ES2227610T3 - Composicion farmaceutica contiendo un estimulador de activina. - Google Patents
Composicion farmaceutica contiendo un estimulador de activina.Info
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Abstract
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A ESTIMULADORES DE ACTIVINA Y/O INHIBINA PARA SU USO EN LA ESTIMULACION DE LA CURACION DE HERIDAS Y TRASTORNOS FIBROTICOS CON REDUCIDA CICATRIZACION, JUNTO CON MEDICAMENTOS Y METODOS PARA FAVORECER LA CURACION DE HERIDAS Y TRASTORNOS FIBROTICOS CON REDUCIDA CICATRIZACION.
Description
Composición farmacéutica conteniendo un
estimulador de Activina.
La presente invención se refiere a preparaciones
farmacéuticas para favorecer la curación de heridas o de trastornos
fibróticos con una cicatrización reducida.
Por "heridas o trastornos fibróticos" se
quiere significar cualquier estado que pueda dar lugar a la
formación de tejido cicatrizado. En particular, esto incluye la
curación de heridas de la piel, la reparación del daño en tendones,
la curación de traumatismos por aplastamiento, la curación de
heridas en los ojos, incluyendo heridas en la córnea, la curación de
daños en el sistema nervioso central (SNC), estados que dan lugar a
la formación de tejido cicatrizado en el SNC, formación de tejido
cicatrizado resultante de golpes, y adhesión de tejido, por ejemplo,
como resultado del daño o cirugía (esto puede tener aplicación a,
por ejemplo, la curación de tendón y contracciones abdominales y
adhesiones). Ejemplos de trastornos fibróticos incluyen fibrosis
pulmonar, glomerulonefritis, cirrosis del hígado, esclerosis
sistémica, escleroderma, vitreoretinopatía proliferativa, reparación
después de un infarto de miocardio, incluyendo hibernación de
miocardio.
En particular, existe una falta de composiciones
para favorecer la cicatrización de heridas o trastornos fibróticos
con cicatrización reducida. La formación de tejido cicatrizado,
aunque proporciona fuerza mecánica a la herida curada, puede ser fea
y puede empeorar el funcionamiento del tejido.
Este es particularmente el caso de heridas que
dan lugar a la formación de tejido cicatrizado en el SNC, inhibiendo
el tejido cicatrizado la reconexión de terminales nerviosos en
estado grave o de nuevo crecimiento, afectando de este modo de forma
significativa su funcionamiento.
También hay una falta de composiciones para uso
en el tratamiento de las heridas crónicas, por ejemplo úlceras
venosas, úlceras diabéticas y por estancia prolongada en cama
(úlceras de decúbito), especialmente en los ancianos y en los
pacientes heridos en silla de ruedas. Dichas composiciones pueden
ser extremadamente útiles en pacientes en que la cicatrización de
heridas es o bien lenta o en los que el proceso de curación aún no
ha empezado. Dichas composiciones pueden ser utilizadas para la
curación de heridas de "inicio rápido" y por ello pueden ser
utilizadas en combinación con composiciones (por ejemplo, las de la
patente PCT/GB93/00586) que favorecen la curación de heridas o
trastornos fibróticos con cicatrización reducida. Por ello no sólo
una herida crónica puede ser curada, sino que puede ser curada con
una cicatrización reducida.
De acuerdo con la presente invención se
proporciona el uso de un estimulador de Activina en una cantidad
suficiente para unir los receptores de forma similar a los unidos
por TGF\beta_{3} en la fabricación de un medicamento para
favorecer la curación de heridas con una cicatrización reducida o
para favorecer la curación de trastornos fibróticos con
cicatrización reducida.
