EA017697B1 - Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства - Google Patents

Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства Download PDF

Info

Publication number
EA017697B1
EA017697B1 EA200901459A EA200901459A EA017697B1 EA 017697 B1 EA017697 B1 EA 017697B1 EA 200901459 A EA200901459 A EA 200901459A EA 200901459 A EA200901459 A EA 200901459A EA 017697 B1 EA017697 B1 EA 017697B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
amino acid
group
reconstructed
surfactant according
acid residue
Prior art date
Application number
EA200901459A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200901459A1 (ru
Inventor
Ян Йоханссон
Торе Курстедт
Бенгт Робертсон
Original Assignee
КЬЕЗИ ФАРМАЧЕУТИЧИ С.п.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by КЬЕЗИ ФАРМАЧЕУТИЧИ С.п.А. filed Critical КЬЕЗИ ФАРМАЧЕУТИЧИ С.п.А.
Publication of EA200901459A1 publication Critical patent/EA200901459A1/ru
Publication of EA017697B1 publication Critical patent/EA017697B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/785—Alveolar surfactant peptides; Pulmonary surfactant peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Fire-Extinguishing Compositions (AREA)
  • Emulsifying, Dispersing, Foam-Producing Or Wetting Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель, полипептидный аналог природного поверхностно-активного белка SP-C и полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка. Изобретение также относится к содержащим его фармацевтическим композициям и его применению для профилактики и/или лечения RDS (респираторного дистресс-сидрома) и других респираторных расстройств.

