EP1305620A1 - Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a thin-film plate - Google Patents

Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a thin-film plate

Info

Publication number
EP1305620A1
EP1305620A1 EP01969386A EP01969386A EP1305620A1 EP 1305620 A1 EP1305620 A1 EP 1305620A1 EP 01969386 A EP01969386 A EP 01969386A EP 01969386 A EP01969386 A EP 01969386A EP 1305620 A1 EP1305620 A1 EP 1305620A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
thin
sorbent
substance
head
layer plate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
EP01969386A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Heinrich Lutfmann
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Publication of EP1305620A1 publication Critical patent/EP1305620A1/en
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G01N30/95—Detectors specially adapted therefor; Signal analysis

Definitions

  • the invention relates to a device for preparing the quantitative analysis of substance stains on a ductile thin-layer plate in thin-layer chromatography.
  • the principle of thin layer chromatography is to spread a suitable sorbent in a thin layer on a thin layer plate, to dry this layer, to activate it if necessary, and then to apply a drop of the starting solution to be analyzed to a "starting point".
  • the plate After the solvent used has been evaporated off, the plate is placed in a closed container with solvent which, due to capillary action, passes through the layer and migrates upwards.
  • the mixture is separated into a number of spots corresponding to its number of components, all of which must then lie in a line perpendicularly from the starting point up to the rising height of the solvent (solvent front).
  • the individual spots can be analyzed qualitatively, for example by recognizing them by their own color in daylight or by making them visible by means of reagents or other aids, such as fluorescent additives or UV light.
  • a substance can also be identified with the help of reference substances that are also included.
  • a device of the type mentioned has a rinsing head which can be placed on the thin layer plate coated with the dried sorbent and which is provided with a protruding, closed rim cutter with which the sorbent can be penetrated to the top of the thin layer plate and against the surrounding sorbent can be sealed, and with at least one supply line to the cavity formed by the rinsing head and within the rim cutter, through which an elution liquid eluting the substance of the substance stain can be introduced.
  • a “rinsing head” is to be understood as a device which brings a rinsing liquid to a functional area and rinses or dissolves the amount of liquid rinsed off there.
  • the wreath cutting edge penetrates into the dried sorbent layer, to the surface of the solid thin-layer plate, which, however, must not be brittle in order not to shatter.
  • the ring cutter then forms a firm sealing ring against the rest of the sorbent layer, so that "channeling" is reliably avoided.
  • the flushing head can work with only one supply line or more than two supply lines, then however, it is preferable to use a flushing head with only one supply line and one discharge line.
  • the cavity which can be formed by the wreath cutting edge and, if appropriate, an additional hollow, has a contact surface opposite the thin-layer plate surface, which lies on the sorbent when the wreath cutting edge is placed on or keeps a small distance from it. There is therefore a precisely defined wash cabinet.
  • the height of the crown cutting edge measured from the contact surface to the actual cutting tip, should only be 0.05 to 0.5 mm larger than the average sorbent layer thickness.
  • the ring cutting edge can also be exchangeably attached to the flushing head so that it can be replaced after a certain time, if the actual cutting edges have become blunt.
  • Stainless steel is particularly suitable as the material for the ring cutter.
  • the flushing head can have a cylindrical plunger, into which the rim cutting edge is embedded, the actual cutting area protruding.
  • the stamp can be made of a plastic that is inert to the eluents commonly used. In particular, a stamp made of polyether ether ketone (PEEK) has proven itself.
  • FIG. 1 shows a flushing head with wreath edge in a sectional view
  • Figure 2 seen a rinsing head from the cutting side
  • Figure 3 shows the device according to the invention with a
  • FIG. 4 and 5 circuits for using the new device.
  • FIG. 1 shows an elution stamp 100 which can be clamped in a spindle press frame 200 (see FIG. 3) together with a thin-layer plate 1.
  • the elution stamp 100 has a clamping body which is turned in one piece and is T-shaped in projection, which is cylindrical overall and has a support part 12 and a sleeve part 13.
  • the sleeve part 13 carries a flushing head 2, which is shown in section.
  • the rinsing head 2 is essentially a cylindrical part made of polyether ether ketone (PEEK), which is rotated as a solid body and has two countersunk bores 14, 15 on its upper side, which protrude into the interior of the rinsing head 2 by about 3/5.
  • PEEK polyether ether ketone
  • a fine bore 16 which belongs to a supply line 6, continues from the bore 15 to a support surface 17, which forms the lower, flat end of the plastic flushing head part.
  • the further line, which ends in the bore 14, is identified as a discharge line 7. It ends at the bearing surface 17 in a recess 8, which is a cylindrically drilled extension.
  • a fine filter 10 is installed here, the function of which will be explained below.
  • a circular ring-shaped cutting edge 3 is inserted, which is made of V2A steel and ends in a sharp cutting tip 23 which protrudes about 0.3 mm. Accordingly, there is a cavity which protrudes beyond the bearing surface 17 within the ring cutting edge 3.
  • the principle of thin-layer chromatography is to spread a suitable sorbent 4 on a thin-layer plate 1, which has dried and to which a drop of the starting solution to be analyzed is applied at a starting point. With the help of a solvent, which migrates as a result of capillary action
  • the ring edge 3 penetrates the sorbent 4 up to the top of the thin layer plate 1 and seals it against the surrounding sorbent.
  • the bearing surface 17 is in contact with the sorbent or slightly above it.
  • an elution liquid for example water or methanol
  • the eluent spreads within the cavity, which is completely filled with the substance stain and the sorbent area, and then flows back through the fine filter 10 into the discharge line 7. It is essential that the hollow space 5 firmly against the surrounding sorbent during the entire elution time, in which 0.01-1 ml / min are passed at a constant flow during the time of the substance elution of typically 0.5-5 min is sealed so that "chanelling" cannot occur.
  • FIG. 2 shows a top view of the flushing head and the cavity 5.
  • the ring cutting edge 3 is circular and surrounds the bearing surface 17.
  • the elution liquid discharged through the discharge line 7 is examined in a mass spectrometer, as is known per se. However, it is also possible to use other analyzers.
  • a spindle press frame 200 is used for this (see FIG. 3).
  • the spindle press frame consists of a frame 30 which has a base 31 and a yoke 32.
  • the yoke is pierced so that the sleeve part 13 can be inserted through it.
  • the sleeve part is provided with a groove 18 through which a fork plate 36 can be pushed so that it lies below the yoke 32.
  • a stamp 34 presses against the intermediate thin-layer plate 1, so that it in turn contacts the ring cutter 3 from above comes, which can be pressed when tightening a screw spindle 35.
  • the thin-layer plate is made of a ductile material that does not shatter when pressure is applied at certain points.
  • a sheet of aluminum or an aluminum alloy is preferably suitable for this. It has been shown that considerable pressures can be absorbed within the cavity 5, since there is intimate contact between the ring cutter 3 and the surface of the thin-layer plate 1. Pressures of 60 bar are manageable after trials.
  • the possible uses of the device for preparing the quantitative analysis are explained with reference to FIGS. 4 and 5.
  • the elution stamp 100 is placed with the wreath cutting edge on a thin layer plate in the area of a substance stain and clamped and pressed into a spindle press frame with counter stamp 34 until the protruding, closed wreath cutting edge 3 has cut into the sorbent, to the top of the thin layer plate 1.
  • an elution liquid coming from the HPLC pump 41 can first be passed through a shunt without eluted substance.
  • the liquid flows through the feed line 6 to the cavity within the ring cutting edge 3 and dissolves the substance stain. It is to be avoided that parts of the sorbent get into the discharge line 7.
  • the fine filter 10 is provided for this.
  • the eluted substance with the elution liquid is introduced via the control valve 40 into an ESI / APCI source, ie into the ion source of a mass spectrometer, with which a ne quantitative or qualitative analysis of the substance can be carried out, as is known per se.
  • Figure 5 shows an adjustment of the control valve 40 so that a briefly different solvent flow is possible.
  • the device is switched in such a way that an idle loop 24 is possible, through which a certain amount of eluent can flow continuously until use is required, as shown in FIG. 4. ,
  • the elution of the substance within the rinsing chamber is exhaustive.
  • the quantification properties depend on the connected detection system.