Por "estimulador" se quiere significar
cualquiera que pueda estimular la cantidad o eficacia de la Activina
activa en el sitio. Este puede ser Activina en sí misma (o una sal
farmacéuticamente aceptable de la misma) o un fragmento o una forma
parcialmente modificada de la misma. Una modificación parcial puede
ser por ejemplo por vía de adición, eliminación o sustitución de los
residuos de amino ácidos. Una vía de sustitución puede ser por
ejemplo una sustitución conservada. Las moléculas parcialmente
modificadas pueden tener, por ejemplo, una mayor vida media que su
molécula de referencia, o pueden tener una diferente afinidad de
unión a sus receptores. Un fragmento puede comprender al menos la
parte de la Activina que se requiere para permitir que ésta estimule
a sus receptores. De forma alternativa, un estimulador puede ser,
por ejemplo un inhibidor del metabolismo de Activina, o puede ser un
estimulador de la síntesis de Activina, o puede ser un bioprecursor
de Activina. Por ejemplo, puede ser un análogo de un fragmento de
Activina que está unido por una enzima degradativa, por ejemplo un
mimotopo (H. M. Geysen, y col., 1987, Journal of
Immunological Methods, 102: 259-274)
preparado de un fragmento de Activina que se une por una enzima que
lo degrada. Dicho mimotopo puede unirse al sitio del receptor de la
enzima, inhibiendo de forma competitiva la unión de Activina a la
enzima y por consiguiente inhibiendo su degradación.
La Activina es un miembro de la superfamilia del
TGF \beta, y al igual que otros miembros de esta familia, las
Activinas son proteínas diméricas, compuestas de disulfuro unido a
subunidades bata A o beta B. Se han identificado tres diferentes
formas de Activina in vivo: la Activina A (beta a, beta a),
la Activina B (beta b, beta b) y la Activina AB (beta a, beta b). En
la presente invención, por "Activina" se quiere significar
todas las posibles formas de Activina.
La respuesta biológica a las Activinas es
transducida por receptores que existen como complejos heteroméricos
de los receptores de tipo I (llamadas quinasas del tipo del receptor
de Activina (Alk) 2 y 4) y receptores de tipo 2 que son quinasas de
treonina serina de transmembrana (L. S. Matthews y W. W. Vale, 1993,
"Molecular and Functional Characterisation of Activin
Receptors", Receptor Volumen 3, páginas 173-181).
La Follistatina es una proteína que se une a la Activina que actúa
como un antagonista de Activina in vitro, pero que in
vivo puede presentar Activinas a sus receptores (U. Michael,
y col., 1993, "Follistatins: more than follicle stimulating
hormone suppressing proteins", Molecular and Cellular
Endocrinology, Volumen 91, páginas 1-11).
La Activina incrementa el número de gonadotrofos
en la pituitaria y causa diferenciación de las células granulosas
del ovario (K. E. May, 1994, "Inhibin and Activin Molecular
Aspects of Regulation and Function", TEM 5:
407-415). La Activina A también incrementa la
diferenciación o las células neuronales (D. Schubert, y col.,
1990, ``Activin A also enhances the differentiation or neuronal
cells (Schubert, D. y col., 1990, "Activin is a nerve cell
survival molecule", Nature, 344: 868-870),
estimula la diferenciación de megacariocitos y de células
critroideas (M. Nishimura, y col., 1991, "Effect of
erythoid differentiation factor on megakaryocytic differentiation of
L8057, a murine megakaryoblastic leukaemia cell line", Biochem
Biophysics Research Communication, 181:
1042-1047) e induce la formación de mesodermo
durante el desarrollo de Xenopus inicial (J. C. Smith y col.,
1990, "Identification of a potent Xenopus mesoderm inducing factor
as a homologue of Activin A" Nature, 345:
729-731).
