ES2234552T3 - Un metodo para tratamiento de calostro. - Google Patents
Un metodo para tratamiento de calostro.Info
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Abstract
Un método para tratar calostro para reducir su biocarga reteniendo al mismo tiempo el contenido de proteínas de alta actividad, comprendiendo el citado método: (a) recogida de calostro (b) desgrasado de dicho calostro (c) realización de microfiltración de circulación transversal (CFMF) del calostro desgrasado utilizando un dispositivo filtro de circulación tangencial (TFF) con canales abiertos, y un filtro que tiene un tamaño de poro de 0, 1-0, 5 y (d) recuperación del filtrado
Description
Un método para tratamiento de calostro.
La presente invención se refiere a un método para
recuperación de componentes de calostro bioactivos. Más
concretamente, la presente invención se refiere a un método para
tratamiento de calostro para reducir la biocarga reteniendo al mismo
tiempo el contenido de proteínas de elevada actividad. La invención
se refiere también al calostro tratado por el citado método y a la
utilización del mismo.
La leche producida enseguida después del parto
recibe el nombre de calostro. Esta leche particular contiene
aproximadamente 20 veces más proteínas que la leche producida más
tarde. El calostro es, por tanto, una fuente excelente de muchas
proteínas valiosas, tales como proteínas biológicamente activas como
factores de crecimiento y especialmente inmunoglobulinas. El
calostro puede utilizarse, por tanto, como fuente de dichas
proteínas valiosas, por ejemplo, en alimentos o preparaciones
clínicas. Sin embargo, el calostro está frecuentemente contaminado
con una elevada cantidad de bacterias y otro material celular, que
no permiten calificar al producto como alimento o producto
clínico.
clínico.
El camino convencional de reducción de la
biocarga de leche es la pasteurización y tratamiento
ultra-térmico, es decir, exposición de la leche a
calor durante un corto período de tiempo. Sin embargo, el
tratamiento con calor no solo destruye los microorganismos presentes
en la leche, sino que desnaturaliza también las proteínas
biológicamente activas valiosas. El calostro especialmente
inadecuado para tratamiento por calor, ya que su alto contenido en
proteínas hace que se coagule a temperaturas elevadas. Un método
para reducir la biocarga del calostro por centrifugación es el
descrito en WO 97/16977. Sin embargo, una reducción efectiva de
bacterias requiere una fuerza de gravitación tan alta que las
proteínas puedan precipitar junto con otras partículas presentes en
una solución rica en proteínas.
Otros métodos para reducir contaminantes
microbianos en la leche son los de radiación gamma (Patente
estadounidense 4.784.850) y tratamiento con
\beta-propiolactona (Patente estadounidense
3,911.108). Estos métodos tienen también a desnaturalizar las
proteínas en cierta medida. La filtración estéril constituye aún
otro método de eliminación de los microbios de la leche (Patentes
estadounidenses 5.256.437, 5.683.733, Pedersen P.J. (1991) edición
IDF especial no. 9201. "Microfiltración para la reducción de
bacterias en leche y salmuera", en New Applications of
Membrane Processes 33-50; Osterland N. New
Developments in Membrane processing, IDF 25º Congreso
Internacional de Lácteos 21-24 de setiembre 1998
Arhus, Dinamarca y Rosenberg M. 1995, Trends in Food Science
& Technology, 6:12-19). También se ha
utilizado la filtración para separar diferentes componentes de la
leche tales como leche desnatada y fracciones enriquecidas en nata
(Patente estadounidense 4,140.806 y componentes disueltos y sin
disolver en la leche (Patente estadounidense 5.028.436. La
filtración no afecta substancialmente a las proteínas, pero los
filtros quedan rápidamente inservibles. Esto constituye un problema
con calostro rico en proteínas, donde la caseína obstruye fácilmente
los filtros.
El problema de los filtros obstruidos ha sido
previamente resuelto por separación parcial o completa de la caseína
del calostro, y/o por dilución del calostro antes de la filtración.
