ES2206609T3 - Reduccion del crecimiento del pelo. - Google Patents

Abstract

EL CRECIMIENTO DEL PELO DE UN MAMIFERO SE REDUCE MEDIANTE LA APLICACION SOBRE LA PIEL DE UNA COMPOSICION DERMATOLOGICAMENTE ACEPTABLE QUE INCLUYE UN INHIBIDOR DE LA ARGINASA.

Description

Reducción del crecimiento del pelo.

La invención se refiere a un método para reducir el crecimiento indeseado de pelo en mamíferos.

Una función principal del pelo en mamíferos es proporcionar protección medioambiental. Sin embargo, esa función se ha perdido en gran medida en los seres humanos, en los cuales el pelo se mantiene o se elimina de diversas partes del cuerpo esencialmente por razones cosméticas. Por ejemplo, generalmente se prefiere tener pelo en la cabellera pero no en la cara.

Se han empleado diversos procedimientos para eliminar el pelo no deseado, incluyendo: afeitado, electrólisis, cremas depilatorias o lociones; depilación a la cera; depilación con pinzas; y antiandrógenos terapéuticos. Estos procedimientos convencionales generalmente tienen inconvenientes asociados. El afeitado, por ejemplo, puede causar rasguños y cortes y puede producir la sensación de un aumento en la velocidad a la que vuelve a crecer el pelo. El afeitado también puede producir una indeseable barba incipiente. La electrólisis, por otro lado, puede mantener un área tratada libre de pelo durante periodos de tiempo prolongados, pero puede ser cara, dolorosa, y algunas veces puede dejar cicatrices. Las cremas depilatorias, aunque muy eficaces, no se recomiendan típicamente para uso frecuente debido a su alto potencial irritante. La depilación a la cera y con pinzas pueden causar dolor, molestias y una eliminación deficiente del pelo corto. Finalmente, los antiandrógenos - los cuales han sido utilizados para el tratamiento del hirsutismo femenino - pueden tener efectos colaterales indeseados.

Se ha revelado previamente que la velocidad y el carácter del crecimiento del pelo se pueden alterar mediante la aplicación en la piel de inhibidores de ciertas enzimas. Estos inhibidores incluyen inhibidores de 5-alfa reductasa, ornitin-descarboxilasa, S-adenosilmetionin-descarboxilasa, gamma-glutamil-transpeptidasa, y transglutaminasa. Véanse, por ejemplo: Breuer et. al., documento de patente US 4.885.289; Shander, documento de patente US 4.720.489; Ahluwalia, documento de patente US 5.095.007; Ahluwalia, documento de patente US 5.096.911; Shander et. al., documento de patente 5.132.293; y Shander et. al., documento de patente 5.143.925.

La arginasa (S-argina-aminohidrolasa EC 3.5.3.1) cataliza la hidrólisis de la L-arginina a ornitina y urea.

Se ha encontrado ahora que el crecimiento indeseado de pelo en mamíferos (incluidos los seres humanos) - particularmente el crecimiento de pelo estimulado por andrógenos - puede reducirse mediante la aplicación en la piel de una composición dermatológicamente aceptable que incluye un inhibidor de arginasa en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento del pelo. El crecimiento de pelo indeseado, que es reducido, puede ser el crecimiento normal del pelo, o el crecimiento de pelo que resulta de un estado anómalo o enfermo.

Los inhibidores preferidos de la arginasa incluyen ácido alfa aminoisobutírico (Bedford et. al. 1988 Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine 188, 509-14); N-G-hidroxi-L-arginina (Daghigh et. al., 1994 Biophysical Biochem. Res. Comm. 202, 174-80); 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)-carbodiimida (Turkoglu et. al., 1991 Int. J. Biochem. 23, 147-51); octopina; N-tosil-L-arginina; y metiléster de N-p-tosil-L-arginina. El último compuesto se convierte in vivo en N-p-tosil-L-arginina mediante las esterasas de los tejidos. Los "inhibidores", tal y como se usan en la presente invención, incluyen compuestos que por sí mismos inhiben la arginasa y compuestos que in vivo se convierten en compuestos que inhiben la arginasa. Los inhibidores preferidos son irreversibles.

El inhibidor de la arginasa se incorpora preferiblemente en una composición tópica que incluye un vehículo dermatológicamente aceptable y no tóxico o un portador que está adaptado para ser extendido sobre la piel. Ejemplos de vehículos apropiados son: acetona, alcoholes, o una crema, loción o gel que pueda vehiculizar eficazmente el compuesto activo. Un vehículo como éste es el que se reveló en la solicitud de patente en tramitación PCT/ US93/ 0506 A. Además, se puede añadir al vehículo un potenciador de la penetración para un mayor incremento de la eficacia de la formulación.

La concentración del inhibidor de arginasa en la composición puede variarse a lo largo de un amplio intervalo hasta una disolución saturada, preferiblemente del 0,1% al 30% en peso o incluso más; la reducción del crecimiento de pelo generalmente aumenta cuando aumenta la cantidad de inhibidor aplicada por unidad de superficie de piel. La máxima cantidad aplicada eficazmente está limitada solamente por la velocidad a la cual el inhibidor penetra en la piel. Generalmente, las cantidades eficaces oscilan entre 100 y 3.000 microgramos o más, por centímetro de piel.

La composición se debería aplicar localmente sobre un área seleccionada del cuerpo en la cual se desea reducir el crecimiento del pelo. Por ejemplo, la composición se puede aplicar en la cara, particularmente la zona de la cara ocupada por la barba, esto es, las mejillas, el cuello, el labio superior y la barbilla. La composición también se puede aplicar en las piernas, brazos, torso y axilas. La composición es particularmente apropiada para reducir el crecimiento del pelo no deseado en mujeres que padecen hirsutismo u otras enfermedades. En seres humanos, la composición debería aplicarse una o dos veces al día, o incluso más frecuentemente, durante al menos tres meses para lograr una reducción perceptible del crecimiento del pelo. La reducción en el crecimiento del pelo se demuestra cuando la frecuencia de eliminación del pelo (mediante afeitado, depilación con pinzas, depilación a la cera) se reduce; o cuando el sujeto percibe menos pelo sobre la zona tratada; o cuantitativamente, cuando el peso de pelo eliminado mediante afeitado (esto es, la masa de pelo) se reduce. Las ventajas de una reducida frecuencia de eliminación del pelo suponen comodidad y menor irritación de la piel.

Los machos íntegros de hámsteres Golden Syrian se consideran modelos aceptables para el crecimiento del pelo de la barba en seres humanos, por cuanto que poseen órganos en los flancos, de forma ovalada, uno a cada lado, de aproximadamente 8 mm de diámetro mayor cada uno, en los cuales crece pelo negro, grueso y áspero similar al pelo de la barba humana. Estos órganos producen pelo como respuesta a los andrógenos en el hámster. Para evaluar la eficacia de una inhibidor de arginasa particular, los órganos de los flancos de cada hámster de un grupo, se depilan mediante la aplicación de un depilatorio químico basado en tioglicolato (Surgex). A un órgano de cada animal se le aplican 10 \mul de vehículo solo, una vez al día, mientras que al otro órgano de cada animal se le aplica una cantidad igual de vehículo que contiene un inhibidor de arginasa. Después de trece aplicaciones (una aplicación por día, durante cinco días a la semana), los órganos de los flancos se afeitan y la cantidad de pelo recuperado de cada uno (masa de pelo) se pesa. El porcentaje de reducción del crecimiento de pelo se calcula restando el valor de la masa de pelo (mg) del lado tratado con el compuesto de prueba, del valor de la masa de pelo del lado tratado con el vehículo; el valor delta obtenido se divide después por el valor de masa de pelo del lado tratado con el vehículo, y el número resultante se multiplica por 100.

Al ensayo descrito anteriormente se referirá la presente invención como el ensayo del "hámster Golden Syrian". Las composiciones preferidas proporcionan una reducción en el crecimiento del pelo de al menos aproximadamente el 30%, más preferiblemente al menos aproximadamente el 45%, y más preferiblemente al menos aproximadamente el 60% cuando se prueba en un ensayo del hámster Golden Syrian. Se probaron un número de composiciones con el ensayo del hámster Golden Syrian; los resultados se recogen en la Tabla I.

(Tabla pasa a página siguiente)