La ruptura objetivo de la cadena beta A de
Activina da lugar a ratones con defectos craneofaciales que murieron
a las 24 horas después del nacimiento (M. M. Matzuk, y col.,
1995, "Functional analysis of activins during mammalian
development", Nature, 274: 354-356). A
estos ratones también les faltaban bigotes y tenían los folículos de
los bigotes anormales. Se ha detectado la cadena de Activina beta A
en el mesenquimo de los folículos de pelo en desarrollo y en la piel
embriónica, pero no en la piel de un recién nacido messenger
ribonucleic acids during rat embryogenesis'', Endocrinology
128: 3122-3129; V. J. Roberts y S. L. Barth,
1994, "Expression of messenger ribonucleic acids encoding the
Inhibin/Activin system during mid and late gestation rat
embryogenesis", Endocrinology, 134:
914-923), además de los receptores de Activina Alk2
y Alk4 (K. Verschueren, y col., 1995, "Expresión of type I
and type IB receptors for activin in mid-gestation
mouse embryos suggests distinct functions in organogenesis",
Mechanisms of Development, 52: 109-123). La
rotura de la proteína unida a Activina, la follistatina, en ratones
transgénicos da lugar a un desarrollo del bigote anormal y a piel
hiperqueratótica (M. M. Matzuk, y col., 1995, "Multiple
defects and perinatal death in mice deficient in follistatin",
Nature, 374: 360-363). La rotura del gen para
la subunidad de Activina/beta Inhibina dio lugar a defectos sutiles
para el desarrollo del párpado (A. Vassaiil, y col., 1994,
"Activin/Inhibin beta b subunit chain disruption leads to defects
in eyelid development and female reproduction", Genes and
Development, 8, 414-427), mientras que la
ruptura objetivo de la cadena de Inhibina alfa causa la formación de
tumor en las gónadas (M. M. Matzuk, y col., 1992, "Inhibin
is a tumour supresor gene with gonadal specificity in mice",
Nature, 360: 313-319).
La patente WO 89/11862 describe que los
antagonistas de Activina pueden ser utilizados como inhibidores del
exceso de proliferación de tejido para el tratamiento de condiciones
tales como los queloides mientras que la Activina puede ser
utilizada para favorecer la regeneración de tejido en una
herida.
Sin embargo, el presente inventor ha encontrado
que la Activina de hecho juega un papel en la curación de heridas
como un factor de crecimiento no fibrótico. Se han encontrado
niveles altos de expresión de Activina y de receptores de Activina y
de Inhibina después de las heridas y en los sitios de las heridas,
de forma similar al TGF-\beta_{3} (ver
PCT/GB93/00586). Esta observación es particularmente sorprendente a
la luz de la creencia anterior de que la Activina es
predominantemente un factor de inducción
reproductivo/eritroideo/neurológico/del mesodermo.
Se ha encontrado que la Activina es
estructuralmente similar al TGF- \beta_{3}, siendo la
similaridad mayor que con TGF-\beta_{1} y
TGF-\beta_{2}. Parece que la Activina puede, de
hecho, unirse a receptores similares a los unidos por el
TGF-\beta_{3} y de este modo mediar el control
de la cicatrización vía dicha ruta.
También se ha encontrado que el receptor Act 2a,
que está unido por la Activina y que se cree que está unido por el
TGF-\beta_{3}, está sobre regulado en la
curación de heridas, especialmente en el día 7 después de la herida.
La Tabla 1 detalla además la unión de las isoformas de la familia
del receptor del TGF-\beta.
Por eso, la Activina tiene propiedades
anti-cicatrizantes similares a las del
TGF-\beta_{3} y de este modo la Activina puede
ser utilizada para un efecto similar (ver, por ejemplo, la patente
PCT/GB93/00586).
El estimulador puede ser utilizado conjuntamente
con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
Puede ser utilizado conjuntamente con un soporte, diluyente o
excipiente farmacéuticamente aceptable en la preparación de un
medicamento para favorecer la curación de heridas y trastornos
fibróticos con cicatrización reducida. De acuerdo con ello, la
presente invención también proporciona el uso de un estimulador de
Activina en la preparación de un medicamento para uso en favorecer
la curación de heridas y trastornos fibróticos con cicatrización
reducida.
De acuerdo con la presente invención pueden
incluirse dos o más estimuladores en una única composición o
medicamento o utilizados en un tratamiento único.
Los soportes, diluyentes y excipientes
farmacéuticamente aceptables son bien conocidos - ver por ejemplo
Remington's Pharmaceutical Sciences and US Pharmacopeia (1984) Mack
Publishing Company, Easton, PA.