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)

Abstract

The invention relates to a device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a ductile thin-film plate (1) using thin-film chromatography. The device has a rinsing head (2) which can be placed on the thin-film plate (1), the latter being coated with the dried sorbent (4) and which is provided with a projecting, closed ring cutter (3) by which means the sorbent (4) can penetrate as far as the top surface of the thin-film plate (1) and be sealed against the surrounding sorbent. At least one supply line to the cavity (5) formed inside the ring cutter (3) is connected to the rinsing head (2). An elution liquid for eluting the substance making up the substance stain can be introduced through said cavity.

Description

Vorrichtung zur Vorbereitung der qualitativen und quantitativen Analyse von Substanzflecken auf einer Dunnschichtplatte Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance stains on a thin layer plate
Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung zur Vorbereitung der quantitativen Analyse von Substanzflecken auf einer duktilen Dunnschichtplatte bei der Dünnschicht-Chromatographie.The invention relates to a device for preparing the quantitative analysis of substance stains on a ductile thin-layer plate in thin-layer chromatography.
Das Prinzip der Dünnschicht-Chromatographie besteht darin, ein geeignetes Sorbens in einer dünnen Schicht auf einer Dunnschichtplatte auszubreiten, diese Schicht zu trocknen, eventuell zu aktivieren und anschließend auf einem "Start- punkt" einen Tropfen der zu analysierenden Ausgangslösung aufzubringen. Nach dem Abdampfen des hierbei benutzten Lösungsmittels wird die Platte in ein verschlossenes Gefäß mit Solvens gestellt, welches infolge Kapillarwirkung nach oben wandernd die Schicht durchläuft. Hierbei wird das Gemisch in eine seiner Komponentenzahl entsprechende Zahl von Flecken aufgetrennt, die dann alle in einer Linie senkrecht vom Startpunkt nach oben bis zur Steighöhe des Solvens (Lösungsmittelfront) liegen müssen.The principle of thin layer chromatography is to spread a suitable sorbent in a thin layer on a thin layer plate, to dry this layer, to activate it if necessary, and then to apply a drop of the starting solution to be analyzed to a "starting point". After the solvent used has been evaporated off, the plate is placed in a closed container with solvent which, due to capillary action, passes through the layer and migrates upwards. Here, the mixture is separated into a number of spots corresponding to its number of components, all of which must then lie in a line perpendicularly from the starting point up to the rising height of the solvent (solvent front).
Es ist dabei bekannt, als Trägermaterial Aluminiumfolie zu verwenden, im Gegensatz zu Glasplatten, die relativ spröde sind. Für die Vorrichtung werden an sich bekannte Dünnschichtplatten aus »duktilen«, also nicht-spröden Materialien verwendet, wobei hier in erster Linie an Aluminium gedacht ist. Bei den bekannten Dünnschichtplatten handelt es sich um solche aus Aluminium oder Aluminium-Legierungen.It is known to use aluminum foil as the carrier material, in contrast to glass plates, which are relatively brittle. Known thin-film plates made of "ductile", ie non-brittle, materials are used for the device, with aluminum being the primary consideration here is. The known thin-layer plates are those made of aluminum or aluminum alloys.
Es ist bekannt, daß die einzelnen Flecken qualitativ analysiert werden können, indem sie beispielsweise an ihrer eige- nen Farbe im Tageslicht erkannt werden oder durch Reagenzien oder andere Hilfsmittel, wie Fluoreszenzzusätze oder UV- Licht, sichtbar gemacht werden. Eine Substanz kann auch mit Hilfe von mitaufgetragenen Referenzsubstanzen identifiziert werden.It is known that the individual spots can be analyzed qualitatively, for example by recognizing them by their own color in daylight or by making them visible by means of reagents or other aids, such as fluorescent additives or UV light. A substance can also be identified with the help of reference substances that are also included.
Wenn es mehrere chromatographisch nicht unterscheidbare Alternativen gibt oder bei Gemischkomponenten ohne übereinstimmende Referenzsubstanz besteht die Möglichkeit, den unbekannten Fleck mit dem Sorbens abzuschaben, das pulverige Material in einen Filter zu geben und mit einem geeigneten Solvens auszuwaschen. Die so gewonnene Substanzmenge ist für die Messung von Spektren, wie UV-, IR- und Massenspektren, im allgemeinen ausreichend (vgl. SU 1644880 AI).If there are several chromatographically indistinguishable alternatives or for mixture components without a matching reference substance, it is possible to scrape off the unknown stain with the sorbent, to put the powdery material in a filter and to wash it out with a suitable solvent. The amount of substance obtained in this way is generally sufficient for the measurement of spectra, such as UV, IR and mass spectra (cf. SU 1644880 AI).