La caseína se puede separar por precipitación por ácido o enzimas y
centrifugación para obtener suero (Patente estadounidense 4.644.056
y Patente británica GB 1.573.995). La Patente estadounidense
5.670.196 describe un método de microfiltración de calostro, con el
que el calostro desgrasado se acidifica primero para precipitar
caseína, que se separa por centrifugación, y después se filtra el
suero a través de un filtro cargado de profundidad para reducir el
contenido en microorganismos. La Patente estadounidense 5.707.678 se
refiere a un método similar, donde la caseína se separa después de
que el suero acidulado se ultrafiltra primero y después se
microfiltra. El principal inconveniente de estos métodos es que
tienden a precipitar grandes cantidades de anticuerpos valiosos y
otras proteínas junto con la caseína. Además, la separación de
caseína es un proceso laborioso, que consume mucho tiempo y que es
caro.
La Patente estadounidense 5.147.548 describe un
método de filtración estéril de calostro sin separar previamente la
caseína. El calostro opcionalmente desgrasado se acidifica a un pH
de menos de 3,5. La caseína precipita a un pH de 5 a 4, pero vuelve
a la solución cuando el pH continúa cayendo. Se ha encontrado que la
solución ácida difiere en tal medida del calostro original que se
podría filtrar estérilmente ya sea como tal o después de neutralizar
volviendo al pH original, El filtro utilizado es un filtro de
profundidad o un filtro de membrana. En un modo de realización
preferido el calostro se diluye en una solución de cloruro de sodio
antes de la acidificación. Sin embargo, también este método tiene
sus inconvenientes. Las inmunoglobulinas se inactivan fácilmente a
bajo pH. Además, la precipitación de caseína no es completamente
reversible teniendo lugar también pérdida de proteína, y la dilución
del calostro aumenta tiempo y gastos del proceso.
El objeto de la presente invención es
proporcionar un método sencillo, eficaz y económico para reducir la
biocarga del calostro sin afectar substancialmente el contenido de
proteínas del mismo. El método proporciona la eliminación de
contaminantes microbianos sin pérdida substancial del alto y
versátil contenido de proteínas biológicamente activas y/o de su
actividad. El método permite, según esto, una reducción eficaz de la
biocarga mientras retiene la actividad máxima de inmunoglobulinas
especialmente de IgG. No se necesita precipitación previa de caseína
ni dilución alguna o adición de sales/ácidos/bases u otros
compuestos químicos, y no hay desnaturalización por la temperatura
de los anticuerpos presentes.
Otro objeto de la invención es proporcionar una
preparación de calostro de alto grado de higiene, que lo califica
como artículo alimenticio o clínico. La preparación de calostro se
puede utilizar en forma de bebida o alimento o en forma seca para
promoción de la salud o para tratamiento o prevención de trastornos,
que pueden curarse con inmunoglobulinas o proteínas de calostro
adicionales.
Se ha encontrado sorprendentemente que un
sencillo sistema de filtración permite la reducción de la biocarga
del calostro sin pretratamiento multietapa ni pérdida de la
actividad de proteína. Los objetos de la presente invención se
pueden conseguir así por tratamiento del calostro con un método que
se caracteriza por:
- (a)
- recogida de calostro
- (b)
- desgrasado de dicho calostro
- (c)
- realización de microfiltración de flujo transversal(CFMF) del calostro desgrasado utilizando un dispositivo filtro de flujo tangencial (TFF) con canales abiertos, y un filtro que tiene un tamaño de poro de 0,1-0,5 y
- (d)
- recuperación del filtrado
El calostro de la presente invención se
caracteriza por estar tratado por el método de la invención.
La invención se refiere además a la utilización
del calostro tratado para la manufactura de preparaciones nutritivas
clínicas, alimentos funcionales o suplementos alimenticios que
comprenden el citado calostro.
Según el método de la presente invención, se
recoge el calostro de un mamífero, que puede ser cualquier mamífero,
tal como una cabra o una oveja, pero, preferiblemente, es una vaca.
Preferiblemente, el mamífero ha sido inmunizado previamente o
hiperinmunizado frente a un patógeno, con lo que se puede obtener un
calostro útil para tratamiento o prevención de la enfermedad
causada por el patógeno. El calostro se recoge enseguida después del
parto, cuando el contenido de IgG está en su máximo, normalmente
dentro de los tres días y preferiblemente dentro de las 48 horas del
parto. El calostro normalmente, pero no necesariamente, se congela
y después se descongela con mucho cuidado antes de procesarlo, con
lo que se evitarán las altas temperaturas. La grasa se separa del
calostro por cualquiera de los métodos convencionales, normalmente
por centrifugación. Preferiblemente, la leche desnatada obtenida se
clarifica entonces, por ejemplo, por prefiltración a través de un
filtro de profundidad o un filtro de membrana para separar los
posibles grumos antes de la etapa de la microfiltración de flujo
transversal. Medios filtrantes adecuados son, por ejemplo,
polipropileno, celulosa regenerada o poliétersulfona que tiene un
tamaño de poro de 0,1-150 \mum, normalmente
aproximadamente 0,5-50 \mum.
