EP2921134A1 - Système de collecte de semence animale et procédé de collecte de semence animale à l'aide d'un tel système - Google Patents

Système de collecte de semence animale et procédé de collecte de semence animale à l'aide d'un tel système Download PDF

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EP2921134A1
EP2921134A1 EP15159227.6A EP15159227A EP2921134A1 EP 2921134 A1 EP2921134 A1 EP 2921134A1 EP 15159227 A EP15159227 A EP 15159227A EP 2921134 A1 EP2921134 A1 EP 2921134A1
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EP
European Patent Office
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container
dilution
collection device
seed
collection
Prior art date
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Application number
EP15159227.6A
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German (de)
English (en)
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EP2921134B1 (fr
Inventor
Eric Schmitt
Agnès CAMUS
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IMV Technologies SA
Original Assignee
IMV Technologies SA
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Publication date
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Application granted granted Critical
Publication of EP2921134B1 publication Critical patent/EP2921134B1/fr
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
    • A61D19/00—Instruments or methods for reproduction or fertilisation
    • A61D19/02—Instruments or methods for reproduction or fertilisation for artificial insemination
    • A61D19/021—Apparatus for collecting seminal fluids; Artificial vaginas

Definitions

  • the present invention relates to the general field of animal semen collection, including bovine semen, and more specifically to the systems for collecting this seed and the methods of collecting this seed using such collection systems.
  • the invention also relates to such systems comprising animal seed dilution media, especially bovine semen, cryoprotectants (or cryopreservatives).
  • the animal semen is analyzed in a specific room often called laboratory, then it is pre-diluted (first dilution) and then diluted (second dilution), before being preserved, for example by cryogenics, in unitary packages called glitter.
  • This first dilution can be done by mixing the collected seed with a predetermined dilution medium.
  • a predetermined dilution medium This may be for example a buffer solution comprising substances for preserving / protecting sperm membranes of the seed and / or antibiotics.
  • bovine seminal plasma contains certain proteins that bind to sperm membranes just after the ejaculation of the animal, which favors acrosomal reactions ( "Snapshots") and is therefore harmful to the conservation of spermatozoa.
  • a medium comprising, in addition to a tris-type buffer (for trishydroxymethylaminomethane or tris (2-amino-2- (hydroxymethyl) propane-1,3-diol) / citric acid / fructose, the composition of which is familiar to humans.
  • a tris-type buffer for trishydroxymethylaminomethane or tris (2-amino-2- (hydroxymethyl) propane-1,3-diol) / citric acid / fructose
  • a tris-type buffer for trishydroxymethylaminomethane or tris (2-amino-2- (hydroxymethyl) propane-1,3-diol) / citric acid / fructose
  • the invention relates to a system for improving the performance of known systems for collecting animal semen, particularly bovine semen, in a simple, convenient and economical manner.
  • the invention thus provides, in a first aspect, a system for collecting animal semen, in particular bovine semen, comprising a container configured to be mounted on one end of an artificial vagina and having an internal space configured to collect said seed, characterized in that said container is further configured to include, prior to collecting said seed, a medium of first dilution of said seed and that said system further comprises a collection device configured to be at least partially introduced into said container and to be attached to said artificial vagina, said collection device being interposed between said artificial vagina and said container, said collection device including a flow channel of said seed extending into said internal space of said container and an orifice of discharging said seed opening into said internal space of said container; and said system is configured to prevent, at least substantially, said first dilution medium from traveling in said flow channel of said collection device.
  • the collection system according to the invention makes it possible to directly and immediately put the animal semen into contact with the medium of first dilution during the harvest of the seed, before proceeding to the analyzes.
  • the collection system according to the invention is configured so that contacting is performed without risk that the medium of first dilution can not go up (at least for the most part) to the artificial vagina where it would not allow have its function of first dilution of the seed.
  • the system according to the invention is thus advantageous in that it allows its user, often called the harvester, to easily mount the artificial vagina together with this system on the penis of the animal, in a position where the artificial vagina and therefore the collection system are returned (upside down); and this, without risk that the medium of first dilution can not escape from the container.
  • the system according to the invention is furthermore advantageous to use during the collection of bovine semen where the animal can be particularly brutal and inflict numerous shakes on the collection system.
  • Liposomes are artificial vesicles (or capsules) formed by concentric lipid bilayers, enclosing an aqueous volume. They are obtained from amphiphilic lipids, and especially from phospholipids having a polar "head” (hydrophilic) generally formed of a glycerol-3 phosphate residue esterified by a polar molecule, and two hydrophobic "tails" (which consist of chains of two fatty acids).
  • Phosphatidylcholine (or lecithin or 1-oleyl-2-stearyl-phosphatidylcholine) is a phospholipid obtained from egg yolk by a reproducible process.
  • the process for obtaining liposomes is generally based on extrusion with a mini-extruder such as that of Avanti Polar Lipids; but any other method known to those skilled in the art is usable.
  • the vesicles formed are of spheroidal structure, generally of average size less than 200 nm in diameter.
  • Low density lipoproteins mainly comprise the following four lipids: sphingomyelin, cholesterol, 1-palmitoyl-2-docosahexaenoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (16: 0-22: 6 PC; (CAS NO.59403) 54-2) and plasmalogen 1- (1Z-octadecyl) -2-docosahexaneoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (P-PC).
  • the process according to the invention comprises the steps of rinsing said collection device after collection of said seed and then removing the collection device from said container; and / or it comprises the steps of providing a device for diluting said seed and then mounting said dilution device on said container, in place of said collection device after removal of the latter from said container once the collection is made; and / or it comprises the steps of introducing a determined volume of a second dilution medium of said seed into said internal space of said container and into a space inside said dilution device, of fixing a lid of said dilution device on an end edge of the latter and then perform a second dilution of said seed.
  • the figure 1 illustrates an animal semen collection system 1, here in a rest configuration. This is a system 1 for collecting bovine semen.
  • This system 1 comprises a container 3 configured to collect the bovine semen, and a collection device 4 attached to both the container 3 and a cone of an artificial vagina 2 configured to be mounted on the penis of the animal (not shown) to stimulate it.
  • the cone of the artificial vagina 2 which is here only partially represented, here has a substantially frustoconical shape, the narrowest portion of which extends towards an end 9 of this cone of artificial vagina 2.
  • the container 3 is here a tube of generally cylindrical shape, having a side wall 10 extending between an end 11 closed by a bottom wall 14 and an open end 12, opposite to the closed end 11.
  • the side wall 10 of the tube 3 has an inner face 16 defining an internal space 15 to the tube 3, this internal space 15 being designed to collect, before collection, a predetermined medium of first dilution 5, and during collection, to collect the seed. animal.
  • the bottom wall 14 formed in the internal space 15 has a V shape, in the manner of a centrifugation tube and the tube 3 further comprises a recess 13 formed between the closed end 11 and the bottom wall 14 .
  • the tube 3 is here made of plastic material molded in one piece and its internal space 15 here has a volume of about 30 mL, and more generally a volume of about 20 mL to 200 mL.
  • the collecting device 4 extends substantially longitudinally between a first end 20 and a second end 21 opposite the first end 20.
  • the collecting device 4 comprises a first lateral wall 71 of generally substantially cylindrical shape, and a second lateral wall 72 extending in the extension of the first side wall 71 and also having a generally substantially cylindrical shape.
  • the first side wall 71 has a recess 29 forming an interior space and the second side wall 72 forms a flow channel 23 of the seed, which channel 23 is narrowed with respect to the interior space of the first side wall 71.
  • the recess 29 is in fluid communication with the flow channel 23.
  • the first side wall 71 has, at the first end 20, a first portion 22 of generally cylindrical shape and configured to be fitted with the end 9 of the cone of the artificial vagina 2.
  • the first side wall 71 has a second portion 54 of generally cylindrical shape extending from the first portion 22 and configured to be fitted with a side wall 10 of the tube 3.
  • the second portion 54 is connected to the first portion 22 by a shoulder 28 formed in the first side wall 71.
  • the shoulder 28 is configured so that the second portion 54 has an outer diameter greater than the outer diameter of the first portion 22.
  • the first side wall 71 has a third portion 55 extending into said internal space 15 of the container 3, from the second portion 54.
  • This third portion 55 has a generally frustoconical outer face and the collection device 4 is provided with a vent 17 formed in this third portion 55.
  • the vent 17 comprises a first chamber having a first internal diameter and opening out of the first side wall 71 of the collection device 4, and a second chamber having a second internal diameter, much smaller than the first internal diameter of the first chamber. and opening into the recess 29 formed in the first side wall 71 of the collecting device 4.
  • the vent 17 is thus configured to create fluid communication for air, which communication is reversible but facilitated from the second chamber to the first chamber due to the respective internal diameters (in other words facilitated by the recess 29 of the collection device 4 to the internal space 15 of the tube 3).
  • the vent 17 is also configured to prohibit fluid communication for animal semen, particularly from the first chamber to the second chamber (in other words prohibited from the inner space 15 of the tube 3 to the recess 29 of the device collection 4).
  • the second side wall 72 has a first portion 24 of generally cylindrical shape, connected to the third portion 55 of the first side wall 71 through an intermediate portion 27, and a tip 25 extending from the first portion 24 to the second end 21.
  • the second portion 24 is thus interposed between the intermediate portion 27 and the endpiece 25.
  • the tip 25 is frustoconical with its narrowest portion which is at the end 21, where a discharge port 26 of the seed is further provided.
  • the second portion 24 and the frustoconical tip form the flow channel 23 of the animal semen.
  • the intermediate portion 27 is configured to form an internal shoulder in the recess 29.
  • the collection device 4 is made of plastic material molded in one piece, and in particular here in a thermoplastic polymer, especially polyacetal or polyoxymethylene (POM).
  • a thermoplastic polymer especially polyacetal or polyoxymethylene (POM).
  • the collection device 4 is configured so that the flow channel 23 has an inner face 30 having a surface tension facilitating the flow of animal semen.
  • the first portion 24 has an outer diameter D 1 here approximately equal to 11 mm and an inner diameter D 2 here approximately equal to 8.6 mm.
  • the frustoconical tip 25 has meanwhile a minimum internal diameter D 3 here approximately equal to 5 mm.
