EA027831B1

EA027831B1 - СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ СОСТОЯНИЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ S-[4-(3-ФТОР-3-МЕТИЛБУТИРИЛОКСИ)БУТ-2-ИНИЛ]6α,9α-ДИФТОР-17α-(ФУРАН-2-ИЛ)КАРБОНИЛОКСИ-11β-ГИДРОКСИ-16α-МЕТИЛ-3-ОКСОАНДРОСТА-1,4-ДИЕН-17β-КАРБОТИОАТА

Info

Publication number: EA027831B1
Application number: EA201592283A
Authority: EA
Inventors: Житен Ранчходбхаи Патель; Гопалкумар Чиманлал Патель; Гаурав Сандживкумар Шетх; Санджай Нандлал Мандхане; Читтури Тринадха Рао; Раджаманнар Тхеннати
Original assignee: Сан Фарма Адвансед Ресёрч Компани Лимитед
Priority date: 2013-05-28
Filing date: 2014-05-28
Publication date: 2017-09-29
Also published as: EP3004133B1; MY179214A; AU2014272640B2; EA201592283A1; EA027831B9; ZA201508640B; UA117248C2; KR20160030085A; BR112015029530A8; CA2912400A1; JP2016520122A; US9458187B2; BR112015029530A2; ES2664019T3; AU2014272640A1; MX2015016283A; EP3004133A1; SG11201509680TA; JP6366696B2; CN105431445A

Abstract

Изобретение относится к способам лечения воспалительных состояний с применением S-[4-(3-фтор-3-метилбутирилокси)бут-2-инил]6α,9α-дифтор-17α-(фуран-2-ил)карбонилокси-11β-гидрокси-16α-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17β-карботиоата (соединения формулы I), нового противовоспалительного соединения андростанового ряда, и способу его получения

Description

Изобретение относится к 8-[4-(3-фтор-3-метилбутирилокси)бут-2-инил]6а,9а-дифтор-17а-(фуран2-ил)карбонилокси-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоату, новому противовоспалительному соединению андростанового ряда, и способам лечения воспалительных состояний.

Предпосылки изобретения

Кортикостероиды (или глюкокортикоиды), обладающие противовоспалительными свойствами, широко применяются для лечения воспалительных состояний или нарушений кожи, дыхательных путей, глаза, желудочно-кишечного тракта, суставов, центральной нервной системы (ЦНС) и т.д. и некоторых аутоиммунных нарушений. Некоторыми из воспалительных нарушений кожи, при которых назначают лечение глюкокортикоидами, являются экзема, псориаз, аллергический дерматит, зуд, реакции гиперчувствительности и т.д. Воспалительные или аллергические состояния дыхательных путей, при которых применяют глюкокортикоиды, включают нарушения, связанные с носовой полостью, глоткой или легкими, такие как ринит (в том числе сенная лихорадка), носовые полипы, астма (в том числе вызванная аллергеном астматическая реакция), хроническое обструктивное заболевание легких, интерстициальное заболевание легких, фиброз и т.д. Введение глюкокортикоидов также применяют при воспалительных заболеваниях кишечника, таких как язвенный колит и болезнь Крона; и воспалительных нарушениях суставов, таких как ревматоидный артрит, которые представляют собой аутоиммунные заболевания. Тем не менее, введение кортикостероидов, как правило, кроме требуемого фармакологического эффекта может вызывать некоторое число нежелательных или вредных побочных действий в участках, отдаленных от ткани-мишени, так называемых системных эффектов. Долгосрочное применение таких кортикостероидов ограничивается из-за случаев тяжелых нежелательных системных эффектов, в том числе подавления системы гипоталамус-гипофиз-надпочечники (НРА), системной иммуносупрессии, задержки заживления ран, повышенного метаболизма костной ткани, ослабленного роста, слабости или атрофии мышц, пептической язвы, истончения кожи, диабета, ожирения, гипертензии, отечности, нарушений, связанные с прогестероном и эстрогеном. Таким образом, в случае длительного лечения желательно иметь глюкокортикоиды, которые обладают сильной противовоспалительной активностью в тканимишени с минимальной системной активностью или, предпочтительно, с ее отсутствием при терапевтических дозах.

Краткое описание изобретения

Изобретение относится к новому глюкокортикоидному соединению 8-[4-(3-фтор-3-метилбутирилокси)бут-2-инил]6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоату формулы I

На ίη νίνο моделях воспаления соединение формулы I проявляет индекс безопасности, превосходящий таковой соединений, раскрытых в предшествующем уровне техники.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1 - влияние состава с соединением формулы I для назального применения в отношении овальбумин-индуцированную проницаемость сосудов у морских свинок, сенсибилизированных и подвергнутых провокационной пробе с овальбумином;

фиг. 2- овальбумин-индуцированные изменения внутриносового давления у морских свинок; фиг. 3 - влияние на овальбумин-индуцированную проницаемость сосудов конъюнктивы у морских свинок;

фиг. 4 - влияние применяемых в офтальмологии стероидов на 1ОР у кроликов.

Определения

Индекс безопасности относится к показателю, характеризующему эффективность в сравнении с безопасностью. Как упоминается в данном документе, это относится к любому показателю, характеризующему эффективность относительно безопасности. Например, его можно измерять в виде отношения дозы, которая приводит к нежелательному эффекту, к дозе, которая приводит к требуемому эффекту. Его

- 1 027831 обычно измеряют путем определения показателя ΕΌ₅₀ для требуемого эффекта и нежелательного эффекта и вычисления отношения ΕΌ₅₀ нежелательного эффекта к ΕΌ₅₀ требуемого эффекта. Например, на модели отека легких, вызванного 8ерйабех®, индекс безопасности можно измерять как отношение ΕΌ₅₀инволюции вилочковой железы/ΕΌ^ отека легких. Индекс безопасности также можно выражать как отношение процента требуемого эффекта к проценту нежелательного эффекта при определенной дозе, например в приведенном в качестве примера в данном документе тесте с образованием гранулемы вокруг ватного шарика использовали отношение процента подавления гранулемы к проценту уменьшения массы вилочковой железы при определенной дозе.

Лечение состояния относится к принятию мер для получения благоприятных или требуемых результатов, в том числе клинических результатов. Для целей настоящего исследования благоприятные или требуемые клинические результаты включают без ограничения облегчение или уменьшение интенсивности одного или нескольких симптомов, отсрочку или замедление прогрессирования заболевания, стабилизацию патологического состояния и другие благоприятные результаты, описанные ниже.

Термин введение относится к системному и/или локальному введению.

Термин системное введение относится к нелокализованному введению, так что введенное вещество может воздействовать на несколько органов или тканей по всему организму, или так что введенное вещество может проходить через несколько органов или тканей по всему организму во время достижения целевого участка.