La microfiltración (MF) es un proceso de
separación impulsado por la presión que utiliza membranas de un
tamaño de poro dado para separar componentes en una solución o
suspensión sobre la base de su diferencia de tamaños. Aunque las
partículas más grandes se pueden separar empleando filtros que no
son de membrana o de profundidad, solamente un filtro de membrana
que tiene un tamaño de polvo definido de forma precisa puede
asegurar una retención cuantitativa. La microfiltración (MF)
convencional es un proceso terminal, donde la solución se hace pasar
verticalmente a través de la membrana. Las partículas que son
demasiado grandes para atravesar los poros son retenidas sobre la
superficie de la membrana, con lo que el filtro se obtura
rápidamente. Un desarrollo de la MF es la microfiltración de
circulación transversal (CFMF), donde la solución retenida circula
tangencialmente cruzando la superficie de la membrana. El flujo
trasversal es la velocidad a la que el material fluye cruzando la
superficie de la membrana y es importante ya que genera una serie de
fuerzas que tienden a separar las capas depositadas de la superficie
de la membrana ayudando así a mantener limpia la membrana.
En la a microfiltración de circulación
transversal el permeato o filtrato es la solución que ha pasado a
través de la membrana, el retentato es la solución o suspensión
retenida por la membrana y el flujo es la corriente de filtrado a
través de la membrana.
La microfiltración del calostro desgrasado según
la presente invención se lleva a cabo por microfiltración de
circulación transversal (CFMF) utilizando un dispositivo de filtro
de circulación tangencial (TFF). Los dispositivos de membrana TFF
pueden ser promovidos linealmente o con turbulencia dependiendo del
diseño de canales de circulación tangencial para el curso del
material. Los llamados dispositivos de canales abiertos tienen
canales de corriente de alimentación abiertos, lineales, que
permiten una circulación laminar en los canales, mientras que los
promovidos con turbulencia son los llamados dispositivos de canales
finos que tienen canales de corriente de alimentación que contienen,
por ejemplo, un tamiz que promueve la turbulencia. Los dispositivos
de canales abiertos son los que se utilizan en el método de la
presente invención. Los dispositivos de canales abiertos de los
filtros de circulación transversal (TFF) se pueden obtener, por
ejemplo, en Millipore Corp. Bedford, MA, EEUU (Prostak^{TM}).
La membrana que se utiliza en el dispositivo de
canales abiertos es una membrana de lámina plana que tiene un tamaño
de poro que evita el paso de bacterias y otros microorganismos al
filtrato, pero que permite que penetren las proteínas deseadas, por
ejemplo IgG. Un tamaño de poro adecuado para este propósito es el de
0,1 - 0,5 \mum y preferiblemente 0,2 - 0,45 \mum, especialmente
de aproximadamente 0,2 \mum. Los filtros pueden ser, por ejemplo,
de polisulfona, celulosa o especialmente membranas basadas en
polímeros de hidrocarburos fluorados. Las membranas de poli fluoruro
de vinilideno (PVDF) son especialmente adecuadas para CFMF de
calostro y más preferiblemente son membranas de PVDF, que han sido
hidrofilizadas.
Con el fin de aumentar el área filtrante y la
velocidad hasta el flujo de filtrado se pueden combinar varios
módulos de dispositivos filtrantes. Normalmente se filtran 100 - 200
litros de calostro con una capacidad de 10-50
l/m^{2}hora, preferiblemente 20-40 l/m^{2}hora y
especialmente aproximadamente 25 l/m^{2}hora a una presión de
aproximadamente 0,5-3 bar, preferiblemente
0,8-2 bar y especialmente 1 bar. Se recupera un
filtrado que contiene las proteínas activas, pero substancialmente
está libre de cualquier contaminante bacteriano u otro microbio.
Opcionalmente el calostro microfiltrado por circulación transversal
se filtra por último por microfiltración convencional a través de
una membrana de 0,2-0,45 \mum para asegurar un
producto final estéril.
