DK161519B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af tropylbenzoatderivater eller farmakologisk acceptable salte deraf - Google Patents

Description

DK 161519B

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte tropylbenzoatderivater med den nedenfor anførte formel I eller farmakologisk acceptable salte deraf.

5 Akutte anfald af migræne behandles sædvanligvis med et middel, der virker sammentrækkende på de perifere kar, såsom ergotamin, der kan indgives sammen med coffein, og dihydroergotamin, et antipyretisk analgetikum, såsom acetylsalicylsyre eller p-acetylaminophenol, og/eller 10 et antiemetisk middel, såsom cyclizin, metoclopramid og thiethylperazin. Det er også blevet rapporteret (J.B. Hughes, Med. J. Aust. 2, nr. 17, 580, 1977), at en omgående lettelse af akutte migræneanfald kan opnås ved langsom intravenøs injektion af metoclopramid (10 mg).

15 Det formodes, at 5-hydroxytryptamin (5-HT) er det naturligt forekommende stof, som mest sandsynligt spiller en rolle i migrænes patofysiologi. Der udskilles forøgede mængder 5-HT og dens metabolit 5-hydroxyindol-eddikesyre i urinen under de fleste anfald. Endvidere falder 20 plasma- og blodplade-5-HT-koncentrationerne hurtigt ved begyndelsen af et anfald og forbliver lave, medens hovedpinen varer. Desuden er anfald af migræne klart blevet forbundet med perioder af thrombocytopeni hos visse patienter. Det er blevet foreslået, at forbindelser, 25 som blokerer aktiviteten af 5-HT, kunne være nyttige ved behandling af migræne (J.R. Fozard, International Headache Congress (1980), rapporteret i Advances in Neurology, bind 33, Raven Press, New York 1982).

De kendte midler til forebyggelse af migræne, methyser-30 gid, propranolol, amitriptylin og chlorpromazin, har vidt forskellige farmakologiske aktiviteter, men de er alle 5-HT-D-receptor-antagonister i de klinisk anvendte doser til behandling af migræne. Metoclopramid er en kraftig 5-HT-M-receptor-antagonist, og det er blevet 35 foreslået (J.R. Fozard, se ovenfor), at blokering af M-receptoren, som er til stede på afferente sensoriske DK 161519B | 2 neuroner, giver symptomatisk lindring ved et akut migræneanfald .

Det er et formål med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe forbindelser, der er mere kraftige 5 og selektive 5-HT-M-receptor-antagonister end metoclopramid og således er indicerede til anvendelse ved behandling af migræne.

Virkningen som 5-HT-M-receptor-antagonister af (-)-cocain og nogle beslægtede forbindelser er blevet rapporteret 10 (J.R. Fozard et al., Eur. J. Pharmacol., 59, (1979), 195-210), men med undtagelse af nor(-)cocain og benzoyl-tropin er ingen af dem så virksomme som metoclopramid;. pA2“Værdierne, der er blevet rapporteret for nor(-)cocain og benzoyltropin, er hhv. 7,7 og 7,12, medens pA2_5-HT-15 -værdien for metoclopramid bestemt ved den samme procedure er 7,2 (J.R. Fozard et al., Eur. J. Pharmacol., 49 (1978), 109-112).

Det har nu overraskende vist sig, at tropylbenzoat-derivaterne med den nedenfor anførte formel I har en væ-2Ό sentligt forbedret virkning som 5-HT-M-receptor-antagonist.

Tropylbenzoatderivaterne, der er anført i den følgende tabel I, er kendte forbindelser.

5

DK 161519 B

3

Tabel I

Kendte tropvlbenzoater.

3- 5- 4- Reference och3 h H ) ) OCH3 OCH3 OCH3 ) f.eks. C.A. 59, 5665 10 OCH3 OCH3 OC4H9 C.A. 67, 53963

Cl Η H )

Cl Cl H ) f.eks. C.A. 78, 119197 15 CH3 Η H ) ) GB-A-1.012.622 CH3 CH3 H ) 20

Det er blevet rapporteret, at nogle af de nævnte kendte tropylbenzoatderivater og visse kendte positions-isomere deraf har farmakologisk aktivitet, nærmere bestemt lokalanæstetisk, centralnervesystems-stimulerende, cholinoly-25 tisk og/eller spasmolytisk aktivitet. Der er imidlertid ikke blevet rapporteret nogen farmakologisk aktivitet, som indicerer anvendelse ved behandling af migræne.