Los soportes farmacéuticamente aceptables pueden
comprender por ejemplo una crema estéril neutra, gel o polvo para
aplicación tópica, o una solución estéril para inyección, irrigación
o inhalación o un aerosol, o puede comprender un apósito estéril
para cubrir de forma tópica una herida o puede estar en la forma de
un comprimido o cápsula para la administración enteral, o el soporte
puede comprender un parche de biopolímero o un dispositivo de
liberación lenta para implantación.
Los estimuladores de Activina y los medicamentos
fabricados o preparados de acuerdo con la presente invención pueden
estar en la forma de una composición para la administración tópica
como una crema, gel, polvo o apósito; en una solución para
inyección, irrigación o inhalación o aerosol, o en la forma de un
comprimido o cápsula para la administración enteral. También puede
comprender un polímero biodegradable que forme un parche, o un
dispositivo de liberación controlada implantable, útil en las
operaciones quirúrgicas que tienen una liberación inicial larga
seguida por una liberación más lenta a continuación. Se apreciará
que esta lista no es exhaustiva, siendo posibles otros muchos otros
tipos de composiciones, tales como las que pueden fácilmente
producir un experto en la materia.
Otras formas de la presente invención en las que
está incluido un estimulador de Activina también incluyen vendajes;
vehículos de liberación biocompatibles, biodegradables, no
inflamatorios tales como ácido hialurónico; implantes; inyecciones
intradérmicas; terapia sistémica por ej. fibrosis o trauma severo o
quemaduras, por ejemplo por administración intraperitoneal,
intravenosa o oral; gotas oculares para heridas de la córnea o
cicatrización; películas y barreras para tratar adhesiones.
La aplicación para composiciones y agentes para
favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con
cicatrización reducida son bien conocidos (ver por ejemplo las
patentes PCT/GB93/00586, PCT/GB92/00570 y US 5.520.926 y la presente
invención las incorpora de acuerdo con su contenido.
El estimulador puede ser utilizado conjuntamente
con una composición para favorecer la curación de heridas o de
trastornos fibróticos con cicatrización reducida.
El estimulador puede ser utilizado conjuntamente
con una composición para favorecer la curación de heridas
crónicas.
La estimulación puede ser conseguida por
administración en un sitio de Activina en sí misma o de un
estimulador de Activina. Por "sitio" se quiere significar un
sitio de curación o trastorno fibrótico. El estimulador puede ser un
estimulador de acuerdo con la presente invención.
La Activina puede ser estimulada inmediatamente
antes de la curación. Puede ser preferiblemente estimulada
inmediatamente después de la curación. Puede ser estimulada a los 14
días de la curación, preferiblemente en los 7 días de la curación,
más preferiblemente en los 3 días de la curación.
La invención será además aparente a partir de la
siguiente descripción que muestra, sólo por vía del ejemplo, formas
de favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con
cicatrización reducida.
Se llevaron a cabo estudios iniciales para
determinar el perfil de expresión de la Activina en tejido herido,
en relación con el tejido control. Esto llevó a la conclusión de que
la adición exógena de Activina podía tener actividad
anti-cicatrización. Las conclusiones de los
experimentos fueron que la Activina tiene un efecto
anti-cicatrización.
Experimento
1
Se anestesiaron ratones CD1 adultos machos
utilizando halotano, óxido nitroso y oxígeno. Se hicieron cuatro
heridas en cada animal, aproximadamente a un centímetro de la línea
del medio, 20 y 40 centímetros de la base del cráneo
respectivamente. Las heridas fueron de 1 centímetro de longitud por
debajo y a lo largo del panículo carnoso. Los animales fueron
sacrificados y las heridas se recuperaron en los días 1, 3, 7, 14,
28, 60 y 80, después de la herida. Se analizaron al menos 4 heridas
de 4 animales separados para cada experimento. Las heridas fueron
extirpadas, fijadas en paraformaldehído, deshidratadas y fijadas en
cera en preparación para la hibridación in situ (bajo
condiciones libres de RNAasa), o congeladas en OCT (Miles
Scientific), crioseccionadas y utilizadas para
inmunocitoquímica.
