EA043052B1

EA043052B1 - Анти-cd27 антитела

Info

Publication number: EA043052B1
Application number: EA201990817
Authority: EA
Inventors: Эми М. Биб; Джейсон Ка Джен Чеунг; Вероника Цзюань; Лоренс ФАЯДАТ-ДИЛМАН; Светлана САДЕКОВА; Джерелин Вонг; Тьерри Оливер Фишманн; Винифред В. ПРОСИЗЕ; Эненнам Ханс Ван; Элсас Андреа Ван; Ларс ГЮЛЕН
Original assignee: МЕРК ШАРП И ДОУМ ЭлЭлСи; Мерк Шарп и Доум Б.В.
Priority date: 2016-09-26
Filing date: 2017-09-25
Publication date: 2023-04-20

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к лечению состояний, которые могут быть ослаблены за счет стимуляции иммунного ответа, в частности, за счет стимуляции антиген-специфических Т-лимфоцитов. Различные аспекты настоящего изобретения подходят для лечения любого состояния, которое, как известно, или предположительно, может быть ослаблено за счет стимуляции CD27+ иммуноцитов или за счет ингибирования одного или более белков - иммунных контрольных точек. Состояния, подходящие для лечения с помощью изобретения, представляют собой такие состояния, которые могут быть ослаблены за счет стимуляции иммунной системы, например, инфекционные заболевания и рак. Более конкретно, настоящее изобретение относится к анти-CD27 антителам, а также к применению этих антител в лечении таких заболеваний, как рак и инфекционное заболевание.

Предпосылки создания изобретения

CD27, представитель семейства рецепторов TNF, был идентифицирован, как мембранная молекула на человеческих Т-клетках (van Lier et al., 1987, J. Immunol. 139:1589-96). Согласно современным данным CD27 имеет единственный лиганд, CD70, который также является представителем семейства TNF (Goodwin et al., 1993, Cell 73:447-56).

CD27 экспрессируется исключительно гемопоэтическими клетками, в частности клетками лимфоцитарной линии дифференцировки, то есть Т-, В- и NK-клетками. CD27 исходно был определен как костимулирующая молекула человеческих Т-клеток, которая увеличивает пролиферативный ответ на стимуляцию TCR (van Lier et al., 1987, J. Immunol. 139:1589-96). Присутствие CD70, лиганда для CD27, определяет время и персистенцию опосредованной CD27 костимуляции.

Трансгенной экспрессии CD70 в незрелых дендритных клетках было достаточно для превращения иммунологической толерантности к вирусам или опухолям в восприимчивость CD8+ Т-клеток.

Аналогично, агонистический растворимый CD70 стимулировал CD8+ Т-клеточный ответ при иммунизации таким пептидом (Rowley et al., 2004, J Immunol 172:6039-6046), и у трансгенных по CD70 мышей образование CD4+ и CD8+ эффекторных клеток в ответ на стимуляцию TCR было значительно стимулировано (Arens et al., 2001, Immunity 15:801-12; Tesselaar et al., 2003, Nat Immunol 4:49-54; Keller et al., 2008, Immunity 29:334-346). В мышиных моделях лимфомы отторжение опухолей происходило в большей степени в случае трансгенной экспрессии CD70 или инъекции антитела против CD27 мыши (Arens et al., 2003, J Exp Med 199:1595-1605; French et al., 2007, Blood 109: 4810-15; Sakanishi and Yagita, 2010, Biochem. Biophys. Res. Comm. 393:829-835; WO 2008/051424; WO 2012/004367).

В WO 2012/004367 описано первое агонистическое антитело против человеческого белка (обозначенное hCD27.15), для которого не требуется перекрестное связывание для активации опосредованной CD27 костимуляции иммунного ответа. Кроме того, описано антитело против человеческого CD27, обозначенное 1F5, которое активирует CD27 при перекрестном связывании (WO 2011/130434 и Vitale et al., Clin. Cancer Res, 2012, 18(14):3812-3821). Однако в данной области все еще сохраняется потребность в разработке антител против человеческого CD27, которые имеют улучшенные характеристики, включая способность к связыванию человеческого CD27, имеющего A59T ОНП, и CD27 яванского макака.

Сущность изобретения

Изобретение относится к анти-CD27 антителам и их антигенсвязывающим фрагментам, имеющим структурные и функциональные признаки, указанные ниже.

В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывается с CD27 человека, содержащему вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1;

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; и (iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит:

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, где X1=M;

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х₄=Т; и (iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, где X1=M.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_D примерно 5-10 нМ при определении ме

- 1 043052 тодом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антигенспецифическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной ЕС₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной ЕС₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной ЕС₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

(i) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где Х1=М;

(ii) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (iii) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X₂=N и X₃=S.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной ЕС₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_D примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антигенспецифическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В другом варианте осуществления изобретения антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие

CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, где Х1=М; или аминокислотную последовательность, отличающуюся от указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами;

CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х₄=Т, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от

- 2 043052 указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами;

CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, где X₁=M, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами;

CDR 1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где X₁=M, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами;

CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X₁=D и Х₂=Т, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами; и

CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X₁=W, X₂=N и X₃=S, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от указанной последовательности 1, 2 или 3 консервативными заменами.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антигенспецифическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной ЕС₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину ЕС₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В другом варианте осуществления изобретения антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, включает антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD27 человека, содержащее вариабельную область легкой цепи иммуноглобулина, вариабельную область тяжелой цепи иммуноглобулина или вариабельную область как легкой цепи, так и тяжелой цепи, иммуноглобулина, выбранное из группы, состоящей из антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 7 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 8 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 9 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 14 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 32 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 33 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 34 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID

- 3 043052

NO: 35 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 35 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 39 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 40 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 10-13, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от последовательностей SEQ ID N0:10-13 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из любой из SEQ ID NO: 15-18, или аминокислотную последовательность, отличающуюся от последовательностей SEQ ID NO: 15-18 1, 2 или 3 консервативными заменами; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 10 1, 2 или 3 консервативными заменами, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15 или аминокислотную последовательность, отличающуюся от SEQ ID NO: 15 1, 2 или 3 консервативными заменами. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину ЕС₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Тклетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;

(iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;

(iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

- 4 043052 (ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и .V Т;

(iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, где X1=M;

(iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где X1=M;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X2=N и X3=S.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, является гуманизированным. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9, 10, 11, 12, 13, 32, 34 и 39; и вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14, 15, 16, 17, 18, 33, 35 и 40. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с любой из SEQ ID NO: 10, 11, 12 или 13; и вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с любой из SEQ ID NO: 15, 16, 17 или 18. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных замен относительно любой из SEQ ID NO: 10, 11, 12 или 13; и вариабельную область легкой цепи, имеющую 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 аминокислотных замен относительно любой из SEQ ID NO: 15, 16, 17 или 18. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_D примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NFкВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной ЕС₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывается с CD27 человека, содержащему вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с любой из SEQ ID NO: 10, 11, 12 или 13; и вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с любой из SEQ ID NO: 15, 16, 17 или 18. В одном варианте осуществления предложенные вариации последовательностей имеют место лишь в каркасных областях антитела.

(iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность

- 5 043052

SEQ ID NO: 3;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с вариабельной областью тяжелой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9-13, и вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с вариабельной областью легкой цепи, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14-18. В данном вышеуказанном варианте осуществления вариации последовательностей имеют место в каркасных областях, и антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит:

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х₄=Т;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X₁=W, X₂=N и X₃=S. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_Dпримерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной ЕС₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной ЕС₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Тклетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В следующем варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывается с CD27 человека, содержащему вариабельную область как легкой цепи, так и тяжелой цепи, иммуноглобулина, выбранному из группы, состоящей из: антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую ами

- 6 043052 нокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 35; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 10-13, и вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-18; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15; антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи с любой из SEQ ID NO: 10-12 и вариабельную область легкой цепи с любой из SEQ ID NO: 15-17; и антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи SEQ ID NO: 13 и вариабельную область легкой цепи SEQ ID NO: 18.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антигенспецифическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной ЕС₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной ЕС₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной ЕС₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему: вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с CD27 человека.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывается с CD27 человека, содержащему: тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или ее вариант, имеющий до 25 аминокислотных замен, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8 или ее вариант, имеющий до 25 аминокислотных замен. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его

- 7 043052 фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Тклетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, может быть выделенным.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, представляет собой рекомбинантный антитело.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело может быть полноразмерным антителом.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, может представлять собой гуманизированное антитело.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, может представлять собой гуманизированное антитело, содержащее две тяжелые цепи и две легкие цепи, и, необязательно, представляет собой интактное IgG антитело. В одном варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgG. В одном варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgG1. В другом варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgG2. В другом варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgG4. В другом варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgM. В одном варианте осуществления антитело содержит константный домен тяжелой цепи с SEQ ID NO: 30 или SEQ ID NO: 28.

В другом аспекте изобретения антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где X₃=M;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X₃=W, X2=N и X3=S, и константный домен тяжелой цепи имеет изотип IgG1 или IgG4.

В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной ЕС₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антигенспецифическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 человека, с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 человека A59T, с величиной EC50 менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 резуса, с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину ЕС50 менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Тклеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека,

- 8 043052

CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное антиCD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл антиCD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению может содержать область тяжелой цепи, состоящую из:

(а) любой из вариабельных областей тяжелой цепи, описанных выше, и (b) лидерного пептида (например, лидерного пептида с SEQ ID NO: 26). В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению может содержать область легкой цепи, состоящую из:

(а) любой из вариабельных областей легкой цепи, описанных выше, и (b) лидерного пептида (например, лидерного пептида с SEQ ID NO: 27).

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, может представлять собой антитело, содержащее любую из вариабельных областей тяжелой цепи, описанных выше, и любой константный домен тяжелой цепи антитела человека. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеет изотип IgG, и содержит константный домен тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит константный домен тяжелой цепи IgG1 человека (SEQ ID NO: 30) или его вариант, который имеет до 20 аминокислотных замен относительно SEQ ID NO: 30. В другом варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит константный домен тяжелой цепи IgG4 человека, в котором была произведена замена аминокислоты в положении 228 (в соответствии с системой нумерации EU) с Ser на Pro (SEQ ID NO: 28). В другом варианте осуществления тяжелые цепи имеют изотип IgM.

В любом из вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, может содержать любую из вариабельных областей легкой цепи, описанных выше, и константный домен легкой цепи антитела человека. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит константный домен легкой цепи каппа антитела человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению имеет полную тетрамерную структуру с двумя легкими цепями и двумя тяжелыми цепями, при этом каждая легкая цепь содержит: вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константную область легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь содержит: вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константную область IgG1 человека (SEQ ID NO: 30).

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению имеет полную тетрамерную структуру с двумя легкими цепями и двумя тяжелыми цепями, при этом каждая легкая цепь содержит: вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константную область легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константную область IgM человека.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению имеет полную тетрамерную структуру с двумя легкими цепями и двумя тяжелыми цепями, при этом каждая легкая цепь содержит: вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константную область легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь содержит: вариабельную область, содержащую любую из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константную область IgG2 человека.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению содержит две легкие цепи и две тяжелые цепи, при этом каждая легкая цепь состоит из SEQ ID NO: 36; и каждая тяжелая цепь состоит из SEQ ID NO: 37.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению состоит из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, при этом каждая легкая цепь состоит из SEQ ID NO: 36 и каждая тяжелая цепь состоит из SEQ ID NO: 37.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению содержит две легкие цепи и две тяжелые цепи, при этом каждая легкая цепь состоит из SEQ ID NO: 36 и каждая тяжелая цепь состоит из SEQ ID NO: 38.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению состоит из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, при этом каждая легкая цепь состоит из SEQ ID NO: 36 и каждая тяжелая цепь состоит из SEQ ID NO: 38.

- 9 043052

В одном варианте осуществления aHTu-CD27 антитело по изобретению содержит две легкие цепи и две тяжелые цепи, при этом каждая легкая цепь состоит из вариабельной области, содержащей любую из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константного домена легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь состоит из: вариабельной области, состоящей из любой из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константной области IgM человека.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению состоит из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, при этом каждая легкая цепь состоит из: вариабельной области, содержащей любую из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константного домена легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области, состоящей из любой из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константной области IgM человека.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению содержит две легкие цепи и две тяжелые цепи, при этом каждая легкая цепь состоит из вариабельной области, состоящей из любой из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константного домена легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь состоит из: вариабельной области, содержащей любую из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константной области IgG1 человека.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело по изобретению состоит из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, при этом каждая легкая цепь состоит из: вариабельной области, состоящей из любой из SEQ ID NO: 14-18, 33, 35 и 40, и константного домена легкой цепи каппа антитела человека или легкой цепи лямбда антитела человека; и каждая тяжелая цепь состоит из: вариабельной области, содержащей любую из SEQ ID NO: 9-13, 32, 34 и 39, и константной области IgG1 человека.

В другом аспекте изобретения любое из вышеуказанных антител, или антигенсвязывающих фрагментов, имеет паттерн гликозилирования, характерный для экспрессии в клетке млекопитающего или в клетке СНО.

В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгировано с по меньшей мере одним терапевтическим средством. В одном варианте осуществления терапевтическое средство представляет собой второе антитело, или его фрагмент, иммуномодулятор, гормон, цитотоксическое средство, фермент, радиоактивный изотоп, второе антитело, конъюгированное с по меньшей мере одним иммуномодулятором, ферментом, радиоактивной меткой, гормоном, антисмысловым олигонуклеотидом или цитотоксическим средством, либо их сочетанием.

Изобретение также относится к выделенным полипептидам, содержащим любую аминокислотную последовательность из SEQ ID NO: 1-18, 32-40 и 44-45 или фрагмент любой из указанных последовательностей.

Изобретение также относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим любое из антиCD27 антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению. В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим любой из полипептидов с SEQ ID NO: 1-18, 32-40 и 44-45, при этом указанные полипептиды могут, необязательно, содержать лидерную последовательность. В другом варианте осуществления изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, содержащей SEQ ID NO: 46 или SEQ ID NO: 47, или обе последовательности. Изобретение также относится к экспрессионным векторам, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую любой из полипептидов с SEQ ID NO: 1-18, 32-40 и 44-45 (при этом указанные полипептиды могут, необязательно, содержать лидерную последовательность), или нуклеиновую кислоту, содержащую SEQ ID NO: 46 или SEQ ID NO: 47, или обе последовательности. Эти выделенные нуклеиновые кислоты и содержащие их экспрессионные векторы могут быть использованы для экспрессии антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению в рекомбинантных клетках-хозяевах. Таким образом, изобретение также относится к клеткам-хозяевам, содержащим нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из полипептидов с SEQ ID NO: 1-18, 32-40 и 44-45 (при этом указанные полипептиды могут, необязательно, содержать лидерную последовательность), или нуклеиновую кислоту, содержащую SEQ ID NO: 46 или SEQ ID NO: 47, или обе последовательности. В одном варианте осуществления клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку, клетку человека, клетку млекопитающего, клетку Pichia, растительную клетку, клетку HEK293 или клетку яичника китайского хомяка. В одном варианте осуществления клетка-хозяин представляет собой клетку яичника китайского хомяка. В одном варианте осуществления клетка-хозяин представляет собой дрожжевую клетку, например, клетку Pichia или клеткухозяина Pichia pastoris.

Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. В одном варианте осуществления композиция содержит дополнительное терапевтическое средство. В одном варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из анти-LAG3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIGIT антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-VISTA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиBTLA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIM3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CTLA4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-HVEM антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD70 антитела, или его антигенсвязывающего

- 10 043052 фрагмента; анти-ОХ40 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; aHTu-CD28 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDl антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиPDL1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-GITR антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ICOS антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-SIRPa антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; и анти-ILT5 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-4-1ВВ (CD137) антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2A антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2С антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2E антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TSLP антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ГЬ-10 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; IL-10 или пегилированного IL-10; агониста STING; антагониста CXCR2 и ингибитора PARP.

В одном варианте осуществления фармацевтических композиций по изобретению анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

Изобретение также охватывает комбинацию, включающую анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению в сочетании с одним, двумя или более терапевтическими средствами; при этом второе терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из анти-LAG3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIGIT антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-VISTA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-BTLA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIM3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CTLA4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-HVEM антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD70 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ОХ40 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD28 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PD1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиGITR антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ICOS антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-SIRPa антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT5 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-4-1ВВ антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиNKG2A антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2C антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2Е антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TSLP антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ГЬ-10 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; IL-10 или пегилированного IL-10; агониста STING; антагониста CXCR2 и ингибитора PARP.

В одном варианте осуществления комбинаций по изобретению анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и

- 11 043052 (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

Изобретение также относится к резервуару или инъекционному устройству, содержащему любое из анти-CD27 антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению. В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х4Т;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X2=N и X₃=S.

Изобретение также относится к способу получения анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, включающему: культивирование клетки-хозяина, содержащей полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь и/или легкую цепь антитела (или его антигенсвязывающего фрагмента) по изобретению, в условиях, благоприятных для экспрессии полинуклеотида; и, необязательно, извлечение антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, из клетки-хозяина и/или культуральной среды. В одном варианте осуществления полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, находятся в одном векторе. В другом варианте осуществления полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, находятся в разных векторах. В одном варианте осуществления полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, кодируют антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее:

В другом варианте осуществления изобретение относится к полинуклеотиду, кодирующему тяжелую цепь, и полинуклеотиду, кодирующему легкую цепь, из антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, которое связывается с CD27 человека, содержащего:

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность

- 12 043052

SEQ ID NO: 2, где Xi=N, X₂=T, X₃=N и Х4=Т;

(iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где X₁=M;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X₁=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X2=N и X3=S.

Изобретение также относится к способу лечения злокачественного новообразования у пациента, включающему введение пациенту эффективного количества анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, необязательно, в сочетании с дополнительным терапевтическим средством или терапевтической процедурой. В одном варианте осуществления субъект, получающий лечение, является субъектом-человеком. В одном варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из анти-LAG3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIGIT антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-VISTA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-BTLA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIM3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CTLA4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-HVEM антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD70 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ОХ40 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD28 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PD1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиPDL2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-GITR антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ICOS антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиSIRPa антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT5 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; и анти-4-1ВВ антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2А антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2C антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиNKG2E антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TSLP антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-Ш-10 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-Ш-10 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; IL-10 или пегилированного IL-10; агониста STING; антагониста CXCR2 и ингибитора PARP.

В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, где X₁=M;

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X₁=N, X₂=T, X₃=N и Х₄=Т;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х2=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность

- 13 043052

SEQ ID NO: 6, где Xi=W, X2=N и X₃=S.

В одном варианте осуществления изобретение относится к композиции, содержащей:

(i) анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению; и (ii) анти-PD1 антитело, содержащее последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 53 и последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 48.

В другом варианте осуществления изобретение относится к композиции, содержащей:

(а) анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению; и (b) анти-PD1 антитело, содержащее последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 78. В одном варианте осуществления анти-PD1 антитело вводят до введения анти-CD27 антитела.

В одном варианте осуществления анти-PD1 антитело вводят за 4-10 дней до введения анти-CD27 антитела. В одном варианте осуществления предварительное введение анти-PD1 антитела может вызывать модуляцию иммуноцитов, что приводит к усилению Fc-опосредованной функции анти-CD27 антител. В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

Изобретение также относится к способу лечения инфекции или инфекционного заболевания у субъекта, включающему введение пациенту эффективного количества антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, необязательно, в сочетании с дополнительным терапевтическим средством или терапевтической процедурой. В одном варианте осуществления субъект, получающий лечение, является субъектом-человеком. В одном варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из анти-LAG3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIGIT антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-VISTA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-BTLA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TIM3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CTLA4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-HVEM антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD70 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ОХ40 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-CD28 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PD1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-PDL2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-GITR антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ICOS антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-SIRPa антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT2 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиILT3 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT4 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-ILT5 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; и анти-4-1ВВ антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2A антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2С антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-NKG2E антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; анти-TSLP антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; антиIL-10 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента; IL-10 или пегилированного IL-10; агониста STING; антагониста CXCR2 и ингибитора PARP.

- 14 043052 (v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

(ii) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х4=Т;

(v) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и (vi) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X₂=N и X₃=S.

Изобретение также относится к вакцине, содержащей антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению. В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, содержащие:

(iii) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, где X₁=M; (iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, где X1=M;

В одном варианте осуществления вакцина дополнительно содержит антиген.

Изобретение также относится к способу обнаружения присутствия пептида CD27, или его фрагмента, в образце, включающему создание контакта образца с антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по изобретению и обнаружения присутствия комплекса между антителом, или фрагментом, и пептидом; при этом обнаружение комплекса указывает на присутствие пептида CD27. В одном варианте осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению содержит:

- 15 043052 (iv) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;

В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывается с CD27 человека, содержащему:

Изобретение также относится к способу повышения активности иммуноцита, включающему создание контакта иммуноцита с любым из антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению. В одном варианте осуществления изобретение относится к способу повышения активности иммуноцита, включающему введение пациенту, эффективного количества антитела, или антигенсвязывающих фрагментов по изобретению. В одном варианте осуществления способ используют для лечения злокачественного новообразования, лечения инфекции или инфекционного заболевания, или для добавления в вакцину адъюванта. В одном варианте осуществления повышение активности иммуноцита можно обнаруживать путем измерения пролиферации иммуноцита. Например, повышение активности Т-клетки можно обнаруживать путем измерения пролиферации Т-клетки. В одном варианте осуществления повышение активности иммуноцита можно обнаруживать путем измерения активации Т-клеток ex vivo в образце, полученном от субъекта. В одном варианте осуществления повышение активности Т-клетки определяют путем:

(i) измерения реакций смешанной культуры лимфоцитов или прямой стимуляции с помощью антиCD3 мАт сигнализации Т-клеточного рецептора (TCR) для индукции продуцирования цитокина, выбранного из группы, состоящей из: IL-2, TNFa, IL-17, IFNy, IL-1e, GM-CSF, RANTES, IL-6, IL-8, IL-5 и IL-13;

(ii) измерения индуцированного SEB продуцирования одного или более цитокинов, выбранных из группы, состоящей из: IL-2, TNFa, IL-17, IFNy, GM-CSF, RANTES, IL-6, IL-8, IL-5 и IL-13; или (iii) измерения индуцированного ТТ продуцирования цитокина, выбранного из группы, состоящей из: IL-2, TNFa, IL-17, IFNy, GM-CSF, RANTES, IL-6, IL-8, IL-5 и IL-13.

- 16 043052

SEQ ID NO: 2, где Xi=N, X₂=T, X₃=N и .V Т;

Краткое описание фигур

На фиг. 1 показано, что антитело hCD27.15 не связывается с CD27 A59T. CD27 и CD27 A59T были экспрессированы на CHO-K1 путем временной трансфекции. Связывание hCD27.15 (гуманизированные 6В) и Fc-mCD70 с CD27 и CD27 A59T измеряли методом проточной цитометрии. При том, что FcmCD70 связывает и CD27, и CD27 A59T, hCD27.15 связывает только CD27.

На фиг. 2 показано, что антитело hCD27.15 не связывается с CD27 Macaca mulatta. HsCD27 и MmCD27 были экспрессированы на CHO-K1 путем временной трансфекции. Связывание hCD27.15 (химерные с-4) с HsCD27 и MmCD27 измеряли методом проточной цитометрии.

На фиг. 3А-3В показано выравнивание вариабельных областей тяжелой цепи и легкой цепи разных анти-CD27 антител по изобретению с последовательностями зародышевой линии VH и VL:

131AVH6 (SEQ ID NO: 10), 131AVH7 (SEQ ID NO: 11), 131А, родительская VH (SEQ ID NO: 7), 131AVH8 (SEQ ID NO: 12), 131AVH9 (SEQ ID NO: 13), VH1-102 (SEQ ID NO: 64), VH1-146 ( SEQ ID NO: 65);

131AVL6 (SEQ ID NO: 15), 131AVL7 (SEQ ID NO: 16), 131A, родительская VL (SEQ ID NO: 8), 131AVL8 (SEQ ID NO: 17), 131AVL9 (SEQ ID NO: 18), VK1-02 (SEQ ID NO: 66), VK3-L6 (SEQ ID NO: 67).

На фиг. 4 показана противоопухолевая активность 131AVH6VL6-huIgG1 в сравнении с 1F5-huIgG1 у нокин-мышей по гену huCD27, несущих опухоли МС38, на основании измерения объема опухоли в течение нескольких дней после лечения.

На фиг. 5 показана противоопухолевая активность 131AVH6VL6-huIgG1 в сочетании с анти-PD-1 у нокин-мышей по гену huCD27, несущих опухоли МВ49.

Фиг. 6А-6С: hCD27.131AVH6VL6-huIgG1 индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 клетках 293FT. Клетки эмбриональной почки человека, содержащие NF-кВ-люциферазный репортерный конструкт (293FT-NF-κВ-люциферазные клетки), временно трансфицировали плазмидами, кодирующими человеческий белок ДТ, A59T или CD27 резуса. Клетки стимулировали в течение 16-20 ч в присутствии или в отсутствие антител против человеческого CD27, затем анализировали на активацию NF-кВ путем определения люциферазной активности. Показаны значения кратности изменения люциферазной активности относительно не стимулированных клеток после стимуляции клеток HEK293FT, экспрессирующих (A) hCD27 ДТ, (В) hCD27 A59T или (С) CD27 резуса, при помощи мАт hCD27.131AVH6VHL6 huIgG1, 1F5 huIgG1 или hCD27.15-4B IgG4. Данные представляют результаты измерений в тройном повторе в 1 эксперименте (+SD). Данные являются репрезентативными для 3-6 независимых экспериментов.

Фиг. 7А и 7В: Гуманизированные варианты hCD27.131A IgG1 и IgG4 индуцируют активацию NFкВ в экспрессирующих CD27 клетках 293FT. Клетки эмбриональной почки человека, содержащие NFкВ-люциферазный репортерный конструкт (293FT-NF-κВ-люциферазные клетки), временно трансфицировали плазмидой, кодирующей CD27 человека ДТ. Клетки стимулировали в течение 16-20 ч в присутствии и в отсутствие антител против человеческого CD27, затем анализировали на активацию NF-кВ путем определения люциферазной активности. Показаны значения кратности изменения люциферазной активности относительно не стимулированных клеток после стимуляции гуманизированными антителами hCD27.131A на каркасах (A) IgG1 или (В) IgG4 человека.

Фиг. 8: Биологическая активность 131AVH6VL6-IgG1 в культурах ОИЛ первичной опухоли человека. Ткани опухолей человека (N=20, 16 NSCLC, 3 RCC и 1 H&N), полученные при хирургической резекции, расщепляли до одноклеточной суспензии с использованием коллагеназы I типа и ДНКазы I. Обогащенные живые клетки, содержащие смесь опухолевых клеток разных типов, обрабатывали 0,1, 1, 10 или 20 мкг/мл 131AVH6VL6-hIgG1 в присутствии 10 нг/мл анти-CD3. Варианты обработки также включали контроль по изотипу (IgG1 и IgG4, 20 мкг/мл) и 10 мкг/мл анти-PD-1 (пембролизумаб). Супернатанты собирали для измерения уровня интерферона-гамма (IFNy) в день 6. Приведены средние уровни IFNy и стандартная ошибка среднего. P-значения для сравнения групп воздействия с группами контроля по изотипу определяли с использованием парного параметрического двустороннего критерия Стьюдента. IFNy=интерферон-гамма; IgG1=иммуноглобулин G, подкласс 1; IgG4=иммуноглобулин G, подкласс 4; SEM=стандартная ошибка среднего.

Фиг. 9: Сравнение биологической активности 131AVH6VL6-IgG1 с активностью hCD27.15-4BIgG4

- 17 043052 и IF5-IgG1 в культурах ОИЛ первичной опухоли человека. Одновременно, разделенные расщеплением человеческие опухолевые клетки 13 опухолей (12 NSCLC и 1 H&N) из 20 также тестировали с hCD27.154BIgG4 и IF5-IgG1. Обогащенные живые клетки, содержащие смесь опухолевых клеток разных типов, обрабатывали 0,1, 1, 10 или 20 мкг/мл 131AVH6VL6-hIgG1, hCD27.15-4BIgG4 и IF5-IgG1, включая контроль по изотипу (IgG1 и IgG4, 20 мкг/мл) и 10 мкг/мл контрольных анти-PD1 (пембролизумаб). Растворимые анти-CD3 в концентрации 10 нг/мл (BioLegend, клон ОКТ3) использовали для стимуляции. Супернатанты собирали для измерения уровня интерферона-гамма (IFNy) в день 6. Приведены средние уровни IFNy и стандартная ошибка среднего. P-значения для сравнения групп воздействия с группами контроля по изотипу определяли с использованием парного параметрического двустороннего критерия Стьюдента. IFNy=интерферон-гамма; IgG1=иммуноглобулин G, подкласс 1; IgG4=иммуноглобулин G, подкласс 4; SEM=стандартная ошибка среднего.

Фиг. 10: Определенное методом проточной цитометрии связывание мышиного hCD27.131A (IgG1 мыши), гуманизированного hCD27.15 (IgG4 человека, клон 6В), 1А4 (Beckman Coulter IM2034, клон 1A4CD27, IgG1 мыши), 9F4 (Sanquin PeliCluster CD27; артикульный № М1455, клон CLB-CD27/1, 9F4, IgG2a мыши) и 1F5IgG1 с аланиновыми мутантами hCD27, экспрессированными на клетках Сно-Κι. Перечислены протестированные варианты hCD27. Аминокислоты соответствуют последовательности UniProt P26842-1. Аминокислоты 1-20 соответствуют сигнальному пептиду. Связывание выражено в виде геометрического среднего сигнала FITC относительно связывания антитела с hCD27, которое было принято за 100%.

Фиг. 11: Сравнение структур комплекса 131AVH6VL6Fab-CD27 и M2177Fab-CD27 (Obmolova et al., Mol Immunol. 2017 Mar; 83:92-99, 2017): координаты показаны в виде ленты после наложения структур антигена; CD27 показан черными жирными линиями и Fab показаны тонкими линиями, черными и светло-серыми для 131AVH6VL6Fab и M2177Fab, соответственно. Координаты для комплекса M2177-CD27 взяты из PDB 5TLK с использованием цепей А, В и X для легкой цепи, тяжелой цепи Fab и антигена, соответственно.

Фиг. 12А и 12В: Сравнение структур комплекса 131AVH6VL6Fab-CD27 (А) и M2177Fab-CD27 (В) крупным планом: вводные модели и ориентация чертежа такие же, как на фиг. 11, но увеличено изображение поверхности контакта Fab-антиген для лучшего сравнительного показа. Использовано такое же представление в виде ленты, те же цвета и толщина линий, которые использованы для фиг. 11 (за исключением того, что совместная структура M2177-CD27 окрашена в светло-серый цвет), но боковые цепи остатков, вовлеченных в полярные взаимодействия, изображены палочками. Н-связи и солевые мосты с порогом отсечения по расстоянию 3,30 А показаны пунктирными линиями, с использованием более коротких штрихов для изображения солевых мостов.

Фиг. 13А и 13В: Мышиное анти-hCD27 антитело клона hCD27.131A не конкурирует с 1F5IgG1 за связывание с hCD27 в клеточных анализах ELISA. Мышиное антитело hCD27.131A и мышиное антитело hCD27.15 тестировали на конкуренцию с 1F5IgG1 за связывание с hCD27. (А) Левая панель: План эксперимента. Правая панель: Данные по конкурентному связыванию, полученные при использовании серийно разведенного 1F5IgG1, с последующим добавлением 1 мкг/мл мышиного hCD27.131A, мышиного hCD27.15 или мышиного IgG1 в качестве контроля по изотипу. (В) Левая панель: План эксперимента. Правая панель: Данные по конкурентному связыванию, полученные при использовании серийно разведенных: мышиного hCD27.131A, мышиного hCD27.15 или мышиного IgG1 в качестве контроля по изотипу, с последующим добавлением 1 мкг/мл 1F5IgG1. Точки данных с планками погрешностей представляют средние значения, измеренные в двойном повторе с диапазоном.

Фиг. 14: Биологическая активность 131AVH6VL6-hIgG1 и 1F5-hIgG1 в анализе костимуляции с первичными CD8 Т-клетками.

Подробное описание изобретения Сокращения

В тексте подробного описания и примеров изобретения использованы следующие сокращения: ADCC - Антителозависимая клеточная цитотоксичность.

CDC - Комплементзависимая цитотоксичность.

CDR - Определяющая комплементарность область в вариабельных областях иммуноглобулина, определенная с использованием системы нумерации Kabat.

СНО - Яичник китайского хомяка.

ELISA - Твердофазный иммуноферментный анализ.

FR - Каркасная область антитела: вариабельные области иммуноглобулина за исключением областей CDR.

HRP - Пероксидаза хрена.

IFN - Интерферон.

IC - Концентрация, приводящая к 50% ингибированию.

IgG - Иммуноглобулин G.

Kabat - Система выравнивания и нумерации остатков иммуноглобулинов, впервые предложенная

- 18 043052

Elvin A. Kabat ((1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5^th Ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.).

мАт или Мат или Моноклональное антитело Мат.

SEB - Стафилококковый энтеротоксин В.

TCR - Т-клеточный рецептор.

ТТ - Столбнячный анатоксин.

V - область.

Сегмент цепей Ig, последовательность которого варьируется в разных антителах. Он продолжается до остатка 107 по системе Kabat в легкой цепи и остатка 113 в тяжелой цепи.

VH - Вариабельная область тяжелой цепи иммуноглобулина.

VK - Вариабельная область легкой цепи каппа иммуноглобулина.

Определения

Для облегчения понимания изобретения ниже приведено разъяснение некоторых технических и научных терминов. Если в данном документе специально не указано иное, все другие технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то значение, которое им обычно придают специалисты в области, к которой относится данное изобретение.

При использовании в настоящем документе, включая прилагаемую формулу изобретения, термины в единственном числе включают соответствующие термины во множественном числе, если из контекста четко не следует иное.

Термины введение и воздействие применительно к животному, человеку, экспериментальному пациенту, клетке, ткани, органу или биологической жидкости означают создание контакта экзогенного фармацевтического, терапевтического, диагностического средства или композиции с животным, человеком, субъектом, клеткой, тканью, органом или биологической жидкостью. Воздействие на клетку включает создание контакта реагента с клеткой, а также создание контакта реагента с жидкостью, когда жидкость находится в контакте с клеткой. Термины введение и воздействие также означают in vitro и ex vivo воздействие, например, на клетку, реагентом, диагностическим, связывающим соединением или другой клеткой.

Термины лечить или лечение означают введение терапевтического средства, такого как композиция, содержащая любое из антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по настоящему изобретению, внутренним или внешним путем введения пациенту или пациенту, имеющему один или более симптомов заболевания, или предположительно имеющему заболевание, в отношении которого средство обладает терапевтической активностью. Как правило, средство вводят в количестве, эффективном для ослабления одного или более симптомов заболевания у получающего лечение субъекта или группы субъектов, за счет либо вызывания регрессии, либо ингибирования прогрессирования такого симптома(ов) до какой-либо клинически измеримой степени. Количество терапевтического средства, которое эффективно для ослабления какого-либо конкретного симптома заболевания, может варьироваться в зависимости от таких факторов, как состояние заболевания, возраст и масса тела пациента, а также способность лекарственного средства вызывать желательный ответ у субъекта. Произошло ли ослабление симптома, можно оценивать путем измерений любых клинических показателей, как правило, используемых врачами или другим квалифицированным медицинским персоналом для оценки степени тяжести или состояния прогрессирования симптома.

CD27

В одном из вариантов осуществления изобретения аминокислотная последовательность человеческого CD27 представляет собой аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19 или SEQ ID NO: 20 (которая идентична SEQ ID NO: 19, но содержит ОНП - A59T. Общая средняя частота встречаемости аллеля rs25680 (обычно называемого A59T) согласно базе данных ExAC составляет 19,78%.

В одном из вариантов осуществления изобретения аминокислотная последовательность CD27 яванского макака, например, Macaca fascicularis или Macaca Mulatta CD27 (mmCD27), представляет собой аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21.

Ahtu-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты

Настоящее изобретение относится к антителам, или их антигенсвязывающим фрагментам, которые связывают CD27 человека, и вариантам применения таких антител или фрагментов. В некоторых вариантах осуществления анти-CD27 антитела являются выделенными.

В некоторых вариантах осуществления анти-CD27 антитела, или антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению связывают CD27 человека (SEQ ID NO: 19 или SEQ ID NO: 20) с величиной K_D примерно 5-10 нМ. В одном варианте осуществления антитело по изобретению, которое связывается с CD27 человека, также перекрестно реагирует с mmCD27. Используемый в настоящем документе термин перекрестная реактивность означает способность антитела взаимодействовать с гомологичным белком из других биологических видов. Связывает ли антитело CD27 человека или mmCD27, можно определять с использованием любых анализов, известных в данной области. Примеры анализов, известных в данной области, для определения аффинности связывания включают анализ методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET).

- 19 043052

Настоящее изобретение относится к aHTu-CD27 антителам и способам их применения. Используемый в настоящем документе термин антитело относится к любой форме антитела, обладающей желательной биологической активностью. Таким образом, он используется в самом широком смысле и, в частности, охватывает, но не ограничивается ими, моноклональные антитела (в том числе полноразмерные моноклональные антитела, содержащие две легкие цепи и две тяжелые цепи), поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела), гуманизированные антитела, полностью человеческие антитела и химерные антитела.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 антигенсвязывающие фрагменты и способы их применения. При использовании в настоящем документе, если нет иных указаний, термины фрагмент антитела или антигенсвязывающий фрагмент означают антигенсвязывающие фрагменты антител, то есть фрагменты антител, сохраняющие способность специфически связываться с антигеном, который связывает полноразмерное антитело, например, фрагменты, которые сохраняют одну или более областей CDR. Примеры антигенсвязывающих фрагментов включают, но не ограничиваются ими, Fab, Fab', F(ab')₂ и Fv фрагменты; диатела; линейные антитела; одноцепочечные молекулы антител, например, scFv; a также мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 Fab-фрагменты и способы их применения. Fabфрагмент состоит из одной легкой цепи, а также СН1 и вариабельных областей одной тяжелой цепи. Тяжелая цепь молекулы Fab не может образовывать дисульфидную связь с другой молекулой тяжелой цепи. Fab-фрагмент может представлять собой продукт расщепления антитела папаином.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие Fc-область, а также способы их применения. Fc-область содержит два фрагмента тяжелой цепи, содержащие CH3 и CH2 домены антитела. Два фрагмента тяжелой цепи удерживаются вместе двумя или более дисульфидными связями и гидрофобными взаимодействиями CH3 доменов.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 Fab'-фрагменты и способы их применения. Fab'фрагмент содержит одну легкую цепь и часть или фрагмент одной тяжелой цепи, содержащий VH домен и СН1 домен, а также область между СН1 и СН2 доменами, так, что может быть образована межцепочечная дисульфидная связь между двумя тяжелыми цепями двух Fab'-фрагментов, с образованием молекулы F(ab')₂.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 F(ab')₂-фрагменты и способы их применения. F(ab')₂Фрагмент содержит две легкие цепи и две тяжелые цепи, содержащие часть константной области между СН1 и СН2 доменами, так, что образуется межцепочечная дисульфидная связь между двумя тяжелыми цепями. Таким образом, F(ab')₂-фрагмент состоит из двух Fab'-фрагментов, которые удерживаются вместе дисульфидной связью между двумя тяжелыми цепями. F(ab')₂-фрагмент может быть продуктом расщепления антитела пепсином.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 Fv-фрагменты и способы их применения. Fvобласть содержит вариабельные области как тяжелых, так и легких цепей, но не содержит константные области.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 scFv-фрагменты и способы их применения. Термин одноцепочечные Fv, или scFv, антитела означает фрагменты антитела, содержащие VH и VL домены антитела, причем эти домены находятся на одной полипептидной цепи. Как правило, полипептид Fv дополнительно содержит полипептидный линкер между VH и VL доменами, который позволяет scFv образовывать структуру, необходимую для связывания антигена. Для обзора, посвященного scFv, смотри Pluckthun (1994) The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds. SpringerVerlag, New York, pp. 269-315. См. также публикацию международной патентной заявки № WO 88/01649 и патенты США №№ 4946778 и 5260203.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 двухвалентные антитела и способы их применения. Двухвалентное антитело содержит два антигенсвязывающих сайта. В некоторых случаях два связывающих сайта имеют одну и ту же антигенную специфичность. Однако двухвалентные антитела могут быть биспецифическими (смотри ниже).

Настоящее изобретение включает анти-CD27 диатела и способы их применения. Используемый в настоящем документе термин диатела означает небольшие фрагменты антител с двумя антигенсвязывающими сайтами, при этом фрагменты содержат вариабельный домен тяжелой цепи (VH), связанный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) в одной и той же полипептидной цепи (VH-VL или VL-VH). В результате использования линкера, который является слишком коротким, чтобы допустить спаривание между двумя доменами на одной и той же цепи, домены вынужденно образуют пары с комплементарными доменами другой цепи, с образованием двух антигенсвязывающих сайтов. Диатела описаны более подробно, например, в EP 404097, WO 93/11161 и Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:64446448. Для обзора, посвященного рекомбинантным вариантам антител, в основном, смотри Holliger and Hudson (2005) Nat. Biotechnol. 23:1126-1136.

Как правило, антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению, которое некоторым образом модифицировано, сохраняет по меньшей мере 10% от его активности связывания (в сравнении с родительским антителом), в молярном выражении. Предпочтительно, антитело, или антигенсвязываю

- 20 043052 щий фрагмент, по изобретению сохраняет по меньшей мере 20%, 50%, 70%, 80%, 90%, 95% или 100% или более аффинности связывания для CD27 от аффинности родительского антитела. Также предусмотрено, что антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению может иметь консервативные или не консервативные аминокислотные замены (такие варианты называют консервативные варианты или функционально консервативные варианты антитела), которые существенно не изменяют его биологическую активность.

Настоящее изобретение включает выделенные анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, а также способы их применения. Выделенные антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, являются по меньшей мере частично свободными от других биологических молекул из клеток или клеточных культур, в которых они продуцируются. Такие биологические молекулы включают нуклеиновые кислоты, белки, липиды, углеводы или другой материал, такой как клеточный детрит и ростовая среда. Кроме того, выделенное антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, может быть по меньшей мере частично свободным от компонентов системы экспрессии, таких как биологические молекулы из их клетки-хозяина или ростовая среда. Как правило, термин выделенные не должен означать полное отсутствие таких биологических молекул или отсутствие воды, буферов или солей, или компонентов фармацевтического препарата, содержащего антитела или фрагменты.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 химерные антитела (например, человеческий константный домен/мышиный вариабельный домен) и способы их применения. Используемый в настоящем документе термин химерное антитело означает антитело, имеющее вариабельный домен из первого антитела и константный домен из второго антитела, при этом первое и второе антитела получены от разных биологических видов. (Патент США № 4816567; и Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855). Как правило, вариабельные домены получают из антитела экспериментального животного (родительское антитело), такого как грызун, и последовательности константного домена получают из антител человека, чтобы полученное химерное антитело с меньшей вероятностью вызывало неблагоприятный иммунный ответ у человека, чем родительское (например, мышиное) антитело.

Настоящее изобретение включает анти-CD27 гуманизированные антитела и их антигенсвязывающие фрагменты (например, крысиные или мышиные антитела, которые были гуманизированы), а также способы их применения. Изобретение включает любой гуманизированный вариант антитела 131А. В настоящем документе термины антитело 131А и hCD27.131A используют взаимозаменяемо для обозначения антитела, содержащего область VH с SEQ ID NO: 7 и область VL с SEQ ID NO: 8. Используемый в настоящем документе термин гуманизированное антитело относится к формам антител, которые содержат последовательности как человеческих, так и отличных от человеческих (например, мышиных или крысиных), антител. В целом, гуманизированное антитело будет содержать практически все из по меньшей мере одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или практически все из гипервариабельных петель соответствуют таковым из не принадлежащего человеку иммуноглобулина, а все или практически все из каркасных (FR) областей являются областями последовательности человеческого иммуноглобулина.

Гуманизированное антитело может, необязательно, содержать по меньшей мере часть константной области (Fc) человеческого иммуноглобулина. Для более подробной информации о гуманизированных антителах, см., например, Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Reichmann et al., Nature, 332:323-329 (1988); Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-596 (1992); и Clark, Immunol. Today 21: 397-402 (2000).

Как правило, структурная единица основного антитела представляет собой тетрамер. Каждый тетрамер содержит две идентичные пары полипептидных цепей, каждая пара содержит одну легкую (примерно 25 кДа) и одну тяжелую (примерно 50-70 кДа) цепь. Аминоконцевая часть каждой цепи содержит вариабельную область из примерно 100-110 или более аминокислот, играющую основную роль в узнавании антигена. Карбоксиконцевая часть тяжелой цепи может содержать константную область, играющую основную роль в эффекторной функции. Как правило, легкие цепи антитела человека классифицируют как легкие цепи каппа и лямбда. Кроме того, тяжелые цепи антитела человека, как правило, классифицируют как цепи мю, дельта, гамма, альфа или эпсилон, и они определяют изотип антитела как IgM, IgD, IgG, IgA и IgE соответственно. В составе легких и тяжелых цепей вариабельные и константные области связаны J-областью из примерно 12 или более аминокислот, при этом тяжелая цепь также содержит D-область еще из примерно 10 аминокислот. Смотри, в основном, Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W., ed., 2^nd Ed., Raven Press, N.Y. (1989).

Вариабельные области каждой пары легкой/тяжелой цепей образуют связывающий сайт антитела. Таким образом, как правило, интактное антитело имеет два связывающих сайта. За исключением бифункциональных или биспецифических антител, два связывающих сайта являются, как правило, одинаковыми.

Как правило, вариабельные домены тяжелой и легкой цепей содержат три гипервариабельные области, также называемые определяющими комплементарность областями (CDR), находящиеся среди относительно консервативных каркасных областей (FR). Области CDR, как правило, расположены в ряд с каркасными областями, что создает возможность для связывания конкретного эпитопа. Как правило, от N-конца к С-концу вариабельные домены как легкой, так и тяжелой, цепи содержат FR1, CDR1, FR2,

- 21 043052

CDR2, FR3, CDR3 и FR4. Обычно аминокислоты относят к каждому домену в соответствии с определениями, приведенными в публикациях Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al., National Institutes of Health, Bethesda, Md.; 5^th Ed.; NIH Publ. No. 91-3242 (1991); Kabat, 1978, Adv. Prot. Chem. 32:175; Kabat, et al., 1977, J. Biol. Chem. 252:6609-6616; Chothia et al., 1987, J Mol. Biol. 196:901-917 или Chothia et al., 1989, Nature 342:878-883.

Используемый в настоящем документе термин каркасные, или FR, остатки относится к остаткам вариабельного домена, отличным от остатков гипервариабельной области, определяемых в настоящем документе, как остатки CDR.

Используемый в настоящем документе термин гипервариабельная область означает аминокислотные остатки антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, которые отвечают за связывание антигена. Гипервариабельная область содержит аминокислотные остатки из CDR (то есть, CDRL1, CDRL2 и CDRL3 в вариабельном домене легкой цепи и CDRH1, CDRH2 и CDRH3 в вариабельном домене тяжелой цепи). Смотри Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5^th Ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (определение областей CDR антитела на основании последовательности); смотри также Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-917 (определение областей CDR антитела на основании структуры).

Термины выделенная молекула нуклеиновой кислоты или выделенный полинуклеотид означают полинуклеотид ДНК или РНК геномного, мРНК, кДНК или синтетического происхождения, или некоторые их сочетания, который не связан с полноразмерным, или частичным, полинуклеотидом, в котором выделенный полинуклеотид встречается в природе, или связан с полинуклеотидом, с которым он не связан в природе. Для целей настоящего изобретения следует понимать, что термин молекула нуклеиновой кислоты, содержащая конкретную нуклеотидную последовательность, не охватывает интактные хромосомы. Выделенные молекулы нуклеиновой кислоты, содержащие конкретные нуклеотидные последовательности, могут содержать, в дополнение к указанным последовательностям, кодирующие последовательности до десяти или даже до двадцати или более других белков, либо их частей или фрагментов, или могут содержать функционально связанные регуляторные последовательности, контролирующие экспрессию кодирующей области указанных нуклеотидных последовательностей, и/или могут содержать векторные последовательности.

Термин последовательности контроля относится к последовательностям ДНК, необходимым для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организмехозяине. Последовательности контроля, которые являются подходящими для прокариот, например, включают последовательность промотора, необязательно, оператора, и сайт связывания рибосомы. Известно, что в эукариотических клетках используются промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.

Нуклеиновая кислота, или полинуклеотид, является функционально связанной, когда она находится в функциональной связи с другой нуклеотидной последовательностью. Например, ДНК для предпоследовательности или секреторной лидерной последовательности функционально связана с ДНК для полипептида, если она экспрессируется в виде пребелка, который участвует в секреции полипептида; промотор или энхансер функционально связан с кодирующей последовательностью, если он влияет на транскрипцию последовательности; или сайт связывания рибосомы функционально связан с кодирующей последовательностью, если он расположен так, чтобы способствовать трансляции. Как правило, но не всегда, термин функционально связанные означает, что связанные последовательности ДНК являются смежными, и, в случае секреторной лидерной последовательности, являются смежными и в фазе считывания. Однако энхансеры не обязательно должны быть смежными. Связывание осуществляют путем лигирования в удобные сайты рестрикции. Если такие сайты отсутствуют, используют синтетические олигонуклеотидные адаптеры или линкеры в соответствии с общепринятой практикой.

В настоящем документе термины клетка, линия клеток и культура клеток используют взаимозаменяемо, и все такие определения включают клеточное потомство. Таким образом, термины трансформанты и трансформированные клетки включают первичную указанную клетку и культуры, полученные из нее, без учета количества пересевов. Следует также понимать, что не все потомки будут иметь абсолютно идентичную ДНК вследствие преднамеренных или непреднамеренных мутаций. Мутантное потомство, имеющее такую же функцию или биологическую активность, на которую был проведен скрининг исходной трансформированной клетки, охвачено данными терминами. Там, где предполагаются четкие обозначения, это будет ясно из контекста.

Используемый в настоящем документе термин последовательность зародышевой линии относится к последовательности не перегруппированных последовательностей ДНК иммуноглобулина. Можно использовать любой подходящий источник не перегруппированных последовательностей иммуноглобулина.

Последовательности зародышевой линии белков человека можно получать, например, из баз данных последовательностей зародышевой линии JOINSOLVER на вебсайте Национального института артрита и скелетно-мышечных и кожных болезней Национальных институтов здоровья США. Последовательности зародышевой линии белков мыши можно получать, например, как описано в статье Giudicelli

- 22 043052 et al., 2005, Nucleic Acids Res. 33:D256-D261.

Физические и функциональные свойства иллюстративных aHTu-CD27 антител

Настоящее изобретение относится к aHTu-CD27 антителам и их антигенсвязывающим фрагментам, имеющим указанные структурные и функциональные свойства, а также к способам применения антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, в лечении или предотвращении заболевания (например, злокачественного новообразования или инфекционного заболевания).

Анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению включает любое антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, описанное в настоящем документе (например, hCD27.131A или его гуманизированные варианты, приведенные в табл. 12), или его вариант (например, с вариантной последовательностью или функциональный вариант); любое антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, содержащее любую одну или более из областей CDR, приведенных в табл. 12.

Как указано выше, антитела и фрагменты, которые связывают тот же эпитоп, что и любое из антиCD27 антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, по настоящему изобретению, также являются частью настоящего изобретения. В одном варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывает тот же эпитоп человеческого CD27, что и антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи с SEQ ID NO: 10 и вариабельную область легкой цепи с SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое связывает тот же эпитоп человеческого CD27, что и антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи с SEQ ID NO: 7 и вариабельную область легкой цепи с SEQ ID NO: 8. Известно несколько методов картирования эпитопов антитела на антигенахмишенях, включая ВДО масс-спектрометрию, рентгеновскую кристаллографию, анализ pepscan, сканирование аланином, футпринтинг гидроксильными радикалами и сайт-направленный мутагенез. Например, ВДО (водородно-дейтериевый обмен) в сочетании с протеолизом и масс-спектрометрией можно использовать для определения эпитопов антитела на специфическом антигене Y. Метод ВДО-МС основан на точном измерении и сравнении степени включения дейтерия антигеном при инкубации в D₂O в отсутствие и в присутствии антитела к нему через разные временные интервалы. Дейтерий обменивается с водородом на амидном каркасе белков в открытых областях, в то время как области связывания антигена с антителом будут защищены и будут демонстрировать меньшую степень, или отсутствие, обмена после анализа методом ЖХ-МС/МС протеолитических фрагментов. В одном варианте осуществления эпитоп определяют путем решения методом рентгеновской дифракции кристаллической структуры комплекса между CD27, или его фрагментом, и анти-CD27 антителом, или его фрагментом, и идентификации одного или более остатков CD27, находящихся на расстоянии в пределах 4А от остатков анти-CD27 антитела. В другом варианте осуществления эпитоп включает, например, остатки CD27, которые контактируют за счет ван-дер-ваальсовых сил, полярного взаимодействия, солевых мостов или водородных связей с остатками анти-CD27 антитела. В другом варианте осуществления эпитоп определяют путем мутагенеза (например, аланин-сканирующего) остатков CD27 и анализа потери связывания с анти-CD27 антителом в результате мутагенеза.

Изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое при связывании с человеческим CD27 связывает по меньшей мере один остаток, выбранный из группы, состоящей из Leu18, Asp34, Gln35 и Lys38 в SEQ ID NO: 19. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывает по меньшей мере один, два, три или четыре остатка, выбранных из группы, состоящей из Leu18, Asp34, Gln35 и Lys38 в SEQ ID NO: 19. Изобретение также относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое при связывании с человеческим CD27 связывает по меньшей мере один остаток, выбранный из группы, состоящей из Gln35 и Lys38 в SEQ ID NO: 19. В одном варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывает по меньшей мере Gln35 и Lys38 в SEQ ID NO: 19.

В другом варианте осуществления вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, дополнительно связывает один или более остатков (один, два, три, четыре, пять или шесть остатков), выбранных из группы, состоящей из Pro8, Glu9, His11, Lys17, His36 и Arg37 в SEQ ID NO: 19. В следующем варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, дополнительно связывает один или более остатков (один, два, три или четыре остатка), выбранных из группы, состоящей из Glu9, Lys17, His36 и Arg37 в SEQ ID NO: 19. В другом аспекте изобретения антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывает остатки Pro8, Glu9, His11, Lys17, Leu18, Asp34, Gln35, His36, Arg37 и Lys38 в SEQ ID NO: 19. В следующем варианте осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывает остатки Glu9, Lys17, Leu18, Asp34, Gln35, His36, Arg37 и Lys38 в SEQ ID NO: 19.

В одном варианте осуществления вышеуказанных вариантов осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, имеет по меньшей мере одну из следующих характеристик: связывается с CD27 человека с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной EC₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в кле

- 23 043052 точном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением KD примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека клетках с величиной ЕС₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной ЕС₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀ менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC₅₀ менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Тклетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела.

Примеры иммуноглобулиновых цепей анти-CD27 антител по изобретению, а также их областей CDR, включают, но не ограничиваются ими, те, которые приведены в табл. 12 (SEQ ID NO: 7-18 и 32-40). Настоящее изобретение включает любой полипептид, содержащий, или состоящий из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 7-18 и 32-40, и 44-45, а также рекомбинантные нуклеотиды, кодирующие такие полипептиды.

В объем настоящего изобретения входят выделенные анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты (например, гуманизированные антитела), содержащие вариант иммуноглобулиновой цепи, приведенной в настоящем документе, например, любой из SEQ ID NO: 7-18, 32-40 и 44-45; при этом вариант проявляет одно или более из следующих свойств: связывается с CD27 человека с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной ЕС₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 резуса с величиной ЕС₅₀ менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_D примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 человека, с величиной EC₅₀ менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 человека A59T клетках с величиной EC₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC₅₀менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину ЕС₅₀менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CD3 продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CD3 продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CD3 антитела. В одном варианте осуществления вариант имеет 1 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 аминокислотных замен относительно любой из SEQ ID NO: 718, 32-40 и 44-45.

В других вариантах осуществления изобретение относится к антителам, или их антигенсвязывающим фрагментам, которые связывают CD27 человека (например, гуманизированным антителам) и содержат VL домены и VH домены, имеющие по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности последовательности с по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 7-18 и 32-40; при этом вариант демонстрирует желаемые параметры связывания и свойства, например связывается с CD27 человека с величиной EC50 менее 100 пМ или менее 200 пМ в клеточном анализе ELISA, связывается с CD27 человека A59T с величиной EC₅₀ менее 150 пМ или менее 250 пМ в клеточном анализе ELISA; свя

- 24 043052 зывается с CD27 резуса с величиной EC50 менее 100 пМ или менее 150 пМ в клеточном анализе ELISA; связывается с CD27 человека и CD27 человека (A59T) с двухвалентным значением K_D примерно 5-10 нМ при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET); перекрестно реагирует с CD27 яванского макака или резуса; блокирует связывание человеческого CD27 с человеческим CD70; повышает активацию Т-клеток; стимулирует антиген-специфическое продуцирование Т-клетками IL-2 и IFNy; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 человека, с величиной EC50 менее 5 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в клетках, экспрессирующих CD27 человека A59T, с величиной ЕС₅₀ менее 10 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; индуцирует активацию NF-кВ в экспрессирующих CD27 резуса клетках с величиной EC50 менее 1 нМ, когда антитело, или его фрагмент, находится в растворимой форме; имеет величину EC50 менее 0,5 нМ для связывания человеческого CD27 на CD8+ или CD4+ Т-клетках; повышает активацию CD8+ Т-клеток, находясь в растворимой форме, и увеличивает индуцируемое анти-CDS продуцирование IFNy в культуре опухоли человека. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD27 человека, CD27 человека A59T или CD27 резуса, представляют собой клетки HEK29SFT эмбриональной почки человека, содержащие плазмиды NF-кВ-люциферазного репортерного конструкта с CD27, временно введенные трансфекцией. В одном варианте осуществления активацию CD8+ Т-клеток измеряют на основании % доли CD8+ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+, и имеет место в среднем примерно 1,5-2-кратное повышение активации CD8+ Т-клеток. В другом варианте осуществления индуцированное анти-CDS продуцирование IFNy увеличивается по меньшей мере в 1,5 раза при концентрации 20 мкг/мл анти-CD27 антитела и концентрации 10 нг/мл анти-CDS антитела.

В других вариантах осуществления изобретение относится к антителам, или их антигенсвязывающим фрагментам, которые связывают CD27 человека (например, гуманизированным антителам) и содержат VL домены и VH домены, имеющие по меньшей мере 95% идентичности последовательности с любым из VL доменов с SEQ ID NO: 8, 14-18, SS, S5 и 40, и любым из VH доменов с SEQ ID NO: 7, 9-1S, S2, S4 и S9. В других вариантах осуществления изобретение относится к антителам, или их антигенсвязывающим фрагментам, которые связывают CD27 человека (например, гуманизированным антителам) и содержат VL домены и VH домены, представляющие собой любой из VL доменов с SEQ ID NO: 8, 14-18, SS, S5 и 40, и любой из VH доменов с SEQ ID NO: 7, 9-1S, S2, S4, и S9. В других вариантах осуществления изобретение относится к антителам, или их антигенсвязывающим фрагментам, которые связывают CD27 человека (например, гуманизированным антителам) и содержат VL домены и VH домены, имеющие по меньшей мере 99% идентичности последовательности с любым из VL доменов с SEQ ID NO: 8, 14-18, SS, S5 и 40, и любым из VH доменов с SEQ ID NO: 7, 9-1S, S2, S4 и S9.

Термины консервативно модифицированные варианты или консервативная замена относятся к заменам аминокислот в белке другими аминокислотами, имеющими аналогичные характеристики (например, заряд, размер боковой цепи, гидрофобность/гидрофильность, конформацию и жесткость каркаса и так далее), так что изменения часто могут быть произведены без изменения биологической активности белка. Специалисты в данной области понимают, что, как правило, одиночные аминокислотные замены в несущественных областях полипептида не приводят к значительным изменениям биологической активности (смотри, например, Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benj amin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4^th Ed.)). Кроме того, замены на структурно или функционально аналогичные аминокислоты с меньшей вероятностью приводят к нарушению биологической активности. Иллюстративные консервативные замены приведены в табл. 1.

Таблица 1. Иллюстративные консервативные аминокислотные замены

Исходный остаток	Консервативная замена
Ala (А)	Gly; Ser
Arg (R)	Lys; His
Asn (N)	Gin; His
Asp (D)	Glu; Asn
Cys (С)	Ser; Ala
Gin (Q)	Asn
Glu (E)	Asp; Gin
Gly (G)	Ala
His (H)	Asn; Gin
He (I)	Leu; Vai
Leu (L)	He; Vai
Lys (K)	Arg; His
Met (M)	Leu; He; Tyr
Phe (F)	Tyr; Met; Leu
Pro (P)	Ala

- 25 043052

Ser (S)	Thr
Thr (Т)	Ser
Trp (W)	Туг; Phe
Туг (Y)	Trp; Phe
Vai (V)	lie; Leu

Функционально консервативные варианты антител по изобретению также предусмотрены по настоящему изобретению. Используемый в настоящем документе термин функционально консервативные варианты относится к антителам, или их фрагментам, в которых один или более аминокислотных остатков были заменены без изменения желаемого свойства, такого как аффинность и/или специфичность в отношении антигена. Такие варианты включают, но не ограничиваются ими, варианты с заменой аминокислоты на аминокислоту, имеющую аналогичные свойства, например, варианты с консервативными аминокислотными заменами, приведенными в табл. 1. Также предложены выделенные полипептиды, содержащие VL домены анти-CD27 антител по изобретению (например, SEQ ID NO: 8, 14-18, 33, 35 и 40), и выделенные полипептиды, содержащие VH домены анти-CD27 антител по изобретению (например, SEQ ID NO: 7, 9-13, 32, 34 и 39), имеющие 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более аминокислотных замен.

В другом варианте осуществления предложено антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD27 и содержит VL домены и VH домены, имеющие по меньшей мере 99% 98%, 97%, 96%, 95%, 90%, 85%, 80% или 75% идентичности последовательности с одним или более из VL доменов или VH доменов, описанных в настоящем документе, и демонстрирует специфическое связывание с CD27. В другом варианте осуществления связывающее антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению содержит VL и VH домены (с сигнальной последовательностью или без нее), имеющие вплоть до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более аминокислотных замен, и демонстрирует специфическое связывание с CD27.

Полинуклеотиды и полипептиды

Настоящее изобретение также относится к полинуклеотидам, кодирующим любые из полипептидов или иммуноглобулиновых цепей анти-CD27 антител и их антигенсвязывающих фрагментов по изобретению. Например, настоящее изобретение относится к полинуклеотидам, кодирующим любые аминокислотные последовательности из SEQ ID NO: 1-18, 32-40 и 44-45. В другом варианте осуществления изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, содержащей SEQ ID NO: 46 или SEQ ID NO: 47, или обе последовательности.

В одном варианте осуществления предложен выделенный полинуклеотид, например ДНК, кодирующий полипептидные цепи выделенных антител или антигенсвязывающих фрагментов, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления выделенный полинуклеотид кодирует антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее по меньшей мере один зрелый вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL) по изобретению и/или по меньшей мере один зрелый вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) по изобретению. В некоторых вариантах осуществления выделенный полинуклеотид кодирует как легкую цепь, так и тяжелую цепь, на одной полинуклеотидной молекуле, и в других вариантах осуществления легкая и тяжелая цепи закодированы на отдельных полинуклеотидных молекулах. В другом варианте осуществления полинуклеотид также кодирует сигнальную последовательность.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VH домен, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащий CDR-H1 (SEQ ID NO: 1), CDR-H2 (SEQ ID NO: 2) и CDR-H3 (SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VL домен, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащий CDR-L1 (SEQ ID NO: 4), CDR-L2 (SEQ ID NO: 5) и CDR-L3 (SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VH домен с SEQ ID NO: 7.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VL домен с SEQ ID NO: 8.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VH домен с любой из SEQ ID NO: 10-13.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VH домен с SEQ ID NO: 10.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VL домен с любой из SEQ ID NO: 15-18.

В одном варианте осуществления изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему VL домен с SEQ ID NO: 15.

Настоящее изобретение также относится к векторам, например экспрессионным векторам, таким как плазмиды, содержащим выделенные полинуклеотиды по изобретению, при этом полинуклеотид

- 26 043052 функционально связан с последовательностями контроля, которые узнаются клеткой-хозяином, когда клетку-хозяина трансфицируют вектором. Также предложены клетки-хозяева, содержащие вектор по настоящему изобретению, и способы получения антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, или полипептида, раскрытых в настоящем документе, включающие культивирование клетки-хозяина, содержащей экспрессионный вектор или нуклеиновую кислоту, кодирующую иммуноглобулиновые цепи антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, в культуральной среде, и выделение антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, из клетки-хозяина или культуральной среды.

Настоящее изобретение также включает полипептиды, например, полипептиды иммуноглобулина, содержащие аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере примерно на 75% идентичны, 80% идентичны, более предпочтительно по меньшей мере примерно на 90% идентичны и наиболее предпочтительно по меньшей мере примерно на 95% (например, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%) идентичны с аминокислотными последовательностями антител, приведенными в настоящем документе, при сравнении с использованием алгоритма BLAST, когда параметры алгоритма выбраны для достижения наибольшего соответствия между соответствующими последовательностями по всей длине соответствующих эталонных последовательностей (например, порог ожидания: 10; размер слова: 3; максимальное количество совпадений в диапазоне запроса: 0; матрица BLOSUM 62; штрафы за делецию: внесение 11, продолжение 1; условная композиционная корректировка матрицы замен).

Идентичность последовательностей означает степень, в которой аминокислоты двух полипептидов являются одинаковыми в эквивалентных положениях при оптимальном выравнивании двух последовательностей.

Следующие литературные источники посвящены описанию алгоритмов BLAST, часто используемых для анализа последовательностей: BLAST ALGORITHMS: Altschul et al. (2005) FEBS J. 272 (20):5101-5109; Altschul, S.F., et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410; Gish, W., et al. (1993) Nature Genet. 3:266-272; Madden, T.L., et al. (1996) Meth. Enzymol. 266:131-141; Altschul, S.F., et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402; Zhang, J., et al. (1997) Genome Res. 7:649-656; Wootton, J.C., et al. (1993) Comput. Chem. 17:149-163; Hancock, J.M. et al. (1994) Comput. Appl. Biosci. 10:67-70; ALIGNMENT SCORING SYSTEMS: Dayhoff, M.O., et al., A model of evolutionary change in proteins, в: Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed.), pp. 345-352, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Schwartz, R.M., et al., Matrices for detecting distant relationships, в: Atlas of Protein Sequence and Structure (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed.), pp. 353-358, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Altschul, S.F. (1991) J. Mol. Biol. 219:555-565; States, D.J., et al. (1991) Methods 3:66-70; Henikoff, S., et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915-10919; Altschul, S.F., et al. (1993) J. Mol. Evol. 36:290-300; ALIGNMENT STATISTICS: Karlin, S., et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268; Karlin, S., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877; Dembo, A., et al. (1994) Ann. Prob. 22:2022-2039; и Altschul, S.F. Evaluating the statistical significance of multiple distinct local alignments, в: Theoretical and Computational Methods in Genome Research (S. Suhai, ed.), (1997) pp. 1-14, Plenum, New York.

Аффинность связывания

В качестве примера, но не ограничения, антитела и антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе, могут связывать CD27 человека или CD27 A59T (SEQ ID NO: 19 или SEQ ID NO: 20) с двухвалентным значением K_D, составляющим 10х10’⁹ М или ниже, при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET) и измерении с человеческим слитым белком CD27-Fc или человеческим слитым белком CD27 A59T-FC. В одном варианте осуществления антитела и антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе, могут связывать CD27 человека или CD27 A59T с двухвалентным значением K_D примерно 5-10x10’9 М при определении методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE) или аналогичным методом (например, KinExa или OCTET) и измерении с человеческим слитым белком CD27-FC или человеческим слитым белком CD27 A59T-FC.

Активация иммуноцитов

В некоторых вариантах осуществления антитела, или антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению способствуют повышению активности иммуноцита. Повышение активности иммуноцита можно обнаруживать любым методом, известным в данной области. В одном варианте осуществления повышение активности иммуноцита можно обнаруживать путем измерения пролиферации иммуноцита. Например, повышение активности Т-клетки можно обнаруживать путем измерения пролиферации Т-клетки или событий сигнальной трансдукции, таких как фосфорилирование остатков тирозина иммунных рецепторов или действующих позже киназ, которые передают сигналы регуляторам транскрипции. В других вариантах осуществления повышение активности иммуноцита можно обнаруживать путем определения цитотоксического действия CTL или NK-клеток на специфические клетки-мишени или ответов в виде продуцирования цитокина IFNy, которые связаны со стимуляцией противоопухолевого иммунитета. В других вариантах осуществления повышение активности иммуноцита можно обнаруживать путем измерения активации Т-клеток ex vivo в образце, полученном от субъекта. В одном варианте осуществления повышение активности Т-клеток определяют путем:

- 27 043052 (i) измерения индуцированного SEB (стафилококковый энтеротоксин В) продуцирования одного или более провоспалительных цитокинов, выбранных из группы, состоящей из: IL-2, TNFa, IL-17, IFNy, ΤΕ-1β, GM-CSF, RANTES, IL-6, IL-8, IL-5 и IL-13; или (ii) измерения реакций смешанной культуры лимфоцитов или прямой стимуляции с помощью антиCD3 мАт сигнализации TCR для индукции продуцирования цитокина, выбранного из группы, состоящей из: IL-2, TNFa, IL-17, IFNy, ΤΕ-1β, GM-CSF, RANTES, IL-6, IL-8, IL-5 и IL-13.

В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению будет стимулировать увеличение по меньшей мере в 1,5 раза антигенспецифического продуцирования Т-клетками IL-2 и/или IFNy.

В некоторых вариантах осуществления способность антитела, или антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению повышать активность иммуноцита можно обнаруживать по увеличению экспрессии CD25 и CD69 методом проточной цитометрии.

Способность aHTu-hCD27 антител блокировать связывание с hCD70

В некоторых вариантах осуществления анти-CD27 антитела, или антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению способны блокировать связывание человеческого CD27 с человеческим CD70. Способность блокировать связывание человеческого CD27 с человеческим CD70 можно определять любым методом, известным в данной области. В одном варианте осуществления способность антитела блокировать связывание человеческого CD27 с человеческим CD70 определяют с использованием анализа ELISA.

Способы получения антител и их антигенсвязывающих фрагментов

Таким образом, настоящее изобретение относится к способам получения анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по настоящему изобретению, включающим культивирование клеток гибридомы, экспрессирующих антитело, или фрагмент, в условиях, благоприятных для такой экспрессии, и, необязательно, выделение антитела, или фрагмента, из гибридомы и/или ростовой среды (например, культуральной среды).

Анти-CD27 антитела, раскрытые в настоящем документе, также можно получать рекомбинантными методами (например, в экспрессионной системе E. coli/T7, экспрессионной системе клеток млекопитающих или экспрессионной системе низших эукариот). В данном варианте осуществления нуклеиновые кислоты, кодирующие молекулы антитела по изобретению (например, VH или VL), могут быть вставлены в плазмиду на основе рЕТ и экспрессированы в системе E.coli/T7. Например, настоящее изобретение включает способы экспрессии антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, или его иммуноглобулиновой цепи, в клетке-хозяине (например, бактериальной клетке-хозяине, такой как E.coli, например, BL21 или BL21DE3), включающие экспрессию Т7 РНК-полимеразы в клетке, также содержащей полинуклеотид, кодирующий иммуноглобулиновую цепь, который функционально связан с промотором Т7. Например, в одном из вариантов осуществления изобретения бактериальная клетка-хозяин, такая как E.coli, содержит полинуклеотид, кодирующий Т7 РНК-полимеразу, функционально связанный с lacпромотором, и экспрессия полимеразы и цепи индуцируется путем инкубации клетки-хозяина с IPTG (изопропил-бета-D-тиогалактопиранозид).

В данной области известно несколько методов получения рекомбинантных антител. Один пример метода получения рекомбинантных антител приведен в патенте США № 4816567.

Трансформацию можно выполнять любым известным методом введения полинуклеотидов в клеткухозяина. Методы введения гетерологичных полинуклеотидов в клетки млекопитающих хорошо известны в данной области и включают опосредованную декстраном трансфекцию, осаждение фосфатом кальция, опосредованную полибреном трансфекцию, слияние протопластов, электропорацию, инкапсуляцию полинуклеотида(ов) в липосомы, биолистическую инъекцию и прямую микроинъекцию ДНК в ядро. Кроме того, молекулы нуклеиновой кислоты можно вводить в клетки млекопитающих с помощью вирусных векторов. Способы трансформации клеток хорошо известны в данной области. См., например, патенты США №№ 4399216, 4912040, 4740461 и 4959455.

Таким образом, настоящее изобретение включает рекомбинантные способы получения анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, или его иммуноглобулиновой цепи по настоящему изобретению, включающие введение полинуклеотида, кодирующего одну или более иммуноглобулиновых цепей антитела или фрагмента (например, тяжелую и/или легкую иммуноглобулиновую цепь); культивирование клетки-хозяина (например, СНО или Pichia, или Pichia pastoris) в условиях, благоприятных для такой экспрессии, и, необязательно, выделение антитела или фрагмента, или цепи из клетки-хозяина и/или среды, в которой растет клетка-хозяин.

Анти-CD27 антитела также можно синтезировать любым из способов, изложенных в патенте США № 6331415.

Эукариотические и прокариотические клетки-хозяева, включая клетки млекопитающих, в качестве хозяев для экспрессии антител или фрагментов, или иммуноглобулиновых цепей, раскрытых в настоящем документе, хорошо известны в данной области и включают многие иммортализованные линии клеток, доступные от Американской коллекции типовых культур (АТСС). К ним относятся, в частности, клетки яичника китайского хомяка (СНО), клетки NSO, клетки SP2, клетки HeLa, клетки почки новоро

- 28 043052 жденного хомяка (ВНК), клетки почки обезьяны (COS), клетки печеночно-клеточной карциномы человека (например, HepG2), клетки А549, клетки 3T3, клетки HEK-293 и целый ряд других линий клеток. Клетки-хозяева млекопитающих включают клетки человека, мыши, крысы, собаки, обезьяны, свиньи, козы, быка, лошади и хомяка. Особенно предпочтительные линии клеток выбирают, определяя линии клеток с высокими уровнями экспрессии. Другие линии клеток, которые можно использовать, включают линии клеток насекомых, такие как клетки Sf9, клетки амфибий, клетки бактерий, клетки растений и клетки грибов. Клетки грибов включают клетки дрожжей и клетки нитчатых грибов, в том числе, напри мер,

Pi chi a past oris_r Pi chi a finlandica , Pichia trehalophila , Pichia koclamae_r Pichia membranaefaciens, Pichia minuta (Ogataea minuta, Pichia lindneri), Pichia opuntiae, Pichia thermotolerans, Pichia salictaria, Pichia guercuum, Pichia pijperi, Pichia stiptis, Pichia methanolica, Pichia sp., Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces sp., Hansenula polymorpha, Kluyveromyces sp., Kluyveromyces lactis, Candida albicans , Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Trichoderma reesei, Chrysosporium lucknowense, Fusarium sp., Fusarium gramineum, Fusarium venenatum, Physcomitrella patens и Neurospora crassa, Pichia sp. , любые Saccharomyces sp. , Hansenula polymorpha, любые Kluyveromyces sp. , Candida albicans , любые Aspergillus sp. , Trichoderma reesei, Chrysosporium lucknowense, любые Fusarium sp. , Yarrowia lipolytica и Neurospora crassa.

Когда рекомбинантные экспрессионные векторы, кодирующие тяжелую цепь, либо ее антигенсвязывающую часть или фрагмент, легкую цепь и/или ее антигенсвязывающий фрагмент, вводят в клетки хозяева млекопитающих, антитела продуцируются при культивировании клеток-хозяев в течение периода времени, достаточного для экспрессии антитела или фрагмента, или цепи в клетках-хозяевах, либо секреции их в культуральную среду, в которой растут клетки-хозяева.

Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, и иммуноглобулиновые цепи можно извлекать из культуральной среды с использованием стандартных методов очистки белков. Кроме того, экспрессию антител и их антигенсвязывающих фрагментов, и иммуноглобулиновых цепей по изобретению (или других их фрагментов) в линии клеток-продуцентов можно повышать с использованием ряда известных методов. Например, использование экспрессионной системы гена глутаминсинтетазы (система GS) является общепринятым подходом для повышения экспрессии в определенных условиях. Система GS описано полностью или частично в Европейских патентах №№ 0216846, 0256055 и 0323997, и Европейской патентной заявке № 89303964.4. Таким образом, в одном из вариантов осуществления изобретения клеткихозяева млекопитающих (например, СНО) лишены гена глутаминсинтетазы и растут в отсутствие глутамина в среде, однако при этом полинуклеотид, кодирующий иммуноглобулиновую цепь, содержит ген глутаминсинтетазы, который восполняет отсутствие гена в клетке-хозяине.

Как правило, гликопротеины, продуцируемые в конкретной линии клеток или трансгенном животном, будут иметь паттерн гликозилирования, характерный для гликопротеинов, продуцируемых в линии клеток или трансгенном животном. Таким образом, конкретный паттерн гликозилирования антитела будет зависеть от конкретной линии клеток или трансгенного животного, которые используют для продуцирования антитела. Однако все антитела, закодированные молекулами нуклеиновой кислоты, предло женными в настоящем документе, или содержащие аминокислотные последовательности, предложенные в настоящем документе, включены в настоящее изобретение, независимо от паттерна гликозилирования, который антитела могут иметь. Аналогично, в конкретных вариантах осуществления антитела с паттерном гликозилирования, включающим только не фукозилированные N-гликаны, могут быть предпочтительными, поскольку показано, что такие антитела, как правило, являются более эффективными, чем их фукозилированные аналоги, как in vitro, так и in vivo (см., например, Shinkawa et al., J. Biol. Chem. 278:3466-3473 (2003); патенты США № 6946292 и 7214775). Данные антитела с не фукозилированными N-гликанами вряд ли будут иммуногенными, поскольку их углеводные структуры являются обычным компонентом популяции, существующей в IgG человеческой сыворотки.

Настоящее изобретение включает биспецифические и бифункциональные антитела и антигенсвязывающие фрагменты, имеющие специфичность связывания для CD27 и другого антигена, такого как, например, PD-1, PD-L1 или LAG-3, а также способы их применения. В одном из вариантов осуществления изобретения цепи aнти-CD27 содержат любую из последовательностей VH/VL, приведенных в табл. 12, и цепи αнти-PD1 содержат аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48 и 53 или SEQ ID NO: 78

- 29 043052 и 52 (или антигенсвязывающий фрагмент любой из указанных последовательностей). Биспецифическое или бифункциональное антитело представляет собой искусственное гибридное антитело, имеющее две разные пары тяжелая/легкая цепь и два разных сайта связывания. Биспецифические антитела можно получать разными способами, включая слияние гибридом или связывание Fab'-фрагментов. См., например, Songsivilai, et al. (1990) Clin. Exp. Immunol. 79:315-321, Kostelny, et al. (1992) J Immunol. 148:1547-1553. Кроме того, биспецифические антитела могут быть получены в виде диател (Holliger, et al. (1993) PNAS USA 90:6444-6448) или в виде янусинов (Traunecker, et al. (1991) EMBO J. 10:3655-3659 и Traunecker, et al. (1992) Int. J. Cancer Suppl. 7:51-52).

Настоящее изобретение также включает анти-CD27 антигенсвязывающие фрагменты анти-CD27 антител, раскрытых в настоящем документе. Фрагменты антитела включают F(ab)₂-фрагменты, которые могут быть получены путем ферментативного расщепления IgG, например, пепсином. Fab-фрагменты могут быть получены, например, путем восстановления F(ab)₂ дитиотреитолом или меркаптоэтиламином.

Иммуноглобулины могут быть отнесены к разным классам в зависимости от аминокислотных последовательностей константного домена их тяжелых цепей. В некоторых вариантах осуществления разные константные домены могут быть присоединены к гуманизированным областям VL и VH, полученным из областей CDR, приведенных в настоящем документе. Существуют по меньшей мере пять основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, и некоторые из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4; IgA1 и IgA2. Изобретение включает антитела и антигенсвязывающие фрагменты любого из этих классов или подклассов антител.

В одном варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, содержит константную область тяжелой цепи, например, человеческую константную область, такую как человеческая константная область тяжелой цепи γ, γ2, γ3 или γ4, или ее вариант. В другом варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, содержит константную область легкой цепи, например, человеческую константную область легкой цепи, такую как человеческая константная область легкой цепи лямбда или каппа, или ее вариант. В качестве примера, но не ограничения, человеческая константная область тяжелой цепи может представлять собой γ4, и человеческая константная область легкой цепи может представлять собой каппа. В альтернативном варианте осуществления Fc-область антитела представляет собой γ4 с мутацией Ser228Pro (Schuurman, J et. al., Mol. Immunol. 38:1-8, 2001).

В одном варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, имеет константную область тяжелой цепи подтипа IgG1. В одном варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, имеет константную область тяжелой цепи подтипа IgG2. В одном варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, имеет константную область тяжелой цепи подтипа IgG4.

Конструирование антитела

В настоящее изобретение дополнительно включены варианты осуществления, в которых анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты представляют собой рекомбинантные антитела с модификациями каркасных остатков в вариабельных доменах родительского моноклонального антитела hCD27.131A, например, для улучшения свойств антитела или фрагмента. Как правило, такие модификации каркаса осуществляют для уменьшения иммуногенности антитела или фрагмента. Это, как правило, осуществляют путем замены не находящихся в CDR остатков вариабельных доменов (то есть, каркасных остатков) в родительском антителе, или фрагменте (например, грызуна), аналогичными остатками из иммунного репертуара биологического вида, для которого будет использовано антитело, например, остатками из иммуноглобулина человека в случае терапевтических антител для человека. Такое антитело, или фрагмент, называют гуманизированным антителом или фрагментом. В некоторых случаях желательно повышать аффинность или изменять специфичность рекомбинантного (например, гуманизированного) антитела. Одним из подходов является обратная мутация одного или более каркасных остатков в соответствующие остатки последовательности зародышевой линии. Более конкретно, антитело, или фрагмент, в котором произошла соматическая мутация, может содержать каркасные остатки, отличающиеся от остатков последовательности зародышевой линии, из которой антитело получено. Такие остатки могут быть идентифицированы путем сравнения каркасных последовательностей антитела, или фрагмента, с последовательностями зародышевой линии, из которых было получено антитело, или фрагмент. Другой подход заключается в возвращении к оригинальному остатку родительского антитела (например, антитела грызуна) в одном или более положениях в рекомбинантном (например, гуманизированном) антителе, например, для восстановления аффинности связывания, которая могла быть потеряна в процессе замены каркасных остатков. (Смотри, например, патент США № 5693762, патент США № 5585089 и патент США № 5530101).

В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты являются рекомбинантными (например, гуманизированными) с модификациями в каркасе и/или областях CDR для улучшения их свойств. Такие рекомбинантные изменения могут быть основаны на результатах молекулярного моделирования. Молекулярная модель вариабельной области родительской (не принад

- 30 043052 лежащей человеку) последовательности антитела может быть сконструирована для понимания структурных особенностей антитела и использована для идентификации потенциальных областей на антителе, которые могут взаимодействовать с антигеном. Обычно области CDR определяют на основании выравнивания последовательностей иммуноглобулинов и идентификации вариабельных областей. Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al., National Institutes of Health, Bethesda, Md.; 5^th ed.; N1H Publ. No. 91-3242; Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75; Kabat, et al. (1977) J. Biol. Chem. 252:6609-6616. Chothia с соавторами тщательно изучили конформации петель в кристаллических структурах антител и предложили понятие гипервариабельные петли. Chothia, et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917 или Chothia, et al. (1989) Nature 342:878-883. Существуют различия между областями, классифицируемыми как области CDR и гипервариабельные петли. В более поздних исследованиях (Raghunathan et al. (2012) J. Mol. Recog. 25, 3, 103-113) были проанализированы несколько кристаллических комплексов антитело-антиген и установлено, что антигенсвязывающие области в антителах не обязательно точно соответствуют остаткам CDR или гипервариабельным петлям. Молекулярной моделью вариабельной области не принадлежащего человеку антитела можно руководствоваться при выборе областей, которые потенциально могут связывать антиген. На практике, потенциальные антигенсвязывающие области, определенные на основании модели, отличаются от общепринятых областей CDR или гипервариабельных петель. Для молекулярного моделирования можно использовать коммерческие научные компьютерные программы, такие как МОЕ (Chemical Computing Group). Человеческие каркасные последовательности можно выбирать на основании наилучшего соответствия последовательности антитела, не принадлежащего человеку, как в каркасных областях, так и в областях CDR. В случае FR4 (каркас 4) в VH сравнивают области VJ человеческих последовательностей зародышевой линии с соответствующей областью не принадлежащего человеку антитела. В случае FR4 (каркас 4) в VL сравнивают области J-каппа и J-лямбда человеческих последовательностей зародышевой линии с соответствующей областью не принадлежащего человеку антитела. После идентификации подходящих человеческих каркасных последовательностей области CDR прививают на выбранные человеческие каркасные последовательности. В некоторых случаях конкретные остатки на поверхности контакта VL-VH могут быть сохранены такими, как в не принадлежащей человеку (родительской) последовательности.

Молекулярные модели также можно использовать для идентификации остатков, которые потенциально могут изменять конформации CDR, и, следовательно, связывание антигена. В некоторых случаях эти остатки сохраняют такими, как в не принадлежащей человеку (родительской) последовательности. Молекулярные модели также можно использовать для идентификации экспонированных для растворителя аминокислот, что может приводить к таким нежелательным последствиям, как гликозилирование, дезамидирование и окисление. Фильтры, позволяющие оценивать вероятность создания эффективных антител, можно использовать на ранних этапах стадии разработки для устранения/сведения к минимуму этих потенциальных проблем.

Другой вид модификации каркасной области включает мутацию одного или более остатков в каркасной области, или даже в одной или более областях CDR, для удаления Т-клеточных эпитопов с целью уменьшения потенциальной иммуногенности антитела. Такой подход также называют лишением иммуногенности, он описан более подробно в патенте США № 7125689.

В конкретных вариантах осуществления будет желательной замена некоторых аминокислот, содержащих экспонированные боковые цепи, на другой аминокислотный остаток для обеспечения большей химической стабильности конечного антитела, чтобы избежать дезамидирования или изомеризации. Дезамидирование остатка аспарагина может происходить в последовательностях NG, DG, NG, NS, NA, NT, QG или QS и приводить к созданию остатка изоаспарагиновой кислоты, который вносит изгиб в полипептидную цепь и уменьшает ее стабильность (эффект изоаспарагиновой кислоты). Изомеризация может происходить в последовательностях DG, DS, DA или DT. В конкретных вариантах осуществления антитела по настоящему изобретению не содержат сайтов дезамидирования или аспарагиновой изомеризации.

Например, остаток аспарагина (Asn) может быть заменен на Gln или Ala для уменьшения вероятности образования изоаспартата в любых последовательностях Asn-Gly, особенно в CDR. Аналогичная проблема может возникать в последовательности Asp-Gly. Reissner and Aswad (2003) Cell. Mol. Life Sci. 60:1281. Образование изоаспартата может приводить к ослаблению или полному исчезновению связывания антитела с его целевым антигеном. Смотри, Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731-734. В одном варианте осуществления остаток аспарагина заменяют на остаток глутамина (Gln). Также может быть желательной замена аминокислоты, соседней с остатком аспарагина (Asn) или глутамина (Gln), для уменьшения вероятности дезамидирования, которое происходит более часто, когда небольшие аминокислоты находятся рядом с остатком аспарагина или глутамина. См., Bischoff & Kolbe (1994) J. Chromatog. 662:261. Кроме того, любые остатки метионина (как правило, экспонированные для растворителя остатки Met) в областях CDR можно заменять на Lys, Leu, Ala или Phe, или другие аминокислоты для уменьшения вероятности того, что сера метионина будет окисляться, что может приводить к уменьшению аффинности связывания антигена и, кроме того, вносить вклад в молекулярную гетерогенность в конечном препарате антитела, та же ссылка. Кроме того, для предотвращения или сведения к минимуму

- 31 043052 потенциально расщепляемых пептидных связей Asn-Pro может быть желательным изменение любых сочетаний Asn-Pro, обнаруженных в CDR, на Gln-Pro, Ala-Pro или Asn-Ala. Антитела с такими заменами впоследствии подвергают скринингу для подтверждения того, что замены не привели к уменьшению аффинности или специфичности антитела для CD27, либо другой желательной биологической активности, до неприемлемых уровней.

Таблица 2. Иллюстративные стабилизирующие варианты CDR

Остаток CDR	Последовательность стабилизирующего варианта
Asn-Gly (N-G)	Gln-Gly, Ala-Gly или Asn-Ala (Q-G), (A-G) или (N-A)
Asp-Gly (D-G)	Glu-Gly, Ala-Gly или Asp-Ala (E-G), (A-G) или (D-A)
Met (Μ)	Lys, Leu, Ala или Phe (K) , (L) , (А) или (F)
Asn (N)	Gin или Ala (Q) или (A)
Asn-Pro (N-P)	Gln-Pro, Ala-Pro или Asn-Ala (Q-P), (А-P) или (N-A)

Модификация Fc-области антитела

Антитела (например, гуманизированные антитела) и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также могут быть генетически модифицированы для внесения изменений в Fc-область, как правило, для изменения одного или более свойств антитела, таких как время полужизни в сыворотке, фиксация комплемента, связывание Fc-рецептора и/или эффекторная функция (например, антигензависимая клеточная цитотоксичность). Кроме того, антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) могут быть химически модифицированы (например, один или более химических фрагментов могут быть присоединены к антителу) или быть модифицированы для изменения паттерна гликозилирования, опять-таки, для изменения одного или более свойств антитела или фрагмента. Каждый из таких вариантов осуществления описан более подробно ниже. Нумерация остатков в Fc-области соответствует EU-индексу Kabat.

Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также включают антитела и фрагменты с Fc-областями, модифицированными (или блокированными) для изменения эффекторных функций. Смотри, например, патент США № 5624821, WO 2003/086310, WO 2005/120571, WO 2006/0057702. Такие модификации можно использовать для усиления или подавления различных реакций иммунной системы, с возможными полезными эффектами в диагностике и терапии. Изменения Fc-области включают аминокислотные изменения (замены, делеции и вставки), гликозилирование или дегликозилирование, а также добавление нескольких Fc-областей. Изменения Fc также могут приводить к изменению времени полужизни антител в случае терапевтических антител, что позволяет уменьшать частоту дозирования и, таким образом, повышать удобство и сокращать количество используемого материала. Смотри Presta, 2005, J. Allergy Clin. Immunol. 116:731, 734-35.

В одном варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) представляет собой антитело, или фрагмент, IgG4 изотипа, имеющий мутацию остатка серина на остаток пролина в положении, соответствующем положению 228 (S228P; нумерация по EU-индексу) в шарнирной области константной области тяжелой цепи. Сообщают, что данная мутация приводит к устранению гетерогенности дисульфидных мостов между тяжелыми цепями в шарнирной области (Angal et al., выше; положение 241 определено по системе нумерации Kabat).

В одном варианте осуществления изобретения шарнирная область СН1 модифицирована так, что число остатков цистеина в шарнирной области увеличено или уменьшено. Такой подход подробно описан в патенте США № 5677425. Число остатков цистеина в шарнирной области СН1 изменяют, например, для облегчения сборки легкой и тяжелой цепей, либо для увеличения или уменьшения стабильности антитела.

В другом варианте осуществления шарнирную область Fc антитела, или антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов) подвергают мутации для уменьшения биологического времени полужизни антитела, или фрагмента. Более конкретно, одну или более аминокислотных мутаций вводят в область зоны контакта доменов СН2-СНЗ Fcшарнирного фрагмента так, что у антитела, или фрагмента, нарушается связывание с стафилококковым белком А (SpA), относительно связывания естественного Fc-шарнирного домена с SpA. Такой подход описан более подробно в патенте США № 6165745.

В другом варианте осуществления антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) модифицируют для увеличения его биоло

- 32 043052 гического времени полужизни. Возможны различные подходы. Например, можно вносить одну или более из следующих мутаций: T252L, T254S, T256F, как описано в патенте США № 6277375. Альтернативно, для увеличения биологического времени полужизни антитело может быть изменено в СН1 или CL области для содержания эпитопа, связывающего рецептор реутилизации, взятого из двух петель СН2 домена Fc-области IgG, как описано в патентах США №№ 5869046 и 6121022.

В других вариантах осуществления Fc-область изменяют путем замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком для изменения эффекторной функции(ий) антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Например, одну или более аминокислот, выбранных из аминокислотных остатков 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 и 322, можно заменять другим аминокислотным остатком таким образом, что изменяется аффинность антитела для эффекторного лиганда и сохраняется антигенсвязывающая способность родительского антитела.

Эффекторный лиганд, аффинность к которому изменяется, может представлять собой, например, Fc-рецептор или компонент С1 комплемента. Такой подход описан более подробно в патентах США №№ 5624821 и 5648260.

В другом примере одна или более аминокислот, выбранных из аминокислотных остатков 329, 331 и 322, могут быть заменены другим аминокислотным остатком таким образом, что изменяется связывание антитела с C1q и/или уменьшается или устраняется комплементзависимая цитотоксичность (CDC). Такой подход описан более подробно в патенте США № 6194551.

В другом примере один или более аминокислотных остатков в аминокислотных положениях 231 и 239 изменяют, чтобы таким образом изменить способность антитела фиксировать комплемент. Такой подход более подробно описан в публикации международной патентной заявки № WO 94/29351.

В другом примере Fc-область модифицируют для уменьшения способности антитела, или антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов) опосредовать антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC) и/или для уменьшения аффинности антитела, или фрагмента, для Fcγ-рецептора за счет изменения одной или более аминокислот в следующих положениях: 238, 239, 243, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 264, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 или 439. Данный подход более подробно описан в PCT публикации WO 00/42072. Кроме того, сайты связывания на IgG1 человека для FcyRI, FcyRII, FcyRIII и FcRn были картированы, и были описаны варианты, отличающиеся более сильным связыванием (смотри Shields et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:6591-6604).

В одном варианте осуществления изобретения Fc-область модифицируют для уменьшения способности антитела по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов) опосредовать эффекторную функцию и/или для усиления противовоспалительных свойств за счет модификации остатков 243 и 264. В одном варианте осуществления Fc-область антитела или фрагмента модифицируют путем изменения остатков в положениях 243 и 264 на аланин. В одном варианте осуществления Fcобласть модифицируют для уменьшения способности антитела или фрагмента опосредовать эффекторную функцию и/или для усиления противовоспалительных свойств за счет модификации остатков 243, 264, 267 и 328.

Изменение эффекторной функции

В некоторых вариантах осуществления Fc-область анти-CD27 антитела модифицируют для увеличения или уменьшения способности антитела, или антигенсвязывающего фрагмента, опосредовать эффекторную функцию и/или для усиления/ослабления их связывания с Fcy-рецепторами (FcyR).

Используемый в настоящем документе термин эффекторная функция должен означать одно или более из: антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксической активности (ADCC), комплементопосредованной цитотоксической активности (CDC), Fc-опосредованного фагоцитоза или антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP), а также рециркуляции антитела через FcRn-рецептор.

Считается, что взаимодействие между константной областью антигенсвязывающего белка и различными Fc-рецепторами (FcR), включая FcyRI (CD64), FcyRII (CD32) и FcyRIII (CD16), опосредует эффекторные функции, такие как ADCC и CDC, антигенсвязывающего белка. Fc-рецептор также важен для перекрестного связывания антитела, что может быть важно для противоопухолевого иммунитета.

Эффекторную функцию можно измерять разными способами, в том числе, например, посредством связывания FcyRIII с клетками естественными киллерами или посредством связывания FcyRI с моноцитами/макрофагами для измерения эффекторной функции ADCC. Например, антигенсвязывающий белок по настоящему изобретению можно оценивать на эффекторную функцию ADCC в анализе с клетками естественными киллерами. Примеры таких анализов можно найти в публикациях Shields et al., 2001 J. Biol. Chem., Vol. 276, p. 6591-6604; Chappel et al., 1993 J. Biol. Chem. Vol. 268, p. 25124-25131; Lazar et al., 2006, PNAS, 103:4005-4010.

Показано, что константные области IgG1 человека, имеющие определенные мутации или измененное гликозилирование на остатке Asn297, отличаются пониженным связыванием с Fc-рецепторами. В

- 33 043052 других случаях также было показано, что мутации приводят к усилению ADCC и CDC (Lazar et al., 2006, PNAS, 103:4005-4010; Shields et al., J Biol Chem 2001, 276:6591-6604; Nechansky et al., Mol Immunol 2007, 44:1815-1817).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения такие мутации имеют место в одном или более из положений, выбранных из 239, 332 и 330 (IgG1), или в эквивалентных положениях в IgG других изотипов. Примерами соответствующих мутаций являются S239D, I332E и A330L. В одном варианте осуществления антигенсвязывающий белок по изобретению, описанный в настоящем документе, имеет мутации в положениях 239 и 332, например, S239D и I332E, или в следующем варианте осуществления имеет мутации в трех или более положениях, выбранных из 239, 332 и 330, например, S239D, I332E и A330L. (Нумерация по EU-индексу).

В альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения предложено антитело, содержащее константную область тяжелой цепи с измененным профилем гликозилирования, в результате чего антигенсвязывающий белок имеет усиленную эффекторную функцию. Например, при этом антитело имеет усиленную ADCC или усиленную CDC, или при этом оно имеет обе усиленные эффекторные функции, как ADCC, так и CDC. Примеры соответствующих методологий для получения антигенсвязывающих белков с измененным профилем гликозилирования описаны в WO 2003011878, WO 2006014679 и EP 1229125.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к не фукозилированным или афукозилированным антителам. Не фукозилированные антитела содержат в Fc-области структуру триманнозного ядра N-гликанов сложного типа без остатков фукозы. Такие антитела с модифицированным паттерном гликозилирования, лишенные остатка фукозы в ядре N-гликанов Fc-области, могут проявлять более сильную ADCC, чем фукозилированные аналоги, из-за усиления способности к связыванию FcyRIIIa.

Настоящее изобретение также относится к способу получения антитела по изобретению, включающему этапы:

а) культивирование рекомбинантной клетки-хозяина, содержащей экспрессионный вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту, описанную в настоящем документе, при этом рекомбинантная клетка-хозяин не содержит альфа-1,6-фукозилтрансферазу; и

b) извлечение антигенсвязывающего белка.

Рекомбинантная клетка-хозяин может исходно не содержать ген, кодирующий альфа-1,6фукозилтрансферазу (например, дрожжевые клетки-хозяева, такие как Pichia sp.), или может быть генетически модифицирована для инактивации гена альфа-1,6-фукозилтрансферазы. Рекомбинантные клетки-хозяева, генетически модифицированные для инактивации гена FUT8, кодирующего альфа-1,6фукозилтрансферазу, доступны.

См., например, технологическую систему POTELLIGENT™, поставляемую компанией BioWa, Inc. (Princeton, N.J.), в которой клетки CHOK1SV, лишенные функциональной копии гена FUT8, продуцируют моноклональные антитела, имеющие повышенную антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксическую (ADCC) активность, которая увеличена относительно активности идентичного моноклонального антитела, продуцируемого в клетке с функциональным геном FUT8. Аспекты технологической системы POTELLIGENT™ описаны в US 7214775, US 6946292, WO 0061739 и WO 0231240. Специалистам в данной области известны и другие соответствующие системы.

Специалисты в данной области понимают, что такие модификации могут быть использованы не только отдельно, но могут быть использованы и в сочетании с любыми другими модификациями для дополнительного усиления или ослабления эффекторной функции.

Получение антител с модифицированным гликозилированием

В другом варианте осуществления антитела, или антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) имеют конкретный паттерн гликозилирования. Например, может быть получено афукозилированное или агликозилированное антитело, или фрагмент (то есть, антитело, лишенное фукозы или гликозилирования, соответственно). Паттерн гликозилирования антитела, или фрагмента, может быть изменен, например, для повышения аффинности или авидности антитела, или фрагмента, в отношении антигена CD27. Такие модификации можно осуществлять, например, путем изменения одного или более сайтов гликозилирования в последовательности антитела или фрагмента. Например, можно производить одну или более аминокислотных замен, которые приводят к удалению одного или более сайтов гликозилирования каркаса вариабельной области, чтобы устранить гликозилирование в этом сайте. Такое агликозилирование может приводить к повышению аффинности или авидности антитела, или фрагмента, для антигена. См., например, патенты США №№ 5714350 и 6350861.

Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) могут также включать те, которые получены в клеткаххозяевах низших эукариот, в частности, клетках-хозяевах грибов, таких как дрожжи и нитчатые грибы, которые были генетически модифицированы для продуцирования гликопротеинов, имеющих паттерны гликозилирования, характерные для млекопитающих или человека (смотри, например, Choi et al. (2003)

- 34 043052

Proc. Natl. Acad. Sci. 100:5022-5027; Hamilton et al. (2003) Science 301:1244-1246; Hamilton et al. (2006) Science 313:1441-1443; Nett et al., Yeast 28(3):237-52 (2011); Hamilton et al., Curr Opin Biotechnol. Oct;18(5):387-92 (2007)). Особым преимуществом этих генетически модифицированных клеток-хозяев перед используемыми в настоящее время линиями клеток млекопитающих является способность контролировать профиль гликозилирования гликопротеинов, которые продуцируются в клетках, в результате чего могут быть получены композиции гликопротеинов, в которых преобладает конкретная структура Nгликанов (смотри, например, патент США № 7029872 и патент США № 7449308). Такие генетически модифицированные клетки-хозяева были использованы для продуцирования антител, у которых преобладают конкретные структуры N-гликанов (см., например, Li et al. (2006) Nat. Biotechnol. 24:210-215).

В конкретных вариантах осуществления антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), дополнительно включают те, которые получены в клетках-хозяевах низших эукариот и которые содержат фукозилированные и не фукозилированные гибридные и сложные N-гликаны, в том числе биссектные и полиантенные разновидности, включая, но без ограничения, такие N-гликаны, как GlcNAc (i-4)Man₃GlcNAc2; Gal ₍₁_ ₄₎ GlcNAc ₍₁_₄₎Man₃GlcNAc₂ 7 NANA₍₁_₄₎Gal ₍i-₄₎ GlcNAc ₍₁_₄₎Man₃GlcNAc₂ .

В конкретных вариантах осуществления антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, предложенные в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут включать антитела, или фрагменты, имеющие по меньшей мере один гибридный N-гликан, выбранный из группы, состоящей из GlcNAcMan₅GlcNAc₂; GalGlcNAcMan₅GlcNAc₂ и NANAGalGlcNAcMan₅GlcNAc₂.

В конкретных аспектах гибридный N-гликан является преобладающим видом N-гликанов в композиции.

В конкретных вариантах осуществления антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, предложенные в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), включают антитела и фрагменты, имеющие по меньшей мере один сложный N-гликан, выбранный из группы, состоящей из

GlcNAcMan₃GlcNAc₂; GalGlcNAcMan₃GlcNAc₂; NANAGalGlcNAcMan₃GlcNAc₂;

GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂; GalGlcNAc₂Man₃GlcNAc₂; Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ ;

NANAGal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ и NANA₂Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂.

В конкретных аспектах сложный N-гликан является преобладающим видом N-гликанов в композиции. В следующих аспектах сложный N-гликан представляет собой определенный вид N-гликана, составляющий примерно 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или 100% от сложных N-гликанов в композиции. В одном варианте осуществления антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, предложенные в настоящем документе, содержат сложные N-гликаны, при этом по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или 100% сложных N-гликанов содержат структуру NANA₂Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc_2j причем такая структура является афукозилированной. Такие структуры могут быть получены, например, в рекомбинантных клетках-хозяевах Pichia pastoris.

В конкретных вариантах осуществления N-гликан является фукозилированным. Как правило, фукоза находится в а1,3-связи с GlcNAc на восстанавливающем конце N-гликана, а1,6-связи с GlcNAc на восстанавливающем конце N-гликана, а1,2-связи с Gal на невосстанавливающем конце N-гликана, α1,3связи с GlcNac на невосстанавливающем конце N-гликана или α 1,4-связи с GlcNAc на невосстанавливающем конце N-гликана.

Таким образом, в конкретных аспектах вышеуказанных композиций гликопротеинов гликоформа включает а1,3-связанную или а1,6-связанную фукозу, с образованием гликоформы, выбранной из группы, состоящей из

Man₅GlcNAc₂(Fuc), GlcNAcMan₅GlcNAc₂(Fuc),

Man₃GlcNAc₂ (Fuc) , GlcNAcMan₃GlcNAc₂ (Fuc) , GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ (Fuc) , GalGlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ (Fuc) , Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ (Fuc) ,

NANAGal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ (Fuc) и NANA₂Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ ( Fuc) ;

а1,3-связанную или а1,4-связанную фукозу, с образованием гликоформы, выбранной из группы, состоящей из

GlcNAc (Fuc)Man₅GlcNAc₂, GlcNAc ( Fuc) Man₃GlcNAc₂, GlcNAc^FuCi- ₂) Man₃GlcNAc₂, GalGlcNAc₂ ( Fuci-₂ ) Man₃GlcNAc₂, Gal₂GlcNAc₂ ( Fucl- ) Man₃GlcNAc₂, NANAGal₂GlcNAc₂ ( Fuc^) Man₃GlcNAc₂ и

NANA₂Gal₂GlcNAc₂ (Fuci~₂) Man₃GlcNAc₂;

или а1,2-связанную фукозу, с образованием гликоформы, выбранной из группы, состоящей из Gal (Fuc) GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂, Gal₂ (Fuc₄_₂) GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂,

NANAGal₂ (Fuc^) GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ и N7WA₂Gal₂(Fuc₁_ ₂) GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂.

- 35 043052

В следующих аспектах антитела (например, гуманизированные антитела), или их антигенсвязывающие фрагменты, содержат высокоманнозные N-гликаны, включая, но без ограничения,

Man₈GlcNAc2 л Man₇GlcNAc2, Man₆GlcNAc₂, Man₅GlcNAc2 < Man₄GlcNAc2, или N-гликаны, состоящие из N-гликановой структуры Man₃GlcNAc2.

В следующих аспектах вышеописанные сложные N-гликаны дополнительно включают фукозилированные и не фукозилированные биссектные и полиантенные разновидности.

В настоящем документе термины N-гликан и гликоформа используются взаимозаменяемо и относятся к N-связанному олигосахариду, например, присоединенному с помощью аспарагин-Nацетилглюкозаминовой связи к остатку аспарагина полипептида. N-связанные гликопротеины содержат остаток N-ацетилглюкозамина, связанный с атомом азота амидной группы остатка аспарагина в белке. Преобладающими сахарами на гликопротеинах являются глюкоза, галактоза, манноза, фукоза, Nацетилгалактозамин (GalNAc), N-ацетилглюкозамин (GlcNAc) и сиаловая кислота (например, Nацетилнейраминовая кислота (NANA)). Процессинг сахарных групп происходит котрансляционно в просвете ЭР и продолжается посттрансляционно в аппарате Гольджи в случае N-связанных гликопротеинов.

N-гликаны имеют общее пентасахаридное ядро из Man₃GlcNAc2 (Man означает маннозу; Glc означает глюкозу и NAc означает N-ацетил; GlcNAc означает N-ацетилглюкозамин). Как правило, Nгликановые структуры представляют с невосстанавливающим концом слева и восстанавливающим концом справа. Восстанавливающий конец N-гликана представляет собой конец, который присоединен к остатку Asn, входящему в сайт гликозилирования на белке. N-гликаны различаются в зависимости от числа ветвей (антенн), содержащих периферические сахара (например, GlcNAc, галактозу, фукозу и сиаловую кислоту), которые дополняют структуру ядра из Man₃GlcNAc2 (Man₃), также называемую триманнозным ядром, пентасахаридным ядром или пауциманнозным ядром. N-гликаны классифицируют по их разветвленным компонентам (например, высокоманнозные, сложные или гибридные). N-гликан высокоманнозного типа имеет пять или более остатков маннозы.

N-гликан сложного типа, как правило, имеет по меньшей мере один GlcNAc, присоединенный к 1,3-маннозному плечу, и по меньшей мере один GlcNAc, присоединенный к 1,6-маннозному плечу триманнозного ядра. Сложные N-гликаны также могут содержать остатки галактозы (Gal) или Nацетилгалактозамина (GalNAc), которые, необязательно, модифицированы сиаловой кислотой или производными (например, NANA или NeuAc, где Neu означает нейраминовую кислоту и Ас означает ацетил). Сложные N-гликаны также могут иметь внутрицепочечные замены, включающие биссектный GlcNAc и фукозу ядра (Fuc). Сложные N-гликаны также могут иметь несколько антенн на триманнозном ядре, их часто называют полиантенные гликаны. Гибридный N-гликан содержит по меньшей мере один GlcNAc на конце 1,3-маннозного плеча триманнозного ядра и ноль или более остатков маннозы на 1,6-маннозном плече триманнозного ядра. Различные N-гликаны также называют гликоформами.

Применительно к сложным N-гликанам термины G-2, G-1, G0, G1, G2, A1 и A2 означают следующее:

G-2 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как Man₃GlcNAc₂;

термин G-1 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как GlcNAcMan₃GlcNAc₂ ;

термин G0 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂;

термин G1 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как GalGlcNAc₂Man₃GlcNAc₂;

термин G2 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂;

термин А1 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как NANAGal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂ ;

и термин А2 означает N-гликановую структуру, которая может быть охарактеризована как NANA₂Gal₂GlcNAc₂Man₃GlcNAc₂.

Если нет иных указаний, термины G-2, G-1, G0, G1, G2, А1 и А2 означают виды Nгликанов, которые лишены остатков фукозы, присоединенных к остатку GlcNAc на восстанавливающем конце N-гликана. Если термин включает F, то F указывает на то, что вид N-гликана содержит остаток фукозы на остатке GlcNAc на восстанавливающем конце N-гликана. Например, все из обозначений G0F, G1F, G2F, A1F и A2F указывают на то, что N-гликан дополнительно содержит остаток фукозы, присоединенный к остатку GlcNAc на восстанавливающем конце N-гликана. Низшие эукариоты, такие как дрожжи и нитчатые грибы, обычно не продуцируют N-гликаны, содержащие фукозу.

В случае полиантенных N-гликанов термин полиантенный N-гликан означает N-гликаны, которые дополнительно содержат остаток GlcNAc на остатке маннозы, входящем в невосстанавливающий конец 1,6-плеча или 1,3-плеча N-гликана, или остаток GlcNAc на каждом из остатков маннозы, входящих в не

- 36 043052 восстанавливающий конец 1,6-плеча или 1,3-плеча N-гликана. Таким образом, полиантенные N-гликаны могут иметь формулы

GlcNAc ₍2-4)Man₃GlcNAc2, Gal ₍i-₄₎ GlcNAc (₂-4)Man₃GlcNAc₂ или NANA₍i-

4) Gal (1-4) GlcNAc ₍₂-4)Man₃GlcNAc₂ .

Термин 1-4 означает 1, 2, 3 или 4 остатка.

В случае биссектных N-гликанов термин биссектный N-гликан означает N-гликаны, в которых остаток GlcNAc связан с остатком маннозы на восстанавливающем конце N-гликана. Биссектный Nгликан может иметь формулу GlcNAc₃Man₃GlcNAc₂, где каждый остаток маннозы связан на невосстанавливающем конце с остатком GlcNAc. Напротив, если полиантенный N-гликан имеет формулу GlcNAc₃Man₃GlcNAc₂, формула указывает на то, что два остатка GlcNAc связаны с остатком маннозы на невосстанавливающем конце одного из двух плеч N-гликанов и один остаток GlcNAc связан с остатком маннозы на невосстанавливающем конце другого плеча N-гликана.

Физические свойства антител

Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут дополнительно содержать один или более сайтов гликозилирования в вариабельной области либо легкой, либо тяжелой цепи иммуноглобулина. Такие сайты гликозилирования могут приводить к повышению иммуногенности антитела, или фрагмента, или изменению рК антитела вследствие изменения связывания антигена (Marshall et al. (1972) Annu Rev Biochem 41:673-702; Gala and Morrison (2004) J. Immunol 172:5489-94; Wallick et al. (1988) J. Exp. Med. 168:1099-109; Spiro (2002) Glycobiology 12:43R-56R; Parekh et al. (1985) Nature 316:452-7; Mimura et al. (2000) Mol. Immunol 37:697-706). Известно, что гликозилирование имеет место на фрагментах, содержащих последовательность N-X-S/T.

Каждое антитело, или антигенсвязывающий фрагмент (например, 131А или его гуманизированные варианты), будет иметь уникальную изоэлектрическую точку (pI), которая, как правило, попадает в диапазон pH от 6 до 9,5. Значение pI для IgG1 антитела, как правило, попадает в диапазон pH 7-9,5 и значение pI для IgG4 антитела, как правило, попадает в диапазон pH 6-8.

Каждое антитело, или антигенсвязывающий фрагмент (например, 131А или его гуманизированные варианты), будет иметь характерную температуру плавления, при этом более высокая температура плавления свидетельствует о более высокой общей стабильности in vivo (Krishnamurthy R. and Manning MC (2002) Curr Pharm Biotechnol 3:361-71). Как правило, T_M1 (температура начального разворачивания) может быть более 60°С, более 65°С или более 70°С. Температуру плавления антитела, или фрагмента, можно измерять методом дифференциальной сканирующей калориметрии (Chen et al. (2003) Pharm Res 20:1952-60; Ghirlando et al. (1999) Immunol Lett 68:47-52) или кругового дихроизма (Murray et al. (2002) J. Chromatogr Sci 40:343-9).

В следующем варианте осуществления выбирают антитела и их антигенсвязывающие фрагменты (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), которые не распадаются быстро. Распад антитела, или фрагмента, можно измерять методом капиллярного электрофореза (КЭ) и МАЛДИ-МС (Alexander A.J. and Hughes DE (1995) Anal Chem 67:3626-32).

В следующем варианте осуществления выбирают антитела (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) и их антигенсвязывающие фрагменты, имеющие минимальные эффекты агрегации, которая может приводить к инициации нежелательного иммунного ответа и/или измененным или неблагоприятным фармакокинетическим свойствам. Как правило, приемлемыми являются антитела и фрагменты с агрегацией 25% или менее, 20% или менее, 15% или менее, 10% или менее, или 5% или менее. Агрегацию можно определять несколькими методами, включая эксклюзионную хроматографию (ЭХ) на колонке, высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и рассеяние света.

Конгьюгаты антител

Ahtu-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также могут быть конъюгированы с химическим фрагментом. Химический фрагмент может представлять собой, в частности, полимер, радиоактивный изотоп или цитотоксический фактор. В конкретных вариантах осуществления химический фрагмент представляет собой полимер, который увеличивает время полужизни антитела или фрагмента в организме субъекта. Подходящие полимеры включают, без ограничения, гидрофильные полимеры, которые включают, но не ограничиваются ими, полиэтиленгликоль (ПЭГ) (например, ПЭГ с молекулярной массой 2 кДа, 5 кДа, 10 кДа, 12 кДа, 20 кДа, 30 кДа или 40 кДа), декстран и монометоксиполиэтиленгликоль (мПЭГ). В публикации Lee, et al. (1999) (Bioconj. Chem. 10:973-981) описаны конъюгированные с ПЭГ одноцепочечные антитела. В публикации Wen, et al. (2001) (Bioconj. Chem. 12:545-553) описана конъюгация антител с ПЭГ, который связан с хелатором радиоактивных металлов (диэтилентриаминпентауксусной кислотой (ДТПК)).

Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также могут быть конъюгированы с метками, такими как ⁹⁹Тс, ⁹⁰Y, ^mIn, ³²Р, ¹⁴С, ¹²⁵I, ³Н, ¹³¹I, ^ПС, ¹⁵О, ¹³N, ¹⁸F, ³⁵S, ⁵¹Cr, ⁵⁷To, ²²⁶Ra, ⁶⁰Co, ⁵⁹Fe, ⁵⁷Se, ¹⁵²Eu, ⁶⁷Cu,

- 37 043052 ²¹⁷Ci, ²¹¹At, ²¹²Pb, ⁴⁷Sc, ¹⁰⁹Pd, ²³⁴Th, и ⁴⁰K,¹⁵⁷ Td, ⁵⁵Mn, ⁵²Tr и ⁵⁶Fe.

Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также могут быть пегилированы, например, для увеличения их биологического времени полужизни (например, в сыворотке). Для пегилирования антитела или фрагмента, как правило, проводят реакцию антитела или фрагмента с реакционноспособной формой полиэтиленгликоля (ПЭГ), такой как реакционноспособное сложноэфирное или альдегидное производное ПЭГ, в условиях, в которых одна или более групп ПЭГ присоединяются к антителу или фрагменту антитела. В конкретных вариантах осуществления пегилирование осуществляют путем реакции ацилирования или реакции алкилирования с реакционноспособной молекулой ПЭГ (или аналогичным реакционноспособным водорастворимым полимером). Используемый в настоящем документе термин полиэтиленгликоль охватывает любые формы ПЭГ, которые используют для дериватизации других белков, например моно(C₁-С₁₀)алкокси- или арилоксиполиэтиленгликоль или полиэтиленгликоль-малеимид. В конкретных вариантах осуществления антитело, или фрагмент, которое пегилируют, представляет собой агликозилированное антитело, или фрагмент. Методы пегилирования белков известны в данной области и могут быть применены к антителам по изобретению. Смотри, например, EP 0154316 и EP 0401384.

Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также могут быть конъюгированы с флуоресцентными или хемилюминесцентными метками, включая флуорофоры, например, хелаты редкоземельных элементов, флуоресцеин и его производные, родамин и его производные, изотиоцианат, фикоэритрин, фикоцианин, аллофикоцианин, o-фталевый альдегид, флуорескамин, ¹⁵²Eu, дансил, умбеллиферон, люциферин, люминальные метки, изолюминальные метки, метки в виде ароматического сложного эфира акридиния, имидазольные метки, метки в виде соли акридиния, оксалатные сложноэфирные метки, эквориновые метки, 2,3-дигидрофталазиндионы, биотин/авидин, спиновые метки и стабильные свободные радикалы.

Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) также могут быть конъюгированы с цитотоксическим фактором, таким как дифтерийный токсин, А-цепь экзотоксина Pseudomonas aeruginosa, А-цепь рицина, А-цепь абрина, Ацепь модецина, альфа-сарцин, белки и соединения (например, жирные кислоты) Aleurites fordii, диантиновые белки, белки PAPI, PAPII и PAP-S Phytoiacca americana, ингибитор из Momordica charantia, курцин, кротин, ингибитор из Saponaria officinalis, митогеллин, рестриктоцин, феномицин и эномицин.

Можно использовать любой метод, известный в данной области, для конъюгации антител и их антигенсвязывающих фрагментов по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов) с различными фрагментами, включая методы, описанные в публикациях Hunter et al., 1962, Nature 144:945; David et al., 1974, Biochemistry 13:1014; Pain et al., 1981, J. Immunol. Meth. 40:219 и Nygren, 1982, Histochem. and Cytochem. 30:407. Методы конъюгации антител и фрагментов являются обычными и очень хорошо известны в данной области.

Терапевтическое применение aHTu-CD27 антител

Также предложены способы лечения пациентов, включая людей, которые нуждаются в лечении, с использованием выделенных антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, раскрытых в настоящем документе (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов). В одном варианте осуществления изобретения такой субъект страдает от инфекции или инфекционного заболевания. По изобретению также предложено антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, для использования в лечении злокачественного новообразования, либо лечении инфекции или инфекционного заболевания. По изобретению также предложено применение антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, для производства лекарственного препарата, предназначенного для повышения активации иммуноцитов; лечения злокачественного новообразования, либо лечения инфекции или инфекционного заболевания.

В другом варианте осуществления изобретения такой субъект страдает злокачественным новообразованием. В одном варианте осуществления рак представляет собой, например, остеосаркому, рабдомиосаркому, нейробластому, рак почки, лейкоз, переходно-клеточный рак почки, рак мочевого пузыря, опухоль Вильмса, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак кости, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого), рак желудка, колоректальный рак, рак шейки матки, синовиальную саркому, рак головы и шеи, плоскоклеточную карциному, множественную миелому, почечно-клеточный рак, ретинобластому, гепатобластому, печеночно-клеточную карциному, меланому, рабдоидную опухоль почки, саркому Юинга, хондросаркому, рак мозга, глиобластому, менингиому, аденому гипофиза, вестибулярную шванному, примитивную нейроэктодермальную опухоль, медуллобластому, астроцитому, анапластическую астроцитому, олигодендроглиому, эпендимому, папиллому хориоидного сплетения, истинную полицитемию, тромбоцитемию, идиопатический миелофиброз, саркому мягких тканей, рак щитовидной железы, рак эндометрия, карциноидный рак или рак печени, рак молочной железы или рак желудка. В одном из вариантов осуществления изобретения рак представляет собой метастатическую форму злокачественного новообразования, например видов злокачественного новообразования, перечисленных выше.

Виды злокачественного новообразования, которые можно лечить антителами или антигенсвязывающими фрагментами, композициями и способами по изобретению, включают, но без ограничения рак

- 38 043052 сердца: саркому (ангиосаркому, фибросаркому, рабдомиосаркому, липосаркому), миксому, рабдомиому, фиброму, липому и тератому; рак легкого: бронхогенную карциному (плоскоклеточную, недифференцированную мелкоклеточную, недифференцированную крупноклеточную аденокарциному), альвеолярную (бронхиолярную) карциному, бронхиальную аденому, саркому, лимфому, хондроматозную гамартому, мезотелиому; рак желудочно-кишечного тракта: пищевода (плоскоклеточную карциному, аденокарциному, лейомиосаркому, лимфому), желудка (карциному, лимфому, лейомиосаркому), поджелудочной железы (протоковую аденокарциному, инсулиному, глюкагоному, гастриному, карциноидные опухоли, випому), тонкого кишечника (аденокарциному, лимфому, карциноидные опухоли, саркому Капоши, лейомиому, гемангиому, липому, нейрофиброму, фиброму), толстого кишечника (аденокарциному, трубчатую аденому, ворсинчатую аденому, гамартому, лейомиому), колоректальный рак; рак мочеполовых путей: почки (аденокарциному, опухоль Вильмса [нефробластому], лимфому, лейкоз), мочевого пузыря и уретры (плоскоклеточную карциному, переходно-клеточную карциному, аденокарциному), предстательной железы (аденокарциному, саркому), яичек (семиному, тератому, эмбриональную карциному, тератокарциному, хориокарциному, саркому, карциному из интерстициальных клеток, фиброму, фиброаденому, аденоматоидные опухоли, липому); рак печени: гепатому (печеночно-клеточную карциному), холангиокарциному, гепатобластому, ангиосаркому, печеночно-клеточную аденому, гемангиому; рак кости: остеогенную саркому (остеосаркому), фибросаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, хондросаркому, саркому Юинга, злокачественную лимфому (ретикулосаркому), множественную миелому, злокачественную гигантоклеточную опухоль хордому, остеохондрома (костно-хрящевые экзостозы), доброкачественную хондрому, хондробластому, хондромиксофиброму, остеоид-остеому и гигантоклеточные опухоли; рак нервной системы: черепа (остеому, гемангиому, гранулему, ксантому, деформирующий остеит), мягких мозговых оболочек (менингиому, менингиосаркому, глиоматоз), головного мозга (астроцитому, медуллобластому, глиому, эпендимому, герминому [пинеалому], полиморфную глиобластому, олигодендроглиому, шванному, ретинобластому, врожденные опухоли), спинного мозга (нейрофиброму, менингиому, глиому, саркому); гинекологический рак: тела матки (эндометриальную карциному), шейки матки (карциному шейки матки, предопухолевую дисплазию шейки матки), яичника (карциному яичника [серозную цистаденокарциному, муцинозную цистаденокарциному, неклассифицированную карциному], гранулезоклеточные опухоли, опухоль из сертоли-лейдиговских клеток, дисгерминому, злокачественную тератому), вульвы (плоскоклеточную карциному, интраэпителиальную карциному, аденокарциному, фибросаркому, меланому), влагалища (светлоклеточную карциному, плоскоклеточную карциному, гроздевидную саркому (эмбриональную рабдомиосаркому), фаллопиевых труб (карциному), молочной железы; гематологический рак: крови (миелоидный лейкоз [острый и хронический], острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественную миелому, миелодиспластический синдром), болезнь Ходжкина, неходжскинскую лимфому [злокачественную лимфому]; рак кожи: злокачественную меланому, базально-клеточную карциному, плоскоклеточную карциному, саркому Капоши, диспластический невус, липому, ангиому, дерматофиброму, келоиды, псориаз; и рак надпочечников: нейробластому. Таким образом, при использовании в настоящем документе термин раковая клетка включает клетку, пораженную одним из вышеуказанных заболеваний.

В одном варианте осуществления виды злокачественного новообразования, которые можно лечить антителами, или их антигенсвязывающими фрагментами, раскрытыми в настоящем документе, композициями и способами по изобретению, включают, но без ограничения: рак легкого, рак поджелудочной железы, рак толстого кишечника, колоректальный рак, миелоидный лейкоз, острый миелогенный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, хронический миеломоноцитарный лейкоз, рак щитовидной железы, миелодиспластический синдром, карциному мочевого пузыря, эпидермальную карциному, меланому, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак головы и шеи, рак яичника, рак головного мозга, рак мезенхимального проихождения, саркомы, тетракарциномы, нейробластомы, карциномы почки, гепатомы, неходжскинскую лимфому, множественную миелому и анапластическую карциному щитовидной железы.

В одном из вариантов осуществления изобретения предложены способы лечения субъектов с использованием анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов), при этом субъект страдает от вирусной инфекции. В одном варианте осуществления вирусная инфекция представляет собой инфекцию, вызываемую вирусом, выбранным из группы, состоящей из вируса иммунодефицита человека (HIV), вируса гепатита (А, В или С), вируса герпеса (например, VZV, HSV-I, HAV-6, HSV-II и CMV, вируса Эпштейна-Барр), аденовируса, вируса гриппа, флавивирусов, эховируса, риновируса, вируса Коксаки, коронавируса, респираторно-синцитиального вируса, вируса свинки, ротавируса, вируса кори, вируса краснухи, парвовируса, вируса осповакцины, вируса HTLV, вируса лихорадки Денге, папилломавируса, вируса контагиозного моллюска, вируса полиомиелита, вируса бешенства, вируса JC или вируса арбовирусного энцефалита.

В одном из вариантов осуществления изобретения предложены способы лечения субъектов с использованием анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, при этом

- 39 043052 субъект страдает от бактериальной инфекции. В одном варианте осуществления бактериальная инфекция представляет собой инфекцию, вызываемую бактерией, выбранной из группы, состоящей из Chlamydia, риккетсий, микобактерий, стафилококков, стрептококков, пневмококков, менингококков и гонококков,

Klebsiella , Proteus, Serratia, Pseudomonas, Legionella, Corynebacterium diphtheriae, Salmonella, bacilli, Vibrio cholerae, Clostridium tetan, Clostridium botulinum, Bacillus anthricis, Yersinia pestis, Mycobacterium leprae, Mycobacterium 1epromatosis и Borriella.

В одном из вариантов осуществления изобретения предложены способы лечения субъектов с использованием анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, при этом субъект страдает от грибковой инфекции. В одном варианте осуществления грибковая инфекция представляет собой инфекцию, вызываемую грибком, выбранным из группы, состоящей из

Candi da (albicans, krusei, glabrata, tropicalis и так далее), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger и так далее), рода Mucorales (mucor, absidia, rhizopus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum.

В одном из вариантов осуществления изобретения предложены способы лечения субъектов с использованием анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, при этом субъект страдает от паразитарной инфекции. В одном варианте осуществления паразитарная инфекция представляет собой инфекцию, вызываемую паразитом, выбранным из группы, состоящей из

Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleria fowleri,

Acanthamoeba, Giardia lamblia, Cryptosporidium, Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei,

Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii и Nippostrongylus brasiliensis.

Субъект может быть млекопитающим, таким как человек, собака, кошка, лошадь, корова, мышь, крыса, обезьяна (например, яванский макак, например, Масаса fascicularis) или кролик. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения субъект является человеком.

Выражение в сочетании с указывает на то, что компоненты, вводимые в способе по настоящему изобретению, например, анти-CD27 антитело (например, гуманизированное антитело), или его антигенсвязывающий фрагмент (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант), вместе с противораковым средством, могут быть сформулированы в одной композиции для одновременной доставки или сформулированы раздельно в двух или более композициях (например, в наборе). Каждый компонент можно вводить пациенту в иное время, чем время введения другого компонента; например каждое введение можно выполнять не одновременно (например, раздельно или последовательно) с некоторыми интервалами на протяжении конкретного периода времени. Кроме того, отдельные компоненты можно вводить пациенту одним и тем же или разными путями введения.

В конкретных вариантах осуществления антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А или его гуманизированные варианты), могут быть использованы отдельно или в сочетании с другими, дополнительными терапевтическими средствами и/или терапевтическими процедурами, для лечения или предотвращения любого заболевания, такого как рак, например, описанный в настоящем документе, у субъекта, который нуждается в таком лечении или предотвращении. Композиции, например, фармацевтические композиции, содержащие фармацевтически приемлемый носитель, содержащий такие антитела и фрагменты в сочетании с дополнительными терапевтическими средствами, также являются частью настоящего изобретения.

Таким образом, настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования у человека, включающему введение пациенту эффективного количества антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, раскрытых в настоящем документе, необязательно, в сочетании с дополнительным терапевтическим средством или терапевтической процедурой. Настоящее изобретение также относится к способу лечения инфекции или инфекционного заболевания у человека, включающему введение пациенту эффективного количества антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, раскрытых в настоящем документе, необязательно, в сочетании с дополнительным терапевтическим средством или терапевтической процедурой. Настоящее изобретение также относится к способу повышения активности иммуноцита, включающему введение пациенту, эффективного количества антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, раскрытых в настоящем документе. В одном варианте осуществления способ используют для: лечения злокачественного новообразования; лечения инфекции или инфекционного

- 40 043052 заболевания; или для добавления в вакцину адъюванта. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, по изобретению, для использования с целью лечения злокачественного новообразования; повышения активности иммуноцита; либо лечения инфекции или инфекционного заболевания в сочетании с дополнительным терапевтическим средством. В следующем варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению для производства лекарственного препарата, предназначенного для повышения активации иммуноцитов, лечения злокачественного новообразования, либо лечения инфекции или инфекционного заболевания в сочетании с дополнительным терапевтическим средством. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению и дополнительного терапевтического средства для лечения злокачественного новообразования; повышения активности иммуноцитов; либо лечения инфекции или инфекционного заболевания.

В других вариантах осуществления изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования, либо лечения инфекции или инфекционного заболевания у человека, включающему введение пациенту эффективного количества антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению, или экспрессионного вектора, или клетки-хозяина по изобретению, необязательно, в сочетании с дополнительным терапевтическим средством или терапевтической процедурой.

В конкретных вариантах осуществления антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут быть использованы отдельно или в сочетании с противоопухолевыми вакцинами. Примеры противоопухолевых вакцин включают, но не ограничиваются ими, вакцины против инфекции папилломавируса человека (HPV), вызывающей рак, такие как гардасил®, гардасил® и церварикс®; вакцины, которые предотвращают вызываемый вирусом гепатита В рак печени, такие как энджерикс-В® и рекомбивакс НВ®; онколитическую вирусную терапию, которая инициирует иммунный ответ, такую как имлигик®; ДНКвакцины, такие как плазмидная ДНК-вакцина Synchotrope MA2M и ZYC101; ДНК-вакцина против маммоглобина а (см. Clinical Cancer Res. 2014 20(23):5964-75); вакцины на основе вектора, такие как PSATRICOM (проствак), PANVAC-VF, вакцину против PSA на основе Listeria monocytogenes (см. Therapeutic Advances in Vaccines, 2014, 2(5) 137-148), Listeria-мезотелин Adeno-CEA; аллогенные вакцины, такие как GVAX, BLP-25 (анти-Ankara-муцин 1), белагенпуматуцел-L, TG4010, вакцину на основе эпидермального фактора роста цимавакс, NY-ESO, GM.CD40L-CCL21; аутологичные вакцины, такие как: Adeno-CD40L, BCG, INGN-225, вакцины на основе дендритных клеток, такие как провенге® (сипулеуцел-Т), rF-CEAMUC1-TRICOM (панвак-DC); вакцины на основе антигенов, таких как MUC-1 (стимувакс), NY-ESO-1, GP-100, MAGE-A3 (кодирующий антиген меланомы ген A3), INGN-225 (см. Pharmacology & Therapeutics 153 (2015) 1-9).

В конкретных вариантах осуществления антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут быть использованы отдельно или в сочетании с химиотерапевтическими средствами.

В конкретных вариантах осуществления антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут быть использованы отдельно или в сочетании с лучевой терапией.

В конкретных вариантах осуществления антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), могут быть использованы отдельно или в сочетании с препаратами таргетированной терапии. Примеры таргетированных терапевтических средств включают: гормональные терапевтические средства, ингибиторы сигнальной трансдукции (например, ингибиторы EGFR, такие как цетуксимаб (эрбитукс) и эрлотиниб (тарцева)); ингибиторы HER2 (например, трастузумаб (герцептин) и пертузумаб (перьета)); ингибиторы BCR-ABL (такие как иматиниб (гливек) и дазатиниб (сприцел)); ингибиторы ALK (такие как кризотиниб (ксалкори) и церитиниб (зикадия)); ингибиторы BRAF (такие как вемурафениб (зелбораф) и дабрафениб (тафинлар)), модуляторы генной экспрессии, индукторы апоптоза (например, бортезомиб (велкейд) и карфилзомиб (кипролис)), ингибиторы ангиогенеза (например, бевацизумаб (авастин) и рамуцирумаб (цирамза), моноклональные антитела, связанные с токсинами (например, брентуксимаб ведотин (адцетрис) и адо-трастузумаб эмтанзин (кадсила)).

В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) могут быть использованы в сочетании с противораковым терапевтическим средством или иммуномодулирующим терапевтическим средством, таким как иммуномодулирующий ингибитор рецептора, например, антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывается с рецептором.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) используют в сочетании с одним или более из: анти-PD1 антитела, анти-PDL1 антитела, анти-TIGIT антитела, анти-CTLA4 антитела, анти-CS1 антитела (например, элотузумаба), анти-KIR2DL1/2/3 антитела (напри

- 41 043052 мер, лирилумаба), aHTu-CD137 антитела (например, урелумаба), анти-GITR антитела (например, TRX518), анти-PDl антитела (например, пембролизумаба, ниволумаба, пидилизумаба (СТ-011)), антиPD-L1 антитела (например, BMS-936559, дурвалумаба, MSB0010718C или MpDl3280A), анти-PD-L2 антитела, анти-ILT1 антитела, анти-ILT2 антитела, анти-ILT3 антитела, анти-ILT4 антитела, анти-ILT5 антитела, анти-ILT6 антитела, анти-ILT7 антитела, анти-ILT8 антитела, анти-CD40 антитела, анти-ОХ40 антитела, анти-ICOS, анти-SIRPa, анти-KIR2DL1 антитела, анти-KIR2DL2/3 антитела, анти-KIR2DL4 антитела, анти-KIR2DL5A антитела, анти-KIR2DL5B антитела, анти-KIR3DL1 антитела, анти-KIR3DL2 антитела, анти-KIR3DL3 антитела, анти-NKG2A антитела, анти-NKG2C антитела, анти-NKG2Е антитела, анти-4-1ВВ антитела (например, PF-05082566), анти-TSLP антитела, анти-IL-10 антитела, IL-10 или пегилированного IL-10, или любого низкомолекулярного органического ингибитора таких мишеней.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-PD1 антителом (например, пембролизумабом, ниволумабом, пидилизумабом (СТ-011)).

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-PDL1 антителом (например, BMS-936559, дурвалумабом, MSB0010718C или MPDL3280A).

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-CTLA4 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-CS1 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL1/2/3 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-CD137 антителом (например, урелумабом).

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-GITR антителом (например, TRX518).

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-PD-L2 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL1 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL2 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL3 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL4 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL5 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL6 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL7 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-[TL8 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) исполь

- 42 043052 зуют в сочетании с aHTu-CD40 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения aHTu-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-ОХ40 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL1 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL2/3 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL4 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL5A антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR2DL5B антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR3DL1 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR3DL2 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-KIR3DL3 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-NKG2А антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-NKG2С антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-ICOS антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-SIRPa антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-4-1ВВ антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-IL-10 антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с анти-TSLP антителом.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с IL-10 или пегилированным IL-10.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с одним или более из ингибиторов (например, малой органической молекулы или антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом), таких как ингибитор MTOR (мишень рапамицина у млекопитающих), цитотоксическое средство, средство на основе платины, ингибитор EGFR, ингибитор VEGF, стабилизатор микротрубочек, таксан, ингибитор CD20, ингибитор CD52, ингибитор CD30, ингибитор RANK (рецептор-активатор ядерного транскрипционного фактора каппа-В), агонист STING, антагонист CXCR2, ингибитор RANKL (лиганд рецептора-активатора ядерного транскрипционного фактора каппа-В), ингибитор ERK, ингибитор МАР-киназы, ингибитор АКТ, ингибитор МЕК, ингибитор PARP, ингибитор PI3K, ингибитор HER1, ингибитор HER2, ингибитор HER3, ингибитор HER4, ингибитор Bcl2,

- 43 043052 ингибитор CD22, ингибитор CD7 9b, ингибитор ErbB2 или ингибитор фарнезил-протеинтрансферазы.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с одним или более из: 13-цис-ретиноевой кислоты, 3-[5-(метилсульфонилпиперадинметил)индолил]хинолона, 4-гидрокситамоксифена, 5-дезоксиуридина, 5'-дезокси-5фторуридина, 5-фторурацила, 6-меркаптопурина, 7-гидроксистауроспорина, А-443654, абиратеронацетата, абраксана, АВТ-578, аколбифена, ADS-100380, ALT-110, алтретамина, мифостина, аминоглутетимида, амрубицина, амсакрина, анагрелида, анастрозола, ангиостатина, АР-23573, ARQ-197, арзоксифена, AS-252424, AS-605240, аспарагиназы, АТ-9263, атрасентана, акситиниба, AZD1152, вакцины на основе бациллы Кальметта-Герена (BCG), батабулина, ВС-210, бесодутокса, бевацизумаба, бикалутамида, Bio111, BIO140, блеомицина, BMS-214662, BMS-247550, BMS-275291, BMS-310705, бортезимиба, бузерелина, бусульфана, кальцитриола, камптотецина, канертиниба, капецитабина, карбоплатина, кармустина, СС8490, цедираниба, CG-1521, CG-781, хламидоцина, хлорамбуцила, хлоротоксина, циленгитида, цимитидина, цисплатина, кладрибина, клодроната, COL-3, СР-724714, циклофосфамида, ципротерона, ципротеронацетата, цитарабина, цитозинарабинозида, дакарбазина, дациностата, дактиномицина, далотузумаба, данусертиба, дазатаниба, даунорубицина, декатаниба, дегуелина, денилейкина, дезоксикоформицина, депсипептида, диарилпропионитрила, диэтилстилбестрола, дифтитокса, доцетаксела, довитиниба, доксорубицина, дролоксифена, эдотекарина, меченого иттрием-90 эдотреотида, эдотреотида, EKB569, EMD121974, эндостатина, энзалутамида, энзастаурина, эпирубицина, эпитилона В, ERA-923, эрбитукса, эрлотиниба, эстрадиола, эстрамустина, этопозида, эверолимуса, экземестана, фиклатузумаба, финастерида, флавопиридола, флоксуридина, флударабина, флудрокортизона, флуоксиместерона, флутамида, режима FOLFOX, фулвестранта, галетерона, гефитиниба, гемцитабина, гиматекана, гозерелина, гозерелин ацетата, госсипола, GSK461364, GSK690693, HMR-3339, гидроксипрогестеронкапроата, гидроксимочевины, IC87114, идарубицина, идоксифена, ифосфамида, IM862, иматиниба, IMC-1C11, INCB24360, INO1001, интерферона, интерлейкина-12, ипилимумаба, иринотекана, JNJ-16241199, кетоконазола, KRX-0402, лапатиниба, лазофоксифена, лектрозола, лейковорина, леупролида, леупролид ацетата, левамизола, заключенного в липосомы паклитаксела, ломустина, лонафарниба, лукантона, LY292223, LY292696, LY293646, LY293684, LY294002, LY317615, маримастата, мехлорэтамина, медроксипрогестеронацетата, магестролацетата, мелфалана, меркаптопурина, месны, метотрексата, митрамицина, митомицина, митотана, митоксантрона, тозасертиба, MLN8054, неовастата, нератиниба, нейрадиаба, нилотиниба, нилутимида, нолатрекседа, NVP-BEZ235, облимерсена, октреотида, офатумумаба, олапариба, ореговомаба, ортеронела, оксалиплатина, паклитаксела, палбоциклиба, памидроната, панитумумаба, пазопаниба, PD0325901, PD184352, ПЭГ-интерферона, пеметрекседа, пентостатина, перифозина, фенилаланиниприта, PI-103, пиктилисиба, PIK-75, пипендоксифена, PKI-166, пликамицина, порфимера, преднизона, прокарбазина, прогестинов, РХ-866, R-763, ралоксифена, ралтитрексида, разоксина, ридафоролимуса, ритуксимаба, ромидепсина, RTA744, рубитекана, скриптаида, Sdx102, селициклиба, селуметиниба, семаксаниба, SF1126, сиролимуса, SN36093, сорафениба, спиронолактона, свкаламина, SR13668, стрептозоцина, SU6668, суберойланилид-гидроксамовой кислоты, сунитиниба, синтетического эстрогена, талампанела, талимоген лагерпарепвека, тамоксифена, темозололмида, темсиролимуса, тенипозида, тесмилифена, тестостерона, тетрандрина, TGX-221, талидомида, тиогуанина, тиотепы, тицилимумаба, типифарниба, тивозаниба, TKI-258, TLK286, топотекана, торемифен цитрата, трабектедина, трастузумаба, третиноина, трихостатина А, трицирибинфосфата моногидрата, трипторелин памоата, TSE-424, урамустина, вальпроевой кислоты, валрубицина, вандетаниба, ваталаниба, ловушки VEGF, винбластина, винкристина, виндезина, винорелбина, витаксина, витеспана, вориностата, VX-745, вортманнина, Xr311, занолимумаба, ZK186619, ZK-304709, ZM336372, ZSTK474.

Неограничивающие примеры подходящих противораковых средств для использования в сочетании с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по изобретению включают цитостатические средства, цитотоксические средства, таргетированные лекарственные средства (низкомолекулярные средства, биологические средства, киРНК и микроРНК) против злокачественного новообразования и неопластических заболеваний:

1) антиметаболиты (такие как метотрексат, 5-фторурацил, гемцитабин, флударабин, капецитабин);

2) алкилирующие средства, такие как темозололмид, циклофосфамид;

3) взаимодействующие с ДНК и повреждающие ДНК средства, такие как цисплатин, оксалиплатин, доксорубицин;

4) ионизирующее излучение, например, лучевую терапию;

5) ингибиторы топоизомеразы II, такие как этопозид, доксорубицин;

6) ингибиторы топоизомеразы I, такие как иринотекан, топотекан;

7) взаимодействующие с тубулином средства, такие как паклитаксел, доцетаксел, абраксан, эпотилоны;

8) ингибиторы белка веретена деления кинезина;

9) ингибиторы контрольных точек веретена деления;

10) ингибиторы поли(АЦФ-рибоза)-полимеразы (PARP), такие как олапариб, нирапариб и велипа

- 44 043052 риб;

11) ингибиторы матриксной металлопротеиназы (ММР);

12) ингибиторы протеазы, такие как ингибиторы катепсина D и катепсина K;

13) ингибиторы протеасомы или убиквитинирования, такие как бортезомиб;

14) активатор мутанта р53 для восстановления его активности р53 дикого типа;

15) аденовирусный белок - р53;

16) ингибиторы Bcl-2, такие как АВТ-263;

17) модуляторы белка теплового шока (HSP), такие как гелданамицин и 17-AAG;

18) ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC), такие как вориностат (SAHA);

19) средства, модулирующие действие половых гормонов; а. антиэстрогены, такие как тамоксифен, фулвестрант,

b) селективные модуляторы рецепторов эстрогенов (SERM), такие как ралоксифен,

c) антиандрогены, такие как бикалутамид, флутамид,

d) агонисты LHRH, такие как леупролид,

e) ингибиторы 5а-редуктазы, такие как финастерид,

f) цитохром Р450 С17 лиазу (CYP450c17, также называемую 17аС),

g) ингибиторы ароматазы, такие как лектрозол, анастрозол, экземестан,

20) ингибиторы EGFR-киназы, такие как гефтиниб, эрлотиниб, лапатиниб;

21) двойные ингибиторы erbB1 и erbB2, такие как лапатиниб;

22) многоцелевые ингибиторы киназы (серин/треонин и/или тирозинкиназы);

a) ингибиторы ABL-киназы, иматиниб и нилотиниб, дазатиниб,

b) ингибиторы VEGFR-1, VEGFR-2, PDGFR, KDR, FLT, c-Kit, Tie2, Raf, MEK и ERK, такие как сунитиниб, сорафениб, вандетаниб, пазопаниб, PLX-4032, акситиниб, РТК787, GSK-1120212,

c) ингибиторы Polo-подобной киназы,

d) ингибиторы киназы Aurora,

e) ингибитор JAK,

f) ингибиторы с-МЕТ киназы,

g) ингибиторы PI3K и mTOR, такие как GDC-0941, BEZ-235, ВКМ-120 и AZD-8055,

n) рапамицин и его аналоги, такие как темсиролимус, эверолимус и дефоролимус,

i) агонист STING (стимулятор генов интерферона),

j) ингибитор CXCR (хемокинового рецептора СХС), антагонист CXCR2,

23) и другие противораковые (также известные как анти-неопластические) средства, включая, но без ограничения, ara-С, адриамицин, цитоксан, карбоплатин, урамустин, клорметин, ифосфамид, мелфалан, хлорамбуцил, пипоброман, триэтиленмеламин, триэтилентиофосфорамин, бусульфан, кармустин, ломустин, стрептозоцин, дакарбазин, флоксуридин, цитарабин, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, флударабин фосфат, пентостатин, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин, навелбин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, тенипозид, цитарабин, пеметрексед, идарубицин, митрамицин, дезоксикоформицин, митомицин-С, L-аспарагиназу, тенипозид, этинилэстрадиол, диэтилстилбестрол, тестостерон, преднизон, флуоксиместерон, дромостанолон пропионат, тестолактон, магестролацетат, метилпреднизолон, метилтестостерон, преднизолон, триамцинолон, хлортрианизен, гидроксипрогестерон, аминоглутетимид, эстрамустин, флутамид, медроксипрогестеронацетат, торемифен, гозерелин, карбоплатин, гидроксимочевину, амсакрин, прокарбазин, митотан, митоксантрон, левамизол, дроллоксафин, гексаметилмеламин, бексар, зевалин, тризенокс, профимер, тиотепу, алтретамин, доксил, онтак, депоцит, аранесп, нейпоген, неуласту, кепиванс;

24) ингибиторы фарнезил-протеинтрансферазы, такие как сарасар™ (4-[2-[4-[(11R)-3,10-дибром-8хлор-6,11-дигидро-5Н-бензо[5,6]циклогепта[1,2-b]пиридин-11-ил]-1-пиперидинил]-2-оксоэтил]пиперидинкарбоксамид, типифарниб;

25) интерфероны, такие как интрон А, пэг-интрон;

26) анти-erbB 1 антитела, такие как цетуксимаб, панитумумаб;

27) анти-erbB2 антитела, такие как трастузумаб;

28) анти-CD52 антитела, такие как алемтузумаб;

29) анти-CD20 антитела, такие как ритуксимаб;

30) анти-CD33 антитела, такие как гемтузумаб озагомицин;

31) анти-VEGF антитела, такие как авастин;

32) лиганды TRIAL, такие как лексатумумаб, мапатумумаб и AMG-655;

33) анти-CTLA-4 антитела, такие как ипилимумаб;

34) антитела против СТА1, СЕА, CD5, CD19, CD22, CD30, CD44, CD44V6, CD55, CD56, ЕрСАМ, FAP, MHCII, HGF, IL-6, MUC1, PSMA, TAL6, TAG-72, TRAILR, VEGFR, IGF-2, FGF;

35) анти-IGF-1R антитела, такие как далотузумаб (MK-0646) и робатумумаб (SCH 717454).

Термин модуляторы рецепторов эстрогенов относится к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание эстрогенов с рецептором, независимо от механизма. Примеры модуляторов рецепторов эстрогенов включают, но без ограничения, тамоксифен, ралоксифен, идоксифен, LY353381,

- 45 043052

LY117081, торемифен, фулвестрант, 4-[7-(2,2-диметил-1-оксопропокси-4-метил-2-[4-[2-(1-пиперидинил)этокси]фенил] -2Н-1 -бензопиран-3-ил]фенил-2,2-диметилпропаноат, 4,4'-дигидроксибензофенон-2,4динитрофенилгидразон и SH646.

Термин модуляторы рецепторов андрогенов относится к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание андрогенов с рецептором, независимо от механизма. Примеры модуляторов рецепторов андрогенов включают финастерид и другие ингибиторы 5а-редуктазы, нилутамид, флутамид, бикалутамид, лиарозол и абиратерон ацетат.

Термин модуляторы ретиноидных рецепторов относится к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание ретиноидов с рецептором, независимо от механизма. Примеры таких модуляторов ретиноидных рецепторов включают бексаротен, третиноин, 13-цис-ретиноевую кислоту, 9-цисретиноевую кислоту, а-дифторметилорнитин, ILX23-7553, транс-N-(4'-гидроксифенил)ретинамид и N-4карбоксифенилретинамид.

Термин цитотоксические/цитостатические средства относится к соединениям, которые вызывают гибель клеток или ингибируют пролиферацию клеток, главным образом, за счет прямого препятствия функционированию клеток, либо за счет ингибирования или создания препятствия митозу клеток, и охватывает алкилирующие средства, факторы некроза опухоли, интеркалирующие средства, активируемые гипоксией соединения, ингибиторы микротрубочек/стабилизаторы микротрубочек, ингибиторы митотических кинезинов, ингибиторы гистондеацетилазы, ингибиторы киназ, участвующих в прогрессировании митоза, ингибиторы киназ, участвующих в путях сигнальной трансдукции фактора роста и цитокинов, антиметаболиты, модификаторы биологического ответа, гормональные/антигормональные лекарственные средства, гемопоэтические факторы роста, направляемые моноклональными антителами лекарственные средства, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы протеасомы, ингибиторы убиквитин-лигазы и ингибиторы киназы Aurora.

Примеры цитотоксических/цитостатических средств включают, но без ограничения, комплексные соединения платины, сертенеф, кахектин, ифосфамид, тасонермин, лонидамин, карбоплатин, алтретамин, преднемустин, дибромдульцитол, ранимустин, фотемустин, недаплатин, оксалиплатин, темозололмид, гептаплатин, эстрамустин, импросульфан тозилат, трофосфамид, нимустин, диброспидия хлорид, пумитепу, лобаплатин, сатраплатин, профиромицин, цисплатин, ирофулвен, дексифосфамид, цисаминдихлор(2-метилпиридин)платину, бензилгуанин, глюфосфамид, GPX100, (транс, транс, транс)-бисму-(гексан-1,6-диамин)-му-[диаминплатина(П)]бис[диамин(хлор)платины (II)] тетрахлорид, диаризидинилспермин, триоксид мышьяка, 1-(11-додециламино-10-гидроксиундецил)-3,7-диметилксантин, зорубицин, идарубицин, даунорубицин, бисантрен, митоксантрон, пирарубицин, пинафид, валрубицин, амрубицин, антинеопластон, 3'-деамино-3'-морфолино-13-деоксо-10-гидроксикарминомицин, аннамицин, галарубицин, элинафид, MEN10755, 4-деметокси-3-деамино-3-азиридинил-4-метилсульфонилдаунорубицин (см. WO 00/50032).

Примером активируемых гипоксией соединений является тирапазамин.

Примеры ингибиторов протеасомы включают, но не ограничиваются ими, лактацистин и MLN-341 (велкейд).

Примеры ингибиторов микротрубочек/стабилизаторов микротрубочек включают, в целом, таксаны. Конкретные соединения включают паклитаксел (таксол®), виндезинсульфат, 3',4'-дидегидро-4'-дезокси8'-норвинкалеукобластин, доцетаксел (таксотер®), ризоксин, доластатин, мивобулин изетионат, ауристатин, цемадотин, RPR109881, BMS184476, винфлюнин, криптофицин, 2,3,4,5,6-пентафтор-N-(3-фтор-4метоксифенил)бензолсульфонамид, ангидровинбластин, N,N-диметил-L-βалил-L-βалил-N-метил-Lвалил-L-пролил-L-пролин-т-бутиламид, (SEQ ID NO: 68), TDX258, эпотилоны (см., например, патенты США №№ 6284781 и 6288237) и BMS188797.

Некоторыми примерами ингибиторов топоизомеразы являются топотекан, гикаптамин, иринотекан, рубитекан, 6-этоксипропионил-3',4'-O-эксобензилиденчартреузин, 9-метокси-N,N-диметил-5-нитропиразоло[3,4,5-кл]акридин-2-(6Н)пропанамин, 1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил1Н,12Н-бензо[де]пирано[3',4':b,7]индолизино[1,2b]хинолин-10,13(9Н,15Н)дион, луртотекан, 7-[2-(N-u30пропиламино)этил]-(20S)камптотецин, BNP1350, BNPI1100, BN80915, BN80942, этопозид фосфат, тенипозид, собузоксан, 2'-диметиламино-2'-дезоксиэтопозид, GL331, N-[2-(диметиламино)этил]-9-гидрокси5,6-диметил-6Н-пиридо[4,3-b]карбазол-1-карбоксамид, азулакрин, (5а,5аВ,8аа,9b)-9-[2-[N-[2-(диметиламино)этил]-N-метиламино]этил]-5-[4-гидрокси-3,5-диметоксифенил]-5,5а,6,8,8а,9-гексогидрофуро(3',4':6,7)нафто(2,3-d)-1,3-диоксол-6-он, 2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-гидрокси-8-метоксибензо[с]фенантридиний, 6,9-бис[(2-аминоэтил)амино]бензо[g]изогвинолин-5,10-дион, 5-(3-аминопропиламино)7,10-дигидрокси-2-(2-гидроксиэтиламинометил)-6Н-пиразоло[4,5,1-де]акридин-6-он, N-[1-[2(диэтиламино)этиламино]-7-метокси-9-оксо-9Н-тиоксантен-4-илметил]формамид, N-(2-(диметиламино)этил)акридин-4-карбоксамид, 6-[[2-(диметиламино)этил]амино]-3-гидрокси-7Н-индено[2,1-с]хинолин-7-он и димесна.

Примеры ингибиторов митотических кинезинов и, в частности, митотического кинезина KSP человека, описаны в публикациях WO 03/039460, WO 03/050064, WO 03/050122, WO 03/049527, WO

- 46 043052

03/049679, WO 03/049678, WO 04/039774, WO 03/079973, WO 03/099211, WO 03/105855, WO 03/106417, WO 04/037171, WO 04/058148, WO 04/058700, WO 04/126699, WO 05/018638, WO 05/019206, WO 05/019205, WO 05/018547, WO 05/017190, US 2005/0176776. В одном из вариантов осуществления ингибиторы митотических кинезинов включают, но без ограничения, ингибиторы KSP, ингибиторы MKLP1, ингибиторы CENP-E, ингибиторы МСАК и ингибиторы Rab6-KIFL.

Примеры ингибиторов гистондеацетилазы включают, но без ограничения, SAHA, TSA, оксамфлатин, PXD101, MG98 и скриптаид.

Дополнительную информацию по другим ингибиторам гистондеацетилазы можно найти в следующей публикации: Miller, Т.А. et al., J. Med. Chem. 46 (24):5097-5116 (2003).

Ингибиторы киназ, участвующих в прогрессировании митоза включают, но без ограничения, ингибиторы киназы Aurora, ингибиторы Polo-подобной киназы (PLK; в частности, ингибиторы PLK-1), ингибиторы bub-1 и ингибиторы bub-R1. Примером ингибитора киназы Aurora является VX-680.

Антипролиферативные средства включают антисмысловые РНК и ДНК олигонуклеотиды, такие как G3139, OdN698, RVASKRAS, GEM231, и INX3001, и антиметаболиты, такие как эноцитабин, кармофур, тегафур, пентостатин, доксифлуридин, триметрексат, флударабин, капецитабин, галоцитабин, цитарабин окфосфат, фостеобин натрия гидрат, ралтитрексид, палтитрексид, эмитефур, тиазофурин, децитабин, нолатрексед, пеметрексед, нелзарабин, 2'-дезокси-2'-метилиденцитидин, 2'-фторметилен-2'дезоксицитидин, N-[5-(2,3-дuгuдробензофурuл)сульфонил]-N'-(3,4-дuхлорфенил)мочеβuнα, N6-[4дезокси-4-[№-[2(Е),4(Е)-тетрадекадиэноил]глициламино]-Ь-глицеро-В^-манногептопиранозил]аденин, аплидин, эктеинасцидин, троксацитабин, 4-[2-амино-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидро-3Н-пиримидино[5,4b][1,4]тиазин-6-ил-(S)-этил]-2,5-тиэноил-L-глутаминовая кислота, аминоптерин, 5-флуроурацил, аланозин, 11 -ацетил-8-(карбамоилоксиметил)-4-формил-6-метокси-14-окса-1,11 -диазатетрацикло(7,4,1,0,0)тетрадека-2,4,6-триен-9-ил уксусной кислоты сложный эфир, сваинсонин, лометрексол, дексразоксан, метиониназа, 2'-циано-2'-дезокси-N4-пальмитоил-1-В-D-арабинофуранозилцитозин, 3-аминопиридин-2карбоксальдегидтиосемикарбазон и трастузумаб.

Примеры направляемых моноклональным антителом лекарственных средств включают те лекарственные средства, в которых цитотоксические средства или радиоактивные изотопы присоединены к специфическому для раковой клетки или специфическому для клетки-мишени моноклональному антителу. Примеры включают бексар.

Термин ингибитор пренилпротеинтрансферазы относится к соединению, которое ингибирует любой один из, или любое сочетание, ферментов пренилпротеинтрансфераз, включая фарнезилпротеинтрансферазу (ФПТазу), геранилгеранилпротеинтрансферазу I типа (ГГПТазу-I) и геранилгеранилпротеинтрансферазу II типа (ГГПТазу-II, также называемую Rab ГГПТазой).

Примеры ингибиторов пренил-протеинтрансфераз можно найти в следующих публикациях и патентах: WO 96/30343, WO 97/18813, WO 97/21701, WO 97/23478, WO 97/38665, WO 98/28980, WO 98/29119, WO 95/32987, патент США № 5420245, патент США № 5523430, патент США № 5532359, патент США № 5510510, патент США № 5589485, патент США № 5602098, Европейская патентная публикация 0618221, Европейская патентная публикация 0675112, Европейская патентная публикация 0604181, Европейская патентная публикация 0696593, WO 94/19357, WO 95/08542, WO 95/11917, WO 95/12612, WO 95/12572, WO 95/10514, патент США № 5661152, WO 95/10515, WO 95/10516, WO 95/24612, WO 95/34535, WO 95/25086, WO 96/05529, WO 96/06138, WO 96/06193, WO 96/16443, WO 96/21701, WO 96/21456, WO 96/22278, WO 96/24611, WO 96/24612, WO 96/05168, WO 96/05169, WO 96/00736, патент США № 5571792, WO 96/17861, WO 96/33159, WO 96/34850, WO 96/34851, WO 96/30017, WO 96/30018, WO 96/30362, WO 96/30363, WO 96/31111, WO 96/31477, WO 96/31478, WO 96/31501, WO 97/00252, WO 97/03047, WO 97/03050, WO 97/04785, WO 97/02920, WO 97/17070, WO 97/23478, WO 97/26246, WO 97/30053, WO 97/44350, WO 98/02436 и патент США № 5532359. Пример влияния ингибитора пренилпротеинтрансферазы на ангиогенез можно найти в European J. of Cancer, Vol. 35, No. 9, pp. 1394-1401 (1999).

Термин ингибиторы ангиогенеза относится к соединениям, которые ингибируют образование новых кровеносных сосудов, независимо от механизма. Примеры ингибиторов ангиогенеза включают, но без ограничения, ингибиторы тирозинкиназы, такие как ингибиторы рецепторов тирозинкиназы Flt-1 (VEGFR1) и Flk-1/KDR (VEGFR2), ингибиторы эпидермального, фибробластного или тромбоцитарного факторов роста, ингибиторы ММР (матриксной металлопротеиназы), блокаторы интегринов, интерферон-α, интерлейкин-12, пентозанполисульфат, ингибиторы циклооксигеназы, включая нестероидные противовоспалительные средства (НСПВС), такие как аспирин и ибупрофен, а также селективные ингибиторы циклооксигеназы 2, такие как целекоксиб и рофекоксиб (PNAS, Vol. 89, р. 7384 (1992); JNCI, Vol. 69, р. 475 (1982); Arch. Opthalmol., Vol. 108, p.573 (1990); Anat. Rec, Vol. 238, p. 68 (1994); FEBS Letters, Vol. 372, p. 83 (1995); Clin, Orthop. Vol. 313, p. 76 (1995); J. Mol. Endocrinol., Vol. 16, p.107 (1996); Jpn. J. Pharmacol., Vol. 75, p. 105 (1997); Cancer Res., Vol. 57, p. 1625 (1997); Cell, Vol. 93, p. 705 (1998); Intl. J. Mol. Med., Vol. 2, p. 715 (1998); J. Biol. Chem., Vol. 274, p. 9116 (1999)), стероидные противовоспалительные средства (такие как кортикостероиды, минералокортикоиды, дексаметазон, преднизон, преднизолон, метилпред, бетаметазон), карбоксиамидотриазол, комбретастатин А-4, свкаламин, 6-O

- 47 043052 хлорацетилкарбонил)фумагиллол, талидомид, ангиостатин, тропонин 1, антагонисты ангиотензина II (смотри Fernandez et al., J. Lab. Clin. Med. 105:141-145 (1985)) и антитела к VEGF (см., Nature Biotechnology, Vol. 17, pp. 963-968 (October 1999); Kim et al., Nature, 362, 841-844 (1993); WO 00/44777 и WO 00/61186).

Другие примеры ингибиторов ангиогенеза включают, но без ограничения, эндостатин, украин, ранпирназу, IM862, 5-метокси-4-[2-метил-3-(3-метил-2-бутенил)оксиранил]-1-оксаспиро[2,5]окт-6ил(хлорацетил)карбамат, ацетилдинаналин, 5-амино-1-[[3,5-дихлор-4-(4-хлорбензоил)фенил]метил]-1Н1,2,3-триазол-4-карбоксамид, СМ101, свкаламин, комбретастатин, RPI4610, NX31838, сульфированный маннопентозофосфат, 7,7-(карбонил-бис[имино-N-метил-4,2-пирролокарбонилимино[N-метил-4,2-пиррол]карбонилимино]бис(1,3-нафталиндисульфонат) и 3-[(2,4-диметилпиррол-5 -ил)метилен] -2-индолинон (SU5416).

Другие терапевтические средства, которые модулируют или ингибируют ангиогенез и также могут быть использованы в сочетании с соединениями по настоящему изобретению, включают средства, модулирующие или ингибирующие системы свертывания крови и фибринолиза (см. обзор в Clin. Chem. La. Med. 38:679-692 (2000)). Примеры таких средств, модулирующих или ингибирующих пути свертывания крови и фибринолиза, включают, но без ограничения, гепарин (см. Thromb. Haemost. 80:10-23 (1998)), ингибиторы низкомолекулярных гепаринов и карбоксипептидазы U (также известные как ингибиторы активируемого активным тромбином ингибитора фибринолиза [TAFIa]) (см. Thrombosis Res. 101:329-354 (2001)). Ингибиторы TAFIa описаны в патентных заявках США с серийными номерами 60/310927 (поданной 8 августа 2001 г.) и 60/349925 (поданной 18 января 2002 г.).

Термин средства, препятствующие действию рецепторных тирозинкиназ (RTK) относится к соединениям, которые ингибируют RTK и, следовательно, механизмы, вовлеченные в онкогенез и прогрессирование опухолей. Такие средства включают ингибиторы с-Kit, Eph, PDGF, Flt3 и c-Met. Дополнительные средства включают ингибиторы RTK, описанные в публикации Bume-Jensen and Hunter, Nature, 411:355-365, 2001.

Термин ингибиторы пролиферации клеток и сигнального пути выживания относится к соединениям, которые ингибируют каскады сигнальной трансдукции, действующие после рецепторов клеточной поверхности по ходу передачи сигнала. Такие средства включают ингибиторы серин/треонинкиназы (включая, но без ограничения, ингибиторы Akt, такие как те, которые описаны в WO 02/083064, WO 02/083139, WO 02/083140, US 2004-0116432, WO 02/083138, US2004-0102360, WO 03/086404, WO 03/086279, WO 03/086394, WO 03/084473, WO 03/086403, WO 2004/041162, WO 2004/096131, WO 2004/096129, WO 2004/096135, WO 2004/096130, WO 2005/100356, WO 2005/100344, US 2005/029941, US 2005/44294, US 2005/43361, 60/734188, 60/652737, 60/670469), ингибиторы Raf киназы (например, PLX4032), ингибиторы MEK (например, Arry-162, RO-4987655 и GSK-1120212), ингибиторы mTOR (например, AZD-8055, BEZ-235 и эверолимус) и ингибиторы PI3K (например, GDC-0941, ВКМ-120).

Как указано выше, термин блокаторы интегринов относится к соединениям, которые селективно препятствуют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда с интегрином α_γβ₃, к соединениям, которые селективно препятствуют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда с интегрином α_γβ₅, к соединениям, которые селективно препятствуют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда как с интегрином a_ve₃, так и с интегрином a_ve₅, и к соединениям, которые селективно препятствуют, ингибируют или противодействуют активности конкретного интегрина(ов), экспрессируемого на эндотелиальных клетках капилляров. Термин также относится к антагонистам интегринов a_ve₆, a_ve₈, α1β1, α₂β1, α₅β1, α₆β1 и α₆β₄. Термин также относится к антагонистам любого сочетания из интегринов a_ve₃, a_ve₅, a_ve₆, a_ve₈, α1β1, α₂β1, α₅β1, α₆β1 и α6β₄.

Некоторые конкретные примеры ингибиторов тирозинкиназы включают

N-(трифторметилфенил)-5-метилизоксазол-4-карбоксамид, 3-[(2,4-диметилпиррол-5-ил)метилиденил)индолин-2-он, 17-(аллиламино)-17-деметоксигелданамицин, 4-(3-хлор-4-фторфениламино)-7-метокси-6-[3-(4-морфолинил)пропоксил]хиназолин, N-(3-этинилфенил)-6,7-бис(2-метоксиэтокси)-4-хиназолинамин, BIBX1382, 2,3,9,10,11,12-гексагидро-10-(гидроксиметил)-10-гидрокси-9-метил-9,12-эпокси-1Ы-дииндоло[1,2,3fg:3',2',1 '-kl]пирроло[3,4-i] [ 1,6]бензодиазоцин-1 -он,

SH268, генистеин, STI571, СЕР2563,

4-(3-хлорфениламино)-5,6-диметил-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидинметансульфонат,

4-(3-бром-4-гидроксифенил)амино-6,7-диметоксихиназолин,

4-(4'-гидроксифенил)амино-6,7-диметоксихиназолин,

SU6668, STI571A,

N-4-хлорфенил-4-(4-пиридилметил)-1-фталазинамин и

EMD121974.

- 48 043052

Сочетание описанных в настоящей заявке антител, или антигенсвязывающих фрагментов с агонистами PPAR-γ (то есть, PPAR-гамма) и агонистами PPAR-δ (то есть, PPAR-дельта) могут быть полезным в лечении некоторых злокачественных новообразований. PPAR-γ и PPAR-δ представляют собой активируемые пролифератором пероксисом рецепторы γ и δ. О экспрессии PPAR-γ на эндотелиальных клетках и его участии в ангиогенезе сообщалось в литературе (см. J. Cardiovasc. Pharmacol. 1998; 31:909-913; J. Biol. Chem. 1999;274:9116-9121; Invest. Ophthalmol Vis. Sci. 2000; 41:2309-2317). Недавно было показано, что агонисты PPAR-γ ингибируют ангиогенный ответ на VEGF in vitro; как троглитазон, так и росиглитазон малеат, ингибируют развитие неоваскуляризации сетчатки у мышей. (Arch. Ophthamol. 2001; 119:709-717). Примеры агонистов PPAR-γ и PPAR-γ/α включают, но без ограничения, линпарзу®, рукапариб®, талазопариб®, нирапариб, велипариб®, тиазолидиндионы (такие как DRF2725, CS-011, троглитазон, росиглитазон и пиоглитазон), фенофибрат, гемфиброзил, клофибрат, GW2570, SB219994, ARH039242, JTT-501, MCC-555, GW2331, GW409544, NN2344, KRP297, NP0110, DRF4158, NN622, GI262570, PNU182716, DRF552926, 2-[(5,7-дипропил-3-трифторметил-1,2-бензизоксазол-6-ил)окси]-2метилпропионовую кислоту и 2(R)-7-(3-(2-хлор-4-(4-фторфенокси)фенокси)пропокси)-2-этилхроман-2карбоновую кислоту.

Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению также может быть полезным для лечения или предотвращения злокачественного новообразования молочной железы в сочетании с ингибиторами ароматазы. Примеры ингибиторов ароматазы включают, но не ограничиваются ими: анастрозол, лектрозол и экземестан.

Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению также может быть полезным для лечения злокачественного новообразования в сочетании со следующими химиотерапевтическими средствами: абареликс (пленаксис депо®); альдеслейкин (прокин®); альдеслейкин (пролейкин®); алемтузумаб (кампат®); алитретиноин (панретин®); аллопуринол (зилоприм®); алтретамин (гексален®); амифостин (этиол®); анастрозол (аримидекс®); триоксид мышьяка (тризенокс®); аспарагиназа (элспар®); азацитидин (видаза®); бендамустин гидрохлорид (треанда®); бевацизумаб (авастин®); бексаротен капсулы (таргретин®); бексаротен гель (таргретин®); блеомицин (бленоксан®); бортезомиб (велкейд®); брефелдин А; бусульфан внутривенный (бусульфекс®); бусульфан пероральный (милеран®); калюстерон (метосарб®); капецитабин (кселода®); карбоплатин (параплатин®); кармустин (BCNU®, BiCNU®); кармустин (глиадел®); кармустин с полифепрозаном 20 имплантат (глиадел капсулы®); целекоксиб (целебрекс®); цетуксимаб (эрбитукс®); хлорамбуцил (лейкеран®); цисплатин (платинол®); кладрибин (леустатин®, 2-CdA®); клофарабин (клолар®); циклофосфамид (цитоксан®, неосар®); циклофосфамид (цитоксан инъекция®); циклофосфамид (цитоксан таблетки®); цитарабин (цитозар-U®); цитарабин липосомный (депоцит®); дакарбазин (DTIC-дом®); дактиномицин, актиномицин D (космеген®); дальтепарин натрия инъекция (фрагмин®); дарбэпоэтин альфа (аранесп®); дазатиниб (спрайцел®); даунорубицин липосомный (дануоксом®); даунорубицин, дауномицин (даунорубицин®); даунорубицин, дауномицин (церубидин®); дегареликс (фирмагон®); денилейкин дифтитокс (онтак®); дексразоксан (зинекард®); дексразоксан гидрохлорид (тотект®); дидемнин В; 17-DMAG; доцетаксел (таксотер®); доксорубицин (адриамицин PFS®); доксорубицин (адриамицин®, рубекс®); доксорубицин (адриамицин PFS инъекция®); доксорубицин липосомный (доксил®); дромостанолон пропионат (дромостанолон®); дромостанолон пропионат (мастерон инъекция®); экулизумаб инъекция (солирис®); раствор Эллиота В (раствор Эллиота В®); элтромбопаг (промакта®); эпирубицин (элленс®); эпоэтин альфа (эпоген®); эрлотиниб (тарцева®); эстрамустин (эмцит®); этинил эстрадиол; этопозид фосфат (этопофос®); этопозид, VP-16 (вепезид®); эверолимус таблетки (афинитор®); экземестан (аромазин®); ферумокситол (ферагем инъекция®); филграстим (нейпоген®); флоксуридин (внутриартериальный) (FUDR®); флударабин (флудара®); фторурацил, 5-FU (адруцил®); фулвестрант (фаслодекс®); гефитиниб (пресса®); гелданамицин; гемцитабин (гемзар®); гемтузумаб озагомицин (милотарг®); гозерелин ацетат (золадекс имплантат®); гозерелин ацетат (золадекс®); гистрелин ацетат (гистрелин имплантат®); гидроксимочевина (гидреа®); ибритумомаб тиуксетан (зевалин®); идарубицин (идамицин®); ифосфамид (ифекс®); иматиниб мезилат (гливек®); интерферон альфа-2а (роферон А®); интерферон альфа-2b (интрон А®); иобенгуан I 123 инъекция (адревью®); иринотекан (камптосар®); иксабепилон (иксемпра®); лапатиниб таблетки (тайкерб®); леналидомид (ревлимид®); лектрозол (фемара®); лейковорин (велковорин®, лейковорин®); леупролид ацетат (элигард®); левамизол (эргамизол®); ломустин, CCNU (CeeBU®); меклоретамин, азотистый иприт (мустарген®); магестрол ацетат (мегас®); мелфалан, L-PAM (алкеран®); меркаптопурин, 6-МР (пуринтол®); месна (меснекс®); месна (меснекс таблетки®); метотрексат (метотрексат®); метоксален (увадекс®); 8-метоксипсорален; митомицин С (мутамицин®); митотан (лизодрен®); митоксантрон (новантрон®); митрамицин; нандролон фенпропионат (дураболин-50®); неларабин (арранон®); нилотиниб (тасигна®); нофетумомаб (верлума®); офатумумаб (арзерра®); опрелвекин (неумега®); оксалиплатин (элоксатин®); паклитаксел (паксен®); паклитаксел (таксол®); паклитаксел белок-связанные частицы (абраксан®); палифермин (кепиванс®); памидронат (аредиа®); пани

- 49 043052 тумумаб (вектибикс®); пазопаниб таблетки (вотриент®); пегадемаза (адаген (пегадемаза бычья)®); пегаспаргаза (онкаспар®); пегфилграстим (неуласта®); пеметрексед динатрий (алимта®); пентостатин (нипент®); пипоброман (верцит®); плериксафор (мозобил®); пликамицин, митрамицин (митрацин®); порфимер натрий (фотофрин®); пралатрексат инъекция (фолотин®); прокарбазин (матулан®); хинакрин (атабрин®); рапамицин; расбуриказа (элитек®); ралоксифен гидрохлорид (эвиста®); ритуксимаб (ритуксан®); ромидепсин (истодакс®); ромиплостим (энплейт®); сарграмостим (лейкин®); сарграмостим (прокин®); сорафениб (нексавар®); стрептозоцин (заносар®); сунитиниб малеат (сутент®); тальк (склерозол®); тамоксифен (нолвадекс®); темозололмид (темодар®); темсиролимус (торисел®); тенипозид, VM-26 (вумон®); тестолактон (теслак®); тиогуанин, 6-TG (тиогуанин®); тиопурин; тиотепа (тиоплекс®); топотекан (гикамтин®); торемифен (фарестон®); тозитумомаб (бексар®); тозитумомаб/I-131 тозитумомаб (бексар®); транс-ретиноевая кислота; трастузумаб (герцептин®); третиноин, атра (везаноид®); триэтиленмеламин; урамустин (урамустин капсулы®); валрубицин (валстар®); винбластин (велбан®); винкристин (онковин®); винорелбин (навелбин®); вориностат (золинза®); вортманнин и золедронат (зомета®).

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) используют в сочетании с одним или более из противорвотных средств, включают, но без ограничения: касопитант (GlaxoSmithKline), нетупитант (MGI-Helsinn) и другие антагонисты рецепторов NK-1, палоносетрон (продаваемый под названием алокси от MGI Pharma), апрепитант (продаваемый под названием эменд от Merck and Co.; Rahway, NJ), дифенгидрамин (продаваемый под названием бенадрил® от Pfizer; New York, NY), гидроксизин (продаваемый под названием атаракс® от Pfizer; New York, NY), метоклопрамид (продаваемый под названием реглан® от АН Robins Co.; Richmond, VA), лоразепам (продаваемый под названием ативан® от Wyeth; Madison, NJ), альпразолам (продаваемый под названием занакс® от Pfizer; New York, NY), галоперидол (продаваемый под названием галдол® от Ortho-McNeil; Raritan, NJ), дроперидол (инапсин®), дронабинол (продаваемый под названием маринол® от Solvay Pharmaceuticals, Inc.; Marietta, GA), дексаметазон (продаваемый под названием декадрон® от Merck and Co.; Rahway, NJ), метилпреднизолон (продаваемый под названием медрол® от Pfizer; New York, NY), прохлорперазин (продаваемый под названием компазин® от Glaxosmithkline; Research Triangle Park, NC), гранизетрон (продаваемый под названием китрил® от Hoffmann-La Roche Inc.; Nutley, NJ), ондансетрон (продаваемый под названием зофран® от Glaxosmithkline; Research Triangle Park, NC), долазетрон (продаваемый под названием анземет® от Sanofi-Aventis; New York, NY), трописетрон (продаваемый под названием навобан® от Novartis; East Hanover, NJ).

Другие побочные эффекты противораковой терапии включают дефицит красных и белых клеток крови. Соответственно, в одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант), используют в сочетании со средством, которое лечит или предотвращает такой дефицит, таким как, например, филграстим, пегфилграстим, эритропоэтин, эпоэтин альфа или дарбэпоэтин альфа.

В одном из вариантов осуществления изобретения анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) вводят в сочетании с противораковой лучевой терапией. Например, в одном из вариантов осуществления изобретения лучевая терапия представляет собой наружную дистанционную лучевую терапию (ДЛТ): способ доставки пучка высокоэнергетического рентгеновского излучения к месту расположения опухоли. Пучок создают вне тела пациента (например, с помощью линейного ускорителя) и направляют в зону опухоли. Это рентгеновское излучение может разрушать раковые клетки, и тщательное планирование воздействия позволяет избегать повреждения соседних тканей. Никакие радиоактивные источники не размещают в теле пациента. В одном из вариантов осуществления изобретения лучевая терапия представляет собой протонную терапию: вид конформной терапии, при которой пораженную ткань бомбардируют протонами вместо рентгеновского излучения. В одном из вариантов осуществления изобретения лучевая терапия представляет собой конформную наружную лучевую терапию: процедуру, в которой используют передовую технологию для адаптации лучевой терапии к структурам тела индивидуума. В одном из вариантов осуществления изобретения лучевая терапия представляет собой брахитерапию: временное размещение радиоактивных материалов в теле, обычно используемое для введения дополнительной дозы или бустерной дозы излучения в конкретную область тела.

В одном из вариантов осуществления изобретения в сочетании с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом (например, антителом 131А или его гуманизированным вариантом), используют хирургическую процедуру, например, хирургическое иссечение опухоли.

В следующем варианте осуществления пациенту проводят инфузию аутологичных Т-клеток, размноженных ex vivo, в сочетании со специфическими анти-CD27 антителами, или их антигенсвязывающими фрагментами. В другом варианте осуществления пациенту вводят аутологичные Т-клетки со специфическими анти-CD27 антителами, или их антигенсвязывающими фрагментами. В другом варианте

- 50 043052 осуществления пациента вакцинируют противораковой вакциной и вводят инфузией аутологичные Тклетки, размноженные ex vivo, со специфическими анти-CD27 антителами, или их антигенсвязывающими фрагментами. Аутологичные Т-клетки могут представлять собой аутологичные инфильтрирующие лимфоциты, Т-клетки, трансдуцированные высокоаффинными Т-клеточными рецепторами для опухолевых антигенов, или Т-клетки, трансдуцированные химерными антигенными рецепторами, состоящими из гибридов легких цепей иммуноглобулина с эндодоменами Т-клеточных сигнальных молекул. Смотри Kalos M. and June С. Н., Immunity, 39, 2013, р. 49-60; Wu R. et al., Cancer J. 2012; 18(2):160-175; и June, С. H., J. Clin. Invest. 117:1466-1476 (2007).

Экспериментальные и диагностические варианты применения Ahtu-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант), можно использовать в качестве аффинных средств для очистки. В данном способе анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты иммобилизуют на твердой фазе, такой как Sephadex®, стекло, агарозная смола или фильтровальная бумага, методами, хорошо известными в данной области. Иммобилизованное антитело, или фрагмент, контактирует с образцом, содержащим белок CD27 (или его фрагмент), который предстоит очищать, затем подложку промывают соответствующим растворителем, который будет удалять практически весь материал в образце, за исключением белка CD27, связанного с иммобилизованным антителом или фрагментом. В завершение, подложку промывают растворителем, который элюирует связанный CD27 (например, белком А). Такие иммобилизованные антитела и фрагменты являются частью настоящего изобретения.

Предложены также антигены для получения вторичных антител, полезных, например, для проведения вестерн-блот анализов и других иммуноанализов, описанных в настоящем документе.

Ahtu-CD27 антитела (например, гуманизированные антитела) и их антигенсвязывающие фрагменты также могут быть полезны в диагностических анализах на белок CD27, например, для обнаружения его экспрессии в определенных клетках, тканях или сыворотке, например, клетках опухолей, таких как клетки меланомы. Такие диагностические методы могут быть полезны в диагностике различных заболеваний.

Настоящее изобретение включает анализ ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ), в котором используют анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, раскрытое в настоящем документе (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант).

Например, такой способ включает следующие этапы:

(a) покрытие субстрата (например, поверхности лунки планшета для микротитрования, например, пластикового планшета) анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом;

(b) нанесение образца, тестируемого на присутствие CD27, на субстрат;

(c) промывание планшета, при этом несвязанный материал в образце удаляется;

(d) нанесение меченых детектируемой меткой антител (например, связанных с ферментом антител), которые также специфичны в отношении антигена CD27;

(e) промывание субстрата, при этом несвязанные меченые антитела удаляются;

(f) если меченые антитела связаны с ферментом, наносят химический реагент, который при взаимодействии с ферментом генерирует флуоресцентный сигнал; и (g) обнаружение присутствия меченого антитела. Обнаружение метки, связанной с субстратом, указывает на присутствие белка CD27.

В следующем варианте осуществления меченое антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит в качестве метки пероксидазу, которая взаимодействует с ABTS (например, 2,2'-азинобис(3этилбензтиазолин-6-сульфоновой кислотой)) или 3,3',5,5'-тетраметилбензидином, при этом происходит изменение окраски, которое поддается обнаружению. Альтернативно, меченое антитело, или фрагмент, содержит в качестве метки детектируемый радиоизотоп (например, ³Н), который можно обнаруживать в сцинтилляционном счетчике в присутствии сцинтиллятора.

Ahtu-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант) можно использовать в методе вестерн-блоттинга или иммунного обнаружения белка на блоте. Такой метод является частью настоящего изобретения и включает, например, этапы:

(1) необязательно, перенесения белков из образца, тестируемого на присутствие CD27 (например, после электрофоретического разделения белков образца в ПААГ или SDS-ПААГ), на мембрану или другой твердый субстрат методом, известным в данной области (например, полусухим блоттингом или блоттингом в резервуаре); создания контакта мембраны или другого твердого субстрата, тестируемого на присутствие связанного CD27 или его фрагмента, с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по изобретению.

Такая мембрана может представлять собой нитроцеллюлозную или виниловую (например, из поливинилиденфторида (ПВДФ)) мембрану, на которую были перенесены белки, тестируемые на присутствие CD27, после не денатурирующего электрофореза в ПААГ (электрофореза в полиакриламидном геле) или электрофореза в SDS-ПААГ (электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия) (например, после электрофоретического разделения в геле). Перед контактированием мембраны с анти

- 51 043052

CD27 антителом, или фрагментом, мембрану, необязательно, блокируют, например, раствором обезжиренного сухого молока или тому подобного, для блокирования сайтов неспецифического связывания белков на мембране.

(2) промывания мембраны один или более раз для удаления несвязанного анти-CD27 антитела, или фрагмента, а также других несвязанных веществ; и (3) обнаружения связанного анти-CD27 антитела, или фрагмента.

Обнаружение связанного антитела, или фрагмента, указывает на то, что белок CD27 присутствует на мембране или субстрате и в образце. Обнаруживать связанное антитело, или фрагмент, можно путем связывания антитела, или фрагмента, с вторичным антителом (антителом против иммуноглобулинов), меченым детектируемой меткой, с последующим обнаружением присутствия вторичного антитела.

Ahtu-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также можно использовать для иммуногистохимического анализа. Такой способ является частью настоящего изобретения и включает, например, (1) создание контакта клетки (например, клетки опухоли, такой как клетка меланомы), тестируемой на присутствие белка CD27, с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по изобретению; и (2) обнаружение антитела или фрагмента на или в клетке. Если антитело, или фрагмент, само мечено детектируемой меткой, его можно обнаруживать непосредственно. Альтернативно, антитело, или фрагмент, может быть связано меченым детектируемой меткой вторичным антителом, которое обнаруживают.

Некоторые анти-CD27 антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), также можно использовать для in vivo визуализации опухоли. Такой способ может включать инъекцию радиоактивно меченого анти-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, в тело пациента, тестируемого на наличие опухоли, связанной с экспрессией CD27 (например, которая экспрессирует CD27, например, на поверхности клетки опухоли), с последующей визуализацией методом томографии тела пациента для обнаружения присутствия меченого антитела, или фрагмента, например, в локусах, содержащих в высокой концентрации антитело, или фрагмент, связанное с опухолью. Обнаружение локусов указывает на присутствие CD27+ опухоли и опухолевых клеток.

Методы визуализации включают ОЭКТ-визуализацию (однофотонную эмиссионную компьютерную томографию) или ПЭТ-визуализацию (позитронную эмиссионную томографию). Метки включают, например, иод-123 (¹²³I) и технеций-99m (^99mTc), например, в сочетании с ОЭКТ-визуализацией или 11С, ¹³N, ¹⁵O или ¹⁸F, или индий-111, например, в сочетании с ПЭТ-визуализацией (смотри, например, Gordon et al. (2005) International Rev. Neurobiol. 67:385-440).

Фармацевтические композиции и введение

Для получения фармацевтических или стерильных композиций анти-CD27 антител и антигенсвязывающих фрагментов по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов) антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, смешивают с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. Смотри, например, Remington's Pharmaceutical Sciences и U.S. Pharmacopeia: National Formulary, Mack Publishing Company, Easton, PA (1984).

Препараты терапевтических и диагностических средств можно получать путем смешивания с приемлемыми носителями, эксципиентами или стабилизаторами, например, в форме лиофилизированных порошков, густых суспензий, водных растворов или суспензий (см., например, Hardman, et al. (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, NY; Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams and Wilkins, New York, NY; Avis, et al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Marcel Dekker, NY; Weiner and Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity and Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, NY).

Токсичность и терапевтическую эффективность антител по изобретению, вводимых отдельно или в сочетании с другим терапевтическим средством, можно определять стандартными фармацевтическими методами с использованием клеточных культур или экспериментальных животных, например, для определения LD₅₀ (дозы, летальной для 50% популяции) и ED₅₀ (дозы, терапевтически эффективной для 50% популяции). Отношение доз для токсического и терапевтического эффектов называют терапевтическим индексом (LD₅₀/ED₅₀). Данные, полученные из этих анализов клеточных культур и исследований на животных, можно использовать для определения диапазона доз, используемых для человека. Доза таких соединений предпочтительно лежит в диапазоне циркулирующих концентраций, которые включают ED50 с небольшой токсичностью, или без нее. В этом диапазоне дозы могут варьироваться в зависимости от используемой лекарственной формы и пути введения.

В следующем варианте осуществления дополнительное терапевтическое средство вводят пациенту в сочетании с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по изобретению (например, антителом 131А или его гуманизированными вариантами) в соответствии с Physicians' Desk Refer

- 52 043052 ence 2003 (Thomson Healthcare; 57^th edition (November 1, 2002)).

Способ введения может варьироваться. Пути введения включают пероральный, ректальный, трансмукозальный, кишечный, парентеральный; внутримышечный, подкожный, внутрикожный, интрамедуллярный, интратекальный, прямой интравентрикулярный, внутривенный, внутрибрюшинный, интраназальный, внутриглазной, ингаляцию, инсуффляцию, топический, кожный, чрескожный или внутриартериальный.

В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) можно вводить инвазивным путем, например, инъекцией. В следующих вариантах осуществления изобретения антиCD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или его фармацевтическую композицию вводят внутривенно, подкожно, внутримышечно, внутриартериально, внутрь опухоли, либо путем ингаляции, аэрозольной доставки. Введение неинвазивными путями (например, перорально; например, в виде пилюли, капсулы или таблетки) также входит в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится к сосуду (например, пластиковому или стеклянному флакону, например, с крышкой, или хроматографической колонке, полой игле или цилиндру шприца), содержащему любое из антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), или его фармацевтическую композицию. Настоящее изобретение также относится к инъекционному устройству, содержащему любое из антител, или антигенсвязывающих фрагментов, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), или его фармацевтическую композицию. Инъекционное устройство представляет собой устройство, которое вводит вещество в тело пациента парентеральным путем введения, например, внутримышечным, подкожным или внутривенным. Например, инъекционное устройство может представлять собой шприц (например, предварительно заполненный фармацевтической композицией, такой как автоматический медицинский шприц), который, например, включает цилиндр или корпус для содержания инъецируемой жидкости (например, антитела или фрагмента, или его фармацевтической композиции), иглу для прокалывания кожи и/или кровеносных сосудов для инъекции жидкости и поршень для выталкивания жидкости из цилиндра через отверстие иглы. В одном из вариантов осуществления изобретения инъекционное устройство, содержащее антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению, или его фармацевтическую композицию, представляет собой инъекционное устройство для внутривенного (в/в) введения. Такое устройство содержит антитело, или фрагмент, или его фармацевтическую композицию, в канюле или троакаре/игле, которая может быть соединена с трубкой, которая может быть соединена с мешком или резервуаром для содержания жидкости (например, солевого раствора или раствора Рингера лактата, содержащего NaCl, натрия лактат, KCl, CaCl₂ и, необязательно, содержащего глюкозу), вводимой в тело пациента через канюлю или троакар/иглу. Антитело, или фрагмент, или его фармацевтическую композицию в одном из вариантов осуществления изобретения можно вводить в устройство после того, как троакар и канюля введены в вену субъекта и троакар удален из введенной канюли. Устройство для в/в введения можно, например, вводить в периферическую вену (например, в предплечье или плече); верхнюю полую вену или нижнюю полую вену, или в правое предсердие сердца (например, в центральную вену), или в подключичную, внутреннюю яремную или бедренную вену и, например, продвигать в направлении сердца, пока оно не достигнет верхней полой вены или правого предсердия (например, центральной венозной линии). В одном из вариантов осуществления изобретения инъекционное устройство представляет собой автоматический медицинский шприц, безыгольный шприц или внешний инфузионный насос. В безыгольном шприце используется узкая струя жидкости под высоким давлением, которая проникает в эпидермис, доставляя антитело, или фрагмент, или его фармацевтическую композицию в тело пациента. Внешние инфузионные насосы представляют собой медицинские устройства, доставляющие антитело, или фрагмент, или его фармацевтическую композицию в тело пациента в контролируемых количествах. Внешние инфузионные насосы могут быть электрическими или механическими. Разные насосы действуют по-разному, например, шприцевой насос удерживает жидкость в резервуаре шприца, а подвижный поршневой элемент контролирует доставку жидкости, эластомерный насос удерживает жидкость в растяжимом шарообразном резервуаре, и давление от эластичных стенок шара обеспечивает доставку жидкости. В перистальтическом насосе ролики, прокатываясь по гибкой трубке, сдавливают ее, проталкивая жидкость вперед. В многоканальном насосе жидкости могут доставляться из нескольких резервуаров с разными скоростями.

Фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем документе, также можно вводить безыгольным устройством для подкожных инъекций, таким как устройства, описанные в патентах США №№ 6620135; 6096002; 5399163; 5383851; 5312335; 5064413; 4941880; 4790824 или 4596556. Такие безыгольные устройства, содержащие фармацевтическую композицию, также являются частью настоящего изобретения. Фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем документе, также можно вводить путем инфузии. Примеры хорошо известных имплантатов и модулей для введения фармацевтических композиций включают те, которые описаны в: патенте США № 4487603, в котором описан имплантируемый микроинфузионный насос для введения медикаментов с контролируемой скоростью; патенте США № 4447233, в котором описан инфузионный насос для доставки медикаментов с точной скоростью инфу

- 53 043052 зии; патенте США № 4447224, в котором описан имплантируемый инфузионный аппарат переменного потока для продолжительной доставки лекарственного средства; патенте США № 4439196, в котором описана осмотическая система доставки лекарственного средства, имеющая многокамерное строение. Множество других таких имплантатов, систем и модулей для доставки хорошо известны специалистам в данной области, и те, которые содержат фармацевтические композиции по настоящему изобретению, входят в объем настоящего изобретения.

Альтернативно, можно вводить анти-CD27 антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) локальным, а не системным путем, например, вводя инъекцией антитело, или фрагмент, непосредственно в опухоль, например, CD27+ опухоль. Кроме того, можно вводить антитело, или фрагмент, с помощью системы таргетированной доставки лекарственного средства, например, в липосоме, покрытой тканеспецифическим антителом, нацеленным, например, на опухоль, например, CD27+ опухоль, например, характеризующуюся иммунопатологией. Липосомы будут направлены к пораженной ткани и будут избирательно поглощаться этой тканью. Такие способы и липосомы являются частью настоящего изобретения.

Режим введения зависит от нескольких факторов, включая скорость оборота терапевтического антитела, или антигенсвязывающего фрагмента, в сыворотке или ткани, уровень симптомов, иммуногенность терапевтического антитела и доступность клеток-мишеней в биологическом матриксе.

