EA044682B1 - Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим - Google Patents
Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим Download PDFInfo
- Publication number
- EA044682B1 EA044682B1 EA202191544 EA044682B1 EA 044682 B1 EA044682 B1 EA 044682B1 EA 202191544 EA202191544 EA 202191544 EA 044682 B1 EA044682 B1 EA 044682B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- concentration
- romiplostim
- compositions
- stability
- hplc
- Prior art date
Links
- 108010017584 romiplostim Proteins 0.000 title claims description 46
- 229960004262 romiplostim Drugs 0.000 title claims description 46
- WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N semaxanib Chemical compound N1C(C)=CC(C)=C1\C=C/1C2=CC=CC=C2NC\1=O WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N 0.000 title claims description 46
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 90
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 27
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims description 22
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims description 22
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 21
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 21
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 21
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 21
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 20
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 20
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 17
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 12
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 23
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 21
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 15
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 14
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 13
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 13
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 12
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 8
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 8
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 8
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 101000799466 Homo sapiens Thrombopoietin receptor Proteins 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 3
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102100034196 Thrombopoietin receptor Human genes 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 239000002357 osmotic agent Substances 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 238000010911 splenectomy Methods 0.000 description 2
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241001146702 Candidatus Entotheonella factor Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010043561 Thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 229940127323 Thrombopoietin Receptor Agonists Drugs 0.000 description 1
- 108010070774 Thrombopoietin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005763 Thrombopoietin Receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 102000054764 human MPL Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001354 painful effect Effects 0.000 description 1
- 229940021222 peritoneal dialysis isotonic solution Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- -1 polyoxyethylene chains Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000009094 second-line therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940126460 thrombopoietin receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 125000004417 unsaturated alkyl group Chemical group 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к улучшенным лиофилизированным фармацевтическим композициям, содержащим ромиплостим, буфер, наполнитель, стабилизатор и поверхностно-активное вещество и способу их получения. Предлагаемые композиции могут найти применение в производстве лекарственного препарата, относящегося к агонистам рецептора тромбопоэтина, используемого для лечения тромбоцитопении.
Уровень техники
Тромбопоэтин (ТПО) - цитокин, участвующий в регуляции синтеза тромбоцитов (тромбоцитопоэза) посредством активации роста и дифференцировки мегакариоцитов, клеток-предшественников тромбоцитов, в костном мозге.
ТПО синтезируется в виде белка-предшественника длиной 353 аминокислоты. Большая часть ТПО формируется в печени, при этом скорость синтеза поддерживается на одном уровне. В результате процессинга формируется зрелый белок, состоящий из двух доменов: рецептор-связывающего и высоко гликозилированного C-концевого [1].
Содержание ТПО в крови в норме обратно пропорционально количеству тромбоцитов. Механизм обратной связи реализуется путем рецептор-опосредованного разрушения цитокина при связывании с тромбопоэтиновыми рецепторами (CD110 или c-Mpl), которые в большом количестве представлены на поверхности тромбоцитов. При развитии тромбоцитопении общее количество рецепторов снижается, поэтому также уменьшается и рецептор-опосредованное разрушение.
Ромиплостим является агонистом тромбопоэтиновых рецепторов. По своей структуре он представляет Fc-конъюгированный пептид (пептидное антитело), который, как и ТПО, индуцирует тромбоцитопоэз. Молекула пептидного антитела состоит из Fc-фрагмента человеческого иммуноглобулина IgG1, в которой каждая одноцепочечная субъединица Fc-фргамента на C-конце соединена ковалентной связью с пептидом-агонистом CD110, содержащим два рецептор-связывающих домена. Ромиплостим получают путем рекомбинантной ДНК-технологии с использованием штамма-продуцента Escherichia coli (E.coli). Аминокислотная последовательность ромиплостима не гомологична аминокислотной последовательности эндогенного ТПО. В доклинических и клинических исследованиях не обнаружили формирования перекрестно реагирующих антител к ромиплостиму и эндогенному ТПО [2, 3].
Ромиплостим показан для лечения хронической идиопатической (иммунной) тромбоцитопенической пурпуры у взрослых пациентов после спленэктомии, резистентной к другим видам лечения (например, глюкокортикостероидам, иммуноглобулинам). Препарат может применяться в качестве терапии второй линии у пациентов, которым противопоказана спленэктомия [2].
Как правило, пептиды в водной среде физически и химически не стабильны, что может привести к потере их биологической активности при производстве и хранении. Результатом физической нестабильности пептида может являться денатурация, агрегация, осаждение или адсорбция. Химические изменения происходят вследствие окисления, дезамидирования, протеолиза и др. Все эти процессы представляют серьёзную проблему для терапевтически активных пептидов, дозировка которых зависит от биологической активности [4, 5].