Description

Данное изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию конкретных полипептидных аналогов природного поверхностно-активного белка 8Р-С с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка.
Изобретение также относится к соответствующим фармацевтическим композициям и их применению для профилактики и/или лечения КП8 и других респираторных расстройств.
Предшествующий уровень техники
Человеческое легкое состоит из большого числа маленьких воздушных мешочков, называемых альвеолами, в которых газы обмениваются между кровью и воздушными пространствами в легких. У здоровых индивидуумов этот обмен опосредуется присутствием белоксодержащего поверхностно-активного комплекса, который предохраняет легкие от коллапса в конце выдоха.
Поверхностно-активный комплекс легких состоит, главным образом, из липида и содержит незначительные количества различных белков. Отсутствие достаточных уровней этого комплекса приводит к дисфункции легкого. Этот синдром называется респираторным дистресс-синдромом (КЭ8 от англ. К.езр1га!огу И181ге88 8упбготе) и обычно поражает недоношенных младенцев.
Указанный синдром эффективно лечат препаратами модифицированных природных поверхностноактивных веществ, экстрагированными из легких животных.
Имеющиеся в продаже препараты модифицированных поверхностно-активных веществ, например СиговигГ, получены из легкого свиньи, 1пГа8игГ экстрагирован из легочного лаважа теленка и 8игуаи1а представляет собой химически модифицированный натуральный экстракт легкого крупного рогатого скота.
Основными компонентами этих препаратов поверхностно-активных веществ являются фосфолипиды, такие как 1,2-дипальмитоил-зп-глицеро-3-фосфохолин, широко известный как дипалмитоилфосфатидилхолин (ИРРС), фосфотидилглицерин (РС) и поверхностно-активные гидрофобные белки В и С (8Р-В и 8Р-С).
Вследствие недостатков препаратов поверхностно-активных веществ из животных тканей, таких как сложные процессы производства и стерилизации и возможная индукция иммунных реакций, были разработаны синтетические поверхностно-активные вещества, имитирующие композицию модифицированных природных поверхностно-активных веществ.
Указанные синтетические поверхностно-активные вещества известны как реконструированные поверхностно-активные вещества.
Однако оказалось, что разработка клинически активных реконструированных поверхностноактивных веществ является сложной, поскольку природные гидрофобные белки слишком велики для синтеза, имеют сложную структуру и нестабильны в чистой форме.
С целью замены указанных природных гидрофобных белков некоторые синтетические полипептиды, частично соответствующие их последовательностям, и их аналоги были предложены в предшествующем уровне техники и раскрыты, например, в АО 89/06657, АО 92/22315, АО 95/32992, И8 6660833, ЕР 413957, АО 91/18015 и АО 00/47623.
Однако согласно имеющейся литературе в исследованиях на животных обработка реконструированными поверхностно-активными веществами дает в результате недостаточные объемы газа в легких и степень раскрытия альвеол в конце выдоха и требуется вентиляция с положительным давлением в конце выдоха (РЕЕР) с целью достижения активности ίη νίνο, сравнимой с той, которая достигается с помощью модифицированных природных поверхностно-активных веществ (1ойап88оп 1. е! а1. 1. Арр1 Р11у8ю1. 2003, 95, 2055-2063; ϋονΐδ АД. е! а1. Ат 1. Веврй. Сгй Саге Меб. 1998; 157, 553-559).
Имеющиеся в продаже препараты реконструированных поверхностно-активных веществ действительно не способны образовывать стабильную фосфолипидную пленку в альвеолах в конце выдоха.
Поэтому до сих пор существует неудовлетворенная потребность в реконструированном поверхностно-активном веществе с улучшенными свойствами в отношении растяжимости легкого.
В частности, существует потребность в препарате реконструированного поверхностно-активного вещества, который способен обеспечивать альвеолярную стабильность и таким образом поддерживать альвеолярную стабильность в конце выдоха без необходимости вентиляции с РЕЕР.
В настоящее время было обнаружено и это является предметом настоящего изобретения, что конкретные полипептидные аналоги природного белка 8Р-С предпочтительно могут быть объединены с конкретными полипептидами, содержащими последовательность с изменяющимся числом гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одним основным аминокислотным остатком, с целью создания препарата реконструированного поверхностно-активного вещества с улучшенными свойствами в отношении растяжимости легкого и, в частности, в отношении способности эффективно поддерживать раскрытое состояние альвеол в конце выдоха без потребности в вентиляции с РЕЕР.
В модели РЭ8. в которой недоношенных новорожденных обрабатывали экзогенными препаратами поверхностно-активных веществ без применения РЕЕР, комбинация указанных полипептидов влияет на объемы газа в легких, которые являются показателем проходимости альвеол в конце выдоха.
- 1 017697
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию конкретных полипептидных аналогов природного поверхностно-активного белка 8Р-С с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8, предпочтительно от 4 до 5, и одного основного аминокислотного остатка.
В частности, изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему:
а) липидный носитель;
б) полипептид из по меньшей мере 20 аминокислотных остатков и не более чем 40 аминокислотных остатков, имеющих последовательность, представленную общей формулой:
Ее<Эе1АЗдЗРУН1.КР!ХаВХ1)(ЭА110р(Зр1.р (I) где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, Ь и иЬ;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К, К, Η, А, Ρ, Υ и Огп;
возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, предпочтительно 16 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;
Ω представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М, окисленного по атому серы, I, Ь и пЬ;
а представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 8;
Ь представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 19;
е, ί, д и р представляют собой целые числа, имеющие значение 0 или 1;
при условии, что ХаВХЬ представляет собой последовательность, имеющую максимум 22 аминокислоты;
в) полипептид из по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более чем 60 аминокислотных остатков, содержащий последовательность, представленную общей формулой (II) в<иав)х (Н) где и представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из Ь, I, пЬ, V, А, М и Ρ;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К, К, Н и Огп;
а представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 8, предпочтительно от 4 до 5;
х представляет собой целое число, имеющее значение от 2 до 6, предпочтительно от 3 до 4.