Используемый в данном документе термин пероральное введение относится к введению соединения через рот при проглатывании или через какую-либо другую часть желудочно-кишечного тракта, в том числе пищевод. Фармацевтические композиции, подходящие для перорального введения, могут включать, например, таблетки (в том числе прессованные, покрытые оболочкой таблетки или таблетки без оболочки), пеллеты, драже, пастилки, твердые или мягкие капсулы, водные или масляные суспензии, эмульсии, диспергируемые порошки или гранулы, сиропы или эликсиры и тому подобное.

Термин парентеральное введение относится и включает в себя любой путь, посредством которого соединение вводят млекопитающему, за исключением введения через пищеварительный тракт, неограничивающие примеры таких путей включают внутривенную инъекцию, внутриартериальную инъекцию, внутримышечную инъекцию и инъекцию через систему для внутривенного введения, канюлю, катетер и т.п. Фармацевтические композиции, подходящие для парентерального введения, могут включать, например, стерильный раствор, суспензию или эмульсию для внутривенного, подкожного, внутримышечного, внутрисуставного, внутрисосудистого или инфузионного дозирования и т.п.

Термины местное нанесение или нанесенный местно используются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения нанесения на внешний слой кожи млекопитающих, которое включает нанесение путем втирания в кожу, нанесения щеткой, нанесения кистью, обтирания и поглаживания. Фармацевтические композиции, подходящие для местного введения, могут включать, например, мази, кремы, водные или масляные растворы или суспензии, трансдермальные пластыри, пленки, гели, лосьоны и т.п.

Используемый в данном документе термин локальное введение относится к введению в определенный участок или поблизости него. Фармацевтические композиции, подходящие для локального введения, могут включать, например, глазные/ушные/назальные капли, кремы/мази для кожного/офтальмологического применения, спреи, аэрозоли, порошки для инсуффляции, ингаляции, растворы/суспензии для распыления и т.п.

Наиболее подходящий способ введения зависит, в каждом отдельном случае, от природы и тяжести состояния, подлежащего лечению, и от природы соединения по настоящему изобретению, применяемого в каждом случае.

Подробное описание изобретения

Изобретение предусматривает соединение формулы I. Настоящее изобретение также предусматривает способы лечения или облегчения воспалительных состояний у пациента, поддающегося лечению с помощью противовоспалительных средств, включающие введение указанному пациенту эффективного количества соединения по настоящему изобретению. Соединение формулы I можно вводить в диапазонах доз от 0,01 до 10 мг. Термин доза относится к физически дискретным единицам, которые содержат предварительное заданное количество или содержание активного ингредиента, вводимого в виде однократного введения.

Доза соединения по настоящему изобретению, применяемая для достижения требуемого биологического эффекта, зависит от ряда факторов, например предполагаемого применения, требуемой продолжительности лечения, типа или пути введения, частоты дозирования и клинического состояния пациента. Частота дозирования или частота введения дозы соединения, как правило, составляет от одного до трех раз в сутки.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний или связанных с ними симптомов у человека, включающее введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний или симптомов, связанных с заболеванием, выбранным из группы, вклю- 2 027831 чающей сезонный аллергический ринит, круглогодичный аллергический ринит, круглогодичный неаллергическии ринит, хронический синусит, рецидивирующий синусит, назальные полипы, у человека, включающее интраназальное введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I. Способ относится к введению соединения формулы I при суточной интраназальной дозе в диапазоне от 0,01 до 2,5 мг. Более предпочтительно, способ относится к введению соединения формулы I при суточной интраназальной дозе в диапазоне от 0,05 до 1,0 мг. В предпочтительном варианте осуществления для лечения пациента, страдающего от сезонного аллергического ринита, дозу, составляющую 0,1 до 0,4 мг, можно вводить интраназально со схемой приема дважды в день (ВГО), что составляет суточную интраназальную дозу от 0,2 до 0,8 мг.

В другом варианте осуществления способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний или симптомов, связанных с респираторными нарушениями, выбранными из группы, включающей аллергические, неаллергические и/или воспалительные заболевания верхних или нижних воздухоносных путей или легких, такие как астма, хроническое обструктивное заболевание легких, бронхиолит, круп, бронхолегочная дисплазия, интерстициальная болезнь легких, у человека, включающее введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи ингаляционного пути введения. Доза для введения соединения по настоящему изобретению при помощи ингаляционного пути введения находится в диапазоне от 0,05 до 10 мг.

В другом варианте осуществления способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний или симптомов, связанных с кожными нарушениями, выбранными из группы, включающей экзему, псориаз, аллергический дерматит, контактный дерматит, зуд и реакции гиперчувствительности, у человека, включающее введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи местного пути введения.

В другом варианте осуществления способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний и симптомов, связанных с системными воспалительными нарушениями, выбранными из группы, включающей синдром раздраженного кишечника, воспалительные состояния кишечника, такие как язвенный колит, болезнь Крона, остеоартрит, или аутоиммунные заболевания, такие как, без ограничения, ревматоидный артрит, у человека, включающее введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи перорального или парентерального пути введения.

В еще одном варианте осуществления способ включает лечение или облегчение воспалительных состояний или симптомов, связанных с глазными или отоларингологическими воспалительными нарушениями, выбранными из группы, включающей воспаление глаза вследствие аллергии (такое как, без ограничения, сезонный/круглогодичный аллергический конъюнктивит), хронические состояния, такие как кератит, весенний кератоконъюнктивит, атопический кератоконъюнктивит, конъюнктивит с гиперплазией сосочков, дерматоконъюктивит, (контактную аллергию), пингвекулу и эписклерит, у человека, включающее введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи местного применения.

Кроме применения в медицине соединение по настоящему изобретению может найти применение в качестве противовоспалительного и противоаллергического средства в ветеринарной медицине. Соединение по настоящему изобретению проходит дальнейшие клинические испытания.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предусмотрена фармацевтическая композиция для применения в лечении воспалительных состояний, которая содержит соединение по настоящему изобретению вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями или носителями.

В одном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению вызывает сильные противовоспалительные или противоаллергический эффекты, особенно после местного введения, вследствие связывания с глюкокортикоидным рецептором и последующей реакции с помощью этого рецептора.

В ίη νίΐτο исследованиях по связыванию рецептора соединение по настоящему изобретению показало хорошую действенность и селективность в отношении глюкокортикоидного рецептора человека.

На животных моделях воспаления и аллергии соединение по настоящему изобретению, в целом, проявляло очень хорошую эффективность, продолжительность эффекта и необычно низкий уровень системных побочных действий. Соединение по настоящему изобретению обладало свойствами, которые требовались стероиду для местного применения, такими как низкая пероральная биодоступность и короткий системный период полувыведения из плазмы, что, тем самым, приводило к низкой предрасположенности к системным побочным действиям, в отличие от таковых, наблюдаемых в случае других глюкокортикоидов.