Предпочтительно, режим введения обеспечивает доставку достаточного количества терапевтического антитела, или фрагмента, для облегчения подвергаемого лечению заболевания, при этом с минимальными нежелательными побочными эффектами. Соответственно, количество доставляемого биологического средства частично зависит от конкретного терапевтического антитела и степени тяжести состояния, подвергаемого лечению. Руководство по выбору соответствующих доз терапевтических антител, или фрагментов, доступно (смотри, например, Wawrzynczak, (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert, et al., 2003, New Engl. J. Med. 348:601-608; Milgrom et al., 1999, New Engl. J. Med. 341:1966-1973; Slamon et al., 2001, New Engl. J. Med. 344:783-792; Beniaminovitz et al., 2000, New Engl. J. Med. 342:613-619; Ghosh et al., 2003, New Engl. J. Med. 348:24-32; Lipsky et al., 2000, New Engl. J. Med. 343:1594-1602).

Соответствующую дозу определяет клиницист, например, с использованием параметров или факторов, известных или предполагаемых в данной области для целей лечения заболевания. Как правило, дозирование начинают с количества, которое немного меньше оптимальной дозы, а затем дозу увеличивают с небольшими приращениями до достижения желаемого или оптимального эффекта относительно любых отрицательных побочных эффектов. Важные диагностические меры включают определение симптомов, например, воспаления или уровня продуцирования воспалительных цитокинов. Как правило, желательно, чтобы используемое биологическое средство имело происхождение от того же биологического вида, что и животное, которое предстоит лечить, в этом случае сводится к минимуму любой иммунный ответ на реагент. В случае субъектов-людей, например, может быть желательно использовать гуманизированные и полностью человеческие антитела.

Антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, раскрытые в настоящем документе (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты), можно вводить непрерывной инфузией или дозами, вводя, например, один раз в день, 1-7 раз в неделю, раз в неделю, раз в две недели, раз в месяц, раз в два месяца, раз в квартал, раз в полгода, раз в год и так далее. Дозы можно вводить, например, внутривенно, подкожно, топически, перорально, назально, ректально, внутримышечно, интрацеребрально, интраспинально или путем ингаляции. Общая недельная доза, как правило, составляет по меньшей мере 0,05 мкг/кг массы тела, чаще по меньшей мере 0,2 мкг/кг, 0,5 мкг/кг, 1 мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг, 0,25 мг/кг, 1,0 мг/кг, 2,0 мг/кг, 5,0 мг/мл, 10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг или более (см., например, Yang, et al., 2003, New Engl. J. Med. 349:427-434; Herold, et al., 2002, New Engl. J. Med. 346:1692-1698; Liu, et al., 1999, J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456; Portielji, et al., 2003, Cancer Immunol. Immunother. 52:151-144). Также можно вводить дозы, позволяющие достигать заранее определенной целевой концентрации антиCD27 антитела в сыворотке субъекта, например 0,1, 0,3, 1, 3, 10, 30, 100, 300 мкг/мл или более. В других вариантах осуществления анти-CD27 антитело по настоящему изобретению вводят, например, подкожно или внутривенно, раз в неделю, раз в две недели, раз в 4 недели, раз в месяц, раз в два месяца или раз в квартал в дозе 10, 20, 50, 80, 100, 200, 500, 1000 или 2500 мг/субъекта.

Используемый в настоящем документе термин эффективное количество означает количество анtu-CD27 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по изобретению (например, антитела 131А и его гуманизированных вариантов), которое, при введении отдельно или в сочетании с дополнительным терапевтическим средством в клетку, ткань или в тело субъекта, является эффективным для вызывания измеримого ослабления одного или более симптомов заболевания, например, злокачественного новообразования, или прогрессирования злокачественного новообразования. Эффективная доза также означает количество антитела, или фрагмента, достаточное для, по меньшей мере, частичного ослабления симптомов, например, уменьшения размеров или элиминации опухоли, прекращения роста опухоли, увели

- 54 043052 чения срока выживания. В случае, если индивидуальный активный ингредиент вводят отдельно, термин эффективная доза относится к данному отдельному ингредиенту. Если ингредиенты используют в сочетании, термин эффективная доза относится к суммарному количеству активных ингредиентов, которое приводит к терапевтическому эффекту при введении в сочетании, последовательно или одновременно. Эффективное количество терапевтического средства будет приводить к улучшению диагностического показателя, или параметра, на по меньшей мере 10%; как правило, на по меньшей мере 20%; предпочтительно, по меньшей мере примерно 30%; более предпочтительно, по меньшей мере 40%, и наиболее предпочтительно, на по меньшей мере 50%. Эффективное количество также может приводить к улучшению субъективных показателей в случаях, когда субъективные показатели используют для оценки степени тяжести заболевания.

Наборы

Также предложены наборы, содержащие один или более компонентов, которые включают, но не ограничиваются ими, анти-CD27 антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, описанное настоящем документе (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант), в сочетании с одним или более дополнительными компонентами, в том числе, но без ограничения, фармацевтически приемлемым носителем и/или терапевтическим средством, описанным в настоящем документе. Антитело, или фрагмент, и/или терапевтическое средство можно формулировать в виде чистой композиции или в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем в фармацевтической композиции.

В одном варианте осуществления набор включает анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А или его гуманизированный вариант), или его фармацевтическую композицию в одном контейнере (например, в стерильном стеклянном или пластиковом флаконе) и/или терапевтическое средство и его фармацевтическую композицию в другом контейнере (например, в стерильном стеклянном или пластиковом флаконе).

В другом варианте осуществления набор содержит комбинацию по изобретению, включающую анtu-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, гуманизированное 131А) вместе с фармацевтически приемлемым носителем, необязательно, в сочетании с одним или более терапевтическими средствами, сформулированными вместе, необязательно, в фармацевтической композиции в одном общем контейнере.

Если набор включает фармацевтическую композицию для парентерального введения пациенту, набор может включать устройство для выполнения такого введения. Например, набор может включать одну или более игл для подкожных инъекций или другие инъекционные устройства, описанные выше.

Набор может включать вкладыш в упаковку, содержащий информацию о фармацевтических композициях и лекарственных формах в наборе. Как правило, такая информация помогает пациентам и врачам использовать входящие в набор фармацевтические композиции и лекарственные формы эффективно и безопасно. Например, вкладыш может содержать следующую информацию о комбинации по изобретению: показатели фармакокинетики и фармакодинамики, результаты клинических исследований, параметры эффективности, показания к применению, противопоказания, предостережения, меры предосторожности, побочные реакции, сведения о передозировке, надлежащие дозы и способ введения, описание поставляемой формы, надлежащие условия хранения, литературные источники, информацию о производителе/дистрибьютере и патентную информацию.

Наборы для обнаружения и наборы для терапии

Для удобства, анти-CD27 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по изобретению (например, антитело 131А и его гуманизированные варианты) можно предоставлять в наборе, то есть, в виде упакованной комбинации реагентов в заранее определенных количествах с инструкциями по проведению диагностики или анализа на обнаружение. Если антитело, или фрагмент, содержит в качестве метки фермент, набор будет включать субстраты и кофакторы, необходимые для фермента (например, предшественник субстрата, создающий поддающийся обнаружению хромофор или флуорофор). Кроме того, могут быть включены другие добавки, такие как стабилизаторы, буферы (например, блокирующий буфер или лизирующий буфер) и тому подобное. Относительные количества различных реагентов могут варьироваться в широких пределах для создания концентраций реагентов в растворе, которые существенно оптимизируют чувствительность анализа. В частности, реагенты могут быть предоставлены в виде сухих порошков, как правило, лиофилизированных, включая эксципиенты, которые при растворении образуют раствор реагента, имеющий соответствующую концентрацию.

Также предложены реагенты для диагностики или обнаружения и наборы, содержащие один или более таких реагентов, для использования в разных обнаруживающих анализах, включая, например, иммуноанализы, такие как ELISA (в формате сэндвич или конкурентного анализа). Компоненты набора могут быть заранее связаны с твердой подложкой или могут быть нанесены на поверхность твердой подложки при использовании набора. В некоторых вариантах осуществления изобретения средства для генерирования сигнала могут быть предоставлены предварительно связанными с антителом, или фрагментом, по изобретению или может потребоваться их объединение с одним или более компонентами, например, буферами, конъюгатами антитело-фермент, ферментными субстратами, или тому подобным, перед использованием. Наборы также могут включать дополнительные реагенты, например, блокирую

- 55 043052 щие реагенты для уменьшения неспецифического связывания с поверхностью твердой фазы, промывающие реагенты, ферментные субстраты и тому подобное. Поверхность твердой фазы может иметь форму трубки, гранулы, планшета для микротитрования, микросферы или других материалов, подходящих для иммобилизации белков, пептидов или полипептидов. В конкретных аспектах фермент, катализирующий образование хемилюминесцентного или хромогенного продукта, либо восстановление хемилюминесцентного или хромогенного субстрата, является компонентом средства генерирования сигнала. Такие ферменты хорошо известны в данной области. Наборы могут включать любые из захватывающих средств и обнаруживающих реагентов, описанных в настоящем документе. Необязательно, набор также может включать инструкции по осуществлению способов по изобретению.

Также предложен набор, включающий анти-CD27 антитело (например, гуманизированное антитело), или его антигенсвязывающий фрагмент, упакованное в контейнере, таком как флакон или бутыль, и дополнительно включающий этикетку, прикрепленную к контейнеру или упакованную вместе с ним; на этикетке указано содержание контейнера и приведены предписания и/или инструкции, относящиеся к использованию содержимого контейнера для предотвращения/лечения одного или более болезненных состояний, описанных в настоящем документе.

В одном аспекте набор предназначен для лечения злокачественного новообразования и содержит анти-CD27 антитело (например, гуманизированное антитело), или его антигенсвязывающий фрагмент, и дополнительное терапевтическое средство или вакцину. Набор также может, необязательно, включать шприц для парентерального, например, внутривенного, введения. В другом аспекте набор включает анtu-CD27 антитело (например, гуманизированное антитело), или его антигенсвязывающий фрагмент, и этикетку, прикрепленную к контейнеру или упакованную вместе с ним, содержащую информацию об использовании антитела, или фрагмента, вместе с вакциной или дополнительным терапевтическим средством. В другом аспекте набор включает вакцину или дополнительное терапевтическое средство и этикетку, прикрепленную к контейнеру или упакованную вместе с ним, содержащую информацию об использовании вакцины или дополнительного терапевтического средства с анти-CD27 антителом, или фрагментом. В конкретных вариантах осуществления анти-CD27 антитело и вакцина или дополнительное терапевтическое средство находятся в разных флаконах или объединены в одной и той же фармацевтической композиции. В дополнение к противоопухолевым вакцинам, описанным выше, в сочетании с анти-CD27 антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, можно использовать вакцины против инфекционного заболевания, например, комвакс®, M-M-R® II, педвакс HIB®, пневмовакс® 23, проквад®, ротатек®, варивакс® и зоставакс®.

Как описано выше в разделе, посвященном комбинированной терапии, для одновременного введения двух терапевтических средств необязательно вводить средства в одно и то же время или одним и тем же путем введения при условии, что имеет место перекрывание периодов времени, в течение которых средства оказывают свое терапевтическое действие. Предусмотрено одновременное или последовательное введение, а также введение в разные дни или недели.

Также могут быть изготовлены наборы для терапии и обнаружения, раскрытые в настоящем документе, включающие по меньшей мере одно антитело, пептид, антигенсвязывающий фрагмент или полинуклеотид, раскрытые в настоящем документе, и инструкции по использованию композиции в качестве обнаруживающего реагента или терапевтического средства. Контейнеры, используемые в таких наборах, как правило, могут представлять собой по меньшей мере один флакон, пробирку, колбу, бутыль, шприц или другой подходящий контейнер, в который одна или более из обнаруживающих и/или терапевтических композиций могут быть помещены и, предпочтительно, разделены на соответствующие аликвоты. В случае дополнительного предоставления второго терапевтического средства набор также может включать второй контейнер, в который может быть помещена вторая обнаруживающая и/или терапевтическая композиция. Альтернативно, несколько соединений могут быть приготовлены в одной фармацевтической композиции и могут быть упакованы в одном контейнере, таком как флакон, колба, шприц, бутыль или другой подходящий одиночный контейнер. Наборы, раскрытые в настоящем документе, как правило, также будут включать средства для содержания флакона(ов) в плотной защитной оболочке для коммерческой продажи, такие как, например, изготовленные методом литья под давлением или литья с раздувом пластиковые контейнеры, в которых содержатся нужные флаконы. Если в набор включена радиоактивная, хромогенная, флуорогенная или другая детектируемая метка, или обнаруживающее средство, средство для мечения либо может быть предоставлено в том же контейнере, что и сама обнаруживающая или терапевтическая композиция, либо, альтернативно, может быть помещено во второй отдельный контейнер, в который эта вторая композиция может быть помещена и разделена на соответствующие аликвоты. Альтернативно, обнаруживающий реагент и метку можно готовить в одном контейнере и, в большинстве случаев, набор, как правило, также будет включать средства для содержания флакона(ов) в плотной защитной оболочке для коммерческой продажи и/или удобную упаковку и средство доставки.

Также предложено устройство, или аппарат, для осуществления способов обнаружения или мониторинга, описанных в настоящем документе. Такой аппарат может включать камеру или пробирку, в которую может быть помещен образец, систему подачи жидкости, необязательно, включающую клапаны

- 56 043052 или насосы для направления потока образца через устройство, необязательно, фильтры для отделения плазмы или сыворотки от форменных элементов крови, смесительные камеры для добавления улавливающих реагентов или обнаруживающих реагентов и, необязательно, обнаруживающее устройство для определения количества детектируемой метки, связанной с иммунным комплексом улавливающего реагента. Поток образца может быть пассивным (например, под действием капиллярных, гидростатических или других сил, которые не требуют дальнейших манипуляций с устройством после нанесения образца) или активным (например, за счет применения силы, создаваемой механическими насосами, электроосмотическими насосами, центробежной силой или повышением давления воздуха), или может создаваться за счет сочетания активных и пассивных сил.

В следующих вариантах осуществления также предложен процессор, машиночитаемое устройство памяти и подпрограмма, хранящаяся на машиночитаемом устройстве памяти и адаптированная к выполнению на процессоре, для осуществления любых способов, описанных в настоящем документе. Примеры подходящих компьютерных систем, оборудования и/или конфигураций включают персональные компьютеры, серверные компьютеры, портативные и переносные устройства, многопроцессорные системы, микропроцессорные системы, телевизионные приставки, программируемые бытовые электронные устройства, сетевые ПК, миникомпьютеры, универсальные вычислительные машины, распространяемое вычислительное оборудование, которое включает любые из вышеперечисленных систем или устройств, или любые другие системы, известные в данной области.

Общие методы

Стандартные методы молекулярной биологии описаны в Sambrook, Fritsch and Maniatis (1982, 1989, 2^nd Ed., и 2001, 3^rd Ed.) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning, 3^rd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) Recombinant DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA). Стандартные методы также описаны в сборнике Ausbel et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, в котором описано клонирование в бактериальных клетках и мутагенез ДНК (том 1), клонирование в клетках млекопитающих и дрожжей (том 2), гликоконъюгаты и экспрессия белка (том 3) и биоинформатика (том 4).

Методы очистки белков, включая иммунопреципитацию, хроматографию, электрофорез, центрифугирование и кристаллизацию, описаны (Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York). Методы химического анализа, химической модификации, посттрансляционной модификации, продуцирования слитых белков, гликозилирования белков описаны (смотри, например, Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp. 16.0.5-16.22.17; Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp. 45-89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384-391). Методы получения, очистки и фрагментации поликлональных и моноклональных антител описаны (Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, выше). Стандартные методы характеризации взаимодействий лиганд/рецептор описаны (смотри, например, Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York).

Методы получения моноклональных, поликлональных и гуманизированных антител описаны (смотри, например, Sheperd and Dean (eds.) (2000) Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann and Dubel (eds.) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow and Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp. 139-243; Carpenter, et al. (2000) J. Immunol. 165:6205; He et al. (1998) J. Immunol. 160:1029; Tang et al. (1999) J. Biol. Chem. 274:27371-27378; Baca et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:10678-10684; Chothia et al. (1989) Nature 342:877-883; Foote and Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487-499; патент США № 6329511).

Альтернативой гуманизации является использование библиотек человеческих антител, экспонированных на фаге, или библиотек человеческих антител в трансгенных мышах (Vaughan et al. (1996) Nature Biotechnol. 14:309-314; Barbas (1995) Nature Medicine 1:837-839; Mendez et al. (1997) Nature Genetics 15:146-156; Hoogenboom and Chames (2000) Immunol. Today 21:371-377; Barbas et al. (2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York; Kay et al. (1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA; de Bruin et al. (1999) Nature Biotechnol. 17:397-399).

Одноцепочечные антитела и диатела описаны (смотри, например, Malecki et al., 2002, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:213-218; Conrath et al., 2001, J. Biol. Chem. 276:7346-7350; Desmyter et al., 2001, J. Biol. Chem. 276:26285-26290; Hudson and Kortt, 1999, J. Immunol. Methods 231:177-189 и патент США № 4946778). Бифункциональные антитела описаны (смотри, например, Mack, et al. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:7021-7025; Carter (2001) J. Immunol. Methods 248:7-15; Volkel, et al. (2001) Protein Engineering 14:815-823; Segal, et al. (2001) J. Immunol. Methods 248:1-6; Brennan, et al. (1985) Science 229:81-83; Raso, et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:27623; Morrison (1985) Science 229:1202-1207; Traunecker, et al. (1991) EMBO J.10:3655-3659 и патенты США №№ 5932448, 5532210 и 6129914).

- 57 043052

Биспецифические антитела также описаны (смотри, например, Azzoni et al. (1998) J. Immunol. 161:3493; Kita et al. (1999) J. Immunol. 162:6901; Merchant et al. (2000) J. Biol. Chem. 74:9115; Pandey et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:38633; Zheng et al. (2001) J. Biol Chem. 276:12999; Propst et al. (2000) J. Immunol. 165:2214; Long (1999) Ann. Rev. Immunol. 17:875).

Для получения антител антиген очищать необязательно. Животных можно иммунизировать клетками, несущими интересующий антиген. Затем можно получать спленоциты от иммунизированных животных, и можно проводить слияние спленоцитов с линией клеток миеломы для получения гибридомы (смотри, например, Meyaard et al. (1997) Immunity 7:283-290; Wright et al. (2000) Immunity 13:233-242; Preston et al., выше; Kaithamana et al. (1999) J. Immunol. 163:5157-5164).

Антитела могут быть конъюгированы, например, с низкомолекулярными лекарственными средствами, ферментами, липосомами, полиэтиленгликолем (ПЭГ). Антитела полезны для терапии, диагностики, использования в наборе или других целей, и включают антитела, связанные, например, с красителями, радиоизотопами, ферментами или металлами, например, коллоидным золотом (смотри, например, Le Doussal et al. (1991) J. Immunol. 146:169-175; Gibellini et al. (1998) J. Immunol. 160:3891-3898; Hsing and Bishop (1999) J. Immunol. 162:2804-2811; Everts et al. (2002) J. Immunol. 168:883-889).

Методы проточной цитометрии, включая активированную флуоресценцией сортировку клеток (FACS), описаны (смотри, например, Owens, et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2θθ1) Flow Cytometry, 2^nd Ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Флуоресцентные реагенты, подходящие для модификации нуклеиновых кислот, включая нуклеотидные праймеры и зонды, полипептидов и антител, для использования, например, в качестве диагностических реагентов, доступны (Molecular Probes (2003) каталог, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) каталог, St. Louis, MO).

Стандартные методы гистологии иммунной системы описаны (смотри, например, Muller-Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, et al. (20O0) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA; Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY).

Пакеты программ и базы данных для определения, например, антигенных фрагментов, лидерных последовательностей, сворачивания белка, функциональных доменов, сайтов гликозилирования и выравнивания последовательностей, are доступны (смотри, например, GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al. (2000) Bioinformatics 16:741-742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742; Wren, et al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68: 177-181; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133:17-21; von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14:4683-4690).

Пример 1. Иммунизация и отбор анти-CD27 антител

Иммунизация мышей кДНК CD27

Для получения анти-hCD27 антител кДНК, кодирующую полноразмерную открытую рамку считывания hCD27, субклонировали в вектор pCI-neo (Promega, Madison, WI). Экспрессию полученного вектора проверяли путем временной трансфекции pCI-neo-hCD27 в клетки Сно-Κι (Американская коллекция типовых культур, Manassas, VA) и применения метода проточной цитометрии с использованием мышиного анти-hCD27 IgG1 в концентрации 10 мкг/мл (BD Pharmingen № 555439), а затем конъюгата с FITC антитела козы против мышиных IgG1 (1:100) (Southern Biotechnology, Birmingham, AL).

Мышей иммунизировали при помощи генной пушки, используя генную пушку Helios (BioRad, Hercules, CA) и покрытые ДНК золотые пули (BioRad) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, 1-мкм золотые частицы покрывали кДНК pCI-neo-hCD27 и коммерческими экспрессионными векторами для Flt3L мыши и GM-CSF мыши в соотношении 2:1:1 (оба вектора от компании Aldevron, Fargo, ND). Всего 1 мкг плазмидной ДНК использовали для покрытия 50 0 мкг золотых частиц.

Конкретно, самок мышей BALB/c в возрасте 7-8 недель иммунизировали в уши с помощью генной пушки, проводя по 3 цикла введения в оба уха. После двух иммунизаций ДНК в сыворотке мышей определяли титр анти-hCD27 примерно 1:4000 в клеточном анализе ELISA. При проведении клеточного анализа ELISA после всех этапов инкубации следовал этап промывания PBST (PBS с 0,01% Tween 20). Родительские клетки СНО-К1 или CHO-K1.hCD27 высевали (40000 клеток/лунку) в планшеты для культивирования тканей и инкубировали в течение ночи при 37°С. На следующий день культуральную среду удаляли, и клетки инкубировали в течение 1 ч с мышиной сывороткой (в разведениях) при 37°С. Затем клетки промывали PBST и инкубировали в течение 1 ч при 37°С с конъюгатом антител козы против мышиных IgG-HRP в разведении 1:1000 (Southern Biotechnology, № 1030-05).

Затем клетки промывали 6 раз PBST и визуализировали анти-hCD27 иммунореактивность при помощи 100 мкл субстрата OptiEIA ТМВ (BD Biosciences, Franklin Lake, NJ). Реакцию останавливали 100 мкл 0,5 М H₂SO₄ и поглощение считывали при длине волны 460 и 620 нм. Мышей, у которых были обнаружены антитела против hCD27, иммунизировали в последний, четвертый, раз и умерщвляли через четыре дня.

- 58 043052

Истощенные по эритроцитам популяции клеток селезенки получали, как описано ранее (Steenbakkers et al., 1992, J. Immunol. Meth. 152:69-77; Steenbakkers et al., 1994, Mol. Biol. Rep. 19:12 5-134), и замораживали при -140°С.

Отбор продуцирующих aHTu-hCD27 антитело В-клеток

Для отбора В-клеточных клонов, продуцирующих анти-hCD27 антитела, 1,5х10⁷ истощенных по эритроцитам спленоцитов истощали по моноцитам. hCD27-специфические В-клетки отбирали путем связывания при 4°С или 37°С на облученных (3000 рад) трансфектантах СНО-K1.hCD27, которые были выращены до конфлюэнтности в матрасе Т25. После интенсивного промывания для удаления неспецифических В-клеток связавшиеся В-клетки собирали путем обработки трипсином в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen, каталожный № 25200-056). Затем В-клетки культивировали, как описано в публикации Steenbakkers et al., 1994, Mol. Biol. Rep. 19:125-134. Вкратце, выбранные В-клетки смешивали с 7,5% (по объему) Т-клеточным супернатантом и 50000 облученных (2500 рад) клетоккормильцев EL-4 B5 в конечном объеме 200 мкл DMEM F12/P/S/10% BCS в 96-луночных плоскодонных планшетах для культивирования тканей.

На восьмой день проводили скрининг супернатантов методом клеточного анализа ELISA на реакционную способность в отношении hCD27, как описано выше. Кроме того, hCD27-реактивные супернатанты тестировали на связывание с CD27 Масаса Mulatta (mmCD27), экспрессированным на клетках Сно-Κι. [CD27 Масаса Mulatta, регистрационный № в Genbank gil09095214]. При проведении клеточного анализа ELISA после всех этапов инкубации следовал этап промывания PBST (PBS с 0,01% Tween 20). Родительские клетки СНО-К1, СНО-K1.hCD27 или СНО-K1.mmCD27 высевали (40000 клеток/лунку) в планшеты для культивирования тканей и инкубировали в течение ночи при 37°С. На следующий день культуральную среду удаляли, и клетки инкубировали в течение 1 ч с В-клеточными супернатантами (в разведениях) при 37°С. Затем клетки промывали PBST и инкубировали в течение 1 ч при 37°С с конъюгатом антител козы против мышиных IgG-HRP в разведении 1:1000 (Southern Biotechnology, № 1030-05). После этого клетки промывали 6 раз PBST и визуализировали анти-hCD27 иммунореактивность при помощи 100 мкл стабилизированного хромогена ТМВ (Invitrogen, каталожный № SB02). Реакцию останавливали 100 мкл 0,5 М H₂SO₄, и поглощение считывали при длине волны 460 и 620 нм.

Затем 64 В-клеточных клона, супернатанты которых продемонстрировали связывание с hCD27 и mmCD27, иммортализовали путем мини-электрослияния, используя опубликованные методы (Steenbakkers et al., 1992, J. Immunol. Meth. 152:69-77; Steenbakkers et al., 1994, Mol. Biol. Rep. 19:125-34). В частности, В-клетки смешивали с 106 клеток миеломы Sp2/0-Ag14, и сыворотку удаляли промыванием средой DMEM F12. Клетки обрабатывали раствором проназы (Calbiochem, каталожный № 4308070.536) в течение 3 мин и промывали изомолярным буфером для электрослияния (Eppendorf, каталожный № 53702).

Электрослияние выполняли в 50-мкл камере слияния путем приложения переменного электрического поля с параметрами 30 с, 2 МГц, 400 В/см, с последующим прямоугольным импульсом высокой интенсивности с параметрами 10 мкс, 3 кВ/см, а затем вновь переменного электрического поля с параметрами 30 с, 2 МГц, 400 В/см.

Содержимое камеры переносили в селективную среду для гибридом и высевали в 96-луночный планшет в серийных разведениях. В день 8 или 9 после слияния проводили скрининг супернатантов гибридом на реактивность в отношении hCD27, как описано выше. Супернатанты гибридом тестировали методом клеточного анализа ELISA на связывание с клетками СНО-K1.mmCD27 или СНО-К1, экспрессирующими hCD27 (A59T), как описано выше. Кроме того, изучали перекрестную конкуренцию супернатантов гибридом с антителом hCD27.15 в анализе гомогенной флуоресценции с временным разрешением (ГФВР). Антитело hCD27.15 описано в WO 2012/004367 как антитело, продуцируемое гибридомой, депонированной в АТСС под регистрационным номером депозита РТА-11008, и имеющее область VH с SEQ ID NO: 3 и область VL с SEQ ID NO: 4 (применительно к SEQ ID NO в WO 2012/004367). В данном анализе 0,6 нМ биотинилированное hCD27.15 инкубировали с 1,2 нМ rhCD27-Fc (R&D systems, 382-CD100), 1,33 нМ стрептавидином К (акцептор) и 1,25 нМ антителом против Fc-D2 человека (донор). Добавляли супернатанты в серийном разведении. Перекрестная конкуренция с hCD27.15 приводит к уменьшению переноса энергии от донора к акцептору, которое выражают в виде дельта F ((соотношение 665/615 образца - соотношение 665/615 фона)/соотношение 665/615 фона, где фон определяют без добавления rhCD27-Fc). Флуоресценцию измеряли на спектрофотометре Victor2 (PerkinElmer) при длине волны 615 и 665 нм.

И в завершение, супернатанты гибридом тестировали на их способность инициировать сигнализацию CD27. Клетки HEK293T, совместно трансфицированные hCD27-pcDNA и NF-кВ-люциферазным репортерным конструктом, подвергали воздействию супернатантов гибридом в серийных разведениях в течение 24 ч. Люциферазную активность измеряли с использованием системы Steady Lite Plus High Sensitivity Luminescence Reporter Gene Assay (PerkinElmer, 6016757) и спектрофотометра Victor (PerkinElmer).

Затем выбирали 46 гибридом для субклонирования в одном раунде серийного разведения. После скрининга супернатантов от клеток после серийного разведения на связывание с СНО-K1.hCD27, отби

- 59 043052 рали клоны для замораживания и хранения. Дополнительный анализ супернатантов от клеток после серийного разведения на связывание с СНО-K1.hCD27, перекрестную конкуренцию с hCD27.15 и стимуляцию NF-кВ, как описано выше, позволил выбрать 16 гибридом для продуцирования антител в бессывороточной среде.

Пример 2. Очистка и характеризация анти-hCD27 антител

Стабильные гибридомы культивировали в бессывороточной среде в течение 7 дней и собирали супернатанты. Антитела очищали путем смешивания со смолой Mab Select SuRe Prot A (GE Healthcare 175438) и элюции с хроматографических колонок Poly-prep (BioRad 731-1550) в соответствии с инструкциями производителя. Затем антитела обессоливали, повторно вносили в буфер PBS, pH 7,4, (Gibco) с использованием обессоливающих колонок Zeba Spin (Life Technologies 89889) и количественно определяли методом спектрофотометрии.

Затем очищенные антитела характеризовали в серии экспериментов. Как описано выше, их способность связываться с СНО-K1.hCD27 и СНО-K1.mmCD27 определяли методом клеточного анализа ELISA. Также было изучено, конкурируют ли они перекрестно с hCD27.15 в анализе ГФВР, а также способны ли они индуцировать сигнализацию CD27 в анализе с NF-кВ люциферазным репортером. Кроме того, изучали, обладают ли антитела стимулирующим эффектом на необученные человеческие CD8+ Тклетки, следующим образом. Необученные CD8+ Т-клетки выделяли из лейкоцитной пленки с использованием коктейля RosetteSep для обогащения по человеческим CD8+ Т-клеткам (StemCell 15063) и центрифугирования в градиенте плотности фиколла, с последующей отрицательной селекцией на основе MACS с использованием набора BD IMag™ для обогащения по человеческим необученным CD8⁺ Tклеткам (BD, каталожный номер 558569), в основном, в соответствии с инструкциями производителя. Выделенные CD8+ T-клетки проверяли на чистоту и необученность методом проточной цитометрии с использованием анти-CD8 и анти-CD45RA антител. Затем их высевали в 96-луночные планшеты в концентрации 1,5x105 клеток/лунку. Клетки стимулировали растворимым анти-CD3 мАт (ОКТ-3) в конечной концентрации 0,125 мкг/мл и анти-CD28 мАт (Sanquin, клон 15Е8) в конечной концентрации 1,0 мкг/мл в присутствии серийно разведенных очищенных антител. Через 4 дня определяли жизнеспособность клеток с использованием пропидий иодида (PI), и число активированных клеток определяли методом проточной цитометрии.

На основании результатов, полученных в вышеописанных экспериментах, антитело hCD27.131A было выбрано для дальнейшего анализа. Антитело hCD27.131A (или мышиное родительское антитело 131А) представляет собой мышиное IgG1 антитело, имеющее область VH с SEQ ID NO: 7 и область VL с SEQ ID NO: 8.

Пример 3. Аффинность антитела hCD27.15 в отношении hCD27 (A59T) и mmCD27

Ранее агонистическое антитело hCD27.15 было выделено, как описано в WO 2012/004367. hCD27.15 было гуманизировано для получения hCD27.15-6B (гуманизированного варианта hCD27.15, описанного в WO 2012/004367, с идентичными областями CDR, SEQ ID NO: 24 и 25), и химерного hCD27.15-c4 (вариабельные области мышиного hCD27.15 и константная область человеческого IgG4, SEQ ID NO: 22 и 23). Как показано на фиг. 1 и 2, соответственно, эти варианты антитела hCD27.15 не связывают hCD27 с часто встречающимся ОНП (A59T) и не связывают CD27 яванского макака (также называемый в настоящем документе MmCD27 или CD27 Масаса mulatta). Напротив, антитело hCD27.131A было специально выбрано для связывания как hCD27 с часто встречающимся ОНП (A59T), так и CD27 яванского макака.

Пример 4. Гуманизация антитела hCD27.131A

Мышиное антитело hCD27.131A было гуманизировано с использованием способов, описанных в спецификации. Из мышиного антитела hCD27.131A были сконструированы следующие гуманизированные вариабельные области тяжелой цепи: 131AVH6, 131AVH7, 131AVH8, 131AVH9 (SEQ ID NO: 10-13); и были сконструированы следующие гуманизированные вариабельные области легкой цепи: 131AVL6, 131AVL7, 131AVL8, 131AVL9 (SEQ ID NO: 15-18). Были получены антитела 131AVH6VL6, 131AVH6VL7, 131AVH6VL8, 131AVH7VL6, 131AVH7VL7, 131AVH7VL8, 131AVH8VL6, 131AVH8VL7, 131AVH8VL8 и 131AVH9VL9 с константными областями либо IgG1, IgG2, либо IgG4 человека.

Пример 5. Связывание с CD27 на клеточной поверхности

Антитела 131AVH6VL6-hIgG1 и 131AVH6VL6-hIgG2 были экспрессированы в клетках СНО-ЕХР1 или клетках НЕК293ЕХР1. Антитело 1F5 hIgG1 (или 1F5, или 1F5IgG1, имеет вариабельные области 1F5, описанного в US2011/0274685) было экспрессировано в клетках НЕК293ЕХР1. Очищенные антитела анализировали на связывание с экспрессирующими CD27 человека клетками CHOK1, экспрессирующими CD27 человека A59T клетками CHOK1, и на перекрестную реактивность с экспрессирующими CD27 резуса клетками CHOK1 в клеточном анализе ELISA. Экспрессирующие CD27 человека клетки CHOK1, экспрессирующие CD27 человека A59T клетки CHOK1 и экспрессирующие CD27 резуса клетки CHOK1 высевали в 96-луночные планшеты для культивирования тканей в 50 мкл среды DMEM/F12, содержащей 10% ТС и гентамицин (среда СНО-Ki). Клетки высевали либо при плотности 2x104 клеток/лунку за два дня до проведения анализа, либо при плотности 4x104 клеток/лунку за один день до

- 60 043052 проведения анализа. Среду удаляли из лунок перед проведением анализа, с последующей инкубацией клеток в 100 мкл свежей культуральной среды с мАт, имеющими начальную концентрацию 10 мкг/мл и разбавленными 1:4 в 8 шагах серийного разведения. Антитела инкубировали в течение 30-60 мин при комнатной температуре и клетки промывали 3 раза PBS/0,05% Tween 20, используя протокол промывания для клеточного анализа ELISA, на устройстве для промывания планшетов Biotek EL405x Select CW. Пятьдесят микролитров обнаруживающего антитела (HRP-конъюгированного антитела козы против IgG человека (Jackson, каталожный № 109-036-098)), добавляли в разведении 1:5000 в среду Сно-Κι и инкубировали при комнатной температуре в течение 30-60 мин. Аналитические планшеты промывали, как описано выше, добавляли ТМВ для развития окраски и останавливали реакцию раствором для остановки реакции ТМВ (KPL, каталожный № 50-85-06) или 0,1 Н фосфорной кислотой. Лунки планшета просчитывали на планшетном ридере Molecular Devices VersaMax при длине волны 450 нм/650 нм. Кривые титрования использовали для определения полумаксимальной эффективной концентрации (EC₅₀).

Кровь от здоровых людей-добровольцев собирали, частично в рамках программы добровольного донорства крови в Palo Alto, в пробирки, содержащие К2-ЭДТА (BD vacutainer, BD Biosciences, каталожный № 367863). Кровь от обезьян резусов собирали в лаборатории компании Bioreclamation в пробирки, содержащие К2-ЭДТА (BD vacutainer, BD Biosciences, каталожный № 367863), пробирки осторожно переворачивали, хранили при 4°С и перевозили при 4°С в течение ночи в Merck Research Laboratories, Palo Alto, CA. Проводили визуальный осмотр крови после получения для подтверждения отсутствия очевидных признаков лизиса или сгустков. Сто микролитров крови инкубировали в 96-луночных блоках (Costar, каталожный № 3960) с коктейлем антител для определения фенотипа и тестируемым или контрольным антителом в указанных концентрациях в течение 30 мин при 4°С в темноте. Затем лизировали красные клетки крови (KKK) путем инкубации с 1,7 мл лизирующего раствора для красных клеток крови, содержащего аммоний-хлорид-калий (ACK) (Life Technologies, каталожный № А10492-01), в течение 5 мин. Этап лизиса повторяли еще раз с 2 мл лизирующего раствора АСК, а затем вновь с 300 мкл лизирующего раствора АСК. Затем клетки промывали, добавляя 1,7 мл фосфатно-солевого буфера (PBS) (Hyclone, каталожный № SH30028.02). Клетки ресуспендировали в 100 мкл PBS, содержащего 0,1 мкл красителя Fixable Viability Dye eFluor506 (eBioscience, каталожный № 65-0866-18), и инкубировали в темноте при 4°С в течение 30 мин. Меченые клетки промывали, ресуспендируя их в 2 мл буфера для окрашивания (SB), содержащего 2% эмбриональной бычьей сыворотки (SAFC, каталожный № 12103С) и 2 мМ ЭДТА (Life technologies, каталожный № 15575-038) в фосфатно-солевом буфере (PBS) (Hyclone, каталожный № SH30028.02), с последующим центрифугированием при 1300 об/мин в течение 5 мин. Этап промывания повторяли с SB, как описано, а затем клетки фиксировали путем инкубации с 1% раствором параформальдегида (Electron Microscopy Sciences, каталожный № 15710) в PBS в течение 15 мин при 4°С в темноте. После последнего промывания в SB образцы вносили в проточный цитометр LSR-Fortessa (BD Biosciences) с использованием высокопроизводительного пробоотборника, и данные анализировали при помощи программы FlowJo (Tree Star Inc).

Таблица 3. Связывание 131AVH6VL6-hIgG1 и 1F5-hIgG1 с CD27 на клеточной поверхности

Антитело	Мишень	kELISA на трансфектантах CD27-CHO	СИФ методом проточной цитометрии на Т-клетках периферической крови
CD8+ Т-клетки	CD4+ Т-клетки
EC₅₀±SD (нМ)	η	ec₅₀±sd (нМ)	η	ec₅₀±sd (нМ)	η
131AVH6V L6-hIgGl	CD27 человека	0,072±0,013	2	0,30±0,07	4	0,32±0,07	4
CD27 человека А5 9Т	0,097±0,008	2	Не тестировали	Не тестировали
CD27 резуса	0,054±0,005	2	0,22±0,08	4	0,17±0,07	4
1F5hlgGl	CD27 человека	0,325±0,068	2	1,30±0,595	4	1,54±0,789	4
CD27 человека А5 9Т	0,326±0,049	2	Не тестировали	Не тестировали
CD27 резуса	0,193±0,063	2	1,92±3,81		1,58±0,289	4

ЕС₅₀= полумаксимальная эффективная концентрация; ЗЕ=стандартное отклонение СИФ=средняя интенсивность флуоресценции

Значения EC₅₀ для связывания с человеческим CD27 на клеточной поверхности трансфицированных клеток СНО (kELISA) или первичных Т-клетках (проточная цитометрия) были примерно в 4-раза ниже для 131AVH6VL6-hIgG1 в сравнении с 1F5-hIgG1 (табл. 3).

Гуманизированные вариантные антитела 131A-hIgG1 и 131А-hIgG4 были экспрессированы в клетках СНО-ЕХР1 или клетках НЕК293ЕХР1. Очищенные антитела анализировали на связывание с экспрессирующими CD27 человека клетками СНОК1 в клеточном анализе ELISA. Экспрессирующие CD27

- 61 043052 человека клетки CHOK1 высевали в 96-луночные планшеты для культивирования тканей в 50 мкл среды DMEM/F12, содержащей 10% ТС (телячья сыворотка) (среда Сно-Κι). Клетки высевали либо при плотности 2x104 клеток/лунку за два дня до проведения анализа, либо при плотности 4x104 клеток/лунку за один день до проведения анализа. Среду удаляли из лунок перед проведением анализа, с последующей инкубацией клеток в 100 мкл свежей культуральной среды с мАт, имеющими начальную концентрацию 10 мкг/мл и разбавленными 1:5 в 8 шагах серийного разведения (антитела hIgG4), или имеющими начальную концентрацию 50 мкг/мл и разбавленными 1:5 в 8 шагах серийного разведения (антитела hIgG1). Инкубацию с антителами проводили в течение 30-60 мин при комнатной температуре и клетки промывали 3 раза PBS/0,05% Tween 20, используя протокол промывания для клеточного анализа ELISA, на устройстве для промывания планшетов Biotek EL405x Select CW. Пятьдесят микролитров обнаруживающего антитела (HRP-конъюгированного антитела козы против IgG человека (Southern Biotech, каталожный № 2014-05) добавляли в разведении 1:2000 в среду СНО-К1 и инкубировали при комнатной температуре в течение 30-60 мин. Аналитические планшеты промывали, как описано выше, добавляли ТМВ для развития окраски и останавливали реакцию раствором для остановки реакции ТМВ (KPL каталожный № 50-85-06) или 0,1 Н фосфорной кислотой. Лунки планшета просчитывали на планшетном ридере Molecular Devices SpectraMax Plus 384 при длине волны 450 нм/650 нм. Кривые титрования использовали для определения полумаксимальной эффективной концентрации (ЕС₅₀).

Таблица 4. Связывание с CD27 на клеточной поверхности гуманизированных анти-CD27 антител 131А

	kELISA, ЕС₅₀ (пМ)
Тяжелая и легкая цепи антитела	hlgGl	h!gG4
131А VH7/VL6	162	42
131А VH7/VL7	207	84
131А VH7/VL8	144	86
131А VH6/VL6	155	101
131А VH6/VL7	130	132
131А VH6/VL8	131	103
131А VH8/VL6	298	97
131А VH8/VL7	262	88
131А VH8/VL8	145	129
131А VH9/VL9	111	130

Все гуманизированные вариантные антитела 131A-hIgG1 и 131А-hIgG4 имели значения EC₅₀ для связывания с человеческим CD27 на клеточной поверхности трансфицированных клеток СНО (kELISA), которые находились в пределах 2-кратного значения EC₅₀ для 131AVH6VL6-hIgG1 (табл. 4), при том, что значение ЕС₅₀ для 1F5-hIgG1 было примерно в 4 раза выше в сравнении со значением для 131AVH6VL6hIgG1 (табл. 3).

Кровь от здоровых людей-добровольцев собирали в виде лейкоцитной пленки в центре донорства крови в Stanford, и мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяли центрифугированием в градиенте плотности с использованием Ficoll-Plaque Plus (GE healthcare, № 17-1440-03). Оставшиеся красные клетки крови (KKK) во фракции МКПК лизировали путем инкубации с 2 мл лизирующего раствора для красных клеток крови, содержащего аммоний-хлорид-калий (ACK) (Life Technologies, каталожный № А10492-01), в течение 5 мин при комнатной температуре, а затем промывали клетки в 10 мл буфера для окрашивания (SB), содержащего 2% эмбриональной бычьей сыворотки (SAFC, каталожный № 12103С) и 2 мМ ЭДТА (Life technologies, каталожный № 15575-038) в фосфатно-солевом буфере (PBS) (Hyclone, каталожный № SH30028.02), с последующим центрифугированием при 300 g в течение 5 мин. Затем клетки подсчитывали при помощи автоматического счетчика клеток Vicell (Beckman Coulter, каталожный № 383556) и вносили в 96-лучночный планшет по 2x105 клеток на лунку с U-образным дном. Клетки ресуспендировали в 100 мкл PBS, содержащего 0,1 мкл красителя Fixable Viability Dye eFluor506 (eBioscience, каталожный № 65-08 66-18), и инкубировали в темноте при 4°С в течение 30 мин. Меченые клетки промывали, ресуспендируя их в 150 мкл буфера для окрашивания (SB), с последующим центрифугированием при 300 g в течение 5 мин. Затем клетки ресуспендировали в 100 мкл SB, содержащего первичные анти-CD27 антитела в разных концентрациях, инкубировали в темноте при 4°С в течение 30 мин, с последующими этапами промывания и центрифугирования, описанными выше. Затем клетки окрашивали вторичным мышиным антителом против IgG1 человека, конъюгированным с PE (Southern biotech, каталожный № НР6001), для обнаружения клонов гуманизированных анти-CD27 или антителом осла против иммуноглобулинов мыши, конъюгированным с Alexa555 (Thermofisher, каталожный № А-31570), для обнаружения родительского мышиного анти-CD27 антитела. Клетки инкубировали в течение 30 мин при 4°С в темноте, с последующими этапами промывания и центрифугирования. Затем

- 62 043052 клетки окрашивали для определения фенотипа коктейлем антител против поверхностных маркеров (CD3, CD4, CD8, CD11b) и инкубировали в течение 30 мин при 4°С в темноте, с последующими этапами промывания и центрифугирования. В завершение, клетки фиксировали путем инкубации с 100 мкл BD Cytofix (BD biosciences каталожный № 554655) в течение 10 мин при 4°С в темноте, с последующими этапами промывания и центрифугирования. Образцы вносили в проточный цитометр LSR-Fortessa (BD Biosciences) с использованием высокопроизводительного пробоотборника, и данные анализировали при помощи программы FlowJo (Tree Star Inc).

Таблица 5. Связывание гуманизированных анти-CD27 антител 131А с CD27 на клеточной поверхности человеческих Т-клеток

Антитело Гуманизированное антиCD27 131А VH6/VL6-hIgGl	Мишень CD27 человека	ЕС₅₀ (hM)±SD CD4+ клетки* 0,1371±0,00509	ЕС₅₀ (hM)±SD CD8+ клетки* 0,1234±0,0349
Гуманизированное антиCD27 131А VH6/VL7-hIgGl	CD27 человека	0,1235±0,00014	0,1097±0,03
Гуманизированное антиCD27 131А VH6/VL8-hIgGl	CD27 человека	0,12625±0,00714	0,1240±0,018
Гуманизированное антиCD27 131А VH7/VL6-hIgGl	CD27 человека	0,12815±0,00361	0,1269±0,0314
Гуманизированное антиCD27 131А VH7/VL7-hIgGl	CD27 человека	0,11345±0,00191	0,1113±0,0249
Гуманизированное антиCD27 131А VH7/VL8-hIgGl	CD27 человека	0,11825±0,00163	0,1180±0,0130
Гуманизированное антиCD27 131А VH8/VL6-hIgGl	CD27 человека	0,12445±0,00785	0,1127±0,0203
Гуманизированное антиCD27 131А VH8/VL7-hIgGl	CD27 человека	0,11475±0,00728	0,1105±0,0178
Гуманизированное антиCD27 131А VH8/VL8-hIgGl	CD27 человека	0,13465±0,00431	0,1312±0,0293
Гуманизированное антиCD27 131А VH9/VL9-hIgGl	CD27 человека	0,0773б±0,00467	0,0721±0,0174
Химерное мышиноечеловеческое анти-СГ27 131A-hIgGl	CD27 человека	0,06644±0,00157	0,0649±0,0186
Мышиное родительское 131А	CD27 человека	0,06446±0,0102	0,0194±0,0145

EC₅₀=полумаксимальная эффективная концентрация;

SD=стандартное отклонение;

СИФ=средняя интенсивность флуоресценции *СИФ методом проточной цитометрии на Т-клетках периферической крови (N=2 донора).

Все гуманизированные вариантные антитела 131A-hIgG1 имели значения EC₅₀ для связывания с первичными Т-клетками (проточная цитометрия), которые были сопоставимыми (в пределах 10%) или более низкими, чем значение EC₅₀ для 131AVH6VL6-hIgG1 (табл. 5), при том, что значение ЕС₅₀ для 1F5hIgG1 было примерно в 5 раз выше в сравнении со значением для 131AVH6VL6-hIgG1 (табл. 3).

Пример 6. Определение аффинности связывания анти-CD27 антител с рекомбинантным человеческим белком CD27

Кинетику связывания антител против человеческого CD27 131AVH6VL6-hIgG1 и 131AVH6VL6hIgG2 измеряли методом поверхностного плазмонного резонанса с использованием системы Biacore T200 (Biacore, GE Healthcare, Piscataway, NJ). Примерно 400 EO человеческого слитого белка CD27-Fc, примерно 2000 EO человеческого слитого белка CD27 A59T-Fc или примерно 300 ЕО слитого белка CD27-Fc макаки резуса иммобилизовали методом связывания через аминогруппы на сенсорном чипе СМ5 серии S, каталожный номер BR-1005-30. HBS-EP+ буфер (BR-1006-69) использовали в качестве подвижного буфера при скорости потока 50 мкл/мин. Антитела 131AVH6VL6-hIgG1 и 131AVH6VL6-hIgG2 в разных концентрациях, в диапазоне от 4,1 до 400 нМ, инжектировали над поверхностями с антителами. Инжекции антител продолжали 180 с и после инжекции диссоциацию контролировали в течение 900 с. После каждого цикла инжекции поверхность с антигеном регенерировали путем 30-секундной инжекции 3 М MgCl2.

Сенсограммы дважды корректировали относительно контроля, вычитая ответ от пустой поверхности и ответ от поверхности при инжекции буфера, и использовали для анализа константы скорости ассоциации (k_a) и диссоциации (kd), а также равновесной константы диссоциации K_D. Набор полученных данных аппроксимировали к модели связывания 1:1 Ленгмюра с использованием программы Biacore T200 BIAevaluation (версия 2.0). В табл. 6 приведены показатели аффинности связывания антител против человеческого CD27 с человеческим слитым белком CD27-FC, человеческим слитым белком CD27 A59T-Fc и слитым белком CD27-FC макаки резуса.

- 63 043052

Таблица 6. Измерение аффинности связывания антител против человеческого CD27 с антигеном CD27 в системе BIAcore

Антитело	Антиген	Biacore, k_a(M^-1c^-1)	Biacore, k_d(c-¹)	Biacore, K_D(нМ)
131AVH6VL6hlgGl	huCD27	2,2E+05	1,IE-03	5,1
131AVH6VL6hIgG2	huCD27	2,4E+05	1,5E-03	6,4
131AVH6VL6hlgGl	huCD27 A5 9T	1,5E+05	1,IE-03	7,3
131AVH6VL6hIgG2	huCD27 A5 9T	1,4E+05	l,2E-03	8,2
131AVH6VL6hlgGl	rhCD27	2,3E+05	1,0E-03	4,3
131AVH6VL6h!gG2	rhCD27	2,6E+05	1,4E-03	5,5

Эксперименты методом поверхностного плазмонного резонанса (ППР) проводили с использованием системы Biacore 4000 (Biacore, GE Healthcare, Piscataway, NJ) для определения кинетики связывания гуманизированных вариантов анти-CD27.131А hIgG1 и hIgG4 с содержащими His9G-метку рекомбинантными белками CD27 человека и яванского макака (последовательность His9G приведена в SEQ ID NO: 69) (проведенная в собственной лаборатории временная трансфекция плазмидами клеток HEK293). Поверхность сенсорного чипа СМ5 серии S (GE/Biacore, каталожный № BR-1005-30) подготавливали путем связывания через аминогруппы мышиного антитела против IgG (Fc) человека (набор для захвата человеческих антител, GE/Biacore, каталожный № BR-1008-39) в соответствии с протоколом производителя, получая примерно 9000 ЕО иммобилизованного антитела. Анализы проводили при 25°С в фильтрованном и дегазированном подвижном буфере HBS-EP+, pH 7,4 (GE/Biacore, каталожный № 1006-69). Анtu-CD27 131A химеры и варианты захватывали при концентрации 6,6 нМ (1 мкг/мл) в течение 120 с при скорости потока 10 мкл/мин. Поверхности в проточной ячейке, модифицированные антителом против Fc человека, но без внесенных антител против CD27, использовали в качестве контроля. 2-кратно разведенные в серии из пяти шагов (от 3,13 нМ до 50 нМ) His9G-меченые белки CD27 человека и яванского макака (последовательность His9G приведена в SEQ ID NO: 69) инжектировали над поверхностью с антителом в течение 180 с (фаза ассоциации) со скоростью 30 мкл/мин, с последующим пропусканием буфера в течение 600 с (фаза диссоциации). Поверхность чипа регенерировали 30-секундной инжекцией 3 М MgCl₂ после каждого цикла инжекции.

Данные дважды корректировали относительно контроля, вычитая ответ от пустой поверхности и ответ от поверхности при инжекции буфера, и использовали для анализа константы скорости ассоциации (ka) и диссоциации (kd), а также равновесной константы диссоциации K_D. Набор полученных данных аппроксимировали к модели связывания 1:1 Ленгмюра с использованием программы Biacore 4000 BIAevaluation, версия 1.0 (GE/Biacore). В табл. 7 приведены показатели аффинности связывания гуманизированных вариантов анти-CD27.131А hIgG1 и hIgG4 с белками CD27/His человека и яванского макака.

- 64 043052

Таблица 7. Показатели аффинности взаимодействия гуманизированных вариантов aHTu-CD27.131A hIgGI и hIgG4 с His9G-меченым CD27 человека и яванского макака (последовательность His9G приведена в SEQ ID NO: 69)

Гуманизированные варианты анти-	K_D	(M)
CD27	CD27 человека/His	CD27/His макака
131А химера huIgGl	2,92E-08	4,04E-08
hCD27. 131А VH6VL6 huIgGl	6,52E-08	5,15E-08
hCD27. 131A VH6VL7 huIgGl	7,17E-08	4,19E-08
hCD27. 131AVH6VL8 huIgGl	6,82E-08	5,65E-08
hCD27. 131A VH7VL6 huIgGl	4,13E-08	3,48E-08
hCD27. 131A VH7VL7 huIgGl	3,89E-08	3,17E-08
hCD27. 131AVH7VL8 huIgGl	4,49E-08	3,65E-08
hCD27. 131A VH8VL6 huIgGl	6,44E-08	4,66E-08
hCD27. 131AVH8VL7 huIgGl	6,33E-08	4,41E-08
hCD27. 131A VH8VL8 huIgGl	6,10E-08	3,23E-08
hCD27. 131A VH9VL9 huIgGl	6,22E-08	1,05E-07
131A химерное huIgG4	4,34E-08	3,12E-08
hCD27. 131A VH6VL6 huIgG4	1,68E-07	7,30E-08
hCD27. 131A VH6VL7 huIgG4	1,08E-07	8,20E-08
hCD27. 131A VH6VL8 huIgG4	9,91E-08	5,52E-08
hCD27. 131A VH7VL6 huIgG4	6,57E-08	5,82E-08
hCD27. 131AVH7VL7 huIgG4	8,24E-08	3,67E-08
hCD27. 131AVH7VL8 huIgG4	5,85E-08	4,01E-08
hCD27. 131A VH8VL6 huIgG4	l,32E-07	5,97E-08
hCD27. 131A VH8VL7 huIgG4	8,93E-08	7,68E-08
hCD27. 131A VH8VL8 huIgG4	1,10E-07	9,67E-08
hCD27. 131A VH9VL9 hu!gG4	1,04E-07	7,29E-08

Пример 7. Противоопухолевая активность 131AVH6VL6-hIgG1 в сравнении с 1F5-hIgG1 в мышиной модели опухоли

Мыши: мышей В 6 . Cg-Cd27^tm1(CD27)Jbo/Tac (мыши huCD27KI) получали путем замены гена внеклеточного домена мышиного CD27 геном внеклеточного домена человеческого CD27, с последующим обратным скрещиванием с мышами фонового генотипа C56BL6/J до того времени, когда ОНП анализ 1449 показал наличие 97,95%-98,99% реципиентного генома C57BL/6. Самок мышей huCD27KI в возрасте примерно восемь-двенадцать недель со средней массой тела 20,3 г (диапазон 17,5-23,5 г) получали из принадлежащей компании Merck разводимой колонии мышей, поддерживаемой в Taconic Laboratory (Germantown, NY). Обычный корм и воду предоставляли животным без ограничения.

Реагенты - антитела:

Моноклональные антитела получали из внутренних источников в виде замороженных (-80°С) маточных растворов. Антитела 131AVH6VL6-hIgG1 и 1F5-hIgG1 были продуцированы в рекомбинантных линиях клеток. Мышиное контрольное по изотипу IgG2a антитело (контроль по изотипу) было получено из культуры клеток гибридомы и было специфическим для вируса инфекционного бурсита VP2-4-3_GV.

Препараты реагентов - антител:

Буферы формулирования были специфическими для каждого антитела с целью стабилизации белков и предотвращения осаждения. Препараты были следующими: контроль по изотипу: 20 мМ ацетат натрия, 9% сахарозы, pH 5,5; 131AVH6VL6-hIgG1: 20 мМ ацетат натрия, 9% сахарозы, pH 5,5; 1F5hIgG1: 10 мМ Na-фосфат+75 мМ NaCl+3% сахарозы, pH 7,4.

Получение и имплантация линии опухолевых клеток:

МС38 представляет собой линию клеток, полученную из аденокарциномы толстой кишки мыши C57BL6/J. Клетки МС38 из замороженного стока поддерживали in vitro в виде монослойной культуры в среде DMEM (Cellgro, каталожный № 10-013CV), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Hyclone, каталожный № SH30088.03), при 37°С в атмосфере 5% CO2 в воздухе. 1x106 клеток МС38 в логарифмической фазе роста из субконфлюэнтного слоя вводили подкожной (п/к) инъекцией в объеме 100 мкл базовой среды DMEM в дорсальную часть правого бока каждой мыши. Мышей предварительно выбривали с помощью машинки для стрижки в области, используемой для имплантации.

Измерения опухолей и массы тела:

Опухоли измеряли за день до введения первой дозы и дважды в неделю после этого. Длину и ширину опухоли измеряли с использованием электронного штангенциркуля и объем опухоли определяли по формуле:

объем (мм³)=0,5хдлинухширину², где длина представляет собой большее из двух измерений. Мышей взвешивали периодически для контроля общего состояния здоровья. Перед проведением лечения мышей взвешивали и измеряли опу

- 65 043052 холи отдельных мышей. Для предотвращения систематический ошибки оценки любых животных с сильным отклонением в массе тела или объеме опухоли исключали, а остальных мышей распределяли в группы лечения с эквивалентными средними размерами опухолей. Когда средний объем опухолей у мышей, несущих опухоль МС38, достигал ~85 мм³ (диапазон 70-100 мм³), примерно через 5 дней после имплантации, начинали введение доз. Животным вводили антитела, как описано ниже.

Приготовление раствора для дозирования, введение и анализ:

Замороженные маточные растворы антител, которые предстояло тестировать в животной модели, размораживали и переносили на влажный лед. Во избежание повторного цикла замораживанияразмораживания каждый флакон маточного раствора размораживали один раз и хранили при 4°С. После размораживания антитела использовали в течение месяца. Перед каждым введением дозы маточный раствор каждого антитела разбавляли до номинальной концентрации соответствующим разбавителем и немедленно вводили животным. Аликвоты растворов для дозирования быстро замораживали в сухом льду и хранили при -80°С до проведения анализа. Растворы для дозирования оценивали с использованием платформы Meso Scale Discovery (MSD®, Rockville, MD), основанной на технологии множественных матриц; с сочетанием электрохемилюминесцентной детекции и структурированных матриц.

Введение доз и результаты:

Несущим опухоль МС38 нокин-мышам по гену huCD27 вводили 131AVH6VL6-hIgG1, 1F5-hIgG1 или контроль по изотипу в дозе 5 мг/кг, в/б, каждые 3-4 дня, всего 7 доз. После введения доз продолжали контролировать животных и измерять объем опухоли два раза в неделю. Результаты, представленные на фиг. 4, показали, что противоопухолевый ответ в случае введения 131AVH6VL6-hIgG1 был выше, чем противоопухолевый ответ в случае введения 1F5-hIgG1.

Пример 8. Противоопухолевая активность 131AVH6VL6-hIgG1 в сочетании с анти-PD-1 антителом в мышиной модели опухоли

Мыши:

Самок мышей В6.Cg-Cd27^tm1(CD27)Jbo/Tac (huCD27KI) в возрасте примерно десять-тринадцать недель со средней массой тела 21,21 г (диапазон 18,06-23,21 грамм) получали из разводимой колонии мышей, поддерживаемой в Taconic Laboratory (Germantown, NY). Обычный корм и воду предоставляли животным без ограничения.

Реагенты - антитела: Моноклональные антитела получали из внутренних источников в виде замороженных (-80°С) маточных растворов. Антитела 131AVH6VL6-hIgG1 и мышиное IgG1 антитело против мышиного PD-1 (muDX400) были продуцированы в рекомбинантных линиях клеток. Контролем по изотипу служило мышиное IgG2a антитело, специфическое для вируса инфекционного бурсита, VP2-43_GV, которое было продуцировано в культуре клеток гибридомы.

Препараты реагентов - антител:

Все антитела были сформулированы в 20 мМ ацетате натрия, 9% сахарозы, pH 5,5, для стабилизации белков и предотвращения осаждения.

Получение и имплантация линии опухолевых клеток: МВ49 представляет собой линию опухолевых клеток, полученную из карциномы мочевого пузыря мыши C57BL6/J. Клетки МВ49 из замороженного стока поддерживали in vitro в виде монослойной культуры в среде DMEM (Cellgro, каталожный № 10013CV), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Hyclone, каталожный № SH30088.03), при 37°С в атмосфере 5% CO₂ в воздухе. 5x105 клеток МВ49 в логарифмической фазе роста из субконфлюэнтного слоя вводили подкожной (п/к) инъекцией в объеме 100 мкл базовой среды DMEM в дорсальную часть правого бока каждой мыши. Мышей предварительно выбривали с помощью машинки для стрижки в области, используемой для имплантации.

Измерения опухолей и массы тела:

объем (мм³)=0,5хдлинухширину², где длина представляет собой большее из двух измерений. Мышей взвешивали периодически для контроля общего состояния здоровья. Перед проведением лечения мышей взвешивали и измеряли опухоли отдельных мышей. Для предотвращения систематический ошибки оценки любых животных с сильным отклонением в массе тела или объеме опухоли исключали, а остальных мышей распределяли в группы лечения с эквивалентными средними размерами опухолей. Когда средний объем опухолей у мышей, несущих опухоль МВ49, достигал ~91,56 мм³ (диапазон 80,94-102,89 мм³), примерно через 7 дней после имплантации, начинали введение доз. Животным вводили антитела, как описано ниже.

Приготовление раствора для дозирования, введение и анализ: Замороженные маточные растворы антител, которые предстояло тестировать в животной модели, размораживали и переносили на влажный лед. Во избежание повторного цикла замораживания-размораживания каждый флакон маточного раствора размораживали один раз, и аликвоты отмеряли в объемах, достаточных для однократного применения. Для этой цели использовали полипропиленовые низкоадгезионные пробирки. Аликвоты быстро замора

- 66 043052 живали в сухом льду и хранили при -80°С. Перед каждым введением доз одну аликвоту размораживали, разбавляли до номинальной концентрации соответствующим разбавителем и немедленно вводили животным. Аликвоты растворов для дозирования быстро замораживали в сухом льду и хранили при -80°С до проведения анализа. Растворы для дозирования оценивали с использованием платформы Meso Scale Discovery (MSD®, Rockville, MD), основанной на технологии множественных матриц; с сочетанием электрохемилюминесцентной детекции и структурированных матриц.

Введение доз и результаты:

Несущим опухоль МВ49 нокин-мышам по гену huCD27 вводили 131AVH6VL6-hIgG1, muDX400, 131AVH6VL6-hIgG1+muDX400 или контроль по изотипу в дозе 5 мг/кг, в/б. 131AVH6VL6-hIgG1 вводили каждые 3-4 дня, всего 6 доз. muDX400 вводили еженедельно, всего 4 дозы. После введения доз продолжали контролировать животных и измерять объем опухоли два раза в неделю. Результаты, представленные на фиг. 5, показали, что противоопухолевый ответ в случае введения только 131AVH6VL6-hIgG1 или muDX400 был минимальным, однако комбинированная терапия 131AVH6VL6-hIgG1+muDX400 приводила к значительному увеличению противоопухолевой эффективности.

Пример 9. Анализ активации NF-кВ

Клетки: Клетки HEK293FT эмбриональной почки человека, содержащие NF-кВ-люциферазный репортерный конструкт (pNiFty2-Luc, Invivogen), ранее были созданы методами стабильной трансфекции с селекцией при помощи лекарственного средства зеоцина (293FT-NF-κВ-люциферазнные клетки).

Культивирование клеток: 293FT-NF-κВ-люциферазные клетки выращивали в среде DMEM+2 мМ глутамин, (Cellgro), содержащей 10% инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сыворотки (Hyclone), 1χ смесь пенициллин/стрептомицин/глутамин (Cellgro) и 200 мкг/мл зеоцина (Life Technologies).

Антитела: hCD27.131A IgG1 и IgG4 антитела получали путем временной экспрессии либо в клетках CHO-EXPI, либо в клетках 293-EXPI. 1F5 IgG1 получали путем временной экспрессии в клетках 293EXPI. hCD27.15-4B IgG4 получали путем стабильной экспрессии в клетках СНО. Все антитела очищали стандартным методом с использованием белка А.

Трансфекции: Полноразмерные молекулы кДНК, кодирующие белок человеческого CD27 ДТ (индекс последовательности: NP_001233), вариант человеческого CD27 p.Ala59Thr (A59T, частота встречаемости аллеля: 0,2, индекс последовательности: rs25680) или CD27 резуса/яванского макака (индекс последовательности: ХР_001104337.1/ХР_005569963.1), клонировали в экспрессионный вектор pCI-neo. Плазмиды CD27 временно трансфицировали в 293FT-NF-κВ-люциферазные клетки с использованием липофектамина 2000 (Life Technologies). Использовали метод проточной цитометрии для подтверждения поверхностной экспрессии всех конструктов CD27.

Стимуляция антителами: Через примерно 16-20 ч после временной трансфекции конструктами CD27 клетки собирали при помощи буфера для диссоциации клеток (Millipore) или TyrpLE Express (Life), подсчитывали, высевали в среде Opti-MEM (Life Technologies) при плотности 5000-10000 клеток в лунку в 96-лучночные планшеты с прозрачным дном для определения люминесценции (Corning) и оставляли для адаптации/прикрепления на 30-180 мин при 37°С перед проведением стимуляции растворимыми анти-CD27 антителами. Затем к клеткам добавляли растворимые анти-hCD27 антитела hCD27.131A IgG1 или hCD27.131A IgG4 (максимальная доза 10 мкг/мл), 1F5 IgG1 (максимальная доза 10 мкг/мл) и hCD27.15-4B IgG4 (максимальная доза 160 мкг/мл) в тройном повторе в сериях из 4-кратных или 10кратных разведений, как указано, клетки инкубировали в течение 16-20 ч при 37°С.

Анализ на активность NF-кВ: После инкубации с антителами в течение 16-20 ч при 37°С клетки оставляли при комнатной температуре на 5 мин перед добавлением Bright-Glo (Promega). Затем планшеты защищали от света и инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре перед проведением анализа на люминометре/люминесцентном планшетном ридере (Molecular Device-LJL BioSystem или Envision system). Значения кратности изменения показателей при добавлении антитела рассчитывали относительно условий без добавления антитела. Значения кратности изменения показателей использовали для построения нелинейных кривых зависимости доза-ответ с использованием программы GraphPad Prism [модель: log(агонист) против ответа - вариабельный наклон (четыре параметра) без ограничений].

При сравнении активности антител в растворе для разных изоформ CD27 антитело hCD27.131A VH6VL6 huIgG1 демонстрировало наивысший потенциал для индукции активности NF-кВ в случае всех изоформ (фиг. 6). hCD27.131A VH6VL6 huIgG1 демонстрировало сопоставимую эффективность для человеческого CD27 ДТ и A59T (средние значение EC₅₀ 2,22 и 4,72 нМ, соответственно), и примерно в 7 раз более сильную активность для CD27 резуса (среднее значение 0,29 нМ) (табл. 8). Напротив, 1F5 huIgG1 не всегда было активно в растворимой форме и, таким образом, значения EC₅₀ невозможно было рассчитать для 1F5 huIgG1 (фиг. 6).

Антитело hCD27.15-4B IgG4 (гуманизированный вариант hCD27.15, описанного в WO 2012/004367, с идентичными областями CDR, SEQ ID NO: 41 и 42) устойчиво демонстрировало активность против клеток, экспрессирующих hCD27 ДТ, но не клеток, экспрессирующих CD27 A59T или экспрессирующих CD27 резуса. Это свидетельствовало о том, что hCD27.15-4B не будет активным в случае A59T аллеля

- 67 043052

CD27, повсеместно присутствующего с частотой встречаемости 20%. Та же тенденция была заметна для родительского клона hCD27.15 (данные не представлены). Кроме того, hCD27.15-4B IgG4 мАт является менее эффективным для индукции активности NF-кВ в сравнении с hCD27.131AVH6VL6-huIgG1. В этих экспериментах hCD27.15-4B IgG4 не приводило к появлению плато в сигнализации NF-кВ даже при дозах 160 мкг/мл и, таким образом, невозможно было рассчитать значение EC50. В табл. 9 приведены значения кратности изменения активации NF-кВ в случае одной концентрации 2,5 мкг/мл для иллюстрации различий в активности при низких дозах. Например, при концентрации 2,5 мкг/мл в клетках, экспрессирующих CD27 ДТ, hCD27.131A VH6VL6 huIgG1 демонстрировало более высокую эффективность в сравнении с hCD27.15-4B IgG4 (средняя кратность изменения: 2,52±0,45 против 1,82±0,38, парный критерий Стьюдента, p-значение: 0,01) или в сравнении с 1F5 huIgG1 (кратность изменения: 1,34±0,29, рзначение: 0,001). В целом, эти данные показывают, что hCD27.131A VH6VL6 huIgG1 вызывает четкую NF-кВ-люциферазную активность в случае CD27 ДТ и второстепенного аллельного варианта CD27 A59T, а также CD27 резуса, и показывают, что hCD27.131A VH6VL6 huIgG1 имеет более высокую активность в сравнении с 1F5 huIgG1 и более высокую активность в сравнении с hCD27.15-4B IgG4.

Несколько гуманизированных вариантов hCD27.131A были протестированы на CD27индуцируемую NF-кВ-люциферазную активность (фиг. 7). Все гуманизированные варианты продемонстрировали более высокую активность, чем 1F5 IgG1. Прямое сравнение химерных мышиныхчеловеческих антител hCD27.131A показало аналогичную активацию NF-кВ-люциферазной активности в случае химерных каркасов huIgG1 или huIgG4 (фиг. 7А). В целом, все гуманизированные варианты hCD27.131A huIgG1 действовали сходным образом, приводя к отчетливо более высокой NF-кВлюциферазной активности в сравнении с 1F5 huIgG1 (10 мкг/мл, средняя кратность изменения: 5,32 против 2,23, фиг. 7А). Аналогично, все гуманизированные варианты hCD27.131A IgG4 демонстрировали более высокую активность относительно 1F5 huIgG1 (10 мкг/мл, средняя кратность изменения: 3,06 против 1,73), с более широким диапазоном активности, наблюдаемым среди отдельных 131А IgG4 антител (фиг. 7В).

Таблица 8. Биологическая активность hCD27.131A VH6VL6 huIgG1, 1F5 huIgG1, hCD27.15-4B IgG4 в анализе с NF-кВ-люциферазным репортером: значения EC50 и E_max получены на основании соответствующих кривых доза-ответ

Антитело	Мишень	EC₅₀±SD (нМ)	EmaxiSD (кратность изменения)	Ы=число поддающихся определению соответствий кривой
hCD27.131А VH6VL6 huIgGl	CD27 человека	2,22±2,17	2,955±0,362	6
CD27 человека А5 9Т	4,72±1,87	3,220±0,445	5
CD27 резуса	0,29±0,16	2,111±0,193	5
1F5 huIgGl	CD27 человека	н/о (низкая активность)	1,482±0,266	5
CD27 человека А5 9Т	н/о (низкая активность)	1,299±0,220	5
CD27 резуса	н/о (низкая активность)	1,333±0,218	3
hCD27.15-4B IgG4	CD27 человека	н/о (нет плато)	н/о (нет плато)	0
CD27 человека А5 9Т	н/о (низкая активность)	н/о (низкая активность)	0
CD27 резуса	н/о (низкая активность)	н/о (низкая активность)	0

- 68 043052

Таблица 9. Биологическая активность hCD27.131A VH6VL6 huIgGl, 1F5 huIgGl, hCD27.15-4B IgG4 в анализе с NF-кВ-люциферазным репортером: значения кратности изменения при концентрации 2,5 мкг/мл.

Антитело	Мишень	Значения кратности изменения при концентрации 2,5 мкг/мл ± SD	п
hCD27.131A VH6VL6 huIgGl	CD27 человека	2,52±0,45	6
CD27 человека А59Т	2,61±0,58	5
CD27 резуса	2,11±0,35	5
1F5 huIgGl	CD27 человека	1,34±0,29	6
CD27 человека А59Т	1,23±0,22	5
CD27 резуса	1,22±0,13	5
hCD27.15-4B IgG4	CD27 человека	1,82±0,38	3
CD27 человека А59Т	0,97±0,02	2
CD27 резуса	0,99±0,06	2

Пример 10. Биологическая активность в анализах костимуляции первичных Т-клеток человека и резуса

Человеческие обогащенные CD8+ Т-клетки получали из лейкоцитных пленок с использованием коктейля RosetteSep для обогащения по человеческим CD8+ Т-клеткам (StemCell Technologies, Vancouver, Canada) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, лейкоцитную пленку инкубировали с коктейлем антител, разбавленным PBS+2% ЭБС, затем центрифугировали в среде с градиентом плавучей плотности Ficoll-Paque Plus (GE Healthcare, United Kingdom) для осаждения нежелательных клеток, наряду с KKK. Обогащенные CD8⁺ Т-клетки затем извлекали из границы раздела между плазмой и средой, тщательно промывали и лизировли лизирующим буфером АСК (Thermo Fisher, MA, USA). Необученные CD8⁺ Т-клетки выделяли путем дальнейшей обработки образца с использованием набора для обогащения по человеческим необученным CD8⁺ Т-клеткам (BD Biosciences, CA, USA). Клетки либо использовали свежими, либо замораживали для использования в будущих экспериментах.

Для анализа активации необученные CD8⁺ клетки ресуспендировали до плотности 7,5x105 клеток/мл в среде DMEM-F12 (Gibco, CA, USA), содержащей 5% инактивированной нагреванием человеческой сыворотки (Sigma, МО, USA), 50 мкМ 2-меркаптоэтанол (Sigma, МО, USA), 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина (Lonza, Switzerland). 1,5x105 клеток культивировали в присутствии субоптимальной дозы aCD3 (0,025-0,05 мкг/мл клон ОКТ3, Biolegend, CA, USA) и aCD28 (1 мкг/мл клон 15Е8, Cell Sciences, MA, USA) с растворимыми 131AVH6VL6-hIgG1, 1F5-hIgG1, контролем по изотипу или только антu-CD3/антu-CD28 в плоскодонном 96-луночном планшете в течение 3 дней в инкубаторе при температуре 37°C, 5% CO₂. После стимуляции клетки промывали PBS, а затем окрашивали красителем Fixable Viability Dye (eBioscience, CA, USA) в течение 30 мин при 4°С. Избыток красителя удаляли промыванием, и клетки блокировали TruStain FcX (Biolegend, CA, USA). Затем клетки инкубировали с антителами для определения фенотипа (конъюгированные с FITC антитела мыши против CD69 человека (клон FN50, BD Biosciences, CA, USA), PE/CF594 антитела мыши против CD4 человека (клон L200, BD Biosciences, CA, USA), РЕ/Су7 антитела мыши против CD25 человека (клон М-А251, BD Biosciences, CA, USA), конъюгированные с Pacific Blue антитела мыши против CD3 человека (клон SP34-2, BD Biosciences, CA, USA) и АРС/Су7 антитела мыши против CD8a человека (клон RPA-T8, Biolegend, CA, USA)) в течение 30 мин при 4°С, затем промывали и фиксировали 1% раствором параформальдегида. Активацию Т-клеток измеряли методом проточной цитометрии на BD LSRFortessa™ (BD Biosciences, CA, USA), определяя поверхностные маркеры CD25 и CD69. Активацию CD8⁺ Т-клеток определяли на основании % доли CD8⁺ Т-клеток, имеющих фенотип CD25+CD69+.

Антитело 131AVH6VL6-hIgG1 проявляло активность в растворимой форме в анализе с первичными CD8⁺ Т-клетками (в среднем, 2,3-кратное увеличение относительно контроля по изотипу), в то время как 1F5-hIgG1 было неактивным (фиг. 14).

- 69 043052

Таблица 10

мАт	Кратность изменения % доли активированных CD8 Т-клеток относительно контроля по изотипу
донор 87	донор 84	донор 91	донор 11	донор 49	донор 56	донор 816	донор 641	Сред нее	SD
131AVH 6VL6hlgGl	1,55	2,98	1,63	1,96	1,64	0,98	2,43	3,87	2,13	0,93
1F5hlgGl	1,30	0,96	0,99	1,18	1,05	0,62	0,74	1,13	1,00	0,23

Пример 11. Биологическая активность в культуре первичной опухоли человека

Образцы человеческих опухолей от пациентов с немелкоклеточной карциномой легких (NSCLC), почечно-клеточным раком (RCC) и карциномой головы и шеи (H&N) получали от коммерческих поставщиков в соответствии с государственными и федеральными правилами.

Расщепление человеческих опухолей для получения смешанной культуры ОИЛ из опухоли

Свежие ткани опухолей собирали в местах проведения хирургических операций и перевозили в среде AQIX (AQIX, UK) в течение ночи при 4°С в Merck Research Laboratories, Palo Alto, CA. Одиночные клетки получали из опухолей путем тщательного измельчения опухолей скальпелем, с последующей 30минутной инкубацией при 37°С в расщепляющей среде, содержащей 10 мл модифицированной по способу Дульбекко среды Игла (DMEM) (Cellgro, каталожный № 10-013-CV), содержащей 100 мг/мл коллагеназы I типа (Invitrogen, каталожный № 1710 0-017) и 10000 Ед/мл ДНКазы I (Worthington Biochemical, каталожный № LS002060). Расщепленные образцы несколько раз перемешивали пипеткой в направлении вверх-вниз, фильтровали через 70-мкм фильтр и промывали полной средой DMEM. Если жизнеспособность клеток составляла менее 30%, проводили разделение в градиенте плотности фиколла для обогащения по живым клеткам. Смешанные клетки, полученные после расщепления опухоли, наносили на среду Ficoll Paque Plus (GE Healthcare, каталожный № 17-1440-03) и проводили центрифугирование в градиенте плотности при 1000xg в течение 20 мин. Обогащенные живые клетки собирали с границы раздела среды и фиколла и промывали 2 раза фосфатно-солевым буфером Дульбекко (DPBS).

Обнаружение IFNy в культур альных супернатантах ОИЛ из опухолей для определения активации опухоль-инфильтрирующих Т-клеток

Всего 0,1 х10⁶ клеток из расщепленных опухолей/лунку культивировали в 96-луночных кругло донных планшетах и стимулировали их растворимым анти-СОЗ в концентрации 10 нг/мл (BioLegend, клон ОКТЗ, каталожный № 371304) в присутствии 131AVH6VL6-hIgGl (временная трансфекция плазмидой клеток CHO-EXPI - суспензионная культура), анти-PDl (пембролизумаб) или hCD27.15-4BIgG4, IF5hlgGl, либо контроля по изотипу (анти-РСБК9, IgGl и IgG4) в указанных концентрациях. Супернатанты собирали в день 6, и уровень IFNy измеряли с использованием набора для определения IFNy человека в культурах тканей (MSD, каталожный № К151АЕВ).

Поскольку CD27 экспрессируется на необученных Т-клетках, а также на Т-клетках памяти, авторы изобретения предположили, что 131AVH6VL6-hIgGl может оказывать костимулирующие эффекты на инфильтрирующие опухоль Т-клетки памяти. Для оценки способности 131AVH6VL6-hIgGl активировать Т-клетки в иммуносупрессирующем окружении человеческой опухоли авторы изобретения использовали для экспериментов смешанную популяцию клеток из расщепленной человеческой опухоли. 131AVH6VL6-hIgGl в концентрации 0,1, 1, 10 и 20 мкг/мл добавляли к культуре одиночных клеток, полученных при расщеплении ткани опухоли, на 6 дней в присутствии 10 нг/мл анти-СОЗ. Уровень IFNy измеряли в 6-дневных супернатантах. Результаты, полученные для 20 опухолей, приведены на фиг. 8. Антитело 131AVH6VL6-hIgGl в концентрации 10 и 20 мкг/мл вызывало усиление анти-СОЗиндуцированного продуцирования IFNy ОИЛ из человеческой опухоли зависимым от дозы образом со статистически значимым изменением (р<0,001 и р<0,01 соответственно). Антитело 131AVH6VL6-hIgGl также изучали путем сравнения его с двумя другими анти-СО27 мАт, h27.15-4BIgG4 и IF5-IgGl, в анализе продуцирования IFNy ОИЛ из 13 опухолей (фиг. 9). 131AVH6VL6-hIgGl было единственным мАт, вызывающим статистически значимое увеличение анти-СОЗ-индуцированного продуцирования IFNy (р<0,05).

Пример 12. Сканирование аланином для идентификации эпитопа анти-СО27 антител

Способность некоторых анти-ЬСО27 антител к связыванию с рядом аланиновых мутантов hCD27 определяли с использованием клеток СНО-ΚΙ, временно трансфицированных пустым вектором pCI-neo, pCI-neo.hCD27 и несколькими конструктами мутантов pCI-neo.CD27Ala. Трансфекцию выполняли в 6луночных планшетах, используя по 4 мкг плазмидной ДНК и 10 мкл реагента липофектамина 2000 (Invitrogen, 11668-019) на лунку, оба компонента были разведены в OPTI-MEMI (Gibco, каталожный № 31985), в соответствии с инструкциями производителя.

После инкубации трансфицированных клеток в течение одного дня в условиях 37°С и 5% СО2 в ин

-70043052 кубаторе с увлажненной атмосферой клетки промывали один раз в DPBS, открепляли при помощи 400 мкл не содержащего фермент раствора для диссоциации клеток (Gibco, 13151-014) и собирали в 800 мкл ледяного MACS буфера (Miltenyi Biotec, 130-091-221). Открепленные клетки переносили в 96-луночные круглодонные планшеты в количестве примерно 1,2x105 клеток/лунку. После осаждения клеток центрифугированием, отбрасывания супернатантов и ресуспендирования клеток в остаточном объеме добавляли первичные антитела и инкубировали в течение 30 мин при 4°С. Клетки промывали три раза DPBS с 1% БСА, с последующим центрифугированием, отбрасыванием супернатантов и ресуспендированием в остаточном объеме. Связывание первичных антител обнаруживали путем окрашивания в течение 30 мин при 4°С конъюгированным с FITC антителом козы против IgG мыши (BD Bioscience, 349031, 2 мкл/лунку) или конъюгированным с FITC антителом козы против IgG человека (специфическим для γцепи) (SouthernBiotech, 2040-02, 2 мкл/лунку). После одного промывания связывание антитела обнаруживали на планшетном ридере HTS (FACS Canto II), и данные анализировали с использованием программы FlowJo. Детрит, мертвые клетки и дубли исключали из анализа. Связывание выражали в виде геометрического среднего сигнала FITC относительно показателя связывания антитела с hCD27, который был принят за 100%.

Как показано на фиг. 10, мутация аминокислот Р8, Н36, R37 и K38 приводила к потере связывания мышиного hCD27.131A с hCD27, что показано темной штриховкой. Антитело hCD27.131A имеет иной профиль связывания, чем hCD27.15, 1A4 и 1F5IgG1.

Пример 13. Картирование эпитопов CD27 и 131AVH6VL6-hIgG1 методом рентгеновской кристаллографии

Образование комплекса и очистка

Комплекс CD27/131AVH6VL6Fab получали путем инкубации в молярном соотношении 2:1 06AOV (CD27) и 01APN (Fab), соответственно, в течение 48 ч при 4°С. Затем реакционную смесь наносили на колонку Superdex 200 HiLoad 16/600 (120 мл), и полученные фракции объединяли на основании ЭХСЭЖХ анализа. Затем пул комплекса диализовали против 25 мМ Tris, 100 мМ NaCl, pH 8,0. Диализованный материал центрифугировали и фильтровали через 22-мкм шприцевой фильтр.

Метод кристаллизации CD27⁺Fab

Образцы для кристаллизации готовили, добавляя 6,25 мкл 40 мМ маточного раствора хлорида кадмия к 25-мкл аликвоте комплекса CD27-Fab в буфере, состоящем из 25 мМ Tris, pH 8,0, и 100 мМ хлорида натрия. Конечная концентрация белка в образце составляла 12,6 мг/мл, и концентрация хлорида кадмия составляла 8,0 мМ. Образцы выдерживали при комнатной температуре примерно в течение 1 ч до эксперимента.

Первичный скрининг проводили с использованием микрофлюидной системы со свободной межфазной диффузией Topaz, чипов 4.96 Topaz (Fluidigm) и коммерчески доступных экранов. Чипы готовили при комнатной температуре и впоследствии поддерживали при 18°С. Следующие условия были выбраны для перевода в систему диффузии пара:

Экран: Rigaku Wizard Cryo 1-2 (каталожный № 1008649) Осадитель: 0,1 М имидазол, pH 8,0,+40% (по объему) ПЭГ 400 Экран: Jena Bioscience Classic HTS1 (каталожный № CS-201L) Осадитель: 0,1 М Tris pH, 8,5,+30% (по объему) ПЭГ 3000+0,2 М сульфат лития.

Кристаллы для исследований методом рентгеновской дифракции получали с использованием метода диффузии пара в варианте сидячей капли. Растворы в лунках планшета, состоящие из 100 мМ Tris, pH 8,0-8,5, и ПЭГ 400 30-50% (по объему), распределяли с использованием прибора Formulator™ (Formulatrix). Капли, состоящие из равных объемов раствора в лунке и белка (0,22 мкл+0,22 мкл) распределяли при комнатной температуре с использованием Oryx4 (Douglas Instruments) и впоследствии поддерживали при 18°С. Кристаллы росли в течение одного месяца.

Кристаллы также получали путем добавления затравочного стока, приготовленного в буфере, состоящем из 100 мМ Tris pH, 8,5, и 40% (по объему) ПЭГ 400. Капли, состоящие из 0,30 мкл белка+0,20 мкл раствора в лунке+0,1 мкл затравочного стока, распределяли при комнатной температуре с использованием Oryx4 (Douglas Instruments) и впоследствии поддерживали при 18°С. Кристаллы росли в течение одного месяца.

Сбор кристаллов и получение данных

Кристалл из эксперимента по кристаллизации № 4482 drop F 1 собирали из кристаллизующейся капли с помощью Litholoop с 0,3-мм сеткой (Molecular Dimensions Ltd, Suffold, UK) и замораживали в жидком азоте. Сбор данных производили на установке Промышленной ассоциации по кристаллографическому изучению макромолекул (IMCA), сектор 17 исследовательского центра Advanced Photon Source (APS) в Argonne National Laboratory (ANL, Lemont, IL). Данные получали при длине волны 1,0 А с использованием детектора Pilatus 6M (Dectris AG, Baden-Dattwil, Switzerland). Данные обрабатывали при помощи автоматизированного программного обеспечения autoPROC с использованием опций XDS для индексирования и интегрирования, AIMLESS для масштабирования, POINTLESS для анализа данных и STARANISO для применения пределов анизотропной дифракции.

- 71 043052

Параметры элементарной ячейки кристалла:

a=114,20, b=126,10, c=131,600, α=90°, β=90°, γ=90°, пространственная группа С222(1).

Выяснение и уточнение структуры

Структура была решена путем молекулярной замены с помощью программы MOLREP. Учетные записи 2XTJ и 5TLS в базе данных PDB использовали в качестве поисковых зондов для Fab и антигена, соответственно. Используя параметры по умолчанию, сначала локализовали область VH+VL (К4/сигма=7,91, ТТ/сигма=10,83), затем фрагмент CH1+CL, с использованием вариабельной области в качестве фиксированной вводной модели для трансляции (Rf/сигма=11,56, ТТ/сигма=23,70). Однако на данной стадии антиген невозможно было разместить однозначно (наилучшее решение Rf=4,73, Tf/сигмa=3,77). Затем модель уточняли с использованием программы autoBUSTER. Хотя значения R_free и R_work были высокими (41,4 и 38,4% соответственно), карта электронной плотности показала соответствие с большинством замен и вставок или делеций в последовательности между Fab, используемым в качестве зонда, и конечной структурой. Коррекцию производили с использованием программы COOT. Полученную структуру вновь уточняли при помощи autoBUSTER до значений R_free и R_work, составляющих 34,3 и 30,8% соответственно. Вновь применяли молекулярную замену с использованием данной модели в качестве фиксированных координат, что привело к однозначному решению для функции трансляции (TF/сигма=17,67). Дополнительные шаги по воссозданию и уточнению привели к получению конечных значений R_free и R_work, составляющих 22,4 и 20,0% соответственно. Конечная модель содержит остатки CD27 6-88 и 94-100, остатки легкой цепи Fab 1-212, остатки тяжелой цепи Fab 1-131 и 137-217, 6 катионов кадмия, одну молекулу ПЭГ 400 и 288 молекул воды. Упорядоченные сайты гликозилирования обнаружены не были.

Анализ взаимодействий Fab-антиген

В следующей таблице приведены все контакты между Fab и антигеном (Н-связи указаны жирным шрифтом в виде Н, солевые мосты выделены жирным курсивом (SB), порог отсечения 3,30 А использовали для полярных взаимодействий):

Таблица 11

Список контактов <4,0 А между антителом и CD27
Легкая цепь Fab	Антиген	Расстояние (A)
Туг	31	Oh	Pro	8	Ca	3,82
Туг	31	Oh	Pro	8	C	3,81
Туг	31	Cz	Pro	8	Cb	3,74
Туг	31	Се2	Pro	8	Cb	3,73
Туг	31	Cel	Glu	9	N	3,93
Туг	31	Oh	Glu	9	N	2,95H
Туг	31	Cz	Glu	9	N	3,61
Туг	31	Oh	Glu	9	Ca	3,77
Туг	31	Oh	Glu	9	Cb	3,47
Тгр	90	Ch2	His	11	Cel	3,83
Тгр	90	Ch2	His	11	Ne2	3,72

- 72 043052

Trp	90	Cz3	His	11	Ne2	3,81
Asp	49	Od2	Arg	37	Cz	3,83
Asp	49	Odl	Arg	37	Cz	3,61
Trp	90	Cz2	Arg	37	Nhl	3,86
Asp	49	Od2	Arg	37	Nhl	3,78
Asp	49	eg	Arg	37	Nhl	3,68
Asp	49	Odl	Arg	37	Nhl	2,81SB
Asp	49	Od2	Arg	37	Nh2	2,98SB
Asp	49	eg	Arg	37	Nh2	3,66
Asp	49	Odl	Arg	37	Nh2	3,53
Tyr	93	Oh	Lys	38	Cd	3,47
Tyr	93	Oh	Lys	38	Ce	3,53
Tyr	93	Cz	Lys	38	Nz	3,98
Tyr	93	Oh	Lys	38	Nz	2,93H
Phe	95	Ce2	Lys	38	Nz	3,85
Phe	95	Cz	Lys	38	Nz	3,52
Тяжелая цепь Fab	Антиген	Расстояние (A)
Asn	31	Nd2	Lys	17	Cd	3,60
Asn	31	Nd2	Lys	17	Ce	3,86
Asn	31	Odl	Lys	17	Nz	3,29H
Asn	31	Nd2	Lys	17	Nz	3,87
Asn	31	Cg	Lys	17	Nz	3,93
Asn	31	0	Leu	18	Cd2	3,32
Asn	31	Cb	Leu	18	Cd2	3,82
Thr	30	0	Asp	34	0	3,52
Asn	54	Cb	Asp	34	0	3,89
Asn	54	Odl	Asp	34	Cb	3,84
Asn	54	Cg	Asp	34	Cb	3,93
Asn	52	Nd2	Asp	34	eg	3,85
Asn	52	Nd2	Asp	34	Odl	3,24H
Asn	52	Nd2	Asp	34	Od2	3,82
Asn	54	Odl	Asp	34	Od2	3,57
Thr	55	Cg2	Asp	34	Od2	3,30
Asn	54	Cb	Asp	34	Od2	3,90
Asn	31	0	Gin	35	Ca	3,50
Asn	31	0	Gin	35	C	3,61
Asn	52	Nd2	Gin	35	eg	3,43
Asn	52	Odl	Gin	35	Cg	3,40
Asn	52	eg	Gin	35	cg	3,45
Gly	33	N	Gin	35	Cd	3,79

- 73 043052

Thr	53	N	Gin	35	Cd	3,57
As η	52	Odl	Gin	35	Cd	3,28
Туг	32	C	Gin	35	Cd	3,94
Thr	53	Ogi	Gin	35	Cd	3,64
As η	52	Cg	Gin	35	Cd	3,68
lie	51	0	Gin	35	Oel	3,98
Gly	33	Ca	Gin	35	Oel	3,12
Gly	33	N	Gin	35	Oel	3,21H
Thr	53	N	Gin	35	Oel	2,76H
Asn	52	Odl	Gin	35	Oel	3,49
Asn	52	eg	Gin	35	Oel	3,75
Asn	52	0	Gin	35	Oel	3,43
Thr	53	Ca	Gin	35	Oel	3,79
Thr	53	Cb	Gin	35	Oel	3,94
Tyr	32	C	Gin	35	Oel	3,49
Tyr	32	0	Gin	35	Oel	3,63
Asn	52	Ca	Gin	35	Oel	3,29
Trp	50	Cz3	Gin	35	Oel	3,81
Thr	53	Ogi	Gin	35	Oel	3,18H
Thr	53	N	Gin	35	Ne2	3,90
Asn	52	Odl	Gin	35	Ne2	3,65
Thr	53	Ogi	Gin	35	Ne2	3,25H
Tyr	32	N	Gin	35	Ne2	3,83
Asn	31	C	Gin	35	Ne2	3,76
Asn	54	N	Gin	35	Ne2	3,57
Asn	54	Cb	Gin	35	Ne2	3,72
Thr	30	0	Gin	35	Ne2	2,87H
Thr	30	C	Gin	35	Ne2	3,67
Asn	31	0	His	36	N	2,88H
Asn	31	0	His	36	Ca	3,83
Tyr	32	Cd2	His	36	Cb	3,58
Asn	31	0	His	36	Cb	3,62
Tyr	32	Ce2	His	36	Cb	3,66
Tyr	32	Ce2	His	36	eg	3,72
Asp	101	Odl	His	36	Cd2	3,87
Gly	100	C	His	36	Cd2	3,59
Gly	100	Ca	His	36	Cd2	3,78
Tyr	32	Ce2	His	36	Cd2	3,71
Tyr	32	Cd2	His	36	Cd2	3,97
Gly	100	0	His	36	Cd2	3,44
Asp	101	Odl	His	36	Cel	3,65
Asp	101	Odl	His	36	Ne2	2,80SB
Asp	101	Cg	His	36	Ne2	3,95
Gly	100	0	His	36	Ne2	3,79
Gly	100	c	His	36	Ne2	3,92
Gly	100	0	Arg	37	Cd	3,74
Asp	101	Odl	Arg	37	Ne	3,47
Asp	101	Ca	Arg	37	Cz	3,99
Asp	101	Odl	Arg	37	Cz	3,65
Asp	101	Cg	Arg	37	Nh2	3,77
Asp	101	Odl	Arg	37	Nh2	3,44
Trp	50	Ch2	Lys	38	eg	3,93
Trp	50	Ch2	Lys	38	Cd	3,85
Trp	50	Cz2	Lys	38	Cd	3,96
Trp	50	Cz3	Lys	38	Ce	3,80
Trp	50	Ch2	Lys	38	Ce	3,71
Trp	50	Cz2	Lys	38	Ce	3,81
Trp	50	Ce3	Lys	38	Ce	3,99
Trp	50	Ce2	Lys	38	Ce	3,99
Glu	99	eg	Lys	38	Ce	3,89
Glu	99	Cg	Lys	38	Nz	3,82

- 74 043052

Помимо многочисленных ван-дер-ваальсовых взаимодействий, несколько Н-связей и солевых мостов имеют место на поверхности контакта. Паратоп включает все 3 определяющие комплементарность области (CDR) из каждой легкой и тяжелой цепи. Однако эпитоп ограничен 1-м цистеин-богатым доменом (CRD). В дополнение к сегменту вблизи N-конца, остаткам 8-11 и остатку 17, все контакты происходят с остатками 34-38 (см. фиг. 11 и 12). Общая поверхность, скрываемая при образовании комплекса антиген-антитело, составляет 679 А² и 616 А² на доступных для растворителя поверхностях CD27 и Fab, соответственно (см. фиг. 11).

Пример 14. Исследование конкуренции анти-CD27 антител за связывание с hCD27

Клетки СНО-К1, стабильно экспрессирующие hCD27, высевали в 96-луночные планшеты (Nunc, 167008) при плотности 4х10⁴ клеток/лунку и инкубировали в условиях 37°С и 5% CO2 в инкубаторе с увлажненной атмосферой. Анти-hCD27 антитела в серийных разведениях оставляли для связывания на 2 ч в условиях 37°С и 5% CO2. Затем добавляли второе анти-hCD27 антитело в фиксированной концентрации и инкубировали в течение 1 ч в условиях 37°С и 5% CO2. Промывочное устройство ELx405 BioTEK использовали для промывания клеток три раза буфером DPBS/0,05% Tween. Связывание анти-hCD27 антитела, которое добавляли в фиксированной концентрации, обнаруживали, добавляя либо конъюгированное с HRP антитело козы против IgG человека (Jackson Immuno Research, 109-035-088, разведение 1:1000), либо конъюгированное с HRP антитело козы против IgG мыши (Southern Biotech, 1030-05, разведение 1:5000). Планшеты инкубировали в течение 1 ч в условиях 37°С и 5% СО₂ и промывали три раза, как описано выше. Добавляли стабилизированный хромоген ТМВ (Invitrogen, SB02), и клетки инкубировали в течение примерно 10 мин при комнатной температуре. Реакцию останавливали добавлением равного объема 0,5 М H2SO4. В завершение, использовали планшетный ридер iEMS Reader MF (Labsystems) или планшетный ридер Envision (Perkin Elmer) для измерения поглощения при длине волны 460 и 620 нм.