Для решения проблемы физико-химической нестабильности терапевтических пептидов в водных композициях широко применяется лиофилизация (сублимационная сушка) [5, 6]. Сублимационная сушка основана на удалении влаги из замороженного материала путем возгонки (сублимации) льда, который превращается в пар, минуя жидкую фазу. Практическая реализация метода включает три этапа: замораживание, основную сушку (сублимацию льда) и досушивание (удаление остаточной влаги при температуре выше 0°C).
При разработке лекарственных препаратов, содержащих пептиды или белки в виде лиофилизатов, учитывают свойства как действующих, так и введенных вспомогательных веществ, которые должны обеспечивать эффективность лекарственного препарата, его химическую и физическую стабильность. При этом вопрос о составе препарата и концентрации веществ решается для каждого терапевтически активного пептида индивидуально, с проведением физико-химических, технологических и биофармацевтических исследований созданных композиций. Определение оптимального соотношения между основным и вспомогательными веществами является необходимым условием получения качественного лекарственного препарата.
Лиофилизированные препараты терапевтически пептидных антител обычно содержат буфер, наполнитель, стабилизатор. В том случае, если во время стадии лиофилизации или на стадии восстановления происходит агрегация, в состав композиции дополнительно включают поверхностно-активное вещество (ПАВ).
В патенте EA17085 описаны лиофилизированные композиции терапевтических пептидных антител, в том числе ромиплостима, содержащие буфер, наполнитель, стабилизирующий агент и, необязательно, ПАВ. В патенте EA22424 защищено выделенное из патента EA17085 изобретение, являющееся наиболее близким аналогом настоящего изобретения - стабильная композиция ромиплостима (Fc-TMP), соответствующая составу/технологии получения оригинального препарата Энплейт, содержащая ромиплостим в концентрации 0,5 мг/мл, 10 мМ гистидиновый буфер (pH 5), 4% вес./об., маннитола в качестве наполни
- 1 044682 теля, 2% вес./об., сахарозы в качестве стабилизатора и 0,004% вес./об., полисорбата-20 в качестве ПАВ. Указанные концентрации представляют собой концентрации в жидкой композиции до лиофилизации, которые равны концентрациям в восстановленном в соответствии с инструкцией по медицинскому применению лиофилизате [2]. Проведенное нами исследование стабильности оригинального препарата показало, что при хранении лиофилизата возможно появление примесей окисления, дезамидирования, протеолиза ромиплостима. Наличие таких примесей нежелательно в связи с возможным влиянием на биологическую активность препарата. Стабильность ромиплостима в композициях согласно описанию изобретения понижается по мере уменьшения концентрации белка в растворе до лиофилизации. Так, например, возможно повышение скорости агрегации и окисления при концентрациях менее 0,5 мг/мл.
В заявке WO2015150968 описаны лиофилизированные фармацевтические композиции, содержащие ромиплостим в концентрации 0,5 мг/мл, буфер, выбранный из цитратного, фосфатного, аланинового, глицинового, аргининового или их комбинации, полисорбат-20 в качестве суфрактанта и наполнитель, выбранный из сахарозы, трегалозы или их комбинации. Описанные в заявке лиофилизированные композиции имеют стабильность (хранение в закрытых флаконах, 15 дней или 21 день при 40°C), сопоставимую со стабильностью композиции, воспроизводящей состав оригинального препарата. Однако в заявке нет данных по изучению стабильности при долгосрочном хранении (2-8°C) и при ускоренном хранении ((25±2)°C; (60±5)%).
Общим недостатком известных лиофилизированных композиций ромиплостима является использование в них в качестве ПАВ полисорбата-20 (полиоксиэтилена (20) сорбитана монолаурата), который является химически нестабильным соединением.
Полисорбаты содержат сложноэфирные связи, а также ненасыщенные алкильные и полиоксиэтиленовые цепи, которые легко гидролизуются и самоокисляются в водной среде, что приводит к накоплению высокореакционных пероксидов и альдегидов. Образовавшиеся пероксиды способны окислять метиониновые и триптофановые остатки полипептида. Альдегиды реагируют с первичными аминогруппами полипептида, что может способствовать повышению иммуногенности [5, 7-10]. Лауриновая кислота, образующаяся в результате гидролиза полисорбата-20, может понижать кислотность растворов. При фильтрации растворов полипептидов полисорбат-20 может сорбироваться на фильтрующих мембранах [11].
Следовательно, существует потребность в разработке лиофилизированного фармацевтического препарата ромиплостима, не содержащего полисорбаты в качестве ПАВ, физически и химически стабильного при различных условиях хранения.
Сущность изобретения
Целью настоящего изобретения является получение новых стабильных лиофилизированных композиций ромиплостима. Поставленная цель достигается выбором концентрации активной субстанции в растворе для лиофилизации, выбором качественного и количественного состава вспомогательных веществ, условий лиофилизации.