Frecuentemente es deseable concentrar el calostro
filtrado para enriquecer las proteínas en cuestión y opcionalmente
separar sales. Esto puede hacerse de la manera conocida, por ejemplo
por ultrafiltración u ósmosis inversa dependiendo de la naturaleza
de la proteína. Es posible finalmente secar el calostro filtrado,
por ejemplo, por liofilización. Alternativamente el calostro se
puede secar por pulverización bajo temperaturas controladas para
evitar la desnaturalización de las proteínas. El calostro secado se
puede, por ejemplo, encapsular y utilizar como tal o disolverse en
una solución acuosa antes de utilizarlo.
Con objeto de mantener bajo el número de
microbios, el proceso deberá llevarse a cabo a baja temperatura.
Para separar la grasa es conveniente una temperatura de
aproximadamente 40ºC, pero el resto del proceso se lleva a cabo a
temperaturas más bajas, que no pasan de 15ºC, y principalmente a una
temperatura de 2-10ºC. Incluso en el bombeo durante
la CFMF, se puede mantener baja la temperatura y no dejar nunca que
sobrepase los
40ºC.
40ºC.
El método de la presente invención se puede
utilizar con diferentes propósitos cuando el objetivo es obtener
calostro libre de microbios sin pérdida substancial de actividades
de proteínas valiosas. El calostro contiene una serie de proteínas
biológicamente activas tales como hormonas, factores del
crecimiento, lactoferrina, proteínas bactericidas y especialmente
anticuerpos, es decir, inmunoglobulinas de las clases IgG, IgA e
IgM.
El calostro de la presente invención se puede
utilizar en forma seca o en forma de bebida o alimento. Es
especialmente adecuado para la manufactura de preparaciones
nutritivas clínicas, alimentos funcionales y suplementos de
alimentos que comprenden el calostro tratado. Una preparación
nutritiva clínica es un artículo que es adecuado para una persona
que tiene necesidades médicas especiales de los componentes activos
que hay en ella. Los alimentos funcionales son alimentos que tienen
efecto de promoción de la salud, y un suplemento alimenticio es un
aditivo de alimentos que se añade para dar al alimento las
propiedades deseables. Estos productos se pueden administrar
convenientemente por vía oral a los sujetos que los necesiten. La
IgG, por ejemplo, es útil en la protección de las membranas mucosas
frente a colonización y penetración patógena, y es especialmente
adecuada para tratamiento o prevención de infecciones
enteropatogénicas. El calostro rico en IgG, libre de microbios, de
la presente invención se puede dar, por ejemplo, a pacientes con
inmunosupresión.
Se inmunizaron vacas lecheras con preparaciones
de células de Clostridium difficile inactivadas por
formalina. Se emulsionó una suspensión de organismos en 0,5 ml de
solución salina fisiológica con 5 ml de auxiliar de hidróxido de
aluminio. La vacuna resultante se administró intramuscularmente a
ambos lados de la cervical o la paletilla, cinco veces durante las
últimas 8 semanas de la gestación, de la forma que se da a
continuación. Primera inyección: 2 x 4 ml, que contenían 10^{9}
células bacterianas por 1 ml de vacuna; 1. y 2. refuerzos: 2 x 2 ml
que contenían 10^{9} células bacterianas por 1ml de vacuna; y 3.
refuerzo: 2 x 2 ml que contenían 5 x 10^{8} células bacterianas
por 1 ml de vacuna; y 4. refuerzo: 2 x 2 ml que contenían 2 x
10^{8} células bacterianas por 1 ml de vacuna.
Se recogió leche calostro durante los dos
primeros días de lactancia. Se congeló la leche calostro a -20ºC
inmediatamente después de la recogida.
Se colocaron 65 litros de calostro de vacas
inmunizadas congelado en profundidad en una vasija de
descongelación con una mezcladora y manguito. Se calentó el calostro
a la temperatura de separación de 40ºC.
Se separó la grasa del calostro obtenido en la
etapa (a) con un separador obteniéndose 55 litros de leche
desnatada. Se añadieron 50 ml de lactasa (BioFincon, GODO YNL) para
hidrolizar la lactosa presente en la leche desnatada. La enzima
lactasa se separó en cualquier momento durante el proceso.
La leche desnatada se prefiltró a través de un
filtro de profundidad de medio polipropileno (Millipore, Polygard
0,5 \mum) para separar las posibles partículas grandes de la leche
desnatada. En esta etapa es de esperar una mejora del comportamiento
de la presente CFMF. La leche desnatada prefiltrada se pasa al
recipiente de descongelación con mezcladora y manguito y se enfría a
la temperatura de CFMF de 7-9ºC.