Изобретение также включает фармацевтически приемлемые соли указанных полипептидов и их производные с защищенными Ν- и С-концами, например, посредством ацетилирования и амидирования.
В изобретении также предложены фармацевтические композиции, содержащие реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению.
Кроме того, изобретение относится к применению описанного выше реконструированного поверхностно-активного вещества в качестве лекарственного средства.
В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к применению описанного выше реконструированного поверхностно-активного вещества для профилактики и/или для лечения респираторного дистресс-синдрома у недоношенных детей, заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, и других респираторных расстройств.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу предупреждения и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (КБ8) у недоношенных детей, других заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, и других респираторных расстройств, включающему введение эффективного количества описанного выше реконструированного поверхностноактивного вещества.
Описание графических материалов
На фиг. 1 показана аминокислотная последовательность человеческого белка 8Р-С; Сук остатки пальмитоилированы в нативном 8Р-С;
на фиг. 2 представлено изображение витка спирали полипептида КЬ4; основные аминокислотные остатки обведены кружками;
на фиг. 3 представлены данные в виде объемов газа в легких (мл/кг);
на фиг. 4 представлены данные в виде дыхательных объемов (мл/кг) в зависимости от времени/давления.
Определения
Респираторную функцию после обработки ш νίνο препаратами экзогенных поверхностно-активных веществ определяют путем измерения двух параметров:
1) дыхательного объема, который является показателем растяжимости легкого; и
2) объема газа в легких, который является показателем расширения воздушного пространства или
- 2 017697 раскрытого состояния альвеол в конце выдоха и вследствие этого способности образовывать стабильную фосфолипидную пленку в альвеолах в конце выдоха.
Используемое в данной заявке эффективное количество композиции для лечения конкретного заболевания представляет собой количество, достаточное для облегчения или, в некоторой степени, уменьшения симптомов, ассоциированных с заболеванием. Указанное количество будет зависеть от типа и тяжести заболевания и состояния (масса, пол, возраст) пациента.
Используемый в данной заявке термин реконструированное поверхностно-активное вещество означает липидный носитель, к которому были добавлены полипептидные аналоги поверхностно-активных белков, полученные с использованием рекомбинантной технологии или способов синтеза.
Используемый в данной заявке термин липидный носитель означает смесь фосфолипидов и возможно другие липидные компоненты, например нейтральные липиды, такие как триацилглицерины, свободные жирные кислоты и/или холестерин.
Используемый в данной заявке термин полипептидные аналоги природного поверхностноактивного белка 8Р-С включает полипептиды, имеющие аминокислотную последовательность, в которой по сравнению с природными белками одна или более аминокислот отсутствует(ют) или заменена(ы) другими аминокислотами, при условии, что полипептиды в смеси с липидным носителем, демонстрируют активность легочного поверхностно-активного вещества.
Аминокислотные последовательности представлены в соответствии с трехбуквенным кодом аминокислотой, которая несет свободную аминогруппу на левом конце (аминоконец), и аминокислотой, которая несет свободную карбоксильную группу на правом конце (карбоксиконец).
Все аминокислотные остатки, идентифицированные в данной заявке, имеют природную Ьконфигурацию, и последовательности, идентифицированные в данной заявке, представлены в соответствии со стандартными аббревиатурами аминокислотных остатков, как показано в последующей Таблице соответствия.
Таблица соответствия
АМИНОКИСЛОТА СИМВОЛ
Однобуквенный Трехбуквенный
Глицин <3 61у
ί-пролин Р Рго
ί-изолейцин 1 Не
ί-лейцин ί Ьеи
ί-тирозин Υ Туг
ί-цистеин с Суз
ί-триптофан νν Тгр
ί-аланин А А1а
ί-лизин К Ьуз
ί-аргинин В Агд
ί-глутамин 0 О1и
ί-метионин м Ме(
ί-серин δ бег
ί-валин V \/а1
1-аспарагин N Азп
Ь-аспарагиновая кислота ϋ Азр
Ьглутаминовая кислота Е С1и
ί-гистидин Н ΗΪ8
ί-треонин т ТЬг
ί-фенилаланин Е РЬе
ί-норлейцин - пЬеи
ί-орнитин - Огл
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к реконструированному поверхностно-активному веществу, содержащему липидный носитель и комбинацию полипептидов общей формулы (I) с полипептидами, содержащими последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка.
Авторы изобретения фактически обнаружили, что в модели ΚΌ8, в которой недоношенного новорожденного обрабатывали препаратами экзогенных поверхностно-активных веществ без применения РЕЕР, полипептиды общей формулы (I) в комбинации с полипептидами общей формулы (II) предпочтительно действуют на объемы газа в легких, которые являются показателем раскрытого состояния альвеол
- 3 017697 в конце выдоха.
Оказалось, что заявленный препарат реконструированного поверхностно-активного вещества улучшает респираторную функцию, выраженную дыхательными объемами, размеров степени, сравнимой с достигнутой после введения модифицированного природного поверхностно-активного вещества.
Предпочтительно аналог природного белка 8Р-С представляет собой полипептид из по меньшей мере 20 аминокислотных остатков и не более чем 40 аминокислотных остатков, имеющий последовательность, представленную общей формулой (I)
ΕβΘβ1ίΡί898ΡνΗΙΚΡΧ3ΒΧι,ΟΑΙΙΩρβρίρ (I) где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, Ь и пЬ;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К, К, Η, №, Ρ, Υ и От;
возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, предпочтительно 16 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;
Ω представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М, окисленного по атому серы, I, Ь и пЬ;
а представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 8;
Ь представляет собой целое число, имеющее значение от 1 до 19;
е, £, д и р представляют собой целые числа, имеющие значение 0 или 1;
при условии, что ХаВХЬ представляет собой последовательность, имеющую максимум 22 аминокислоты, предпочтительно содержащую от 10 до 22 аминокислот.
Предпочтительно полипептид общей формулы (I) состоит из по меньшей мере 30 и не более чем 35 аминокислот, более предпочтительно не более чем 33 аминокислот.
В частности, воплощения полипептидов общей формулы (I) состоят из 30, или 33, или 35 амино кислот.
Предпочтительно полипептидный аналог белка 8Р-С представлен общей формулой (0). в которой е и п равны 0 и д равно 1.