1

Los estudios in vitro sobre la inhibición de la arginasa del folículo piloso confirmaron la acción bioquímica de los compuestos inhibidores del crecimiento del pelo los cuales se seleccionaron como inhibidores de la arginasa del folículo piloso. Se obtuvieron extractos de folículos pilosos mediante extirpación y tratamiento por ultrasonido de los folículos pilosos de los órganos de los flancos del hámster. Los folículos pilosos de los órganos de los flancos del hámster se extirparon y se sometieron a ultrasonidos en una disolución de tampón Tris 0,001 M, a pH 7,5. Los extractos sometidos a ultrasonidos se centrifugaron a 12.000 x g, y el sobrenadante se usó para medir la actividad de la arginasa. Los volúmenes de reacción finales se alcanzaron utilizando 90 \mul del sobrenadante del folículo, el cual se mezcló con 100 \mul del tampón Tris (con o sin el inhibidor), y 10 \mul de arginina 20 mM incubados durante 5 minutos a 37ºC. La reacción enzimática se paró mediante la separación de la enzima del sustrato con un filtro con un valor de corte de 10.000 de peso molecular. El producto formado, ornitina, se separó del sustrato de arginina usando la metodología HPLC en fase inversa. Se usó una alícuota de la reacción para generar 20 \mul del filtrado el cual se hizo reaccionar con 2 \mul de reactivo O-ftalaldehído (OPA). Este reactivo rápidamente reacciona con todos los aminoácidos primarios para formar aductos fluorescentes que se separan sobre una columna C18 (15 cm x 3,9 mm). Los 40 \mul de la muestra derivatizada se inyectan en la columna HPLC y eluyen con un gradiente en etapas comenzando con el Tampón A al 100% (Acetato sódico 0,024M, fosfato sódico 0,024M, mezcla a pH 4 de metanol e tetrahidrofurano en una proporción de 81:15:4) y terminando con una mezcla 50/50 del Tampón A y el Tampón B (metanol/ agua/ tetrahidrofurano en una proporción de 75:15:10). Se usó un detector de fluorescencia para monitorizar los picos de aminoácido cuando se eluían de la columna. Usando este método la arginina eluyó de la columna a los 20 minutos y la formación de ornitina, cuando estaba incluida, a una concentración final de 10 \muM. La magnitud de la inhibición de la masa de pelo se correlacionó bien con los resultados in vitro. El metiléster de N-tosil-L-arginina no demostró actividad in vitro pero se convirtió in vitro en N-tosil-L-arginina mediante las esterasas del tejido. Los resultados se muestran en la Tabla II.

TABLA II

Ensayo in vitro de los inhibidores de la arginasa de folículo piloso
Compuesto (10 \muM)	% Inhibición
Ácido \alpha-aminoisobutírico	27%
1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida	64%
N-tosil-L-arginina	64%
Metiléster de N-p-tosil-L-arginina	0%
Octopina	50%
N^{-G}-hidroxi-L-arginina	98%

Se apreciará por los expertos en la técnica que la invención puede ser realizada en un amplio intervalo de parámetros equivalentes de composición y de condiciones sin apartarse del espíritu o del alcance de la invención o de cualquier realización de la misma.

Claims (15)

1. Un método cosmético para la reducción del crecimiento del pelo en mamíferos, que comprende: seleccionar un área de piel de la cual se desea el crecimiento reducido del pelo; y aplicar a dicha área de piel una composición dermatológicamente aceptable que incluye un inhibidor de arginasa en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento de pelo.

2. El método de la reivindicación 1, en el que dicho inhibidor de arginasa comprende ácido alfa aminoisobutírico, N^{-G}-hidroxi-L-arginina, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida, octopina, N-tosil-L-arginina, o 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida.

3. El método de las reivindicaciones 1 ó 2, en el que la concentración de dicho inhibidor de arginasa en dicha composición está entre 1% y 30% y/o la composición se aplica en la piel en una cantidad entre 100 y 3.000 microgramos de dicho inhibidor de arginasa por centímetro cuadrado de piel.

4. El método de la reivindicación 1, en el que la composición se aplica a la piel de la cara de dicho mamífero y/o proporciona una reducción en el crecimiento de pelo de al menos 30%, o al menos 40%, o al menos 60% cuando se prueba con el ensayo del hámster Golden Syrian.

5. El método de la reivindicación 1, en el que dicho mamífero es un ser humano.

6. El método de las reivindicaciones de 1 a 5, en el que dicha composición comprende además un portador o un vehículo dermatológicamente aceptable y no-tóxico.

7. El método de la reivindicación 1, en el que dicho inhibidor de arginasa es un compuesto que por sí mismo inhibe la arginasa o es un compuesto que se convierte in vivo en un compuesto que inhibe la arginasa cuando se aplica tópicamente sobre la piel.

8. El uso de un inhibidor de arginasa para la fabricación de un medicamento para inhibir el crecimiento de pelo en mamíferos.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en el que dicho inhibidor es como se define en las reivindicaciones
1 ó 2.

10. Un método para producir una composición para inhibir el crecimiento de pelo en mamífero, el cual comprende seleccionar un inhibidor de arginasa, y combinar dicho inhibidor, en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento de pelo, con un vehículo o portador dermatológicamente aceptable y no tóxico.

11. Un método de acuerdo con la reivindicación 10, en la que dicho vehículo o portador está adaptado para ser extendido sobre la piel de un mamífero.

12. Un método de acuerdo con las reivindicaciones 10 u 11, en el que dicho inhibidor es como se define en las reivindicaciones 1 ó 2.

13. El uso cosmético de un inhibidor de arginasa para reducir el crecimiento de pelo.

14. Una composición cuando se usa para inhibir el crecimiento de pelo en mamíferos, que incluye un inhibidor de arginasa en una cantidad eficaz para reducir el crecimiento de pelo y un vehículo o portador dermatológicamente aceptable y no tóxico.

15. Una composición de acuerdo con la reivindicación 14, en la que dicho inhibidor es como se define en las reivindicaciones 1 ó 2.