DK160904B - Reagens til koagulationsfaktorbestemmelse samt fremgangsmaade til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere - Google Patents
Reagens til koagulationsfaktorbestemmelse samt fremgangsmaade til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere Download PDFInfo
- Publication number
- DK160904B DK160904B DK596783A DK596783A DK160904B DK 160904 B DK160904 B DK 160904B DK 596783 A DK596783 A DK 596783A DK 596783 A DK596783 A DK 596783A DK 160904 B DK160904 B DK 160904B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- particles
- reagent
- blood
- average diameter
- alumina
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 title claims description 6
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 title claims description 6
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 title claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 3
- 239000003914 blood derivative Substances 0.000 title claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 27
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 17
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 claims description 9
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims 4
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 claims 2
- 229910052910 alkali metal silicate Inorganic materials 0.000 claims 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 12
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 12
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 5
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 229910021485 fumed silica Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical class CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 2
- CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 2-azaniumylethyl [(2r)-2,3-diacetyloxypropyl] phosphate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](OC(C)=O)COP(O)(=O)OCCN CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000220479 Acacia Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 101100515515 Arabidopsis thaliana XI-G gene Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000713575 Homo sapiens Tubulin beta-3 chain Proteins 0.000 description 1
- 241001071861 Lethrinus genivittatus Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 241000842783 Orna Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102100036790 Tubulin beta-3 chain Human genes 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000005171 mammalian brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003168 reconstitution method Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
DK 160904 B
Den foreliggende opfindelse angår et reagens til koagulationsfaktorbestemmelse samt en fremgangsmåde til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere, især bestemmelsen af antikoagulanter eller blod-5 koagulationsfaktorer. Opfindelsen er især rettet på forbedringer ved tidsprøver med aktiveret thromboplastin (APTT).
APTT-prøver anvendes konventionelt ved påvisning og overvågning af blodkoagulationsanomaliteter. Sådanne mangler kan hidrøre fra genetiske mangler eller skader eller fra au-10 toimmunsygdomme, hvilket resulterer i lave niveauer af plas-maproteinkoagulationsfaktorer, eller fra indgivelsen af antikoagulanter såsom heparin. Den praktiske udøvelse og fortolkning af APTT-prøver er konventionel og velkendt inden for teknikken.
15 Ved sådanne prøver benyttes en "aktivator” for Hage- man' s faktor. Hageman's faktor er et protein, der indgår i initieringen af blodkoagulation via en egenmekanisme. Aktivering af Hageman's faktor igangsætter en rækkefølge af enzymatiske omdannelser, der kulminerer i blodets koagulation. I overens-stemmelse hermed er aktivatorens funktion at stimulere en udtagen prøve til at koagulere, således at prøvens koagulationsevne kan fastslås. Prøvens koagulationsevne afprøves biologisk ved hjælp af den tid, det kræver at nå et givet slutpunkt såsom en bestemt viskositet eller en bestemt optisk tæthed.
^ Der kendes et stort antal stoffer til aktivering af Ha
geman's faktor, men der har kun været benyttet meget få med noget synderlig held ved koagulationsprøver, som har vist sig anvendelige i kommerciel skala og til rutinemæssig brug. Eksempler på aktivatorer, som har været anvendt ved koagulations-3 O
prøver, indbefatter materialer af siliciumdioxid fældet i gasfase (fumed silica) med en diameter fra 20 til ca. 60 nm (jfr. US patentskrift nr. 3.880.714) og opløsninger af natriumellagat (jfr. US patentskrift nr. 3.486.981).