Для определения того, способно ли мышиное антитело hCD27.131A и мышиное антитело hCD27.15 перекрестно конкурировать с 1F5IgG1 за связывание с hCD27, проводили конкурентный клеточный анализ ELISA. Антитело 1F5IgG1 в серийных разведениях оставляли для связывания с hCD27, экспрессированным на клетках СНО-К1. Затем определяли связывание мышиного антитела hCD27.131A или мышиного антитела hCD27.15. Также проводили обратный эксперимент, в котором мышиное антитело hCD27.131A или мышиное антитело hCD27.15 в серийных разведениях оставляли для связывания, с последующим определением связывания антитела 1F5IgG1. Как показано на фиг. 13, мышиное антитело hCD27.131A не препятствует связыванию 1F5IgG1, это свидетельствует, что эти два антитела связываются с разными эпитопами на hCD27. Аналогичные данные были получены для мышиного антитела hCD27.15, которое, как было показано, не конкурирует с 1F5IgG1 за связывание с hCD27. Только, когда первым связывалось антитело 1F5IgG1 в высокой концентрации, можно было наблюдать умеренное уменьшение связывания мышиного антитела hCD27.15.

По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительной патентной заявки США № 62/399837 и предварительной патентной заявки США № 62/546214, полное содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки. Все литературные источники, цитированные в настоящем документе, включены посредством ссылки в той же степени, как если было бы специально и индивидуально указано, что каждая отдельная публикация, информация в базе данных (например, последовательности в Genbank или записи в GeneID), патентная заявка или патент включены посредством ссылки. Данное заявление о включении посредством ссылки, согласно намерениям авторов заявки и в соответствии с 37 C.F.R. 1,57(b)(1), должно относиться ко всем, и к каждой отдельной публикации, информации в базе данных (например, последовательностям в Genbank или записям в GeneID), патентной заявке, или патенту, все из которых четко указаны в соответствии с 37 C.F.R. 1,57(b) (2), даже если цитирование такого источника не сопровождается непосредственно специальным заявлением о включении посредством ссылки. Наличие специальных заявлений о включении посредством ссылки, если они имеют место, в тексте спецификации никоим образом не ослабляет общего заявления о включении посредством ссылки. Цитирование в настоящем документе литературных источников не является признанием того, что литературный источник относится к предшествующему уровню техники, и не является какимлибо признанием содержания, или даты опубликования, данных публикаций или документов. Если в указанных публикациях приводится определение для заявленного термина, которое противоречит определениям, приведенным в настоящей спецификации, то определения, приведенные в настоящей спецификации, должны быть использованы для интерпретации заявленного изобретения.

Объем настоящего изобретения не ограничен конкретными вариантами осуществления, описанными в настоящем документе. Действительно, различные модификации вариантов осуществления изобретения, в дополнение к тем, которые описаны в настоящем документе, станут очевидны для специалистов в данной области на основании вышеприведенного описания и сопроводительных фигур. Такие модификации должны входить в объем прилагаемой формулы изобретения.

Вышеприведенная письменная спецификация считается достаточной, чтобы специалист в данной области мог осуществить на практике настоящее изобретение. Различные модификации вариантов осу- 75 043052 ществления изобретения, в дополнение к тем, которые описаны в настоящем документе, станут очевидны для специалистов в данной области на основании вышеприведенного описания, и они входят в объем прилагаемой формулы изобретения.

Таблица 12. Информация о последовательностях

Описание	SEQ ID NO:	ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ
131А Н - CDR1	1	NYGXiN Х₄= Μ, V, L, I, G, A, S, Т
131А Н - CDR2	2	WIX₁X₂X₃X4 geptyreefkg X₄=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₂=Т или любая аминокислота, кроме М, С X₃=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₄=Т или любая аминокислота, кроме М, С
131А Н - CDR3	3	EGDRXiDY Х₄=М или любая аминокислота, кроме С
131А L - CDR1	4	SASSSVSYXiH Х₄=М, V, L, I, G, A, S, Т
131А L - CDR2	5	XiX₂SKLAS X₄=D или любая аминокислота, кроме М, С Х₂=Т или любая аминокислота, кроме М, С
131А L - CDR3	6	QQXiX₂X₃YPFT X₄=W или любая аминокислота, кроме М, С X₂=N или любая аминокислота, кроме М, С, Р X₃=S или любая аминокислота, кроме М, С, Р
131А VH, РОДИТЕЛЬСКАЯ	7	QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTNYGMNWVKQAPGKG LKWMGKPNTNTGEPTYAEEFFCGRFAFSLETSATTAYLQINNLKN EDTATYFCAREGDAMDYWGQGTSVTVSS
131 VL, РОДИТЕЛЬСКАЯ	8	QIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSGTSPK RWIYDTSKLASGVPARESGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQ QWNSYPFTFGSGTKLEIK
131 VH, гуманизированный тип	9	EI QLVQS GAEVKKPGAS VKX₄ S CKAS GYT FTNYGX₂NWVX₃QAPG QGLKWX₄GX5lX₆X7X_sXpGEPTYAEEFFCGRFTFTLX₁₀TSX₁₁X₁₂T AYX₁₃EX₁₄SSLRX₁₅ E DT AVY YC AREGXj gXi ₇X₁₈D YWGQ GT T VT V

- 76 043052

		SS X₄=V, I Х₂=М, V, L, I, G, A, S, Т Х₃=К, R Х₄=М, V, L, I X₅=W или любая аминокислота, кроме М или С X₆=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₇=Т или любая аминокислота, кроме М, С X₈=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₉=Т или любая аминокислота, кроме М, С Xio=D, Е Χιι=Ι, А Xi2=S, Т Х₁₃=М, L, V, I Х₁₄—L, I Х₁₅—S, N X₁₆=D или любая аминокислота, кроме М, 0 Х₁₇=А или любая аминокислота, кроме М, 0 Х₁₈=М или любая аминокислота, кроме С
131A VH6 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	10	ЕIQLVQS GAEVKKРGASVKVS СKAS GYT FTNYGMNWVKQAP GQG LKWMGWZNTNTGEPTYAEEFFCGRFTFTLDTSISTAYMELSSLRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVS S
131А VH7 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	11	EIQLVQ S GAEVKKP GASVKIS CKAS GYT FTNYGMNWVKQAP GQG LKWMG¥ZNTNTCTPTYAEEFFCGRFT FTLDT SATTAYLEIS S LRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVS S
131А VH8 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	12	EIQLVQ S GAEVKKP GASVKVS CKAS GYT FTNYGMNWVKQAP GQG LKWMGJVZNTNTGEPI’YAEEPKGRFTFTLDTSISTAYMELSSLRN EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVS S
131А VH9 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	13	EIQLVQ S GAEVKKP GASVKVS CKAS GYT FTNYGMNWVRQAP GQG LKWMGNZNTNTGEPTYAEEFKGRFTFTLDTSASTAYMELSSLRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVS S
131А VL, гуманизированный тип	14	X₁IX₂LTQSPX₃TX₄SX₅SX₆GX₇RX₈TX₉X₁₀CSASSSVSYX₁₁HWY qqkpgx₁₂apkrx₁₃iyx₁₄x₁₅skzasgvparfsgsgsgtx₁₆yx₁₇ LTISSX₁₈X₁₉PEDX₂oAX₂₁YYCeeX₂₂X₂₃X₂₄YPFTFGQGTKLEIK Xi=E, D, X₂=V, Q X₃=A, S x₄=l x₅=l, A X₆=P, V X₇=E, d x₈=a, V

-77043052

Xg = L, I

Xio=S, T

X₂₁=M, V, L, I, G, A, S, T

X12=Q, К

		X₁₃=W или любая аминокислота, кроме М, С X₁₄=D или любая аминокислота, кроме М, С Х₁₅=Т или любая аминокислота, кроме М, С Xi₆=D, S Xi7=S, Т X₁₈=L, М, V, I X19=E, Q X₂₀=F, V, L, I, T X₂i=V, T X₂₂=W или любая аминокислота, кроме Μ, С Χ₂₃=Ν или любая аминокислота, кроме Μ, С, Р X₂₄=S или любая аминокислота, кроме Μ, С, Р
131A VL6 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	15	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSASSSVSYMHWYQQKPGQAPK RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTDYSLTISSLEPEDFAVYYCQ QWSYPFTFGQGTKLEIК
131A VL7 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	16	ЕIVLTQSРATLSLSРGЕRATLSСSASSSVSYMHWYQQКРGQAPК RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSLEPEDFATYYCQ QWSYPFTFGQGTKLEIК
131A VL8 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	17	ЕIVLTQSРATLSASРGЕRVTLSСSASSSVSYMHW YQQКРGQAPК RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTDYSLTISSMEPEDFAVYYCQ QWSYPFTFGQGTKLEIК
131A VL9 (ГУМАНИЗИРОВАННАЯ)	18	DIQLTQSPSTLSASVGDRVTITCSASSSVSYMHWYQQKPGKAPK RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQ QWSYPFTFGQGTKLEIК
CD27 человека	19	TPAPKSCPERHYWAQGKLCCQMCEPGTFLVKDCDQHRKAAQCDP CIPGVSFSPDHHTRPHCESCRHCNSGLLVRNCTITANAECACRN GWQCRDKECTECDPLPNPSLTARSSQALSPHPQPTHLPYVSEML ЕARTAGHMQ Т LAD F RQ L РART L S Т НW Р Р Q R S L С S S D FIRILVIF SGMFLVFTLAGALFLHQRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREE EGSTIPIQEDYRKPEPACSP
CD27 человека (А59Т)	20	TPAPKSCPERHYWAQGKLCCQMCEPGTFLVKDCDQHRKTAQCDP CIPGVSFSPDHHTRPHCESCRHCNSGLLVRNCTITANAECACRN GWQCRDKECTECDPLPNPSLTARSSQALSPHPQPTHLPYVSEML ЕARTAGHMQ Т LAD F RQ L PART L S T HW P P Q R S L C S S D FIRILVIF SGMFLVFTLAGALFLHQRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREE EGSTIPIQEDYRKPEPACSP
mmCD27	21	TPAPKSCPERHYWAQGKLCCQMCEPGTFLVKDCDQHRKAAQCHP CIPGVSFSPDHHTRPHCESCRHCNSGLLIRNCTITANAVCACRN

- 78 043052

		GWQCRDKECTECDPPPNPSLTTWPSQALGPHPQPTHLPYVNEML ЕARTAGHMQ Т LAD F RH L РART L S Т НW Р Р Q R S L С S S D FIRILVIF SGMFLVFTLAGTLFLHQQRKYRSNKGESPMEPAEPCPYSCPREE EGSTIPIQEDYRKPEPASSP
C4-hCD27.15, химерное антитело, тяжелая цепь	22	EVRLQQSGADLVKPGASVKLSCTASGFIIKATYMHWVRQRPEQG LEWIGRIDPANGETKYDPKFQVKATITADTSSSTAYLQLNSLTS DDTAVYYCARYAWYFDVWGAGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSR STSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGP PCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQ EDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQD WLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQE EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDS DGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
C4-hCD27.15 химерное антитело, легкая цепь	23	DIQMTQSPASLSASVGDTVTITCRASENIYSFLAWYHQKQGRSP QLLVYHAKTLAEGVPSRFSGSGSGTQFSLKINSLQAEDFGSYYC QHYYGSPLTFGAGTKLEVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASV VCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
hCD27.15 6В гуманизированное антитело, тяжелая цепь	24	QVQLVQ S GAEVKK РGASVKVSСKAS GF11 КАТYMHWVRQAP GQR LEWMGRIDPANGETKYDPKFQVRVTITADTSASTAYMELSSLRS EDTAVYYCARYAWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSR STSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGP PCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQ EDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQD WLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQE EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDS DGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
hCD27.15 6В гуманизированное антитело, легкая цепь	25	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASENIYSFLAWYQQKPGKAP KLLIYHAKTLAEGVTSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDSATYYC QHYYGSPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASV VCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLS STLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Лидерная последовательность, тяжелые цепи	26	MEWSWVFLFFLSVTTGVHS
Лидерная последовательность, легкие цепи	27	MSVPTQVLGLLLLWLTDARC

-79043052

		ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHK PSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLM

Константный домен
тяжелой цепи -	28	IS RT Р Е VT С VWD VS Q Е D Р Е VQ FNW YVD GVEVHNAKT К Р RE EQ F
IgG4	NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAK
S228P Константный домен		GQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESN GQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSLGK RTVAAP SVFIFPPSDEQLKS GTASWCLLNN FYР REAKVQWKVD
легкой цепи каппа	29	NALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACE VTHQGLSSPVTKSFNRGEC ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHK PSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKD
Константный домен	30	Т LMIS RT Р Е VT С VWD VS Н Е D Р Е VK FNWYVD GVE VHNAKT К Р RE
тяжелой цепи - IgGl		EQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSG ALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVDHK PSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMI
Константный домен	31	S RT Р Е VT С VWD VS Н Е D Р Е VQ FNW YVD GVE VHNAKT К P RE EQ FN
тяжелой цепи - IgG2		STFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKG QPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMH EALHNHYTQKSLSLSPGK Y₁IQLVQSGY2EY₃KKPGY4Y₅VKX₁SCKASGYTFTNYGX₂NWVX₃Q APGY₆GLKWX₄GX5lX₆X7X_sXpGEPTYAEEFFCGRFY₇FY₈LX₁₀TSX ₁₁X₁₂TAYX₁₃EX₁4SSLRX₁5EDTAVYYCAREGX₁₆X₁₇X_1sDYWGQG TY₉VTVSS Y₃=E или Q Y₂=A или P Y₃=V или L
131 VH типа 1	32	Y₄=A или E Y₅=S или T Y₆=Q или К Y₇=A или Т Y₈=T или S Y₉=T или S Xi=V, I X₂=M, V, L, I, G, A, S, T

- 80 043052

131 VL типа 1

33

X₃=K, R Х₄=М, V, L, I X₅=W или любая аминокислота, кроме М или С X₆=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₇=Т или любая аминокислота, кроме М, С X₈=N или любая аминокислота, кроме М, С Х₉=Т или любая аминокислота, кроме М, С Xio=D, Е Χιι=Ι, А Xi2=S, Т Х₁₃=М, L, V, I Xi4=L, I Х15= 3, N X₁₆=D или любая аминокислота, кроме М, С Х₁₇=А или любая аминокислота, кроме М, С Х₁₈=М или любая аминокислота, кроме С X₁IX₂LTQSPX₃Y₁X4SX5SX₆GX₇Y2X₈TX9X₁₀CS’ASSSVSZX₁₁HW YQQKY₃GX₁₂Y4PKRX₁₃IYX2₄X25SKLASGVPARFSGSGSGTX₁₆Y X₁₇LTISSX₁₈X₁9Y5EDX2oAX2iYYCeeX₂₂X₂3X₂₄YPFTFGQGTKL EIK Y₂=T или I Y₂=K или R Y₃=P или S Y₄=A или S Y₅=A или P X4=E, d, q X₂=V, Q X₃=A, S x₄=l, m x₅=l, A X₆=P, V x₇=e, d x₈=a, V X₉=L, I, M Xio=S, T Х_Ы=М, V, L, I, G, A, S, T x₁₂=q, k, t X₁₃=W или любая аминокислота, кроме М, С X₁₄=D или любая аминокислота, кроме М, С Х₁₅=Т или любая аминокислота, кроме М, С X_i6=D, S Xi7=S, Т

- 81 043052

		X₁₈=L, Μ, V, I Х1э=Е, Q X₂₀=F, V, L, I, T, A X₂i=V, T X₂₂=W или любая аминокислота, кроме М, С Χ₂₃=Ν или любая аминокислота, кроме М, С, Р X₂₄=S или любая аминокислота, кроме М, С, Р
131 VH типа 2	34	Y₁IQLVQSGY₂EY₃KKPGY₄Y₅VKX₁SCKASGYTFTNYGX₂NWVX₃Q APGY₆GLY₇WX₄GX₅IX₆X7X_sXpGEPTYAEEFFCGRFY₈FY₉LX₁oTS X₁₁X₁₂TAYX₁₃EX₁₄SSLRX₁₅EDTAVYYCAREGX₁₆X₁₇X_1sDYWGQ GTY₁₀VTVSS Y₄=E или Q Y₂=A или P Y₃=V или L Y₄=A или E Y₅=S или T Y₆=Q или К Y₇=K или Е Υ₈=Α или Т Υ₉=Τ или S Υ₁₀=Τ или S X₄=V, I Х₂=М, V, L, I, G, A, S, Т Х₃=К, R Х₄=М, V, L, I X₅=W, F, или Y X₆=N или Q Х₇=Т X₈=N или Q Х₉=Т Xio=D, Е Χιι=Ι, А X₄₂=S, Т Х₁₃=М, L, V, I X₁₄=L, I Xi5=S, N Xis=D х₁₇=а Х₁₈=М, L, V, I
131 VL типа 2	35	x₁ix₂ltqspx₃y₁x₄sx₅sx₆gx₇y₂x₈tx₉x₁₀csasssvszx₁₁hw yqqky₃gx₁₂y₄pky₅x₁₃i xx₁₄x₁₅sklasgvparfsgsgsgtx₁₆ YX₁₇LTISSX₁₈X₁₉Y₆EDX₂oAX₂₁YYCeeX₂₂X₂₃X₂4rPFTFGQGTK

- 82 043052

		LEIK Y₄=T или I Υ₂=Κ или R Υ₃=Ρ или S Υ₄=Α или S Y₅=R или L Y₆=A или Р Х₄=Е, D, Q X₂=V, Q Х₃=А, S x₄=l, м x₅=l, А Х₆=Р, V Х₇=Е, D Х₈=А, V X₉=L, I, М Хю=3, Т Х₄₁=М, V, L, I, G, A, S, Т x₁₂=q, к, т X₁₃=W или L x₁₄=d Х15=Т Xi₆=D, S Xi7=S, Т X₁₈=L, М, V, I Х1э=Е, Q X₂₀=F, V, L, I, T, A X₂₁=V, T X₂₂=W, F, или Y X₂₃=N или Q X₂₄=S
131A6 (гуманизированная), легкая цепь	36	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSASSSVSYMHWYQQKPGQAPK RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTDYSLTISSLEPEDFAVYYCQ QWNSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASW CLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
131А6 IgGl (гуманизированная) , тяжелая цепь	37	EIQLVQ S GAEVKKP GASVKVS CKASGYT FTNYGMNWVKQAPGQG LKWMGWINTNTGEPTYAEEFKGRFTFTLDTSISTAYMELSSLRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSK STSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD KTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWD

- 83 043052

		VSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVL HQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPP SRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPV LDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSL SLSPGK
131A6 IgG2 (гуманизированная) , тяжелая цепь	38	ЕIQLVQ S GAEVKKP GASVKVS СКАЗ GYT FTNYGMNWVKQAPGQG LKWMGWINTNTGEPTYAEEFKGRFTFTLDTSISTAYMELSSLRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSR STSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCV ECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHE D Р EVQ FNWYVDGVEVHNAKT КР REEQ FN S Т FRWS VLT WHQDW LNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREE MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSD GSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP GK
131 VH, гуманизированная консенсусная	39	EI QLVQS GAEVKKP GAS VKX₄ S СКАЗ GYT FTNYGX₂NWVX₃QAPG QGLKWX₄GX₅IX₆X7X_sX₉GEPTYAEEFFCGRFTFTLX₁oTSX₁₁X₁₂T ΑΥΧ₁₃EX₁₄SSLRX₁₅ E DT AVY YCAREGXj gXi ₇X₁₈D YWGQ GT T VT V S3 X₄=V, I X₂=M X₃=K, R X₄=M X₅=W X₆=N X₇=T x₈=n X₉ = T X₁₀=D Xii=I, A Xi2=S, T X₁₃=M, L X₄₄=L, I X15=S X_i6=D x₁₇=a X₁₈=M
131 VL гуманизированная консенсусная	40	X₁IX2LTQSPX₃TX₄SX5SX₆GX₇RX₈TX₉X₁oCSASSSVSZX₁₁HWY QQKPGX^APKRXnlYXK^SKLASGVPARFSGSGSGTX^YXn LTISSX₁₈X₁₉PEDX2oAX₂₁YYCeeX₂₂X₂3X₂4YPFTFGQGTKLEIK Xi=E, D,

- 84 043052

		KN KN KN KN KN KN KN KN KN KN rS KN KN KN KN KN KN KN KN к*ч rS KN KN 1 Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι Ίι и 3 s; < ч я t-, и ο η σ s; ю к и Г Г > > F F F Н ЮКНИ я _н н < _σ < > ИЮ
hCD27.15 4B, тяжелая цепь	41	QVQLVQ S GAEVKKР GASVKVSСKAS GF11КАТYMHWVRQAP GQR LEWMGRIDPANGETKYDPKFQVRVTITADTSASTAYMELSSLRS EDTAVYYCARYAWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSR STSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGP PCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQ EDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQD WLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQE EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDS DGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
hCD27.15 4В, легкая цепь	42	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASENIYSFLAWYQQKPGKAP KLLIYHAKTLAEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC QHYYGSPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASV VCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLS STLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
CD27 (06AOV)	43	TPAPKSCPERHYWAQGKLCCQMCEPGTFLVKDCDQHRKAAQCDP CIPGVSFSPDHHTRPHCESCRHCNSGLLVRNCTITANAECACRN GWQCRDKECTECDPLPNPSLTARSSQALSPHPQPTHLPYVSEML

- 85 043052

		EARTAGHMQT LAD FRQL PART LSTHHHHHHHH
131AVH6VL6 Fab, тяжелая цепь	44	ЕIQLVQ S GAEVKKP GASVKVS CKAS GYT FTNYGMNWVKQAP GQG LKWMGWINTNTGEPTYAEEFKGRFTFTLDTSISTAYMELSSLRS EDTAVYYCAREGDAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSK STSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD KTHT
131AVH6VL6 Fab, легкая цепь	45	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSASSSVSYMHWYQQKPGQAPK RWIYDTSKLASGVPARFSGSGSGTDYSLTISSLEPEDFAVYYCQ QWNSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASW CLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSS TLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
		ATGGACATGCGGGTGCCAGCTCAGCTGCTGGGCCTGCTGCTGCT
Последовательность ДНК, кодирующая легкую цепь 131AVH6VL6 (сигнальный пептид подчеркнут)	46	GTGGCTGAGAGGCGCCAGATGCGAGATCGTGCTGACCCAGTCCC CCGCCACCCTGTCTCTGAGCCCTGGCGAGAGAGCCACCCTGAGC TGCTCCGCCTCCTCCTCCGTGTCCTACATGCACTGGTATCAGCA GAAGCCCGGCCAGGCCCCCAAGCGGTGGATCTACGACACCTCCA AGCTGGCCTCCGGCGTGCCCGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCT GGCACCGACTACTCCCTGACCATCTCCAGCCTGGAACCCGAGGA CTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGTGGAACTCCTACCCCTTCA CCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAA ATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATC CCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAA TCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGA CAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAG ACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAG GGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTG TTGA( стоп-кодон)
		ATGGGCTCCACCGCCATCCTGGGACTGCTGCTGGCTGTGCTGCA
Последовательность ДНК, кодирующая тяжелую цепь 131AVH6VL6 (сигнальный пептид подчеркнут)	47	GGGCGTGTGCGCCGAGATCCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAG TGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCC GGCTACACCTTCACCAACTACGGCATGAACTGGGTGAAACAGGC CCCAGGCCAGGGCCTGAAGTGGATGGGCTGGATCAACACCAACA CCGGCGAGCCCACCTACGCCGAAGAGTTCAAGGGCCGGTTCACC TTCACCCTGGACACCTCCATCTCCACCGCCTACATGGAACTGTC CTCCCTGCGGAGCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGAG AGGGCGACGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACAACCGTGACC GTGTCCTCCGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGC ACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCT GCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGG AACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCCGT

- 86 043052

		CCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCG TGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTG AATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTTGAGCC САААТСТТGT GAGААААСТСACACATGCCCACCGTGCCCAGCAC CTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAA CCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATG CGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCA ACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAG CCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGT CCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACA AGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAA ACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTA CACCCTGCCCCCATCCCGGGACGAGCTGACCAAGAACCAGGTCA GCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCC GTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGAC CACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACA GCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTC TTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACAC GCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAATGA(стопкодон)
VH1-102	64	QVQ LVQ S GAE VKK Р GASVKVSСKAS GYT FTWVRQAPGQ GL EWMG RVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAR
VH1-146	65	QVQ LVQ S GAEVKK P GASVKVS C KAS GYT FTWVRQAP GQ GL EWMG RVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR
VK1-O2	66	DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCWYQQKPGKAPKLLIYGVPSRF SGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC
VK3-L6	67	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCWYQQKPGQAPRLLIYGIPARF SGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC

Таблица 13. Иллюстративные последовательности анти-PD-1 антитела

Описание антитела	Аминокислотная последовательность	SEQ ID NO.
Пембролизумаб, легкая цепь
CDR1	RASKGVSTSGYSYLH	75
CDR2	LASYLES	76
CDR3	QHSRDLPLT	77
Вариабельн ая область	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYL ASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKV EIK	78
Легкая цепь	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYL ASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKV EIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGN	48

- 87 043052

	SQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRG ЕС
Пембролизумаб, тяжелая цепь
CDR1	NYYMY	49
CDR2	GINPSNGGTNFNEKFKN	50
CDR3	RDYRFDMGFDY	51
Вариабельн ая область	QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPS NGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFD YWGQGTTVTVSS	52
Тяжелая цепь	QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPS NGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFD YWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWN SGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDK RVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQED PEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS NKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEAL HNHYTQKSLSLSLGK	53
Ниволумаб, легкая цепь
CDR1	RASQSVSSYLA	54
CDR2	DASNRAT	55
CDR3	QQSSNWPRT	56
Вариабельн ая область	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNR ATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIK	57
Легкая цепь	EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNR ATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKR TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQES VTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC	58
Ниволумаб, тяжелая цепь
CDR1	NSGMH	59
CDR2	VIWYDGSKRYYADSVKG	60
CDR3	NDDY	61
Вариабельн ая область	QVQLVESGGGWQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYD GSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTL VTVSS	62
Тяжелая цепь	QVQLVESGGGWQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYD GSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTL VTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYG PPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSQEDPEVQFNW	63
	YVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSS IEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQK SLSLSLGK

-88043052

Таблица 14. Структурные координаты на основании кристаллической структуры комплекса 131AVH6VL6Fab и CD27 (в таблице приведены SEQ ID NO: 70-74, соответственно, в порядке появления)

