DK163580B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cyclohexancarboxylsyrederivater - Google Patents

Description

DK 163580B

Den foreliggende opfindelse angår en analogi-fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cyclo-hexancarboxylsyrederivater med formlen I

HN. ---

5 . ^C-NHCH9-< \-C00R. I

Vv hvori R, betegner vanilyl, pyridyl, a-tocophe- R2 10 ryl eller en gruppe med formlen hvori R2 beteg ner hydrogen, lavere alkoxy eller en gruppe med formlen -(CH2)nC00R3, hvori R3 betegner hydrogen, lavere alkyl, phenyl, benzyl, anisyl eller lavere alkoxycarbonylmethyl, 15 og n betegner et helt tal fra 0 til 2, eller farmaceutisk acceptable salte heraf, og fremgangsmåden er ejendommelig ved det i krav 1's kendetegnende del anførte.

De omhandlede forbindelser har vist sig at besidde fortrinlige inhibitoriske virkninger på protease, 20 antiulcusvirkninger og antihistaminvirkninger, antiin-flammatoriske virkninger og antiallergiske virkninger.

Navnlig har forbindelserne med formlen II

HV /-\ /-l^(CH2)nCOOR3

25j ^-NHCH2- _y -COO- II

: hvori og n har de ovennævnte betydninger, vist sig ! at besidde fortrinlige inhibitoriske virkninger på mave-! sekretionen og forebyggende og helende virkninger på for*-30' skellige mavesår og duodenalsår.

Estergrupperne i de omhandlede forbindelser med formlen I kan være vanilyl, pvridyl, a-to- R2 : copheryl eller en gruppe med formlen -u ' \ 35 \==/

Egnede pyridylgrupper indbefatter 2-pyridyl, i 3-pyridyl- eller 4-pyridylgrupper. Egnede grupper med

DK 163580 B

rÅ formlen ~\'y indbefatter phenyl, methoxyphenyl, etho-xyphenyl, propoxyphenyl eller en gruppe med formlen tf—j^(CH2)nCOOR3 5 'y · Egnede grupper med formlen --- .(CH9) COOR, -(/ indbefatter hydroxycarbo- nylphenyl, methoxycarbonylphenyl, ethoxycarbonylphenyl, 10 t-butoxycarbonylphenyl, phenoxycarbonylphenyl, benzyl- oxycarbonylphenyl, hydroxycarbonylmethylphenyl, methoxycarbonylmethylphenyl, ethoxycarbonylmethylphenyl, t-butoxycarbonylmethylphenyl, phenoxycarbonylmethylphenyl, benzyloxycarbonylmethylphenyl, hydroxycarbonylethyl-15 phenyl, ethoxycarbonylethylphenyl, phenoxycarbonylethyl-phenyl, benzyloxycarbonylethylphenyl og lignende.

Forbindelser med formlen I kan være enten ciseller trans-isomeren. Særlig foretrukken er trans-isome-ren.

20 Farmaceutisk acceptable salte af de omhandlede forbindelser er syreadditionssalte dannet ud fra saltsyre, svovlsyre, phosphorsyre, hydrogenbromidsyre, eddikesyre, mælkesyre, maleinsyre, fumarsyre, vinsyre, citronsyre, methansulfonsyre, p-toluensulfonsyre eller lig-25 nende.

Ved fremgangsmåde (1) ifølge opfindelsen fremstilles i forbindelserne med formlen I ved, at man omsætter 4-gua-nidinomethylcyclohexancarboxylsyre eller et reaktivt derivat heraf med en forbindelse med formlen III

30 R'i - OH III

hvori R' betegner vanilyl, pyridyl, a-toco- R2 pheryl eller en gruppe med formlen , hvori R2f 35 betegner hydrogen, lavere alkoxy, eller en gruppe med formlen ~^<3H2^nCO(3R3 '' kvori R3 * betegner lavere alkyl, phenyl,

DK 163580B

3 benzyl, anisyl eller lavere alkoxycarbonylmethyl, og n betegner et helt tal fra 0 til 2, og om ønsket derpå fraspalter en benzyl-, anisyl-, lavere alkoxycarbonylmethyl- eller t-butylgruppe i Rj'.

5 Egnede reaktive derivater af 4-guanidinomethylcy- clohexancarboxylsyre indbefatter syrehalogeniderne, f. eks. syrechloridet, syrebromidet eller lignende, og blandede anhydrider under anvendelse af ethylchlorformi-! at, butylchlorformiat eller lignende. Syrehalogenider 10 fremstilles ved at omsætte 4-guanidinomethylcyclohexan-carboxylsyre med halogeneringsreagenser, såsom thionyl-chlorid og thionyIbromid, ved en temperatur på fra stuetemperatur til halogeneringsreagensets kogepunkt. De således opnåede syrehalogenider omsættes med forbindelser-15 ne med formlen III til dannelse af de omhandlede forbindelser. Denne omsætning udføres ved omrøring ved en temperatur på fra stuetemperatur til opløsningsmidlets kogepunkt i 1 til 40 timer. Egnede opløsningsmidler, der kan anvendes, indbefatter dimethylformamid, dimethylacetr 20 amid, pyridin, dichlormethan, dichlorethan, chloroform, acetonitril eller lignende. Anvendelse af et syrebindende middel, f.eks. triethylamin, dimethylanilin eller pyridin, er undertiden tilrådelig.

Når 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre omsæt-25 tes direkte uden omdannelse til et reaktivt mellemprodukt deraf, udføres omsætningen fortrinsvis i nærværelse af et kondensationsmiddel, f.eks. carbodiimid, såsom di-cyclohexylcarbodiimid eller l-ethyl-3-(3'-dimethylamino-propyDcarbodiimid-hydrochlorid, svovlsyre—*borsyre, car-30 bodiimidazol, sulfodiimidazol eller en Lewis-syre, såsom phosphoroxychlorid eller bortrifluorid. Omsætningen udføres med et opløsningsmiddel, f.eks. toluen, xylen eller dimethylformamid, et opløsningsmiddel som nævnt ovenfor, eller blandinger heraf, ved en temperatur på 35 fra stuetemperatur til opløsningsmidlets kogepunkt.

De forbindelser med formlen I, hvori R3 betegner et hydrogenatom,kan derpå fremstilles ved hydrogenering eller hydrolyse som beskrevet nedenfor under fremgangs-

DK 163580 B

4 måde (2).

Forbindelser med formlen IV

HN /-\ Λ-^ n000^

^c-nhch2- / \-C00-^ IV

hvori R^ og n har de ovennævnte betydninger, kan også

fremstilles ved fremgangsmåde (2) ifølge opfindelsen ved, at man omsætter forbindelserne med formlen V

10 HN /-. ,-- (CH9) C00H

N\:-nhch2- -coo- ^ v

hvori n har den ovennævnte betydning, eller et reaktivt 15 derivat heraf, med en forbindelse med formlen VI

R3r - OH VI

hvori R3r har den ovennævnte betydning.

Omsætningen udføres ved at gå frem på samme måde 20: som ved den ovennævnte esterificering.

De forbindelser med formlen I, hvori R^ betegner et hydrogenatom,kan fremstilles ved hydrogenering af de forbindelser med formlen iv, hvori R^'betegner en benzyl-; eller anisylgruppe, i nærværelse af en katalysator, f.

25; eks. palladium. Disse forbindelser kan også fremstilles ! ved hydrolyse af de forbindelser med formlen IV, hvori R^1 : betegner en butyl- eller lavere alkoxycarbonylmethyl- gruppe, i nærværelse af en katalysator, f.eks. trifluor-j eddikesyre eller saltsyre-eddikesyre.

30 De således opnåede forbindelser med formlen I iso leres derefter ved konventionelle metoder.

Der kan benyttes en række hensigtsmæssige udførelsesformer for fremgangsmåden ifølge opfindelsen som angivet i krav 2-7.

35 : Sædvanligvis er det bedst at udvinde de omhandle de forbindelser i form af deres syreadditionssalte som ,nævnt ovenfor.

Forbindelserne med formlen I kan indeholde kry-•stalvand i ækvimolære mængder.

DK 163580 B

5

De således opnåede forbindelser med formlen I har et fortrinligt farmaceutisk virkningsområde. De omhandlede forbindelser udviser således fortrinlige inhibito-riske virkninger på protease, såsom trypsin, chymotryp-5 sin, thrombin eller urokinase. De omhandlede forbindelser udviser også fortrinlige antiulcusvirkninger. De kan således anvendes som et fortrinligt forebyggende middel eller til heling af ulcusmodeller hos rotter, såsom Shay-ulcera, stress-ulcera, indomethacin-ulcera, eddikesyre-10 inducerede ulcera, cysteamin-ulcera eller histamin-ulce-ra.

Disse forbindelser viste sig i stærk grad at undertrykke mavesekretionens rumfang, mavesafternes acidi-tet og den peptiske aktivitet. Desuden viser disse virk-15 ninger sig at være ganske langvarige. Prøver for akut og subakut toksicitet bekræftede, at de omhandlede forbindelser har en lav toksicitetsgrad. Navnlig udviser forbindelserne med formlen II fortrinlige antiulcusvirkninger og viser sig at være bemærkelsesværdigt sikre.

20 De omhandlede forbindelser udviser desuden anti- ihistaminvirkninger, antiinflammatoriske virkninger og !antiallergiske virkninger (passiv cutan anaphylaxiprøve).

Fra US-patentskrift nr. 4.147.876 er det kendt, at den med de omhandlede forbindelser beslægtede forbin-25 delse 4'-(2"-hydroxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-amino-methylcyclohexancarboxylat (hvis hydrochlorid er den nedenfor som forbindelse A betegnede sammenligningsforbindelse) har antiplasmin-aktivitet og antiulcusvirkning.

Som det vil ses af forsøgsresultaterne i nedenstående 30 tabeller 1, 2 og 3 er de omhandlede forbindelser imidlertid forbindelse A overlegne med hensyn til inhibito-risk virkning på protease (antiplasmin-aktivitet) og antiulcusvirkning.

Tranexamsyre (trans-4-aminomethylcyclohexancar-35 boxy1syre) er et cyclohexancarboxylsyrederivat og vides at have fortrinlige antiplasminvirkninger. Esterne af tranexamsyre vides også at have fortrinlige antiplasminvirkninger (A. Okano et al., J. Med. Chem.yVol. 15, nr.