De for tiden tilgængelige biologiske prøver til bedøm-35 melse af blods koagulationsfunktion lider alle af forskellige 2
DK 160904 B
mangler. Således kan den ene prøve f.eks. være fuldtud tilfredsstillende i én henseende, men være mindre fordelagtig i andre sammenhænge. F.eks. er den vandopløselige aktivator natriumellagat ønskelig, fordi brugeren af den omhandlede prø-5 ve kan forsynes hermed i form af vandige opløsninger, og rekonstituering eller suspendering af aktivatoren er derfor u-nødvendig. Biologiske prøver, til hvilke denne aktivator benyttes, har imidlertid vist sig at udvise uønskeligt høje variationskoefficienter med hensyn til præcisionen fra dag til 10 dag.
Aktivatoren, som opererer ved hjælp af siliciumdioxid fældet i gasfase, således som nærmere beskrevet i US patentskrift nr. 3.880.714 opfører sig dog mere tilfredsstillende, men lider alligevel af den ulempe, at brugeren nødvendigvis må frem-15 stille en vandig opløsning af aktivatoren, før den anvendes.
Den foreliggende opfindelses formål er således at forbedre fremgangsmåder og reagenser med hensyn til opførsel ved blodkoagulationsprøver, navnlig for så vidt angår deres reproducerbarhed ved laboratoriebrug i klinikken, såvel 20 som med hensyn til at gøre prøvens afbenyttelse mere bekvem, især ved fremstillingen og brugen af reagenser, der tilvejebringes til gennemførelse af den biologiske afprøvning.
Dette formål opnås med et reagens af den i krav l's indledning angivne art, hvilket reagens er ejendommeligt 25 ved det i krav 1·s kendetegnende del angivne.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er af den i krav 6's indledning angivne art, og den er ejendommelig ved det i dette kravs kendetegnende del angivne.
Der tilvejebringes således et nyt reagens til bestem-30 melse af koagulationsfaktor, og dette reagens kan også indbefatte et antimikrobielt middel.
Den særlige art af kolloidalt siliciumdioxid, som herved anvendes, er kritisk til opnåelse af den foreliggende opfindelses hovedsigte, nemlig tilvejebringelsen af et stabilt, van-35 digt reagens, som kan fyldes i beholdere, der indgår i et reagenssæt til gennemførelse af koagulationsprøver, og derpå op- 3
DK 160904 B
bevares i langvarige tidsrum uden at udfældes eller agglomere-res fra kolloidal dispersion. Hidtil anvendte aktivatorer såsom de siliciumdioxidpartikler, der forhandles under betegnelsen "Aerosil" ®, således som anvist i US patentskrift nr.
5 3.880.714, er ikke stabile i kolloidale dispersioner udover sådanne tidsrum og skal derfor fremstilles af den bruger, som skal benytte prøven, ud fra et tørt reagens. Hertil kommer, at sådanne tidligere anvendte aktivatorer har krævet tilstedeværelsen af et suspenderingsmiddel såsom acacia-gummi for at hol-10 de aktivatorpartiklerne i homogen suspension. Dette er derimod ikke tilfældet med det her omhandlede kolloidale siliciumdioxid-reagens, der fortrinsvis er fri for suspenderingsmiddel.
De i reagenset ifølge opfindelsen anvendte kolloidale partikler kan være fremstillet ved den i US patentskrift 15 nr. 2.244.325 angivne metode, og de er kommercielt tilgængelige inden for et helt interval af partikeldiametre. Partiklerne med en gennemsnitsdiameter på 70 nm udviser et overfladeareal på under 50 m2/g. De er ikke-agglomererede, i det væsentlige kuglerunde af form, negativt ladede og 20 stabiliseret med en modion såsom natrium. Selv om gennemsnitspartikeldiameteren kan ligge i området fra 4 til 100 nm, opnås de bedste resultater dog med partikler med diametre på over 50 nm, idet størrelsen 70 nm foretrækkes. Blandinger af partikler med forskellige diametre inden for hele inter-25 vallet fra 4 til 100 nm kan dog benyttes.
