ES2207951T3 - Metodo para reducir los efectos dañinos de la terapia con radiacion en la piel y mucosa de un animal. - Google Patents

Metodo para reducir los efectos dañinos de la terapia con radiacion en la piel y mucosa de un animal.

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ES2207951T3 ES99930683T ES99930683T ES2207951T3 ES 2207951 T3 ES2207951 T3 ES 2207951T3 ES 99930683 T ES99930683 T ES 99930683T ES 99930683 T ES99930683 T ES 99930683T ES 2207951 T3 ES2207951 T3 ES 2207951T3
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Abstract

El uso de una mezcla de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 y arginina en la elaboración de un alimento para mascotas, nutritivamente equilibrado, que contiene ácidos grasos poliinsaturados omega-6, para mitigar los efectos perjudiciales sobre las células normales de un animal mascota con cáncer que sufre terapia de radiación.

Description

Método para reducir los efectos dañinos de la terapia con radiación en la piel y mucosa de un animal.
Antecedentes de la invención Campo de la invención
La presente invención se refiere a una reducción del daño en la piel y en la mucosa de animales mascota tales como perros y gatos, en los que la mascota esta aquejado de cáncer y está sometido a terapia de radiación, que incluye una composición alimenticia que se va a utilizar con este fin.
La técnica anterior
Se sabe que la terapia de radiación clínica en animales va a inducir cambios bioquímicos en los tejidos y células normales de animal que da como resultado daños en ellos. Claramente existe una necesidad de medios para mejorar los daños de los tejidos normales del paciente durante la terapia de radiación. Los procedimientos previos para proporcionar tal mejoramiento incluye la administración al paciente de agentes químicos que, con frecuencia, tienen efectos secundarios indeseables sobre el paciente.
Sumario de la invención
La presente invención se basa en la premisa del descubrimiento de que los daños por radiación en las células normales de los animales con cáncer, que sufren terapia de radiación, se pueden reducir fortaleciendo al animal con una dieta complementada con una mezcla de ácidos grasos omega-3 poliinsaturados y arginina.
Descripción detallada de las realizaciones preferidas
Una reducción de los efectos perjudiciales de la terapia de radiación en animales con cáncer, y en particular en animales mascotas, se proporciona alimentando al animal que sufre semejante terapia con una composición alimenticia que contenga ácidos grasos omega-6 como un nutriente en el que el contenido de nutriente del alimento se complementa para que contenga, sobre una base de materia seca, aproximadamente 2,5 a aproximadamente 7,5% de ácidos grasos omega-3, y aproximadamente 2,0 a aproximadamente 3,5% de arginina, estando la relación, en peso, de ácido graso omega-3 respecto al omega-6, en el alimento, en el intervalo de aproximadamente 0,3:1 a 3,5:1.
En la práctica de la presenten invención, resulta particularmente ventajoso que el contenido de nutrientes de la composición alimenticia utilizada en el método contenga aproximadamente 27 a aproximadamente 35%, sobre una base de la materia seca, de grasa, y aproximadamente 15 a aproximadamente 27%, sobre la base de materia seca, de hidrato de carbono, teniendo como significado el término "base de materia seca", cuando se utiliza aquí, el contenido de nutriente del producto alimenticio después de haberle quitado la humedad. En la solicitud de patente, en tramitación conjunta, USSN 06/544.421 se describe una composición alimenticia de este tipo, cuya composición es eficaz para mitigar la severidad de los trastornos metabólicos en animales con cáncer. Sin embargo, la técnica no ha proporcionado un vínculo entre administrar esta composición alimenticia a animales con cáncer, para reducir el trastorno metabólico, y la reducción de los daños en las células normales de la piel y la mucosa cuando tales animales, que están tomando tal alimento, están expuestos a terapia de radiación.
