DK172477B1 - Fremgangsmåde til bestemmelse af risiko af Down's syndrom og analysemidler til anvendelse derved - Google Patents
Fremgangsmåde til bestemmelse af risiko af Down's syndrom og analysemidler til anvendelse derved Download PDFInfo
- Publication number
- DK172477B1 DK172477B1 DK198901154A DK115489A DK172477B1 DK 172477 B1 DK172477 B1 DK 172477B1 DK 198901154 A DK198901154 A DK 198901154A DK 115489 A DK115489 A DK 115489A DK 172477 B1 DK172477 B1 DK 172477B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- dheas
- syndrome
- hydroxy
- assay
- serum
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/689—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to pregnancy or the gonads
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/743—Steroid hormones
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/76—Human chorionic gonadotropin including luteinising hormone, follicle stimulating hormone, thyroid stimulating hormone or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/38—Pediatrics
- G01N2800/385—Congenital anomalies
- G01N2800/387—Down syndrome; Trisomy 18; Trisomy 13
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Holo Graphy (AREA)
Description
DK PR 172477 B1 i
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til bestemmelse af risikoen for Down's syndrom hos et foster og analysemidler, som kan anvedes derved.
Risikoen for Down's syndrom hos et foster vides at øges med 5 moderens alder, og det er dette fakturm, der danner grundlaget for udvælgelsen af mødre til yderligere undersøgelse. Yderligere undersøgelse involverer prøveudtagning af fostervandet ved amniocentesis, en fremgangsmåde der ikke er helt risikofri for moderen eller fosteret, idet fremkaldelse af 10 abort er en erkendt fare.
Fostervandsundersøgelsen for Down's syndrom (erkendelsen af et ekstra kromosom 21 i fosterceller) er diagnostisk.
Der er et behov for en screeningsmetode, der kan identificere de mest risikofyldte graviditeter for at retfærdiggøre amnio-15 centesis med dens ledsagende risici.
Den nærmest kendte teknik er beskrevet i US 4.454.232, Arch. Gynåk., bind 221 (1976), side 179-185, Aust. N. Z. J. Obstet. Gynaec (1974) 14:12, Ugeskrift for læger, bind 138 (1976), side 1075-1077 og The Lancet, oktober 14, 1972, side 782-784.
20 Et formål med opfindelsen er at tilvejebringe en i forhold til den kendte teknik forbedret screeningsfremgangsmåde.
Ifølge opfindelsen anvises en fremgangsmåde til bestemmelse af øget risiko for Down's syndrom hos et foster, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at den omfatter analyse af 25 en serumprøve fra moderen, taget før starten på graviditetens tredje trimester, for mindst én serumbestanddel valgt blandt: ukonjugeret østriol; progesteron; 16-a-hydroxy-dehydroepiandrosteronsulfat 30 (16-or-hydroxy-DHEAS) ; 2 DK PR 172477 B1 dehydroepiandrosteronsulfat {DHEAS), og forstadier derfor eller metabolitter deraf, og sammenligning af mængden af den eller de analyserede bestanddele med en kontrolværdi hidrørende fra graviditeter, der ikke er påvir-5 ket af Down's syndrom, idet resultaterne af nævnte sammenligning (er) er indikative for øget risiko for Down's syndrom hos et foster.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen omfatter fortrinsvis analyser og kontrolsammenligninger for mere end én af serumbe-10 standdelene, såsom f.eks. mindst ukonjugeret østriol og pro-gesteron, ukonjugeret østriol og DHEAS og/eller 16-of-hydroxy-DHEAS eller ukonjugeret østriol, progesteron og DHEAS.
Fremgangsmåden kan også omfatte en yderligere analyse og en kontrolsammenligning for α-foetoprotein.
15 Det foretrækkes, at fremgangsmåden omfatter en yderligere analyse og kontrolsammensætning for humant choriongonatotro-phin (hGC).
Ved en specielt foretrukket fremgangsmåde udføres tre analyser og kontrolsammensætninger for a-foetoprotein (AFP), ukon-20 jugeret østriol og humant choriongonadotrophin.
I en anden foretrukket udførelsesform omfatter fremgangsmåden yderligere analyse og kontrolsammenligninger for én af eller begge forbindelserne 16-a-hydro-dehydroepiandrosteronsulfat (16-a-hydroxy-DHEAS) og dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS).
25 Til udledning af risikoindikatoren kan analyseresultaterne fortolkes i kombination med moderens alder.
Ifølge opfindelsen anvises yderligere en fremgangsmåde som angivet i krav 11.
DK PR 172477 B1 3
Ifølge opfindelsen tilvejebringes endvidere analysemidler til udførelse af en fremgangsmåde af den i krav 2 angivne art, hvilke analysemidler er som angivet i krav 12. Midlerne omfatter i kombination midler til at analysere mindst ukonjuge-5 ret østriol og progesteron, ukonjugeret østriol og DHEAS og/-eller 16-or-hydroxy-DHEAS eller ukonjugeret østriol, progesteron og DHEAS. Desuden kan analysemidlerne yderligere omfatte en analyse for α-foetoprotein og/eller choriongonadotropin. Ydermere omfatter analysemidlerne fortrinsvis midler til ud 10 fra analyseresultater, at hjælpe til at udlede en indikation for forøget risiko for Down's syndrom hos et foster, idet disse midler til at hjælpe ved udledningen fortrinsvis omfatter kontrolværdier af de i krav 19 angivne art.