De aluminiumoxidovertrukne siliciumdioxidpartikler udviser samme egenskaber som aluminiumoxidovertrækket frem for si- liciumdioxidkernens egenskaber. Selv om det foretrækkes at anvende aluminiumoxidovertrukne partikler, opnås der dog til-30 fredsstillende resultater med kolloidalt siliciumdioxid fremstillet således som ovenfor beskrevet eller med en blanding af begge typer af partikler.
De kolloidale partikler tilvejebringes i vandig dispersion i en partikelkoncentration fra ca. 0,01 til ca. 0,2% 35 efter vægt/rumfang, men fortrinsvis på ca. 0,1% efter vægt/-rumfang. Koncentrationen af kolloidale partikler er ikke kri
O
DK 160904 B
4 tisk og kan i virkeligheden varieres således, at den er i overensstemmelse med eller forenelig med den instrumentering, som påregnes anvendt, og kan beregnes således, at der tilvejebringes optimale resultater ved den biologiske prøve.
5 Reagenset indeholder en blodpladeerstatning. Dette er en velkendt komponent, som anvendes ved koagulationsprøver. Herved tilvejebringes den pladefaktorlignende aktivitet, der behøves til initiering af koagulation. Cephalinhol-dige ekstrakter fra pattedyrhjerner har været kommercielt til-10 gængelige til dette formål allerede i nogen tid. Blodplader som sådanne kunne i og for sig anvendes, men de frembyder et problem, eftersom blodlegemer er opbevaringsinstabile og ikke særlig praktiske til brug i kommercielle produkter.
Reagenset skal pufres til en pH-værdi fra 7 til 8, 15 . men fortrinsvis indstilles på pH på ca. 7,25 - 0,05. Hen sigtsmæssige puffere vil være indlysende for fagmanden. En foretrukken puffer er N-2-hydroxyethylpiperazin-N^-2-ethan-sulfonsyre.
Reagenset bør også indeholde et antimikrobielt middel.
20 Sådanne midler er velkendte og indbefatter sådanne bakterio-stater som phenol og natriumazid. Disse forøger reagensets hyldelevetid, efter at dets opbevaringsbeholder er åbnet.
Reagenset behøver ikke indeholde suspenderingsmiddel. Disse midler har været anvendt almindeligt for at bevare ho-25 mogeniteten hos suspensioner af aktivatorpartikler, men de udøver ingen kendt biokemisk aktivitet ved koagulationsprøverne, idet deres virkning er begrænset til rent mekaniske påvirkninger. Brugen af sådanne midler ved koagulationsprøver er f.eks. beskrevet i US patentskrift nr. 3.395.210.
30 Reagenset kan anvendes ved en hvilken som helst bio logisk prøve, ved hvilken aktivering af Hageman's faktor udføres som del af metoden, navnlig ved APTT-prøven og dens ovenfor beskrevne udførelsesformer. Ved gennemførelse af sådanne prøver blandes det her omhandlede kolloidale siliciumdi-35 oxidreagens med den udtagne prøve og en kilde til calciumioner og inkuberes, indtil koagulationens slutpunkt nås, således som bestemt ved viskositet eller ved andre inden for teknik- 5
DK 160904B
O
ken kendte foranstaltninger.
De følgende eksempler tjener til nærmere belysning af opfindelsen.