АТОМ 1 О SER А 6 -8,803 -39,519 13,045 1,00 82,60 О

АТОМ 2 N SER А 6 -5,820 -40,853 12,360 1,00 85,52 N

АТОМ 3 CA SER А 6 -7,246 -41,157 12,225 1,00 83,74 С

АТОМ 4 С SER А 6 -8,079 -40,476 13,335 1,00 80,98 С

АТОМ 5 СВ SER А 6 -7,470 -42,668 12,227 1,00 86,62 С

АТОМ 6 OG SER А 6 -7,019 -43,264 13,431 1,00 95,24 О

АТОМ 7 N CYS А 7 -7,966 -40,963 14,593 1,00 69,90 N

АТОМ 8 CA CYS А 7 -8,687 -40,428 15,760 1,00 65,48 С

АТОМ 9 С CYS А 7 -7,716 -39,655 16,652 1,00 67,51 С

АТОМ 10 О CYS А 7 -6,507 -39,865 16,540 1,00 67,71 О

АТОМ 11 СВ CYS А 7 -9,350 -41,557 16,550 1,00 61,81 С

АТОМ 12 SG CYS А 7 -10,673 -42,420 15,667 1,00 65,96 S

АТОМ 13 N PRO А 8 -8,230 -38,834 17,599 1,00 62,53 N

АТОМ 14 CA PRO А 8 -7,327 -38,139 18,528 1,00 62,23 С

АТОМ 15 С PRO А 8 -6,703 -39,122 19,538 1,00 62,80 С

АТОМ 16 О PRO А 8 -6,993 -40,316 19,500 1,00 59,20 О

АТОМ 17 СВ PRO А 8 -8,219 -37,078 19,197 1,00 63,97С

АТОМ 18 CG PRO А 8 -9,601 -37,363 18,767 1,00 67,86С

АТОМ 19 CD PRO А 8 -9,537 -38,155 17,515 1,00 64,20С

АТОМ 20 N GLU А 9 -5,835 -38,624 20,428 1,00 60,43 N

АТОМ 21 CA GLU А 9 -5,171 -39,468 21,426 1,00 58,00 С

АТОМ 22 С GLU А 9 -6,208 -40,046 22,396 1,00 56,70 С

АТОМ 23 О GLU А 9 -7,195 -39,377 22,702 1,00 55,78 О

АТОМ 24 СВ GLU А 9 -4,087 -38,688 22,193 1,00 60,92С

АТОМ 25 CG GLU А 9 -2,938 -39,562 22,668 1,00 75,31С

АТОМ 26 CD GLU А 9 -1,948 -39,953 21,584 1,00104,77С

- 89 043052

ATOM 27 OE1 GLU A 9 -1,472 -39,051 20,857 1,00103,10 О

ATOM 28 OE2 GLU A 9 -1,631 -41,160 21,478 1,00 98,24 О

ATOM 29 N ARG A 10 -6,008 -41,310 22,814 1,00 50,38 N

ATOM 30 GA ARG A 10 -6,901 -42,064 23,701 1,00 47,14 C

ATOM 31 C ARG A 10 -8,282 -42,335 23,064 1,00 47,30 C

ATOM 32 О ARG A 10 -9,236 -42,621 23,782 1,00 44,44 О

ATOM 33 GB ARG A 10 -7,017 -41,411 25,101 1,00 48,88C

ATOM 34 CG ARG A 10 -5,713 -41,472 25,872 1,00 61,89C

ATOM 35 CD ARG A 10 -5,748 -40,691 27,166 1,00 73,75C

ATOM 36 NE ARG A 10 -4,476 -40,821 27,885 1,00 85,72N

ATOM 37 CZ ARG A 10 -4,204 -40,268 29,064 1,00 98,18C

ATOM 38 NH1 ARG A 10 -5,119 -39,529 29,691 1,00 79,44 N

ATOM 39 NH2 ARG A 10 -3,018 -40,453 29,633 1,00 85,59 N

ATOM 40 N HIS A 11 -8,373 -42,304 21,715 1,00 45,23 N

ATOM 41 CA HIS A 11 -9,597 -42,625 20,976 1,00 44,43 C

ATOM 42 C HIS A 11 -9,295 -43,733 19,975 1,00 48,94 C

ATOM 43 О HIS A 11 -8,140 -43,927 19,608 1,00 50,15 О

ATOM 44 GB HIS A 11 -10,152 -41,421 20,206 1,00 46,11 C

ATOM 45 CG HIS A 11 -10,785 -40,363 21,043 1,00 49,09 C

ATOM 46 ND1 HIS A 11 -10,052 -39,624 21,948 1,00 50,70N

ATOM 47 CD2 HIS A 11 -12,040 -39,866 20,990 1,00 51,51C

ATOM 48 CE1 HIS A 11 -10,893 -38,754 22,472 1,00 51,05C

ATOM 49 NE2 HIS A 11 -12,102 -38,849 21,907 1,00 51,94N

ATOM 50 N TYR A 12 -10,336 -44,426 19,504 1,00 44,82 N

ATOM 51 CA TYR A 12 -10,199 -45,497 18,520 1,00 45,01 C

ATOM 52 C TYR A 12 -11,328 -45,442 17,496 1,00 52,06 C

ATOM 53 О TYR A 12 -12,419 -44,954 17,799 1,00 50,50 О

ATOM 54 CB TYR A 12 -10,161 -46,868 19,208 1,00 42,79C

ATOM 55 CG TYR A 12 -11,478 -47,277 19,826 1,00 41,00C

ATOM 56 GDI TYR A 12 -11,886 -46,756 21,048 1,00 40,15C

ATOM 57 CD2 TYR A 12 -12,293 -48,223 19,217 1,00 42,89C

ATOM 58 CE1 TYR A 12 -13,087 -47,144 21,633 1,00 38,61C

ATOM 59 CE2 TYR A 12 -13,516 -48,589 19,772 1,00 42,98C

ATOM 60 CZ TYR A 12 -13,906 -48,054 20,989 1,00 45,55C

ATOM 61 OH TYR A 12 -15,099 -48,416 21,564 1,00 42,17О

ATOM 62 N TRP A 13 -11,058 -45,961 16,291 1,00 51,96 N

- 90 043052

ATOM 63 CA TRP A 13 -12,029 -46,011 15,206 1,00 55,00 C

ATOM 64 C TRP A 13 -12,959 -47,196 15,465 1,00 59,39 C

ATOM 65 О TRP A 13 -12,486 -48,326 15,551 1,00 59,17 О

ATOM 66 CB TRP A 13 -11,296 -46,159 13,868 1,00 57,28 C

ATOM 67 CG TRP A 13 -12,151 -46,037 12,647 1,00 61,73 C

ATOM 68 GDI TRP A 13 -12,304 -46,971 11,665 1,00 67,19C

ATOM 69 CD2 TRP A 13 -12,844 -44,867 12,200 1,00 63,42C

ATOM 70 NE1 TRP A 13 -13,063 -46,459 10,641 1,00 69,98N

ATOM 71 CE2 TRP A 13 -13,420 -45,173 10,948 1,00 70,88C

ATOM 72 CE3 TRP A 13 -13,052 -43,594 12,744 1,00 64,03C

ATOM 73 CZ2 TRP A 13 -14,203 -44,257 10,240 1,00 72,61C

ATOM 74 CZ3 TRP A 13 -13,830 -42,685 12,046 1,00 68,06C

ATOM 75 CH2 TRP A 13 -14,389 -43,015 10,804 1,00 71,93C

ATOM 76 N ALA A 14 -14,270 -46,935 15,619 1,00 56,55 N

ATOM 77 CA ALA A 14 -15,274 -47,957 15,920 1,00 56,51 C

ATOM 78 C ALA A 14 -16,317 -48,081 14,818 1,00 64,02 C

ATOM 79 О ALA A 14 -16,631 -47,090 14,156 1,00 65,10 О

ATOM 80 CB ALA A 14 -15,981 -47,596 17,216 1,00 55,00 C

ATOM 81 N GLN A 15 -16,865 -49,305 14,630 1,00 62,17 N

ATOM 82 CA GLN A 15 -17,957 -49,591 13,685 1,00 65,61 C

ATOM 83 C GLN A 15 -17,720 -49,083 12,241 1,00 73,48 C

ATOM 84 О GLN A 15 -18,682 -49,002 11,474 1,00 76,16 О

ATOM 85 CB GLN A 15 -19,279 -48,979 14,223 1,00 66,71C

ATOM 86 CG GLN A 15 -19,626 -49,315 15,687 1,00 78,93C

ATOM 87 CD GLN A 15 -20,419 -50,593 15,843 1,00100,32C

ATOM 88 OE1 GLN A 15 -21,419 -50,817 15,153 1,00 97,14 О

ATOM 89 NE2 GLN A 15 -20,050 -51,429 16,809 1,00 93,09 N

ATOM 90 N GLY A 16 -16,462 -48,773 11,855 1,00 70,23 N

ATOM 91 CA GLY A 16 -16,157 -48,222 10,534 1,00 73,11 C

ATOM 92 C GLY A 16 -16,801 -46,837 10,313 1,00 77,68C

ATOM 93 О GLY A 16 -17,189 -46,543 9,185 1,00 80,88 О

ATOM 94 N LYS A 17 -16,930 -45,997 11,376 1,00 71,01N

ATOM 95 CA LYS A 17 -17,599 -44,684 11,248 1,00 71,20 C

ATOM 96 C LYS A 17 -17,369 -43,660 12,400 1,00 70,85C

ATOM 97 О LYS A 17 -17,370 -42,463 12,109 1,00 71,77О

ATOM 98 CB LYS A 17 -19,126 -44,858 11,030 1,00 74,62 C

- 91 043052

ATOM 99 CG LYS A 17 -19,751 -46,059 11,754 1,00 83,72 C

ATOM 100 CD LYS A 17 -21,061 -45,782 12,501 1,00 89,88C

ATOM 101 GE LYS A 17 -22,179 -46,715 12,096 1,00 99,90C

ATOM 102 NZ LYS A 17 -23,332 -46,635 13,031 1,00105,06N

ATOM 103 N LEU A 18 -17,239 -44,092 13,673 1,00 63,17 N

ATOM 104 CA LEU A 18 -17,067 -43,180 14,817 1,00 60,28 C

ATOM 105 C LEU A 18 -15,676 -43,242 15,444 1,00 61,62 C

ATOM 106 О LEU A 18 -15,061 -44,302 15,437 1,00 60,54 О

ATOM 107 CB LEU A 18 -18,060 -43,566 15,930 1,00 58,45 C

ATOM 108 CG LEU A 18 -19,518 -43,752 15,549 1,00 64,20 C

ATOM 109 GDI LEU A 18 -20,310 -44,282 16,718 1,00 62,59 C

ATOM 110 CD2 LEU A 18 -20,120 -42,474 15,073 1,00 67,55 C

ATOM 111 N CYS A 19 -15,231 -42,134 16,073 1,00 57,40 N

ATOM 112 CA CYS A 19 -14,017 -42,113 16,893 1,00 56,18 C

ATOM ИЗ C CYS A 19 -14,558 -42,153 18,324 1,00 54,32 C

ATOM 114 О CYS A 19 -15,261 -41,229 18,706 1,00 53,32 О

ATOM 115 CB CYS A 19 -13,153 -40,875 16,660 1,00 59,52 C

ATOM 116 SG CYS A 19 -12,060 -40,981 15,212 1,00 67,70 S

ATOM 117 N CYS A 20 -14,304 -43,237 19,079 1,00 47,18 N

ATOM 118 CA CYS A 20 -14,785 -43,396 20,461 1,00 43,78 C

ATOM 119 C CYS A 20 -13,637 -43,186 21,402 1,00 43,86 C

ATOM 120 О CYS A 20 -12,522 -43,552 21,050 1,00 41,32 О

ATOM 121 CB CYS A 20 -15,364 -44,794 20,661 1,00 43,12 C

ATOM 122 SG CYS A 20 -16,797 -45,180 19,633 1,00 48,76 S

ATOM 123 N GLN A 21 -13,903 -42,707 22,636 1,00 40,51 N

ATOM 124 CA GLN A 21 -12,846 -42,621 23,647 1,00 39,59 C

ATOM 125 C GLN A 21 -12,604 -44,033 24,119 1,00 40,37 C

ATOM 126 О GLN A 21 -13,565 -44,777 24,325 1,00 39,21 О

ATOM 127 CB GLN A 21 -13,240 -41,788 24,880 1,00 41,38C

ATOM 128 CG GLN A 21 -12,957 -40,314 24,748 1,00 64,78C

ATOM 129 CD GLN A 21 -14,126 -39,437 25,123 1,00 83,23C

ATOM 130 OE1 GLN A 21 -14,726 -39,596 26,194 1,00 80,48 О

ATOM 131 NE2 GLN A 21 -14,459 -38,470 24,265 1,00 73,73 N

ATOM 132 N MET A 22 -11,338 -44,391 24,336 1,00 36,78 N

ATOM 133 CA MET A 22 -10,980 -45,711 24,845 1,00 36,42 C

ATOM 134 C MET A 22 -11,432 -45,844 26,301 1,00 39,59 C

- 92 043052

ATOM 135 О MET A 22 -11,712 -44,845 26,972 1,00 38,93 О

ATOM 136 CB MET A 22 -9,454 -45,921 24,795 1,00 38,78C

ATOM 137 CG MET A 22 -8,878 -45,994 23,402 1,00 44,78C

ATOM 138 SD MET A 22 -7,091 -46,261 23,563 1,00 50,58S

ATOM 139 CE MET A 22 -6,482 -45,469 22,164 1,00 49,85C

ATOM 140 N CYS A 23 -11,460 -47,073 26,792 1,00 36,74 N

ATOM 141 CA CYS A 23 -11,785 -47,338 28,191 1,00 35,73 C

ATOM 142 C CYS A 23 -10,649 -46,865 29,056 1,00 36,92 C

ATOM 143 О CYS A 23 -9,498 -47,012 28,673 1,00 35,59 О

ATOM 144 CB CYS A 23 -12,044 -48,822 28,415 1,00 36,05 C

ATOM 145 SG CYS A 23 -13,586 -49,417 27,700 1,00 41,15 S

ATOM 146 N GLU A 24 -10,964 -46,331 30,229 1,00 34,16 N

ATOM 147 CA GLU A 24 -9,950 -45,886 31,179 1,00 34,33 C

ATOM 148 C GLU A 24 -9,256 -47,092 31,827 1,00 35,25 C

ATOM 149 О GLU A 24 -9,836 -48,180 31,837 1,00 32,32 О

ATOM 150 CB GLU A 24 -10,605 -45,049 32,295 1,00 36,84C

ATOM 151 CG GLU A 24 -11,093 -43,686 31,819 1,00 52,17C

ATOM 152 CD GLU A 24 -10,002 -42,654 31,608 1,00 82,21C

ATOM 153 OE1 GLU A 24 -9,189 -42,452 32,539 1,00 87,94О

ATOM 154 OE2 GLU A 24 -9,970 -42,030 30,521 1,00 83,01О

ATOM 155 N PRO A 25 -8,053 -46,898 32,420 1,00 33,02 N

ATOM 156 CA PRO A 25 -7,392 -47,965 33,173 1,00 32,41 C

ATOM 157 C PRO A 25 -8,331 -48,393 34,301 1,00 34,90 C

ATOM 158 О PRO A 25 -9,005 -47,546 34,873 1,00 33,20 О

ATOM 159 CB PRO A 25 -6,141 -47,284 33,739 1,00 34,85C

ATOM 160 CG PRO A 25 -5,887 -46,136 32,862 1,00 38,86C

ATOM 161 CD PRO A 25 -7,170 -45,723 32,250 1,00 35,27C

ATOM 162 N GLY A 26 -8,426 -49,690 34,577 1,00 32,28 N

ATOM 163 CA GLY A 26 -9,314 -50,180 35,629 1,00 32,48 C

ATOM 164 C GLY A 26 -10,737 -50,440 35,161 1,00 34,53C

ATOM 165 О GLY A 26 -11,589 -50,726 35,992 1,00 34,04О

ATOM 166 N THR A 27 -10,993 -50,381 33,846 1,00 30,91N

ATOM 167 CA THR A 27 -12,302 -50,696 33,268 1,00 31,44 C

ATOM 168 C THR A 27 -12,086 -51,594 32,038 1,00 35,38C

ATOM 169 О THR A 27 -10,942 -51,852 31,650 1,00 35,01О

ATOM 170 CB THR A 27 -13,102 -49,401 32,910 1,00 33,54 C

- 93 043052

ATOM 171 OGI THR A 27 -12,552 -48,797 31,743 1,00 33,25 О

ATOM 172 CG2 THR A 27 -13,142 -48,377 34,046 1,00 26,78 C

ATOM 173 N PHE A 28 -13,178 -52,084 31,443 1,00 31,97 N

ATOM 174 GA PHE A 28 -13,122 -52,897 30,227 1,00 31,35 C

ATOM 175 C PHE A 28 -14,306 -52,547 29,352 1,00 36,32 C

ATOM 176 О PHE A 28 -15,330 -52,105 29,859 1,00 36,35 О

ATOM 177 GB PHE A 28 -13,080 -54,403 30,520 1,00 32,57 C

ATOM 178 CG PHE A 28 -14,347 -54,983 31,102 1,00 34,95 C

ATOM 179 GDI PHE A 28 -14,618 -54,885 32,464 1,00 37,23C

ATOM 180 CD2 PHE A 28 -15,246 -55,675 30,301 1,00 37,68C

ATOM 181 CE1 PHE A 28 -15,787 -55,432 33,002 1,00 38,93C

ATOM 182 CE2 PHE A 28 -16,416 -56,219 30,841 1,00 41,16C

ATOM 183 CZ PHE A 28 -16,673 -56,101 32,188 1,00 38,96 C

ATOM 184 N LEU A 29 -14,177 -52,792 28,056 1,00 35,00 N

ATOM 185 GA LEU A 29 -15,199 -52,441 27,074 1,00 36,44 C

ATOM 186 C LEU A 29 -16,403 -53,371 27,033 1,00 42,33 C

ATOM 187 О LEU A 29 -16,258 -54,578 26,833 1,00 43,83 О

ATOM 188 GB LEU A 29 -14,563 -52,362 25,676 1,00 37,20 C

ATOM 189 CG LEU A 29 -15,406 -51,618 24,627 1,00 42,73 C

ATOM 190 GDI LEU A 29 -14,775 -50,323 24,246 1,00 42,68 C

ATOM 191 CD2 LEU A 29 -15,627 -52,456 23,414 1,00 44,91 C

ATOM 192 N VAL A 30 -17,604 -52,793 27,202 1,00 39,41 N

ATOM 193 GA VAL A 30 -18,871 -53,513 27,085 1,00 41,21 C

ATOM 194 C VAL A 30 -19,482 -53,213 25,707 1,00 46,02 C

ATOM 195 О VAL A 30 -19,950 -54,128 25,034 1,00 47,76 О

ATOM 196 GB VAL A 30 -19,837 -53,135 28,228 1,00 45,82 C

ATOM 197 CGI VAL A 30 -21,221 -53,759 28,016 1,00 47,98 C

ATOM 198 CG2 VAL A 30 -19,263 -53,567 29,566 1,00 45,02 C

ATOM 199 N LYS A 31 -19,509 -51,938 25,316 1,00 41,83 N

ATOM 200 CA LYS A 31 -20,091 -51,500 24,052 1,00 43,31 C

ATOM 201 C LYS A 31 -19,307 -50,299 23,527 1,00 43,94 C

ATOM 202 О LYS A 31 -18,775 -49,519 24,321 1,00 41,40 О

ATOM 203 CB LYS A 31 -21,564 -51,086 24,305 1,00 48,54C

ATOM 204 CG LYS A 31 -22,522 -51,318 23,139 1,00 71,10C

ATOM 205 CD LYS A 31 -23,697 -52,236 23,506 1,00 87,51C

ATOM 206 CE LYS A 31 -23,296 -53,686 23,667 1,00 96,81C

- 94 043052

ATOM 207 NZ LYS A 31 -24,467 -54,549 23,980 1,00106,62 N

ATOM 208 N ASP A 32 -19,256 -50,127 22,202 1,00 40,83 N

ATOM 209 CA ASP A 32 -18,613 -48,948 21,603 1,00 40,22 C

ATOM 210 C ASP A 32 -19,469 -47,713 21,890 1,00 45,15 C

ATOM 211 О ASP A 32 -20,641 -47,833 22,274 1,00 44,59 О

ATOM 212 CB ASP A 32 -18,503 -49,092 20,069 1,00 43,48 C

ATOM 213 CG ASP A 32 -17,539 -50,151 19,586 1,00 50,06 C

ATOM 214 OD1 ASP A 32 -16,467 -50,308 20,212 1,00 48,33 О

ATOM 215 OD2 ASP A 32 -17,808 -50,757 18,531 1,00 54,24 О

ATOM 216 N CYS A 33 -18,911 -46,523 21,639 1,00 43,00 N

ATOM 217 CA CYS A 33 -19,680 -45,287 21,764 1,00 43,55 C

ATOM 218 C CYS A 33 -20,714 -45,314 20,622 1,00 47,10 C

ATOM 219 О CYS A 33 -20,476 -45,974 19,607 1,00 47,00 О

ATOM 220 CB CYS A 33 -18,770 -44,056 21,690 1,00 43,96 C

ATOM 221 SG CYS A 33 -18,121 -43,687 20,036 1,00 49,80 S

ATOM 222 N ASP A 34 -21,875 -44,677 20,824 1,00 43,01 N

ATOM 223 CA ASP A 34 -22,940 -44,589 19,811 1,00 44,20 C

ATOM 224 C ASP A 34 -22,996 -43,161 19,209 1,00 48,29 C

ATOM 225 О ASP A 34 -23,871 -42,862 18,387 1,00 48,66 О

ATOM 226 CB ASP A 34 -24,308 -45,011 20,406 1,00 46,75 C

ATOM 227 CG ASP A 34 -24,754 -44,274 21,661 1,00 57,67 C

ATOM 228 OD1 ASP A 34 -24,019 -43,373 22,118 1,00 58,91 О

ATOM 229 OD2 ASP A 34 -25,801 -44,641 22,221 1,00 60,93 О

ATOM 230 N GLN A 35 -22,065 -42,278 19,638 1,00 42,81 N

ATOM 231 CA GLN A 35 -21,969 -40,893 19,188 1,00 43,04 C

ATOM 232 C GLN A 35 -20,485 -40,598 18,935 1,00 45,91 C

ATOM 233 О GLN A 35 -19,647 -40,986 19,741 1,00 43,23 О

ATOM 234 CB GLN A 35 -22,510 -39,951 20,277 1,00 43,90C

ATOM 235 CG GLN A 35 -23,986 -40,127 20,619 1,00 41,63C

ATOM 236 CD GLN A 35 -24,919 -39,587 19,576 1,00 51,47C

ATOM 237 OE1 GLN A 35 -25,450 -38,489 19,713 1,00 49,14 О

ATOM 238 NE2 GLN A 35 -25,221 -40,364 18,548 1,00 46,18 N

ATOM 239 N HIS A 36 -20,166 -39,904 17,842 1,00 45,31 N

ATOM 240 CA HIS A 36 -18,788 -39,563 17,482 1,00 44,53 C

ATOM 241 C HIS A 36 -18,101 -38,713 18,574 1,00 47,23 C

ATOM 242 О HIS A 36 -18,690 -37,769 19,090 1,00 45,88 О

- 95 043052

ATOM 243 CB HIS A 36 -18,790 -38,846 16,126 1,00 47,91 C

ATOM 244 CG HIS A 36 -17,451 -38,404 15,633 1,00 51,77 C

ATOM 245 ND1 HIS A 36 -16,450 -39,309 15,324 1,00 52,55N

ATOM 246 CD2 HIS A 36 -17,005 -37,156 15,386 1,00 54,50C

ATOM 247 CE1 HIS A 36 -15,436 -38,581 14,881 1,00 53,18C

ATOM 248 NE2 HIS A 36 -15,732 -37,276 14,894 1,00 54,90N

ATOM 249 N ARG A 37 -16,864 -39,087 18,935 1,00 44,51 N

ATOM 250 CA ARG A 37 -16,036 -38,444 19,963 1,00 43,70 C

ATOM 251 C ARG A 37 -16,686 -38,429 21,363 1,00 47,06 C

ATOM 252 О ARG A 37 -16,444 -37,518 22,160 1,00 47,70 О

ATOM 253 CB ARG A 37 -15,581 -37,047 19,522 1,00 45,20C

ATOM 254 CG ARG A 37 -14,521 -37,113 18,440 1,00 48,90C

ATOM 255 CD ARG A 37 -13,864 -35,772 18,225 1,00 49,68C

ATOM 256 NE ARG A 37 -12,902 -35,824 17,124 1,00 50,76N

ATOM 257 CZ ARG A 37 -11,978 -34,901 16,869 1,00 65,51C

ATOM 258 NH1 ARG A 37 -11,881 -33,816 17,634 1,00 55,67 N

ATOM 259 NH2 ARG A 37 -11,146 -35,053 15,848 1,00 60,89 N

ATOM 260 N LYS A 38 -17,442 -39,486 21,684 1,00 42,28 N

ATOM 261 CA LYS A 38 -18,019 -39,683 23,013 1,00 41,17 C

ATOM 262 C LYS A 38 -17,441 -40,974 23,596 1,00 43,23 C

ATOM 263 О LYS A 38 -16,715 -41,701 22,911 1,00 42,89 О

ATOM 264 CB LYS A 38 -19,555 -39,684 22,981 1,00 43,69C

ATOM 265 CG LYS A 38 -20,156 -38,361 22,520 1,00 43,89C

ATOM 266 CD LYS A 38 -19,885 -37,206 23,482 1,00 42,15C

ATOM 267 CE LYS A 38 -20,455 -35,924 22,978 1,00 36,14C

ATOM 268 NZ LYS A 38 -19,792 -34,752 23,603 1,00 41,15N

ATOM 269 N ALA A 39 -17,700 -41,223 24,871 1,00 39,17 N

ATOM 270 CA ALA A 39 -17,129 -42,380 25,560 1,00 37,31 C

ATOM 271 C ALA A 39 -17,765 -43,711 25,213 1,00 41,29 C

ATOM 272 О ALA A 39 -18,984 -43,808 25,053 1,00 42,27 О

ATOM 273 CB ALA A 39 -17,192 -42,166 27,067 1,00 37,51 C

ATOM 274 N ALA A 40 -16,926 -44,756 25,145 1,00 37,60 N

ATOM 275 CA ALA A 40 -17,382 -46,141 24,997 1,00 36,76 C

ATOM 276 C ALA A 40 -18,008 -46,529 26,340 1,00 39,81 C

ATOM 277 О ALA A 40 -17,688 -45,906 27,355 1,00 37,62 О

ATOM 278 CB ALA A 40 -16,195 -47,061 24,707 1,00 35,94 C

- 96 043052

ATOM 279 N GLN A 41 -18,897 -47,535 26,359 1,00 37,98 N

ATOM 280 CA GLN A 41 -19,507 -47,988 27,610 1,00 37,92 C

ATOM 281 C GLN A 41 -18,517 -48,991 28,230 1,00 39,59 C

ATOM 282 О GLN A 41 -18,250 -50,031 27,638 1,00 36,25 О

ATOM 283 CB GLN A 41 -20,886 -48,626 27,360 1,00 41,38C

ATOM 284 CG GLN A 41 -21,717 -48,786 28,636 1,00 59,82C

ATOM 285 CD GLN A 41 -22,262 -50,180 28,824 1,00 80,54C

ATOM 286 OE1 GLN A 41 -21,904 -50,886 29,773 1,00 78,64 О

ATOM 287 NE2 GLN A 41 -23,147 -50,605 27,931 1,00 71,47 N

ATOM 288 N CYS A 42 -17,903 -48,622 29,363 1,00 37,80 N

ATOM 289 CA CYS A 42 -16,889 -49,436 30,005 1,00 37,75 C

ATOM 290 C CYS A 42 -17,290 -49,772 31,424 1,00 41,34 C

ATOM 291 О CYS A 42 -17,585 -48,858 32,192 1,00 41,87 О

ATOM 292 CB CYS A 42 -15,541 -48,716 29,983 1,00 37,77 C

ATOM 293 SG CYS A 42 -15,030 -48,137 28,345 1,00 42,12 S

ATOM 294 N ASP A 43 -17,211 -51,059 31,800 1,00 37,48 N

ATOM 295 CA ASP A 43 -17,531 -51,521 33,159 1,00 37,21 C

ATOM 296 C ASP A 43 -16,249 -51,620 33,983 1,00 37,85 C

ATOM 297 О ASP A 43 -15,192 -51,862 33,412 1,00 35,75 О

ATOM 298 CB ASP A 43 -18,213 -52,907 33,130 1,00 40,32 C

ATOM 299 CG ASP A 43 -19,722 -52,906 32,975 1,00 55,05 C

ATOM 300 OD1 ASP A 43 -20,321 -51,809 32,955 1,00 59,52 О

ATOM 301 OD2 ASP A 43 -20,303 -54,002 32,841 1,00 59,29 О

ATOM 302 N PRO A 44 -16,333 -51,504 35,321 1,00 35,04 N

ATOM 303 CA PRO A 44 -15,117 -51,616 36,138 1,00 33,83 C

ATOM 304 C PRO A 44 -14,507 -53,016 36,211 1,00 37,49 C

ATOM 305 О PRO A 44 -15,222 -54,021 36,168 1,00 37,52 О

ATOM 306 CB PRO A 44 -15,595 -51,212 37,536 1,00 36,41C

ATOM 307 CG PRO A 44 -17,038 -51,530 37,556 1,00 41,52C

ATOM 308 CD PRO A 44 -17,529 -51,281 36,164 1,00 36,85C

ATOM 309 N CYS A 45 -13,196 -53,069 36,466 1,00 34,81 N

ATOM 310 CA CYS A 45 -12,497 -54,322 36,755 1,00 35,43 C

ATOM 311 C CYS A 45 -12,849 -54,662 38,213 1,00 37,20 C

ATOM 312 О CYS A 45 -13,441 -53,836 38,916 1,00 36,50 О

ATOM 313 CB CYS A 45 -10,986 -54,181 36,570 1,00 35,93 C

ATOM 314 SG CYS A 45 -10,456 -53,899 34,863 1,00 39,57 S

- 97 043052

ATOM 315 N ILE A 46 -12,483 -55,852 38,673 1,00 33,32 N

ATOM 316 CA ILE A 46 -12,824 -56,299 40,028 1,00 34,48 C

ATOM 317 C ILE A 46 -11,638 -56,144 40,981 1,00 38,11 C

ATOM 318 О ILE A 46 -10,671 -56,889 40,827 1,00 37,43 О

ATOM 319 CB ILE A 46 -13,317 -57,764 39,960 1,00 38,33 C

ATOM 320 CGI ILE A 46 -14,418 -57,947 38,887 1,00 38,73 C

ATOM 321 CG2 ILE A 46 -13,786 -58,241 41,335 1,00 39,59 C

ATOM 322 GDI ILE A 46 -15,654 -57,116 39,054 1,00 47,23 C

ATOM 323 N PRO A 47 -11,712 -55,225 41,992 1,00 36,72 N

ATOM 324 CA PRO A 47 -10,594 -55,057 42,940 1,00 37,81 C

ATOM 325 C PRO A 47 -10,144 -56,388 43,545 1,00 41,77 C

ATOM 326 О PRO A 47 -10,973 -57,120 44,084 1,00 42,22 О

ATOM 327 CB PRO A 47 -11,154 -54,108 44,017 1,00 40,91 C

ATOM 328 CG PRO A 47 -12,248 -53,380 43,361 1,00 44,71 C

ATOM 329 CD PRO A 47 -12,804 -54,272 42,279 1,00 38,78 C

ATOM 330 N GLY A 48 -8,854 -56,735 43,375 1,00 38,47 N

ATOM 331 CA GLY A 48 -8,281 -57,975 43,910 1,00 39,27 C

ATOM 332 C GLY A 48 -8,430 -59,204 42,993 1,00 42,73 C

ATOM 333 О GLY A 48 -7,886 -60,242 43,332 1,00 43,38 О

ATOM 334 N VAL A 49 -9,156 -59,100 41,854 1,00 40,03 N

ATOM 335 CA VAL A 49 -9,382 -60,230 40,925 1,00 40,03 C

ATOM 336 C VAL A 49 -8,969 -59,918 39,489 1,00 40,57 C

ATOM 337 О VAL A 49 -8,412 -60,789 38,830 1,00 39,24 О

ATOM 338 CB VAL A 49 -10,860 -60,693 41,005 1,00 45,05 C

ATOM 339 CGI VAL A 49 -11,158 -61,823 40,016 1,00 45,50 C

ATOM 340 CG2 VAL A 49 -11,206 -61,101 42,427 1,00 46,81 C

ATOM 341 N SER A 50 -9,234 -58,705 38,990 1,00 35,94 N

ATOM 342 CA SER A 50 -8,838 -58,347 37,633 1,00 33,71 C

ATOM 343 C SER A 50 -8,374 -56,902 37,528 1,00 35,99 C

ATOM 344 О SER A 50 -8,600 -56,099 38,434 1,00 36,25 О

ATOM 345 CB SER A 50 -9,968 -58,657 36,655 1,00 36,17 C

ATOM 346 OG SER A 50 -11,095 -57,827 36,872 1,00 38,18 О

ATOM 347 N PHE A 51 -7,659 -56,583 36,445 1,00 32,04 N

ATOM 348 CA PHE A 51 -7,095 -55,250 36,261 1,00 29,14 C

ATOM 349 C PHE A 51 -6,901 -54,890 34,799 1,00 32,56 C

ATOM 350 О PHE A 51 -6,971 -55,746 33,935 1,00 31,66 О

- 98 043052

ATOM 351 СВ РНЕ А 51 -5,739 -55,175 36,993 1,00 29,13 С

АТОМ 352 CG РНЕ А 51 -4,630 -55,964 36,343 1,00 28,17 С

АТОМ 353 CD1 РНЕ А 51 -4,511 -57,333 36,554 1,00 29,81С

АТОМ 354 CD2 РНЕ А 51 -3,696 -55,338 35,529 1,00 27,50С

АТОМ 355 СЕ1 РНЕ А 51 -3,504 -58,066 35,922 1,00 29,84С

АТОМ 356 СЕ2 РНЕ А 51 -2,716 -56,079 34,867 1,00 28,98С

АТОМ 357 CZ РНЕ А 51 -2,619 -57,435 35,078 1,00 27,36 С

АТОМ 358 N SER А 52 -6,631 -53,620 34,533 1,00 29,38 N

АТОМ 359 CA SER А 52 -6,296 -53,147 33,189 1,00 29,06 С

АТОМ 360 С SER А 52 -5,409 -51,902 33,393 1,00 32,84 С

АТОМ 361 О SER А 52 -5,882 -50,907 33,934 1,00 32,41 О

АТОМ 362 СВ SER А 52 -7,539 -52,889 32,342 1,00 30,73 С

АТОМ 363 OG SER А 52 -8,389 -51,920 32,922 1,00 37,68 О

АТОМ 364 N PRO А 53 -4,098 -52,008 33,095 1,00 29,99 N

АТОМ 365 CA PRO А 53 -3,162 -50,916 33,381 1,00 30,41 С

АТОМ 366 С PRO А 53 -3,249 -49,652 32,542 1,00 35,49 С

АТОМ 367 О PRO А 53 -2,704 -48,641 32,978 1,00 35,51 О

АТОМ 368 СВ PRO А 53 -1,783 -51,567 33,197 1,00 32,77С

АТОМ 369 CG PRO А 53 -2,002 -52,773 32,375 1,00 35,90С

АТОМ 370 CD PRO А 53 -3,438 -53,136 32,400 1,00 30,40С

АТОМ 371 N ASP А 54 -3,868 -49,678 31,363 1,00 34,35 N

АТОМ 372 CA ASP А 54 -3,878 -48,483 30,524 1,00 36,60 С

АТОМ 373 С ASP А 54 -5,175 -48,300 29,750 1,00 38,50 С

АТОМ 374 О ASP А 54 -6,066 -49,142 29,842 1,00 38,49 О

АТОМ 375 СВ ASP А 54 -2,668 -48,523 29,570 1,00 41,23 С

АТОМ 376 CG ASP А 54 -1,990 -47,160 29,419 1,00 62,91 С

АТОМ 377 OD1 ASP А 54 -2,649 -46,223 28,921 1,00 63,05 О

АТОМ 378 OD2 ASP А 54 -0,827 -47,016 29,872 1,00 76,03 О

АТОМ 379 N HIS А 55 -5,282 -47,179 29,010 1,00 33,79 N

АТОМ 380 CA HIS А 55 -6,426 -46,889 28,145 1,00 33,82 С

АТОМ 381 С HIS А 55 -6,454 -47,966 27,055 1,00 36,99 С

АТОМ 382 О HIS А 55 -5,406 -48,281 26,495 1,00 37,92 О

АТОМ 383 СВ HIS А 55 -6,320 -45,480 27,517 1,00 35,97 С

АТОМ 384 CG HIS А 55 -6,435 -44,397 28,536 1,00 39,79 С

АТОМ 385 ND1 HIS А 55 -5,336 -43,965 29,260 1,00 42,24 N

АТОМ 386 CD2 HIS А 55 -7,530 -43,735 28,969 1,00 41,07 С

- 99 043052

ATOM

387

CE1 HIS

A 55 -5,795 -43,065 30,110 1,00 42,04 C

ATOM

388

NE2 HIS

A 55 -7,108 -42,880 29,956 1,00 42,15 N

ATOM

389

N HIS A

-7,606 -48,587 26,817 1,00 32,75 N

ATOM

390

CA HIS A 56 -7,665 -49,715 25,896 1,00 33,13 C

ATOM

391

C HIS A 56 -9,080 -49,974 25,395 1,00 37,42 C

ATOM

392

О HIS A 56 -10,019

-49,303

25,805

1, 00

37,11

ATOM

393

CB HIS A 56 -7,122

-50,983

26, 615

1, 00

32,46

ATOM

394

CG HIS A 56 -8,064

-51,522

27,648

1, 00

33, 84

ATOM

395

ND1

HIS

-8,814

-52,647

27,409

1,00

34,70

ATOM

396

CD2

HIS

-8,447

-50,985

28,830

1,00

34,33

ATOM

397

CE1

HIS

-9,559

-52,816

28,487

1,00

33,79

ATOM

398

NE 2

HIS

-9,361

-51,844

29,372

1,00

33,76

ATOM

399

N THR A

-9,211 -50,968 24,520 1,00 35,36 N

ATOM

400

CA THR A 57 -10,474 -51,373 23,912 1,00 36,44

ATOM

401

C THR A 57 -10,748 -52,884 24,091 1,00 40,44 C

ATOM

402

О THR A 57 -11,658 -53,395 23,436 1,00 42,37 О

ATOM

403

CB THR A 57 -10,449 -50,990 22,418 1,00 39,91 C

ATOM

404

OGI THR

A 57 -9,388 -51,692 21,770 1,00 42,78 О

ATOM

405

CG2 THR

A 57 -10,273 -49,506 22,204 1,00 36,11 C

ATOM

406

N ARG A

-10,019 -53,597 24,984 1,00 36,40 N

ATOM

407

CA ARG A 58 -10,256 -55,047 25,161 1,00 36,92 C

ATOM

408

C ARG A 58 -11,596

-55,265

25,871

1, 00

40, 95

ATOM

409

О ARG A 58 -11,891

-54,528

26, 812

1, 00

40,53

ATOM

410

CB

ARG

-9,116

-55,740

25,960

1, 00

34,53

ATOM

411

CG

ARG

-7,699

-55,544

25,419

1, 00

35, 34

ATOM

412

CD

ARG

-7,592

-55,879

23,949

1, 00

43, 83

ATOM

413

NE

ARG

-7,909

-57,298

23,720

1, 00

49, 81

ATOM

414

CZ

ARG

-8,709

-57,793

22,775

1, 00

59, 77

ATOM

415

NH1 ARG

A 58 -9,312 -56,980 21,905 1,00 47,98 N

ATOM

416

NH2 ARG

A 58 -8,909 -59,102 22,686 1,00 50,31 N

ATOM

417

N PRO A

-12,387 -56,280 25,471 1,00 38,74 N

ATOM

418

CA PRO A 59 -13,675 -56,527 26,131 1,00 38,89 C

ATOM

419

C PRO A 59 -13,581 -57,357 27,434 1,00 41,04 C

ATOM 420 О PRO A 59 -14,534 -58,047 27,805 1,00 41,72 О

ATOM 421 CB PRO A 59 -14,495 -57,223 25,036 1,00 42,78 C

ATOM 422 CG PRO A 59 -13,492 -57,974 24,269 1,00 48,48 C

- 100 043052

ATOM 423 CD PRO A 59 -12,275 -57,075 24,230 1,00 42,93 C

ATOM 424 N HIS A 60 -12,463 -57,243 28,155 1,00 35,45 N

ATOM 425 CA HIS A 60 -12,248 -57,925 29,423 1,00 34,60 C

ATOM 426 C HIS A 60 -11,118 -57,219 30,162 1,00 38,20 C

ATOM 427 О HIS A 60 -10,394 -56,403 29,580 1,00 36,57 О

ATOM 428 CB HIS A 60 -11,878 -59,419 29,190 1,00 36,05 C

ATOM 429 CG HIS A 60 -10,628 -59,598 28,379 1,00 38,86 C

ATOM 430 ND1 HIS A 60 -10,683 -59,824 27,021 1,00 41,96 N

ATOM 431 CD2 HIS A 60 -9,330 -59,468 28,741 1,00 38,40C

ATOM 432 CE1 HIS A 60 -9,427 -59,872 26,608 1,00 40,51C

ATOM 433 NE2 HIS A 60 -8,578 -59,662 27,614 1,00 38,97N

ATOM 434 N CYS A 61 -10,957 -57,573 31,432 1,00 37,29 N

ATOM 435 CA CYS A 61 -9,859 -57,125 32,279 1,00 36,48 C

ATOM 436 C CYS A 61 -8,856 -58,274 32,319 1,00 37,87 C

ATOM 437 О CYS A 61 -9,229 -59,415 32,092 1,00 37,13 О

ATOM 438 CB CYS A 61 -10,354 -56,790 33,684 1,00 37,27 C

ATOM 439 SG CYS A 61 -11,404 -55,331 33,760 1,00 41,49 S

ATOM 440 N GLU A 62 -7,606 -57,977 32,650 1,00 34,49 N

ATOM 441 CA GLU A 62 -6,542 -58,977 32,805 1,00 33,63 C

ATOM 442 C GLU A 62 -6,763 -59,657 34,142 1,00 36,33 C

ATOM 443 О GLU A 62 -7,114 -58,982 35,102 1,00 34,77 О

ATOM 444 CB GLU A 62 -5,164 -58,291 32,836 1,00 33,97C

ATOM 445 CG GLU A 62 -4,864 -57,415 31,631 1,00 36,09C

ATOM 446 CD GLU A 62 -4,928 -58,187 30,334 1,00 43,71C

ATOM 447 OE1 GLU A 62 -6,009 -58,203 29,706 1,00 37,36 О

ATOM 448 OE2 GLU A 62 -3,937 -58,878 30,015 1,00 34,40 О

ATOM 449 N SER A 63 -6,557 -60,975 34,227 1,00 33,89 N

ATOM 450 CA SER A 63 -6,722 -61,674 35,493 1,00 33,61 C

ATOM 451 C SER A 63 -5,503 -61,426 36,363 1,00 37,78 C

ATOM 452 О SER A 63 -4,378 -61,525 35,871 1,00 37,22 О

ATOM 453 CB SER A 63 -6,867 -63,178 35,265 1,00 37,53 C

ATOM 454 OG SER A 63 -8,072 -63,491 34,590 1,00 44,08 О

ATOM 455 N CYS A 64 -5,715 -61,139 37,654 1,00 35,84 N

ATOM 456 CA CYS A 64 -4,615 -61,014 38,609 1,00 38,42 C

ATOM 457 C CYS A 64 -3,997 -62,394 38,798 1,00 43,03 C

ATOM 458 О CYS A 64 -4,741 -63,369 38,902 1,00 43,07 О

- 101 043052

ATOM 459 CB CYS A 64 -5,112 -60,488 39,953 1,00 41,22 C ATOM 460 SG CYS A 64 -5,968 -58,900 39,863 1,00 45,41 S

ATOM 461 N ARG A 65 -2,659 -62,474 38,917 1,00 40,94 N

ATOM 462 CA ARG A 65 -1,981 -63,739 39,226 1,00 42,73 C

ATOM 463 C ARG A 65 -2,246 -64,060 40,699 1,00 50,59 C

ATOM 464 О ARG A 65 -2,498 -63,143 41,488 1,00 47,96 О

ATOM 465 CB ARG A 65 -0,462 -63,660 38,966 1,00 42,53 C

ATOM 466 CG ARG A 65 0,328 -62,666 39,849 1,00 44,59C

ATOM 467 CD ARG A 65 1,821 -62,847 39,684 1,00 47,03C

ATOM 468 NE ARG A 65 2,234 -62,737 38,282 1,00 41,68N

ATOM 469 CZ ARG A 65 2,512 -61,615 37,620 1,00 45,98C

ATOM 470 NH1 ARG A 65 2,432 -60,431 38,231 1,00 35,56 N

ATOM 471 NH2 ARG A 65 2,872 -61,664 36,345 1,00 34,94 N

ATOM 472 N HIS A 66 -2,181 -65,350 41,064 1,00 53,75 N

ATOM 473 CA HIS A 66 -2,415 -65,809 42,436 1,00 57,95 C

ATOM 474 C HIS A 66 -1,089 -66,172 43,088 1,00 60,73 C

ATOM 475 О HIS A 66 -0,259 -66,829 42,457 1,00 60,16 О

ATOM 476 CB HIS A 66 -3,344 -67,033 42,446 1,00 62,92 C

ATOM 477 CG HIS A 66 -4,512 -66,902 41,518 1,00 67,42 C

ATOM 478 ND1 HIS A 66 -4,607 -67,669 40,365 1,00 70,55N

ATOM 479 CD2 HIS A 66 -5,569 -66,057 41,571 1,00 69,55C

ATOM 480 CE1 HIS A 66 -5,726 -67,288 39,768 1,00 69,97C

ATOM 481 NE2 HIS A 66 -6,340 -66,318 40,459 1,00 69,56N

ATOM 482 N CYS A 67 -0,895 -65,750 44,350 1,00 57,25N

ATOM 483 CA CYS A 67 0,307 -66,047 45,120 1,00 58,83C

ATOM 484 C CYS A 67 -0,065 -67,179 46,096 1,00 71,24C

ATOM 485 О CYS A 67 -0,155 -66,958 47,301 1,00 72,76О

ATOM 486 CB CYS A 67 0,800 -64,797 45,851 1,00 57,41C

ATOM 487 SG CYS A 67 1,035 -63,346 44,781 1,00 57,53S

ATOM 488 N ASN A 68 -0,340 -68,383 45,546 1,00 72,87N

ATOM 489 CA ASN A 68 -0,744 -69,550 46,358 1,00 78,32 C

ATOM 490 C ASN A 68 0,421 -70,074 47,203 1,00 87,39 C

ATOM 491 О ASN A 68 1,429 -70,522 46,652 1,00 87,06 О

ATOM 492 CB ASN A 68 -1,361 -70,678 45,504 1,00 83,46 C ATOM 493 CG ASN A 68 -0,515 -71,155 44,343 1,00111,51 C

ATOM 494 OD1 ASN A 68 -0,601 -70,625 43,227 1,00104,57 О

- 102 043052

ATOM 495 ND2 ASN A 68 0,353 -72,132 44,589 1,00105,22 N

ATOM 496 О SER A 69 2,613 -68,877 50,926 1,00 97,30 О

ATOM 497 N SER A 69 0,300 -69,956 48,545 1,00 88,43 N

ATOM 498 CA SER A 69 1,305 -70,337 49,557 1,00 92,23 C

ATOM 499 C SER A 69 2,319 -69,208 49,775 1,00 94,76 C

ATOM 500 CB SER A 69 1,998 -71,668 49,246 1,00 99,50 C

ATOM 501 OG SER A 69 3,179 -71,523 48,471 1,00108,86 О

ATOM 502 N GLY A 70 2,846 -68,613 48,684 1,00 86,65 N

ATOM 503 CA GLY A 70 3,782 -67,497 48,762 1,00 84,70 C

ATOM 504 C GLY A 70 3,085 -66,235 49,284 1,00 85,99C

ATOM 505 О GLY A 70 1,851 -66,166 49,320 1,00 85,72О

ATOM 506 N LEU A 71 3,885 -65,232 49,669 1,00 79,59N

ATOM 507 CA LEU A 71 3,368 -63,971 50,216 1,00 77,19 C

ATOM 508 C LEU A 71 3,142 -62,997 49,049 1,00 72,56 C

ATOM 509 О LEU A 71 3,509 -63,311 47,915 1,00 69,12 О

ATOM 510 CB LEU A 71 4,316 -63,344 51,275 1,00 79,65 C

ATOM 511 CG LEU A 71 5,393 -64,243 51,941 1,00 87,68 C

ATOM 512 GDI LEU A 71 6,771 -63,964 51,355 1,00 87,45 C

ATOM 513 CD2 LEU A 71 5,451 -64,021 53,438 1,00 93,95 C

ATOM 514 N LEU A 72 2,537 -61,832 49,333 1,00 65,30 N

ATOM 515 CA LEU A 72 2,279 -60,794 48,341 1,00 61,42 C

ATOM 516 C LEU A 72 3,191 -59,606 48,602 1,00 63,54 C

ATOM 517 О LEU A 72 3,126 -59,005 49,673 1,00 64,71 О

ATOM 518 CB LEU A 72 0,814 -60,330 48,397 1,00 60,90 C

ATOM 519 CG LEU A 72 -0,196 -61,290 47,770 1,00 64,83 C

ATOM 520 GDI LEU A 72 -1,363 -61,547 48,701 1,00 67,47 C

ATOM 521 CD2 LEU A 72 -0,695 -60,772 46,446 1,00 61,31 C

ATOM 522 N VAL A 73 4,035 -59,268 47,626 1,00 57,45 N

ATOM 523 CA VAL A 73 4,911 -58,099 47,696 1,00 57,01 C

ATOM 524 C VAL A 73 4,038 -56,887 47,373 1,00 55,93 C

ATOM 525 О VAL A 73 4,194 -55,834 47,989 1,00 55,91 О

ATOM 526 CB VAL A 73 6,101 -58,213 46,708 1,00 60,68 C

ATOM 527 CGI VAL A 73 6,954 -56,943 46,721 1,00 61,41 C

ATOM 528 CG2 VAL A 73 6,955 -59,435 47,033 1,00 62,36 C

ATOM 529 N ARG A 74 3,143 -57,041 46,376 1,00 48,50 N

ATOM 530 CA ARG A 74 2,212 -56,004 45,944 1,00 45,91 C

- 103 043052

ATOM 531 C ARG A 74 0,851 -56,650 45,712 1,00 49,19 C

ATOM 532 О ARG A 74 0,779 -57,679 45,044 1,00 48,25 О

ATOM 533 CB ARG A 74 2,721 -55,363 44,646 1,00 42,04C

ATOM 534 CG ARG A 74 2,239 -53,942 44,375 1,00 48,38C

ATOM 535 CD ARG A 74 2,887 -53,406 43,099 1,00 51,48C

ATOM 536 NE ARG A 74 2,348 -54,060 41,899 1,00 44,28N

ATOM 537 CZ ARG A 74 3,001 -54,265 40,749 1,00 52,67C

ATOM 538 NH1 ARG A 74 4,269 -53,880 40,610 1,00 38,62 N

ATOM 539 NH2 ARG A 74 2,394 -54,874 39,735 1,00 32,16 N

ATOM 540 N ASN A 75 -0,221 -56,060 46,258 1,00 46,73 N

ATOM 541 CA ASN A 75 -1,582 -56,565 46,042 1,00 46,00 C

ATOM 542 C ASN A 75 -2,053 -56,170 44,652 1,00 46,93 C

ATOM 543 О ASN A 75 -1,578 -55,172 44,105 1,00 44,44 О

ATOM 544 CB ASN A 75 -2,563 -55,972 47,063 1,00 50,08 C

ATOM 545 CG ASN A 75 -2,362 -56,476 48,469 1,00 78,19 C

ATOM 546 OD1 ASN A 75 -2,311 -57,685 48,705 1,00 72,92 О

ATOM 547 ND2 ASN A 75 -2,295 -55,574 49,446 1,00 75,87 N

ATOM 548 N CYS A 76 -3,031 -56,913 44,113 1,00 43,83 N

ATOM 549 CA CYS A 76 -3,631 -56,569 42,837 1,00 42,07 C

ATOM 550 C CYS A 76 -4,596 -55,401 43,046 1,00 44,28 C

ATOM 551 О CYS A 76 -5,402 -55,433 43,972 1,00 45,68 О

ATOM 552 CB CYS A 76 -4,344 -57,754 42,188 1,00 42,61 C

ATOM 553 SG CYS A 76 -4,559 -57,561 40,392 1,00 45,25 S

ATOM 554 N THR A 77 -4,504 -54,385 42,184 1,00 38,93 N

ATOM 555 CA THR A 77 -5,386 -53,218 42,158 1,00 37,81 C

ATOM 556 C THR A 77 -6,042 -53,265 40,782 1,00 37,95 C

ATOM 557 О THR A 77 -5,600 -54,044 39,940 1,00 34,24 О

ATOM 558 CB THR A 77 -4,589 -51,912 42,354 1,00 47,00 C

ATOM 559 OGI THR A 77 -3,827 -51,635 41,183 1,00 52,34 О

ATOM 560 CG2 THR A 77 -3,669 -51,957 43,564 1,00 48,24 C

ATOM 561 N ILE A 78 -7,052 -52,423 40,526 1,00 34,74 N

ATOM 562 CA ILE A 78 -7,727 -52,440 39,221 1,00 32,87 C

ATOM 563 C ILE A 78 -6,832 -51,967 38,054 1,00 34,22 C

ATOM 564 О ILE A 78 -7,246 -52,115 36,919 1,00 31,53 О

ATOM 565 CB ILE A 78 -9,084 -51,696 39,222 1,00 35,74 C

ATOM 566 CGI ILE A 78 -8,952 -50,234 39,719 1,00 35,66 C

- 104 043052

ATOM 567 CG2 TLE A 78 -10,114 -52,489 40,041 1,00 36,24 C

ATOM 568 GDI TLE A 78 -10,064 -49,391 39,304 1,00 39,66 C

ATOM 569 N THR A 79 -5,607 -51,459 38,309 1,00 31,55 N

ATOM 570 CA THR A 79 -4,687 -51,066 37,244 1,00 30,47 C

ATOM 571 C THR A 79 -3,338 -51,805 37,296 1,00 34,54 C

ATOM 572 О THR A 79 -2,495 -51,553 36,439 1,00 35,67 О

ATOM 573 CB THR A 79 -4,466 -49,536 37,282 1,00 35,81 C

ATOM 574 OGI THR A 79 -3,816 -49,184 38,504 1,00 37,07 О

ATOM 575 CG2 THR A 79 -5,763 -48,750 37,150 1,00 32,44 C

ATOM 576 N ALA A 80 -3,107 -52,680 38,277 1,00 30,96 N

ATOM 577 CA ALA A 80 -1,819 -53,347 38,406 1,00 31,21 C

ATOM 578 C ALA A 80 -1,958 -54,767 38,929 1,00 35,69 C

ATOM 579 О ALA A 80 -2,756 -55,035 39,831 1,00 35,56 О

ATOM 580 CB ALA A 80 -0,918 -52,540 39,332 1,00 32,83 C

ATOM 581 N ASN A 81 -1,122 -55,665 38,395 1,00 31,83 N

ATOM 582 CA ASN A 81 -1,123 -57,068 38,775 1,00 31,50 C

ATOM 583 C ASN A 81 -0,544 -57,282 40,171 1,00 34,61 C

ATOM 584 О ASN A 81 0,219 -56,452 40,677 1,00 33,14 О

ATOM 585 CB ASN A 81 -0,322 -57,899 37,756 1,00 31,63 C

ATOM 586 CG ASN A 81 -0,760 -59,340 37,647 1,00 35,72 C

ATOM 587 OD1 ASN A 81 -1,474 -59,868 38,492 1,00 31,77 О

ATOM 588 ND2 ASN A 81 -0,309 -60,026 36,625 1,00 31,52 N

ATOM 589 N ALA A 82 -0,883 -58,425 40,777 1,00 32,98 N

ATOM 590 CA ALA A 82 -0,312 -58,828 42,056 1,00 33,88 C

ATOM 591 C ALA A 82 1,136 -59,211 41,803 1,00 36,40 C

ATOM 592 О ALA A 82 1,468 -59,646 40,701 1,00 34,67 О

ATOM 593 CB ALA A 82 -1,058 -60,032 42,630 1,00 35,42 C

ATOM 594 N GLU A 83 1,997 -59,032 42,804 1,00 34,63 N

ATOM 595 CA GLU A 83 3,398 -59,444 42,733 1,00 35,26 C

ATOM 596 C GLU A 83 3,664 -60,360 43,922 1,00 45,22 C

ATOM 597 О GLU A 83 3,365 -59,978 45,052 1,00 45,33 О

ATOM 598 CB GLU A 83 4,335 -58,241 42,709 1,00 35,74C

ATOM 599 CG GLU A 83 4,312 -57,536 41,361 1,00 38,29C

ATOM 600 CD GLU A 83 4,982 -58,293 40,227 1,00 39,60C

ATOM 601 OE1 GLU A 83 6,020 -58,944 40,471 1,00 37,67 О

ATOM 602 OE2 GLU A 83 4,464 -58,239 39,092 1,00 33,86 О

- 105 043052

ATOM 603 N CYS A 84 4,176 -61,580 43,661 1,00 46,59 N

ATOM 604 CA CYS A 84 4,408 -62,600 44,689 1,00 50,51 C

ATOM 605 C CYS A 84 5,857 -62,692 45,154 1,00 56,34 C

ATOM 606 О CYS A 84 6,767 -62,144 44,535 1,00 54,93 О

ATOM 607 CB CYS A 84 3,930 -63,970 44,209 1,00 52,50 C

ATOM 608 SG CYS A 84 2,338 -63,963 43,346 1,00 55,78 S

ATOM 609 N ALA A 85 6,051 -63,457 46,239 1,00 56,45 N

ATOM 610 CA ALA A 85 7,354 -63,789 46,820 1,00 59,32 C

ATOM 611 C ALA A 85 7,234 -65,102 47,595 1,00 67,61C

ATOM 612 О ALA A 85 6,138 -65,454 48,033 1,00 66,03О

ATOM 613 CB ALA A 85 7,829 -62,683 47,746 1,00 61,11 C

ATOM 614 О CYS A 86 9,789 -65,864 50,035 1,00 80,95О

ATOM 615 N CYS A 86 8,352 -65,823 47,747 1,00 70,04N

ATOM 616 CA CYS A 86 8,406 -67,079 48,506 1,00 73,93 C

ATOM 617 C CYS A 86 8,999 -66,800 49,883 1,00 81,58 C

ATOM 618 CB CYS A 86 9,220 -68,131 47,758 1,00 75,75C

ATOM 619 SG CYS A 86 8,510 -68,637 46,167 1,00 77,80S

ATOM 620 О ARG A 87 10,966 -68,856 51,499 1,00 93,44О

ATOM 621 N ARG A 87 8,628 -67,615 50,882 1,00 82,66 N

ATOM 622 CA ARG A 87 9,152 -67,478 52,247 1,00 86,62C

ATOM 623 C ARG A 87 10,609 -67,957 52,266 1,00 93,77C

ATOM 624 CB ARG A 87 8,311 -68,300 53,244 1,00 90,21C

ATOM 625 CG ARG A 87 6,862 -67,814 53,373 1,00102,71C

ATOM 626 CD ARG A 87 5,855 -68,945 53,538 1,00117,92C

ATOM 627 NE ARG A 87 4,501 -68,533 53,151 1,00127,83N

ATOM 628 CZ ARG A 87 3,660 -67,820 53,902 1,00144,91C

ATOM 629 NH1 ARG A 87 4,016 -67,412 55,118 1,00137,73 N

ATOM 630 NH2 ARG A 87 2,454 -67,506 53,440 1,00128,40 N

ATOM 631 О ASN A 88 12,123 -69,760 54,308 1,00100,54 О

ATOM 632 N ASN A 88 11,451 -67,357 53,130 1,00 92,99 N

ATOM 633 CA ASN A 88 12,872 -67,726 53,238 1,00 95,23 C

ATOM 634 C ASN A 88 13,063 -69,146 53,806 1,00100,81 C

ATOM 635 CB ASN A 88 13,632 -66,706 54,103 1,00 99,16 C

ATOM 636 CG ASN A 88 15,124 -66,958 54,200 1,00131,25 C

ATOM 637 OD1 ASN A 88 15,760 -67,438 53,255 1,00126,92 О

ATOM 638 ND2 ASN A 88 15,729 -66,618 55,332 1,00127,85 N

- 106 043052

ATOM 639 О ASP A 94 9,704 -67,692 39,489 1,00 73,11 О

ATOM 640 N ASP A 94 10,269 -69,594 36,923 1,00 76,76N

ATOM 641 CA ASP A 94 9,121 -68,883 37,478 1,00 72,67C

ATOM 642 C ASP A 94 9,610 -67,653 38,260 1,00 72,46 C

ATOM 643 CB ASP A 94 8,283 -69,836 38,368 1,00 75,16C

ATOM 644 CG ASP A 94 6,962 -69,267 38,867 1,00 83,13C

ATOM 645 OD1 ASP A 94 6,180 -68,756 38,033 1,00 82,79О

ATOM 646 OD2 ASP A 94 6,687 -69,383 40,082 1,00 85,88О

ATOM 647 О LYS A 95 9,445 -63,752 39,792 1,00 58,23 О

ATOM 648 N LYS A 95 9,918 -66,548 37,542 1,00 64,62 N

ATOM 649 CA LYS A 95 10,353 -65,294 38,179 1,00 61,76 C

ATOM 650 C LYS A 95 9,199 -64,628 38,960 1,00 59,06 C

ATOM 651 CB LYS A 95 10,930 -64,306 37,136 1,00 63,69 C

ATOM 652 CG LYS A 95 9,877 -63,631 36,254 1,00 61,55 C

ATOM 653 CD LYS A 95 10,458 -63,036 34,990 1,00 56,57 C

ATOM 654 CE LYS A 95 9,357 -62,586 34,067 1,00 47,71 C

ATOM 655 NZ LYS A 95 9,895 -61,924 32,850 1,00 44,34 N

ATOM 656 N GLU A 96 7,946 -65,028 38,670 1,00 51,16 N

ATOM 657 CA GLU A 96 6,767 -64,483 39,328 1,00 47,79 C

ATOM 658 C GLU A 96 6,452 -65,102 40,698 1,00 53,73 C

ATOM 659 О GLU A 96 5,500 -64,649 41,318 1,00 51,16 О

ATOM 660 CB GLU A 96 5,550 -64,578 38,385 1,00 46,46C

ATOM 661 CG GLU A 96 5,723 -63,777 37,098 1,00 46,51C

ATOM 662 CD GLU A 96 5,931 -62,283 37,282 1,00 56,44C

ATOM 663 OE1 GLU A 96 5,605 -61,761 38,374 1,00 47,31О

ATOM 664 OE2 GLU A 96 6,408 -61,627 36,326 1,00 40,33О

ATOM 665 N CYS A 97 7,227 -66,111 41,186 1,00 54,71 N

ATOM 666 CA CYS A 97 7,038 -66,714 42,517 1,00 57,34 C

ATOM 667 C CYS A 97 5,582 -67,130 42,819 1,00 59,38 C

ATOM 668 О CYS A 97 5,113 -66,975 43,946 1,00 58,58 О

ATOM 669 CB CYS A 97 7,573 -65,776 43,594 1,00 59,57 C

ATOM 670 SG CYS A 97 9,187 -65,050 43,208 1,00 65,12 S

ATOM 671 N THR A 98 4,875 -67,628 41,798 1,00 56,33 N

ATOM 672 CA THR A 98 3,497 -68,101 41,922 1,00 56,86 C

ATOM 673 C THR A 98 3,531 -69,509 42,570 1,00 64,64 C

ATOM 674 О THR A 98 2,565 -69,898 43,231 1,00 64,61 О

- 107 043052

ATOM 675 CB THR A 98 2,780 -68,010 40,550 1,00 67,68 C

ATOM 676 OGI THR A 98 2,314 -66,665 40,377 1,00 69,41 О

ATOM 677 CG2 THR A 98 1,605 -68,975 40,412 1,00 69,92 C

ATOM 678 N GLU A 99 4,659 -70,249 42,387 1,00 63,98 N

ATOM 679 CA GLU A 99 4,902 -71,579 42,956 1,00 67,53 C

ATOM 680 C GLU A 99 6,206 -71,525 43,771 1,00 74,19 C

ATOM 681 О GLU A 99 7,172 -70,901 43,320 1,00 72,07 О

ATOM 682 CB GLU A 99 5,051 -72,635 41,842 1,00 70,22C

ATOM 683 CG GLU A 99 3,904 -72,679 40,836 1,00 81,49C

ATOM 684 CD GLU A 99 4,178 -72,104 39,455 1,00103,65C

ATOM 685 OE1 GLU A 99 5,323 -72,237 38,962 1,00101,28О

ATOM 686 OE2 GLU A 99 3,223 -71,582 38,834 1,00 92,97О

ATOM 687 N CYS A 100 6,225 -72,166 44,967 1,00 74,67 N

ATOM 688 CA CYS A 100 7,392 -72,212 45,860 1,00 77,43 C

ATOM 689 C CYS A 100 7,622 -73,654 46,338 1,00 85,72 C

ATOM 690 О CYS A 100 7,952 -74,538 45,551 1,00 86,74 О

ATOM 691 CB CYS A 100 7,204 -71,267 47,048 1,00 77,96C

ATOM 692 SG CYS A 100 6,750 -69,568 46,600 1,00 78,35S

ATOM 693 CD CD A9901 -7,490 -41,157 31,507 0,50 62,49CD

ATOM 694 CD CD A9902 -6,163 -59,542 27,858 1,00 39,29CD

ATOM 695 N GLU В 1 -16,461 -26,648 36,434 1,00 66,26 N

ATOM 696 CA GLU В 1 -16,304 -25,892 35,191 1,00 63,97 C

ATOM 697 C GLU В 1 -14,864 -25,409 35,022 1,00 68,14 C

ATOM 698 О GLU В 1 -14,252 -24,969 35,997 1,00 70,24 О

ATOM 699 CB GLU В 1 -17,259 -24,686 35,173 1,00 64,42C

ATOM 700 CG GLU В 1 -17,296 -23,947 33,847 1,00 72,66C

ATOM 701 CD GLU В 1 -18,367 -22,878 33,729 1,00 92,40C

ATOM 702 OE1 GLU В 1 -19,570 -23,226 33,767 1,00 83,52О

ATOM 703 OE2 GLU В 1 -17,999 -21,696 33,539 1,00 84,58О

ATOM 704 N ILE В 2 -14,352 -25,433 33,770 1,00 62,46 N

ATOM 705 CA ILE В 2 -13,013 -24,931 33,439 1,00 62,90 C

ATOM 706 C ILE В 2 -13,223 -23,594 32,711 1,00 63,43 C

ATOM 707 О ILE В 2 -13,939 -23,538 31,709 1,00 61,42 О

ATOM 708 CB ILE В 2 -12,071 -25,936 32,686 1,00 66,24 C

ATOM 709 CGI ILE В 2 -11,426 -25,308 31,422 1,00 65,76 C

ATOM 710 CG2 ILE В 2 -12,747 -27,276 32,367 1,00 66,51 C

- 108 043052

ATOM 711 GDI ILE В 2 -10,366 -26,070 30,866 1,00 72,40 C

ATOM 712 N VAL В 3 -12,613 -22,522 33,235 1,00 59,20 N

ATOM 713 CA VAL В 3 -12,742 -21,176 32,690 1,00 57,38 C

ATOM 714 C VAL В 3 -11,638 -20,926 31,664 1,00 59,89 C

ATOM 715 О VAL В 3 -10,461 -21,101 31,983 1,00 61,71 О

ATOM 716 CB VAL В 3 -12,712 -20,125 33,834 1,00 63,01 C

ATOM 717 CGI VAL В 3 -12,856 -18,704 33,291 1,00 62,18 C

ATOM 718 CG2 VAL В 3 -13,804 -20,412 34,865 1,00 62,58 C

ATOM 719 N LEU В 4 -12,020 -20,485 30,446 1,00 53,70 N

ATOM 720 CA LEU В 4 -11,085 -20,140 29,376 1,00 53,06 C

ATOM 721 C LEU В 4 -11,001 -18,612 29,315 1,00 58,51 C

ATOM 722 О LEU В 4 -12,030 -17,950 29,155 1,00 57,19 О

ATOM 723 CB LEU В 4 -11,559 -20,701 28,028 1,00 50,15 C

ATOM 724 CG LEU В 4 -11,644 -22,224 27,914 1,00 52,38 C

ATOM 725 GDI LEU В 4 -12,192 -22,628 26,562 1,00 49,24 C

ATOM 726 CD2 LEU В 4 -10,294 -22,869 28,132 1,00 56,14 C

ATOM 727 N THR В 5 -9,787 -18,053 29,488 1,00 57,12 N

ATOM 728 CA THR В 5 -9,545 -16,612 29,492 1,00 57,49 C

ATOM 729 C THR В 5 -8,755 -16,226 28,244 1,00 62,49 C

ATOM 730 О THR В 5 -7,591 -16,606 28,115 1,00 64,71 О

ATOM 731 CB THR В 5 -8,829 -16,210 30,792 1,00 64,16 C

ATOM 732 OGI THR В 5 -9,615 -16,656 31,899 1,00 61,62 О

ATOM 733 CG2 THR В 5 -8,622 -14,706 30,907 1,00 64,87 C

ATOM 734 N GLN В 6 -9,392 -15,478 27,330 1,00 57,23 N

ATOM 735 CA GLN В 6 -8,780 -15,010 26,088 1,00 57,57 C

ATOM 736 C GLN В 6 -8,200 -13,609 26,227 1,00 65,40 C

ATOM 737 О GLN В 6 -8,845 -12,745 26,822 1,00 65,16 О

ATOM 738 CB GLN В 6 -9,805 -15,033 24,948 1,00 55,44 C

ATOM 739 CG GLN В 6 -10,142 -16,440 24,518 1,00 58,07 C

ATOM 740 CD GLN В 6 -11,047 -16,457 23,319 1,00 61,09 C

ATOM 741 OE1 GLN В 6 -12,254 -16,645 23,435 1,00 50,30 О

ATOM 742 NE2 GLN В 6 -10,491 -16,247 22,143 1,00 50,28 N

ATOM 743 N SER В 7 -6,996 -13,377 25,655 1,00 64,70 N

ATOM 744 CA SER В 7 -6,319 -12,075 25,708 1,00 66,73 C

ATOM 745 C SER В 7 -5,802 -11,675 24,312 1,00 70,20 C

ATOM 746 О SER В 7 -5,273 -12,531 23,601 1,00 69,56 О

- 109 043052

ATOM 747 CB SER В 7 -5,149 -12,106 26,693 1,00 73,95 C

ATOM 748 OG SER В 7 -5,320 -13,078 27,711 1,00 85,76 О

ATOM 749 N PRO В 8 -5,891 -10,382 23,933 1,00 67,08N

ATOM 750 CA PRO В 8 -6,555 -9,260 24,611 1,00 66,41C

ATOM 751 C PRO В 8 -8,047 -9,281 24,239 1,00 66,56 C

ATOM 752 О PRO В 8 -8,455 -10,091 23,401 1,00 63,39О

ATOM 753 CB PRO В 8 -5,836 -8,040 24,029 1,00 69,44C

ATOM 754 CG PRO В 8 -5,503 -8,455 22,641 1,00 73,38C

ATOM 755 CD PRO В 8 -5,140 -9,917 22,751 1,00 69,21C

ATOM 756 N ALA В 9 -8,852 -8,374 24,826 1,00 62,75 N

ATOM 757 CA ALA В 9 -10,283 -8,275 24,497 1,00 59,18 C

ATOM 758 C ALA В 9 -10,422 -7,798 23,048 1,00 60,93 C

ATOM 759 О ALA В 9 -11,145 -8,410 22,262 1,00 57,16 О

ATOM 760 CB ALA В 9 -10,985 -7,309 25,443 1,00 59,92 C

ATOM 761 N THR В 10 -9,679 -6,735 22,695 1,00 59,34 N

ATOM 762 CA THR В 10 -9,622 -6,197 21,336 1,00 58,27 C

ATOM 763 C THR В 10 -8,158 -6,209 20,896 1,00 63,97 C

ATOM 764 О THR В 10 -7,299 -5,732 21,640 1,00 66,81 О

ATOM 765 CB THR В 10 -10,212 -4,783 21,288 1,00 65,78 C

ATOM 766 OGI THR В 10 -11,542 -4,832 21,810 1,00 64,14 О

ATOM 767 CG2 THR В 10 -10,233 -4,195 19,868 1,00 62,11 C

ATOM 768 N LEU В 11 -7,874 -6,767 19,709 1,00 58,45 N

ATOM 769 CA LEU В 11 -6,526 -6,820 19,147 1,00 59,88 C

ATOM 770 C LEU В 11 -6,550 -5,961 17,892 1,00 63,08 C

ATOM 771 О LEU В 11 -7,034 -6,403 16,848 1,00 61,01 О

ATOM 772 CB LEU В 11 -6,113 -8,276 18,833 1,00 59,83 C

ATOM 773 CG LEU В 11 -4,713 -8,487 18,236 1,00 66,84 C

ATOM 774 GDI LEU В 11 -3,620 -7,868 19,113 1,00 69,57 C

ATOM 775 CD2 LEU В 11 -4,425 -9,967 18,049 1,00 68,76 C

ATOM 776 N SER В 12 -6,094 -4,700 18,022 1,00 60,82 N

ATOM 777 CA SER В 12 -6,085 -3,725 16,931 1,00 59,54 C

ATOM 778 C SER В 12 -4,750 -3,781 16,181 1,00 66,36 C

ATOM 779 О SER В 12 -3,742 -3,296 16,695 1,00 68,95 О

ATOM 780 CB SER В 12 -6,343 -2,321 17,473 1,00 61,03 C

ATOM 781 OG SER В 12 -7,545 -2,264 18,225 1,00 59,35 О

ATOM 782 N LEU В 13 -4,742 -4,389 14,972 1,00 61,99 N

- 110 043052

ATOM 783 CA LEU В 13 -3,552 -4,515 14,115 1,00 64,21 C

ATOM 784 C LEU В 13 -3,915 -4,162 12,663 1,00 68,04 C

ATOM 785 О LEU В 13 -5,080 -4,297 12,288 1,00 63,88 О

ATOM 786 CB LEU В 13 -3,008 -5,948 14,169 1,00 64,67 C

ATOM 787 CG LEU В 13 -2,533 -6,450 15,532 1,00 70,50 C

ATOM 788 GDI LEU В 13 -2,338 -7,955 15,506 1,00 69,97 C

ATOM 789 CD2 LEU В 13 -1,250 -5,748 15,966 1,00 76,02 C

ATOM 790 N SER В 14 -2,939 -3,681 11,859 1,00 68,35 N

ATOM 791 CA SER В 14 -3,173 -3,305 10,453 1,00 68,36 C

ATOM 792 C SER В 14 -3,015 -4,520 9,513 1,00 72,45 C

ATOM 793 О SER В 14 -2,397 -5,504 9,921 1,00 72,71 О

ATOM 794 CB SER В 14 -2,176 -2,235 10,012 1,00 76,14 C

ATOM 795 OG SER В 14 -2,104 -1,139 10,908 1,00 88,84 О

ATOM 796 N PRO В 15 -3,510 -4,442 8,241 1,00 69,11 N

ATOM 797 CA PRO В 15 -3,303 -5,542 7,286 1,00 69,65 C

ATOM 798 C PRO В 15 -1,819 -5,655 6,930 1,00 78,54C

ATOM 799 О PRO В 15 -1,171 -4,641 6,663 1,00 80,10О

ATOM 800 CB PRO В 15 -4,158 -5,144 6,079 1,00 69,78 C

ATOM 801 CG PRO В 15 -5,220 -4,292 6,634 1,00 71,64 C

ATOM 802 CD PRO В 15 -4,601 -3,552 7,789 1,00 68,61 C

ATOM 803 N GLY В 16 -1,278 -6,878 6,977 1,00 77,14N

ATOM 804 CA GLY В 16 0,134 -7,142 6,736 1,00 80,94C

ATOM 805 C GLY В 16 0,838 -7,494 8,053 1,00 86,59 C

ATOM 806 О GLY В 16 1,821 -8,232 8,019 1,00 89,09 О

ATOM 807 N GLU В 17 0,353 -6,967 9,209 1,00 81,49 N

ATOM 808 CA GLU В 17 0,953 -7,263 10,516 1,00 82,40 C

ATOM 809 C GLU В 17 0,663 -8,702 10,959 1,00 84,44 C

ATOM 810 О GLU В 17 -0,209 -9,370 10,401 1,00 81,35О

ATOM 811 CB GLU В 17 0,466 -6,282 11,606 1,00 82,63C

ATOM 812 CG GLU В 17 0,950 -4,853 11,438 1,00 93,06C

ATOM 813 CD GLU В 17 0,713 -3,988 12,663 1,00110,22C

ATOM 814 OE1 GLU В 17 1,356 -4,242 13,708 1,00100,30 О

ATOM 815 OE2 GLU В 17 -0,138 -3,072 12,588 1,00101,98 О

ATOM 816 N ARG В 18 1,409 -9,166 11,968 1,00 82,58 N

ATOM 817 CA ARG В 18 1,280 -10,506 12,533 1,00 81,15 C

ATOM 818 C ARG В 18 0,391 -10,433 13,778 1,00 82,43 C

- 111 043052

ATOM 819 О ARG В 18 0,608 -9,564 14,625 1,00 83,25 О

ATOM 820 СВ ARG В 18 2,674 -11,074 12,872 1,00 83,89С

АТОМ 821 CG ARG В 18 2,660 -12,393 13,638 1,00 94,10С

АТОМ 822 CD ARG В 18 3,789 -13,313 13,217 1,00105,86С

АТОМ 823 NE ARG В 18 3,869 -14,499 14,073 1,00109,81N

АТОМ 824 CZ ARG В 18 4,557 -15,605 13,794 1,00126,65С

АТОМ 825 NH1 ARG В 18 5,243 -15,703 12,657 1,00120,71 N

АТОМ 826 NH2 ARG В 18 4,561 -16,624 14,644 1,00112,23 N

АТОМ 827 N ALA В 19 -0,605 -11,342 13,887 1,00 74,95 N

АТОМ 828 CA ALA В 19 -1,521 -11,397 15,031 1,00 72,03 С

АТОМ 829 С ALA В 19 -1,317 -12,678 15,822 1,00 75,61 С

АТОМ 830 О ALA В 19 -1,129 -13,737 15,230 1,00 74,37 О

АТОМ 831 СВ ALA В 19 -2,959 -11,320 14,555 1,00 69,03 С

АТОМ 832 N THR В 20 -1,358 -12,573 17,157 1,00 72,69 N

АТОМ 833 CA THR В 20 -1,212 -13,702 18,069 1,00 73,06 С

АТОМ 834 С THR В 20 -2,342 -13,556 19,104 1,00 74,31 С

АТОМ 835 О THR В 20 -2,355 -12,600 19,882 1,00 73,95 О

АТОМ 836 СВ THR В 20 0,265 -13,789 18,581 1,00 90,30 С

АТОМ 837 OGI THR В 20 0,843 -15,022 18,139 1,00 92,46 О

АТОМ 838 CG2 THR В 20 0,417 -13,666 20,106 1,00 91,87 С

АТОМ 839 N LEU В 21 -3,350 -14,446 19,016 1,00 68,30 N

АТОМ 840 CA LEU В 21 -4,521 -14,459 19,896 1,00 65,65 С

АТОМ 841 С LEU В 21 -4,298 -15,577 20,900 1,00 68,48 С

АТОМ 842 О LEU В 21 -4,028 -16,695 20,480 1,00 68,53 О

АТОМ 843 СВ LEU В 21 -5,800 -14,732 19,087 1,00 62,61 С

АТОМ 844 CG LEU В 21 -6,278 -13,614 18,155 1,00 66,57 С

АТОМ 845 CDI LEU В 21 -5,452 -13,557 16,865 1,00 68,10 С

АТОМ 846 CD2 LEU В 21 -7,744 -13,808 17,793 1,00 66,13 С

АТОМ 847 N SER В 22 -4,389 -15,288 22,207 1,00 64,91 N

АТОМ 848 CA SER В 22 -4,132 -16,278 23,255 1,00 66,06 С

АТОМ 849 С SER В 22 -5,391 -16,739 23,990 1,00 67,57 С

АТОМ 850 О SER В 22 -6,364 -15,995 24,088 1,00 64,89 О

АТОМ 851 СВ SER В 22 -3,117 -15,733 24,257 1,00 74,58 С

АТОМ 852 OG SER В 22 -3,684 -14,816 25,180 1,00 85,87 О

АТОМ 853 N CYS В 23 -5,343 -17,978 24,513 1,00 64,28 N

АТОМ 854 CA CYS В 23 -6,405 -18,615 25,301 1,00 62,53 С

- 112 043052

ATOM 855 C CYS В 23 -5,697 -19,297 26,483 1,00 68,85 С

ATOM 856 О CYS В 23 -4,734 -20,036 26,275 1,00 69,65 О

АТОМ 857 СВ CYS В 23 -7,191 -19,618 24,451 1,00 60,39 С

АТОМ 858 SG CYS В 23 -8,582 -20,425 25,303 1,00 62,06 S

АТОМ 859 N SER В 24 -6,126 -18,989 27,714 1,00 66,17 N

АТОМ 860 CA SER В 24 -5,555 -19,540 28,941 1,00 67,93 С

АТОМ 861 С SER В 24 -6,639 -20,319 29,684 1,00 69,58 С

АТОМ 862 О SER В 24 -7,686 -19,750 29,989 1,00 67,28 О

АТОМ 863 СВ SER В 24 -5,025 -18,413 29,824 1,00 73,52 С

АТОМ 864 OG SER В 24 -4,551 -18,904 31,068 1,00 85,22 О

АТОМ 865 N ALA В 25 -6,384 -21,604 29,994 1,00 66,33 N

АТОМ 866 CA ALA В 25 -7,331 -22,468 30,711 1,00 64,71 С

АТОМ 867 С ALA В 25 -7,006 -22,520 32,207 1,00 72,28 С

АТОМ 868 О ALA В 25 -5,835 -22,434 32,579 1,00 75,00 О

АТОМ 869 СВ ALA В 25 -7,293 -23,866 30,128 1,00 64,17 С

АТОМ 870 N SER В 26 -8,036 -22,653 33,067 1,00 68,25 N

АТОМ 871 CA SER В 26 -7,843 -22,730 34,522 1,00 70,50 С

АТОМ 872 С SER В 26 -7,155 -24,046 34,917 1,00 76,92 С

АТОМ 873 О SER В 26 -6,318 -24,047 35,823 1,00 79,16 О

АТОМ 874 СВ SER В 26 -9,172 -22,576 35,254 1,00 72,51 С

АТОМ 875 OG SER В 26 -10,107 -23,553 34,832 1,00 78,97 О

АТОМ 876 N SER В 27 -7,502 -25,155 34,230 1,00 72,77 N

АТОМ 877 CA SER В 27 -6,878 -26,473 34,408 1,00 73,84 С

АТОМ 878 С SER В 27 -6,429 -26,995 33,028 1,00 76,35 С

АТОМ 879 О SER В 27 -6,773 -26,393 32,009 1,00 74,05 О

АТОМ 880 СВ SER В 27 -7,835 -27,446 35,093 1,00 76,56 С

АТОМ 881 OG SER В 27 -9,062 -27,576 34,395 1,00 84,78 О

АТОМ 882 N SER В 28 -5,640 -28,080 32,996 1,00 73,77 N

АТОМ 883 CA SER В 28 -5,076 -28,614 31,747 1,00 72,82 С

АТОМ 884 С SER В 28 -6,100 -29,091 30,694 1,00 72,96 С

АТОМ 885 О SER В 28 -7,062 -29,774 31,031 1,00 70,71 О

АТОМ 886 СВ SER В 28 -4,096 -29,744 32,047 1,00 77,29 С

АТОМ 887 OG SER В 28 -3,024 -29,279 32,849 1,00 89,12 О

АТОМ 888 N VAL В 29 -5,851 -28,753 29,412 1,00 68,69 N

АТОМ 889 CA VAL В 29 -6,670 -29,146 28,253 1,00 66,05 С

АТОМ 890 С VAL В 29 -5,746 -29,659 27,149 1,00 71,82 С

- 113 043052

ATOM 891 О VAL В 29 -4,564 -29,321 27,145 1,00 73,88 О

ATOM 892 СВ VAL В 29 -7,616 -28,027 27,741 1,00 67,49 С

АТОМ 893 CGI VAL В 29 -8,763 -27,814 28,707 1,00 66,23 С

АТОМ 894 CG2 VAL В 29 -6,877 -26,722 27,483 1,00 68,50 С

АТОМ 895 N SER В 30 -6,287 -30,448 26,206 1,00 67,52 N

АТОМ 896 CA SER В 30 -5,499 -31,109 25,163 1,00 68,55 С

АТОМ 897 С SER В 30 -5,754 -30,627 23,725 1,00 71,50 С

АТОМ 898 О SER В 30 -4,840 -30,063 23,114 1,00 75,11 О

АТОМ 899 СВ SER В 30 -5,713 -32,621 25,242 1,00 71,25 С

АТОМ 900 OG SER В 30 -5,577 -33,110 26,567 1,00 85,11 О

АТОМ 901 N TYR В 31 -6,952 -30,888 23,173 1,00 61,50 N

АТОМ 902 CA TYR В 31 -7,275 -30,609 21,771 1,00 59,42 С

АТОМ 903 С TYR В 31 -8,187 -29,371 21,642 1,00 61,50 С

АТОМ 904 О TYR В 31 -9,401 -29,497 21,460 1,00 58,79 О

АТОМ 905 СВ TYR В 31 -7,920 -31,868 21,154 1,00 59,05С

АТОМ 906 CG TYR В 31 -6,937 -32,971 20,818 1,00 61,39С

АТОМ 907 GDI TYR В 31 -6,432 -33,807 21,801 1,00 64,53С

АТОМ 908 CD2 TYR В 31 -6,607 -33,251 19,499 1,00 61,86С

АТОМ 909 СЕ1 TYR В 31 -5,566 -34,853 21,491 1,00 66,11С

АТОМ 910 СЕ2 TYR В 31 -5,743 -34,293 19,173 1,00 63,96С

АТОМ 911 CZ TYR В 31 -5,206 -35,080 20,174 1,00 71,35С

АТОМ 912 ОН TYR В 31 -4,366 -36,127 19,869 1,00 73,45О

АТОМ 913 N МЕТ В 32 -7,585 -28,171 21,737 1,00 58,11 N

АТОМ 914 САМЕТ В 32 -8,303 -26,888 21,710 1,00 55,98 С

АТОМ 915 С МЕТ В 32 -8,949 -26,559 20,350 1,00 55,87 С

АТОМ 916 О МЕТ В 32 -8,293 -26,666 19,315 1,00 55,56 О

АТОМ 917 СВ МЕТ В 32 -7,343 -25,753 22,121 1,00 60,50С

АТОМ 918 CG МЕТ В 32 -8,010 -24,403 22,364 1,00 63,40С

АТОМ 919 SD МЕТ В 32 -9,069 -24,377 23,829 1,00 66,79S

АТОМ 920 СЕ МЕТ В 32 -7,881 -24,105 25,096 1,00 66,47С

АТОМ 921 N HIS В 33 -10,226 -26,122 20,372 1,00 48,77 N

АТОМ 922 CA HIS В 33 -10,974 -25,722 19,175 1,00 46,33 С

АТОМ 923 С HIS В 33 -11,124 -24,210 19,150 1,00 49,53 С

АТОМ 924 О HIS В 33 -11,194 -23,588 20,208 1,00 49,20 О

АТОМ 925 СВ HIS В 33 -12,366 -26,366 19,146 1,00 44,26 С

АТОМ 926 CG HIS В 33 -12,366 -27,863 19,196 1,00 46,92 С

- 114 043052

ATOM 927 ND1 HIS В 33 -11,430 -28,613 18,506 1,00 49,65N

ATOM 928 CD2 HIS В 33 -13,240 -28,702 19,793 1,00 47,01C

ATOM 929 CE1 HIS В 33 -11,742 -29,878 18,740 1,00 48,36C

ATOM 930 NE2 HIS В 33 -12,830 -29,978 19,497 1,00 47,24N

ATOM 931 N TRP В 34 -11,168 -23,625 17,944 1,00 45,71 N

ATOM 932 CA TRP В 34 -11,312 -22,185 17,728 1,00 44,73 C

ATOM 933 C TRP В 34 -12,417 -21,920 16,710 1,00 47,48 C

ATOM 934 О TRP В 34 -12,510 -22,632 15,703 1,00 46,46 О

ATOM 935 CB TRP В 34 -10,004 -21,565 17,235 1,00 45,07 C

ATOM 936 CG TRP В 34 -8,893 -21,604 18,238 1,00 47,99 C

ATOM 937 GDI TRP В 34 -8,023 -22,631 18,461 1,00 52,28C

ATOM 938 CD2 TRP В 34 -8,451 -20,517 19,059 1,00 49,06C

ATOM 939 NE1 TRP В 34 -7,091 -22,266 19,408 1,00 53,74N

ATOM 940 CE2 TRP В 34 -7,335 -20,974 19,797 1,00 55,33C

ATOM 941 CE3 TRP В 34 -8,917 -19,212 19,277 1,00 49,76C

ATOM 942 CZ2 TRP В 34 -6,675 -20,166 20,728 1,00 56,59C

ATOM 943 CZ3 TRP В 34 -8,246 -18,404 20,181 1,00 53,00C

ATOM 944 CH2 TRP В 34 -7,133 -18,877 20,887 1,00 55,99C

ATOM 945 N TYR В 35 -13,254 -20,894 16,975 1,00 42,77 N

ATOM 946 CA TYR В 35 -14,364 -20,516 16,103 1,00 40,95 C

ATOM 947 C TYR В 35 -14,249 -19,067 15,695 1,00 44,85 C

ATOM 948 О TYR В 35 -13,894 -18,229 16,516 1,00 44,61 О

ATOM 949 CB TYR В 35 -15,717 -20,727 16,809 1,00 39,67C

ATOM 950 CG TYR В 35 -15,913 -22,159 17,231 1,00 40,42C

ATOM 951 GDI TYR В 35 -16,385 -23,110 16,334 1,00 41,22C

ATOM 952 CD2 TYR В 35 -15,507 -22,594 18,486 1,00 41,05C

ATOM 953 CE1 TYR В 35 -16,428 -24,458 16,668 1,00 41,70C

ATOM 954 CE2 TYR В 35 -15,600 -23,932 18,850 1,00 41,03C

ATOM 955 CZ TYR В 35 -16,067 -24,863 17,939 1,00 46,65C

ATOM 956 OH TYR В 35 -16,164 -26,191 18,274 1,00 46,99О

ATOM 957 N GLN В 36 -14,589 -18,767 14,439 1,00 41,80 N

ATOM 958 CA GLN В 36 -14,605 -17,397 13,930 1,00 41,65 C

ATOM 959 C GLN В 36 -16,048 -16,955 13,872 1,00 43,53 C

ATOM 960 О GLN В 36 -16,882 -17,731 13,413 1,00 42,02 О

ATOM 961 CB GLN В 36 -14,006 -17,316 12,516 1,00 43,16 C

ATOM 962 CG GLN В 36 -13,890 -15,873 11,994 1,00 46,31 C

- 115 043052

ATOM 963 CD GLN В 36 -13,693 -15,826 10,500 1,00 54,64 C

ATOM 964 OE1 GLN В 36 -14,636 -16,029 9,731 1,00 47,51 О

ATOM 965 NE2 GLN В 36 -12,468 -15,577 10,046 1,00 43,33 N

ATOM 966 N GLN В 37 -16,342 -15,710 14,293 1,00 39,68 N

ATOM 967 CA GLN В 37 -17,684 -15,146 14,187 1,00 38,25 C

ATOM 968 C GLN В 37 -17,618 -13,721 13,644 1,00 43,10 C

ATOM 969 О GLN В 37 -16,907 -12,885 14,206 1,00 42,94 О

ATOM 970 CB GLN В 37 -18,438 -15,148 15,526 1,00 38,79C

ATOM 971 CG GLN В 37 -19,927 -14,852 15,318 1,00 41,09C

ATOM 972 CD GLN В 37 -20,759 -14,844 16,568 1,00 43,99C

ATOM 973 OE1 GLN В 37 -20,293 -14,519 17,659 1,00 38,85О

ATOM 974 NE2 GLN В 37 -22,047 -15,106 16,411 1,00 35,28N

ATOM 975 N LYS В 38 -18,410 -13,433 12,592 1,00 39,87 N

ATOM 976 CA LYS В 38 -18,518 -12,090 12,009 1,00 39,92 C

ATOM 977 C LYS В 38 -19,883 -11,515 12,408 1,00 43,53C

ATOM 978 О LYS В 38 -20,780 -12,304 12,713 1,00 40,65О

ATOM 979 CB LYS В 38 -18,331 -12,142 10,484 1,00 42,03 C

ATOM 980 CG LYS В 38 -16,943 -12,663 10,102 1,00 46,18 C

ATOM 981 CD LYS В 38 -16,493 -12,203 8,731 1,00 50,59 C

ATOM 982 CE LYS В 38 -15,021 -12,437 8,512 1,00 55,26 C

ATOM 983 NZ LYS В 38 -14,685 -12,470 7,065 1,00 61,75 N

ATOM 984 N PRO В 39 -20,043 -10,154 12,456 1,00 42,90N

ATOM 985 CA PRO В 39 -21,298 -9,524 12,922 1,00 42,12C

ATOM 986 C PRO В 39 -22,591 -10,034 12,267 1,00 44,27C

ATOM 987 О PRO В 39 -22,654 -10,162 11,045 1,00 43,72О

ATOM 988 CB PRO В 39 -21,072 -8,028 12,646 1,00 44,44C

ATOM 989 CG PRO В 39 -19,604 -7,869 12,564 1,00 49,12C

ATOM 990 CD PRO В 39 -19,107 -9,129 11,945 1,00 44,70C

ATOM 991 N GLY В 40 -23,605 -10,365 13,100 1,00 40,97N

ATOM 992 CA GLY В 40 -24,905 -10,868 12,646 1,00 39,89 C

ATOM 993 C GLY В 40 -24,868 -12,255 11,987 1,00 42,71C

ATOM 994 О GLY В 40 -25,853 -12,642 11,357 1,00 43,22О

ATOM 995 N GLN В 41 -23,761 -13,011 12,134 1,00 37,37N

ATOM 996 CA GLN В 41 -23,636 -14,344 11,548 1,00 36,16 C

ATOM 997 C GLN В 41 -23,334 -15,355 12,642 1,00 36,54C

ATOM 998 О GLN В 41 -22,759 -15,013 13,672 1,00 36,09О

- 116 043052

ATOM 999 CB GLN В 41 -22,513 -14,381 10,502 1,00 38,18 C

ATOM 1000 CG GLN В 41 -22,705 -13,413 9,344 1,00 52,04 C

ATOM 1001 CD GLN В 41 -21,473 -13,371 8,470 1,00 77,06 C

ATOM 1002 OE1 GLN В 41 -20,890 -14,409 8,134 1,00 76,18 О

ATOM 1003 NE2 GLN В 41 -21,050 -12,177 8,064 1,00 70,40 N

ATOM 1004 N ALA В 42 -23,691 -16,610 12,393 1,00 32,84 N

ATOM 1005 CA ALA В 42 -23,420 -17,710 13,315 1,00 31,84 C

ATOM 1006 C ALA В 42 -21,902 -17,981 13,369 1,00 35,92 C

ATOM 1007 О ALA В 42 -21,218 -17,679 12,384 1,00 35,98 О

ATOM 1008 CB ALA В 42 -24,142 -18,971 12,841 1,00 31,79 C

ATOM 1009 N PRO В 43 -21,372 -18,578 14,477 1,00 32,48 N

ATOM 1010 CA PRO В 43 -19,945 -18,949 14,502 1,00 33,86 C

ATOM 1011 C PRO В 43 -19,633 -20,046 13,442 1,00 38,94 C

ATOM 1012 О PRO В 43 -20,540 -20,726 12,955 1,00 38,14 О

ATOM 1013 CB PRO В 43 -19,721 -19,477 15,931 1,00 35,40C

ATOM 1014 CG PRO В 43 -20,847 -18,936 16,727 1,00 38,52C

ATOM 1015 CD PRO В 43 -22,007 -18,816 15,789 1,00 32,73C

ATOM 1016 N LYS В 44 -18,356 -20,181 13,086 1,00 36,90 N

ATOM 1017 CA LYS В 44 -17,843 -21,142 12,105 1,00 37,55 C

ATOM 1018 C LYS В 44 -16,636 -21,815 12,714 1,00 41,70 C

ATOM 1019 О LYS В 44 -15,783 -21,104 13,259 1,00 40,89 О

ATOM 1020 CB LYS В 44 -17,321 -20,391 10,853 1,00 42,52 C

ATOM 1021 CG LYS В 44 -18,255 -20,311 9,655 1,00 54,87C

ATOM 1022 CD LYS В 44 -17,550 -19,585 8,497 1,00 57,24C

ATOM 1023 CE LYS В 44 -18,292 -19,641 7,180 1,00 62,53C

ATOM 1024 NZ LYS В 44 -19,476 -18,739 7,152 1,00 62,92N

ATOM 1025 N ARG В 45 -16,496 -23,156 12,558 1,00 37,53 N

ATOM 1026 CA ARG В 45 -15,287 -23,856 13,001 1,00 37,89 C

ATOM 1027 C ARG В 45 -14,124 -23,303 12,160 1,00 43,62 C

ATOM 1028 О ARG В 45 -14,270 -23,152 10,947 1,00 42,49 О

ATOM 1029 CB ARG В 45 -15,439 -25,376 12,836 1,00 35,88C

ATOM 1030 CG ARG В 45 -14,189 -26,180 13,215 1,00 38,81C

ATOM 1031 CD ARG В 45 -14,300 -27,660 12,899 1,00 44,81C

ATOM 1032 NE ARG В 45 -14,284 -27,916 11,454 1,00 49,62N

ATOM 1033 CZ ARG В 45 -14,013 -29,087 10,877 1,00 57,98C

ATOM 1034 NH1 ARG В 45 -13,730 -30,155 11,616 1,00 46,92 N

- 117 043052

ATOM 1035 NH2 ARG В 45 -14,012 -29,196 9,553 1,00 41,99 N

ATOM 1036 N TRP В 46 -13,019 -22,914 12,817 1,00 43,32 N

ATOM 1037 CA TRP В 46 -11,867 -22,321 12,136 1,00 45,71 C

ATOM 1038 C TRP В 46 -10,631 -23,197 12,294 1,00 51,80 C

ATOM 1039 О TRP В 46 -10,094 -23,677 11,295 1,00 52,82 О

ATOM 1040 CB TRP В 46 -11,630 -20,887 12,650 1,00 44,76C

ATOM 1041 CG TRP В 46 -11,049 -20,002 11,603 1,00 47,19C

ATOM 1042 GDI TRP В 46 -9,741 -19,642 11,470 1,00 52,39C

ATOM 1043 CD2 TRP В 46 -11,719 -19,516 10,435 1,00 46,66 C

ATOM 1044 NE1 TRP В 46 -9,579 -18,869 10,345 1,00 52,63 N

ATOM 1045 CE2 TRP В 46 -10,771 -18,793 9,678 1,00 52,22C

ATOM 1046 CE3 TRP В 46 -13,036 -19,601 9,963 1,00 46,11C

ATOM 1047 CZ2 TRP В 46 -11,093 -18,168 8,475 1,00 51,50C

ATOM 1048 CZ3 TRP В 46 -13,364 -18,952 8,784 1,00 47,71C

ATOM 1049 CH2 TRP В 46 -12,398 -18,246 8,053 1,00 50,27C

ATOM 1050 N ILE В 47 -10,195 -23,423 13,537 1,00 48,59N

ATOM 1051 CA ILE В 47 -9,077 -24,311 13,847 1,00 49,89C

ATOM 1052 C ILE В 47 -9,625 -25,312 14,846 1,00 53,75 C

ATOM 1053 О ILE В 47 -10,351 -24,923 15,755 1,00 51,44О

ATOM 1054 CB ILE В 47 -7,819 -23,574 14,389 1,00 54,90C

ATOM 1055 CGI ILE В 47 -7,425 -22,418 13,442 1,00 55,55C

ATOM 1056 CG2 ILE В 47 -6,641 -24,564 14,588 1,00 57,33C

ATOM 1057 GDI ILE В 47 -6,154 -21,702 13,785 1,00 60,87C

ATOM 1058 N TYR В 48 -9,314 -26,598 14,661 1,00 52,51 N

ATOM 1059 CA TYR В 48 -9,753 -27,659 15,568 1,00 51,57 C

ATOM 1060 C TYR В 48 -8,586 -28,584 15,856 1,00 55,31 C

ATOM 1061 О TYR В 48 -7,604 -28,578 15,116 1,00 55,78 О

ATOM 1062 CB TYR В 48 -10,966 -28,422 15,011 1,00 51,70C

ATOM 1063 CG TYR В 48 -10,680 -29,256 13,781 1,00 55,49C

ATOM 1064 GDI TYR В 48 -10,538 -28,669 12,530 1,00 58,03C

ATOM 1065 CD2 TYR В 48 -10,578 -30,642 13,867 1,00 56,79C

ATOM 1066 CE1 TYR В 48 -10,249 -29,431 11,400 1,00 59,64C

ATOM 1067 CE2 TYR В 48 -10,309 -31,417 12,741 1,00 58,73C

ATOM 1068 CZ TYR В 48 -10,143 -30,808 11,507 1,00 66,61C

ATOM 1069 OH TYR В 48 -9,858 -31,552 10,383 1,00 69,66 О

ATOM 1070 N ASP В 49 -8,663 -29,323 16,971 1,00 51,22 N

- 118 043052

ATOM 1071 CA ASP В 49 -7,619 -30,252 17,411 1,00 52,44 C

ATOM 1072 C ASP В 49 -6,282 -29,523 17,618 1,00 57,54 C

ATOM 1073 О ASP В 49 -5,219 -30,047 17,279 1,00 57,96 О

ATOM 1074 CB ASP В 49 -7,500 -31,454 16,434 1,00 54,46 C

ATOM 1075 CG ASP В 49 -8,690 -32,406 16,448 1,00 59,93 C

ATOM 1076 OD1 ASP В 49 -9,538 -32,292 17,359 1,00 57,16 О

ATOM 1077 OD2 ASP В 49 -8,763 -33,282 15,561 1,00 66,68 О

ATOM 1078 N THR В 50 -6,361 -28,279 18,153 1,00 54,10 N

ATOM 1079 CA THR В 50 -5,232 -27,382 18,429 1,00 56,18 C

ATOM 1080 C THR В 50 -4,659 -26,738 17,175 1,00 61,25 C

ATOM 1081 О THR В 50 -4,566 -25,518 17,142 1,00 60,88 О

ATOM 1082 CB THR В 50 -4,126 -28,075 19,260 1,00 62,52 C

ATOM 1083 OGI THR В 50 -4,720 -28,630 20,430 1,00 62,24 О

ATOM 1084 CG2 THR В 50 -3,006 -27,126 19,665 1,00 59,52 C

ATOM 1085 N SER В 51 -4,217 -27,545 16,185 1,00 60,20 N

ATOM 1086 CA SER В 51 -3,523 -27,087 14,978 1,00 61,75 C

ATOM 1087 C SER В 51 -4,168 -27,443 13,624 1,00 65,82 C

ATOM 1088 О SER В 51 -3,609 -27,037 12,607 1,00 68,03 О

ATOM 1089 CB SER В 51 -2,103 -27,651 14,998 1,00 66,64 C

ATOM 1090 OG SER В 51 -2,114 -29,070 14,985 1,00 71,98 О

ATOM 1091 N LYS В 52 -5,289 -28,194 13,568 1,00 59,53 N

ATOM 1092 CA LYS В 52 -5,870 -28,542 12,264 1,00 58,69 C

ATOM 1093 C LYS В 52 -6,749 -27,413 11,740 1,00 63,24 C

ATOM 1094 О LYS В 52 -7,645 -26,962 12,448 1,00 61,69 О

ATOM 1095 CB LYS В 52 -6,664 -29,858 12,312 1,00 58,90C

ATOM 1096 CG LYS В 52 -5,853 -31,056 12,784 1,00 67,94C

ATOM 1097 CD LYS В 52 -6,698 -32,319 12,753 1,00 73,07C

ATOM 1098 CE LYS В 52 -6,055 -33,486 13,455 1,00 79,98C

ATOM 1099 NZ LYS В 52 -7,006 -34,620 13,605 1,00 87,87N

ATOM 1100 N LEU В 53 -6,516 -26,974 10,495 1,00 62,00 N

ATOM 1101 CA LEU В 53 -7,309 -25,909 9,878 1,00 61,40 C

ATOM 1102 C LEU В 53 -8,542 -26,506 9,203 1,00 64,71 C

ATOM 1103 О LEU В 53 -8,455 -27,582 8,605 1,00 65,02 О

ATOM 1104 CB LEU В 53 -6,482 -25,145 8,830 1,00 63,57 C

ATOM 1105 CG LEU В 53 -5,140 -24,583 9,275 1,00 70,86 C

ATOM 1106 GDI LEU В 53 -4,452 -23,882 8,121 1,00 72,90 C

- 119 043052

ATOM 1107 CD2 LEU В 53 -5,298 -23,627 10,446 1,00 72,79 С

ATOM 1108 N ALA В 54 -9,689 -25,810 9,284 1,00 59,69 N

ATOM 1109 CA ALA В 54 -10,917 -26,261 8,621 1,00 58,17 C

ATOM 1110 C ALA В 54 -10,790 -26,015 7,104 1,00 64,70 C

ATOM 1111 О ALA В 54 -9,942 -25,221 6,684 1,00 64,60 О

ATOM 1112 CB ALA В 54 -12,119 -25,517 9,173 1,00 56,50 C

ATOM 1113 N SER В 55 -11,607 -26,702 6,285 1,00 62,64 N

ATOM 1114 CA SER В 55 -11,539 -26,554 4,822 1,00 64,02 C

ATOM 1115 C SER В 55 -11,875 -25,116 4,396 1,00 68,19 C

ATOM 1116 О SER В 55 -12,873 -24,546 4,854 1,00 66,10 О

ATOM 1117 CB SER В 55 -12,466 -27,547 4,127 1,00 67,64 C

ATOM 1118 OG SER В 55 -12,311 -27,509 2,717 1,00 78,36 О

ATOM 1119 N GLY В 56 -11,001 -24,520 3,565 1,00 66,16 N

ATOM 1120 CA GLY В 56 -11,144 -23,146 3,100 1,00 65,31 C

ATOM 1121 C GLY В 56 -10,328 -22,147 3,935 1,00 67,72 C

ATOM 1122 О GLY В 56 -10,112 -21,031 3,461 1,00 68,58 О

ATOM 1123 N VAL В 57 -9,859 -22,529 5,153 1,00 61,01 N

ATOM 1124 CA VAL В 57 -9,096 -21,625 6,021 1,00 59,84 C

ATOM 1125 C VAL В 57 -7,686 -21,461 5,431 1,00 65,21 C

ATOM 1126 О VAL В 57 -6,979 -22,458 5,339 1,00 65,74 О

ATOM 1127 CB VAL В 57 -9,067 -22,123 7,490 1,00 61,18 C

ATOM 1128 CGI VAL В 57 -8,169 -21,243 8,361 1,00 61,69 C

ATOM 1129 CG2 VAL В 57 -10,480 -22,183 8,063 1,00 57,87 C

ATOM 1130 N PRO В 58 -7,278 -20,227 5,021 1,00 63,08 N

ATOM 1131 CA PRO В 58 -5,952 -20,011 4,412 1,00 65,68 C

ATOM 1132 C PRO В 58 -4,745 -20,491 5,234 1,00 70,54 C

ATOM 1133 О PRO В 58 -4,815 -20,562 6,460 1,00 68,54 О

ATOM 1134 CB PRO В 58 -5,914 -18,495 4,205 1,00 67,57C

ATOM 1135 CG PRO В 58 -7,318 -18,108 4,068 1,00 69,05C

ATOM 1136 CD PRO В 58 -8,033 -18,957 5,058 1,00 62,40C

ATOM 1137 N ALA В 59 -3,632 -20,796 4,535 1,00 70,63 N

ATOM 1138 CA ALA В 59 -2,378 -21,291 5,132 1,00 73,06 C

ATOM 1139 C ALA В 59 -1,738 -20,325 6,141 1,00 76,94 C

ATOM 1140 О ALA В 59 -0,988 -20,775 7,012 1,00 77,91 О

ATOM 1141 CB ALA В 59 -1,371 -21,620 4,035 1,00 77,06 C

ATOM 1142 N ARG В 60 -2,010 -19,005 6,013 1,00 71,54 N

- 120 043052

ATOM 1143 CA ARG В 60 -1,493 -17,995 6,944 1,00 71,68 C

ATOM 1144 C ARG В 60 -1,978 -18,201 8,384 1,00 73,05 C

ATOM 1145 О ARG В 60 -1,354 -17,669 9,298 1,00 74,05 О

ATOM 1146 CB ARG В 60 -1,822 -16,567 6,472 1,00 71,21C

ATOM 1147 CG ARG В 60 -3,305 -16,208 6,461 1,00 74,34C

ATOM 1148 CD ARG В 60 -3,505 -14,781 6,006 1,00 78,85C

ATOM 1149 NE ARG В 60 -4,898 -14,493 5,674 1,00 77,99N

ATOM 1150 CZ ARG В 60 -5,524 -14,853 4,555 1,00 87,93C

ATOM 1151 NH1 ARG В 60 -4,881 -15,533 3,608 1,00 76,36 N

ATOM 1152 NH2 ARG В 60 -6,800 -14,533 4,370 1,00 67,82 N

ATOM 1153 N ВНЕ В 61 -3,088 -18,948 8,588 1,00 66,10 N

ATOM 1154 CA PHE В 61 -3,597 -19,258 9,921 1,00 64,28C

ATOM 1155 С PHE В 61 -2,885 -20,476 10,488 1,00 69,61C

ATOM 1156 О PHE В 61 -2,547 -21,396 9,745 1,00 70,31 О

ATOM 1157 CB PHE В 61 -5,106 -19,540 9,894 1,00 62,73C

ATOM 1158 CG PHE В 61 -5,943 -18,297 9,759 1,00 62,60C

ATOM 1159 GDI PHE В 61 -6,368 -17,604 10,883 1,00 64,47 C

ATOM 1160 CD2 PHE В 61 -6,301 -17,815 8,508 1,00 64,32 C

ATOM 1161 CE1 PHE В 61 -7,151 -16,457 10,758 1,00 64,38 C

ATOM 1162 CE2 PHE В 61 -7,079 -16,670 8,384 1,00 65,84 C

ATOM 1163 CZ PHE В 61 -7,497 -15,994 9,509 1,00 63,15 C

ATOM 1164 N SER В 62 -2,678 -20,487 11,806 1,00 66,32 N

ATOM 1165 CA SER В 62 -2,061 -21,614 12,499 1,00 67,24 C

ATOM 1166 C SER В 62 -2,434 -21,592 13,972 1,00 69,68C

ATOM 1167 О SER В 62 -2,704 -20,526 14,521 1,00 69,05О

ATOM 1168 CB SER В 62 -0,542 -21,602 12,332 1,00 74,31 C

ATOM 1169 OG SER В 62 0,052 -20,447 12,904 1,00 85,34О

ATOM 1170 N GLY В 63 -2,459 -22,771 14,602 1,00 65,57N

ATOM 1171 CA GLY В 63 -2,791 -22,909 16,014 1,00 64,13 C

ATOM 1172 C GLY В 63 -1,791 -23,831 16,702 1,00 70,06C

ATOM 1173 О GLY В 63 -1,291 -24,772 16,088 1,00 70,03О

ATOM 1174 N SER В 64 -1,483 -23,533 17,969 1,00 67,66N

ATOM 1175 CA SER В 64 -0,557 -24,305 18,792 1,00 69,46 C

ATOM 1176 C SER В 64 -0,968 -24,184 20,254 1,00 72,46C

ATOM 1177 О SER В 64 -1,911 -23,456 20,567 1,00 70,44О

ATOM 1178 CB SER В 64 0,875 -23,801 18,600 1,00 77,56 C

- 121 043052

ATOM 1179 OG SER В 64 1,076 -22,504 19,141 1,00 86,08О

ATOM 1180 N GLY В 65 -0,266 -24,887 21,146 1,00 71,07N

ATOM 1181 CA GLY В 65 -0,564 -24,838 22,572 1,00 70,85 C

ATOM 1182 C GLY В 65 -0,349 -26,161 23,270 1,00 75,44C

ATOM 1183 О GLY В 65 -0,241 -27,212 22,635 1,00 74,06О

ATOM 1184 N SER В 66 -0,318 -26,100 24,595 1,00 74,55N

ATOM 1185 CA SER В 66 -0,084 -27,265 25,435 1,00 76,47 C

ATOM 1186 C SER В 66 -0,573 -26,987 26,858 1,00 81,99C

ATOM 1187 О SER В 66 -0,439 -25,863 27,346 1,00 83,12О

ATOM 1188 CB SER В 66 1,412 -27,586 25,451 1,00 83,75C

ATOM 1189 OG SER В 66 1,732 -28,667 26,311 1,00 94,88О

ATOM 1190 N GLY В 67 -1,130 -28,014 27,516 1,00 77,57N

ATOM 1191 CA GLY В 67 -1,587 -27,938 28,901 1,00 77,30 C

ATOM 1192 C GLY В 67 -2,581 -26,821 29,210 1,00 78,60C

ATOM 1193 О GLY В 67 -3,778 -27,002 29,010 1,00 74,79О

ATOM 1194 N THR В 68 -2,084 -25,682 29,723 1,00 77,44N

ATOM 1195 CA THR В 68 -2,912 -24,563 30,180 1,00 76,28 C

ATOM 1196 C THR В 68 -2,919 -23,336 29,241 1,00 79,65 C

ATOM 1197 О THR В 68 -3,811 -22,505 29,399 1,00 77,30 О

ATOM 1198 CB THR В 68 -2,471 -24,196 31,623 1,00 89,54 C

ATOM 1199 OGI THR В 68 -3,619 -23,956 32,434 1,00 89,46 О

ATOM 1200 CG2 THR В 68 -1,510 -23,008 31,695 1,00 91,77 C

ATOM 1201 N ASP В 69 -1,945 -23,192 28,312 1,00 77,83 N

ATOM 1202 CA ASP В 69 -1,855 -22,026 27,418 1,00 77,02 C

ATOM 1203 C ASP В 69 -1,973 -22,433 25,949 1,00 78,50 C

ATOM 1204 О ASP В 69 -1,252 -23,329 25,511 1,00 80,10 О

ATOM 1205 CB ASP В 69 -0,532 -21,282 27,653 1,00 82,57 C

ATOM 1206 CG ASP В 69 -0,404 -20,722 29,054 1,00 96,01 C

ATOM 1207 OD1 ASP В 69 -1,224 -19,854 29,423 1,00 95,53 О

ATOM 1208 OD2 ASP В 69 0,510 -21,157 29,785 1,00106,12 О

ATOM 1209 N TYR В 70 -2,890 -21,780 25,197 1,00 70,97 N

ATOM 1210 CA TYR В 70 -3,147 -22,053 23,777 1,00 68,56 C

ATOM 1211 C TYR В 70 -3,176 -20,765 22,956 1,00 73,46 C

ATOM 1212 О TYR В 70 -3,391 -19,688 23,517 1,00 73,56 О

ATOM 1213 CB TYR В 70 -4,463 -22,830 23,619 1,00 65,52 C

ATOM 1214 CG TYR В 70 -4,297 -24,297 23,937 1,00 65,72 C

- 122 043052

ATOM 1215 GDI TYR В 70 -4,220 -24,739 25,252 1,00 67,72C

ATOM 1216 CD2 TYR В 70 -4,123 -25,232 22,926 1,00 65,72C

ATOM 1217 CE1 TYR В 70 -3,976 -26,073 25,551 1,00 67,27C

ATOM 1218 CE2 TYR В 70 -3,886 -26,573 23,214 1,00 66,49C

ATOM 1219 CZ TYR В 70 -3,828 -26,993 24,531 1,00 72,77 C

ATOM 1220 OH TYR В 70 -3,617 -28,316 24,842 1,00 73,72 О

ATOM 1221 N SER В 71 -2,924 -20,868 21,632 1,00 70,12 N

ATOM 1222 CA SER В 71 -2,878 -19,692 20,758 1,00 70,18 C

ATOM 1223 C SER В 71 -3,355 -19,946 19,329 1,00 71,24 C

ATOM 1224 О SER В 71 -3,308 -21,073 18,841 1,00 69,77 О

ATOM 1225 CB SER В 71 -1,452 -19,147 20,684 1,00 77,69 C

ATOM 1226 OG SER В 71 -0,894 -18,886 21,961 1,00 90,01 О

ATOM 1227 N LEU В 72 -3,774 -18,857 18,656 1,00 66,31 N

ATOM 1228 CA LEU В 72 -4,166 -18,827 17,245 1,00 64,79 C

ATOM 1229 C LEU В 72 -3,331 -17,692 16,640 1,00 70,72 C

ATOM 1230 О LEU В 72 -3,393 -16,572 17,149 1,00 71,03 О

ATOM 1231 CB LEU В 72 -5,676 -18,560 17,090 1,00 61,72 C

ATOM 1232 CG LEU В 72 -6,245 -18,564 15,651 1,00 64,98 C

ATOM 1233 GDI LEU В 72 -7,662 -19,108 15,623 1,00 61,85 C

ATOM 1234 CD2 LEU В 72 -6,256 -17,157 15,027 1,00 66,99 C

ATOM 1235 N THR В 73 -2,517 -17,984 15,603 1,00 68,65 N

ATOM 1236 CA THR В 73 -1,624 -16,999 14,978 1,00 70,53 C

ATOM 1237 C THR В 73 -1,968 -16,754 13,501 1,00 73,74 C

ATOM 1238 О THR В 73 -2,367 -17,680 12,800 1,00 72,13 О

ATOM 1239 CB THR В 73 -0,162 -17,471 15,160 1,00 79,88C

ATOM 1240 OGI THR В 73 0,157 -17,433 16,549 1,00 81,62О

ATOM 1241 CG2 THR В 73 0,857 -16,624 14,394 1,00 79,28C

ATOM 1242 N ILE В 74 -1,778 -15,505 13,030 1,00 71,50 N

ATOM 1243 CA ILE В 74 -1,980 -15,113 11,628 1,00 71,40 C

ATOM 1244 C ILE В 74 -0,664 -14,464 11,194 1,00 79,41 C

ATOM 1245 О ILE В 74 -0,290 -13,440 11,761 1,00 79,98 О

ATOM 1246 CB ILE В 74 -3,197 -14,168 11,438 1,00 71,75 C

ATOM 1247 CGI ILE В 74 -4,418 -14,696 12,228 1,00 68,88 C

ATOM 1248 CG2 ILE В 74 -3,526 -14,020 9,941 1,00 71,80 C

ATOM 1249 GDI ILE В 74 -5,588 -13,837 12,206 1,00 73,61 C

ATOM 1250 N SER В 75 0,071 -15,090 10,252 1,00 78,64 N

- 123 043052

ATOM 1251 CA SER В 75 1,388 -14,603 9,817 1,00 82,42 C

ATOM 1252 C SER В 75 1,347 -13,211 9,178 1,00 87,14 C

ATOM 1253 О SER В 75 2,162 -12,356 9,533 1,00 88,95 О

ATOM 1254 CB SER В 75 2,051 -15,607 8,875 1,00 87,62C

ATOM 1255 OG SER В 75 1,248 -15,869 7,737 1,00 94,12О

ATOM 1256 N SER В 76 0,401 -12,988 8,252 1,00 82,09 N

ATOM 1257 CA SER В 76 0,217 -11,700 7,567 1,00 82,20C

ATOM 1258 C SER В 76 -1,282 -11,441 7,393 1,00 82,22C

ATOM 1259 О SER В 76 -1,908 -12,063 6,537 1,00 80,72О

ATOM 1260 CB SER В 76 0,920 -11,708 6,211 1,00 88,43C

ATOM 1261 OG SER В 76 0,681 -10,512 5,486 1,00 96,36О

ATOM 1262 N LEU В 77 -1,850 -10,528 8,209 1,00 76,84N

ATOM 1263 CA LEU В 77 -3,283 -10,196 8,203 1,00 72,92 C

ATOM 1264 C LEU В 77 -3,815 -9,691 6,857 1,00 77,19 C

ATOM 1265 О LEU В 77 -3,216 -8,799 6,259 1,00 78,61 О

ATOM 1266 CB LEU В 77 -3,589 -9,118 9,261 1,00 72,06 C

ATOM 1267 CG LEU В 77 -3,456 -9,526 10,722 1,00 76,55 C

ATOM 1268 CDI LEU В 77 -3,193 -8,312 11,600 1,00 77,54 C

ATOM 1269 CD2 LEU В 77 -4,691 -10,251 11,198 1,00 75,30 C

ATOM 1270 N GLU В 78 -4,972 -10,225 6,424 1,00 72,28 N

ATOM 1271 CA GLU В 78 -5,711 -9,801 5,229 1,00 71,21 C

ATOM 1272 C GLU В 78 -7,040 -9,187 5,736 1,00 70,61 C

ATOM 1273 О GLU В 78 -7,466 -9,537 6,843 1,00 68,30 О

ATOM 1274 CB GLU В 78 -6,026 -10,996 4,312 1,00 72,49C

ATOM 1275 CG GLU В 78 -4,812 -11,635 3,656 1,00 87,48C

ATOM 1276 CD GLU В 78 -4,022 -10,763 2,703 1,00112,73C

ATOM 1277 OE1 GLU В 78 -4,620 -9,856 2,080 1,00110,91О

ATOM 1278 OE2 GLU В 78 -2,805 -11,016 2,551 1,00112,15 О

ATOM 1279 N PRO В 79 -7,706 -8,302 4,944 1,00 65,02 N

ATOM 1280 CA PRO В 79 -8,970 -7,679 5,373 1,00 61,28C

ATOM 1281 C PRO В 79 -10,086 -8,645 5,834 1,00 60,72C

ATOM 1282 О PRO В 79 -10,835 -8,311 6,751 1,00 58,19О

ATOM 1283 CB PRO В 79 -9,396 -6,879 4,140 1,00 62,94C

ATOM 1284 CG PRO В 79 -8,135 -6,506 3,486 1,00 70,44C

ATOM 1285 CD PRO В 79 -7,172 -7,637 3,736 1,00 68,02C

ATOM 1286 N GLU В 80 -10,194 -9,824 5,203 1,00 56,30N

- 124 043052

ATOM 1287 CA GLU В 80 -11,226 -10,813 5,534 1,00 53,71 C

ATOM 1288 C GLU В 80 -11,016 -11,525 6,900 1,00 56,40 C

ATOM 1289 О GLU В 80 -11,966 -12,110 7,424 1,00 53,35 О

ATOM 1290 CB GLU В 80 -11,337 -11,857 4,403 1,00 55,59 C

ATOM 1291 CG GLU В 80 -10,193 -12,863 4,378 1,00 68,69 C

ATOM 1292 CD GLU В 80 -9,827 -13,412 3,013 1,00 97,64 C

ATOM 1293 OE1 GLU В 80 -8,829 -12,932 2,427 1,00100,61 О

ATOM 1294 OE2 GLU В 80 -10,516 -14,347 2,544 1,00 91,35 О

ATOM 1295 N ASP В 81 -9,797 -11,485 7,464 1,00 54,10 N

ATOM 1296 CA ASP В 81 -9,474 -12,158 8,733 1,00 53,36 C

ATOM 1297 C ASP В 81 -10,008 -11,455 9,967 1,00 56,43 C

ATOM 1298 О ASP В 81 -10,130 -12,090 11,016 1,00 55,62 О

ATOM 1299 CB ASP В 81 -7,949 -12,273 8,904 1,00 57,40 C

ATOM 1300 CG ASP В 81 -7,242 -12,953 7,763 1,00 64,20 C

ATOM 1301 OD1 ASP В 81 -7,891 -13,751 7,049 1,00 63,36 О

ATOM 1302 OD2 ASP В 81 -6,048 -12,665 7,554 1,00 71,18 О

ATOM 1303 N РНЕ В 82 -10,268 -10,151 9,878 1,00 52,95 N

ATOM 1304 CA РНЕ В 82 -10,706 -9,365 11,027 1,00 51,87 C

ATOM 1305 С РНЕ В 82 -12,131 -9,787 11,419 1,00 52,04 C

ATOM 1306 О РНЕ В 82 -13,036 -9,733 10,591 1,00 50,63 О

ATOM 1307 СВ РНЕ В 82 -10,553 -7,861 10,735 1,00 54,14 С

АТОМ 1308 CG РНЕ В 82 -9,102 -7,462 10,536 1,00 58,34 С

АТОМ 1309 CD1 РНЕ В 82 -8,307 -7,110 11,615 1,00 62,40 С

АТОМ 1310 CD2 РНЕ В 82 -8,537 -7,435 9,269 1,00 61,95 С

АТОМ 1311 СЕ1 РНЕ В 82 -6,971 -6,754 11,435 1,00 65,79 С

АТОМ 1312 СЕ2 РНЕ В 82 -7,199 -7,073 9,089 1,00 67,27 С

АТОМ 1313 CZ РНЕ В 82 -6,428 -6,725 10,173 1,00 66,48 С

АТОМ 1314 N ALA В 83 -12,285 -10,316 12,648 1,00 46,96 N

АТОМ 1315 CA ALA В 83 -13,532 -10,898 13,174 1,00 44,03 С

АТОМ 1316 С ALA В 83 -13,345 -11,212 14,673 1,00 47,01 С

АТОМ 1317 О ALA В 83 -12,292 -10,889 15,225 1,00 48,83 О

АТОМ 1318 СВ ALA В 83 -13,837 -12,202 12,423 1,00 43,57 С

АТОМ 1319 N VAL В 84 -14,340 -11,848 15,324 1,00 41,13 N

АТОМ 1320 CA VAL В 84 -14,216 -12,290 16,722 1,00 40,65 С

АТОМ 1321 С VAL В 84 -13,793 -13,754 16,685 1,00 44,54 С

АТОМ 1322 О VAL В 84 -14,269 -14,500 15,831 1,00 43,86 О

- 125 043052

ATOM 1323 CB VAL В 84 -15,510 -12,086 17,558 1,00 41,88 C

ATOM 1324 CGI VAL В 84 -15,368 -12,686 18,961 1,00 41,89 C

ATOM 1325 CG2 VAL В 84 -15,860 -10,604 17,656 1,00 40,84 C

ATOM 1326 N TYR В 85 -12,893 -14,159 17,588 1,00 42,41 N

ATOM 1327 CA TYR В 85 -12,420 -15,541 17,671 1,00 42,97 C

ATOM 1328 C TYR В 85 -12,637 -16,085 19,063 1,00 48,03 C

ATOM 1329 О TYR В 85 -12,177 -15,468 20,020 1,00 49,51 О

ATOM 1330 CB TYR В 85 -10,939 -15,628 17,307 1,00 45,67C

ATOM 1331 CG TYR В 85 -10,707 -15,379 15,838 1,00 45,85C

ATOM 1332 CDI TYR В 85 -10,551 -14,087 15,348 1,00 47,32C

ATOM 1333 CD2 TYR В 85 -10,708 -16,426 14,926 1,00 45,53C

ATOM 1334 CE1 TYR В 85 -10,359 -13,848 13,993 1,00 47,60C

ATOM 1335 CE2 TYR В 85 -10,518 -16,201 13,567 1,00 46,72C

ATOM 1336 CZ TYR В 85 -10,336 -14,909 13,102 1,00 53,44C

ATOM 1337 OH TYR В 85 -10,188 -14,702 11,751 1,00 51,93О

ATOM 1338 N TYR В 86 -13,323 -17,236 19,182 1,00 43,51 N

ATOM 1339 CA TYR В 86 -13,582 -17,888 20,470 1,00 43,19 C

ATOM 1340 C TYR В 86 -12,844 -19,192 20,544 1,00 47,49 C

ATOM 1341 О TYR В 86 -12,954 -19,977 19,609 1,00 45,45 О

ATOM 1342 CB TYR В 86 -15,072 -18,211 20,631 1,00 41,61C

ATOM 1343 CG TYR В 86 -15,977 -17,004 20,629 1,00 40,75C

ATOM 1344 CDI TYR В 86 -16,332 -16,376 21,813 1,00 42,52C

ATOM 1345 CD2 TYR В 86 -16,554 -16,546 19,450 1,00 39,56C

ATOM 1346 CE1 TYR В 86 -17,226 -15,309 21,827 1,00 43,46C

ATOM 1347 CE2 TYR В 86 -17,443 -15,475 19,448 1,00 39,13C

ATOM 1348 CZ TYR В 86 -17,763 -14,845 20,638 1,00 46,08C

ATOM 1349 OH TYR В 86 -18,644 -13,793 20,669 1,00 45,53О

ATOM 1350 N CYS В 87 -12,158 -19,466 21,668 1,00 47,69 N

ATOM 1351 CA CYS В 87 -11,518 -20,760 21,891 1,00 48,62 C

ATOM 1352 C CYS В 87 -12,560 -21,608 22,630 1,00 49,15 C

ATOM 1353 О CYS В 87 -13,528 -21,055 23,154 1,00 46,52 О

ATOM 1354 CB CYS В 87 -10,190 -20,652 22,652 1,00 52,40 C

ATOM 1355 SG CYS В 87 -10,286 -19,868 24,288 1,00 57,94 S

ATOM 1356 N GLN В 88 -12,424 -22,936 22,593 1,00 45,22 N

ATOM 1357 CA GLN В 88 -13,372 -23,849 23,241 1,00 42,45 C

ATOM 1358 C GLN В 88 -12,691 -25,152 23,625 1,00 46,38 C

- 126 043052

АТОМ

1359

GLN В 88 -11,897 -25,674 22,843 1,00 47,02 О

АТОМ

1360

СВ

GLN

-14,529

-24,155

22,280

1, 00

40, 68

АТОМ

1361

CG

GLN

-15,647

-25,055

22,846

1,00

42, 62

АТОМ

1362

CD

GLN

-15,772

-26,410

22,162

1,00

51,06

АТОМ

1363

ОЕ1 GLN

В 88 -15,816 -26,515 20,933 1,00 42,02 О

АТОМ

1364

NE2 GLN

В 88 -15,948 -27,479 22,927 1,00 41,44 N

АТОМ

1365

N GLN В

-13,041 -25,708 24,797 1,00 42,41 N

АТОМ

1366

CA GLN В 89 -12,504 -26,993 25,248 1,00 42,78 С

АТОМ

1367

С GLN В 89 -13,621 -28,045 25,323 1,00 45,27 С

АТОМ

1368

О GLN В 89 -14,790 -27,709 25,533 1,00 42,06 О

АТОМ

1369

СВ

GLN

-11,731

-26, 856

26, 583

1,00

45,86

АТОМ

1370

CG

GLN

-12,566

-26, 473

27,816

1,00

48,91

АТОМ

1371

CD

GLN

-13,360

-27,612

28,428

1,00

58,10

АТОМ

1372

ОЕ1 GLN

В 89 -12,980 -28,785 28,353 1,00 50,12 О

АТОМ

1373

NE2 GLN

В 89 -14,473 -27,295 29,079 1,00 46,79 N

АТОМ

1374

N TRP В

-13,240 -29,317 25,149 1,00 43,48 N

АТОМ

1375

CA TRP В 90 -14,143 -30,472 25,206 1,00 42,34 С

АТОМ

1376

С TRP В 90 -13,533 -31,605 26,079 1,00 48,13 С

АТОМ

1377

О TRP В 90 -13,926 -32,759 25,939 1,00 47,04 О

АТОМ

1378

СВ TRP В 90 -14,479 -30,972 23,778 1,00 39,82 С

АТОМ

1379

CG TRP В 90 -13,291 -31,452 22,996 1,00 42,22 С

АТОМ

1380

CD1

TRP

-12,282

-30,690

22,486

1,00

46,21

АТОМ

1381

CD2

TRP

-12,984

-32,808

22,650

1,00

42,49

АТОМ

1382

NE1

TRP

-11,355

-31,487

21,862

1,00

46, 65

АТОМ

1383

СЕ2

TRP

-11,761

-32,794

21,946

1,00

47,73

АТОМ

1384

СЕЗ

TRP

-13,644

-34,033

22,834

1,00

43,26

АТОМ

1385

CZ2

TRP

-11,184

-33,957

21,427

1,00

47,77

АТОМ

1386

CZ3

TRP

-13,064

-35,187

22,333

1,00

45,41

АТОМ

1387

СН2

TRP

-11,848

-35,143

21,641

1, 00

47,43

АТОМ

1388

N ASN В

-12,614 -31,261 27,004 1,00 47,97 N

АТОМ

1389

CA ASN В 91 -11,971 -32,226 27,903 1,00 50,26 С

АТОМ

1390

С ASN В 91 -12,892 -32,662 29,018 1,00 54,80 С

АТОМ

1391

О ASN В 91 -12,780 -33,797 29,489 1,00 53,62 О

АТОМ

1392

СВ ASN В 91 -10,692 -31,638 28,519 1,00 54,00 С

АТОМ

1393

CG ASN В 91 -9,549 -31,598 27,549 1,00 78,58 С

АТОМ

1394

OD1 ASN В 91 -9,320 -30,601 26,869 1,00 75,71 О

- 127 043052

ATOM 1395 ND2 ASN В 91 -8,840 -32,704 27,422 1,00 73,65 N

ATOM 1396 О SER В 92 -15,973 -30,214 29,820 1,00 53,47 О

ATOM 1397 N SER В 92 -13,750 -31,747 29,497 1,00 52,61 N

ATOM 1398 CA SER В 92 -14,671 -32,051 30,590 1,00 52,75 C

ATOM 1399 C SER В 92 -15,962 -31,270 30,446 1,00 53,91 C

ATOM 1400 CB SER В 92 -14,018 -31,722 31,930 1,00 58,69 C

ATOM 1401 OG SER В 92 -13,721 -30,337 32,038 1,00 67,43 О

ATOM 1402 N TYR В 93 -17,048 -31,801 31,019 1,00 49,07 N

ATOM 1403 CA TYR В 93 -18,350 -31,144 31,006 1,00 47,17 C

ATOM 1404 C TYR В 93 -18,430 -30,177 32,203 1,00 50,89 C

ATOM 1405 О TYR В 93 -17,932 -30,514 33,281 1,00 51,68 О

ATOM 1406 CB TYR В 93 -19,496 -32,162 31,091 1,00 47,60C

ATOM 1407 CG TYR В 93 -19,624 -33,024 29,857 1,00 48,53C

ATOM 1408 GDI TYR В 93 -19,987 -32,475 28,633 1,00 48,47C

ATOM 1409 CD2 TYR В 93 -19,428 -34,399 29,922 1,00 50,28C

ATOM 1410 CE1 TYR В 93 -20,128 -33,267 27,495 1,00 48,36C

ATOM 1411 CE2 TYR В 93 -19,573 -35,205 28,793 1,00 50,27C

ATOM 1412 CZ TYR В 93 -19,929 -34,636 27,580 1,00 52,39C

ATOM 1413 OH TYR В 93 -20,053 -35,409 26,449 1,00 47,02О

ATOM 1414 N PRO В 94 -19,053 -28,994 32,034 1,00 45,75 N

ATOM 1415 CA PRO В 94 -19,670 -28,475 30,807 1,00 43,75 C

ATOM 1416 C PRO В 94 -18,618 -27,971 29,813 1,00 46,73 C

ATOM 1417 О PRO В 94 -17,566 -27,486 30,232 1,00 47,63 О

ATOM 1418 CB PRO В 94 -20,561 -27,334 31,324 1,00 45,47C

ATOM 1419 CG PRO В 94 -19,843 -26,838 32,548 1,00 51,32C

ATOM 1420 CD PRO В 94 -19,241 -28,071 33,172 1,00 47,46C

ATOM 1421 N РНЕ В 95 -18,877 -28,116 28,496 1,00 40,21 N

ATOM 1422 CA РНЕ В 95 -17,969 -27,570 27,485 1,00 39,48 C

ATOM 1423 С РНЕ В 95 -18,007 -26,068 27,663 1,00 43,23 C

ATOM 1424 О РНЕ В 95 -19,069 -25,524 27,959 1,00 41,42 О

ATOM 1425 СВ РНЕ В 95 -18,397 -27,951 26,059 1,00 39,28 С

АТОМ 1426 CG РНЕ В 95 -18,239 -29,399 25,644 1,00 40,62 С

АТОМ 1427 CD1 РНЕ В 95 -17,686 -30,340 26,511 1,00 44,44С

АТОМ 1428 CD2 РНЕ В 95 -18,659 -29,827 24,394 1,00 41,19С

АТОМ 1429 СЕ1 РНЕ В 95 -17,507 -31,660 26,107 1,00 45,39С

АТОМ 1430 СЕ2 РНЕ В 95 -18,494 -31,153 24,001 1,00 43,39С

- 128 043052

ATOM 1431 CZ РНЕ В 95 -17,911 -32,057 24,857 1,00 42,95 С

ATOM 1432 N THR В 96 -16,855 -25,407 27,572 1,00 41,95 N

ATOM 1433 CA THR В 96 -16,784 -23,968 27,795 1,00 42,74 C

ATOM 1434 C THR В 96 -16,094 -23,273 26,668 1,00 47,87 C

ATOM 1435 О THR В 96 -15,230 -23,845 26,011 1,00 48,17 О

ATOM 1436 CB THR В 96 -16,095 -23,646 29,123 1,00 48,68 C

ATOM 1437 OGI THR В 96 -14,905 -24,428 29,244 1,00 48,40 О

ATOM 1438 CG2 THR В 96 -16,998 -23,889 30,307 1,00 47,75 C

ATOM 1439 N РНЕ В 97 -16,462 -22,013 26,477 1,00 43,76 N

ATOM 1440 CA РНЕ В 97 -15,899 -21,142 25,466 1,00 43,33 C

ATOM 1441 С РНЕ В 97 -15,188 -20,007 26,161 1,00 50,88 C

ATOM 1442 О РНЕ В 97 -15,564 -19,625 27,271 1,00 51,63 О

ATOM 1443 СВ РНЕ В 97 -17,023 -20,552 24,605 1,00 42,06 С

АТОМ 1444 CG РНЕ В 97 -17,737 -21,534 23,708 1,00 40,37 С

АТОМ 1445 CD1 РНЕ В 97 -17,321 -21,728 22,397 1,00 40,99С

АТОМ 1446 CD2 РНЕ В 97 -18,901 -22,164 24,129 1,00 39,39С

АТОМ 1447 СЕ1 РНЕ В 97 -18,026 -22,572 21,542 1,00 39,83С

АТОМ 1448 СЕ2 РНЕ В 97 -19,613 -22,996 23,267 1,00 39,99С

АТОМ 1449 CZ РНЕ В 97 -19,163 -23,206 21,985 1,00 37,63 С

АТОМ 1450 N GLY В 98 -14,202 -19,425 25,494 1,00 49,49 N

АТОМ 1451 CA GLY В 98 -13,544 -18,227 26,001 1,00 51,19 С

АТОМ 1452 С GLY В 98 -14,500 -17,039 25,742 1,00 52,41С

АТОМ 1453 О GLY В 98 -15,479 -17,187 25,010 1,00 47,63О

АТОМ 1454 N GLN В 99 -14,237 -15,881 26,362 1,00 50,95N

АТОМ 1455 CA GLN В 99 -15,097 -14,696 26,206 1,00 48,95 С

АТОМ 1456 С GLN В 99 -15,001 -14,060 24,797 1,00 51,79 С

АТОМ 1457 О GLN В 99 -15,858 -13,248 24,437 1,00 50,22 О

АТОМ 1458 СВ GLN В 99 -14,835 -13,670 27,332 1,00 51,64С

АТОМ 1459 CG GLN В 99 -13,528 -12,869 27,232 1,00 68,39С

АТОМ 1460 CD GLN В 99 -12,368 -13,491 27,964 1,00 85,35С

АТОМ 1461 ОЕ1 GLN В 99 -12,224 -14,721 28,017 1,00 76,51О

АТОМ 1462 NE2 GLN В 99 -11,464 -12,665 28,473 1,00 81,45N

АТОМ 1463 N GLY В 100 -13,963 -14,416 24,017 1,00 48,68 N

АТОМ 1464 CA GLY В 100 -13,786 -13,935 22,652 1,00 47,98 С

АТОМ 1465 С GLY В 100 -12,769 -12,800 22,563 1,00 54,37 С

АТОМ 1466 О GLY В 100 -12,646 -11,999 23,490 1,00 55,57 О

- 129 043052

ATOM 1467 N THR В 101 -12,051 -12,737 21,434 1,00 51,18 N

ATOM 1468 CA THR В 101 -11,072 -11,694 21,142 1,00 52,85 C

ATOM 1469 C THR В 101 -11,459 -11,061 19,815 1,00 55,49 C

ATOM 1470 О THR В 101 -11,479 -11,759 18,800 1,00 54,25 О

ATOM 1471 CB THR В 101 -9,657 -12,288 21,088 1,00 59,98 C

ATOM 1472 OGI THR В 101 -9,238 -12,578 22,418 1,00 58,56 О

ATOM 1473 CG2 THR В 101 -8,639 -11,352 20,423 1,00 60,05 C

ATOM 1474 N LYS В 102 -11,749 -9,752 19,808 1,00 51,10 N

ATOM 1475 CA LYS В 102 -12,081 -9,066 18,561 1,00 49,56 C

ATOM 1476 C LYS В 102 -10,785 -8,679 17,860 1,00 55,44 C

ATOM 1477 О LYS В 102 -10,052 -7,823 18,352 1,00 56,75 О

ATOM 1478 CB LYS В 102 -12,957 -7,818 18,794 1,00 50,04C

ATOM 1479 CG LYS В 102 -13,420 -7,168 17,489 1,00 50,49C

ATOM 1480 CD LYS В 102 -14,335 -5,972 17,713 1,00 55,49C

ATOM 1481 CE LYS В 102 -14,869 -5,432 16,407 1,00 63,54C

ATOM 1482 NZ LYS В 102 -15,701 -4,212 16,594 1,00 70,94N

ATOM 1483 N LEU В 103 -10,503 -9,321 16,718 1,00 51,50 N

ATOM 1484 CA LEU В 103 -9,348 -8,997 15,892 1,00 52,92 C

ATOM 1485 C LEU В 103 -9,859 -7,856 15,011 1,00 56,83 C

ATOM 1486 О LEU В 103 -10,659 -8,077 14,099 1,00 55,12 О

ATOM 1487 CB LEU В 103 -8,896 -10,225 15,088 1,00 53,04C

ATOM 1488 CG LEU В 103 -7,818 -10,012 14,047 1,00 59,35C

ATOM 1489 GDI LEU В 103 -6,578 -9,370 14,644 1,00 62,10 C

ATOM 1490 CD2 LEU В 103 -7,470 -11,318 13,391 1,00 60,99C

ATOM 1491 N GLU В 104 -9,461 -6,624 15,368 1,00 54,35 N

ATOM 1492 CA GLU В 104 -9,941 -5,362 14,801 1,00 52,67 C

ATOM 1493 C GLU В 104 -8,902 -4,667 13,895 1,00 59,92 C

ATOM 1494 О GLU В 104 -7,704 -4,819 14,125 1,00 62,89 О

ATOM 1495 CB GLU В 104 -10,306 -4,472 16,000 1,00 53,24C

ATOM 1496 CG GLU В 104 -11,095 -3,228 15,665 1,00 60,41C

ATOM 1497 CD GLU В 104 -10,419 -1,909 15,975 1,00 77,51C

ATOM 1498 OE1 GLU В 104 -9,176 -1,816 15,854 1,00 73,51О

ATOM 1499 OE2 GLU В 104 -11,143 -0,959 16,346 1,00 65,92 О

ATOM 1500 N ILE В 105 -9,352 -3,948 12,844 1,00 55,66 N

ATOM 1501 CA ILE В 105 -8,434 -3,263 11,918 1,00 58,22 C

ATOM 1502 C ILE В 105 -7,838 -2,002 12,552 1,00 63,24 C

- 130 043052

ATOM 1503 О ILE В 105 -8,589 -1,115 12,955 1,00 61,14 О

ATOM 1504 СВ ILE В 105 -9,109 -2,922 10,556 1,00 60,89 С

АТОМ 1505 CGI ILE В 105 -9,492 -4,210 9,816 1,00 60,92 С

АТОМ 1506 CG2 ILE В 105 -8,161 -2,075 9,682 1,00 64,50 С

АТОМ 1507 GDI ILE В 105 -10,268 -4,039 8,503 1,00 70,71 С

АТОМ 1508 N LYS В 106 -6,495 -1,884 12,551 1,00 63,25 N

АТОМ 1509 CA LYS В 106 -5,810 -0,686 13,041 1,00 65,26 С

АТОМ 1510 С LYS В 106 -5,658 0,221 11,842 1,00 70,42 С

АТОМ 1511 О LYS В 106 -5,169 -0,195 10,787 1,00 71,21 О

АТОМ 1512 СВ LYS В 106 -4,453 -0,972 13,683 1,00 70,36 С

АТОМ 1513 CG LYS В 106 -3,914 0,227 14,467 1,00 85,15 С

АТОМ 1514 CD LYS В 106 -2,697 -0,113 15,335 1,00 99,27 С

АТОМ 1515 СЕ LYS В 106 -2,774 0,524 16,703 1,00111,93 С

АТОМ 1516 NZ LYS В 106 -1,600 0,181 17,549 1,00126,28 N

АТОМ 1517 N ARG В 107 -6,111 1,453 12,007 1,00 66,11 N

АТОМ 1518 CA ARG В 107 -6,185 2,465 10,973 1,00 65,54 С

АТОМ 1519 С ARG В 107 -5,486 3,722 11,451 1,00 70,00 С

АТОМ 1520 О ARG В 107 -5,151 3,820 12,635 1,00 70,45 О

АТОМ 1521 СВ ARG В 107 -7,676 2,770 10,767 1,00 63,82 С

АТОМ 1522 CG ARG В 107 -8,080 2,936 9,334 1,00 71,44С

АТОМ 1523 CD ARG В 107 -9,246 3,880 9,209 1,00 69,88С

АТОМ 1524 NE ARG В 107 -8,786 5,273 9,205 1,00 77,15N

АТОМ 1525 CZ ARG В 107 -9,155 6,218 8,338 1,00 91,04С

АТОМ 1526 NH1 ARG В 107 -10,041 5,954 7,382 1,00 76,11 N

АТОМ 1527 NH2 ARG В 107 -8,647 7,441 8,431 1,00 81,81 N

АТОМ 1528 N THR В 108 -5,310 4,706 10,559 1,00 66,82 N

АТОМ 1529 CA THR В 108 -4,753 5,990 10,971 1,00 69,09 С

АТОМ 1530 С THR В 108 -5,872 6,696 11,738 1,00 71,48 С

АТОМ 1531 О THR В 108 -7,053 6,506 11,419 1,00 67,72 О

АТОМ 1532 СВ THR В 108 -4,261 6,817 9,772 1,00 79,28 С

АТОМ 1533 OGI THR В 108 -5,305 6,925 8,800 1,00 76,46 О

АТОМ 1534 CG2 THR В 108 -3,018 6,225 9,135 1,00 81,09 С

АТОМ 1535 N VAL В 109 -5,512 7,458 12,777 1,00 69,90 N

АТОМ 1536 CA VAL В 109 -6,497 8,166 13,592 1,00 67,67 С

АТОМ 1537 С VAL В 109 -7,332 9,092 12,703 1,00 70,41 С

АТОМ 1538 О VAL В 109 -6,775 9,815 11,872 1,00 72,05 О

- 131 043052

ATOM 1539 CB VAL В 109 -5,821 8,935 14,758 1,00 73,33 C

ATOM 1540 CGI VAL В 109 -6,773 9,952 15,396 1,00 71,74 C

ATOM 1541 CG2 VAL В 109 -5,293 7,959 15,806 1,00 73,97 C

ATOM 1542 N ALA В 110 -8,662 9,040 12,867 1,00 62,90 N

ATOM 1543 CA ALA В 110 -9,602 9,877 12,127 1,00 61,06 C

ATOM 1544 C ALA В 110 -10,496 10,573 13,134 1,00 64,18 C

ATOM 1545 О ALA В 110 -11,096 9,905 13,968 1,00 63,18 О

ATOM 1546 CB ALA В 110 -10,440 9,018 11,196 1,00 59,63C

ATOM 1547 N ALA В 111 -10,567 11,904 13,086 1,00 62,07N

ATOM 1548 CA ALA В 111 -11,396 12,672 14,016 1,00 61,29 C

ATOM 1549 C ALA В 111 -12,875 12,567 13,619 1,00 61,25C

ATOM 1550 О ALA В 111 -13,164 12,492 12,424 1,00 59,38О

ATOM 1551 CB ALA В 111 -10,972 14,135 14,006 1,00 64,06 C

ATOM 1552 N PRO В 112 -13,809 12,588 14,595 1,00 57,11 N

ATOM 1553 CA PRO В 112 -15,230 12,525 14,248 1,00 54,57 C

ATOM 1554 C PRO В 112 -15,769 13,860 13,745 1,00 57,94 C

ATOM 1555 О PRO В 112 -15,499 14,899 14,349 1,00 57,84 О

ATOM 1556 CB PRO В 112 -15,907 12,145 15,577 1,00 55,27 C

ATOM 1557 CG PRO В 112 -14,998 12,664 16,619 1,00 61,79 C

ATOM 1558 CD PRO В 112 -13,617 12,460 16,055 1,00 59,47 C

ATOM 1559 N SER В 113 -16,571 13,819 12,672 1,00 52,50 N

ATOM 1560 CA SER В 113 -17,291 14,996 12,197 1,00 51,51 C

ATOM 1561 C SER В 113 -18,548 14,963 13,071 1,00 51,97 C

ATOM 1562 О SER В 113 -19,288 13,970 13,036 1,00 49,85 О

ATOM 1563 CB SER В 113 -17,653 14,872 10,720 1,00 53,97 C

ATOM 1564 OG SER В 113 -16,477 14,810 9,930 1,00 66,05 О

ATOM 1565 N VAL В 114 -18,716 15,965 13,939 1,00 46,85 N

ATOM 1566 CA VAL В 114 -19,819 16,000 14,894 1,00 45,32 C

ATOM 1567 C VAL В 114 -20,995 16,802 14,324 1,00 48,58 C

ATOM 1568 О VAL В 114 -20,784 17,830 13,683 1,00 48,53 О

ATOM 1569 CB VAL В 114 -19,346 16,530 16,277 1,00 50,19 C

ATOM 1570 CGI VAL В 114 -20,440 16,375 17,338 1,00 48,89 C

ATOM 1571 CG2 VAL В 114 -18,077 15,805 16,728 1,00 51,02 C

ATOM 1572 N РНЕ В 115 -22,231 16,308 14,534 1,00 44,22 N

ATOM 1573 CA РНЕ В 115 -23,459 16,971 14,082 1,00 42,95 C

ATOM 1574 С РНЕ В 115 -24,507 16,871 15,190 1,00 46,54 C

- 132 043052

ATOM 1575 О РНЕ В 115 -24,619 15,819 15,812 1,00 46,20 О

АТОМ 1576 СВ РНЕ В 115 -24,014 16,310 12,798 1,00 43,15 С

АТОМ 1577 CG РНЕ В 115 -23,038 16,204 11,651 1,00 44,57 С

АТОМ 1578 GDI РНЕ В 115 -22,203 15,101 11,526 1,00 46,42С

АТОМ 1579 CD2 РНЕ В 115 -22,924 17,228 10,718 1,00 47,28С

АТОМ 1580 СЕ1 РНЕ В 115 -21,272 15,022 10,490 1,00 47,73С

АТОМ 1581 СЕ2 РНЕ В 115 -21,996 17,145 9,676 1,00 50,26 С

АТОМ 1582 CZ РНЕ В 115 -21,177 16,043 9,569 1,00 48,05С

АТОМ 1583 N ILE В 116 -25,284 17,940 15,425 1,00 42,16N

АТОМ 1584 СА ILE В 116 -26,345 17,930 16,435 1,00 41,52 С

АТОМ 1585 С ILE В 116 -27,683 18,171 15,742 1,00 44,82С

АТОМ 1586 О ILE В 116 -27,770 19,015 14,854 1,00 45,21О

АТОМ 1587 СВ ILE В 116 -26,083 18,901 17,620 1,00 45,51 С

АТОМ 1588 CGI ILE В 116 -27,075 18,616 18,773 1,00 44,96С

АТОМ 1589 CG2 ILE В 116 -26,120 20,383 17,175 1,00 47,17С

АТОМ 1590 GDI ILE В 116 -26,788 19,383 20,097 1,00 50,62С

АТОМ 1591 N РНЕ В 117 -28,719 17,415 16,130 1,00 40,34 N

АТОМ 1592 СА РНЕ В 117 -30,047 17,523 15,528 1,00 38,63 С

АТОМ 1593 С РНЕ В 117 -31,083 17,841 16,607 1,00 45,82 С

АТОМ 1594 О РНЕ В 117 -31,190 17,089 17,580 1,00 45,97 О

АТОМ 1595 СВ РНЕ В 117 -30,411 16,208 14,822 1,00 37,51 С

АТОМ 1596 CG РНЕ В 117 -29,438 15,813 13,741 1,00 37,97 С

АТОМ 1597 CD1 РНЕ В 117 -29,533 16,356 12,467 1,00 39,10С

АТОМ 1598 CD2 РНЕ В 117 -28,463 14,852 13,978 1,00 39,97С

АТОМ 1599 СЕ1 РНЕ В 117 -28,676 15,942 11,445 1,00 40,25С

АТОМ 1600 СЕ2 РНЕ В 117 -27,605 14,436 12,954 1,00 42,48С

АТОМ 1601 CZ РНЕ В 117 -27,710 14,993 11,696 1,00 40,72 С

АТОМ 1602 N PRO В 118 -31,841 18,946 16,455 1,00 45,09 N

АТОМ 1603 СА PRO В 118 -32,879 19,259 17,437 1,00 45,31 С

АТОМ 1604 С PRO В 118 -34,092 18,334 17,227 1,00 49,18 С

АТОМ 1605 О PRO В 118 -34,194 17,684 16,182 1,00 46,92 О

АТОМ 1606 СВ PRO В 118 -33,210 20,730 17,150 1,00 47,56С

АТОМ 1607 CG PRO В 118 -32,884 20,932 15,748 1,00 51,11С

АТОМ 1608 CD PRO В 118 -31,803 19,959 15,378 1,00 46,29С

АТОМ 1609 N PRO В 119 -35,008 18,255 18,209 1,00 48,02 N

АТОМ 1610 СА PRO В 119 -36,187 17,422 17,994 1,00 47,42 С

- 133 043052

ATOM 1611 C PRO В 119 -37,046 18,010 16,858 1,00 50,41 С

ATOM 1612 О PRO В 119 -37,065 19,219 16,645 1,00 51,03 О

АТОМ 1613 СВ PRO В 119 -36,912 17,449 19,350 1,00 50,01С

АТОМ 1614 CG PRO В 119 -36,196 18,448 20,190 1,00 55,19С

АТОМ 1615 CD PRO В 119 -35,195 19,151 19,367 1,00 50,65С

АТОМ 1616 N SER В 120 -37,724 17,149 16,127 1,00 46,48 N

АТОМ 1617 CA SER В 120 -38,611 17,562 15,045 1,00 45,63 С

АТОМ 1618 С SER В 120 -39,898 18,135 15,638 1,00 50,81 С

АТОМ 1619 О SER В 120 -40,253 17,812 16,769 1,00 49,99 О

АТОМ 1620 СВ SER В 120 -38,947 16,366 14,161 1,00 45,74 С

АТОМ 1621 OG SER В 120 -39,828 15,466 14,817 1,00 48,70 О

АТОМ 1622 N ASP В 121 -40,604 18,967 14,868 1,00 49,41 N

АТОМ 1623 CA ASP В 121 -41,889 19,536 15,296 1,00 50,62 С

АТОМ 1624 С ASP В 121 -42,951 18,443 15,395 1,00 53,32 С

АТОМ 1625 О ASP В 121 -43,837 18,535 16,245 1,00 54,69 О

АТОМ 1626 СВ ASP В 121 -42,348 20,651 14,339 1,00 53,45 С

АТОМ 1627 CG ASP В 121 -41,474 21,893 14,384 1,00 66,85 С

АТОМ 1628 OD1 ASP В 121 -40,793 22,109 15,419 1,00 66,32 О

АТОМ 1629 OD2 ASP В 121 -41,474 22,656 13,391 1,00 75,46 О

АТОМ 1630 N AGLU В 122 -42,837 17,400 14,554 0,50 48,70 N

АТОМ 1631 CA AGLU В 122 -43,751 16,256 14,541 0,50 48,23 С

АТОМ 1632 С AGLU В 122 -43,694 15,516 15,884 0,50 50,26 С

АТОМ 1633 О AGLU В 122 -44,740 15,186 16,440 0,50 50,69 О

АТОМ 1634 СВ AGLU В 122 -43,392 15,278 13,399 0,50 48,42С

АТОМ 1635 CG AGLU В 122 -43,555 15,861 12,003 0,50 55,52С

АТОМ 1636 CD AGLU В 122 -42,272 16,342 11,353 0,50 61,34С

АТОМ 1637 OE1AGLU В 122 -41,715 17,363 11,819 0,50 43,76О

АТОМ 1638 OE2AGLU В 122 -41,822 15,699 10,379 0,50 49,62О

АТОМ 1639 N BGLU В 122 -42,864 17,408 14,539 0,50 48,39 N

АТОМ 1640 CA BGLU В 122 -43,791 16,274 14,564 0,50 47,80 С

АТОМ 1641 С BGLU В 122 -43,703 15,544 15,913 0,50 49,98 С

АТОМ 1642 О BGLU В 122 -44,740 15,234 16,497 0,50 50,33 О

АТОМ 1643 СВ BGLU В 122 -43,486 15,294 13,414 0,50 47,88С

АТОМ 1644 CG BGLU В 122 -44,538 14,210 13,232 0,50 52,69С

АТОМ 1645 CD BGLU В 122 -44,305 13,277 12,061 0,50 64,91С

АТОМ 1646 OE1BGLU В 122 -43,199 13,317 11,474 0,50 52,72О

- 134 043052

ATOM 1647 OE2BGLU В 122 -45,226 12,492 11,739 0,50 61,22 О

ATOM 1648 N GLN В 123 -42,475 15,278 16,402 1,00 45,06 N

ATOM 1649 CA GLN В 123 -42,270 14,580 17,678 1,00 44,94 C

ATOM 1650 C GLN В 123 -42,759 15,406 18,858 1,00 50,36 C

ATOM 1651 О GLN В 123 -43,385 14,847 19,762 1,00 49,32 О

ATOM 1652 CB GLN В 123 -40,796 14,206 17,902 1,00 44,97C

ATOM 1653 CG GLN В 123 -40,619 13,279 19,109 1,00 44,15C

ATOM 1654 CD GLN В 123 -39,195 12,935 19,425 1,00 47,60C

ATOM 1655 OE1 GLN В 123 -38,258 13,662 19,082 1,00 40,87 О

ATOM 1656 NE2 GLN В 123 -39,013 11,867 20,187 1,00 35,78 N

ATOM 1657 N LEU В 124 -42,482 16,722 18,848 1,00 48,30 N

ATOM 1658 CA LEU В 124 -42,917 17,624 19,909 1,00 50,36 C

ATOM 1659 C LEU В 124 -44,442 17,657 20,030 1,00 57,38 C

ATOM 1660 О LEU В 124 -44,938 17,783 21,146 1,00 58,17 О

ATOM 1661 CB LEU В 124 -42,358 19,042 19,688 1,00 50,61 C

ATOM 1662 CG LEU В 124 -40,841 19,179 19,840 1,00 54,63 C

ATOM 1663 GDI LEU В 124 -40,359 20,491 19,260 1,00 54,80 C

ATOM 1664 CD2 LEU В 124 -40,419 19,070 21,288 1,00 57,16 C

ATOM 1665 N LYS В 125 -45,189 17,457 18,916 1,00 54,79 N

ATOM 1666 CA LYS В 125 -46,656 17,407 18,967 1,00 55,96 C

ATOM 1667 C LYS В 125 -47,149 16,200 19,817 1,00 57,32 C

ATOM 1668 О LYS В 125 -48,211 16,288 20,432 1,00 59,10 О

ATOM 1669 CB LYS В 125 -47,261 17,374 17,549 1,00 59,50C

ATOM 1670 CG LYS В 125 -48,772 17,633 17,519 1,00 82,76C

ATOM 1671 CD LYS В 125 -49,194 18,695 16,493 1,00 95,44C

ATOM 1672 CE LYS В 125 -49,106 18,211 15,065 1,00104,43C

ATOM 1673 NZ LYS В 125 -49,641 19,222 14,112 1,00113,34N

ATOM 1674 N SER В 126 -46,357 15,112 19,890 1,00 50,44 N

ATOM 1675 CA SER В 126 -46,663 13,934 20,718 1,00 49,24 C

ATOM 1676 C SER В 126 -46,230 14,108 22,209 1,00 53,01 C

ATOM 1677 О SER В 126 -46,458 13,198 23,015 1,00 51,52 О

ATOM 1678 CB SER В 126 -46,032 12,678 20,119 1,00 49,01 C

ATOM 1679 OG SER В 126 -44,662 12,539 20,458 1,00 53,59 О

ATOM 1680 N GLY В 127 -45,596 15,254 22,560 1,00 51,44 N

ATOM 1681 CA GLY В 127 -45,198 15,597 23,932 1,00 52,67 C

ATOM 1682 C GLY В 127 -43,856 15,027 24,410 1,00 54,98 C

- 135 043052

ATOM 1683 О GLY В 127 -43,618 14,986 25,615 1,00 56,14 О

ATOM 1684 N THR В 128 -42,966 14,666 23,479 1,00 49,82 N

ATOM 1685 CA THR В 128 -41,624 14,131 23,754 1,00 48,90 C

ATOM 1686 C THR В 128 -40,599 14,858 22,875 1,00 50,82 C

ATOM 1687 О THR В 128 -40,967 15,427 21,846 1,00 48,54 О

ATOM 1688 CB THR В 128 -41,577 12,640 23,439 1,00 55,72 C

ATOM 1689 OGI THR В 128 -42,047 12,433 22,100 1,00 52,09 О

ATOM 1690 CG2 THR В 128 -42,389 11,825 24,407 1,00 55,78 C

ATOM 1691 N ALA В 129 -39,318 14,815 23,264 1,00 47,60 N

ATOM 1692 CA ALA В 129 -38,259 15,497 22,523 1,00 46,69 C

ATOM 1693 C ALA В 129 -36,966 14,717 22,577 1,00 50,52 C

ATOM 1694 О ALA В 129 -36,382 14,585 23,650 1,00 52,29 О

ATOM 1695 CB ALA В 129 -38,043 16,889 23,103 1,00 48,80 C

ATOM 1696 N SER В 130 -36,518 14,203 21,416 1,00 44,66 N

ATOM 1697 CA SER В 130 -35,260 13,478 21,268 1,00 42,46 C

ATOM 1698 C SER В 130 -34,256 14,415 20,612 1,00 45,91 C

ATOM 1699 О SER В 130 -34,575 15,046 19,603 1,00 45,83 О

ATOM 1700 CB SER В 130 -35,440 12,256 20,380 1,00 42,20 C

ATOM 1701 OG SER В 130 -36,417 11,377 20,904 1,00 42,28 О

ATOM 1702 N VAL В 131 -33,057 14,520 21,184 1,00 41,62 N

ATOM 1703 CA VAL В 131 -31,980 15,360 20,659 1,00 39,96 C

ATOM 1704 C VAL В 131 -30,892 14,375 20,300 1,00 40,80 C

ATOM 1705 О VAL В 131 -30,533 13,549 21,143 1,00 39,10 О

ATOM 1706 CB VAL В 131 -31,480 16,397 21,698 1,00 45,31 C

ATOM 1707 CGI VAL В 131 -30,610 17,444 21,022 1,00 45,09 C

ATOM 1708 CG2 VAL В 131 -32,645 17,070 22,422 1,00 45,92 C

ATOM 1709 N VAL В 132 -30,429 14,392 19,040 1,00 38,45 N

ATOM 1710 CA VAL В 132 -29,446 13,429 18,543 1,00 37,72 C

ATOM 1711 C VAL В 132 -28,118 14,116 18,237 1,00 43,59 C

ATOM 1712 О VAL В 132 -28,091 15,139 17,553 1,00 40,69 О

ATOM 1713 CB VAL В 132 -29,994 12,652 17,308 1,00 39,35 C

ATOM 1714 CGI VAL В 132 -28,916 11,770 16,662 1,00 37,62 C

ATOM 1715 CG2 VAL В 132 -31,214 11,812 17,691 1,00 38,39 C

ATOM 1716 N CYS В 133 -27,022 13,516 18,726 1,00 43,57 N

ATOM 1717 CA CYS В 133 -25,663 13,933 18,441 1,00 45,44 C

ATOM 1718 C CYS В 133 -25,055 12,811 17,612 1,00 45,60 C

- 136 043052

ATOM 1719 О CYS В 133 -25,119 11,649 18,026 1,00 43,13 О

ATOM 1720 СВ CYS В 133 -24,872 14,159 19,721 1,00 49,38 С

АТОМ 1721 SG CYS В 133 -23,190 14,764 19,439 1,00 56,38 S АТОМ 1722 N LEU В 134 -24,495 13,142 16,438 1,00 41,51 N

АТОМ 1723 CA LEU В 134 -23,869 12,158 15,544 1,00 39,97 С

АТОМ 1724 С LEU В 134 -22,366 12,407 15,505 1,00 44,72 С АТОМ 1725 О LEU В 134 -21,950 13,543 15,305 1,00 44,75 О

АТОМ 1726 СВ LEU В 134 -24,470 12,265 14,124 1,00 38,04 С

АТОМ 1727 CG LEU В 134 -23,730 11,552 12,969 1,00 40,51 С АТОМ 1728 GDI LEU В 134 -23,798 10,045 13,114 1,00 38,88 С АТОМ 1729 CD2 LEU В 134 -24,311 11,972 11,627 1,00 40,63 С