La presente invención pretende, de forma general, aplicarse a todas las formas de alimento para mascotas que incluyan productos alimenticios para mascotas, secos, enlatados o de humedad intermedia, en la medida de que estos términos son reconocidos por los expertos en la técnica de la formulación y elaboración de alimentos para mascotas, alimentos que, convencionalmente, contienen ácidos grasos omega-6 como ingredientes nutricionales esenciales.
La composición alimenticia para mascotas, de la presente invención no pretende estar restringida por ninguna lista específica de ingredientes o formas de productos proteínicos, grasas o hidratos de carbono, ya que estos dependerán completamente del equilibrio nutritivo de la ración deseada, así como su disponibilidad para el fabricante de alimentos para mascotas. Generalmente, aparte de los ingredientes nutritivos equilibrantes tales como vitaminas, minerales y similares, las composiciones alimenticias de la presente invención tienen un contenido de humedad de aproximadamente 10 a aproximadamente 90% en peso y, preferiblemente, aproximadamente 65 a aproximadamente 75% en peso, y se formulan teniendo un contenido de nutrientes listado en la Tabla I de abajo.
TABLA I
Nutriente % de contenido de nutriente (base de materia seca)
Hidratos de carbono Aproximadamente 15 a aproximadamente 27
Proteínas Aproximadamente 35 a aproximadamente 48
Grasas Aproximadamente 27 a aproximadamente 35
Ácidos grasos omega-6 Aproximadamente 2,0 a aproximadamente 6,0
Ácidos grasos omega-3 Aproximadamente 2,5 a aproximadamente 7,5
Arginina Aproximadamente 2,0 a aproximadamente 3,5
Agentes nutritivos equilibrantes, como vitaminas (A, B1,
B2, B6, E) y minerales (Ca, P, Na,K, Mg, Fe, Cl) Aproximadamente 0,4 a aproximadamente 1,0
El factor crítico, en la medida en que la presente invención es aplicable a la mejora de los daños celulares por la terapia de radiación, es la presencia de una mezcla de ácidos grasos omega-3 poliinsaturados y arginina, en las proporciones especificadas en la anterior Tabla I, en una composición alimenticia para mascotas nutritivamente equilibrada que incluye ácidos grasos omega-6 poliinsaturados, como nutrientes.
Los nutrientes grasos y los hidratos de carbono utilizados para preparar las composiciones alimenticias de la invención, para mascotas, se pueden aportar como fuente alimenticia, a través de ingredientes tales como carne, subproductos cárnicos, otras fuentes de proteínas de origen animal y granos. Por carne se entiende carne de ganado vacuno, cerdo, cordero, cabra, caballo, y otros mamíferos así como de ave y pescado. Los subproductos cárnicos incluyen, pero no se limitan a, pulmones, riñones, sesos, hígados, y estómagos e intestinos exentos de sus contenidos. Además, las mezclas de carne, subproductos cárnicos, y otras proteínas de origen animal, son adecuadas para el uso en los alimentos para mascotas de esta invención. Los ingredientes nutrientes pueden incluir también cantidades de granos de cereales tales como trigo, maíz, cebada y arroz y materiales fibrosos que aumenten el volumen, tales como celulosa, pulpa de remolacha, cáscaras de cacahuetes o fibra de soja.
Un típico producto alimenticio enlatado para perros, útil en la práctica del método de la presente invención se prepara a partir de una mezcla de los siguientes ingredientes:
TABLA II
Ingredientes % en peso
Agua 25-30
Pulmones, lóbulos de vacuno 40-45
Hígado 6-10
Pollo 5-8
Arroz 4-8
Aceite de pescado (fuente de ácidos grasos omega-3 y omega-6) 5-8
Celulosa 0,5-2
Pulpa de carne de vacuno 0,5-2
Sales inorgánicas (carbonato de calcio, óxido de hierro, citrato de potasio) 0,5-2
Arginina 0,2-0,6
Vitaminas 0,01-0,2
Taurina 0,02-0,2
Minerales 0,01-0,2
Al preparar un producto alimenticio para mascotas, útil en la práctica de la presente invención, la composición nutriente se ajusta de forma que la concentración de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 esté presente en el producto alimenticio para animales, de la presente invención, en una concentración de aproximadamente 2,5 a aproximadamente 7,5% sobre una base de materia seca y, preferiblemente, aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,5%, sobre una base de materia seca, cuando los ácidos grasos poliinsaturados omega-6 están presentes en el producto alimenticio para mascotas en una concentración de aproximadamente 2,0 a aproximadamente 6,0% sobre una base de materia seca.