La leche desnatada enfriada se microfiltró con
circulación transversal a través de módulos de filtro de canales
abiertos que tenían membranas PVDF hidrófilas Durapore sobre placas
de polisulfona, siendo el tamaño de poro de la membrana de 0,22
\mum y la altura de los canales de 0,5 mm aproximadamente
(Millipore, Prostak^{TM}, GVPP). La leche desnatada se bombeó al
módulo de canales abiertos a una presión de 1 bar. La capacidad de
bombeado de la bomba centrífuga era de 100 litros/minuto. No se
observó pérdida significativa del flujo inicial durante la
microfiltración de circulación transversal. Se recuperaron 52,5
litros de filtrado y la temperatura final era de 15ºC. Para
comparación se utilizaron módulos de filtro de canales finos que
promueven turbulencia con las mismas membranas (Millipore,
Prostak^{TM}, GVPP).
Se utilizó un sencillo ensayo competitivo de
enzima unida a inmunosorbente (ELISA) para detectar la
inmunoglobulina G (IgG) contenida en las fracciones del proceso. La
recuperación de la IgG en el proceso de CFMF de canales abiertos era
del 95% mientras que la recuperación en el proceso de CFMF de
canales finos era solamente de 30%.
Se analizó la concentración de anticuerpo, es
decir la cantidad relativa de inmunoglobulina específica para vacuna
biológicamente activa en las fracciones del proceso por utilización
de células de C. difficile inmovilizadas como fase sólida en
ELISA. La concentración más alta (1:432.000) se retuvo constante
durante el proceso, lo que es una buena correlación para el 95% de
recuperación de la IgG total.
Se hizo el conteo total de la placa antes y
después de la etapa de CFMF de canales abiertos. El conteo total de
la placa se había reducido de 1,2 x 10^{6} ufc/ml a menos de 1,0 x
10^{1} ufc/ml o en 5,1 logaritmos.
Se desgrasaron 65 litros de calostro congelados
en profundidad de vacas no inmunizadas y se trataron por el método
descrito en el Ejemplo 2 empleando los dispositivos de canales
abiertos (llamado también aquí proceso del calostro). Se obtuvieron
45 litros de filtrado. El contenido de IgG se determinó como se ha
descrito antes. Los resultados se muestran en la Tabla 1.
Se colocaron 69 litros de calostro de vacas
no-inmunizadas congelado en profundidad en un
recipiente de descongelado con una mezcladora y manguito. Se calentó
el calostro a la temperatura de separación de 40ºC. Se eliminó la
grasa del calostro con un separador lo que dio por resultado 61
litros de leche desnatada. Se añadieron 50 ml de lactasa (BioFincon,
GODO YNL) para hidrolizar la lactosa presente en la leche desnatada.
La enzima lactasa no se separó en ningún momento del proceso. Se
añadió cuajo (RencoRennet Biofincon; 1:50000) a la leche desnatada a
32ºC y el queso se cortó al cabo de 30 minutos. El suero del queso
obtenido (52 l) se prefiltró a través de un filtro de profundidad
(Millipore, Polygard, 0,5 \mum) para separar posibles partículas
grandes del suero de queso, La prefiltración significó la mejora del
comportamiento de la etapa de la presente CFMF. El suero prefiltrado
se pasó a un recipiente de descongelación y se enfrió a la
temperatura de CFMF (7-9ºC). El suero de queso
enfriado se microfiltró con flujo cruzado a través de módulos
filtrantes de canales abiertos (Millipore, Prostak^{TM}, GVPP). El
suero se bombeó al módulo de canales abiertos a una presión de 1 bar
con una bomba centrífuga. La capacidad de la bomba era 100
litros/minuto. Se recuperaron 45 litros de filtrado y la temperatura
final fue de 15ºC. Se determinó el contenido de IgG. Los resultados
se muestran en la Tabla 1.
La cantidad de inmunoglobulina recuperada en el
proceso de suero de queso fue 30% menos que en el proceso del
calostro.
Para comparar la recuperación de IgG así como el
comportamiento en la CFMF, se llevaron a cabo marchas a escala de
laboratorio con calostro, suero ácido y suero de queso. Se
desgrasaron primero 1000 litros de calostro y se distribuyeron en
pequeños recipientes y congelaron a -20ºC, El calostro congelado a
muy baja temperatura desgrasado se descongeló rápidamente a 10ºC.