Соединение по настоящему изобретению при испытании на ίη νίνο моделях воспаления, как дополнительно описано и проиллюстрировано при помощи демонстрационных примеров в данном документе, проявляло значительную противовоспалительную активность с минимальными побочными действиями. Соединение по настоящему изобретению продемонстрировало очень высокий предел безопасности (индекс безопасности), который в несколько раз увеличился по сравнению с соединениями, описанными в предшествующем уровне техники.

- 3 027831

Способ получения.

Другой аспект настоящего изобретения представляет собой способ получения соединения формулы I по настоящему изобретению.

В одном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению получают в ходе одной стадии из тиокислоты формулы IV путем алкилирования с помощью алкинового фрагмента формулы V, как показано на схеме I.

В соединении формулы V Ь представляет собой уходящую группу (например, атом галогена, мезильную или тозильную группу и т.п.), предпочтительно Ь представляет собой хлор.

Реакцию алкилирования можно успешно проводить в инертном органическом полярном растворителе, например ацетоне, ацетонитриле, Ν,Ν-диметилформамиде, Ν,Ν-диметилацетамиде, диметилсульфоксиде и т.п., или в их смесях, предпочтительно в ацетоне в присутствии подходящего основания. Примерами подходящих оснований являются карбонаты щелочных или щелочно-земельных металлов, такие как карбонат калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия и т.п., предпочтительно карбонат калия.

Соединение формулы IV можно получать при помощи следующих известных способов, например из Согбоп 1. РЫШрк е! а1., 1. Меб. СЬет., 37, 3717-3729 (1994); И8 4335121; РСТ публикации АО 04/001369 или АО 04/039827.

Соединение формулы V можно получать при помощи способов, известных специалистам в данной области.

В другом варианте осуществления соединение по настоящему изобретению получают в ходе двухстадийного процесса, как показано на схеме II.

Получение соединения формулы I включает конденсацию соединения формулы II с соединением формулы VII в присутствии средства конденсации в инертном растворителе с помощью способов, известных специалистам в данной области. В качестве альтернативы, соединение формулы УПа, где X представляет собой галогенид, предпочтительно хлор, можно применять для ацилирования формулы II в присутствии подходящего основания с получением соединения формулы I.

Соединение формулы II можно получать алкилированием соединения формулы IV с помощью соединения формулы VI, где Ь представляет собой уходящую группу (например, атом галогена, мезильную или тозильную группу и т.п.), предпочтительно Ь представляет собой тозил.

Реакцию алкилирования можно успешно проводить в инертном органическом полярном растворителе, например, ацетоне, ацетонитриле, Ν,Ν-диметилформамиде, Ν,Ν-диметилацетамиде, диметилсульфоксиде и т.п., предпочтительно в ацетоне в присутствии подходящего основания. Примерами подходящих оснований являются карбонаты щелочных или щелочно-земельных металлов, такие как карбонат калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия и т.п., предпочтительно карбонат калия.

- 4 027831

В еще одном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению получают в ходе двух стадий из соединения формулы II, как показано на схеме III.

Способ получения соединения формулы I включает осуществление реакции соединения формулы IX с фторирующим реагентом в подходящем растворителе.

Примеры фторирующих реагентов включают фтороводородную кислоту (например, водный НР, НР-пиридин), тетрафторид серы (8Р₄), трифторид диметиламиносеры, трифторид диэтиламиносеры (ОЛ8Т). трифторид морфолиносеры, Зе1ееШиог® и т.п. Предпочтительно, фторирование проводят с применением ИЛ8Т в дихлорметановом растворителе.

В целях удобства соединение формулы IX можно получать путем конденсации соединения формулы II с соединением формулы VIII в присутствии инертного основания и/или подходящего катализатора в инертном растворителе с помощью способов, известных специалистам в данной области.

Соединение по настоящему изобретению подвергается высокоэффективному гидролизу до метаболита формулы II, обладающего аналогичной действенностью в ίη νίίτο анализах связывания глюкокортикоидного рецептора. Однако, что удивительно, соединение формулы II было значительно менее сильным, чем соединение по настоящему изобретению на ιη νίνο моделях местного применения для определения противовоспалительной эффективности, таких как отек уха, вызванный кротоновым маслом. Как соединение по настоящему изобретению, так и соединение формулы II подвергаются метаболизму в печени с образованием неактивного метаболита, соединения формулы III. Метаболит формулы III в несколько раз менее сильный, чем соединение по настоящему изобретению и соединение формулы II в т νϊίΓΟ анализах связывания глюкокортикоидного рецептора формулы I составляет 2,3 нМ по сравнению с 2%-ным подавлением при 0,1 мкМ в случае формулы III).

Изобретение проиллюстрировано следующими неограничивающими примерами.

Примеры

Пример 1. 8-[4-(3-Фтор-3-метилбутирилокси)бут-2-инил]6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11 β-гидрокси- 16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоат

- 5 027831

Смесь 6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4диен-17р-тиокарбоновой кислоты (5,0 г, 9,87 ммоль), 4-хлор-1-(3-фтор-3-метилбутирилокси)-бут-2-ина (2,24 г, 10,85 ммоль) и безводного карбоната калия (1,5 г, 10,85 ммоль) в ацетоне (25 мл) перемешивали под защитным слоем азота при 25-30°С в течение 3 ч. Добавляли ΏΜ воду (100 мл) и перемешивали в течение 1 ч при 25-30°С. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и высушивали при 60-65°С. Полученный сухой продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (1% метанол в дихлорметане) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

¹Н ЯМР (400 МГц в СОС1₃), δ: 1,05 (ά, 1=6,99 Гц, 3Н), 1,20 (з, 3Н), 1,36-1,40 (т, 1Н), 1,46 (з, 3Н), 1,51 (з, 3Н), 1,55 (з, 3Н), 1,74-1,98 (т, 3Н), 2,28-2,53 (т, 4Н), 2,68 (ά, 1=17,80 Гц, 2Н), 2,74 (з, 1Н), 3,45 (т, 1Н), 3,66 (ά, 1=16,71 Гц, 1Н), 3,76 (ά, 1=16,61 Гц, 1Н), 4,43 (ά, 1=7,16 Гц, 1Н), 4,54 (ά, 1=15,35 Гц, 1Н), 4,79 (ά, 1=15,32 Гц, 1Н), 5,33-5,49 (т, 1Н), 6,40 (ά, 1=10,16 Гц, 1Н), 6,45 (з, 1Н), 6,50 (Ьг-з, 1Н), 7,12 (ά, 1=3,11 Гц, 1Н), 7,17 (ά, 1=10,09 Гц, 1Н), 7,59 (з, 1Н).