Para la hibridación in situ, se
construyeron ribosondas antisentido contra el receptor Act 2a, Act
R1 (Alk 2) y Act RIB (Alk 4).
Para la inmunocitoquímica, se utilizó y detectó
un anticuerpo primario que reconocía la Activina utilizando
amplificación con estreptavadin biotina utilizando un anticuerpo
secundario marcado (isotiocianato de fluoresceína).
Como controles, se utilizó piel de adulto no
herido y fetal E16 (día embriónico 16).
En los días 3 y 7 después de la herida, se
detectó la tinción incrementada por Activina en el sitio de la
herida, predominantemente en fibroblastos del margen de la herida y
del tejido de granulación. La tinción volvió a niveles próximos a
los normales a los 14 días después de la herida. Ya que anticuerpo
reconoce de forma predominante la cadena de beta A Activina, se
asume que ésta es la isoforma predominante en el tejido de
granulación.
El RNA mensajero para el receptor Act 2a fue
sobre regulado en el margen de la herida y del tejido de granulación
en los siete días después de la herida. El receptor de Alk 2 (Act
R1) fue expresado en el mesenquimo de la piel normal, pero no se
detectó elevación significativa en el borde de la herida o en el
tejido de granulación. Por el contrario, el receptor de Act R1B (Alk
4) estuvo presente a un nivel mucho menor en la dermis de la piel
normal pero fue sobre regulado en el margen de la herida termal y en
el tejido de granulación de las heridas, particularmente en los días
7 y 14, después de la herida.
En la piel del ratón adulto normal, el Alk2 y el
Alk4 se expresaron de forma predominante en la dermis y la
epidermis, respectivamente, La tinción para la Activina en la piel
de adulto normal estuvo a un marcado nivel bajo en la dermis. Sin
embargo, la piel fetal de ratones embriónicos en el día 16 mostraron
una marcada tinción para la Activina, particularmente en la dermis
fetal.
Estos modelos de tinción sugieren que la Activina
y sus receptores están presentes en la piel fetal y son reinducidos
durante la curación de la herida en la piel de adulto. Ya que las
heridas fetales curan sin cicatrización en el día embriónico 16 (D.
J. Whitby y M. W. J. Ferguson, "The extracellular matrix of lip
wounds in fetal, neonatal and adult mice", Development,
112: 651-668, 1991) y con niveles reducidos
de inflamación, y por lo tanto TGF\beta1 y TGF\beta2, pero con
niveles termales endógenos de TGF\beta3 incrementados (D. J.
Whitby y M. W. J. Ferguson, 1991, "Immunohistochemical
localisation of growth factors and fetal wound healing",
Developmental Biology, 147: 207-215), puede
ser asumido de forma razonable que la Activina juega un papel en
esta curación de la herida fetal con menos cicatrización. Por tanto,
la adición exógena de Activina, puede tener actividad
anti-cicatrización.
Con el fin de analizar esto, se llevó a cabo el
siguiente experimento:
Experimento
2
Se obtuvo Activina A de bovino recombinante (4
\mug) de Innogenetics, Bélgica (Cat. No. CY-035).
Se preparó la Activina A por la reconstitución inicial del polvo
liofilizado en solución salina tamponada de fosfato estéril (PBS)
conteniendo un 0,1% de albúmina de suero bovino (BSA) y diluyendo a
continuación con PBS/BSA para dar tres dosis: 100 ng/ml; 50 ng/ml; y
25 ng/ml.
Se anestesiaron doce ratas macho
Sprague-Dawley, de edades y pesos equiparables (220
g - 250 g), se anestesiaron utilizando una mezcla a partes iguales
de halotano, óxido nitroso y oxígeno. Se afeitaron las superficies
dorsales y se lavaron con alcohol del 70%. Se hicieron cuatro
incisiones de 1 cm de espesor total lineal (hacia abajo e incluyendo
el panículo carnosos) a posiciones anatómicas definidas de 5 cm y 8
cm a partir de la base del cráneo, y a 1 cm a cada lado de la línea
del medio.