АТОМ 1730 N LEU В 135 -21,565 11,345 15,704 1,00 41,00 N

АТОМ 1731 CA LEU В 135 -20,098 11,363 15,605 1,00 41,97 С

АТОМ 1732 С LEU В 135 -19,822 10,484 14,404 1,00 44,74 С

АТОМ 1733 О LEU В 135 -20,012 9,274 14,496 1,00 43,15 О

АТОМ 1734 СВ LEU В 135 -19,441 10,746 16,840 1,00 42,81 С

АТОМ 1735 CG LEU В 135 -19,313 11,619 18,065 1,00 47,57 С

АТОМ 1736 GDI LEU В 135 -20,682 11,976 18,646 1,00 45,53 С

АТОМ 1737 CD2 LEU В 135 -18,423 10,926 19,092 1,00 52,20 С

АТОМ 1738 N ASN В 136 -19,447 11,078 13,266 1,00 42,96 N

АТОМ 1739 CA ASN В 136 -19,294 10,330 12,020 1,00 42,15 С

АТОМ 1740 С ASN В 136 -17,857 10,054 11,580 1,00 47,55 С

АТОМ 1741 О ASN В 136 -17,021 10,958 11,585 1,00 49,26 О АТОМ 1742 СВ ASN В 136 -20,029 11,085 10,904 1,00 41,37 С

АТОМ 1743 CG ASN В 136 -20,616 10,190 9,844 1,00 51,90 С

АТОМ 1744 OD1 ASN В 136 -21,276 9,205 10,146 1,00 44,17 О

АТОМ 1745 ND2 ASN В 136 -20,409 10,507 8,581 1,00 47,56 N

АТОМ 1746 N ASN В 137 -17,602 8,804 11,148 1,00 43,79 N

АТОМ 1747 CA ASN В 137 -16,358 8,338 10,532 1,00 45,11 С

АТОМ 1748 С ASN В 137 -15,088 8,625 11,325 1,00 50,60С

АТОМ 1749 О ASN В 137 -14,222 9,361 10,858 1,00 52,71О

АТОМ 1750 СВ ASN В 137 -16,248 8,922 9,112 1,00 47,23С

АТОМ 1751 CG ASN В 137 -17,433 8,599 8,231 1,00 61,25С

АТОМ 1752 OD1 ASN В 137 -18,151 7,618 8,456 1,00 50,10 О

АТОМ 1753 ND2 ASN В 137 -17,680 9,421 7,214 1,00 51,12 N АТОМ 1754 N РНЕ В 138 -14,945 7,980 12,488 1,00 46,69 N

- 137 043052

ATOM 1755 CA PHE В 138 -13,786 8,163 13,358 1,00 48,08 C

ATOM 1756 С PHE В 138 -13,085 6,847 13,723 1,00 51,74 C

ATOM 1757 О PHE В 138 -13,678 5,771 13,650 1,00 49,10 О

ATOM 1758 CB PHE В 138 -14,216 8,908 14,630 1,00 49,40 C

ATOM 1759 CG PHE В 138 -15,186 8,155 15,508 1,00 48,95 C

ATOM 1760 GDI PHE В 138 -14,729 7,316 16,511 1,00 52,66C

ATOM 1761 CD2 PHE В 138 -16,557 8,273 15,321 1,00 48,13C

ATOM 1762 CE1 PHE В 138 -15,619 6,613 17,321 1,00 51,64C

ATOM 1763 CE2 PHE В 138 -17,449 7,570 16,135 1,00 49,29C

ATOM 1764 CZ PHE В 138 -16,974 6,755 17,136 1,00 48,25 C

ATOM 1765 N TYR В 139 -11,817 6,959 14,130 1,00 51,54 N

ATOM 1766 CA TYR В 139 -10,994 5,830 14,574 1,00 52,33 C

ATOM 1767 C TYR В 139 -9,969 6,356 15,622 1,00 57,69 C

ATOM 1768 О TYR В 139 -9,383 7,406 15,374 1,00 57,85 О

ATOM 1769 CB TYR В 139 -10,264 5,159 13,385 1,00 54,15 C

ATOM

1770

CG TYR В 139 -9,572 3,896 13,834 1,00 56,42 C

ATOM

1771

GDI

TYR

139

-10,269 2,697 13,924 1,00 55,93 C

ATOM

1772

CD2

TYR

139

-8,299

3, 945

14,397

1,00

59,79

ATOM

1773

CE1

TYR

139

-9,700

1,567

14,503

1,00

56, 81

ATOM

1774

CE2

TYR

139

-7,735

2,831

15,012

1,00

61,40

ATOM

1775

CZ TYR В 139 -8,426 1,633 15,036 1,00 66,36 C

ATOM

1776

OH TYR В 139 -7,844 0,526 15,609 1,00 67,92 О

ATOM

1777

N PRO В 140 -9,736 5,656 16,768 1,00 54,87 N

ATOM

1778

CA PRO В 140 -10,313 4,383 17,238 1,00 52,80 C

ATOM

1779

C PRO В 140 -11,744

4,520

17,769

1,00

56, 42

ATOM

1780

О PRO В 140 -12,290

5, 621

17,803

1,00

55, 80

ATOM

1781

CB

PRO

140

-9,315

3, 940

18,314

1,00

56, 32

ATOM

1782

CG

PRO

140

-8,826

5, 225

18,901

1,00

62,48

ATOM

1783

CD

PRO

140

-8,750

6, 185

17,735

1,00

58,28

ATOM

1784

N ARG В 141 -12,342

3,389

18,183

1,00

52,96

ATOM

1785

CA ARG В 141 -13,720 3,330 18,693 1,00 51,71 C

ATOM

1786

C ARG В 141 -13,925 4,112 19,999 1,00 57,68 C

ATOM

1787

О ARG В 141 -15,039 4,571 20,265 1,00 55,60 О

ATOM

1788

CB

ARG

141

-14,138

1,862

18,916

1,00

50,28

ATOM

1789

CG

ARG

141

-15,639

1, 653

19,145

1, 00

57,39

ATOM

1790

CD

ARG

141

-15,895

1,022

20,500

1,00

77, 69

- 138 043052

ATOM 1791 NE ARG В 141 -17,298 0,667 20,723 1,00 85,89 N

ATOM 1792 CZ ARG В 141 -17,925 -0,385 20,195 1,00 91,53 C

ATOM 1793 NH1 ARG В 141 -17,288 -1,202 19,358 1,00 73,57 N

ATOM 1794 NH2 ARG В 141 -19,200 -0,618 20,484 1,00 73,45 N

ATOM 1795 N GLU В 142 -12,866 4,260 20,810 1,00 57,75 N

ATOM 1796 CA GLU В 142 -12,949 4,945 22,103 1,00 59,18 C

ATOM 1797 C GLU В 142 -13,297 6,418 21,896 1,00 64,31 C

ATOM 1798 О GLU В 142 -12,537 7,142 21,260 1,00 65,59 О

ATOM 1799 CB GLU В 142 -11,636 4,801 22,903 1,00 63,33C

ATOM 1800 CG GLU В 142 -11,400 3,400 23,459 1,00 70,25C

ATOM 1801 CD GLU В 142 -11,058 2,319 22,450 1,00 79,12C

ATOM 1802 OE1 GLU В 142 -10,233 2,590 21,547 1,00 62,08 О

ATOM 1803 OE2 GLU В 142 -11,634 1,210 22,544 1,00 65,27 О

ATOM 1804 N ALA В 143 -14,482 6,830 22,375 1,00 60,05 N

ATOM 1805 CA ALA В 143 -14,992 8,195 22,251 1,00 60,25 C

ATOM 1806 C ALA В 143 -15,937 8,492 23,413 1,00 64,55 C

ATOM 1807 О ALA В 143 -16,697 7,613 23,808 1,00 63,46 О

ATOM 1808 CB ALA В 143 -15,748 8,343 20,935 1,00 58,79 C

ATOM 1809 N LYS В 144 -15,902 9,717 23,954 1,00 63,21 N

ATOM 1810 CA LYS В 144 -16,783 10,102 25,057 1,00 63,15 C

ATOM 1811 C LYS В 144 -17,698 11,234 24,606 1,00 64,62 C

ATOM 1812 О LYS В 144 -17,220 12,234 24,074 1,00 64,21 О

ATOM 1813 CB LYS В 144 -15,965 10,524 26,288 1,00 68,96 C

ATOM 1814 CG LYS В 144 -16,710 10,327 27,611 1,00 89,48 C

ATOM 1815 CD LYS В 144 -16,363 9,010 28,347 1,00101,00 C

ATOM 1816 CE LYS В 144 -17,045 7,757 27,817 1,00107,47 C

ATOM 1817 NZ LYS В 144 -16,234 6,991 26,826 1,00113,21 N

ATOM 1818 N VAL В 145 -19,015 11,060 24,803 1,00 58,70 N

ATOM 1819 CA VAL В 145 -20,027 12,058 24,465 1,00 56,79 C

ATOM 1820 C VAL В 145 -20,631 12,553 25,776 1,00 61,26 C

ATOM 1821 О VAL В 145 -20,996 11,734 26,627 1,00 61,28 О

ATOM 1822 CB VAL В 145 -21,111 11,474 23,537 1,00 57,49 C

ATOM 1823 CGI VAL В 145 -22,171 12,525 23,217 1,00 56,36 C

ATOM 1824 CG2 VAL В 145 -20,485 10,928 22,259 1,00 56,26 C

ATOM 1825 N GLN В 146 -20,742 13,884 25,934 1,00 57,91 N

ATOM 1826 CA GLN В 146 -21,286 14,498 27,141 1,00 58,76 C

- 139 043052

ATOM 1827 C GLN В 146 -22,366 15,513 26,749 1,00 60,79 С

ATOM 1828 О GLN В 146 -22,095 16,424 25,970 1,00 60,97 О

АТОМ 1829 СВ GLN В 146 -20,138 15,151 27,937 1,00 63,02С

АТОМ 1830 CG GLN В 146 -20,525 15,781 29,273 1,00 81,67С

АТОМ 1831 CD GLN В 146 -21,055 14,769 30,256 1,00101,31С

АТОМ 1832 ОЕ1 GLN В 146 -20,292 14,067 30,923 1,00 99,91 О

АТОМ 1833 NE2 GLN В 146 -22,371 14,695 30,410 1,00 90,85 N

АТОМ 1834 N TRP В 147 -23,594 15,322 27,255 1,00 55,77 N

АТОМ 1835 CA TRP В 147 -24,729 16,209 26,985 1,00 54,82 С

АТОМ 1836 С TRP В 147 -24,811 17,330 28,040 1,00 61,88 С

АТОМ 1837 О TRP В 147 -24,635 17,056 29,229 1,00 63,01 О

АТОМ 1838 СВ TRP В 147 -26,055 15,413 26,994 1,00 51,74 С

АТОМ 1839 CG TRP В 147 -26,329 14,639 25,743 1,00 50,01 С

АТОМ 1840 GDI TRP В 147 -26,211 13,293 25,565 1,00 51,63С

АТОМ 1841 CD2 TRP В 147 -26,789 15,172 24,497 1,00 48,35С

АТОМ 1842 NE1 TRP В 147 -26,571 12,953 24,281 1,00 48,77N

АТОМ 1843 СЕ2 TRP В 147 -26,909 14,092 23,597 1,00 50,07С

АТОМ 1844 СЕЗ TRP В 147 -27,063 16,468 24,037 1,00 49,60С

АТОМ 1845 CZ2 TRP В 147 -27,342 14,265 22,280 1,00 47,70С

АТОМ 1846 CZ3 TRP В 147 -27,501 16,634 22,736 1,00 49,20С

АТОМ 1847 СН2 TRP В 147 -27,636 15,541 21,872 1,00 48,13С

АТОМ 1848 N LYS В 148 -25,130 18,566 27,610 1,00 58,30 N

АТОМ 1849 CA LYS В 148 -25,332 19,712 28,510 1,00 60,71 С

АТОМ 1850 С LYS В 148 -26,619 20,443 28,111 1,00 65,11 С

АТОМ 1851 О LYS В 148 -26,851 20,668 26,921 1,00 63,98 О

АТОМ 1852 СВ LYS В 148 -24,155 20,703 28,479 1,00 63,88С

АТОМ 1853 CG LYS В 148 -22,779 20,072 28,617 1,00 77,60С

АТОМ 1854 CD LYS В 148 -21,693 21,133 28,765 1,00 88,29С

АТОМ 1855 СЕ LYS В 148 -20,333 20,627 28,351 1,00 99,31С

АТОМ 1856 NZ LYS В 148 -19,256 21,605 28,660 1,00112,28 N

АТОМ 1857 N VAL В 149 -27,450 20,799 29,105 1,00 62,45 N

АТОМ 1858 CA VAL В 149 -28,714 21,515 28,916 1,00 61,78 С

АТОМ 1859 С VAL В 149 -28,569 22,808 29,737 1,00 66,99 С

АТОМ 1860 О VAL В 149 -28,625 22,746 30,965 1,00 67,90 О

АТОМ 1861 СВ VAL В 149 -29,905 20,624 29,360 1,00 65,16 С

АТОМ 1862 CGI VAL В 149 -31,217 21,396 29,334 1,00 65,00 С

- 140 043052

ATOM 1863 CG2 VAL В 149 -30,003 19,375 28,480 1,00 62,45 С

ATOM 1864 N ASP В 150 -28,293 23,951 29,059 1,00 63,79 N

ATOM 1865 CA ASP В 150 -27,964 25,252 29,682 1,00 66,94 C

ATOM 1866 C ASP В 150 -26,665 25,100 30,502 1,00 76,26 C

ATOM 1867 О ASP В 150 -26,588 25,507 31,664 1,00 78,68 О

ATOM 1868 CB ASP В 150 -29,124 25,835 30,533 1,00 69,01 C

ATOM 1869 CG ASP В 150 -30,327 26,308 29,741 1,00 71,79 C

ATOM 1870 OD1 ASP В 150 -30,173 26,595 28,530 1,00 70,87 О

ATOM 1871 OD2 ASP В 150 -31,419 26,423 30,336 1,00 74,21 О

ATOM 1872 N ASN В 151 -25,658 24,442 29,883 1,00 74,05 N

ATOM 1873 CA ASN В 151 -24,336 24,155 30,457 1,00 76,87 C

ATOM 1874 C ASN В 151 -24,361 23,221 31,701 1,00 83,21 C

ATOM 1875 О ASN В 151 -23,322 23,066 32,348 1,00 85,06 О

ATOM 1876 CB ASN В 151 -23,579 25,462 30,764 1,00 82,11 C

ATOM 1877 CG ASN В 151 -22,138 25,425 30,321 1,00113,45 C

ATOM 1878 OD1 ASN В 151 -21,777 25,941 29,256 1,00105,66 О

ATOM 1879 ND2 ASN В 151 -21,294 24,762 31,101 1,00110,93 N

ATOM 1880 N ALA В 152 -25,511 22,568 32,002 1,00 78,34 N

ATOM 1881 CA ALA В 152 -25,645 21,670 33,147 1,00 78,90 C

ATOM 1882 C ALA В 152 -25,420 20,232 32,672 1,00 81,83 C

ATOM 1883 О ALA В 152 -26,232 19,696 31,913 1,00 78,13 О

ATOM 1884 CB ALA В 152 -27,028 21,809 33,771 1,00 79,41 C

ATOM 1885 N LEU В 153 -24,301 19,625 33,113 1,00 80,85 N

ATOM 1886 CA LEU В 153 -23,903 18,248 32,772 1,00 79,40 C

ATOM 1887 C LEU В 153 -25,063 17,260 32,979 1,00 80,64 C

ATOM 1888 О LEU В 153 -25,703 17,290 34,031 1,00 81,20 О

ATOM 1889 CB LEU В 153 -22,686 17,812 33,622 1,00 82,41 C

ATOM 1890 CG LEU В 153 -21,589 17,104 32,849 1,00 87,34 C

ATOM 1891 CDI LEU В 153 -20,707 18,102 32,106 1,00 88,51 C

ATOM 1892 CD2 LEU В 153 -20,736 16,229 33,765 1,00 92,60 C

ATOM 1893 N GLN В 154 -25,344 16,410 31,973 1,00 74,56 N

ATOM 1894 CA GLN В 154 -26,447 15,443 32,030 1,00 72,41 C

ATOM 1895 C GLN В 154 -25,960 14,033 32,365 1,00 76,58 C

ATOM 1896 О GLN В 154 -24,771 13,734 32,220 1,00 76,89 О

ATOM 1897 CB GLN В 154 -27,204 15,429 30,692 1,00 70,53 C

ATOM 1898 CG GLN В 154 -27,877 16,755 30,338 1,00 75,29 C

- 141 043052

ATOM 1899 CD GLN В 154 -29,096 17,045 31,190 1,00 85,67 C

ATOM 1900 OE1 GLN В 154 -30,108 16,341 31,118 1,00 78,23 О

ATOM 1901 NE2 GLN В 154 -29,056 18,105 31,993 1,00 79,95 N

ATOM 1902 N SER В 155 -26,891 13,167 32,816 1,00 72,43 N

ATOM 1903 CA SER В 155 -26,583 11,771 33,149 1,00 71,75 C

ATOM 1904 C SER В 155 -27,849 10,909 33,296 1,00 73,00 C

ATOM 1905 О SER В 155 -28,813 11,331 33,942 1,00 72,41 О

ATOM 1906 CB SER В 155 -25,758 11,695 34,435 1,00 79,51 C

ATOM 1907 OG SER В 155 -24,402 11,392 34,151 1,00 91,92 О

ATOM 1908 N GLY В 156 -27,826 9,692 32,704 1,00 67,51 N

ATOM 1909 CA GLY В 156 -28,912 8,717 32,819 1,00 65,86 C

ATOM 1910 C GLY В 156 -30,145 8,940 31,943 1,00 67,02 C

ATOM 1911 О GLY В 156 -31,125 8,218 32,123 1,00 66,32 О

ATOM 1912 N ASN В 157 -30,118 9,907 31,008 1,00 62,63 N

ATOM 1913 CA ASN В 157 -31,252 10,154 30,101 1,00 60,49 C

ATOM 1914 C ASN В 157 -30,831 10,095 28,615 1,00 61,02 C

ATOM 1915 О ASN В 157 -31,612 10,498 27,748 1,00 59,01 О

ATOM 1916 CB ASN В 157 -31,960 11,480 30,454 1,00 60,32 C

ATOM 1917 CG ASN В 157 -31,079 12,704 30,469 1,00 74,28 C

ATOM 1918 OD1 ASN В 157 -29,851 12,635 30,290 1,00 59,89 О

ATOM 1919 ND2 ASN В 157 -31,692 13,857 30,718 1,00 67,62 N

ATOM 1920 N SER В 158 -29,620 9,551 28,325 1,00 55,90 N

ATOM 1921 CA SER В 158 -29,101 9,406 26,967 1,00 53,60 C

ATOM 1922 C SER В 158 -28,739 7,946 26,689 1,00 56,48 C

ATOM 1923 О SER В 158 -28,461 7,193 27,621 1,00 57,31 О

ATOM 1924 CB SER В 158 -27,880 10,295 26,752 1,00 56,49 C

ATOM 1925 OG SER В 158 -26,738 9,800 27,431 1,00 63,69 О

ATOM 1926 N GLN В 159 -28,744 7,555 25,409 1,00 49,85 N

ATOM 1927 CA GLN В 159 -28,380 6,204 24,990 1,00 48,14 C

ATOM 1928 C GLN В 159 -27,501 6,279 23,760 1,00 48,42 C

ATOM 1929 О GLN В 159 -27,720 7,117 22,882 1,00 46,22 О

ATOM 1930 CB GLN В 159 -29,618 5,333 24,746 1,00 48,47C

ATOM 1931 CG GLN В 159 -30,077 4,623 26,008 1,00 60,61C

ATOM 1932 CD GLN В 159 -31,061 3,531 25,698 1,00 74,74C

ATOM 1933 OE1 GLN В 159 -31,915 3,676 24,823 1,00 65,28 О

ATOM 1934 NE2 GLN В 159 -30,957 2,403 26,391 1,00 69,75 N

- 142 043052

ATOM 1935 N GLU В 160 -26,495 5,413 23,723 1,00 43,16 N

ATOM 1936 CA GLU В 160 -25,484 5,376 22,688 1,00 42,59 C

ATOM 1937 C GLU В 160 -25,624 4,142 21,805 1,00 44,01 C

ATOM 1938 О GLU В 160 -26,049 3,083 22,277 1,00 40,63 О

ATOM 1939 CB GLU В 160 -24,101 5,372 23,360 1,00 46,21C

ATOM 1940 CG GLU В 160 -23,067 6,266 22,717 1,00 59,67C

ATOM 1941 CD GLU В 160 -22,110 6,871 23,721 1,00 82,32C

ATOM 1942 OE1 GLU В 160 -22,489 7,872 24,371 1,00 76,02 О

ATOM 1943 OE2 GLU В 160 -20,996 6,323 23,882 1,00 81,97 О

ATOM 1944 N SER В 161 -25,250 4,289 20,522 1,00 40,24 N

ATOM 1945 CA SER В 161 -25,218 3,192 19,555 1,00 39,43 C

ATOM 1946 C SER В 161 -24,028 3,427 18,640 1,00 43,55 C

ATOM 1947 О SER В 161 -23,806 4,559 18,232 1,00 42,87 О

ATOM 1948 CB SER В 161 -26,502 3,125 18,740 1,00 41,55 C

ATOM 1949 OG SER В 161 -26,503 1,948 17,952 1,00 46,47 О

ATOM 1950 N VAL В 162 -23,255 2,375 18,342 1,00 40,28 N

ATOM 1951 CA VAL В 162 -22,059 2,460 17,501 1,00 40,87 C

ATOM 1952 C VAL В 162 -22,214 1,456 16,365 1,00 45,52 C

ATOM 1953 О VAL В 162 -22,662 0,336 16,602 1,00 44,96 О

ATOM 1954 CB VAL В 162 -20,769 2,153 18,308 1,00 45,94 C

ATOM 1955 CGI VAL В 162 -19,534 2,668 17,582 1,00 46,43 C

ATOM 1956 CG2 VAL В 162 -20,845 2,737 19,715 1,00 47,46 C

ATOM 1957 N THR В 163 -21,814 1,834 15,146 1,00 42,14 N

ATOM 1958 CA THR В 163 -21,870 0,920 14,011 1,00 40,76 C

ATOM 1959 C THR В 163 -20,678 -0,015 14,098 1,00 46,05 C

ATOM 1960 О THR В 163 -19,743 0,236 14,866 1,00 46,24 О

ATOM 1961 CB THR В 163 -21,794 1,696 12,670 1,00 44,21 C

ATOM 1962 OGI THR В 163 -20,598 2,475 12,635 1,00 42,58 О

ATOM 1963 CG2 THR В 163 -22,983 2,594 12,448 1,00 39,52 C

ATOM 1964 N GLU В 164 -20,681 -1,064 13,258 1,00 42,71 N

ATOM 1965 CA GLU В 164 -19,534 -1,959 13,127 1,00 43,35 C

ATOM 1966 C GLU В 164 -18,502 -1,185 12,300 1,00 48,75 C

ATOM 1967 О GLU В 164 -18,853 -0,214 11,630 1,00 47,54 О

ATOM 1968 CB GLU В 164 -19,905 -3,258 12,382 1,00 43,58C

ATOM 1969 CG GLU В 164 -20,941 -4,126 13,070 1,00 47,89C

ATOM 1970 CD GLU В 164 -20,526 -4,753 14,386 1,00 69,07C

- 143 043052

ATOM 1971 OE1 GLU В 164 -19,318 -4,727 14,717 1,00 62,05 О

ATOM 1972 OE2 GLU В 164 -21,417 -5,296 15,078 1,00 66,26 О

ATOM 1973 N GLN В 165 -17,250 -1,629 12,315 1,00 48,38 N

ATOM 1974 CA GLN В 165 -16,171 -0,980 11,560 1,00 49,62 C

ATOM 1975 C GLN В 165 -16,509 -1,009 10,055 1,00 55,31 C

ATOM 1976 О GLN В 165 -16,901 -2,058 9,546 1,00 55,76 О

ATOM 1977 CB GLN В 165 -14,849 -1,691 11,865 1,00 52,40C

ATOM 1978 CG GLN В 165 -13,627 -0,826 11,689 1,00 60,35C

ATOM 1979 CD GLN В 165 -12,393 -1,435 12,293 1,00 67,84C

ATOM 1980 OE1 GLN В 165 -12,333 -2,632 12,593 1,00 56,87 О

ATOM 1981 NE2 GLN В 165 -11,353 -0,635 12,425 1,00 63,60 N

ATOM 1982 N ASP В 166 -16,427 0,145 9,366 1,00 53,07 N

ATOM 1983 CA ASP В 166 -16,826 0,258 7,955 1,00 53,01C

ATOM 1984 C ASP В 166 -16,078 -0,676 6,977 1,00 59,36C

ATOM 1985 О ASP В 166 -14,854 -0,792 7,029 1,00 60,34О

ATOM 1986 CB ASP В 166 -16,709 1,704 7,468 1,00 55,20C

ATOM 1987 CG ASP В 166 -17,418 1,949 6,151 1,00 59,71C

ATOM 1988 OD1 ASP В 166 -18,669 1,950 6,142 1,00 59,68 О

ATOM 1989 OD2 ASP В 166 -16,722 2,130 5,129 1,00 59,98 О

ATOM 1990 N SER В 167 -16,835 -1,292 6,050 1,00 56,31 N

ATOM 1991 CA SER В 167 -16,315 -2,227 5,049 1,00 57,19 C

ATOM 1992 C SER В 167 -15,273 -1,608 4,105 1,00 61,95C

ATOM 1993 О SER В 167 -14,359 -2,317 3,690 1,00 62,89О

ATOM 1994 CB SER В 167 -17,466 -2,827 4,244 1,00 60,76 C

ATOM 1995 OG SER В 167 -18,241 -1,811 3,629 1,00 73,16 О

ATOM 1996 N LYS В 168 -15,388 -0,293 3,791 1,00 58,37N

ATOM 1997 CA LYS В 168 -14,447 0,403 2,905 1,00 59,84C

ATOM 1998 C LYS В 168 -13,346 1,174 3,653 1,00 63,38 C

ATOM 1999 О LYS В 168 -12,168 0,911 3,422 1,00 64,86 О

ATOM 2000 CB LYS В 168 -15,198 1,351 1,946 1,00 62,47 C

ATOM 2001 CG LYS В 168 -14,269 2,264 1,131 1,00 83,02 C

ATOM 2002 CD LYS В 168 -14,900 2,799 -0,158 1,00 94,89 C

ATOM 2003 CE LYS В 168 -14,596 4,264 -0,391 1,00110,05 C

ATOM 2004 NZ LYS В 168 -14,582 4,617 -1,832 1,00121,69 N

ATOM 2005 N ASP В 169 -13,724 2,163 4,483 1,00 58,13 N

ATOM 2006 CA ASP В 169 -12,754 3,035 5,171 1,00 58,45 C

- 144 043052

ATOM 2007 C ASP В 169 -12,375 2,593 6,608 1,00 58,86 С

ATOM 2008 О ASP В 169 -11,598 3,297 7,226 1,00 59,24 О

АТОМ 2009 СВ ASP В 169 -13,230 4,514 5,153 1,00 59,93 С

АТОМ 2010 CG ASP В 169 -14,593 4,792 5,768 1,00 66,31 С

АТОМ 2011 OD1 ASP В 169 -14,877 4,252 6,856 1,00 65,52 О

АТОМ 2012 OD2 ASP В 169 -15,355 5,594 5,187 1,00 67,95 О

АТОМ 2013 N SER В 170 -12,892 1,457 7,130 1,00 52,83 N

АТОМ 2014 CA SER В 170 -12,551 0,920 8,468 1,00 51,74 С

АТОМ 2015 С SER В 170 -12,756 1,893 9,683 1,00 54,52 С

АТОМ

2016

О SER В 170 -12,112 1,713 10,719 1,00 54,26 О

АТОМ

2017

СВ SER В 170 -11,121 0,376 8,475 1,00 56,38 С

АТОМ

2018

OG SER В 170 -10,912 -0,598 7,465 1,00 61,79 О

АТОМ

2019

N THR В 171 -13,678 2,870 9,581 1,00 50,06 N

АТОМ

2020

CA THR В 171 -13,979 3,788 10,688 1,00 49,35 С

АТОМ

2021

С THR В 171 -15,274 3,377 11,383 1,00 51,64 С

АТОМ

2022

О THR В 171 -16,048 2,563 10,867 1,00 49,92 О

АТОМ

2023

СВ THR В 171 -14,165 5,245 10,192

1,00

53, 05

АТОМ

2024

OGI THR

В 171 -15,281 5,301 9,296

1,00

45, 64

АТОМ

2025

CG2 THR

В 171 -12,905 5,831 9,567

1,00

51,38

АТОМ

2026

N TYR В

172 -15,518 4,001 12,534 1,00 48,20 N

АТОМ

2027

CA TYR В 172 -16,731 3,847 13,322 1,00 46,06 С

АТОМ

2028

С TYR В 172 -17,550 5,127 13,218 1,00 48,04 С

АТОМ

2029

О TYR В 172 -17,003 6,203 12,962 1,00 47,47 О

АТОМ

2030

СВ TYR В 172 -16,375 3,648 14,800 1,00 47,86 С

АТОМ

2031

CG TYR В 172 -15,664 2,347 15,070 1,00 50,29 С

АТОМ

2032

CD1

TYR

172

-14,281

2,249

14,961

1,00

54,19

АТОМ

2033

CD2

TYR

172

-16,373

1,207

15,436

1,00

49,40

АТОМ

2034

СЕ1

TYR

172

-13,622

1,046

15,205

1,00

56, 13

АТОМ

2035

СЕ2

TYR

172

-15,726

0, 002

15,687

1,00

50,21

АТОМ

2036

CZ TYR В 172 -14,353 -0,080

15,553

1,00

58, 65

АТОМ

2037

ОН TYR В 172 -13,732 -1,266

15,836

1,00

57,48

АТОМ

2038

N SER В 173 -18,853 5,005 13,449 1,00 42,52 N

АТОМ 2039 CA SER В 173 -19,781 6,128 13,554 1,00 41,39 С

АТОМ 2040 С SER В 173 -20,567 5,872 14,829 1,00 44,26 С

АТОМ 2041 О SER В 173 -20,687 4,717 15,243 1,00 42,74 О

АТОМ 2042 СВ SER В 173 -20,688 6,231 12,336 1,00 42,46 С

- 145 043052

ATOM 2043 OG SER В 173 -19,968 6,785 11,247 1,00 48,33 О

ATOM 2044 N LEU В 174 -21,067 6,926 15,473 1,00 41,73 N

ATOM 2045 CA LEU В 174 -21,758 6,794 16,750 1,00 41,45 C

ATOM 2046 C LEU В 174 -22,885 7,807 16,895 1,00 45,24 C

ATOM 2047 О LEU В 174 -22,722 8,965 16,500 1,00 44,85 О

ATOM 2048 CB LEU В 174 -20,711 6,948 17,870 1,00 43,33 C

ATOM 2049 CG LEU В 174 -21,169 6,802 19,328 1,00 48,59 C

ATOM 2050 GDI LEU В 174 -20,045 6,224 20,192 1,00 50,45 C

ATOM 2051 CD2 LEU В 174 -21,589 8,146 19,925 1,00 52,10 C

ATOM 2052 N SER В 175 -24,022 7,377 17,494 1,00 40,43 N

ATOM 2053 CA SER В 175 -25,159 8,257 17,785 1,00 39,27 C

ATOM 2054 C SER В 175 -25,413 8,287 19,306 1,00 43,68 C

ATOM 2055 О SER В 175 -25,371 7,237 19,955 1,00 44,00 О

ATOM 2056 CB SER В 175 -26,419 7,749 17,098 1,00 39,91C

ATOM 2057 OG SER В 175 -26,842 6,540 17,710 1,00 46,16О

ATOM 2058 N SER В 176 -25,725 9,460 19,850 1,00 39,04 N

ATOM 2059 CA SER В 176 -26,103 9,626 21,255 1,00 39,59C

ATOM 2060 C SER В 176 -27,460 10,313 21,229 1,00 43,39C

ATOM 2061 О SER В 176 -27,584 11,352 20,588 1,00 42,69О

ATOM 2062 CB SER В 176 -25,083 10,467 22,009 1,00 44,01 C

ATOM 2063 OG SER В 176 -25,406 10,533 23,388 1,00 53,29 О

ATOM 2064 N THR В 177 -28,494 9,694 21,813 1,00 39,57 N

ATOM 2065 CA THR В 177 -29,853 10,234 21,800 1,00 38,89 C

ATOM 2066 C THR В 177 -30,309 10,614 23,207 1,00 45,78 C

ATOM 2067 О THR В 177 -30,455 9,739 24,061 1,00 46,82 О

ATOM 2068 CB THR В 177 -30,820 9,242 21,152 1,00 42,72 C

ATOM 2069 OGI THR В 177 -30,292 8,833 19,885 1,00 41,05 О

ATOM 2070 CG2 THR В 177 -32,216 9,833 20,964 1,00 40,93 C

ATOM 2071 N LEU В 178 -30,578 11,912 23,423 1,00 44,32 N

ATOM 2072 CA LEU В 178 -31,063 12,457 24,691 1,00 45,67 C

ATOM 2073 C LEU В 178 -32,572 12,606 24,560 1,00 51,59 C

ATOM 2074 О LEU В 178 -33,017 13,348 23,691 1,00 50,54 О

ATOM 2075 CB LEU В 178 -30,421 13,829 24,939 1,00 46,50 C

ATOM 2076 CG LEU В 178 -30,877 14,609 26,178 1,00 51,65 C

ATOM 2077 GDI LEU В 178 -30,287 14,020 27,432 1,00 52,40 C

ATOM 2078 CD2 LEU В 178 -30,473 16,062 26,066 1,00 55,19 C

- 146 043052

ATOM 2079 N THR В 179 -33,359 11,906 25,400 1,00 50,94 N

ATOM 2080 CA THR В 179 -34,823 11,978 25,341 1,00 51,02 C

ATOM 2081 C THR В 179 -35,379 12,693 26,588 1,00 54,86 C

ATOM 2082 О THR В 179 -35,180 12,233 27,712 1,00 54,95 О

ATOM 2083 CB THR В 179 -35,427 10,576 25,091 1,00 62,65 C

ATOM 2084 OGI THR В 179 -34,903 10,049 23,857 1,00 67,28 О

ATOM 2085 CG2 THR В 179 -36,950 10,604 24,996 1,00 60,77 C

ATOM 2086 N LEU В 180 -36,077 13,813 26,374 1,00 50,66 N

ATOM 2087 CA LEU В 180 -36,713 14,588 27,429 1,00 52,20 C

ATOM 2088 C LEU В 180 -38,189 14,686 27,132 1,00 52,81 C

ATOM 2089 О LEU В 180 -38,622 14,406 26,020 1,00 49,03 О

ATOM 2090 CB LEU В 180 -36,147 16,020 27,458 1,00 53,77 C

ATOM 2091 CG LEU В 180 -34,650 16,163 27,669 1,00 59,65 C

ATOM 2092 GDI LEU В 180 -34,262 17,619 27,663 1,00 61,07 C

ATOM 2093 CD2 LEU В 180 -34,213 15,535 28,986 1,00 63,66 C

ATOM 2094 N SER В 181 -38,962 15,152 28,107 1,00 52,27 N

ATOM 2095 CA SER В 181 -40,374 15,437 27,886 1,00 52,01 C

ATOM 2096 C SER В 181 -40,429 16,787 27,163 1,00 56,45 C

ATOM 2097 О SER В 181 -39,449 17,538 27,208 1,00 55,99 О

ATOM 2098 CB SER В 181 -41,117 15,518 29,217 1,00 55,17 C

ATOM 2099 OG SER В 181 -40,678 16,608 30,012 1,00 55,33 О

ATOM 2100 N LYS В 182 -41,550 17,091 26,483 1,00 53,85 N

ATOM 2101 CA LYS В 182 -41,731 18,386 25,811 1,00 53,81 C

ATOM 2102 C LYS В 182 -41,730 19,486 26,880 1,00 59,10 C

ATOM 2103 О LYS В 182 -41,168 20,556 26,641 1,00 58,25 О

ATOM 2104 CB LYS В 182 -43,045 18,404 25,009 1,00 55,66C

ATOM 2105 CG LYS В 182 -43,313 19,643 24,163 1,00 60,45C

ATOM 2106 CD LYS В 182 -44,810 19,791 23,894 1,00 74,61C

ATOM 2107 CE LYS В 182 -45,160 20,802 22,829 1,00 90,09C

ATOM 2108 NZ LYS В 182 -46,478 20,502 22,212 1,00104,17 N

ATOM 2109 N ALA В 183 -42,314 19,206 28,075 1,00 57,91 N

ATOM 2110 CA ALA В 183 -42,348 20,175 29,186 1,00 60,15 C

ATOM 2111 C ALA В 183 -40,933 20,547 29,645 1,00 63,82 C

ATOM 2112 О ALA В 183 -40,628 21,728 29,711 1,00 64,74 О

ATOM 2113 CB ALA В 183 -43,155 19,624 30,354 1,00 62,70 C

ATOM 2114 N ASP В 184 -40,057 19,551 29,888 1,00 59,31 N

- 147 043052

ATOM 2115 CA ASP В 184 -38,658 19,805 30,266 1,00 59,12 C

ATOM 2116 C ASP В 184 -37,892 20,439 29,114 1,00 59,87 C

ATOM 2117 О ASP В 184 -37,064 21,317 29,358 1,00 58,39 О

ATOM 2118 CB ASP В 184 -37,931 18,520 30,705 1,00 60,60 C

ATOM 2119 CG ASP В 184 -38,336 17,989 32,069 1,00 75,85 C

ATOM 2120 OD1 ASP В 184 -39,246 18,580 32,695 1,00 78,40 О

ATOM 2121 OD2 ASP В 184 -37,744 16,980 32,511 1,00 81,02 О

ATOM 2122 N TYR В 185 -38,163 20,001 27,858 1,00 54,33 N

ATOM 2123 CA TYR В 185 -37,502 20,561 26,681 1,00 52,13 C

ATOM 2124 C TYR В 185 -37,741 22,083 26,569 1,00 57,95 C

ATOM 2125 О TYR В 185 -36,799 22,842 26,347 1,00 56,10 О

ATOM 2126 CB TYR В 185 -37,919 19,823 25,390 1,00 50,32C

ATOM 2127 CG TYR В 185 -37,251 20,371 24,146 1,00 48,96C

ATOM 2128 GDI TYR В 185 -35,883 20,192 23,937 1,00 48,51C

ATOM 2129 CD2 TYR В 185 -37,948 21,152 23,239 1,00 49,40C

ATOM 2130 CE1 TYR В 185 -35,246 20,747 22,829 1,00 45,64C

ATOM 2131 CE2 TYR В 185 -37,335 21,666 22,096 1,00 49,58C

ATOM 2132 CZ TYR В 185 -35,976 21,467 21,898 1,00 53,23C

ATOM 2133 OH TYR В 185 -35,340 21,992 20,798 1,00 51,78О

ATOM 2134 N GLU В 186 -38,984 22,526 26,783 1,00 57,91 N

ATOM 2135 CA GLU В 186 -39,346 23,944 26,712 1,00 59,03 C

ATOM 2136 C GLU В 186 -38,786 24,798 27,873 1,00 63,83 C

ATOM 2137 О GLU В 186 -38,666 26,010 27,707 1,00 63,68 О

ATOM 2138 CB GLU В 186 -40,869 24,107 26,593 1,00 61,14C

ATOM 2139 CG GLU В 186 -41,381 23,633 25,240 1,00 71,13C

ATOM 2140 CD GLU В 186 -42,880 23,453 25,094 1,00 96,57C

ATOM 2141 OE1 GLU В 186 -43,583 23,317 26,122 1,00 96,32 О

ATOM 2142 OE2 GLU В 186 -43,345 23,410 23,932 1,00 90,42 О

ATOM 2143 N LYS В 187 -38,405 24,181 29,014 1,00 60,66 N

ATOM 2144 CA LYS В 187 -37,822 24,909 30,161 1,00 62,47 C

ATOM 2145 C LYS В 187 -36,365 25,392 29,933 1,00 65,88 C

ATOM 2146 О LYS В 187 -35,863 26,146 30,764 1,00 67,25 О

ATOM 2147 CB LYS В 187 -37,858 24,048 31,442 1,00 65,07C

ATOM 2148 CG LYS В 187 -39,228 23,898 32,081 1,00 80,48C

ATOM 2149 CD LYS В 187 -39,160 22,926 33,265 1,00 88,59C

ATOM 2150 CE LYS В 187 -40,470 22,755 33,995 1,00 98,81C

- 148 043052

ATOM 2151 NZ LYS В 187 -41,385 21,808 33,306 1,00105,15 N

ATOM 2152 N HIS В 188 -35,667 24,929 28,867 1,00 60,49 N

ATOM 2153 CA HIS В 188 -34,268 25,306 28,622 1,00 60,34 C

ATOM 2154 C HIS В 188 -34,062 25,826 27,224 1,00 61,88 C

ATOM 2155 О HIS В 188 -34,881 25,566 26,341 1,00 59,68 О

ATOM 2156 CB HIS В 188 -33,350 24,109 28,873 1,00 60,80 C

ATOM 2157 CG HIS В 188 -33,661 23,424 30,155 1,00 66,48 C

ATOM 2158 ND1 HIS В 188 -34,364 22,237 30,181 1,00 67,83N

ATOM 2159 CD2 HIS В 188 -33,429 23,822 31,423 1,00 70,78C

ATOM 2160 CE1 HIS В 188 -34,511 21,935 31,457 1,00 68,91C

ATOM 2161 NE2 HIS В 188 -33,964 22,865 32,239 1,00 71,45N

ATOM 2162 N LYS В 189 -32,942 26,536 27,020 1,00 60,07 N

ATOM 2163 CA LYS В 189 -32,587 27,161 25,743 1,00 59,64 C

ATOM 2164 C LYS В 189 -31,446 26,439 25,010 1,00 61,56 C

ATOM 2165 О LYS В 189 -31,626 26,054 23,861 1,00 59,51 О

ATOM 2166 CB LYS В 189 -32,210 28,637 25,998 1,00 63,64C

ATOM 2167 CG LYS В 189 -31,897 29,482 24,750 1,00 86,76C

ATOM 2168 CD LYS В 189 -33,007 29,508 23,672 1,00100,09C

ATOM 2169 CE LYS В 189 -34,381 29,919 24,164 1,00116,24C

ATOM 2170 NZ LYS В 189 -34,390 31,269 24,792 1,00126,05N

ATOM 2171 N VAL В 190 -30,279 26,270 25,660 1,00 59,07 N

ATOM 2172 CA VAL В 190 -29,086 25,696 25,022 1,00 57,13 C

ATOM 2173 C VAL В 190 -29,007 24,187 25,207 1,00 59,87 C

ATOM 2174 О VAL В 190 -29,004 23,721 26,339 1,00 60,57 О

ATOM 2175 CB VAL В 190 -27,775 26,351 25,534 1,00 62,46 C

ATOM 2176 CGI VAL В 190 -26,594 25,966 24,641 1,00 61,26 C

ATOM 2177 CG2 VAL В 190 -27,903 27,877 25,631 1,00 63,39 C

ATOM 2178 N TYR В 191 -28,870 23,441 24,089 1,00 54,33 N

ATOM 2179 CA TYR В 191 -28,695 21,995 24,056 1,00 52,43 C

ATOM 2180 C TYR В 191 -27,375 21,755 23,359 1,00 55,56 C

ATOM 2181 О TYR В 191 -27,231 22,150 22,204 1,00 53,17 О

ATOM 2182 CB TYR В 191 -29,836 21,346 23,283 1,00 51,40 C

ATOM 2183 CG TYR В 191 -31,107 21,388 24,087 1,00 52,89 C

ATOM 2184 CDI TYR В 191 -31,421 20,367 24,976 1,00 55,24 C

ATOM 2185 CD2 TYR В 191 -31,918 22,517 24,080 1,00 52,54 C

ATOM 2186 CE1 TYR В 191 -32,530 20,451 25,811 1,00 56,20 C

- 149 043052

ATOM 2187 CE2 TYR В 191 -33,045 22,603 24,892 1,00 53,78 С

ATOM 2188 CZ TYR В 191 -33,343 21,567 25,764 1,00 60,22 C

ATOM 2189 OH TYR В 191 -34,444 21,607 26,576 1,00 57,44 О

ATOM 2190 N ALA В 192 -26,389 21,184 24,071 1,00 53,86 N

ATOM 2191 CA ALA В 192 -25,047 20,981 23,534 1,00 53,95 C

ATOM 2192 C ALA В 192 -24,563 19,554 23,704 1,00 58,41 C

ATOM 2193 О ALA В 192 -24,882 18,900 24,688 1,00 58,37 О

ATOM 2194 CB ALA В 192 -24,075 21,925 24,223 1,00 57,15 C

ATOM 2195 N CYS В 193 -23,760 19,100 22,745 1,00 55,78 N

ATOM 2196 CA CYS В 193 -23,131 17,791 22,738 1,00 56,08 C

ATOM 2197 C CYS В 193 -21,626 18,050 22,745 1,00 57,94 C

ATOM 2198 О CYS В 193 -21,149 18,719 21,839 1,00 56,41 О

ATOM 2199 CB CYS В 193 -23,554 17,011 21,493 1,00 55,44 C

ATOM 2200 SG CYS В 193 -22,629 15,479 21,250 1,00 59,78 S

ATOM 2201 N GLU В 194 -20,890 17,564 23,755 1,00 56,17 N

ATOM 2202 CA GLU В 194 -19,434 17,743 23,838 1,00 57,92 C

ATOM 2203 C GLU В 194 -18,767 16,390 23,593 1,00 60,48 C

ATOM 2204 О GLU В 194 -18,995 15,445 24,355 1,00 59,51 О

ATOM 2205 CB GLU В 194 -19,027 18,319 25,195 1,00 61,77C

ATOM 2206 CG GLU В 194 -17,550 18,666 25,297 1,00 74,55C

ATOM 2207 CD GLU В 194 -17,129 19,093 26,686 1,00 96,82C

ATOM 2208 OE1 GLU В 194 -17,270 18,274 27,621 1,00 85,14 О

ATOM 2209 OE2 GLU В 194 -16,641 20,237 26,837 1,00 99,73 О

ATOM 2210 N VAL В 195 -17,935 16,313 22,536 1,00 56,28 N

ATOM 2211 CA VAL В 195 -17,273 15,088 22,087 1,00 54,95 C

ATOM 2212 C VAL В 195 -15,775 15,118 22,382 1,00 60,96 C

ATOM 2213 О VAL В 195 -15,094 16,053 21,963 1,00 60,69 О

ATOM 2214 CB VAL В 195 -17,532 14,890 20,567 1,00 56,65 C

ATOM 2215 CGI VAL В 195 -16,738 13,705 20,011 1,00 56,05 C

ATOM 2216 CG2 VAL В 195 -19,027 14,741 20,283 1,00 53,80 C

ATOM 2217 N THR В 196 -15,261 14,055 23,039 1,00 59,14 N

ATOM 2218 CA THR В 196 -13,839 13,873 23,344 1,00 61,70 C

ATOM 2219 C THR В 196 -13,334 12,670 22,527 1,00 63,94 C

ATOM 2220 О THR В 196 -13,985 11,623 22,507 1,00 61,61 О

ATOM 2221 CB THR В 196 -13,644 13,679 24,850 1,00 74,19 C

ATOM 2222 OGI THR В 196 -14,285 14,761 25,532 1,00 76,14 О

- 150 043052

ATOM 2223 CG2 THR В 196 -12,172 13,614 25,251 1,00 75,74 С

ATOM 2224 N HIS В 197 -12,196 12,838 21,829 1,00 61,96 N

ATOM 2225 CA HIS В 197 -11,605 11,795 20,982 1,00 61,16 C

ATOM 2226 C HIS В 197 -10,122 12,097 20,682 1,00 68,85 C

ATOM 2227 О HIS В 197 -9,753 13,262 20,519 1,00 69,73 О

ATOM 2228 CB HIS В 197 -12,396 11,689 19,664 1,00 59,08 C

ATOM 2229 CG HIS В 197 -11,947 10,574 18,778 1,00 61,45 C

ATOM 2230 ND1 HIS В 197 -11,075 10,793 17,733 1,00 64,08N

ATOM 2231 CD2 HIS В 197 -12,277 9,264 18,806 1,00 61,56C

ATOM 2232 CE1 HIS В 197 -10,883 9,612 17,172 1,00 62,74C

ATOM 2233 NE2 HIS В 197 -11,573 8,658 17,797 1,00 61,59N

ATOM 2234 N GLN В 198 -9,292 11,039 20,580 1,00 67,35 N

ATOM 2235 CA GLN В 198 -7,847 11,117 20,282 1,00 70,53 C

ATOM 2236 C GLN В 198 -7,505 11,978 19,037 1,00 75,67C

ATOM 2237 О GLN В 198 -6,481 12,657 19,038 1,00 78,55О

ATOM 2238 CB GLN В 198 -7,258 9,684 20,165 1,00 72,19C

ATOM 2239 CG GLN В 198 -5,966 9,542 19,350 1,00 91,00C

ATOM 2240 CD GLN В 198 -5,167 8,296 19,647 1,00109,12 C

ATOM 2241 OE1 GLN В 198 -3,935 8,341 19,703 1,00106,91 О

ATOM 2242 NE2 GLN В 198 -5,818 7,144 19,790 1,00 99,27 N

ATOM 2243 N GLY В 199 -8,365 11,973 18,008 1,00 70,22 N

ATOM 2244 CA GLY В 199 -8,154 12,744 16,779 1,00 70,28 C

ATOM 2245 C GLY В 199 -8,398 14,255 16,928 1,00 74,85C

ATOM 2246 О GLY В 199 -8,050 15,002 16,015 1,00 74,21О

ATOM 2247 N LEU В 200 -8,999 14,700 18,056 1,00 72,59N

ATOM 2248 CA LEU В 200 -9,288 16,108 18,346 1,00 73,59 C

ATOM 2249 C LEU В 200 -8,262 16,658 19,343 1,00 82,02C

ATOM 2250 О LEU В 200 -7,944 15,975 20,320 1,00 81,96О

ATOM 2251 CB LEU В 200 -10,692 16,226 18,961 1,00 71,26 C

ATOM 2252 CG LEU В 200 -11,825 15,587 18,164 1,00 72,51 C

ATOM 2253 GDI LEU В 200 -13,085 15,475 19,002 1,00 70,73 C

ATOM 2254 CD2 LEU В 200 -12,068 16,347 16,875 1,00 74,05 C

ATOM 2255 N SER В 201 -7,761 17,893 19,113 1,00 82,62 N

ATOM 2256 CA SER В 201 -6,787 18,543 20,012 1,00 86,82 C

ATOM 2257 C SER В 201 -7,428 18,852 21,369 1,00 92,27 C

ATOM 2258 О SER В 201 -6,815 18,607 22,407 1,00 94,46 О

- 151 043052

ATOM 2259 CB SER В 201 -6,240 19,826 19,389 1,00 92,04C

ATOM 2260 OG SER В 201 -7,279 20,740 19,081 1,00 99,16О

ATOM 2261 N SER В 202 -8,663 19,384 21,347 1,00 87,20 N

ATOM 2262 CA SER В 202 -9,465 19,681 22,538 1,00 86,89C

ATOM 2263 C SER В 202 -10,922 19,245 22,249 1,00 86,91C

ATOM 2264 О SER В 202 -11,279 19,145 21,072 1,00 84,09О

ATOM 2265 CB SER В 202 -9,408 21,172 22,873 1,00 91,46C

ATOM 2266 OG SER В 202 -9,888 21,971 21,804 1,00 97,96О

ATOM 2267 N PRO В 203 -11,758 18,993 23,292 1,00 82,94N

ATOM 2268 CA PRO В 203 -13,141 18,558 23,060 1,00 79,66 C

ATOM 2269 C PRO В 203 -13,979 19,502 22,171 1,00 81,40 C

ATOM 2270 О PRO В 203 -14,067 20,701 22,459 1,00 81,97 О

ATOM 2271 CB PRO В 203 -13,718 18,438 24,472 1,00 82,03C

ATOM 2272 CG PRO В 203 -12,561 18,115 25,319 1,00 89,24C

ATOM 2273 CD PRO В 203 -11,369 18,792 24,704 1,00 86,84C

ATOM 2274 N VAL В 204 -14,577 18,950 21,086 1,00 74,31 N

ATOM 2275 CA VAL В 204 -15,402 19,710 20,144 1,00 71,83 C

ATOM 2276 C VAL В 204 -16,842 19,717 20,631 1,00 70,82 C

ATOM 2277 О VAL В 204 -17,394 18,656 20,932 1,00 68,32 О

ATOM 2278 CB VAL В 204 -15,288 19,152 18,703 1,00 75,22 C

ATOM 2279 CGI VAL В 204 -16,276 19,839 17,757 1,00 73,55 C

ATOM 2280 CG2 VAL В 204 -13,865 19,315 18,185 1,00 77,39 C

ATOM 2281 N THR В 205 -17,456 20,911 20,681 1,00 66,25 N

ATOM 2282 CA THR В 205 -18,834 21,086 21,127 1,00 64,05 C

ATOM 2283 C THR В 205 -19,699 21,583 19,984 1,00 65,32 C

ATOM 2284 О THR В 205 -19,350 22,562 19,325 1,00 65,30 О

ATOM 2285 CB THR В 205 -18,915 22,066 22,306 1,00 68,69 C

ATOM 2286 OGI THR В 205 -17,991 21,661 23,317 1,00 70,58 О

ATOM 2287 CG2 THR В 205 -20,319 22,147 22,902 1,00 62,87 C

ATOM 2288 N LYS В 206 -20,835 20,911 19,764 1,00 59,26 N

ATOM 2289 CA LYS В 206 -21,832 21,304 18,776 1,00 57,07 C

ATOM 2290 C LYS В 206 -23,101 21,561 19,579 1,00 59,72 C

ATOM 2291 О LYS В 206 -23,423 20,777 20,474 1,00 58,87 О

ATOM 2292 CB LYS В 206 -22,036 20,204 17,717 1,00 57,42C

ATOM 2293 CG LYS В 206 -20,795 19,932 16,858 1,00 64,65C

ATOM 2294 CD LYS В 206 -20,429 21,085 15,921 1,00 63,94C

- 152 043052

ATOM 2295 CE LYS В 206 -19,183 20,783 15,124 1,00 68,88 C

ATOM 2296 NZ LYS В 206 -19,039 21,682 13,948 1,00 79,66 N

ATOM 2297 N SER В 207 -23,775 22,691 19,327 1,00 56,17 N

ATOM 2298 CA SER В 207 -24,972 23,044 20,084 1,00 55,72 C

ATOM 2299 C SER В 207 -25,976 23,832 19,259 1,00 58,40 C

ATOM 2300 О SER В 207 -25,691 24,239 18,134 1,00 57,77 О

ATOM 2301 CB SER В 207 -24,577 23,847 21,327 1,00 61,27 C

ATOM 2302 OG SER В 207 -24,055 25,122 20,989 1,00 69,57 О

ATOM 2303 N РНЕ В 208 -27,165 24,024 19,829 1,00 54,71 N

ATOM 2304 CA РНЕ В 208 -28,222 24,838 19,236 1,00 53,49 C

ATOM 2305 С РНЕ В 208 -29,049 25,502 20,342 1,00 58,74 C

ATOM 2306 О РНЕ В 208 -29,086 25,008 21,477 1,00 57,67 О

ATOM 2307 СВ РНЕ В 208 -29,126 24,013 18,304 1,00 52,41 С

АТОМ 2308 CG РНЕ В 208 -29,924 22,933 18,997 1,00 52,75 С

АТОМ 2309 CD1 РНЕ В 208 -31,149 23,219 19,587 1,00 54,84С

АТОМ 2310 CD2 РНЕ В 208 -29,460 21,627 19,044 1,00 52,67С

АТОМ 2311 СЕ1 РНЕ В 208 -31,873 22,227 20,244 1,00 54,65С

АТОМ 2312 СЕ2 РНЕ В 208 -30,193 20,634 19,683 1,00 54,36С

АТОМ 2313 CZ РНЕ В 208 -31,403 20,933 20,266 1,00 52,70 С

АТОМ 2314 N ASN В 209 -29,718 26,609 19,993 1,00 56,87 N

АТОМ 2315 CA ASN В 209 -30,626 27,327 20,883 1,00 58,08 С

АТОМ 2316 С ASN В 209 -32,043 26,901 20,482 1,00 62,33 С

АТОМ 2317 О ASN В 209 -32,355 26,913 19,292 1,00 60,45 О

АТОМ 2318 СВ ASN В 209 -30,446 28,834 20,727 1,00 58,83 С

АТОМ 2319 CG ASN В 209 -29,077 29,323 21,146 1,00 79,26 С

АТОМ 2320 OD1 ASN В 209 -28,414 28,737 22,010 1,00 68,87 О

АТОМ 2321 ND2 ASN В 209 -28,625 30,428 20,566 1,00 75,32 N

АТОМ 2322 N ARG В 210 -32,868 26,443 21,442 1,00 60,89 N

АТОМ 2323 CA ARG В 210 -34,233 25,986 21,149 1,00 60,59 С

АТОМ 2324 С ARG В 210 -35,012 27,071 20,368 1,00 69,52 С

АТОМ 2325 О ARG В 210 -35,045 28,226 20,789 1,00 70,27 О

АТОМ 2326 СВ ARG В 210 -34,960 25,598 22,449 1,00 56,73С

АТОМ 2327 CG ARG В 210 -36,408 25,154 22,258 1,00 56,48С

АТОМ 2328 CD ARG В 210 -37,033 24,683 23,557 1,00 57,39С

АТОМ 2329 NE ARG В 210 -36,967 25,712 24,593 1,00 63,13N

АТОМ 2330 CZ ARG В 210 -37,759 26,782 24,679 1,00 77,20С

- 153 043052

ATOM 2331 NH1 ARG В 210 -38,730 26,977 23,789 1,00 65,86 N

ATOM 2332 NH2 ARG В 210 -37,591 27,662 25,660 1,00 59,34 N

ATOM 2333 N GLY В 211 -35,593 26,698 19,214 1,00 69,48 N

ATOM 2334 CA GLY В 211 -36,327 27,627 18,352 1,00 71,07 C

ATOM 2335 C GLY В 211 -35,357 28,440 17,492 1,00 78,25C

ATOM 2336 О GLY В 211 -35,430 29,663 17,487 1,00 80,21О

ATOM 2337 N GLU В 212 -34,461 27,747 16,772 1,00 76,19N

ATOM 2338 CA GLU В 212 -33,428 28,309 15,888 1,00 76,94 C

ATOM 2339 C GLU В 212 -32,367 29,108 16,659 1,00 81,95 C

ATOM 2340 О GLU В 212 -32,603 30,233 17,092 1,00 82,60 О

ATOM 2341 CB GLU В 212 -34,032 29,140 14,735 1,00 78,34C

ATOM 2342 CG GLU В 212 -35,167 28,457 13,985 1,00 91,48C

ATOM 2343 CD GLU В 212 -34,833 27,101 13,398 1,00122,56C

ATOM 2344 OE1 GLU В 212 -34,225 27,062 12,304 1,00124,80 О

ATOM 2345 OE2 GLU В 212 -35,199 26,079 14,022 1,00119,86 О

ATOM 2346 CD CD B9901 -18,857 6,410 6,358 1,00126,83 CD

ATOM 2347 CD CD B9902 -33,656 22,074 34,366 1,00101,06 CD

ATOM 2348 ΟΙ 2PE B9911 -22,872 -9,867 16,331 1,00 62,50 О

ATOM 2349 C2 2PE B9911 -22,071 -10,991 16,674 1,00 63,56 C

ATOM 2350 СЗ 2PE B9911 -21,935 -11,146 18,163 1,00 65,44 C

ATOM 2351 04 2PE B9911 -20,834 -10,369 18,641 1,00 66,79 О

ATOM 2352 C5 2PE B9911 -21,040 -9,788 19,931 1,00 64,28 C

ATOM 2353 C6 2PE B9911 -19,727 -9,445 20,570 1,00 62,37 C

ATOM 2354 07 2PE B9911 -19,494 -10,301 21,691 1,00 60,69 О

ATOM 2355 C8 2PE B9911 -18,188 -10,856 21,782 1,00 59,26 C

ATOM 2356 C9 2PE B9911 -17,274 -9,906 22,475 1,00 61,42 C

ATOM 2357 O10 2PE B9911

ATOM 2358 СИ 2PE B9911

ATOM 2359 C12 2PE B9911

ATOM 2360 013 2PE B9911

ATOM 2361 C14 2PE B9911

ATOM 2362 C15 2PE B9911

ATOM 2363 016 2PE B9911

ATOM 2364 C17 2PE B9911

ATOM 2365 C18 2PE B9911

ATOM 2366 019 2PE B9911

-15,949 -10,431 22,475 1,00 63,12 О

- 14,979 -9,603 21,849 1,00 65,29 C

- 14,612 -8,454 22,735 1,00 69,11 C

- 14,469 -7,280 21,939 1,00 72,89 О

- 14,725 -6,052 22,615 1,00 77,60 C

- 15,447 -5,108 21,699 1,00 80,79 C

- 16,827 -5,016 22,050 1,00 84,78 О

- 17,094 -4,168 23,171 1,00 90,27 C

- 18,054 -4,834 24,111 1,00 91,97 C

- 17,687 -4,558 25,466 1,00 95,36 О

- 154 043052

ATOM 2367 020 2PE B9911 -17,491 -5,710 26,284 1,00 96,33С

ATOM 2368 C21 2PE B9911 -18,803 -6,194 26,819 1,00 95,30С

ATOM 2369 022 2PE B9911 -18,660 -7,493 27,385 1,00 94,55О

ATOM 2370 C23 2PE B9911 -19,090 -8,542 26,525 1,00 91,87С

ATOM 2371 C24 2PE B9911 -18,693 -9,866 27,094 1,00 92,15С

ATOM 2372 025 2PE B9911 -19,003 -10,901 26,162 1,00 89,40О

ATOM 2373 C26 2PE B9911 -18,469 -12,180 26,492 1,00 87,56С

ATOM 2374 C27 2PE B9911 -19,251 -12,799 27,621 1,00 86,27С

ATOM 2375 028 2PE B9911 -19,209 -14,218 27,573 1,00 84,51О

ATOM 2376 N GLU С 1 -22,618 -29,854 1,438 1,00 63,58 N

ATOM 2377 CA GLU С 1 -23,717 -30,821 1,519 1,00 63,31 C

ATOM 2378 C GLU С 1 -24,332 -30,855 2,927 1,00 61,30 C

ATOM 2379 О GLU С 1 -25,562 -30,934 3,036 1,00 61,09 О

ATOM 2380 CB GLU С 1 -23,250 -32,227 1,101 1,00 66,84C

ATOM 2381 CG GLU С 1 -24,314 -33,319 1,157 1,00 82,05C

ATOM 2382 CD GLU С 1 -25,611 -33,021 0,422 1,00109,67C

ATOM 2383 OE1 GLU С 1 -25,551 -32,432 -0,682 1,00110,68О

ATOM 2384 OE2 GLU С 1 -26,689 -33,395 0,940 1,00104,39 О

ATOM 2385 N ILE C 2 -23,504 -30,833 3,999 1,00 51,48 N

ATOM 2386 CA ILE C 2 -24,059 -30,861 5,352 1,00 47,04 C

ATOM 2387 C ILE C 2 -24,625 -29,480 5,729 1,00 47,71 C

ATOM 2388 О ILE C 2 -23,925 -28,470 5,624 1,00 45,78 О

ATOM 2389 CB ILE C 2 -23,058 -31,378 6,415 1,00 48,86 C

ATOM 2390 CGI ILE C 2 -22,700 -32,866 6,161 1,00 49,65C

ATOM 2391 CG2 ILE C 2 -23,644 -31,168 7,838 1,00 46,14C

ATOM 2392 GDI ILE C 2 -21,523 -33,450 7,026 1,00 47,83C

ATOM 2393 N GLN C 3 -25,870 -29,453 6,222 1,00 43,58 N

ATOM 2394 CA GLN C 3 -26,493 -28,215 6,675 1,00 42,22 C

ATOM 2395 C GLN C 3 -27,422 -28,456 7,873 1,00 43,24 C

ATOM 2396 О GLN C 3 -28,128 -29,463 7,913 1,00 42,56 О

ATOM 2397 CB GLN C 3 -27,279 -27,571 5,520 1,00 44,23C

ATOM 2398 CG GLN C 3 -27,799 -26,166 5,849 1,00 66,49C

ATOM 2399 CD GLN C 3 -27,461 -25,147 4,789 1,00 94,56C

ATOM 2400 OE1 GLN C 3 -26,284 -24,843 4,550 1,00 93,02О

ATOM 2401 NE2 GLN C 3 -28,476 -24,556 4,160 1,00 84,87N

ATOM 2402 N LEU C 4 -27,416 -27,515 8,839 1,00 37,54 N

- 155 043052

ATOM 2403 CA LEU C 4 -28,322 -27,497 9,987 1,00 35,69 C

ATOM 2404 C LEU C 4 -29,240 -26,293 9,752 1,00 37,93 C

ATOM 2405 О LEU C 4 -28,736 -25,183 9,626 1,00 34,85 О

ATOM 2406 CB LEU C 4 -27,554 -27,318 11,308 1,00 34,43 C

ATOM 2407 CG LEU C 4 -26,555 -28,411 11,693 1,00 39,46 C

ATOM 2408 GDI LEU C 4 -26,104 -28,237 13,129 1,00 37,91 C

ATOM 2409 CD2 LEU C 4 -27,122 -29,796 11,492 1,00 41,20 C

ATOM 2410 N VAL C 5 -30,561 -26,514 9,621 1,00 35,79 N

ATOM 2411 CA VAL C 5 -31,519 -25,437 9,367 1,00 35,25 C

ATOM 2412 C VAL C 5 -32,391 -25,265 10,586 1,00 35,99 C

ATOM 2413 О VAL C 5 -33,154 -26,161 10,918 1,00 34,91 О

ATOM 2414 CB VAL C 5 -32,386 -25,701 8,102 1,00 40,70 C

ATOM 2415 CGI VAL C 5 -33,389 -24,564 7,876 1,00 40,07 C

ATOM 2416 CG2 VAL C 5 -31,506 -25,886 6,869 1,00 41,08 C

ATOM 2417 N GLN C 6 -32,333 -24,097 11,211 1,00 33,06 N

ATOM 2418 CA GLN C 6 -33,158 -23,799 12,378 1,00 32,21 C

ATOM 2419 C GLN C 6 -34,440 -23,054 12,027 1,00 36,16 C

ATOM 2420 О GLN C 6 -34,502 -22,364 11,005 1,00 34,87 О

ATOM 2421 CB GLN C 6 -32,361 -22,988 13,389 1,00 31,67C

ATOM 2422 CG GLN C 6 -31,222 -23,775 13,990 1,00 33,35C

ATOM 2423 CD GLN C 6 -30,507 -22,998 15,048 1,00 37,99C

ATOM 2424 OE1 GLN C 6 -29,304 -22,789 14,961 1,00 32,51О

ATOM 2425 NE2 GLN C 6 -31,204 -22,608 16,108 1,00 34,83N

ATOM 2426 N SER C 7 -35,442 -23,145 12,912 1,00 33,10 N

ATOM 2427 CA SER C 7 -36,714 -22,436 12,728 1,00 32,33 C

ATOM 2428 C SER C 7 -36,530 -20,904 12,916 1,00 34,33 C

ATOM 2429 О SER C 7 -35,486 -20,441 13,402 1,00 32,67 О

ATOM 2430 CB SER C 7 -37,790 -22,996 13,663 1,00 34,45 C

ATOM 2431 OG SER C 7 -37,340 -23,094 15,005 1,00 35,38 О

ATOM 2432 N GLY C 8 -37,536 -20,129 12,496 1,00 31,79 N

ATOM 2433 CA GLY C 8 -37,499 -18,664 12,499 1,00 30,41 C

ATOM 2434 C GLY C 8 -37,561 -17,981 13,867 1,00 36,01C

ATOM 2435 О GLY C 8 -37,760 -18,623 14,905 1,00 34,46О

ATOM 2436 N ALA C 9 -37,403 -16,640 13,835 1,00 33,40N

ATOM 2437 CA ALA C 9 -37,415 -15,754 15,005 1,00 32,51 C

ATOM 2438 C ALA C 9 -38,680 -15,933 15,864 1,00 36,53 C

- 156 043052

ATOM 2439 О ALA С 9 -39,776 -16,123 15,326 1,00 35,95 О

ATOM 2440 СВ ALA С 9 -37,297 -14,299 14,553 1,00 32,54 С

АТОМ 2441 N GLU С 10 -38,514 -15,861 17,196 1,00 32,54 N

АТОМ 2442 CA GLU С 10 -39,591 -16,043 18,164 1,00 33,03 С

АТОМ 2443 С GLU С 10 -39,707 -14,842 19,084 1,00 37,36 С

АТОМ 2444 О GLU С 10 -38,696 -14,324 19,553 1,00 36,85 О

АТОМ 2445 СВ GLU С 10 -39,315 -17,292 19,032 1,00 34,31С

АТОМ 2446 CG GLU С 10 -39,313 -18,599 18,253 1,00 39,42С

АТОМ 2447 CD GLU С 10 -40,668 -19,160 17,863 1,00 50,94С

АТОМ 2448 ОЕ1 GLU С 10 -41,708 -18,572 18,239 1,00 42,37 О

АТОМ 2449 ОЕ2 GLU С 10 -40,684 -20,185 17,146 1,00 50,90 О

АТОМ 2450 N VAL С 11 -40,946 -14,421 19,373 1,00 35,06 N

АТОМ 2451 CA VAL С 11 -41,231 -13,301 20,272 1,00 34,90 С

АТОМ 2452 С VAL С 11 -42,306 -13,780 21,230 1,00 40,99 С

АТОМ 2453 О VAL С 11 -43,376 -14,192 20,788 1,00 42,78 О

АТОМ 2454 СВ VAL С 11 -41,638 -12,035 19,496 1,00 36,50 С

АТОМ 2455 CGI VAL С 11 -41,698 -10,828 20,427 1,00 35,68 С

АТОМ 2456 CG2 VAL С 11 -40,656 -11,786 18,359 1,00 35,29 С

АТОМ 2457 N LYS С 12 -41,998 -13,797 22,526 1,00 38,39 N

АТОМ 2458 CA LYS С 12 -42,875 -14,357 23,553 1,00 39,13 С

АТОМ 2459 С LYS С 12 -43,030 -13,439 24,750 1,00 43,69 С

АТОМ 2460 О LYS С 12 -42,196 -12,567 24,985 1,00 41,69 О

АТОМ 2461 СВ LYS С 12 -42,269 -15,685 24,050 1,00 40,54С

АТОМ 2462 CG LYS С 12 -42,082 -16,767 22,986 1,00 40,87С

АТОМ 2463 CD LYS С 12 -43,385 -17,464 22,642 1,00 43,40С

АТОМ 2464 СЕ LYS С 12 -43,234 -18,398 21,470 1,00 49,33С

АТОМ 2465 NZ LYS С 12 -44,526 -19,027 21,098 1,00 60,76N

АТОМ 2466 N LYS С 13 -44,084 -13,682 25,538 1,00 43,27 N

АТОМ 2467 CA LYS С 13 -44,349 -12,946 26,772 1,00 44,58 С

АТОМ 2468 С LYS С 13 -43,672 -13,730 27,900 1,00 48,51 С

АТОМ 2469 О LYS С 13 -43,477 -14,941 27,741 1,00 47,08 О

АТОМ 2470 СВ LYS С 13 -45,860 -12,867 27,055 1,00 48,66С

АТОМ 2471 CG LYS С 13 -46,686 -12,183 25,969 1,00 54,31С

АТОМ 2472 CD LYS С 13 -46,569 -10,668 25,985 1,00 57,75С

АТОМ 2473 СЕ LYS С 13 -47,609 -10,047 25,081 1,00 65,70С

АТОМ 2474 NZ LYS С 13 -47,421 -8,585 24,928 1,00 75,98 N

- 157 043052

ATOM 2475 N PRO C 14 -43,359 -13,079 29,052 1,00 46,94 N

ATOM 2476 CA PRO C 14 -42,788 -13,806 30,180 1,00 47,12 C

ATOM 2477 C PRO C 14 -43,771 -14,860 30,685 1,00 51,78 C

ATOM 2478 О PRO C 14 -44,981 -14,614 30,686 1,00 51,43 О

ATOM 2479 CB PRO C 14 -42,535 -12,708 31,217 1,00 49,87C

ATOM 2480 CG PRO C 14 -42,284 -11,487 30,418 1,00 52,81C

ATOM 2481 CD PRO C 14 -42,928 -11,667 29,071 1,00 47,65C

ATOM 2482 N GLY C 15 -43,257 -16,053 31,042 1,00 48,78 N

ATOM 2483 CA GLY C 15 -44,082 -17,158 31,533 1,00 50,33 C

ATOM 2484 C GLY C 15 -44,502 -18,130 30,431 1,00 53,71C

ATOM 2485 О GLY C 15 -44,949 -19,224 30,750 1,00 54,84О

ATOM 2486 N ALA C 16 -44,368 -17,752 29,141 1,00 49,31N

ATOM 2487 CA ALA C 16 -44,747 -18,631 28,027 1,00 48,16 C

ATOM 2488 C ALA C 16 -43,645 -19,659 27,746 1,00 49,44C

ATOM 2489 О ALA C 16 -42,606 -19,656 28,407 1,00 47,16О

ATOM 2490 CB ALA C 16 -45,003 -17,792 26,780 1,00 47,36 C

ATOM 2491 N SER C 17 -43,867 -20,529 26,757 1,00 46,84 N

ATOM 2492 CA SER C 17 -42,863 -21,495 26,317 1,00 45,71 C

ATOM 2493 C SER C 17 -42,603 -21,337 24,814 1,00 48,77 C

ATOM 2494 О SER C 17 -43,441 -20,803 24,076 1,00 47,69 О

ATOM 2495 CB SER C 17 -43,270 -22,926 26,675 1,00 51,76 C

ATOM 2496 OG SER C 17 -44,464 -23,326 26,024 1,00 66,12 О

ATOM 2497 N VAL C 18 -41,405 -21,746 24,378 1,00 44,66 N

ATOM 2498 CA VAL C 18 -40,986 -21,671 22,971 1,00 42,57 C

ATOM 2499 C VAL C 18 -40,295 -22,984 22,619 1,00 45,17 C

ATOM 2500 О VAL C 18 -39,628 -23,557 23,468 1,00 44,37 О

ATOM 2501 CB VAL C 18 -40,069 -20,431 22,706 1,00 44,23 C

ATOM 2502 CGI VAL C 18 -38,754 -20,510 23,478 1,00 43,39 C

ATOM 2503 CG2 VAL C 18 -39,800 -20,240 21,221 1,00 42,49 C

ATOM 2504 N LYS C 19 -40,449 -23,445 21,376 1,00 42,15 N

ATOM 2505 CA LYS C 19 -39,828 -24,671 20,886 1,00 41,47 C

ATOM 2506 C LYS C 19 -39,072 -24,335 19,609 1,00 42,91 C

ATOM 2507 О LYS C 19 -39,684 -23,911 18,631 1,00 43,64 О

ATOM 2508 CB LYS C 19 -40,888 -25,751 20,634 1,00 45,01C

ATOM 2509 CG LYS C 19 -40,308 -27,156 20,448 1,00 49,05C

ATOM 2510 CD LYS C 19 -41,418 -28,215 20,426 1,00 60,62C

- 158 043052

ATOM

2511

CE LYS C 19 -40,902 -29,617 20,650 1,00 79,35 C

ATOM

2512

NZ LYS C 19 -42,009 -30,605 20,812 1,00 88,79 N

ATOM

2513

N VAL C 20 -37,738 -24,469 19,637 1,00 37,38 N

ATOM

2514

CAVAL C 20 -36,871 -24,175 18,489 1,00 35,44 C

ATOM

2515

C VAL C 20 -36,495 -25,507 17,860 1,00 38,00 C

ATOM

2516

О VAL C 20 -36,146 -26,430 18,585 1,00 36,91 О

ATOM

2517

CB VAL C 20 -35,611 -23,375 18,931 1,00 37,50 C

ATOM

2518

CGI VAL

C 20 -34,650 -23,152 17,759 1,00 36,60 C

ATOM

2519

CG2 VAL

C 20 -36,016 -22,038 19,552 1,00 36,75 C

ATOM

2520

N SER C

-36,574 -25,615 16,531 1,00 34,47 N

ATOM

2521

CA SER C 21 -36,224 -26,848 15,830 1,00 34,87 C

ATOM

2522

C SER C 21 -34,903 -26,650 15,077 1,00 40,61 C

ATOM

2523

О SER C 21 -34,486 -25,518 14,820 1,00 39,50 О

ATOM

2524

CB SER C 21 -37,344 -27,262 14,883 1,00 37,26 C

ATOM

2525

OG SER C 21 -37,457 -26,351 13,803 1,00 48,80 О

ATOM

2526

N CYS C 22 -34,236 -27,757 14,773 1,00 37,95 N

ATOM

2527

CA CYS C 22 -32,951 -27,774 14,074 1,00 38,24 C

ATOM

2528

C CYS C 22 -32,951 -29,009 13,165 1,00 42,29 C

ATOM

2529

О CYS C 22 -32,783 -30,117 13,660 1,00 43,00 О

ATOM

2530

CB CYS C 22 -31,816 -27,820 15,100 1,00 38,86 C

ATOM

2531

SG CYS C 22 -30,172 -28,148 14,408 1,00 42,75 S

ATOM

2532

N LYS C 23 -33,185 -28,822 11,862 1,00 39,28 N

ATOM

2533

CA LYS C 23 -33,231 -29,916 10,893 1,00 39,83 C

ATOM

2534

C LYS C 23 -31,852 -30,134 10,289 1,00 43,79 C

ATOM

2535

О LYS C 23 -31,302 -29,223 9,686 1,00 42,31 О

ATOM

2536

CB

LYS

-34,254

-29,611

9,787

1,00

43, 14

ATOM

2537

CG

LYS

-34,474

-30,785

8,825

1,00

52,94

ATOM

2538

CD

LYS

-35,742

-30,618

7,995

1,00

58,08

ATOM

2539

CE

LYS

-35,928

-31,725

6, 979

1,00

60,42

ATOM

2540

NZ

LYS

-36,619

-32,901

7,555

1,00

59,48

ATOM

2541

N ALA C 24 -31,310 -31,351 10,425

1,00

42,99

ATOM

2542

CA ALA C 24 -29,998 -31,718 9,891

1,00

43,47

ATOM

2543

C ALA C 24 -30,144 -32,476 8,573 1,00 48,66 C

ATOM

2544

О ALA C 24 -31,098 -33,241 8,411 1,00 49,47 О

ATOM

2545

CB ALA C 24 -29,276 -32,604 10,890 1,00 44,42 C

ATOM

2546

N SER C 25 -29,178 -32,302 7,652 1,00 44,71 N

- 159 043052

ATOM 2547 CA SER C 25 -29,148 -33,037 6,384 1,00 45,72 C

ATOM 2548 C SER C 25 -27,706 -33,238 5,922 1,00 50,57 C

ATOM 2549 О SER C 25 -26,822 -32,512 6,371 1,00 49,51 О

ATOM 2550 CB SER C 25 -29,960 -32,303 5,314 1,00 49,16 C

ATOM 2551 OG SER C 25 -29,436 -31,022 5,006 1,00 50,85 О

ATOM 2552 N GLY C 26 -27,468 -34,242 5,053 1,00 49,05 N

ATOM 2553 CA GLY C 26 -26,155 -34,522 4,467 1,00 49,32 C

ATOM 2554 C GLY C 26 -25,287 -35,531 5,217 1,00 53,45C

ATOM 2555 О GLY C 26 -24,162 -35,785 4,780 1,00 54,80О

ATOM 2556 N TYR C 27 -25,778 -36,114 6,324 1,00 48,38N

ATOM 2557 CA TYR C 27 -25,002 -37,088 7,103 1,00 46,86 C

ATOM 2558 C TYR C 27 -25,932 -37,981 7,925 1,00 51,13C

ATOM 2559 О TYR C 27 -27,143 -37,750 7,938 1,00 50,12О

ATOM 2560 CB TYR C 27 -24,001 -36,349 8,015 1,00 45,84 C

ATOM 2561 CG TYR C 27 -24,643 -35,614 9,175 1,00 43,92 C

ATOM 2562 GDI TYR C 27 -25,131 -34,323 9,024 1,00 44,44 C

ATOM 2563 CD2 TYR C 27 -24,730 -36,201 10,432 1,00 43,61C

ATOM 2564 CE1 TYR C 27 -25,684 -33,627 10,100 1,00 43,30C

ATOM 2565 CE2 TYR C 27 -25,284 -35,520 11,515 1,00 42,32C

ATOM 2566 CZ TYR C 27 -25,766 -34,234 11,345 1,00 47,43 C

ATOM 2567 OH TYR C 27 -26,322 -33,590 12,424 1,00 44,79 О

ATOM 2568 N THR C 28 -25,363 -38,986 8,621 1,00 49,09 N

ATOM 2569 CA THR C 28 -26,132 -39,907 9,466 1,00 49,25 C

ATOM 2570 C THR C 28 -26,422 -39,195 10,792 1,00 51,29 C

ATOM 2571 О THR C 28 -25,548 -39,106 11,649 1,00 50,53 О

ATOM 2572 CB THR C 28 -25,378 -41,240 9,638 1,00 59,68 C

ATOM 2573 OGI THR C 28 -25,036 -41,741 8,344 1,00 59,87 О

ATOM 2574 CG2 THR C 28 -26,197 -42,289 10,394 1,00 58,03 C

ATOM 2575 N PHE C 29 -27,644 -38,652 10,926 1,00 46,66 N

ATOM 2576 CA PHE C 29 -28,109 -37,880 12,083 1,00 44,45 C

ATOM 2577 С PHE C 29 -27,841 -38,536 13,439 1,00 46,44 C

ATOM 2578 О PHE C 29 -27,371 -37,866 14,353 1,00 44,51 О

ATOM 2579 CB PHE C 29 -29,618 -37,587 11,943 1,00 45,95 C

ATOM 2580 CG PHE C 29 -30,193 -36,720 13,040 1,00 45,40 C

ATOM 2581 GDI PHE C 29 -29,801 -35,396 13,178 1,00 45,67 C

ATOM 2582 CD2 PHE C 29 -31,106 -37,239 13,954 1,00 46,43 C

- 160 043052

ATOM 2583 CE1 РНЕ С 29 -30,325 -34,596 14,194 1,00 45,11 С

ATOM 2584 СЕ2 РНЕ С 29 -31,652 -36,430 14,951 1,00 47,75 С

АТОМ 2585 CZ РНЕ С 29 -31,255 -35,117 15,069 1,00 44,49 С

АТОМ 2586 N THR С 30 -28,108 -39,844 13,546 1,00 44,66 N

АТОМ 2587 CA THR С 30 -27,971 -40,605 14,793 1,00 44,62 С

АТОМ 2588 С THR С 30 -26,521 -40,998 15,170 1,00 46,75 С

АТОМ 2589 О THR С 30 -26,341 -41,611 16,214 1,00 44,59 О

АТОМ 2590 СВ THR С 30 -28,879 -41,843 14,734 1,00 54,91 С

АТОМ 2591 OGI THR С 30 -28,458 -42,673 13,653 1,00 58,28 О

АТОМ 2592 CG2 THR С 30 -30,354 -41,475 14,559 1,00 52,29 С

АТОМ 2593 N ASN С 31 -25,495 -40,624 14,366 1,00 43,46 N

АТОМ 2594 CA ASN С 31 -24,084 -40,936 14,667 1,00 43,21 С

АТОМ 2595 С ASN С 31 -23,329 -39,787 15,353 1,00 44,04 С

АТОМ 2596 О ASN С 31 -22,212 -39,999 15,817 1,00 44,02 О

АТОМ 2597 СВ ASN С 31 -23,344 -41,333 13,378 1,00 43,58 С

АТОМ 2598 CG ASN С 31 -23,662 -42,722 12,874 1,00 59,56 С

АТОМ 2599 OD1 ASN С 31 -24,315 -43,539 13,539 1,00 52,70 О

АТОМ 2600 ND2 ASN С 31 -23,206 -43,018 11,674 1,00 53,16 N

АТОМ 2601 N TYR С 32 -23,923 -38,584 15,414 1,00 40,04 N

АТОМ 2602 CA TYR С 32 -23,294 -37,394 15,983 1,00 38,44 С

АТОМ 2603 С TYR С 32 -24,233 -36,723 16,960 1,00 41,02 С

АТОМ 2604 О TYR С 32 -25,401 -36,561 16,637 1,00 40,60 О

АТОМ 2605 СВ TYR С 32 -22,961 -36,394 14,850 1,00 38,37С

АТОМ 2606 CG TYR С 32 -22,034 -36,960 13,799 1,00 40,01С

АТОМ 2607 GDI TYR С 32 -22,526 -37,722 12,745 1,00 41,48С

АТОМ 2608 CD2 TYR С 32 -20,662 -36,775 13,883 1,00 41,23С

АТОМ 2609 СЕ1 TYR С 32 -21,673 -38,280 11,796 1,00 41,39С

АТОМ 2610 СЕ2 TYR С 32 -19,796 -37,339 12,949 1,00 43,02С

АТОМ 2611 CZ TYR С 32 -20,306 -38,083 11,898 1,00 48,67С

АТОМ 2612 ОН TYR С 32 -19,468 -38,606 10,938 1,00 49,51О

АТОМ 2613 N GLY С 33 -23,733 -36,290 18,125 1,00 37,23 N

АТОМ 2614 CA GLY С 33 -24,545 -35,563 19,098 1,00 36,84 С

АТОМ 2615 С GLY С 33 -24,838 -34,150 18,599 1,00 40,03С

АТОМ 2616 О GLY С 33 -24,157 -33,661 17,693 1,00 39,15О

АТОМ 2617 N МЕТ С 34 -25,861 -33,501 19,173 1,00 35,88N

АТОМ 2618 САМЕТ С 34 -26,236 -32,144 18,797 1,00 34,40 С

- 161 043052

ATOM 2619 C MET С 34 -26,134 -31,239 20,019 1,00 39,38 С

ATOM 2620 О МЕТ С 34 -26,831 -31,463 21,009 1,00 40,01 О

АТОМ 2621 СВ МЕТ С 34 -27,666 -32,111 18,229 1,00 35,96С

АТОМ 2622 CG МЕТ С 34 -28,039 -30,776 17,579 1,00 37,38С

АТОМ 2623 SD МЕТ С 34 -26,998 -30,373 16,152 1,00 39,09S

АТОМ 2624 СЕ МЕТ С 34 -27,629 -31,496 14,976 1,00 35,89С

АТОМ 2625 N ASN С 35 -25,253 -30,232 19,949 1,00 35,27 N

АТОМ 2626 CA ASN С 35 -25,070 -29,236 21,010 1,00 34,40 С

АТОМ 2627 С ASN С 35 -26,072 -28,130 20,849 1,00 37,48 С

АТОМ 2628 О ASN С 35 -26,507 -27,859 19,735 1,00 36,13 О

АТОМ 2629 СВ ASN С 35 -23,682 -28,578 20,927 1,00 32,88 С

АТОМ 2630 CG ASN С 35 -22,531 -29,545 21,095 1,00 45,03 С

АТОМ 2631 OD1 ASN С 35 -22,213 -29,971 22,211 1,00 36,36 О

АТОМ 2632 ND2 ASN С 35 -21,893 -29,927 20,006 1,00 37,11 N

АТОМ 2633 N TRP С 36 -26,393 -27,451 21,956 1,00 34,97 N

АТОМ 2634 CA TRP С 36 -27,235 -26,258 21,970 1,00 33,48 С

АТОМ 2635 С TRP С 36 -26,364 -25,194 22,617 1,00 35,71 С

АТОМ 2636 О TRP С 36 -25,736 -25,477 23,633 1,00 35,70 О

АТОМ 2637 СВ TRP С 36 -28,554 -26,471 22,725 1,00 32,77 С

АТОМ 2638 CG TRP С 36 -29,505 -27,349 21,972 1,00 34,47 С

АТОМ 2639 GDI TRP С 36 -29,633 -28,704 22,096 1,00 38,31С

АТОМ 2640 CD2 TRP С 36 -30,277 -26,977 20,822 1,00 33,76С

АТОМ 2641 NE1 TRP С 36 -30,519 -29,182 21,154 1,00 37,71N

АТОМ 2642 СЕ2 TRP С 36 -30,908 -28,147 20,343 1,00 37,56С

АТОМ 2643 СЕЗ TRP С 36 -30,552 -25,753 20,188 1,00 34,01С

АТОМ 2644 CZ2 TRP С 36 -31,801 -28,127 19,270 1,00 36,52С

АТОМ 2645 CZ3 TRP С 36 -31,473 -25,728 19,152 1,00 34,99С

АТОМ 2646 СН2 TRP С 36 -32,075 -26,905 18,693 1,00 36,19С

АТОМ 2647 N VAL С 37 -26,225 -24,029 21,962 1,00 31,77 N

АТОМ 2648 CA VAL С 37 -25,368 -22,931 22,408 1,00 31,68 С

АТОМ 2649 С VAL С 37 -26,214 -21,647 22,471 1,00 35,29 С

АТОМ 2650 О VAL С 37 -26,931 -21,340 21,522 1,00 33,99 О

АТОМ 2651 СВ VAL С 37 -24,172 -22,788 21,412 1,00 34,93 С

АТОМ 2652 CGI VAL С 37 -23,336 -21,531 21,676 1,00 34,09 С

АТОМ 2653 CG2 VAL С 37 -23,300 -24,046 21,423 1,00 35,24 С

АТОМ 2654 N LYS С 38 -26,111 -20,898 23,574 1,00 33,55 N

- 162 043052

ATOM 2655 CA LYS C 38 -26,828 -19,631 23,766 1,00 32,90 C

ATOM 2656 C LYS C 38 -25,879 -18,433 23,539 1,00 36,90 C

ATOM 2657 О LYS C 38 -24,732 -18,444 24,001 1,00 35,60 О

ATOM 2658 CB LYS C 38 -27,403 -19,567 25,201 1,00 34,99C

ATOM 2659 CG LYS C 38 -28,113 -18,248 25,543 1,00 35,35C

ATOM 2660 CD LYS C 38 -28,588 -18,249 26,978 1,00 39,90C

ATOM 2661 CE LYS C 38 -29,184 -16,929 27,403 1,00 34,43C

ATOM 2662 NZ LYS C 38 -29,763 -17,022 28,775 1,00 38,69N

ATOM 2663 N GLN C 39 -26,384 -17,382 22,865 1,00 33,51 N

ATOM 2664 CA GLN C 39 -25,650 -16,136 22,683 1,00 32,91 C

ATOM 2665 C GLN C 39 -26,573 -14,967 23,027 1,00 36,70 C

ATOM 2666 О GLN C 39 -27,387 -14,546 22,200 1,00 35,72 О

ATOM 2667 CB GLN C 39 -25,074 -16,007 21,265 1,00 33,64C

ATOM 2668 CG GLN C 39 -24,267 -14,717 21,087 1,00 35,85C

ATOM 2669 CD GLN C 39 -23,282 -14,813 19,955 1,00 40,10C

ATOM 2670 OE1 GLN C 39 -23,590 -15,333 18,884 1,00 34,17 О

ATOM 2671 NE2 GLN C 39 -22,099 -14,253 20,121 1,00 33,15 N

ATOM 2672 N ALA C 40 -26,462 -14,465 24,262 1,00 35,19 N

ATOM 2673 CA ALA C 40 -27,256 -13,328 24,726 1,00 35,91 C

ATOM 2674 C ALA C 40 -26,802 -12,042 23,985 1,00 42,15 C

ATOM 2675 О ALA C 40 -25,671 -12,015 23,489 1,00 41,64 О

ATOM 2676 CB ALA C 40 -27,120 -13,172 26,237 1,00 37,19 C

ATOM 2677 N PRO C 41 -27,681 -11,015 23,846 1,00 40,24 N

ATOM 2678 CA PRO C 41 -27,300 -9,803 23,094 1,00 40,39 C

ATOM 2679 C PRO C 41 -26,025 -9,141 23,636 1,00 44,02 C

ATOM 2680 О PRO C 41 -25,911 -8,909 24,837 1,00 44,30 О

ATOM 2681 CB PRO C 41 -28,538 -8,894 23,208 1,00 42,20 C

ATOM 2682 CG PRO C 41 -29,652 -9,805 23,576 1,00 46,06 C

ATOM 2683 CD PRO C 41 -29,025 -10,859 24,436 1,00 41,75 C

ATOM 2684 N GLY C 42 -25,036 -8,940 22,757 1,00 40,30 N

ATOM 2685 CA GLY C 42 -23,757 -8,345 23,127 1,00 40,77 C

ATOM 2686 C GLY C 42 -22,812 -9,293 23,876 1,00 45,52 C

ATOM 2687 О GLY C 42 -21,745 -8,838 24,279 1,00 48,05 О

ATOM 2688 N GLN C 43 -23,160 -10,596 24,043 1,00 39,62 N

ATOM 2689 CA GLN C 43 -22,328 -11,545 24,791 1,00 40,29 C

ATOM 2690 C GLN C 43 -21,691 -12,601 23,865 1,00 43,71 C

- 163 043052

ATOM 2691 О GLN С 43 -21,931 -12,611 22,655 1,00 41,68 О

ATOM 2692 СВ GLN С 43 -23,168 -12,233 25,898 1,00 42,01С

АТОМ 2693 CG GLN С 43 -23,863 -11,283 26,883 1,00 58,06С

АТОМ 2694 CD GLN С 43 -22,892 -10,511 27,738 1,00 86,83С

АТОМ 2695 ОЕ1 GLN С 43 -22,255 -11,069 28,638 1,00 88,11 О

АТОМ 2696 NE2 GLN С 43 -22,754 -9,211 27,490 1,00 80,98 N

АТОМ 2697 N GLY С 44 -20,879 -13,487 24,455 1,00 42,03 N

АТОМ 2698 CA GLY С 44 -20,186 -14,559 23,752 1,00 41,97 С

АТОМ 2699 С GLY С 44 -21,034 -15,828 23,709 1,00 44,75С

АТОМ 2700 О GLY С 44 -22,256 -15,760 23,819 1,00 44,03О

АТОМ 2701 N LEU С 45 -20,378 -16,986 23,571 1,00 41,38N

АТОМ 2702 CA LEU С 45 -21,051 -18,286 23,471 1,00 38,74 С

АТОМ 2703 С LEU С 45 -21,096 -19,009 24,820 1,00 41,07 С

АТОМ 2704 О LEU С 45 -20,115 -19,017 25,558 1,00 41,06 О

АТОМ 2705 СВ LEU С 45 -20,354 -19,142 22,400 1,00 37,85 С

АТОМ 2706 CG LEU С 45 -20,165 -18,444 21,029 1,00 40,26 С

АТОМ 2707 GDI LEU С 45 -19,302 -19,273 20,106 1,00 39,97 С

АТОМ 2708 CD2 LEU С 45 -21,512 -18,127 20,365 1,00 39,04 С

АТОМ 2709 N LYS С 46 -22,254 -19,604 25,137 1,00 36,64 N

АТОМ 2710 CA LYS С 46 -22,491 -20,356 26,363 1,00 36,49 С

АТОМ 2711 С LYS С 46 -23,068 -21,720 25,970 1,00 37,74 С

АТОМ 2712 О LYS С 46 -24,114 -21,778 25,336 1,00 35,53 О

АТОМ 2713 СВ LYS С 46 -23,482 -19,579 27,259 1,00 38,67С

АТОМ 2714 CG LYS С 46 -23,730 -20,181 28,639 1,00 47,96С

АТОМ 2715 CD LYS С 46 -22,544 -20,014 29,567 1,00 59,13С

АТОМ 2716 СЕ LYS С 46 -22,893 -20,303 31,011 1,00 66,31С

АТОМ 2717 NZ LYS С 46 -21,727 -20,086 31,910 1,00 72,38N

АТОМ 2718 N TRP С 47 -22,391 -22,810 26,350 1,00 36,18 N

АТОМ 2719 CA TRP С 47 -22,844 -24,174 26,054 1,00 35,61 С

АТОМ 2720 С TRP С 47 -24,004 -24,522 26,986 1,00 39,00 С

АТОМ 2721 О TRP С 47 -23,853 -24,431 28,197 1,00 39,05 О

АТОМ 2722 СВ TRP С 47 -21,693 -25,160 26,260 1,00 34,55 С

АТОМ 2723 CG TRP С 47 -21,961 -26,568 25,810 1,00 35,04 С

АТОМ 2724 GDI TRP С 47 -21,904 -27,043 24,532 1,00 37,01 С

АТОМ 2725 CD2 TRP С 47 -22,128 -27,714 26,658 1,00 35,28 С

АТОМ 2726 NE1 TRP С 47 -22,099 -28,405 24,526 1,00 36,66 N

- 164 043052

ATOM 2727 CE2 TRP C 47 -22,197 -28,848 25,820 1,00 38,90C

ATOM 2728 CE3 TRP C 47 -22,225 -27,893 28,048 1,00 37,36C

ATOM 2729 CZ2 TRP C 47 -22,360 -30,139 26,322 1,00 38,56C

ATOM 2730 CZ3 TRP C 47 -22,374 -29,180 28,548 1,00 39,47C

ATOM 2731 CH2 TRP C 47 -22,451 -30,283 27,690 1,00 39,81C

ATOM 2732 N MET C 48 -25,164 -24,876 26,420 1,00 34,50 N

ATOM 2733 САМЕТ C 48 -26,359 -25,221 27,204 1,00 34,00 C

ATOM 2734 C MET C 48 -26,370 -26,703 27,577 1,00 38,45 C

ATOM 2735 О MET C 48 -26,899 -27,080 28,623 1,00 38,74 О

ATOM 2736 CB MET C 48 -27,624 -24,887 26,406 1,00 34,84C

ATOM 2737 CG MET C 48 -27,707 -23,431 26,014 1,00 36,90C

ATOM 2738 SD MET C 48 -29,006 -23,169 24,819 1,00 39,77S

ATOM 2739 CE MET C 48 -30,444 -23,408 25,832 1,00 37,72C

ATOM 2740 N GLY C 49 -25,787 -27,534 26,710 1,00 34,76 N

ATOM 2741 CA GLY C 49 -25,736 -28,969 26,881 1,00 34,43 C

ATOM 2742 C GLY C 49 -25,755 -29,614 25,502 1,00 37,75C

ATOM 2743 О GLY C 49 -25,497 -28,945 24,496 1,00 36,33О

ATOM 2744 N TRP C 50 -26,087 -30,892 25,449 1,00 35,13N

ATOM 2745 CA TRP C 50 -26,178 -31,620 24,185 1,00 34,61 C

ATOM 2746 C TRP C 50 -27,186 -32,747 24,308 1,00 39,74C

ATOM 2747 О TRP C 50 -27,604 -33,081 25,417 1,00 40,68О

ATOM 2748 CB TRP C 50 -24,798 -32,163 23,758 1,00 33,36 C

ATOM 2749 CG TRP C 50 -24,315 -33,329 24,572 1,00 35,59 C

ATOM 2750 GDI TRP C 50 -23,927 -33,312 25,879 1,00 38,84C

ATOM 2751 CD2 TRP C 50 -24,170 -34,685 24,128 1,00 36,15C

ATOM 2752 NE1 TRP C 50 -23,561 -34,572 26,280 1,00 39,22N

ATOM 2753 CE2 TRP C 50 -23,711 -35,439 25,229 1,00 40,58C

ATOM 2754 CE3 TRP C 50 -24,398 -35,340 22,908 1,00 37,44C

ATOM 2755 CZ2 TRP C 50 -23,456 -36,813 25,144 1,00 40,47C

ATOM 2756 CZ3 TRP C 50 -24,166 -36,707 22,829 1,00 39,61C

ATOM 2757 CH2 TRP C 50 -23,704 -37,429 23,939 1,00 41,17C

ATOM 2758 N TLE C 51 -27,582 -33,321 23,172 1,00 36,40 N

ATOM 2759 CA TLE C 51 -28,504 -34,444 23,143 1,00 36,37 C

ATOM 2760 C TLE C 51 -27,886 -35,575 22,345 1,00 40,89 C

ATOM 2761 О TLE C 51 -27,328 -35,348 21,267 1,00 37,88 О

ATOM 2762 CB TLE C 51 -29,929 -34,067 22,632 1,00 38,96 C

- 165 043052

ATOM 2763 CGI ILE C 51 -30,880 -35,296 22,714 1,00 40,23C

ATOM 2764 CG2 ILE C 51 -29,903 -33,497 21,207 1,00 38,66C

ATOM 2765 CDI ILE C 51 -32,294 -34,955 22,868 1,00 42,97C

ATOM 2766 N ASN C 52 -27,993 -36,803 22,887 1,00 39,50 N

ATOM 2767 CA ASN C 52 -27,517 -37,998 22,221 1,00 40,16 C

ATOM 2768 C ASN C 52 -28,559 -38,324 21,145 1,00 44,28 C

ATOM 2769 О ASN C 52 -29,687 -38,655 21,484 1,00 45,11 О

ATOM 2770 CB ASN C 52 -27,356 -39,143 23,230 1,00 40,73 C

ATOM 2771 CG ASN C 52 -26,756 -40,402 22,660 1,00 48,81 C

ATOM 2772 OD1 ASN C 52 -27,157 -40,886 21,593 1,00 40,43 О

ATOM 2773 ND2 ASN C 52 -25,828 -41,006 23,380 1,00 44,29 N

ATOM 2774 N THR C 53 -28,194 -38,208 19,866 1,00 40,01 N

ATOM 2775 CA THR C 53 -29,122 -38,445 18,759 1,00 40,61 C

ATOM 2776 C THR C 53 -29,458 -39,923 18,540 1,00 47,82 C

ATOM 2777 О THR C 53 -30,422 -40,206 17,835 1,00 49,05 О

ATOM 2778 CB THR C 53 -28,614 -37,778 17,481 1,00 42,11 C

ATOM 2779 OGI THR C 53 -27,330 -38,317 17,157 1,00 40,46 О

ATOM 2780 CG2 THR C 53 -28,556 -36,254 17,619 1,00 36,13 C

ATOM 2781 N ASN C 54 -28,702 -40,858 19,145 1,00 45,92 N

ATOM 2782 CA ASN C 54 -28,969 -42,291 19,027 1,00 47,26 C

ATOM 2783 C ASN C 54 -29,991 -42,778 20,074 1,00 52,16 C

ATOM 2784 О ASN C 54 -30,904 -43,526 19,728 1,00 52,80 О

ATOM 2785 CB ASN C 54 -27,677 -43,085 19,172 1,00 46,35 C

ATOM 2786 CG ASN C 54 -27,825 -44,510 18,724 1,00 63,63 C

ATOM 2787 OD1 ASN C 54 -28,026 -45,408 19,535 1,00 57,04 О

ATOM 2788 ND2 ASN C 54 -27,739 -44,747 17,422 1,00 57,72 N

ATOM 2789 N THR C 55 -29,808 -42,393 21,350 1,00 49,15 N

ATOM 2790 CA THR C 55 -30,681 -42,799 22,467 1,00 49,96 C

ATOM 2791 C THR C 55 -31,715 -41,737 22,858 1,00 52,55 C

ATOM 2792 О THR C 55 -32,695 -42,079 23,519 1,00 53,10 О

ATOM 2793 CB THR C 55 -29,839 -43,107 23,716 1,00 55,75 C

ATOM 2794 OGI THR C 55 -29,190 -41,906 24,149 1,00 52,46 О

ATOM 2795 CG2 THR C 55 -28,826 -44,217 23,482 1,00 53,38 C

ATOM 2796 N GLY C 56 -31,461 -40,455 22,541 1,00 47,53 N

ATOM 2797 CA GLY C 56 -32,335 -39,350 22,933 1,00 46,25 C

ATOM 2798 C GLY C 56 -31,983 -38,788 24,307 1,00 49,63 C

- 166 043052

ATOM 2799 О GLY С 56 -32,654 -37,852 24,733 1,00 48,46 О

ATOM 2800 N GLU C 57 -30,936 -39,327 24,998 1,00 47,35 N

ATOM 2801 CA GLU C 57 -30,527 -38,851 26,326 1,00 47,15 C

ATOM 2802 C GLU C 57 -30,029 -37,401 26,231 1,00 48,06 C

ATOM 2803 О GLU C 57 -29,088 -37,147 25,471 1,00 45,81 О

ATOM 2804 CB GLU C 57 -29,398 -39,723 26,910 1,00 49,45C

ATOM 2805 CG GLU C 57 -28,947 -39,321 28,314 1,00 64,29C

ATOM 2806 CD GLU C 57 -27,633 -39,929 28,774 1,00 82,18C

ATOM 2807 OE1 GLU C 57 -27,256 -41,002 28,252 1,00 71,99 О

ATOM 2808 OE2 GLU C 57 -26,986 -39,337 29,670 1,00 70,32 О

ATOM 2809 N PRO C 58 -30,625 -36,469 27,023 1,00 43,61 N

ATOM 2810 CA PRO C 58 -30,164 -35,082 27,019 1,00 41,79 C

ATOM 2811 C PRO C 58 -29,218 -34,848 28,196 1,00 45,66 C

ATOM 2812 О PRO C 58 -29,383 -35,454 29,263 1,00 43,86 О

ATOM 2813 CB PRO C 58 -31,459 -34,304 27,185 1,00 42,77C

ATOM 2814 CG PRO C 58 -32,263 -35,157 28,134 1,00 48,63C

ATOM 2815 CD PRO C 58 -31,883 -36,592 27,801 1,00 45,10C

ATOM 2816 N THR C 59 -28,221 -33,981 28,001 1,00 40,90 N

ATOM 2817 CA THR C 59 -27,287 -33,608 29,057 1,00 40,69 C

ATOM 2818 C THR C 59 -27,391 -32,114 29,144 1,00 45,94 C

ATOM 2819 О THR C 59 -27,143 -31,444 28,145 1,00 44,05 О

ATOM 2820 CB THR C 59 -25,873 -34,060 28,718 1,00 48,14 C

ATOM 2821 OGI THR C 59 -25,850 -35,490 28,612 1,00 49,83 О

ATOM 2822 CG2 THR C 59 -24,840 -33,583 29,745 1,00 45,08 C

ATOM 2823 N TYR C 60 -27,775 -31,584 30,306 1,00 44,41 N

ATOM 2824 CA TYR C 60 -27,914 -30,145 30,501 1,00 44,47 C

ATOM 2825 C TYR C 60 -26,797 -29,627 31,364 1,00 51,94 C

ATOM 2826 О TYR C 60 -26,498 -30,236 32,385 1,00 53,63 О

ATOM 2827 CB TYR C 60 -29,240 -29,845 31,204 1,00 45,68C

ATOM 2828 CG TYR C 60 -30,431 -30,400 30,466 1,00 45,61C

ATOM 2829 GDI TYR C 60 -30,909 -29,785 29,314 1,00 45,81C

ATOM 2830 CD2 TYR C 60 -31,038 -31,580 30,877 1,00 46,46C

ATOM 2831 CE1 TYR C 60 -31,989 -30,309 28,613 1,00 45,64C

ATOM 2832 CE2 TYR C 60 -32,123 -32,112 30,187 1,00 46,88C

ATOM 2833 CZ TYR C 60 -32,601 -31,470 29,057 1,00 47,97C

ATOM 2834 OH TYR C 60 -33,652 -31,990 28,339 1,00 44,87О

- 167 043052

ATOM 2835 N ALA C 61 -26,227 -28,462 31,013 1,00 49,04 N

ATOM 2836 CA ALA C 61 -25,216 -27,821 31,860 1,00 49,52 C

ATOM 2837 C ALA C 61 -25,974 -27,254 33,079 1,00 54,51 C

ATOM 2838 О ALA C 61 -27,166 -26,964 32,960 1,00 52,25 О

ATOM 2839 CB ALA C 61 -24,502 -26,713 31,092 1,00 49,03 C

ATOM 2840 N GLU C 62 -25,319 -27,159 34,251 1,00 55,04 N

ATOM 2841 CA GLU C 62 -25,946 -26,732 35,523 1,00 56,11 C

ATOM 2842 C GLU C 62 -26,909 -25,546 35,427 1,00 58,34 C

ATOM 2843 О GLU C 62 -28,005 -25,610 35,988 1,00 58,41 О

ATOM 2844 CB GLU C 62 -24,878 -26,431 36,598 1,00 59,36C

ATOM 2845 CG GLU C 62 -24,475 -27,642 37,422 1,00 74,93C

ATOM 2846 CD GLU C 62 -25,560 -28,214 38,315 1,00 98,93C

ATOM 2847 OE1 GLU C 62 -26,317 -27,423 38,925 1,00 87,04 О

ATOM 2848 OE2 GLU C 62 -25,662 -29,460 38,394 1,00 96,62 О

ATOM 2849 N GLU C 63 -26,520 -24,486 34,702 1,00 53,32 N

ATOM 2850 CA GLU C 63 -27,346 -23,286 34,554 1,00 52,26 C

ATOM 2851 C GLU C 63 -28,607 -23,497 33,690 1,00 54,16 C

ATOM 2852 О GLU C 63 -29,485 -22,635 33,696 1,00 54,82 О

ATOM 2853 CB GLU C 63 -26,509 -22,127 33,975 1,00 53,10C

ATOM 2854 CG GLU C 63 -25,405 -21,652 34,906 1,00 67,32C

ATOM 2855 CD GLU C 63 -24,459 -20,632 34,303 1,00 93,33C

ATOM 2856 OE1 GLU C 63 -24,904 -19,491 34,041 1,00 97,70 О

ATOM 2857 OE2 GLU C 63 -23,263 -20,960 34,126 1,00 87,08 О

ATOM 2858 N РНЕ C 64 -28,701 -24,618 32,951 1,00 47,53 N

ATOM 2859 CA РНЕ C 64 -29,822 -24,918 32,066 1,00 45,54 C

ATOM 2860 С РНЕ C 64 -30,636 -26,135 32,532 1,00 52,73 C

ATOM 2861 О РНЕ С 64 -31,354 -26,737 31,738 1,00 51,76 О

ATOM 2862 СВ РНЕ С 64 -29,286 -25,087 30,626 1,00 44,42 С

АТОМ 2863 CG РНЕ С 64 -28,575 -23,846 30,133 1,00 43,34 С

АТОМ 2864 CD1 РНЕ С 64 -29,277 -22,826 29,511 1,00 44,21С

АТОМ 2865 CD2 РНЕ С 64 -27,227 -23,649 30,394 1,00 44,03С

АТОМ 2866 СЕ1 РНЕ С 64 -28,638 -21,645 29,125 1,00 44,23С

АТОМ 2867 СЕ2 РНЕ С 64 -26,579 -22,488 29,972 1,00 45,82С

АТОМ 2868 CZ РНЕ С 64 -27,285 -21,499 29,326 1,00 43,21 С

АТОМ 2869 N LYS С 65 -30,582 -26,460 33,833 1,00 53,05 N

АТОМ 2870 CA LYS С 65 -31,364 -27,563 34,386 1,00 54,38 С

- 168 043052

ATOM 2871 C LYS С 65 -32,677 -26,997 34,922 1,00 60,28 С

ATOM 2872 О LYS С 65 -32,646 -26,027 35,682 1,00 61,57 О

АТОМ 2873 СВ LYS С 65 -30,594 -28,270 35,517 1,00 58,48С

АТОМ 2874 CG LYS С 65 -29,411 -29,071 35,006 1,00 70,31С

АТОМ 2875 CD LYS С 65 -28,699 -29,850 36,095 1,00 77,70С

АТОМ 2876 СЕ LYS С 65 -27,540 -30,631 35,525 1,00 83,81С

АТОМ 2877 NZ LYS С 65 -26,829 -31,422 36,565 1,00 97,06N

АТОМ 2878 N GLY С 66 -33,820 -27,585 34,527 1,00 56,71 N

АТОМ 2879 CA GLY С 66 -35,135 -27,178 35,027 1,00 57,44 С

АТОМ 2880 С GLY С 66 -36,113 -26,782 33,936 1,00 59,55С

АТОМ 2881 О GLY С 66 -37,103 -27,486 33,715 1,00 60,68О

АТОМ 2882 N ARG С 67 -35,852 -25,646 33,274 1,00 52,60N

АТОМ 2883 CA ARG С 67 -36,747 -25,085 32,262 1,00 50,96 С

АТОМ 2884 С ARG С 67 -36,421 -25,479 30,817 1,00 51,95 С

АТОМ 2885 О ARG С 67 -37,259 -25,241 29,957 1,00 50,60 О

АТОМ 2886 СВ ARG С 67 -36,782 -23,550 32,397 1,00 48,23С

АТОМ 2887 CG ARG С 67 -37,183 -23,066 33,795 1,00 48,48С

АТОМ 2888 CD ARG С 67 -37,270 -21,547 33,905 1,00 45,81С

АТОМ 2889 NE ARG С 67 -35,997 -20,907 33,543 1,00 47,15N

АТОМ 2890 CZ ARG С 67 -35,775 -20,114 32,491 1,00 57,65С

АТОМ 2891 NH1 ARG С 67 -36,767 -19,797 31,660 1,00 40,82 N

АТОМ 2892 NH2 ARG С 67 -34,563 -19,614 32,276 1,00 39,93 N

АТОМ 2893 N РНЕ С 68 -35,266 -26,137 30,556 1,00 46,54 N

АТОМ 2894 СА РНЕ С 68 -34,836 -26,517 29,202 1,00 43,54 С

АТОМ 2895 С РНЕ С 68 -35,079 -28,010 28,927 1,00 46,49 С

АТОМ 2896 О РНЕ С 68 -34,752 -28,847 29,769 1,00 45,31 О

АТОМ 2897 СВ РНЕ С 68 -33,351 -26,153 28,985 1,00 43,64 С

АТОМ 2898 CG РНЕ С 68 -33,079 -24,678 29,189 1,00 44,64 С

АТОМ 2899 CD1 РНЕ С 68 -32,984 -24,140 30,471 1,00 48,34С

АТОМ 2900 CD2 РНЕ С 68 -32,999 -23,812 28,105 1,00 44,72С

АТОМ 2901 СЕ1 РНЕ С 68 -32,830 -22,767 30,662 1,00 48,00С

АТОМ 2902 СЕ2 РНЕ С 68 -32,821 -22,439 28,300 1,00 47,45С

АТОМ 2903 CZ РНЕ С 68 -32,756 -21,926 29,578 1,00 46,55 С

АТОМ 2904 N THR С 69 -35,661 -28,338 27,746 1,00 42,97 N

АТОМ 2905 CA THR С 69 -35,935 -29,722 27,352 1,00 43,22 С

АТОМ 2906 С THR С 69 -35,421 -29,977 25,935 1,00 44,51 С

- 169 043052

ATOM 2907 О THR С 69 -35,897 -29,348 24,990 1,00 43,05 О

ATOM 2908 СВ THR С 69 -37,432 -30,054 27,479 1,00 50,82 С

АТОМ 2909 OGI THR С 69 -37,892 -29,634 28,757 1,00 50,33 О

АТОМ 2910 CG2 THR С 69 -37,719 -31,541 27,326 1,00 50,08 С

АТОМ 2911 N РНЕ С 70 -34,456 -30,900 25,788 1,00 40,32 N

АТОМ 2912 СА РНЕ С 70 -33,929 -31,290 24,482 1,00 38,86 С

АТОМ 2913 С РНЕ С 70 -34,630 -32,580 24,043 1,00 45,20 С

АТОМ 2914 О РНЕ С 70 -34,671 -33,530 24,820 1,00 44,98 О

АТОМ 2915 СВ РНЕ С 70 -32,407 -31,524 24,536 1,00 39,78 С

АТОМ 2916 CG РНЕ С 70 -31,544 -30,405 25,075 1,00 40,33 С

АТОМ 2917 CD1 РНЕ С 70 -31,901 -29,072 24,888 1,00 42,65С

АТОМ 2918 CD2 РНЕ С 70 -30,340 -30,681 25,708 1,00 41,10С

АТОМ 2919 СЕ1 РНЕ С 70 -31,090 -28,040 25,378 1,00 42,65С

АТОМ 2920 СЕ2 РНЕ С 70 -29,536 -29,654 26,193 1,00 43,12С

АТОМ 2921 CZ РНЕ С 70 -29,910 -28,340 26,017 1,00 41,49 С

АТОМ 2922 N THR С 71 -35,204 -32,607 22,823 1,00 43,02 N

АТОМ 2923 CA THR С 71 -35,862 -33,804 22,275 1,00 43,93 С

АТОМ 2924 С THR С 71 -35,455 -33,983 20,817 1,00 47,17 С

АТОМ 2925 О THR С 71 -34,690 -33,169 20,291 1,00 44,33 О

АТОМ 2926 СВ THR С 71 -37,396 -33,742 22,437 1,00 50,03 С

АТОМ 2927 OGI THR С 71 -37,894 -32,582 21,770 1,00 48,76 О

АТОМ 2928 CG2 THR С 71 -37,830 -33,748 23,891 1,00 44,13 С

АТОМ 2929 N LEU С 72 -35,915 -35,087 20,196 1,00 45,85 N

АТОМ 2930 CA LEU С 72 -35,616 -35,420 18,808 1,00 46,48 С

АТОМ 2931 С LEU С 72 -36,822 -35,973 18,082 1,00 52,69 С

АТОМ 2932 О LEU С 72 -37,747 -36,499 18,707 1,00 53,00 О

АТОМ 2933 СВ LEU С 72 -34,582 -36,559 18,737 1,00 47,11 С

АТОМ 2934 CG LEU С 72 -33,302 -36,466 19,539 1,00 50,90 С

АТОМ 2935 GDI LEU С 72 -32,699 -37,828 19,682 1,00 51,59 С

АТОМ 2936 CD2 LEU С 72 -32,297 -35,525 18,878 1,00 50,84 С

АТОМ 2937 N ASP С 73 -36,732 -35,958 16,743 1,00 49,46 N

АТОМ 2938 CA ASP С 73 -37,622 -36,664 15,826 1,00 51,42 С

АТОМ 2939 С ASP С 73 -36,673 -37,173 14,740 1,00 55,97 С

АТОМ 2940 О ASP С 73 -36,407 -36,476 13,757 1,00 55,22 О

АТОМ 2941 СВ ASP С 73 -38,765 -35,798 15,262 1,00 53,45 С

АТОМ 2942 CG ASP С 73 -39,806 -36,585 14,472 1,00 63,69 С

- 170 043052

ATOM 2943 OD1 ASP C 73 -39,536 -37,759 14,127 1,00 65,24 О

ATOM 2944 OD2 ASP C 73 -40,890 -36,028 14,199 1,00 68,96 О

ATOM 2945 N THR C 74 -36,089 -38,358 14,986 1,00 53,14 N

ATOM 2946 CA THR C 74 -35,080 -38,958 14,110 1,00 52,84 C

ATOM 2947 C THR C 74 -35,614 -39,316 12,732 1,00 56,08 C

ATOM 2948 О THR C 74 -34,821 -39,346 11,794 1,00 54,60 О

ATOM 2949 CB THR C 74 -34,404 -40,163 14,789 1,00 57,27 C

ATOM 2950 OGI THR C 74 -35,399 -41,100 15,188 1,00 63,17 О

ATOM 2951 CG2 THR C 74 -33,574 -39,757 15,993 1,00 51,44 C

ATOM 2952 N SER C 75 -36,936 -39,548 12,584 1,00 54,66 N

ATOM 2953 CA SER C 75 -37,542 -39,841 11,274 1,00 55,95 C

ATOM 2954 C SER C 75 -37,401 -38,644 10,304 1,00 58,67 C

ATOM 2955 О SER C 75 -37,318 -38,858 9,098 1,00 59,17 О

ATOM 2956 CB SER C 75 -39,009 -40,248 11,419 1,00 59,94 C

ATOM 2957 OG SER C 75 -39,842 -39,153 11,766 1,00 65,14 О

ATOM 2958 N ILE C 76 -37,327 -37,404 10,833 1,00 53,62 N

ATOM 2959 CA ILE C 76 -37,127 -36,198 10,018 1,00 52,30 C

ATOM 2960 C ILE C 76 -35,811 -35,481 10,396 1,00 52,90 C

ATOM 2961 О ILE C 76 -35,688 -34,286 10,139 1,00 52,08 О

ATOM 2962 CB ILE C 76 -38,375 -35,265 10,064 1,00 55,25 C

ATOM 2963 CGI ILE C 76 -38,765 -34,893 11,512 1,00 54,74 C

ATOM 2964 CG2 ILE C 76 -39,551 -35,936 9,346 1,00 57,07 C

ATOM 2965 GDI ILE C 76 -39,674 -33,697 11,624 1,00 59,04 C

ATOM 2966 N SER C 77 -34,810 -36,228 10,941 1,00 47,96 N

ATOM 2967 CA SER C 77 -33,493 -35,716 11,360 1,00 45,97 C

ATOM 2968 C SER C 77 -33,567 -34,338 12,068 1,00 46,80 C

ATOM 2969 О SER C 77 -32,818 -33,422 11,725 1,00 44,01 О

ATOM 2970 CB SER C 77 -32,552 -35,642 10,159 1,00 48,90 C

ATOM 2971 OG SER C 77 -32,426 -36,897 9,513 1,00 55,71 О