  • This minimum internal diameter D 3 is representative of the smallest passage for the animal seed in the flow channel 23, at the discharge orifice 26 of this seed ( figure 2 ).
  • the outside diameter D 1 is between about 5 mm and about 17 mm
  • the inside diameter D 2 is between about 8 mm and about 20 mm
  • the minimum inside diameter D 3 is between about 5 mm and about 15 mm. mm.
  • the second cylindrical portion 54 of the first side wall 71 of the collection device 4 is partially force-fitted into the tube 3 so that the flow channel 23 of this collection device 4 extends into the internal space 15 of the tube 3 towards the bottom wall 14 of the latter.
  • this second cylindrical portion 54 has an outer face 31 which comes into contact with the inner face 16 of the side wall 10 of the tube 3.
  • the collection device 4 is fitted into the tube 3 in such a way that the frustoconical tip 25 of this collection device 4 and more precisely its discharge orifice 26, is opposite the first dilution medium 5 situated at the bottom of the tube 3, when the system 1 is in its rest configuration ( figure 1 ).
  • the tube 3 and the collection device 4 are configured so that the discharge orifice 26 and the high level of the first dilution medium 5 are separated by a distance denoted H 1 , here approximately equal to 4.7 mm, when the assembly formed of the collection device 4 and the tube 3 is in the vertical position. More generally, the distance H 1 is between about 2 mm and about 35 mm.
  • the cone of the artificial vagina 2 has a frustoconical portion 58 and a cylindrical portion 57 extending from the frustoconical portion 58, to the end 9 of the cone of the artificial vagina 2.
  • the cylindrical portion 57 is provided with a free edge 59 in the form of a bead.
  • the cylindrical portion 57 is partially force-fitted on the first portion 22 of the first side wall 71 of the collection device 4, at its first end 22, the free edge 59 in a bead bearing against the shoulder 28 formed on this first side wall 71.
  • the collection system 1 which is fixed via its collection device 4 to the cone of the artificial vagina 2, is in the extension of the latter and has a general inclination similar to that of the artificial vagina.
  • the system 1 When the harvester introduces the penis of the animal into the artificial vagina 2, the system 1 is disposed with an inclination for example of about 10 degrees to about 30 degrees above a horizontal plane (upside down or downward). other terms exhaust port 26 of the collection device 4 at the top). This at least substantially overturned position of the system 1 can be maintained until the ejaculation of the animal.
  • the arrangement of the collection device 4 and the tube 3 containing the first dilution medium 5 therefore advantageously allows, before collection during the assembly of the artificial vagina 2 and the system 1 on the penis of the animal, where the system can be returned (head down), and also during collection, to retain the medium of first dilution 5 in the tube 3 ( figure 2 ).
  • the collection device 4 and the tube 3 containing the first dilution medium 5 are configured to prevent, at least for the most part, this first dilution medium from running in the flow channel 23 of the collection device. 4 during assembly and during the collection of animal semen.
  • the system 1 changes position until it is inclined at about 10 degrees to about 30 degrees below the horizontal plane at the end of the collection.
  • the animal semen flows into the flow channel 23 of the collection device 4 by gravity until leaving this channel 23 through the discharge port 26 to immediately come into contact with the first dilution medium 5.
  • This arrangement of the collection device 4 and the tube 3 containing the first dilution medium 5 thus also advantageously allows just after the collection of the seed which is evacuated by gravity from the flow channel 23 through the orifice evacuation 26, to put this seed immediately in contact with the medium of first dilution 5.
  • the collection system 1 then comprises, in place of the collection device 4, a dilution device 6 of the animal seed having a general funnel shape having an open first end 45 facing the bottom of the tube 3 and a second open end 44 opposite the first open end 45.
  • This dilution device 6 is configured to be mounted on the container 3 after withdrawal of the latter from the container 3 after the collection of animal semen.
  • this mixture of seed pre-dilution 70 has a volume of from about 5 mL to about 15 mL for an initial volume of the first dilution medium of from about 2.5 mL to about 6 mL.
  • the initial volume of the first dilution medium may range from about 2 mL to about 60 mL so that the volume of the seed pre-dilution mixture may be from about 4 mL to about 120 mL.
  • the initial volume of the first dilution medium 5, also known as the predilution medium is preferably substantially similar to the volume of seed collected or collected.
  • the volume of such a medium can be about 6 mL whereas for young bulls, it can only be about 3 mL.
  • these volumes are a function of the animal to which the seed is to be collected and possibly the tube 3, the collection device 4 fixed on the tube 3 and the cone of the artificial vagina 2 fixed on the collection device 4.
  • these volumes may for example vary by a few milliliters for the bovine species depending on the young genomic bulls or service bulls. These variations may be more important for other species.
  • the dilution device 6 in the form of funnel has a side wall defining an internal space 44 to the dilution device 6 and having a first cylindrical portion 40 at its second open end 44, a second portion 41 substantially frustoconical and which s' extends from the first cylindrical portion 40 towards the first open end 45, a third portion 42 also substantially frustoconical and extending from the second frustoconical portion 41 towards the first open end 45, as well as a substantially cylindrical end portion 43 which extends from the third frustoconical portion 42 to the first open end 45.
  • the arrangement of the different portions of the dilution device 6 makes it possible to optimize its volume with respect to its height, as well as the flow of the fluids that it is configured to receive.
  • the end portion 43 is configured to be press fit in the side wall 10 of the tube 3 at its open end 12.
  • this end portion 43 has an outer face 47 which is configured to come into contact with the inner face 16 of the side wall 10 of the tube 3.
  • the first cylindrical portion 40 of the dilution device 6 here has an inside diameter much greater than that of the end portion 43 which is located opposite the first cylindrical portion 40.
  • the side wall of the dilution device 6 further comprises, at its second open end 44 and therefore opposite its end portion 43, an end edge 48 connected to the first cylindrical portion 40.
  • This end edge 48 is configured to form a protruding shoulder of the side wall of the dilution device 6.
  • the dilution device 6 further includes a cover 49 configured to be attached to the end edge 48 of the side wall.
  • the cover 49 has a circular shape so as to close the opening formed in the dilution device 6 at its second open end 44.
  • the cover 49 has a recess 52 at the bottom of which is formed a sealed wall 53 which is disposed in an internal space 46 of the dilution device 6 when the cover 49 is fixed on the latter, to ensure the seal between the cover 49 and dilution device 6.
  • the cover 49 further comprises a circular flange 50 configured to snap onto the end edge 48 of the side wall of the dilution device 6.
  • the circular flange 50 of the cover 49 is configured to leave a space between the latter and an outer face of the side wall of the device. dilution 6, under the end edge 48, to allow removal of the cover 49 of the side wall.
  • the side wall and the lid of the dilution device 6 are here made of plastic.
  • the collection system 1 formed by the tube 3 and the dilution device 6 fitted on this tube 3, as illustrated in FIGS. Figures 3 and 4 has a volume here equal to about 300 mL. More generally, the collection system 1 has a volume of between about 100 ml and about 1000 ml.
  • the collection system 1 is shown before the second dilution of the animal semen and more precisely the mixture 70 while on the figure 4 a diluted mixture of the animal seed 80 filled the volume of the collection system 1 illustrated.
  • the method of collecting animal semen comprises the step of providing the tube 3 as described above and then introducing into the internal space 15 of the latter a determined volume of the first dilution medium 5.
  • this determined volume of the first dilution medium may be in the range [2.5 mL; 6 mL].
  • this medium of first dilution may comprise a buffer solution composed for example of substances for the preservation / protection of the sperm membranes of the animal semen and / or antibiotics.
  • the method of collecting animal semen further comprises the step of providing a collection device 4 as described above and to introduce the latter at least partially into the tube 3 so that the flow channel 23 extends into the internal space 15 of the tube 3 and the discharge orifice 26 opens into this internal space 15.
  • the collection device 4 is fitted into the tube 3.
  • the discharge port 26 is facing the first dilution medium 5 and at a determined distance.
  • the method of collecting animal semen further comprises the step of providing an artificial vagina 2 as described above and fixing the collection device 4 on the cone of the artificial vagina 2 so as to interpose this collection device 4 between the cone of the artificial vagina 2 and the tube 3.
  • the collection system 1 is then in the extension of the artificial vagina 2 and is therefore inclined with respect to a horizontal plane (above or below, see above).
  • the collection system 1 and in particular the collection device 4 and the tube 3, are configured to prevent at least a major part of the first dilution medium from running in the flow channel of the collection device 4 during the collection of animal semen.
  • the method for collecting animal semen furthermore comprises, once the ejaculation of the animal has been completed and the seed has passed into the tube 3 and thus in contact with the pre-dilution medium 5, the step of removing the collection system. 1 of the cone of the artificial vagina 2, removing the cylindrical portion 57 of the cone of the first portion 22 of the first side wall 71 of the collection device 4.
  • the collection process then comprises the step of rinsing the collection device 4 after collection of the seed, for example by means of a second dilution medium, and then removing this collection device 4 from the tube 3.
  • the method for collecting animal semen also comprises the steps of providing a device 6 for diluting the seed as described above and then mounting this dilution device 6 on the tube 3, here by a force fitting, instead of the collection device 4 after removing the latter from the tube 3 once the collection.
  • the seed collection process comprises the steps of introducing a determined volume of a medium of second dilution of the seed into the internal space 15 of the tube 3 and into the internal space 46 of the dilution device 6, to fix the cover 49 on the end edge 48 of the dilution device 6 and then perform a second dilution of the animal semen and more specifically a dilution of the pre-diluted mixture of seed 70 to obtain the diluted mixture of this seed 80.
  • the method may further comprise the steps of taking a plurality of determined volumes of the diluted medium 80, filling flakes each with a determined volume of this diluted medium 80 and cryogenizing these filled flakes to maintain these mixing volumes. .
  • the first immediate dilution of the seed with the first dilution medium 5 directly in the tube 3, the rinsing of the collection device 4 mounted on the tube 3 and the second dilution by means of the dilution device 6 mounted on the tube 3 instead of the collection device 4 after removal from the tube 3 when the collection of semen is performed, allows both to simplify the animal semen collection process by minimizing the number of steps and to significantly limit the losses of volume of animal semen, pre-diluted mixture of this seed and diluted mixture of this seed; in comparison with the seed collection methods of the prior art where a plurality of transfer steps inducing volume losses are required.