Es ist weiterhin bekannt, eine Sorbensprobe mit einem Substanzflecken aus einer Dunnschichtplatte auszuschneiden, sie in eine durchströmbare Kapsel einzubetten und mit einer Elu- tionsflüssigkeit durchströmen zu lassen. Die die Substanz auflösende Elutionsflüssigkeit wird in ein Spektrometer geleitet, mit dem die unbekannte Substanz analysiert werden kann. Nachteilig bei dieser Verfahrensart ist, daß aus der Dunnschichtplatte jeweils ein Stück herausgestanzt oder herausgeschnitten werden muß. Erfahrungsgemäß werden hierbei die umliegenden Sorbens-Bereiche zerstört, zumindest beschädigt. Die umfangreichen Manipulationen beinhalten außerdem die Ge- ahr der Kontamination. Es stellt sich damit die Aufgabe, eine Vorrichtung zur Vorbereitung der qualitativen, wenn möglich quantitativen Analyse von Substanzflecken auf einer duktilen Dunnschichtplatte bei der Dünnschicht-Chromatographie anzugeben, die die Nachteile des Standes der Technik nicht aufweist, insbesondere eine einfache und wiederholbare Arbeitsweise erlaubt, bei der die Substanzflecken und die Sorbensschicht der Umgebung der zu analysierenden Substanzflecken nicht beschädigt werden kann.It is also known to cut out a sorbent sample with a substance stain from a thin-layer plate, to embed it in a flow-through capsule and to let it flow through with an elution liquid. The elution liquid dissolving the substance is passed into a spectrometer with which the unknown substance can be analyzed. A disadvantage of this type of process is that a piece has to be punched out or cut out of the thin layer plate. Experience has shown that the surrounding sorbent areas are destroyed, or at least damaged. The extensive manipulations also include the risk of contamination. It is therefore the task of specifying a device for preparing the qualitative, if possible quantitative analysis of substance stains on a ductile thin-layer plate in thin-layer chromatography, which does not have the disadvantages of the prior art, in particular allows a simple and repeatable procedure which cannot damage the substance stains and the sorbent layer in the vicinity of the substance stains to be analyzed.
Diese Aufgabe wird bei einer Vorrichtung der genannten Art dadurch gelöst, daß diese einen auf die mit dem getrockneten Sorbens beschichtete Dunnschichtplatte aufsetzbaren Spülkopf besitzt, der mit einer überstehenden, geschlossenen Kranzschneide versehen ist, mit der das Sorbens bis auf die Oberseite der Dunnschichtplatte durchdringbar und gegen das umge- bende Sorbens abdichtbar ist, und mit wenigstens einer Zuleitung zu dem von dem vom Spülkopf und innerhalb der Kranz- schneide gebildeten Hohlraum, durch den eine die Substanz des Substanzfleckens eluierende Elutionsflüssigkeit einleitbar ist.This object is achieved in a device of the type mentioned in that it has a rinsing head which can be placed on the thin layer plate coated with the dried sorbent and which is provided with a protruding, closed rim cutter with which the sorbent can be penetrated to the top of the thin layer plate and against the surrounding sorbent can be sealed, and with at least one supply line to the cavity formed by the rinsing head and within the rim cutter, through which an elution liquid eluting the substance of the substance stain can be introduced.
Unter einem »Spülkopf« soll eine Vorrichtung verstanden werden, die eine Spülflüssigkeit an einen Funktionsbereich heranbringt und dort abgespülte bzw. gelöste Flüssigkeitsmengen wieder abführbar macht. Im vorliegenden Falle dringt die Kranzschneide in die getrocknete Sorbensschicht ein, und zwar bis zur Oberfläche der festen Dunnschichtplatte, die allerdings nicht spröde sein darf, um nicht zu zerspringen. Die Kranzschneide bildet dann einen festen Abdichtungskranz gegen den Rest der Sorbensschicht, so daß ein "Channeling" zuverlässig vermieden wird.A “rinsing head” is to be understood as a device which brings a rinsing liquid to a functional area and rinses or dissolves the amount of liquid rinsed off there. In the present case, the wreath cutting edge penetrates into the dried sorbent layer, to the surface of the solid thin-layer plate, which, however, must not be brittle in order not to shatter. The ring cutter then forms a firm sealing ring against the rest of the sorbent layer, so that "channeling" is reliably avoided.
Wenn es auch denkbar ist, daß der Spülkopf mit nur einer Zuleitung oder mehr als zwei Zuleitungen arbeitsfähig ist, so ist jedoch ein Spülkopf vorzuziehen, der nur eine Zuleitung und eine Abführleitung besitzt.If it is also conceivable that the flushing head can work with only one supply line or more than two supply lines, then however, it is preferable to use a flushing head with only one supply line and one discharge line.
Der Hohlraum, der von der Kranzschneide und gegebenenfalls einer zusätzlichen Aushöhlung gebildet sein kann, hat gegen- überliegend zur Dünnschichtplattenoberflache eine Auflagefläche, die sich beim Aufsetzen der Kranzschneide auf das Sorbens legt oder einen geringen Abstand dazu hält . Es damit ein genau festgelegter Spülraum vorhanden.The cavity, which can be formed by the wreath cutting edge and, if appropriate, an additional hollow, has a contact surface opposite the thin-layer plate surface, which lies on the sorbent when the wreath cutting edge is placed on or keeps a small distance from it. There is therefore a precisely defined wash cabinet.
Die Höhe der Kranzschneide, gemessen von der Auflagefläche bis zur eigentlichen Schneidenspitze, sollte nur 0,05 bis 0,5 mm größer als die mittlere Sorbensschichtdicke sein.The height of the crown cutting edge, measured from the contact surface to the actual cutting tip, should only be 0.05 to 0.5 mm larger than the average sorbent layer thickness.