Los ácidos grasos poliinsaturados omega-3 y omega-6 son proporcionados muy convenientemente por los aceites de pescado tales como la lacha, caballa, arenque, boquerón, y salmón, los cuales tienen, todos ellos, niveles significativos de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 y omega-6. Los ácidos grasos poliinsaturados omega-3, ácido eicosapentaenoico C20:5 y ácido docosahexaenoico C22:6 son los típicos aceites de pescado y, juntos, comprenden aproximadamente 25-38% en peso del aceite de pescado. Los ácidos grasos poliinsaturados omega-6 incluyen ácido linoleico y ácido araquidónico, y están presentes en los aceites de pescado en concentraciones menores, generalmente inferiores a aproximadamente 10% en peso.
El producto alimenticio para mascotas, de la presente invención, se complementa con arginina para contener aproximadamente 2,0 a aproximadamente 3,5%, sobre una base de materia seca, y preferiblemente aproximadamente 3,0 a aproximadamente 3,5%, sobre una base de materia seca. La arginina y los componentes del aceite de pescado del producto alimenticio para mascotas, de la presente invención, se incorporan al producto alimenticio durante el tratamiento de la formulación, como por ejemplo, durante y después de la mezcla de los ingredientes del alimento para mascotas. La distribución de estos componentes se puede llevar a cabo por medios convencionales.
Se pueden incluir otros aditivos en este alimento para mascotas, a medida que se necesitan. Estos otros aditivos incluyen agentes que dan sabor, vitaminas, minerales, colorantes y sus mezclas. Estos aditivos se añaden con fines nutritivos y de sabor. Las cantidades adecuadas se determinarán fácilmente por una persona que tenga una experiencia normal en la técnica. Sin embargo, comúnmente se utilizan hasta aproximadamente el 5% de estos ingredientes. Los ingredientes de esta categoría están representados por el óxido de hierro, cloruro de sodio, citrato de potasio, cloruro de potasio, y otras sales comestibles, agentes que dan sabor, vitaminas, minerales, y colorantes.
Los productos alimenticios para mascotas, preparados según la práctica de la presente invención, se preparan mezclando tejidos proteínicos molidos de animales y aves con los restantes ingredientes que incluyen aceites de pescado, arginina, granos de cereales y otros ingredientes nutritivamente equilibrantes y aditivos con fines especiales tales como mezclas de vitaminas y minerales, sales inorgánicas, celulosa y agentes que dan volumen a la pulpa de remolacha y similares. También se añade suficiente agua para el tratamiento. Mientras se mezclan los componentes, se utiliza un recipiente para calentar.
El calentamiento de la mezcla de ingredientes se puede efectuar de cualquier forma adecuada, por ejemplo, mediante inyección directa de vapor o utilizando un recipiente equipado con un cambiador de calor. A continuación de la adición del último ingrediente, se calienta la mezcla a una temperatura que varía desde aproximadamente 21ºC a aproximadamente 60ºC. Son aceptables temperaturas fuera de este intervalo pero pueden no ser prácticas desde el punto de vista comercial sin el uso de otras ayudas del tratamiento. Cuando se calienta a la temperatura apropiada, el material está en forma de líquido espeso. El producto líquido espeso se introduce luego en latas. Se aplica una tapa y el recipiente se cierra herméticamente. A continuación, la lata cerrada herméticamente se coloca en un equipo convencional diseñado para esterilizar el contenido. Esto se lleva a cabo normalmente calentando a temperaturas por encima de 110ºC durante un tiempo apropiado que depende de la temperatura exacta y de la fórmula.