  • the collection system 1 while being particularly simple, convenient and economical, thus makes the collection process itself particularly simple, convenient and economical and allows the filling of a higher number of flakes for the preservation of the animal semen collected.
  • the collection system 101 is here illustrated in the same configuration as the collection system 1 of the figure 2 .
  • the tube 103 here has a capacity greater than the tube 3 illustrated on the Figures 1 to 4 .
  • This tube 103 has here for example a volume of about 50 ml.
  • This tube 103 furthermore has a determined volume of a first dilution medium 105, for example between about 3 ml and about 15 ml.
  • This first dilution medium 105 is located at the bottom of the tube, against a V-shaped wall, at the closed end 111 of the tube 103.
  • the tube 103 further comprises a lid 163 pierced with an orifice 165, here central, and the lid 163 has a circular flap 164 which is applied on an outer face 166 of the side wall of the tube 103.
  • the collection device 104 of the collection system 101 has a cylindrical general shape, similar to that of the tube 103, having a side wall 160 extending between a first end 120 and a second end 121 opposite the first end 120. .
  • the collection device 104 here has a volume of about 15 ml.
  • the collection device 104 is further provided with a cover 161 mounted at its first end 120 and having a circular flap 162 provided to be applied on an outer face 131 of the side wall 160.
  • the collection device 104 is configured to be introduced into the internal space of the tube 103, on the side of the second end 121 of the collection device 104, through the orifice 165 formed in the lid 163 of the tube 103.
  • the opening 165 here has a diameter of approximately 15 mm and the collection device 104 is introduced into the tube 103 of a length here defined H 2 , between about 3 mm and about 10 mm.
  • the collection device 104 also has an outlet opening 126 formed in a substantially frustoconical bottom wall of this collection device 104.
  • the discharge orifice 126 here has a diameter of between about 3 mm and 10 mm.
  • this collection device 104 is configured to be attached to the cone of an artificial vagina.
  • the cover 161 may be removed from the collection device 104 or the cover 161 may include a passage opening for the passage of the end of the cone of the artificial vagina and / or mounting members thereon.
  • first dilution media 5 cryopreservatives, whose behavior in the presence of bovine semen are illustrated by the following examples will be described.
  • figures 6 , 7 and 8 Such a dilution medium has a volume of between about 2.5 ml and about 6 ml.
  • Buffered saline (White or "BI") consisted of tris (2-amino-2- (hydroxymethyl) propane-1,3-diol (173.0 mMol), citric acid monohydrate (70.0 mMol), fructose (56.0 mMol) and glycerol (6.4% vol / vol) The pH was adjusted to 6.2 and the osmolarity was approximately 1300.0 mOsm.
  • the low-density lipoprotein (LDL) cryoprotectant medium was extracted from the yolk according to the protocol described by Moussa et al. (Theriogenology 57 (6): 1695-1706 ). After extraction, the resulting amount of this LDL sample was diluted in buffered saline (100 mL) resulting in the "comparable C1" solution: "Comp”. This solution, which is according to the invention, has been compared with the solutions according to the invention comprising liposomes.
  • the proteins, assayed by BCA method using a Pierce micro-kit from Thermoscientific, were present in the LDL sample in an amount of 8 g / L.
  • Liposomes were produced from an egg phospholipid extract in buffered saline by extrusion using a mini extruder from Avanti Polar Lipids. They were composed of 73% phosphatidylcholine, 11% phosphadiethanolamine and various minor compounds (neutral lipids, triglycerides and sphingomyelin). The extracts were hydrated in buffered saline overnight at lipid concentrations of 10 g / L for solution C1, respectively; 20 g / L for solution C2; 40 g / L for solution C3; and 60 g / L for solution C4. The solutions were then sonicated for 15 minutes (per Elmasonic S 30 H from Elma at 275 W power). Finally, the dispersions were extruded (20 passages per 100 nm membrane).
  • a characterization of the semen from Prim'Hosltein cattle was carried out by a preliminary protein determination.
  • the seed was immediately centrifuged twice at 10,000 x g to recover the seminal plasma in the supernatant.
  • the amount of protein in this bovine semen sample was 88.5 mg / mL. It was measured by BCA method (using a Pierce micro-kit from Thermoscientific).
  • sperm motility analyzes were performed on a CASA system for "computer assisted semen analysis" in English terminology, for example with a device known as IVOS designed and developed by Hamitlon Thorne. So-called intact acrosome viability assays of spermatozoa were performed by cytometry, for example with a device known as EasyCyte designed and developed by the applicant company and the company Millipore.
  • the figure 6 is a schematic diagram illustrating the percentage of motile sperm (MS) obtained after contacting each solution with the seed (the rate of 100% corresponding to the total sperm population).
  • the figure 7 is a schematic diagram illustrating the percentage of progressive spermatozoa (PS) obtained after contacting each of the solutions with the seed.
  • the figure 8 is a schematic diagram illustrating the percentage of viable spermatozoa with intact acrosomes (V / A (+)) obtained after contacting each of the solutions with the seed.
  • cryoprotective containing cryoprotective LDL or liposome molecules
  • Comp cryoprotective LDL or liposome molecules
  • BI cryoprotectants
  • cryoprotective medium in particular comprising LDLs, can be used in the system according to the invention.
  • the latter comprises a flow channel formed for example by a cylindrical portion in which are formed walls to form a baffled system in the flow channel; thus preventing the first dilution medium from running in this flow channel.
  • the latter has a flow channel at the end of which is formed a valve allowing the passage of animal semen to the internal space of the container and preventing at least major part of the flow of the first dilution medium in the flow channel of the collection device.
  • the container has a rectangular shape and the collection device is formed by a plate at least partially introduced into the container and extending therethrough; with this plate which is provided with at least one orifice for the evacuation of the seed in the internal space of the container when this seed travels on the plate.

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Abstract

L'invention concerne un système de collecte de semence animale, comportant un contenant (3) configuré pour être monté sur une extrémité (9) d'un vagin artificiel (2), présentant un espace interne (15) configuré pour recueillir ladite semence et configuré pour comporter un milieu de première dilution (5) avant de recueillir ladite semence, et ledit système (1) comporte un dispositif de collecte (4) configuré pour être au moins partiellement introduit dans ledit contenant et pour être fixé sur ledit vagin, et étant interposé entre ledit vagin et ledit contenant, ledit dispositif de collecte comportant un canal d'écoulement (23) de ladite semence s'étendant dans ledit espace interne dudit contenant et un orifice d'évacuation (26) de ladite semence débouchant dans ledit espace interne ; et ledit système est configuré pour empêcher, au moins en majeure partie, ledit milieu de première dilution de cheminer dans ledit canal d'écoulement dudit dispositif de collecte.

Description

  • La présente invention a trait au domaine général de la collecte de semence animale, notamment la semence bovine, et plus précisément aux systèmes pour collecter cette semence et aux procédés de collecte de cette semence à l'aide de tels systèmes de collecte. L'invention concerne également de tels systèmes comprenant des milieux de dilution de semence animale, notamment la semence bovine, cryoprotecteurs (ou cryoconservateurs).
  • On connaît déjà des systèmes de collecte de semence animale, notamment bovine, formés d'un vagin artificiel à monter sur le pénis de l'animal pour le stimuler et d'un tube collecteur fixé sur un cône du vagin artificiel et prévu pour recueillir la semence animale.
  • Une fois recueillie dans le tube collecteur, la semence animale est analysée dans une pièce spécifique souvent appelée laboratoire, puis elle est pré-diluée (première dilution) et ensuite diluée (deuxième dilution), avant d'être conservée, par exemple par cryogénie, dans des conditionnements unitaires appelés paillettes.
  • Il peut généralement se passer un temps de l'ordre de quelques minutes à dix minutes environ entre la fin de la collecte de semence, l'analyse de la semence pure et la première dilution.
  • Cette première dilution peut se faire en mélangeant la semence recueillie avec un milieu prédéterminé de dilution. Il peut s'agir par exemple d'une solution tampon comportant des substances de conservation/protection des membranes des spermatozoïdes de la semence et/ou des antibiotiques.
  • Les substances de conservation/protection sont intéressantes en particulier dans la collecte de semence bovine car on sait que le plasma séminal bovin comporte certaines protéines se liant aux membranes des spermatozoïdes juste après l'éjaculation de l'animal, ce qui favorise les réactions acrosomiques (« instantanées ») et qui est par conséquent néfastes à la conservation des spermatozoïdes.
  • Par exemple, on connaît un milieu comportant, outre un tampon de type tris (pour trishydroxyméthylaminométhane ou tris(2-amino-2-(hydroxyméthyl) propane-1,3-diol) / acide citrique / fructose dont la composition est familière à l'homme du métier, des lipoprotéines à basse densité (ou LDL pour « Low density Lipoproteins » en anglais) extraites du jaune d'oeuf (D. Tainturier et al., « Production et conservation de la semence animale », RASPA Vol. 11, N°S, 2013).
  • Ces lipoprotéines, si elles constituent des molécules cryoprotectrices relativement efficaces par rapport aux solutions précédemment utilisées, présentent cependant l'inconvénient de ne pas pouvoir être produites de façon industrielle. Néanmoins, elles constituent des molécules cryoprotectrices d'intérêt.
  • L'invention concerne un système visant à améliorer les performances des systèmes connus de collecte de semence animale, notamment bovine, de manière simple, commode et économique.
  • L'invention a ainsi pour objet, sous un premier aspect, un système de collecte de semence animale, notamment bovine, comportant un contenant configuré pour être monté sur une extrémité d'un vagin artificiel et présentant un espace interne configuré pour recueillir ladite semence, caractérisé en ce que ledit contenant est en outre configuré pour comporter, avant de recueillir ladite semence, un milieu de première dilution de ladite semence et en ce que ledit système comporte en outre un dispositif de collecte configuré pour être au moins partiellement introduit dans ledit contenant et pour être fixé sur ledit vagin artificiel, ledit dispositif de collecte étant interposé entre ledit vagin artificiel et ledit contenant, ledit dispositif de collecte comportant un canal d'écoulement de ladite semence s'étendant dans ledit espace interne dudit contenant et un orifice d'évacuation de ladite semence débouchant dans ledit espace interne dudit contenant ; et ledit système est configuré pour empêcher, au moins en majeure partie, ledit milieu de première dilution de cheminer dans ledit canal d'écoulement dudit dispositif de collecte.