DK 163580B

6 3, side 247-255 (1972)). Det rapporteredes imidlertid (ibid.), at 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre, der er en med de her omhandlede forbindelser nært beslægtet forbindelse, kun udviste en ringe antiplasminvirk-5 ning, nemlig en virkning på mindre end 0,04 gange anti-plasminvirkningen af tranexamsyre, medens den heri som forbindelse A betegnede forbindelse rapporteredes (ibid.) at have en antiplasminvirkning på 47,3 gange virkningen af tranexamsyre. På denne baggrund er det 10 overraskende, at de her omhandlede forbindelser har de kraftige, i nedenstående tabel 1 anførte inhibitoriske virkninger på protease.

Forbindelserne med formlen I har fortrinlige inhi-bitoriske virkninger på protease. De inhibitoriske virk-15 ninger bestemtes ved følgende metoder: 1) Inhibitoriske virkninger på trypsin:

Inhibitoriske virkninger af forbindelserne på trypsin bestemtes efter den metode, der er beskrevet af :M. Muramatsu et al. (The Journal of Biochemistry, Vol.

20; ; 58, 214 (1965)). Navnlig undersøgtes de inhibitoriske ! virkninger af forbindelserne på hydrolysen af p-tosyl- argininmethylester ved indvirkning af trypsin (inkuba-! tion ved 37°C i 10 minutter).

2) Inhibitoriske virkninger på chymotrypsin:

Inhibitoriske virkninger af forbindelserne på chymotrypsin bestemtes efter den metode, der er beskrevet af M. Muramatsu (The Journal of Biochemistry, Vol.

62 (4), 408 (1967)). Navnlig undersøgtes de inhibitori-^ ske virkninger af forbindelserne på hydrolysen af N-ace-tyl-L-tyrosinethylester ved indvirkning af chymotrypsin (inkubation ved 37°C i 10 minutter.

3) Inhibitoriske virkninger på thrombin:

Inhibitoriske virkninger af forbindelserne på 35 thrombin bestemtes efter den metode, der er beskrevet af M. Muramatsu et al. (The Journal of Biochemistry, Vol.

65 (1), 17 (1969)). Navnlig undersøgtes de inhibitoriske virkninger af forbindelserne på hydrolysen af p-tosylar-gininmethylester ved indvirkning af thrombin (inkubation

DK 163580 B

7 ved 37°C i 10 minutter.

4) Inhibitoriske virkninger på urokinase:

Inhibitoriske virkninger af'forbindelserne på urokinase bestemtes efter den metode, der er beskrevet af 5 A.J.Joeson et al. (Throm. Diath. Haemorrh. 21, 259-272 (1969)). Navnlig bestemtes de inhibitoriske virkninger af forbindelserne på hydrolysen af N-acetylglycyllysin-methylester ved indvirkning af urokinase (inkubation ved 37°C i 10 minutter).

10 De opnåede resultater er anført i tabel 1.

Tabel 1

Inhibitoriske virkninger på protease Inhibition (%) 15 Prøveforbindelse -

Trypsin Chymotrypsin Thrombin Urokinase

Forbindelse 1 79 100 37 32

Forbindelse 2 61 100 51 72

Forbindelse 3 42 48 30 52 20 Forbindelse 4 22 28 35 84

Forbindelse 5 38 90 34 35

Forbindelse 6 25 70 39 50

Forbindelse 7 23 70 32 67

Forbindelse 8 51 20 43 55 25 Forbindelse 9 28 60 29 50

Forbindelse A 65 0 30 32

Forbindelse 1: 2'-benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guani-dinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlo-30 rid,

Forbindelse 2: 2'-methoxy-4'-formylphenyl-trans-4-guani-dinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlo-rid,

Forbindelse 3: phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexan-35 carboxylat-hydrochlorid,

Forbindelse 4: 2'-ethoxyphenyl-trans-4-guanidinomethyl-cyclohexancarboxylat-hydrochlorid, 8

DK 163580 B

Forbindelse 5: 2'-phenoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidi-nomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid, Forbindelse 6: 4'-ethoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidi-nomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid, 5 Forbindelse 7: 3 '-pyridyl-trans-4-guanidinomethylcyclo- hexancarboxylat-hydrochlorid,

Forbindelse 8: 4(2"-ethoxycarbonylethyl)phenyl-trans- 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hy-drochlorid, 1 o Forbindelse 9: 2'-ethoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidi- nomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid, Forbindelse A: 4'—(2"-hydroxycarbonylethyl)phenyl-trans- 4-aminomethylcyclohexancarboxylat-hydro-chlorid 15 (beskrevet i J. Med. Chem., Vol. 15, nr.

3, 247 (1972)).

1. Shay-ulcera.-

Hanrotter af Sprague-Dawley-stammen og af en vægt på 160-180 g blev unddraget føde, men havde fri adgang 20 til vand i 20 timer forud for forsøget. Under etherbedø-velse blev der gjort indsnit i abdomen, og pylorus under-: bandtes som beskrevet af Shay et al. (Gastroenterology, ! 5, 43 (1945)).

Rotterne blev aflivet 18 timer senere med en .

25 i overdosis af ether, og maverne fjernedes. Der blev gjort i indsnit i maven langs den store krumning, og overflade-j arealet af hver læsion i formaven måltes med det ubevæb-! nede øje.læsionerne gradueredes arbitrært i.6 grader scm et : ulcusindex efter den metode, der er angivet af Adami et al. (Arch. int. Pharmacodyn., 147, 113-145 (1964)) som følger: 0 = ingen læsion 1 = hæmorrhagisk suffusion 2 = 1-5 små ulcera (< 3 mm) 35 3 = mange små ulcera (mere end 5) eller 1 ulcus af betydelig størrelse 4 = mange ulcera af betydelig størrelse 5 = perforeret ulcus.

9

DK 163580 B

De aktive prøveforbindelser blev indgivet intra-peritonealt, umiddelbart efter pylorus-underbinding.

De opnåede resultater er anført i tabel 2.

c Tabel 2

O

Shay-ulcera

Prøve- Dosis Ulcusgrad forbindelser (mg/kg) - Total ___0 1 2 3 4 5__ 10 Kontrol — 0 1 0 2 2 5 10

Forbindelse 1 300 700000 7

Forbindelse 1 150 {10 00000 10

Forbindelse 1 75 ‘802000 10

Forbindelse 3 400 :11 4 5 0 0 0 20 15 Forbindelse 8j 200 :422110 10

Forbindelse BJ 12,5 i 2 1 0 1 3 3 10

Forbindelse A 300 6 0 0 1 2 1 10

Forbindelse A 150 2 0 3 1 4 0 10

Forbindelse B: atropinsulfat, 20

Forbindelse 1, forbindelse 3, forbindelse 8 og forbindelse A er de samme som defineret ovenfor. 1

Eddikesyre-ulcera.

Der anvendtes hanrotter af Sprague-Dawley-stammen 25 og af en vægt på ca. 200 g. Under etherbedøvelse injiceredes der forsigtigt 10% eddikesyreopløsning (0,05 ml) mellem den serøse membran og musklen nær pyrorus, og abdomen lukkedes. Derefter holdtes dyrene under betingelser og fik administreret 1 ml/100 g af hver prøveforbin-30 delse opløst eller suspenderet i 0,5% carboxymethylcellu-loseopløsning p.o. dagligt i 10 dage startende fra dagen efter operationen. På den ellevte dag blev rotterne aflivet under etherbedøvelse, og maverne fjernedes. Ul-cusarealet måltes og gradueredes i 5 grader som et ulcus-35 index efter <føigende metode:

DK 163580 B

10

Ulcusindex Ulcusarealet 1 0-10 mm1 2 11-20 mm1 3 21-30 mm1 5 4 31 - 40 mm1 2 5 >40 mm

De opnåede resultater er anført i tabel 3.

Tabel 3 10 Eddikesyre-ulcera.

Prøve- Dosis Ulcusgrad forbindelser (mg/kg) -j-sj-3-4-s~ Total

Kontrol — 0 0 3 3 7 13

Forbindelse 1 500 16 2 0 0 0 18

Forbindelse 1 250 14 1 1 0 0 16

Forbindelse 1 125 15 1 2 0 0 18

Forbindelse 2 500 12 3 2 0 1 18

Forbindelse 2 250 14 0 3 1 0 18 2Q Forbindelse 2 125 91221 15

Forbindelse 8 300 43100 8

Forbindelse 9 500 12 2 1 0 0 15

Forbindelse 9 250 11 2 1 0 0 14

Forbindelse 9 125 11 '3 1 1 1 17 25 Forbindelse 10 500 4 3 1 0 0 8

Forbindelse 10 300 42102 9

Forbindelse A 500 76101 15

Forbindelse A 300 22211 8

Forbindelse A 250 48320 17 30

Forbindelse 10: 2,-hydroxycarbonylpheny‘l-trans-4-guanidi-nomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid, Forbindelse 1/ forbindelse 2, forbindelse 8, forbindelse 9 og forbindelse A er de samme som defineret ovenfor.

35 3. Duodenal-ulcera (cysteamin-induceret).

Hunrotter af Sprague-Dawley-stammen og af en vægt på ca. 200 g blev unddraget føde i 24 timer før forsøget.

400 mg/kg cysteamin blev subcutant indgivet rotterne én gang. Dyrene fik føde ad libitum fra 7 timer senere. Prø 1i

DK 163580 B

veforbindelsen blev indgivet oralt som vandig suspension 7 timer efter administreringen af cysteamin og derefter dagligt i 4 dage. Morgenen efter den sidste administrering blev dyrene aflivet under etherbedøvelse. Ulcusare-2 5 alet (mm ) måltes og anførtes som ulcusindex.

De opnåede resultater er anført i tabel 4.

Tabel 4

Cysteamin-inducerede ulcera.

10 ·_

Prøve- Dosis Antal Ulcusindex Inhibition forbindelser (mg/kg) rotter ((mnr) (%)

Kontrol — 7 80,7+4,3

Forbindelse 1 500 6 11,7+3,6 85,5 15 Forbindelse 1 250 6 22,5+3,9 72,1

Forbindelse 1 er den samme som defineret ovenfor.