Con el fin de una completa comprensión, se deberá reconocer que el término composición alimenticia para mascotas se pretende aplicar generalmente a un alimento para mascotas, nutritivamente equilibrado, y vendido comercialmente, que proporciona la única toma de alimentos del animal mascota.
Los siguientes ejemplos pretenden describir realizaciones específicas, pero no limitantes, de la presente invención.
Ejemplo
Preparación del producto alimenticio para mascotas
Se preparó un producto alimenticio para mascotas, útil en la práctica de la presente invención, haciendo una mezcla de los ingredientes listados en la siguiente Tabla III y calentando la mezcla a 57ºC durante 15 minutos, seguido del llenado de las latas a 43,3ºC para formar un líquido espeso que se enlató y se esterilizó a 121ºC durante 83 minutos.
(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA III
1
2
El análisis del producto alimenticio para mascotas destilado, preparado a partir de los ingredientes de la Tabla III indicada, como se registra en la Tabla IV, indicó la presencia de los siguientes constituyentes:
(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA IV
3
Para determinar el efecto de la composición alimenticia descrita en la tabla IV, en la reducción del daño en las células normales de la piel y de la mucosa cuando se administra a perros con cáncer que sufren terapia de radiación, se seleccionaron secuencialmente doce perros con neoplasia maligna de la cavidad nasal, confirmada histológicamente, a partir de una población de pacientes extraída de una Unidad de Oncología Comparativa de una Universidad estatal. De este estudio se excluyeron los perros si estaban caquéticos o si habían recibido quimioterapia, esteroides exógenos, o anestesia en los 30 días anteriores a la selección para el estudio. Además, se excluyeron los perros con enfermedades concurrentes tales como disfunción renal, cirrosis hepática, enfermedades endocrinas, obesidad, o hipercalcemia.
Se les hizo tomar parte a todos los perros en un estudio de diseño doble-ciego aleatorio y se les administró una de las dos dietas reseñadas como "Dieta 1" y "Dieta 2". Las dietas eran isocalóricas, proporcionando una energía metabolizable/g de 6,1 kJ. A cada uno de los perros se les administraron cantidades isocalóricas (requisito de mantenimiento de la energía) (kcal = 2[70 kg peso 0,75]) de una de las dos dietas incluidas en el estudio. La Dieta 1 tenía una composición de ingredientes de la presente invención como se describe en la Tabla IV. La Dieta 2, dieta de control, era idéntica a la Dieta 1, excepto en que el aceite de soja estaba sustituido por el aceite de pescado de lachas y arginina, ingredientes presente en la Dieta 1; de forma que la Dieta 2 contenía niveles inferiores de ácidos grasos omega-3 y arginina que en la Dieta 1. Los periodos de evaluación tuvieron como referencia 1 semana antes de comenzar la terapia de radiación (designado como "Día 0"), 7 días con terapia de radiación, y 21 días y 42 días después de que se hubo completado la terapia de radiación.
Las concentraciones de ácidos grasos séricos omega-3 y omega-6, en la sangre extraída de los pacientes durante el periodo de evaluación se registran en la Tabla V de abajo.
TABLA V
4
Los datos registrados en la Tabla V muestran que los perros alimentados con la Dieta 1, la dieta de la presente invención, tenían niveles séricos de ácido grasos poliinsaturados omega-3 más altos (p < 0,001), ácido docosahexaenoico (C22:6) y ácido eicosapentaenoico (C20:5); y concentraciones reducidas del ácido graso poliinsaturado omega-6, ácido linoleico (C198:2) comparado con la línea de referencia (Día 0) y los perros alimentados con la Dieta 2.