Denne opfindelse bygger på den kendsgerning, at serum-AFP og 15 ukonjugeret østriol i moderens blod i den tidlige graviditet er signifikant lavere hos angrebne graviditeter end hos ikke-angrebne graviditeter, og derfor påvirkes også deres forstadier indbefattende 16-a-hydroxy-DHEAS og DHEAS, og serumpro-gestoron og humant choriongonadotrophin er begge højere hos 20 angrebne graviditeter end hos ikke-angrebne graviditeter.
De abnorme niveauer af ukonjugeret østriol, progesteron og AFP i Down's syndrom-graviditeter afspejler abnorm syntesemetabolisme hos foetus og/eller placenta. Fig. 1 på den medfølgende tegning anskueliggør de metaboliske veje vedrørende 25 biosyntesen af østriol (og progesteron) under graviditet, idet østriolbiosyntesevejen vises med fede typer. Forkortelserne DHEAS betyder dehydroepiandrosteronsulfat og 16-0H-DHEAS betyder dets 16-hydroxy-derivat.
4 DK PR 172477 B1 AFP produceres af b1ommesækken og af fosterets lever.
Således omdannes østriol, som vist på fig. 1, afledt fra cholesterol, som stammer fra moderens, via pregnenolon og DHEAS 5 til 16-hydroxy-DHEAS, der derefter ved moderkageaktivitet omdannes til østriol, der returnerer, i ukonjugeret form, til moderens serum, hvor det efterfølgende omdannes til østriol-sulfater og glucuronider.
10 Progesteron opstår ved moderkageaktivitet, der omdanner cholesterol til pregnenolon og derefter til progesteron, idet en del af pregnenoIonen passerer videre til fosteret til omdannelse til østriol ved den nævnte vej, og den resterende del returnerer til moderens serum.
15
Medianniveauet af ukonjugeret østriol i serum fra moderen efter 13 til 27 ugers svangerskab hos 77 grav iditerer , der var sat i forbindelse med Down's syndrom, var 0,73 gange median-værdien (MOM) for 385 ikke-angrebne kontro 1 grav iditeter , der 20 var jævnbyrdige med hensyn til moderens alder, svangerskabets varighed og varigheden af serumprøvens opbevaringstid. Dette resultat er statistisk meget signifikant. Ukonjugeret østriol i serum er en bedre diskriminator mellem Down's syndrom og ikke-angrebne graviditeter end moderens alder eller serum-AFP.
25 Diskriminationsomfanget er også uafhængigt af moderens alder og i høj grad uafhængigt af serum -AFP. Når de tre variabler, alder, serum-AFP og ukonjugeret østriol i serum, anvendes i kombination, er de mere effektive end hver for sig eller parvis i kombination til i dent ificering af Down’s syndrom, indbe-30 fatteisen af serumprogesteron fører til signifikant forøgelse af påvisningseffektiviteten.
Medianniveauet af serumprogesteron fra moderen ved 13 til 27 ugers svangerskab hos 77 graviditeter, der var sat i forbi n-35 delse med Oown's syndrom, var 1,19 gange medianværdien (MoM) for 385 ikke-angrebne kontro 1 graviditeter med samme svangerskabsalder. Forøgelsen af værdier var statisk signifikant (X^ DK PR 172477 B1 5 = 14, baseret på variantsanalyse af rækken af sammenlignelige par). Oer var større overlapning i fordelingen af progesteron mellem angrebne og ikke-angrebne graviditeter, end det var tilfældet ved ukonjugeret østriol.
5
Ved en normal graviditet producerer fosterets binyrebark OHEAS, der kommer ind i fosterets kredsløb og passerer til fosterets lever, hvor det meste undergår 16-a-hydroxy1 er ing. Oet nyligt dannede 16-a-hydroxy-DHEAS når placenta, hvor en del af 10 det omdannes, i fire enzymatiske trin, til østriol. Uomdannet 16-a-hydroxy-OHEAS passerer højst sandsynligt også ind i moderens kredsløb. Det er muligt, at næsten alt 16-a-hydroxy-DHEAS i moderens serum stammer fra fosteret, snarere end fra moderen, og derfor er målingen af denne forbindelse en speci-15 fik markør for fosterets udvikling.
Fostre med Down's syndrom er mindre udviklede end ikke-angreb-ne fostre, og således forventes graviditeter, der er sat i forbindelse med Oown1 s syndrom hos fostre, at have lavere 16-20 α-hydroxy-DHEAS-niveauer end ikke-angrebne grav iditeter. Det er ved tilsvarende ræsonnement, at lavere niveauer af OHEAS vil blive fundet i moderens blod hos kvinder bærende fostre med Oown's syndrom, end hos kvinder bærende ikke-angrebne fostre.
25
Derfor er begge eller en af forbindelserne DHEAS og 16-a-hydroxy-DHEAS anvendelige markører for Down's syndrom i den tidlige graviditet, især når resultaterne ses i forbindelse med de andre indikatorer, der refereres til heri.
30
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen øger effektiviteten af screeningen af kvinder for Down's syndrom ved at identificere en større andel kvinder med angrebne graviditeter som egnede til amniocentesis (dvs. forøgelse af andelen af sande positive) 35 uden samtidig at øge andelen af kvinder med ikke-angrebne graviditeter, som, efter nogle kriterier, ville være egnede til amniocentesis (dvs. uden forøgelse af andelen af falske positive) .
DK PR 172477 B1 6
Opfindelsen beskrives i det følgende under henvisning til tegningen.