Forbindelserne med formlen I kan indgives til effektiv behandling af migræne i dosisniveauer, der ligger væsentligt 30 under de niveauer, ved hvilke der hidtil er blevet rapporteret farmakologisk aktivitet for de nævnte kendte forbindelser eller deres kendte isomere.

Opfindelsen angår således en analogifremgangsmåde til fremstilling af tropylbenzoatderivater med den følgende 35 almene formel I: DK 161519 B ; j i 4 i i H0C - CH - CH0 / Ri [ 1 1 /=\ 5 i 3 i 2 \Jr H0C--CH -CH R_ 2 (endo) 2 hvori Ri betyder Ci_4-alkyl, C-L_4-alkoxy eller halogen, 10 R2 betyder <~ι_4-alkyl eller C1_4-alkoxy, og R3 betyder

Ci-4-alkyl eller, undtagen når R^ betyder alkyl, hydrogen, eller farmakologisk acceptable salte deraf, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne.

15 Farmaceutiske præparater i enhedsdosisform til ef fektiv lindring af migræne indeholder en forbindelse med den almene formel I i blanding med eller på anden måde knyttet til et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel | eller bærestof og indeholder 0,5-100 mg pr. enhedsdosis.

20 Sædvanligvis vil præparaterne indeholde 1-50 mg, især 3-30 mg, pr. enhedsdosis.

Ved behandling af migræne indgives der til en patient, der lider af migræne, en effektiv migrænelindrende mængde af en forbindelse med formlen I. Denne mængde vil 25 sædvanligvis ligge i område 0,01-10 mg/kg, især 0,03-3,0 mg/kg. Forbindelserne med formlen I kan også anvendes til forebyggelse af migræne ved indgivelse til en patient med risiko for migræne af en effektiv migræneforebyggende mængde af forbindelsen.

30 Eksempler på C-L_4-alkylgrupper R^, R2 og R3 er meth yl, ethyl, n-propyl, n-butoxy og isopropyl, idet methyl og ethyl foretrækkes.

Eksempler på C1_4-alkoxygrupper R]_ og R2 er meth-oxy, ethoxy, n-propoxy, n-butoxy og isopropoxy, idet ethoxy 35 og især methoxy foretrækkes.

5

DK 161519B

Halogener R-j_ er brom, chlor, fluor og iod, idet brom, fluor og især chlor foretrækkes.

En foretrukken forbindelse er forbindelsen med formlen I, hvori Ri og R2 er ens og hver især betyder methoxy, 5 og R3 betyder hydrogen.

En anden foretrukken forbindelse er forbindelsen med formlen I, hvori R^, R2 og R3 er ens og hver især betyder methyl.

Forbindelserne med formlen I blokerer M-receptorerne 10 5-hydroxytryptamin (5-HT) på afferente sensoriske neuroner, hvoraf visse tjener til smertetransmission.

Som ovenfor forklaret antages blokeringen af sådanne M-receptorer at være en mekanisme, ved hjælp af hvilken symptomerne på migræne kan lindres. Følgelig er forbindelserne 15 med formlen I anvendelige til behandling af migræne, når de indgives i mængder, der er tilstrækkelige til effektiv blokering af M-receptorerne.

Aktiviteten af forbindelserne mod 5-HT kan bedømmes ved bestemmelse af deres pA2-værdier i et isoleret kaninhjerte 20 som beskrevet af Fozard et al., Europ. J. Pharmacol., 59, 195-210 (1979). Ved den beskrevne metode bestemmes den molære koncentration af antagonist, der reducerer effekten af to gange ED^q af 5-HT til effekten af ED,-q i fraværelse af antagonist. pA2~værdien er den negative logaritme 25 af den nævnte molære koncentration. I almindelige vendinger er forbindelsen mere virksom, jo højere pA2~værdien er.

pA2-Værdierne for nogle repræsentative forbindelser med formlen I er anført i den følgende tabel II:

30 Tabel II

Forbindelse pA2 5-HT

tropyl-3,5-dimethoxybenzoat 8,4 tropyl-3,4,5-trimethylbenzoat 8,96 35 tropyl-3-chlor-5-methyl-benzoat 9,10 DK 161519 B ; 6

Til sammenligning er PA2-værdierne for nogle forbindelser, der strukturelt er nært beslægtede med de her i omhandlede forbindelser, anført i den følgende tabel III.

5 Tabel III

Forbindelse pA^ 5-HT

tropyl-4-chlorbenzoat 7,0 tropyl-3 ,'4 -dimethoxybenzoat 7,2 tropyl-benzoat 7,2 10 tropy1-4-methylbenzoat 7,8 nortropyl-3,5-dichlorbenzoat 7,8

Det ses af tabel II og III, at forbindelserne med formlen I ved denne test udviser en virkning som 5-HT-M-15 -receptor-antagonister, der er mindst en størrelsesorden større end virkningen af tropylbenzoat.

Aktiviteten af forbindelserne mod 5-HT kan bedømmes in vivo ved måling af virkningen af forbindelsen på Von Bezold-Jarisch-rrøfleksen induceret af 5-HT injiceret 20 intravenøst i rotter' (se A.S. Paintal, Physiol. Rev.

53, 159-227, (1973). Den forbigående hjertefrekvensnedsættelse hidrører fra en forøget afferent vagusaktivitet der skyldes 5-HT-stimulering af sensoriske afferente fibre i og omkring hjertet (se eksempel 3).

25 Forbindelserne med formlen I er særdeles selektive i deres virkning mod 5—HT-M-receptor. Deres virkning" mod andre· 5-HT-recepto.rer og andre spasmogener, især oxytocin, acetylcholin, histamin og calcium, synes at være mindst to størrelsesordener lavere end virkningen mod 5-HT-M-30 -receptorer (se eksempel 4). Følgelig skulle deres .

anvendelse ved behandling af migræne være uden nogen bivirkninger.

Forbindelserne med formlen I kan indgives på forskellig måde til opnåelse af den ønskede virkning.

35 Forbindelserne kan indgives alene eller i form af farmaceutiske præparater til patienten, der behandles, og enten oralt eller parenteralt, f.eks. subcutant eller

DK 161519 B

7 intravenøst. Den indgivne mængde forbindelse vil variere og kan være enhver effektiv migrænelindrende mængde.

Afhængigt af patienten og indgivelsesmåden kan mængden af indgivet forbindelse variere inden for vide grænser, således 5 at der gives ca. 0,01-10 mg/kg, sædvanligvis 0,03-3,0 mg/kg legemsvægt hos patienten pr. dosis.

Enhedsdoser af disse forbindelser kan f.eks. indeholde fra ca. 0,5 mg til 100 mg, sædvanligvis 1-50 mg og fortrinsvis 3-30 mg af forbindelsen og kan f.eks.

10 indgives 1-4 gange daglig.

Det vil forstås, at de ovenfor anførte doseringsniveauer er væsentlig mindre end de, der ville kræves til en medicinsk behandling baseret på en hvilken som helst kendt farmakologisk aktivitet af en hvilken 15 som helst af de kendte forbindelser.

Ved udtrykket "enhedsdoseringsform" skal der forstås en enkelt eller flerdobbelt doseringsform indeholdende en vis mængde af den aktive bestanddel i blanding med eller på anden måde knyttet til fortyndingsmidlet eller bære-20 stoffet, hvor denne mængde er af en sådan størrelse, at der normalt skal anvendes en eller flere af de forud fastlagte enheder til en enkelt terapeutisk indgivelse.

Når der er tale om flerdobbelte doseringsformer, såsom væsker eller tabletter med delekærv(e) vil den forud 25 fastlagte enhed være en brøkdel, såsom en 5 ml's portion (en teskefuld) af en væske eller en halvdel eller en fjerdedel af en tablet med delekærv(e), af den flerdobbelte doseringsform.