  • Le système de collecte selon l'invention permet de mettre directement et immédiatement en contact la semence animale avec le milieu de première dilution durant la récolte de la semence, avant de procéder aux analyses.
  • En outre, le système de collecte selon l'invention est configurée pour que cette mise en contact soit réalisée sans risque que le milieu de première dilution ne puisse remonter (au moins en majeure partie) jusqu'au vagin artificiel où il ne permettrait pas d'avoir sa fonction de première dilution de la semence.
  • Le système selon l'invention est ainsi avantageux en ce qu'il permet à son utilisateur, appelé souvent récolteur, de monter aisément le vagin artificiel ensemble avec ce système sur la verge de l'animal, dans une position où le vagin artificiel et donc le système de collecte sont retournés (tête en bas) ; et ce, sans risque que le milieu de première dilution ne puisse s'échapper du contenant.
  • Le système selon l'invention est en outre avantageux à utiliser lors de la collecte de semence bovine où l'animal peut être particulièrement brutal et infliger de nombreuses secousses au système de collecte.
  • Selon des caractéristiques préférées, simples, commodes et économiques du système selon l'invention :
    • ledit dispositif de collecte comporte une première paroi latérale présentant une première portion de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ladite extrémité dudit vagin artificiel ;
    • ledit contenant présente la forme d'un tube de forme générale cylindrique et ledit dispositif de collecte comporte une première paroi latérale présentant une deuxième portion de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ledit tube ;
    • ledit dispositif de collecte comporte une première paroi latérale présentant une troisième portion s'étendant dans ledit espace interne dudit contenant et dans laquelle est ménagé au moins un évent ;
    • ledit dispositif de collecte comporte une deuxième paroi latérale s'étendant à partir de ladite première paroi latérale et étant rétrécie par rapport à cette première paroi latérale, et présentant une première portion de forme générale cylindrique et un embout s'étendant à partir de ladite première portion, ledit embout et ladite première portion formant ledit canal d'écoulement dudit dispositif de collecte ;
    • ledit embout présente une forme générale tronconique qui se rétrécit vers une extrémité libre dudit dispositif de collecte et ledit orifice d'évacuation est ménagé à cette extrémité libre ;
    • ledit dispositif de collecte est réalisé en un polymère thermoplastique, notamment du polyoxyméthylène ; grâce à quoi ledit canal d'écoulement présente une face interne ayant une tension de surface facilitant l'écoulement de ladite semence ;
    • ledit orifice d'évacuation présente un diamètre interne compris entre environ 5 mm et environ 15 mm ;
    • ledit système comporte en outre un dispositif de dilution de ladite semence configuré pour être monté sur ledit contenant, en lieu et place dudit dispositif de collecte après retrait de ce dernier dudit contenant une fois la collecte effectuée ;
    • ledit contenant présente la forme d'un tube de forme générale cylindrique et ledit dispositif de dilution présente une forme générale d'entonnoir ayant une portion d'extrémité de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ledit tube ;
    • ledit dispositif de dilution comporte une paroi latérale ayant un bord d'extrémité opposé à ladite portion d'extrémité, et un couvercle configuré pour être fixé sur ledit bord d'extrémité de ladite paroi latérale ;
    • ledit système comporte en outre un volume prédéterminé dudit milieu de première dilution ; et/ou
    • ledit système admet une configuration de repos, avant collecte de ladite semence, dans laquelle il est configuré pour que ledit orifice d'évacuation dudit dispositif de collecte se trouve en regard et à une distance d'environ 5 mm à environ 35 mm dudit milieu de première dilution lorsque ce dernier se trouve dans ledit contenant.
  • Selon d'autres caractéristiques préférées, simples, commodes et économiques du système selon l'invention, ledit milieu de première dilution est constitué d'une solution saline tamponnée contenant des liposomes, dans laquelle :
    • les liposomes sont présents dans le milieu de première dilution à une concentration de 10 g/L à 60 g/L ;
    • les liposomes sont présents dans le milieu de première dilution à une concentration de 30 g/L à 40 g/L ;
    • les liposomes sont formés par de la phosphatidylcholine à raison de 20% à 100% en poids ;
    • les liposomes sont formés par de la phosphatidylcholine à raison de 60% à 80% en poids ; et/ou
    • le milieu de première dilution est constitué d'une solution saline tamponnée contenant des lipoprotéines à basse densité (ou LDL).
  • Les liposomes sont des vésicules (ou capsules) artificielles formées par des bicouches lipidiques concentriques, enfermant un volume aqueux. Ils sont obtenus à partir de lipides amphiphiles, et tout particulièrement de phospholipides possédant une « tête » polaire (hydrophile) généralement formée d'un résidu glycérol-3 phosphate estérifié par une molécule polaire, et de deux « queues » hydrophobes (qui sont constituées des chaînes de deux acides gras).
  • La phosphatidylcholine (ou lécithine ou 1-oleyl-2-stéaryl-phosphatidylcholine) est un phospholipide obtenu à partir de jaune d'oeuf selon un procédé reproductible. Le procédé d'obtention des liposomes est généralement basé sur l'extrusion avec un mini-extrudeur tel que celui de la société Avanti Polar Lipids ; mais tout autre procédé connu de l'homme du métier est utilisable. Les vésicules formées sont de structure sphéroïde, généralement de taille moyenne inférieure à 200 nm de diamètre.
  • Les lipoprotéines à basse densité comprennent principalement les quatre lipides suivants: la sphingomyéline, le cholestérol, la 1-palmitoyl-2-docosahexaenoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (16:0-22:6 PC ; (CAS NO.59403-54-2) et la plasmalogen 1-(1Z-octadécyl)-2-docosahexaneoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (P-PC).
  • L'invention a aussi pour objet, sous un deuxième aspect, un procédé de collecte de semence animale, notamment bovine, à l'aide d'un système de collecte de semence animale tel que décrit ci-dessus, comportant les étapes de :
    • fournir un contenant configuré pour être monté sur une extrémité d'un vagin artificiel et présentant un espace interne configuré pour recueillir ladite semence ;
    • introduire un volume déterminé d'un milieu de première dilution de ladite semence dans ledit espace interne dudit contenant ;
    • fournir un dispositif de collecte comportant un canal d'écoulement et un orifice d'évacuation de ladite semence ;
    • introduire au moins partiellement ledit dispositif de collecte dans ledit contenant de sorte que ledit canal d'écoulement s'étend dans ledit espace interne dudit contenant et ledit orifice d'évacuation débouche dans ledit espace interne dudit contenant ;
    • fournir un vagin artificiel ; et
    • fixer ledit dispositif de collecte sur ledit vagin artificiel de sorte à interposer ledit dispositif de collecte entre ledit vagin artificiel et ledit contenant ; ledit système étant configuré pour empêcher au moins en majeure partie ledit milieu de première dilution de cheminer dans ledit canal d'écoulement dudit dispositif de collecte durant la collecte de semence.
  • Selon des caractéristiques préférées, simples, commodes et économiques du procédé selon l'invention, il comporte les étapes de rincer ledit dispositif de collecte après collecte de ladite semence puis de retirer le dispositif de collecte dudit contenant ; et/ou il comporte les étapes de fournir un dispositif de dilution de ladite semence puis de monter ledit dispositif de dilution sur ledit contenant, en lieu et place dudit dispositif de collecte après retrait de ce dernier dudit contenant une fois la collecte effectuée ; et/ou il comporte les étapes d'introduire un volume déterminé d'un milieu de deuxième dilution de ladite semence dans ledit espace interne dudit contenant et dans un espace interne audit dispositif de dilution, de fixer un couvercle dudit dispositif de dilution sur un bord d'extrémité de ce dernier puis d'effectuer une deuxième dilution de ladite semence.
  • On va maintenant poursuivre l'exposé de l'invention par la description d'exemples de réalisation, donnés ci-après à titre illustratif et non limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels :
    • la figure 1 représente, schématiquement et partiellement, en section, un système de collecte de semence animale, notamment bovine, dans une configuration de repos, dans laquelle il comporte un vagin artificiel, un dispositif de collecte de semence fixé sur un cône du vagin artificiel et un contenant comportant un volume déterminé d'un milieu de première dilution et monté sur le dispositif de collecte, ce dernier étant interposé entre le cône du vagin artificiel et le contenant ;
    • la figure 2 est une vue similaire à celle de la figure 1, ici dans une configuration de montage du système sur la verge de l'animal, pour la collecte de la semence ;
    • la figure 3 représente schématiquement, partiellement en perspective et partiellement en section, le système de la figure 1, ici dans une configuration de dilution dans laquelle il comporte un dispositif de dilution monté sur le contenant, en lieu et place du dispositif de collecte, après retrait de ce dernier du contenant ;
    • la figure 4 représente schématiquement, en section, le système illustré sur la figure 3, après introduction d'un volume déterminé d'un milieu de deuxième dilution dans le contenant et dans le dispositif de dilution ;
    • la figure 5 représente, schématiquement et partiellement, en section, une variante de réalisation du système de collecte illustré sur les figures 1 à 4 ; et
    • les figures 6 à 8 illustrent les exemples en indiquant respectivement les pourcentages de spermatozoïdes mobiles (MS), les pourcentages de spermatozoïdes progressifs (PS) et les pourcentages de spermatozoïdes viables avec des acrosomes intacts (+) (V/A (+)), dans des cas d'utilisation d'un milieu de première dilution, cryoprotecteur, soit sans molécule cryoprotectrice « BI » (« Blanc »), soit avec molécules cryoprotectrices LDL « Comp » (« Comparable C1 »), soit avec molécules cryoprotectrices liposomes à diverses concentrations (C1, C2, C3 et C4).
