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Publication number: DEF0017709MA
Authority: DE

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLANDFEDERAL REPUBLIC OF GERMANY

Tag der Anmeldung: 10. Juni 1955 Bekanntgemaoht am 5. Juli 1956Registration date: June 10, 1955 Announced on July 5 , 1956

DEUTSCHES PATENTAMTGERMAN PATENT OFFICE

Zur Gewinnung eines Kallikrein-Iniaktivators aus Lymph- und Ohrspeicheldrüsen sowie dem Pankreas von Rindern und aus Blut wurde ein Verfahren entwickelt, das darin besteht, daß man die frischen Organe oder das Blutserum mit saurem verdünntem Alkohol in der Wärme extrahiert, die Extrakte im Vakuum einengt und mit Äther ausschüttelt, aus der wäßrigen Phase den Inaktivator mit Alkohol, Aceton oder einem anderen mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel ausfällt, den Niederschlag in verdünnter Essigsäure löst, unwirksame Begleitstoffe durch Einstellung schwach alkalischer Reaktion entfernt und den Inaktivator erneut mit Alkohol, Aceton oder einem anderen mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel ausfällt.To obtain a kallikrein iniactivator from Lymph and parotid glands as well as the pancreas of cattle and blood became a procedure which consists in diluting the fresh organs or the blood serum with acid Alcohol extracted in the heat, the extracts concentrated in a vacuum and shaken out with ether the aqueous phase the inactivator with alcohol, acetone or another miscible with water organic solvent precipitates, the precipitate dissolves in dilute acetic acid, ineffective Accompanying substances are removed by setting a weakly alkaline reaction and the inactivator again with alcohol, acetone or another water-miscible organic solvent fails.

Es wurde nun gefunden, daß der Inaktivator nach dem gleichen Verfahren bei guter Ausbeute auch aus anderen Organen isoliert werden kann, z. B. aus Leber, Milz oder Colostrum. ,It has now been found that the inactivator can be obtained by the same procedure with good yield can also be isolated from other organs, e.g. B. from liver, spleen or colostrum. ,

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1000 g Rinderleber werden im Fleischwolf zerkleinert und zweimal mit je 5 1 Aceton behandelt. Das Aceton wird durch Absaugen weitgehend entfernt und das noch feuchte Material 2 bis 3 Stunden mit 1200 ecm Essigsäure und 2800 ecm o,6~⁰/oigem Alkohol bei 50⁰ extrahiert. Die alkoholische1000 g of beef liver are minced in a meat grinder and treated twice with 5 liters of acetone each time. The acetone is largely removed by aspiration and the still moist material extracted 6 ~ ⁰ / pc alcohol at 50 ⁰ to 3 hours at 1200 cc of acetic acid and 2800 cc O 2. The alcoholic

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F 17709 IVa/30 hF 17709 IVa / 30 h

Lösung enthält 600 000 Inaktivatoreinheiten. Der Extrakt wird im Vakuum auf etwa 1200 ecm einr geengt und mit demselben Volumen Äther ausgeschüttelt, wobei dunkle Farbstoffe sowie Reste von Fett in Lösung gehen. Die wäßrige Phase wird nun mit Aceton versetzt und der entstehende Niederschlag abzentrifugiert und in verdünnter Essigsäure gelöst. Man bringt mit Ammoniaklösung auf schwach alkalische Reaktion, zentrifugiert einen unwirksamen Niederschlag ab und fällt den Inaktivator mit der fünffachen Menge Alkohol. Ausbeute 110 000 Inaktivatoreinheiten in 1,1 g Trockenpulver nach Trocknung mit ÄTther.Solution contains 600,000 inactivator units. The extract is adjusted to about 1200 ecm in a vacuum concentrated and shaken out with the same volume of ether, with dark coloring matter and residues of fat going into solution. The aqueous phase is then mixed with acetone and the resulting Centrifuged precipitate and dissolved in dilute acetic acid. Bring with ammonia solution on weakly alkaline reaction, an ineffective precipitate is centrifuged off and falls the inactivator with five times the amount of alcohol. Yield 110,000 inactivator units in 1.1 g dry powder after drying with ether.

Example 2

1000 g Rindermilz werden im Fleischwolf zerkleinert und zweimal mit je ,5 1 Aceton behandelt. Weiterverarbeitung wie für Leber angegeben. Der essigsaure alkoholische Extrakt enthält 95 000 Inaktivatoreinheiten. Die Ausbeute nach der Fällung mit Alkohol und Äthertrocknung beträgt 41 000 Inaktivatoreinheiten in 0,4 g-1000 g of beef spleen are ground up in a meat grinder and treated twice with 5 liters of acetone each time. Further processing as indicated for liver. the acetic acid alcoholic extract contains 95,000 inactivator units. The yield after precipitation with alcohol and ether drying is 41,000 inactivator units in 0.4 g

Example 3

1000 ecm Rindercolostrum vom ersten Tag werden mit 1000 ecm destilliertem Wasser verdünnt: Nach Zugabe von 120 ecm Eisessig" und 4600 ecm Alkohol wird 1 Stunde lang bei 50° extrahiert. Im alkoholischen Filtrat befinden sich 4000 Inaktivatoreinheiten. Die Weiterverarbeitung erfolgt wie- bei Leber angegeben. Die Ausbeute nach Fällung mit Alkohol und Äthertrocknung beträgt 2200 Inaktivatoreinheiten in 0,2 g.1000 ecm beef colostrum from day one are diluted with 1000 ecm of distilled water: after adding 120 ecm of glacial acetic acid "and 4600 ecm of alcohol is extracted for 1 hour at 50 °. There are in the alcoholic filtrate 4000 inactivator units. Further processing takes place as indicated for Leber. The yield after precipitation with alcohol and ether drying is 2200 inactivator units in 0.2 g.

Claims

Claim:

Process for obtaining a kallikrein inactivator according to patent application K 22401 IV a / 30h, characterized; that in place of the ones mentioned in the main patent application Lymph and parotid glands and pancreas of cattle and blood of other organs Ruminants, such as the liver, spleen or colostrum, can be used as starting materials.

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