Metoder 5 77 førfødselsserumprøver blev identificeret fra 77 enkeltindi-vidsgrav idi teter, der var sat i forbindelse med Down's syndrom ("tilfælde"), ved anvendelse af en -40 “C førfødsel serumbank med relation til over 30.000 graviditeter. Hver prøve blev 10 sammenholdt med en opbevaret prøve fra fem ikke-angrebne graviditeter (kontroller) svarende hertil med hensyn til moderens alder (inden for det samme år), svangerskabets varighed (inden for en uge), og varighed af opbevaringen af prøven (inden for et år). Prøverne erhvervedes fra opbevaringen med henblik på 15 ukonjugeret østriol- og AFP-analyse. Ingen af "tilfældene" eller kontrollerne var fra gravid iteter, der kunne sættes i forbindelse med neuralrørsdefekt, og alle prøverne opsamledes i tiden mellem 13 og 27 fuldførte svangerskabsuger.
20
Ukonjugeret østriol blev analyseret ved anvendelse af en direkte, ikke-ekstraheringsrad i o immunana1yse ("Amerlex oestriol RIA kit", Amersham). Analysen blev modificeret ved at fordoble prøvevo1 uroet til 40 mikroliter for alle de analyserede stof-25 fer.
Moder-serum-AFP analyseredes ved immunrad i ometrisk analyse (Boots-Ce11 tech Diagnostics Limited).
30 Moder-serumprogesteron analyseredes ved anvendelse af en ra diometrisk analyse ("Amerlex -M progesteron (New) kit", Amersham) og serum-DHEAS også ved radiometrisk analyse ("Pantex DHEA-S 1125 kit").
35 Alle analyserne udførtes inden for ca. en uge. "Tilfælde" og kontroller blev altid undersøgt i den samme analytiske batch, og analyserne udførtes uden viden om, hvorvidt de var fra angrebne eller ikke-angrebne graviditeter.
DK PR 172477 B1 7
Moder-serum-hCG analyseredes ved anvendelse af en immunrad io-metrisk analyse ("Serono-MAIA-clone kit", der var kallibreret over for det første internationale referencepræparat) i en 1 i 500-fortynding. Alle analyserne udførtes inden for 3 dage, 5 og "tilfælde" og kontroller analyseredes altid i den samme analytiske batch uden kendskab til, om prøverne stammede fra angrebne eller ikke-angrebne graviditeter.
RESULTATER
10
Ukoniuoeret østriol i serum fra moderen
Fig. 2 viser de individuelle ukonjugerede østri o 1niveauer for hver graviditet, der var sat i forbindelse med Oown's syndrom, 15 sammen med medianan og 25- og 75-frakti 1 værdi erne for ikke-an-grebne graviditeter, baseret på linære regressioner af svangerskabet, vægtet for det antal kvinder der undersøgtes i hver svangerskabsuge. De observerede medianer for ikke-angrebne graviditeter til hver svangerskabsuge er også vist. I gen-20 nemsnit var de ukonjugerede østriolværdi er signifikant lavere for Down’s syndrom-graviditeter end for de ikke-angrebne graviditeter (p <0,001, ved variantsanalyse af rækkerne inden for sammenholdte grupper). Differencen havde ingen tendens til at være væsentlig forskellig i nogen særlig uge fra 13 til 27 25 ugers svangerskab.
Ukonjugerede østriolniveauer kan bekvemt udtrykkes i multipla af medianen for ikke-angrebne graviditeter med den samme svangerskabsalder (MoM) ved anvendelse af regressionsmedianerne 30 vist i tabel I nedenfor.
35 DK PR 172477 B1 8
TABEL I
MSO (MoML
Frak t i 1 Down's syndrom ikke-angrebne 5 graviditeter graviditeter __(n«77 )_ ( n=385) 25 0,59 0,83 50 (median) 0,73 1,00 10 75 0,90 1,19 MSO = ukonjugeret østriol i serum fra moderen.
Tabel I viser 25-, 50- og 75-frakti 1 erne af ukonjugeret østri-15 ol i serum fra moderen i MoMs hos Down's syndrom-graviditeter og ikke-angrebne graviditeter. Serum-AFP-med i anen for de an-greben graviditeter var blot 73¾ af værdien for ikke-angrebne graviditeter { p < 0,0 01) .
20 Tabel II viser andelen af Down's syndrom-graviditet og ikke-angreben graviditeter med medianniveauer for ukonj ugeret østriol i serum på mindre end eller lig med specificerede cutoff-n i veaue r . Gaussiske frekvensforde1 i nger passede nogenlunde godt til dataene.
25
TABEL II
Ukonjugeret Oown's syndrom Ikke-angrebne østriolni veau graviditeter graviditeter 3 0 (MoM)_(_%J__LMJ_ <0,40 9,1 1,3 <0,50 16 3,1 <0,60 26 4,9 <0,70 46 9,6 35 <0,80 62 21 <0,90 75 35 <1,00_86 _50_ DK PR 172477 B1 9
Tabel III viser medianniveauet for ukonjugeret østriol i serum af moderen (MSO) ved Down's syndrom og ikke-angrebne graviditeter i relation til moderens alder. Ved både Down's syndrom-graviditeter og ikke-angrebne graviditeter giver medianniveau-5 et for ukonjugeret estriol i serum et mål for risikoen for Down's syndrom, som er uafhængig af moderens alder.
TABEL III
10 Moderens alder Down's syndrom- Ikke-angrebne ved forventet graviditeter graviditeter
dato for fedsel MSO MSO
(år )_(MoM )_Anta 1_(MoM) Antal 15 <30 0,75 20 0,98 100 30-34 0,72 17 1,04 85 35-39 0,76 19 1,00 95 40 eller mere 0,73 21 1.00 i05 20 Alle 0,73 77 1,00 385
Tabel IV viser, at ved både Down's syndrom-graviditeter og ikke-angrebne graviditeter øges medianniveauet af ukonjugeret 25 østriol i serum fra moderen (MSO) med stigende moder-serum- AFP-niveau udtrykt i MoMs lige som ukonjugeret østriol. Korrelationen mellem ukonjugeret østriol og logaritmen af AFP-nive-auer er statistisk signifikant (r=0,21, p<0,05 for Down's syndrom-graviditeter, og r=0,20, p<0,001 for ikke-angrebne 30 graviteter). En Gaussisk frekvensfordeling med to variable passede nogenlunde godt til dataene.
35 DK PR 172477 B1 10
TABEL IV
Serum AFo « ,
Down s syndrom- Ikke-angrebne n iveau ...
graviditeter graviditeter
5 MSO MSO
^——__(MoM)_Antal_(MoM )_Antal $0,S0 0,66 17 0,74 22 0-61-0,80 0,72 24 0,95 76 10 0,81-l,0o 0,82 23 0,96 94 >l,0° 0,82 13 1,04 193 A11e 0,73 77 1,00 385 15
En måde at kombinere information om serum-AFP-medianniveauer og af ukonjugeret østriol i serum, der vægter begge tests lige meget, er at betragte screeningsresultatet som positivt, hvis det ene niveau er mindre end eller lig med den tilsvarende 20 fraktil hos normale. Ved anvendelse af denne fremgangsmåde var der, for et givet antal angrebne graviditeter med positive resultater, færre ikke-angrebne graviditeter med positive resultater, når begge tests anvendtes, end når hver test vurderedes alene (tabel V).
25 30 35
TABEL V
11 DK PR 172477 B1 Påvisning af Fa 1sk-positivhyppighed (¾) anvendelse af
Down's syndrom Alder AFP u^3 Alder Alder Alder,AFP
5 alene alene alene & AFP & 11E3 og UE3 (%)_(al (b) (c) (d) _ (e)_(JJ_ 60 31 33 28 20 14 12 55 25 28 19 IS 11 9,1 10 50 19 24 16 12 8,8 7,0 45 15 20 13 9,8 6,7 5,3 40 11 17 11 7,3 5,0 3,9 35 7,5 14 8,5 5,3 3,7 2,8 30 5,1 11 6,6 3,6 2,5 1,9 15 25 3,3 8,2 5,0 2,2 1,6 1,2 20 1,9 6,0 3,5 1,3 0,9 0,7
Bemærk: 20 Et resultat er positivt, hvis (a) alderen er fremskreden, (t>) AFP er lav, (c) UE3 er lav eller, for (d), (e) og (f), risiko en for Down's syndrom (ved termin) er høj.
Det meste af besparelsen, der opnås ved at udføre begge tests 25 (AFP og MS0) sammenlignet med kun en, skyldtes screeningseffektiviteten for ukonjugeret østriol mere end for AFP. Til i ~ dentifikation af 35¾ af Down’s syndrom-graviditeter som positive (se tabel V), reducerede anvendelsen af begge tests f.eks. andelen af ikke-angrebne graviditeter med positive re-30 sultater med kun 0,1¾ sammenlignet med det, der opnåedes med ukonjugeret østriol alene, men reducerede andelen med 2,2¾ sammenlignet med det, der opnåedes med AFP alene. Logistisk regressionsanalyse bekræftede, at ukonjugeret østriol er en stærkere indikator for Down's syndrom end AFP, trods hver især 35 tilvejebragte yderligere information, der var statistisk signifikant {X2 - 45,4, p<0,0001 for ukonjugeret østriol sat til 1 AFP; χ2 s ii,2, p<0,001 for AFP sat til ukonjugeret østriol).
DK PR 172477 B1 12
Oisse resultater bekræfter, at niveauet af ukonjugeret østriol i serum fra moderen i gennemsnit er lavere ved graviditeter, der er forbundet med Down's syndrom, end ved ikke-angrebne graviditeter, hvilket er en effekt, som er uafhængig af mode-5 rens alder. Resultaterne viser også, at niveauet af ukonjugeret østriol i serum mere effektivt skelner angrebne gravidi-terer fra ikke-angrebne graviditeter end et serum-AFP-niveau.
Forklaringen på de lave niveauer af ukonjugeret østriol i 10 serum fra moderen ved Oown's syndrom-graviditeter kendes ikke.
Fig. 1 viser den metaboliske vej for østri o 1bi osyntes en i fosteret og placenta og indikerer de steder, ved hvilke en metabolisk ændring kunne opstå. Under normale graviditeter producerer fosterets binyrebark OHEAS, der kommer ind i fosterets 15 kredsløb og passerer til forsterets lever, hvor hovedparten af det undergår 16-α-hydroxy1 er ing. Det nyligt dannede 16-hydro-xy-OHEAS når placenta, hvor det i fire enzymatiske trin (sulphatase, aromatase og 17-j8-hydroxysteroiddehydrogenase) omdannes til østriol. Østriol diffunderer derefter over i moderrum-20 met, hvor det kan måles som et ukonjugeret steroid, idet dets koncentrati onsforøge 1 se svarer til væksten af fosteret og placenta. Ulig totaløstriol stammer ukonjugeret østriol i moderens serum helt fra fosteret og placenta. På grund af dette kan det anvendes heri som en mere følsom indikation for ændret 25 fostermetabolisme end det totale østriol i serum fra moderen.
Indførelsen af en progesteronanalyse i screeningsprogrammet, der giver fire parametre som risikoindikatorer (moderens alder, ukonjugeret østriol, AFP og progesteron) forøger yderli-30 gere den opnåede selektivitetsgrad.
Oet har også vist sig at være fordelagtigt at indbefatte en analyse for humant choriongonadotrophin (hCG) i screeningsprogrammet. hCG-med ianniveauet hos moderen i 77 graviditeter, der 35 vaf forbundet med Down's syndrom, var to gange medianniveauet hos 365 ikke-angrebne graviditeter, der var ligestillede med hensyn til moderens alder, svangerskabets varighed og varighed af serumprøvens opvaring (p < 0,001). Måling af moder-serum- DK PR 172477 B1 13 hCG var derfor en effektiv screen ingtest for Oown’s syndrom.
F.eks. var, til opnåelse af en 30% påvisningsfrekvens, de falske positive (andelen af ikke-angrebne graviditete, som var klassificeret som positive) 3% for hCG, lavere end for mode-5 rens alder (5%) og ukonjugeret ostriol (7%) og AFP (11%). Oen mest effektive screening opnåedes ved at tage højde for alle disse fire parametre; for at opnå den samme 30% påvisningsfrekvens, aftog frekvensen for falsk positiv til 0,5%.
10 Kombination af screeninqtests
Ved anvendelse af flere variable i kombination til at screene for en bestemt sygdom er det nødvendigt at vurdere korrela-15 tionsgraden mellem de involverede variable. Hvis to variable er perfekt korrelerede, tilføjer den ene ikke noget til den anden ved bedømmelse af et individs risiko for at have sygdommen; hvis de er totalt uden sammenhæng, tilvejebringer hver et uafhængigt mål for risikoen. I den udstrækning, at de kan ko r -20 releres delvis, vil der være nogen uafhængig information. Sammenhængen mellem hCG, uE3 og AFP ved angrebne og ikke-angrebne graviditeter vises i tabel VI nedenfor.
25 30 35 DK PR 172477 B1
1A
TABEL VI
Down's syndrom- Ikke-angrebne graviditeter graviditeter 5 hCG-median hCG-median - --Antal_(MoM) Antal
Al der {år) <3° 1(94 (20) 1,10 (100) 30" 1,52 ( 17 ) 0,96 ( 85 ) 10 35- 2,11 ( 19 ) 0,95 (95) 2,19 (21) 1.02 (105) uE 3 (MoM) <0,6° 2,71 (20) 1,25 ( 19) 15 0,60- 1,83 (2o) 1,21 ( 36) 0,75- 1,85 (18) 0,97 (77) *°'90 1,84 (19) 1,00 (253) AFP (MoM) 20 <0,60 1,64 (17) χ , 02 (22) °'60" 2,05 (24) 0,91 (75) °'80" 2'12 (23) 0,89 ( 95) *1'00 2'24 (13) 1,10 (193) 25
Al1e 2'04 (77) 1,02 (385)
Oisse resultater viser intet tegn p* en sanimenhang mellem hCG-30 niveauer og moderens alder, men der er en lille negativ sammenhang mellem hCG-niveau og niveauet af ukonjugeret østriol (uE3). Relationen mellem hCG og AFP er mindre tydelig, men siden uE3 og AFP tidligere har vist sig at være forbundet, og hCG og uE3 er, er der sandsynligvis en underliggende sammen-35 hæng.
Tabel VII viser risikoen for at have en Down's syndrom-graviditet ifølge udvalgte værdier fra tre biokemiske screenings DK PR 172477 B1 15 tests (moderserum-AFP, ukonjugeret østriol og hCG) svarende til en 35-årig kvinde.
TABEL VII 5 uE3 hCG AFP (MoM) (MoM) (MoM)____ __<LJ_LJL_2_J> 0,4 0,5 1:370 1:2800 1:22000 10 1,0 1: 34 1: 480 1: 2800 2.0 1:16 1:69 1:310 1,0 0,5 1:820 1:4800 1:28000 1.0 1:330 1:1400 1:6400 15 2,0 1:110 1: 360 1: 1200 1,4 0,5 1:2200 1:11000 1:52000 1.0 1:1300 1: 4600 1:17000 2.0 1: 630 1: 1700 1: 4700 20 __________
Resultaterne i tabel VII viser, at hvis resultaterne af to vilkårlige tests er kendt, så er den tredie stadig informativ. F.eks., hvis en 35-årig kvinde har et AFP-niveau på 1,0 25 MoM og et uE3-niveau på 0,4 MoM, så vil risikoen være 1:2800 ved et hCG-niveau på 0,5 MoM og 1:69 ved 2,0 MoM hCG.
Hvis der kun udføres to test, er AFP og hCG det foretrukne par på grund af, at AFP er af særskilt værdi ved screening for 30 nervebanedefekter, og præstationen af AFP og hCG i komb i nat i -on er ikke meget værre end ved anvendelse af uE3 og hCG i kombination. Oe bedste samlede resultater opnås imidlertid ved anvendelse af alle tre tests sammen med moderens alder. F.eks. gav dette påvi s iningshpppighed på 60¾ med en falsk positivhyp-35 pighed på 4,7¾ (se nedenfor).
Tabel VIII opsummerer påvisningshyppigheden af falsk positive svarende til Oown's syndom-påvisningshyppighederne ved anven- DK PR 172477 B1 16 delse af af moderens alder sammen med analyser for ukonjugeret estriol {11E3 ), AFP og hCG alene eller i kombination.
TABEL VIII 5
Falsk positiv-hyppighed (%) ved Down's anvendelse af alder sammen med: syndrom ___________ Påvisknings- AFP UE3 hCG AFP AFP u E 3 AFP, UE3
10 hyppighed og og og og hCG
(¾)_uE3 hCG hCG_ 80 44 34 27 29 20 20 16 75 37 27 21 23 15 15 12 70 30 22 16 1Θ 12 11 8,6 15 65 25 18 12 15 8,8 8,1 6,4 60 20 14 9,5 12 6,7 6,0 4,7 55 16 11 7,2 9,1 5,0 4,4 3,4 50 12 8,8 5,4 7,0 3,7 3,2 2,5 45 9,7 6,7 3,9 5,3 2,7 2,3 1,7 20 40 7,3 5,0 2,8 3,9 1,9 1,6 1,2 35 5,3 3,7 1,9 2,8 1,3 1,0 0,8 30 3,6 2,5 1,2 1,9 0,8 0,7 0,5 25 2,2 1,6 0,8 1,2 0,5 0,4 0,3 20 1,3 0,9 0,4 0,7 0,3 0,2 0,2 2 5 ________________ 30 35 DK PR 172477 B1 17
Tabel IX nedenfor opsummerer påvisningshyppigheden ved 5¾ falsk-pos it i vhyppigh ed ved anvendelse af forskellige analyser alene eller i kombination. Forkortelserne anvendt i den første kolonne er som følger: 5 A s (logio) ot-foetoprotein AFP); E * ukonjugeret østriol, - (logio) humant choriongonadotrophin (hCG); p - (logi0> Pfogesteron.
10
IS
20 25 30 35 DK PR 172477 B1 18
Tabel IX
_Uden DHEAS_ _Med OHEAS__ 5 S påvis- % påv i s -
Må 1 t d. Risiko n i nq PPV d Risiko n i nq PPV
AEHP 1,771 232 63,6 62 1,795 232 64,3 61 AEH 1,680 227 60,6 65 1,700 228 61,3 64 EHP 1,601 226 58,1 68 1,532 226 59,1 67 10 AEP 1,585 225 57,5 68 1,619 226 58,7 67 EH 1,539 225 56,1 70 1,565 225 56,9 69 AHP 1,517 225 55,4 71 1,546 225 56,3 70 AH 1,493 225 54,6 72 1,519 225 55,5 71 EP 1,390 227 51,4 76 1,434 226 52,8 75 - 15 HP 1,272 231 47,9 82 1,312 229 49,1 80 H 1,268 231 47,8 82 1,305 229 48,8 80 AE 1,159 237 44,7 88 1,193 235 45,6 86 AP 1,080 243 42,6 92 1,133 239 44,0 89 E 1,006 249 40,7 96 1,051 246 41,9 94 20 A 0,703 285 34,7 113 0,767 277 35,8 110 P 0,656 291 34,0 116 0,753 278 35,5 111 DHEAS - - 0,333 321 30,7 128 d = afstand, i standardafvigelsesenheder, mellem angrebne og 25 ikke-angrebne grupper.
Risikoen er angivet som forhold på 1: tallet i tabellen.
PPV = positiv forudsigelighedsværdi, og er en indikator af 30 chancerne for den faktiske tilstedeværelse af Down's syndrom hos fosteret. Oen angives som et forhold på 1: tallet i tabel len.
Ved mange eksisterende screeningsprogrammer udvælges omkring 35 5% af kvinderne til amnoicentesis alene på grundlag af frem skreden alder. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen, til hvilken der anvendes analyser for AFP, hCG og ukonjugeret østriol i kombination med moderens alder, påviser over 60¾ angrebne gra- DK PR 172477 B1 19 viditeter, mere end det dobbelte af, hvad der er opnåeligt med den samme amniocentesishyppighed ved eksisterende screenings-programmer. Som en illustration har denne metode potentialet til at reducere antallet af Down's syndrom-fødsler i Storbri-5 tannien fra omkring 900 pr. år, ved manglende screening, til omkring 350 pr. år.
Påvisningshyppigheden kan forøges yderligere ved ultralydscreening ved anvendelse af f.eks. længdemåling af fosterets 10 femur som supplerende teknik.
15 20 25 30 35
Claims (19)
1. Fremgangsmåde til bestemmelse af øget risiko for Down's syndrom hos et foster, kendetegnet ved, at den om- 5 fatter analyse af en serumprøve fra moderen, taget før starten på graviditetens tredje trimester, for mindst én serum-bestanddel valgt blandt; ukonjugeret østriol; progesteron; 10 16-a-hydroxy-dehydroepiandrosteronsulfat (16-a-hydroxy-DHEAS); dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS), og forstadier derfor eller metabolitter deraf, og sammenligning af mængden af den eller de analyserede bestanddele med en kontrolværdi hidrø-15 rende fra graviditeter, der ikke er påvirket af Down's syndrom, idet resultaterne af nævnte sammenligning(er) er indi-kative for øget risiko for Down's syndrom hos et foster.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvori der udføres analyser og kontrolsammenligninger for mere end én af serumbestandde- 20 lene.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, hvori der udføres analyser og kontrolsammenligninger, i kombination, for mindst ukon-jugeret østriol og progesteron.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 2, hvori der udføres analyser 25 og kontrolsammenligninger, i kombination, for mindst ukon- jugeret østriol og DHEAS og/eller 16-or-hydroxy-DHEAS.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 2, hvori der udføres analyser og kontrolsammenligninger, i kombination, for mindst ukon-jugeret østriol, progesteron og DHEAS. DK PR 172477 B1
6. Fremgangsmåde ifølge ethvert af de foregående krav, som omfatter en yderligere analyse og kontrolsammenligning for a-foetoprotein.
7. Fremgangsmåde ifølge ethvert af de foregående krav, som 5 omfatter en yderligere analyse og kontrolsammenligning for humant choriongonadotrophin.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, hvori der analyseres og udføres kontrolsammenligninger for α-foetoprotein (AFP), ukon-jugeret østriol og humant choriongonadotrophin.
9. Fremgangsmåde ifølge krav 8, som omfatter en yderligere analyse og kontrolsammenligning for én af eller begge forbindelserne 16-<Y-hydroxy-dehydroepiandrosteronsulfat (16-a-hy-droxy-DHEAS) og dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS).
10 DHEAS); dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS) og forstadier eller meta-bolitter deraf, eller som omfatter midler til analyse af nævnte prøve for mindst en serumbestanddel, som defineret heri, i kombination 15 med midler til analyse for a-foetoprotein og/eller humant choriongonadotrophin.
10. Fremgangsmåde ifølge ethvert af de foregående krav, 15 hvori sammenligningen og moderens alder er indikative for risikoen.
11. Fremgangsmåde til bestemmelse af øget risiko for Down's syndrom hos et foster, som omfatter analyse af en serumprøve fra moderen, taget før begyndelsen af graviditetens tredje 20 trimester, for α-foetoprotein, ukonjugeret østriol og mindst en serumbestanddel valgt blandt: progesteron; humant choriongonadotrophin; 16-a-hydroxy-dehydroepiandrosteronsulfat (16-a-hydroxy-DHEAS) 25 og dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS); og forstadier eller metabolitter deraf, sammenligning af mængden af analyserede bestanddele med kontrolværdier deraf hidrørende fra graviditeter, der ikke er 30 påvirket af Down's syndrom, idet resultaterne af nævnte sammenligning(er) er indikative for øget risiko for Down's syndrom hos et foster. DK PR 172477 B1
12. Analysemidler, der kan anvendes til udførelse af en fremgangsmåde ifølge krav 2 til bestemmelse af øget risiko for Down's syndrom hos et foster, omfattende i kombination mindst to midler til analyse af en serumprøve fra moderen, 5 taget før begyndelsen af graviditetens tredje trimester, for mere end en serumbestanddel valgt blandt: ukonjugeret østriol; progesteron; 16-a-hydroxy-dehydroepiandrosteronsulfat (16 - ar - hydroxy -
13. Analysemidler ifølge krav 12 omfattende i kombination midler til at analysere mindst ukonjugeret østriol og progesteron .
14. Analysemidler ifølge krav 12 omfattende i kombination midler til at analysere mindst ukonjugeret østriol og DHEAS og/eller 16-a-hydroxy-DHEAS.
15. Analysemidler ifølge krav 12 omfattende i kombination midler til at analysere ukonjugeret østriol, progesteron og
25 DHEAS.
16. Analysemidler ifølge ethvert af kravene 12-15, som yderligere omfatter en analyse for or-foetoprotein.
17. Analysemidler ifølge ethvert af kravene 12-16, som yderligere omfatter en analyse for humant choriongonadotrophin.
18. Analysemidler ifølge ethvert af kravene 12-17, som omfatter midler til, ud fra de nævnte analyseresultater, at DK PR 172477 B1 hjælpe til at udlede en indikation for forøget risiko for Down's syndrom hos et foster.
19. Analysemidler ifølge krav 18, hvori nævnte midler til at hjælpe til udledning omfatter kontrolværdier for de serumbe-5 standdele, som kan analyseres ved hjælp af nævnte midler, hvilke værdier hidrører fra graviditeter, der ikke er påvirket af Down's syndrom.
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB878716158A GB8716158D0 (en) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Antenatal screening for down's syndrome |
GB878724913A GB8724913D0 (en) | 1987-10-23 | 1987-10-23 | Antenatal screening for down's syndrome |
GB8716158 | 1987-10-23 | ||
GB8724913 | 1987-10-23 | ||
GB8800557 | 1988-01-12 | ||
PCT/GB1988/000557 WO1989000696A1 (en) | 1987-07-09 | 1988-07-11 | Antenatal screening for down's syndrome |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK115489D0 DK115489D0 (da) | 1989-03-09 |
DK115489A DK115489A (da) | 1989-05-09 |
DK172477B1 true DK172477B1 (da) | 1998-09-14 |
Family
ID=26292455
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK198901154A DK172477B1 (da) | 1987-07-09 | 1989-03-09 | Fremgangsmåde til bestemmelse af risiko af Down's syndrom og analysemidler til anvendelse derved |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0362294B1 (da) |
JP (1) | JP2525474B2 (da) |
AT (1) | ATE91182T1 (da) |
DE (1) | DE3882140T2 (da) |
DK (1) | DK172477B1 (da) |
WO (1) | WO1989000696A1 (da) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5252489A (en) * | 1989-01-17 | 1993-10-12 | Macri James N | Down syndrome screening method utilizing dried blood samples |
US5324667A (en) * | 1989-01-17 | 1994-06-28 | Macri James N | Method for detecting down sydrown by non-invasive maternal blood screening |
US5258907A (en) * | 1989-01-17 | 1993-11-02 | Macri James N | Method and apparatus for detecting down syndrome by non-invasive maternal blood screening |
EP0409956B2 (en) * | 1989-01-17 | 2004-07-21 | MACRI, James N. | Down syndrome screening method |
GB9224965D0 (en) * | 1992-11-28 | 1993-01-20 | Kodak Ltd | Antenatal screening for chromosomal abnormalities |
GB9306354D0 (en) * | 1993-03-26 | 1993-05-19 | Kodak Ltd | Antenatal screening for chromosomal abnormalities |
US5583612A (en) * | 1994-07-14 | 1996-12-10 | Xerox Corporation | Flexible latch with relaxed engagement |
GB9315230D0 (en) * | 1993-07-22 | 1993-09-08 | Kodak Ltd | Antenatal screening for chromosomal abnormalities |
GB9416415D0 (en) * | 1994-08-13 | 1994-10-05 | Kodak Ltd | Antenatel screening for pregnacy abnormalities |
GB9606261D0 (en) * | 1996-03-25 | 1996-05-29 | Johnson & Johnson Clin Diag | Prenatal screening for fetal abnormalities |
KR100459271B1 (ko) * | 2002-04-26 | 2004-12-03 | 엘지.필립스 엘시디 주식회사 | 구리 단일막 또는 구리 몰리브덴막의 식각용액 및 그식각방법 |
WO2012049874A1 (ja) * | 2010-10-13 | 2012-04-19 | ヒューマン・メタボローム・テクノロジーズ株式会社 | 脂肪性肝疾患を診断するためのバイオマーカー、その測定方法、コンピュータプログラム、および、記憶媒体 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4454232A (en) * | 1982-06-07 | 1984-06-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Estriol assay |
GR850899B (da) * | 1984-04-12 | 1985-11-25 | Gen Hospital Corp | |
US4670401A (en) * | 1985-01-25 | 1987-06-02 | Monell Chemical Senses Center | Axillary androstenol and dehydroepiandrosterone as fertile period onset indicators |
-
1988
- 1988-07-11 DE DE88905972T patent/DE3882140T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-07-11 AT AT88905972T patent/ATE91182T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-07-11 WO PCT/GB1988/000557 patent/WO1989000696A1/en active IP Right Grant
- 1988-07-11 JP JP63505897A patent/JP2525474B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-07-11 EP EP88905972A patent/EP0362294B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-03-09 DK DK198901154A patent/DK172477B1/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0362294A1 (en) | 1990-04-11 |
ATE91182T1 (de) | 1993-07-15 |
EP0362294B1 (en) | 1993-06-30 |
DK115489D0 (da) | 1989-03-09 |
DE3882140D1 (en) | 1993-08-05 |
WO1989000696A1 (en) | 1989-01-26 |
JPH03502483A (ja) | 1991-06-06 |
DE3882140T2 (de) | 1993-12-23 |
DK115489A (da) | 1989-05-09 |
JP2525474B2 (ja) | 1996-08-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Birdir et al. | Predictive value of sFlt-1, PlGF, sFlt-1/PlGF ratio and PAPP-A for late-onset preeclampsia and IUGR between 32 and 37 weeks of pregnancy | |
DK172477B1 (da) | Fremgangsmåde til bestemmelse af risiko af Down's syndrom og analysemidler til anvendelse derved | |
US6573103B1 (en) | Antenatal screening for Down's syndrome | |
Hanita et al. | Maternal level of pregnancy-associated plasma protein A as a predictor of pregnancy failure in threatened abortion | |
US5605843A (en) | Kit for prenatal screening for Down's syndrome | |
Moreau et al. | Age-specific anti-Mullerian hormone (AMH) levels poorly affects cumulative live birth rate after intra-uterine insemination | |
Lower et al. | The value of serum levels of oestradiol, progesterone and β-human chorionic gonadotrophin in the prediction of early pregnancy loss | |
US7666683B1 (en) | Rapid method of diagnosing a normal pregnancy with high accuracy | |
KR100389988B1 (ko) | 임신이상에대한산전검사방법 | |
US20070092445A1 (en) | Assessing Ovarian Reserve | |
WO2006026243A2 (en) | Inhibin-a: a marker for differentiation, diagnosing and screening abnormal pregnancies | |
US11255861B2 (en) | Method for determining the risk of preterm birth | |
Westergaard et al. | Placental protein measurements in complicated pregnancies. III. Premature labour | |
Lin et al. | Prediction of early pregnancy outcomes | |
Stener Jørgensen et al. | Alpha‐fetoprotein and acetylcholinesterase activity in first‐and early second‐trimester amniotic fluid | |
AU2002237407A1 (en) | Improvements in or relating to assessment of fertility | |
RU2717148C1 (ru) | Способ отбора женщин в группу риска по развитию рака молочной железы в перименопаузальном периоде | |
Chen | Blood levels of maternal serum corticotropin-releasing hormone (CRH) at mid-pregnancy: Which maternal characteristics are influential? | |
JP3440138B2 (ja) | 染色体異常について妊娠期間中にスクリーニングするための方法および装置 | |
Takata et al. | Human chorionic gonadotropin in cervical fluid as a predictor of miscarriage | |
Krantz et al. | First‐trimester maternal dried blood Down syndrome screening marker levels in early pregnancy loss | |
Alnakash et al. | Outcome of the first trimester threatened miscarriage: study of the predicting factors | |
Navolan et al. | Risk assessment program for fetal aneuploidies at the municipal clinical emergency hospital in Timisoara | |
Evans et al. | Clinical usefulness of estriol assay for predicting" light-for-dates" infants. | |
Batlle et al. | P07. 01: Patient's perception of first trimester risk assessment for Down syndrome: what is a “high risk” for you? |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PUP | Patent expired |