  • La figure 1 illustre un système de collecte de semence animale 1, ici dans une configuration de repos. Il s'agit ici d'un système 1 de collecte de semence bovine.
  • Ce système 1 comporte un contenant 3 configuré pour recueillir la semence bovine, ainsi qu'un dispositif de collecte 4 fixé à la fois au contenant 3 et à un cône d'un vagin artificiel 2 configuré pour être monté sur le pénis de l'animal (non représenté) pour le stimuler.
  • Le cône du vagin artificiel 2, qui est ici seulement partiellement représenté, présente ici une forme sensiblement tronconique dont la portion la plus resserrée s'étend vers une extrémité 9 de ce cône de vagin artificiel 2.
  • Le contenant 3 est ici un tube de forme générale cylindrique, ayant une paroi latérale 10 s'étendant entre une extrémité 11 fermée par une paroi de fond 14 et une extrémité ouverte 12, opposée à l'extrémité fermée 11.
  • La paroi latérale 10 du tube 3 présente une face interne 16 définissant un espace interne 15 au tube 3, cet espace interne 15 étant prévu pour recueillir, avant collecte, un milieu prédéterminé de première dilution 5, puis durant la collecte, pour recueillir la semence animale.
  • La paroi de fond 14 ménagée dans l'espace interne 15 présente une forme en V, à la manière d'un tube de centrifugation et le tube 3 comporte en outre un évidement 13 ménagé entre l'extrémité fermée 11 et la paroi de fond 14.
  • Le tube 3 est ici réalisé en matière plastique moulée d'une seule pièce et son espace interne 15 présente ici un volume d'environ 30 mL, et plus généralement un volume d'environ 20 mL à 200 mL.
  • Le dispositif de collecte 4 s'étend sensiblement longitudinalement entre une première extrémité 20 et une deuxième extrémité 21 opposée à la première extrémité 20.
  • Le dispositif de collecte 4 comporte une première paroi latérale 71 de forme globalement sensiblement cylindrique, et une deuxième paroi latérale 72 s'étendant dans le prolongement de la première paroi latérale 71 et étant également de forme globalement sensiblement cylindrique.
  • La première paroi latérale 71 présente un évidement 29 formant un espace intérieur et la deuxième paroi latérale 72 forme un canal d'écoulement 23 de la semence, lequel canal 23 est rétréci par rapport à l'espace intérieur de la première paroi latérale 71.
  • L'évidement 29 est en communication fluidique avec le canal d'écoulement 23.
  • La première paroi latérale 71 présente, à la première extrémité 20, une première portion 22 de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec l'extrémité 9 du cône du vagin artificiel 2.
  • La première paroi latérale 71 présente une deuxième portion 54 de forme générale cylindrique, s'étendant à partir de la première portion 22, et configurée pour être emmanchée avec a paroi latérale 10 du tube3.
  • La deuxième portion 54 est reliée à la première portion 22 par un épaulement 28 ménagé dans la première paroi latérale 71.
  • L'épaulement 28 est configuré pour que la deuxième portion 54 présente un diamètre externe plus grand que le diamètre externe de la première portion 22.
  • La première paroi latérale 71 présente une troisième portion 55 s'étendant dans ledit espace interne 15 du contenant 3, à partir de la deuxième portion 54.
  • Cette troisième portion 55 a une face externe globalement tronconique et le dispositif de collecte 4 est pourvu d'un évent 17 ménagé dans cette troisième portion 55.
  • L'évent 17 comporte une première chambre ayant un premier diamètre interne et débouchant hors de la première paroi latérale 71 du dispositif de collecte 4, ainsi qu'une deuxième chambre ayant un deuxième diamètre interne, bien inférieur au premier diamètre interne de la première chambre, et débouchant dans l'évidement 29 ménagé dans la première paroi latérale 71 du dispositif de collecte 4.
  • L'évent 17 est ainsi configuré pour créer une communication fluidique pour l'air, laquelle communication est réversible mais facilitée de la deuxième chambre à la première chambre du fait des diamètres internes respectifs (en d'autres termes facilitée de l'évidement 29 du dispositif de collecte 4 vers l'espace interne 15 du tube 3).
  • L'évent 17 est également configuré pour interdire une communication fluidique pour la semence animale, en particulier de la première chambre vers la deuxième chambre (en d'autres termes interdite de l'espace interne 15 du tube 3 vers l'évidement 29 du dispositif de collecte 4).
  • La deuxième paroi latérale 72 présente une première portion 24 de forme générale cylindrique, reliée à la troisième portion 55 de la première paroi latérale 71 par le biais d'une portion intermédiaire 27, ainsi qu'un embout 25 s'étendant à partir de la première portion 24 jusqu'à la deuxième extrémité 21.
  • La deuxième portion 24 est ainsi interposée entre la portion intermédiaire 27 et l'embout 25.
  • L'embout 25 est tronconique avec sa portion la plus resserrée qui se trouve au niveau de l'extrémité 21, où un orifice d'évacuation 26 de la semence est en outre ménagé.
  • La deuxième portion 24 et l'embout tronconique forment le canal d'écoulement 23 de la semence animale.
  • La portion intermédiaire 27 est configurée pour former un épaulement interne dans l'évidement 29.
  • Le dispositif de collecte 4 est réalisé en matière plastique moulée d'une seule pièce, et en particulier ici en un polymère thermoplastique, notamment du polyacétal ou polyoxyméthylène (POM).
  • Plus généralement, le dispositif de collecte 4 est configuré de sorte que le canal d'écoulement 23 présente une face interne 30 ayant une tension de surface facilitant l'écoulement de la semence animale.
  • La première portion 24 présente un diamètre externe D1 ici environ égal à 11 mm et un diamètre interne D2 ici environ égal 8,6 mm.
  • L'embout tronconique 25 présente quant à lui un diamètre interne minimum D3 ici environ égal à 5 mm. Ce diamètre interne minimum D3 est représentatif du plus petit passage pour la semence animale dans le canal d'écoulement 23, au niveau de l'orifice d'évacuation 26 de cette semence (figure 2).
  • Plus généralement, le diamètre externe D1 est compris entre environ 5 mm et environ 17 mm, le diamètre interne D2 est compris entre environ 8 mm et environ 20 mm et le diamètre interne minimum D3 est compris entre environ 5 mm et environ 15 mm.
  • La deuxième portion cylindrique 54 de la première paroi latérale 71 du dispositif de collecte 4 est partiellement emmanchée, à force, dans le tube 3 de sorte que le canal d'écoulement 23 de ce dispositif de collecte 4 s'étend dans l'espace interne 15 du tube 3 en direction de la paroi de fond 14 de ce dernier.
  • Plus précisément, cette deuxième portion cylindrique 54 présente une face externe 31 qui vient en contact avec la face interne 16 de la paroi latérale 10 du tube 3.
  • Le dispositif de collecte 4 est emmanché dans le tube 3 de telle sorte que l'embout tronconique 25 de ce dispositif de collecte 4 et plus précisément son orifice d'évacuation 26, se trouve en regard du milieu de première dilution 5 située au fond du tube 3, lorsque le système 1 est dans sa configuration de repos (figure 1).
  • Le tube 3 et le dispositif de collecte 4 sont configurés pour que l'orifice d'évacuation 26 et le niveau haut du milieu de première dilution 5 soient séparés d'une distance notée H1, ici environ égale à 4,7 mm, lorsque l'ensemble formé du dispositif de collecte 4 et du tube 3 se trouve en position verticale. Plus généralement, la distance H1 est comprise entre environ 2 mm et environ 35 mm.
  • Le cône du vagin artificiel 2 présente une portion tronconique 58 et une portion cylindrique 57 s'étendant à partir de la portion tronconique 58, jusqu'à l'extrémité 9 du cône du vagin artificiel 2.
  • A cette extrémité 9, la portion cylindrique 57 est pourvue d'un bord libre 59 en forme de bourrelet.
  • A cette extrémité 9, la portion cylindrique 57 est partiellement emmanchée, à force, sur la première portion 22 de la première paroi latérale 71 du dispositif de collecte 4, au niveau de sa première extrémité 22, le bord libre 59 en bourrelet venant en appui contre l'épaulement 28 formé sur cette première paroi latérale 71.
  • Ainsi, le système de collecte 1, qui est fixé par l'intermédiaire de son dispositif de collecte 4 au cône du vagin artificiel 2, se trouve dans le prolongement de ce dernier et présente une inclinaison générale similaire à celle du vagin artificiel.
  • Lorsque le récolteur introduit la verge de l'animal dans le vagin artificiel 2, le système 1 est disposé avec une inclinaison par exemple d'environ 10 degrés à environ 30 degrés au-dessus d'un plan horizontal (tête en bas ou en d'autres termes orifice d'évacuation 26 du dispositif de collecte 4 en haut). Cette position au moins sensiblement retournée du système 1 peut être maintenu jusqu'à l'éjaculation de l'animal.
  • L'agencement du dispositif de collecte 4 et du tube 3 contenant le milieu de première dilution 5 permet donc avantageusement, avant la collecte lors du montage du vagin artificiel 2 et du système 1 sur la verge de l'animal, où le système peut être retourné (tête en bas), et aussi durant la collecte, de retenir le milieu de première dilution 5 dans le tube 3 (figure 2).
  • Plus précisément, le dispositif de collecte 4 et le tube 3 contenant le milieu de première dilution 5, sont configurés pour empêcher, au moins en majeure partie, ce milieu de première dilution 5 de cheminer dans le canal d'écoulement 23 du dispositif de collecte 4 lors du montage et durant la collecte de la semence animale.
  • Même dans le cas d'une collecte de semence bovine, où l'on sait que l'animal peut être particulièrement brutal et infliger de nombreuses secousses au vagin artificiel 2 et par conséquent au système de collecte 1, la configuration du tube 3 et du dispositif de collecte 4, en particulier la première portion 24 et l'embout tronconique 25 de sa deuxième paroi latérale 72, empêche au moins en majeure partie le milieu de première dilution 5 qui se trouvent dans l'espace interne 15 du tube 3, de s'introduire dans le canal d'écoulement 23 jusqu'au cône du vagin artificiel 2.