Se determinó que estos niveles séricos incrementados de ácidos grasos poliinsaturados omega-3, ácido docosahexaenoico (C22:5) y ácido eicosapentaenoico (C20:5), iban a estar significativamente asociados (p = significado estadístico de la diferencia con cero) con las concentraciones más bajas en los tejidos de mediadores inflamatorios, como se informa en las Tablas VI y VII que siguen. El nivel de mediadores inflamantorios proporciona una evidencia bioquímica de los daños disminuidos en la piel y en la mucosa.
Los parámetros de estudio examinados para evaluar el efecto de la Dieta 1 y la Dieta 2 en el mejoramiento de los daños debidos a la radiación fueron, la generación de mediadores inflamatorios, la prostaglandina E_{2} (PGE_{2}), 11-deshidrotromboxano B_{2} (11 DTX B_{2}), así como puntuaciones histológicas evaluadas a partir de biopsias con incisiones de 6 mm tomadas de la piel y la mucosa procedentes de áreas de altas (300 cGy) y bajas (200 cGy) dosis de radiación diaria, se registran en las tablas VI-VII de abajo.
La Tabla VI de abajo registra la presencia, en una muestra tomada del labio interno (mucosa oral) del paciente, de los mediadores inflamatorios PGE_{2} y 11DTXB_{2}, que son marcadores bioquímicos de la inflamación.
TABLA VI
5
Los datos registrados en la Tabla VI muestran una correlación negativa para los ácidos grasos poliinsaturados omega-3, ácido docosahexaenoico y ácido eicosapentaenoico, es decir, cuanto más alto es el nivel de ácido graso omega-3 presente en la muestra, más baja es la inflamación encontrada en el paciente. Los datos, además, muestran una correlación positiva para el ácido graso omega-6, ácido linoleico, es decir, cuanto más alto es el nivel de ácido graso poliinsaturado omega-6, más alto es el nivel de mediador y más alto es el nivel de inflamación encontrado en el paciente.
La Tabla VII de abajo registra la presencia, en una muestra tomada de la superficie de la piel del paciente, de los mediadores inflamatorios PGE_{2} y 11DTXB_{2}.
(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA VII
6
Los datos registrados en la Tabla VII muestran que las concentraciones en la piel de mediadores inflamatorios eran estadística y significativamente inferiores por la correlación por rangos en pacientes con altos niveles de ácidos grasos omega-3, ácido docosahexaenoico y ácido eicosapentaenoico. Se cree que las concentraciones inferiores de mediadores inflamatorios juegan un papel en la mejora de los efectos secundarios agudos de la terapia de radiación.
Los datos de la Tabla VIII de abajo indican que los niveles séricos de ácido docosahexaenoico y de ácido eicosapentaenoico están también significativamente asociados con la evidencia histológica de los daños disminuidos en la mucosa oral. Se determinó que las concentraciones séricas de ácido eicosapentaenoico y de ácido docosahexaenoico estaban positivamente correlacionadas con el espesor celular en las áreas de la mucosa, ácido eicosapentaenoico (p = 0,017), y ácido docosahexaenoico (p = 0,0241).
(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA VIII
7
Los datos registrados en la Tabla VIII muestran que los pacientes con las concentraciones séricas de ácido eicosapentaenoico y docosahexaenoico globales más elevadas tenían las mejores puntuaciones de espesor de la capa celular histológica en las áreas de la mucosa, que se cree que proporcionan mucositis decreciente, mejorando así la calidad de vida de los pacientes que sufre terapia de radiación.
La calidad de vida de estos pacientes con cáncer que sufren terapia de radiación se evaluó más utilizando un esquema de comportamiento-puntuación, donde la puntuación más baja indica mejor comportamiento clínico. Como se muestra en la Tabla IX, el ácido eicosapentaenoico y docosahexaenoico sérico tenían una significativa correlación por rangos negativa con el estatus del comportamiento clínico, es decir, cuanto más alto es el nivel de ácido graso omega-3 presente en la muestra, más baja es la puntuación en el esquema de comportamiento-puntuación, que indica un mejor comportamiento clínico.