Die Kranzschneide kann auch auswechselbar am Spülkopf befestigt sein, so daß er nach einer gewissen Zeit, wenn die eigentlichen Schneiden stumpf geworden sein sollten, ausgewech- seit werden kann. Als Material für die Kranzschneide eignet sich insbesondere rostfrei legierter Stahl .The ring cutting edge can also be exchangeably attached to the flushing head so that it can be replaced after a certain time, if the actual cutting edges have become blunt. Stainless steel is particularly suitable as the material for the ring cutter.
Der Spülkopf kann einen zylindrischen Stempel besitzen, in den die Kranzschneide eingelassen ist, wobei der eigentliche Schneidenbereich übersteht. Der Stempel kann aus einem Kunst- Stoff bestehen, der gegen die üblicherweise verwendeten Elu- tionsmittel inert ist. Insbesondere hat sich ein Stempel aus Polyetheretherketon (PEEK) bewährt.The flushing head can have a cylindrical plunger, into which the rim cutting edge is embedded, the actual cutting area protruding. The stamp can be made of a plastic that is inert to the eluents commonly used. In particular, a stamp made of polyether ether ketone (PEEK) has proven itself.
Werden eine zuführende und eine abführende Leitung verwendet, so ist es vorteilhaft, der abführenden Leitung noch im Be- reich des Spülkopfes einen Feinfilter vorzuschalten.If a supply and a discharge line are used, it is advantageous to connect a fine filter upstream of the discharge line in the area of the flushing head.
Schließlich wird vorgeschlagen, daß die Kranzschneide mit Hilfe eines die Dunnschichtplatte gegen den Spülkopf drückenden Spindelpreßgestells in das Sorbens eindrückbar und fixierbar ist. Ein Ausführungsbeispiel der Erfindung wird anhand der Zeichnung erläutert. Die Figuren der Zeichnung zeigen im einzelnen:Finally, it is proposed that the crown cutting edge can be pressed and fixed in the sorbent with the aid of a spindle press frame which presses the thin layer plate against the washing head. An embodiment of the invention is explained with reference to the drawing. The figures in the drawing show in detail:
Figur 1 einen Spülkopf mit Kranzschneide in ge- schnittener Darstellung;FIG. 1 shows a flushing head with wreath edge in a sectional view;
Figur 2 einen Spülkopf von der Schneidenseite her gesehen;Figure 2 seen a rinsing head from the cutting side;
Figur 3 die Vorrichtung gemäß Erfindung mit einerFigure 3 shows the device according to the invention with a
Dunnschichtplatte in einem Spindelpreßge- stell.Thin layer plate in a spindle press frame.
Figuren 4 und 5 Schaltungen zum Einsatz der neuen Vorrichtung.Figures 4 and 5 circuits for using the new device.
Figur 1 zeigt einen Elutionsstempel 100, der in ein Spindelpreßgestell 200 (vgl. Figur 3) zusammen mit einer Dünn- schichtplatte 1 eingespannt werden kann. Der Elutionsstempel 100 besitzt einen einstückig gedrehten und in Projektion T- förmigen Einspannkorpus, der insgesamt zylindrisch ist und ein Auflageteil 12 und ein Hülsenteil 13 aufweist. Das Hülsenteil 13 trägt eingesetzt einen Spülkopf 2, der im Schnitt dargestellt ist. Der Spülkopf 2 ist im wesentlichen ein zylindrisches Teil aus Polyetheretherketon (PEEK) , das als Vollkörper gedreht ist und zwei eingesenkte Bohrungen 14, 15 an seiner Oberseite besitzt, die bis etwa 3/5 in das Innere des Spülkopfes 2 hineinragen.FIG. 1 shows an elution stamp 100 which can be clamped in a spindle press frame 200 (see FIG. 3) together with a thin-layer plate 1. The elution stamp 100 has a clamping body which is turned in one piece and is T-shaped in projection, which is cylindrical overall and has a support part 12 and a sleeve part 13. The sleeve part 13 carries a flushing head 2, which is shown in section. The rinsing head 2 is essentially a cylindrical part made of polyether ether ketone (PEEK), which is rotated as a solid body and has two countersunk bores 14, 15 on its upper side, which protrude into the interior of the rinsing head 2 by about 3/5.
Eine feine Bohrung 16, die zu einer Zuleitung 6 gehört, setzt sich von der Bohrung 15 bis zu einer Auflagefläche 17 fort, die den unteren, planen Abschluß des Spülkopf- Kunststoffteiles bildet. Die weitere Leitung, die in der Bohrung 14 endet, ist als abführende Leitung 7 gekennzeichnet. Sie endet an der Auflagefläche 17 in einem Rezeß 8, der eine zylindrisch aufgebohrte Erweiterung darstellt. Hier ist ein Feinfilter 10 eingebaut, dessen Funktion noch erläutert werden wird.A fine bore 16, which belongs to a supply line 6, continues from the bore 15 to a support surface 17, which forms the lower, flat end of the plastic flushing head part. The further line, which ends in the bore 14, is identified as a discharge line 7. It ends at the bearing surface 17 in a recess 8, which is a cylindrically drilled extension. A fine filter 10 is installed here, the function of which will be explained below.
In das Kunststoffteil des Spülkopfes 2 ist eine kreisrunde Kranzschneide 3 eingesetzt, die aus V2A-Stahl besteht und in einer scharfen, etwa 0,3 mm überstehenden Schneidspitze 23 endet. Es besteht demnach ein Hohlraum, der innerhalb der Kranzschneide 3 über die Auflagefläche 17 übersteht.In the plastic part of the flushing head 2, a circular ring-shaped cutting edge 3 is inserted, which is made of V2A steel and ends in a sharp cutting tip 23 which protrudes about 0.3 mm. Accordingly, there is a cavity which protrudes beyond the bearing surface 17 within the ring cutting edge 3.