1АЗЗРУНЬККХаВХь6АИСрСрЬр (1а) где X, В и Ω являются такими, как определено выше;
а равно 1;
Ь равно 14;
£ и р равны 0 или 1.
Более предпочтительно, когда полипептидный аналог белка 8Р-С представлен общей формулой (к), в которой £ равно 1
1Р35РУНкКВХаВХьСА1Б0рСрБр (1Ь) где X, В, Ω, а и Ь являются такими, как определено выше;
р равно 0 или 1.
Еще более предпочтительно, когда полипептидный аналог белка 8Р-С представлен общей формулой (Тс)
где Ω является таким, как определено выше; р равно 0 или 1.
Примеры полипептидов формулы (к) представлены ниже:
1РЗЗР7Н1-КР1-К1-Ш-1-1-Ш1-Ш ЬСАИМек
1Р38РУН1КР1_к1-1-Ш-1-Ш1Ш1-еАше1
1Р83Р7Н1КК1-К1-1-1-и-1-Ш1Ш1-(ЗА1-1-1-С(
1Р88РА/Н1_КР1_К1.1-1-1-(-1-Ш1-Ш1СА1.1-пкО1.
ι рззрун |_кя1_ки.ш_1.ш1.ш ьсап.
Полипептид (И) известен в предшествующем уровне техники как 8Р-С33.
Наиболее предпочтительно, когда аналог 8Р-С представляет собой полипептид, выбранный из группы полипептидов, имеющих формулы (кНШ).
Наиболее предпочтительный полипептид имеет формулу (Г£).
Предпочтительно полилептид, содержащий последовательность с изменяющимся числом гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одним основным аминокислотным остатком, состоит из по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более 60 аминокислотных остатков, предпочтительно из не менее 20 и не более 35, и представлен общей формулой (II)
В(иаВ)х (II) где и представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из Ь, I, пЬ, V, А, М и Ρ;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К,
- 4 017697
К, Н и От;
а представляет собой целое число, имеющее значение от 4 до 5, предпочтительно 4;
х представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 4, предпочтительно 4.
Группа предпочтительных полипептидов включает или состоит из последовательности, где и представляет собой Ь или I, В представляет собой К или К, а равно 4 или 5, предпочтительно 4, и х равно 3 или 4, предпочтительно 4.
Особенно предпочтительным полипептидом является полипептид, который известен в уровне техники как КЬ4 и который имеет последовательность, представленную ниже
КккккКккккКккккКккккК <К1_4) (ЗЕ<2 Ю ΝΟ: 6)
Другим примером особенно предпочтительного полипептида является полипептид, имеющий последовательность, представленную ниже, и названный в данной заявке КЬ5
КкккккКкккккКккккЦКкккккК (Кк5) (ЗЕО Ю ΝΟ: 7)
Фактически обнаружили, что КЬ5 демонстрирует распределение заряженных остатков вокруг целого витка спирали пептида, аналогичное таковому для КЬ4.
Другими примерами предпочтительных полипептидов являются полипептиды, имеющие последовательность (III)
ΡΟΙΡ55ΡνΗίΚΒΧ4ΒΧ4ΒΧ4Βί<3ΑΙίΜΟί (III)
Примером полипептида общей формулы (Ша) является полипептид, который известен в уровне техники как 8Р-С (ЬК8)
РС1Р88РУНкКРкк1кКккккК1кккКкСАккМ6к [8Р-С (кК8)] (8ЕО Ю N0: 8)
Полипептиды общих формул (I) и (II) могут быть получены любым известным методом, например, описанным в ГМ. 81еуатб и Ю. Уоиид, 8ойб Р1азе Рерббе 8уп1йез1з, ν.Η. Ргеетаи Со., 8аи Етапс1зсо, 1969 и 1. Ме1еп1юГег. Ногтопа1 Рто1етз апб Рерббез, νοί. 2, р. 46, Лсабетк Ргезз (Νο\ν Уотк), 1983, для твердофазного синтеза пептидов, и Е. 8сйгобег апб К. КиЬке, Т1е Рерббез, νο1. 1, Лсабетк Ртезз (№у Уотк), 1965, для классического синтеза в растворе. Краткое изложение методов синтеза полипептидов можно найти в 1. 81иай и Ю. Уоипд, 8ойб Р1азе Рерббе 8уп1йез1з, Р1егсе С1ет1са1 Сотрапу, КоскГогб, Ш, 3б Еб., №ига1й, Н. е! а1., Ебз., р. 104-237, Лсабетк Ргезз, №у Уотк, ΝΥ (1976).
Соответствующие защитные группы для применения в таких синтезах можно найти в вышеупомянутых руководствах, а также в Ι.Ε.ν. МсОт1е, РгсИесОте Отоирз ш Отдашс Сйет1з1ту, Р1епит Ргезз, №у Уогк, ΝΥ (1973).
В целом, эти способы включают последовательное добавление одного или более аминокислотных остатков или соответствующим образом защищенных аминокислотных остатков к растущей пептидной цепи. Как правило, либо амино-, либо карбоксильная группа первого аминокислотного остатка защищена подходящей, избирательно удаляемой защитной группой.
Используя твердофазный синтез пептидов в качестве примера, защищенную или дериватизированную аминокислоту присоединяют к инертной твердой подложке через ее незащищенную карбоксильную или аминогруппу. Защитные группы для амино- или карбоксильной группы затем избирательно удаляют и добавляют следующую аминокислоту в последовательности, имеющую комплементарную (амино- или карбоксильную) группу, соответствующим образом защищенную, и подвергают взаимодействию в условиях, подходящих для образования амидной связи с остатком, уже присоединенным к твердой подложке. Защитную группу для амино- или карбоксильной группы затем удаляют из вновь добавленного аминокислотного остатка и затем добавляют следующую аминокислоту (соответствующим образом защищенную) и т. д.
После того как все желаемые аминокислоты были соединены в соответствующей последовательности, оставшиеся защитные группы для концевых и боковых групп (и твердую подложку) удаляют последовательно или одновременно с получением конечного полипептида.
В частности, полипептиды общих формул (I) и (II) могут быть получены в соответствии со способами, раскрытыми в νθ 00/47623, в то время как полипептиды, состоящие из последовательности общей формулы (II), могут быть получены в соответствии со способами, описанными в νθ 92/22315.
Реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению может быть получено смешиванием раствора или суспензии полипептидов общих формул (I) и (II) и липидов и последующей сушкой смеси, в других случаях они могут быть получены лиофилизацией или сушкой распылением.
Предпочтительно полипептиды общей формулы (I) и полипептиды общей формулы (II) присутствуют в реконструированных поверхностно-активных веществах по изобретению в фиксированном количестве и количественном соотношении в виде фиксированной комбинации.
Соотношение полипептидов общих формул (I) и (II) к реконструированному поверхностноактивному веществу может варьировать. Предпочтительно каждый полипептид может присутствовать в количестве от 0,5 до 10% на основании массы поверхностно-активного вещества (мас./мас.), предпочтительно от 1 до 5%, наиболее предпочтительно от 1 до 3%.
Предпочтительно липидный носитель включает фосфолипиды, которые содержатся в препаратах природного легочного поверхностно-активного вещества, например фосфатидилхолины (РС), такие как
- 5 017697 дипальмитоилфосфатидилхолин (ЭРРС) и пальмитоилолеоилфосфатидилхолин (РОРС), и фосфатидилглицерины (РС), такие как пальмитоилолеоилфосфатидилглицерин (РОРС) и дипальмитоилфосфатидилглицерин (ЭРРС).
Другие фосфолипиды, которые могут быть предпочтительно использованы, представляют собой фосфатидилинозитолы (Р1), фосфатидилэтаноламины (РЕ), фосфатидилсерины и сфингомиелины (БМ).