¹³С ЯМР (50,33 МГц в СОС1₃), δ: 16,94 (ς), 17,76 (ς), 18,45 (ΐ), 23,63 (ς, ά, 1=5,36), 27,32 (ς, ά, 1=24,02), 27,53 (ς, ά, 1=23,93), 33,27 (ά, άά, 1χ=19,35, 12=11,08), 34,34 (ΐ, ά, 1=21,56), 34,56 (ΐ), 36,33 (ΐ),

37,18 (ά), 43,47 (ά), 46,26 (ΐ, ά, 1=25,29), 48,77 (з, άά, 1χ=22,37, 12=3,62), 49,98 (з), 53,05 (ΐ), 72,09 (ά, ά, 1=37,06), 76,95 (₈), 82,57 (з), 87,11 (ά, ά, 1=183,92), 93,79 (з, ά, 1=170,16), 97,49 (з), 99,79 (з, ά, 1=177,49), 112,66 (ά), 119,46 (ά), 147,77 (ά), 121,45 (ά, ά, 1=12,80), 130,50 (ά), 144,19 (з), 152,00 (ά), 157,55 (з), 162,67 (з, ά, 1=13,59), 170,06 (з, ά, 1=8,15), 195,00 (з), 186,38 (з).

ΙΚ (КВг), у.см^-1: 3357 (Ьг, т), 2980 (т), 2945 (т), 1727 (з), 1707 (з), 1667 (з), 1622 (т), 1606 (т), 1301 (т), 1176 (т), 992 (т), 771 (т).

Масса: 677,47 масса/заряд [М+Н]+.

Пример 2. 8-(4-Гидрокси-бут-2-инил)6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11 β-гидрокси16а-метил-3 -оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоат

Смесь 6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11 β-гидрокси-16а-метил-3 -оксо-андроста-1,4диен-17р-тиокарбоновой кислоты (34,0 г, 67 ммоль), 4-гидрокси-1-тозилокси-бут-2-ин (17,8 г, 74 ммоль) и безводного карбоната калия (11,11 г, 80 ммоль) в ацетоне (170 мл) перемешивали под защитным слоем азота при 25-30°С в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили ΏΜ водой (500 мл) и перемешивали в течение 1 ч при 25-30°С. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и высушивали при 70-75°С с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

Ή ЯМР (400 МГц в СОС1₃+ПМ8О-О6) δ: 1,02 (ά, 1=7,08 Гц, 3Н), 1,13 (з,3Н), 1,32-1,37 (т, 1Н), 1,55 (з, 3Н), 1,66-2,02 (т, 4Н), 2,07-2,32 (т, 4Н), 3,38-3,41 (т, 1Н), 3,70 (ά, 1=16,32, 1Н), 3,78 (ά, 1=16,35 Гц, 1Н), 4,12-4,15 (т, 2Н), 4,33 (ά, 1=6,37, 1Н), 4,88 (ΐ, 1=5,92, 1Н), 5,14 (т, 1Н), 5,36-5,53 (т, 1Н), 6,29-6,32 (т, 2Н), 6,54 (άά, 1ι=3,47 Гц, 1₂=1,72 Гц, 1Н), 7,11 (ά, 1=3,46, 1Н), 7,25 (ά, 1=10,45 Гц, 1Н), 7,66 (т, 1Н).

¹³С ЯМР (50,33 МГц в СОС1₃), δ: 15,79 (ς), 16,70 (ς), 17,70 (ΐ), 22,66 (ς, ά, 1=5,34 Гц), 32,10 (ά, άά, 1χ=18,93 Гц, 12=11,02 Гц), 33,36 (ΐ, ά, 1=19,73 Гц), 33,36 (ΐ), 34,98 (ΐ), 36,02 (ά), 42,77 (ά), 47,69 (з, άά, 1ι=21,39 Гц, 1₂=2,66 Гц), 48,85 (з), 49,18 (ΐ), 70,31 (ά, ά, 1=36,22 Гц), 78,09 (з), 82,39 (з), 86,15 (ά, ά, 1=182,76 Гц), 96,64 (з), 99,12 (з, ά, 1=177,5 Гц), 111,78 (ά), 118,39 (ά), 120,01 (ά, ά, 1=12,79 Гц), 129,14 (ά), 143,15 (з), 146,94 (ά), 151,07 (ά), 156,31 (з), 161,73 (з, ά, 1=12,73 Гц), 184,70 (з), 194,35 (з).

ΙΚ (КВг), у.см^-1: 3546 (т), 3341 (т), 2982 (т), 2959 (т), 2936 (т), 2878 (т), 1701 (з), 1682 (з), 1657 (з), 1614 (з), 1577 (т), 1471 (з), 1393 (т), 1171 (з), 1119 (з), 1073 (з), 1019 (т), 991 (т), 891 (з).

Масса: 575,5 масса/заряд [М+Н]+.

Пример 3. 8-[4-(3-Гидрокси-3-метилбутирилокси)-бут-2-инил]-6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11 β-гидрокси-16а-метил-3 -оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоат

- 6 027831

К перемешиваемой смеси 8-(4-гидрокси-бут-2-инил)-6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоата (4,0 г, 6,96 ммоль), 3-гидрокси-3метилмасляной кислоты (1,23 г, 10,4 ммоль) и триэтиламина (2,9 мл, 20,8 ммоль) в сухом дихлорметане (50 мл) добавляли (бензтриазол-1-илокси)трис-(диметиламино)фосфония гексафторфосфат (ВОР) (4,6 г, 10,4 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь выливали в ΌΜ воду (100 мл), органический слой отделяли, промывали последовательно ΌΜ водой и насыщенным раствором хлорида натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

¹Н ЯМР (400 МГц в (ПСЕ) δ: 1,05 (ά, 1=7,09 Гц, 3Н), 1,17 (к, 3Н), 1,30 (к, 3Н), 1,32 (к, 3Н), 1,35-1,40 (т, 1Н), 1,55 (к, 3Н), 1,65-1,95 (т, 3Н), 2,28-2,51 (т,4Н), 2,53 (к, 2Н), 3,32 (к, 1Н), 3,38 (к, 1Н), 3,41-3,45 (т, 1Н), 3,68 (ά, 1=16,75 Гц, 1Н), 3,76 (ά, 1=16,75 Гц, 1Н), 4,43 (ά, 1=8,18 Гц, 1Н), 4,69 (к, 1Н), 5,32-5,49 (т, 1Н), 6,39 (άά, 1ι=10,79 Гц, 1₂=1,23 Гц, 1Н), 6,45 (к, 1Н), 6,50 (άά, 1ι=3,15 Гц, 1₂=1,40 Гц, 1Н), 7,12 (ά, 1=3,36 Гц, 1Н), 7,16 (ά, 1=10,12 Гц, 1Н), 7,59 (к, 1Н).

Масса: 674,93 масса/заряд [М+Н]+.

Пример 4. 8-[4-(3-Фтор-3-метилбутирилокси)-бут-2-инил]-6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонил-окси-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоат

К перемешиваемому раствору 8-[4-(3-гидрокси-3-метилбутирилокси)-бут-2-инил]-6а,9а-дифтор17а-(фуран-2-ил)-карбонилокси-11 β-гидрокси-16а-метил-3 -оксоандроста- 1,4-диен- 17β -карботиоата (3,2 г, 4,74 ммоль) в сухом дихлорметане (25 мл) добавляли Ν,Ν-диэтиламиносеры трифторид (ΌΆ3Τ) (0,992 г, 6,15 ммоль) и смесь перемешивали при 25-30°С в течение 1,5 ч. Гасили ΌΜ водой (100 мл), отделяли органический слой и последовательно промывали ΌΜ водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Концентрирование в вакууме и очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (1% метанол в дихлорметане) давали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.

Пример 5. 8-[4-(3-Фтор-3-метилбутирилокси)-бут-2-инил]-6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси-11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоат

К перемешиваемой смеси 8-(4-гидрокси-бут-2-инил)-6а,9а-дифтор-17а-(фуран-2-ил)карбонилокси11в-гидрокси-16а-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17в-карботиоата (0,59 г, 1 ммоль), 3-фтор-3метилмасляной кислоты (0,25 г, 2 ммоль) и 4-(диметиламино)пиридина (0,025 г, 0,2 ммоль) в сухом ацетонитриле (20 мл) добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида гидрохлорид (БОС НС1) (0,79 г, 4,1 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили ΌΜ водой (100 мл), продукт экстрагировали в этилацетат (100 мл), промывали последовательно ΌΜ водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Концентрирование при пониженном давлении и очистка остатка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (1% метанол в дихлорметане) давали указанное в заголовке соединение в виде грязно-белого твердого вещества.

- 7 027831

Фармакологические данные.

Пример 6. Анализы связывания стероидного рецептора.

Активность исследуемых соединений в отношении глюкокортикоидного рецептора оценивали с применением анализов связывания радиолиганда. Человеческие клетки НеЬа, трансфицированые глюкокортикоидными рецепторами, инкубировали с [³Н]дексаметазоном при 25°С в течение 2 ч в инкубационной среде ΚΡΜΙ-1640, 10 нМ НЕРЕ8, рН 7,2, в отсутствие или в присутствии исследуемых соединений при концентрации 3 и/или 10 нМ. Свободный [³Н]дексаметазон удаляли из среды центрифугированием и концентрацию связанного с рецептором лиганда определяли в супернатанте с помощью подсчета импульсов в жидкой фазе.

Параллельно, как эталонное соединение, исследовали дексаметазон, что было неотъемлемой частью каждого анализа для обеспечения валидности полученных результатов. % подавления определяли с применением одной концентрации исследуемого соединения и соответствующего лиганда с радиоактивной меткой. Результаты представлены в виде процента подавления специфического связывания. Значения представляют собой среднее результатов двух повторностей для каждой концентрации.

Для определения связывания соединения по настоящему изобретению с другими родственными стероидными рецепторами применяли клонированные рецепторы из клеток, указанных в скобках: эстрогеновый Ега/Είβ и прогестероновый (человеческий рекомбинантный из клеток насекомых 819), тестостероновый (человеческий из ЬпСЛР) и альдостероновый (почка крысы линии Вистар).

Таблица 1. Тест связывания глюкокортикоидного рецептора человека (ίη νίΐίο)

Соединение	1С₅₀	К
Формула I	2,3 нМ	1,24 нМ
Дексаметазон	4,71 нМ	2,54 нМ

Таблица 2. Тест связывания стероидного рецептора (ίη νότο)

Соединение	Класс рецептора/Тип	Вид	1С₅₀	К
Формула I	Альдостероновый	Крыса	328 нМ	256 нМ
Прогестероновый	Человек	8,52 нМ	3,29 нМ
Прогестероновый	Корова	39,4 нМ	5,14 нМ
Эстрогеновый Ега	Человек	Отсутствует значимое связывание при 100 нМ	-
Эстрогеновый Ετβ	Человек	Отсутствует значимое связывание при 100 нМ	-
Т естостероновый	Крыса	Отсутствует значимое связывание при 100 нМ	-

В указанном выше ίη νότο исследовании связывания рецептора соединение по настоящему изобретению показало хорошую действенность и селективность в отношении глюкокортикоидного рецептора человека по сравнению с другими стероидными рецепторами, такими как альдостероновый, эстрогеновый, прогестероновый и тестостероновый рецепторы (см. табл. 1 и 2).

Пример 7. Отек уха, вызванный кротоновым маслом.

Мышей (самцы, СИ-1) распределяли в разные группы. Применяли метод, аналогичный описываемому в литературе. Исследуемые соединения растворяли в растворе пиридин:вода:ацетон (4:2:14), 10 мкл этого раствора соединения или раствор растворителя наносили на левое ухо мышей. Одновременно на правое ухо каждой мыши наносили 10 мкл раствора пиридин:вода:ацетон (4:2:14). Через 2 ч после нанесения соединения или растворителя на левое ухо всем животным наносили 10 мкл раствора кротонового масла. Через 6 ч обработки кротоновым маслом животных умерщвляли; уши вырезали и взвешивали по отдельности.

- 8 027831

Таблица 3. Тест на отек уха, вызванный кротоновым маслом

Соединение	Подавление отека уха (%)
Формула I	75,5 (1 мкг)
Флутиказона пропионат	81,09 (1,6 мкг)
Дексаметазон	50,05 (1,6 мкг)

Соединение по настоящему изобретению проявляло значительное подавление отека уха при более низкой дозе.

Пример 8. Гранулема вокруг ватного шарика.

Крыс линии Спрег-Доули применяли для оценки противовоспалительной активности исследуемого соединения с применением метода с образованием гранулемы вокруг ватного шарика. Готовили стерильные ватные шарики весом 20 мг. Исследуемые соединения растворяли в ацетоне для получения необходимого количества для каждого ватного шарика в 500 мкл. Различные шарики пропитывали 500 мкл ацетона, чтобы они содержали необходимого количества исследуемых соединений и оставляли высыхать. Шарики контроля растворителем пропитывали 500 мкл ацетона. Крыс распределяли в разные группы. По два ватных шарика хирургическим путем имплантировали в лопаточную область каждой крысы. На шестой день после такой имплантации шарики вместе с гранулемой извлекали. У каждого животного также отделяли и взвешивали вилочковую железу. Шарики с гранулемой сушили в течение 20 ч при 60°С и взвешивали. Рассчитывали средний вес сухой гранулемы и вилочковой железы, прибавку массы тела/100 г массы тела.

Таблица 4. Исследование образования гранулемы вокруг ватного шарика

Соединение	Доза (мкг/шарик)	Средний % подавления гранулемы А	Масса вилочковой железы (% уменьшения) В	Соотношение А/В*
Формула I	100	58,13	4,67	12,44
Циклезонид	100	63,38	15,16	4,18
Флутиказона пропионат	100	66,04	73,56	0,89

*Отношение А/В характеризует показатель индекса безопасности.

В вышеуказанной модели гранулемы вокруг ватного шарика маркеры системных побочных действий, такие как инволюция вилочковой железы и увеличение массы тела, были незначительными даже при уровнях доз 100 мкг на шарик. Индекс безопасности для соединения по настоящему изобретению, измеренный как отношение подавления гранулемы к степени инволюции вилочковой железы, намного превосходил продаваемые кортикостероиды для местного применения, такие как циклезонид и флутиказона пропионат.

Пример 9. Атрофия кожи и системные побочные действия у крыс при местном нанесении.

Самцов крыс линии Спрег-Доули подвергали легкой анестезии изофлураном. На спине отмечали билатерально парные участки, по одному на каждой стороне боковой поверхности тела. На один из участков наносили соответствующую дозу соединения по настоящему изобретению и флутиказона пропионата, растворенных в ацетоне, ежедневно в течение периода 14 дней. Контралатеральный участок служил в качестве контроля, обрабатываемого растворителем, и его обрабатывали ацетоном. Массу тела регистрировали в 0-14 дни. В день 15, через двадцать четыре часа после последних нанесений, собирали кровь из хвостовой вены для проведения общего анализа крови и определения лейкоцитарной формулы. Животных умерщвляли и кожу из бритой области пробивали на полную толщину с получением пробок диаметром 15 мм. Подкожный жир и мышцы удаляли и пробки, полученные с помощью пробивки, взвешивали. Массу вилочковой железы каждого животного также определяли в качестве маркера системной кортикостероидной активности.

- 9 027831

Таблица 5. Влияние кожного нанесения соединения формулы I и флутиказона пропионата в течение 2 недель на толщину кожи, массу вилочковой железы, увеличение массы тела и количество лейкоцитов у крыс

Обработка	Доза (мкг/уча сток)	% подавления	% увеличения массы тела
Масса кожи	Вилоч- ковая железа	Общее количество лейкоцитов	Лимфо- циты	Нейтро- филы
Растворитель	-	-	-				72,4
формула I	6	0,0	0,0	0,0	0,0	0,0	82,4
18	0,0	0,0	0,6	0,0	0,0	80,8
60	0,0	0,0	0,0	0,0	0,0	75,6
180	0,0	0,0	0,0	0,0	0,6	80,4
Флутиказона пропионат	6	25,3	2,0	31,4	31,7	25,8	68,1
18	20,8	5,4	17,5	15,9	24,5	67,4
60	27,9	23,0	15,2	15,6	14,5	61,9
180	30,0	55,0	32,7	34,1	24,6	42,5

Значения подавления в сравнении с массой органа или количеством кровяных клеток в группе с обработкой растворителем. Все значения в группе с обработкой соединением формулы I не были статистически значимыми при сравнении с контрольными группами с обработкой растворителем.

При оценке на указанных выше животных моделях локальных и системных побочных действий при кожном нанесении соединение по настоящему изобретению не вызывает ни атрофию кожи, ни системный иммуносупрессорный эффект при дозах до 180 мкг, в отличие от флутиказона пропионата, применяемого в качестве эталонного кортикостероида. Изменение массы вилочковой железы является показателем системной активности и, тем самым, токсичности. Чем меньше масса вилочковой железы, тем выше системная токсичность. Из данных, приведенных в табл. 5, видно, что кожное нанесение соединения по настоящему изобретению в течение 2 недель не вызывало какого-либо снижения массы вилочковой железы даже при высоких дозах, что свидетельствует о том, что соединения по настоящему изобретению обладают гораздо меньшей системной активностью.

Пример 10. ЗерЬабех®-индуцированный отек легких у крыс линии Спрег-Доули.

ЗерЬабех® 0-200 готовили в стерильном солевом растворе (10 мг/мл) и оставляли набухать в течение по меньшей мере 3 дней при комнатной температуре. Исследуемые соединения вводили интратрахеально за 24 и 2 ч до интратрахеального введения ЗерЬабех® (5 мг/кг) под действием легкой эфирной анестезии. Животным из группы контроля растворителем вместо ЗерЬабех® вводили растворитель. Через 24 ч после инстилляции ЗерЬабех® у каждого животного вырезали и взвешивали легкие и вилочковую железу. Массу легких и вилочковой железы корректировали из расчета начальной массы тела в 100 г. Рассчитывали процентную долю увеличения массы легких, вызванного ЗерЬабех®, и его подавление с помощью соединений. Также рассчитывали процентную долю снижения массы вилочковой железы по сравнению с группой контроля растворителем.

Таблица 6. Индекс безопасности для соединений на модели отека легких, вызванного ЗерЬабех®, у крыс линии Спрег-Доули

Соединение	Εϋξο подавления отека легких (мг/кг, ΐ.ί.)	Εϋδο инволюции вилочковой железы (мг/кг, ΐ.ί.)	Индекс безопасности ЕИ₅₀ инволюции вилочковой железы/ ЕИ₅₀ отека легких
Формула I	0,094	8,70	92,55
Циклезонид	0,388	3,13	8,07
Будезонид	0,101	0,68	6,73
Флутиказона пропионат	0,086	0,36	4,19

На указанной выше животной модели воспалительного процесса в легких, а именно модели Зерйабех®-индуцированного воспалительного процесса в легких, установили, что соединение по настоящему изобретению либо превосходит, либо является сравнимым по эффективности по сравнению с эта- 10 027831 лонными кортикостероидами, такими как будезонид, циклезонид и флутиказона пропионат. Кроме того, с точки зрения системного профиля безопасности (в качестве маркера применяли инволюцию вилочковой железы), соединение по настоящему изобретению, что удивительно, намного превосходило эти эталонные лекарственные средства, тем самым демонстрируя относительно высокий индекс безопасности (отношение эффективности к побочному действию, т.е. разграничение локальной противовоспалительной активности и системной активности). Установили, что индекс безопасности соединения по настоящему изобретению в несколько раз превышает таковой флутиказона пропионата.

Пример 11. Отложение гликогена в печени у крыс.