Wie bereits eingangs erläutert, besteht das Prinzip der Dünnschicht-Chromatographie darin, auf einer Dunnschichtplatte 1 ein geeignetes Sorbens 4 auszubreiten, das getrocknet ist und bei dem auf einem Startpunkt ein Tropfen der zu analysierenden Ausgangslösung aufgebracht wird. Mit Hilfe eines Solvens, welches in Folge Kapillarwirkung nach oben wandernd dieAs already explained at the beginning, the principle of thin-layer chromatography is to spread a suitable sorbent 4 on a thin-layer plate 1, which has dried and to which a drop of the starting solution to be analyzed is applied at a starting point. With the help of a solvent, which migrates as a result of capillary action
Schicht durchläuft, werden Substanzflecken erzeugt, die eine Flächenausdehnung haben, die von der Kranzschneide 3 vollständig umschlossen werden können. Es sei angemerkt, daß je nach Erfordernis verschiedene Kranzschneiden-Durchmesser ver- wendet werden können. Im allgemeinen liegt der Durchmesser bei etwa 4mm. Es sind aber auch Kranzschneiden innerhalb des Bereiches 2 bis 10mm Durchmesser herstellbar und gegebenenfalls anwendbar.Passes through the layer, substance stains are generated, which have a surface area that can be completely enclosed by the ring cutting edge 3. It should be noted that different ring cutter diameters can be used as required. Generally the diameter is about 4mm. However, wreath cutting can also be produced within the range of 2 to 10 mm in diameter and used if necessary.
Wie aus der Figur 1 hervorgeht, wird mit der Kranzschneide 3 das Sorbens 4 bis auf die Oberseite der Dunnschichtplatte 1 durchdrungen und gegen das umgebende Sorbens abgedichtet . Die Auflagefläche 17 liegt dabei in Kontakt mit dem Sorbens oder etwas oberhalb dazu.As can be seen from FIG. 1, the ring edge 3 penetrates the sorbent 4 up to the top of the thin layer plate 1 and seals it against the surrounding sorbent. The bearing surface 17 is in contact with the sorbent or slightly above it.
Mit dem zweifach durchbohrten Spülkopf 2, dessen Zulaufslei- tung 6 in einem Öffnungsdurchmesser von etwa 0,2 mm en- det, wird eine Elutionsflüssigkeit , beispielsweise Wasser oder Methanol durch die Zuleitung 6 eingeleitet . Innerhalb des Hohlraums, der mit dem Substanzfleck und dem Sorbens- Bereich voll ausgefüllt wird, breitet sich das Elutionsmittel aus und fließt anschließend durch den Feinfilter 10 in die abführende Leitung 7 zurück. Wesentlich ist, daß während der gesamten Elutionszeit, bei der etwa während der Zeit der Sub- stanzelution von typischerweise 0,5 - 5 min, 0,01-1 ml/min bei konstanten Fluß hindurchgeleitet werden, der Hohlraum 5 fest gegen das umgebende Sorbens abgedichtet ist, so daß es nicht zu einem „Chanelling" kommen kann.With the double-drilled flushing head 2, the inlet line 6 of which has an opening diameter of approximately 0.2 mm. det, an elution liquid, for example water or methanol, is introduced through the feed line 6. The eluent spreads within the cavity, which is completely filled with the substance stain and the sorbent area, and then flows back through the fine filter 10 into the discharge line 7. It is essential that the hollow space 5 firmly against the surrounding sorbent during the entire elution time, in which 0.01-1 ml / min are passed at a constant flow during the time of the substance elution of typically 0.5-5 min is sealed so that "chanelling" cannot occur.
Figur 2 zeigt eine Draufsicht auf den Spülkopf und den Hohlraum 5. Deutlich erkennbar ist die Öffnung für die zuführende Leitung 6, sowie der Feinfilter 10, der in einer wesentlich vergrößerten Öffnung der abführenden Leitung 7 vorgeschaltet ist. Die Kranzschneide 3 ist in diesem Fall kreisrund und umgibt die Auflagefläche 17.FIG. 2 shows a top view of the flushing head and the cavity 5. The opening for the supply line 6 and the fine filter 10, which is connected upstream of the discharge line 7 in a substantially enlarged opening, can be clearly seen. In this case, the ring cutting edge 3 is circular and surrounds the bearing surface 17.
Die durch die abführende Leitung 7 abgeführte Elutionsflüssigkeit wird in einem Massenspektrometer, wie an sich be- kannt, untersucht. Es ist aber auch möglich, andere Analysa- toren zu verwenden.The elution liquid discharged through the discharge line 7 is examined in a mass spectrometer, as is known per se. However, it is also possible to use other analyzers.
Hierfür wird beispielsweise ein Spindelpreßgestell 200 verwendet (vergl . Fig. 3). Das Spindelpreßgestell besteht aus einem Rahmen 30, der eine Basis 31 und ein Joch 32 aufweist. Das Joch ist durchbohrt, so daß das Hülsenteil 13 hindurch gesteckt werden kann. Das Hülsenteil ist mit einer Nut 18 versehen, durch das ein Gabelblech 36 schiebbar ist, so daß es unterhalb des Jochs 32 liegt. Von unten drückt ein Stempel 34 gegen die zwischengelagerte Dunnschichtplatte 1, so daß diese wiederum von oben mit der Kranzschneide 3 in Kontakt kommt, die bei Anziehen einer Schraubspindel 35 angedrückt werden kann.For example, a spindle press frame 200 is used for this (see FIG. 3). The spindle press frame consists of a frame 30 which has a base 31 and a yoke 32. The yoke is pierced so that the sleeve part 13 can be inserted through it. The sleeve part is provided with a groove 18 through which a fork plate 36 can be pushed so that it lies below the yoke 32. From below, a stamp 34 presses against the intermediate thin-layer plate 1, so that it in turn contacts the ring cutter 3 from above comes, which can be pressed when tightening a screw spindle 35.