De las cuatro heridas por animal, dos fueron
tratadas con una dosis de 100 \mul de Activina A, una con 100
\mul de PBS, y el otra permaneció sin manipular. Todas las
inyecciones fueron intradérmicas, introduciendo aproximadamente 50
\mul a cada lado de la incisión tan cerca como fue posible de la
herida sin romperla, y se administraron una vez al día durante tres
días, comenzando inmediatamente antes de la herida (Día 0).
Se dividieron los doce animales en tres grupos de
acuerdo con la dosis administrada. Cuatro animales recibieron
inyecciones diarias de 100 \mul de 100 ng/ml de Activina A (es
decir inyecciones de 10 ng/100 \mul), cuatro recibieron 50 ng/ml
(es decir, inyecciones de 5 ng/100 \mul) y los cuatro restantes
fueron tratados con 25 ng/ml (es decir inyecciones de 2,5 ng/100
\mul). Las heridas estuvieron descubiertas y sin sutura. Se
sacrificaron seis animales, dos de cada grupo de tratamiento, 7 días
pw (después de la herida) y los seis restantes se sacrificaron a
los 80 días después de la herida, todos por sobredosis de cloroformo
seguido por dislocación del cuello. Se utilizó un sistema de captura
de imagen basado en PC para guardar las imágenes macroscópicas de la
piel intacta, afeitada. Se separó la piel dorsal y se hicieron las
heridas en todo su espesor por escisión con un margen de
aproximadamente 0,5 cm de piel normal alrededor de la herida. Se
fijó la mitad del tejido en solución salina formal y se procesaron
por histología en cera de rutina y la otra mitad se sumergió en un
medio fijado en OCT y congelado instantáneo sobre nitrógeno líquido
para el análisis de immunocitoquímico.
Se cortaron secciones de 7 \mum en un microtomo
estándar y se tiñeron las secciones con Haematoxylin & Eosin
para examinar la celularidad y la angiogénesis, y con tinción de
Masson's Trichrome para la organización del colágeno.
Se ideó un sistema de puntuación análogo visual
que oscilaba entre 0 como representante de normal, piel sin herida,
hasta 10 como representante de cicatrización hipertrófica. Se dibujó
una línea no marcada de 10 cm sobre una pieza de papel en blanco y
se puntuaron las cuatro cicatrices en la superficie dorsal de cada
rata recién sacrificada colocando una marca a lo largo de la línea
entre 0 y 10, con una línea separada para cada cicatriz. Sólo se
puntuaron las cicatrices a los 80 días (es decir 6 ratas).
Las apariencias macroscópicas de las heridas
tratadas con Activina A fueron muy buenas. Las cicatrices fueron
bastante variables pero las dosis menores produjeron las cicatrices
de mejor cualidad macroscópica cuando se compararon con los
controles.
A los 7 días pw, se
re-epitelizaron las heridas y el epitelio se aplastó
de un modo similar al epitelio no herido. Una observación
consistente a los 7 días después de la herida (pW) fue la de que no
había muchas células inflamatorias en la parte superior de la
herida, pero bastantes en la base. Las heridas control (no
manipuladas y tratados con PBS) también fueron epitelizadas de nuevo
paro tuvieron más células inflamatorias distribuidas a lo largo de
la herida.
A los 80 días pw, la apariencia al microscopio de
las cicatrices fue muy buena. Se utilizó otro sistema de puntuación
análogo visual, oscilando entre 0 como representante de la piel
normal hasta 10 representando la cicatrización hipertrófica. Las
puntuaciones promedio se muestran en la Tabla 2. La puntuación
promedio para las heridas tratadas fue de 2,65, las tratadas con PBS
de 3,3, y las no manipuladas de 3,65. La orientación del colágeno en
las heridas tratadas fue más similar a la de la piel normal, estando
los bultos de colágeno menos densamente empaquetados, más largos y
teniendo una mayor apariencia de tejido de cesta (la dermis no
herida tuvo bultos de colágeno ordenados en una arquitectura de
tejido de cesta), particularmente hacia la epidermis.