У самцов крыс линии Спрег-Доули весом 190-220 г проводили двустороннюю адреналэктомию, и надпочечники хранили в 0,9% солевом растворе на протяжении всего эксперимента. В день 5 и 6 после адреналэктомии животных распределяли в разные группы, исследуемые соединения, приготовленные в холодном солевом растворе (подвергали воздействию ультразвука на протяжении 30 мин), закапывали интратрахеально в виде 2 доз из расчета 3 мг/кг с интервалом 24 ч. Через 15 ч после последней обработки животных умерщвляли и печень вырезали и взвешивали. Содержание гликогена в печени определяли при помощи антронного метода. Вкратце, навеску печеночной ткани гомогенизировали с 5% трихлоруксусной кислотой, супернатант смешивали с этанолом и выдерживали в течение ночи для осаждения. Гликоген, экстрагированный таким образом, оценивали в виде глюкозы, образованной после кислотного гидролиза, с добавлением антронового реагента при 620 нм. Содержание гликогена выражали в виде мг/100 г печени.

Таблица 7. Отложение гликогена в печени у крыс

Соединение	Доза (мг/кг)	Содержание гликогена (мг/100 г печени)	% снижения массы вилочковой железы
Формула I	3	10,68	26,15
Флутиказона пропионат	3	1514,65	70,17
Мометазона фуроат	3	1117,32	43,51
Будезонид	3	552,77	65,02
Циклезонид	3	263,96	61,34

В указанном выше исследовании отсутствие нежелательных системных побочных действий у соединения по настоящему изобретению дополнительно продемонстрировали путем измерения отложения гликогена в печени у крыс после интратрахеального введения. Отложение гликогена в печени, которое является показателем метаболического системного побочного действия глюкокортикоидов, в случае соединения по настоящему изобретению было крайне незначительным, по сравнению с таковым у эталонных кортикостероидов, таких как будезонид, циклезонид и флутиказона пропионат. Это явно демонстрирует минимальную системную токсичность и сильную противовоспалительную активность соединения по настоящему изобретению.

Пример 12. Подавление овальбумин-индуцированной проницаемости носовых сосудов у морских свинок.

Аллергический ринит индуцировали путем сенсибилизации с помощью внутрибрюшинной инъекции овальбумина (100 мкг/0,5 мл/животное), суспендированного в геле гидроксида алюминия, еженедельно в течение 4 недель, с последующей местной инстилляцией 60 мг/мл раствора овальбумина из расчета 20 мкл/ноздрю. Успешно сенсибилизированным животным из соответствующей группы в обе ноздри закапывали по 40 мкл соединения формулы I (0,0714%), циклезонида (0,0714%) и плацебо и через восемь часов животных анестезировали пентобарбиталом натрия (50 мг/кг, ί.ρ.). На пищевод накладывали лигатуру, а полость рта заполняли биоадгезивом. Для осуществления самостоятельного дыхания проводили трахеотомию, а в носоглотку вводили катетер, соединенный с перфузионной насосной установкой, установленной на скорость подачи 0,25 мл/мин. Синий краситель Эванса (3% вес./об., 1 мл/кг) вводили внутривенно. Осуществляли перфузию носовой полости овальбумином (1%) в течение 10 мин и физиологическим раствором в течение 50 мин. Перфузат собирали в течение 60 мин. Супернатант перфузата оценивали на содержание красителя посредством спектрофотометрии при 620 нм. Транссудацию синего красителя Эванса после внутривенного введения отслеживали в качестве маркера проницаемости сосудов. Рассчитывали общий объем просачивания красителя в носовую полость за период времени 60 мин. Интраназальное введение состава с соединением формулы I для назального применения в дозе 28,56 мкг/ноздрю за 8 ч до провокационной пробы с овальбумином снижало овальбумин-индуцированное просачивание красителя. Эталонный состав циклезонида также вызывал подавление просачивания красителя, подобно составу с соединением формулы I для назального применения. Эти результаты представлены на фиг. 1.

Пример 13. Подавление овальбумин-индуцированного повышения внутриносового давления у мор- 11 027831 ских свинок.

Животных, сенсибилизированных овальбумином, как описано выше, использовали для экспериментов по определению внутриносового давления. Интраназальную инстилляцию соединения формулы I, флутиказона пропионата или плацебо производили за 24 и 2 ч до провокационной пробы с овальбумином. В носоглотку вводили катетер с РЕ-канюлей, один конец которой был прикреплен к датчику давления и другой к распылителю. Овальбумин (5%) распыляли в носовую полость в течение 10 мин. Изменения внутриносового давлении регистрировали в течение следующих 45 мин и рассчитывали разность давления (6Р). Соединение формулы I и флутиказона пропионат приводили к эквивалентному подавлению повышения внутриносового давления, как показано на фиг. 2.

Таким образом, с помощью указанных выше ίη νίνο моделей аллергического воспаления верхних дыхательных путей, таких как овальбумин-индуцированная проницаемость сосудов и овальбумининдуцированное повышение внутриносового давления у сенсибилизированных морских свинок, установили, что соединение по настоящему изобретению обладает эффективностью, сравнимой с таковой продаваемых кортикостероидов для местного применения, таких как циклезонид и флутиказона пропионат.

Пример 14. Эффективность при аллерген-индуцированном конъюнктивите у морских свинок.

В этих экспериментах применяли морских свинок, сенсибилизированных внутрибрюшинным введением овальбумина (100 мкг/животное, гидроксид алюминия в качестве адъюванта). Две дозы соединения формулы I, лотепреднола этабонат, преднизолона ацетат или плацебо закапывали в правый глаз разных морских свинок с интервалом 3 ч. Через два часа после второй инстилляции стероидных составов через яремную вену вводили синий краситель Эванса (0,5%, 4 мл/кг, ί.ν.) и непосредственно после этого глаз подвергали провокационной пробе с овальбумином, веки удаляли, краситель экстрагировали с применением 5 мл раствора ацетона и сульфата натрия и его количество определяли с помощью спектрофотометрии при 620 нм (результаты представлены на фиг. 3. Влияние на овальбумин-индуцированную проницаемость сосудов конъюнктивы у морских свинок).

В указанной выше животной модели для аллергического глазного воспаления, а именно аллергениндуцированного конъюнктивита у морских свинок, соединение по настоящему изобретению показало эффективность, сравнимую с эталонными применяемыми в офтальмологии кортикостероидами, такими как лотепредола этабонат и преднизолон.

Пример 15. Влияние на внутриглазное давление (ЮР) у кроликов.

Глазную инстилляцию 40 мкл соединения формулы I, лотепреднола этабоната, дексаметазона натрия фосфата и плацебо выполняли у различных групп животных, 10 инстилляции в сутки с интервалом 1 ч в течение 10 дней. Измерение ЮР проводили через 1 ч после инстилляции последней дозы (результаты представлены на фиг. 4. Влияние применяемых в офтальмологии стероидов на ЮР у кроликов).

В случае соединения по настоящему изобретению, соответствующего приведенному выше в исследовании, повышение внутриглазного давления (ЮР), побочное действие сильных применяемых в офтальмологии кортикостероидов, было незначительным (по сравнению с плацебо) по сравнению с эталонными кортикостероидами дексаметазоном и преднизолоном. Кроме того, при введении с помощью интраназального пути сенсибилизированным аллергеном животным повышение аллерген-индуцированного внутриносового давления, показателя интраназальной устойчивости, подавляется под действием соединения по настоящему изобретению.

Пример 16. Эффективность и безопасность при интраназальном введении.

Данное исследование проводили для определения эффективности и безопасности соединения по настоящему изобретению при интраназальном пути ведения на модели сезонного аллергического ринита. Оно представляло собой одноцентровое, рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое исследование на параллельных группах.

Цель. Целью исследования была оценка эффективности и безопасности соединения по настоящему изобретению при интраназальном пути введения по сравнению с плацебо в облегчении признаков и симптомов сезонного аллергического ринита на модели с камерой воздействия факторов окружающей среды (ЕЕС) после 2 недель лечения.

Методы. В это исследование включали пациентов, мужчин и женщин, в возрасте 18-65 лет с сезонным аллергическим ринитом в анамнезе и положительной кожной инъекционной пробой на Όαοίνΐίδ §1отега1е не позднее 12 месяцев до скрининга, а также баллом по ΤΝδδ >6 по меньшей мере один раз во время 2-часового скрининга в ЕЕС. В исследование включали всего 159 пациентов и всего 154 пациентов рассматривали в анализе эффективности. 39 пациентов получали 200 мкг (100 мкг ВГО), 37 пациентов получали 400 мкг (200 мкг ВГО), 39 пациентов получали 800 мкг (400 мкг ВГО) соединения по настоящему изобретению посредством назального пути введения и 39 пациентов получали растворитель в качестве плацебо.

Первичной конечной точкой оценки эффективности было изменение ΤΝδδ (балла по шкале общей тяжести симптомов ринита) в условиях 4-часовой провокационной пробы с пыльцой Όαοίνΐίδ §1отега1е в ЕЕС от исходного уровня в день 15/16. ΤΝδδ рассчитывали как сумму согласно 4-балльной шкале тяжести (0 = отсутствует, 1 = слабый, 2 = умеренный и 3 = сильный) для каждого симптома (заложенность носа, ринорея, зуд в носу и чихание).

- 12 027831

Вторичной конечной точкой оценки эффективности было изменение у подшкал ΤΝ88 и изменение количества носового секрета в условиях 4-часовой провокационной пробы при окружающих условиях в ЕЕС от исходного уровня к дню 15/16. Конечной точкой оценки безопасности служила частота вызванных лечением нежелательных явлений.

Результаты показали, что значительное отличие в профиле безопасности соединения по настоящему изобретению и плацебо отсутствовало. Все дозы соединения по настоящему изобретению статистически значимо превосходили плацебо в отношении всех первичных и вторичных конечных точек оценки эффективности, и соединение по настоящему изобретению было безопасным и эффективным для лечения сезонного аллергического ринита.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы I
2. Способ лечения или облегчения воспалительных состояний или симптомов, связанных с заболеванием, выбранным из группы, включающей сезонный аллергический ринит, круглогодичный аллергический ринит, круглогодичный неаллергический ринит, хронический синусит, рецидивирующий синусит, носовые полипы, у человека, включающий интраназальное введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I
3. Способ по п.2, где соединение формулы I вводят в суточной интраназальной дозе в диапазоне от 0,01 до 2,5 мг.
4. Способ по п.2, где соединение формулы I вводят в суточной интраназальной дозе в диапазоне от 0,05 до 1,0 мг.
5. Способ лечения или облегчения воспалительных состояний или симптомов, связанных с дыхательными нарушениями, выбранными из группы, включающей аллергические, неаллергические и/или воспалительные заболевания верхних или нижних воздухоносных путей или легких, такие как астма, хроническое обструктивное заболевание легких, бронхиолит, круп, бронхолегочная дисплазия, интерстициальная болезнь легких, у человека, включающий введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи ингаляционного пути введения
6. Способ лечения или облегчения воспалительных состояний или симптомов, связанных с кожными нарушениями, выбранными из группы, включающей экзему, псориаз, аллергический дерматит, контактный дерматит, зуд и реакции гиперчувствительности, у человека, включающий введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи местного пути введения

- 13 027831
7. Способ лечения или облегчения воспалительных состояний или симптомов, связанных с системными воспалительными нарушениями, выбранными из группы, включающей синдром раздраженного кишечника (ΙΒ8), воспалительные состояния кишечника, такие как язвенный колит, болезнь Крона, остеоартрит или аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, у человека, включающий введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи перорального или парентерального пути введения
8. Способ лечения или облегчения воспалительных состояний или симптомов, связанных с глазными или отоларингологическими воспалительными нарушениями, выбранными из группы, включающей сезонный/круглогодичный аллергический конъюнктивит, кератит, весенний кератоконъюнктивит, атопический кератоконъюнктивит, конъюнктивит с гиперплазией сосочков, дерматоконъюктивит, пингвекулу, блефарит и эписклерит, у человека, включающий введение указанному человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I при помощи местного пути введения
9. Способ получения соединения формулы I, включающий алкилирование соединения формулы IV с помощью алкинового фрагмента формулы V где в соединении формулы V Ь представляет собой уходящую группу.
10. Способ получения соединения формулы I, включающий: а) алкилирование соединения формулы IV с помощью соединения формулы VI

- 14 027831 /-=-\ ι_ он формула VI ?

где Ь представляет собой уходящую группу, с получением соединения формулы II и

Ь) обработку соединения формулы II соединением формулы VIIа формула УПа где X представляет собой атом галогена.
11. Способ получения соединения формулы I, включающий: а) ацилирование соединения формулы II с помощью соединения формулы VIII формула ΥΙΠ с получением соединения формулы IX формула IX и

Ь) фторирование соединения формулы IX.

- 15 027831 □ Несенсибилизированные ЁЭ Сенсибилизированные плацебо

Н Сенсибилизированные назальным спреем соединения формулы I (0,0714%)

Θ Сенсибилизированные назальным спреем циклезонида (0,0714%)

Каждый столбик представляет собой среднее ±8.ϋ. от 6 животных.

Значимое отличие по сравнению с несенсибилизированным контролем.

^Значимое отличие по сравнению с сенсибилизированным контролем, р <0,05, ΑΝΟνΑ с последующим критерием Даннета.

Фиг. 1 формула I - 0,1%, лотепреднол - 0,2%, преднизолон - 1% - 2 часа иформула I - 0,2%, лотепреднол - 0,2%, преднизолон - 1% - 12 часов