4. Indvirkningen på mavesekretionen.

Hanrotter af Sprague-Dawley-stammen og af en vægt 20 på 160-180 g blev unddraget føde, men havde fri adgang til vand i 20 timer forud for forsøget. Under etherbedøvelse blev der gjort indsnit i abdomen, og pyrolus underbandtes som beskrevet af Shay et al. (Gastroenterology/ 5, 43 (1945)). Prøveforbindelsen blev indgivet in-25 traperitonealt umiddelbart efter pylorusunderbindingen. Rotterne blev aflivet 3, 6 og 12 timer senere, og maverne fjernedes. Mavesaften opsamledes og analyseredes med hensyn til rumfang. Derefter centrifugeredes mavesaften ved 1300 g i 10 minutter ved stuetemperatur til opnåelse 30 af den overliggende væske. Den overliggende væskes totale aciditet og peptiske aktivitet bestemtes. Den totale aciditet bestemtes ved titrering med 0,01 N NaOH. Den peptiske aktivitet bestemtes efter den fremgangsmåde, der er beskrevet af Anson et al. (J. Gen. Physiol., 22, 35 79-89 (1938)). Resultaterne er anført i tabellerne 5-7.

Den totale aciditet er anført som titreringsrumfanget (ml), og den peptiske aktivitet er anført som den tilsvarende vægtmængde (mg) af krystallinsk pepsin.

DK 163580 B

12 ft tn O G •H *rl hil h m σι r- Ή ud -tf m π5^4>ΰ - ' ' ' ' - ' ,q 3 β I ^ in H ro id ro in hfl S icor-' *tf 'tf io

O O I

P P dP

•P ft____

•W

Eh ,ρ σιιοΓ^ίπσιοοιΠΓΟ

0 *5 OOOrHOOOCM

mg +1+1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 nw οοο’ίΓ'ηΗΐοβ

tnoHinrorotnoD

tn £3 G

O -Η χφΗίΠΙΟιΗΓΊσι

•HP

p+’b i f co n Μ n in m Ό ft M G I σι co m r- Γ'- σι •'tf

Η Λ ft B

O

JG Q)0 dg__

Ό P P

fi+Jft lororoior^tnovo

•Η ·Η O

O E-l P omrOrHr'H'tfCN

> 5* ^ Η Η «Η H

td 01 ft1 +1+1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 g "W iDiococNi^cNor^ 3.

"-r CO ro ri IN ”tf (D i--- > ft) *©. ft 5-i -π co σ> to ιο Γ" id ro p, }_| V·.·.·.».··».

Ό i cn m o co H r- o in p O' ft i oo r~ i—i m m rj r—i O ft 83 ·

rH -P (O

O «Η IH t#> JG O g -- · " 1 ------ nj 3 NNntfNOCO'tf E-I P P3

<D H . OOOOOOOO

g g +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1

-H minncocNtfrlcN

___CN_ O O m r-t I—1 ro of p

H O ns 4J P -P

30 inininmininmin

<P

_ c λ Ί &»

tn M lo -H

•H \ * ^ cn tn οοιλμοοιλΦ

Og i o m h o m r-· g q 'χ' i ro H ro Η -η ··

p rHrHrHPOUUUU

(U

in 00)0)0)0)0)0 o

ι-l [Il Dl 01 Dl Dl D) 10 O

Q) H i—1 r—1 H i—1 i—1 i—1 H

Ό (1)0)0)0000 O

13 H'COfaOrO'C5,ft,5 O-H Oftftftft Cftft p

£* ,Ο Μ ·Η ·Η -Η iH ·Η -H -H

«ιΜ +1ΛΛΛΛΛΛΧ1 -P

p O ftPPPPPPP % (li (p OOOOOOOO o

Js^pulxlftftlfplxlft ft

DK 163580 B

13 ti Cn o c

Η H

S-ι P 34 σι <o m ro o co o ti X Π i v v > - - - - A ti G n in in in σι m o M'dW co o- ro m m H ro

0) O

+) o____— •HC sfTi'Hoyor^csin E4 h

tø ^ rOHHCOHHCNH

o. S' +1+1 +i +i + +* +' +* ø B ('ΐΛΐ'-σίΓ-σιΓ-^οι O'·" - - v. ^ ^ · Ηη'ίΟΟίΚΜ'Λ

C4 H HH

tn - ti ti O +1 Η 34 i£> o π H m ro ί-ι-Ρ^ i «· * * - - *· T3 nj X ti h cn in oo ro 04 i—j tQ o jy coo'fotnoooj'd* o >4 ό x a 0 ______ H3 ΜΗ in^-ftoonm^1 0 4j o Η Η Φ i-oct>hovdoo CD E-ι 5-J (ocO'tfiomcNr-ro > > +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 + <0 &D3 oi'frtiscoiotflfo S W - ti- ποιησιΗΐηοο ·

co h o in i— »a· m cn H

Λ ro CN I—I CM CN O

© i................ - ----- Th 4 I %

o. o <3· ^ H r- \o ro in O

rrt I * ^^ ·**“**“ "* uajj CncJ m m h in m η σι -p C g r-r-ninvorNoi g H -P flJ ni 0) 44 +1 _dP__ g *9 ® § vococovo^or-mm -h

ti li pi .—- ******** *P

H0J H- OOOOOOOO © g g +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +' *0 5 ^r-jintncNO'Hooro

r, K»,«wV%>S,k*' H

ri* —1- w

p S

HQ) g $ $ inininminininn © CO ® *4 54 O)

__ V

c: n »5 “i ® gg SSS3SSS “ q «Β ΓΟΗ (OH g1 --- - ffl u h m u S 0) 0) 03 ^ η ω ω ω « η η η α> ® φ © ω °ϊ 1 δ Η *0 Τ3 Ό τί «Η Ο C C C 0) Ρ ·Η -Η ^ •£2 -Ρ Λ · Λ Λ ζ ΡΟ C 34 34 34 ·Η η! (2 Ο Ο 0 0 Λ ^ Μ 1¾ PM g

Cm

DK 163580 B

14 C 0»

O C

•Η Ή σι ίο σι o o o σι Q3C I * w urrt « LD 00 CM Η H CJ1 O _

So™ r- m m -m1 cm cm

U 5) OP

4J ft---ry,-

Tj S CO ^ CN| 'iD ^ o vo

g Cl OicMM-ODHCMCM M

g j? +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 ™ 5 oOOnCNCM(MO\ ω^^Γ'^^Γίιη __iniHCMCMCQCO-M’M' O' ” 3

C C 0 -H

"Ί-Β in co <σι co cm n i—i 5) -Ρ Ό i .. _ ^ ^ ^ ~ ^ 5 51¾ S 00 Ν Η Τ > Ν ΟΙ Ή +3 Ρ η id in m cm cm cm ΟΡΌ Λ Φ 0._όΡ______ 'SHB οσιηιηο C -Ρ Ρ .. «- ‘.'^τΓ'ΟΟ -Η -Η φ ο W ΟΙ ΙΟ 05 »· - »> dl Β ^ οΌΓ'ητΗΐΜΜ > 5? c η tri cn cm in

« ® +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 B

«2 W iD^COVOrrtOOVO 0

C- < K K. k. K ^ K IW

v οω^'ΦΓ'Γ^οονο G

*-*· rMincoo^Hdro'q' Φ (1) -.. r- - _- m cm fo on id in m r- >

> O’ O

•Θ- G

5-) -Η oocninorovarH -P

Dj U i 05 Ό η n i—ι ο σ> οί h 5-) 54 O' G [s m ίο ί η ο H Φ

Φ G « G

H +> d -H

Φ IH 1)-) dP ___m ,q Q) g--ao id σϊ "h "5* ^ rti σι Φ rt 3- - - v » * * ~ - T3 E-ι U Pi — t—ioocmoooo 0) Η. -Η +1 +1 +l -H +1 +1 +1 £

g £ iniOCOCMi—iCMLOO O

•H w CO

H mmioincoooostM

η _η Φ

CM I

~ u ' «

H Φ tO

fij -P

+)+) inininminininm <D

CO Ό < u u . ........—— > Φ

Ο» in U

U) ,¾ - -rt \ ο o m cm ο o in O*

wo» o in r- η o m γ- O

Og η η η η Q — « ________ ^e^mm^«Μ . Si ι—ι η Ο ή +| 0) Q) Ο) CD Φ to WWW w 1-4 Η i—1 Η r-j 0 Q) Φ Φ Φ Ό Η Ό t) Ό 'Ο

IC Ο C C C G

φ -Η 54 ·Η Ή ·Η -Η > Λ -Ρ Ά Λ Λ Λ S- 5) G Ρ U U Μ 54 0 0 0 0 0 Ο CU <+) W En Iχ) Εο fø

DK 163580 B

15

Toksiciteten af en typisk forbindelse blandt de omhandlede forbindelser er beskrevet i det følgende: 1. Akut toksicitet.

Der anvendtes normale mus af ICR-stammen (hanmus: 5 25 - 27 g, hunmus: 22 - 24 g). Prøveforbindelserne blev indgivet oralt under anvendelse af en mavesonde. Dyrene observeredes i 7 dage. LD50-værdien beregnedes ved pro-bit-metoden (C.I.Bliss). De opnåede resultater er anført i tabel 8.

10 Tabel 8

Prøveforbindelse LD50(mg/kg)

Hanmus Hunmus

Forbindelse 1 > 8000 7600

Forbindelse 1 er den samme som defineret ovenfor.

15 2. Subakut toksicitet.

Der anvendtes rotter af Sprague-Dawley-stammen af en vægt på ca. 150 g. Dosen administreredes én gang om dagen i 1 måned. Doseringerne fastsattes på 4 niveauer: 40 mg/kg, 130 mg/kg, 400 mg/kg og 1300 mg/kg af 2'-20 benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid. Følgende punkter observere des.

1) Observeringer af generelle symptomer, legemsvægt, fødeindtagelse og vandindtagelse.

25 2) Hematologiske undersøgelser.

3) Serum-biokemiske undersøgelser.

4) Organvægt.

5) Histopathologiske undersøgelser.

Som resultat døde kun 4 rotter ved den højeste ’ 30 dosis (1300 mg/kg), men der observeredes ikke toksiske læsioner ved de andre doser.