5 Eksempel 1
Kolloidalt siliciumdioxid "NALCOAG" ® 1060 fås fra Nalco Chemical Company. De kolloidale partikler i dette produkt har en gennemsnitspartikelstørrelse på 60 nm og et overfladeareal på 50 m /g. Det kolloidale siliciumdioxid dispergeres i 1020 ml 10 destilleret vand indeholdende kaninhjernecephalin, 11,9 g N-2-hydroxyethylpiperazin-N'*'-2-ethansulfonsyre og 1,5 g phe-nol, indtil der opnås en partikelkoncentration på ca. 0,1% efter vægt/rumfang. Dette reagens viser sig at kunne opbevares i uåbnet tilstand i tidsrum på over 3 uger og helt op 15 til 6 måneder og endda 1 år, uden at der sker agglomerering eller svigt på anden måde, for derefter at opføre sig helt tilfredsstillende ved den pågældende biologiske prøve. Det anvendes ved en APTT-prøve som følger: 0,1 ml prøveplasma af-pipetteres i en kuvette eller et reagensglas. Reagenset omrø-20 res, og 0,1 ml deraf sættes til en beholder indeholdende den udtagne prøve. Blandingen inkuberes i nøjagtig 5 minutter, hvorefter der tilsættes 0,1 ml 0,025 M calciumchloridopløs-ning af 37°C. Den udtagne prøves koagulationstid optegnes. Gennemsnitskoagulationstiderne til de nærmeste 0,1 sekund 25 for duplikatbestemmelser er anført som den aktiverede delvise thromboplastintid. Reproducerbarheden ved prøver foretaget fra dag til dag og i løbet af samme dag viser sig tilfredsstillende ved denne bologiske afprøvningsmetode.
30 Eksempel 2
Eksempel 1 gentages med den undtagelse, at de anvendte partikler er af aluminiumoxidovertrukket siliciumdioxid fra Nalco Chemical Company med en gennemsnitsdiameter på 70 nm og et overfladeareal på under 50 m /g.
35 Den opførsel, som konstateres ved denne biologiske prø vemetode, sammenlignes med den, der kendes fra kommercielt tilgængelige APTT-prøver under anvendelse af et rekonstitue-
O
6
DK 160904 B
ret, lyofiliseret præparat indeholdende siliciumdioxid fældet i gasfase (fumed silica) som kontaktaktivatoren (fra General Diagnostics) samt med endnu et reagens, hvortil anvendes.en vandig opløsning af natriumellagat som aktivator (fra Dade, 5 Actin reagent). Præcisionen inden for det enkelte forsøg ved - disse tre prøver sammenlignes ved at gennemføres på to forskellige instrumenter (instrumenter fra henholdsvis BBL Fibro-meter og Lancer Coagulyzer), idet der gennemføres tyve efter hinanden følgende bestemmelser hver på sammenbragte normale 10 og sammenbragte anormale koagulationskontrolprøver ("Orne- ga" ^ Level 1 og Level 2 kontroller fra Hyland Diagnostics Division of Travenol Laboratories, Inc., USA)..Præcisionen fra. dag til dag ved disse tre prøver sammenlignes ved gennemførelse af ovenstående kontrolforsøg på de samme instrumenter 15 i duplikat på hver dag i 10 dage. Resultaterne fremgår af nedenstående tabel: 20 25 30 35
7 DK 160904 B
> Π P > P OO
I «, «, · V
U P i—i U P O
<#> a>
Id) 10 03 to Ό tn
P i—I , Μ P
P « 0 4-> (0 <D
id 03 σ c> σ (d'bcnoO'i C Ή * σ G P * *· (0 (0 > O O id id > o o p p p <—i p p p ω n) h w « οι ο e +> ^ i P — 3 P P 3 P p •h c οι P C 0 p in 03 no ln p in 03 co p PEC* - · PEG - dj o 3 d) cn tr> id ø 3 O cn • Z 3 A! cn cn id £ G AC r- to
Cn G 0 03 G 0 id a) to i) to TQ U — 0 0- E > cti id > m cd s . in
id u O O U p O
tn dc p of1 o ρ Ή o i tu id) p id <0 tn C id 03 cn
Ο P P 0 u p P
3 -Η00ΓΟ cn 03 ·Ηιΰ0Ο ’d’ 0 P 03 σ “ ' G p 03 0i ' ~
03 P 3 Ρ Ο Ο Ρ P 3 ·Η i—I O
c tn ro > in id >
•ri Ρ Ή P 4-) P
Γη ω ø o ø3 w id 1-4 0 PØ O EP'- PEP'-
P 3 -ri ri G 3 -ri P
PIPCØ O fc G 0
C W) ØJ P U3 X 1) t) > H
O EC*· - cn E C - *
x ø 3 co c øpt^cN
U5 G AC CN CN O G Al CO
C C 0 P C 0 O ø tn P øø •ri H3 O — id øj o -
P -Η Η Ρ P
h id m x · h 3 in x · ρ G c >00 σι σ c o > cc ^ ρ 3 a> -π · - pidøp · * ø^tT'p uo o 0οσΌ uo p XI id id £ X) Al (0 E ^ ø O Cl) 3 0 0? B AC 05 P t> p 05 -ri U 0 u
P -ri EP
0 p P P
E -ri O -ri p w I ø c cn i 0 O 03 tn ø 0 ffi C P P p p P p 0 ø ø cn m P øøøm p p il d O' ' - 0 4i 0 C ' ·-
0 A! C -ri O O .¾ G Ρ O P
3 ø > 0 3 0 >
ø ri Ρ p in ri Ρ P
tn P C/3 id pptoø
P p 0 P
øø σ ø 01 > ©· > •so tn o in v p ød p P 0 -ri
0 X Ό X
03 O P G O P ~
C g P P 3 E ·Η P
3330 in 3 G 0 in p ro ø3 o co c -ri in 03 æ p C G E G - ' O G E g o P 030 oo p p ø 3 σ γ- p ecacp cn tn g g ,y r- I- in 3 c ø p 3 c ø p p ø tn u p ø tn U < O — fUrfU'-' fti Mc P & PM IH % ø 0
P P
ø 0
PEP PEP
3 0 0 3 0 0
ø u n ø ri N
E XI >1 E X! ΪΡ
3 p ri P 3 ·Η P P
P ep ø 3 Ρ P 0 3 p o σ p o σ in J C id in XI G id
GoaidO CCQidO
HfflJU hcqJu
8 DK 160904 B
> 'TO
• % h U m m
dP
I d) Ό in 54 >4 4> (C O) 10 oo (0 Ό O' *· *
θ' β -4 .-4 PO
id π) > I—I 4-> 44 i—i 03 (d d> E 4J ~ 3 -4 u ri G Q) li in d 'T rn +j e c id 0) P σι id Z c X ru Γ" s 0) o) in O — tn id · Ό > n i—i * *· ^ h U cm ro
•4 dP
4-1 tn i tu id id Ό m t) D >4 r-t -η id ω t" h (0 i—I C31 - 4 U -4 C -4 O cm m in id > 4J U4 P ό co id C ni <D E 4> ~
g P -4 U
P fc C Φ Μ in Ό ro co 4> EC · in φ p oo vo
c c x CM ID
H Cd) φ » p "3 O ~ hq) 'ri H 4) * h <u in o > m id E c £
Η O d) g O t-4 CM
o n S' g Λ Λ id 3 id -4 o 'ri
B ix. « U
a d ffl '4 CQ ω I d> Ό in
.Id 4) 54 H
li d) id d) in i-4 λ: ό t n v X c -ri O cm in P id > r4 54 41 41 PI 41 C0 id cn 54 •e· 5 tn > S -§ 1 ’i 2 O 41 ^ in E -<4 54 c 3 C d> o -π in ό r-- m •4 C E g
Oj *4 d) P O σι -π E c x ro r- u 3 Cd) S 5 Γ h id 4) id 4) e id E id 14
4 54 54 O
G 4-> O C 4> G
4> O ·4 C O -4 id c ή ϋ i ·4 υ i
d) —. 4) I H _ 4) I CM
g (¾) id η /¾ id -4 3^40 idO1 r4 o 3 H id p 5 3 Ij 3 5 id 4) Cn Cr> +-1 d) oiCi+i dl in Q)idC> nj rd Π > c É O O *4 SOO -4 h o x x, z <5 « w z 9
O
DK 160904 B
Ovenstående data demonstrerer den forbedrede effektivitet hos det med siliciumdioxid og/eller med aluminiumoxid over-trukne, kolloidalt suspenderede siliciumdioxidreagens. Særlig bemærkelsesværdig er den formindskede procentvise variations-5 koefficient ved praktisk udøvelse fra dag til dag hos det forbedrede aktivator/reagens ifølge opfindelsen sammenlignet med det andet flydende reagens, natriumellagat og de gunstige resultater, som opnås i sammenligning med et reagens på grundlag af siliciumdioxid fældet i gasfasen (fumed silica), der vi-10 ser sig mindre fordelagtigt, fordi det kræver rekonstituering før brug.
15 20 25 30 35
Claims (8)
1. Reagens til koagulationsfaktorbestemmelse indeholdende vand, et stof med blodpladefaktoraktivitet og kol-loidale siliciumdioxid- eller med aluminiumoxid overtrukne 5 kolloidale siliciumdioxidpartikler med en gennemsnitsdiameter fra 4 til 100 nm, hvilket reagens er pufret til en pH-værdi på 7-8, kendetegnet ved, at partiklerne er fremstillet ved en fremgangsmåde, ved hvilken (a) en alkalimetalsil icatopløsning' bringes i kontakt med et ionbyttermateriale 10 til fjernelse af alkalimetalioner fra silicatopløsningen, og (b) de kolloidalt dispergerede partikler udvindes fra ionbyttermaterialet.
2. Reagens ifølge krav 1, kendetegnet ved, at partiklernes gennemsnitsdiameter er fra 60 til 70 nm.
3. Reagens ifølge krav 1, kendetegnet ved, at partiklerne er aluminiumoxidovertrukne siliciumdioxidpartikler med en gennemsnitsdiameter på 70 nm og med et overfladeareal på under 50 m2/g.
4. Reagens ifølge krav 1, 2 eller 3, kendeteg-20 net ved, at det er praktisk talt fri for suspenderingsmidler.
5. Reagens ifølge ethvert af de foregående krav, kendetegnet ved, at det desuden omfatter et anti-mikrobielt middel.
6. Fremgangsmåde til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere, ved hvilken Hageman's faktor aktiveres med en kontaktaktivator i nærværelse af et stof med blodpladefaktoraktivitet, hvorhos kontaktaktivatoren indeholder kolloidale siliciumdioxid- eller med aluminiumoxid 30 overtrukne kolloidale siliciumdioxidpartikler med en gennemsnitsdiameter fra 4 til 100 nm, hvorhos reagenset omfatter vand og er pufret til en pH-værdi på 7-8, kendetegnet ved, at partiklerne er fremstillet ved en fremgangsmåde, ved hvilken (a) en alkalimetalsilicatopløsning bringes 35 i kontakt med et ionbyttermateriale til fjernelse af alkalimetalioner fra silicatopløsningen, og (b) de kolloidalt XI DK 160904B dispergerede partikler udvindes fra ionbyttermaterialet.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at partiklerne gennemsnitsdiameter er 60 til 70 nm.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendeteg net ved, at partiklerne er af aluminiumoxidovertrukket siliciumdioxid med en gennemsnitsdiameter på 70 nm og med et overfladeareal på under 50 m2/g.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37593682 | 1982-05-07 | ||
| US06/375,936 US4455377A (en) | 1982-05-07 | 1982-05-07 | Clotting assay and reagent therefor |
| PCT/US1983/000645 WO1983004105A1 (en) | 1982-05-07 | 1983-05-04 | Clotting assay and reagent therefor |
| US8300645 | 1983-05-04 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK596783A DK596783A (da) | 1983-12-23 |
| DK596783D0 DK596783D0 (da) | 1983-12-23 |
| DK160904B true DK160904B (da) | 1991-04-29 |
| DK160904C DK160904C (da) | 1991-10-14 |
Family
ID=23482977
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK596783A DK160904C (da) | 1982-05-07 | 1983-12-23 | Reagens til koagulationsfaktorbestemmelse samt fremgangsmaade til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4455377A (da) |