Farmaceutiske præparater, i hvilken form de aktive 30 forbindelser fremstillet ifølge opfindelsen normalt vil blive anvendt, fremstilles på en inden for den farmaceutiske teknik i og for sig kendt måde og indeholder sædvanligvis mindst én aktiv forbindelse fremstillet ifølge opfindelsen i blanding med eller på anden måde knyttet 35 til et farmaceutisk acceptabelt bærestof eller fortyndingsmiddel dertil. Til fremstilling af disse præparater

DK 161519 B

8 bliver den aktive bestanddel sædvanligvis blandet med et bærestof eller fortyndet med et fortyndingsmiddel eller indlægges eller indkapsles i en kapsel, lugtepose, oblat- j kapsel, papir eller en anden beholder. Bærestoffer eller j j

5 fortyndingsmidlet kan være et fast, halvfast eller flydende I

materiale, der tjener som bærestof, excipiens eller medium for den aktive bestanddel. Egnede bærestoffer eller fortyndingsmidler er i sig selv velkendte.

Præparaterne kan være tilpasset til enteral eller 10 parenteral anvendelse og kan indgives til patienten i form af tabletter, kapsler, suppositorier, opløsninger, suspensioner eller lignende.

I de specifikke eksempler nedenfor beskrives illustrerende eksempler på egnede farmaceutiske præparater.

15 Tropylbenzoatderivaterne med formlen I kan anvendes ved migrænebehandling sammen med antimigrænemidler, der har andre virkningsmåder. Sådanne midler omfatter dem, der anvendes forebyggende, såsom barbiturater, diazepam, chlorpromazin, amitriptylin, propranolon, · irte thy s ergid, 20 - pizotifen, cyproheptadin, dihydroergotamin og clonidin, og dem, der anvendes ved akutte anfald, såsom karsammentrækkende midler, f.éks. ergotamin og dihydroergotamin, analgetisk/antiinflammatorisk virksomme midler, f.eks. acetylsalicylsyre, paracetamol og indomethacin, eller 25 midler mod kvalme, f.eks. cyclizin, metoclopramid og triethylperazin (se J.R. Fozard, J. Pharm. Pharmacol. 27, 297-321 (1975), J.R. Saper, J. Amer. Med. Assoc. 239, 480-484 (1978), J.R. Fozard, se ovenfor). For eksempel vil forbindelser med formlen I være gavnlige i kombination 30 med acetylsalicylsyre (300-1200 mg) eller methysergid (2-6 mg) indgivet daglig.

Forbindelserne med den almene formel I fremstilles på i og for sig kendt måde ud fra tropin og et syrehalo-genid med den almene formel IV 35 9

DK 161519B

/“Τ' X0C "3 <IV> 5 \ hvori R^, R2 og R^ er som defineret i forbindelse med formlen I, og X betyder halogen, især chlor.

Omsætningen kan gennemføres i fraværelse af et opløsningsmiddel ved opvarmning til f.eks. en temperatur 10 i området 140-160°C af syrehalogenidet og et hydrohalogenidsalt af tropin under omrøring. Der udvikles hydr.ogenhalogenid, og blandingen bliver først flydende, men bliver derefter fast. Opvarmningen fortsættes i £h. 15 minutter efter størkningen, og derefter afkøles blandingen og sættes 15 til vand. Produktet er hydrohalo^nidet af forbindelsen med formlen I, og den frie base kan fås ved tilsætning af vandig base, såsom natrium- eller kaliumcarbonat, der ikke hydrolyserer esteren, indtil basisk reaktion af den vandige produktopløsning og påfølgende ekstraktion 20 af den frie base med et egnet organisk opløsningsmiddel, f.eks. diethylether, ethylacetat og methylenchlorid.

Den organiske opløsning inddampes derpå, og remanensen omkrystalliseres fra f.eks, vandig methanol.

Som nævnt ovenfor kan forbindelserne med formlen I 25 anvendes i form af deres farmaceutisk acceptable syreadditionssalte.

De farmaceutisk acceptable syreadditionssalte kan være ugiftige additionssalte med egnede syrer, såsom salte med uorganiske syrer, f.eks. saltsyre, hydrogenbromidsyre, 20 salpetersyre, svovlsyre eller phosphorsyre, eller med organiske syrer, såsom organiske carboxylsyrer, f.eks, glycolsyre, maleinsyre, hydroxymaleinsyre, æblesyre, vinsyre, citronsyre, salicylsyre, o-acetylbenzoesyre, nicotinsyre eller isonicotinsyre, eller organiske 35 sulfonsyrer, f.eks. methansulfonsyre, ethansulfonsyre, 2-hydroxyethansulfonsyre, p-toluensulfonsyre eller 2--naphthalensulfonsyre.

i

DK 161519 B

10

Ud over farmaceutisk acceptable syreadditionssalte ;

kan andre syreadditionssalte, f.eks. salte med pierinsyre I

j eller oxalsyre, tjene som mellemprodukter ved rensning af forbindelserne eller ved fremstilling af andre, f.eks.

5 farmaceutisk acceptable, syreadditionssalte, eller de er anvendelige til identifikation eller karakterisering af baserne.

Et syreadditionssalt kan omdannes til den frie forbindelse ifølge kendte metoder, f.eks. ved behandling med en base, såsom et metalhydroxid eller- alkoxid, f.eks.

10 et alkalimetal- eller jordalkalimetalhydroxid, f.eks.

lithiumhydroxid, natriumhydroxid, kaliumhydroxid eller calciumhydroxid, med et metalcarbonat, såsom et alkalimetal-eller jordalkalimetalearbonat eller -hydrogencarbonat, f.eks. natrium-, kalium- eller calciumcarbonat eller 15 -hydrogencarbonat, med en trialkylamin eller med en anionisk ionbytterharpiks.

Et syreadditionssalt kan også omdannes til et andet syreadditionssalt ifølge kendte metoder. For eksempel kan et salt med en uorganisk syre behandles 20 med et metalsalt, f.eks. et natrium-, barium- eller sølvsalt, eller en syre i et egnet fortyndingsmiddel, . hvori et dannet uorganisk salt er uopløseligt og således fjernes fra reaktionsmediet. Et syreadditionssalt kan også omdannes til et andet syreadditionssalt ved 25 behandling med et anionbytterpræparat.

Opfindelsen illustreres ved de følgende eksempler.

Eksempel 1.

Tropvl-3,5-dimethoxvbenzoat (formel I, r-l = r2 = 0CH3, 30 R3 = Hj .

34,24 g tropin behandles med vandfri diethylether og etherisk hydrogenchlorid, og det udfældede hydrochlorid isoleres ved afdampning af opløsningsmidlet. 51,7 g 3,5--dimethoxybenzoylchlorid tilsættes, og blandingen omrøres 35 ved 140°C i 15 minutter, og i løbet af dette tidsrum bliver behandlingen flydende, udvikler hydrogenchloridgas og

DK 161519 B

11 størkner igen. Efter opvarmning i yderligere 15 minutter opløses det afkølede faste stof i vand, der tilsættes et overskud af en vandig opløsning af kaliumcarbonat, og basen ekstraheres med ethylacetat. Ved inddampning af den 5 tørrede ethylacetatopløsning fås et fast stof, der omkrystalliseres fra vandig methanol, hvorved der fås tropyl--3,5-dimethoxybenzoat, smp. 200°C.

Eksempel 2.

10 Troovl-3-chlor-5-methvlbenzoat.

5-Chlor-m-xvlen.

En opløsning af 36,3 g (0,3 mol) 3,5-dimethylanilin i 200 ml iseddikesyre behandles med 60 g methansulfonsyre, og den omrørte blanding afkøles til 0-5 °C i et is/salt-bad.

15 En iskold opløsning af natriumnitril (21 g i 80 ml vand) tilsættes langsomt i løbet af 1/2 time, og denne diazoni-umopløsning sættes derefter hurtigt til en iskold opløsning af cuprochlorid (fremstillet ud fra 125 g kobbersulfat--pentahydrat, 32,5 g natriumchlorid og 71 g natriumsulfat) 20 i 160 ml koncentreret saltsyre. Blandingen bliver meget tyk og får lov at opvarme til stuetemperatur. Omrøringen fortsættes natten over, og opløsningen opvarmes til 60°C i 1/2 time. Koncentreret ammoniakopløsning tilsættes under afkøling, indtil opløsningen er basisk, og olien ekstra-25 heres med ether. Destillation af den tørrede etherekstrakt giver 25,6 g 5-chlor-m-xylen med et kogepunkt på 70-73°C ved 12 mm Hg.

3-Chlor-5-methvlbenzoesvre.

30 En godt omrørt blanding af 32,5 g N-bromsuccinimid, 25,6 g 5-chlor-m-xylen og 500 ml carbontetrachlorid tilbagesvales i 8 timer. Opløsningen belyses godt, og hver-anden time tilsættes små mængder benzoylperoxid. Den afkølede opløsning filtreres, og opløsningsmidlet afdampes, 35 hvorved der fås en olie bestående af en blanding af 3- 12

DK 161519B

i i -chlor-5-methylbenzylbromid og 5-chlor-m-xylen i et forhold på ca. 2:1 (34,5 g).

Den ovenfor anførte blanding sættes til en omrørt blanding af 14 g kalium-tert.butoxid, 11 g 2-nitropropan 5 og 100 ml dimethylsulfoxid, og blandingen omrøres natten over ved stuetemperatur. Der tilsættes 500 ml vand, og den udskilte olie ekstraheres med ether. Inddampning af den tørrede etheropløsning giver en olie, der består af en blanding af 3-chlor-5-methylbenzaldehyd og 5-chlor-m-10 -xylen i et forhold på ca. l:l (18,5 g).

Den ovenfor anførte blanding sættes langsomt i løbet af 15 minutter til en omrørt suspension af fugtigt sølvoxid (fremstillet ud fra 24 g sølvnitrat og en vandig opløsning af natriumhydroxid (5,7 g)) i en opløsning af 5,7 g natri-15 umhydroxid i 50 ml vand. Den omrørte blanding tilbagesvales i 30 minutter, afkøles og filtreres, og filtratet ekstraheres med ether. Syrning af det vandige lag med 2 N saltsyre giver et bundfald, som frafiltreres og omkrystalliseres fra vandig methanol, hvorved der fås 9,4 g 3-chlor-20 5-methylbenzoesyre med. smeltepunkt på 174-175°C.

Tropvl-3-chlor-5-methylbenzoat.

En blanding af 9,4 g 3-chlor-5-methylbenzoesyre og 11,5 g phosphorpentachlorid omrøres ved stuetemperatur i 25 1 time og destilleres derefter, hvorved der fås phosphor- oxychlorid med et kogepunkt på 45°C ved 85 mm Hg og 10 g 3-chlor-5-methylbenzoylchlorid med et kogepunkt på 56°C ved 0,1 mm Hg.

7,4 g tropin behandles med vandfri diethylether og 30 etherisk hydrogenchlorid, og det udfældede hydrochlorid isoleres ved afdampning af opløsningsmidlet. 10 g 3-chlor--5-methylbenzoylchlorid tilsættes, og blandingen omrøres ved 140-160°C i 45 minutter. Den afkølede blanding opløses i vand, der tilsættes et overskud af en vandig opløsning .35 af kaliumcarbonat, og basen ekstraheres med ethylacetat. Afdampning af ethylacetet giver 10,5 g af en remanens,

DK 161519 B

13 som behandles med en opløsning af 3,43 g methansulfonsyre i 50 ml ethanol. Opløsningen koncentreres og afkøles, hvorved der fås 10,9 g krystaller af tropyl-3-chlor-5-meth-ylbenzoat-methansulfonat med et smeltepunkt på 185°c.

5 Analyse for C17H24NO5CIS:

Beregnet: 52,37% C, 6,20% H, 3,59% N.

Fundet: 52,36% C, 6,15% H, 3,57% N.

Eksempel 3.

10 Tropvl-3.4.5-trimethvlbenzoat.

En blanding af 0,9 g 3,4,5-trimethylbenzoesyre (fremstillet ifølge Ber. 27. 3444, 1984) og 1,15 g phosphorpen-tachlorid omrøres ved stuetemperatur i 1 time, og phosphor-oxychloridet afdampes under formindsket tryk. Den olieag-15 tige remanens af 3,4,5-trimethylbenzoylchlorid omrøres med tropin-hydrochlorid (fremstillet ud fra 0,8 g tropin) ved 130-140°C i 1/2 time. Den afkølede faste remanens opløses i vand, og opløsningen gøres basisk ved tilsætning af kaliumcarbonatopløsning og ekstraheres med ether. Ether-20 ekstrakten vaskes flere gange med vand og inddampes derefter til tørhed. Ved tilsætning af etherisk hydrogenchlo-rid til remanensen fås et fast hydrochlorid, som omkrystalliseres fra isopropanol, hvorved der fås 350 g tropyl--3,4,5-trimethylbenzoat-hydrochlorid med et smeltepunkt 25 på 297°C.