(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA IX
8
Los procedimientos de análisis a partir de los cuales se obtuvieron los datos registrados en las Tablas V-VIII se describen a continuación.
Análisis de ácidos grasos
Los ácidos grasos se analizaron siguiendo el procedimiento de Zicker y colaboradores, como se describe en Ohta A., Mayo MC., Kramer N., Lands WE. Rapid análisis of fatty acids in plasma lipids. Lipids 1990; 25:742-747.
Histopatología
Se hicieron biopsias de la mucosa oral y de la piel con un punzón para biopsias, Baker, de 6 mm en áreas que recibieron dosis bajas (200 cGy) y altas (300 cGy) de radiación según se determina mediante un plan de tratamiento computerizado. Las biopsias se llevaron a cabo 1 semana antes de la terapia, con 1 día de terapia, con 7 días de terapia, al final de la terapia, y 21 días después de que se hubo completado la terapia. Los tejidos se evaluaron histopatológicamente por un único patólogo para el espesor de la capa celular.
Análisis de los mediadores inflamatorios
Se obtuvo mucosa oral y piel de áreas que recibieron dosis altas y bajas de radiación, de la misma forma que para la histopatología y se congelaron a -80ºC. Las muestras congeladas se pusieron sobre un porta de vidrio limpio y se cortaron en pequeños trozos antes de que pudieran descongelarse. Los trozos cortados se pasaron a un tubo de plástico de cultivo, de 4 ml, y se añadieron 2 ml de acetato de etilo frío. Se homogeneizó luego la muestra sedimentando a la velocidad más alta durante un minuto, mientras la muestra y el tubo de cultivo reposaban en un baño de hielo. Se retiró la muestra y los tubos de cultivo del homogeneizador y la punta del homogeneizador se enjuagó con un ml de acetato de etilo frío. Se combinaron las muestras y el líquido del enjuague. Se taparon los tubos de cultivo con papel de aluminio y se dejaron reposar en un baño de hielo durante 30 minutos. Después de treinta minutos en el baño de hielo, se taparon los tubos y se centrifugaron a 500 g, durante 10 minutos a cinco grados centígrados. Se retiró todo el sobrenadante y se puso en un nuevo tubo de plástico de cultivo, de cuatro mililitros. Se evaporó el acetato de etilo de la muestra con una corriente lenta de nitrógeno gas. Se utilizó un baño de agua templada (30ºC) para facilitar el secado. El residuo de la muestra se volvió a poner en suspensión en solución tampón EIA 500 \mul (Caymen, Ann Arbor, MI). Se cubrió la muestra con nitrógeno gas y se almacenó a -80ºC. Se analizaron las muestras para ver la prostaglandina E_{2} y 11-deshidrotromboxano B_{2} con equipos Enzyme Immunoassay (Caymen, Ann Arbor, MI).

Claims (5)

1. El uso de una mezcla de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 y arginina en la elaboración de un alimento para mascotas, nutritivamente equilibrado, que contiene ácidos grasos poliinsaturados omega-6, para mitigar los efectos perjudiciales sobre las células normales de un animal mascota con cáncer que sufre terapia de radiación.
2. El uso de la reivindicación 1, en que los ácidos grasos poliinsaturados omega-3 están presentes en la composición alimenticia en una concentración de 2,5 a 7,5%, sobre una base de materia seca.
3. El uso de la reivindicación 1, en que la arginina está presente en la composición alimenticia en una concentración de 2,0 a 3,5%, sobre una base de materia seca.
4. El uso de la reivindicación 1, en que la relación de pesos de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 respecto a ácidos grasos omega-6 presentes en el alimento es de 0,3:1 a 3,5:1.
5. El uso de la reivindicación 1, en que el alimento nutritivamente equilibrado tiene un contenido de grasa de 27 a 35%, sobre una base de materia seca, un contenido de hidratos de carbono de 15 a 27%, sobre una base de materia seca, y estando la relación de pesos de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 respecto a los omega-6 en el intervalo 0,3:1 a 3,5:1.
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