EA010437B1 - Фармацевтические композиции, содержащие активные соединения витамина d - Google Patents

Abstract

Описаны фармацевтические композиции, содержащие соединение активного витамина D в препаратах предконцентратов эмульсии, а также эмульсии и субмикронные эмульсии, получаемые из указанных концентратов. Композиции содержат компонент липофильной фазы, одно или несколько поверхностно-активных веществ и соединение активного витамина D. Указанные композиции также могут содержать компонент гидрофильной фазы.

Description

Настоящее изобретение относится к новым фармацевтическим составам, содержащим соединение активного витамина Ό, причем указанные фармацевтические составы являются предконцентратами эмульсий. Изобретение также относится к эмульсиям и к субмикронным эмульсиям (с размером капель менее микрона), получаемым при разбавлении предконцентратов эмульсий водным раствором.

Уровень техники

Витамин Ό - это жирорастворимый витамин, незаменимый в качестве положительного регулятора кальциевого гомеостаза (см. Натчоп'ч Рппс1р1еч оГ 1п!егпа1 Мебюше: Рай Е1еуеп, 'ТОчогбегч оГ Вопе апб М1пега1 Ме!аЬойчт, Сйар!ег 335, рр. 1860-1865, Е. Вгаипета1б е! а1., (ебч.), МсСга^-НШ, Ыете Уогк (1987)). Активная форма витамина Ό - это 1а,25-дигидроксивитамин Ό₃, известный также как кальцитриол. Специфические нуклеарные рецепторы соединений активного витамина Ό обнаружены в клетках различных органов, не участвующих в кальциевом гомеостазе. (МШег е! а1., Сапсег. Веч. 52:515-520 (1992)). Соединения активного витамина Ό не только влияют на кальциевый гомеостаз, но также участвуют в остеогенезе (костеобразование), модуляции иммунных реакций, модуляции процесса выработки инсулина В-клетками поджелудочной железы, функционировании мышечных клеток и в дифференцировке и росте эпидермических и кроветворных тканей.

Кроме того, в опубликованной литературе имеется много указаний на полезность применения соединений активного витамина Ό при лечении рака. Например, было показано, что некоторые соединения витамина Ό и их аналоги обладают мощным антилейкозным действием, поскольку они стимулируют дифференцировку злокачественных клеток (в особенности, лейкозных клеток) в доброкачественные макрофаги (моноциты) и полезны при лечении лейкемии (§иба е! а1., патент США № 4391802, Райпбде е! а1., патент США № 4594340). Также сообщали об антипролиферативном и дифференцирующем действии кальцитриола и других аналогов витамина Ό₃ в связи с лечением рака простаты (В1чйор е! а1., патент США № 5795882). Соединения активного витамина Ό также применяли при лечении рака кожи (СЫба е! а1., Сапсег Вечеагсй 45:5426-5430 (1985)), рака толстой кишки (О1чтап е! а1., Сапсег Вечеагсй 47:21-25 (1987)) и рака легких (§а!о е! а1., Тойоки 1. Ехр. Меб. 738:445-446 (1982)). Другие сообщения о важном терапевтическом действии соединений активного витамина Ό обобщены в патенте США № 6034079, Вобгщиех е! а1.

Хотя прием внутрь соединений активного витамина Ό может привести к весьма положительным терапевтическим результатам, лечение рака и других заболеваний при помощи этих соединений ограничено из-за действия, оказываемого этими соединениями на метаболизм кальция. При уровнях доз, необходимых для эффективного применения ш у1уо в качестве антипролиферативных агентов, соединения активного витамина Ό могут вызывать сильное и потенциально опасное повышение уровня кальция в крови, благодаря присущему им действию на кальциевый обмен. То есть, клиническому применению кальцитриола и других соединений активного витамина Ό в качестве антипролиферативных агентов препятствует или сильно ограничивает это применение риск развития гиперкальциемии.

Было показано, что проблема системной гиперкальциемии может быть решена при помощи приема достаточной дозы соединения активного витамина Ό в режиме импульсной дозировки, таким образом, чтобы достичь антипролиферативного эффекта, но в то же время избежать развития острой гиперкальциемии (патент США № 6521608). В соответствии с изложенным в патенте 6521608 прием соединений активного витамина Ό может произовдиться не чаще, чем раз в трое суток, например один раз в неделю, при дозе по меньшей мере 0,12 мкг/кг в сутки (8,4 мкг для человека массой 70 кг). Фармацевтические составы, применяемые в режиме импульсной дозировки в соответствии с патентом 6521608, включают 5100 мкг соединения активного витамина Ό и могут быть введены пероральным, внутривенным, внутримышечным, топическим, трансдермальным, подъязычным, внутриносовым, внутриопухолевым или другими способами.

Торговое название препарата кальцитриола, выпускаемого Восйе ЬаЬога!ог1еч, - ВОСАЬТВОЕ. ВОСЛЕТВОЬ поставляется в виде капсул, содержащих 0,25 и 0,5 мкг кальцитриола, и в форме раствора для перорального приема, содержащего 1 мкг/мл кальцитриола. Все формы дозирования содержат в качестве антиоксидантов бутилированный гидроксианизол (БГА) и бутилированный гидрокситолуол (БГТ). Капсулы содержат также фракционированный триглицерид кокосового масла, а растворы для перорального приема содержат фракционированный триглицерид пальмового масла (РйучШап'ч Эечк ВеГегепсе. 54^1й Ебйюп, рр.2649-2651, Меб1са1 Есопоткч Сотрапу, 1пс., Моп1уа1е, N1 (2000)).

Известно, что кальцитриол чувствителен к свету и легко окисляется. Кроме того, кальцитриол и другие соединения активного витамина Ό липофильны, т. е. легко растворимы в липидах (жирах) и некоторых органических растворителях, но практически нерастворимы или плохо растворимы в воде. Из-за липофильной природы соединений активного витамина Ό диспергирование таких соединений в водных растворах, в частности в желудочных жидкостях, довольно ограничено. Соответственно, фармакокинетические параметры препаратов соединений активного витамина Ό, описанные ранее в настоящей области техники, субоптимальны для приема больших доз в режиме импульсной дозировки. Кроме того, доступные в настоящий момент препараты соединений активного витамина Ό проявляют довольно сильный разброс значений всасываемости в тонком кишечнике. При этом для перорального приема отношение

- 1 010437 между величиной дозы и концентрацией в крови, наблюдаемое для большинства препаратов соединений активного витамина Ό, является нелинейным, то есть количество соединения, поглощенного потоком крови, не коррелирует с количеством соединения, принятого в лекарственной форме, особенно при больших дозах.

Таким образом, в настоящей области техники имеется необходимость разработки улучшенных фармацевтических составов, включающих соединения активного витамина Ό, в особенности для приема больших доз препарата в режиме импульсной дозировки, предназначенных для обеспечения антипролиферативного (например, противоракового) эффекта, но не вызывающих гиперкальциемии. В частности, в настоящей области техники существует необходимость разработки улучшенного фармацевтического состава, содержащего соединение активного витамина Ό, который устойчив в течение длительного времени даже при повышенных температурах, и в то же время проявляет улучшенные фармакокинетические параметры в отношении соединения активного витамина Ό и пониженный разброс всасываемости при приеме его пациентом.

Краткое описание изобретения

В настоящем изобретении преодолены недостатки, ранее имевшиеся в данной области техники, путем разработки фармацевтического состава, включающего соединения активного витамина Ό в виде препаратов предконцентратов эмульсий. Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением обладают достоинствами по сравнению с известными аналогами, поскольку обеспечивают приготовление лекарственных форм соединений активного витамина Ό, например кальцитриола, которые имеют достаточно высокие концентрации для удобства применения, стабильны и хорошо диспергируемы в растворе, и при этом соответствуют необходимым критериям фармакокинетических параметров, в частности, при приеме в режиме импульсной дозировки. Более конкретно, в предпочтительном варианте реализации фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением обеспечивают Стах, в 1,5-2 раза превышающее С_тах, наблюдаемое для КОСЛЬТКОЬ, и более короткое Т_тах, чем аналогичное значение, наблюдаемое для КОСЛЬТКОЬ.

Предконцентраты эмульсий в соответствии с настоящим изобретением представляют собой неводные препараты соединения активного витамина Ό, способные образовывать фармацевтически приемлемую эмульсию при контакте с водой или другими водными растворами.

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает получение фармацевтических составов, которые содержат: (а) компонент липофильной фазы, (б) одно или несколько поверхностно-активных веществ и (в) соединение активного витамина Ό, при этом указанный состав можно использовать в качестве предконцентрата эмульсии, который при разбавлении водой в соотношении вода/состав, равном приблизительно 1:1, или при большем содержании воды образует эмульсию, имеющую оптическую плотность более 0,3 при 400 нм. В соответствии с этим фармацевтические составы могут содержать также компонент гидрофильной фазы.

Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложен жидкий или полутвердый фармацевтический состав, содержащий соединение активного витамина Ό, примерно 50% компонента липофильной фазы, примерно 50% поверхностно-активного вещества, примерно от 0,05 до примерно 0,35% бутилированного гидроксианизола (БГА) и примерно от 0,05 до примерно 0,35% бутилированного гидрокситолуола (БГТ). В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения указанное соединение активного витамина Ό представляет собой кальцитриол. Кроме того, указанный компонент липофильной фазы представляет собой МЮЬУОЬ 812. Предпочтительно, чтобы указанное поверхностно-активное вещество представляло собой витамин Е ТРС8. В предпочтительном варианте реализации фармацевтический состав содержит соединение активного витамина Ό, примерно 50% МЮЬУОЬ 812 и примерно 50% витамина Е ТРС8.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложена стандартная лекарственная форма, содержащая жидкий или полутвердый фармацевтический состав, включающий соединение активного витамина Ό, примерно 50% МЮЬУОЬ 812, примерно 50% витамина Е ТРС8, примерно от 0,05 до 0,35% БГА и примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГТ. В предпочтительном варианте реализации указанная стандартная лекарственная форма содержит в качестве соединения активного витамина Ό кальцитриол. В другом предпочтительном варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит примерно от 10 до примерно 75 мкг кальцитриола, предпочтительно 45 мкг кальцитриола. В еще одном предпочтительном варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит в качестве компонента липофильной фазы МЮЬУОЬ 812. В еще одном варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит в качестве поверхностно-активного вещества витамин Е ТРС8. В другом варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит примерно 50% МЮЬУОЬ 812 и примерно 50% витамина Е ТРС8. В еще одном варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит примерно 45 мкг кальцитриола, примерно 50% МЮЬУОЬ 812, примерно 50% витамина Е ТРС8, примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГА и примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГТ.

В соответствии с другим аспектом изобретения стандартная лекарственная форма, описанная выше, может представлять собой капсулу, предпочтительно желатиновую капсулу. Кроме того, в предпочтительном варианте реализации общий объем ингредиентов в капсуле составляет 10-1000 мкл.

- 2 010437

Таким образом, настоящее изобретение позволяет получить фармацевтический эмульсионный состав, содержащий воду и предконцентрат эмульсии, при этом указанный предконцентрат содержит: (а) компонент липофильной фазы, (б) одно или несколько поверхностно-активных веществ, (в) соединение активного витамина Ό и, возможно, также компонент гидрофобной фазы.

Эмульсии, получаемые из предконцентратов эмульсий в соответствии с настоящим изобретением (при разбавлении водой), включают как эмульсии в традиционном понимании этого термина специалистами в данной области техники (т.е. дисперсии органической фазы в воде), так и субмикронные эмульсии (т.е. дисперсии органической фазы в воде, средний диаметр дисперсионных частиц в которых составляет менее 1000 нм.)

Также разработаны способы приготовления предконцентратов эмульсий, включающих соединения активного витамина Ό. Способы, охватываемые этим аспектом настоящего изобретения, включают тщательное перемешивание соединения активного витамина Ό, например кальцитриола, и компонента липофильной фазы, а также одного или нескольких поверхностно-активных веществ, и, возможно, компонента гидрофильной фазы.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения разработаны способы лечения и предотвращения гиперпролиферативных заболеваний, в частности рака и псориаза, при этом указанные способы включают прием соединения активного витамина Ό в виде жидкого или полутвердого фармацевтического состава или стандартной лекарственной формы пациентом, который в нем нуждается. В альтернативном варианте реализации пациент может принимать соединение активного витамина Ό в виде препарата предконцентрата эмульсии или эмульсионного препарата, приготовленного при помощи разбавления соответствующим количеством воды предконцентрата эмульсии согласно настоящему изобретению. В предпочтительном варианте реализации этого аспекта настоящего изобретения пациент принимает соединение активного витамина Ό, например, в режиме импульсной дозировки. В соответствии с этим аспектом настоящего изобретения пациент принимает соединение активного витамина Ό в виде фармацевтического состава, стандартной лекарственной формы или препарата предконцентрата эмульсии, например, не чаще чем один раз в трое суток при дозе по меньшей мере 0,12 мкг/кг в сутки. В одном варианте реализации введение фармацевтического состава или стандартной лекарственной формы согласно изобретению осуществляют в режиме импульсной дозировки, причем указанный режим импульсной дозировки включает прием пациентом указанной композиции не чаще чем один раз в трое суток, предпочтительно не чаще чем один раз в неделю, более предпочтительно не чаще чем один раз в три недели.

Кроме того, в одном варианте реализации режим дозировки включает также введение одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В предпочтительном варианте реализации введение соединения активного витамина Ό осуществляют по меньшей мере за 12 ч до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В наиболее предпочтительном варианте реализации введение соединения активного витамина Ό осуществляют предварительно от 1 суток до приблизительно 3 месяцев до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В другом предпочтительном варианте реализации введение соединения активного витамина Ό осуществляют одновременно с приемом указанными одним или несколькими химиотерапевтическими агентами или радиотерапевтическими агентами/процедурами. В еще одном предпочтительном варианте реализации введение соединения активного витамина Ό продолжают после окончания приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В еще одном варианте реализации введение соединения активного витамина Ό осуществляют после окончания приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В другом варианте реализации введение соединения активного витамина Ό осуществляют за 1 сутки до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур. В еще одном варианте реализации соединение активного витамина Ό и указанные один или несколько химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур принимают не чаще чем один раз в три недели.

Краткое описание рисунков

На фиг. 1 представлена графическая зависимость средней концентрации кальцитриола в плазме крови собак от времени, прошедшего с момента приема, для трех различных препаратов кальцитриола при дозе 1 мкг/кг.

На фиг. 2А и 2В представлены графические зависимости средней концентрации кальцитриола в плазме крови собак от времени после приема повышенных доз полутвердого препарата #3, у самцов (фиг. 2А) и у самок (фиг. 2В).

На фиг. ЗА и 3В представлены графические зависимости концентрации кальцитриола в плазме крови собак от времени после приема полутвердого препарата #3, у самцов (фиг. ЗА) и у самок (фиг. ЗВ).

На фиг. 4А и 4В представлены графические зависимости средней концентрации кальция в сыворотке крови собак после приема повышенных доз полутвердого препарата #3, у самцов (фиг. 4А) и у самок (фиг. 4В).

- 3 010437

На фиг. 5А-5С представлены графические зависимости концентрации кальцитриола в плазме крови и концентрации кальция в сыворотке крови самцов собак после приема полутвердого препарата #3.

На фиг. 6 представлена графическая зависимость средней концентрации кальцитриола в плазме крови человека после приема полутвердого препарата #3 дозовой группой.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение направлено на разработку фармацевтических составов, включающих соединения активного витамина Ό, в виде препаратов предконцентратов эмульсий. Составы в соответствии с настоящим изобретением позволяют избежать или значительно уменьшить возникновения проблем, связанных с лечением соединениями активного витамина Ό и являвшихся до настоящего времени частью данной области техники, таких как неудовлетворительные фармакокинетические параметры соединения при приеме его пациентом.

Было обнаружено, что составы в соответствии с настоящим изобретением позволяют приготавливать полутвердые и жидкие препараты, содержащие соединения активного витамина Ό в достаточно высоких концентрациях для удобного приема, например перорального, и имеют при этом улучшенные фармакокинетические параметры соединения активного витамина Ό. Например, по сравнению с КОСАЬТКОЬ, составы в соответствии с настоящим изобретением проявляют С_тах, в 1,5-2 раза превышающее С_тах, наблюдаемое для КОСАЬТКОЬ, и более короткое Т_тах, чем наблюдаемое для КОСАЬТКОЬ. Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно обеспечивают 0^, равное по меньшей мере приблизительно 900 пг/мл плазмы, более предпочтительно приблизительно от 900 до 3000 пг/мл плазмы и еще более предпочтительно приблизительно от 1500 до 3000 пг/мл плазмы. Кроме того, составы в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно обеспечивают Т_тах менее 6 ч, более предпочтительно приблизительно от 1 до 3 ч и еще более предпочтительно приблизительно от 1,5 до 2 ч. Кроме того, составы в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно обеспечивают Т1/2 менее 25 ч, более предпочтительно приблизительно от 2 до 10 ч и еще более предпочтительно приблизительно от 5 до 9 ч.

Термин С_тах определяют как максимальную концентрацию соединения активного витамина Ό в сыворотке крови после приема медикамента. Термин Т_тах определяют как время, за которое концентрация достигает С_тах. Термин Т_1/2 определяют как время, требуемое для снижения концентрации соединения активного витамина Ό в сыворотке крови в два раза. Указанные в данном описании значения фармакокинетических данных верны для всей совокупности реципиентов, принимающих соединение активного витамина Ό, а не для индивидуальных реципиентов. Так, предпочтительные фармакокинетические параметры не обязательно будут реализованы для конкретного индивидуума, принимающего состав в соответствии с настоящим изобретением. Однако при приеме состава в соответствии с настоящим изобретением достаточно большой совокупностью субъектов фармакокинетические параметры будут приблизительно совпадать с указанными в данном описании значениями.

В соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения приготавливают фармацевтический состав, содержащий: (а) компонент липофильной фазы, (б) одно или несколько поверхностно-активных веществ и (в) соединение активного витамина Ό; при этом указанный состав является предконцентратом эмульсии, который при разбавлении водой при соотношении вода/состав, равном приблизительно 1:1, или при большем содержании воды образует эмульсию, имеющую оптическую плотность более 0,3 при 400 нм. В соответствии с этим аспектом изобретения фармацевтический состав может также содержать компонент гидрофильной фазы.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения получают эмульсионный фармацевтический состав, содержащий воду (или другой водный раствор) и предконцентрат эмульсии.

Термин предконцентрат эмульсии, используемый в данном описании, означает систему, способную создавать эмульсию при контакте, например, с водой. Термин эмульсия, используемый в данном описании, означает коллоидную дисперсию, включающую воду и органические компоненты, в том числе гидрофобные (липофильные) органические компоненты. Термин эмульсия включает как традиционные эмульсии, т. е. системы, обычно понимаемые под этим термином специалистами в данной области техники, так и субмикронные эмульсии, определение которых приведено ниже.

Термин субмикронные капельные эмульсии, используемый в данном описании, означает дисперсию, содержащую воду и органические компоненты, включающие гидрофобные (липофильные) органические компоненты, при этом капли или частицы, образованные органическими компонентами, имеют средний максимальный размер менее 1000 нм.

Субмикронные капельные эмульсии идентифицируют по одной или более нижеследующих характеристик. Они образуются самопроизвольно или практически самопроизвольно, если их компоненты вступают в контакт, то есть без существенного подвода энергии, например, в отсутствие нагревания или без использования оборудования интенсивного сдвигового смешения или другого существенного перемешивания.

Частицы субмикронной эмульсии могут быть сферическими, однако, возможно наличие и других структур, например жидких кристаллов с чешуйчатой, гексагональной или изотропной симметрией. В общем, субмикронные эмульсии включают капельки или частицы, имеющие максимальный размер (на

- 4 010437 пример, средний диаметр) приблизительно от 50 до 1000 нм и предпочтительно приблизительно от 200 до 300 нм.

Термин фармацевтический состав, используемый в данном описании, следует понимать как состав, в котором отдельные компоненты или ингредиенты являются фармацевтически приемлемыми. Например, если состав предназначен для перорального приема, то его компоненты должны быть приемлемыми для перорального приема, а если состав предназначен для топического приема, то его компоненты должны быть приемлемыми для топического приема.

При разбавлении водой фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением обычно образуют эмульсии. Эмульсия в соответствии с настоящим изобретением образуется при разбавлении пред концентрата эмульсии водой при соотношении вода/состав, равном приблизительно 1:1 или при большем содержании воды. В соответствии с настоящим изобретением соотношение вода/состав может находиться, например, от 1:1 до 5000:1. В частности, соотношение вода/состав может составлять 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 10:1, 200:1, 300:1, 500:1, 1000:1 или 5000:1. Опытный специалист в данной области техники сможет быстро определить соотношение вода/состав, отвечающее конкретной ситуации или условиям.

В соответствии с настоящим изобретением при разбавлении указанного предконцентрата эмульсии водой образуется эмульсия, имеющая оптическую плотность более 0,3 при 400 нм. Оптические плотности эмульсий, образованных при разбавлении пред концентратов эмульсий в соответствии с настоящим изобретением в отношении 1:100, при 400 нм могут находиться в диапазоне, например, от 0,3 до 4,0. Оптическая плотность при 400 нм может составлять, например, приблизительно 0,4, 0,5, 0,6, 1,0, 1,2, 1,6, 2,0, 2,2, 2,4, 2,5, 3,0 или 4,0. Способы определения оптической плотности жидкостных растворов хорошо известны специалистам в данной области техники. Опытный специалист в данной области техники сможет определить и уточнить относительные пропорции ингредиентов в предконцентратах эмульсий в соответствии с настоящим изобретением для получения при разбавлении водой эмульсии, имеющей любую конкретную оптическую плотность и находящейся в области действия настоящего изобретения.

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением могут представлять собой, например, полутвердые препараты или жидкие препараты. Полутвердые препараты в соответствии с настоящим изобретением могут представлять собой любые полутвердые препараты, известные специалистам в данной области техники, включая, например, гели, пасты, кремы и мази.

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением содержат компонент липофильной фазы. Компоненты, пригодные для применения в качестве компонента липофильной фазы, включают любой фармацевтически приемлемый растворитель, несмешиваемый с водой. Очевидно, что такие растворители не имеют или практически не имеют поверхностно-активного действия.

Компонент липофильной фазы может содержать моно-, ди- или триглицериды. Моно-, ди- или триглицериды, которые могут быть использованы в соответствии с настоящим изобретением, включают моно-, ди- или триглицериды жирных кислот С₆, С₈, С₁₀, С₁₂, С₁₄, С₁₆, С₁₈, С₂₀ и С₂₂. Примеры диглицеридов, в частности, включают диолеиновые, дипальмитолеиновые и смешанные каприлин-каприновые диглицериды. Предпочтительные триглицериды включают растительные масла, рыбьи жиры, животные жиры, гидрированные растительные масла, частично гидрированные растительные масла, синтетические триглицериды, модифицированные триглицериды, фракционированные триглицериды, триглицериды со средней длиной углеродной цепи и длинноцепочечные триглицериды, структурированные триглицериды, а также смеси указанных веществ.

Среди вышеперечисленных триглицеридов предпочтительные триглицериды включают миндальное масло, масло бабасу, масло бораго, масло из семян черной смородины, масло канолы, касторовое масло, кокосовое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, масло вечерней примулы, масло из виноградных косточек, масло земляного ореха, горчичное масло, оливковое масло, пальмовое масло, косточковое пальмовое масло, арахисовое масло, репсовое масло, масло шафрана, конопляное масло, масло из печени акулы, соевое масло, подсолнечное масло, гидрированное касторовое масло, гидрированное кокосовое масло, гидрированное пальмовое масло, гидрированное соевое масло, гидрированное растительное масло, гидрированное хлопковое и касторовое масло, частично гидрированное соевое масло, частично гидрированное соевое и хлопковое масло, глицерилтрикапроат, глицерилтрикаприлат, глицерилтрикапрат, глицерилтриундеканоат, глицерилтрилаурат, глицерилтриолеат, глицерилтрилинолеат, глицерилтрилиноленат, глицерилтрикаприлат/капрат, глицерилтрикаприлат/капрат/лаурат, глицерилтрикаприлат/капрат/линолеат и глицерилтрикаприлат/ капрат/стеарат.

Предпочтительным триглицеридом является триглицерид со средней длиной углеродной цепочки, поставляемый под торговой маркой ЬАВКАЕАС СС. Другие предпочтительные триглицериды включают нейтральные масла, например нейтральные растительные масла, в частности фракционированные кокосовые масла, такие как известное и поставляемое под торговой маркой МЮЬУОЬ, включая продукты: МЮЬУОЬ 810, МЮЬУОЬ 812, МЮЬУОЬ 818 и САРТЕХ 355.

Пригодными для целей настоящего изобретения также являются триглицериды каприл-каприновой кислоты, такие как известные и поставляемые под торговой маркой МУКЬТОЬ продукты, включая продукт МУК1ТОБ 813. Другими подходящими продуктами этого класса являются САРМиЬ МСТ, САРТЕХ

- 5 010437

200, САРТЕХ 300, САРТЕХ 800, ΝΕΟΒΕΕ М5 и ΜΑΖΟΕ 1400.

Особенно предпочтительным в качестве компонента липофильной фазы является продукт МЮЬУОЬ 812 (см. патент США № 5342625).

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением могут также содержать компонент гидрофильной фазы. Компонент гидрофильной фазы может включать, например, фармацевтически приемлемый С_1-5-алкильный или тетрагидрофурфуриловый диэфир или неполный простой эфир низкомолекулярного моно- или полиоксиалкандиола. Подходящие компоненты гидрофильной фазы включают, например, ди- или неполные, в частности неполные простые эфиры моно- или поли, в частности моно- или диоксиалкандиолов, содержащих от 2 до 12, в частности 4 атома углерода. Предпочтительно, чтобы моно- или полиоксиалкандиольный фрагмент был прямоцепочечным. Примерами компонентов гидрофильной фазы, применяемыми в соответствии с настоящим изобретением, являются известные и серийно выпускаемые вещества под торговыми марками ТКА№СиТОЬ и СОЬУСОРиКОЕ (см. патент США № 5342625).

В особенно предпочтительном варианте реализации компонент гидрофильной фазы включает 1,2пропиленгликоль.

Разумеется, компонент гидрофильной фазы в соответствии с настоящим изобретением может содержать также один или несколько дополнительных ингредиентов. Однако предпочтительно, чтобы любые дополнительные ингредиенты содержали материалы, в которых соединение активного витамина Ό является достаточно растворимым, чтобы эффективность гидрофильной фазы как среды-носителя соединения активного витамина Ό не была снижена в значительной степени. Примеры возможных дополнительных компонентов гидрофильной фазы включают низшие (например, С_1-5) алканолы, в частности этанол.

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением содержат также одно или несколько поверхностно-активных веществ. Поверхностно-активные вещества, которые могут быть использованы в связи с настоящим изобретением, включают гидрофильные или липофильные поверхностно-активные вещества или их смеси. В особенности предпочтительными являются неионные гидрофильные и неионные липофильные поверхностно-активные вещества.

Подходящие гидрофильные поверхностно-активные вещества включают продукты реакции природных или гидрированных растительных масел и этиленгликоля, т.е. полиоксиэтиленгликолированные природные или гидрированные растительные масла, например полиоксиэтиленгликолированные природные или гидрированные касторовые масла. Такие вещества могут быть получены известными способами, например путем реакции природного или гидрированного касторового масла или его фракций с этиленоксидом, например, в молярном соотношении, находящемся в диапазоне от 1:35 до 1660, с возможным удалением из продукта свободных полиэтиленгликолевых компонентов, например, в соответствии со способами, описанными в немецких акцептованных патентных заявках № 1182388 и 1518819.

Подходящие гидрофильные поверхностно-активные вещества, пригодные для применения в соответствии с настоящим изобретением, также включают эфир полиоксиэтиленсорбита и жирной кислоты, например, моно- и триэфир лауриновой, эфиры пальмитиновой, стеариновой и олеиновой кислот, например типов известных и серийно выпускаютсях под торговой маркой ΤνΕΕΕΝ, включая продукты:

ΤνΕΕΝ 20 (полиоксиэтилен(20)сорбитанмонолаурат),

ΤνΕΕΝ 40 (полиоксиэтилен(20)сорбитанмонопальмитат),

ΤνΕΕΝ 60 (полиоксиэтилен(20)сорбитанмоностеарат),

ΤνΕΕΝ 80 (полиоксиэтилен(20)сорбитанмоноолеат),

ΤνΕΕΝ 65 (полиоксиэтилен(20)сорбитантристеарат),

ΤνΕΕΝ 85 (полиоксиэтилен(20)сорбитантриолеат),

ΤνΕΕΝ 21 (полиоксиэтилен(4)сорбитанмонолаурат),

ΤνΕΕΝ 61 (полиоксиэтилен(4)сорбитанмоностеарат) и

ΤνΕΕΝ 81 (полиоксиэтилен(5)сорбитанмоноолеат).

Наиболее предпочтительными продуктами этого класса, пригодными для применения в соответствии с настоящим изобретением, являются вышеуказанные продукты ΤνΕΕΝ 40 и ΤνΕΕΝ 80 (см. Наиег, е! а1., патент США № 5342625).

В качестве гидрофильных поверхностно-активных веществ, пригодных для применения в фармацевтических соединениях в соответствии с настоящим изобретением, подходят также полиоксиэтиленовые эфиры алкиловых спиртов, эфиры полиоксиэтиленгликоля и жирных кислот, например эфир полиоксиэтиленгликоля и стеариновой кислоты, эфиры полиглицерина и жирных кислот, полиоксиэтиленглицериды, полиоксиэтиленовые эфиры растительных масел, полиоксиэтиленовые эфиры гидрированных растительных масел, реакционные смеси полиолов и, например, жирные кислоты, глицериды, растительные масла, гидрированные растительные масла и стерины, сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена, блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена, диоктилсукцинат, диоктилнатрия сульфосукцинат, ди-[2-этилгексил]сукцинат или натрия лаурилсульфат, фосфолипиды, в частности лецитины, такие как, например, лецитины соевых бобов, моно- и диэфиры пропиленгликоля и жирных кислот, такие как, например, пропиленгликольдикаприлат, пропиленгликольдилаурат, пропиленгликоль

- 6 010437 гидроксистеарат, пропиленгликольизостеарат, пропиленгликольлаурат, пропиленгликольрицинолеат, пропиленгликольстеарат и, в особенности предпочтительным является диэфир пропиленгликоля и каприл-каприновой кислоты, и желчные соли, например соли щелочных металлов, в частности таурохолят натрия.

Подходящие липофильные поверхностно-активные вещества включают спирты, полиоксиэтиленовые эфиры алкиловых спиртов, жирные кислоты, желчные кислоты, эфиры глицерина и жирных кислот, эфиры ацетилированного глицерина и жирных кислот, эфиры низших спиртов и жирных кислот, полиоксиэтиленгликолевые эфиры глицерина и жирных кислот, эфиры полиоксиэтиленгликоля и жирных кислот, полиоксиэтиленглицериды, эфиры молочной кислоты моно/диглицеридов, эфиры сорбита и жирных кислот, полиоксиэтиленовые эфиры сорбита и жирных кислот, блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена, транс-этерифицированные растительные масла, стерины, сложные эфиры сахаров, простые эфиры сахаров, сахарогилицериды, полиоксиэтиленовые эфиры растительных масел, полиоксиэтиленовые эфиры гидрированных растительных масел, реакционные смеси полиолов и по меньшей мере один член группы, состоящей из жирных кислот, глицеридов, растительных масел, гидрированных растительных масел, стеринов, а также смеси указанных веществ.

Липофильные поверхностно-активные вещества, подходящие для применения в фармацевтических соединениях в соответствии с настоящим изобретением, также включают продукты транс-этерификации триглицеридов природных растительных масел и полиалкиленполиолы. Такие транс-этерифицированные продукты известны в данной области техники и могут быть получены, например, в соответствии с общими методиками, описанными в патенте США № 3288824. Они включают продукты трансэтерификации различных природных (например, негидрированных) растительных масел, например маисового масла, косточкового масла, миндального масла, масла земляного ореха, оливкового масла и пальмового масла, и их смеси с полиэтиленгликолями, в частности полиэтиленгликолями, имеющими среднюю молекулярную массу от 200 до 800. Предпочтительными являются продукты, получаемые трансэтерификацией 2 молярных частей триглицерида природного растительного масла 1 частью полиэтиленгликоля (например, имеющими среднюю молекулярную массу от 200 до 800). Различные формы продуктов транс-этерификации определенного класса известны и серийно выпускаются под торговой маркой ЬАБКАНЬ.

Другие липофильные поверхностно-активные вещества, подходящие для применения в фармацевтических составах в соответствии с настоящим изобретением, включают маслорастворимые производные витаминов, например токоферола РЕС-1000 сукцинат (1оеор11сго1 РЕС-1000 киссшаГе) (витамин Е ТРС8).

В качестве липофильных поверхностно-активных веществ, пригодных для применения в фармацевтических соединениях в соответствии с настоящим изобретением, также подходят моно-, ди- и моно/диглицериды, в особенности, продукты этерификации каприловой или каприновой кислоты глицерином, эфиры сорбита и жирных кислот, эфиры пентаэритрита и жирных кислот и простые эфиры полиалкиленгликолов, например пентаэритрит- -диолеат, -дистеарат, -монолаурат, -полигликолевый простой эфир и -моностеарат, а также сложные эфиры пентаэритрита и жирных кислот, моноглицериды, например глицерина моноолеат, глицерина монопальмитат и глицерина моностеарат, глицерина триацетат или (1,2,3)-триацетин, и стерины и их производные, например холестерины и их производные, в частности фитостерины, например продукты, включающие ситостерин, кампестерин или стигмастерин, и их аддукты с этиленоксидом, например стерины сои и их производные.

Специалистам в данной области техники известно, что некоторые поставляемые поверхностноактивные вещества содержат триглицериды в количествах от небольших до умеренных, обычно в результате неполного превращения исходного материала триглицерида, например, при реакции трансэтерификации. Так, поверхностно-активные вещества, подходящие для применения в фармацевтических составах в соответствии с настоящим изобретением, включают те поверхностно-активные вещества, которые содержат триглицериды. Примеры серийно выпускаемых поверхностно-активных составов, содержащих триглицериды, включают некоторые соединения из следующих серий поверхностно-активных веществ: бЕЬИСГКЕЗ, ΜΑΙ8ΙΝΕ8 и ΙΜ\νΐΤΟΚ8. Специфическими примерами таких соединений являются СЕЬЬС'ЧКЕ 44/14 (насыщенные полигликолизованные глицериды), СЕЬЬС'ЧКЕ 50/13 (насыщенные полигликолизованные глицериды), СЕЬИСГКЕ 53/10 (насыщенные полигликолизованные глицериды), СЕЬИСГКЕ 33/01 (полусинтетические триглицериды С₈-С1₈ насыщенных жирных кислот), СЕЬИСГКЕ 39/01 (полусинтетические глицериды), другие СЕЬИСГКЕ, такие как 37/06, 43/01, 35/10,37/02, 46/07,48/09, 50/02, 62/05 и т.д., МА18ШЕ 35-1 (глицериды линолевой кислоты) и ΙΜνίΤΟΚ 742 (глицериды каприловой/каприновой кислот) (см. патент США № 6267985).

Специалистам в данной области техники известны и другие поставляемые поверхностно-активные составы, имеющие значительное содержание триглицеридов. Следует отметить, что составы, которые одновременно содержат как триглицериды, так и поверхностно-активные вещества, могут служить в качестве всего или части компонента липофильной фазы в соответствии с настоящим изобретением, а также в качестве всех или части поверхностно-активных веществ.

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением включают также соединение

- 7 010437 активного витамина Ό. Термин соединение активного витамина Ό, используемый в данном описании, обозначает витамин Ό, гидроксилированный, по меньшей мере, по углероду-1 цикла А, например, 1агидроксивитамин Ό₃. Для состава в соответствии с настоящим изобретением предпочтительным соединением активного витамина Ό является 1а,25-гидроксивитамин Ό₃, известный также как кальцитриол. Известно большое количество других соединений активного витамина Ό, и они могут быть использованы при реализации настоящего изобретения. Примеры включают Ια-гидроксипроизводные с длиной боковой цепи 17, превышающей длину боковых цепей холестерина или эргостерина (см. патент США № 4717721), циклопентановые аналоги витамина Ό (см. патент США № 4851401), аналоги витамина Ό₃ с алкинильными, алкенильными и алканильными боковыми цепочками (см. патенты США № 4866048 и 5145846), тригидроксикальциферол (см. патент США № 5120722), соединения фторхолекальциферола (см. патент США № 5547947), метилзамещенный витамин Ό (см. патент США № 5446035), 23-оксапроизводные (см. патент США № 5411949), соединения 19-нор-витамина Ό (см. патент США № 5237110) и гидроксилированные производные 24-гомо-витамина Ό (см. патент США № 4857518). Особые примеры включают КОСЛЬТКОЕ (Коске ЬаЬогаФпек), пригодный для инъекций кальцитриол СЛЬСИЕХ, исследуемые медикаменты производства Ьео РкаттасеиксаИ, включая ЕВ 1089 (24а,26а,27атригомо-22,24-диен-1аа,25-(ОН)₂-О₃, КН 1060 (20-эпи-22-окса-24а,26а,27а-тригомо-1а,25-(ОН)₂-Э₃), 8еоса1ско1, МС 1288 (1,25-(ОН)₂-20-эпи-Э₃) и МС 903 (кальципотриол, 1а,24к-(ОН)₂-22-ен-26,27дегидро-Э₃), медикаменты от Коске Ркаттасеийса1, которые включают 1,25-(ОН)₂-16-еН-Э₃, 1,25-(ОН)₂16-еН-23-ин-Э₃ и 25-(ОН)₂-16-ен-23-ин-О₃, Скида1 РкагтасеиксаИ 22-оксакальцитриол (22-окса-1а,25(ОН)₂-Э₃, 1а,-(ОН)-Э₅ из Иллинойского университета и медикаменты из 1ке 1и81йи1е ой Мей1са1 Скешщ1ту-8скетшд АО, которые включают ΖΚ 161422 (20-метил-1,25-(ОН)₂-Э₃) и ΖΚ 157202 (20-метил-23-ен1,25-(ОН)₂-Э₃), 1а-(ОН)-Э₂, 1а-(ОН)-О₃ и 1а-(ОН)-Э₄. Дополнительные примеры включают 1а,25-(ОН)₂26,27-й₆-О₃, 1а,25-(ОН)₂-2-ен-Э₃, 1а,25-(ОН)₂-П₃, 1а,25-(ОН)₂-П₂, 1а,25-(ОН)₂-П₄, 1а,24,25-(ОН)₃-П₃, 1а,24,25-(ОН)₃-О₂, 1а,24,25-(ОН)₃-П₄, 1а-(ОН)-25-ГО₃, 1а-(ОН)-25-ГО₄, 1а-(ОН)-25-ГО₂, 1а,24-(ОН)₂Ό₄, 1а,24-(ОН)₂-Э₃, 1а,24-(ОН)₂-П₂, 1а,24-(ОН)₂-25-ЕП₄, 1а,24-(ОН)₂-25-ЕП₃, 1а,24-(ОН)₂-25-ЕП₂, 1а,25(ОН)₂-26,27-Е₆-22-ен-О₃, 1а,25-(ОН)₂-26,27-Е₆-О₃, 1а,258-(ОН)₂-26-Е₃-П₃, 1а, 25-(ОН)₂-24-Е₂-П₃,

1а,258,26-(ОН)₂-22-ен-О₃, 1а,25К,26-(ОН)₂-22-ен-П₃, 1а,25-(ОН)₂-П₂, 1а,25-(ОН)₂-24-эпи-П₃, 1а,25(ОН)₂-23-ин-О₃, 1а,25-(ОН)₂-24К-Е-О₃, 1а,258,26-(ОН)₂-П₃, 1а,24К-(ОН)₂-25Е-П₃, 1а,25-(ОН)₂-26,27-Е₆23-ин-О₃, 1а,25К-(ОН)₂-26-Е₃-О₃, 1а,25,28-(ОН)₃-П₂, 1а,25-(ОН)₂-16-ен-23-ин-П₃, 1а,24К,25-(ОН)₃-П₃, 1а,25-(ОН)₂-26,27-Е₆-23-ен-О₃, 1а,25К-(ОН)₂-22-ен-26-Е₃-П₃, 1а,258-(ОН)₂-22-ен-26-Е₃-П₃, 1а,25К-(ОН)₂Ό₃-26,26,26-ά₃, 1а,258-(ОН)₂-О₃-26,26,26-й₃, и 1а,25К-(ОН)₂-22-ен-О₃-26,26,26-й₃. Дополнительные примеры могут быть найдены в XVО 99/49870. См. также, например, патенты США № 5457217, 5447924, 5446034, 5414098, 5403940, 5384313, 5374629, 5373004, 5371249, 5430196, 5260290, 5393749, 5395830,

5250523, 5247104, 5397775, 5194431, 5281731, 5254538, 5232836, 5185150, 5321018, 5086191, 5036061,

5030772, 5246925, 4973584, 5354744, 4927815, 4804502, 4857518, 4851401, 4851400, 4847012, 4755329,

4940700, 4619920, 4594192, 4588716, 4564474, 4552698, 4588528, 4719204, 4719205, 4689180, 4505906,

4769181, 4502991, 4481198, 4448726, 4448721, 4428946, 4411833, 4367177, 4336193, 4360472, 4360471,

4307231, 4307025, 4358406, 4305880, 4279826 и 4248791.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения соединение активного витамина Ό имеет пониженный гиперкальциемический эффект по сравнению с витамином Ό, поэтому можно вводить увеличенные дозы соединения, не вызывая гиперкальциемии у животного. Пониженный гиперкальциемический эффект определяют как эффект, меньший, чем гиперкальциемический эффект, который вызывает введение равной дозы 1а,25-гидроксивитамина Ό₃ (кальцитриола). Так, например, гиперкальциемический эффект ЕВ 1089 равен 50% гиперкальциемического эффекта кальцитриола. Дополнительные соединения активного витамина Ό, имеющие пониженный гиперкальциемический эффект, включают Ко23-7553 и Ко24-5531 производства Ноййтап ЬаКоске. Другие примеры соединений активного витамина Ό, имеющие пониженный гиперкальциемический эффект, описаны в патенте США № 4717721.

Способы определения гиперкальциемического эффекта соединений активного витамина Ό известны специалистам и описаны в литературе, например Напкеп е1 а1., Сигг. Ркагт. Эе5. 6:803-828 (2000).

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением могут также содержать одну или несколько добавок. Добавки, известные в данной области техники, включают, например, вещества для снижения клейкости, антипенные вещества, буферные агенты, антиоксиданты (например, аскорбилпальмитат, бутилгидроксианизол (БГА), бутилгидрокситолуол (БГТ) и токоферолы, например, атокоферол (витамин Е)), консервирующие вещества, хелатирующие агенты, модуляторы вязкости, повышающие тонус вещества, ароматизирующие вещества, красители, отдушки, глушители, суспендирующие вещества, связывающие вещества, наполнители, пластификаторы, лубриканты, а также смеси указанных веществ. Специалист в данной области техники может легко определить содержание таких добавок, необходимое для получения желаемых свойств. Так, например, антиоксиданты могут присутствовать в количестве приблизительно от 0,01 до 0,5 мас.% от общей массы состава, предпочтительно приблизительно от 0,05 до 0,35%.

- 8 010437

Добавка может также содержать загуститель. Подходящими загустителями могут быть загустители, известные и применяемые в данной области техники, включая, например, фармацевтически приемлемые полимерные материалы и неорганические загустители. Примеры загустителей, подходящих для применения в фармацевтических составах в соответствии с настоящим изобретением, включают полиакрилатные смолы и смолы сополимеров полиакрилатов, например смолы полиакриловой кислоты и сополимерные смолы полиакриловой кислоты/метакриловой кислоты, целлюлозы и производные целлюлозы, включающие алкилцеллюлозы, например метил-, этил- и пропилцеллюлозы, гидроксиалкилцеллюлозы, например гидроксипропилцеллюлозы и гидроксипропилалкилцеллюлозы, такие как гидроксипропилметилцеллюлозы, ацилированные целлюлозы, например ацетаты целлюлозы, ацетатфталаты целлюлозы, ацетатсукцинаты целлюлозы и фталаты гидроксипропилметилцеллюлозы, и соли указанных соединений, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлозы, поливинилпирролидоны, включая, например, поли-Νвинилпирролидоны и сополимеры винилпирролидона, такие как винилпирролидонвинилацетатные сополимеры, поливиниловые смолы, например, включая поливинилацетаты и спирты, а также другие полимерные материалы, включая трагакантовую камедь, гуммиарабик, альгинаты, например, альгиновую кислоту, и соли указанных соединений, например альгинаты натрия, и неорганические загустители, такие как атапульгит, бентонит и силикаты, включая продукты гидрофильного диоксида кремния, например алкилированные (например, метилированные) силикагели, в частности продукты коллоидного диоксида кремния.

Такие загустели, как указано выше, могут быть включены, например, для создания эффекта замедленного высвобождения. Однако, если медикамент предназначен для перорального приема, применение загустителей, как указано выше, в общем случае не требуется и, как правило, менее предпочтительно. С другой стороны, применение загустителя показано, если медикамент предназначен, например, для топического применения.

Составы в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для приема любым приемлемым способом, например перорально, в частности в стандартной лекарственной форме, например в растворе, в мягкой или твердой капсулированной форме, включая желатиновые капсулированные формы, например парентеральным или топическим способом, в частности для нанесения на кожу, например, в виде крема, пасты, лосьона, геля, мази, примочки, припарки, пластыря, наклейки на кожу, или подобным способом, или для офтальмологического применения, например, в форме глазных капель, глазных лосьонов или глазных гелей. Могут быть использованы также легкотекучие формы, например растворы или эмульсии, в частности, для введения в очаг поражения, или их можно вводить перректально, т.е. в виде клизмы. Составы могут дополнительно содержать агенты, которые увеличивают доставку активного соединения витамина Ό, например липосом, полимеров или сополимеров (в частности, полимеров с разветвленной цепью).

Если состав согласно настоящему изобретению приготовлен в стандартной лекарственной форме, соединение активного витамина Ό предпочтительно присутствует в количестве от 1 до 400 мкг на стандартную дозу. Более предпочтительно, содержание соединения активного витамина Ό в стандартной дозе составляет приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295, 300, 305, 310, 315, 320, 325, 330, 335, 340, 345, 350, 355, 360, 365, 370, 375, 380, 385, 390, 395 или 400 мкг или какую-либо другую величину в этих пределах. В предпочтительном варианте реализации содержание соединения активного витамина Ό в стандартной дозе составляет приблизительно от 5 до 180 мкг, более предпочтительно приблизительно от 10 до 135 мкг, еще более предпочтительно приблизительно 45 мкг. В одном варианте реализации стандартная лекарственная форма содержит 45, 90, 135 или 180 мкг кальцитриола.

Если стандартная лекарственная форма состава представляет собой капсулу, общее количество ингредиентов, присутствующих в капсуле, предпочтительно составляет приблизительно 10-1000 мкл. Более предпочтительно общее количество ингредиентов, присутствующих в капсуле, составляет приблизительно 100-300 мкл. В другом варианте реализации общее количество ингредиентов, присутствующих в капсуле, предпочтительно составляет приблизительно 10-1500 мг, предпочтительно приблизительно 1001000 мг. В одном варианте реализации общее количество составляет приблизительно 225, 450, 675 или 900 мг. В другом варианте реализации единичная форма дозирования представляет собой капсулу, содержащую 45, 90, 135 или 180 мкг кальцитриола.

Относительные пропорции ингредиентов в составе в соответствии с настоящим изобретением, конечно, должны существенно зависеть от особенностей конкретного состава. Относительные пропорции также могут сильно зависеть от конкретной функции ингредиентов состава. Относительные пропорции также могут быть изменены в зависимости от конкретных применяемых ингредиентов и желаемых физических характеристик конечного состава, например, в случае если состав предназначен для топического применения, в зависимости от того, является ли он легкотекучей жидкостью или пастой. Средний специалист в данной области техники сможет определить рабочие пропорции компонентов в каждом конкретном примере. Все указанные ниже пропорции и относительные диапазоны масс следует понимать

- 9 010437 только как предпочтительные или индивидуально разработанные указания, а не как ограничения изобретения в его наиболее широком аспекте.

Компонент липофильной фазы в соответствии с настоящим изобретением может подходящим образом присутствовать в количествах приблизительно от 30 до 90 мас.% от общей массы состава. Предпочтительно, компонент липофильной фазы присутствует в количествах приблизительно от 15 до 65 мас.% от общей массы состава.

Поверхностно-активное вещество или поверхностно-активные вещества в соответствии с настоящим изобретением могут присутствовать в количествах приблизительно от 1 до 90 мас.% от общей массы состава. Предпочтительно, поверхностно-активное вещество или поверхностно-активные вещества присутствуют в количествах приблизительно от 5 до 85 мас.% от общей массы состава.

Количество соединения активного витамина Ό в составах в соответствии с настоящим изобретением, разумеется, может быть изменено, например, в зависимости от намеченного способа приема и от процентного содержания остальных компонентов. Однако в общем случае соединение активного витамина Ό в соответствии с настоящим изобретением может присутствовать в количестве приблизительно от 0,005 до 20 мас.% от общей массы состава. Предпочтительно, соединение активного витамина Ό присутствует в количестве приблизительно от 0,01 до 15 мас.% от общей массы состава.

Компонент гидрофильной фазы в соответствии с настоящим изобретением может присутствовать в количествах приблизительно от 2 до 20 мас.% от общей массы состава. Предпочтительно, компонент гидрофильной фазы присутствует в количествах приблизительно от 5 до 15 мас.% от общей массы состава.

Фармацевтический состав в соответствии с настоящим изобретением может представлять собой полутвердую лекарственную форму. Полутвердые лекарственные формы в соответствии с настоящим изобретением могут включать, например, приблизительно от 50 до 80 мас.% компонента липофильной фазы от общей массы состава, приблизительно от 5 до 35 мас.% поверхностно-активного вещества от общей массы состава и приблизительно от 0,01 до 15 мас.% соединения активного витамина Ό от общей массы состава.

Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением могут представлять собой жидкую лекарственную форму. Жидкие лекарственные формы в соответствии с настоящим изобретением могут содержать, например, приблизительно от 50 до 60 мас.% компонента липофильной фазы от общей массы состава, приблизительно от 4 до 25 мас.% поверхностно-активного вещества от общей массы состава, приблизительно от 0,01 до 15 мас.% соединения активного витамина Ό от общей массы состава, и приблизительно от 5 до 10 мас.% компонента гидрофильной фазы от общей массы состава.

В одном из вариантов реализации изобретения фармацевтические составы содержат соединение активного витамина Ό, липофильный компонент и поверхностно-активное вещество. Липофильный компонент может иметь любое процентное содержание приблизительно от 1 до 100%. Содержание липофильного компонента может составлять приблизительно 1,2,3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100%. Поверхностноактивное вещество может иметь любое процентное содержание приблизительно от 1 до 100%. Содержание поверхностно-активного вещества может составлять приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,

13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42,

43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72,

73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 100%.

В одном из вариантов реализации липофильный компонент представляет собой МЮЬУОЬ 812, а поверхностно-активное вещество - витамин Ε ТРО8. В предпочтительных вариантах реализации фармацевтические составы содержат приблизительно 50% МЮЬУОЬ 812 и приблизительно 50% витамина Ε ТРО8, приблизительно 90% МЮЬУОЬ 812 и приблизительно 10% витамина Ε ТРО8 или приблизительно 95% МЮЬУОЬ 812 и приблизительно 5% витамина Ε ТРО8.

В другом варианте реализации изобретения фармацевтические составы содержат соединение активного витамина Ό и липофильный компонент, например приблизительно 100% МЮЬУОЬ 812.

В предпочтительном варианте реализации изобретения фармацевтические составы содержат приблизительно 50% МЮЬУОЬ 812, приблизительно 50% витамина Ε ТРО8 и небольшие количества БГА и БГТ. Как показано далее, эти составы отличаются необычайной стойкостью, как химической, так и физической (см. пример 16). В особенно предпочтительном варианте реализации изобретения фармацевтические составы содержат приблизительно 50% МЮЬУОЬ 812, приблизительно 50% витамина Ε ТРО8 и приблизительно по 0,35% БГА и БГТ. Повышение стойкости обеспечивает более длительный срок хранения соединений. Важно отметить, что стойкость соединений позволяет хранить их при комнатной температуре, исключая сложности и расходы, связанные с хранением при охлаждении. Кроме того, такое соединение пригодно для перорального введения и, как показано далее, способно растворять высокие дозы соединения активного витамина Ό, обеспечивая введение соединения активного витамина Ό с высокой импульсной дозировкой для лечения гиперпролиферативных заболеваний и других нарушений.

- 10 010437

Кроме вышеизложенного, настоящее изобретение предоставляет также способ приготовления вышеозначенного фармацевтического состава, причем указанный способ включает получение однородной смеси индивидуальных компонентов и, если необходимо, введение полученного состава в стандартную лекарственную форму, например, заполнение указанным составом желатиновых капсул, в частности, из мягкого или твердого желатина, или заполнение капсул, изготовленных из другого материала.

В более конкретном варианте реализации настоящее изобретение также предоставляет способ приготовления фармацевтического состава, причем указанный способ включает получение однородной смеси соединения активного витамина Ό, например кальцитриола, а также компонента липофильной фазы и поверхностно-активного вещества, как указано выше, причем относительные пропорции компонента липофильной фазы и поверхностно-активного вещества выбирают в зависимости от применяемого количества соединения активного витамина Ό, получая при этом пред концентрат эмульсии.

Настоящее изобретение предоставляет также способы лечения и предотвращения гиперпролиферативных заболеваний, в частности рака и псориаза, при этом указанные способы включают прием соединения активного витамина Ό в виде препарата предконцентрата эмульсии пациентом, который в нем нуждается. В альтернативном случае пациент может принимать соединение активного витамина Ό в виде эмульсионного препарата, приготовленного путем разбавления соответствующим количеством воды предконцентрата эмульсии согласно настоящему изобретению. Альтернативно соединение активного витамина Ό можно вводить в любом составе, указанном в настоящем описании.

Термин рак, используемый в настоящем описании, относится ко всем известным раковым заболеваниям и может включать, в частности, но без ограничения следующие заболевания: лейкоз, в частности острый лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, острый миелоцитарный лейкоз, в том числе миелоидный, промиелоцитарный, миеломоноцитарный, моноцитарный и эритролейкозный лейкозы и миелодиспластический синдром; хронические лейкозы, в частности хронический миелоцитарный (гранлуоцитарный) лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, лейкоз ворсистых клеток; истинная полицитемия; лимфомы, в частности болезнь Ходжкина и другие лимофматозы; множественные миеломы, в частности вялотекущая множественная миелома, нескреторная миелома, остеосклеротическая миелома, лейкоз клеток плазмы, солитарная плазмоцитома и экстрамедуллярная плазмоцитома; макроглобулинемия Вальденстрема; моноклональная гаммопатия неустановленной этиологии; доброкачественная моноклональная гаммопатия; болезнь тяжелых цепей; саркомы костных и соединительных тканей, в частности костная саркома, остеосаркома, хондросаркома, саркома Эвинга, злокачественная опухоль гигантских клеток, фибросаркома кости, хордома, паростальная саркома, саркомы мягких тканей, ангиосаркома (гемангиосаркома), фибросаркома, саркома Капоши, лейомиосаркома, липосаркома, лимфангиосаркома, невролеммома, рабдомиосаркома и синовиальная саркома; опухоли мозга, в частности глиома, астроцитома, глиома ствола головного мозга, эпендимома, олигодендроглиома, неглиальная опухоль, неврилеммома слухового нерва, краниофарингиома, медуллобластома, менингиома, пинеоцитома, пинеобластома и первичная лимфома головного мозга; раковые заболевания молочной железы, в частности аденокарцинома, лобулярная (мелкоклеточная) карцинома, комедокарционома, медуллярный рак молочной железы, мукоидный рак молочной железы, тубулярный рак молочной железы, папиллярный рак молочной железы, рак соска молочной железы (болезнь Педжета), воспалительный рак молочной железы; раковые заболевания надпочечной железы, в частности феохромоцитома и адренокортикальная карцинома; раковые заболевания щитовидной железы, в частности папиллярный или фолликулярный рак щитовидной железы, медуллярный рак щитовидной железы и анаплазированный рак щитовидной железы; раковые заболевания поджелудочной железы, в частности инсулинома, гастринома, глюкагонома, випома, опухоль, выделяющая соматостатин, и карционидная опухоль или инсулинома; раковые заболевания гипофиза, в частности опухоль, выделяющая пролактин и акромегалия; раковые заболевания глаз, в частности глазная меланома, меланома радужной оболочки глаза, меланома сосудистой оболочки глаза, меланома ресничного тела и ретинобластома; вагинальные раковые заболевания, в частности плоскоклеточная карцинома, аденокарцинома и меланома; раковые заболевания вульвы, в частности плоскоклеточная карцинома, меланома и аденокарцинома, базально-клеточная карцинома, саркома и Педжетова болезнь гениталий; раковые заболевания шейки матки, в частности плоскоклеточная карцинома и аденокарцинома, раковые заболевания матки, в частности эндометриальная карцинама и рак матки; раковые заболевания яичника, в частности эпителиальная карцинома яичника; эпителиальная граничная опухоль яичника, герминома и стромальная опухоль; раковые заболевания пищевода, в частности плоскоклеточная карцинома, аденокарцинома, аденоидная кистозная карцинома, слизеобразующая плоскоклеточная карцинома, аденоплоскоклеточная карцинома, саркома, меланома, плазмоцитома, бородавчатая карцинома и овсяно-клеточный (мелкоклеточный) рак; раковые заболевания желудка, в частности аденокарцинома, грибовидное (полипоидное) изъязвляющее поверхностное и диффузное распространение, злокачественная лимфома, липосаркома, фибросаркома и карциносаркома; раковые заболевания толстой кишки; раковые заболевания прямой кишки; раковые заболевания печени, в частности эпителиома печени и гепатобластома; раковые заболевания желчного пузыря, в частности аденокарцинома; холангиокарциномы, в частности папиллярная, узловая и диффузная; раковые заболевания легких, в частности немелкоклеточный рак легких, плоскоклеточная карцинома (эпидермоидный рак), аденокарцинома, крупноклеточная карцинома и мелко

- 11 010437 клеточный рак легких; раковые заболевания яичек, в частности терминальная опухоль, семинома, анапластическая классическая (типичная) сперматоцитная несиминома, эмбриональная карцинома, тератоидная карцинома и хориокарцинома (опухоль желточного мешка); раковые заболевания предстательной железы, в частности аденокарцинома, лейомиосаркома, рабдомиосаркома; рак полового члена; раковые заболевания полости рта, в частности плоскоклеточная карцинома; базальноклеточная карцинома; раковые заболевания слюнной железы, в частности аденокарцинома, мукоэпидермоидная карцинома, аденоиднокистозная карцинома; раковые заболевания глотки, в частности плоскоклеточная карцинома, бородавчатая карцинома; раковые заболевания кожи, в частности базальноклеточная карцинома, плоскоклеточная карцинома и меланома, поверхностно распространяющаяся меланома, узловая меланома, злокачественная меланома лентиго, акральная лентигенозная меланома; раковые заболевания головы и шеи; раковые заболевания почек, в частности почечно-клеточная карцинома, аденокарцинома, гипернефрома, фибросаркома, переходно-клеточная карцинома (почечной лоханки и/или мочеточника); аденомиосаркома; и раковые заболевания мочевого пузыря, в частности переходно-клеточная карцинома, плоскоклеточная карцинома, аденокарцинома и карциносаркома. Кроме того, раковые заболевания, которые можно лечить способами и составами согласно настоящему изобретению, включают миксосаркому, остеобластосаркому, эндотелиосаркому, лимфангиоэндотелиосаркому, мезотелиома, синовиому, гемангиобластому, эпителиальную карциному, цистаденокарциному, бронхогенную карциному, карциному потовых желез, карциному сальных желез, папиллярную карциному и папиллярную аденокарциному. Обзор таких заболеваний приведен в работе Рщйтап с1 а1., 1985, Мебюше, 2'¹ Еб., ТВ. ЫрршсоИ Со., РЫ1абе1рЫа, РА аиб Мигрйу е1 а1., 1997, 1пРогтеб ИесШопк: Тйе Сотр1е1е Воок οί Сапсег Οίηβηοδίδ. ТгеаЦпеШ апб Весоуегу, У1ктд Репдшп, Ыете Уогк, ΝΥ.

Соединение активного витамина Ό обычно вводят с дозой приблизительно от 1 до 400 мкг, предпочтительно приблизительно от 15 до 300 мкг. В одном из специфических вариантов реализации эффективное количество соединения активного витамина Ό составляет 3, 4, 5, 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175,

180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285,

290, 295, 300, 305, 310, 315, 320, 325, 330, 335, 340, 345, 350, 355, 360, 365, 370, 375, 380, 385, 390, 395,

400 мкг или более. В некоторых вариантах реализации доза соединения активного витамина Ό составляет приблизительно от 1 до 270 мкг, предпочтительно приблизительно от 15 до 300 мкг, более предпочтительно приблизительно от 15 до 225 мкг, более предпочтительно приблизительно от 15 до 180 мкг, более предпочтительно приблизительно от 15 до 135 мкг, более предпочтительно приблизительно от 20 до 90 мкг, более предпочтительно приблизительно от 30 до 60 мкг и еще более предпочтительно приблизительно 45 мкг. В некоторых вариантах реализации способы в соответствии с настоящим изобретением включают введение соединения активного витамина Ό с дозой приблизительно от 0,12 до 3 мкг/кг массы тела. Соединение можно вводить одним из способов, включая пероральный, внутримышечный, внутривенный, парентеральный, перректальный, назальный, топический или трансдермальный.

В случае ежедневного приема соединения дозу можно поддерживать на низком уровне, например приблизительно 0,5-5 мкг, чтобы исключить или уменьшить индукцию гиперкальциемии. Если же соединение активного витамина Ό оказывает пониженный гиперкальциемический эффект, то можно вводить более высокую суточную дозу, не вызывая гиперкальциемии, например приблизительно 10-20 мкг или более (вплоть до приблизительно 50-100 мкг).

В предпочтительном варианте реализации изобретения соединение активного витамина Ό вводят в режиме импульсной дозировки, который позволяет вводить высокие дозы соединения активного витамина Ό, не вызывая гиперкальциемии. Импульсной дозировкой называют прерывистое введение соединения активного витамина Ό в соответствии с постоянной прерывистой схемой введения или с непостоянной прерывистой схемой введения. Высокие дозы соединения активного витамина Ό включают дозы, превышающие приблизительно 3 мкг, как указано в приведенных выше разделах. Таким образом, в некоторых вариантах реализации настоящего изобретения способы лечения или уменьшения интенсивности раковых заболеваний включают импульсное введение высоких доз соединений активного витамина Ό. Частота импульсной дозировки может быть ограничена рядом факторов, включая, в частности, но без ограничения, фармакокинетические параметры соединения или состава и фармакодинамическое воздействие соединения активного витамина Ό на организм животного. Так, например, животным, больным раком и имеющим ослабленную функцию почек, может потребоваться менее частое введение соединения активного витамина Ό вследствие пониженной способности их организма к выделению кальция.

Приведенные ниже примеры служат только для иллюстрации того, что термин импульсное дозирование может включать любые режимы прерывистого приема, которые определяет специалист в данной области техники.

В одном примере соединение активного витамина Ό можно принимать не чаще, чем один раз в трое суток, в четверо суток, в пять суток, в шесть суток, в семь суток, в восемь суток, в девять суток, в десять суток, в десять суток, в две недели, в три недели, в четыре недели, в пять недель, в шесть недель, в семь недель, в восемь недель или реже. Прием может продолжаться одну, две, три или четыре недели или один, два, три месяца или дольше. После некоторого перерыва прием соединения активного витамина Ό

- 12 010437 можно повторить по такой же или иной схеме применения. Перерыв может составлять одну, две, три, четыре недели или более в зависимости от фармакодинамических эффектов, которые соединение активного витамина Ό оказывает на животное.

В другом примере соединение активного витамина Ό можно принимать один раз в неделю в течение трех месяцев.

В одном предпочтительном варианте реализации соединение активного витамина Ό можно принимать один раз в неделю в течение цикла из трех или четырех недель. После перерыва в одну неделю прием соединения активного витамина Ό можно повторить по такой же или иной схеме применения.

В другом предпочтительном варианте реализации соединение активного витамина Ό можно принимать один раз в три недели.

Другие примеры схем применения, которые можно использовать в способах согласно настоящему изобретению, описаны в патенте США № 6521608, полностью включенном в данное описание в качестве ссылки.

Вышеописанные примеры схем применения приведены только в иллюстративных целях и не должны рассматриваться в качестве ограничений. Для специалистов в данной области техники очевидно, что все соединения активного витамина Ό включены в область распространения изобретения и что точное дозирование и режим приема соединений активного витамина Ό может изменяться в зависимости от многих факторов.

Величина терапевтически эффективной дозы фармацевтического агента при экстренном или длительном лечении заболевания или нарушения может отличаться в зависимости от факторов, включающих, в частности, но без ограничения, характер заболевания или нарушения, подлежащего лечению, специфических фармацевтических агентов и способ приема. В соответствии со способами согласно настоящему изобретению эффективная доза соединения активного витамина Ό представляет собой дозу соединения, эффективную для лечения или уменьшения интенсивности рака или иных гиперпролиферативных болезней. Высокая доза соединения активного витамина Ό может представлять собой дозу в пределах приблизительно от 3 до 400 мкг или какую-либо дозу в этом диапазоне, как указано выше. Величина дозы, частота приема, длительность приема или их сочетание также могут изменяться в зависимости от возраста, массы тела, реакции и истории болезни животного, а также от способа приема, фармакокинетики и фармакодинамических эффектов фармацевтических агентов. Специалисты в данной области техники учитывают эти факторы в установленном порядке.

На скорость поглощения и выделения соединений активного витамина Ό оказывает влияние множество факторов, которые хорошо известны специалистам в данной области техники. Как указано выше, фармакокинетические свойства соединений активного витамина Ό ограничивают пиковую концентрацию соединений витамина Ό, которую можно получить в крови, не вызывая возникновения гиперкальциемии. Скорость и степень абсорбции, распределение, связывание или локализация в тканях, биотрансформация и выделение соединения активного витамина Ό могут оказывать влияние на частоту приема фармацевтических агентов. В некоторых вариантах реализации соединения активного витамина Ό принимают в режиме импульсной дозировки с высокими дозами для лечения или уменьшения интенсивности рака в соответствии с описанной выше схемой применения.

В одном из вариантов реализации изобретения соединение активного витамина Ό принимают с дозой, достаточной для обеспечения в плазме пиковой концентрации соединения активного витамина Ό, составляющей приблизительно от 0,1 до 20 нМ. В некоторых вариантах реализации способы в соответствии с настоящим изобретением включают прием соединения активного витамина Ό с дозой, которая обеспечивает пиковые концентрации в плазме, составляющие 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12,5, 15, 17,5, 20 нМ или лежащие в каком-либо диапазоне указанных концентраций. В других вариантах реализации соединение активного витамина Ό принимают с дозой, которая обеспечивает в плазме пиковые концентрации соединения активного витамина Ό, превышающие приблизительно 0,5 нМ, предпочтительно приблизительно от 0,5 до 20 нМ, более предпочтительно приблизительно от 1 до 10 нМ, более предпочтительно приблизительно от 1 до 7 нМ и еще более предпочтительно приблизительно от 3 до 5 нМ.

В другом предпочтительном варианте реализации соединение активного витамина Ό принимают с дозой, составляющей по меньшей мере приблизительно 0,12 мкг/кг массы тела, более предпочтительно с дозой, составляющей по меньшей мере приблизительно 0,5 мкг/кг массы тела.

Для специалистов в данной области техники очевидно, что эти стандартные дозы рассчитаны на взрослого пациента со средними размерами и массой приблизительно 70 кг и могут быть откорректированы в соответствии с факторами, которые учитывают в установленном порядке, как указано выше.

В некоторых вариантах реализации способы в соответствии с настоящим изобретением включают также прием дозы соединения активного витамина Ό, которая быстро создает пиковую концентрацию в плазме, например, в течение 4 ч. В других вариантах реализации способы в соответствии с настоящим изобретением включают также прием дозы соединения активного витамина Ό, которая быстро устраняется, например имеет период полувыведения менее 12 ч.

Получение высоких концентраций соединения активного витамина Ό является полезным, однако,

- 13 010437 его необходимо сбалансировать с клинической безопасностью, например с отсутствием гиперкальциемии. Поэтому в одном аспекте изобретения способы согласно изобретению включают импульсное введение высоких доз соединений активного витамина Ό субъекту, страдающему раковым или другим гиперпролиферативным заболеванием, и наблюдение за отсутствием у указанного субъекта симптомов, связанных с гиперкальциемией. Такие симптомы включают кальцификацию мягких тканей (например, сердечной ткани), увеличенную плотность костей и гиперкальциемическую нефропатию. В следующем варианте реализации способы согласно изобретению включают импульсное введение высоких доз соединений активного витамина Ό субъекту, страдающему раковым или другим гиперпролиферативным заболеванием, и наблюдение за концентрацией плазмы указанного субъекта, чтобы не допустить превышение концентрации кальция в плазме приблизительно 10,2 мг/дл.

В некоторых вариантах реализации высокое содержание соединений витамина Ό в крови можно безопасно получить в сочетании со снижением транспорта кальция в кровь. В одном из вариантов реализации высокие концентрации соединения активного витамина Ό можно безопасно получать без возникновения гиперкальциемиии, если прием осуществлять в сочетании с диетой, включающей пониженное содержание кальция. В одном примере кальций может захватываться адсорбентом, абсорбентом, лигандом, хелатом или иным связующим компонентом, который не может транспортироваться в кровь через тонкую кишку. В другом примере скорость активации остеобласта можно ингибировать введением, например, бифосфоната, в частности золедроната, памидроната или алендроната, или глюкокортикоида, например преднизона или дексаметазона, в сочетании с соединением активного витамина Ό.

В некоторых вариантах реализации высокое содержание в крови соединения активного витамина Ό безопасно получают в сочетании с максимизацией скорости выделения кальция. В одном примере выделение кальция можно увеличить, обеспечив адекватную гидратацию и потребление соли. В другом примере для увеличения выделения кальция можно использовать мочегонную терапию.

В некоторых вариантах реализации способы лечения и предотвращения гиперпролиферативных заболеваний, в частности рака и псориаза, включают также введение химиотерапевтического агента или радиотерапевтического агента наряду с соединением активного витамина Ό.

Термин химиотерапевтический агент, используемый в настоящем описании, относится к любому химиотерапевтическому агенту, известному специалистам в данной области техники как эффективное средство для лечения или уменьшения интенсивности рака. Химиотерапевтические агенты включают, в частности, но без ограничения, мелкие молекулы, синтетические препараты, пептиды, полипептиды, белки, нуклеиновые кислоты (например, полинуклеотиды ДНК и РНК, включая в частности, но без ограничения, антисмысловые нуклеотидные последовательности, тройные спирали и нуклеотидные последовательности, кодирующие биологически активные белки, полипетиды или пептиды), антитела, синтетические или природные неорганические молекулы, миметические агенты и синтетические или природные органические молекулы. Любой агент, который известен как полезный, или который применялся или применяется в настоящее время для лечения или уменьшения интенсивности рака, может быть использован в сочетании с соединением активного витамина Ό в соответствии с данным изобретением. Информация о терапевтических агентах, используемых в настоящее время для лечения или уменьшения интенсивности рака, приведена, например, в работе Нагбтап с1 а1., еб§., 1996, Сообтап & Сбтап'к ТНе Рйагтасо1ощса1 ВаДк О£ Тйегараибск 9'¹' Еб, Мс-Сга^-НШ, Ыете Уогк, ΝΥ.

Химиотерапевтические агенты, пригодные для применения в способах и составах согласно настоящему изобретению, включают алкилирующие агенты, антиметаболиты, антимитотические агенты, эпиподофиллотоксины, антибиотики, гормоны и антагонисты гормонов, ферменты, платиновые координаторные комплексы, антраценодионы, мочевины, содержащие замещение, производные метилгидразина, производные имидазотетразина, цитопротекторные агенты, ингибиторы топоизомеразы ДНК, модификаторы биологических реакций, ретиноиды, терапевтические антитела, дифференцирующие агенты, иммуномодуляторные агенты и ингибиторы ангиогенезиса.

Другие химиотерапевтические агенты, которые могут быть использованы, включают абареликс, альдеслейкин, алемтузумаб, алиретиноин, аллопуринол, альтретамин, амифостин, анастрозол, мышьяковистый ангидрид, аспарагиназа, живая вакцина БЦЖ, бевацеизумаб, бексаротен, блеомицин, бортезомиб, бусульфан, калустерон, камптоцетин, капецитабин, карбоплатин, кармустин, целекоксиб, цетуксимаб, хлорамбуцил, цинакальцет, цисплатин, кладрибин, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, дарбепоэтин альфа, даунорубицин, денилейкин дифтитокс, дексразоксан, доцетаксель, доксорубицин, дромостанолон, раствор В Эллиотта, эпирубицин, эпоэтин альфа, эстрамустин, этопозид, экземестан, филграстим, флоксуридин, флударабин, фтороурацил, фулвестрант, гемцитабин, гемтуцумаб озогамицин, гефитиниб, гозерелин, оксимочевина, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, изофамид, иматиниб, интерферон альфа-2а, интерферон альфа-2б, иринотекан, тетрозол, лейковорин, левамизол, ломустин, меклоретамин, мегестрол, мелфалан, меркаптопурин, месна, метотрексат, метоксален, метилпреднизолон, митомицин С, митотан, митоксантрон, нандролон, нофетумомаб, облимерсен, опрелвекин, оксалиплатин, паклитаксел, памидронат, пегадемас, пераспаргас, пегфилграстим, пеметрексед, пентостатин, пипоброман, пликамицин, полифепросан, порфимер, прокарбазин, кинакрин, расбурикас, ритуксимаб, сарграмостим, стрептозоцин, тальк, тамоксифен, тарцева, темозоломид, тенипосид, тестолактон,

- 14 010437 тиогуанин, тиотепа, топотекан, торемифен, тоситумомаб, трастузумаб, третиноин, урацильную горчицу, валрубицин, винбластин, винкристин, винорелбин и золедронат.

Химиотерапевтические агенты можно вводить в дозах, известных специалистам в данной области техники как эффективные для лечения рака поджелудочной железы. В некоторых вариантах реализации химиотерапевтические агенты можно вводить в более низких дозах, чем обычные, благодаря добавке или синергическому эффекту соединения активного витамина Ό.

Термин радиотерапевтический агент, используемый в настоящем описании, без ограничения относится к любому радиотерапевтическому агенту, известному специалистам в данной области техники в качестве эффективного средства для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. Так, например, радиотерапевтический агент может представлять собой один из агентов, используемых в брахитерапии или радиоизотопной терапии.

В брахитерапии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В общем случае брахитерапия включает введение радиоактивных источников в организм субъекта, страдающего раковым заболеванием, предпочтительно непосредственно внутрь опухоли, таким образом, чтобы опухоль подвергалась максимальному действию радиоактивного источника, минимизируя при этом действие на здоровую ткань. Примеры изотопов, которые можно использовать в брахитерапии включают, в частности, но без ограничения, фосфор 32, кобальт 60, палладий 103, рутений 106, йод 125, цезий 137, иридий 192, ксенон 133, радий 226, калифорний 252 и золото 198. Способы введения, устройства и составы, используемые в брахитерапии, описаны в работе Махсгоп е1 а1., 8ет. Кай. Опс. 12:95-108 (2002) и в патентах США № 6319189, 6179766, 6168777, 6149889 и 5611767.

В радиоизотопной терапии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В общем случае радиоизотопная терапия включает систематическое введение радиоизотопа, который аккумулируется в раковых клетках или связывается с их поверхностью. Предпочтительное аккумулирование радиоизотопа можно реализовать с помощью различных механизмов, включая, в частности, но без ограничения, введение радиоизотопа в быстро пролиферирующие клетки, специфическое аккумулирование радиоизотопа в раковой ткани без специального нацеливания или конъюгация радиоизотопа с биомолекулой, специфической для неоплазма.

Примеры радиоизотопов, которые можно использовать в радиоизотопной терапии включают, в частности, но без ограничения, фосфор 32, иттрий 90, диспрозий 165, индий 111, стронций 89, самарий 153, рений 186, йод 131, йод 125, лютеций 177 и висмут 213. Хотя все эти изотопы могут связываться с биомолекулой, обеспечивая специфическую направленность, йод 131, индий 111, фосфор 32, самарий 153 и рений 186 можно вводить систематически без указанной конъюгации. Специалист в данной области техники может выбрать специфическую биомолекулу для обеспечения целевого воздействия на конкретный неоплазм с целью проведения радиоизотопной терапии, используя поверхностные молекулы клеток, присутствующих в этом неоплазме. Примеры биомолекул, обеспечивающих специфичность для конкретных клеток, описаны в статье Тйотак, Сапсег ВюПег. Кайюрйагт. 17:71-82 (2002), которая полностью приведена здесь в качестве ссылки. Кроме того, способы введения и составы, применяемые в радиоизотопной терапии, описаны в патентах США № 6246400, 6358194 и 5766571.

Термин радиотерапевтическое лечение, используемый в данном описании, без ограничения относится к любым способам радиотерапевтического лечения, известным специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. Так, например, радиотерапевтическое лечение может представлять собой радиотерапию с внешним излучением, термотерапию, радиохирургию, радиотерапию с применением заряженных частиц, нейтронную радиотерапию или фотодинамическую терапию.

В радиотерапии с внешним излучением можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В общем случае радиотерапия с внешним излучением включает облучение определенного объема организма субъекта излучением с высокой энергией, вызывающим смерть клеток в этом объеме. Облучаемый объем предпочтительно включает всю область, пораженную раковым заболеванием, которое подлежит лечению, и предпочтительно минимально возможное содержание здоровой ткани. Способы введения, устройства и составы, используемые в радиотерапии с внешним излучением, описаны в патентах США № 6449336, 6398710, 6393096, 6335961, 6307914, 6256591, 6245005, 6038283, 6001054, 5802136, 5596619 и 5528652.

В термотерапии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В некоторых вариантах реализации термотерапия может представлять собой криодеструкционную терапию. В других вариантах реализации термотерапия может представлять собой гипертермическую терапию. Кроме того, имеются варианты реализации, в которых термотерапия может представлять собой терапию, повышающую температуру опухоли в большей степени,

- 15 010437 чем гипертермическая терапия.

Криодеструкционная терапия включает замораживание неопластической массы, что приводит к образованию внутри- и внеклеточных кристаллов льда, разрушению клеточных мембран, белков и органелл и созданию гиперосмотической среды, вызывая смерть клеток. Способы и устройства, используемые в криодеструкционной терапии, описаны в работе МигрЬу е! а1., 8ет. Иго1. Опсо1. 79:133-140 (2001) и в патентах США № 6383181, 6383180, 5993444,5654279, 5437673 и 5147355.

Гипертермическая терапия обычно включает повышение температуры неопластической массы в пределах приблизительно от 42 до 44°С. Температуру раковой опухоли можно увеличить и выше указанного предела, однако, это может увеличить поражение окружающей здоровой ткани, не приводя к повышению смертности клеток внутри опухоли, подлежащей лечению. При гипертермической терапии опухоль можно нагревать без ограничения любыми способами, известными специалистам в данной области техники. В частности, но без ограничения, опухоль можно нагревать микроволновым излучением, сфокусированным ультразвуком высокой интенсивности, ферромагнитными термоэлементами, локализованными электрическими полями, инфракрасным излучением, мокрой или сухой высокочастотной абляцией, лазерной фотокоагуляцией, лазерной интерстициальной термотерапией и электроакустикой. Микроволновое и высокочастотное излучение можно генерировать с помощью волноводных аппликаторов, а также рупорных, спиральных, листовых и компактных аппликаторов.

Другие способы, устройства и составы, которые используют для повышения температуры опухоли, описаны в статье ХУнаЦ е! а1., Ьапсе! Опсо1. 3:487-97 (2002) и в патентах США № 6470217, 6379347, 6165440, 6163726, 6099554, 6009351, 5776175, 5707401, 5658234, 5620479, 5549639 и 5523058.

В радиохирургии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В общем случае радиохирургия включает воздействие направляемого вручную радиоактивного источника на определенный объем организма субъекта, что вызывает смерть клеток в указанном объеме. Облучаемый объем предпочтительно содержит всю раковую опухоль, подлежащую лечению, и минимально возможное количество здоровой ткани. Обычно ткань, подлежащую лечению, вначале подвергают воздействию традиционных хирургических методов, а затем хирург вручную направляет на нее радиоактивный источник. В альтернативном варианте исполнения радиоактивный источник можно установить вблизи ткани, которая подлежит облучению, например, с помощью лапароскопа. Способы и устройства, применяемые в радиохирургии, описаны также в работе Уа1епДш е! а1., Еиг. 1. 8игд. Опсо1. 28:180-185 (2002) и в патентах США № 4621416, 6248056 и 5547454.

В радиотерапии с применением заряженных частиц можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В некоторых вариантах реализации радиотерапия с применением заряженных частиц может представлять собой протонно-лучевую радиотерапию. В других вариантах реализации радиотерапия с применением заряженных частиц может представлять собой гелиево-ионную радиотерапию. В общем случае радиотерапия с применением заряженных частиц включает облучение определенного объема организма субъекта лучом заряженных частиц, что вызывает смерть клеток в указанном объеме. Облучаемый объем предпочтительно содержит всю раковую опухоль, подлежащую лечению, и минимально возможное количество здоровой ткани. Способ реализации радиотерапии с применением заряженных частиц описан в патенте США № 5668371.

В нейтронной радиотерапии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В некоторых вариантах реализации нейтронная радиотерапия с применением заряженных частиц может представлять собой нейтронозахватную терапию. В таких вариантах реализации субъекту вводят соединение, которое выделяет излучение при бомбардировке нейтронами и предпочтительно аккумулируется в неопластической массе. Затем опухоль облучают нейтронным лучом с низкой энергией, активируя соединение и заставляя его излучать продукты распада, которые убивают опухолевые клетки. Соединение, подлежащее активации, можно предпочтительно аккумулировать в целевой ткани одним из способов, применяемых для радиоизотопов, как описано выше, или способами, описанными в работе Ьагатоге, 8етт. Опсо1. 24:672-685 (1997) и в патентах США № 6400796,5877165, 5872107 и 5653957.

В других вариантах реализации нейтронная радиотерапия может представлять собой радиотерапию быстрых нейтронов. В общем случае радиотерапия быстрых нейтронов включает облучение определенного объема в организме субъекта нейтронным лучом, вызывающим смерть клеток в указанном объеме.

В фотодинамической терапии можно использовать без ограничения любую схему применения, дозу или способ, известные специалистам в данной области техники как эффективные для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания. В общем случае фотодинамическая терапия включает введение фотосенсибилизирующего агента, который предпочтительно накапливается в неопластической массе и делает неоплазм чувствительным к свету, с последующим облучением опухоли световым излучением с соответствующей длиной волны. При таком облучении фотосенсибилизирующий агент катализирует образование цитотоксического агента, например, синглетного кислорода, который убивает рако

- 16 010437 вые клетки. Способы введения и устройства, применяемые в фотодинамической терапии, описаны в работе Норрег, Ьапсе! Опсо1. 7:12-219 (2000) и в патентах США № 6283957, 6071908, 6011563, 5855595, 5716595 и 5707401.

Не желая ограниваться какой-либо конкретной теорией воздействия, авторы настоящего изобретения предполагают, что соединения активного витамина Ό могут повышать чувствительность раковых клеток к радиотерапии, и эта повышенная чувствительность вызывает изменения клеточных механизмов, регулирующих апоптоз и/или клеточный цикл. Введение соединения активного витамина Ό может не только усиливать, но и расширять применение радиотерапии для лечения или уменьшения интенсивности ракового заболевания, которое в противном случае не реагировало бы на текущую радиотерапию. Кроме того, повышение чувствительности клеток к лечению может обеспечить применение более низкой дозы радиотерапии, что снижает побочные эффекты, связанные с радиотерапией.

Радиотерапию можно использовать для разрушения опухолевых клеток до или после хирургического лечения, до или после химиотерапии, а иногда во время химиотерапии. Радиотерапию можно также использовать для паллиативного снижения симптомов рака, например для уменьшения боли. К типам опухолей которые можно лечить с помощью радиотерапии относятся локализованные опухоли, которые невозможно удалить полностью, а также метастазы и опухоли, полное удаление которых вызывало бы неприемлемые функциональные или косметические дефекты или было бы связано с недопустимыми хирургическими рисками.

Следует понимать, что конкретные дозы радиации, используемые для лечения ракового заболевания, и способ введения зависят от множества факторов. Так, дозирование радиации, которое можно использовать в соответствии со способами настоящего изобретения, определяется требованиями каждой конкретной ситуации. Дозирование зависит от таких факторов, как размер опухоли, местоположение опухоли, возраст и пол пациента, частота дозирования, присутствие других опухолей, возможные метастазы и т. п. Специалисты в области радиотерапии могут легко установить дозировку и способ введения радиации для любой конкретной опухоли с помощью литературы, в частности На11, Е. 1.. ВайюЬю1оду Гог Фе ВайюЬю1одк1, 5^4Ь еййюп, Ырртсой \У|Шат5 & ХУйкнъ РцЫкйега, РЫ1айе1рЫа, РА, 2000; Сипйегкоп, Ь. Ь. апй Террег 1. Е., ей§., С1шюа1 КаФайоп Опсо1оду, СйигсЫН Ьгутдйопе, Ьопйоп, Епд1апй, 2000; апй Сгоксй, Ό. 8., Вю1одюа1 ЕГГес(5 оГ ВаФайоп, 2^пй еййюп, Асайетк Рге§8, 8ап Егапсксо, СА, 1980. В некоторых вариантах реализации введение радиотерапевтических агентов и облучение можно производить с более низкими дозами, чем известные специалистам в данной области техники, благодаря дополнительному или синергическому эффекту соединения активного витамина Ό.

Величина дозирования и частота введения дополнительных терапевтических агентов определяются условиями терапевтической эффективности. Дозирование и частота введения этих агентов обычно изменяются в соответствии с факторами, специфическими для каждого пациента, в зависимости от конкретных вводимых терапевтических агентов, тяжести и типа рака поджелудочной железы, способа введения, а также возраста, массы тела, реакции и истории болезни пациента. Специалист в данной области техники может выбрать соответствующие режимы, учитывая указанные факторы и следуя, например, дозировке, описанной в литературе и рекомендуемой РйукШап'к Эе^к ВеГегепсе (56'¹' ей., 2002).

Животным с резектабельным раком соединение активного витамина Ό можно вводить до и/или после хирургической операции. Аналогично этому введение химиотерапевтических и радиотерапевтических агентов или лечебные процедуры можно производить до и/или после хирургической операции.

Согласно настоящему изобретению лечение соединением активного витамина Ό можно производить в любой период до, во время или после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур. Точный период лечения соединением активного витамина Ό изменяется в зависимости от применяемого соединения активного витамина Ό, типа ракового заболевания поджелудочной железы, пациента и других связанных факторов. Соединение активного витамина Ό можно вводить в период от 12 ч до 3 месяцев до или после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур. Соединение активного витамина Ό можно вводить по меньшей мере за 1 сутки до или на следующие сутки после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур и в течение 3 месяцев до или после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур. В некоторых вариантах реализации способы согласно изобретению включают введение соединения активного витамина Ό один раз в 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 суток течение периода от 3 до 60 суток до или после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур.

Введение соединения активного витамина Ό можно продолжать одновременно с введением химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведением лечебных процедур. Кроме того, введение соединения активного витамина Ό можно продолжать после введения химиотерапевтических или радиотерапевтических агентов или проведения лечебных процедур.

В некоторых вариантах реализации изобретения способ введения соединения активного витамина Ό отдельно или в сочетании с химиотерапевтическими или радиотерапевтическими агентами или лечебными процедурами можно повторять по меньшей мере один раз. Способ можно повторять столько раз, сколько требуется для достижения или поддержания терапевтической реакции, например от 1 до 10 раз.

- 17 010437

При каждом повторении способа соединение активного витамина Ώ и химиотерапевтические или радиотерапевтические агенты или лечебные процедуры могут быть одинаковыми или отличными от использовавшихся в предыдущем повторении.

Кроме того, период и способ введения соединения активного витамина Ώ могут изменяться от одного повторения к другому.

В предпочтительном варианте реализации раковые заболевания лечат способом комбинационной химиотерапии, как описано в патентах США № 6087350 и 6559139. В этом варианте реализации для лечения гиперпролиферативного заболевания соединения активного витамина Ώ вводят в сочетании с другими фармацевтическими агентами, в частности с цитотоксическими агентами. Предпочтительно, предварительная обработка гиперпролиферативных клеток соединениями активного витамина Ώ с последующим воздействием цитотоксическими агентами повышает эффективность цитотоксических агентов. Так, например, соединение активного витамина Ώ можно вводить за сутки до введения химиотерапевтического агента.

Животные, которых можно лечить согласно настоящему изобретению, включают всех животных, состояние которых может быть улучшено при приеме препаратов в соответствии с настоящим изобретением. Такие животные включают человека, домашних животных, таких как собаки и кошки, и сельскохозяйственных животных, в частности коров, свиней, овец, коз и т. п.

Ниже приведены иллюстрирующие, но не ограничивающие примеры способа и составов в соответствии с настоящим изобретением. Другие подходящие модификации и адаптации разнообразных условий и параметров, обычно встречаемые в клинической терапии, и очевидные для опытных специалистов в данной области техники, находятся в соответствии и в пределах области действия настоящего изобретения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Относительная химическая совместимость кальцитриола и выбираемых компонентов.

В этом примере относительную химическую совместимость кальцитриола и выбираемых липофильных, гидрофильных и поверхностно-активных компонентов оценивали, измеряя выделенное процентное количество (степень извлечения) неизмененного кальцитриола после хранения при 40°С и при 60°С. Степень извлечения кальцитриола определяли на основании данных жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД, НРЬС). Результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1. Степень извлечения кальцитриола, %, приготовленного вместе с выбранными компонентами

Компонент	Наполнитель	Время	Степень извлечения, %, при 40°С	Степень извлечения, %, при 60°С
Липофильный	Кукурузное масло	0	100,0	100,0
		3 суток	93,77	104,80
		7 суток	90,27	91,50
		14 суток	89,89	86,46
	Соевое масло	0	100,0	100,0
		3 суток	96,44	94,56
		7 суток	98,46	98,57
		14 суток	96,66	93,15
	Подсолнечное	0	100,0	100,0
	масло	3 суток	99,10	99,33
		7 суток	102,7	102,93
		14 суток	96,56	88,79
	Витамин Е	0	100,0	100,0
		3 суток	128,56	160,79
		7 суток	0,00	0,00
		14 суток	102,29	65,02
	М|д1уо1 812	0	100,0	100,0
		3 суток	98,23	97,01
		7 суток	99,31	96,78
		14 суток	99,17	99,48
	М(д1уо1 812, 0,02%	0	100,0	100,0
	БГА/БГТ	3 суток	98,41	97,83
		7 суток	97,43	98,17
		14 суток	98,72	102,15
	Сар1ех 200	0	100,0	100,0
		3 суток	99,20	97,28
		7 суток	100,14	97,68
		14 суток	108,83	101,15
	каЬга!ас СС	0	100,0	100,0

- 18 010437

		3 суток	98,60	95,84
7 суток	100,05	99,51
14 суток	101,37	100,24
Г идрофильный	ПЭГ 300	0	100,0	100,0
3 суток	78,22	18,95
7 суток	52,68	4,61
14 суток	10,09	1,84
Пропиленгликоль	0	100,0	100,0
3 суток	97,56	99,71
7 суток	101,73	108,47
14 суток	105,83	138,22
Поверхностноактивное вещество	Сгеторпог Е1_Р	0	100,0	100,0
3 суток	82,61	66,28
7 суток	62,86	60,90
14 суток	51,90	59,92
СгеторКог КН 40 25% в М|д1уо1 812	0	100,0	100,0
3 суток	105,30	91,91
7 суток	92,10	78,30
14 суток	96,88	87,95
Ро1узогЬа1е 80	0	100,0	100,0
3 суток	87,94	67,43
7 суток	87,29	71,71
14 суток	60,52	66,08
СЕШС1КЕ 44/14 25% в М|д1уо1 812	0	100,0	100,0
3 суток	98,70	107,68
7 суток	101,55	83,06
14 суток	100,96	98,11
Витамин Е ТРС5 25% в М(д!уо1 812	0	100,0	100,0
3 суток	101,15	97,26
7 суток	101,26	98,74
14 суток	103,61	100,15
ЬаЬгИН М	0	100,0	100,0
3 суток	98,46	95,19
7 суток	99,45	95,64
14 суток	100,30	78,97
Рокэхатег 188 25% в М|д!уо! 812	0	100,0	100,0
3 суток	116,42	76,47
7 суток	126,39	116,67
14 суток	126,79	83,30

Из полученных значений степени извлечения видно, что наиболее совместимыми компонентами являются Μίβίγοί 812 (при наличии или в отсутствии БГТ и БГА), ЬаЬгаГас СС и Сар1ех 200 из группы липофильных компонентов, пропиленгликоль из группы гидрофильных компонентов и витамин Е ТРС8 и ОЕЬиС1КЕ 44/14 из группы поверхностно-активных веществ.

Приимер 2. Стабильность жидких и полутвердых препаратов кальцитриола.

I. Введение

В этом примере была измерена стабильность препарата кальцитриола, содаржащего соединения активного витамина Ώ, в девяти различных видах препаратов (четыре жидких препарата и пять полутвердых препаратов).

II. Приготовление препаратов кальцитриола

А. Жидкие препараты

Были приготовлены четыре жидких препарата кальцитриола (Ы-Ь4), содержащие ингредиенты, перечисленные в табл. 2. Готовый состав содержал 0,208 мг кальцитриола на 1 г жидкого препарата.

- 19 010437

55,0 ~0~

Таблица 2. Состав жидких препаратов кальцитриола

Ингредиент Кальцитриол

М«д1уо1 812

Сар1ех 200 1_аЬга(ас СС

1_1

0,0208

56,0

О !_2

0,0208

62,0

О ьз

0,0208

О

Ι_4

Витамин Е ТРСЗ

1_аЬп!Н М

1,2-пропиленгликоль

БГТ

БГА

22,0

14,0

9,0

0Ц5

0Ц5

Количества указаны в граммах.

В. Полутвердые препараты

Приготовили пять полутвердых препарата кальцитриола (881-885), которые содержали ингредиенты, перечисленные в табл. 3. Готовый состав содержал 0,208 мг кальцитриола на 1 г полутвердого препарата.

Таблица 3. Состав полутвердых препаратов кальцитриола

Ингредиент	881	882	883	884	885
Кальцитриол	0,0208	0,0208	0,0208	0,0208	0,0208
М|д1уо1 812	80,0	0	65,0	0	79,0
Сар1ех 200	0	82,0	0	60,0	0
1_аЬга1ас СС	0	0	0	0	12,0
Витамин Ε ТР68	20,0	18,0	5,0	5,0	9,0
ЬаЬпТИ М	0	0	0	0	0
СЕ1_иС1КЕ 44/14	0	0	30,0	35,0	0
БГТ	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05
БГА	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05

Количества указаны в граммах.

С. Способ приготовления жидких и полутвердых препаратов кальцитриола

1. Приготовление доставочных средств

Стограммовые количества четырех жидких препаратов кальцитриола (Ь1-Ь4) и пяти полутвердых препаратов кальцитриола (881-885), перечисленных в табл. 2 и 3, соответственно, готовили следующим образом.

Перечисленные ингредиенты, за исключением кальцитриола, смешивали в подходящем стеклянном сосуде и перемешивали до гомогенности. Витамин Е ТРС8 и ОЕЬиСГКЕ 44/14 перед взвешиванием и добавлением в препарат нагревали и гомогенизировали при 60°С.

2. Приготовление активных препаратов

Полутвердые доставочные средства нагревали и гомогенизировали при температуре <60°С. Кальцитриол в количестве 12+1 мг взвешивали и раскладывали в отдельные стеклянные бутылочки с винтовыми крышками при притушенном свете, одну бутылочку использовали для одного препарата. (Кальцитриол чувствителен к свету, при работе с кальцитриолом/его препаратами необходим притушенный/красный свет). Точную массу записывали до 0,1 мг. Как только кальцитриол помещали в бутылочки, крышки немедленно закрывали. Затем, при помощи следующей формулы вычисляли количество каждого доставочного средства, требуемое для доведения концентрации до 0,208 мг/г:

С^/0,208 = требуемая масса доставочного средства, где С_А = масса кальцитриола, мг, и

0,208 = конечная концентрация кальцитриола, мг/г.

Наконец, в каждую из соответствующих бутылочек, содержащих кальцитриол, прибавили соответствующее количество доставочного средства. Препараты нагревали (<60°С) при смешивании, чтобы растворить кальцитриол.

ΙΙΙ. Стабильность препаратов кальцитриола

Девять препаратов кальцитриола (Ь1-Ь4 и 881-885) анализировали для определения стабильности компонента кальцитриола при трех различных температурах. Каждый из образцов девяти препаратов выдерживали при температуре 25, 40 и 60°С. Образцы всех девяти препаратов, выдержанные при трех

- 20 010437 температурах, анализировали при помощи ЖХВД спустя 1, 2 и 3 недели. Кроме того, образцы, выдержанные при 60°С, анализировали при помощи ЖХВД спустя 9 недель. Процентное содержание исходного кальцитриола, оставшееся в каждый момент измерения, определенное для каждого образца, указано в табл. 4 (жидкие препараты) и табл. 5 (полутвердые препараты).

* процент от концентрации при нулевом времени

Таблица 5. Стабильность полутвердых препаратов

Препарат	Температура	Возврат* кальцитриола (%)
Неделя 1	Неделя 2	Неделя 3	Неделя 9
Полутвердый #1	25°С	98,5	98,9	99,8	Н.о.
40°С	99,6	99,0	98,2	Н.о.
60пС	97,9	97,2	96,3	104,6
Полутвердый #2	25°С	100,0	99,6	100,4	Н.о.
40пС	98,7	99,6	98,7	Н.о.
60пС	97,2	98,0	98,6	100,0
Полутвердый #3	25°С	101,2	98,9	100,4	Н.о.
40°С	100,0	98,7	98,8	Н.о.
60°С	98,3	97,6	98,4	97,1
Полутвердый #4	25°С	100,2	99,0	99,6	Н.о.
40°С	98,4	99,2	98,5	Н.о.
60°С	96,8	97,7	97,7	103,4
Полутвердый #5	25°С	98,8	99,2	98,9	Н.о.
40иС	99,0	97,1	96,8	Н.о.
60°С	96,8	96,7	96,0	97,7

* процент от концентрации при нулевом времени

Как видно из табл. 4 и 5, кальцитриол остается относительно стабильным с очень незначительной степенью распада во всех проанализированных препаратах (жидких и полутвердых).

Пример 3. Исследование внешнего вида препаратов кальцитриола, их УФ поглощения и поглощения в видимом диапазоне.

Препараты кальцитриола 1.1 и 883 были приготовлены до начала этого исследования, и их хранили при комнатной температуре, защищенными от света. В табл. 6 указаны количества ингредиентов, из которых готовили эти препараты.

- 21 010437

Таблица 6. Состав препаратов кальцитриола, используемых для анализа поглощения

Перед использованием препараты нагревали до 55°С. Оба препарата (жидкий #1 и полутвердый #3) хорошо смешивали в вихревом смесителе, они имели вид прозрачных жидкостей. Каждый препарат кальцитриола (= 250 мкл) добавляли в 25 мл мерную колбу. Точные добавленные массы составляли 249,8 мг для жидкости #1 и 252,6 мг для полутвердого #3. При контакте со стеклом полутвердый препарат #3 затвердел. Затем прибавили деионизованную воду до 25 мл отметки и растворы смешивали в вихревом смесителе до однородности. В этот момент наблюдаемый внешний вид и поглощение полученных смесей при 400 нм определяли при помощи УФ спектрофотометрии и спектрофотометрии в видимом диапазоне. В качестве контрольного раствора применяли деионизованную воду и измерения проводили при 400 нм. Поглощение каждого 5 образца измеряли 10 раз в течение 10 мин. Результаты сведены в табл. 7. Оба полученных препарата были белыми и непрозрачными.

Таблица 7. Значения поглощения для препаратов при 400 нм

Измерение	Жидкий #1	Полутвердый #3
1	2,4831	1,6253
2	2,5258	1,6290
3	2,5411	1,6309
4	2,5569	1,6328
5	2,5411	1,6328
6	2,5258	1,6347
7	2,5569	1,6328
8	2,5111	1,6366
9	2,5111	1,6366
10	2,5411	1,6328
Среднее	2,5294	1,6324
Κ8ϋ% (ΚβΙβΐϊνβ 31апс1агс1 Οβνϊθίϊοη, относительное стандартное отклонение)	0,91	0,21

Пример 4. Диаметр капелек эмульсии, образованных жидкими и полутвердыми доставочными средствами (без кальцитриола).

В этом примере измеряли средний диаметр капелек эмульсии, полученных после разбавления жидких (Ь1-Ь4) и полутвердых (881-885) доставочных средств предконцентратов эмульсий (не содержащих кальцитриола) имитацией желудочного сока (ИЖС), не содержащей энзимов. Средний диаметр капелек определяли по рассеиванию света. Внешний вид предконцентратов и полученных эмульсий также отмечали визуально. Результаты указаны в табл. 8.

- 22 010437

Таблица 8. Диаметр капелек эмульсии, образованных доставочными средствами предконцентратов эмульсий (без кальцитриола)

Препарат	Внешний вид предконцентрата эмульсии	Соотношение предконцентрат: ИЖС	Средний гидродинамический диаметр*	Внешний вид эмульсии
И	Прозрачная жидкость	1:1600	237	Непрозрачная
1_2	Прозрачная жидкость	1:1600	281	Непрозрачная
13	Прозрачная жидкость	1:1600	175	Непрозрачная
Ь4	Прозрачная жидкость	1:1600	273	Непрозрачная
881	Полутвердое вещество	1:2000	305	Непрозрачная
882	Полутвердое вещество	1:2000	259	Непрозрачная
883	Полутвердое вещество	1:2000	243	Непрозрачная
834	Полутвердое вещество	1:2000	253	Непрозрачная
835	Полутвердое вещество	1:2000	267	Непрозрачная
* среднее в нанометрах

Из вышеприведенных результатов видно, что капельки (частицы), образованные препаратами предконцентратов эмульсий, - это частицы субмикронного размера, несмотря на непрозрачный вид эмульсии.

Пример 5. Диаметр капелек эмульсии, образованных жидкими и полутвердыми препаратами каль цитриола.

В этом примере измеряли средний диаметр капелек эмульсии, полученных после разбавления жидкого #1 (Ы) и полутвердого #3 (883) предконцентратов эмульсий имитацией желудочного сока (ИЖС), не содержащей энзимов. Препараты, применяемые в этом примере, содержали кальцитриол в концентрации 0,2 мг/1 г препарата. Диаметр капелек определяли по рассеиванию света. Внешний вид предконцентратов и полученных эмульсий также отмечали визуально. Результаты указаны в табл. 9.

Таблица 9. Диаметр капелек эмульсии, образованных препаратами

Препарат	Соотношение предконцентрат: ИЖС	Средний гид род инам ически й диаметр*	Внешний вид эмульсии
И	1:1600	257	Непрозрачная
883	1:2000	263	Непрозрачная

* среднее в нанометрах

Пример 6. Дисперсия кальцитриола из предконцентратов эмульсий ίη уйго.

В этом примере определяли разброс дисперсии кальцитриола в различных препаратах в желатиновых капсулах. Единичную капсулу, содержащую 250 мг препарата кальцитриола в желатиновой капсуле размера-2 (каждая капсула содержала 0,2 мг кальцитриола/г препарата), прибавляли к 200 мл имитации желудочного сока (ИЖС), не содержащей ферментов, при 37°С перемешивали лопастной мешалкой при 200 об./мин. Затем образцы фильтровали через 5 мкм фильтр и измеряли концентрацию кальцитриола через 30, 60, 90 и 120 мин при помощи ЖХВД. Результаты указаны в табл. 10.

- 23 010437

Таблица 10. Процент кальцитриола, полученный в фильтрате после диспергирования в ИЖС и фильтрации через 5 мкм фильтр

Препарат	30 мин.	60 мин.	90 мин.	120 мин.
Жидкий #1	106	103	86	68
Полутвердый #3	109	99	73	53
Препарат сравнения #	0	0	0	0

Препарат сравнения содержал кальцитриол при 0,2 мг/г, растворенный в М1д1уо1 812 с 0,05% БГА и 0,05% БГТ. Этот препарат аналогичен препарат КОСАЬТКОБ, выпускаемому Коске Ьакога1:опе8.

Как видно из данного примера, дисперсия кальцитриола в имитации желудочного сока из капсул, содержащих как препарат Ь1, так и 883, гораздо выше, чем дисперсия из капсул, содержащих препарат сравнения (аналогичный препарату КОСАЬТКОБ, выпускаемому Коске Ьакога1ог1е8).

Пример 7. Концентрации в плазме и фармакокинетика кальцитриола у собак.

При фармакокинетическом исследовании, проведенном на собаках, сравнивали уровни кальцитриола в плазме крови собак после введения 1,0 мкг/кг трех различных препаратов: КОСАЬТКОБ, жидкого препарата (жидкий #1) и полутвердого препарата (полутвердый #3). Четырем собакам вводили перорально 1,0 мкг/кг КОСАЬТКОБ полутвердого препарата или жидкого препарата. Если собакам вводили более одного препарата, прием каждого препарата происходил минимум через семь суток.

Для анализа уровней кальцитриола образцы крови были взяты перед приемом и спустя 0, 5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36 и 48 ч после приема препарата. Для группы КОСАЬТКОБ образцы крови для клинического химического анализа отбирали перед приемом препарата и спустя 24 и 48 ч после него, для жидких и полутвердых препаратов образцы отбирали перед приемом препарата и спустя 4, 24, 48, 72, 96 и 120 ч после него. Содержание кальцитриола в образцах определяли при помощи радиоиммунологического исследования, а затем подвергали фармакокинетическому анализу.

Зависимость концентрации кальцитриола в плазме от времени для трех препаратов показана на фиг. 1.

Итоговые результаты фармакокинетических исследований кальцитриола для одного из трех препаратов при обычной дозе 1,0 мкг/кг представлены в табл. 11-14.

Таблица 11: Итоговые параметры кальцитриола, определенные для собак

Параметр	КОСА1_ТБЮ1_	Полутвердый #3	Жидкий #1
	Среднее	8ϋ	Среднее	8ϋ	Среднее	δϋ
Стах, ПГ/МЛ	717,4	51,5	2066,6	552,5	2164,4	253,9
Ттах , 430	3,0	(2-6)	2,0	(1-2)	1,5	(1-2)
А11С(о-«), пг' час/мл	11988,0	3804,7	12351,7	1624,9	14997,9	3531,7
Τι/2&, час	25,1	11,1	4,8	1,2	1,2	3,5

(81апбагб Пеу1аИоп) - стандартное отклонение, ^а - выражено как среднее и диапазон, ^Ь - выражено как среднее гармоническое и псевдо 8Ό на основе отклонения, рассчитанного по методу разбиения выборки (]асккш£е уапапсе).

Таблица 12. Концентрация в плазме (пг/мл) и фармакокинетические параметры кальцитриола у собак после ~ одного приема КОСАБТКОБ при дозе1 мкг/кг

Параметр	Время, час	Собака 101	Собака 102	Собака 103	Собака 104	Среднее	8ϋ
	0,0	ВОЬ	ВО1	ВОЬ	ВО1	0	0
	0,5	488,2	304,8	182,7	ΒΩί.	243,9	205,4
	1,0	478,2	634,8	500,7	555,7	542,4	69,7
	2,0	518,2	700,8	749,7	765,7	683,6	113,7

- 24 010437

	4,0	494,2	658,8	750,7	745,7	662,4	119,8
	6,0	652,2	566,8	496,7	532,7	559,9	68,0
	8,0	381,2	366,8	418,7	381,7	387,1	22,2
	10,0	313,2	212,8	165,7	158,7	212,6	71,2
	12,0	190,2	186,8	189,7	171,7	184,6	8,7
	24,0	78,2	78,8	69,7	97,7	81,1	11,8
	36,0	63,2	83,8	80,7	67,7	73,9	10,0
	48,0	66,2	47,8	45,7	52,7	53,1	9,2
Стах, пг/мл		652,2	700,8	750,7	765,7	717,4	51,5
Ттах , 430		6,0	2,0	4,0	2,0	3,0	(2-6)
Аис((М, ПГ час/мл		17693,6	10094,5	9976,2	10187,5	11988,0	3804,7
Τι/215, час		100,4	18,8	20,2	21,3	25,1	11,1

8Ό - стандартное отклонение,

ВОЕ - значение находится ниже предела определения,

- выражено как среднее и диапазон, ^ь - выражено как среднее гармоническое и псевдо 8Ό на основе отклонения, рассчитанного по методу разбиения выборки (]асккш£е уапапсе)

Жирный шрифт использовали для вычисления λ.

Таблица 13. Концентрация в плазме (пг/мл) и фармакокинетические параметры кальцитриола у собак после одного приема полутвердого препарата #3 при дозе 1 м кг/кг

Параметр	Время, час	Собака 101	Собака 102	Собака 103	Собака 104	Среднее
	0,0	ВСЯ	ВСЯ	ВСЯ	ВСЯ	0	0
	0,5	198,1	11,0	вся	ВОЕ	52,3	97,4
	1,0	1208,1	2246,0	1128,7	503,4	1271,6	722,0
	2,0	1255,1	2110,0	2269,7	2495,4	2032,6	541,9
	4,0	902,1	1371,0	1095,7	1437,4	1201,6	248,5
	6,0	603,1	1039,0	932,7	1112,4	921,8	224,9
	8,0	815,1	441,0	593,7	848,4	674,6	192,4
	10,0	253,1	489,0	285,7	305,4	333,3	106,0
	12,0	213,1	295,0	184,7	170,4	215,8	55,7
	24,0	50,1	37,0	40,7	29,4	39,3	8,6
	36,0	14,1	ВСЯ	ВСЯ	13,6	6,9	8,0
	48,0	ВСЯ	вся	ВОЕ	ВСЯ	0,0	0,0
Стах, пг/мл		1255,1	2246,0	2269,7	2495,4	2066,6	552,5
Ттах > Час		2,0	1,0	2,0	2,0	2,0	(1-2)
Аис^), ПГ · час/мл		10333,8	14012,9	11813,8	13246,4	12351,7	1624,9
Τι/2 ΰ, час		6,2	3,8	4,1	5,9	4,8	1,2

8Ό - стандартное отклонение,

ВОЕ - значение находится ниже предела определения, ^а - выражено как среднее и диапазон, ^ь - выражено как среднее гармоническое и псевдо 8Ό на основе отклонения, рассчитанного по методу разбиения выборки (]асккш£е уапапсе),

Жирный шрифт использовали для вычисления λ.

- 25 010437

Таблица 14. Концентрация в плазме (пг/мл) и фармакокинетические параметры кальцитриола у собак после одного приема , жидкого препарата #1 при дозе 1 мкг/кг

Параметр	Время, час	Собака 105	Собака 106	Собака 107	Собака 108	Среднее	δϋ
	0,0	ВСЯ	ВСЯ	ВОЬ	ВСЯ	0	0
	0,5	ВСЯ	57,6	523,0	350,0	232,7	246,9
	1,0	1283,0	238,6	2266,0	2468,0	1563,9	1024,0
	2,0	2028,0	1895,6	2026,0	2373,0	2080,7	204,5
	4,0	1090,0	892,6	1009,0	1771,0	1190,7	395,3
	6,0	871,0	763,6	730,0	1063,0	856,9	150,0
	8,0	301,0	579,6	374,0	562,0	454,2	138,1
	10,0	421,0	520,6	464,0	517,0	480,7	47,4
	12,0	348,0	290,6	170,0	373,0	295,4	90,4
	24,0	42,0	165,6	62,0	202,0	117,9	78,0
	36,0	49,0	111,6	ВСЯ	79,0	59,9	47,4
	48,0	35,0	15,5	ВСЯ	ВСЯ	12,6	16,6
Стах! пг/мл		2028,0	1895,6	2266,0	2468,0	2164,4	253,9
Ттах3! Час		2,0	2,0	1,0	1,0	1,5	(1-2)
АиСфо»), ПГ час/мл		13474,4	14296,3	12101,0	20117,7	14997,4	3531,7
Τι/2 ϋ, час |		10,6	8,5	5,0	10,1	7,8	3,5

8Ώ - стандартное отклонение,

В(')1, - значение находится ниже предела определения,

- выражено как среднее и диапазон, ^ь - выражено как среднее гармоническое и псевдо 81) на основе отклонения, рассчитанного по методу разбиения выборки (]асккт1е уапапсе), Жирный шрифт использовали для вычисления λ.

Результаты проведенного исследования показывают, что имеются следующие различия и сходные черты в фармакокинетике препаратов в соответствии с настоящим изобретением и КОСАЬТКОЬ:

С_тах для жидких и полутвердых препаратов приблизительно в три раза превышает С_тах для препарата КОСАЬТКОЬ;

С_тах для жидких и полутвердых препаратов достигается быстрее (от 1 до 2 ч), чем для препарата КОСАЬТКОЬ (от 2 до 4 ч);

полное системное воздействие (ОуегаП 8у81ет1с ехрозиге) (АИС_0-да) для всех трех препаратов сравнимо, хотя системное воздействие (8у81ет1с ехрозиге) в течение первых 24-48 ч больше для жидкого и полутвердого препаратов, нежели для КОСАЬТКОЬ.

Вышеуказанные результаты показывают, что наибольшее значение С_тах и АИС кальцитриола получены при введении жидкого препарата #1, чуть меньшие значения получены при введении полутвердого препарата #3. Наименьшие значения С_тах и АИС получены для КОСАЬТКОЬ. Оказалось, что жидкий #1 и полутвердый #3 препараты всасываются гораздо быстрее и вызывают более высокие концентрации в плазме крови в течение первых 12 ч, а также имеют большую скорость выведения.

Пример 8. Фармакокинетика полутвердого препарата #3 после приема повышенных доз.

В этом исследовании изучали фармакокинетику полутвердого препарата #3 у собак после повышения пероральной дозы препарата. Трем самцам и трем самкам гончих вводили перорально за один раз 0,5 мкг/кг (всем шести собакам), 0,1 мкг/кг (1 самцу и 1 самке), 5,0 мкг/кг (2 самцам и 2 самкам) и 10,0 мкг/кг (всем собакам) препарата. После дозы 10 мкг/кг по две собаки каждого пола были умерщвлены. Оставшихся собак обоего пола продолжали исследовать и вводили им дозы 30 и 100,0 мкг/кг. После каждой дозы собак выдерживали в течение 6 суток.

Образцы крови (приблизительно 1 мл) были взяты перед приемом и спустя 0, 2 (у всех собак, кроме тех, кому ввели 0,5 мкг/кг), 4, 8, 24, 48 и 96 ч после приема препарата. Содержание кальцитриола в образцах определяли при помощи радиоиммунологического исследования, а затем подвергали фармакоки

- 26 010437 нетическому анализу. Концентрации кальцитриола в плазме крови показаны графически для самцов и самок на фиг. 2 А и 2В.

После введения полутвердого препарата #3 максимальные концентрации в плазме крови обычно наблюдали в образце, отобранном спустя 2 ч. Оказалось, что при дозах более 0,1 мкг/кг скорость снижения концентрации кальцитриола в плазме крови была выше в течение первых 8 ч, чем в течение 24 и 96 ч.

При самой низкой дозе 0,1 мкг/кг концентрации кальцитриола в плазме крови падали ниже предела определения спустя 24 ч. При дозе 0,5 мкг/кг и выше измеряемые концентрации кальцитриола сохранялись еще при отборе образцов спустя 96 ч после введения препарата. Особых различий между результатами, полученными для самцов и для самок, замечено не было.

Фармакокинетические параметры для полутвердого препарата #3 при дозах, находящихся в диапазоне от 0,1 до 100,0 мкг/кг представлены в табл. 15.

Таблица 15: Фармакокинетика кальцитриола после приема повышенных доз кальцитриола (полутвердого препарата #3)

Доза (мкг/кг)	0.1	0.5	5.0
Пол	Самец	Самка	Самец	Самка	Самец	Самка
N	1	1	3	3	2	2
Стах (пг/мл)	566	473	1257	1431	17753	18346
Ттах (час)	2,0	2,0	4,0	4,0	2,0	2,0
А11С(0-24) (пг час/мл)	4311	2654	11431	15598	104027	107452
ДиС(0-48) (пг час/мл)	4311	2654	13584	19330	125408	126746
диС(о-оо) (пг · час/мл)	4916	2718	15062	21644	200283	160681
Т)/2 (час)	4,2	2,7	17,1	14,2	67,6	36,8
Доза (мкг/кг)	1С	1,0	ЗС	),о	ЮС	),о
Пол	Самец	Самка	Самец	Самка	Самец	Самка
N	3	3	1	1	1	1
Стах (ПГ/МЛ)	23858	32336	53005	115896	238619	211631
Ттах (час)	2,7	2,0	2,0	2,0	2,0	2,0
ДиС(0-24) (пг час/мл)	183981	203857	311841	567717	1165988	1089831
ДиС(0-48) (пг час/мл)	223977	240483	370713	641469	1381424	1256007
Аис^о») (пг час/мл)	388600	345936	531303	854841	1874997	1731873
Τι/2 (час)	77,7	56,0	56,3	58,2	45,3	53,7

Эти фармакокинетические результаты указывают на следующее:

системное воздействие (зу81ет1с ехрозиге) для кальцитриола оказалось достаточно линейным во всем диапазоне испытанных доз, от 0,1 до 100,0 мкг/кг. Ни насыщения, ни поглощения замечено не было;

время полужизни кальцитриола, как оказалось, зависит от дозы. Препараты, имеющие время полужизни более 24 ч, менее приемлемы для приема в режиме импульсной дозировки;

недельная дозировка полутвердого препарата #3 при приеме 5,0 мкг/кг и выше приводила к некоторому его накоплению в плазме крови. Подобное накопление не наблюдали с достаточным постоянством при более низких дозах 0,1 и 0,5 мкг/кг.

Пример 9. Исследование токсичности полутвердого препарата #3 при пероральном введении собакам в течение 28 суток.

Для определения фармакокинетики кальцитриола после недельного перорального приема капсулиро

- 27 010437 ванного препарата проводили токсикологическое исследование полутвердого препарата #3 при повторном введении его собакам в течение 28 суток. Капсулы полутвердого препарата #3 или контрольного препарата вводили по следующим дням, считая от начала исследования: 0, 7, 14,21 и 28. Двенадцать собак (6 самцов и 6 самок) получали контрольный препарат - доставочное средство (группа 1), восемь собак (4 самца и 4 самки) получали 0,1 мкг/кг полутвердого препарата #3 (группа 2) и восемь собак (4 самца и 4 самки) получали 1,0 мкг/кг полутвердого препарата #3 (группа 3). Двенадцать собак (6 самцов и 6 самок) получили 30,0 мкг/кг полутвердого препарата #3 в 0 день исследования (группа 4). Из-за острой клинической реакции, наблюдаемой после приема 30,0 мкг/кг препарата в 0 день исследования, уровни дозы для этой группы затем были снижены до 10 мкг/кг (на 7, 14, 21 и 28 день для самцов) или до 5 мкг/кг (на 7, 14, 21 и 28 день для самок). Образцы крови отбирали у каждой собаки перед введением дозы препарата и спустя 1, 2, 4, 6, 8, 24 и 48 ч после него для 0 суток исследования (первая доза) и 21 суток исследования (четвертая еженедельная доза). Все животные были умерщвлены на 29 день от начала исследования.

Фармакокинетические результаты для кальцитриола в плазме крови для групп 2-4 представлены в табл. 16.

Таблица 16. Средние токсикокинетические параметры для кальцитриола после еженедельного приема полутвердого препарата #3 у собак

Одень
Доза	0,1 мкг/кг (группа 2)	1,0 мкг/кг (группа 3)	30,0 мкг/кг (группа 4)
Пол(Νο собаки)	Самец(4)	Самка(4)	Самец (4)	Самка(4)	Самец (6)	Самка (6)
Стах, ПГ/МЛ	198,7	430,8	2380,0	3419,1	84909,1	57133,3
Ттах , 480	1,0	2,0	1,0	1,5	2,0	2,0
Д11С(0-24), пг	1840,6	3093,4	17144,2		23259,7	496044,6	323573,1
час/мл
ди С (0-48), ПГ	2130,8	3093,4	19141,6		25794,5	644064,2	365340,7
час/мл				0 день
Доза		0,1 мкг/кг	1,0 мкг/кг	10,0 мкг/кг	5,0 мкг/кг
		(группа 2)	(группа 3)	(группа 4)	(группа 4)
Пол (Νο	Самец (4)	Самка (4)	Самец (4)		Самка (4)	Самец (6)	Самка (6)
сииаки)
Доза		0,1	0,1	1,0		1,0	10Д15	5Д5
Стах,		217,6	398,3	2272,1		2188,6	29061,8	8670,7
пг/мл
Ттах , ЧаС		1,0	2,0	1,5		2,0	1,0	2,0
ДиС(0-24),		1956,2	3283,0	19765,4		12947,3	173597,2	46878,1
пг ’ час/мл
диС(о-48),		2225,9	3640,7	24606,9		15380,0	209732,1	54976,1
пг · час/мл

а

- значения

Т ^х тах

- средние значения для этого параметра. Для всех остальных параметров также показаны средние значения, ^ь - дозы препарата полутвердый #3 были снижены, начиная с 7 суток исследования.

Данные по контрольной группе собак, принимавших только доставочное средство (группа 1), не подвергали фармакокинетическому анализу.

На фиг. 3А и 3В показаны уточненные кривые зависимости концентрации кальцитриола в плазме крови от времени после перорального приема капсул полутвердого препарата #3 на 0 и на 21 день исследования самцами (фиг. 3А) и самками (фиг. 3В) гончих собак. Из всех последующих значений концентрации кальцитриола в плазме крови были вычтены значения, полученный при времени 0 в 0 день исследования, для отсчета от эндогенного (исходного) уровня концентрации кальцитриола в плазме крови.

Результаты исследования указывают на следующее:

после перорального приема капсул полутвердого препарата #3, концентрации кальцитриола в плаз

- 28 010437 ме крови возрастают довольно быстро, достигая пиковой концентрации в плазме крови в течение 2 ч; скорость снижения концентрации кальцитриола в плазме крови имеет большее значение в течение первых 8 ч после приема, чем в течение более позднего периода времени (24-48 ч), что, возможно, указывает на перераспределение кальцитриола во внесосудистое пространство с последующим медленным высвобождением кальцитриола обратно в сосудистое пространство. Это наблюдение более очевидно при более высоких дозах, нежели при приеме более низких доз;

спустя 24 ч после приема 0,1 мкг/кг препарата, концентрация кальцитриола в плазме крови снижается почти до исходного уровня. Однако при более высоких дозах кальцитриола остаточные концентрации кальцитриола, зависящие от величины дозы, все еще были зафиксированы при последнем отборе образцов (48 ч), хотя все значения возвращались к исходному уровню (до приема препарата) спустя одну неделю после приема препарата;

значения С_тах и АиС практически пропорциональны величине дозы для всех испытанных доз (0,130,0 мкг/кг);

значения АиС_0-24 при низкой дозе, при которой не наблюдали регистрируемого неблагоприятного эффекта (0,1 мкг/кг), находились в диапазоне от 1840,6 до 3283,0 пг-ч/мл;

значения АиСо_-24 при средней дозе, которая являлась максимальной допустимой дозой (1,0 мкг/кг), находились в диапазоне от 12947,3 до 23259,7 пг-ч/мл;

значения АиС_0-24 при дозах, при которых наблюдали потерю массы и умеренные признаки интоксикации, находились в диапазоне от 46878,1 пг-ч/мл (5,0 мкг/кг, самки) до 173597,2 пг-ч/мл (10,0 мкг/кг, самцы);

значения АиС_0-24 при дозах, при которых наблюдали смертность (30,0 мкг/кг), находились в диапазоне от 323573,1 до 496044,6 пг-ч/мл;

не было замечено никаких устойчивых различий в фармакокинетических параметрах в зависимости от пола животных.

В общем, оказалось, что животные переносят кальцитриол одинаковым образом после первой дозы и после повторных доз, принимаемых раз в неделю, за некоторыми исключениями, такими как более высокие значения С_тах и АиС в 0 день по сравнению с 21 днем при дозе 1,0 мкг/кг у самок (зависимость не очевидна для самцов).

Пример 10. Исследование острой токсичности трех различных препаратов.

Для оценки токсичности препаратов кальцитриола, при поведении исследования, описанного в примере 7, регистрировали некоторые прижизненные параметры, включая параметры клинической химии. Образцы крови анализировали на содержание кальция, фосфора, азота мочевины крови (Ыооб игеа пИгодеп, ΒϋΝ), глюкозы, альбумина, билирубина (общего), аминотрансферазы аспарата (а§рага!е атй пойапзЕегазе, А8Т), аминотрансферазы аланина (а1ашпе аттоШашЕегазе, ЛЕТ), щелочной фосфатазы (а1кайпе рНозрЬа1азе, АР) и креатинина.

Не наблюдали никакой клинической токсичности ни у одной собаки при приеме любого из трех препаратов.

Гиперкальциемию наблюдали после приема 1,0 мкг/кг любого из трех препаратов. Средние групповые и индивидуальные диапазоны уровней кальция в сыворотке крови для каждого из трех препаратов указаны в табл. 17.

Таблица 17. Средние групповые уровни кальция в сыворотке крови, мг/дл

- 29 010437

(10,44)	5ϋ	0,33	0,29	1,72	1,52	1,35	0,76	0,47
Диапазон	9,7- 10,5	10,7- 10,8	12,2- 16,4	12,1- 15,5	10,8- 13,6	11,5- 13,1	12,Ο- Ι 3,0

^а - исторический диапазон;

^ь - историческое среднее;

* - среднее за пределами исторического диапазона;

НД = не доступно (не отбирали образец сыворотки крови).

Кроме повышения концентрации кальция, во всех группах наблюдали повышение уровней ЛЬТ, А8Т, ΒϋΝ и креатинина.

В общем, результаты этого исследования показывают, что ни у одной собаки не было обнаружено никаких связанных с приемом любого из препаратов (КОСАЬТКОЬ, жидкого или полутвердого) клинических признаков;

гиперкальциемию наблюдали после перорального приема 1,0 мкг/кг любого из трех препаратов;

временной курс гиперкальциемии был схож при приеме всех трех препаратов в течение 48 ч, после 48 ч для группы, которой вводили КОСАЬТКОЬ, отбор крови не производили;

острота гиперкальциемии была сравнима при приеме всех трех препаратов, наибольшее содержание кальция в сыворотке крови (17,0 мг/дл) наблюдали у собак, получавших жидкий препарат, спустя 24 ч после приема;

наблюдали, что средние значения АЬТ, А8Т, ΒϋΝ и креатинина находились вне исторического диапазона (ранее полученных значений) для всех подопытных групп при единичном или нескольких моментах анализа;

повышение уровней ΒϋΝ и креатинина были больше для групп, которым вводили жидкий или полутвердый препарат, в отсутствие конкурентной контрольной группы значение этого наблюдения не ясно.

Пример 11. Исследование максимально допустимой высокой дозы.

В исследовании, описанном в примере 8, также определяли острую токсичность и гиперкальциемическое воздействие полутвердого препарата #3 для оценки максимально допустимой дозы и для сбора данных, необходимых для выбора дозы для будущих исследований.

Уровни кальция возрастали в зависимости от величины дозы при всех величинах дозы у самцов (фиг. 4А) и самок (фиг. 4В) собак. Данные по уровню кальция в сыворотке крови самцов при дозах 0,001 и 1,0 мкг/кг были получены в исследовании, описанном в примере 10, и были включены в данный пример для полноты эксперимента.

В общем, данное исследование полутвердого препарата #3, вводимого перорально в капсулах самцам и самкам гончих собак при дозах 0,1, 0,5, 5,0, 10,0, 30,0 и 100,0 мкг/кг, показало:

наиболее общей лабораторной аномалией была гиперкальциемия, зависящая от величины дозы;

при дозах 5,0 мкг/кг и выше наблюдали повышение уровней креатинина, азота мочевины, холестерина, эритроцитов, гемоглобина, гематокрита и нейтрофилов, а также снижение уровня лимфоцитов;

после введения доз величиной 30,0 и 100,0 мкг/кг было отмечено значительное снижение массы тела животных и потребления пищи, после приема 100,0 мкг/кг собаки заметно худели, и их активность была понижена. На основании этих результатов максимально допустимой дозой полутвердого препарата #3 для собак оказалась доза 5,0 мкг/кг.

Пример 12. Токсикологическое исследование при приеме повторных доз в течение 28 суток.

В исследовании, проведенном как описано в примере 9, оценивали потенциальную токсичность полутвердого препарата #3 для собак при пероральном приеме (капсул) один раз в 7 суток в течение 28 суток. Исследование включало оценку клинических признаков, массы тела, потребления пищи, токсикокинетику, клиническую патологию, включая биохимические показатели, гематологические показатели, коагуляцию (свертывание крови) и анализ мочи, офтальмологические показатели, кардиологические показатели, макроскопическое вскрытие, определение массы органов и проведение полной гистопатологии во всех животных. Результаты указаны в табл. 18.

- 30 010437

Таблица 18. План исследования для приема повторных доз собаками в течение 28 суток

Группа	Количество основных (выживших) животных	Вводимые материалы	Общий уровень дозы (мг/кг/доза)*	Уровень дозы кальцитриола (мг/кг/доза)
Самцы	Самки
1	4(2)	4(2)	Контрольный медикамент	300**	0
2	4	4	Испытательный медикамент*	1	0,1
3	4	4	Испытательный медикамент*	10	1
4	4(2)	4(2)	Испытательный медикамент*	300/100 (самцы)** 300/50 (самки)**	30/10 (самцы)** 30/5 (самки)**

* Контрольный медикамент (препарат кальцитриола полутвердый #3) - препарат, содержащий 0,1 мг кальцитриола на грамм ** Дозы были снижены до 10 мкг/кг для самцов и до 5 мкг/кг для самок на 2-й неделе, все выжившие животные были умерщвлены на 29 день.

Четверо животных из группы 4 (1 самец и 3 самки) погибли или были умерщвлены перед смертью в течение первых трех суток исследования. После снижения уровня дозы на 7 день животные не умирали, в группах 1, 2 или 3 животные не умирали вовсе.

В группе 4 у животных, которые погибли, перед смертью, в основном, отмечали следующие наиболее заметные клинические отклонения: красную рвоту, малое количество/отсутствие кала, жидкий стул, содержащий красный материал, красное истечение из носа, неглубокое/учащенное дыхание, пониженную активность и боковое лежачее положение.

В группах животных 3 и 4 отмечали снижение массы тела в зависимости от дозы, снижение набора массы тела и понижение количества потребляемой пищи, показатели в группе 3 были на -11-12% ниже контрольных показателей, в группе 4 они были на -17-24⁰% ниже контрольных показателей. В группе животных 2 не наблюдали очевидного снижения массы или количества потребляемой пищи.

На 29 день в группе животных 4 также наблюдали тенденцию повышения некоторых параметров красных и белых кровяных клеток (ВВС апб ^ВС), в группах животных 3 и 4 не было отмечено токсикологически значимых гематологических отклонений.

Гиперкальциемия, зависящая от дозы, была отмечена в группах животных 3 и 4. Уровни содержания кальция достигали повышенных значений спустя 6 ч после приема препарата, достигая максимального значения спустя 24 ч после приема препарата, и постепенно снижались спустя 48 и 96 ч после приема препарата. Другие аномалии клинических химических параметров в группах животных 3 и 4 включали повышенное содержание протеинов и холестерина в сыворотке крови, повышенные параметры функций почек и пониженную удельную массу электролитов и мочи. В группе животных 2 не наблюдали токсикологически значимых аномалий клинических химических параметров или значительного повышения содержания кальция в сыворотке крови.

На 22/23 день исследования не наблюдали никаких медикаментозных изменений в глазных тканях, в данном исследовании также не наблюдали никаких медикаментозных изменений ЭКГ и кровяного давления.

Наибольшие аномалии, обнаруженные при макроскопическом вскрытии, наблюдали для 4 группы животных, которые были найдены погибшими или были умерщвлены, и они включали поражение пищеварительной системы и зависимых органов, темно-красный цвет сальников, цвет слизистых пищевода и толстой кишки - от покрасневших до темно-красных, покрытый пятнами и утолщенный желчный пузырь, тромбы в сердце, темно-красные и покрытые сыпью участки легких, цвет поджелудочной железы от покрасневшей до темно-красной, темно-красную вилочковую железу, утолщенный мочевой пузырь и бледную селезенку. Макроскопические аномалии были менее выражены в 3 группе животных, в 2 группе животных не было отмечено заметных макроскопических аномалий.

Первичной гистопатологической аномалией был интерстициальный нефрит, зависящий от дозы: от небольшого до умеренного в 3 группе животных и от умеренного до сильно выраженного в 4 группе животных. Другими микроскопическими обнаруджениями в этих группах животных оказались: интерстициальный нефрит, от вторичного до хронического, и включенная минерализация различных орга

- 31 010437 нов/тканей. В 2 группе животных не было обнаружено никаких микроскопических повреждений.

Наибольшие значения концентраций кальция в сыворотке крови обычно проявлялись в течение первых 24 ч после приема препарата и вновь достигали исходных уровней перед следующей дозировкой. Выборочные данные (самцы, на 21 день) концентраций кальция в сыворотке крови и концентраций кальцитриола в плазме крови показаны на фиг. 5А-5С. Эти данные показывают, что максимальная концентрация кальцитриола в плазме крови достигается задолго до достижения максимальной концентрации кальция в сыворотке крови.

В общем, данное исследование полутвердого препарата #3, вводимого перорально каждые 7 суток самцам и самкам гончих собак при дозах 0, 1,0 и 5,0 (самки) или 10,0 (самцы) мкг/кг, после введения начальной дозы 30,0 мкг/кг показало:

уровень дозы, при котором не наблюдали никакого неблагоприятного эффекта, - 0,1 мкг/кг, максимально допустимая доза - 1,0 мкг/кг, смертность была замечена при 30 мкг/кг;

в группах животных 3 и 4 наблюдали зависящие от дозы повреждения пищеварительной системы и зависимых органов, сниженных набор массы и пониженное потребление пищи;

в группах животных 3 и 4 наблюдали зависящий от дозы интерстициальный нефрит.

Пример 13. Фармакокинетическое исследование на людях.

Фармакокинетику полутвердого препарата #3, полученную на людях, оценивали при помощи клинического испытания. В этом исследовании пациенты получали полутвердый препарат #3 при дозах кальцитриола до 90 мг. Предварительные фармакокинетические результаты обсуждены ниже.

Образцы крови были взяты перед приемом и спустя 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48 и 72 ч после начального приема дозы полутвердого препарата #3. Содержание кальцитриола определяли при помощи доступного радиоиммунологического исследования с ограниченной проверкой достоверности разбавления.

Для каждой группы были получены кривые зависимости средней концентрации в плазме крови от времени (фиг. 6). Интегральные (поп-сошраг1шеп!а1) фармакокинетические параметры были вычислены для каждого испытуемого, а затем усреднены (табл. 19). Из всех последующих значений были вычтены исходные значения, для отсчета от эндогенного (исходного) уровня концентрации кальцитриола.

Таблица 19. Фармакокинетические параметры полутвердого препарата #3 для дозовой группы

Доза, мкг	Стах, пг/мл (±50)	Ттах, 430 (среднее и диапазон)	АиС(0-24ч), пг ’ час/мл (±50)	АиС(о_48ч), пг час/мл (±50)	Аис(0.~) пг ’ час/мл (±50)	Ц/2, час*
5,0 (п = 3)	398,3 (12,9)	1,00 (1-1)	3665,7**	5627,3*** (637,1)	5464,8 (892,8)	8,9
0,0 (п = 3)	898,8 (333,6)	1,50 (1,5-2)	6955,9 (2825,4)	9792,4 (2323,9)	11069,7*** (1406,4)	16,3***
0,0 (п = 6)	2077,3 (533,3)	4,00 (1,5-4)	17480,6 (2989,7)	20999,4 (4762,5)	21795,0 (5124,8)	7,3
0,0 (п = 4)	1918,4 (605,2)	1,3 (1-1,5)	17523,1 (1217,2)	20663,5 (1832,1)	24997,6 (4612,5)	8,6
5,0 (п = 3)	1586,2 (328,6)	1,5 (1-4)	16499,1 (2343,8)	21159,1 (3406,0)	22690,4 (9209,4)	10,8
0,0 (п = 3)	2858,7 (496,3)	1,5 (1-2)	23127,5 (5755,7)	28164,3 (8428,3)	29204,1 (9209,4)	8,8

*гармоническое среднее на основе отклонения, рассчитанного по методу разбиения выборки (]асккпйе уапапсе), ** п = 1, *** п = 2

На основании этих данных показано, что фармакокинетика полутвердого препарата #3 линейна и предсказуема. Насыщения поглощения не наблюдали.

Пример 14. Данные по безопасности применения полутвердого препарата #3.

Данные по безопасности применения полутвердого препарата #3 для людей оценивали при помощи клинического испытания. В этом исследовании 8 мая 2002 года 12 пациентов получили полутвердый препарат #3 следующим образом: 3 в группе 1 (15 мкг), 3 в группе 2 (30 мкг) и 6 в группе 3 (60 мкг). Предварительные фармакокинетические результаты на 9 пациентах обсуждены ниже.

Ни один пациент не погиб. У 8 из 9 пациентов были отмечены 34 неблагоприятных эффекта, 20 из

- 32 010437 неблагоприятных эффектов, по-видимому, были связаны с приемом полутвердого препарата #3. Один серьезный неблагоприятный эффект, который, как полагает исследователь, не связан с приемом препарата, был отмечен в группе 3. У этого пациента в первый день развилась переходящая лихорадка класса 1, что увеличило срок госпитализации. Неблагоприятные эффекты классов 2 или 3, которые, по-видимому, связаны с приемом исследуемого медикамента, представлены в табл. 20.

Таблица 20. Неблагоприятные эффекты классов 2 или 3, которые, по-видимому, связаны с приемом исследуемого медикамента

Пациент	Дозовая группа	Эффект	Острота	Комментарии
002-1002	60 мкг	Гиперглицемия	Класс 2	-
		Гипопротеинемия	Класс 2	-
002-1003	60 мкг	Запор	Класс 2	-
		Гипонатриемия	Класс 3	Натрий 127 мэкв/л на 4 день, переходный, без вмешательства

Предварительные результаты фазы 1 испытаний полутвердого препарата #3 показывают: максимальная допустимая доза полутвердого препарата #3 пока еще не определена на фазе 1 испытаний, продолжаются исследования состояния добавочных пациентов в группе 3 (60 мкг);

фармакокинетика полутвердого препарата #3 линейна и предсказуема для первых трех дозовых групп.

Пример 15. Дополнительные составы.

Когда полутвердый препарат #3 поместили в твердые желатиновые капсулы для перорального приема, наблюдали вытекание состава из капсул. Поэтому пришлось испытывать новые составы, содержащие различные компоненты липофильной фазы и поверхностно-активные вещества, а также различные содержания каждого компонента, чтобы найти составы, которые позволяют решить эту проблему. Испытанные составы указаны в табл. 21.

Таблица 21. Дополнительные испытанные составы

	Процент по массе
Состав	а	Ь	с	ό	е	ί	9	Ιί	ϊ
<3е1ис1ге 44/14	50	50	50	40	40	30	20		60
Витамин Е ТРСВ		10	20	30	20	30	30	50	25
1УНд1уо1 812	50	40	30	30	30	40	50	50	15

	Процент по массе
Состав	ΐ	к	I	т	η	о	Р	я	г
Се1ис1ге 50/13	30	50	50	50	40	40	30	20	60
Витамин Е ТРСВ	5		10	20	30	20	30	30	25
М|д!уо! 812	65	50	40	30	30	40	40	50	15

- 33 010437

Кроме того, испытали дополнительные составы, содержащие несколько поверхностно-активных веществ, без компонента липофильной фазы. Составы представляли собой комбинации витамина Е ТРС8 с Ое1ис1ге 44/14 или Ое1ис1ге 50/13.

Определили составы, которые не дают вытеания.

Пример 16. Стабильные составы для лекарственных форм.

Приготовили составы, содержащие кальцитриол, чтобы получить композиции, представленные в табл. 22. Витамин Е ТРС8 нагрели приблизительно до 50°С и смешали в соответствующем отношении с ΜΙ6ΓΥΟΓ 812. В каждый состав добавляли БГА и БГТ, чтобы получить конечную концентрацию в препарате, равную 0,35 мас.%.

Таблица 22. Составы, содержащие кальцитриол

№ состава	ΜΙΟΙ_ΥΟΙ_ (% по массе)	Витамин Е ТРСЗ (% по массе)
1	100	0
2	95	5
3	90	10
4	50	50

После приготовления составы 2-4 нагрели приблизительно до 50°С и смешали с кальцитриолом, чтобы получить концентрацию 0,1 мкг кальцитриола/мг готового состава. Затем составы, содержащие кальцитриол, (~ 250 мкл) ввели в мерную колбу объемом 25 мл и добавили деионизованную воду до метки 25 мл. После этого растворы перемешали со встряхиванием и измерили коэффициент поглощения при 400 нм непосредственно после смешивания (начальное поглощение) и через 10 мин после смешивания. Как показано в табл. 23, все три состава после смешивания с водой образовали опалесцирующий раствор. Состав 4 образовал стабильную суспензию при отсутствии видимых изменений коэффициента поглощения при 400 нм через 10 мин.

Таблица 23. Коэффициент поглощения составов, суспендированных в воде

Для дополнительного анализа соединений, содержащих кальцитриол, провели исследование растворимости, чтобы определить содержание растворимого кальцитриола в каждом составе. Концентрации кальцитриола от 0,1 до 0,6 мкг кальцитриола/мг состава получили нагреванием составов до 50°С с последующим добавлением соответствующей массы кальцитриола. Затем составы выдержали для охлаждения до комнатной температуры и определили присутствие нерастворенного кальцитриола с помощью оптического микроскопа с поляризованным светом и без поляризованного света. Для всех составов кальцитриол был растворим при максимальной опытной концентрации 0,6 мкг/мг состава.

Дозу кальцитриола 45 мкг в настоящее время используют в фазе 2 клинических испытаний на людях. Для получения капсулы с такой дозировкой приготовили все составы с концентрацией 0,2 мкг кальцитриола/мг состава и 0,35 мас.% БГА и БГТ. Твердые желатиновые капсулы номер 3 заполнили составами в форме сыпучих смесей массой 225 мг (45 мкг кальцитриола). Затем провели анализ стабильности капсул при 5°С, 25°С/60% КН (ге1айуе БитЙНу, относительная влажность), 30°С/65% КН и 40°С/75% КН. В соответствующие моменты времени стабильность образцов определяли по содержанию цельного кальцитриола и растворению капсул. Содержание кальцитриола в капсулах определяли, растворяя три открытых капсулы в 5 мл метанола и выдерживая при 5°С до проведения анализа. Затем растворенные образцы анализировали с помощью ЖХВД с обратной фазой. Использовали колонку РБетопех НурегзП ΒΏ8 С18 при 30°С с градиентом ацетонитрила от 55% ацетонитрила в воде до 95% ацетонитрила при

- 34 010437 скорости потока 1,0 мл/мин во время элюирования. Определяли пики при 265 нм, впрыскивая в каждом цикле по 25 мкл образца. Площадь пика образца и эталона сравнивали, чтобы рассчитать содержание кальцитриола, как показано в табл. 24. Испытание на растворение проводили, поместив по одной капсуле в каждый из шести контейнеров с малым объемом, содержащих 50 мл деионизованной воды с добавкой 0,5% додецилсульфата натрия. Образцы вынимали через 30, 60 и 90 мин после смешивания при 75 об./мин и 37°С. Содержание кальцитриола в образцах определяли путем впрыска 100 мкл образца в колонку Ве1а§11 С18 при скорости потока 1 мл/мин с подвижной фазой, содержащей 50:40:10 ацетонитрил :вода:тетрагидрофуран, при 30°С (определение пика при 265 нм). Среднее значение результатов растворения после 90 мин для шести капсул представлено в табл. 25.

Таблица 24. Химическая стойкость составов, содержащих кальцитриол, в твердых желатиновых капсулах (общая масса заполнения капсулы 225 мг, 45 мкг кальцитриола)

Условия хранения	Время (месяцы)	Анализ3(%) Состав 1	Состав 2	Состав 3	Состав 4
нд	0	100,1	98,8	99,1	100,3
5°С	1,0	99,4	98,9	98,9	104,3
25°С/60% КН	0,5	99,4	97,7	97,8	102,3
	1,0	97,1	95,8	97,8	100,3
	3,0	95,2	93,6	96,8	97,9
30°С/65% КН	0,5	98,7	97,7	96,8	100,7
	1,0	95,8	96,3	97,3	100,4
	3,0	94,2	93,6	95,5	93,4
40°С/75% КН	0,5	96,4	96,7	98,2	97,1
	1,0	96,1	98,6	98,5	99,3
	3,0	92,3	92,4	93,0	96,4

а - результаты анализа показывают % кальцитриола относительно ожидаемого значения, исходя из 45 мкг в капсуле. Значения включают предкальцитриол, который является активным изомером кальцитриола.

Таблица 25. Физическая стойкость составов, содержащих кальцитриол, в твердых желатиновых капсулах (общая масса заполнения капсулы

а - растворение капсул производили, как описано выше, и рассчитывали % кальцитриола, исходя из стандарта и ожидаемого содержания кальцитриола 45 мг в капсуле. Активный изомер, предкальцитриол, не включен в расчет % растворенного кальцитриола. Представленные значения относятся к образцам, подвергнутым растворению в течение 90 мин.

Результаты определения химической стойкости показывают, что уменьшение содержания МЮЬУОЬ 812 с сопутствующим увеличением содержания витамина Е ТРО8 обеспечивают повышение степени извлечения цельного кальцитриола, как показано в табл. 24. Состав 4 (50:50 МЮЬУОЬ 812/витамин Е ТРО8) обладал наибольшей химической стойкостью при незначительном уменьшении

- 35 010437 степени извлечения цельного кальцитриола после 3 месяцев хранения при 25°С/60% КН, что позволяет производить его хранение при комнатной температуре.

Физическую стойкость составов определяли по растворению капсул после их хранения в каждом режиме проверки стойкости. Как и при испытании химической стойкости уменьшение содержания МЮЕУОЕ 812 и увеличение содержания витамина Е ТРО8 улучшало характеристики растворения состава (табл. 25). Состав 4 (50:50 МЮЬУОЬ 812/ витамин Е ТРО8) имел оптимальные характеристики растворения и пригодную стойкость после хранения при комнатной температуре.

Пример 17. Фаркмакокинетика состава 4.

Провели эксперименты для сравнения фармакокинетических характеристик состава 4 (#4) из примера 16 и полутвердого состава #3 (883). Приготовили составы #4 и 883, содержащие кальцитриол, и заполнили ими капсулы, получив содержание 4,5 мкг кальцитриола на капсулу. Отдельные капсулы вводили перорально 20 самцам гончих собак (доза составляла приблизительно 0,5 мкг/кг массы тела). Половине собак ввели капсулу #4 в 1 день и капсулу 883 в 7 день. Другие 10 собак получили капсулу 883 в 1 день и капсулу #4 в 7 день. Образцы крови отбирали за 60, 40 и 20 мин до каждой дозы и через 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48 и 96 ч после каждой дозы. Результаты фармакокинетического анализа уровня кальцитриола в образцах крови представлены в табл. 26.

Таблица 26. Сравнение фармакокинетики кальцитриола в составах 883 и #4.

Состав	Стах (пг/мл)	А11С(о-() (пг' час/мл)	Аис(0.~) (пг · час/мл)
833	1125	10061	11341
#4	1075	10269	11228

Из представленных данных можно видеть, что препараты #4 и 883 обладают весьма сходной фармакокинетикой и поэтому являются биоэквивалентными.

После ознакомления с полным описанием изобретения специалистам в данной области техники должно быть понятно, что подобное исследование может быть проведено в широком диапазоне эквивалентных условий, препаратов и других параметров без ограничения области применения изобретения и вариантов его реализации. Все патенты, патентные заявки и публикации, цитируемые в настоящем документе, полностью входят в описание настоящей заявки в качестве ссылки.

Claims (30)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Жидкий или полутвердый фармацевтический состав, содержащий соединение активного витамина Ώ, примерно 50% компонента липофильной фазы, примерно 50% поверхностно-активного вещества, примерно от 0,05 до примерно 0,35% бутилированного гидроксианизола (БГА) и примерно от 0,05 до примерно 0,35% бутилированного гидрокситолуола (БГТ).
2. 2. Фармацевтический состав по п.1, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина О представляет собой кальцитриол.
3. 3. Фармацевтический состав по п.1, отличающийся тем, что указанный компонент липофильной фазы представляет собой МЮЕУОЕ 812.
4. 4. Фармацевтический состав по п.1, отличающийся тем, что указанное поверхностно-активное вещество представляет собой витамин Е ТРО8.
5. 5. Фармацевтический состав по п.1, содержащий соединение активного витамина О, примерно 50% МЮЕУОЕ 812 и примерно 50% витамина Е ТРО8.
6. 6. Стандартная лекарственная форма, содержащая жидкий или полутвердый фармацевтический состав, содержащая соединение активного витамина Ώ, примерно 50% МЮЕУОЕ 812, примерно 50% витамина Е ТРО8, примерно от 0,05 до 0,35% БГА и примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГТ.
7. 7. Стандартная лекарственная форма по п.6, отличающаяся тем, что указанное соединение активного витамина О представляет собой кальцитриол.
8. 8. Стандартная лекарственная форма по п.7, отличающаяся тем, что указанная стандартная лекарственная форма содержит примерно от 10 мкг до примерно 75 мкг кальцитриола.
9. 9. Стандартная лекарственная форма по п.8, отличающаяся тем, что указанная стандартная лекарственная форма содержит примерно 45 мкг кальцитриола.
10. 10. Стандартная лекарственная форма по п.6, отличающаяся тем, что указанный компонент липофильной фазы представляет собой МЮЕУОЕ 812.
11. 11. Стандартная лекарственная форма по п.6, отличающаяся тем, что указанное поверхностноактивное вещество представляет собой витамин Е ТРО8.
12. 12. Стандартная лекарственная форма по п.6, содержащая примерно 50% МЮЕУОЕ 812 и примерно 50% витамина Е ТРО8.
13. 13. Стандартная лекарственная форма по п.6, отличающаяся тем, что указанная стандартная лекарственная форма содержит примерно 45 мкг кальцитриола, примерно 50% МЮЕУОЕ 812, примерно 50%

    - 36 010437 витамина Е ТРС8. примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГА и примерно от 0,05 до примерно 0,35% БГТ.
14. 14. Стандартная лекарственная форма по п.6, отличающаяся тем, что указанная стандартная лекарственная форма представляет собой капсулу.
15. 15. Стандартная лекарственная форма по п.14, отличающаяся тем, что указанная стандартная лекарственная форма представляет собой желатиновую капсулу.
16. 16. Стандартная лекарственная форма по п.14, отличающаяся тем, что общий объем ингредиентов в указанной капсуле составляет 10-1000 мкл.
17. 17. Способ лечения или предотвращения гиперпролиферативного заболевания, включающий прием фармацевтического состава по любому из пп.1-5 или стандартной лекарственной формы по любому из пп.6-16 пациентом, который в нем нуждается.
18. 18. Способ по п.17, отличающийся тем, что указанное гиперпролиферативное заболевание представляет собой рак.
19. 19. Способ по п.17, отличающийся тем, что указанное гиперпролиферативное заболевание представляет собой псориаз.
20. 20. Способ по п.17, отличающийся тем, что введение медикамента осуществляют в режиме импульсной дозировки, причем указанный режим импульсной дозировки включает прием пациентом указанной композиции не чаще, чем один раз в трое суток.
21. 21. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный прием осуществляют не чаще, чем один раз в неделю.
22. 22. Способ по п.21, отличающийся тем, что указанный прием осуществляют не чаще, чем один раз в три недели.
23. 23. Способ по любому из пп.17-22, отличающийся тем, что включает также прием одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
24. 24. Способ по п.23, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина Ό принимают по меньшей мере за 12 ч до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
25. 25. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина Ό принимают предварительно от 1 суток до приблизительно 3 месяцев до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
26. 26. Способ по п.23, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина Ό принимают одновременно с указанными одним или несколькими химиотерапевтическими агентами или радиотерапевтическими агентами/процедурами.
27. 27. Способ по п.26, отличающийся тем, что прием указанного соединения активного витамина Ό продолжают после окончания приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
28. 28. Способ по п.23, отличающийся тем, что прием указанного соединения активного витамина Ό осуществляют после окончания приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
29. 29. Способ по п.23, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина Ό принимают за 1 сутки до приема указанных одного или нескольких химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур.
30. 30. Способ по п.23, отличающийся тем, что указанное соединение активного витамина Ό и указанные один или несколько химиотерапевтических агентов или радиотерапевтических агентов/процедур принимают не чаще, чем один раз в три недели.