Композиции согласно изобретению содержат ромиплостим в концентрации от 0,1 до 1,0 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации от 5 до 25 мМ (pH композиций 4-6), маннитол в концентрации от 3 до 4,5% мас./об., трегалозу в концентрации от 1,5 до 3% мас./об., полоксамер 188 в концентрации от 0,004 до 1% мас./об., где концентрация маннитола и трегалозы находится в соотношении от 1:1 до 3:1.
Функциональное назначение вспомогательных веществ: гистидин - буферный агент, маннитол - наполнитель, осмотический агент, трегалоза - стабилизатор, осмотический агент, полоксамер 188 - поверхностно-активное вещество. Разбавленная хлористоводородная кислота используется в случае необходимости для корректировки pH композиций до значений 4,0-6,0, предпочтительно 5,0.
Технический результат, достигаемый с использованием предлагаемых композиций, состоит в повышении их стабильности по сравнению с композицией, воспроизводящей состав оригинального препарата.
Стабильность композиций, а именно склонность к образованию родственных примесей, определяли методами: обращенно-фазовой ВЭЖХ (RP-HPLC), катионнообменной ВЭЖХ (CEX-HPLC), эксклюзионной ВЭЖХ (SE-HPLC) [12-14].
Метод SE-HPLC основан на разделении полипептидов по размеру, позволяет определить примеси агрегации ромиплостима (димеры, тримеры и др.). Агрегация терапевтических белков влияет на их эффективность и может вызвать иммуногенность. Согласно требованиям Международной конференции по гармонизации ICH (Q6B), агрегаты должны быть отделены от основного продукта и количественно охарактеризованы [14].
Метод CEX-HPLC основан на разделении полипептидов по суммарному заряду, позволяет выявить примеси дезамидирования и окисления метионина в ромиплостиме.
Метод RP-HPLC основан на разделении полипептидов с различной гидрофобностью, позволяет выделить дезамидированные и усеченные с N-конца формы ромиплостима.
С целью установления влияния концентрации гистидинового буфера в композициях на их стабильность были приготовлены композиции 1-4 (табл. 1). Состав композиции 1 (контроль) воспроизводит состав композиции оригинального препарата до лиофилизации. Концентрация гистидинового буфера в нем
- 2 044682 мМ. Качественный и количественный состав композиций 2-4 аналогичен составу композиции 1 за исключением молярной концентрации гистидинового буфера, которая варьирует от 5 до 25 мМ.
Таблица 1
Качественный и количественный состав композиций 1-4
| Номер композиции | 1 | 2 | 3 | 4 |
| Ромиплостим | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл |
| L-гистидин | 10 мМ | 5 мМ | 15 мМ | 25 мМ |
| Маннитол | 4 % масс./об. | 4 % масс./об. | 4 % масс./об. | 4 % масс./об. |
| Сахароза | 2 % масс./об. | 2 % масс./об. | 2 % масс./об. | 2 % масс./об. |
| Полисорбат-20 | 0,004 % масс./об. | 0,004 % масс./об. | 0,004 % масс./об. | 0,004 % масс./об. |
| Разбавленный раствор HC1 (10 %) | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 |
Приготовление композиций по примерам 1-4.
Композиции по примерам 1-4 готовили в объеме 0,5 л.
Приготовление буфера.
Предварительно готовят 0,6 л гистидинового буфера с концентрацией 5, 10, 15 или 25 мМ, в зависимости от концентрации, приведенной в табл. 1. Измеряют pH и при необходимости доводят pH раствора до 4,8-5,3 10% раствором кислоты хлористоводородной.
Приготовление раствора плацебо.
С использованием гистидинового буфера готовят 0,15 л раствора, содержащего 10 г сахарозы и 20 г маннитола. В отдельной емкости в гистидиновом буфере растворяют 20 мг полисорбата-20, доводят объем до 0,007 л. В мерную колбу объемом 0,2 л количественно переносят полученные растворы во всем приготовленном объеме. Измеряют pH, при необходимости доводят pH 10% раствором кислоты хлористоводородной до pH 4,8-5,3, далее объем доводят до 0,2 л гистидиновым буфером.
Приготовление композиций с концентрацией ромиплостима 0,5 мг/мл.
В мерную колбу вместимостью 0,5 л с навеской ромиплостима 0,2500 г, добавляют 0,26 л гистидинового буфера, перемешивают до полного растворения ромиплостима. Измеряют pH, при необходимости доводят pH до 4,8-5,3 10% раствором кислоты хлористоводородной. Прибавляют раствор плацебо во всем приготовленном объеме. Доводят объем до 0,5 л гистидиновым буфером.