  • Ensuite, le système 1 change de position jusqu'à se retrouver avec une inclinaison d'environ 10 degrés à environ 30 degrés au-dessous du plan horizontal à la fin de la collecte.
  • Lors de la descente de l'animal d'un boute-en-train (aussi appelé mannequin), la semence animale s'écoule dans le canal d'écoulement 23 du dispositif de collecte 4 par gravité jusqu'à sortir de ce canal 23 par l'orifice d'évacuation 26 pour entrer immédiatement en contact avec le milieu de première dilution 5.
  • Cet agencement du dispositif de collecte 4 et du tube 3 contenant le milieu de première dilution 5 permet donc aussi, de manière avantageuse, juste après la collecte de la semence qui s'évacue par gravité du canal d'écoulement 23 par l'orifice d'évacuation 26, de mettre cette semence immédiatement en contact avec le milieu de première dilution 5.
  • On va maintenant décrire, en référence aux figures 3 et 4, une autre configuration du système de collecte 1. Il s'agit sur les figures 3 et 4 d'une configuration de deuxième dilution de la semence animale collectée, du système de collecte 1.
  • Dans cette configuration de deuxième dilution, le dispositif de collecte 4 est retiré du tube 3.
  • Le système de collecte 1 comporte alors, en lieu et place du dispositif de collecte 4, un dispositif de dilution 6 de la semence animale présentant une forme générale d'entonnoir ayant une première extrémité ouverte 45 tournée vers le fond du tube 3 et une deuxième extrémité ouverte 44 opposée à la première extrémité ouverte 45.
  • Ce dispositif de dilution 6 est configuré pour être monté sur le contenant 3 après retrait de ce dernier du contenant 3 une fois la collecte de semence animale effectuée.
  • On notera que dans le tube 3 est alors présent un mélange dit de pré-dilution de semence animale, noté 70, composé de la semence récoltée et du milieu de pré-dilution 5. Ici, ce mélange de pré-dilution de semence 70 présente un volume compris entre environ 5 mL et environ 15 mL pour un volume initial du milieu de première dilution 5 compris ici entre environ 2,5 mL et environ 6 mL.
  • Plus généralement, le volume initial du milieu de première dilution 5 peut être compris entre environ 2 mL et environ 60 mL de sorte que le volume du mélange de pré-dilution de semence 70 peut être compris entre environ 4 mL et environ 120 mL.
  • On notera que le volume initial du milieu de première dilution 5, dit aussi milieu de prédilution, est de préférence sensiblement similaire au volume de semence collectée ou à collecter. Par exemple, selon des volumes moyens observés, pour des taureaux adultes, le volume d'un tel milieu peut être d'environ 6 mL alors que pour les jeunes taureaux, il ne peut être que d'environ 3 mL. Ces valeurs de volumes sont aussi fonction notamment de l'âge des animaux et du rythme de récolte.
  • Bien entendu, ces volumes sont fonction de l'animal auquel on souhaite collecter la semence et éventuellement du tube 3, du dispositif de collecte 4 fixé sur le tube 3 et du cône du vagin artificiel 2 fixé sur le dispositif de collecte 4. Ainsi, ces volumes peuvent par exemple varier de quelques millilitres pour l'espèce bovine en fonction des jeunes taureaux génomiques ou des taureaux de service. Ces variations peuvent être plus importantes pour d'autres espèces.
  • Le dispositif de dilution 6 en forme d'entonnoir comporte une paroi latérale définissant un espace interne 44 au dispositif de dilution 6 et présentant une première portion 40 cylindrique au niveau de sa deuxième extrémité ouverte 44, une deuxième portion 41 sensiblement tronconique et qui s'étend à partir de la première portion cylindrique 40 en direction de la première extrémité ouverte 45, une troisième portion 42 également sensiblement tronconique et qui s'étend à partir de la deuxième portion tronconique 41 en direction de la première extrémité ouverte 45, ainsi qu'une portion d'extrémité 43 sensiblement cylindrique et qui s'étend à partir de la troisième portion tronconique 42 jusqu'à la première extrémité ouverte 45.
  • L'agencement des différentes portions du dispositif de dilution 6 permet d'optimiser son volume par rapport à sa hauteur, ainsi que l'écoulement des fluides qu'il est configuré pour recevoir.
  • La portion d'extrémité 43 est configurée pour être emmanchée de manière étanche dans la paroi latérale 10 du tube 3 au niveau de son extrémité ouverte 12.
  • Plus précisément, cette portion d'extrémité 43 présente une face externe 47 qui est configurée pour venir en contact avec la face interne 16 de la paroi latérale 10 du tube 3.
  • La première portion cylindrique 40 du dispositif de dilution 6 présente ici un diamètre intérieur bien supérieur à celui de la portion d'extrémité 43 qui est située à l'opposé de la première portion cylindrique 40.
  • La paroi latérale du dispositif de dilution 6 comporte en outre, au niveau de sa deuxième extrémité ouverte 44 et donc à l'opposé de sa portion d'extrémité 43, un bord d'extrémité 48 relié à la première portion cylindrique 40.
  • Ce bord d'extrémité 48 est configuré pour former un épaulement saillant de la paroi latérale du dispositif de dilution 6.
  • Le dispositif de dilution 6 comporte en outre un couvercle 49 configuré pour être fixé sur le bord d'extrémité 48 de la paroi latérale.
  • Le couvercle 49 présente une forme circulaire de sorte à obturer l'ouverture ménagée dans le dispositif de dilution 6 à sa deuxième extrémité ouverte 44.
  • Le couvercle 49 présente un renfoncement 52 au fond duquel est formée une paroi étanche 53 qui est disposée dans un espace interne 46 du dispositif de dilution 6 lorsque le couvercle 49 est fixé sur ce dernier, pour assurer l'étanchéité entre le couvercle 49 et ce dispositif de dilution 6.
  • Le couvercle 49 comporte en outre un rebord circulaire 50 configuré pour venir s'encliqueter sur le bord d'extrémité 48 de la paroi latérale du dispositif de dilution 6.
  • Le rebord circulaire 50 du couvercle 49 est configuré pour laisser un espace entre ce dernier et une face externe de la paroi latérale du dispositif de dilution 6, sous le bord d'extrémité 48, pour permettre le retrait du couvercle 49 de la paroi latérale.
  • La paroi latérale et le couvercle du dispositif de dilution 6 sont ici réalisés en matière plastique.
  • On notera que le système de collecte 1 formé par le tube 3 et le dispositif de dilution 6 emmanché sur ce tube 3, comme illustré sur les figures 3 et 4, présente un volume ici égal à environ 300 mL. Plus généralement le système de collecte 1 présente un volume compris entre environ 100 mL et environ 1000 mL.
  • Sur la figure 3, le système de collecte 1 est montré avant la deuxième dilution de la semence animale et plus précisément du mélange 70 tandis que sur la figure 4, un mélange dilué de la semence animale 80 rempli le volume du système de collecte 1 illustré.
  • On notera qu'une fois la semence animale correctement diluée, il est possible de prélever directement dans le système de collecte 1 illustré sur la figure 4 une pluralité de volumes prédéterminés du mélange dilué 80, pour le remplissage de paillettes (non illustrées), en vue de la conservation de ce mélange dilué 80, par exemple par cryogénisation des paillettes.
  • On va maintenant décrire le procédé de collecte de semence animale, notamment bovine, à l'aide du système de collecte 1 tel que décrit ci-dessus.
  • Le procédé de collecte de semence animale comporte l'étape de fournir le tube 3 tel que décrit ci-dessus puis d'introduire dans l'espace interne 15 de ce dernier un volume déterminé du milieu de première dilution 5.
  • Par exemple, ce volume déterminé du milieu de première dilution 5 peut être situé dans l'intervalle [2,5 mL ; 6 mL].
  • On notera que ce milieu de première dilution 5 peut comporter une solution tampon composée par exemple de substances de conservation/protection des membranes des spermatozoïdes de la semence animale et/ou d'antibiotiques.
  • Le procédé de collecte de semence animale comporte en outre l'étape de fournir un dispositif de collecte 4 tel que décrit ci-dessus et d'introduire ce dernier au moins partiellement dans le tube 3 de sorte que le canal d'écoulement 23 s'étend dans l'espace interne 15 du tube 3 et l'orifice d'évacuation 26 débouche dans cet espace interne 15.
  • Ici, le dispositif de collecte 4 est emmanché dans le tube 3.
  • Une fois le dispositif de collecte 4 emmanché dans le tube 3, on notera, comme indiqué précédemment, que l'orifice d'évacuation 26 se trouve en regard du milieu de première dilution 5 et à une distance déterminée.
  • Le procédé de collecte de semence animale comporte en outre l'étape de fournir un vagin artificiel 2 tel que décrit ci-dessus et de fixer le dispositif de collecte 4 sur le cône du vagin artificiel 2 de sorte à interposer ce dispositif de collecte 4 entre le cône du vagin artificiel 2 et le tube 3.
  • On notera, comme indiqué précédemment, que le système de collecte 1 est alors dans le prolongement du vagin artificiel 2 et est par conséquent incliné par rapport à un plan horizontal (au-dessus ou en-dessous, voir ci-dessus).
  • En outre, le système de collecte 1 et en particulier le dispositif de collecte 4 et le tube 3, sont configurés pour empêcher au moins en majeur partie le milieu de première dilution 5 de cheminer dans le canal d'écoulement du dispositif de collecte 4 durant la collecte de la semence animale.
  • Le procédé de collecte de semence animale comporte en outre, une fois l'éjaculation de l'animal terminée et la semence écoulée dans le tube 3 et donc au contact du milieu de pré-dilution 5, l'étape de retirer le système de collecte 1 du cône du vagin artificiel 2, en enlevant la portion cylindrique 57 du cône de la première portion 22 de la première paroi latérale 71 du dispositif de collecte 4.
  • Le procédé de collecte comporte ensuite l'étape de rincer le dispositif de collecte 4 après collecte de la semence, par l'intermédiaire par exemple d'un milieu de deuxième dilution, puis de retirer ce dispositif de collecte 4 du tube 3.