Visse forbindelser med formlen I udviser antihistaminvirkninger. F.eks. hæmmede 1-5 yg phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid fuld-35 stændig den med 10 ^ g/ml histamin-dihydrochlorid frem-

DK 163580B

16 kaldte kontraktion af ileum hos et marsvin. 50 yg phenyl- trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydro-chlorid hæmmede fuldstændigt kontraktionen af ileum hos et marsvin/ der var sensibiliseret med ægalbumin, når 5 forbindelsen blev indgivet med 250 yg/ml ægalbumin som antigen. Endvidere hæmmede phenyl-trans-4-guanidinome-thylcyclohexancarboxylat carrageenin-induceret inflammation (rotter af Wister-stammen/ I.P., ED50 = ca. 200 mg/ kg). Når forbindelserne fremstillet ved fremgangsmåden 10 ifølge opfindelsen anvendes son antiulcusmidler/ foretrækkes navnlig forbindelserne med formlen II. Disse forbindelser udviser både orale og parenterale virkninger, men den orale administreringsmåde vil selvsagt være den foretrukne. Oral administrering kan foretages ved hjælp af kapsler, tab-15 letter, pulvere eller granulater. I doseringsformen er de aktive forbindelser blandet med mindst ét indifferent fortyndingsmiddel, såsom lactose, majsstivelse eller krystallinsk cellulose, et smøremiddel, såsom magnesium-stearat, et bindemiddel, såsom hydroxypropylcellose, 20 et farvestof, et duftstof, et sødemiddel eller lignende.

Doseringerne af de omhandlede forbindelser i forskellige faktisk anvendte præparater kan varieres. Det er imidlertid nødvendigt, at mængden af forbindelserne er sådan, at der opnås to passende doseringsformer. En-25 hver valgt dosis afhænger af den ønskede terapeutiske virkning, administreringsvejen og behandlingens varighed. Sådanne doser ligger almindeligvis i området fra 50 til 1500 mg/dag.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere 30 ved hjælp af de efterfølgende eksempler 1-16, 20-22, ; 25-33, 37, 40-44 og 47-51.

Eksempel 1

Vitamin-E-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-35; hydrochlorid.

j En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- I xancarboxylsyre-hydrochlorid (11,8 g), vitamin E (17,2 I g) og dicyclohexylcarbodiimid (12,4 g) i pyridin (150 ml) 1 omrørtes ved stuetemperatur i 30 timer. Efter fjernelse

DK 163580 B

17 af uopløselige materialer ved filtrering inddampedes filtratet til tørhed, og det tilbageværende faste stof behandledes med en blanding af 0,1 N saltsyre (200 ml) og ethylacetat (100 ml) i 1 time. De uopløselige materi-5 aler fjernedes. Det organiske lag filtreredes og-koncen-treredes ved filtrering, og desuden tilsattes der ether til opnåelse af et lysegult krystallinsk stof, vitamin-E-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlo-rid (16,1 g, 62,1%), smp. 183-186°C, IR: v a (cm"1) 1740 1ΩΗΧ 10 (C=0).

Analyse:fundet: C 70,62, H 10,45, N 6,29

Beregnet for c38H65N303’HCl: C 70,39, H 10,26, N 6,48.

0,1 mM af denne forbindelse undertrykker ca. 50% af den af thrombin og trypsin udøvede hydrolytiske aktivitet.

15 Eksempel 2 4 ’- (2"-Benzyloxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (7,1 g), benzyl-4-hydroxy-20 phenylpropionat (8,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (7,2 g) i pyridin (75 ml) omrørtes ved 25°C i 15 timer. Efter fjernelse af uopløselige materialer ved filtrering koncentrer edes filtratet under formindsket tryk. Remanensen behandledes med en blanding af 0,1 N saltsyre (100 ml) 25 og ethylacetat (50 ml), og det dannede faste stof fjernedes ved filtrering. Det organiske lag filtreredes og koncentreredes, og det tilbageværende gummiagtige materiale behandledes med ether og omrørtes til opnåelse af hvide krystaller, som ved omkrystallisation af methanol-30 ether gav 4(2"-benzyloxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (13,1 g, 92,1%), smp. 77-80°C.

IR: (cm-1) 1745, 1725 (C=0).

IuaX

Analyse:fundet: C 62,98, H 6,65, N 9,04 35 Beregnet for C25H31N304-HCl: C 63,55, H 6,80, N 8,86.

DK 163580B

18

Eksempel 3 4'-(2"-Ethoxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-guanidinometh-ylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-5 xancarboxylsyre-hydrochlorid (11,8 g), ethyl-4-hydroxy-phenylpropionat (10,7 g) og dicyclohexylcarbodiimid (11,4 g) i pyridin (150 ml) omrørtes ved 25°C i 15 timer. Efter fjernelse af uopløselige materialer ved filtrering inddampedes filtratet. Remanensen behandledes med 1 N 10 saltsyre (150 ml), de opnåede krystaller fjernedes ved filtrering, og filtratet vaskedes med ether. Det vandige lag koncentreredes, og remanensen behandledes med ether til opnåelse af hvide krystaller, som ved omkrystallisation af ethanol/ether gav 4' -(2"-ethoxycarbonylethyl)phe-15 nyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydro-chlorid (17,9 g, 86,9%), smp. 90-91°C.

IR: '’„»„(c»"1) 1725, 1740 (C=0).

Analyse:fundet: C 57,98, H 7,10, N 10,13

Beregnet for c2()H2gN304*HC1: C 58,32, H 7,34, N 10,24.

20 Eksempel 4

Phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hy-drochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (11,8 g), phenol (5,6 g) og 25 dicyclohexylcarbodiimid (12,4 g) i pyridin (75 ml) omrørtes natten over ved stuetemperatur. Efter afdampning af opløsningsmidlet behandledes remanensen med 0,1 N saltsyre (200 ml), de uopløselige materialer fjernedes ved filtrering, og filtratet vaskedes med ethylacetat.

30 Det vandige lag koncentreredes til 100 ml, og de opnåede krystaller frafiltreredes og vaskedes med isopropyl-alkohol/isopropylether til opnåelse af phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (12,5 g, 80,2%), smp. 150-153°. Denne forbindelse omkry-35 stalliseredes af methanol til opnåelse af et hvidt krystallinsk produkt, phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid, smp. 159,5-161,5°C.

DK 163580 B

19 IR: Vmax(cm~1) 1750 (^=0),1620-1680 (C=N).

Analyse;fundet: C 57,49, H 1,25, N 13,27

Beregnet for C15H21N302*HC1: C 57,78, H 7,11, N 13,48.

Eksempel 5 5 4'- (2"-Carboxyethyl)phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid:

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (11,8 g), benzyl-4-hydroxy-phenylpropionat (15,4 g) og dicyclohexylcarbodiimid 10 (14,4 g) i pyridin (80 ml) omrørtes natten over ved stuetemperatur. Efter afdampning af opløsningsmidlet behandledes remanensen med en blanding af 0,1 N saltsyre (200 ml) og ethylacetat (100 ml), det uopløselige materiale frafiltreredes, og det organiske lag fraskiltes. Ef-15 ter inddampning til tørhed tilsattes der methanol, eddikesyre og vand, hvorefter den opnåede klare opløsning hydrogeneredes over 10% Pd/C. Efter absorption af den teoretiske mængde hydrogen frafiltreredes katalysatoren. Filtratet koncentreredes til tørhed, og de opnåede kry-20 staller omkrystalliseredes af methanol/eddikesyre til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (14,3 g, 74,5%), smp. 295-296°C.

IR: (cm-1) 1750 (C=0), 1706(C*0), 1630-1680(C=N).

Analyse; fundet: C 55,98, H 6,51, N 10,72 25 Beregnet for ClgH25N304*HC1: C 56,32, H 6,83, N 10,95.

Eksempel 6 2'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-30 xancarboxylsyre-hydrochlorid (10,6 g), benzylsalicylat (11,4 g) og dicyclohexylcarbodiimid (11,3 g) i pyridin (100 ml) omrørtes ved 35-40°C i 15 timer. Efter fjernelse af uopløselige materialer afdampedes opløsningsmidlet. Remanensen behandledes med 0,1 N saltsyre (200 ml), og 35 de dannede krystaller opsamledes og ekstraheredes med methanol. Ekstrakten koncentreredes, og der tilsattes

DK 163580 B

20 vand/ og det fremkomne faste stof omkrystalliseredes af vandig acetone til opnåelse af 2'-benzyloxycarbonylphe-nyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydro-chlorid (17/9 g, 89/2%), smp. 70-72,5°C.

5 IR: (cm-1) 1730 (C=0).

IUciX

Analyse: fundet: C 61,38, H 6,38, N 9,19

Beregnet for C23H27N3°4*HC^: C 61,95, H 6,33, N 9,42.

Det opnåede produkt omkrystalliseredes af methanol/ether til opnåelse af et hvidt krystallinsk produkt, 2' -benzylo'xy-10 carbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy-lat-hydrochlorid, smp. 83°C.

Eksempel 7 21-Hydroxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

15 En opløsning af 21-benzyloxycarbonylphenyl-trans- 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (8,9 g) i eddikesyre (30 ml) og methanol (10 ml) hydrogeneredes over 10% Pd/C. Efter absorption af hydrogen (ca. 500 ml) frafiltreredes katalysatoren. Filtratet koncentrere-20 des til tørhed, og krystallerne, vaskedes med ether og omkrystalliseredes af ethanol/ether til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (6,5 g, 91,3%), smp. 166-168°C.

IR: v (cm-1) 1750, 1690(C=0). max 25 Analyse: fundet: C 53,85, H 6,05, N 11,42

Beregnet for C 54,01, H 6.,23, N-11,81.

Eksempel 8 21-Ethoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

30 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (7,1 g), ethylsalicylat (5,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (7,2 g) i pyridin (100 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 15 timer. Efter fjernelse af uopløselige materialer ved filtrering kon-35 centreredes opløsningen. Remansen behandledes med 0,1 N saltsyre (100 ml), yderligere uopløseligt materiale fra-

DK 163580B

21 filtreredes, og filtratet vaskedes med ether. Efter ind-dampning behandledes remanensen med ether og omrørtes, og det opnåede rå produkt omkrystalliseredes af ethanol/ ether til opnåelse af 2'-ethoxycarbonylphenyl-trans-4-5 guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.(8,4 g, 72,9%), smp. 110-111°C.

IR: vmay(cm"1) 1740 (C=0).

Analyse:fundet: C 55,97, H 6,72, N 10,54

Beregnet for *HC1: C 56,32, H 6,83, N 10,95.

10 Eksempel 9 21-Methoxy-4'-formylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (7,1 g), vanilin (5,0 g) og 15 dicyclohexylcarbodiimid (7,2 g) i pyridin (100 ml) om-rørtes ved 30°C i 15 timer. Efter fjernelse af det uopløselige materiale koncentreredes opløsningen. Remanensen behandledes med en blanding af 0,1 N saltsyre (100 ml) og ethylacetat (100 ml) og omrørtes i 1 time. Yderligere 20 uopløseligt materiale frafiltreredes, og det organiske lag fraskiltes. Efter inddampning til tørhed vaskedes det tilbageværende faste stof med ether og omkrystalliseredes af isopropylalkohol/ether til opnåelse af 2'-methoxy-4 '-formylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-25 oxylat-hydrochlorid (9,6 g, 86,5%), smp. 110-111°C.

IR: Vmax(cmrl) 1760 (C=0).

Analyse:fundet: C .54,74, H 6,66, N 11,22

Beregnet for ci7H23N3°4 *HC1: C 55,21, H 6,54, N 11,36.

Eksempel 10 30 2'-Phenoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (27,5 g), phenylsalicylat (25,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (26,5 g) i dimethyl-35 formamid (100 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 21 timer.

Til denne opløsning sattes der vand (150 ml) og koncen-

DK 163580B

22 treret saltsyre (120 ml), og det opnåede udfældede faste stof vaskedes med vand. Derefter behandledes det faste stof med methanol, og methanollaget inddampedes til tørhed og omdannedes til fast stof med ether til opnåelse af 5 21-phenoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid (34,1 g, 67,5%), smp. 157-162°C.

IR: v (cm_1) 1740, 1750 (C=0)

ITlclX

NMR: SCD30D

10 0,7-3,1 (m, 12H) 6.8- 8,1 (m, 9H).

Analyse:fundet: C 61,08, H 5,95, N 9,79

Beregnet for c22H25N304*HC1: C 61,18, H 6,07, N 9,73.

Eksempel 11 15 3'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

31-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinometh-ylcyclohexancarboxylsyre-hydrochlorid (109,8 g), benzyl- 3-hydroxybenzoat (106,3 g) og dicyclohexylcarbodiimid 20 (105,7 g) i pyridin (450 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 22 timer. Efter afdampning af pyridin tilsattes der vand (100 ml) og syrnedes med saltsyre. Den opnåede op-slemning behandledes i en centrifugalseparator. Det opnåede faste stof behandledes med methanol, og methanol-25 laget koncentreredes. Ved omkrystallisation af remanensen fra isopropylalkohol opnåedes der 3'-benzyloxycarbo-nylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (169,5 g, 81,6%), smp. 75-80°C.

IR: v (cm"1) 1725, 1755 (C=0) max

30 NMR: <$CD30D

0,8-3,2 (m, 12H) 5,3 (s, 2H) 6.9- 8,0 (m, 9H)

Analyse:fundet:. C 61,37, H 6,18, N 9,58 35 Beregnet for C23H2^N304*HC1: C 61,95, H 6,33, N 9,42.

DK 163580B

23

Eksempel 12 31-Hydroxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydroc hlorid.

3'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinometh-5 ylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (80 g) opløstes i en blanding af methanol (300 ml) og eddikesyre (300 ml) , og opløsningen hydrogeneredes over 10% Pd/C. Efter absorption af den teoretiske mængde hydrogen frafiltreredes katalysatoren. Filtratet koncentreredes til tørhed, og 10 de opnåede krystaller omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (56,8 g, 89,0%), smp. 197-200°C.

IR: (ατΓ1) 1700, 1740 (C=0)

IllaX

NMR: (SCD30D

15 0,8-3,2 (m, 12H) 7,0-8,0 (m, 4H)

Analyse:fundet: C 53,96, H 6,21, N 11,89

Beregnet for C16H21N304*HC1: C 54,01, H 6,23, N 11,81.

Eksempel 13 20 4' -Ethoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g) , ethyl-4-hydroxy-benzoat (25 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 -g) i py-25 ridin (350 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 17 timer.

Efter afdampning af pyridin sattes der vand (300 ml) til remanensen, og blandingen syrnedes med saltsyre. Det opnåede hvide faste stof opløstes i methanol, og uopløseligt materiale frafiltreredes. Methanollaget koncentre-30 redes, og ved omkrystallisation af remanensen af ethanol opnåedes der 4 '-ethoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (33,7 g, 58,5%), smp. 181-184°C.

IR: υ (cnT1) 1715, 1755 (C=0) ΙΠαΧ

35 NMR: åCD-jOD

0,6-3,1 (m,t,15H) 4,3 (q,2H)

DK 163580 B

24 7.1, 8,0 (d,d,4H)

Analyse: fundet: C 56,21, H 6,79, N 11,03

Beregnet for C^gl^N^O^·Η<31: C 56,32, H 6,83, N 10,95.

Eksempel 14 5 4'-Hydroxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid:

Ved at gå frem som i eksempel 12 og anvende 4‘-benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid (65 g) som udgangsmateriale 10 opnåedes der 4'-hydroxycarbonylphenyl-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (45,8 g, 88,3%), smp. 225,5-228,0°C.

IR: v (cm-1) 1750 (C=0)

IIlclX

NMR: fiDMSO-dg, D20 15 0,8-3,2 (m, 12H) 7.2, 8,0 (d,d, 4H)

Analyse: fundet: C 53,89, H 6,21, N 11,97

Beregnet for c16H21N304*HC1: C 54,01, H 6,23, N 11,81.

Eksempel 15 20 3'-Methoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), methyl-3-hydroxy-benzoat (22,8 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i 25 pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer.

Efter fjernelse af uopløseligt materiale og afdampning af pyridin syrnedes remanensen med koncentreret saltsyre og ekstraheredes med chloroform.Efter.koncentrering af chloroformlaget omkrystalliseredes det tilbageblevne fa-30 ste stof af acetone til opnåelse af 3'-methoxycarbonyl-phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hy-drochlorid (20,9 g, 37,7%), smp. 138-147°C..

IR: Vm fcirf1) 1705, 1745 (C=0) ΐΐιαΧ

NMR: 6CD3OD

35 0,8-3,2 (m, 12H) 3,9 (s, 3H)

DK 163580 B

25 7,0-8,1 (m, 12H).

Analyse: fundet: C 54,93, H 6,48, N 11,43

Beregnet for C17H23N3°4*HC1: C 55,21, H 6,51, N 11,36.

Eksempel 16 5 3'-Pyridyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-dihydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (47,1 g), 3-hydroxypyridin (19,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (45,4 g) i pyridin 10 (400 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Det op-samlede faste stof ekstraheredes med methanol, og metha-nollaget inddampedes til tørhed. Remanensen omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af 3'-pyridyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-dihydrochlorid (36,1 15 g, 57,7%), smp. 180-185°C.

IR: 1750 (OO)

NMR: 6CD3OD

0,7-3,1 (m, 12H) 7,6-8,6 (m, 3H) 20 Analyse: fundet: C 47,98, H 6,24, N 16,31

Beregnet for C]_4H20N4^2*^^: C 48,15, H 6,35, N 16,04.

Eksempel 17 Ø-Naphthyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

.25 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (47,1 g), 3-naphthol (28,8 g) og dicyclohexylcarbodiimid (45,4 g) i pyridin (400 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Efter afdampning af opløsningsmidlet sattes der vand (500 ml) til 30 remanensen, og blandingen syrnedes med saltsyre. De opnåede hvide krystaller opløstes i methanol (500 ml). Efter afdampning af methanolet.omkrystalliseredes remanensen af methanol til opnåelse af 3-naphthyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (49,1 35 g, 67,8%), smp. 195-202°C.

IR: (cm"1) 1750 (C=0)

IucLX

DK 163580 B

26 NMR: SDMSO-dg 0,8-3,1 (m, 12H) 6,9-8,2 (m, 7H)

Analyse: fundet: C 62,52, H 6,59, N 11,89 5 Beregnet for ci9H23N3°2*HC^: c 63,06, H 6,68, N 11,61.

Eksempel 18 a-Naphthyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat- hydrochlorid.

Ved at gå frem som i eksempel 17, men anvende a-10 naphthol (28,8 g) i stedet for β-naphthol som udgangsmateriale opnåedes der a-naphthyl-trans-4-guanidinomethyl-cyclohexancarboxylat-hydrochlorid (36,9 g, 51,0%), smp. 191-203°C.

IR: ^„(an"1) 1745 (C=0) max

15 NMR: SCDjOD

0,9-3,0 (m, 12H) 7,2-8,1 (m, 7H)

Analyse: fundet: C 62,71, H 6,62, N 11,83

Beregnet for C^g^gNgC^'HCl: C 63,06, H 6,68, N 11,61.

. 20 Eksempel 19 21-Formylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy-lat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (94,3 g), salicylaldehyd 25 (50 g) og dicyclohexylcarbodiimid (90,8 g) i pyridin (600 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 16 timer. Efter afdamp-, ning af pyridin sattes der vand (200 ml) til remanensen, og blandingen syrnedes med saltsyre. Det opnåede hvide faste stof frafiltreredes og ekstraheredes med methanol 30 (500 ml). Det uopløselige materiale fjernedes ved filtrering, og filtratet koncentreredes. Til remanensen sattes der acetone (200 ml), og det uopløselige materiale fjernedes ved filtrering. Filtratet koncentreredes. Remanensen krystalliseredes af vand til opnåelse af 2'-formyl-35 phenyl-trans-4-guahidinomethylcyclohexancarboxylat-hydro-chlorid (53,2 g, 39,1%), smp. 135-138°C.

DK 163580B

27 IR: Vmav(cm_1) 1740 (C“0) ΙΠαΧ

NMR: <5CD3OD

0/8-3,2 (m, 12H) 5,4 (s, IH) 5 6,8 (m, 4H)

Analyse: fundet: C 55,98, H 6,31, N 12,63

Beregnet for c16H21N303*HC1: C 56,55, H 6,53, N 12,37.

0,1 mM af denne forbindelse undertrykte 56% af den af urokinase udøvede hydrolytiske aktivitet.

10 Eksempel 20 21 -Methoxyphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (47,1 g), o-methoxyphenol 15 (24,8 g) og dicyclohexylcarbodiimid (45,4 g) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Efter fjernelse af uopløseligt materiale koncentreredes opløsningen til tørhed.

Til remanensen sattes vand (300 ml), og opløsningen syr-nedes med saltsyre. De opnåede krystaller frafiltrere-20 des og omkrystalliseredes af isopropylalkohol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (57,5 g, 84,1%), smp. 141-145°C.

IR’* vittax(cm"1) 1760 (C=0)

NMR: 6CD3OD

25 0,7-3,0 (m, 12H) 3,8 (s, 3H) 6,8-7,3 (m, 4H)

Analyse: fundet: C 56,18, H 7,01, N 12,31

Beregnet for ci6H26N3°3*HC1! C 56,22, H 7,08, N 12,29.

30 0,1 mM af denne forbindelse undertrykte 50% af den af urokinase udøvede hydrolytiske aktivitet.

Eksempel 21 4' -Methoxyphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

35 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (47 g), p-methoxyphenol (25

DK 163580 B

28 g) og dicyclohexylcarbodiimid (45 g) i dimethylformamid (200 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 23 timer. Til reaktionsblandingen sattes der vand (200 ml) , is (100 g) og koncentreret saltsyre (200 ml). De opnåede krystaller 5 frafiltreredes og vaskedes med vand og opløstes i methanol (300 ml). Det uopløselige materiale frafiltreredes, og filtratet koncentreredes til tørhed. Remanensen omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (29,2 g, 42,4%), smp. 203-10 205°C.

IR: v (cm-1) 1745 (C=0) max

NMR: 6CD3OD

0,7-3,1 (m, 12H) 3,8 (s, 3H) 15 7,0 (s, 4H)

Analyse: fundet: C 56,19, H 7,01, N 12,35

Beregnet for C^gl^N^C^'HCl: C 56,22, H 7,08, N 12,29.

0,1 mM af denne forbindelse undertrykker 52% af den af urokinase udøvede hydrolytiske aktivitet.

20 Eksempel 22 2' -Ethoxyphenyl- trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (70,7 g), o-ethoxyphenol 25 (41,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (68,1 g) i dimethylformamid (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer.

Til reaktionsblandingen sattes der vand (100 ml) og koncentreret saltsyre (350 ml). De opnåede krystaller fra-filtreredes og vaskedes med vand og opløstes i methanol 30 (300 ml). Detuopløselige materiale frafiltreredes, og filtratet koncentreredes til tørhed. Remanensen opløstes i acetone og behandledes med ether til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (65,0 g, 60,9%), smp. 144-148°C.

35 IR: (cm"1) 1750 (C=0) max

NMR: 6CD3OD

0,7-3,0 (m, t, 15H)

DK 163580B

29 4,0 (1, 2H) 6,7-7,2 (m, 4H)

Analyse: fundet: C 56,94, H 7,01, N 12,11

Beregnet for ^17^25^3^3*HC1: C 56,38, H 7,36, N 11,81.

5 Eksempel 23 2'-Acetylphenyl~trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy-lat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (34,7 g), o-hydroxyaceto-10 phenon (20,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (33,3 g) i pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer.

Efter fjernelse af uopløseligt materiale koncentreredes opløsningen til tørhed. Til remanensen sattes der vand (200 ml), og blandingen syrnedes med saltsyre og ekstra-15 heredes derpå med chloroform. Chloroformlaget koncentre-redes til tørhed, og remanensen omkrystalliseredes af isopropylalkohol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (22,7 g, 43,7%), smp. 159-166°C.

IR: vraaJcm"1) 1750 (OO) max

20 NMR: 6CD3OD

0,8-3,1 (m,s, 15H) 6,9-8,0 (m, 4H)

Analyse: fundet: C 57,47, H 6,78, N 12,03

Beregnet for ci7H23N3°3*H<^: C 57,70, H 6,84, N 11,88.

25 0,05 mM af denne forbindelse undertrykker 50% af den af chymotrypsin udøvede hydrolytiske aktivitet.

Eksempel 24 41-Acetylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

30 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), p-hydroxyaceto-phenon (20,4 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer.

Efter fjernelse af uopløseligt materiale koncentreredes 35 opløsningen til tørhed. Til remanensen sattes vand (300 ml), og blandingen syrnedes med saltsyre. De opnåede

DK 163580 B

30 krystaller frafiltreredes og omkrystalliseredes af ethanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (42,4 g, 80%), smp. 175-180°C.

IR: v a (cm'1) 1750 (C=0) max

5 NMR: 6CD3OD

0,7-3,1 (m,s, 15H) 7,2-8,0 (d,d, 4H)

Analyse: fundet: C 57,63, H 6,81, N 11,92

Beregnet for *HC1: C 57,70, H 6,84, N 11,88.

10 Eksempel 25 21-Phenylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), o-phenylphenol 15 (25,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Opløsningen koncentreredes til tørhed. Til remanensen sattes vand (300 ml), og opløsningen syrnedes med saltsyre og ekstraheredes derefter med chloroform. Chloroformlaget 20 vaskedes med vand og inddampedes til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (55,5 g, 94,6%), smp. 78-85°C.

IR: v (cm”1) 1750 (C=0)

IuciX

NMR: (SCD^OD

25 0,7-3,0 (m, 12H) 6,8-7,5 (m, 9H)

Analyse: fundet: C 64,69, H 6,49, N 11,04

Beregnet for C21H25N302*HC1: C 65,02, H 6,76, N 10,83.

Eksempel 26 30 4'-Phenylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (47,1 g), p-tphenylphenol (34,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (44,5 g) i dimethyl-35 formamid (250 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Efter fjernelse af uopløseligt materiale inddampedes op-

DK 163580 B

31 løsningen til tørhed. Til remanensen sattes vand (300 ml), og opløsningen syrnedes med saltsyre. De opsamlede dannede krystaller omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (47,9 5 g, 61,7%), smp. 185-196°C.

IR: v av(cm_1) 1750 (OO)

lUclX

NMR: 6CD3OD

0,8-3,1 (m, 12H) 6,9-7,8 (m, 9H) 10 Analyse: fundet: C 64,94, H 6,57, N 11,03

Beregnet for ·Ηα1; c 65,02, H 6,76, N 10,83·

Eksempel 27 4’-Phenoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

15 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (22,0 g), phenyl-4-hydroxy-benzoat (20,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (22,9 g) i pyridin (100 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 30 timer.

Efter afdampning af pyridin sattes der vand (300 ml) til 20 remanensen, og opløsningen syrnedes med saltsyre. Det opnåede faste stof ekstraheredes med methanol (500 ml).

Efter koncentrering af ekstrakten omkrystalliseredes remanensen af ethanol til opnåelse af 41-phenoxycarbonyl-phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydro-25 chlorid (21,5 g, 53,5%), smp. 166-170°C.

IR: v (cm-1) 1740, 1745 (C=0)

InaX

NMR: 6CD3OD

0,7-3,1 (m, 12H) 7,0-8,3 (m, 9H) 30 Analyse: fundet: C 61,09, H 6,12, N 9,78

Beregnet for C22H25N3°4*HC1: C 61,18, H 6,07, N 9,73.

Eksempel 28 3' -Anisyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

35 En suspension af 3'-carboxyphenyl-trans-4-guani- dinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (7,12 g), p-

DK 163580 B

32 anisalkohol (2,76 g) og dicyclohexylcarbodiimid (5,16 g) i pyridin (30 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 18 timer.

Til denne reaktionsblanding sattes vand (100 ml), og opløsningen syrnedes med saltsyre og omrørtes i 1 time. Det 5 opnåede faste stof ekstraheredes med methanol (50 ml).

Efter afdampning af methanolet omkrystalliseredes remanensen af vandigt methanol til opnåelse af 31-anisyloxy-carbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy-lat-hydrochlorid (8,4 g, 88,2%), smp. 90-93°C.

10 IR: V (cm-1) 1725, 1755 (C=0) ΙΠαΧ

NMR: 6CD3OD

0,8-3,2 (s, 12H) 3,8 (s, 3H) 5,3 (s, 2H) 15 6,9-8,0 (m, 8H)

Analyse: fundet: C 60,35, H 6,31, N 8,89

Beregnet for C24H29N3°5*HCl: C 60,56, H 6,35, N 8,83.

Eksempel 29 3'-Hydroxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-2 0 xancarboxylat-hydrochlorid.

Ved at gå frem som i eksempel 12, men anvende 3'-anisyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid (2,5 g) som udgangsmateriale, opnåedes der den i overskriften anførte forbindelse (1,5 25 g, 80,3%).

Eksempel 30 41-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-30 xancarboxylsyre-hydrochlorid (119,4 g), benzyl-4-hydro-xybenzoat (115,6 g) og dicyclohexylcarbodiimid (114,9 g) i dimethylformamid (430 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 20 timer. Til denne reaktionsblanding sattes der vand (1500 ml), og opløsningen syrnedes med saltsyre (500 ml).

35 Det opnåede faste stof ekstraheredes med methanol (500 ml). Efter fjernelse af uopløseligt materiale ved filtre-

DK 163580 B

33 ring koncentreredes filtratet, og remanensen omkrystal- liseredes af methanol/vand til opnåelse af 41-benzyloxy- carbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy- lat-hydrochlorid (148,5 g, 65,8%), smp. 134-138°C.

5 IR: v (cm-1) 1710, 1750 (C-0) max

NMR: SCDgOD

0,8-3,2 (m, 12H) 5,35 (s, 2H) 7,2-8,1 (d,d 4H) 10 7,4 (s, 5H)

Analyse: fundet: C 61,47, H 6,18, N 9,53

Beregnet for C23H27N304«HC1: C 61,95, H 6,33, N 9,42.

Eksempel 31 4' -Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-15 hexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af 4'-hydroxycarbonylphenyl-trans- 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (2,15 g), benzylalkohol (0,65 g) og l-ethyl-3-(3'-dimethylami-nopropyl)carbodiimid-hydrochlorid (1,39 g) i pyridin (10 20 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 30 timer. Til denne reaktionsblanding sattes vand (50 ml), og opløsningen syrnedes med saltsyre, og de opnåede krystaller frafil-treredes og omkrystalliseredes af methanol/vand til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (1,48 g, 25 55,3%).