Analyse for C^gH^gNC^Cl:

Beregnet: 66,79% C, 8,10% H, 4,33% N.

Fundet: 66,94% C, 7,91% H, 4,34% N.

30 Eksempel 4.

Antagonisme af von Bezold-Jarisch-refleksen fremkaldt af 5-HT hos anæsteriserede rotter måles for tropyl-3,5-di-methoxybenzoat ved anvendelse af følgende metode.

Sprague-Dawley-hanrotter med en vægt på 250-300 g 35 anæstetiseres med urethan, 1,25 g/kg injiceret intraperitonealt, og opstilles til registrering af blodtryk og hjerterytme som 14

DK 161519B

beskrevet af J.R. Fozard et al., J. Cardiovasc. Pharmacol.

. 2t 229-245 (1980). En submaksimal dosis 5-HT (2 pg/kg) indgives gentagne gange via en kanyle i halsvenen, og ændringerne i hjerterytmen bestemmes. Antagonister indgives intravenøst, og 5 doserne, der kræves for netop at inhibere reaktionen på 5-HT (tærskeldosis) eller for at inhibere reaktionen på 5-HT 50% (EDjjq) bestemmes.

De opnåede resultater er anført i den følgende tabel IV.

10

Tabel IV

von Bezold-Jarisch-refleks-antagonisme.

Tærskeldosis ED50 15 (Mg/kg) (Mg/kg) 6,96±0,90 13,7±1,20

Ved et sammenligningsforsøg giver metoclopramid en tærskeldosis på 233,4±66,3 Mg/kg og en ED50 på 408,4±80,9 20 ^g/kg.

Dette sammenligningsforsøg viser, at tropyl-3,5-di-methoxybenzoat er mange gange mere virksomt end metoclopramid ved dette specielle forsøg, hvilket er et tegn på en tilsvarende reduktion af doseringsniveauerne ved be-25 handling af migræne.

Tropyl-3,5-dimethoxybenzoat er også relativt ugiftigt, som det fremgår af de respektive LDso-værdier hos mus og rotter (se tabel V) c

DK 161519 B

15

Tabel V.

LD50 hos mus og rotter (mg/kg).

Indqivelsesvei Mus Rotte 5 i.p. 28 s.c. 17 i.v. 29 13 oral 160 10 (- = ikke bestemt)

Eksempel 5.

Virkninasselektivitet.

Et udvalg af klassiske in vitro-farmakologiske test-15 præparationer (rotteuterus, rottefundus, marsvinsileum, marsvins-taenia caeci) opstilles ifølge almindeligt anerkendt procedurer (se "Pharmacological experiments on isolated preparations", Staff of the Department of Pharmacology, University of Edinburgh, 1970). Forskellige 20 spasmogener jcnvendes til at fremkalde kontraktion af disse væv via andre mekanismer end 5-HT-"M"-receptoren. Der bestemmes de koncentrationer af tropy1-3,5-dimethoxyben-zoat, som reducerer virkningerne af en submaksimal dosis agonist med 50% (IC50)· Resultaterne er anført i tabel VI 25 nedenfor.

Det fremgår af tabel VI, at tropyl-3,5-dimethoxyben-zoat er mindst 700 gange og i flere tilfælde over 50.000 gange mere virksomt som 5-HT-M-receptor-blokker end af reaktioner fremkaldt af andre midler.

16

DK 161519B

(ti

•H

S3

<D

(ti •P * o •H 00

v 0 O

S3 <0 VO

•η (β n

>0 ω U

w £ S3 a o 0 s a §

Λ -H

u i in n S W ω h iS S3 m vo 2 -η σι vo

§ S

•P g “ a «Η ^ (0 0 Φ s S3 «Η £ •H <H 2 g ° 3 ^ o

Η Μ H CM

• ·Η “ I O H

H ? m ο» o n

*33 ? " H

J.-j K i

En ^ d ω ·η s i 3 s w .5 P ω Μ Q) o o s

.H a 4-1 00 CO H

Jj ” 3 ^ Ί· ft

«ri 1 CM CM O

« °8 o> in tn pi ” -P Λ Λ 0) G -P >3

. O O

H K M

S3 £? -H ®

m -P -P

S P (!)

S ® P

1st s g -5 m Ϊ c S3 (0

g (ti H

S M O

C ft ^ 0) S3 Ό

-Η I

h e o s S3 Λ S3 ·Η

•P -Η O ·Η g H

ω O H g 3 (ti •H O >i (ti -Η Λ3

S3 -P -P -P O

O Eh >i <D (fl Η H

6i Μ X O -H (ti < Hl o < B O *

DK 161519 B

17 I de følgende eksempler, der vedrører farmaceutiske præparater, anvendes betegnelsen "aktiv forbindelse" om forbindelsen tropyl-3,5-dimethoxybenzoat. Ved anvendelse af andre forbindelser med formlen I kan ændringer i mæng-5 den af medikamentet være nødvendige eller ønskelige afhængigt af medikamentets virkningsgrad, som det er velkendt inden for teknikken.

Eksempel 6.

10 Et illustrativt præparat til hårde gelatinekapsler er følgende: (a) aktiv forbindelse 5 mg (b) talkum 5 mg (c) lactose 90 mg 15 Præparatet fremstilles ved at passere de tørre pul vere af (a) og (b) gennem en finmasket sigte og blande dem godt. Pulveret fyldes derefter i hårde gelatinekapsler i en nettomængde på 100 mg pr. kapsel. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 35

Eksempel 7.

2

Et illustrativt præparat til tabletter er følgende: 3 (a) aktiv forbindelse 5 mq 4 (b) stivelse 43 mg 5 (c) lactose 50 mg 6 (d) magnesiumstearat 2 mg 7

Granulatet, der fås ved blanding af lactosen med (a) 8 og en del af stivelsen og granulering med stivelsespasta, 9 tørres, sigtes og blandes med magnesiumstearat. Blandingen 10 komprimeres til tabletter med en vægt på 100 mg hver.

11

DK 161519B

i i i 18

Eksempel 8.

Et illustrativt præparat til en injicerbar suspension er følgende 1 ml*s ampul til intramuskulær injektion: vægt-% 5 (a) aktiv forbindelse 0,01 (b) polyvinylpyrrolidon 0,5 (c) lecithin 0,25 (d) vand til injektion op til 100,0 10 Materialerne (a) til (d) blandes, homogeniseres og fyldes i 1 ml's ampuller, der forsegles og autoklaveres i 20 minutter ved 121°C. Hver ampul indeholder 1,0 mg pr. ml af forbindelsen (a).

Eksempel 9.

-*-5 mg/suppositorie aktiv forbindelse 5 kakaosmør 995

Medikamentet pulveriseres og passeres gennem en B.S. No. 100-sigte og udrives med smeltet kakaosmør ved 45°C 20 til dannelse af en glat suspension. Blandingen omrøres godt og udhældes i forme med en nominel kapacitet på 1 g hver til dannelse af suppositorier.

25 30 35

Claims (4)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af tropyl-benzoat-derivater med den almene formel I 5 H0C - CH - CHQ . R. I 1 1 _M nch3 cho2 c-^ /)- R3 i1)

10 H2c - CH - CH2 V 10 * (endo) 2 2 hvori Ri betyder C1«4-alkyl, C1_4-alkoxy eller halogen, R2 betyder Ci_4-alkyl eller Ci_4-alkoxy, og R3 betyder 15 C1_4-alkyl eller, undtagen når betyder alkyl, hydrogen, eller farmakologisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at tropin og det tilsvarende syrehalo-genid med den almene formel IV X0C “Λ—/ R3 (IV) R2 hvori Ri, R2 og R3 har den ovenfor angivne betydning, og 25 X betyder halogen, omsættes på i og for sig kendt måde.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at et hydrohalogenidsalt af tropin opvarmes med syrehalogenidet i fraværelse af et opløsningsmiddel. 30

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at Ri og R2 hver især betyder methoxy, og R3 betyder hydrogen.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1,kendeteg ne t ved, at Ri, R2 og R3 hver især betyder methyl.