A los 7 días pw, todas las heridas fueron
epitelizadas de nuevo y completamente bastante celulares y las
heridas tratadas aparecieron similares a las heridas control. Hubo
alguna variación en las heridas tratadas, siendo algunas de ellas
muy celulares, y otras no conteniendo tantas células
inflamatorias.
A los 80 días pw, la arquitectura termal fue
buena, con una puntuación promedio de 3,13, en comparación con las
heridas control tratadas con PBS y las no manipuladas que tuvieron
un promedio de 5,5 y 4,1 respectivamente. El colágeno fue más
abierto y hubo bultos más espesos, de nuevo y de forma particular en
la parte superior del sitio de la herida cerca de la epidermis.
A los 7 días pw, las heridas tratadas se parecían
a las heridas control.
A los 80 días pw, las heridas tratadas tuvieron
una arquitectura de colágeno razonable, y una puntuación promedio de
5,25, en comparación con las heridas control tratadas con PBS y las
no manipuladas que tuvieron una puntuación de 5,45 y
respectivamente.
Estos experimentos muestran que el miembro de la
familia de TGF-\beta Activina A tiene un efecto
anti-cicatrización.
Tanto los regimenes de tratamiento con inyección
de 5 ng/ 100 \mul como de 10 ng/100 \mul mostraron una mejoría
considerable en la cicatrización en relación con las heridas
control. Es interesante que la mayor dosis parece reducir el influjo
de las células inflamatorias en la herida - un efecto similar al
conseguido con el TGF-\beta_{3}. La apariencia
al microscopio de heridas a los 80 días pw que habían sido tratadas
con una inyección de 10 ng/100 \mul de Activina A fue mejor que
los controles, y una inyección de 5 ng/100 \mul fue también mejor
que los controles. La comparación entre los tratamientos con
inyección de 10 ng/100 \mul y con inyección de 5 ng/ 100 \mul
mostró que el tratamiento con inyección de 10 ng/100 \mul fue
superior pero que las heridas control en estos animales también fue
mejor, posiblemente el resultado de los efectos sistémicos de la
mayor dosis de Activina A. La dosis menor (2,5 ng/100 \mul)
también mejoró ligeramente la cicatrización aunque los resultados
microscópicos fueron más próximos a las heridas control.
La apariencia macroscópica de las heridas fue
bastante variable aunque las heridas tratadas con las dosis media
(inyección de 5 ng/100 \mul) y más pequeña (inyección de 2,5 ng/
100 \mul) pareció ser mejor que sus controles respectivos. Las
heridas tratadas con la dosis mayor (inyección de 10 ng/100 \mul)
fue microscópicamente bastante variable, pero un efecto obvio puede
haber sido invalidado por la calidad de las heridas control que
estuvieron en el mismo animal y por consiguiente quizás mejoró por
los efectos sistémicos de la mayor dosis de Activina A.
Claims (6)
1. El uso de un estimulador de Activina en una
cantidad suficiente para unir receptores de forma similar a los
unidos por TGF-\beta3 en la fabricación de un
medicamento para favorecer la curación de heridas con cicatrización
reducida o favorecer la curación de trastornos fibróticos de
cicatrización reducida.
2. El uso de un estimulador de Activina de
acuerdo con la reivindicación 1 en donde, el estimulador está
seleccionado entre cualquiera del grupo de Activina, un fragmento de
Activina, una forma parcialmente modificada de Activina, un
inhibidor del metabolismo de Activina, y un estimulador de la
síntesis de Activina.
3. El uso de un estimulador de Activina de
acuerdo con la reivindicación 2 en donde, el estimulador comprende
una forma parcialmente modificada de Activina que tiene una vida
media más larga que su molécula de referencia.
4. El uso de un estimulador de Activina de
acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente
con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente
aceptable.
5. El uso de un estimulador de Activina de
acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente
con una composición para favorecer la curación de heridas o
trastornos fibróticos con cicatrización reducida.
6. El uso de un estimulador de Activina de
acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente
con una composición para favorecer la curación de heridas
crónicas.
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