Bei der Dunnschichtplatte handelt es sich um eine aus einem duktilen Material, das bei einem punktweise aufgesetzten Druck nicht zerspringt. Hierzu eignet sich vorzugsweise ein Blech aus Aluminium oder eine Aluminiumlegierung. Es hat sich gezeigt, daß erhebliche Drücke innerhalb des Hohlraumes 5 aufgefangen werden können, da sich ein inniger Kontakt zwischen der Kranzschneide 3 und der Oberfläche der Dünnschicht- platte 1 einstellt. Drücke von 60 Bar sind nach Versuchen beherrschbar.The thin-layer plate is made of a ductile material that does not shatter when pressure is applied at certain points. A sheet of aluminum or an aluminum alloy is preferably suitable for this. It has been shown that considerable pressures can be absorbed within the cavity 5, since there is intimate contact between the ring cutter 3 and the surface of the thin-layer plate 1. Pressures of 60 bar are manageable after trials.
Die Anwendungsmöglichkeiten der Vorrichtung zur Vorbereitung der quantitativen Analyse werden anhand der Figuren 4 und 5 erläutert. Der Elutionsstempel 100 wird mit der Kranzschneide auf eine Dunnschichtplatte im Bereich eines Substanzflecks aufgesetzt und in ein Spindelpreßgestell mit Gegenstempel 34 eingespannt und angedrückt, bis sich die überstehende, geschlossene Kranzschneide 3 in das Sorbens eingeschnitten hat, und zwar bis zur Oberseite der Dunnschichtplatte 1.The possible uses of the device for preparing the quantitative analysis are explained with reference to FIGS. 4 and 5. The elution stamp 100 is placed with the wreath cutting edge on a thin layer plate in the area of a substance stain and clamped and pressed into a spindle press frame with counter stamp 34 until the protruding, closed wreath cutting edge 3 has cut into the sorbent, to the top of the thin layer plate 1.
Mit Hilfe eines Steuerventils 40 kann eine von der HPLC-Pumpe 41 kommende Elutionsflüssigkeit zunächst ohne eluierte Substanz durch einen Nebenschluß geleitet werden. Bei entsprechender Verstellung des Steuerventils fließt die Flüssigkeit durch die Zuleitung 6 zum Hohlraum innerhalb der Kranzschnei- de 3 und löst den Substanzfleck auf. Es soll vermieden werden, daß Teile des Sorbens in die abführende Leitung 7 gelangen. Hierfür ist der Feinfilter 10 vorgesehen. Die eluierte Substanz wird mit der Elutionsflüssigkeit über das Steuerventil 40 in eine ESI/APCI-Quelle eingeleitet, also in die Io- nenquelle eines Massenspektrometers, mit dem anschließend ei- ne quantitative oder qualitative Analyse der Substanz erfolgen kann, wie es an sich bekannt ist.With the help of a control valve 40, an elution liquid coming from the HPLC pump 41 can first be passed through a shunt without eluted substance. With a corresponding adjustment of the control valve, the liquid flows through the feed line 6 to the cavity within the ring cutting edge 3 and dissolves the substance stain. It is to be avoided that parts of the sorbent get into the discharge line 7. The fine filter 10 is provided for this. The eluted substance with the elution liquid is introduced via the control valve 40 into an ESI / APCI source, ie into the ion source of a mass spectrometer, with which a ne quantitative or qualitative analysis of the substance can be carried out, as is known per se.
Figur 5 zeigt eine Verstellung des Steuerventils 40, so daß ein kurzzeitig anderer Lösungsmittelfluß möglich ist. Es wird die Vorrichtung so geschaltet, daß eine Leerlaufschleife 24 möglich ist, durch die ständig eine gewisse Menge an Eluti- onsmittel fließen kann, bis ein Einsatz erforderlich ist, wie er in Fig. 4 dargestellt ist. .Figure 5 shows an adjustment of the control valve 40 so that a briefly different solvent flow is possible. The device is switched in such a way that an idle loop 24 is possible, through which a certain amount of eluent can flow continuously until use is required, as shown in FIG. 4. ,
Es zeigt sich, daß für viele Substanzen sowohl Reproduzier- barkeit als auch Linearität für eine quantitative Analyse des Substanzfleckes ausgezeichnet sind, obwohl sich die Substanzmengen nur im Nanogramm-Bereich befinden. Derartige Substanzmengen können mit einer Peakfläche korreliert werden, die sich bei einer Dünnschicht-Chromatographie in Kombination mit einem Massenspektrometer vermessen läßt.It turns out that for many substances, both reproducibility and linearity are excellent for a quantitative analysis of the substance stain, even though the substance quantities are only in the nanogram range. Such amounts of substance can be correlated with a peak area that can be measured in thin-layer chromatography in combination with a mass spectrometer.
Die Elution der Substanz innerhalb der Spülkammer ist erschöpfend. Die Quantifizierungseigenschaften hängen vom angeschlossenen Nachweissystem ab. The elution of the substance within the rinsing chamber is exhaustive. The quantification properties depend on the connected detection system.

Claims

Patentansprüche : Claims:
1. Vorrichtung zur Vorbereitung der qualitativen und quantitativen Analyse von Substanzflecken auf einer duktilen Dunnschichtplatte (1) bei der Dünnschicht-1. Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance stains on a ductile thin-layer plate (1) in the thin-layer
Chromatographie, gekennzeichnet durch einen auf die mit dem getrockneten Sorbens (4) beschichtete Dunnschichtplatte (1) aufsetzbaren Spülkopf (2) , der mit einer überstehenden, geschlossenen Kranzschneide (3) versehen ist, mit der das Sorbens (4) bis auf die Oberseite der Dunnschichtplatte (1) durchdringbar und gegen das umgebende Sorbens abdichtbar ist mit einer Zuleitung (6) zu dem innerhalb der Kranzschneide (3) gebildeten Hohlraum (5) , durch den eine die Substanz des Substanzfleckens eluie- rende Elutionsflüssigkeit einleitbar ist und mit einer Abführleitung (7) .Chromatography, characterized by a rinsing head (2) which can be placed on the thin-layer plate (1) coated with the dried sorbent (4) and which is provided with a projecting, closed rim cutter (3) with which the sorbent (4) extends to the top of the The thin-layer plate (1) can be penetrated and sealed against the surrounding sorbent with a feed line (6) to the cavity (5) formed inside the ring cutter (3), through which an elution liquid eluting the substance of the substance stain can be introduced and with a discharge line ( 7).
2. Vorrichtung nach Anspruch, dadurch gekennzeichnet, daß den Abschluß des Hohlraums (5) des Spülkopfes eine Auflagefläche (17) bildet, die sich beim Aufsetzen der Kranz- schneide (3) auf das Sorbens legt oder einen geringen Abstand dazu hält .2. Device according to claim, characterized in that the closure of the cavity (5) of the rinsing head forms a support surface (17) which lies on the sorbent when the rim cutter (3) is placed on it or keeps a small distance from it.
3. Vorrichtung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Höhe der Kranzschneide (3) , gemessen von der Auflagefläche (17), 0,05 bis 0,5 mm mehr als die Dicke der Sor- bensschicht beträgt.3. Apparatus according to claim 2, characterized in that the height of the crown cutting edge (3), measured from the contact surface (17), is 0.05 to 0.5 mm more than the thickness of the sorbent layer.
4. Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Kranzschneide (3) im Querschnitt eine geschlossene Struktur bildet.4. Apparatus according to claim 1 to 3, characterized in that the ring cutter (3) forms a closed structure in cross section.
5. Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeich- net, daß die Kranzschneide (3) auswechselbar am Spülkopf (2) befestigt ist.5. The device according to claim 1 to 4, characterized in net that the ring cutter (3) is replaceably attached to the flushing head (2).
6. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Kranzschneide (3) aus rost- frei legiertem Stahl besteht.6. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the ring cutter (3) consists of stainless steel.
7. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Spülkopf (2) einen zylindrischen Stempel besitzt, in dem das Oberteil der Kranzschneide (3) gehalten ist, wobei der eigentliche Schnei- denbereich übersteht .7. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the rinsing head (2) has a cylindrical plunger in which the upper part of the ring cutter (3) is held, the actual cutting area protruding.
8. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Stempel aus einem Material besteht, das gegen die verwendete Elutionsflüssigkeit inert ist.8. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the stamp consists of a material which is inert to the elution liquid used.
9. Vorrichtung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Stempel aus Polyetheretherketon besteht .9. The device according to claim 8, characterized in that the stamp consists of polyether ether ketone.
10. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß in der Auflagefläche (17) des Spülkopfes (2) die Zuleitung (6) und die Abführleitung (7) en- den.10. Device according to one of claims 1 to 9, characterized in that in the bearing surface (17) of the flushing head (2) the feed line (6) and the discharge line (7) end.
11. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Abführleitung (7) im Bereich des Spülkopfes (2) mit einem Feinfilter (10) versehen ist.11. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the discharge line (7) in the region of the flushing head (2) is provided with a fine filter (10).
12. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Kranzschneide (3) mit Hilfe eines die Dunnschichtplatte (1) gegen den Spülkopf (2) drückenden Spindelpreßgestells (200) in das Sorbens eindrückbar und fixierbar ist. 12. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the crown cutting edge (3) can be pressed and fixed into the sorbent with the aid of a spindle press frame (200) which presses the thin-layer plate (1) against the washing head (2).
3. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Abführleitung (7) mit einem Massenspektrometer verbindbar ist. 3. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the discharge line (7) can be connected to a mass spectrometer.
EP01969386A 2000-07-26 2001-07-14 Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a thin-film plate Ceased EP1305620A1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10036293 2000-07-26
DE2000136293 DE10036293C2 (en) 2000-07-26 2000-07-26 Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance stains on a thin layer plate
PCT/EP2001/008133 WO2002008747A1 (en) 2000-07-26 2001-07-14 Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a thin-film plate

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP1305620A1 true EP1305620A1 (en) 2003-05-02

Family

ID=7650210

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP01969386A Ceased EP1305620A1 (en) 2000-07-26 2001-07-14 Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance spots on a thin-film plate

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP1305620A1 (en)
AU (1) AU2001289655A1 (en)
DE (1) DE10036293C2 (en)
WO (1) WO2002008747A1 (en)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH701526B1 (en) 2009-07-24 2013-02-15 Camag Method and apparatus for preparation of substances for qualitative and quantitative analyzes.
EP2330402B1 (en) 2009-12-01 2017-02-15 Spark Holland B.V. Method and apparatus for desorption of a blood sample from a medical test sheet
JP2020091173A (en) * 2018-12-05 2020-06-11 山善株式会社 Thin-layer chromatography preparative method and thin-layer chromatography preparative deice

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1644880A1 (en) * 1988-12-05 1991-04-30 Институт питания АМН СССР Method for quantitative determination of benzoic and sorbic acids in foods and beverages
US5208458A (en) * 1991-11-05 1993-05-04 Georgia Tech Research Corporation Interface device to couple gel electrophoresis with mass spectrometry using sample disruption
EP1010468A1 (en) * 1998-12-14 2000-06-21 FENN, John B. Improved method and apparatus for electrospray ionization

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of WO0208747A1 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2002008747A1 (en) 2002-01-31
DE10036293C2 (en) 2002-08-14
DE10036293A1 (en) 2002-02-14
AU2001289655A1 (en) 2002-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2657351C3 (en) Polarographic analysis device for determining glucose
DE19509062C2 (en) NMR sample holder and method for filling the sample holder
CH465271A (en) Column closure for column chromatograph
DE102008057866B4 (en) Chair sampling device
DE4101473C2 (en) Probe head for flow-through NMR spectroscopy
EP2457086B1 (en) Method and device for preparing substances for qualitative and quantitative analyses
EP1697736B1 (en) Device for sample preparation
DE69736282T2 (en) DILUTION AND MEASURING DEVICE FOR PARTICLE COUNTERS
DE1815865B2 (en) DEVICE FOR HANDLING LIQUID SAMPLES IN SAMPLE CONTAINERS
DE10036293C2 (en) Device for preparing the qualitative and quantitative analysis of substance stains on a thin layer plate
WO2005042166A1 (en) Sample pipette
DE2801223A1 (en) ELECTRODE ARRANGEMENT
DE3004347A1 (en) SAMPLING DEVICE FOR GAS CHROMATOGRAPHS
DE102010016103B4 (en) Measuring device with resonator
EP0483613B1 (en) Method and apparatus for the qualitative and/or quantitative monitoring of liquid raw materials
EP1048333A1 (en) Device and method for chemical derivatization
DE2934434A1 (en) SEALING DEVICE
EP2100134A1 (en) Device for field flow fractionation
DE2317957A1 (en) PRESS FOR PROGRESSIVE COMPRESSION OF AN ABSORBENT, LIQUID-SOAKED OBJECT
DE3900123A1 (en) Piercing device for piercing a coolant pipe in a refrigerating device for disposal
EP0860699B1 (en) System for monitoring several oil filled electrical devices
DE3049565C2 (en) Device for measuring certain properties of particles suspended in a particle suspension
DE2100089B2 (en) GAS CHROMATOGRAPHIC INJECTION DEVICE
DE2646749C3 (en) Filter device with a stack of annular filter elements compressed under constant pressure
WO2011085791A9 (en) Method for real-time sample preparation in the hplc high-pressure area with the aid of ultrasound

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

17P Request for examination filed

Effective date: 20030109

AK Designated contracting states

Designated state(s): AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LI LU MC NL PT SE TR

AX Request for extension of the european patent

Extension state: AL LT LV MK RO SI

17Q First examination report despatched

Effective date: 20061115

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE APPLICATION HAS BEEN REFUSED

18R Application refused

Effective date: 20070716