Полученные растворы фильтруют через полиэфирсульфоновый фильтр 0,22 мкм, разливают в стерильных условиях по 0,75 мл (для доставляемой дозы 250 мкг) или 1,5 мл (для доставляемой дозы 500 мкг) во флаконы объемом 3 мл, предукупоривают пробками и подвергают лиофилизации. По окончании лиофилизации флаконы закупоривают алюминиевым колпачком.
Стабильность полученных лиофилизатов изучали при следующих условиях: в течение 28 суток при температуре (40±2)°C и относительной влажности (75±5)%, в течение 6 месяцев при температуре (25±2)°C и относительной влажности (60±5)%.
Результаты изучения стабильности по показателю чистота (% основного пика) методами RP-HPLC, CEX-HPLC и SE-HPLC показали, что концентрация гистидинового буфера, варьирующая от 5 до 25 мМ, не оказывает влияния на стабильность. Для дальнейших исследований был выбран 25 мМ гистидиновый буфер с наибольшей буферной емкостью для обеспечения максимальной буферной стабильности.
С целью изучения влияния замены поверхностно-активного вещества полисорбата-20 на полоксамер 188 были приготовлены композиции по примерам 6-10 (табл. 2) с качественным и количественным составом аналогичным составу композиции 4 за исключением того, что в качестве ПАВ был использован полоксамер 188 с концентрацией от 0,004% мас./об, до 1% мас./об. В качестве контроля была приготовлена композиция 5, воспроизводящая состав композиции 4.
Приготовление композиции 5 осуществляют аналогично композиции 4. Приготовление композиций 6-10 осуществляют аналогично композиции 4, за исключением того, что вместо полисорбата-20 используют полоксамер 188 в количествах, приведенных в табл. 2.
- 3 044682
Таблица 2
Качественный и количественный состав композиций 5-10
| Номер композиции | 5 (контроль) | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
| Ромиплостим | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл |
| L-гистидин | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ |
| Маннитол | 4% масс./об. | 4% масс./об. | 4 % масс./об. | 4% масс./об. | 4% масс./об. | 4% масс./об. |
| Сахароза | 2% масс./об. | 2% масс./об. | 2% масс./об. | 2% масс./об. | 2% масс./об. | 2% масс ./об. |
| Полисорбат 20 | 0,004 % масс./об | — | — | — | — | — |
| Полоксамер 188 | — | 0,004 % масс./об. | 0,05 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,1 % масс./об. | 1 % масс./об. |
| Разбавленный раствор НС1 (10%) | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 |
Стабильность полученных лиофилизатов изучали при следующих условиях: в течение 28 суток при температуре (40±2)°C и относительной влажности (75±5)%, в течение 6 месяцев при температуре (25±2)°C и относительной влажности (60±5)%. Результаты изучения стабильности по показателю чистота (% основного пика) методами RP-HPLC, CEX-HPLC и SE-HPLC (табл. 3, фиг. 1-3) показали, что при использовании полоксамера 188 в любой из концентраций (от 0,004 мас./об., до 1 мас./об.) стабильность композиций лучше, чем при использовании полисорбата 20.
Таблица 3
Результаты изучения стабильности композиций 5 - 10 по показателю Чистота,% основного вещества методами RP-HPLC, CEX-HPLC, SE-HPLC___________
| Номер композиции | (40±2)°С; (75±5) % | (25±2)°; (60±5) % | ||||
| RP-HPLC | ||||||
| 0 суток | 7 суток | 14 суток | 28 суток | 3 месяца | 6 месяцев | |
| 5 | 98,4 | 98,2 | 98,0 | 97,6 | 98,0 | 97,5 |
| 6 | 98,3 | 98,4 | 98,3 | 97,8 | 98,0 | 97,5 |
| 7 | 98,4 | 98,4 | 98,2 | 98,1 | 98,2 | 98,0 |
| 8 | 98,5 | 98,4 | 98,3 | 98,3 | 98,4 | 98,3 |
| 9 | 98,4 | 98,3 | 98,3 | 98,2 | 98,4 | 98,2 |