Se obtuvo suero ácido por adición de HCl al calostro desgrasado para
reducir el pH a 4,5 y se separó el suero ácido por centrifugación.
Se añadió cuajo al calostro desgrasado calentado a 32ºC después de
lo cual se recuperó el suero de queso tras cortar el queso.
El calostro desgrasado y el suero ácido preparado
a partir de él se prefiltró a través de filtros de profundidad
separados y la solución resultante se trató como tal, o se diluyó
con agua ionizada 1:5 antes de la CFMF con dispositivos filtrantes
Millipore Prostak^{TM} GVPP. Se empleó una bomba de lóbulo
rotatorio (Amicon) en las citadas filtraciones. El volumen de la
alimentación de cada operación de ensayo individual era de 10
litros, la presión en la alimentación era de 0,9 bar. Los resultados
se muestran en la Tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
Los flujos de permeado presentes en ambos
procesos de suero eran peores que en los procesos de calostro, tal
como lo era la permeabilidad de IgG. La dilución del calostro
mejoraba el flujo del permeato a través de la membrana en un factor
de 2,5 mientras que la IgG estaba diluida en un factor de 5. Las
fracciones de IgG diluidas necesitaron concentrarse después lo cual
aumenta los gastos y tiempo del proceso y además hay posibilidades
de contaminación posterior.
Se filtraron terminalmente 20 litros de calostro
microfiltrado por circulación transversal con un filtro Opticap
Millipore de 4'' con medio Durapore^{TM} PVDF de tamaño de poro de
0,22 \mum en una cabina de corriente laminar, y se embotellaron
asépticamente en frascos de 500 ml. El producto embotellado era
absolutamente estéril. La filtración terminal estéril del calostro
era posible solamente después de microfiltrarse con circulación
transversal a través de membrana del mismo tamaño de poro.
Alternativamente, antes del embotellado, se utilizó un filtro
Opticap Millipore de 4'' con medio Miligard^{TM} (ésteres mixtos
de celulosa) de tamaño de poro de 0,22 \mum.
Se liofilizaron con éxito 10 litros de calostro
microfiltrado con circulación transversal del Ejemplo 2 sin
necesidad de concentrarlo más para producir polvo de calostro. El
polvo se disolvió más tarde en agua o solución salina tamponada con
fosfato (0,1 M, pH 7,0).
Claims (12)
1. Un método para tratar calostro para
reducir su biocarga reteniendo al mismo tiempo el contenido de
proteínas de alta actividad, comprendiendo el citado método:
- (a)
- recogida de calostro
- (b)
- desgrasado de dicho calostro
- (c)
- realización de microfiltración de circulación transversal (CFMF) del calostro desgrasado utilizando un dispositivo filtro de circulación tangencial (TFF) con canales abiertos, y un filtro que tiene un tamaño de poro de 0,1-0,5 y
- (d)
- recuperación del filtrado
2. El método según la reivindicación 1 donde
la CFMF se lleva a cabo utilizando un filtro que tiene un tamaño de
poro de aproximadamente 0,2 \mum
3. El método según la reivindicación 1 o la
2 donde la CFMF se lleva a cabo empleando un filtro de membrana de
fluoruro de polivinilideno (PVDF) hidrofilizado.
4. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes donde el calostro se recoge de una
vaca dentro de las 48 horas del parto.
5. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes que comprende además la clarificación
del calostro antes de la CFMF.
6. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes que comprende además la realización de
una filtración estéril a través de un filtro que tiene un tamaño de
poro de 0,2-0,45 \mu después de la CFMF.
7. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes que comprende además el secado del
filtrado recuperado.
8. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes donde el calostro se recoge de un
mamífero que ha sido inmunizado.
9. El método según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes donde la etapa de CFMF (c) se lleva a
cabo a una temperatura que no sobrepasa los 40ºC.
10. El método según la reivindicación 9
donde la etapa (c) de CFMF se lleva a cabo a una temperatura de 15ºC
como máximo.
11. Calostro tratado por el método de
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10
12. Utilización del calostro de la
reivindicación 11 para la manufactura de preparaciones nutritivas
clínicas, alimentos funcionales o suplementos alimenticios que
comprenden el citado calostro.
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