| EP (1) | EP0108131B1 (da) |
| AU (1) | AU547448B2 (da) |
| CA (1) | CA1192823A (da) |
| DE (1) | DE3374148D1 (da) |
| DK (1) | DK160904C (da) |
| ES (2) | ES8501715A1 (da) |
| IT (1) | IT1203671B (da) |
| WO (1) | WO1983004105A1 (da) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1985004426A1 (en) * | 1984-03-26 | 1985-10-10 | International Health Services | A method of determining the clotting time of blood and particulate reagents therefor |
| FR2583881A1 (fr) * | 1985-06-21 | 1986-12-26 | Girolami Antoine | Procede et solution pour determiner les temps de howell et realiser les tests de tolerance a l'heparine |
| EP0482088B1 (en) * | 1989-07-20 | 1999-03-31 | Analytical Control Systems, Inc. | Improved stable coagulation controls |
| ATE140034T1 (de) * | 1990-04-17 | 1996-07-15 | Analytical Control Syst Inc | Koagulationsassays und reagenzien |
| US5569590A (en) * | 1990-04-17 | 1996-10-29 | Analytical Control Systems, Inc. | Initial screen for abnormal platelet condition |
| US5637452A (en) * | 1992-10-02 | 1997-06-10 | Analytical Control Systems, Inc. | Kit for an initial screen for abnormal platelet condition comprising propyl gallate or tannin and a metal ion |
| US6238578B1 (en) | 1996-12-09 | 2001-05-29 | Sherwood Services Ag | Method for dispensing separator gel in a blood collection tube |
| ES2390271T3 (es) * | 2003-09-22 | 2012-11-08 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Fosfolípidos solubles para uso en ensayos de factores de coagulación |
| MX2007000918A (es) * | 2004-07-22 | 2007-12-04 | Hemo Nanoscience Llc | Composiciones y metodos para tratar sangrado excesivo. |
| US8319002B2 (en) * | 2007-12-06 | 2012-11-27 | Nanosys, Inc. | Nanostructure-enhanced platelet binding and hemostatic structures |
| CN101883545B (zh) * | 2007-12-06 | 2013-08-07 | 纳诺西斯有限公司 | 可再吸收的纳米增强型止血结构和绷带材料 |
| KR102577993B1 (ko) * | 2018-04-06 | 2023-09-18 | 프리시젼바이오 주식회사 | 유체 검사 카트리지, 이를 포함하는 유체 검사장치 및 검사장치의 제어방법 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3293134A (en) * | 1961-09-08 | 1966-12-20 | Warner Lambert Pharmaceutical | Diagnostic reagent composition for determining blood coagulation factors and method of use |
| US3395210A (en) * | 1964-02-07 | 1968-07-30 | Warner Lambert Pharmaceutical | Lyophilized diagnostic reagent for the determination of blood coagulation factors |
| US3486981A (en) * | 1965-03-15 | 1969-12-30 | Roy E Speck | Substances relating to testing of blood-coagulation |
| US3880714A (en) * | 1973-07-18 | 1975-04-29 | Warner Lambert Co | Diagnostic reagent |
-
1982
- 1982-05-07 US US06/375,936 patent/US4455377A/en not_active Expired - Fee Related
-
1983
- 1983-05-04 DE DE8383901990T patent/DE3374148D1/de not_active Expired
- 1983-05-04 EP EP83901990A patent/EP0108131B1/en not_active Expired
- 1983-05-04 AU AU16053/83A patent/AU547448B2/en not_active Ceased
- 1983-05-04 WO PCT/US1983/000645 patent/WO1983004105A1/en active IP Right Grant
- 1983-05-05 CA CA000427554A patent/CA1192823A/en not_active Expired
- 1983-05-06 ES ES522158A patent/ES8501715A1/es not_active Expired
- 1983-05-06 IT IT67498/83A patent/IT1203671B/it active
- 1983-12-23 DK DK596783A patent/DK160904C/da not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-09-17 ES ES535986A patent/ES8601481A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK160904C (da) | 1991-10-14 |
| ES535986A0 (es) | 1985-10-16 |
| WO1983004105A1 (en) | 1983-11-24 |
| DK596783A (da) | 1983-12-23 |
| IT8367498A0 (it) | 1983-05-06 |
| US4455377A (en) | 1984-06-19 |
| AU1605383A (en) | 1983-12-02 |
| ES522158A0 (es) | 1984-12-01 |
| DK596783D0 (da) | 1983-12-23 |
| EP0108131A4 (en) | 1985-04-03 |
| ES8501715A1 (es) | 1984-12-01 |
| CA1192823A (en) | 1985-09-03 |
| IT1203671B (it) | 1989-02-15 |
| EP0108131A1 (en) | 1984-05-16 |
| ES8601481A1 (es) | 1985-10-16 |
| EP0108131B1 (en) | 1987-10-21 |
| DE3374148D1 (en) | 1987-11-26 |
| AU547448B2 (en) | 1985-10-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK160904B (da) | Reagens til koagulationsfaktorbestemmelse samt fremgangsmaade til bestemmelse af blods eller et blodderivats evne til at koagulere | |
| US4731330A (en) | Whole blood control sample | |
| Pratt et al. | Complex of bacteriophage M13 single-stranded DNA and gene 5 protein | |
| US4038147A (en) | Method for detecting endotoxins | |
| Sefton et al. | Does surface chemistry affect thrombogenicity of surface modified polymers? | |
| JP3167415B2 (ja) | 固相免疫検査における抗原細胞の保存方法 | |
| JPH02501115A (ja) | 血小板凝集試薬、試薬容器及びｅｄｔａ‐凝固防止血液中の血小板の凝集の測定方法 | |
| Keller 3rd et al. | Strongylocentrotus purpuratus spindle tubulin. I. Characteristics of its polymerization and depolymerization in vitro. | |
| EP0870200A1 (en) | Method, reagent and kit for analysis of haemostatic activity | |
| CN112111456B (zh) | 一种循环肿瘤细胞分离富集试剂盒 | |
| CN112852725B (zh) | 利用蛋白交联纳米亲和微球提取纯化干细胞外泌体制备方法及应用 | |
| EP0019939A1 (en) | Serum and plasma clarification process | |
| NO178578B (no) | Fremgangsmåte for ekstraksjon av tromboplastiner samt anvendelse av det ekstraherte tromboplastin | |
| JPS6360862B2 (da) | ||
| US6150121A (en) | Assessing immunological state of transplant recipients | |
| WO1993008269A1 (en) | A method for enriching fetal progenitor cells from maternal blood | |
| CN113980814B (zh) | 一种用于外周血红细胞快速裂解的组合物及其应用 | |
| Mondoro et al. | Restoration of in vitro responses in platelets stored in plasma | |
| WO2021010369A1 (ja) | ウイルスを用いた循環腫瘍細胞の検出方法 | |
| EP1625405A1 (en) | Activation mixture | |
| Crago et al. | Monocyte chemoattractant activity of Ser195→ Ala active site mutant recombinant α-thrombin | |
| US20050239153A1 (en) | Method for detecting the von willebrand factor-cleaving protease activity of adamts-13 | |
| JPH0210160A (ja) | 固体表面への細胞の固定化方法 | |
| Christou et al. | Partial analysis and purification of polymorphonuclear neutrophil chemotactic inhibitors in serum from anergic patients | |
| US6506308B1 (en) | Methods for the removal of organic substances from aqueous solutions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |