DK171309B1 - Blanding til afgivelse af oralt indgivelige stoffer - Google Patents

Description

DK 171309 B1 i

Den foreliggende opfindelse angår en blanding til afgivelse af oralt indgivelige stoffer. Opfindelsens område er biologien og især lipidpræparater til fremføring og frigivelse af lægemidler og andre stoffer via lymfe-5 systemet ind i det systemiske kredsløb.

Med hensyn til absorption af lægemidler, må disse nå deres mål på selektiv og regulerbar måde, dersom deres tilstræbte farmakologiske aktiviteter skal maksimeres. En 10 fremgangsmåde til optimering af lægemidlernes virkninger består i en reguleret og gennem længere tid opretholdt indgift i det systemiske kredsløb. Oralt indgivne lægemidler absorberes i almindelighed i tyndtarmen. Sådanne lægemidler undergår en behandling ved første pas-15 sage gennem leveren og tyndtarmen; dette betyder, at de omdannes af tyndtarmen og af leveren til farmakologisk inaktive metabolitter og/eller udskilles i galden af leveren enten som lægemiddel eller som aktive metabolitter. Som et resultat heraf kan den mængde af et peroralt 20 indgivet lægemiddel, som i realiteten træder ind i det systemiske kredsløb, være meget mindre end den mængde, der er blevet indgivet. Man må for at sikre sig, at effektive mængder af et sådant lægemiddel vil indgå i kredsløbet og nå det eller de udvalgte målsteder i 25 legemet, indgive større mængder end de faktisk fornødne, og de må ofte indgives i adskillige mindre doser frem for i én dosis. Peroralt indgivne lægemidler besidder ligeledes typisk dårlig biologisk tilgængelighed. De kan f.eks. influeres på ugunstig måde af pH og af den 30 enzymatiske aktivitet i maven og i tyndtarmen, og de kan eventuelt opløses dårligt i mave og tyndtarmsvæskerne.

Der har foreligget talrige forsøg på at løse disse problemer og forbedre den biologiske tilgængelighed af 35 peroralt indgivne lægemidler. Man har forbedret effektiviteten af visse peroralt indgivne lægemidler ved at indgive dem med et triglycerid eller med neutralt fedt.

2 DK 171309 B1 Sådanne fedtstoffer repræsenterer et medium, som er forligeligt med lipofile lægemidler, dvs. at de udviser lav vandig opløselighed. Fedtstoffer forhøjer ligeledes stabiliteten af lægemidler, som er ustabile i maven og i 5 tyndtarmen. Slutprodukterne af fedtfordøjelsen absorberes af villi i tyndtarmens slimhinde ind i et lymfekar, det centrale fraførende kar; absorptionen foregår indenfor tyndtarmens område, i hvilket der indtræder en begrænset metabolisme af lægemidlet. Det absorberede fedt transpor-10 teres gennem toraxkanalen, hovedlymfekarret og udtømmes derpå 1 blodet; det føres ikke ind i portåreblodet, som går til leveren, hvor first pass metabolisme for lægemidlet indtræder.

15 Man har påvist, at absorptionen af griseofulvin forbedres, dersom lægemidlet indgives samtidig med et måltid med et højt fedtindhold eller i en emulsion af olie og vand. Crounse, R.G., Journal of Investigative Dermatology, 37:529 (1961); Carrigan, P.J. og Bates, T.R., Journal 20 of Pharmacological Science, 62:1476 (1973). Dersom man indgiver hormonet testosteron-undecanoat i en jord-nøddeolieopløsning, er det mere biologisk aktivt, end dersom det indgives som en vandig mikrokrystallinsk suspension. Coert, A. J. et al., Acta Endocrinol, 79:789, 25 (1975); Hirschhauser, C. et al., Acta Endocrinol., 80:179 (1975). Denne virkning formodes at skyldes absorptionen af steroidet gennem thoraxlymfesystemet snarere end gennem portåreblodet; på denne måde undgår man en bearbej-ning ved første passage igennem leveren.

30

Cholesterol, estere deraf og triglycerid-bestanddelene (f.eks. fedtsyrer og monoglycerider) absorberes gennem thoraxlymfen. Virkningerne af visse af disse forbindelser alene eller i nærvær af galdesalte på visse peroralt 35 indgivne lægemidler er blevet undersøgt. F.eks. førte indgift pr. os af ubidecarenon, som anvendes til behandling af hypertension, i en blanding indeholdende fedtsy- 3 DK 171309 B1 rer med 12-18 carbonatomer og monoglycerider indeholdende sådanne fedtsyrer til absorption af ubidecarenonen i noget større udstrækning, end man fandt efter indgift peroralt af lægemidlet alene (8,3% overfor 2,2%). Takl, 5 K. og Takahira, H., U.S. Patentskrift nr. 4 325 942. (1982). Dersom steroidet progesteron indgives peroralt i kombination med cholesterol eller estere deraf, kan man opnå god langvarig biologisk aktivitet. Dette formodes at skyldes absorptionen af progesteron via thoraxlymfen og 10 ikke via portårekredsløbet. Kind, F. A., Proceedings of the 6th International Congress of Pharmacology, 5:105, (1975).

Yesair har bedømt virkningen af fedtsyrer indeholdende 15 12-18 carbonatomer, monoglycerider af disse fedtsyrer og af galdesalte på absorptionen af estradiol, som er et østrogent hormon indgivet peroralt Yesair, D. W., PCT WO 83/00294 (1983). Molforholdet mellem de bedømte fedtsyrer: monoglycerider: galdesalte befandt sig i området fra 20 10:1:1 til 1:1:10 eller 1:10:1. Det foretrukne forhold angives at være 2:1:2, hvilket svarer til den micellære sammensætning, som er resultatet af den enzymatiske fordøjelse af triglycerider i tyndtarmen, som foregår i nærvær af galdesalte og af calciumioner. Når der er 25 galdesalte i overskud tilstede, kan estradiol inkorporeret i blandingen 2:1:2 migrere eller fordele sig ind i en galdesalt-beriget micellær opløsning. Denne migrering eller fordeling af estradiol indtrådte forud for absorptionen af lægemidlet, således som det påvises ved den 30 kendsgerning, at de oprindelige koncentrationer af estradiol i plasma til at begynde med er større end koncentrationerne i lymfe. Derudover blev ca. 25-50% af det estradiol, der blev indgivet i blandingen, co-absorberet med lipid-bestanddelene og indtrådte i det systemiske 35 kredsløb gennem thoraxlymfen.

4 DK 171309 B1

Tilstedeværelsen af galdesalte, som absorberes i ileum (og ikke i jejunum, som det er tilfældet for det meste fedtstof) indvirker uheldigt på co-absorptionen af estradiol med fedt ved at forhøje migreringen af lægemidlet 5 fra fedt til galdesalt-micellen. Man anvendte phosphati-dyl-cholin i et forsøg på at holde estradiol indenfor den micellære sammensætning, i hvilke fedtsyrerne:monoglyce-riderne:galdesaltene forelå i et molært forhold 2:1:2. I nærvær af overskud af galdesalte forblev ca. 60% af det 10 estradiol, som blev inkorporeret i den 2:1:2 micellære sammensætning, associeret dermed, når phosphatidyl-cholin ikke var tilstede. Under de samme betingelser forblev 70-75% af estradiolen i blandingen, når man anvendte phosphatidyl-cholin. Tilsætning af phosphatidyl-cholin til 15 dette formål resulterer imidlertid i en forøget størrelse af transportsystemet. Størrelsen udgør en vigtig parameter i absorptionen af lipidmiceller, og denne virkning af phosphatidyl-cholin kunne inteferere med co-absorptionen af lægemidlet sammen med lipiderne. Man har 20 derudover påvist, at overskydende phosphatidyl-cholin reducerer lipidabsorptionen. Ammon, Η. V. et al., Lipids, 14:395 (1979); Clark, S. B., Gastrointestinal Physiology, 4:E183 (1978). 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Andre forskere har ligeledes beskrevet virkningerne af 2 tilstedeværelsen af galdesalte i lipid-formuleringer an 3 vendt til co-absorption af lægemidler. Wilson, T. H., 4

In:Intestinal Absorption, Saunders, (1962); Lack, L. og 5 weiner, I.M., American Journal of Physiology, 240;313, 6 (1961); Η. V. Ammon et al, Lipids, 14:395, (1979). F.eks.

7 kunne man kun konstatere en lille forskel i absorptionen 8 af 5-fluorouracil (5FU) i maven eller i tyndtarmen, når 9 5FU blev indgivet alene eller i en blandet micelleformu- 10 lering med mono-olein/natriumtaurocholat. 5FU absorptio- 11 nen i tyndtarmen var større, når lægemidlet blev indgivet i formulering, end når det blev indgivet alene. Streptomycin absorberes dårligt fra tarmen. Muranushi og hans 5 DK 171309 B1 medarbejdere rapporterer, at blandede miceller, som er sammensat af galdesalte, mono-oleln eller umættede fedtsyrer, ikke forbedrer absorption af streptomycin fra tyndtarmen; men at de i udpræget grad forøger absorptio-5 nen fra tyktarmen. Denne forøgelse 1 tyktarmen blev for det meste tilskrevet ændringen i permeabiliteten gennem slimhinde-membranen for mono-olein eller for umættet fedtsyre. I modsætning hertil fremkaldte blandede miceller af galdesalte og mættede fedtsyrer kun en lille 10 forøgelse i streptomycinabsorptionen selv fra tyktarmen. Muranushi, N. et al., Journal of Pharmaceutics, 4:271 (1980). Taniguchi et al. rapporterer, at mono-olein/tau-rocholat eller oliesyre/taurocholat fremmer absorptionen af heparin, som absorberes dårligt, når det indgives 15 alene. Taniguchi, K. et al., International Journal of Pharmaceutics, 4:219 (1980). Absorptionen af heparin fra tyktarmen var dobbelt så stor som den, der opnåedes fra tyndtarmen. Koncentrationen af heparin i blandingsmicellen for at opnå forbedringen i tyktarmen var ca. % af 20 den, som var nødvendig i tyndtarmen.

Sezoshi og Muranishi beskriver i US patentskrift nr.

4 156 719 en micelleopløsning til rektal indgift af vandopløselige lægemidler, som absorberes dårligt. Præparatet 25 består af fedtsyrer indeholdende 6-18 carbonatomer og/eller mono- eller di-glycerider indeholdende den samme type af fedtsyre; et galdesalt eller et andet ikke-ionisk overfladeaktivt middel samt af vand. Man kan i stedet for fedtsyrerne og mono- eller di-glyceriderne substituere en 30 lysophosphatidyl-cholin-andel. Absorption af streptomycin og gentamycin fra rectum og fra tyktarmen angives at være sammenlignelig med omfanget, når lægemidlet indgives i en micelle af galdesalt:blandet lipid. Tilsvarende formuleringer var ikke effektive med hensyn til at forhøje 35 absorptionen i duodenum. Muranushi, S. et al., Interna tional Journal of Pharmaceutics, 2:201 (1979). Absorption af de to lægemidler via rectum og tyktarm blev i udpræget 6 DK 171309 B1 grad større end den var, med en sammenlignelig dosis indgivet i duodenum, selv når koncentrationen af den blandede lipid micelle indgivet i duodenum var 4 gange så stor, som den der blev indgivet gennem de andre veje.

5

Der er for tiden et behov for en mere effektiv fremgangsmåde til at forbedre absorptionen af peroralt Indgivne lægemidler fra tyndtarmen. En stor del af et lægemiddel indgivet peroralt når aldrig frem til de udvalgte bestem-10 melsessteder, enten fordi lægemidlet absorberes dårligt, eller fordi det, efter at det er blevet absorberet, i stor udstrækning fjernes af leveren. Dersom der forelå mere effektive midler til at forhøje absorptionen af et lægemiddel, ville behandlingen være mere effektiv, efter-15 som man kun behøvede at indgive en mindre mængde af lægemidlet for at sikre, at den ønskede mængde ville nå frem til de udvalgte bestemmelsessteder.

Med hensyn til ernæringen er de enkelte individers kalo-20 riebehov primært en funktion af legemets sammensætning og af niveauet af fysisk aktivitet. Medicinsk beskadigede, ældre og fysisk stressede individer har ofte en begrænset mængde legemsfedt. Som følge heraf vil energibehovene (kaloriebehovene) i hovedsagen blive tilfredsstillet fra 25 ydre kilder.

Fysiske aktiviteter gør brug af muskler, og energibehovene for samtlige muskler inklusive hjertet bliver primært opfyldt som et resultat af oxidation af fedtsyre fra fedt 30 i kosten eller mobiliseret fedtvævsfedt. Fedtvævsfedtet kan, som det er bemærket, være ganske lidt, og en effektiv absorption af fedtet kan derfor være en vigtig faktor ved tilfredsstillelsen af energibehovet af de medicinsk svækkede, de gamle og de fysisk aktive.

Fedtabsorption kan være uheldigt influeret under mange omstændigheder. F.eks. foreligger der ved cystisk fibro- 35 7 DK 171309 B1 se, som er en sygdomstilstand i de exokrine kirtler, en mangeltilstand på pancreasenzymer, galdesalte og hydro-gencarbonationer. Nutrition Reviews, 42:344 (1984); Ross, C. A., Archives of Diseases of Childhood, 30:316 (1955): 5 Scow, R. O. E., Journal of Clinical Investigation, 55:908 (1975). Fedtabsorptionen hos patienter med cystis fibrose kan være ganske alvorligt påvirket, og fra 30 til 60% af det indtagne fedtstof kan blive malabsorberet. Malabsorp-tionen og den deraf følgende steatoré behandles i almin-10 delig ikke med held ved peroral indgift af pancreas-lipase. I et forsøg på at regulere steatoréen, kan det forekomme, at patienten forbruger mindre fedtstof end ønskværdigt til opnåelse af god helbredstilstand.

15 Fedtabsorptionen kan være uheldigt influeret under belastende tilstande, og den almindeligt accepterede metode til at håndtere dette problem har været at reducere forbruget af fedtstof. Denne metode kan resultere i såvel akutte som kroniske medicinske problemer. Disse problemer 20 kan undgås eller i det mindste minimeres, dersom man har en let absorberbar fedtstofkilde til rådighed.

Den foreliggende opfindelse angår en blanding, som består af 25 1) ikke-esterificerede fedtsyrer indeholdende 14-18 car-bonatomer, 2) monoglycerider, som er monoestere af glycerol og fedt- 30 syrer indeholdende 14-18 carbonatomer, 3) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyrekomponenten indeholder 14-18 carbonatomer, og 35 4) et lægemiddel.

8 DK 171309 B1

De ikke-esterificerede fedtsyrer og de esterificerede fedtsyre-andele 1 monoglyceriderne og i phosphatidyl-cholinet kan være umættede eller mættede. De umættede fedtsyrer kan især være palmitolsyre, oliesyre, linolsyre 5 eller linolensyre, som kan foreligge i blandingen individuelt eller i kombination. De mættede fedtsyrer, der ligeledes indeholder 14-18 carbonatomer, kan f.eks. være myristinsyre, palmitinsyre eller stearinsyre.

10 De ikke-esterificerede fedtsyrer og monoglyceriderne foreligger i blandingen i et molært forhold på mellem ca.

2:1 og ca. 1:2 (ikke esterificerede fedtsyrer:monoglyce-rider). Lysophosphatidyl-cholinet udgør fra ca. 1,0 mol-% til ca. 30,0 mol-% af den samlede blanding.

15

Dersom de ikke-esterificerede fedtsyrer i blandingen er mættede, tilsætter man tilstrækkeligt store mængder af divalente kationer (ca. halvdelen af den molære mængde af fedtsyrerne), såsom calciumioner, til dannelse af ikke-20 esterificerede fedtsyresalte.

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse er beregnet til at fremme optagelsen af det blandede lipid-colloid i slimhinden i tyndtarmen, den påfølgende syntese til 25 chylomicroner, translokationen af chylomicronerne til thoraxlymfen og transporten til det systemiske kredsløb (dvs. blod).

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse vil fremme 30 en hurtig og kvantitativ absorption af lipider i tyndtarmen og transport af lipiderne via lymfekarrene på grund af adskillige karakteristika. For det første er det for fedtsyrerne og monoglyceriderne beskrevne molære forhold optimalt for deres absorption i jejunum. For det andet 35 har man påvist, at de umættede fedtsyrer eller de mættede fedtsyre-calciumsalte, som er indbefattet i blandingen, bliver maksimalt absorberet og fortrinsvis transporteret 9 DK 171309 B1 via thoraxlymfen (og ikke transporteret via portåreblo-det). For det tredie indeholder blandingen ligeledes lysophosphatidyl-cholin, som fremmer translokationen af de rekonstituerede lipider som chylomicroner ind i tho-5 raxlymfen.

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse kan tjene som bæremedium for en forøget optagelse og biologisk tilgængelighed af lægemidler. Lægemidler er her bredt defΙ-ΙΟ neret som ethvert kemisk middel eller kemiske stoffer, som udøver en indflydelse på livsprocesser. Eksempler på stoffer, som kan inkorporeres i forbindelsen ifølge den foreliggende opfindelse, er lægemidler, der er indgivet til diagnostiske, terapeutiske eller forebyggende formål; 15 lipofile pro-lægemidler; bioaktive peptider; visse næ ringsemner, såsom fedtopløselige vitaminer og andre xeno-biotica. Denne forøgelse eller fremme indtræder, fordi lægemidlet inkorporeret i blandingen ifølge opfindelsen absorberes sammen med lipider og som følge heraf indtræ-20 der i det systemiske kredsløb gennem lymfekarrene. Som et resultat deraf absorberes det hurtigere og mere fuldstændigt, end det ellers ville være tilfældet. Fordi man undgår en udskillelse ved første passage gennem leveren, indtræder mere af den absorberede dosis i blodet og er 25 tilgængeligt til at nå målområderne, end hvad der ville være tilgængeligt, dersom man ikke anvendte lipid-formu-leringen.

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse kan ligele-30 des tjene som en højt koncentreret kilde til let absorberbart fedtstof, som f.eks. kan anvendes af sådanne individer, som har behov for en i kaloriemæssig henseende tung diæt-komponent. Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse består, når den anvendes på denne måde, af 1), 35 2) og 3) som ovenfor beskrevet, og den indbefatter ikke et lægemiddel.

10 DK 171309 B1

Blandingen Ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebringer ligeledes et stabilt, blandet llpld-collold, som vil beskytte lægemidlerne mod f.eks. enzymatisk og kemisk nedbrydning 1 maven og 1 den øvre del af tarmen. I til-5 slutning hertil vil den Indbyggede stabilitet af lipid-komponenterne gøre blandingerne stabile Igennem længere tid og kan således tjene som stabile transport-medier for de stoffer, som er Inkorporeret 1 formuleringen.

10 På tegningen viser fig. 1 i en grafisk afbildning de samlede vitamin A-afledte radioaktivitets-ækvivalenter igen- 3 nem tiden i plasma fra rotter, som fik indgivet H-vitamin A i en blanding og i plasma fra rotter, som fik 3 indgivet H-vitamin A i majsolie.

15 På fig. 2 er vist en grafisk afbildning af de gennemsnitlige profiler for plasmakoncentration-tid for N-(4-hy-droxyphenyl)-trans-retinamid (HPR) hos hunde efter en peroral indgift af HPR.

20

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse, som består af ikke-esterificerede fedtsyrer, mono-glycerider af sådanne fedtsyrer, lysophosphatidyl-cholin indeholdende sådanne fedtsyrer som sin fedtsyreandel samt et lægemiddel, 25 er baseret på absorption og transport karakteristika for fedtsyrerne og på bidraget fra lysophosphatidyl-cholin til solubilisering af lægemidlet i lipid-blandingen og til translokation af det absorberede fedtstof ind i lymfen (frem for ind i portårekredsløbet).

30

Hydrolyse af triglycerider fører til et molært forhold mellem fedtsyre og monoglycerid på 2:1. Ved den påfølgende absorption og re-syntetisering i tarmens slimhindelag blandes de fra føden kommende fedtsyrer og mister deres 35 identitet; der dannes nye triglycerider, som til dels er karakteristiske for den pågældende organismes art.

11 DK 171309 B1

To bestanddele af galden er fedtsyrer og phosphatidyl-cholin. Enzymatisk hydrolyse af phosphatidyl-cholin fører til fedtsyrer; fuldstændig hydrolyse fører til 2 molekyler fedtsyre og delvis hydrolyse fører til 1 molekyle 5 fedtsyre og lysophosphatidyl-cholin. Som et resultat heraf kan en blanding, som indeholder et overskud af mo-noglycerid (f.eks. fedtsyre:monoglyceridforhold på 1:2), være i ligevægt med sådanne fedtsyrer, som stammer fra galden, i omtrent det optimale forhold på 2:1 for den 10 forbedrede absorption af blandede lipidkolloider fra den øvre del af tarmen. Et forhold mellem fedtsyre:mono-glycerider, der ikke befinder sig indenfor dette område (dvs. 1:2 til 2:1), kan ikke fremme lipidabsorptionen.

Det kan ligeledes indvirke skadeligt ikke alene på 15 lipidabsorptionen, men også på co-absorptionen af lægemidler indgivet med lipiderne.

En mindre effektiv måde at tilpasse sig overskuddet af fedtsyre er tilsætningen af glycerol i stedet for mo-20 noglycerider. Dersom de indgående lipider ikke er blevet absorberede indenfor jejunumområdet i tarmen, fortsætter de i tyndtarmen til tyktarmen. De lægemidler, som bevæger sig sammen med lipiderne, kan absorberes og transporteres via portåresystemet til udskillelse ved første passage 25 gennem leveren. Når de først befinder sig i tyktarmen, anvendes de indgående lipider af tarmens mikroflora. Disse mikroorganismer kan ligeledes metabolisere lægemidlet, der bevæger sig sammen med de indgående lipider, til dannelse af toxikologisk aktive arter. Goldman, P. In: 30 The Molecular and Cellular Approaches to Understanding the Mechamisms of Toxicity, A. H. Tashjian (ed.) 164, (1983).

Man har vist, at absorption af mættede fedtsyrer er om-35 vendt proportional med antallet af carbonatomer i fedtsyren. F.eks. er absorptionen af decansyre (10:0, som er angivelse af kædelængde og omfanget af umættethed) næsten 12 DK 171309 B1 kvantitativt. For laurinsyre (12:0) er det mere end 95%; for myristinsyre (14:0) er den 80-90%; for palmitinsyre (16:0) er den 65-70% og for stearinsyre (18:0) er den 30-45%.

5

Transporten af absorberet fedtsyre via lymfen (og ikke i portårekredsløbet) varierer i stort omfang. Dvs., at man har påvist, at den meget større procentdel af absorberede umættede fedtsyrer føres i lymfen, end når det drejer sig 10 om mættet fedtsyrer. Man har vist at ca. 85% af de umættede fedtsyrer føres i lymfen. Miura, S. et al., Keio Journal of Medicine, 28:121 (1979). I modsætning hertil transporteres 5-20% af absorberet decansyre (10:0) og 15-55% absorberet laurinsyre (12:0) i lymfen, skønt 95% af 15 en given mængde af hver vil blive absorberet. Den tilbageværende del absorberes ind i portåreblodet. Som ovenfor bemærket er den procentvise absorption af mættede fedtsyrer omvendt proportional med kædelængden. Dvs., at myristinsyre (14:0) absorberes i større udstrækning end 20 palmitinsyre (16:0), som på sin side absorberes i større udstrækning end stearinsyre (18:0). Den mængde af disse absorberede fedtsyrer, som føres i lymfen, er ligeledes omvendt proportional med kædelængden: 68-80% for myri stinsyre; 85% for palmitinsyre og stearinsyre. Derudover 25 har man vist, at udmættede fedtsyrer (f.eks. linolsyre 18:2) absorberes hurtigere ind i lymfen og i større udstrækning end mættet fedtsyre. Taniquchi, K., International Journal of Pharmaceutics, 4:219 (1980). 1 2 3 4 5 6

Dersom man inkluderer mættede fedtsyrer i blandingen i- 2 følge den foreliggende opfindelse, inkluderes de i form 3 af calciumsalte eller salte af en anden kation. Dette er 4 tilfældet, fordi den enzymatiske hydrolyse af triglyceri- 5 der, som frigiver mættede fedtsyrer, fremmer dannelsen af 6 calciumsæberne deraf. Tak, Y.A. and Grigor, M. R., Bio-chimica Biophysica Acta, 531:257 (1978).

13 DK 171309 B1

Man har påvist, at en overførsel af absorberet fedt til lymfen kræver lysophosphatldyl-cholln. Såvel lysophospha-tidyl-cholin som phosphatidyl-cholin Indeholder phos-phoryl-cholin bundet til C-l i glycerol; men de adskiller 5 sig ved antallet af fedtsyrer, som de indeholder. Lyso-phosphatidyl-cholin har en enkelt fedtsyrekomponent, som er placeret ved enten C-l eller C-2 i molekylet; phosphatidyl-cholin har to fedtsyreandele (en ved C-l og en ved C-2). Hastigheden, men ikke omfanget af overførslen 10 af absorberet fedt er tilsyneladende forbundet med fedtsyreandelen i lysophosphatidyl-cholin. F.eks. resulterer oleoyl-lysophosphatidyl-cholin (afledt af di-oleoyl-phos-phatidyl-cholin) i en 100% forhøjelse i triglycerid og phospholipid igennem lymfekarrene transporteret fedtstof, 15 når man sammenligner det med virkningerne af et lyso-phosphatidyl-cholin, som er afledt af en phosphatidyl-cholin, der er sammensat i hovedsagen af mættede fedtsyrer (f.eks. palmitinsyre (C16:0) og stearinsyre (C18:0)). Der foreligger, i fraværet af luminalt phospha-20 tidyl-cholin til at føre til et lysophosphatidyl-cholin, en forhøjet akkumulering af mucosalt triglycerid og tilsyneladende forhøjet portåretransport af de absorberede fedtsyrer. Tso, P et al., Gastroenterology, 80:60 (1981); 0'Doherty, P.J.A. et al., Lipids, 8:249 (1973). Dersom 25 belastningen med fedtstof forøges 5 gange, ses en defekt ved lymfe-transporten af absorberet fedtstof. Denne virkning kan modvirkes ved tilsætning af en kilde til lysophosphatidyl-cholin. Tso, P. et al., Gastroenterology, 73:1362 (1977). Denne virkning af lysophosphatidyl-30 cholin, som er iagttaget in vivo, er ligeledes forekommende in vitro. Rodgers, J. B., og O*Connor, P. J., Bio-chimica Biophysica Acta, 409:192 (1975). Man har påvist, at lysophosphatidyl-cholin absorberes hurtigt intakt. Rodgers, J. B. et al., Digestive Diseases, 20:208 (1975); 35 Nilsson, A., Biochimica Biophysica Acta, 137:240, (1976).

Man har ligeledes påvist, at lymfe-phospholipider i hovedsagen indeholder umættede fedtsyrer: oliesyre (18:1) 14 DK 171309 B1 50-63%; linolsyre (18:2) 17-20% og arachldonsyre (20:4) 2-4%. Inkorporering af en umættet lysophosphatidyl-cholin i blandingen ifølge den foreliggende opfindelse vil fremme overførslen af de absorberede lipider og de samti-5 dig dermed absorberede lægemidler eller andre stoffer. Derudover spiller lysophosphatidyl-cholinet en rolle ved solubilisering af visse lægemidler (f.eks. forøger tilstedeværelsen deraf opløseligheden af lægemidlerne i blandingen).

10

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse består af ikke-esterificerede fedtsyrer indeholdende 14-18 carbon-atomer; monoglycerider, der er monoestere af glycerol og fedtsyrer indeholdende 14-18 carbonatomer; lysophosphati-15 dyl-cholin, i hvilket fedtsyreandelen ligeledes har 14-18 carbonatomer samt et lægemiddel. De ikke-esterificerede fedtsyrer og fedtsyrerne i monoglyceriderne og i lysophosphatidyl-cholin kan være umættede eller mættede, og de vil fortrinsvis være umættede. Eksempler på umættede 20 fedtsyrer, der kan anvendes i blandingen ifølge den foreliggende opfindelse, er: palmitolsyre CH16H30°2 16:1 oliesyre ^H18H34°2 18:1 25 linolsyre CH^gH^C^ 18:2 linolensyre CH18H30°2 18:3

Eksempler på mættede fedtsyrer, som kan anvendes i blandingen ifølge opfindelsen, er: 30 myristinsyre CH14H28°2 14:0 palmitinsyre CHi6H32°2 16:0 stearinsyre CH18H36°2 18:0 35 De ikke-esterificerede fedtsyrer og monoglycerider foreligger i mængder, som fører til et molært forhold på fra ca. 2:1 til 1:2 (ikke-esterificeret fedtsyre:monoglyce- 15 DK 171309 B1 rid).

Derudover Indeholder blandingen lysophosphatidyl-cholin, hvis fedtsyredel indeholder 14-18 carbonatomer og for-5 trinsvis er umættet. Fedtsyrekomponenten i lysophosphati-dyl-cholinet er fortrinsvis en af de ovenfor anførte. Mængden af lysophosphatidyl-cholin i blandingen er bestemt af den mængde, der er nødvendig for at forhøje solubiliseringen af et lægemiddel, som skal indgives i 10 blandingen, og den mængde, der er nødvendig til dets medvirken ved overførslen. Lysophosphatidyl-cholin udgør i almindelighed fra ca. 1,0 mol-% til ca. 30,0 mol-% af den samlede blanding. Fedtsyrerne, som indgår i blandingen ifølge den foreliggende opfindelse, hvad enten disse 15 er ikke-esterificerede fedtsyrer eller er bestanddele af monoglycerider eller lysophosphatidyl-cholin, kan alle være ens, eller man kan inkludere et antal forskellige fedtsyrer.

20 Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse kan ligeledes indeholde et lægemiddel, som kan være et vilkårligt kemisk middel eller kemisk stof, som influerer på levende processer. De inkluderer, men er ikke begrænset til, lægemidler der indgives til diagnostiske, terapeutiske el-25 ler forebyggende formål; lipofile pro-lægemidler; visse næringsstoffer såsom fedtopløselige vitaminer og andre xenobiotika.

Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles 30 i overensstemmelse med den i den følgende beskrevne metode. De indgående lipidkomponenter vejes og sammenblandes med eller uden anvendelse af varme til opnåelse af væskehomogenitet. Lægemidlet tilsættes og opløses med eller uden anvendelse af varme i lipidblandingen. En ensartet 35 tilstand er Indikeret ved fraværet af faste bestanddele ved den passende temperatur, hvor blandingen skal være flydende, og ved fravær af sløringsdannelse. En slørings- 16 DK 171309 B1 effekt vil være tydeligere ved større koncentrationer af lægemidlet i lipidblandingen. Formuleringen er stabil overfor adskillige cycler af frysning og optøning? fremkomsten af faste stoffer eller af sløring kan indikere 5 ustabilitet af formuleringen.

En anden metode til fremstilling af formuleringen involverer opløsning af de indgående lipider og lægemidlet i et opløsningsmiddel eller i en blanding af opløsningsmid-10 ler og sammenblanding til opnåelse af homogenitet. Opløsningsmidlerne fjernes under vakuum eller ved andre egnede metoder. Kriteriet for en egnet formulering vil være den samme som ovenfor anførte.

15 Blandingen ifølge den foreliggende opfindelse belyses af de i det følgende viste eksempler.

EKSEMPEL I

20 Fremstilling af blandingen og sammenligning med majsolie som et middel til transport

Llpid blanding 3 25 Man inkorporerede tritium-mærket ( H) vitamin A (7 mg eller 0,25 mmol; 30 curie pr. mol; specifik aktivitet 1,26 mC/mmol; Hoffman LaRoche) i en lipid formulering med følgende sammensætning: 56 mg oliesyre (NuCheck Pr ep,

Inc.); 36 mg mono-olein ('NuCheck Prep, Inc.) og 6 mg 30 lysophosphatidyl-cholin afledt af sojalecithin (A. E. Staley Mfg. Co.). Dette svarer til et omtrentligt molært forhold mellem oliesyre:monoolein:lysophosphatidyl-cholin på 2:1:0,1. (De omtrentlige molære procentandele af de indgående komponenter var henholdsvis 64,5:32,3:3,2).

35 Blandingen blev indgivet til rotter af arten Sprague-Daw-ley (vægt 210-230 g) ved tvangsfodring.

17 DK 171309 B1

Maj sollepræparatlon

Man indgav tritium-mærket vitamin A (7 mg eller 0,25 mmol) til Sprague-Dawley rotter (som ovenfor beskrevet) i 5 99 mg levnedsmiddelkvalitet raffineret majsolie (A. E.

Staley Mfg. Co.)·

Eksperimentel fremgangsmåde og resultater 10 Man målte koncentrationen af vitamin A ækvivalenter i plasma ved udtagelse af dobbelte blodprøver på 0,05 ml fra orbitalsinus 0,5, 1, 2, 3, 4, 6, 8 og 24 timer efter indgiften. Blodet blev opsamlet i hematokritrør og centrifugeret. Plasmaet blev overført til scintillationsam-15 puller og vejet. Radioaktiviteten blev bestemt ved væske-scintillationstælling.

Resultaterne indikerede en langsom absorption af vitamin A gennem en 8 timers periode (fig. 1). En beregning af 20 den mængde, der blev absorberet, som en funktion af tiden, er vist i tabel 1. Ca. 73% af vitamin A i en blanding blev absorberet indenfor 2 timer efter indgift; omtrent 50% af vitamin A indgivet i majsolie blev absorberet indenfor de første 2 timer. På tidspunktet 3 timer 25 efter indgiften var mere end 90% af vitamin A i lipid-blandingen og 77% af vitamin A i majsolien blevet absorberet .

Ved afslutningen af den 8 timer lange undersøgelsesperi-30 ode var absorptionen af vitamin A i såvel blandingen som i majsolie fuldstændig. Plasmakoncentrationen af tritium-mærket vitamin A ækvivalenter i rotter i de to grupper var sammenlignelige. Blandingen forøgede absorptionen af det vitamin A, som var inkorporeret i den, og den for-35 årsagede ligeledes, at vitaminet blev absorberet hurtigere.

18 DK 171309 B1

Arealerne under koncentration-tids-kurven for den 8 timers periode var ligeledes ækvivalente, hvilket indikerede, at absorptionen af vitamin A i blandingen var kvantitativ. Ved en tilsvarende sammenligning blev ca. 73% af 5 vitamin A i blandingen absorberet inden for 2 timer (tabel 1), og absorptionen var større end 90% ved 3 timer i sammenligning med 52 og 77% henholdsvis for vitamin A indgivet i majsolie. Det er således klart, at blandingen vil foranledige såvel den forhøjede som den tidligere 10 absorption af inkorporerede lægemidler og derfor forhøje deres effektivitet.

TABEL 1: Procenvis absorption af vitamin A indgivet i blandingen eller i majsolie til rotter ved in-15 tubering gennem munden.

Procent absorption

Lipid Forhold 20 Timer blanding Majsolie Blanding/olie 0 - 0,5 5,4 4,0 1,35 0. 5- 1 27,3 20,0 1,37 1- 2 72,6 52,4 1,39 2- 3 92,0 77,2 1,19 25 3-4 97,3 91,8 1,06 4-6 100,0 99,5 1,01 6-8 100,0 100,0 1,00 EKSEMPEL II 30

Bedømmelse af kapaciteten og stabiliteten af en blanding som et middel til at transportere vitamin A

Man anvendte en blanding omfattende oliesyre, monoglyce-35 rid og lysophosphatidyl-cholin, som beskrevet i eksempel 1, til at karakterisere blandingens kapacitet for vitamin A (ligeledes som ovenfor beskrevet). Til blandingen satte DK 171309 B1 19 man vitamin A 1 portioner som følger: 1. tilsætning: 0,277 mmol 2. tilsætning: 0,241 mmol 5 3. tilsætning: 0,246 mmol 4. tilsætning: 0,262 mmol og 5. tilsætning: 0,285 mmol.

Den 5. tilsætning resulterede i tilsætningen af 1,34 mmol 10 eller 3,84 mg vitamin A til ca. 1 g af blandingen.

Millimolforholdet i blandingen var ca. 2:1:0,1 (oliesyre :monoolein:lysophosphatidyl-cholin).

Efter hver tilsætning noterede man den omtrentlige tid, 15 som var nødvendig til fuldstændig opløsning af det tilsatte vitamin A, ligesom udstrækningen af synlig sløring.

Den tid, der behøves til at opnå en minimal sløring, var i almindelighed mellem 2 minutter og 60 minutter og var omvendt proportional med den tilsatte mængde vitamin A.

20 Efter hver tilsætning og opnåelse af en minimal sløring blev opløsningen anbragt i isvand for at bedømme dens stabilitet. Man noterede sig ligeledes den relative viskositet af den kolde opløsning. De opnåede resultater er vist i opsummering i efterfølgende tabel 2.

25

Man iagttog en klar opløsning uden sløringsdannelse indenfor 1 time efter den 5. tilsætning. Den samme opløsning blev frosset i 1 uge og optøet. Man iagttog på det tidspunkt en klar opløsning. Denne cyclus mellem frysning 30 og optøning blev gentaget 4 timer igennem en periode på 8 uger med sammenlignelige resultater. Det er således klart, at denne lipid-formulering er stabil over længere oplagringsperioder og over ændringer i temperaturen.

35 DK 171309 Bl 20

Tabel 2: Blandingens kapacitet for vitamin A

Tilstand til opnåelse af

Vitamin A_klar opløsning 5

Tilsat Total (mmol) (mmol) Tid Temp. Sløring Viskositet 0,277 0,277 1 min. 20 °C ingen normal 0,241 0,518 1 min. 20 °C minimal normal 10 0,276 0,794 5 min. 37 °C medium tykkere 0,262 1,056 10 min. 37 °C medium viskøs 0,285 1,341 10 min. 46 °C omfat- meget tende viskøs

15 EKSEMPEL III

Bedømmelse af opløseligheden af N-(4-hydroxyphenyl)-trans-retinamid (HPR) i lipid-formuleringer 20 Lipid-formuleringer

Man anvendte N-(4-hydroxyphenyl)-trans-retinamid (HPR) (McNeil Pharmaceutical) til at karakterisere opløseligheden deraf i flere formuleringer af blandingen ifølge 25 den foreliggende opfindelse. Sammensætningen af blandin gen varierede med hensyn til fedtsyrebestanddelene blandt de 3 basis-komponenter: fedtsyre (NuCheck Prep Inc.), mo-noglycerid (NuCheck Prep Inc.) og lysophosphatidyl-cholin (Avanti Polar Lipids). De anvendte formuleringer er an-30 ført 1 den senere bragte tabel 3.

I hver af formuleringerne blev lipid-komponenterne først blandet sammen i en forseglet beholder under nitrogen. Derpå tilsatte man fast HPR i små portioner. Beholderen 35 blev efter hver tilsætning igen forseglet under nitrogen og opvarmet og behandlet med ultralyd til dannelse af en opløsning af HPR, eller indtil det blev klart, at det 21 DK 171309 B1 faste HPR ville forblive i suspension. Sådanne formuleringer, som resulterede i opløsning af HPR, blev afkølet i køleskab eller frosset, og man bemærkede sig den fortsatte solubilisering af HPR. I alle tilfælde fældede HPR, 5 når det først var blevet solubiliseret, ikke ud af opløsningen.

De opnåede resultater af observationerne for de pågældende formuleringer er vist i efterfølgende tabel 3. I 10 formuleringerne II og III bemærkede man sig opløsning af HPR, når det molære forhold mellem lysophosphatidyl-cho-lin (LysoPC) og HPR (LysoPC:HPR) var større end 1; en suspension af HPR blev observeret, når det molære forhold mellem lysophosphatidyl-cholin og HPR var mindre end 1.

15 Ved sammenligning af formuleringen III og IV, som indeholdt omtrent den samme mængde HPR, var forholdet LysoPC:HPR mindre end 1 i formulering III, da man iagttog en suspension af HPR, og større end 1 i formulering IV, da man iagttog en opløsning. Sammenligning af formule-20 ringerne V og VI viste, at opløsningen af HPR var klart synlig ved molær forhold på 1 (LysoPC:HPR) hvor lysophosphatidyl-cholin indeholdende enten myristyl-fedtsyren (14:1) eller palmityl-fedtsyren (16:1). I formulering V synes solubiliseringen af den tredie sekventi-25 elle tilsætning af HPR at være mere vanskelig end de første to tilsætninger. Dette er en yderligere indikation af den betydning det har, at man har et molært forhold mellem LysoPC:HPR større end 1. 1 2 3 4 5 6

Formulering VII repræsenterer en formulering af HPR som 2 indeholdt samtlige komponenter i de tidligere nævnte for 3 muleringer. Således som det er beskrevet i efterfølgende 4 eksempel IV blev denne formulering indgivet til hunde.

5

Kort anført var forholdet 18:1 LysoPC:HPR 0,69; forholdet 6 af 14:0 LysoPC:HPR var 0,33; og forholdet af 16:0 LysoPC:HPR var ligeledes 0,33. Det molære forhold mellem lysophosphatidyl-cholin:HPR i formulering VII var 1,31:1.

22 DK 171309 B1

I I I

I I I

I I I

μ tal i i i (DC i i i

C -Η I I I

O C I I t

•H -P I I I

μ « i i i

(0 (0 I I I

> H C I C I C I

μ μ tao itao icao i φ μ c ih i c *h ic-h i

CO 1-1 (0 I 1-1 (0 I iH W I

X3 u cc ICC icc i o x m φ io)0) io)o) i ix © α i φ α i ©· o< i

W H 0) I H 0) I Η 0) I

c t-ι o» o i α d i o. 3 i

0)0) 0(0 I O CO 10(0 I

> μ i i i

X M-l · · I · · I · · I

0)0) μ N I μ N I μ N I

CO III

I I I

I I I

I I I

I I I

I I I

> III

•Η III

μ \Ω rf I vD C"i I <N σ» I

(OH NO I IT) Tf I 00 t- I

KHO O r-l lOt-l I O Ή I

X 3 E 11 I 1 1 1-1 I

X E E O O too IOO I

3 III

μ x i i i

(0 III

i i i ta iii

C 00 VO I μ [ί I N σι I

ri Ol 11 I i i 111 I

C E OO ι N uo i n pi i

μ IH 00 I N 00 I 00 00 I

(¾ III

0) III

HO) I I I

μ h c i i i

0) E-I 0) · I I I

ta > μ ·· i·· i·· i

C X C r-ι <N IrHN ItHN I

μ 0) iii μ co iii

Φ III

Η III

3 I [Ί 00 I I

g rf r# id ι co σ σ ioot^ i μ η νοοσιοοσσιαιηΓΊΐ ο Ο οοοοιοσοίνοοοΝί μ E 11l| 11l| llll

I OllE N ι-H Ο INOO I ιΗΟΟ I

Ό C III

•Η H III

Q μ III

μ Φ iii Η μ ill 3 Ο) Γιοοσ ιιηνοΝ i oo n r) i μ EE in rj ι pi in σ ι ο-· ο υ ι μ vooo ι in oo i oo μ i X 0 iii x μ iii

Xi iii ό υ ι υ ι υ ι

μ μ μ XI XI XI

(0 α φ οι οι οι μ Ό (0 1 (0 1 (0 1 Ό J Ό <O>ii<0>il<:e>>il Φ C ΧΣΗΙΧΣΗΙΧΣΗΙ

Λ (0 III

Φ μ μμοιμμμιμμμι ta (ο ...... ι ...... ι ·· ·· ·· ι μ Φ 00 00 if IOOCOCO IC0C0C0 ι μ X μμμιμμμιμμμι

φ III

0) ιιι

φ III

μ ιιι α ta ιιι Ο C ιιι μ ιιι ••μ ιιι oo Φ ιιι μ ι ι ι μ 3 μ ι ι ι Φ E C I ι ι

X3 M I H I I

(0 Ο Η I Η I > I

E-t X Η I Η I Η I

DK 171309 B1 23

I I

M Oli I I

(DC i i

C Ή I I

O C i i μ -μ i i μ « i i

to CD I I

> Η I I

μ μ o> o> σ> ι σ> οι io> <d -u c c c i c c ic W iH -Η iH I Ή -Η I μ X) o: c c c i c c ic 0 x w w w i w w i w 1 x s s s i ©·©· is

W Η μ ri I Η Η I rH

c μ α α o. i α o. ι α

<D (D O O O I O O I O

> μ i i JÉ μ · · · ι · · ι·

01 0) Η N η I rH (S I rH

CO I I

i i i i

I I

I I

I I

> I I

μ I I

μ cm ό co i co ic-'

(0 μ CO 00 lO I 00 rH ICO

OSrHO<H<HN I rH CO IO

cu c ε " i *·* i * xeeoooioo i ^

3 I I

μ x i i (0 i i I i ^ O) I I o c σ> oo co i <h co i o •ri O * - * I - v I«

C g iH O O I CO H I lO

μ in n co i c·* ίο ι μ ti i i co i i

H CO I I

μ μ c i i

<D E-ι <D I I

οι > μ · · · i · · i·

C AOCrHCNCOIrHN IH

μα) II

Ih CO II

0) I I

Η I I

3 I I

I σι^οοιιη^οοιο^οοΜ ιο σ μ vo μ μ co ^ r- i rH o μ i cm σ σ σ> o c-· r» m O o m oo cm i o o co i in μ r«* co cm cm co ι 01 E μ o o ι cm μ o i in σ oo cm cm μ μ in Ό C ι i cm μ μ μ ii α μ ι· μφ ιι μ μ ι ι 301VOOCO IC0C0O ι μ £ Ε ^ Ο CM IVDC0VD ι μ mi m μ ι in co μ ι α ο ιι Οι μ ιι χι ιι Ό ϋ I οι Ο Ο Ο

μ μμ XI χι XXX

co α α) οι οι οοο

μ Ό »i (0 I WWW

Ό ΟΌ<0>ιΙ<0>ιΐ<ΟΟ >ι >ι >ι α) cxxjixxjixxs j j j

Λ 10 I I

α) μμμοιμομιμμο μ ο ο σι w ...... ι ............. ......

μ DCOOOMIOOlOlOIOOCOlO 00 τ* ιΟ μ χμμμιμμμιμμμ μ μ μ 0) ι ι w ι ι

S I I

μ ι ι α ο» ι ι ο c ιι μ ι ι ·· (η ιι

C0 0) II

μ ι ι μ 3 (η i ι (DEC ι ι J3 Ih i ih

(0 O IH IH

E-ι X > I > i > DK 171309 B1 24

EKSEMPEL IV

Biologisk tilgængelighed af N-(4-hydroxyphenyl)-trans-retinamid (HPR) indgivet i en formulering 5

Denne undersøgelse var udformet for at sammenligne den biologiske tilgængelighed af HPR fra lipid-formulering VII (se eksempel III og tabel 3), indgivet til beaglehunde under fasten (behandling E^) og hunde under 10 fødetilførsel (behandling E2), med den biologiske tilgængelighed af HPR indgivet til beagle-hunde i en reference-formulering (behandling A) under tilstand med indgivelse af føde. Reference-formuleringen var en oliebaseret blanding indeholdende et overfladeaktivt middel.

15 I disse undersøgelser anvendte man 4 hunde af arten beagle; samtlige hunde modtog HPR, idet der gik mindst 1 uge mellem behandlingerne. Dosis af HPR for behandling A og E^ var 200 mg; det blev indgivet i suspension i behandling A og i opløsning i behandling , og i hvert 20 et tilfældene blev det indgivet i form af to 100 mg kapsler. Ved behandling E2 indgav man 100 mg HPR i opløsning i form af en 100 mg kapsel. Samtlige data for behandling E2 er forelagt med en normalisering til en dosis på 200 mg.

25

Hundene modtog føde og vand ad libitum under behandling A og behandling E2. De blev fastet med hensyn til føde i 12 timer før de modtog behandling E1; denne faste fortsatte indtil 2 timer efter doseringen.

30

Man analyserede plasmaprøver for HPR ved anvendelse af højtryksvæskekromatografimetoden. Plasmakoncentration af HPR ved denne undersøgelse er vist i opsummering i tabel 4 samt på fig. 2.

De gennemsnitlige HPR topkoncentrationer var 1660, 4238 og 8174 ng/ml for henholdsvis behandling A, E1 og E2 35 DK 171309 B1 25 (tabel 4). Det gennemsnitlige areal under kurven, AUC (0-80 timer) udviste værdier på 22666, 62590 og 95935 ng x time x ml for henholdsvis behandling A, Ej og E2 (tabel 5). Det er umiddelbart klart, at den biologiske 5 tilgængelighed af HPR Indgivet 1 formulering VII (behandling Ej og E2) var større end den biologisk tilgængelighed af HPR indgivet i reference-formuleringen (behandling A). En sammenligning af resultaterne opnået, når man indgav formulering VII til dyrene under fodrings-10 tilstand (E^), med resultater opnået, når formuleringen blev givet til fastede dyr (Ej) indikerer, at yderligere lipider (fra den optagne føde) resulterer i en yderligere forøgelse i AUC (1,5 gange forøgelse mellem behandlingerne E2 og E^). De umættede lysophosphatidyl-choliner er 15 ganske særligt anvendelige ved overførsel af absorberet fedt til lymfen. Eftersom disse umættede lysophosphatidyl-choliner kan have været kombineret med HPR, var der utilstrækkelig 18:1 LysoPC til både solubilisering af HPR og overførsel af de absorberede lipider og HPR til 20 lymfen. Som følge heraf kræver sådanne lægemidler, som interreagerer med lysophosphatidyl-cholin i lipidformule-ringen tilsyneladende et højere molært indhold af lysophosphatidyl-cholin med hensyn til fedtsyrerne og mono-glyceriderne.

25 1 35 DK 171309 B1 26

Tabel 4: Opsummering af data for plasmakoncentration-tid for HPR i 4 hunde efter peroral indgift af HPR i formulering VII

5 Gennemsnitlig HPR koncentration i plasma - ng/ml

Formulering Reference A Lipid E^ Lipid-Ej3 tilstand Fodret Fastende Fodret 10

Tid (timer) Plasma HPR koncentration (ng/ml) 0 0,0 24,0 121,9 0,5 219,9 238,9 345,5 1 769,7 1093,3 2388,3 15 2 1430,6 3124,7 7259,8 3 1490,5 3866,0 8032,5 4 1325,2 4078,8 6841,1 5 1105,2 3599,1 5411,0 6 914,3 3021,3 4386,7 20 7 797,3 2470,7 3402,7 24 187,4 557,5 852,6 30 198,0 426,5 646,1 48 93,9 253,3 449,3 54 79,4 193,6 333,9 25 72 69,7 149,0 276,0 80 47,8 114,5 210,3 sk

Korrigeret til basis dosis på 200 mg. 1 35 27 DK 171309 B1

Tabel 5: Areal under kurven for plasmakoncentration-tid [AUC (0-80 timer)] for HPR i 4 hunde efter peroral indgift af HPR i formulering VII

5 HPR-AUC (mg H/ml)

Formulering Reference A Lipid Lipid-E2* tilstand Fodret Fastende Fodret 10 Hund nr.

1 28609 50044 107106 2 15964 85898 127589 3 21190 78476 56274 4 24900 36941 92721 15 ---------------------------------------------------

Middel 22666 62590 95935

Standardafvigelse 5398 22842 30054 20 Median 23045 64260 99939 G. middel 22156 59241 91905

25 Som en % af A

Middel 276 423

Median 279 434 G middel 267 415 30 a Korrigeret til en basis dosis på 200 mg 35

Claims (11)

28 DK 171309 B1 Patentkrav :

1. Blanding til afgivelse af oralt indgivelige stoffer, 5 kendetegnet ved, at den består af: a) mindst en ikke-esterificet C14-Clg fedtsyre, b) mindst et monoglycerid, som er en monoester af glyce- 10 rol og en C14~Clg fedtsyre, c) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyredelen indeholder 14-18 carbonatomer, og 15 d) et lægemiddel, idet forholdet mellem komponent a) og b) er fra 1:2 til 2:1.

2. Blanding ifølge krav 1 til forøgelse af absorptionen af et lægemiddel og til forøgelse af transporten af ikke- 20 esterificerede fedtsyrer og monoglycerider i et individs lymfekar, kendetegnet ved, at den består af: a) ikke-esterificede C14~C^g fedtsyrer, 25 b) monoglycerider, som er monoestere af glycerol og en C14-C18 fedtsyre' c) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyredelen indeholder 14-18 carbonatomer, og 30 d) et lægemiddel, idet lysophosphatidyl-cholinet forefindes i blandingen i tilstrækkelig stor mængde til at solubilisere lægemidlet 35 i blandingen. 29 DK 171309 B1

3. Blanding ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den består af: a) mindst en ikke-esterificeret C^-C^g fedtsyre og 5 mindst et monoglycerid, som er en monoester af glyce rol og en C^-C^g fedtsyre, hvilken fedtsyre og hvilket monoglycerid tilsammen udgør 70,0-99,0 mol-% af blandingen og forefindes i blandingen i et molforhold på mellem 1:2 og 2:1, 10 b) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyredelen indeholder 14-18 carbonatomer, hvilket phosphatidyl-cholin udgør 1,0-30,0 mol-% af blandingen, og 15 c) et lægemiddel.

4. Blanding ifølge krav 3, kendetegnet ved, at det molære forhold mellem fedtsyre og monoglycerid er omkring 2:1, og at lysophosphatidyl-cholinet udgør 3,0- 20 13,0 mol-%.

5. Lipidholdig blanding ifølge krav 3, kendetegnet ved, at den indeholder ikke-esterificerede, mættede C^-C^g fedtsyrer og en tilstrækkelig stor mængde cal- 25 ciumioner til dannelse af et salt med de ikke-esterificerede, mættede fedtsyrer.

6. Blanding ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den består af: a) mindst en ikke-esterificeret fedtsyre valgt blandt palmitolsyre, oliesyre, linolsyre, linolensyre og mættede c14“C1g fedtsyrer, 35 b) mindst et monoglycerid, som er en monoester af glycerol og en fedtsyre valgt blandt palmitolsyre, oliesyre, linolsyre, linolensyre og mættede C^-C^g fedtsy- 30 DK 171309 B1 rer, c) lysophosphatidyl-cholin, der som sin fedtsyredel indeholder en fedtsyre valgt blandt palmitolsyre, oliesy- 5 re, linolsyre, linolensyre og mættede C^-C^g fedtsy rer, og d) et lægemiddel, 10 idet fedtsyren og monoglyceridet tilsammen udgør 70,0- 99,0 mol-% af blandingen og forefindes i et forhold mellem fedtsyre og monoglycerid på mellem 1:2 og 2:1, og i-det lysophosphatidyl-cholinet udgør fra 1,0 til 30,0 mol-% af blandingen. 15

7. Blanding ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 30 den består af: a) ikke-esterificede C^-C^g fedtsyrer, b) monoglycerider, som er monoestere af glycerol og en

35 C14"C18 fedtsYre' 31 DK 171309 B1 c) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyredelen indeholder 14-18 carbonatomer, og d) et lægemiddel, 5 idet de ikke-esterificerede fedtsyrer og monoglyceridet tilsammen udgør 87,0-97,0 mol-% af blandingen og forefindes i et molforhold mellem fedtsyre og monoglycerid på omkring 2:1, og idet lysophosphatidyl-cholinet udgør 3,0-10 13,0 mol-% af blandingen.

7. Blanding ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den består af: a) mindst en ikke-esterificet C^-C^g fedtsyre, 20 b) mindst et monoglycerid, som er en monoester af glycerol og en C^-C^ fedtsyre, c) lysophosphatidyl-cholin, hvori fedtsyredelen indehol- 25 der 14-18 carbonatomer, og d) et lægemiddel.

8. Lipidblanding ifølge krav 7, kendetegnet ved, at det indgående lægemiddel er et fedtopløseligt vitamin. 15

9. Blanding ifølge krav 7, kendetegnet ved, at den ikke-esterificerede fedtsyre, fedtsyren i monoglyceridet og fedtsyren i lysophosphatidyl-cholinet hver især er valgt blandt palmitolsyre, oliesyre, linolsyre, lino- 20 lensyre, myristinsyre, palmitinsyre og stearinsyre.

10. Blanding ifølge krav 7, kendetegnet ved, at den ikke-esterificerede fedtsyre er oliesyre, monoglyceridet er monoolein eller monopalmitin, og lysophos- 25 phatidyl-cholinet er valgt blandt lysophosphatidyl-cholin afledt af sojalecithin, myristyl-lysophosphatidyl-cholin, palmityl-lysophosphatidyl-cholin og oleyl-phosphatidyl-cholin.

11. Blanding ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den består af: a) oliesyre og monoolein i et molært forhold på omkring 2:1, 35 b) ca. 3,0 mol-% lysophosphatidyl-cholin; og c) vitamin A.