В конкретном воплощении липидный носитель может содержать дополнительные компоненты, например нейтральные липиды, такие как триацилглицерины, свободные жирные кислоты и/или холестерин.
Предпочтительно реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению содержит от 90 до 99 мас.% липидного носителя, предпочтительно от 92 до 98 мас.%, более предпочтительно от 94 до 96 мас.% и от 1 до 10 мас.% суммы обоих пептидов, предпочтительно от 2 до 8 мас.%, более предпочтительно от 4 до 6 мас.%.
В конкретном воплощении изобретения реконструированное поверхностно-активное вещество содержит 96 мас.% липидного носителя, 2 мас.% полипептида общей формулы (I) и 2 мас.% полипептида общей формулы (II).
Фосфолипиды, входящие в состав липидного носителя, представляют собой предпочтительно смеси, состоящие из ЭРРС и пальмитоилолеоилфосфолипида, выбранного из РОРС или его смеси с РОРС в массовых соотношениях, варьирующих от 95:5 до 50:50, предпочтительно от 80:20 до 60:40. Массовое соотношение ЭРРС и РОРС варьирует предпочтительно от 75:25 до 65:35 и более предпочтительно составляет 68:31. В случае смесей ЭРРС:РОРС:РОРС фосфолипиды предпочтительно используют в массовых соотношениях 60:20:20 или 68:15:16.
В предпочтительном воплощении реконструированное поверхностно-активное вещество содержит от 1 до 5 мас.% полипептида общей формулы (1а), от 1 до 5 мас.% полипептида формулы (II) и смесь ЭРРС и РОРС в массовом соотношении 68:31.
В еще более предпочтительном воплощении реконструированное поверхностно-активное вещество содержит от 1,5 до 3 мас.% полипептида, выбранного из группы, состоящей из ДеНШ), более предпочтительно полипептида (II), от 1,5 до 3 мас.% пептида общей формулы (II) и смесь ЭРРС и РОРС в массовом соотношении 68:31.
Введение реконструированного поверхностно-активного вещества по изобретению осуществляют стандартно, предпочтительно посредством интратрахеальной инстилляции (инфузия или болюс) или распыления.
Эффективная доза реконструированного поверхностно-активного вещества варьирует в зависимости от многих факторов, включая способы введения, характер и тяжесть заболевания, и от того, является ли лечение профилактическим или терапевтическим. Как правило, доза составляет от 0,01 мг до 10 г на 1 кг массы тела, предпочтительно от 10 до 500 мг на 1 кг, более предпочтительно от 40 до 200 мг на 1 кг. Специалист может легко определить оптимальную дозу и частоту ее введения.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению. Указанные композиции предпочтительно вводят в форме раствора, дисперсии, суспензии или сухого порошка. Предпочтительно указанные композиции содержат реконструированное поверхностно-активное вещество, растворенное или суспендированное в подходящем растворителе или среде для ресуспендирования.
Предпочтительно указанные фармацевтические композиции поставляют в виде суспензии в забуференном физиологическом растворе в одноразовых стеклянных флаконах. Предпочтительно концентрация реконструированного поверхностно-активного вещества (выраженная в виде содержания фосфолипида) варьирует от примерно 2 до примерно 160 мг поверхностно-активного вещества на 1 мл, предпочтительно от 10 до 100 мг/мл, более предпочтительно от 20 до 80 мг/мл.
Для уменьшения вязкости указанные композиции могут дополнительно содержать электролиты, такие как соли кальция, магния и/или натрия (например, хлорид кальция или хлорид натрия).
Фармацевтические композиции по изобретению применимы для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (КЭБ) у недоношенных детей или других заболеваний, связанных с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, включающих острое легочное повреждение (АЫ), КЭБ у взрослых (АКЭБ), синдром мекониевой аспирации (МАБ) и бронхолегочную дисплазию (ВРЭ).
Они также могут быть полезны для профилактики и/или лечения других респираторных расстройств, таких как пневмония, бронхит, СОРЭ (хроническая обструктивная болезнь легких), астма и кистозный фиброз, а также для лечения серозного среднего отита (экссудативного отита).
Следующий пример иллюстрирует изобретение более подробно.
Пример
Эксперименты ίη νίνο с реконструированным поверхностно-активным веществом на основе полипептидов БР-С33 и КЬ4.
Препараты поверхностно-активного вещества испытывали на преждевременно рожденных крольчатах, полученных путем удаления матки на сроке беременности 27 суток. Эксперименты выполняли без
- 6 017697 применения положительного давления в конце выдоха (РЕЕР).
В качестве аналога 8Р-С использовали полипептид, известный как 8Р-С33, который получен, как описано в АО 00/47623.
В качестве аналога 8Р-В использовали полипептид, известный как КЬ4, который получен, как описано в АО 92/22315.
Животных обрабатывали при рождении 200 мг/кг (80 мг/мл) препаратами реконструированного поверхностно-активного вещества, содержащими 2% 8Р-С33 или 2% 8Р-С33+2% КЬ4 в комбинации со смесью фосфолипидов, состоящей из ОРРС:РОРС в соотношении 68:31 мас./мас.
Животные, обработанные СитокитГ® (80 мг/мл), служили в качестве положительных контролей, а необработанные детеныши того же помета в качестве отрицательных контролей.
Недоношенных новорожденных крольчат подвергали вентиляции наряду со стандартизированной последовательностью максимальных давлений при инсуффляции. Для того чтобы открыть легкие, давление сначала устанавливали на уровне 35 см Н2О в течение 1 мин. После этого приема стимуляции давление понижали до 25 см Н2О в течение 15 мин и далее до 20 и 15 см Н2О. В конце давление снова повышали до 25 см Н2О в течение 5 мин, после чего легкие вентилировали в течение дополнительных 5 мин азотом и затем иссекали для измерений объема газа.
Измеряли как объемы газа в легких, так и дыхательные объемы, выраженные в виде мл/кг, и результаты, представленные в виде средних значений, показаны на фиг. 4 и 5 соответственно.
На фиг. 3 показано, что животные, обработанные препаратом реконструированного поверхностноактивного вещества, содержащим 2% мас./мас. 8Р-С33 в комбинации с 2% КЬ4, имели более высокие объемы газа в легких, чем животные, которые получали 2% мас./мас. 8Р-С33, что указывает на то, что добавление 2% мас./мас. КЬ4 к поверхностно-активному веществу 8Р-С33 привело к увеличению объемов газа в легких.
Указанный результат демонстрирует, что реконструированное поверхностно-активное вещество по изобретению обеспечивает лучшую стабилизацию фосфолипидной пленки в альвеолах в конце выдоха, чем препарат реконструированного поверхностно-активного вещества, содержащий только аналог белка 8Р-С.
Более того, на фиг. 4 показано, что заявленный препарат реконструированного поверхностноактивного вещества, как оказалось, значительно улучшает респираторную функцию, выраженную дыхательными объемами.

Claims (18)

1. Реконструированное поверхностно-активное вещество, содержащее липидный носитель и комбинацию аналога природного поверхностно-активного белка 8Р-С с полипептидом, содержащим последовательность повторяющихся единиц, состоящих из ряда гидрофобных аминокислотных остатков в количестве от 3 до 8 и одного основного аминокислотного остатка, где указанный аналог белка 8Р-С представлен общей формулой (1а) кРтЗЗРУНкККХаВХьбАБЮрбрЬр (1а) где X представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из I, Ь и пЬ;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К, В, Н, А, Б, Υ и Огп;
8 возможно замещен ацильными группами, содержащими 12-22 атомов углерода, соединенными с боковой цепью через сложноэфирную связь;
Ω представляет собой аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из М или М, окисленного по атому серы, I, Ь и пЬ;
а равно 1;
Ь равно 14;
Г и р равны 0 или 1;
где указанный полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, имеет по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и не более 60 аминокислотных остатков и представлен общей формулой (II) в(иав)х (П) где и представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из Ь, I, пЬ, V, А, М и Б;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К, В, Н и Огп;
а представляет собой целое число, имеющее значение от 4 до 5;
х представляет собой целое число, имеющее значение от 3 до 4.
2. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1, где ацильные группы в качестве возможных заместителей 8 содержат 16 атомов углерода.
- 7 017697
3. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно-активного белка 8Р-С представлен общей формулой (1Ь)
1Р88РУН1_КРХаВХьеАи.0р6рЬр <1Ь) где р равно 0 или 1.
4. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно-активного белка 8Р-С представлен общей формулой (1с) (Ρ53ΡνΗΙΚΒΙΚΙίΙΙΙΙίυυ.Ι.ΙΙ-(3ΑΙΙ.ΩρΘρΙ.ρ (1с>
где р равно 0 или 1.
5. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.4, где аналог природного поверхно- стно-активного белка 8Р-С выбран из группы, состоящей из
1Р83РУН1КР1К111111Ш1Ш1_еА1-1-М(31.
1Р38Р\/Н1-КЯ1.К1-1.Ш-Ш_11-Ш1_0АШС1ΙΡ38ΡνΗίΚΒΙΚΙίΙίΙίίίΙΕΐυίΟΑΙίίΘί
1РЗЗРУНЬКК1КШ111Ш1Ш1СА1_1-П1.О11Р88РУНЬКК1К1.и-1.11.Ш1.11.11.СА1.1.
(Ιά) (δΕΟ Ю N0: 1);
(1е) (ЗЕО Ю N0: 2);
(1ΐ) (ЗЕО Ю N0: 3);
(1д) (8Е0 Ю N0: 4);
(Ιή) (ЗЕО Ю N0' 5).
6. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где полипептид общей формулы (II) содержит или состоит из последовательности, представленной общей формулой (III) в(и4в)х (ίίί) где и представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из Ь и I;
В представляет собой аминокислотный остаток, независимо выбранный из группы, состоящей из К и В;
х представляет собой целое число, имеющее значение 3 или 4.
7. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.6, где полипептид имеет формулу
Κ1_1Α[_Κ[_Ι_1±ΚΙ±Ι_Ι_ΚΙ_1-1-Ι_Κ (ЗЕО Ю N0: 6)
8. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.1 или 2, где аналог природного поверхностно активного белка 8Р-С имеет формулу
1РЗЗР7Н1_КЯ1_К1_1-Ш-Ш_11.Ш ЬСАкЫеЬ и полипептид, содержащий последовательность повторяющихся единиц, имеет формулу
9. Реконструированное поверхностно-активное вещество по любому из пп.1-8, где липидный носитель содержит смесь фосфолипидов.
10. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.9, где смесь фосфолипидов состоит из дипальмитоилфосфатидилхолина (ЭРРС) и пальмитоилолеоилфосфолипида, выбранного из пальмитоилолеоилфосфатидилглицерина (РОРС) или их смеси с пальмитоилолеоилфосфатидилхолином (РОРС) в соотношениях по массе, варьирующих от 95:5 до 50:50.
11. Реконструированное поверхностно-активное вещество по п.10, где фосфолипидная смесь состоит из ОРРС и РОРС в соотношении по массе 68:31.
12. Фармацевтическая композиция для профилактики и/или лечения респираторного дистресссиндрома (КП8) у недоношенных детей или другого заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких (ЛЫ), ΡΩ8 у взрослых (ΆΒΌ8), синдрома мекониевой аспирации (МА8) и бронхолегочной дисплазии (ВРЭ). содержащая реконструированное поверхностно-активное вещество по любому из пп.1-11.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, содержащая реконструированное поверхностноактивное вещество в концентрации от 2 до 160 мг/мл.
14. Фармацевтическая композиция по п.13, где концентрация реконструированного поверхностноактивного вещества составляет от 20 до 80 мг/мл.
15. Препарат, содержащий водную суспензию реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11.
16. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 в качестве лекарственного средства для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (ΚΌ8) у недоношенных детей или другого заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностно-активных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких (АЫ), ΡΩ8 у взрослых (АВО8), синдрома мекониевой аспирации (МА8) и бронхолегочной дисплазии (ВРЭ).
17. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 для профилактики и/или лечения респираторного дистресс-синдрома (КП8) у недоношенных детей.
18. Применение реконструированного поверхностно-активного вещества по любому из пп.1-11 для профилактики и/или лечения заболевания, связанного с дефицитом или дисфункцией поверхностноактивных веществ, выбранного из группы, состоящей из острого повреждения легких (АЫ), ΡΩ8 у взрослых (АВО8), синдрома мекониевой аспирации (МА8) и бронхолегочной дисплазии (ΒΓΌ).
EA200901459A 2007-06-01 2008-05-22 Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства EA017697B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07010857A EP1997502A1 (en) 2007-06-01 2007-06-01 Reconstituted surfactants having improved properties
PCT/EP2008/004097 WO2008145298A1 (en) 2007-06-01 2008-05-22 Reconstituted surfactants having improved properties

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200901459A1 EA200901459A1 (ru) 2010-06-30
EA017697B1 true EA017697B1 (ru) 2013-02-28

Family

ID=38421186

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200901459A EA017697B1 (ru) 2007-06-01 2008-05-22 Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства

Country Status (14)

Country Link
US (1) US7897577B2 (ru)
EP (2) EP1997502A1 (ru)
JP (1) JP5575639B2 (ru)
KR (1) KR101516443B1 (ru)
CN (1) CN101687006B (ru)
AT (1) ATE544461T1 (ru)
AU (1) AU2008256449B2 (ru)
BR (1) BRPI0811320A2 (ru)
CA (1) CA2689066C (ru)
EA (1) EA017697B1 (ru)
HK (1) HK1140420A1 (ru)
MX (1) MX2009012675A (ru)
WO (1) WO2008145298A1 (ru)
ZA (1) ZA200908445B (ru)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITMI20021058A1 (it) 2002-05-17 2003-11-17 Chiesi Farma Spa Miscele di lipidi sintetici ottimizzate per la preparazione di un surfattante ricostituito
DK2078038T3 (da) * 2006-10-13 2013-12-02 Chiesi Farma Spa Rekonstituerede surfaktanter med forbedrede egenskaber
EP2022798A1 (en) 2007-08-09 2009-02-11 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Synthetic pulmonary surfactant peptides
US8551534B2 (en) * 2007-10-10 2013-10-08 Parion Sciences, Inc. Inhaled hypertonic saline delivered by a heated nasal cannula
US8399406B2 (en) * 2009-06-05 2013-03-19 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Reconstituted surfactant composition containing analogs of surfactant protein B (SP-B) and surfactant protein C (SP-C)
US8945605B2 (en) 2011-06-07 2015-02-03 Parion Sciences, Inc. Aerosol delivery systems, compositions and methods
JP6219271B2 (ja) 2011-06-07 2017-10-25 パリオン・サイエンシィズ・インコーポレーテッド 治療の方法
AR086745A1 (es) 2011-06-27 2014-01-22 Parion Sciences Inc 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-(4-(2-(hexil(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil)carbamimidoil)pirazina-2-carboxamida
WO2013149013A1 (en) 2012-03-28 2013-10-03 Discovery Laboratories, Inc. Lyophilization of synthetic liposomal pulmonary surfactant
AU2013267504B2 (en) 2012-05-29 2017-11-02 Parion Sciences, Inc. Dendrimer like amino amides possessing sodium channel blocker activity for the treatment of dry eye and other mucosal diseases
BR112015014178A2 (pt) 2012-12-17 2017-07-11 Parion Sciences Inc compostos de 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-fenilbutil)carbamimidoil) pirazina-2- carboxamida
ES2674665T3 (es) 2012-12-17 2018-07-03 Parion Sciences, Inc. Compuestos de 3,5-diamino-6-cloro-N-(N-(4-fenilbutilo)carbamimidoilo)-pirazina-2-carboxamida
PT2931713T (pt) 2012-12-17 2017-02-22 Parion Sciences Inc Derivados de cloro-pirazina carboxamida úteis para o tratamento de doenças favorecidas por insuficiente hidratação das mucosas
KR20170065583A (ko) 2014-10-01 2017-06-13 플랜트 헬스 케어, 인코포레이티드 과민성 반응 유발제 펩타이드 및 이의 용도
MX2017004278A (es) 2014-10-01 2018-03-28 Plant Health Care Inc Peptidos inductores que tienen una caja de respuesta de hipersensibilidad interrumpida y su uso.
US10793608B2 (en) 2016-04-06 2020-10-06 Plant Health Care, Inc. Hypersensitive response elicitor-derived peptides and use thereof
US11371011B2 (en) 2016-04-06 2022-06-28 Plant Health Care, Inc. Beneficial microbes for delivery of effector peptides or proteins and use thereof
RU2757902C2 (ru) 2016-12-22 2021-10-22 КЬЕЗИ ФАРМАЧЕУТИЧИ С.п.А. Терапевтическая комбинация для лечения развивающейся bpd, содержащая легочный сурфактант и стероид
WO2019206731A1 (en) 2018-04-23 2019-10-31 Chiesi Farmaceutici S.P.A. A therapeutic combination comprising a pulmonary surfactant and a steroid for the prophylaxis of bpd
US20230097886A1 (en) * 2021-07-30 2023-03-30 Ayuvis Research, Inc. Compositions and methods for the treatment of bronchopulmonary dysplasia (bpd) and bpd-associated pulmonary hypertension