| 10 | 98,5 | 98,4 | 98,3 | 98,2 | 98,4 | 98,3 |
| CEX-HPLC | ||||||
| 5 | 98,4 | 98,2 | 98,1 | 97,6 | 97,5 | 97,5 |
| 6 | 98,5 | 98,4 | 98,2 | 97,9 | 98,3 | 98,0 |
| 7 | 98,5 | 98,4 | 98,3 | 98,1 | 98,3 | 98,1 |
| 8 | 98,6 | 98,4 | 98,3 | 98,4 | 98,6 | 98,5 |
| 9 | 98,5 | 98,2 | 98,3 | 98,3 | 98,5 | 98,3 |
| 10 | 98,4 | 98,4 | 98,3 | 98,3 | 98,2 | 98,2 |
| SE-HPLC | ||||||
| 5 | 99,4 | 99,2 | 99,1 | 98,6 | 99,0 | 98,5 |
| 6 | 99,5 | 99,4 | 99,2 | 98,9 | 99,3 | 99,0 |
| 7 | 99,5 | 99,3 | 99,3 | 99,1 | 99,3 | 99,1 |
| 8 | 99,5 | 99,4 | 99,3 | 99,4 | 99,5 | 99,4 |
| 9 | 99,4 | 99,3 | 99,2 | 99,2 | 99,4 | 99,3 |
| 10 | 99,4 | 99,4 | 99,3 | 99,1 | 99,3 | 99,1 |
Повышение стабильности, а именно уменьшение продуктов химической деградации ромиплостима при замене полисорбата-20 на полоксамер 188 можно объяснить тем, что полоксамер 188 вследствие отсутствия в своей химической структуре сложноэфирной связи и ненасыщенной алкильной цепи по сравнению с полисорбатом 20 менее подвержен окислению и гидролизу, вследствие чего в композициях на- 4 044682 капливается меньше реакционноспособных продуктов разложения ПАВ, взаимодействующих с ромиплостимом. Уменьшение агрегации ромиплостима при использовании полоксамера 188 обусловлено как лучшей стабильностью полоксамера 188 по сравнению с полисорбатом 20, так и повышением его концентрации. Таким образом, замена ПАВ и повышение концентрации ПАВ в составе композиций являются целесообразными. Оптимальная концентрация полоксамера 188 от 0,05 до 1% мас./об., предпочтительно 0,07% мас./об.
Следующим этапом разработки было изучение влияния замены сахарозы на трегалозу, а также определение оптимального соотношения маннитол:трегалоза при оптимальной концентрации полоксамера 188.
Готовят композиции 11-15 с различным соотношением маннитол:трегалоза, варьируя количество трегалозы и корректируя уровень маннитола так, чтобы осмолярность готовых композиций была в физиологическом диапазоне (консенсусный диапазон для подкожного введения 269-360 мОсм/кг). Осмолярность крови - около 300 мОсм/кг. По данным литературных источников для ощутимого болезненного эффекта от введения осмолярность должна составлять более 600 мОсм/кг. Принято, что препараты для инъекций должны быть приготовлены в виде изотонических растворов (осмоляльность около 300 мОсм/кг) [15,16].
Таблица 4
Качественный и количественный состав композиций 11-15
| Номер композиции | И | 12 | 13 | 14 | 15 |
| Ромиплостим | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл | 0,50 мг/мл |
| L-гистидин | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ |
| Маннитол | 4 % масс./об. | 4,5 % масс./об. | 3 % масс./об. | 1,5 % масс./об. | 2 % масс./об. |
| Трегалоза | 2 % масс./об. | 1,5 % масс./об. | 3 % масс./об. | 4,5 % масс./об. | 4 % масс./об. |
| Полоксамер 188 | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. |
| Разбавленный раствор НС1 (10 %) | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 |
Композиции 11-13 обладает лучшей стабильностью по сравнению со стабильностью композиций 110. Согласно данным, представленным в табл. 5, и как видно на фиг. 4-6, наиболее предпочтительными являются соотношения маннитол:трегалоза 2:1, 3:1 и 1:1 (композиции 11, 12 и 13). С увеличением содержания трегалозы в составе (композиции 14 и 15) чистота лиофилизата, определяемая в процессе ускоренного хранения ((25±2)°C; (60±5)%) и хранения в стресс-условиях ((40±2)°C, (75±5)%) падает, составы приобретают неудовлетворительный внешний вид.
- 5 044682
Таблица 5
Результаты изучения стабильности композиций 11-15 по показателю Чистота,% основного вещества __методами RP-HPLC, CEX-HPLC, SE-HPLC___________
| Номер композиции | (40±2)°С; (75±5) % | (25±2)°; (60±5) % | ||||
| RP-HPLC | ||||||
| 0 суток | 7 суток | 14 суток | 28 суток | 3 месяца | 6 месяцев | |
| 11 | 98,9 | 98,7 | 98,7 | 98,6 | 98,3 | 98,5 |
| 12 | 98,8 | 98,7 | 98,7 | 98,4 | 98,6 | 98,4 |
| 13 | 98,9 | 98,7 | 98,6 | 98,5 | 98,7 | 98,5 |
| 14 | 98,7 | 98,6 | 98,4 | 98,1 | 97,7 | 97,8 |
| 15 | 98,8 | 98,5 | 98,4 | 98,0 | 98,5 | 98,0 |
| CEX-HPLC | ||||||
| 11 | 98,9 | 98,8 | 98,7 | 98,7 | 98,5 | 98,6 |
| 12 | 98,8 | 98,7 | 98,6 | 98,6 | 98,7 | 98,4 |
| 13 | 98,9 | 98,7 | 98,7 | 98,5 | 98,8 | 98,5 |
| 14 | 98,8 | 98,7 | 98,5 | 98,00 | 98,5 | 97,9 |
| 15 | 98,7 | 98,6 | 98,4 | 98,1 | 98,3 | 97,8 |
| SE-HPLC | ||||||
| И | 99,6 | 99,6 | 99,4 | 99,3 | 99,5 | 99,3 |
| 12 | 99,5 | 99,4 | 99,5 | 99,3 | 99,3 | 99,1 |
| 13 | 99,5 | 99,3 | 99,2 | 99,2 | 99,3 | 99,2 |
| 14 | 99,6 | 99,3 | 99,00 | 98,6 | 99,0 | 98,8 |
| 15 | 99,5 | 99,2 | 98,9 | 98,7 | 98,3 | 98,4 |
С целью оценки влияния незначительных изменений концентрации ромиплостима в растворе до лиофилизации на стабильность были приготовлены композиции 16-19 в диапазоне концентраций ромиплостима от 0,45 до 0,55 мг/мл. Композиции 16-19 были приготовлены вышеописанным способом с качественным и количественным составом, приведенным в табл. 6. В связи с изменением концентрации активной субстанции в композициях был изменен объем раствора, помещаемый во флакон для последующей лиофилизации, таким образом, чтобы содержание активной субстанции во всех флаконах (для композиций 16-19) было равным 375 мкг.
Результаты изучения стабильности по показателю чистота (% основного пика) методами RP-HPLC, CEX-HPLC, SE-HPLC не показали статистически значимых различий между композициями 16-19.
Таблица 6
Качественный и количественный состав композиций 16-19
| Номер композиции | 16 | 17 | 18 | 19 |
| Ромиплостим | 0,45 мг/мл | 0,5 мг/мл | 0,521 мг/мл | 0,55 мг/мл |
| L-гистидин | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ | 25 мМ |
| Маннитол | 3,6 % масс./об. | 4 % масс./об. | 4,2 % масс./об. | 4,4 % масс./об. |
| Трегалоза | 1,8 | 2 масс. %/об.% | 2,1 масс.%/об.% | 2,2 масс.%/об.% |
| Полоксамер 188 | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. | 0,07 % масс./об. |
| Разбавленный раствор НС1 (10 %) | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 | до pH 5,0 |
| Объем композиции во флаконе с доставляемой дозой 250 мкг* | 0,833 мл | 0,75 мл | 0,72 мл | 0,682 мл |
* Фактическое содержание ромиплостима во флаконе с доставляемой дозой 250-375 мкг.
Композиции 11, 12, 13, 16-19 стабильны как при долгосрочном хранении в холодильнике (2-8°C) (в
- 6 044682 течение минимум 2 лет), так и при ускоренном хранении.
В процессе хранения композиций 11, 12, 13, 16-19 определяли также и специфическую биологическую активность. Определение проводили в тесте in vitro no валидированной методике. Была использована клеточная линия 32D Clone 3 трансфецированная человеческим тромбопоэтиновым рецептором. В ответ на добавление ромиплостима, дозозависимо изменялась скорость пролиферации клеток, которую детектировали методом флуоресценции.
Статистически значимых изменений в биологической активности по сравнению с исходной при хранении не происходит (см. табл. 7 и 8).
Таблица 7 Результаты определения биологической активности в процессе ускоренного хранения ((25±2)°C; (60±5)%)
| Номер композиции | % стандартной активности (от 80 до 125 %) | ||
| 0 мес. | 3 мес. | 6 мес. | |
| 11 | 108 | 98 | 119 |
| 12 | 103 | 86 | 114 |
| 13 | 99 | 101 | 109 |
| 16 | 102 | 99 | 111 |
| 17 | 98 | 101 | 117 |
| 18 | 118 | 109 | 116 |
| 19 | 92 | ИЗ | 99 |
Таблица 8
Результаты определения биологической активности в процессе долгосрочного хранения при 2-8°C
| Номер композиции | % стандартной активности (от 80 до 125 %) | |||||
| 0 мес. | 3 мес. | 6 мес. | 12 мес. | 18 мес. | 24 мес. | |
| И | 99 | 95 | 100 | 98 | 119 | 105 |
| 12 | 100 | 97 | 105 | 101 | 99 | 113 |
| 13 | 95 | 105 | 110 | 105 | 96 | 111 |
| 16 | 103 | 95 | 111 | 98 | 100 | 99 |
| 17 | 95 | 103 | 115 | 96 | 110 | 106 |
| 18 | 105 | 98 | 113 | 103 | 101 | 102 |
| 19 | 91 | 102 | 95 | 112 | 101 | 96 |
Проведена оценка стабильности предлагаемых в изобретении композиций в диапазоне концентраций ромиплостима от 0,1 до 1 мг/мл в условиях ускоренного хранения и в стресс-условиях. Было показано, что полоксамер 188 в диапазоне концентраций от 0,004 до 1% мас./об, ингибирует агрегацию и химическую деградацию во всем изученном диапазоне концентраций ромиплостима. Повышение концентрации ромиплостима выше 1 мг/мл не представляет интерес в связи с низкой дозировкой ромиплостима в клинике. Использование композиций с концентрациями ромиплостима ниже 0,5 мг/мл может способствовать более точному дозированию при розливе во флаконы, поскольку ошибка измерения объема уменьшается с увеличением измеряемого объема.
Для оценки влияния pH на стабильность были приготовлены композиции с качественным и количественным составом, соответствующим составам 17 и 18 с использованием гистидинового буфера, pH которого варьировали от 4 до 6. Изменение pH композиций в диапазоне от 4 до 6 не оказывает влияния на стабильность композиций.
- 7 044682
Список литературы.
1. Kuter D. J., Begley C. G. Recombinant human thrombopoietin: Basic biology and evaluation of clinical studies. Blood. 2002; 100 (10): 3457-3469. doi: 10.1182/blood.V 100.10.3457
2. Инструкция по применению лекарственного препарата для медицинского применения Энплейт (NPLATE). URL: http://grls.rosminzdrav.ru (дата обращения 31.05.21).
3. Mytych D. Т., Park J. К., Kim J. et al. Assessment of romiplostim immunogenicity in adult patients in clinical trials and in a global postmarketing registry. British Journal of Haematology, 2020; 190 (6), 923 - 932. https://doi.org/10.1182/blood-2018-99-113484
4. Grassi L., Cabrele C. Susceptibility of protein therapeutics to spontaneous chemical modifications by oxidation, cyclization, and elimination reactions. Amino Acids. 2019; 51: 1409-1431. https://doi.org/10.1007/s00726-019-02787-2
5. Zapadka K. L., Becher F. J., Gomes dos Santos A. L., Jackson S. E. Factors affecting the physical stability (aggregation) of peptide therapeutics. Interface Focus. 2017; 7(6):1-16 doi: 10.1098/rsfs.2017.0030
6. Аршинова О. Ю., Оборотова Н. А., Санарова Е. В. Вспомогательные вещества в технологии лиофилизации лекарственных препаратов. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2013; 1(2):20 - 25.
7. Edward Т. Maggio. Polysorbates, peroxides, protein aggregation, and immunogenicity - a growing concern. J. Excipients and Food Chern. 2012; 3 (2): 45 - 53.
8. Kerwin B. A. Polysorbates 20 and 80 Used in the Formulation of Protein Biotherapeutics: Structure and Degradation Pathways. Journal of Pharmaceutical Sciences. 2008; 97(8), 2924-2935. doi:10.1002/jps.21190
9. Frison-Norrie S., Spoms, P. Investigating the Molecular Heterogeneity of Polysorbate Emulsifiers by MALDI-TOF MS. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2001; 49(7): 3335-3340. doi:10.1021/jf010096w
10. Donbrow M., Azaz E., Pillersdorf A. Autoxidation of Polysorbates. Journal of Pharmaceutical Sciences. 1978; 67(12), 1676-1681. doi: 10.1002/jps.2600671211
11. Zhou J., Qiu J., Jiang G., Zhou C., Bingham N., Yeung H., Tressel T. Non-specific binding and saturation of Polysorbate-20 with aseptic filter membranes for drug substance and drug product during mAb production. Journal of Membrane Science. 2008; 325(2): 735-741. doi:10.1016/j.memsci.2008.08.046
12. ICH Topic QI A Stability testing of new drug substances and products.
13. ICH Topic Q5C Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products.
14. ICH Topic Q6B Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/Biological Products. CPMP/ICH/365/96 September 1999.
15. Usach I., Martinez R., Festini T., Peris J.-E. Subcutaneous Injection of Drugs: Literature Review of Factors Influencing Pain Sensation at the Injection Site. Advances in Therapy 2019; 36: 2986 - 2996. doi:10.1007/sl2325-019-01101-6
16. Wang W. Tolerability of hypertonic injectables. International Journal of Pharmaceutics.
2015; 490: 308 - 315. https://doi.Org/10.1016/j.ijpharm.2015.05.069
Перечень фигур, чертежей и иных материалов
Фиг. 1. Изучение стабильности композиций 5-10 методом RP-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
Фиг. 2. Изучение стабильности композиций 5-10 методом CEX-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
Фиг. 3. Изучение стабильности композиций 5-10 методом SE-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
Фиг. 4. Изучение стабильности композиций 11-15 методом RP-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
- 8 044682
Фиг. 5. Изучение стабильности композиций 11-15 методом CEX-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
Фиг. 6. Изучение стабильности композиций 11-15 методом SE-HPLC (условия хранения: (40±2)°C; (75±5)%).
Claims (5)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим, в виде раствора для внутривенного или подкожного введения, отличающаяся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит гистидиновый буфер, маннитол, трегалозу и полоксамер 188, гдеа) концентрация ромиплостима от 0,1 до 1,0 мг/мл;б) концентрация гистидинового буфера от 5 до 25 мМ, pH 4-6;в) концентрация маннитола от 3 до 4,5% мас./об.;г) концентрация трегалозы от 1,5 до 3% мас./об.;д) концентрация полоксамера 188 от 0,004 до 1% мас./об., где концентрация маннитола и трегалозы находится в соотношении от 1:1 до 3:1.
- 2. Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим в виде раствора для лиофилизации, отличающаяся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит гистидиновый буфер, маннитол, трегалозу, полоксамер 188, гдеа) концентрация ромиплостима от 0,1 до 1,0 мг/мл;б) концентрация гистидинового буфера от 5 до 25 мМ, pH 4-6;в) концентрация маннитола от 3 до 4,5% мас./об.;г) концентрация трегалозы от 1,5 до 3% мас./об.;д) концентрация полоксамера 188 от 0,004 до 1% мас./об., где концентрация маннитола и трегалозы находится в соотношении от 1:1 до 3:1.
- 3. Фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, чтоа) концентрация ромиплостима составляет 0,5 мг/мл;б) концентрация гистидинового буфера составляет 25 мМ, pH 4.8-5.3;в) концентрация маннитола составляет 4% мас./об.;г) концентрация трегалозы составляет 2% мас./об.;д) концентрация полоксамера 188 составляет 0,07% мас./об., где указанные концентрации представляют собой концентрации в растворе до лиофилизации.
- 4. Фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, чтоа) концентрация ромиплостима составляет 0,521 мг/мл;б) концентрация гистидинового буфера составляет 25 мМ, pH 4.8-5.3;в) концентрация маннитола составляет 4,2% мас./об.;г) концентрация трегалозы составляет 2,1% мас./об.;д) концентрация полоксамера 188 составляет 0,07% мас./об., где указанные концентрации представляют собой концентрации в растворе до лиофилизации.
- 5. Лиофилизат для приготовления раствора ромиплостима для внутривенного или подкожного введения, отличающийся тем, что получен из композиций по пп.2-4.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044682B1 true EA044682B1 (ru) | 2023-09-22 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20240058263A1 (en) | Formulations of antibody | |
| RU2381036C2 (ru) | Фармацевтический препарат, включающий антитело против рецептора egf | |
| JP5357391B2 (ja) | 液状形態及び凍結乾燥形態の免疫グロブリンｇ組成物用安定化配合物 | |
| AU2013255413A1 (en) | Pharmaceutical formulations of TNF-alpha antibodies | |
| ES2950570T3 (es) | Composición farmacéutica del complejo de proteína il-15 y usos de la misma | |
| US8178489B2 (en) | Formulation for aviptadil | |
| KR20150022854A (ko) | 데가렐릭스의 제조 방법 | |
| JPH0314520A (ja) | インターロイキン―１組成物 | |
| US10881739B2 (en) | Interleukin-11 PEGylation reaction intermediate composition | |
| AU2020311050A1 (en) | Stable formulations of recombinant proteins | |
| EA044682B1 (ru) | Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим | |
| KR20180114018A (ko) | 동결 건조된 약학적 제제 및 그의 용도 | |
| US20210101929A1 (en) | Method for stabilizing protein comprising formulations by using a meglumine salt | |
| CN103536898B (zh) | 胸腺五肽药物组合物 | |
| PT1069912E (pt) | Formulações injectáveis de igf contendo succinato como agente tampão | |
| JP2023543496A (ja) | 血管透過性の問題に対処するオートファジー阻害ペプチド及びその有機酸塩 | |
| JP2015224219A (ja) | 凍結乾燥製剤 | |
| JPWO2017164349A1 (ja) | ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ’フラグメント含有医薬組成物 | |
| CN112424347A (zh) | 治疗酸性鞘磷脂酶缺乏症的药物组合物 | |
| BR112013005697B1 (pt) | Formulação aquosa estável | |
| JPH06247870A (ja) | インターロイキン−６を含有する医薬製剤 | |
| CN116685309A (zh) | 改善的冻干制剂 | |
| WO2024114626A1 (zh) | 抗her3抗体药物偶联物组合物及其医药用途 |