ATOM 2972 N THR C 78 -34,488 -34,194 13,033 1,00 43,04 N

ATOM 2973 CA THR C 78 -34,685 -32,918 13,717 1,00 41,49 C

ATOM 2974 C THR C 78 -34,436 -33,027 15,224 1,00 43,81 C

ATOM 2975 О THR C 78 -34,818 -34,000 15,860 1,00 43,23 О

ATOM 2976 CB THR C 78 -36,075 -32,345 13,362 1,00 47,21 C

ATOM 2977 OGI THR C 78 -36,103 -32,132 11,948 1,00 44,47 О

ATOM 2978 CG2 THR C 78 -36,375 -31,012 14,059 1,00 43,17 C

- 171 043052

ATOM 2979 N ALA C 79 -33,777 -32,002 15,772 1,00 40,03 N

ATOM 2980 CA ALA C 79 -33,491 -31,853 17,191 1,00 39,14 C

ATOM 2981 C ALA C 79 -34,285 -30,622 17,640 1,00 40,85 C

ATOM 2982 О ALA C 79 -34,321 -29,621 16,915 1,00 38,22 О

ATOM 2983 CB ALA C 79 -32,000 -31,621 17,401 1,00 39,04 C

ATOM 2984 N TYR C 80 -34,936 -30,699 18,810 1,00 37,50 N

ATOM 2985 CA TYR C 80 -35,729 -29,592 19,343 1,00 36,80 C

ATOM 2986 C TYR C 80 -35,178 -29,102 20,655 1,00 41,15 C

ATOM 2987 О TYR C 80 -34,569 -29,860 21,410 1,00 40,69 О

ATOM 2988 CB TYR C 80 -37,183 -30,006 19,566 1,00 38,97C

ATOM 2989 CG TYR C 80 -37,867 -30,508 18,320 1,00 40,94C

ATOM 2990 CDI TYR C 80 -38,435 -29,621 17,407 1,00 42,18C

ATOM 2991 CD2 TYR C 80 -37,946 -31,865 18,046 1,00 42,77C

ATOM 2992 CE1 TYR C 80 -39,058 -30,078 16,249 1,00 42,98C

ATOM 2993 CE2 TYR C 80 -38,568 -32,336 16,895 1,00 44,82C

ATOM 2994 CZ TYR C 80 -39,149 -31,441 16,009 1,00 52,02C

ATOM 2995 OH TYR C 80 -39,785 -31,894 14,875 1,00 55,03О

ATOM 2996 N MET C 81 -35,454 -27,842 20,952 1,00 38,31 N

ATOM 2997 CA MET C 81 -35,036 -27,209 22,185 1,00 38,86 C

ATOM 2998 C MET C 81 -36,239 -26,427 22,707 1,00 41,32 C

ATOM 2999 О MET C 81 -36,659 -25,461 22,070 1,00 39,90 О

ATOM 3000 CB MET C 81 -33,846 -26,290 21,900 1,00 40,92C

ATOM 3001 CG MET C 81 -33,025 -25,970 23,109 1,00 46,42C

ATOM 3002 SD MET C 81 -33,577 -24,533 24,001 1,00 53,17S

ATOM 3003 CE MET C 81 -33,005 -23,230 22,863 1,00 48,11C

ATOM 3004 N GLU C 82 -36,858 -26,913 23,796 1,00 37,33 N

ATOM 3005 CA GLU C 82 -38,014 -26,258 24,386 1,00 37,62 C

ATOM 3006 C GLU C 82 -37,588 -25,565 25,668 1,00 44,17 C

ATOM 3007 О GLU C 82 -36,774 -26,093 26,417 1,00 45,34 О

ATOM 3008 CB GLU C 82 -39,171 -27,238 24,636 1,00 40,33C

ATOM 3009 CG GLU C 82 -40,395 -26,570 25,248 1,00 51,38C

ATOM 3010 CD GLU C 82 -41,705 -27,317 25,105 1,00 76,33C

ATOM ЗОИ OE1 GLU C 82 -41,691 -28,567 25,161 1,00 74,04 О

ATOM 3012 OE2 GLU C 82 -42,755 -26,648 24,973 1,00 77,13 О

ATOM 3013 N LEU C 83 -38,131 -24,377 25,906 1,00 40,98 N ATOM 3014 CA LEU C 83 -37,829 -23,592 27,084 1,00 42,46 C

- 172 043052

ATOM 3015 C LEU С 83 -39,148 -23,130 27,673 1,00 48,00 С

ATOM 3016 О LEU С 83 -39,932 -22,526 26,960 1,00 48,75 О

АТОМ 3017 СВ LEU С 83 -36,944 -22,413 26,673 1,00 41,74 С

АТОМ 3018 CG LEU С 83 -36,536 -21,413 27,746 1,00 48,28 С

АТОМ 3019 GDI LEU С 83 -36,137 -22,094 29,047 1,00 50,54 С

АТОМ 3020 CD2 LEU С 83 -35,436 -20,481 27,197 1,00 50,96 С

АТОМ 3021 N SER С 84 -39,423 -23,482 28,936 1,00 44,74 N

АТОМ 3022 CA SER С 84 -40,671 -23,138 29,624 1,00 46,15 С

АТОМ 3023 С SER С 84 -40,465 -21,954 30,571 1,00 49,18 С

АТОМ 3024 О SER С 84 -39,322 -21,561 30,811 1,00 47,21 О

АТОМ 3025 СВ SER С 84 -41,176 -24,344 30,411 1,00 49,92 С

АТОМ 3026 OG SER С 84 -40,189 -24,773 31,333 1,00 60,20 О

АТОМ 3027 N SER С 85 -41,577 -21,392 31,105 1,00 46,34 N

АТОМ 3028 CA SER С 85 -41,566 -20,246 32,026 1,00 46,41 С

АТОМ 3029 С SER С 85 -40,521 -19,203 31,589 1,00 47,84 С

АТОМ 3030 О SER С 85 -39,610 -18,866 32,340 1,00 46,67 О

АТОМ 3031 СВ SER С 85 -41,324 -20,717 33,459 1,00 51,60 С

АТОМ 3032 OG SER С 85 -42,365 -21,581 33,885 1,00 62,77 О

АТОМ 3033 N LEU С 86 -40,622 -18,760 30,327 1,00 44,01 N

АТОМ 3034 CA LEU С 86 -39,673 -17,809 29,741 1,00 42,04 С

АТОМ 3035 С LEU С 86 -39,483 -16,535 30,581 1,00 47,78 С

АТОМ 3036 О LEU С 86 -40,457 -15,984 31,097 1,00 48,21 О

АТОМ 3037 СВ LEU С 86 -40,082 -17,445 28,302 1,00 40,04 С

АТОМ 3038 CG LEU С 86 -39,816 -18,512 27,241 1,00 41,12 С

АТОМ 3039 GDI LEU С 86 -40,629 -18,242 25,989 1,00 38,91 С

АТОМ 3040 CD2 LEU С 86 -38,345 -18,569 26,870 1,00 38,83 С

АТОМ 3041 N ARG С 87 -38,217 -16,110 30,738 1,00 44,37 N

АТОМ 3042 CA ARG С 87 -37,793 -14,918 31,486 1,00 45,33 С

АТОМ 3043 С ARG С 87 -37,173 -13,939 30,477 1,00 47,34 С

АТОМ 3044 О ARG С 87 -36,679 -14,395 29,447 1,00 43,73 О

АТОМ 3045 СВ ARG С 87 -36,691 -15,291 32,500 1,00 46,43С

АТОМ 3046 CG ARG С 87 -37,122 -16,210 33,635 1,00 56,09С

АТОМ 3047 CD ARG С 87 -36,368 -15,919 34,923 1,00 77,75С

АТОМ 3048 NE ARG С 87 -34,995 -16,435 34,903 1,00 93,41N

АТОМ 3049 CZ ARG С 87 -34,611 -17,651 35,302 1,00109,85 С

АТОМ 3050 NH1 ARG С 87 -35,505 -18,530 35,754 1,00 94,20 N

- 173 043052

ATOM 3051 NH2 ARG C 87 -33,330 -18,001 35,244 1,00 95,36 N

ATOM 3052 N SER C 88 -37,084 -12,628 30,806 1,00 45,15 N

ATOM 3053 CA SER C 88 -36,450 -11,653 29,900 1,00 43,88 C

ATOM 3054 C SER C 88 -34,957 -11,972 29,646 1,00 46,23 C

ATOM 3055 О SER C 88 -34,465 -11,716 28,554 1,00 44,31 О

ATOM 3056 CB SER C 88 -36,622 -10,224 30,414 1,00 48,56 C

ATOM 3057 OG SER C 88 -35,889 -10,005 31,604 1,00 62,20 О

ATOM 3058 N GLU C 89 -34,286 -12,630 30,618 1,00 44,67 N

ATOM 3059 CA GLU C 89 -32,879 -13,049 30,535 1,00 43,02 C

ATOM 3060 C GLU C 89 -32,670 -14,199 29,545 1,00 44,03 C

ATOM 3061 О GLU C 89 -31,520 -14,531 29,258 1,00 42,78 О

ATOM 3062 CB GLU C 89 -32,340 -13,468 31,914 1,00 45,89C

ATOM 3063 CG GLU C 89 -32,405 -12,377 32,972 1,00 57,40C

ATOM 3064 CD GLU C 89 -33,556 -12,509 33,951 1,00 82,31C

ATOM 3065 OE1 GLU C 89 -34,719 -12,338 33,520 1,00 65,11 О

ATOM 3066 OE2 GLU C 89 -33,299 -12,783 35,145 1,00 88,49 О

ATOM 3067 N ASP C 90 -33,759 -14,826 29,045 1,00 39,75 N

ATOM 3068 CA ASP C 90 -33,675 -15,859 28,014 1,00 38,16 C

ATOM 3069 C ASP C 90 -33,601 -15,215 26,629 1,00 38,48 C

ATOM 3070 О ASP C 90 -33,443 -15,942 25,650 1,00 37,24 О

ATOM 3071 CB ASP C 90 -34,869 -16,822 28,076 1,00 40,23 C

ATOM 3072 CG ASP C 90 -35,003 -17,524 29,405 1,00 45,99 C

ATOM 3073 OD1 ASP C 90 -33,969 -17,957 29,954 1,00 46,86 О

ATOM 3074 OD2 ASP C 90 -36,147 -17,682 29,879 1,00 45,07 О

ATOM 3075 N THR C 91 -33,726 -13,876 26,522 1,00 35,50 N

ATOM 3076 CA THR C 91 -33,588 -13,185 25,245 1,00 34,04 C

ATOM 3077 C THR C 91 -32,173 -13,469 24,735 1,00 36,90 C

ATOM 3078 О THR C 91 -31,213 -13,192 25,446 1,00 36,84 О

ATOM 3079 CB THR C 91 -33,869 -11,684 25,414 1,00 38,72 C

ATOM 3080 OGI THR C 91 -35,226 -11,536 25,849 1,00 37,88 О

ATOM 3081 CG2 THR C 91 -33,604 -10,875 24,124 1,00 33,64 C

ATOM 3082 N ALA C 92 -32,052 -14,080 23,550 1,00 32,89 N

ATOM 3083 CA ALA C 92 -30,754 -14,492 23,003 1,00 32,23 C

ATOM 3084 C ALA C 92 -30,927 -15,108 21,636 1,00 34,59 C

ATOM 3085 О ALA C 92 -32,054 -15,347 21,198 1,00 33,75 О

ATOM 3086 CB ALA C 92 -30,130 -15,565 23,924 1,00 33,21 C

- 174 043052

ATOM 3087 N VAL C 93 -29,796 -15,417 20,984 1,00 31,52 N

ATOM 3088 CA VAL C 93 -29,760 -16,228 19,776 1,00 31,04 C

ATOM 3089 C VAL C 93 -29,386 -17,640 20,285 1,00 34,81 C

ATOM 3090 О VAL C 93 -28,436 -17,778 21,065 1,00 34,37 О

ATOM 3091 CB VAL C 93 -28,763 -15,738 18,699 1,00 33,19 C

ATOM 3092 CGI VAL C 93 -28,569 -16,797 17,611 1,00 32,03 C

ATOM 3093 CG2 VAL C 93 -29,243 -14,426 18,080 1,00 32,68 C

ATOM 3094 N TYR C 94 -30,117 -18,668 19,840 1,00 31,06 N

ATOM 3095 CA TYR C 94 -29,852 -20,054 20,201 1,00 30,70 C

ATOM 3096 C TYR C 94 -29,388 -20,787 18,970 1,00 35,19 C

ATOM 3097 О TYR C 94 -30,042 -20,687 17,936 1,00 34,82 О

ATOM 3098 CB TYR C 94 -31,114 -20,716 20,768 1,00 30,69C

ATOM 3099 CG TYR C 94 -31,479 -20,138 22,111 1,00 31,16C

ATOM 3100 GDI TYR C 94 -32,306 -19,028 22,214 1,00 32,73C

ATOM 3101 CD2 TYR C 94 -30,902 -20,629 23,276 1,00 31,99C

ATOM 3102 CE1 TYR C 94 -32,605 -18,460 23,446 1,00 33,76C

ATOM 3103 CE2 TYR C 94 -31,201 -20,077 24,519 1,00 32,65C

ATOM 3104 CZ TYR C 94 -32,051 -18,989 24,601 1,00 37,49C

ATOM 3105 OH TYR C 94 -32,313 -18,424 25,826 1,00 37,85О

ATOM 3106 N TYR C 95 -28,259 -21,513 19,066 1,00 31,75 N

ATOM 3107 CA TYR C 95 -27,737 -22,291 17,948 1,00 31,12 C

ATOM 3108 C TYR C 95 -27,759 -23,750 18,294 1,00 36,58 C

ATOM 3109 О TYR C 95 -27,510 -24,120 19,447 1,00 35,65 О

ATOM 3110 CB TYR C 95 -26,263 -21,943 17,634 1,00 32,42C

ATOM 3111 CG TYR C 95 -25,965 -20,480 17,390 1,00 33,70C

ATOM 3112 CD1 TYR C 95 -26,113 -19,917 16,128 1,00 35,21C

ATOM 3113 CD2 TYR C 95 -25,446 -19,681 18,402 1,00 34,49C

ATOM 3114 CE1 TYR C 95 -25,821 -18,576 15,894 1,00 35,70C

ATOM 3115 CE2 TYR C 95 -25,145 -18,340 18,181 1,00 34,92C

ATOM 3116 CZ TYR C 95 -25,333 -17,789 16,924 1,00 41,88C

ATOM 3117 OH TYR C 95 -25,012 -16,475 16,680 1,00 40,68О

ATOM 3118 N CYS C 96 -27,978 -24,587 17,282 1,00 34,61 N

ATOM 3119 CA CYS C 96 -27,748 -26,015 17,382 1,00 35,50 C

ATOM 3120 C CYS C 96 -26,408 -26,170 16,648 1,00 37,03 C

ATOM 3121 О CYS C 96 -26,126 -25,405 15,716 1,00 35,03 О

ATOM 3122 CB CYS C 96 -28,856 -26,836 16,729 1,00 37,04 C

- 175 043052

ATOM 3123 SG CYS C 96 -29,122 -26,492 14,973 1,00 41,53 S

ATOM 3124 N ALA C 97 -25,552 -27,065 17,104 1,00 32,70 N

ATOM 3125 CA ALA C 97 -24,263 -27,275 16,443 1,00 32,65 C

ATOM 3126 C ALA C 97 -23,846 -28,724 16,581 1,00 37,32 C

ATOM 3127 О ALA C 97 -23,861 -29,269 17,689 1,00 36,14 О

ATOM 3128 CB ALA C 97 -23,205 -26,343 17,016 1,00 33,19 C

ATOM 3129 N ARG C 98 -23,501 -29,364 15,455 1,00 35,53 N

ATOM 3130 CA ARG C 98 -23,169 -30,787 15,460 1,00 36,66 C

ATOM 3131 C ARG C 98 -21,906 -31,073 16,237 1,00 40,15 C

ATOM 3132 О ARG C 98 -20,907 -30,397 16,034 1,00 40,12 О

ATOM 3133 CB ARG C 98 -23,005 -31,329 14,026 1,00 35,79C

ATOM 3134 CG ARG C 98 -22,807 -32,845 13,990 1,00 38,52C

ATOM 3135 CD ARG C 98 -22,636 -33,404 12,589 1,00 38,54C

ATOM 3136 NE ARG C 98 -21,245 -33,332 12,126 1,00 38,05N

ATOM 3137 CZ ARG C 98 -20,738 -34,037 11,116 1,00 49,66C

ATOM 3138 NH1 ARG C 98 -21,499 -34,887 10,439 1,00 40,39 N

ATOM 3139 NH2 ARG C 98 -19,462 -33,906 10,783 1,00 40,88 N

ATOM 3140 О GLU C 99 -20,182 -34,722 16,824 1,00 39,36 О

ATOM 3141 N GLU C 99 -21,923 -32,123 17,062 1,00 36,01 N

ATOM 3142 CA GLU C 99 -20,726 -32,562 17,752 1,00 36,27 C

ATOM 3143 C GLU C 99 -19,980 -33,514 16,790 1,00 40,48 C

ATOM 3144 CB GLU C 99 -21,078 -33,238 19,099 1,00 37,68C

ATOM 3145 CG GLU C 99 -19,875 -33,508 19,991 1,00 44,26C

ATOM 3146 CD GLU C 99 -18,977 -32,335 20,350 1,00 60,17C

ATOM 3147 OE1 GLU C 99 -19,425 -31,169 20,241 1,00 45,39 О

ATOM 3148 OE2 GLU C 99 -17,841 -32,591 20,811 1,00 51,81 О

ATOM 3149 О GLY C 100 -16,575 -33,913 16,434 1,00 43,26О

ATOM 3150 N GLY C 100 -19,169 -32,932 15,881 1,00 37,95N

ATOM 3151 CA GLY C 100 -18,379 -33,664 14,895 1,00 38,68 C

ATOM 3152 C GLY C 100 -16,913 -33,565 15,299 1,00 44,00C

ATOM 3153 О ASP C 101 -14,521 -30,532 14,281 1,00 43,47О

ATOM 3154 N ASP C 101 -16,041 -33,121 14,375 1,00 40,89N

ATOM 3155 CA ASP C 101 -14,621 -32,881 14,665 1,00 41,53 C

ATOM 3156 C ASP C 101 -14,653 -31,430 15,107 1,00 44,27 C

ATOM 3157 CB ASP C 101 -13,746 -33,099 13,413 1,00 44,48 C

ATOM 3158 CG ASP C 101 -13,577 -34,553 13,004 1,00 52,29 C

- 176 043052

ATOM 3159 OD1 ASP C 101 -13,902 -35,445 13,821 1,00 51,22 О

ATOM 3160 OD2 ASP C 101 -13,120 -34,801 11,864 1,00 58,70 О

ATOM 3161 О ALA C 102 -17,404 -30,524 16,084 1,00 39,71 О

ATOM 3162 N ALA C 102 -14,970 -31,221 16,409 1,00 40,87 N

ATOM 3163 CA ALA C 102 -15,295 -29,940 17,052 1,00 39,67 C

ATOM 3164 C ALA C 102 -16,752 -29,657 16,664 1,00 41,18 C

ATOM 3165 CB ALA C 102 -14,386 -28,803 16,573 1,00 40,92 C

ATOM 3166 N MET C 103 -17,258 -28,449 16,913 1,00 36,68 N

ATOM 3167 САМЕТ C 103 -18,620 -28,119 16,494 1,00 34,23 C

ATOM 3168 C MET C 103 -18,497 -27,662 15,044 1,00 38,48 C

ATOM 3169 О MET C 103 -18,429 -26,474 14,750 1,00 37,28 О

ATOM 3170 CB MET C 103 -19,222 -27,086 17,430 1,00 35,01C

ATOM 3171 CG MET C 103 -19,225 -27,573 18,861 1,00 37,82C

ATOM 3172 SD MET C 103 -20,069 -26,458 19,960 1,00 39,84S

ATOM 3173 CE MET C 103 -19,518 -27,119 21,566 1,00 37,25C

ATOM 3174 N ASP C 104 -18,373 -28,653 14,146 1,00 36,75 N

ATOM 3175 CA ASP C 104 -18,044 -28,445 12,739 1,00 37,51 C

ATOM 3176 C ASP C 104 -19,171 -27,881 11,878 1,00 40,69 C

ATOM 3177 О ASP C 104 -18,870 -27,272 10,866 1,00 41,02 О

ATOM 3178 CB ASP C 104 -17,461 -29,730 12,106 1,00 40,15 C

ATOM 3179 CG ASP C 104 -18,243 -31,015 12,300 1,00 41,59 C

ATOM 3180 OD1 ASP C 104 -19,360 -30,960 12,859 1,00 41,81 О

ATOM 3181 OD2 ASP C 104 -17,732 -32,080 11,909 1,00 45,34 О

ATOM 3182 N TYR C 105 -20,433 -28,066 12,252 1,00 38,20 N

ATOM 3183 CA TYR C 105 -21,558 -27,501 11,506 1,00 37,29 C

ATOM 3184 C TYR C 105 -22,482 -26,830 12,500 1,00 39,73 C

ATOM 3185 О TYR C 105 -22,862 -27,450 13,483 1,00 38,23 О

ATOM 3186 CB TYR C 105 -22,299 -28,582 10,708 1,00 39,27C

ATOM 3187 CG TYR C 105 -21,439 -29,141 9,606 1,00 43,09C

ATOM 3188 GDI TYR C 105 -21,252 -28,441 8,419 1,00 45,85C

ATOM 3189 CD2 TYR C 105 -20,722 -30,319 9,789 1,00 44,77C

ATOM 3190 CE1 TYR C 105 -20,408 -28,922 7,420 1,00 48,74C

ATOM 3191 CE2 TYR C 105 -19,864 -30,802 8,805 1,00 47,26C

ATOM 3192 CZ TYR C 105 -19,708 -30,101 7,618 1,00 55,46C

ATOM 3193 OH TYR C 105 -18,870 -30,560 6,624 1,00 57,88О

ATOM 3194 N TRP C 106 -22,796 -25,554 12,270 1,00 35,79 N

- 177 043052

ATOM 3195 CA TRP C 106 -23,669 -24,770 13,131 1,00 34,32 C

ATOM 3196 C TRP C 106 -24,925 -24,425 12,381 1,00 38,63 C

ATOM 3197 О TRP C 106 -24,862 -24,157 11,177 1,00 39,38 О

ATOM 3198 CB TRP C 106 -22,974 -23,459 13,527 1,00 32,65 C

ATOM 3199 CG TRP C 106 -21,848 -23,643 14,486 1,00 33,67 C

ATOM 3200 GDI TRP C 106 -20,643 -24,225 14,230 1,00 37,22C

ATOM 3201 CD2 TRP C 106 -21,779 -23,142 15,825 1,00 33,03C

ATOM 3202 NE1 TRP C 106 -19,856 -24,190 15,354 1,00 36,90N

ATOM 3203 CE2 TRP C 106 -20,526 -23,526 16,350 1,00 37,50C

ATOM 3204 CE3 TRP C 106 -22,672 -22,442 16,649 1,00 33,13C

ATOM 3205 CZ2 TRP C 106 -20,139 -23,224 17,659 1,00 36,59C

ATOM 3206 CZ3 TRP C 106 -22,293 -22,153 17,952 1,00 34,77C

ATOM 3207 CH2 TRP C 106 -21,039 -22,540 18,444 1,00 36,16C

ATOM 3208 N GLY C 107 -26,057 -24,338 13,093 1,00 35,05 N

ATOM 3209 CA GLY C 107 -27,302 -23,858 12,496 1,00 34,89 C

ATOM 3210 C GLY C 107 -27,139 -22,326 12,324 1,00 38,88C

ATOM 3211 О GLY C 107 -26,186 -21,751 12,863 1,00 37,72О

ATOM 3212 N GLN C 108 -28,033 -21,674 11,562 1,00 35,72N

ATOM 3213 CA GLN C 108 -27,940 -20,218 11,349 1,00 34,48 C

ATOM 3214 C GLN C 108 -28,236 -19,417 12,623 1,00 36,52 C

ATOM 3215 О GLN C 108 -27,866 -18,249 12,708 1,00 35,28 О

ATOM 3216 CB GLN C 108 -28,813 -19,748 10,165 1,00 36,25C

ATOM 3217 CG GLN C 108 -30,320 -19,534 10,427 1,00 37,04C

ATOM 3218 CD GLN C 108 -31,133 -20,801 10,402 1,00 42,51C

ATOM 3219 OE1 GLN C 108 -30,613 -21,915 10,552 1,00 40,06 О

ATOM 3220 NE2 GLN C 108 -32,439 -20,672 10,236 1,00 31,88 N

ATOM 3221 N GLY C 109 -28,898 -20,044 13,606 1,00 33,66 N

ATOM 3222 CA GLY C 109 -29,227 -19,415 14,874 1,00 33,01 C

ATOM 3223 C GLY C 109 -30,686 -19,012 14,839 1,00 36,49C

ATOM 3224 О GLY C 109 -31,227 -18,754 13,761 1,00 36,95О

ATOM 3225 N THR C 110 -31,333 -19,007 16,003 1,00 32,70N

ATOM 3226 CA THR C 110 -32,728 -18,594 16,144 1,00 32,46 C

ATOM 3227 C THR C 110 -32,788 -17,523 17,217 1,00 34,68C

ATOM 3228 О THR C 110 -32,420 -17,797 18,356 1,00 33,77О

ATOM 3229 CB THR C 110 -33,633 -19,782 16,496 1,00 40,27 C

ATOM 3230 OGI THR C 110 -33,657 -20,692 15,393 1,00 36,94 О

- 178 043052

ATOM 3231 CG2 THR C 110 -35,063 -19,350 16,824 1,00 36,82 C

ATOM 3232 N THR C 111 -33,266 -16,320 16,863 1,00 30,46 N

ATOM 3233 CA THR C 111 -33,426 -15,225 17,830 1,00 30,94 C

ATOM 3234 C THR C 111 -34,693 -15,485 18,616 1,00 34,43 C

ATOM 3235 О THR C 111 -35,740 -15,734 18,022 1,00 35,46 О

ATOM 3236 CB THR C 111 -33,559 -13,850 17,128 1,00 35,59 C

ATOM 3237 OGI THR C 111 -32,469 -13,673 16,229 1,00 36,40 О

ATOM 3238 CG2 THR C 111 -33,572 -12,686 18,115 1,00 34,29 C

ATOM 3239 N VAL C 112 -34,607 -15,402 19,930 1,00 30,68 N

ATOM 3240 CA VAL C 112 -35,761 -15,543 20,811 1,00 31,81 C

ATOM 3241 C VAL C 112 -35,812 -14,269 21,639 1,00 37,05 C

ATOM 3242 О VAL C 112 -34,865 -13,998 22,371 1,00 37,54 О

ATOM 3243 CB VAL C 112 -35,666 -16,790 21,725 1,00 35,23 C

ATOM 3244 CGI VAL C 112 -36,822 -16,834 22,728 1,00 35,87 C

ATOM 3245 CG2 VAL C 112 -35,610 -18,081 20,906 1,00 34,03 C

ATOM 3246 N THR C 113 -36,904 -13,497 21,536 1,00 34,53 N

ATOM 3247 CA THR C 113 -37,098 -12,286 22,337 1,00 34,18 C

ATOM 3248 C THR C 113 -38,182 -12,558 23,369 1,00 37,78 C

ATOM 3249 О THR C 113 -39,293 -12,942 22,998 1,00 36,82 О

ATOM 3250 CB THR C 113 -37,485 -11,096 21,457 1,00 37,79 C

ATOM 3251 OGI THR C 113 -36,453 -10,895 20,497 1,00 34,63 О

ATOM 3252 CG2 THR C 113 -37,681 -9,804 22,269 1,00 36,47 C

ATOM 3253 N VAL C 114 -37,867 -12,345 24,657 1,00 35,36 N

ATOM 3254 CA VAL C 114 -38,836 -12,507 25,743 1,00 36,70 C

ATOM 3255 C VAL C 114 -39,070 -11,115 26,326 1,00 41,49 C

ATOM 3256 О VAL C 114 -38,121 -10,477 26,790 1,00 41,38 О

ATOM 3257 CB VAL C 114 -38,376 -13,514 26,821 1,00 40,57 C

ATOM 3258 CGI VAL C 114 -39,460 -13,700 27,882 1,00 41,97 C

ATOM 3259 CG2 VAL C 114 -37,999 -14,855 26,189 1,00 39,76 C

ATOM 3260 N SER C 115 -40,323 -10,642 26,289 1,00 37,44 N

ATOM 3261 CA SER C 115 -40,650 -9,318 26,789 1,00 37,71 C

ATOM 3262 C SER C 115 -42,138 -9,137 27,039 1,00 44,81 C

ATOM 3263 О SER C 115 -42,973 -9,742 26,374 1,00 45,12 О

ATOM 3264 CB SER C 115 -40,180 -8,255 25,799 1,00 36,58 C

ATOM 3265 OG SER C 115 -40,711 -6,980 26,119 1,00 45,95 О

ATOM 3266 N SER C 116 -42,453 -8,250 27,971 1,00 43,52 N

- 179 043052

ATOM 3267 CA SER C 116 -43,817 -7,862 28,299 1,00 45,24 C

ATOM 3268 C SER C 116 -44,396 -6,913 27,224 1,00 47,63 C

ATOM 3269 О SER C 116 -45,613 -6,738 27,173 1,00 48,53 О

ATOM 3270 CB SER C 116 -43,833 -7,150 29,644 1,00 50,86 C

ATOM 3271 OG SER C 116 -45,164 -6,936 30,077 1,00 71,06 О

ATOM 3272 N ALA C 117 -43,532 -6,272 26,399 1,00 42,07 N

ATOM 3273 CA ALA C 117 -43,971 -5,331 25,359 1,00 41,82 C

ATOM 3274 C ALA C 117 -44,864 -5,969 24,297 1,00 46,42 C

ATOM 3275 О ALA C 117 -44,794 -7,171 24,044 1,00 45,12 О

ATOM 3276 CB ALA C 117 -42,773 -4,679 24,685 1,00 40,90 C

ATOM 3277 N SER C 118 -45,711 -5,140 23,693 1,00 45,26 N

ATOM 3278 CA SER C 118 -46,643 -5,541 22,648 1,00 45,54 C

ATOM 3279 C SER C 118 -46,135 -5,030 21,311 1,00 45,34 C

ATOM 3280 О SER C 118 -45,396 -4,048 21,266 1,00 43,82 О

ATOM 3281 CB SER C 118 -48,030 -4,970 22,931 1,00 51,75 C

ATOM 3282 OG SER C 118 -48,564 -5,534 24,118 1,00 64,79 О

ATOM 3283 N THR C 119 -46,530 -5,706 20,224 1,00 40,43 N

ATOM 3284 CA THR C 119 -46,141 -5,338 18,862 1,00 37,93 C

ATOM 3285 C THR C 119 -46,515 -3,880 18,584 1,00 41,88 C

ATOM 3286 О THR C 119 -47,667 -3,494 18,805 1,00 43,45 О

ATOM 3287 CB THR C 119 -46,814 -6,283 17,848 1,00 41,22 C

ATOM 3288 OGI THR C 119 -46,490 -7,624 18,206 1,00 40,13 О

ATOM 3289 CG2 THR C 119 -46,390 -6,010 16,401 1,00 34,48 C

ATOM 3290 N LYS C 120 -45,542 -3,074 18,132 1,00 36,14 N

ATOM 3291 CA LYS C 120 -45,779 -1,670 17,809 1,00 36,50 C

ATOM 3292 C LYS C 120 -44,846 -1,208 16,692 1,00 39,05 C

ATOM 3293 О LYS C 120 -43,648 -1,455 16,766 1,00 39,04 О

ATOM 3294 CB LYS C 120 -45,584 -0,780 19,048 1,00 37,54 C

ATOM 3295 CG LYS C 120 -46,175 0,615 18,845 1,00 39,66C

ATOM 3296 CD LYS C 120 -45,645 1,638 19,823 1,00 35,79C

ATOM 3297 CE LYS C 120 -45,912 3,051 19,361 1,00 36,99C

ATOM 3298 NZ LYS C 120 -44,934 3,522 18,337 1,00 42,09N

ATOM 3299 N GLY C 121 -45,387 -0,522 15,681 1,00 35,36 N

ATOM 3300 CA GLY C 121 -44,591 0,019 14,583 1,00 33,69 C

ATOM 3301 C GLY C 121 -43,882 1,303 15,055 1,00 36,60 C

ATOM 3302 О GLY C 121 -44,329 1,922 16,014 1,00 35,09 О

- 180 043052

ATOM 3303 N PRO C 122 -42,780 1,695 14,403 1,00 33,96 N

ATOM 3304 CA PRO C 122 -42,072 2,915 14,815 1,00 33,88 C

ATOM 3305 C PRO C 122 -42,771 4,217 14,414 1,00 39,19 C

ATOM 3306 О PRO C 122 -43,578 4,246 13,489 1,00 38,22 О

ATOM 3307 CB PRO C 122 -40,739 2,828 14,054 1,00 34,32C

ATOM 3308 CG PRO C 122 -41,064 2,022 12,806 1,00 37,97C

ATOM 3309 CD PRO C 122 -42,127 1,038 13,243 1,00 34,54C

ATOM 3310 N SER C 123 -42,409 5,299 15,104 1,00 37,89 N

ATOM 3311 CA SER C 123 -42,766 6,659 14,727 1,00 38,91 C

ATOM 3312 C SER C 123 -41,485 7,111 14,055 1,00 41,92 C

ATOM 3313 О SER C 123 -40,405 6,842 14,589 1,00 42,38 О

ATOM 3314 CB SER C 123 -43,061 7,533 15,943 1,00 44,48 C

ATOM 3315 OG SER C 123 -44,341 7,237 16,473 1,00 55,10 О

ATOM 3316 N VAL C 124 -41,572 7,719 12,866 1,00 37,46 N

ATOM 3317 CA VAL C 124 -40,384 8,138 12,128 1,00 35,79 C

ATOM 3318 C VAL C 124 -40,343 9,655 12,076 1,00 41,49 C

ATOM 3319 О VAL C 124 -41,287 10,282 11,602 1,00 42,53 О

ATOM 3320 CB VAL C 124 -40,322 7,489 10,723 1,00 37,10 C

ATOM 3321 CGI VAL C 124 -39,030 7,869 10,008 1,00 35,76 C

ATOM 3322 CG2 VAL C 124 -40,433 5,971 10,841 1,00 35,79 C

ATOM 3323 N РНЕ C 125 -39,252 10,237 12,587 1,00 37,30 N

ATOM 3324 CA РНЕ C 125 -39,049 11,677 12,649 1,00 36,95 C

ATOM 3325 С РНЕ C 125 -37,808 12,042 11,840 1,00 40,08 C

ATOM 3326 О РНЕ С 125 -36,850 11,278 11,837 1,00 37,20 О

ATOM 3327 СВ РНЕ С 125 -38,854 12,103 14,116 1,00 38,71 С

АТОМ 3328 CG РНЕ С 125 -39,985 11,673 15,020 1,00 39,28 С

АТОМ 3329 CD1 РНЕ С 125 -41,274 12,145 14,818 1,00 41,37С

АТОМ 3330 CD2 РНЕ С 125 -39,759 10,804 16,079 1,00 40,99С

АТОМ 3331 СЕ1 РНЕ С 125 -42,325 11,728 15,638 1,00 42,44С

АТОМ 3332 СЕ2 РНЕ С 125 -40,804 10,410 16,919 1,00 43,79С

АТОМ 3333 CZ РНЕ С 125 -42,075 10,895 16,706 1,00 42,60 С

АТОМ 3334 N PRO С 126 -37,795 13,212 11,181 1,00 39,92 N

АТОМ 3335 CA PRO С 126 -36,608 13,602 10,420 1,00 39,47 С

АТОМ 3336 С PRO С 126 -35,514 14,166 11,326 1,00 40,00 С

АТОМ 3337 О PRO С 126 -35,806 14,769 12,360 1,00 39,10 О

АТОМ 3338 СВ PRO С 126 -37,143 14,700 9,484 1,00 42,36 С

- 181 043052

ATOM 3339 CG PRO C 126 -38,200 15,362 10,284 1,00 47,50 C

ATOM 3340 CD PRO C 126 -38,833 14,264 11,125 1,00 42,41 C

ATOM 3341 N LEU C 127 -34,255 13,975 10,909 1,00 35,97 N

ATOM 3342 CA LEU C 127 -33,065 14,574 11,516 1,00 35,80 C

ATOM 3343 C LEU C 127 -32,630 15,558 10,413 1,00 41,86 C

ATOM 3344 О LEU C 127 -31,912 15,193 9,476 1,00 39,52 О

ATOM 3345 CB LEU C 127 -31,980 13,532 11,819 1,00 34,86 C

ATOM 3346 CG LEU C 127 -32,335 12,473 12,869 1,00 36,48 C

ATOM 3347 GDI LEU C 127 -31,303 11,375 12,882 1,00 34,90 C

ATOM 3348 CD2 LEU C 127 -32,428 13,093 14,265 1,00 36,49 C

ATOM 3349 N ALA C 128 -33,200 16,769 10,454 1,00 40,92 N

ATOM 3350 CA ALA C 128 -33,007 17,769 9,396 1,00 42,03 C

ATOM 3351 C ALA C 128 -31,552 18,225 9,221 1,00 46,13 C

ATOM 3352 О ALA C 128 -30,868 18,419 10,221 1,00 45,47 О

ATOM 3353 CB ALA C 128 -33,900 18,974 9,656 1,00 44,04 C

ATOM 3354 N PRO C 129 -31,082 18,428 7,968 1,00 45,18 N

ATOM 3355 CA PRO C 129 -29,709 18,909 7,770 1,00 48,35 C

ATOM 3356 C PRO C 129 -29,532 20,332 8,302 1,00 59,59 C

ATOM 3357 О PRO C 129 -30,449 21,147 8,180 1,00 59,01 О

ATOM 3358 CB PRO C 129 -29,510 18,845 6,249 1,00 49,63C

ATOM 3359 CG PRO C 129 -30,860 18,885 5,688 1,00 52,25C

ATOM 3360 CD PRO C 129 -31,770 18,234 6,677 1,00 46,36C

ATOM 3361 N SER C 130 -28,365 20,618 8,906 1,00 63,13 N

ATOM 3362 CA SER C 130 -28,063 21,940 9,470 1,00 67,28 C

ATOM 3363 C SER C 130 -27,376 22,840 8,440 1,00 76,61 C

ATOM 3364 О SER C 130 -27,081 22,400 7,323 1,00 76,81 О

ATOM 3365 CB SER C 130 -27,193 21,805 10,722 1,00 73,73 C

ATOM 3366 OG SER C 130 -25,802 21,860 10,440 1,00 87,12 О

ATOM 3367 N SER C 131 -27,117 24,106 8,834 1,00 76,52 N

ATOM 3368 CA SER C 131 -26,457 25,118 7,999 1,00 78,64 C

ATOM 3369 C SER C 131 -25,328 25,793 8,782 1,00 84,72 C

ATOM 3370 О SER C 131 -24,161 25,684 8,404 1,00 85,42 О

ATOM 3371 CB SER C 131 -27,469 26,164 7,540 1,00 82,74 C

ATOM 3372 OG SER C 131 -28,231 26,661 8,629 1,00 92,26 О

ATOM 3373 N GLY C 137 -19,451 22,330 3,155 1,00 70,36 N

ATOM 3374 CA GLY C 137 -19,227 21,411 2,042 1,00 69,22 C

- 182 043052

ATOM 3375 C GLY С 137 -20,110 20,163 2,136 1,00 68,93С

ATOM 3376 О GLY С 137 -20,907 19,916 1,232 1,00 67,73О

АТОМ 3377 N THR С 138 -19,989 19,395 3,235 1,00 62,57N

АТОМ 3378 CA THR С 138 -20,756 18,156 3,435 1,00 59,19 С

АТОМ 3379 С THR С 138 -21,771 18,336 4,580 1,00 59,81 С

АТОМ 3380 О THR С 138 -21,435 18,897 5,623 1,00 60,22 О

АТОМ 3381 СВ THR С 138 -19,820 16,922 3,591 1,00 67,18 С

АТОМ 3382 OGI THR С 138 -20,572 15,804 4,071 1,00 70,05 О

АТОМ 3383 CG2 THR С 138 -18,647 17,165 4,519 1,00 66,68 С

АТОМ 3384 N ALA С 139 -23,018 17,870 4,366 1,00 53,15 N

АТОМ 3385 CA ALA С 139 -24,111 17,970 5,337 1,00 50,79 С

АТОМ 3386 С ALA С 139 -24,601 16,590 5,758 1,00 49,65 С

АТОМ 3387 О ALA С 139 -24,678 15,695 4,925 1,00 48,16 О

АТОМ 3388 СВ ALA С 139 -25,268 18,746 4,731 1,00 51,34 С

АТОМ 3389 N ALA С 140 -24,965 16,430 7,036 1,00 43,44 N

АТОМ 3390 CA ALA С 140 -25,513 15,172 7,548 1,00 41,09 С

АТОМ 3391 С ALA С 140 -27,009 15,332 7,759 1,00 42,87 С

АТОМ 3392 О ALA С 140 -27,457 16,384 8,185 1,00 42,46 О

АТОМ 3393 СВ ALA С 140 -24,853 14,796 8,864 1,00 41,79 С

АТОМ 3394 N LEU С 141 -27,779 14,302 7,445 1,00 39,12 N

АТОМ 3395 CA LEU С 141 -29,219 14,285 7,670 1,00 38,24 С

АТОМ 3396 С LEU С 141 -29,595 12,854 8,031 1,00 42,42 С

АТОМ 3397 О LEU С 141 -28,747 11,963 7,947 1,00 43,71 О

АТОМ 3398 СВ LEU С 141 -29,999 14,805 6,443 1,00 38,37 С

АТОМ 3399 CG LEU С 141 -29,873 13,998 5,131 1,00 42,64 С

АТОМ 3400 GDI LEU С 141 -31,098 13,129 4,892 1,00 41,82 С

АТОМ 3401 CD2 LEU С 141 -29,684 14,920 3,933 1,00 45,29 С

АТОМ 3402 N GLY С 142 -30,826 12,623 8,454 1,00 36,49 N

АТОМ 3403 CA GLY С 142 -31,201 11,272 8,819 1,00 35,92 С

АТОМ 3404 С GLY С 142 -32,652 11,143 9,235 1,00 39,79 С

АТОМ 3405 О GLY С 142 -33,435 12,077 9,071 1,00 39,99 О

АТОМ 3406 N CYS С 143 -32,994 9,984 9,771 1,00 36,21 N

АТОМ 3407 CA CYS С 143 -34,328 9,680 10,278 1,00 37,37 С

АТОМ 3408 С CYS С 143 -34,159 9,019 11,632 1,00 39,29 С

АТОМ 3409 О CYS С 143 -33,326 8,126 11,753 1,00 38,92 О

АТОМ 3410 СВ CYS С 143 -35,079 8,759 9,321 1,00 38,59 С

- 183 043052

ATOM 3411 SG CYS C 143 -35,870 9,604 7,927 1,00 44,04 S

ATOM 3412 N LEU C 144 -34,954 9,430 12,629 1,00 34,45 N

ATOM 3413 CA LEU C 144 -34,971 8,825 13,957 1,00 33,07 C

ATOM 3414 C LEU C 144 -36,175 7,882 13,945 1,00 35,80 C

ATOM 3415 О LEU C 144 -37,301 8,337 13,732 1,00 34,17 О

ATOM 3416 CB LEU C 144 -35,105 9,907 15,056 1,00 33,74 C

ATOM 3417 CG LEU C 144 -35,398 9,423 16,496 1,00 36,68 C

ATOM 3418 GDI LEU C 144 -34,327 8,469 16,995 1,00 36,40 C

ATOM 3419 CD2 LEU C 144 -35,520 10,608 17,456 1,00 37,03 C

ATOM 3420 N VAL C 145 -35,922 6,567 14,098 1,00 32,86 N

ATOM 3421 CA VAL C 145 -36,933 5,503 14,089 1,00 31,94 C

ATOM 3422 C VAL C 145 -37,173 5,126 15,550 1,00 36,81 C

ATOM 3423 О VAL C 145 -36,453 4,301 16,116 1,00 34,76 О

ATOM 3424 CB VAL C 145 -36,439 4,301 13,245 1,00 34,65 C

ATOM 3425 CGI VAL C 145 -37,533 3,249 13,121 1,00 33,48 C

ATOM 3426 CG2 VAL C 145 -35,974 4,769 11,858 1,00 34,52 C

ATOM 3427 N LYS C 146 -38,204 5,715 16,147 1,00 35,25 N

ATOM 3428 CA LYS C 146 -38,459 5,611 17,573 1,00 35,58 C

ATOM 3429 C LYS C 146 -39,548 4,640 18,025 1,00 38,97 C

ATOM 3430 О LYS C 146 -40,602 4,553 17,402 1,00 40,05 О

ATOM 3431 CB LYS C 146 -38,803 7,023 18,114 1,00 39,35C

ATOM 3432 CG LYS C 146 -37,801 7,567 19,131 1,00 48,41C

ATOM 3433 CD LYS C 146 -38,452 8,299 20,251 1,00 54,56C

ATOM 3434 CE LYS C 146 -37,530 8,445 21,435 1,00 54,44C

ATOM 3435 NZ LYS C 146 -37,415 7,195 22,225 1,00 59,15N

ATOM 3436 N ASP C 147 -39,309 3,991 19,187 1,00 32,81 N

ATOM 3437 CA ASP C 147 -40,278 3,178 19,926 1,00 32,65 C

ATOM 3438 C ASP C 147 -41,031 2,108 19,118 1,00 36,32 C

ATOM 3439 О ASP C 147 -42,230 2,223 18,885 1,00 38,15 О

ATOM 3440 CB ASP C 147 -41,283 4,133 20,601 1,00 34,77 C

ATOM 3441 CG ASP C 147 -40,648 5,156 21,525 1,00 43,50 C

ATOM 3442 OD1 ASP C 147 -39,502 4,933 21,963 1,00 43,44 О

ATOM 3443 OD2 ASP C 147 -41,301 6,177 21,812 1,00 47,34 О

ATOM 3444 N TYR C 148 -40,340 1,055 18,733 1,00 31,65 N

ATOM 3445 CA TYR C 148 -40,958 -0,058 18,004 1,00 30,87 C

ATOM 3446 C TYR C 148 -40,642 -1,348 18,724 1,00 32,58 C

- 184 043052

ATOM 3447 О TYR С 148 -39,721 -1,401 19,531 1,00 31,62 О

ATOM 3448 СВ TYR С 148 -40,492 -0,119 16,539 1,00 29,90С

АТОМ 3449 CG TYR С 148 -39,010 -0,366 16,368 1,00 30,49С

АТОМ 3450 GDI TYR С 148 -38,510 -1,656 16,218 1,00 30,97 С

АТОМ 3451 CD2 TYR С 148 -38,109 0,696 16,310 1,00 31,12 С

АТОМ 3452 СЕ1 TYR С 148 -37,146 -1,888 16,060 1,00 30,32 С

АТОМ 3453 СЕ2 TYR С 148 -36,747 0,478 16,120 1,00 30,49С

АТОМ 3454 CZ TYR С 148 -36,264 -0,818 16,031 1,00 36,71С

АТОМ 3455 ОН TYR С 148 -34,926 -1,044 15,829 1,00 34,36О

АТОМ 3456 N РНЕ С 149 -41,430 -2,374 18,451 1,00 29,78 N

АТОМ 3457 CA РНЕ С 149 -41,247 -3,685 19,045 1,00 28,55 С

АТОМ 3458 С РНЕ С 149 -41,977 -4,700 18,158 1,00 34,99 С

АТОМ 3459 О РНЕ С 149 -43,120 -4,441 17,777 1,00 35,21 О

АТОМ 3460 СВ РНЕ С 149 -41,803 -3,733 20,500 1,00 30,35 С

АТОМ 3461 CG РНЕ С 149 -41,651 -5,089 21,147 1,00 31,30 С

АТОМ 3462 CD1 РНЕ С 149 -40,484 -5,429 21,822 1,00 32,84С

АТОМ 3463 CD2 РНЕ С 149 -42,626 -6,068 20,987 1,00 33,45С

АТОМ 3464 СЕ1 РНЕ С 149 -40,297 -6,720 22,321 1,00 33,55С

АТОМ 3465 СЕ2 РНЕ С 149 -42,440 -7,357 21,492 1,00 35,85С

АТОМ 3466 CZ РНЕ С 149 -41,283 -7,672 22,165 1,00 33,11 С

АТОМ 3467 N PRO С 150 -41,363 -5,862 17,868 1,00 32,34 N

АТОМ 3468 CA PRO С 150 -40,010 -6,326 18,211 1,00 31,46 С

АТОМ 3469 С PRO С 150 -39,048 -5,869 17,117 1,00 35,48 С

АТОМ 3470 О PRO С 150 -39,430 -5,138 16,194 1,00 33,77 О

АТОМ 3471 СВ PRO С 150 -40,172 -7,858 18,192 1,00 33,13С

АТОМ 3472 CG PRO С 150 -41,212 -8,076 17,132 1,00 37,85С

АТОМ 3473 CD PRO С 150 -42,195 -6,972 17,374 1,00 34,21С

АТОМ 3474 N GLU С 151 -37,819 -6,366 17,172 1,00 31,95 N

АТОМ 3475 CA GLU С 151 -36,885 -6,169 16,081 1,00 30,85 С

АТОМ 3476 С GLU С 151 -37,346 -7,111 14,938 1,00 33,62 С

АТОМ 3477 О GLU С 151 -38,072 -8,065 15,207 1,00 32,36 О

АТОМ 3478 СВ GLU С 151 -35,468 -6,521 16,529 1,00 31,57С

АТОМ 3479 CG GLU С 151 -34,927 -5,542 17,553 1,00 36,89С

АТОМ 3480 CD GLU С 151 -33,419 -5,433 17,528 1,00 55,05С

АТОМ 3481 ОЕ1 GLU С 151 -32,899 -4,717 16,642 1,00 43,17 О

АТОМ 3482 ОЕ2 GLU С 151 -32,757 -6,131 18,330 1,00 50,96 О

- 185 043052

ATOM 3483 N PRO C 152 -36,952 -6,860 13,681 1,00 30,67 N

ATOM 3484 CA PRO C 152 -36,103 -5,778 13,207 1,00 29,57 C

ATOM 3485 C PRO C 152 -36,886 -4,715 12,473 1,00 34,73 C

ATOM 3486 О PRO C 152 -38,026 -4,931 12,058 1,00 34,13 О

ATOM 3487 CB PRO C 152 -35,162 -6,500 12,240 1,00 31,06C

ATOM 3488 CG PRO C 152 -36,071 -7,528 11,577 1,00 35,02C

ATOM 3489 CD PRO C 152 -37,055 -7,943 12,667 1,00 31,45C

ATOM 3490 N VAL C 153 -36,230 -3,581 12,284 1,00 33,27 N

ATOM 3491 CA VAL C 153 -36,676 -2,464 11,466 1,00 34,10 C

ATOM 3492 C VAL C 153 -35,628 -2,419 10,355 1,00 36,23 C

ATOM 3493 О VAL C 153 -34,461 -2,727 10,615 1,00 36,00 О

ATOM 3494 CB VAL C 153 -36,749 -1,137 12,293 1,00 39,53 C

ATOM 3495 CGI VAL C 153 -35,885 -0,021 11,708 1,00 40,72 C

ATOM 3496 CG2 VAL C 153 -38,186 -0,652 12,433 1,00 39,76 C

ATOM 3497 N THR C 154 -36,017 -2,040 9,142 1,00 32,69 N

ATOM 3498 CA THR C 154 -35,055 -1,852 8,055 1,00 32,45 C

ATOM 3499 C THR C 154 -35,212 -0,447 7,522 1,00 34,76 C

ATOM 3500 О THR C 154 -36,319 0,091 7,526 1,00 34,11 О

ATOM 3501 CB THR C 154 -35,229 -2,890 6,938 1,00 37,98 C

ATOM 3502 OGI THR C 154 -36,540 -2,768 6,405 1,00 35,51 О

ATOM 3503 CG2 THR C 154 -34,983 -4,304 7,412 1,00 36,93 C

ATOM 3504 N VAL C 155 -34,112 0,147 7,055 1,00 31,22 N

ATOM 3505 CA VAL C 155 -34,135 1,494 6,488 1,00 31,26 C

ATOM 3506 C VAL C 155 -33,399 1,498 5,170 1,00 35,98 C

ATOM 3507 О VAL C 155 -32,309 0,939 5,073 1,00 38,41 О

ATOM 3508 CB VAL C 155 -33,529 2,578 7,419 1,00 34,20 C

ATOM 3509 CGI VAL C 155 -33,774 3,986 6,850 1,00 34,32 C

ATOM 3510 CG2 VAL C 155 -34,081 2,462 8,831 1,00 33,57 C

ATOM 3511 N SER C 156 -33,981 2,136 4,168 1,00 31,85 N

ATOM 3512 CA SER C 156 -33,329 2,390 2,889 1,00 31,67 C

ATOM 3513 C SER C 156 -33,532 3,890 2,648 1,00 35,07 C

ATOM 3514 О SER C 156 -34,326 4,511 3,358 1,00 32,90 О

ATOM 3515 CB SER C 156 -33,909 1,527 1,763 1,00 33,56 C

ATOM 3516 OG SER C 156 -35,139 1,994 1,233 1,00 38,04 О

ATOM 3517 N TRP C 157 -32,798 4,469 1,696 1,00 33,68 N

ATOM 3518 CA TRP C 157 -32,892 5,887 1,354 1,00 34,59 C

- 186 043052

ATOM 3519 C TRP С 157 -33,226 6,021 -0,124 1,00 40,18С

ATOM 3520 О TRP С 157 -32,605 5,344 -0,956 1,00 40,14О

АТОМ 3521 СВ TRP С 157 -31,588 6,599 1,694 1,00 33,76С

АТОМ 3522 CG TRP С 157 -31,442 6,848 3,163 1,00 34,18С

АТОМ 3523 GDI TRP С 157 -30,921 6,004 4,099 1,00 36,15С

АТОМ 3524 CD2 TRP С 157 -31,921 7,992 3,872 1,00 33,96С

АТОМ 3525 NE1 TRP С 157 -31,019 6,568 5,350 1,00 35,46N

АТОМ 3526 СЕ2 TRP С 157 -31,641 7,786 5,239 1,00 37,15С

АТОМ 3527 СЕЗ TRP С 157 -32,553 9,186 3,478 1,00 35,25С

АТОМ 3528 CZ2 TRP С 157 -31,972 8,725 6,215 1,00 35,97С

АТОМ 3529 CZ3 TRP С 157 -32,889 10,111 4,452 1,00 36,69 С

АТОМ 3530 СН2 TRP С 157 -32,567 9,891 5,796 1,00 36,63 С

АТОМ 3531 N ASN С 158 -34,244 6,845 -0,448 1,00 37,21 N

АТОМ 3532 CA ASN С 158 -34,702 7,060 -1,831 1,00 38,69 С

АТОМ 3533 С ASN С 158 -35,024 5,740 -2,555 1,00 42,14 С

АТОМ 3534 О ASN С 158 -34,682 5,562 -3,729 1,00 42,39 О

АТОМ 3535 СВ ASN С 158 -33,682 7,917 -2,604 1,00 40,22 С

АТОМ 3536 CG ASN С 158 -33,522 9,295 -2,008 1,00 46,21 С

АТОМ 3537 OD1 ASN С 158 -34,342 9,733 -1,212 1,00 40,14 О

АТОМ 3538 ND2 ASN С 158 -32,487 10,024 -2,400 1,00 38,65 N

АТОМ 3539 N SER С 159 -35,668 4,807 -1,818 1,00 37,79 N

АТОМ 3540 CA SER С 159 -36,079 3,491 -2,301 1,00 38,40 С

АТОМ 3541 С SER С 159 -34,904 2,654 -2,844 1,00 41,77 С

АТОМ 3542 О SER С 159 -35,106 1,830 -3,724 1,00 41,19 О

АТОМ 3543 СВ SER С 159 -37,190 3,635 -3,343 1,00 41,54 С

АТОМ 3544 OG SER С 159 -38,272 4,392 -2,822 1,00 47,75 О

АТОМ 3545 N GLY С 160 -33,693 2,846 -2,281 1,00 38,65 N

АТОМ 3546 CA GLY С 160 -32,482 2,137 -2,689 1,00 39,01 С

АТОМ 3547 С GLY С 160 -31,542 2,951 -3,596 1,00 43,01С

АТОМ 3548 О GLY С 160 -30,411 2,527 -3,788 1,00 43,49О

АТОМ 3549 N ALA С 161 -31,981 4,093 -4,154 1,00 41,35N

АТОМ 3550 CA ALA С 161 -31,123 4,921 -5,027 1,00 42,93 С

АТОМ 3551 С ALA С 161 -29,924 5,544 -4,287 1,00 46,99С

АТОМ 3552 О ALA С 161 -28,918 5,833 -4,928 1,00 48,13О

АТОМ 3553 СВ ALA С 161 -31,942 6,031 -5,687 1,00 44,18 С

АТОМ 3554 N LEU С 162 -30,031 5,766 -2,957 1,00 41,98 N

- 187 043052

ATOM 3555 CA LEU C 162 -28,964 6,368 -2,158 1,00 40,66 C

ATOM 3556 C LEU C 162 -28,381 5,330 -1,195 1,00 43,86 C

ATOM 3557 О LEU C 162 -29,060 4,889 -0,271 1,00 41,50 О

ATOM 3558 CB LEU C 162 -29,533 7,567 -1,389 1,00 39,63 C

ATOM 3559 CG LEU C 162 -28,580 8,332 -0,469 1,00 42,63 C

ATOM 3560 GDI LEU C 162 -27,376 8,842 -1,225 1,00 43,36 C

ATOM 3561 CD2 LEU C 162 -29,306 9,486 0,193 1,00 43,56 C

ATOM 3562 N THR C 163 -27,135 4,922 -1,438 1,00 42,81 N

ATOM 3563 CA THR C 163 -26,435 3,914 -0,627 1,00 42,79 C

ATOM 3564 C THR C 163 -25,122 4,420 -0,023 1,00 48,11 C

ATOM 3565 О THR C 163 -24,741 3,965 1,055 1,00 49,40 О

ATOM 3566 CB THR C 163 -26,143 2,677 -1,500 1,00 51,93 C

ATOM 3567 OGI THR C 163 -25,384 3,079 -2,650 1,00 54,16 О

ATOM 3568 CG2 THR C 163 -27,414 1,975 -1,952 1,00 49,57 C

ATOM 3569 N SER C 164 -24,402 5,295 -0,741 1,00 45,94 N

ATOM 3570 CA SER C 164 -23,113 5,830 -0,316 1,00 47,16 C

ATOM 3571 C SER C 164 -23,266 6,742 0,914 1,00 51,49 C

ATOM 3572 О SER C 164 -24,199 7,546 0,974 1,00 50,70 О

ATOM 3573 CB SER C 164 -22,465 6,596 -1,470 1,00 52,38 C

ATOM 3574 OG SER C 164 -21,112 6,917 -1,197 1,00 64,54 О

ATOM 3575 N GLY C 165 -22,380 6,570 1,910 1,00 48,80 N

ATOM 3576 CA GLY C 165 -22,378 7,373 3,132 1,00 48,55 C

ATOM 3577 C GLY C 165 -23,538 7,086 4,100 1,00 49,65 C

ATOM 3578 О GLY C 165 -23,696 7,844 5,054 1,00 50,49 О

ATOM 3579 N VAL C 166 -24,329 6,016 3,883 1,00 42,72 N

ATOM 3580 CA VAL C 166 -25,470 5,686 4,745 1,00 40,16 C

ATOM 3581 C VAL C 166 -25,000 4,874 5,958 1,00 43,26 C

ATOM 3582 О VAL C 166 -24,337 3,861 5,769 1,00 43,80 О

ATOM 3583 CB VAL C 166 -26,566 4,900 3,966 1,00 42,30 C

ATOM 3584 CGI VAL C 166 -27,690 4,421 4,901 1,00 40,35 C

ATOM 3585 CG2 VAL C 166 -27,133 5,731 2,819 1,00 41,87 C

ATOM 3586 N HIS C 167 -25,385 5,284 7,184 1,00 38,32 N

ATOM 3587 CA HIS C 167 -25,079 4,544 8,404 1,00 37,74 C

ATOM 3588 C HIS C 167 -26,377 4,320 9,154 1,00 40,29 C

ATOM 3589 О HIS C 167 -26,933 5,278 9,681 1,00 40,72 О

ATOM 3590 CB HIS C 167 -24,093 5,295 9,316 1,00 40,12 C

- 188 043052

ATOM 3591 CG HIS C 167 -22,748 5,542 8,714 1,00 45,66 C

ATOM 3592 ND1 HIS C 167 -21,895 4,506 8,392 1,00 47,59N

ATOM 3593 CD2 HIS C 167 -22,144 6,712 8,410 1,00 49,56C

ATOM 3594 CE1 HIS C 167 -20,807 5,065 7,902 1,00 48,72C

ATOM 3595 NE2 HIS C 167 -20,907 6,398 7,901 1,00 50,53N

ATOM 3596 N THR C 168 -26,874 3,077 9,191 1,00 35,88 N

ATOM 3597 CA THR C 168 -28,071 2,714 9,963 1,00 35,19 C

ATOM 3598 C THR C 168 -27,558 2,063 11,235 1,00 39,47 C

ATOM 3599 О THR C 168 -26,951 0,993 11,177 1,00 39,80 О

ATOM 3600 CB THR C 168 -29,014 1,829 9,147 1,00 36,19 C

ATOM 3601 OGI THR C 168 -29,437 2,596 8,022 1,00 34,80 О

ATOM 3602 CG2 THR C 168 -30,242 1,387 9,939 1,00 31,62 C

ATOM 3603 N РНЕ C 169 -27,768 2,727 12,376 1,00 33,66 N

ATOM 3604 CA РНЕ C 169 -27,248 2,281 13,652 1,00 33,21 C

ATOM 3605 С РНЕ C 169 -27,932 1,027 14,179 1,00 38,49 C

ATOM 3606 О РНЕ С 169 -29,115 0,826 13,902 1,00 36,76 О

ATOM 3607 СВ РНЕ С 169 -27,371 3,405 14,708 1,00 34,82 С

АТОМ 3608 CG РНЕ С 169 -26,378 4,504 14,457 1,00 37,02 С

АТОМ 3609 CD1 РНЕ С 169 -26,692 5,572 13,621 1,00 39,48С

АТОМ 3610 CD2 РНЕ С 169 -25,085 4,406 14,934 1,00 38,66С

АТОМ 3611 СЕ1 РНЕ С 169 -25,753 6,563 13,347 1,00 41,07С

АТОМ 3612 СЕ2 РНЕ С 169 -24,145 5,376 14,635 1,00 42,25С

АТОМ 3613 CZ РНЕ С 169 -24,477 6,447 13,835 1,00 40,95 С

АТОМ 3614 N PRO С 170 -27,220 0,226 15,014 1,00 37,64 N

АТОМ 3615 CA PRO С 170 -27,876 -0,919 15,637 1,00 36,91 С

АТОМ 3616 С PRO С 170 -28,952 -0,416 16,590 1,00 39,98 С

АТОМ 3617 О PRO С 170 -28,785 0,647 17,194 1,00 38,00 О

АТОМ 3618 СВ PRO С 170 -26,741 -1,620 16,398 1,00 39,13 С

АТОМ 3619 CG PRO С 170 -25,528 -1,261 15,681 1,00 44,32 С

АТОМ 3620 CD PRO С 170 -25,748 0,119 15,129 1,00 40,17С

АТОМ 3621 N ALA С 171 -30,048 -1,172 16,732 1,00 37,84N

АТОМ 3622 CA ALA С 171 -31,127 -0,797 17,652 1,00 37,38 С

АТОМ 3623 С ALA С 171 -30,666 -0,839 19,100 1,00 40,61С

АТОМ 3624 О ALA С 171 -29,804 -1,637 19,458 1,00 40,78О

АТОМ 3625 СВ ALA С 171 -32,308 -1,735 17,483 1,00 37,47 С

АТОМ 3626 N VAL С 172 -31,237 0,026 19,933 1,00 37,47 N

- 189 043052

ATOM

3627

CAVAL С 172 -30,945 0,044 21,358 1,00 37,51 С

АТОМ

3628

С VAL С 172 -32,266 -0,167 22,054 1,00 40,36 С

АТОМ

3629

О VAL С 172 -33,243 0,510 21,730 1,00 40,15 О

АТОМ

3630

СВ VAL С 172 -30,243 1,343 21,822 1,00 42,01 С

АТОМ

3631

CGI VAL

С 172 -30,056 1,348 23,337 1,00 43,19 С

АТОМ

3632

CG2 VAL

С 172 -28,893 1,497 21,135 1,00 41,67 С

АТОМ

3633

N LEU С

173 -32,294 -1,100 23,010 1,00 36,43 N

АТОМ

3634

CA LEU С 173 -33,475 -1,382 23,802 1,00 36,35 С

АТОМ

3635

С LEU С 173 -33,518 -0,339 24,929 1,00 44,13 С

АТОМ

3636

О LEU С 173 -32,555 -0,209 25,697 1,00 44,92 О

АТОМ

3637

СВ LEU С 173 -33,394 -2,817 24,373 1,00 35,69 С

АТОМ

3638

CG LEU С 173 -34,542 -3,260 25,278 1,00 40,30 С

АТОМ

3639

GDI LEU

С 173 -35,871 -3,230 24,534 1,00 38,92 С

АТОМ

3640

CD2 LEU

С 173 -34,275 -4,664 25,852 1,00 43,69 С

АТОМ

3641

N GLN С

174 -34,630 0,404 25,020 1,00 41,93 N

АТОМ

3642

CA GLN С 174 -34,832 1,442 26,034 1,00 42,66 С

АТОМ

3643

С GLN С 174 -35,531 0,826 27,250 1,00 46,20 С

АТОМ

3644

О GLN С 174 -36,099 -0,265

27,133

1,00

42,26

АТОМ

3645

СВ

GLN

174

-35,660

2,594

25,433

1,00

44,53

АТОМ

3646

CG

GLN

174

-34,969

3,287

24,229

1,00

51,59

АТОМ

3647

CD

GLN

174

-35,915

3, 885

23,210

1,00

62,45

АТОМ

3648

ОЕ1 GLN

С 174 -35,838 5,076 22,881 1,00 58,44 О

АТОМ

3649

NE2 GLN

С 174 -36,730 3,052 22,581 1,00 43,24 N

АТОМ

3650

N SER С

175 -35,503 1,524 28,416 1,00 46,90 N

АТОМ

3651

CA SER С 175 -36,145 1,046 29,654 1,00 49,01 С

АТОМ

3652

С SER С 175 -37,661 0,848 29,493 1,00 53,54 С

АТОМ

3653

О SER С 175 -38,252 0,084 30,256 1,00 54,70 О

АТОМ

3654

СВ SER С 175 -35,850 1,977 30,833 1,00 56,29 С

АТОМ

3655

OG SER С 175 -35,934 3,339 30,447 1,00 68,49 О

АТОМ

3656

N SER С 176 -38,276 1,506 28,488 1,00 48,91 N

АТОМ

3657

CA SER С 176 -39,689 1,336

28,135

1,00

48,23

АТОМ

3658

С SER С 176 -40,004 -0,069

27,584

1,00

49, 92

АТОМ

3659

О SER С 176 -41,181 -0,423

27,482

1,00

49, 96

АТОМ

3660

СВ SER С 176 -40,079 2,345

27,057

1,00

49, 39

АТОМ

3661

OG SER С 176 -39,322 2,146

25,871

1, 00

50,49

АТОМ

3662

N GLY С 177 -38,975 -0,823

27,143

1,00

44,04

- 190 043052

ATOM 3663 CA GLY C 177 -39,147 -2,140 26,541 1,00 41,89 C

ATOM 3664 C GLY C 177 -39,260 -2,024 25,012 1,00 42,93C

ATOM 3665 О GLY C 177 -39,486 -3,036 24,357 1,00 42,28О

ATOM 3666 N LEU C 178 -39,110 -0,809 24,439 1,00 38,86N

ATOM 3667 CA LEU C 178 -39,198 -0,606 22,994 1,00 38,16 C

ATOM 3668 C LEU C 178 -37,835 -0,262 22,465 1,00 39,69C

ATOM 3669 О LEU C 178 -37,031 0,363 23,169 1,00 39,65 О

ATOM 3670 CB LEU C 178 -40,165 0,529 22,629 1,00 39,12 C

ATOM 3671 CG LEU C 178 -41,553 0,412 23,243 1,00 47,25 C

ATOM 3672 GDI LEU C 178 -42,316 1,689 23,084 1,00 49,72 C

ATOM 3673 CD2 LEU C 178 -42,333 -0,750 22,645 1,00 48,05 C

ATOM 3674 N TYR C 179 -37,606 -0,595 21,197 1,00 32,89 N

ATOM 3675 CA TYR C 179 -36,354 -0,311 20,517 1,00 31,68 C

ATOM 3676 C TYR C 179 -36,410 1,029 19,789 1,00 34,45 C

ATOM 3677 О TYR C 179 -37,491 1,508 19,423 1,00 32,55 О

ATOM 3678 CB TYR C 179 -36,048 -1,407 19,493 1,00 31,24C

ATOM 3679 CG TYR C 179 -35,866 -2,771 20,114 1,00 33,01C

ATOM 3680 CD1 TYR C 179 -34,622 -3,194 20,562 1,00 34,09C

ATOM 3681 CD2 TYR C 179 -36,938 -3,651 20,237 1,00 33,66C

ATOM 3682 CE1 TYR C 179 -34,446 -4,459 21,119 1,00 34,49C

ATOM 3683 CE2 TYR C 179 -36,780 -4,908 20,816 1,00 34,17C

ATOM 3684 CZ TYR C 179 -35,532 -5,309 21,256 1,00 39,19C

ATOM 3685 OH TYR C 179 -35,390 -6,551 21,817 1,00 39,50О

ATOM 3686 N SER C 180 -35,224 1,597 19,531 1,00 31,13 N

ATOM 3687 CA SER C 180 -35,072 2,814 18,741 1,00 31,06 C

ATOM 3688 C SER C 180 -33,736 2,809 18,041 1,00 35,97 C

ATOM 3689 О SER C 180 -32,766 2,228 18,541 1,00 35,27 О

ATOM 3690 CB SER C 180 -35,166 4,068 19,607 1,00 35,60 C

ATOM 3691 OG SER C 180 -36,493 4,283 20,050 1,00 46,10 О

ATOM 3692 N LEU C 181 -33,683 3,480 16,897 1,00 33,23 N

ATOM 3693 CA LEU C 181 -32,450 3,666 16,146 1,00 33,56 C

ATOM 3694 C LEU C 181 -32,552 4,860 15,246 1,00 37,99 C

ATOM 3695 О LEU C 181 -33,648 5,366 15,003 1,00 38,13 О

ATOM 3696 CB LEU C 181 -32,047 2,415 15,341 1,00 32,57 C

ATOM 3697 CG LEU C 181 -32,981 1,912 14,235 1,00 36,26 C

ATOM 3698 GDI LEU C 181 -32,790 2,686 12,914 1,00 37,15 C

- 191 043052

ATOM 3699 CD2 LEU C 181 -32,694 0,435 13,923 1,00 39,02 C

ATOM 3700 N SER C 182 -31,407 5,290 14,719 1,00 35,19 N

ATOM 3701 CA SER C 182 -31,337 6,361 13,736 1,00 34,28 C

ATOM 3702 C SER C 182 -30,638 5,814 12,503 1,00 35,76 C

ATOM 3703 О SER C 182 -29,878 4,852 12,590 1,00 33,49 О

ATOM 3704 CB SER C 182 -30,569 7,561 14,283 1,00 36,84 C

ATOM 3705 OG SER C 182 -31,440 8,441 14,970 1,00 44,76 О

ATOM 3706 N SER C 183 -30,940 6,407 11,354 1,00 33,35 N

ATOM 3707 CA SER C 183 -30,297 6,110 10,075 1,00 31,96 C

ATOM 3708 C SER C 183 -29,869 7,446 9,541 1,00 35,95 C

ATOM 3709 О SER C 183 -30,696 8,351 9,455 1,00 35,40 О

ATOM 3710 CB SER C 183 -31,249 5,422 9,107 1,00 32,59 C

ATOM 3711 OG SER C 183 -30,574 5,155 7,889 1,00 36,23 О

ATOM 3712 N VAL C 184 -28,577 7,612 9,276 1,00 33,92 N

ATOM 3713 CA VAL C 184 -28,038 8,886 8,819 1,00 35,09 C

ATOM 3714 C VAL C 184 -27,325 8,724 7,483 1,00 40,08 C

ATOM 3715 О VAL C 184 -26,886 7,628 7,144 1,00 39,18 О

ATOM 3716 CB VAL C 184 -27,109 9,531 9,880 1,00 39,70 C

ATOM 3717 CGI VAL C 184 -27,849 9,751 11,197 1,00 38,39 C

ATOM 3718 CG2 VAL C 184 -25,839 8,705 10,098 1,00 40,03 C

ATOM 3719 N VAL C 185 -27,187 9,833 6,758 1,00 37,40 N

ATOM 3720 CA VAL C 185 -26,466 9,896 5,494 1,00 38,30 C

ATOM 3721 C VAL C 185 -25,799 11,270 5,358 1,00 43,11 C

ATOM 3722 О VAL C 185 -26,386 12,281 5,759 1,00 41,97 О

ATOM 3723 CB VAL C 185 -27,370 9,548 4,274 1,00 41,49 C

ATOM 3724 CGI VAL C 185 -28,521 10,541 4,113 1,00 41,26 C

ATOM 3725 CG2 VAL C 185 -26,551 9,450 2,986 1,00 41,92 C

ATOM 3726 N THR C 186 -24,559 11,297 4,829 1,00 41,34 N

ATOM 3727 CA THR C 186 -23,822 12,538 4,579 1,00 42,71 C

ATOM 3728 C THR C 186 -23,867 12,806 3,084 1,00 47,23 C

ATOM 3729 О THR C 186 -23,590 11,909 2,287 1,00 46,50 О

ATOM 3730 CB THR C 186 -22,407 12,478 5,138 1,00 48,72 C

ATOM 3731 OGI THR C 186 -21,753 11,301 4,669 1,00 48,98 О

ATOM 3732 CG2 THR C 186 -22,399 12,500 6,651 1,00 46,29 C

ATOM 3733 N VAL C 187 -24,253 14,017 2,703 1,00 45,84 N

ATOM 3734 CA VAL C 187 -24,396 14,406 1,298 1,00 46,95 C

- 192 043052

ATOM 3735 C VAL С 187 -23,729 15,761 1,077 1,00 53,16 С

ATOM 3736 О VAL С 187 -23,512 16,485 2,057 1,00 52,77 О

АТОМ 3737 СВ VAL С 187 -25,905 14,433 0,906 1,00 49,45 С

АТОМ 3738 CGI VAL С 187 -26,569 13,094 1,232 1,00 47,20 С

АТОМ 3739 CG2 VAL С 187 -26,659 15,583 1,597 1,00 49,08 С

АТОМ 3740 N PRO С 188 -23,439 16,140 -0,191 1,00 50,85 N

АТОМ 3741 CA PRO С 188 -22,881 17,477 -0,416 1,00 52,31 С

АТОМ 3742 С PRO С 188 -23,950 18,504 -0,032 1,00 55,32 С

АТОМ 3743 О PRO С 188 -25,117 18,319 -0,372 1,00 53,37 О

АТОМ 3744 СВ PRO С 188 -22,565 17,501 -1,922 1,00 55,35С

АТОМ 3745 CG PRO С 188 -22,518 16,080 -2,331 1,00 58,18С

АТОМ 3746 CD PRO С 188 -23,491 15,369 -1,450 1,00 51,79С

АТОМ 3747 N SER С 189 -23,578 19,540 0,712 1,00 53,46 N

АТОМ 3748 CA SER С 189 -24,528 20,567 1,139 1,00 53,84С

АТОМ 3749 С SER С 189 -25,212 21,269 -0,064 1,00 58,42С

АТОМ 3750 О SER С 189 -26,388 21,622 0,036 1,00 56,23 О

АТОМ 3751 СВ SER С 189 -23,849 21,570 2,071 1,00 58,51С

АТОМ 3752 OG SER С 189 -22,635 22,048 1,520 1,00 73,56О

АТОМ 3753 N SER С 190 -24,515 21,383 -1,217 1,00 57,74N

АТОМ 3754 CA SER С 190 -25,083 21,977 -2,441 1,00 59,38 С

АТОМ 3755 С SER С 190 -26,289 21,165 -2,994 1,00 61,93С

АТОМ 3756 О SER С 190 -27,193 21,747 -3,589 1,00 61,60О

АТОМ 3757 СВ SER С 190 -24,008 22,111 -3,518 1,00 64,69 С

АТОМ 3758 OG SER С 190 -23,314 20,885 -3,690 1,00 73,17 О

АТОМ 3759 N SER С 191 -26,326 19,843 -2,750 1,00 57,00 N

АТОМ 3760 CA SER С 191 -27,443 18,992 -3,188 1,00 54,73 С

АТОМ 3761 С SER С 191 -28,734 19,180 -2,345 1,00 56,38 С

АТОМ 3762 О SER С 191 -29,772 18,649 -2,732 1,00 54,22 О

АТОМ 3763 СВ SER С 191 -27,034 17,519 -3,181 1,00 56,06 С

АТОМ 3764 OG SER С 191 -27,060 16,965 -1,874 1,00 59,55 О

АТОМ 3765 N LEU С 192 -28,691 19,927 -1,220 1,00 53,23 N

АТОМ 3766 CA LEU С 192 -29,883 20,138 -0,392 1,00 51,91 С

АТОМ 3767 С LEU С 192 -30,963 20,981 -1,091 1,00 55,14С

АТОМ 3768 О LEU С 192 -32,144 20,791 -0,813 1,00 52,70О

АТОМ 3769 СВ LEU С 192 -29,505 20,763 0,961 1,00 52,37С

АТОМ 3770 CG LEU С 192 -28,583 19,926 1,865 1,00 55,88С

- 193 043052

ATOM 3771 GDI LEU C 192 -28,270 20,674 3,142 1,00 56,85 C

ATOM 3772 CD2 LEU C 192 -29,177 18,563 2,166 1,00 54,65 C

ATOM 3773 N GLY C 193 -30,574 21,877 -2,011 1,00 54,57 N

ATOM 3774 CA GLY C 193 -31,528 22,694 -2,755 1,00 55,72 C

ATOM 3775 C GLY C 193 -32,011 22,031 -4,060 1,00 61,36C

ATOM 3776 О GLY C 193 -32,898 22,589 -4,709 1,00 62,19О

ATOM 3777 N THR C 194 -31,407 20,891 -4,473 1,00 58,05N

ATOM 3778 CA THR C 194 -31,758 20,205 -5,733 1,00 57,84 C

ATOM 3779 C THR C 194 -32,144 18,715 -5,611 1,00 60,18 C

ATOM 3780 О THR C 194 -32,796 18,203 -6,521 1,00 60,53 О

ATOM 3781 CB THR C 194 -30,600 20,337 -6,733 1,00 59,06 C

ATOM 3782 OGI THR C 194 -29,519 19,488 -6,339 1,00 57,56 О

ATOM 3783 CG2 THR C 194 -30,124 21,771 -6,902 1,00 54,99 C

ATOM 3784 N GLN C 195 -31,705 18,009 -4,554 1,00 54,49 N

ATOM 3785 CA GLN C 195 -31,974 16,581 -4,374 1,00 52,91 C

ATOM 3786 C GLN C 195 -32,915 16,368 -3,192 1,00 54,66 C

ATOM 3787 О GLN C 195 -32,746 17,002 -2,155 1,00 53,86 О

ATOM 3788 CB GLN C 195 -30,643 15,829 -4,136 1,00 54,19C

ATOM 3789 CG GLN C 195 -30,754 14,304 -4,008 1,00 72,46C

ATOM 3790 CD GLN C 195 -31,323 13,648 -5,239 1,00 86,87C

ATOM 3791 OE1 GLN C 195 -30,937 13,967 -6,364 1,00 91,30 О

ATOM 3792 NE2 GLN C 195 -32,240 12,709 -5,068 1,00 71,05 N

ATOM 3793 N THR C 196 -33,898 15,476 -3,352 1,00 50,65 N

ATOM 3794 CA THR C 196 -34,850 15,126 -2,297 1,00 49,27 C

ATOM 3795 C THR C 196 -34,312 13,884 -1,558 1,00 49,76 C

ATOM 3796 О THR C 196 -33,700 13,017 -2,190 1,00 47,34 О

ATOM 3797 CB THR C 196 -36,247 14,899 -2,901 1,00 61,55 C

ATOM 3798 OGI THR C 196 -36,673 16,111 -3,521 1,00 62,45 О

ATOM 3799 CG2 THR C 196 -37,274 14,494 -1,863 1,00 61,37 C

ATOM 3800 N TYR C 197 -34,528 13,825 -0,217 1,00 44,93 N

ATOM 3801 CA TYR C 197 -34,078 12,725 0,651 1,00 42,40 C

ATOM 3802 C TYR C 197 -35,245 12,150 1,432 1,00 45,32 C

ATOM 3803 О TYR C 197 -35,835 12,854 2,249 1,00 44,98 О

ATOM 3804 CB TYR C 197 -32,975 13,207 1,605 1,00 42,62 C

ATOM 3805 CG TYR C 197 -31,729 13,597 0,847 1,00 43,63 C

ATOM 3806 GDI TYR C 197 -30,946 12,634 0,221 1,00 45,06 C

- 194 043052

ATOM 3807 CD2 TYR C 197 -31,410 14,936 0,632 1,00 44,12 C

ATOM 3808 CE1 TYR C 197 -29,886 12,989 -0,609 1,00 47,00 C

ATOM 3809 CE2 TYR C 197 -30,313 15,303 -0,147 1,00 45,53 C

ATOM 3810 CZ TYR C 197 -29,556 14,324 -0,774 1,00 50,78 C

ATOM 3811 OH TYR C 197 -28,449 14,638 -1,528 1,00 47,61 О

ATOM 3812 N ILE C 198 -35,606 10,885 1,147 1,00 41,27 N

ATOM 3813 CA ILE C 198 -36,717 10,190 1,796 1,00 40,27 C

ATOM 3814 C ILE C 198 -36,176 8,897 2,394 1,00 42,85 C

ATOM 3815 О ILE C 198 -35,609 8,100 1,658 1,00 43,61 О

ATOM 3816 CB ILE C 198 -37,849 9,880 0,759 1,00 43,87 C

ATOM 3817 CGI ILE C 198 -38,453 11,182 0,162 1,00 45,20 C

ATOM 3818 CG2 ILE C 198 -38,966 9,018 1,390 1,00 42,53 C

ATOM 3819 CD1 ILE C 198 -39,164 10,993 -1,177 1,00 47,15 C

ATOM 3820 N CYS C 199 -36,385 8,655 3,694 1,00 38,95 N

ATOM 3821 CA CYS C 199 -35,992 7,381 4,304 1,00 37,58 C

ATOM 3822 C CYS C 199 -37,198 6,464 4,219 1,00 37,49 C

ATOM 3823 О CYS C 199 -38,322 6,921 4,408 1,00 36,74 О

ATOM 3824 CB CYS C 199 -35,504 7,552 5,744 1,00 38,53 C

ATOM 3825 SG CYS C 199 -36,774 8,077 6,929 1,00 43,26 S

ATOM 3826 N ASN C 200 -36,978 5,195 3,891 1,00 33,95 N

ATOM 3827 CA ASN C 200 -38,060 4,216 3,760 1,00 34,51 C

ATOM 3828 C ASN C 200 -37,888 3,245 4,910 1,00 36,82 C

ATOM 3829 О ASN C 200 -36,941 2,470 4,916 1,00 36,20 О

ATOM 3830 CB ASN C 200 -38,011 3,500 2,405 1,00 37,20 C

ATOM 3831 CG ASN C 200 -37,611 4,407 1,280 1,00 44,47 C

ATOM 3832 OD1 ASN C 200 -36,480 4,369 0,806 1,00 38,46 О

ATOM 3833 ND2 ASN C 200 -38,482 5,318 0,910 1,00 34,99 N

ATOM 3834 N VAL C 201 -38,753 3,340 5,912 1,00 33,44 N

ATOM 3835 CA VAL C 201 -38,680 2,509 7,115 1,00 32,43 C

ATOM 3836 C VAL C 201 -39,695 1,366 7,027 1,00 36,27 C

ATOM 3837 О VAL C 201 -40,873 1,619 6,803 1,00 36,91 О

ATOM 3838 CB VAL C 201 -38,907 3,383 8,367 1,00 34,96 C

ATOM 3839 CGI VAL C 201 -38,753 2,562 9,656 1,00 34,55 C

ATOM 3840 CG2 VAL C 201 -37,945 4,568 8,366 1,00 34,28 C

ATOM 3841 N ASN C 202 -39,250 0,122 7,210 1,00 32,13 N

ATOM 3842 CA ASN C 202 -40,152 -1,027 7,170 1,00 32,50 C

- 195 043052

ATOM 3843 C ASN С 202 -40,048 -1,791 8,481 1,00 35,35 С

ATOM 3844 О ASN С 202 -38,947 -2,073 8,959 1,00 34,29 О

АТОМ 3845 СВ ASN С 202 -39,827 -1,952 5,985 1,00 35,75 С

АТОМ 3846 CG ASN С 202 -40,905 -2,964 5,659 1,00 69,46 С

АТОМ 3847 OD1 ASN С 202 -42,031 -2,909 6,159 1,00 68,86 О

АТОМ 3848 ND2 ASN С 202 -40,578 -3,943 4,838 1,00 63,99 N

АТОМ 3849 N HIS С 203 -41,192 -2,111 9,068 1,00 32,54 N

АТОМ 3850 CA HIS С 203 -41,253 -2,904 10,295 1,00 31,61 С

АТОМ 3851 С HIS С 203 -42,271 -4,017 10,026 1,00 36,97 С

АТОМ 3852 О HIS С 203 -43,465 -3,845 10,254 1,00 38,03 О

АТОМ 3853 СВ HIS С 203 -41,617 -2,018 11,491 1,00 32,05 С

АТОМ 3854 CG HIS С 203 -41,663 -2,748 12,799 1,00 34,54 С

АТОМ 3855 ND1 HIS С

АТОМ 3856 CD2 HIS С

АТОМ 3857 СЕ1 HIS С

АТОМ 3858 NE2 HIS С

АТОМ 3859 N LYS С 2

203 -42,846 -2,909

203 -40,673 -3,351

203 -42,550 -3,592

203 -41,253 -3,884

-41,786 -5,134 9,

13,479 1,00 36,65 N

13,497 1,00 34,43 С

14,571 1,00 35,40 С

14,621 1,00 34,84 N

453 1,00 33,51 N

АТОМ 3860 CA LYS С 204 -42,628 -6,274 9,090 1,00 35,51 С

АТОМ 3861 С LYS С 204 -43,444 -6,849 10,260 1,00 39,45 С

АТОМ 3862 О LYS С 204 -44,613 -7,156 10,033

АТОМ 3863 СВ LYS С 204 -41,808 -7,3928,411

АТОМ 3864 CG LYS С 204 -41,383 -7,0556,983

АТОМ 3865 CD LYS С 204 -40,254 -7,9796,488

АТОМ 3866 СЕ LYS С 204 -40,468 -8,5235,093

АТОМ 3867 NZ LYS С 204 -40,459 -7,4564,063

АТОМ 3868 N PRO С 205 -42,889 -6,924 11,511

1,00 39,43 О

1,00 37,95 С

1,00 59,99 С

1,00 75,65 С

1,00 89,72 С

1,00 98,79 N

1,00 34,46 N

АТОМ 3869 CA PRO С 205 -43,669 -7,486 12,626 1,00 34,26 С

АТОМ 3870 С PRO С 205 -45,016 -6,787 12,912 1,00 40,22 С

АТОМ 3871 О PRO С 205 -45,938 -7,472 13,350 1,00 42,16 О

АТОМ 3872 СВ PRO С 205 -42,698 -7,408 13,801 1,00 34,66С

АТОМ 3873 CG PRO С 205 -41,356 -7,530 13,172 1,00 37,43С

АТОМ 3874 CD PRO С 205 -41,487 -6,694 11,929 1,00 33,27С

АТОМ 3875 N SER С 206 -45,151 -5,471 12,609 1,00 36,17 N

АТОМ 3876 CA SER С 206 -46,398 -4,713 12,784 1,00 37,09 С

АТОМ 3877 С SER С 206 -47,056 -4,313 11,446 1,00 45,52 С

АТОМ 3878 О SER С 206 -48,057 -3,587 11,460 1,00 46,22 О

- 196 043052

ATOM 3879 CB SER C 206 -46,133 -3,451 13,600 1,00 37,24 C

ATOM 3880 OG SER C 206 -45,481 -2,468 12,815 1,00 39,38 О

ATOM 3881 N ASN C 207 -46,501 -4,765 10,305 1,00 44,74 N

ATOM 3882 CA ASN C 207 -46,968 -4,420 8,959 1,00 46,37 C

ATOM 3883 C ASN C 207 -46,954 -2,893 8,750 1,00 51,08 C

ATOM 3884 О ASN C 207 -47,877 -2,330 8,164 1,00 52,75 О

ATOM 3885 CB ASN C 207 -48,348 -5,039 8,668 1,00 51,57 C

ATOM 3886 CG ASN C 207 -48,734 -5,047 7,199 1,00 84,75 C

ATOM 3887 OD1 ASN C 207 -47,888 -5,160 6,298 1,00 80,06 О

ATOM 3888 ND2 ASN C 207 -50,024 -4,920 6,913 1,00 79,89 N

ATOM 3889 N THR C 208 -45,895 -2,229 9,243 1,00 46,28 N

ATOM 3890 CA THR C 208 -45,734 -0,776 9,148 1,00 45,98 C

ATOM 3891 C THR C 208 -44,659 -0,441 8,109 1,00 49,44 C

ATOM 3892 О THR C 208 -43,551 -0,980 8,176 1,00 48,86 О

ATOM 3893 CB THR C 208 -45,379 -0,203 10,537 1,00 51,02 C

ATOM 3894 OGI THR C 208 -46,494 -0,374 11,410 1,00 50,03 О

ATOM 3895 CG2 THR C 208 -44,994 1,271 10,495 1,00 52,32 C

ATOM 3896 N LYS C 209 -45,007 0,417 7,140 1,00 45,59 N

ATOM 3897 CA LYS C 209 -44,097 0,942 6,119 1,00 44,94 C

ATOM 3898 C LYS C 209 -44,286 2,450 6,160 1,00 48,08 C

ATOM 3899 О LYS C 209 -45,421 2,906 6,027 1,00 49,70 О

ATOM 3900 CB LYS C 209 -44,415 0,401 4,708 1,00 47,52 C

ATOM 3901 CG LYS C 209 -43,607 -0,845 4,335 1,00 60,67C

ATOM 3902 CD LYS C 209 -43,547 -1,105 2,822 1,00 68,70C

ATOM 3903 CE LYS C 209 -44,819 -1,659 2,229 1,00 79,44C

ATOM 3904 NZ LYS C 209 -44,942 -3,128 2,426 1,00 90,37N

ATOM 3905 N VAL C 210 -43,209 3,214 6,404 1,00 42,04 N

ATOM 3906 CA VAL C 210 -43,271 4,679 6,496 1,00 41,81 C

ATOM 3907 C VAL C 210 -42,211 5,272 5,578 1,00 45,20 C

ATOM 3908 О VAL C 210 -41,067 4,830 5,608 1,00 44,94 О

ATOM 3909 CB VAL C 210 -43,045 5,153 7,961 1,00 45,14 C

ATOM 3910 CGI VAL C 210 -43,168 6,675 8,080 1,00 45,33 C

ATOM 3911 CG2 VAL C 210 -44,010 4,459 8,922 1,00 45,25 C

ATOM 3912 N ASP C 211 -42,588 6,271 4,778 1,00 42,34 N

ATOM 3913 CA ASP C 211 -41,678 7,018 3,919 1,00 41,90 C

ATOM 3914 C ASP C 211 -41,670 8,429 4,488 1,00 47,72 C

- 197 043052

ATOM 3915 О ASP С 211 -42,726 9,066 4,503 1,00 50,20 О

ATOM 3916 СВ ASP С 211 -42,175 7,056 2,465 1,00 43,60 С

АТОМ 3917 CG ASP С 211 -42,166 5,711 1,779 1,00 52,70 С

АТОМ 3918 OD1 ASP С 211 -41,161 4,981 1,914 1,00 51,11 О

АТОМ 3919 OD2 ASP С 211 -43,156 5,390 1,096 1,00 63,38 О

АТОМ 3920 N LYS С 212 -40,526 8,908 4,996 1,00 41,79 N

АТОМ 3921 CA LYS С 212 -40,451 10,257 5,554 1,00 41,69 С

АТОМ 3922 С LYS С 212 -39,464 11,107 4,774 1,00 44,76 С

АТОМ 3923 О LYS С 212 -38,279 10,792 4,736 1,00 43,28 О

АТОМ 3924 СВ LYS С 212 -40,092 10,237 7,053 1,00 42,89С

АТОМ 3925 CG LYS С 212 -40,062 11,641 7,694 1,00 52,40С

АТОМ 3926 CD LYS С 212 -41,179 11,885 8,695 1,00 64,22С

АТОМ 3927 СЕ LYS С 212 -42,575 11,953 8,125 1,00 78,55С

АТОМ 3928 NZ LYS С 212 -43,444 10,866 8,657 1,00 90,01N

АТОМ 3929 N LYS С 213 -39,953 12,210 4,195 1,00 43,38 N

АТОМ 3930 CA LYS С 213 -39,131 13,173 3,463 1,00 44,27 С

АТОМ 3931 С LYS С 213 -38,375 14,004 4,506 1,00 47,22 С

АТОМ 3932 О LYS С 213 -38,991 14,502 5,444 1,00 47,71 О

АТОМ 3933 СВ LYS С 213 -40,033 14,070 2,588 1,00 48,79 С

АТОМ 3934 CG LYS С 213 -39,311 14,910 1,543 1,00 67,33 С

АТОМ 3935 CD LYS С 213 -40,324 15,788 0,808 1,00 83,39 С

АТОМ 3936 СЕ LYS С 213 -39,715 16,704 -0,225 1,00 99,34 С

АТОМ 3937 NZ LYS С 213 -40,684 17,733 -0,697 1,00109,18 N

АТОМ 3938 N VAL С 214 -37,040 14,082 4,391 1,00 43,34 N

АТОМ 3939 CA VAL С 214 -36,184 14,827 5,318 1,00 42,97 С

АТОМ 3940 С VAL С 214 -35,825 16,116 4,604 1,00 52,25 С

АТОМ 3941 О VAL С 214 -35,042 16,086 3,660 1,00 52,40 О

АТОМ 3942 СВ VAL С 214 -34,937 14,003 5,716 1,00 44,58 С

АТОМ 3943 CGI VAL С 214 -34,052 14,771 6,695 1,00 43,89 С

АТОМ 3944 CG2 VAL С 214 -35,356 12,662 6,314 1,00 43,24 С

АТОМ 3945 N GLU С 215 -36,417 17,238 5,034 1,00 53,37 N

АТОМ 3946 CA GLU С 215 -36,239 18,544 4,391 1,00 55,97 С

АТОМ 3947 С GLU С 215 -35,388 19,506 5,228 1,00 62,07 С

АТОМ 3948 О GLU С 215 -35,449 19,455 6,456 1,00 59,01 О

АТОМ 3949 СВ GLU С 215 -37,621 19,180 4,165 1,00 57,99 С

АТОМ 3950 CG GLU С 215 -38,511 18,370 3,237 1,00 69,95 С

- 198 043052

ATOM 3951 CD GLU C 215 -39,907 18,931 3,064 1,00 99,06 C ATOM 3952 OE1 GLU C 215 -40,554 19,249 4,088 1,00 96,25 О ATOM 3953 OE2 GLU C 215 -40,369 19,021 1,904 1,00100,10 О ATOM 3954 N PRO C 216 -34,630 20,421 4,570 1,00 64,54 N ATOM 3955 CA PRO C 216 -33,890 21,440 5,317 1,00 67,05 C ATOM 3956 C PRO C 216 -34,951 22,418 5,830 1,00 73,58 C ATOM 3957 О PRO C 216 -35,415 23,272 5,075 1,00 75,08 О ATOM 3958 CB PRO C 216 -32,955 22,057 4,267 1,00 69,95 C

ATOM 3959 CG PRO C 216 -33,618 21,819 2,976 1,00 73,76 C

ATOM 3960 CD PRO C 216 -34,516 20,629 3,111 1,00 67,15 C

ATOM 3961 N LYS C 217 -35,421 22,196 7,062 1,00 71,52 N ATOM 3962 CA LYS C 217 -36,490 22,981 7,683 1,00 73,15 C ATOM 3963 C LYS C 217 -35,916 24,214 8,389 1,00 77,06 C

ATOM 3964 О LYS C 217 -35,811 25,276 7,778 1,00 76,66 О

ATOM 3965 CB LYS C 217 -37,283 22,094 8,671 1,00 76,19 C

ATOM 3966 CG LYS C 217 -38,705 22,587 8,990 1,00 97,50 C

ATOM 3967 CD LYS C 217 -38,758 23,599 10,147 1,00107,97 C

ATOM 3968 CE LYS C 217 -40,162 23,851 10,650 1,00117,10 C

ATOM 3969 NZ LYS C 217 -40,963 24,677 9,709 1,00125,01 N

ATOM 3970 CD CD C9901 -22,410 2,405 7,030 0,70 74,10 CD

ATOM 3971 CD CD C9902 -42,496 -21,639 17,273 0,70 68,69 CD

ATOM 3972 OW WAT W 1 -43,686 6,507 20,633 1,00 37,64 О

ATOM 3973 OW WAT W 2 -7,515 -55,973 40,942 1,00 34,99 О

ATOM 3974 OW WAT W 3 -16,190 -32,676 18,735 1,00 49,40 О

ATOM 3975 OW WAT W 4 -17,557 -57,264 27,490 1,00 49,31 О

ATOM 3976 OW WAT W 5 -6,453 -52,025 23,346 1,00 34,24 О

ATOM 3977 OW WAT W 6 -4,793 -51,902 29,479 1,00 34,78 О

ATOM 3978 OW WAT W 7 1,021 -54,897 36,399 1,00 30,59 О

ATOM 3979 OW WAT W 8 -22,290 -23,802 30,481 1,00 54,43 О

ATOM 3980 OW WAT W 9 -29,894 19,889 12,291 1,00 45,45 О

ATOM 3981 OW WAT W 10 -4,843 -65,658 37,110 1,00 52,73О

ATOM 3982 OW WAT W 11 -13,185 -6,989 13,786 1,00 52,53О

ATOM 3983 OW WAT W 12 -29,240 0,950 5,923 1,00 42,90 О ATOM 3984 OW WAT W 13 -7,340 -61,094 23,749 1,00 48,50О

ATOM 3985 OW WAT W 14 -43,809 -9,689 23,593 1,00 40,85О

ATOM 3986 OW WAT W 15 -36,983 6,868 25,062 1,00 43,15 О

- 199 043052

ATOM 3987 OW WAT W 16 -19,890 -39,199 26,687 1,00 59,47 О

ATOM 3988 OW WAT W 17 -47,034 -12,817 30,547 1,00 68,03 О

ATOM 3989 OW WAT W 18 -8,001 1,396 20,051 1,00 52,96 О

ATOM 3990 OW WAT W 19 -38,870 4,456 24,555 1,00 38,93 О

ATOM 3991 OW WAT W 20 -22,038 -2,265 17,233 1,00 64,74 О

ATOM 3992 OW WAT W 21 -4,829 -23,889 19,435 1,00 55,04 О

ATOM 3993 OW WAT W 22 -13,553 -58,794 35,421 1,00 47,74 О

ATOM 3994 OW WAT W 23 3,472 -56,247 37,587 1,00 37,92 О

ATOM 3995 OW WAT W 24 -9,774 -61,094 20,609 1,00 55,83 О

ATOM 3996 OW WAT W 25 -1,424 -58,706 31,053 1,00 34,00 О

ATOM 3997 OW WAT W 26 -14,822 -20,200 29,926 1,00 51,09 О

ATOM 3998 OW WAT W 27 -48,117 -0,157 15,298 1,00 50,50 О

ATOM 3999 OW WAT W 28 -18,464 -54,748 39,058 1,00 49,62 О

ATOM 4000 OW WAT W 29 -16,944 14,679 26,129 1,00 61,00 О

ATOM 4001 OW WAT W 30 -38,364 16,745 35,129 1,00 41,91 О

ATOM 4002 OW WAT W 31 -15,959 -35,971 25,563 1,00 59,27 О

ATOM 4003 OW WAT W 32 -12,962 -32,423 10,242 1,00 47,37 О

ATOM 4004 OW WAT W 33 -17,151 -34,677 22,424 1,00 41,49 О

ATOM 4005 OW WAT W 34 -39,535 2,389 -1,048 1,00 52,38 О

ATOM 4006 OW WAT W 35 -16,188 -53,762 40,168 1,00 36,04 О

ATOM 4007 OW WAT W 36 -15,801 -27,934 32,197 1,00 51,21 О

ATOM 4008 OW WAT W 37 -42,619 12,844 4,552 1,00 48,29 О

ATOM 4009 OW WAT W 38 -40,075 -7,299 29,641 1,00 45,60 О

ATOM 4010 OW WAT W 39 -25,307 -43,940 25,007 1,00 46,30 О

ATOM 4011 OW WAT W 40 -13,473 -59,058 32,594 1,00 39,53 О

ATOM 4012 OW WAT W 41 -13,787 -45,903 30,958 1,00 41,44 О

ATOM 4013 OW WAT W 42 -1,167 -62,434 35,598 1,00 45,52 О

ATOM 4014 OW WAT W 43 -8,824 13,349 11,279 1,00 60,80 О

ATOM 4015 OW WAT W 44 -9,014 -54,295 21,103 1,00 48,13 О

ATOM 4016 OW WAT W 45 -33,709 -17,937 9,821 1,00 47,87 О

ATOM 4017 OW WAT W 46 -42,571 23,661 29,793 1,00 53,44 О

ATOM 4018 OW WAT W 47 -23,013 -36,129 28,963 1,00 57,82О

ATOM 4019 OW WAT W 48 -39,976 -30,578 24,711 1,00 49,01О

ATOM 4020 OW WAT W 49 -12,230 -37,480 14,745 1,00 52,37О

ATOM 4021 OW WAT W 50 -40,880 -7,265 1,223 1,00 46,91 О

ATOM 4022 OW WAT W 51 -36,217 -8,573 26,196 1,00 45,73 О

- 200 043052

ATOM

4023

OW

WAT

-27,369

-42,522 26,037 1,00 50,82 О

ATOM

4024

OW

WAT

-30,085

-1,525 26, 270 1, 00 46, 62 О

ATOM

4025

OW

WAT

-21,459

-42,917 23,254 1,00 56,77 О

ATOM

4026

OW

WAT

-48,128

-9,341 16,581 1,00 52,04 О

ATOM

4027

OW

WAT

-41,161

2,175 3,473 1,00 53,80 О

ATOM

4028

OW

WAT

-32,959

-33,970

6,634 1,00 57,70 О

ATOM

4029

OW

WAT

-22,679

-27,983

34,019 1,00 57,71 О

ATOM

4030

OW

WAT

-35,865

-35,113

26,946 1,00 52,15 О

ATOM

4031

OW

WAT

-38,088

17,218

7,521 1,00 43,82 О

ATOM

4032

OW

WAT

-17,695

-4,736

10,101 1,00 59,45 О

ATOM

4033

OW

WAT

-29,006

23,048

5, 525 1,00 54,53 О

ATOM

4034

OW

WAT

-2,632 -61,249

33,270 1,00 49,17 О

ATOM

4035

OW

WAT

-30,677 9,217 -4,428 1,00 46,60 О

ATOM

4036

OW

WAT

-2,089 -24,886 12,106 1,00 63,36 О

ATOM

4037

OW

WAT

-46,157

-15,581

24,252

1, 00

46,20

ATOM

4038

OW

WAT

-40,525

-32,892

20,549

1,00

55, 06

ATOM

4039

OW

WAT

-41,514

-13,927

14,806

1,00

62,38

ATOM

4040

OW

WAT

-22,302

-40,343

25,447

1,00

53, 17

ATOM

4041

OW

WAT

-22,643

-30,586

32,221

1,00

47,03

ATOM

4042

OW

WAT

-41,750

-11,218

15,132

1,00

42,49

ATOM

4043

OW

WAT

-16,498

-38,238

11,084

1,00

59, 10

ATOM

4044

OW

WAT

-32,508

6,114 19,320 1,00 50,45 О

ATOM

4045

OW

WAT

-47,798

-8,546 21,176 1,00 54,03 О

ATOM

4046

OW

WAT

5,501 -62,333 33,875 1,00 40,22 О

ATOM

4047

OW

WAT

-0,630 -56,746 51,323 1,00 58,43 О

ATOM

4048

OW

WAT

-14,253

-16,896 30,328 1,00 64,63 О

ATOM

4049

OW

WAT

-16,129

-44,953 29,427 1,00 44,23 О

ATOM

4050

OW

WAT

-44,049

14,182 28,247 1,00 40,45 О

ATOM

4051

OW

WAT

-30,357

-0,086 -3,432 1,00 43,64 О

ATOM

4052

OW

WAT

-17,609

-55,150 36,210 1,00 47,81

ATOM

4053

OW

WAT

-5,620 -0,309 7,737 1,00 64,98 О

ATOM

4054

OW

WAT

-35, 333 -36, 792 24, 625 1, 00 55, 50

ATOM

4055

OW

WAT

-3,864 -28,110 9,290 1,00 58,03 О

ATOM

4056

OW

WAT

-22,868 -47,176 23,771 1,00 57,37

ATOM

4057

OW

WAT

0,090 -50,852 36,108 1,00 45,20 О

ATOM

4058

OW

WAT

-8,183 -1,151 21,020 1,00 62,51 О

- 201 043052

ATOM 4059 OW WAT W 88 -33,018 -7,725 22,304 1,00 45,47 О

ATOM 4060 OW WAT W 89 -31,655 -1,393 7,537 1,00 42,27 О

ATOM 4061 OW WAT W 90 -32,662 17,636 2,924 1,00 46,29 О

ATOM 4062 OW WAT W 91 -17,465 -38,109 26,276 1,00 56,12 О

ATOM 4063 OW WAT W 92 -6,887 -60,668 45,840 1,00 56,69 О

ATOM 4064 OW WAT W 93 -39,318 -11,867 32,764 1,00 53,22 О

ATOM 4065 OW WAT W 94 -8,364 -47,344 15,912 1,00 52,70 О

ATOM 4066 OW WAT W 95 -13,110 -2,409 20,213 1,00 59,42 О

ATOM 4067 OW WAT W 96 -30,405 -3,733 15,635 1,00 43,90 О

ATOM 4068 OW WAT W 97 2,111 -65,266 36,755 1,00 50,54 О

ATOM 4069 OW WAT W 98 -12,718 -10,231 25,834 1,00 56,71О

ATOM 4070 OW WAT W 99 -20,180 -52,382 20,505 1,00 56,19О

ATOM 4071 OW WAT W 100 -13,218 -54,275 21,382 1,00 65,09 О

ATOM 4072 OW WAT W 101 -0,687 -48,919 38,318 1,00 48,28О

ATOM 4073 OW WAT W 102 -3,838 -62,253 43,700 1,00 49,16О

ATOM 4074 OW WAT W 103 -39,718 4,768 29,789 1,00 49,94 О

ATOM 4075 OW WAT W 104 -31,944 -3,089 12,979 1,00 46,48 О

ATOM 4076 OW WAT W 105 -33,765 -18,248 12,740 1,00 32,36 О

ATOM 4077 OW WAT W 106 -37,214 -0,117 4,446 1,00 29,24 О

ATOM 4078 OW WAT W 107 -19,351 -15,874 11,194 1,00 36,71 О

ATOM 4079 OW WAT W 108 -21,775 -21,417 10,614 1,00 39,48 О

ATOM 4080 OW WAT W 109 -26,619 -35,038 14,715 1,00 32,72 О

ATOM 4081 OW WAT W 110 -35,620 13,559 15,135 1,00 36,10 О

ATOM 4082 OW WAT W 111 -36,996 -10,846 16,382 1,00 44,68 О

ATOM 4083 OW WAT W 112 -36,912 -6,950 24,030 1,00 33,68 О

ATOM 4084 OW WAT W 113 -33,516 14,817 16,865 1,00 35,25 О

ATOM 4085 OW WAT W 114 -29,783 -1,424 12,325 1,00 39,43 О

ATOM 4086 OW WAT W 115 -18,166 -16,800 25,381 1,00 43,01 О

ATOM 4087 OW WAT W 116 -24,077 10,140 -0,068 1,00 45,52 О

ATOM 4088 OW WAT W 117 -24,361 -0,261 19,500 1,00 42,65 О

ATOM 4089 OW WAT W 118 -37,730 14,775 30,946 1,00 36,06 О

ATOM 4090 OW WAT W 119 -20,173 -22,700 28,237 1,00 47,60 О

ATOM 4091 OW WAT W 120 -24,540 20,221 13,439 1,00 39,18 О

ATOM 4092 OW WAT W 121 -17,942 4,938 9,763 1,00 42,28 О

ATOM 4093 OW WAT W 122 -38,874 -5,521 9,526 1,00 31,42 О

ATOM 4094 OW WAT W 123 -16,780 -29,944 20,969 1,00 38,26 О

- 202 043052

ATOM 4095 OW WAT W 124 -24,266 -15,743 26,088 1,00 44,60 О

ATOM 4096 OW WAT W 125 -29,109 5,403 16,817 1,00 36,92 О

ATOM 4097 OW WAT W 126 -26,521 -36,987 26,430 1,00 48,99 О

ATOM 4098 OW WAT W 127 -33,883 -9,961 20,793 1,00 33,74 О

ATOM 4099 OW WAT W 128 -32,376 -31,327 21,059 1,00 37,71 О

ATOM 4100 OW WAT W 129 -38,219 -21,030 16,400 1,00 32,53 О

ATOM 4101 OW WAT W 130 -38,266 7,048 -1,804 1,00 26,87 О

ATOM 4102 OW WAT W 131 -40,459 8,361 23,021 1,00 36,24 О

ATOM 4103 OW WAT W 132 -21,073 -36,674 18,501 1,00 36,84 О

ATOM 4104 OW WAT W 133 -36,873 -8,310 19,156 1,00 44,97 О

ATOM 4105 OW WAT W 134 -31,678 -18,920 28,463 1,00 36,27 О

ATOM 4106 OW WAT W 135 -21,806 -18,434 9,776 1,00 43,63 О

ATOM 4107 OW WAT W 136 -46,153 -9,807 14,720 1,00 51,20 О

ATOM 4108 OW WAT W 137 -24,475 -44,424 16,285 1,00 47,32 О

ATOM 4109 OW WAT W 138 -37,829 -30,269 23,129 1,00 40,12 О

ATOM 4110 OW WAT W 139 -29,743 3,061 18,200 1,00 39,38 О

ATOM 4111 OW WAT W 140 -26,353 -16,935 10,862 1,00 38,95 О

ATOM 4112 OW WAT W 141 -27,059 12,054 29,756 1,00 51,89 О

ATOM 4113 OW WAT W 142 -25,585 6,342 -3,334 1,00 43,68 О

ATOM 4114 OW WAT W 143 -29,744 -2,526 23,600 1,00 38,01 О

ATOM 4115 OW WAT W 144 -28,349 6,767 20,043 1,00 31,75 О

ATOM 4116 OW WAT W 145 -10,172 -29,271 24,638 1,00 50,15 О

ATOM 4117 OW WAT W 146 -21,497 -32,672 22,980 1,00 43,68 О

ATOM 4118 OW WAT W 147 -45,840 -1,515 22,524 1,00 38,43 О

ATOM 4119 OW WAT W 148 -30,947 7,489 17,609 1,00 35,91 О

ATOM 4120 OW WAT W 149 -35,715 16,046 1,011 1,00 43,17 О

ATOM 4121 OW WAT W 150 -34,097 6,759 21,605 1,00 32,44 О

ATOM 4122 OW WAT W 151 -31,153 -29,424 6,931 1,00 52,76 О

ATOM 4123 OW WAT W 152 -17,488 -27,746 8,560 1,00 51,05 О

ATOM 4124 OW WAT W 153 -13,184 -8,413 8,214 1,00 52,08 О

ATOM 4125 OW WAT W 154 -9,649 -15,709 6,299 1,00 50,09 О

ATOM 4126 OW WAT W 155 -30,314 4,934 20,366 1,00 39,36 О

ATOM 4127 OW WAT W 156 -32,747 18,271 0,227 1,00 42,14 О

ATOM 4128 OW WAT W 157 -24,802 -10,885 20,391 1,00 46,19О

ATOM 4129 OW WAT W 158 -18,677 -24,593 10,969 1,00 35,79О

ATOM 4130 OW WAT W 159 -25,286 -39,676 26,160 1,00 44,70О

- 203 043052

ATOM 4131 OW WAT W 160 -25,878 23,640 27,286 1,00 51,31 О

ATOM 4132 OW WAT W 161 -40,111 -30,248 12,723 1,00 46,12 О

ATOM 4133 OW WAT W 162 -48,933 11,765 22,678 1,00 39,67 О

ATOM 4134 OW WAT W 163 -43,012 -16,049 18,180 1,00 46,36 О

ATOM 4135 OW WAT W 164 -24,923 -25,595 8,909 1,00 38,70 О

ATOM 4136 OW WAT W 165 -35,301 -33,872 29,546 1,00 51,23 О

ATOM 4137 OW WAT W 166 -23,108 -1,358 11,523 1,00 49,25 О

ATOM 4138 OW WAT W 167 -21,256 20,978 -1,257 1,00 50,39 О

ATOM 4139 OW WAT W 168 -20,045 -30,634 4,149 1,00 58,57 О

ATOM 4140 OW WAT W 169 -18,550 -10,595 15,754 1,00 61,81 О

ATOM 4141 OW WAT W 170 -18,747 12,952 7,864 1,00 42,13 О

ATOM 4142 OW WAT W 171 -24,751 11,499 -2,308 1,00 45,78 О

ATOM 4143 OW WAT W 172 -22,547 -39,523 8,065 1,00 46,22 О

ATOM 4144 OW WAT W 173 -30,806 2,957 0,490 1,00 40,34 О

ATOM 4145 OW WAT W 174 -15,757 -32,291 9,949 1,00 47,94 О

ATOM 4146 OW WAT W 175 -44,573 16,854 28,331 1,00 52,33 О

ATOM 4147 OW WAT W 176 -7,977 -15,083 21,992 1,00 53,44 О

ATOM 4148 OW WAT W 177 -25,074 9,003 -3,979 1,00 50,70 О

ATOM 4149 OW WAT W 178 -10,590 0,899 18,154 1,00 47,60 О

ATOM 4150 OW WAT W 179 -7,736 -52,251 45,643 1,00 45,32 О

ATOM 4151 OW WAT W 180 -44,390 -9,173 18,853 1,00 43,31 О

ATOM 4152 OW WAT W 181 -36,893 -15,564 11,325 1,00 40,98 О

ATOM 4153 OW WAT W 182 -18,668 -1,614 16,801 1,00 53,28 О

ATOM 4154 OW WAT W 183 -36,728 -37,278 22,169 1,00 51,45 О

ATOM 4155 OW WAT W 184 -4,056 -59,087 45,469 1,00 47,73 О

ATOM 4156 OW WAT W 185 -34,977 17,331 12,959 1,00 50,25 О

ATOM 4157 OW WAT W 186 -15,254 -15,990 6,954 1,00 53,33 О

ATOM 4158 OW WAT W 187 -25,008 -19,043 9,149 1,00 50,15 О

ATOM 4159 OW WAT W 188 -12,479 -14,878 6,876 1,00 58,96 О

ATOM 4160 OW WAT W 189 -21,761 -15,537 27,605 1,00 53,73 О

ATOM 4161 OW WAT W 190 -13,699 -32,590 19,546 1,00 46,79 О

ATOM 4162 OW WAT W 191 -1,653 -67,263 38,821 1,00 49,26 О

ATOM 4163 OW WAT W 192 -16,337 -34,412 32,445 1,00 55,13 О

ATOM 4164 OW WAT W 193 -40,988 10,137 21,044 1,00 38,32 О

ATOM 4165 OW WAT W 194 -8,330 -30,065 33,366 1,00 51,30 О

ATOM 4166 OW WAT W 195 -35,850 -26,313 11,313 1,00 45,94 О

- 204 043052

АТОМ	4167	OW	WAT	W	196
АТОМ	4168	OW	WAT	W	197
АТОМ	4169	OW	WAT	W	198
АТОМ	4170	OW	WAT	W	199
АТОМ	4171	OW	WAT	W	200
АТОМ	4172	OW	WAT	W	201
АТОМ	4173	OW	WAT	W	202
АТОМ	4174	OW	WAT	W	203
АТОМ	4175	OW	WAT	W	204
АТОМ	4176	OW	WAT	W	205
АТОМ	4177	OW	WAT	W	206
АТОМ	4178	OW	WAT	W	207
АТОМ	4179	OW	WAT	W	208
АТОМ	4180	OW	WAT	W	209
АТОМ	4181	OW	WAT	W	210
АТОМ	4182	OW	WAT	W	211
АТОМ	4183	OW	WAT	w	212
АТОМ	4184	OW	WAT	w	213
АТОМ	4185	OW	WAT	w	214
АТОМ	4186	OW	WAT	w	215
АТОМ	4187	OW	WAT	w	216
АТОМ	4188	OW	WAT	w	217
АТОМ	4189	OW	WAT	w	218
АТОМ	4190	OW	WAT	w	219
АТОМ	4191	OW	WAT	w	220
АТОМ	4192	OW	WAT	w	221
АТОМ	4193	OW	WAT	w	222
АТОМ	4194	OW	WAT	w	223
АТОМ	4195	OW	WAT	w	224
АТОМ	4196	OW	WAT	w	225
АТОМ	4197	OW	WAT	w	226
АТОМ	4198	OW	WAT	w	227
АТОМ	4199	OW	WAT	w	228
АТОМ	4200	OW	WAT	w	229
АТОМ	4201	OW	WAT	w	230
АТОМ	4202	OW	WAT	w	231

-44,254 -21,966 29,984 1,00 48,92 О

-14,556 -52,288 19,703 1,00 47,54 О

-45,543 6,721 4,393 1,00 56,24 О

- 1,510 -52,502 46,012 1,00 49,88 О

- 37,221 -8,769 3,755 1,00 48,71 О

- 15, 008 -9, 692 6, 521 1, 00 54,03 О

-9,154 -10,150 2,409 1,00 64,21 О

-39,318 -31,340 8,710 1,00 57,51 О

-45,582 -10,139 21,126 1,00 51,87 О

-44,026 -10,354 16,431 1,00 43,73 О

-36, 210 7, 117 -5, 687 1, 00 45, 43 О

-37,799 14,409 16,431 1,00 36,95 О

-34,076 -3,333 14,608 1,00 39,15 О

-21,963 20,042 12,700 1,00 49,97 О

-38,664 -5,379 25,427 1,00 34,19 О

-27,013 -1,595 20,048 1,00 59,63 О

-34,179 -15,986 14,105 1,00 32,00 О

-24,410 -21,562 10,160 1,00 36,16 О

-39,138 -10,516 14,813 1,00 47,91 О

-38,147 -4,980 6, 998 1, 00 40,50 О

-21,263 -24,053 10,299 1,00 37,28 О

-18,371 5,558 23,186 1,00 61,33 О

-36,916 -12,555 18,483 1,00 34,96 О

-38,067 -30,490 11,033 1,00 53,39 О

-27,273 -1,669 22,879 1,00 60,24 О

-11,236 -0,446 20,423 1,00 57,47 О

-38,966 -27,165 28,768 1,00 48,50 О

-27,052 12,746 -2,875 1,00 54,30 О

-30,772 -4,221 20,144 1,00 59,60 О

-35,463 18,522 -0,106 1,00 60,87 О

- 15, 335 -26, 347 9, 375 1, 00 44, 12 О

2,572 -63,931 34,456 1,00 55,50 О

- 16, 786 -3, 932 14, 055 1, 00 56, 34 О

- 9,872 -43,050 35,117 1,00 60,32 О

- 37,011 -39,791 17,769 1,00 49,70 О

-22,797 24,445 17,168 1,00 56,75 О

- 205 043052

ATOM 4203 OW WAT W 232

0,236 -53,672 47,725 1,00 56,69 О

ATOM 4204 OW WAT W 233 -26,383 1,765 2,046 1,00 49,47 О

ATOM 4205 OW WAT W 234 -37,667 -27,913 10,243 1,00 48,69О

ATOM 4206 OW WAT W 235 -20,876 9,097 5,925 1,00 38,12 О

ATOM 4207 OW WAT W 236 -15,798 -51,507 16,541 1,00 52,77О

ATOM 4208 OW WAT W 237 -32,462 -42,802 17,632 1,00 63,08О

ATOM 4209 OW WAT W 238 -41,086 16,561 32,871 1,00 51,80 О

ATOM 4210 OW WAT W 239 -48,040 1,597 7,571 1,00 61,28 О

ATOM 4211 OW WAT W 240 -36,279

11,284 -3,308 1,00 51,42 О

ATOM

4212 OW WAT W 241 0,800 -54,597 50,511 1,00 56,31 О

4213 OW WAT W 242 -5,692 -65,042 32,265 1,00 50,05 О

4214 OW WAT W 243 -26,785 27,800 17,578 1,00 44,32 О

4215 OW WAT W 244 -32,984 -23,778 34,134 1,00 63,27 О

4216 OW WAT W 245 -4,702 -50,027 23,969 1,00 61,44 О

4217 OW WAT W 246 -20,411 -37,034 8,519 1,00 52,44О