Eksempel 32 2' -Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-30 xancarboxylsyre-hydrochlorid (5,89 g), benzylsalicylat (5,71 g) og l-ethyl-3- (3'-dimethylaminopropyDearbodi-imid-hydrochlorid (5,75 g) i pyridin (25 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Til denne reaktionsblanding sattes vand (50 ml), og opløsningen syrnedes med 35 saltsyre. Det opnåede faste stof frafiltreredes, vaskedes med vand og omkrystalliseredes af methanol/ether til

DK 163580B

34 opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (9,27 g, 83,2%).

Eksempel 33 3'-Methoxyphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-5 oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), m-methoxyphenol (18,6 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Efter 10 fjernelse af uopløseligt materiale syrnedes remanensen med saltsyre og ekstraheredes med chloroform. Efter koncentrering af chloroformlaget under formindsket tryk vaskedes remanensen med vand. Det opnåede faste stof fra-filtreredes og omkrystalliseredes af ethanol til opnåelse 15 af den i overskriften anførte forbindelse (28,4 g, 55,4%), smp. 125,5-131,5°C.

IR: v (cm-1) 1740 (C=0)

Iuci2£

NMR: 6CD3OD

1,0-3,1 (m, 12H) 20 3,8 (s, 3H) 6,6-7,45(m, 4H)

Eksempel 34 4' -Formylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxy-lat-hydrochlorid.

25 En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe- xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), p-hydroxybenzalde-hyd (18,3 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Efter afdampning af pyridin sattes der vand (100 ml) til 30 remanensen, og opløsningen syrnedes med saltsyre. Det opnåede faste stof frafiltreredes og ekstraheredes med methanol. Ekstrakten koncentreredes til tørhed, og remanensen omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (22,5 g, 44,2%), 35 smp. 157,5-163,5°C.

IR; v (cm-1) 1750 (C=0) max

DK 163580 B

35

NMR: 6CD3OD

0,9-3,1 (m, 12H) 7,25-7,95 (d,d,4H)

Eksempel 35 5 4'-Propionylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarb-oxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (35,4 g), p-hydroxypropio-phenon (22,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (34,0 g) i 10 pyridin (300 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer.

De opnåede krystaller frafiltreredes og ekstraheredes med methanol (500 ml). Ekstrakten inddampedes til tørhed, og remanensen omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (39,6 g, 15 71,8%), smp. 179-185°C.

IR: v (cm-1) 1750 (C=0)

IQaX

NMR: 6CD3OD

0,9-3,0 (m, 17H) 7,1-7,95 (d,d, 4H).

20 Eksempel 36 4'-Diphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-methansulfonat.

Ved at gå frem som i eksempel 26, men anvende trans - 4 -guanidinome thy 1 cy c 1 oh exancarboxy 1 syr e-me thansul -25 fonat (2,95 g) i stedet for trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylsyre-hydrochlorid, opnåedes der den i overskriften anførte forbindelse (3,2 g, 71,4%), smp. 207-210°C.

Eksempel 37 30 2 *-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-p-toluensulfonat.

Ved at gå frem som i eksempel 6, men anvende trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre-p-toluen-sulfonat (3,71 g) i stedet for trans-4-guanidinomethyl-35 cyclohexancarboxylsyre-hydrochlorid , opnåedes der den

DK 163580B

36 i overskriften anførte forbindelse (4,3 g, 13,9%), smp.

110-114°C.

IR: v (cm"1) 1735, 1760 (C=0) max

NMR: 6CD3OD

5 0,7-3,0 (m, s, 15H) 5,3 (s, 2H) 7,0-8,1 (m, 13H).

Eksempel 38 |3-Naphthyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-10 hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (1,8 g), β-naphthol (1,44 g), svovlsyre (0,05 g) og borsyre (0,03 g) i en blanding af dimethylsulfoxid (10 ml) og xylen (50 ml) opvarmedes un-15 der tilbagesvalingsbetingelser i 20 timer. Det opnåede vand fjernedes ved azeotrop destillation med xylen. Efter koncentrering af reaktionsblandingen chromatografere-des remanensen på en silicagelkolonne med chloroform/me-thanol som elueringsmiddel til opnåelse af den i over-20 skriften anførte forbindelse.

Eksempel 39 41-Diphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En blanding af trans-4-guanidinomethylcyclohexan-25 carboxylsyre-hydrochlorid (23,6 g), 4-hydroxybiphenyl (17,0 g) og phosphoroxychlorid (7,7 g) omrørtes ved 80-85°C i 2 timer. Efter tilsætning af toluen (50 ml) omrørtes blandingen ved 80-85°C i yderligere 2 timer. Opløsningsmidlet fjernedes ved dekantering, og der tilsat-30 tes vand. Opløsningen henstilledes natten over i køleskab, og de opnåede hvide krystaller romkrystalMseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (12,8 g, 61,3%).

DK 163580 B

37

Eksempel 40 41 -(2"-Benzyloxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af 4'- (2"-carboxyethyl)phenyl-trans-5 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (1,92 g) i thionylchlorid (10 ml) omrørtes ved 60°C i 1 time.

Efter afdampning af overskuddet af thionylchlorid opløstes remanensen i chloroform (15 ml). Den opnåede bleggule opløsning sattes ved stuetemperatur til en opløsning 10 af benzylalkohol (0,65 g) og triethylamin (0,51 g) i chloroform (5 ml). Efter omrøring ved 35-40°C i 5 timer afdampedes opløsningsmidlet, og remanensen omdannedes til fast stof med vand til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (1,4 g, 59,1%), 15 Eksempel 41 4 ’-(2"-Benzyloxycarbonylethyl)phenyl-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af 4'-(2"-carboxyethyl)phenyl-trans- 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (1,92 20 g) og benzylalkohol (5 ml) omrørtes ved 130-135°C i 10 timer. Efter afdampning af overskuddet af benzylalkohol omkrystalliseredes remanensen af methanol/ether til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (1,2 g, 50,6%).

25 Eksempel 42 3'-Methoxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid.

En suspension af 3*-carboxyphenyl-trans-4-guanidi-nomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (3,56 g) i 30 thionylchlorid (10 ml) tilbagesvaledes i 30 minutter.

Efter koncentrering af reaktionsblandingen opløstes remanensen i chloroform (10 ml), og til opløsningen sattes der methanol (5 ml) under afkøling. Efter omrøring i 30 minutter henstilledes opløsningen natten over i køleskab.

35 De opnåede krystaller frafiltreredes og vaskedes med en blanding af vand og acetone til opnåelse af den i over- 38 '

DK 163580 B

skriften anførte forbindelse (2,5 g, 67,6%).

Eksempel 43 2'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid-monohydrat.

5 2'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinometh- ylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid omkrystalliseredes af acetone/vand (85/15) og tørredes ved 40°C til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse, smp. 96-105°C.

10 NMR: 6pyridin-d 1,0-3,4 (m, 12H) 5,25 (s, 2H) 5,4 (s, 2H) 7,3-9,1 (m, 14H) 15 Analyse: fundet: C 59,61, H 6,57, N 9,18, Cl 7,67

Beregnet for *HC1 ϊ^Ο: C 59,54, H 6,52, N 9,06, Cl 7,64.

Vandbestemmelse (Karl Fischer):

Fundet: 3,98. Beregnet for ^23152-7^0^-HCl'I^O: 3,88.

20 Eksempel 44 4' -EthoxycarbonylmethyloxycarbonylphenyL-trans-4-guanidino-methylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En opløsning af trans-4-guanidinomethylcyclohexan-carboxylsyre-hydrochlorid (9,4.g), ethoxycarbonylmethyl-25 p-hydroxybenzoat (9,0 g) og dicyclohexylcarbodiimid (9,1 g) i dimethylformamid (50 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 24 timer. Uopløseligt materiale fjernedes ved filtrering, og filtratet inddampedes til tørhed. Til remanensen sattes vand, og opløsningen syrnedes med saltsyre 30 og ekstraheredes med chloroform. Ekstrakten inddampedes til tørhed. Remanensen omkrystalliseredes af methanol til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse (10,6 g, 60%), smp. 140-145°C).

IR: V (cm-1) 1735, 1745, 1760 (C=0) max

35 NMR: 6CD3OD

0,9 -3,1 (m,t, 15H)

DK 163580 B

39 4,25 (q, -. 15H) 4,9 (s, 2H) 7,25, 8,1 (d,d, 4H)

Eksempel 45 5 41 -Di'phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

En opløsning af trans-4-guanidinomethylcyclohexan-carboxylsyre-methansulfonat (1,0 g) og dimethylformamid (0,5 ml) i thionylchlorid (5 ml) opvarmedes ved 55-60°C 10 i 2,5 timer. Efter afkøling vaskedes reaktionsblandingen med petroleumsether og opløstes i chloroform. Den opnåede klare opløsning sattes til en opløsning af p-phenyl-phe-nol (0,69 g) i pyridin (5 ml), og blandingen omrørtes natten over ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen ind-15 dampedes, og til remanensen sattes vand. Opløsningen eks-traheredes med chloroform. Ekstrakten koncentreredes og chromatograferedes på en kolonne fyldt med silicagel under anvendelse af chloroform/methanol som elueringsmid-del. Det opnåede rå produkt behandledes derefter med 20 ether/methanol/6 N saltsyre til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

Eksempel 46 4-Diphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarbolylat- hydrochlorid.

25 En blanding af trans-4-guanidinomethylcyclohexan- carboxylsyre-hydrochlorid (1,0 g) og thionylchlorid (5 ml) tilbagesvaledes i 2 timer. Efter koncentrering sattes der chloroform (10 ml) til reaktionsblandingen. Den således opnåede opløsning sattes til en opløsning af p-30 phenylphenol (0,7 g) i pyridin (5 ml) og opvarmedes til 40-50°C i 2 timer. Til reaktionsblandingen sattes saltsyre, og den opnåede opløsning omrørtes og rensedes ved chromatografi til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

DK 163580 B

40

Eksempel 47 41 -Carboxymethylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexan-carboxylat-hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-5 xancarboxylsyre-hydrochlorid (10/64 g), benzyl-prhydro-xyphenylacetat (10,94 g) og dicyclohexylcarboxylimid (11,18 g) i pyridin (40 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 40 timer. Efter fjernelse af uopløseligt materiale ved filtrering koncentreredes filtratet, og der sattes vand 10 til remanensen. Opløsningen syrnedes med saltsyre til opnåelse af et bundfald, som opsamledes ved filtrering og ekstraheredes med methanol. Den opnåede ekstrakt inddampedes til tørhed i vakuum. Den olieagtige remanens opløstes i methanol-eddikesyre og hydrogeneredes over 15 Pd/C. Efter absorption af hydrogen fjernedes katalysatoren ved filtrering, og filtratet koncentreredes. Til remanensen sattes acetone til opnåelse af krystaller. Krystallerne opsamledes ved filtrering og omkrystalliseredes af ethanol til opnåelse af den i overskriften an-20 førte forbindelse (5,4 g, 32,4%), smp. 174-176,5°C.

IR: (cm”1) 1720, 1750 (OO)

IllciX

NMR: $CD3OD

0,9 -3,1 (m, 12H) 3,6 (3, 2H) 25 6,95-7,4 (m, 4H)

Eksempel 48 4'-(2"-Benzyloxycarbonyl)phenyl-trans-4-guanidinomethyl-cyclohexancarboxylat-hydrochlorid.

Ethylchlorformiat (0,65 g) sattes til en suspen-30 sion af 4'-(2"-carboxyethyl)phenyl-trans-4-guanidinome-thylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid (1,92 g) i pyridin (3 ml) og chloroform (10 ml) ved -15 til -10°C. Efter omrøring af blandingen ved samme temperatur i 1 time sattes der benzylalkohol (1,08 g) til reaktionsblandin-35 gen. Den opnåede opløsning omrørtes kontinuerligt i 30 minutter ved -15 til -10°C. Reaktionsblandingen inddampedes til tørhed i vakuum, og til remanensen sattes vand

DK 163580 B

41 og saltsyre. Den således opnåede opløsning ekstraheredes med chloroform. Opløsningsmidlet fjernedes fra ekstrakten. Til remanensen sattes vand til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

5 Eksempel 49 41-Carboxymethylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexan-carboxylat-hydrochlorid.

1) En opløsning af trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylsyre-hydrochlorid (4,7 g), tert-butyl-p- 10 hydroxyphenylacetat (5,5 g) og dicyclohexylcarbodiimid (6,2 g) i dimethylf ormamid (20 ml) omrør tes ved stuetemperatur i 20 timer. Reaktionsblandingen inddampedes i vakuum, og til remanensen sattes chloroform. Uopløseligt materiale fjernedes ved filtrering, og filtratet vaske-15 des med vand. Det således opnåede chloroformlag koncentreredes til opnåelse af 41-tert-butoxycarbonylmethyl-phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hy-drochlorid (6,9 g, 81,0%), smp. 110-125°C.

2) En opløsning af 4'-tert-butoxycarbonylmethyl-20 phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hy- drochlorid (3,0 g) i eddikesyre (30 ml) og en 15% hydro-genchlorid-eddikesyre-opløsning omrørtes ved stuetemperatur i 4 timer. Reaktionsblandingen inddampedes til tørhed i vakuum til opnåelse af den i overskriften an-25 førte forbindelse.

Eksempel 50 2'-Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyc-lohexancarboxylat-hydrochlorid.

1) Trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyrechlorid-30 hydrochlorid.

En suspension af trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylsyre-hydrochlorid (1,2 g) og thionylchlorid (15 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 3 timer. Derefter fjernedes overskuddet af thionylchlorid ved destillation 35 under formindsket tryk. Remanensen vaskedes med vandfri ethylether til opnåelse af trans-4-guanidinomethylcyclo-

DK 163580 B

42 hexancarboxylsyrechlorid-hydrochlorid (1,2 g) som et farveløst pulver.

IR cm-1: 1790 (C=0)

Hlct2£ 2)2 rBenzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-5 hexancarboxylat-hydrochlorid.

En opløsning af triethylamin (0,75 g) i vandfrit methylenchlorid (2 ml) sattes til en suspension af trans- 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyrechlorid-hydrochlo-rid (1,2 g) og benzylsalicylat (1 g) i vandfrit methylen-10 chlorid (10 ml) ved 0°C, og den opnåede blanding omrør-tes ved 0°C i 10 timer. Efter afdestillation af opløsningsmidlet vaskedes remanensen med en mættet natriumhy-drogencarbonatopløsning til fjernelse af uomsat trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre, og til den opnåe-15 de remanens sattes der vandfrit natriumsulfat. Derefter ekstraheredes blandingen med methylenchlorid. Efter af-destillation af opløsningsmidlet vaskedes remanensen med ether til fjernelse af uomsat benzylsalicylat. Til remanensen sattes isopropylalkohol, og uopløseligt materiale 20 fjernedes derefter ved filtrering. Opløsningsmidlet fjernedes fra filtratet ved destillation, og den opnåede remanens omkrystalliseredes af vand til opnåelse af 2'-benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohe-xancarboxylat-hydrochlorid-monohydrat (320 mg) som farve-25 løse krystaller.

Eksempel 51 2' -Benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclo-hexancarboxylat-hydrochlorid-monohydrat.

Trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre-hy-30 drochlorid (1,72 g) og triethylamin (0,74 g) suspenderedes i methylenchlorid (20 ml), og til suspensionen sattes isobutyloxycarbonylchlorid (1 g) ved -5°C. Til den opnåede blanding, som var blevet omrørt ved -5°C i 30 minutter, sattes der benzylsalicylat (1,66 g). Den opnå-35 ede blanding omrørtes i 2 timer under isafkøling og om-rørtes videre i 36 timer ved stuetemperatur. Efter afde- 43

DK 163580B

stillation af opløsningsmidlet vaskedes remanensen med en mættet natriumhydrogencarbonatopløsning og ekstrahe-redes med methylenchlorid. Efter afdestillation af opløsningsmidlet vaskedes remanensen med ether og rensedes 5 ved tyndtlagschromatografi (n-butanol: eddikesyre: vand = 4:1:1) til opnåelse af 21-benzyloxycarbonylphenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlo-rid-monohydrat (285 mg).

Eksempel 52 10 Tabletter: Disse indeholder følgende materialer i 220 mg af en tablet med filmovertræk.

Forbindelse 1 50 mg .Majsstivelse 100 mg

Krystallinsk cellulose 50 mg 15 Magnesiums tear at 1 mg

Hydroxypropylmethylcellose 15 mg

Hydroxypropylcellose 4 mg I alt 220 mg

Forbindelse 1 er den samme som defineret ovenfor.

20 Granuler: Disse indeholder følgende materialer i 1000 mg granuler.

Forbindelse 1 100 mg

Avicel 500 mg

Majsstivelse 400 mg 25 I alt 1000 mg

Forbindelse 1 er den samme som defineret ovenfor.

Claims (7)

1 Y2 1 y / hvori R'2 betegner et hydrogenatom, en lavere 25i - alkoxygruppe eller en gruppe med formlen -(CH2)nCOOR'3, hvori R'3 betegner en lavere alkyl-, phenyl-, benzyl-, anisyl- eller lavere alkoxycarbonylmethylgruppe, og n betegner et helt tal fra 0 til 2, og om ønsket derpå fra-30 spalter en benzyl-, anisyl-, lavere alkoxycarbonylmethyl-.eller t-butylgruppe i R'3, eller i (2) omsætter en forbindelse med formlen HNV /-V /—3^(CH ) COOH ; hvori n har den ovennævnte betydning, eller et reaktivt i derivat heraf med en forbindelse med formlen i t OK 163580 E R'3 - OH VI hvori R'3 har den ovennævnte betydning, til opnåelse af en forbindelse med formlen

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af et cyclohexancarboxylsyrederivat med formlen "S C-NHCH2 -f C00R1 I 5 h2n ^ \ -y hvori R^ betegner en vanilyl-, * pyridyl- eller a-tocopherylgruppe eller en gruppe med formlen R2 , hvori R2 betegner et hydrogenatom, en lavere alkoxygruppe eller en gruppe med formlen -(CH2)nCOOR3, hvori r3 betegner et hydrogenatom eller en lavere alkyl-, phenyl-, benzyl-, ånisyl- eller lavere alkoxycarbonyl-methylgruppe, og n betegner et helt tal fra 0 til 2, 15 eller et farmaceutisk acceptabelt salt heraf, kendetegnet ved, at man (1) omsætter 4-guanidinomethylcyclohexancarboxylsyre piler et reaktivt derivat deraf med en forbindelse med formlen ! R'i - OH III I A 20 j .jj hvori R* ^ betegner en vanilyl-, pyridyl- el-||ler a-tocopherylgruppe eller en gruppe med formlen

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man fremstiller en forbindelse med 15 j formlen HN\ /“Λ I ^C-NHCH2_y VwiCOO^ | H2N^ r i 20 hvori har den ovennævnte betydning, eller et farmaceutisk acceptabelt salt heraf.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendete g- |n e t ved, at man fremstiller vanilyl-4-guanidinometh-'ylcyclohexancarboxylat eller et farmaceutisk acceptedselt salt heraf._____ ___

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man fremstiller pyridyl-4-guanidinomethyl-cyclohexancarboxylat eller et farmaceutisk acceptabelt salt heraf.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller a-tocopheryl-4-guanidino-:methylcyclohexancarboxylatester eller et farmaceutisk jacceptabelt salt heraf.

5 HN^ /—\ Λ ^(CH,) COOR', ^c-nhch2- -coo- 1V 2 hvori R1^ og n har de ovennævnte betydninger, 10 og om ønsket behandler den således opnåede forbindelse med en farmaceutisk acceptabel syre til dannelse af det tilsvarende salt.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kende-tegnet ved, at man fremstiller (21-benzyloxycarbo- nyl) phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid. DK 163580B

7. Fremgangsmåde ifølge krav 1. , k e n d e -tegnet ved, at man fremstiller (21-benzyloxycarbo-nyl)phenyl-trans-4-guanidinomethylcyclohexancarboxylat-hydrochlorid-monohydrat.