  • Le procédé de collecte de semence animale comporte également les étapes de fournir un dispositif de dilution 6 de la semence tel que décrit ci-dessus puis de monter ce dispositif de dilution 6 sur le tube 3, ici par un emmanchement à force, en lieu et place du dispositif de collecte 4 après retrait de ce dernier du tube 3 une fois la collecte effectuée.
  • Le procédé de collecte de semence comporte les étapes d'introduire un volume déterminé d'un milieu de deuxième dilution de la semence dans l'espace interne 15 du tube 3 et dans l'espace interne 46 du dispositif de dilution 6, de fixer le couvercle 49 sur le bord d'extrémité 48 du dispositif de dilution 6 puis d'effectuer une deuxième dilution de la semence animale et plus précisément une dilution du mélange pré-dilué de semence 70 afin d'obtenir le mélange dilué de cette semence 80.
  • Le procédé peut en outre comporter les étapes de prélever une pluralité de volumes déterminés du milieu dilué 80, de remplir des paillettes chacune d'un volume déterminé de ce milieu dilué 80 et de cryogéniser ces paillettes remplies en vue de conserver ces volumes de mélange 80.
  • On notera que la première dilution immédiate de la semence avec le milieu de première dilution 5 directement dans le tube 3, le rinçage du dispositif de collecte 4 monté sur le tube 3 et la deuxième dilution grâce au dispositif de dilution 6 monté sur le tube 3 en lieu et place du dispositif de collecte 4 après son retrait du tube 3 lorsque la collecte de semence est effectuée, permet à la fois de simplifier le procédé de collecte de semence animale en minimisant le nombre d'étapes et de limiter considérablement les pertes de volume de semence animale, de mélange pré-dilué de cette semence et de mélange dilué de cette semence ; en comparaison avec les procédés de collecte de semence de l'art antérieur où une pluralité d'étapes de transvasement induisant des pertes de volume sont nécessaires.
  • Le système de collecte 1, tout en étant particulièrement simple, commode et économique, rend ainsi le procédé de collecte lui-même particulièrement simple, commode et économique et permet le remplissage d'un nombre plus élevé de paillettes en vue de la conservation de la semence animale collectée.
  • On va maintenant décrire une variante de réalisation du système de collecte, en référence à la figure 5.
  • D'une manière générale, on a employé pour les éléments similaires, les mêmes références additionnées du nombre 100.
  • Le système de collecte 101 est ici illustré dans la même configuration que le système de collecte 1 de la figure 2.
  • Le tube 103 présente ici une contenance supérieure au tube 3 illustré sur les figures 1 à 4. Ce tube 103 présente ici par exemple un volume environ égale à 50 mL.
  • Ce tube 103 présente en outre ici un volume déterminé d'un milieu de première dilution 105, compris par exemple entre environ 3 mL et environ 15 mL.
  • Ce milieu de première dilution 105 se trouve au fond du tube, contre une paroi en forme de V, à l'extrémité fermée 111 du tube 103.
  • Le tube 103 comporte en outre un couvercle 163 percé d'un orifice 165, ici central, et le couvercle 163 présente un rabat circulaire 164 qui vient s'appliquer sur une face externe 166 de la paroi latérale du tube 103.
  • Le dispositif de collecte 104 du système de collecte 101 présente quant à lui une forme générale cylindrique, similaire à celle du tube 103, ayant une paroi latérale 160 s'étendant entre une première extrémité 120 et une deuxième extrémité 121 opposée à la première extrémité 120.
  • Le dispositif de collecte 104 présente ici un volume d'environ 15 mL.
  • Le dispositif de collecte 104 est en outre pourvu d'un couvercle 161 monté au niveau de sa première extrémité 120 et présentant un rabat circulaire 162 prévu pour venir s'appliquer sur une face externe 131 de la paroi latérale 160.
  • Le dispositif de collecte 104 est configuré pour être introduit dans l'espace interne du tube 103, du côté de la deuxième extrémité 121 du dispositif de collecte 104, au travers de l'orifice 165 ménagé dans le couvercle 163 du tube 103.
  • On notera que l'ouverture 165 présente ici un diamètre environ égal à 15 mm et le dispositif de collecte 104 est introduit dans le tube 103 d'une longueur déterminée ici notée H2, comprise entre environ 3 mm et environ 10 mm.
  • Le dispositif de collecte 104 présente en outre une ouverture d'évacuation 126 ménagée dans une paroi de fond sensiblement tronconique de ce dispositif de collecte 104.
  • L'orifice d'évacuation 126 présente ici un diamètre compris entre environ 3 mm et 10 mm.
  • Bien entendu, ce dispositif de collecte 104 est configuré pour être fixé au cône d'un vagin artificiel.
  • Pour cela, le couvercle 161 peut être retiré du dispositif de collecte 104 ou le couvercle 161 peut comporter un orifice de passage pour le passage de l'extrémité du cône du vagin artificiel et/ou des organes de montage sur ce dernier.
  • On va maintenant décrire des exemples de milieux de première dilution 5, cryoconservateurs, dont les comportements en présence de semence bovine sont illustrés par les figures 6, 7 et 8. Un tel milieu de dilution est de volume compris entre environ 2,5 mL et environ 6 mL.
  • La solution saline tamponnée (Blanc ou « BI ») comprenait du tris(2-amino-2-(hydroxyméthyl) propane-1,3-diol (173,0 mMol), de l'acide citrique mono-hydraté (70,0 mMol), du fructose (56,0 mMol) et du glycérol (6,4% vol/vol). Le pH était ajusté à 6,2 et l'osmolarité était d'environ 1300,0 mOsm.
  • Le milieu cryoprotecteur de lipoprotéines à basse densité (LDL) a été extrait du jaune d'oeuf selon le protocole décrit par Moussa et al. (Theriogenology 57(6) : 1695-1706). Après extraction, la quantité obtenue de cet échantillon LDL était diluée dans la solution saline tamponnée (100 mL), ce qui a donné la solution « comparable C1 » : « Comp ». Cette solution, qui est selon l'invention, a été comparée aux solutions selon l'invention comportant des liposomes. Les protéines, dosées par méthode BCA (à l'aide d'un micro-kit Pierce de la société Thermoscientific), étaient présentes dans l'échantillon LDL en quantité de 8 g/L.
  • Les liposomes ont été produits à partir d'un extrait de phospholipides d'oeuf, dans la solution saline tamponnée, par extrusion à l'aide d'un mini-extrudeur de la société Avanti Polar Lipids. Ils étaient composés de 73% de phosphatidylcholine, de 11% de phosphadiéthanolamine et de composés divers en moindre quantité (lipides neutres, triglycérides et sphingomyéline). Les extraits ont été hydratés dans la solution saline tamponnée pendant une nuit aux concentrations en lipides respectivement de 10 g/L pour la solution C1 ; de 20 g/L pour la solution C2 ; de 40 g/L pour la solution C3 ; et de 60 g/L pour la solution C4. Les solutions ont ensuite été traitées par ultrasons pendant 15 minutes (par appareil Elmasonic S 30 H de la société Elma, sous une puissance de 275 W). Au final, les dispersions ont été extrudées (20 passages par membrane de 100 nm).
  • Une caractérisation de la semence issue de bovins Prim'Hosltein a été réalisée par un dosage préalable des protéines. La semence a été immédiatement centrifugée deux fois à 10 000 x g pour récupérer le plasma séminal dans le surnageant. La quantité de protéines dans cet échantillon de semence bovine était de 88,5 mg/mL. Elle a été dosée par méthode BCA (à l'aide d'un micro-kit Pierce de la société Thermoscientific).
  • Les résultats de la mise en contact immédiate entre chacun des milieux cryoprotecteurs et la semence bovine, à dilution de moitié (soit en volume 50% - 50%) sont illustrés par les figures 6, 7 et 8. Chaque test a été reproduit sur 10 éjaculats (4 tests ; 4 taureaux ; 10 éjaculats de volume 4 à 6 ml), ce qui a permis d'indiquer la précision de mesure sur les figures.
  • Des analyses de mobilité des spermatozoïdes ont été réalisées sur un système dit CASA pour « computer assisted semen analysis » en terminologie anglo-saxonne, par exemple avec un appareil connu sous le nom IVOS conçu et développé par la société Hamitlon Thorne. Des analyses de viabilité dite avec acrosome intacte des spermatozoïdes ont été réalisées par cytométrie, par exemple avec un appareil connu sous le nom EasyCyte conçu et développée par la société demanderesse et la société Millipore.
  • La figure 6 est un diagramme schématique illustrant le pourcentage des spermatozoïdes mobiles (MS) obtenus après mise en contact de chacune des solutions avec la semence (le taux de 100% correspondant à la population totale de spermatozoïdes).
  • La figure 7 est un diagramme schématique illustrant le pourcentage des spermatozoïdes progressifs (PS) obtenus après mise en contact de chacune des solutions avec la semence.
  • La figure 8 est un diagramme schématique illustrant le pourcentage des spermatozoïdes viables avec des acrosomes intacts (V/A (+)) obtenus après mise en contact de chacune des solutions avec la semence.
  • On constate que les résultats sont meilleurs dans le cas d'un milieu de première dilution, cryoprotecteur, contenant des molécules cryoprotectrices LDL ou liposomes (« Comp », C1, C2, C3 ou C4) que dans un milieu ne comprenant pas de telles molécules cryoprotectrices (« BI »). En outre, les résultats obtenus en mobilité et viabilité des spermatozoïdes sont sensiblement meilleurs au-dessus d'une certaine concentration en liposomes avec les solutions C2, C3 et C4 comprenant des liposomes qu'avec la solution C1 ou la solution comparable C1.
  • De telles solutions de liposomes sont donc particulièrement préférées selon l'invention, mais tout milieu cryoprotecteur, en particulier comprenant des LDL, est utilisable dans le système selon l'invention.
  • Dans une variante non illustrée du dispositif de collecte, ce dernier comporte un canal d'écoulement formé par exemple par une portion cylindrique dans laquelle sont ménagés des murets pour former un système à chicanes dans ce canal d'écoulement ; empêchant ainsi au milieu de première dilution de cheminer dans ce canal d'écoulement.
  • Dans une autre variante non illustrée du dispositif de collecte, ce dernier présente un canal d'écoulement à l'extrémité duquel est formée une valve permettant le passage de la semence animale jusqu'à l'espace interne du contenant et empêchant au moins en majeure partie le cheminement du milieu de première dilution dans le canal d'écoulement du dispositif de collecte.
  • Dans une variante non illustrée du système de collecte, le contenant présente une forme rectangulaire et le dispositif de collecte est formé par une plaque au moins partiellement introduite dans le contenant et s'étendant au travers de ce dernier ; avec cette plaque qui est pourvue d'au moins un orifice pour l'évacuation de la semence dans l'espace interne du contenant lorsque cette semence chemine sur la plaque.
  • Dans des variantes non illustrées :
    • le contenant n'a pas la forme d'un tube à fond en V comme illustré sur les figures 1 à 5 mais présente plutôt une forme de tube à fond plat ou une forme de bol ;
    • le contenant n'est pas en matière plastique mais est plutôt réalisé en verre ;
    • le dispositif de collecte n'est pas emmanché dans le contenant mais plutôt autour du contenant ou le dispositif de collecte et le contenant présentent chacun des organes de coopération permettant leur fixation l'un à l'autre ;
    • le dispositif de collecte ne présente pas la forme illustrée sur les figures 1 et 2 mais plutôt une forme générale tronconique entre ses deux extrémités ;
    • le dispositif de collecte n'est pas réalisé en polyoxyméthylène mais plus généralement en un polymère thermoplastique et encore plus généralement en matière plastique ;
    • le dispositif de collecte ne comporte pas de portion autour de laquelle le cône du vagin artificiel peut s'emmancher, mais plutôt des organes de fixation externes prévus pour se fixer autour du vagin artificiel, ou un évidement dans lequel le cône du vagin artificiel vient s'emmancher ;
    • le tube et le dispositif de collecte ne présentent pas les volumes mentionnés ci-dessus mais présentent chacun des volumes supérieurs ou inférieurs ;
    • le dispositif de dilution ne présente pas une forme d'entonnoir mais plutôt celle d'un vase à fond plat ;
    • le couvercle du dispositif de dilution est articulé à sa paroi latérale plutôt qu'être amovible ;
    • le dispositif de dilution n'est pas emmanché dans le tube mais plutôt autour du tube ou ce dispositif de dilution et le tube présentent chacun des organes complémentaires de fixation pour fixer le dispositif de dilution sur le tube ;
    • le dispositif de dilution et le tube sont configurés pour présenter des contenances différentes de celles mentionnées ci-dessus, par exemple des contenances supérieures ou inférieures ; et/ou
    • le système de collecte et plus précisément le contenant peut initialement comporter un volume déterminé du milieu de première dilution différent des volumes mentionnés ci-dessus, par exemple un volume supérieur ou inférieur.
  • On rappelle plus généralement que l'invention ne se limite pas aux exemples décrits et représentés.

Claims (23)

  1. Système de collecte de semence animale, notamment bovine, comportant un contenant (3) configuré pour être monté sur une extrémité (9) d'un vagin artificiel (2) et présentant un espace interne (15) configuré pour recueillir ladite semence, caractérisé en ce que ledit contenant (3) est en outre configuré pour comporter, avant de recueillir ladite semence, un milieu de première dilution (5) de ladite semence et en ce que ledit système (1) comporte en outre un dispositif de collecte (4) configuré pour être au moins partiellement introduit dans ledit contenant (3) et pour être fixé sur ledit vagin artificiel (2), ledit dispositif de collecte (4) étant interposé entre ledit vagin artificiel (2) et ledit contenant (3), ledit dispositif de collecte (4) comportant un canal d'écoulement (23) de ladite semence s'étendant dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) et un orifice d'évacuation (26) de ladite semence débouchant dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) ; et ledit système (1) est configuré pour empêcher, au moins en majeure partie, ledit milieu de première dilution (5) de cheminer dans ledit canal d'écoulement (23) dudit dispositif de collecte (4).
  2. Système selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit dispositif de collecte (4) comporte une première paroi latérale (70) présentant une première portion (22) de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ladite extrémité (9) dudit vagin artificiel (2).
  3. Système selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que ledit contenant présente la forme d'un tube (3) de forme générale cylindrique et ledit dispositif de collecte (4) comporte une première paroi latérale (70) présentant une deuxième portion (54) de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ledit tube (3).
  4. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que ledit dispositif de collecte (4) comporte une première paroi latérale (71) présentant une troisième portion (55) s'étendant dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) et dans laquelle est ménagé au moins un évent (17).
  5. Système selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, caractérisé en ce que ledit dispositif de collecte (4) comporte une deuxième paroi latérale (72) s'étendant à partir de ladite première paroi latérale (71) et étant rétrécie par rapport à cette première paroi latérale (71), et présentant une première portion (24) de forme générale cylindrique et un embout (25) s'étendant à partir de ladite première portion (24), ledit embout (25) et ladite première portion (24) formant ledit canal d'écoulement (23) dudit dispositif de collecte (4).
  6. Système selon la revendication 5, caractérisé en ce que ledit embout (25) présente une forme générale tronconique qui se rétrécit vers une extrémité libre (21) dudit dispositif de collecte (4) et ledit orifice d'évacuation (26) est ménagé à cette extrémité libre (21).
  7. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que ledit dispositif de collecte (4) est réalisé en un polymère thermoplastique, notamment du polyoxyméthylène ; grâce à quoi ledit canal d'écoulement (23) présente une face interne (30) ayant une tension de surface facilitant l'écoulement de ladite semence.
  8. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que ledit orifice d'évacuation (26) présente un diamètre interne compris entre environ 5 mm et environ 15 mm.
  9. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un dispositif de dilution (6) de ladite semence configuré pour être monté sur ledit contenant (3), en lieu et place dudit dispositif de collecte (4) après retrait de ce dernier dudit contenant (3) une fois la collecte effectuée.
  10. Système selon la revendication 9, caractérisé en ce que ledit contenant présente la forme d'un tube (3) de forme générale cylindrique et ledit dispositif de dilution (6) présente une forme générale d'entonnoir ayant une portion d'extrémité (45) de forme générale cylindrique et configurée pour être emmanchée avec ledit tube (3).
  11. Système selon l'une des revendications 9 et 10, caractérisé en ce que ledit dispositif de dilution (6) comporte une paroi latérale ayant un bord d'extrémité (48) opposé à ladite portion d'extrémité (43), et un couvercle (49) configuré pour être fixé sur ledit bord d'extrémité (48) de ladite paroi latérale.
  12. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un volume prédéterminé dudit milieu de première dilution (5).
  13. Système selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il admet une configuration de repos, avant collecte de ladite semence, dans laquelle il est configuré pour que ledit orifice d'évacuation (26) dudit dispositif de collecte (4) se trouve en regard et à une distance d'environ 5 mm à environ 35 mm dudit milieu de première dilution (5) lorsque ce dernier se trouve dans ledit contenant (3).
  14. Système selon l'une des revendications 12 et 13, caractérisé en ce que ledit milieu de première dilution (5) est constitué d'une solution saline tamponnée contenant des liposomes.
  15. Système selon la revendication 14, caractérisé en ce que les liposomes sont présents dans le milieu de première dilution (5) à une concentration de 10 g/L à 60 g/L.
  16. Système selon l'une des revendications 14 ou 15, caractérisé en ce que les liposomes sont présents dans le milieu de première dilution (5) à une concentration de 30 g/L à 40 g/L.
  17. Système selon l'une des revendications 14 à 16, caractérisé en ce que les liposomes comprennent de la phosphatidylcholine à raison de 20% à 100% en poids.
  18. Système selon l'une des revendications 14 à 17, caractérisé en ce que les liposomes comprennent de la phosphatidylcholine à raison de 60% à 80% en poids.
  19. Système selon l'une des revendications 12 et 13, caractérisé en ce que ledit milieu de première dilution (5) est constitué d'une solution saline tamponnée contenant des lipoprotéines à basse densité (LDL).
  20. Procédé de collecte de semence animale, notamment bovine, à l'aide d'un système de collecte (1) de semence animale selon l'une quelconque des revendications 1 à 19, comprenant les étapes de :
    - fournir un contenant (3) configuré pour être monté sur une extrémité (9) d'un vagin artificiel (2) et présentant un espace interne (15) configuré pour recueillir ladite semence ;
    - introduire un volume déterminé d'un milieu de première dilution (5) de ladite semence dans ledit espace (15) interne dudit contenant (3) ;
    - fournir un dispositif de collecte (4) comportant un canal d'écoulement (23) et un orifice d'évacuation (26) de ladite semence ;
    - introduire au moins partiellement ledit dispositif de collecte (4) dans ledit contenant (3) de sorte que ledit canal d'écoulement (23) s'étend dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) et ledit orifice d'évacuation (26) débouche dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) ;
    - fournir un vagin artificiel (2) ; et
    - fixer ledit dispositif de collecte (4) sur ledit vagin artificiel (2) de sorte à interposer ledit dispositif de collecte (4) entre ledit vagin artificiel (2) et ledit contenant (3) ; ledit système (1) étant configuré pour empêcher au moins en majeure partie ledit milieu de première dilution (5) de cheminer dans ledit canal d'écoulement (23) dudit dispositif de collecte (4) durant la collecte de semence.
  21. Procédé selon la revendication 20, comportant les étapes de rincer ledit dispositif de collecte (4) après collecte de ladite semence puis de retirer le dispositif de collecte (4) dudit contenant (3).
  22. Procédé selon la revendication 21, comportant les étapes de fournir un dispositif de dilution (6) de ladite semence puis de monter ledit dispositif de dilution (6) sur ledit contenant (3), en lieu et place dudit dispositif de collecte (4) après retrait de ce dernier dudit contenant (3) une fois la collecte effectuée.
  23. Procédé selon la revendication 22, comportant les étapes d'introduire un volume déterminé d'un milieu de deuxième dilution de ladite semence dans ledit espace interne (15) dudit contenant (3) et dans un espace interne (46) audit dispositif de dilution (6), de fixer un couvercle (49) dudit dispositif de dilution (6) sur un bord d'extrémité (48) de ce dernier puis d'effectuer une deuxième dilution de ladite semence.
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