4218 OW WAT W 247 -28,495 -35,410 8,773 1,00 54,57О

4219 OW WAT W 248 -29,060 14,857 34,292 1,00 62,48О

4220 OW WAT W 249 -45,852 -2,251 25,140 1,00 52,91О

4221 OW WAT W 250 -29,476 27,814 17,211 1,00 47,88О

4222 OW WAT W 251 -13,400 11,724 9,810 1,00 67,92 О

4223 OW WAT W 252 -24,572 12,847 29,078 1,00 55,98 О

ATOM 4224 OW WAT W 253 -33,478 -13,068 13,678 1,00 51,91 О

ATOM 4225 OW WAT W 254 -21,816 -47,789 18,087 1,00 56,15 О

ATOM 4226 OW WAT W 255 -24,270 -47,301 16,995 1,00 51,11 О

ATOM 4227 OW WAT W 256 -43,497 -1,869 26,469 1,00 43,86 О

ATOM 4228 OW WAT W 257 -29,905 -39,279 8,951 1,00 65,07 О

ATOM 4229 OW WAT W 258 -44,193 7,821 11,648 1,00 54,88 О

ATOM 4230 OW WAT W 259 -20,151 8,692 25,972 1,00 62,13 О

ATOM 4231 OW WAT W 260 -7,665 -55,864 29,627 1,00 32,10 О

ATOM 4232 OW WAT W 261 -5,906 -54,231 28,345 1,00 36,88 О

ATOM 4233 OW WAT W 262 4,919 -62,040 41,051 1,00 36,45 О

ATOM 4234 OW WAT W 263 -0,849 -56,077 31,823 1,00 33,23 О

ATOM 4235 OW WAT W 264 -19,126 2,342 10,361 1,00 47,44 О

ATOM 4236 OW WAT W 265 -20,601 -0,660 9,523 1,00 55,13 О

ATOM 4237 OW WAT W 266 -25,961 1,094 7,475 1,00 51,67 О

ATOM 4238 OW WAT W 267 -42,861 -22,137 19,876 1,00 43,74 О

- 206 043052

ATOM 4239 OW WAT W 268 -27,314 -12,468 20,423 1,00 42,25О

ATOM 4240 OW WAT W 269 -31,904 -11,852 21,052 1,00 36,97О

ATOM 4241 OW WAT W 270 -29,659 -11,156 19,733 1,00 42,01О

ATOM 4242 OW WAT W 271 -30,753 -11,559 16,905 1,00 44,60О

ATOM 4243 OW WAT W 272 -44,416 -3,925 6,661 1,00 56,55 О

ATOM 4244 OW WAT W 273 -23,508 1,254 8,908 1,00 38,10 О

ATOM 4245 OW WAT W 274 -30,753 -6,646 21,311 1,00 49,58 О

ATOM 4246 OW WAT W 275 -30,261 -7,376 17,204 1,00 53,52 О

ATOM 4247 OW WAT W 276 -32,174 -7,535 24,895 1,00 48,16 О

ATOM 4248 OW WAT W 277 -43,043 8,906 19,447 1,00 43,35 О

ATOM 4249 OW WAT W 278 -37,512 4,508 27,820 1,00 61,81 О

ATOM 4250 OW WAT W 279 -36,941 0,000 0,000 0,50 55,93 О

ATOM 4251 OW WAT W 280 -23,733 -24,004 33,240 1,00 62,39 О ATOM 4252 OW WAT W 281 -8,167 -30,315 8,553 1,00 68,84 О

ATOM 4253 OW WAT W 282 -28,958 1,148 1,356 1,00 55,08 О

ATOM 4254 OW WAT W 283 12,591 -61,771 32,569 1,00 46,20О

ATOM 4255 OW WAT W 284 -1,581 -49,613 41,371 1,00 58,06О

ATOM 4256 OW WAT W 285 -26,246 -48,282 18,626 1,00 59,66 О ATOM 4257 OW WAT W 286 2,540 -50,918 39,971 1,00 45,68 О ATOM 4258 OW WAT W 287 -3,856 -43,098 21,755 1,00 61,68О

ATOM 4259 OW WAT W 288 -36,642 23,118 18,736 1,00 62,84О

- 207 043052

Список последовательностей < 110> МЕРК ШАРП И ДОУМ КОРП.

Мерк Шарп и Доум Б.В.

< 120> АНТИ-СО27 АНТИТЕЛА <130> 23413 <140>

<141>

<150> 62,546,214 <151> 2017-08-16 <150> 62/399,837 <151> 2016-09-26 <160> 78 < 170> Patentin version 3.5 <210> 1 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <220>

< 221> ВАРИАНТ <222> (4)..(4) < 223> /замена=У или L или I или G или А или S или Т <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(5) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 1

Asn Туг Gly Met Asn . 5 <210> 2 <211> 17 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность

- 208 043052 <220>

<221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (3)..(6) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С < 400> 2

Тгр lie Хаа Хаа Хаа Хаа Gly Glu Pro Thr Туг Ala Glu Glu Phe Lys . 5 10 15

Gly <210> 3 <211> 7 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (5)..(5) < 223> Любая аминокислота, кроме С < 400> 3

Glu Gly Asp Ala Хаа Asp Туг 1. 5 < 210> 4 <211> 10 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

<221> ВАРИАНТ

- 209 043052 <222> (9)..(9) < 223> /замена=У или L или I или G или А или S или T <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(10) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 4

Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met His

1.5 10 <210> 5 <211> 7 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (1)..(2) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С < 400> 5

Хаа Хаа Ser Lys Leu Ala Ser . 5 <210> 6 <211> 9 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (3)..(3) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> МОД_ОСТ

- 210 043052 < 222> (4) .. (5) <223> Любая аминокислота, кроме М, С или Р <400> 6

Gin Gin Хаа Хаа Хаа Туг Pro Phe Thr 1. 5 <210> 7 <2Н> 116 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 7

Gin lie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 1. 5 1015

Thr Vai Lys He Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 7580

Leu Gin lie Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys

9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Ser Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 8 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность

- 211 043052 <220>

<221> источник <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 8

Gin lie Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala He Met Ser Ala Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Lys Vai Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Met Glu Ala Glu 65 70 7580

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 9 <2H> 116 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (20)..(20) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (34)..(34) < 223> /замена=Н или L или I или G или А или S или Т

- 212 043052 <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (38)..(38) <223> /замена=Н <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (48) .. (48)

<223>	/замена=У или L	или I
<220>
<221>	мод OCT
<222>	(50)..(50)
<223>	Любая аминокислота,	кроме М или С
<220>
<221>	мод OCT
<222>	(52) . . (55)
<223>	Любая аминокислота,	кроме М или С
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(73)..(73)
<223>	/замена=Е
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(76) . . (76)
<223>	/замена=А
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(77)..(77)
<223>	/замена=Т
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(81)..(81)
<223>	/замена=Т или V	или I
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(83)..(83)
<223>	/замена=1
<220>
<221>	ВАРИАНТ
<222>	(88)..(88)
<223>	/замена=Ы
<220>
<221>	МОД_ОСТ
<222>	(101)..(102)
<223>	Любая аминокислота,	кроме М или С

<220>

<221> МОД—OCT

- 213 043052 <222> (103) . . (103) <223> Любая аминокислота, кроме С <220>

<221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК <222> (1)..(116) <223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 9

Glu lie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Xaa He Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Xaa Xaa Xaa Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 10 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 10

Glu Tie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

- 214 043052

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp He Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 11 <2H> 116 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 11

Glu lie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 1. 5 1015

Ser Vai Lys He Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

- 215 043052

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 7580

Leu Glu lie Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 12 <2H> 116 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 12

Glu lie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp He Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Asn Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

- 216 043052

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 13 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 13

Glu Не Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 14 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник

- 217 043052 <223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (3)..(3) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (13)..(13) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (15)..(15) < 223> /замена=У <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (17) . . (17) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (19)..(19) < 223> /замена=У <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (21)..(21) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (22)..(22) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (32)..(32) < 223> /замена=У или L или I или G или А или S или Т <220>

< 221> ВАРИАНТ

- 218 043052 < 222> (41)..(41) < 223> /замена=К <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (46)..(46) < 223> Любая аминокислота, кроме M или С <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (49)..(50) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (71)..(71) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (77)..(77) < 223> /замена=М или V или I <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (78)..(78) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (82)..(82) < 223> /замена=Н или L или I или Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (84)..(84) < 223> /замена=Т <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (90)..(90) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (91) .. (92) < 223> Любая аминокислота, кроме М, С или Р <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(106)

- 219 043052 <223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 14

Glu lie Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Xaa He Tyr 35 4045

Xaa Xaa Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Xaa Xaa Xaa Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 15 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 15

Glu Не Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

- 220 043052

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr He Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 16 <2H> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 16

Glu lie Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105

- 221 043052 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид < 400> 17

Glu Не Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Ala Ser Pro Gly . 5 1015

Glu Arg Vai Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Met Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 18 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид < 400> 18

Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Vai Gly

1. 5 10 15

Asp Arg Vai Thr lie

Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met

- 222 043052

2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp He Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 19 <2H> 240 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens

<400 Thr 1. 5

> 19 Pro

1 Ala

Pro

Lys

Ser

Cys 10

Pro

Glu

Arg

His

Tyr 15

Trp

Ala

Gin

Gly

Lys

Leu

Cys

Cys 20

Gin

Met

Cys

Glu

Pro 25

Gly

Thr

Phe

Leu

Vai 30

Lys

Asp

Cys

Asp

Gin 35

His

Arg

Lys

Ala

Ala 40

Gin

Cys

Asp

Pro

Cys 45

lie

Pro

Gly

Vai

Ser 50

Phe

Ser

Pro

Asp

His 55

His

Thr

Arg

Pro

His 60

Cys

Glu

Ser

Cys

Arg 65

His

Cys

Asn

Ser

Gly 70

Leu

Vai

Arg

Asn 75

Cys

Thr

lie

Thr

Ala 80

Asn

Ala

Glu

Cys

Ala 85

Cys

Arg

Asn

Gly

Trp 90

Gin

Cys

Arg

Asp

Lys 95

Glu

Cys

Thr

Glu

Cys 100

Asp

Pro

Leu

Pro

Asn 105

Pro

Ser

Leu

Thr

Ala 110

Arg

Ser

- 223 043052

Ser Gin Ala Leu Ser Pro His Pro Gin Pro Thr His Leu Pro Tyr Vai

115 120125

Ser Glu Met Leu Glu Ala Arg Thr Ala Gly His Met Gin Thr Leu Ala

130 135140

Asp Phe Arg Gin Leu Pro Ala Arg Thr Leu Ser Thr His Trp Pro Pro

145 150 155160

Gin Arg Ser Leu Cys Ser Ser Asp Phe He Arg Tie Leu Vai lie Phe

165 170175

Ser Gly Met Phe Leu Vai Phe Thr Leu Ala Gly Ala Leu Phe Leu His

180 185190

Gin Arg Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser Pro Vai Glu Pro

195 200205

Ala Glu Pro Cys Arg Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu Glu Gly Ser Thr

210 215220 lie Pro lie Gin Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro Ala Cys Ser Pro

225 230 235240 <210> 20 <2H> 240 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens < 400> 20

Thr Pro Ala Pro Lys Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr Trp Ala Gin Gly

1. 5 1015

Lys Leu Cys Cys Gin Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe Leu Vai Lys Asp 20 2530

Cys Asp Gin His Arg Lys Thr Ala Gin Cys Asp Pro Cys lie Pro Gly 35 4045

Vai Ser Phe Ser Pro Asp His His Thr Arg Pro His Cys Glu Ser Cys 50 5560

Arg His Cys Asn Ser Gly Leu Leu Vai Arg Asn Cys Thr lie Thr Ala 65 70 7580

- 224 043052

Asn

Ala

Glu

Cys

Ala 85

Cys

Arg

Asn

Gly

Trp 90

Gin

Cys

Arg

Asp

Lys 95

Glu

Cys

Thr

Glu

Cys 100

Asp

Pro

Leu

Pro

Asn 105

Pro

Ser

Leu

Thr

Ala 110

Arg

Ser

Gin

Ala 115

Leu

Ser

Pro

His

Pro 120

Gin

Pro

Thr

His

Leu 125

Pro

Tyr

Vai

Ser

Glu 130

Met

Leu

Glu

Ala

Arg 135

Thr

Ala

Gly

His

Met 140

Gin

Thr

Leu

Ala

Asp 145

Phe

Arg

Gin

Leu

Pro 150

Ala

Arg

Thr

Leu

Ser 155

Thr

His

Trp

Pro

Pro 160

Gin

Arg

Ser

Leu

Cys 165

Ser

Asp

Phe

He 170

Arg

He

Leu

Vai

He 175

Phe

Ser

Gly

Met

Phe 180

Leu

Vai

Phe

Thr

Leu 185

Ala

Gly

Ala

Leu

Phe 190

Leu

His

Gin

Arg

Arg 195

Lys

Tyr

Arg

Ser

Asn 200

Lys

Gly

Glu

Ser

Pro 205

Vai

Glu

Pro

Ala

Glu 210

Pro

Cys

Arg

Tyr

Ser 215

Cys

Pro

Arg

Glu

Glu 220

Glu

Gly

Ser

Thr

lie 225

Pro

lie

Gin

Glu

Asp 230

Tyr

Arg

Lys

Pro

Glu 235

Pro

Ala

Cys

Ser

Pro 240

<210> 21 <2H> 240 <212> БЕЛОК <213> Macaca mulatta <400> 21

Thr Pro Ala Pro Lys Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr Trp Ala Gin Gly

1. 5 1015

Lys Leu Cys Cys Gin Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe Leu Vai Lys Asp 20 2530

Cys Asp Gin His Arg Lys Ala Ala Gin Cys His Pro Cys lie Pro Gly 35 4045

- 225 043052

Val Ser Phe Ser Pro Asp His His Thr Arg Pro His Cys Glu Ser Cys 50 5560

Arg His Cys Asn Ser Gly Leu Leu He Arg Asn Cys Thr lie Thr Ala 65 70 7580

Asn Ala Val Cys Ala Cys Arg Asn Gly Trp Gin Cys Arg Asp Lys Glu

9095

Cys Thr Glu Cys Asp Pro Pro Pro Asn Pro Ser Leu Thr Thr Trp Pro

100 105110

Ser Gin Ala Leu Gly Pro His Pro Gin Pro Thr His Leu Pro Tyr Val

115 120125

Asn Glu Met Leu Glu Ala Arg Thr Ala Gly His Met Gin Thr Leu Ala

130 135140

Asp Phe Arg His Leu Pro Ala Arg Thr Leu Ser Thr His Trp Pro Pro

145 150 155160

Gin Arg Ser Leu Cys Ser Ser Asp Phe lie Arg lie Leu Val lie Phe

165 170175

Ser Gly Met Phe Leu Val Phe Thr Leu Ala Gly Thr Leu Phe Leu His

180 185190

Gin Gin Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser Pro Met Glu Pro

195 200205

Ala Glu Pro Cys Pro Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu Glu Gly Ser Thr

210 215220 lie Pro lie Gin Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro Ala Ser Ser Pro

225 230 235240 <210> 22 <2H> 443 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник

- 226 043052 <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 22

Glu Vai Arg Leu Gin Gin Ser Gly Ala Asp Leu Vai Lys Pro Gly Ala 1. 5 1015

Ser Vai Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe He lie Lys Ala Thr 20 2530

Tyr Met His Trp Vai Arg Gin Arg Pro Glu Gin Gly Leu Glu Trp lie 35 4045

Gly Arg lie Asp Pro Ala Asn Gly Glu Thr Lys Tyr Asp Pro Lys Phe 50 5560

Gin Vai Lys Ala Thr lie Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Leu Gin Leu Asn Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Tyr Ala Trp Tyr Phe Asp Vai Trp Gly Ala Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala

115 120125

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

165 170175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu 180 185190

Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Vai Asp His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200205

- 227 043052

Lys Vai Asp Lys Arg Vai Glu Ser

210 215

Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro 220

Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly 225 230

Gly Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro

235 240

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 lie Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr

250 255

Cys Vai Vai Vai Asp Vai Ser Gin

260

Glu Asp Pro Glu Vai Gin Phe Asn 265 270

Trp Tyr Vai Asp Gly Vai Glu Vai

275 280

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

285

Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Tyr

290 295

Arg Vai Vai Ser Vai Leu Thr Vai 300

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 305 310

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Vai Ser

315 320

Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser He 325

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys

330 335

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Vai 340

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu 345 350

Glu Met Thr Lys Asn Gin Vai Ser

355 360

Leu Thr Cys Leu Vai Lys Gly Phe 365

Tyr Pro Ser Asp lie Ala Vai Glu

370 375

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 380

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390

Vai Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

395 400

Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Vai

405

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly

410 415

Asn Vai Phe Ser Cys Ser Vai Met 420

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 425 430

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser

Leu Gly Lys

- 228 043052

435 440 <210> 23 <2H> 213 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 23

Asp Не Gin Met Thr Gin Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Vai Gly

1. 5 1015

Asp Thr Vai Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn lie Tyr Ser Phe 20 2530

Leu Ala Trp Tyr His Gin Lys Gin Gly Arg Ser Pro Gin Leu Leu Vai 35 4045

Tyr His Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Vai Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 5560

Ser Gly Ser Gly Thr Gin Phe Ser Leu Lys lie Asn Ser Leu Gin Ala 65 70 7580

Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gin His Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu 85 9095

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Vai Lys Arg Thr Vai Ala Ala

100 105110

Pro Ser Vai Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly

115 120125

Thr Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135140

Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin

145 150 155160

Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170175

- 229 043052

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr Ala 180 185 190

Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 24 <2H> 443 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 24

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe He He Lys Ala Thr 20 2530

Tyr Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Arg Leu Glu Trp Met 35 4045

Gly Arg lie Asp Pro Ala Asn Gly Glu Thr Lys Tyr Asp Pro Lys Phe 50 5560

Gin Vai Arg Vai Thr lie Thr Ala Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Tyr Ala Trp Tyr Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala

115 120125

- 230 043052

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu

130 135

Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro

145 150

Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr 165

Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai 180

Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu

185 190

Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn

195 200

Vai Asp His Lys Pro Ser Asn Thr

205

Lys Vai Asp Lys Arg Vai Glu Ser

210 215

Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro 220

Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly 225 230

Gly Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro

235 240

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 lie Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr

250 255

Cys Vai Vai Vai Asp Vai Ser Gin

260

Glu Asp Pro Glu Vai Gin Phe Asn

265 270

Trp Tyr Vai Asp Gly Vai Glu Vai

275 280

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 285

Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Tyr

290 295

Arg Vai Vai Ser Vai Leu Thr Vai 300

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 305 310

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Vai Ser

315 320

Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser He 325

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys

330 335

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Vai 340

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu 345 350

- 231 043052

Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe

355 360365

Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 370 375380

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

385 390 395400

Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly

405 410415

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 420 425430

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435440 <210> 25 <2H> 214 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 25

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1. 5 1015

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn lie Tyr Ser Phe 20 2530

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 4045

Tyr His Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Thr Ser Arg Phe Ser Gly 50 5560

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 7580

Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin His Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu

- 232 043052

9095

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Arg Leu Glu He Lys Arg Thr Vai Ala Ala

100 105110

Pro Ser Vai Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly

115 120125

Thr Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135140

Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin

145 150 155160

Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr 180 185190

Ala Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser

195 200205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 26 <211> 19 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 26

Met Glu Trp Ser Trp Vai Phe Leu Phe Phe Leu Ser Vai Thr Thr Gly . 5 10 15

Vai His Ser <210> 27 <2H> 20

- 233 043052 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид < 400> 27

Met Ser Vai Pro Thr Gin Vai Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Thr . 5 10 15

Asp Ala Arg Cys 20 <210> 28 <211> 327 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 28

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai

1.5 10

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

Leu Gly Cys Leu Vai Lys Asp Tyr 25 30

Phe Pro Glu Pro Vai Thr Vai Ser

40

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 45

Gly Vai His Thr Phe Pro Ala Vai 50 55

Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60

Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai Pro 65 70

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

80

Tyr Thr Cys Asn Vai Asp His Lys 85

Pro Ser Asn Thr Lys Vai Asp Lys 90 95

Arg Vai Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 100

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 105 110

- 234 043052

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120125

Asp Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr Cys Vai Vai Vai

130 135140

Asp Vai Ser Gin Glu Asp Pro Glu Vai Gin Phe Asn Trp Tyr Vai Asp

145 150 155160

Gly Vai Glu Vai His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe

165 170175

Asn Ser Thr Tyr Arg Vai Vai Ser Vai Leu Thr Vai Leu His Gin Asp

180 185190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Vai Ser Asn Lys Gly Leu

195 200205

Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg

210 215220

Glu Pro Gin Vai Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235240

Asn Gin Vai Ser Leu Thr Cys Leu Vai Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250255 lie Ala Vai Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265270

Thr Thr Pro Pro Vai Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280285

Arg Leu Thr Vai Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Vai Phe Ser

290 295300

Cys Ser Vai Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser

305 310 315320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325

- 235 043052 <210> 29 <2H> 107 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <400> 29

Arg Thr Vai Ala Ala Pro Ser Vai Phe He Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1. 5 1015

Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 2530

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin 35 4045

Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 50 5560

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 7580

Lys His Lys Vai Tyr Ala Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 85 9095

Pro Vai Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100105 <210> 30 <2H> 330 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <400> 30

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1. 5 1015

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Vai Lys Asp Tyr 20 2530

Phe Pro Glu Pro Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 4045

Gly Vai His Thr Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 5560

Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr

- 236 043052

70

80

Туг lie Cys Asn Vai Asn His Lys 85

Pro Ser Asn Thr Lys Vai Asp Lys

95

Lys Vai Glu Pro Lys Ser Cys Asp 100

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

115 120

Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro Pro

125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie

130 135

Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr Cys 140

Vai Vai Vai Asp Vai Ser His Glu 145 150

Asp Pro Glu Vai Lys Phe Asn Trp

155 160

Tyr Vai Asp Gly Vai Glu Vai His 165

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

170 175

Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

180

Vai Vai Ser Vai Leu Thr Vai Leu

185 190

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys

195 200

Glu Tyr Lys Cys Lys Vai Ser Asn 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu

210 215

Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 220

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Vai Tyr 225 230

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

235 240

Leu Thr Lys Asn Gin Vai Ser Leu

245

Thr Cys Leu Vai Lys Gly Phe Tyr

250 255

Pro Ser Asp lie Ala Vai Glu Trp

260

Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn

265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Vai

275 280

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Vai Asp

290 295

Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn 300

- 237 043052

Val Phe Ser Cys Ser Vai Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330 <210> 31 <2H> 326 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 31

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1. 5 1015

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 2530

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 4045

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 5560

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gin Thr 65 70 7580

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 9095

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120125

Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135140

- 238 043052

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155160

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn

165 170175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gin Asp Trp 180 185190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200205

Ala Pro He Glu Lys Thr lie Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu

210 215220

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235240

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie

245 250255

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu

305 310 315320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 <210> 32 <2H> 116 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник

- 239 043052 <223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) < 223> /замена=Р <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (11)..(11) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (16)..(16) < 223> /замена=Е <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (17) .. (17) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (20)..(20) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (34)..(34) < 223> /замена=У или L или I или G или А или S или Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (38)..(38) < 223> /замена=Н <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (43) .. (43) < 223> /замена=К <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (48) .. (48) < 223> /замена=Н или L или I <220>

< 221> МОД_ОСТ

- 240 043052 < 222> (50)..(50) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (52)..(55) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (71)..(71) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (73)..(73) < 223> /замена=Е <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (76) . . (76) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (77)..(77) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (81)..(81) < 223> /замена=Т или V или I <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (83)..(83) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (88)..(88) < 223> /замена=Ы <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (101)..(102) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 221> МОД_ОСТ < 222> (103) . . (103) < 223> Любая аминокислота, кроме С

- 241 043052 <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (111)..(111) <223> /замена=3 <220>

<221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК <222> (1)..(116) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 32

Glu Не Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Xaa lie Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

9095

Ala Arg Glu Gly Xaa Xaa Xaa Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 33 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид

- 242 043052 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 или Q <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (3)..(3) < 223> /замена=О <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) <223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (10)..(10) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (11)..(11) < 223> /замена=М <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (13)..(13) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (15)..(15) < 223> /замена=Н <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (17)..(17) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (18)..(18) < 223> /замена=Н <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (19)..(19) < 223> /замена=7 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (21)..(21) < 223> /замена=1 или Μ

- 243 043052 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (22)..(22) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (32)..(32) < 223> /замена=У или L или I или G или А или S или T <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (39)..(39) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (41)..(41) < 223> /замена=К или T <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (42) .. (42) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (71) . . (71) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (78)..(78) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ

- 244 043052 <222> (79)..(79) <223> /замена=Р <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (82)..(82) <223> /замена=Г или L или I или T или А <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (84)..(84) <223> /замена=Т <220>

<221> МОД_ОСТ <222> (90)..(90) < 223> Любая аминокислота, кроме М или С <220>

< 2 21> МОД_ОСТ < 222> (91)..(92) < 223> Любая аминокислота, кроме М, С или Р <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(106) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта

400> 33

Glu

He

Vai

Leu

Thr

Gin

Ser

Pro

Ala

Thr

Leu

Ser

Leu

Ser

Pro

Gly

1. ( Glu

Lys

Ala

Thr

Leu

Ser

L0 Cys

Ser

Ala

Ser

15 Ser

Vai

Ser

Tyr

Met

His

Trp

Tyr

20 Gin

Gin

Lys

Pro

Gly

25 Gin

Ala

Pro

Lys

Arg

30 Xaa

He

Tyr

Хаа

Xaa

35 Ser

Lys

Leu

Ala

Ser

40 Gly

Vai

Pro

Ala

Arg

45 Phe

Ser

Gly

Ser

Gly

50 Ser

Gly

Thr

Asp

Tyr

55 Ser

Leu

Thr

He

Ser

60 Ser

Leu

Glu

Ala

Glu

65 Asp

Phe

Ala

Vai

Tyr

70 Tyr

Cys

Gin

Xaa

75 Xaa

Xaa

Tyr

Pro

Phe

80 Thr

Phe

Gly

Gin

Gly

85 Thr

Lys

Leu

Glu

He

90 Lys

95

- 245 043052

100 105 <210> 34 <211> 116 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) < 223> /замена=Р <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (11)..(11) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (16)..(16) < 223> /замена=Е <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (17) .. (17) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (20)..(20) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (38)..(38) < 223> /замена=Н <220>

< 221> ВАРИАНТ

- 246 043052 < 222> (43) .. (43) < 223> /замена=К <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (46)..(46) < 223> /замена=Е <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (48)..(48) < 223> /замена=Г или L или I <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (50) .. (50) < 223> /замена=Е или Y <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (52)..(52) < 223> /замена=О <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (54)..(54) < 223> /замена=О <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (71)..(71) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (73)..(73) < 223> /замена=Е <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (76) . . (76) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (77)..(77) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (81)..(81) < 223> /замена=Е или V или I

- 247 043052 <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (83)..(83) <223> /замена=1 <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (88)..(88) <223> /замена=Ы <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (103) . . (103) <223> /замена=Т или V или I <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (111)..(111) <223> /замена=3 <220>

<221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК <222> (1)..(116) <223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 34

Glu Не Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Val Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Val

100 105110

- 248 043052

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 35 <211> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 или Q <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (3)..(3) < 223> /замена=2 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (10)..(10) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (11)..(11) < 223> /замена=М <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (13)..(13) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (15)..(15) < 223> /saMeHa=V <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (17)..(17) < 223> /замена=0

-249043052 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (18) . . (18) < 223> /замена=Н <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (19)..(19) < 223> /замена=У <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (21)..(21) < 223> /замена=1 или Μ <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (22)..(22) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (39)..(39) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (41)..(41) < 223> /замена=К или T <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (42) .. (42) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (45)..(45) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (46)..(46) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ

- 250 043052 <222> (71)..(71) <223> /замена=Т <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (77)..(77) <223> /замена=М или V или I <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (78)..(78) <223> /замена=О <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (79)..(79) <223> /замена=Р <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (82)..(82) <223> /замена=7 или L или I или T или А <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (84)..(84) <223> /замена=Т <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (90)..(90) <223> /замена=Б или Y <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (91)..(91) <223> /замена=О <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(106) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 35

Glu Не Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1. 5 1015

Glu Lys Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

- 251 043052

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr He Ser Ser Leu Glu Ala Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 36 <2H> 213 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 36

Glu lie Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Thr Vai Ala Ala Pro

100 105110

- 252 043052

Ser Vai Phe He Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr

115 120125

Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135140

Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu

145 150 155160

Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr Ala

180 185190

Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser Phe

195 200205

Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 37 <2H> 446 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид < 400> 37

Glu lie Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

- 253 043052

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu 65 70

Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr

80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser 85

Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

95

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp 100

Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai 105 110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys

115 120

Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly

130 135

Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 145 150

Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr 165

Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai

180

Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu

185 190

Gly Thr Gin Thr Tyr He Cys Asn

195 200

Vai Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

205

Lys Vai Asp Lys Lys Vai Glu Pro

210 215

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

225 230

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Vai Phe

235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 245

Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro

250 255

Glu Vai Thr Cys Vai Vai Vai Asp

260

Vai Ser His Glu Asp Pro Glu Vai 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Vai Asp Gly

275 280

Vai Glu Vai His Asn Ala Lys Thr

285

Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn

Ser Thr Tyr Arg Vai Vai Ser Vai

- 254 043052

290 295300

Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr lie Ser

325 330335

Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345350

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375380

Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410415

Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425430

Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440445 <210> 38 <2H> 442 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 38

Glu lie Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30

- 255 043052

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp He Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala

115 120125

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

165 170175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai Pro Ser Ser Asn Phe

180 185190

Gly Thr Gin Thr Tyr Thr Cys Asn Vai Asp His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200205

Lys Vai Asp Lys Thr Vai Glu Arg Lys Cys Cys Vai Glu Cys Pro Pro

210 215220

Cys Pro Ala Pro Pro Vai Ala Gly Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro Pro

225 230 235240

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr Cys

245 250255

- 256 043052

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp

260 265270

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

275 280285

Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val

290 295300

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

305 310 315320

Lys Gly Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr lie Ser Lys Thr Lys Gly

325 330335

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

340 345350

Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

355 360365

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn

370 375380

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

385 390 395400

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn

405 410415

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425430

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435440 <210> 39 <2H> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник

- 257 043052 <223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (20)..(20) <223> /замена=1 <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (38)..(38) <223> /замена=Н <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (76) . . (76) <223> /замена=А <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (77)..(77) <223> /замена=Т <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (81)..(81) <223> /замена=Т <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (83)..(83) <223> /замена=1 <220>

< 221> ПР0ЧИЙ_ПРИЗНАК < 222> (1)..(116) < 223> /примечание=остатки варианта, приведенные в последовательности, не являются предпочтительными относительно остатков в аннотациях для положений варианта <400> 39

Glu 1 . (

Не 5

Gin

Leu

Val

Gin

Ser 10

Gly

Ala

Glu

Val

Lys 15

Lys

Pro

Gly

Ala

Ser

Val

Lys

Val 20

Ser

Cys

Lys

Ala

Ser 25

Gly

Tyr

Thr

Phe

Thr 30

Asn

Tyr

Gly

Met

Asn 35

Trp

Val

Lys

Gin

Ala 40

Pro

Gly

Gin

Gly

Leu 45

Lys

Trp

Met

Gly

Trp

He

Asn

Thr

Asn

Thr

Gly

Glu

Pro

Thr

Tyr

Ala

Glu

Phe

- 258 043052

5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser

115 <210> 40 <2H> 106 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (1)..(1) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (3)..(3) < 223> /замена=0 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (9)..(9) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (13)..(13) < 223> /замена=А <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (15)..(15) < 223> /замена=У <220>

- 259 043052 < 221> ВАРИАНТ < 222> (17) . . (17) < 223> /замена=О <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (19)..(19) < 223> /замена=7 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (21)..(21) < 223> /замена=1 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (22)..(22) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (41)..(41) < 223> /замена=К <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (69)..(69) < 223> /замена=3 <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (71)..(71) < 223> /замена=Т <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (77)..(77) < 223> /замена=М <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (78)..(78) < 223> /замена=О <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (84)..(84) < 223> /замена=Т <220>

- 260 043052 <400> 40

Glu He Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys

100105 <210> 41 <2H> 443 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 41

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe lie lie Lys Ala Thr 20 2530

Tyr Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Arg Leu Glu Trp Met 35 4045

Gly Arg lie Asp Pro Ala Asn Gly Glu Thr Lys Tyr Asp Pro Lys Phe 50 5560

- 261 043052

Gin Vai Arg Vai Thr He Thr Ala 65 70

Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser 85

Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

95

Ala Arg Tyr Ala Trp Tyr Phe Asp 100

Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai

105 110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys

115 120

Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala 125

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu

130 135

Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 145 150

Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr 165

Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai 180

Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu

185 190

Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn

195 200

Vai Asp His Lys Pro Ser Asn Thr 205

Lys Vai Asp Lys Arg Vai Glu Ser

210 215

Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro 220

Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly 225 230

Gly Pro Ser Vai Phe Leu Phe Pro

235 240

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 lie Ser Arg Thr Pro Glu Vai Thr

250 255

Cys Vai Vai Vai Asp Vai Ser Gin

260

Glu Asp Pro Glu Vai Gin Phe Asn 265 270

Trp Tyr Vai Asp Gly Vai Glu Vai

275 280

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

285

Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Tyr

Arg Vai Vai Ser Vai Leu Thr Vai

- 262 043052

290 295300

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser

305 310 315320

Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser He Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys

325 330335

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu 340 345350

Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe

355 360365

Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu

370 375380

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

385 390 395400

Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly

405 410415

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 420 425430

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435440 <210> 42 <2H> 214 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 42

Asp Не Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1. 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn lie Tyr Ser Phe 20 25 30

- 263 043052

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 4045

Tyr His Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Vai Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 5560

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 7580

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin His Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu 85 9095

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Vai Glu lie Lys Arg Thr Vai Ala Ala

100 105110

Pro Ser Vai Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly

115 120125

Thr Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135140

Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin

145 150 155160

Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr 180 185190

Ala Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser

195 200205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 <210> 43 <211> 164 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник

- 264 043052 < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 43

Thr Pro Ala Pro Lys Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr Trp Ala Gin Gly 1. 5 1015

Lys Leu Cys Cys Gin Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe Leu Vai Lys Asp 20 2530

Cys Asp Gin His Arg Lys Ala Ala Gin Cys Asp Pro Cys He Pro Gly 35 4045

Vai Ser Phe Ser Pro Asp His His Thr Arg Pro His Cys Glu Ser Cys 50 5560

Arg His Cys Asn Ser Gly Leu Leu Vai Arg Asn Cys Thr lie Thr Ala 65 70 7580

Asn Ala Glu Cys Ala Cys Arg Asn Gly Trp Gin Cys Arg Asp Lys Glu 85 9095

Cys Thr Glu Cys Asp Pro Leu Pro Asn Pro Ser Leu Thr Ala Arg Ser

100 105110

Ser Gin Ala Leu Ser Pro His Pro Gin Pro Thr His Leu Pro Tyr Vai

115 120125

Ser Glu Met Leu Glu Ala Arg Thr Ala Gly His Met Gin Thr Leu Ala

130 135140

Asp Phe Arg Gin Leu Pro Ala Arg Thr Leu Ser Thr His His His His

145 150 155160

His His His His <210> 44 <2H> 224 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник

- 265 043052 < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 44

Glu Не Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp lie Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala

115 120125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135140

Vai Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Vai Thr Vai Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155160

Ala Leu Thr Ser Gly Vai His Thr Phe Pro Ala Vai Leu Gin Ser Ser

165 170175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai Pro Ser Ser Ser Leu

180 185190

Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Vai Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200205

- 266 043052

Lys Vai Asp Lys Lys Vai Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220 <210> 45 <2H> 213 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 45

Glu Не Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Vai Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp lie Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Thr Vai Ala Ala Pro

100 105110

Ser Vai Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr

115 120125

Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135140

Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu

145 150 155160

Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

- 267 043052

165 170175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr Ala 180 185190

Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser Phe 195 200205

Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 46 <211> 708 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полинуклеотид <400> 46 atggacatgc gggtgccagc tcagctgctg ggcctgctgc tgctgtggct gagaggcgcc 60 agatgcgaga tcgtgctgac ccagtccccc gccaccctgt ctctgagccc tggcgagaga 120 gccaccctga gctgctccgc ctcctcctcc gtgtcctaca tgcactggta tcagcagaag 180 cccggccagg cccccaagcg gtggatctac gacacctcca agctggcctc cggcgtgccc 240 gccagattct ccggctctgg ctctggcacc gactactccc tgaccatctc cagcctggaa 300 cccgaggact tcgccgtgta ctactgccag cagtggaact cctacccctt caccttcggc 360 cagggcacca agctggaaat caagcgtacg gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 420 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 480 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 540 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 600

- 268 043052 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 660 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttga

708 <210> 47 <211> 1398 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полинуклеотид <400> 47 atgggctcca ccgccatcct gggactgctg ctggctgtgc tgcagggcgt gtgcgccgag 60 atccagctgg tgcagtctgg cgccgaagtg aagaaacctg gcgcctccgt gaaggtgtcc 120 tgcaaggcct ccggctacac cttcaccaac tacggcatga actgggtgaa acaggcccca 180 ggccagggcc tgaagtggat gggctggatc aacaccaaca ccggcgagcc cacctacgcc 240 gaagagttca agggccggtt caccttcacc ctggacacct ccatctccac cgcctacatg 300 gaactgtcct ccctgcggag cgaggacacc gccgtgtact actgcgcccg agagggcgac 360 gccatggact attggggcca gggcacaacc gtgaccgtgt cctccgctag caccaagggc 420 ccatcggtct tccccctggc accctcctcc aagagcacct ctgggggcac agcggccctg 480 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 540 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggcc gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 600 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg 660 aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagaaggttg agcccaaatc ttgtgacaaa 720 actcacacat gcccaccgtg cccagcacct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc 780

- 269 043052 ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 840 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg 900 gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg 960 gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag 1020 gtctccaaca aagccctccc agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag 1080 ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg acgagctgac caagaaccag 1140 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1200 agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc 1260 tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc 1320 ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc 1380 ctgtctccgg gtaaatga

1398 <210> 48 <211> 218 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 48

Glu lie Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Vai Ser Thr Ser 20 2530

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro 35 4045

- 270 043052

Arg Leu Leu lie Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Vai Pro Ala 50 5560

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser 65 70 7580

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin His Ser Arg 85 9095

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Vai Glu lie Lys Arg

100 105110

Thr Vai Ala Ala Pro Ser Vai Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin

115 120125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Vai Vai Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135140

Pro Arg Glu Ala Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser

145 150 155160

Gly Asn Ser Gin Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185190

His Lys Vai Tyr Ala Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro

195 200205

Vai Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210215 <210> 49 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид

- 271 043052 <400> 49

Asn Tyr Tyr Met Tyr 1. 5 <210> 50 <2H> 17 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 50

Gly Не Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys

1. 5 10 15

Asn <210> 51 <2H> 11 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 51

Arg Asp Туг Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr

1.5 10 <210> 52 <2H> 120 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 52

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Vai Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala . 5 10 15

- 272 043052

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Tyr Met Tyr Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 4045

Gly Gly He Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 5560

Lys Asn Arg Vai Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gin Phe Asp Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 9095

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gin

100 105110

Gly Thr Thr Vai Thr Vai Ser Ser

115120 <210> 53 <2H> 447 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 53

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Vai Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala . 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Tyr Met Tyr Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 4045

Gly Gly lie Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 5560

Lys Asn Arg Vai Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr

- 273 043052

70

80

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gin Phe 85

Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

95

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp 100

Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gin 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

130 135

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 145 150

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 165

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

170 175

Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 180

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

195 200

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

210 215

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245

Asp Thr Leu Met He Ser Arg Thr

250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

260

Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu 265 270

Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp

275 280

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe

290 295

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 300

- 274 043052

Val Leu Thr Vai Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser He Glu Lys Thr lie

325 330335

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro

340 345350

Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375380

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410415

Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425430

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440445 <210> 54 <2H> 11 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 54

Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala

1.5 10 <210> 55 <2H> 7 <212> БЕЛОК

- 275 043052 < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 55

Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr . 5 <210> 56 <2H> 9 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 56

Gin Gin Ser Ser Asn Trp Pro Arg Thr 1. 5 <210> 57 <2H> 107 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 57

Glu Не Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly . 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Vai Ser Ser Tyr 20 2530

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lie 35 4045

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 5560

- 276 043052

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 7580

Glu Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Ser Ser Asn Trp Pro Arg 85 9095

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Vai Glu He Lys 100105 <210> 58 <2H> 214 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

<400> 58

Leu

Thr

Gin Ser 10

Pro

Ala

Thr

Leu Ser 15

Leu

Ser

Pro

Gly

Glu Не 1. 5

Vai

Glu

Arg

Ala

Thr 20

Leu

Ser

Cys

Arg

Ala 25

Ser

Gin

Ser

Vai

Ser 30

Ser

Tyr

Leu

Ala

Trp 35

Tyr

Gin

Lys

Pro 40

Gly

Gin

Ala

Pro

Arg 45

Leu

He

Туг

Asp 50

Ala

Ser

Asn

Arg

Ala 55

Thr

Gly

He

Pro

Ala 60

Arg

Phe

Ser

Gly

Ser 65

Gly

Ser

Gly

Thr

Asp 70

Phe

Thr

Leu

Thr

He 75

Ser

Leu

Glu

Pro 80

Glu

Asp

Phe

Ala

Vai 85

Tyr

Cys

Gin

Gin 90

Ser

Asn

Trp

Pro 95

Arg

Thr

Phe

Gly

Gin 100

Gly

Thr

Lys

Vai

Glu 105

He

Lys

Arg

Thr

Vai 110

Ala

Pro

Ser

Vai 115

Phe

He

Phe

Pro

Pro 120

Ser

Asp

Glu

Gin

Leu 125

Lys

Ser

Gly

Thr

Ala

Ser

Vai

Cys

Leu

Asn

Phe

Tyr

Pro

Arg

Glu

Ala

- 277 043052

130 135140

Lys Vai Gin Trp Lys Vai Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin

145 150 155160

Glu Ser Vai Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Vai Tyr

180 185190

Ala Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser

195 200205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 59 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 59

Asn Ser Gly Met His . 5 <210> 60 <211> 17 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 60

Vai lie Trp Туг Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai Lys

1. 5 10 15

Gly

- 278 043052 <210> 61 <2H> 4 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 61

Asn Asp Asp Туг <210> 62 <211> 113 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник <223> /примечание=Описание Синтетический полипептид <400> 62

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser

1.510 искусственной последавательности:

Gly Gly Gly Vai Vai Gin Pro Gly Arg 15

Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys 20

Gly Met His Trp Vai Arg Gin 35

Ala Vai He Trp Tyr Asp Gly

55

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser 65 70

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg 85

Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp 100

Ala Ser Gly lie Thr Phe Ser Asn Ser 2530

Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 4045

Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 60

Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 7580

Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

9095

Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser

105110

- 279 043052

Ser <210> 63 <2H> 440 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 63

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 1. 5 1015

Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly He Thr Phe Ser Asn Ser 20 2530

Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 4045

Ala Val lie Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 7580

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

9095

Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

100 105110

Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser

115 120125

Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp

130 135140

Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr

145 150 155160

- 280 043052

Ser Gly Vai His Thr Phe Pro Ala 165

Vai Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr

170 175

Ser Leu Ser Ser Vai Vai Thr Vai

180

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys 185 190

Thr Tyr Thr Cys Asn Vai Asp His

195 200

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Vai Asp

205

Lys Arg Vai Glu Ser Lys Tyr Gly

210 215

Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala 220

Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser 225 230

Vai Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

235 240

Lys Asp Thr Leu Met He Ser Arg

245

Thr Pro Glu Vai Thr Cys Vai Vai

250 255

Vai Asp Vai Ser Gin Glu Asp Pro

260

Glu Vai Gin Phe Asn Trp Tyr Vai 265 270

Asp Gly Vai Glu Vai His Asn Ala

275 280

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin

285

Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Vai Vai

290 295

Ser Vai Leu Thr Vai Leu His Gin

300

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310

Lys Cys Lys Vai Ser Asn Lys Gly

315 320

Leu Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr 325 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro

330 335

Arg Glu Pro Gin Vai Tyr Thr Leu 340

Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr

345 350

Lys Asn Gin Vai Ser Leu Thr Cys

355 360

Leu Vai Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 365

Asp lie Ala Vai Glu Trp Glu Ser

370 375

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr 380

Lys Thr Thr Pro Pro Vai Leu Asp

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

- 281 043052

385 390 395400

Ser Arg Leu Thr Vai Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Vai Phe

405 410415

Ser Cys Ser Vai Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys

420 425430

Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435440 <210> 64 <2H> 76 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 64

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Trp Vai 20 2530

Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Vai Thr Met 35 4045

Thr Arg Asp Thr Ser He Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu 50 5560

Arg Ser Asp Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala Arg 65 7075 <210> 65 <2H> 76 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

- 282 043052 <400> 65

Gin Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Trp Val 20 2530

Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Val Thr Met 35 4045

Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu 50 5560

Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 65 7075 <210> 66 <2H> 70 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 66

Asp Не Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1. 5 1015

Asp Arg Val Thr He Thr Cys Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala 20 2530

Pro Lys Leu Leu lie Tyr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly 35 4045

Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro Glu Asp 50 5560

Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 6570 <210> 67 <2H> 70 <212> БЕЛОК

- 283 043052 < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический полипептид <400> 67

Glu 1. ΐ

He

Vai

Leu

Thr

Gin

Ser 10

Pro

Ala

Thr

Leu

Ser 15

Leu

Ser

Pro

Gly

Glu

Arg

Ala

Thr 20

Leu

Ser

Cys

Trp

Tyr 25

Gin

Lys

Pro

Gly 30

Gin

Ala

Pro

Arg

Leu 35

Leu

He

Tyr

Gly

He 40

Pro

Ala

Arg

Phe

Ser 45

Gly

Ser

Gly

Ser

Gly 50

Thr

Asp

Phe

Thr

Leu 55

Thr

He

Ser

Leu 60

Glu

Pro

Glu

Asp

Phe Ala Vai Туг Туг Cys 65 70 <210> 68 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 68

Vai Vai Vai Pro Pro

1. 5 <210> 69 <2H> 10 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 69

- 284 043052

His His His His His His His His His Gly 1. 5 10 <210> 70 <2H> 83 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 70

Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr Trp Ala Gin Gly Lys Leu Cys Cys Gin

1. 5 1015

Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe Leu Vai Lys Asp Cys Asp Gin His Arg

2530

Lys Ala Ala Gin Cys Asp Pro Cys He Pro Gly Vai Ser Phe Ser Pro 35 4045

Asp His His Thr Arg Pro His Cys Glu Ser Cys Arg His Cys Asn Ser 50 5560

Gly Leu Leu Vai Arg Asn Cys Thr lie Thr Ala Asn Ala Glu Cys Ala 65 70 7580

Cys Arg Asn <210> 71 <2H> 7 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности Синтетический пептид <400> 71

Asp Lys Glu Cys Thr Glu Cys . 5 <210> 72

- 285 043052 <2H> 212 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 72

Glu Не Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1. 5 1015

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 2530

His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Lys Arg Trp He Tyr 35 4045

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 5560

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 7580

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Asn Ser Tyr Pro Phe Thr 85 9095

Phe Gly Gin Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105110

Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr

115 120125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135140

Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu

145 150 155160

Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185190

- 286 043052

Cys Glu Vai Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Vai Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu 210 <210> 73 <2H> 131 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 73

Glu Не Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala

1. 5 1015

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 2530

Gly Met Asn Trp Vai Lys Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Lys Trp Met 35 4045

Gly Trp He Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe 50 5560

Lys Gly Arg Phe Thr Phe Thr Leu Asp Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr 65 70 7580

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys

9095

Ala Arg Glu Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Thr Vai

100 105110

Thr Vai Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Vai Phe Pro Leu Ala

115 120125

Pro Ser Ser

130

- 287 043052 <210> 74 <2H> 81 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический полипептид <400> 74

Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro . 5 1015

Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr

2530

Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 35 4045

Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr He Cys Asn 50 5560

Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro 65 70 7580

Lys <210> 75 <2H> 15 <212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид <400> 75

Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Leu His

1. 5 10 15 <210> 76 <2H> 7 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность

- 288 043052 <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид < 400> 76

Leu Ala Ser Туг Leu Glu Ser . 5 <210> 77 <211> 9 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>

< 221> источник < 223> /примечание=Описание искусственной последавательности: Синтетический пептид < 400> 77

Gin His Ser Arg Asp Leu Pro Leu Thr

1. 5 <210> 78 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>

<221> источник <223> /примечание=Описание Синтетический полипептид <400> 78

Glu He Vai Leu Thr Gin Ser

1. 5 10 искусственной последавательности:

Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20

Arg Ala Ser Lys Gly Vai Ser Thr Ser 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp 35

Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro 40 45

Arg Leu Leu lie Tyr Leu Ala

55

Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Vai Pro Ala 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Tie Ser

70

80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala

Vai Tyr Tyr Cys Gin His Ser Arg

95

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly

100

Gly Thr Lys Vai Glu He Lys

Claims

1. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD27 человека, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:

a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, где X1=M;

b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, где X1=N, X₂=T, X₃=N и Х₄=Т;

c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, где X1=M;

- 289 043052 и вариабельную область легкой цепи, содержащую:

d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность

SEQ ID NO: 4, где Х1=М;

e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность

SEQ ID NO: 5, где X1=D и Х₂=Т; и

f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, где X1=W, X₂=N и X₃=S.

2. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по п.1, выбранное из группы, состоящей из:

антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 10-13, и вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15-18;

антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащего вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15.

3. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD27 человека, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15.

4. Антитело изотипа IgG1 человека, которое связывается с CD27 человека, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15.

5. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-3, которое представляет собой гуманизированное антитело, содержащее две тяжелые цепи и две легкие цепи, и представляет собой IgG.

6. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-3, которое представляет собой антитело изотипа IgG1 человека.

7. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-6, где антитело содержит константный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.

8. Антитело, которое связывается с CD27 человека, состоящее из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, где каждая легкая цепь состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 36 и каждая тяжелая цепь состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 37.

9. Антитело, которое связывается с CD27 человека, состоящее из двух легких цепей и двух тяжелых цепей, где каждая легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36 и каждая тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37.

10. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-9, которое экспрессируется клеткой яичника китайского хомячка (СНО).

11. Антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-9, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает паттерн гликозилирования, характерный для экспрессии в клетке яичника китайского хомячка (СНО).

12. Полинуклеотид, кодирующий любое из антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, по пп.1-9.

13. Полинуклеотид для кодирования антитела по п.9, где полинуклеотид содержит SEQ ID NO: 46, который кодирует легкую цепь антитела, и SEQ ID NO: 47, который кодирует тяжелую цепь антитела.

14. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п.12 или 13.

15. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по любому из пп.12 или 13 или экспрессионный вектор по п.14.

16. Клетка-хозяин по п.15, представляющая собой клетку яичника китайского хомяка.

17. Способ получения антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий:

a) культивирование клетки-хозяина, содержащей полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь и легкую цепь любого из антител, или их антигенсвязывающих фрагментов, по пп. 1 -9, в условиях, благоприятных для экспрессии полинуклеотида; и

b) извлечение антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, из клетки-хозяина и/или культуральной среды.

18. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-11 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

19. Применение антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-11 или композиции по п.18 для производства лекарственного препарата, предназначенного для лечения злокачественного новообразования.

20. Применение по п.19, где лекарственный препарат адаптирован для введения в сочетании с пембролизумабом.

21. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по п.8 и пембролизумаб.

22. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по п.9 и пембролизумаб.

- 290 043052

23. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп.3-7 и пембролизумаб.

24. Композиция по п.23, отличающаяся тем, что антитело имеет изотип IgG1 человека.

25. Применение композиции по любому из пп.21-24 для производства лекарственного препарата, предназначенного для лечения злокачественного новообразования.