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097695A1 (en) * 2002-05-17 2003-11-27 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Improved synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant
EP1481665A1 (en) * 2003-05-30 2004-12-01 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Novel lipid mixtures for synthetic surfactants
WO2006055532A2 (en) * 2004-11-15 2006-05-26 Discovery Laboratories, Inc. Methods to produce lung surfactant formulations via lyophilization and formulations and uses thereof

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5260273A (en) 1988-01-06 1993-11-09 The Scripps Research Institute Pulmonary surfactant protein and related polypeptide
IT1308180B1 (it) 1999-02-12 2001-12-07 Chiesi Farma Spa Peptidi sintetici aventi la capacita' di diminuire la tensionesuperficiale e loro impiego nella preparazione di un surfattante
CA2372558A1 (en) * 1999-06-11 2000-12-21 Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh Pharmaceutical preparation containing modifications of surfactant protein b (sp-b) and surfactant protein c (sp-c)
CN1838964A (zh) * 2002-04-25 2006-09-27 斯克里普斯研究学院 肺病的治疗与预防
DK2078038T3 (da) * 2006-10-13 2013-12-02 Chiesi Farma Spa Rekonstituerede surfaktanter med forbedrede egenskaber
EP2022798A1 (en) 2007-08-09 2009-02-11 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Synthetic pulmonary surfactant peptides

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097695A1 (en) * 2002-05-17 2003-11-27 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Improved synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant
EP1481665A1 (en) * 2003-05-30 2004-12-01 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Novel lipid mixtures for synthetic surfactants
WO2006055532A2 (en) * 2004-11-15 2006-05-26 Discovery Laboratories, Inc. Methods to produce lung surfactant formulations via lyophilization and formulations and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CA2689066A1 (en) 2008-12-04
EP2152288B1 (en) 2012-02-08
KR20100015802A (ko) 2010-02-12
ATE544461T1 (de) 2012-02-15
JP2010528997A (ja) 2010-08-26
HK1140420A1 (en) 2010-10-15
EP2152288A1 (en) 2010-02-17
US7897577B2 (en) 2011-03-01
CN101687006A (zh) 2010-03-31
JP5575639B2 (ja) 2014-08-20
CA2689066C (en) 2016-03-29
US20090088379A1 (en) 2009-04-02
MX2009012675A (es) 2009-12-14
KR101516443B1 (ko) 2015-05-07
AU2008256449A1 (en) 2008-12-04
EA200901459A1 (ru) 2010-06-30
WO2008145298A1 (en) 2008-12-04
EP1997502A1 (en) 2008-12-03
CN101687006B (zh) 2013-10-16
BRPI0811320A2 (pt) 2014-10-21
ZA200908445B (en) 2011-02-23
AU2008256449B2 (en) 2012-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA017697B1 (ru) Реконструированные поверхностно-активные вещества, имеющие улучшенные свойства
CN102459327B (zh) 包含表面活性剂蛋白质b(sp-b)和表面活性剂蛋白质c(sp-c)的类似物的改良重构的表面活性剂组合物
JP5405307B2 (ja) 改善された性質を有する再構成サーファクタント
US7842664B2 (en) Synthetic lipid mixtures for the preparation of a reconstituted surfactant
JP4762466B2 (ja) サーファクタントタンパク質ｃエステル

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM