Verfahren zur Herstellung eines Aneurinabkömmlings
My@r.bäck und Mitarbeiter (Svensk-Kemisk
Tidskrift, 57, 1aq. [19q.5]) haben behauptet, eine
Lösung des Cocarboxyl,ase,disulfids durch Einwir-
kung von Jod auf Cocarboxylase in alkalischer
Lösung hergestellt zu haben. Sie sichreiben jedoch
nichts über die Möglichkeit, das genannte Disulfid
nach .diesem Verfahren in Substanz zu isolieren.
Aus K a r r e r und V i s c o n t i n i (Helv. Chimica
Acta, Bd. 29 [19q.6], S. 711 und 198a) geht hervor,
daß das nicht gelingt, denn es wird :dabei ein Präparat erhalten, das im Warburg-Test
keine Cocarboxylasewirkung zeigte.Process for the preparation of an aneurine derivative My@r.bäck and staff (Svensk-Kemisk
Tidskrift, 57, 1aq. [19q.5]) have claimed a
Solution of the cocarboxyl, ase, disulfide by exposure
kung of iodine to cocarboxylase in alkaline
Having made the solution. However, you rub yourself
nothing about the possibility of said disulfide
after .this method to isolate in substance.
From K arrer and V iscontini (Helv. Chimica
Acta, Vol. 29 [19q.6], pp. 711 and 198a) it emerges,
that this does not succeed, because it will: thereby obtain a preparation that showed no cocarboxylase effect in the Warburg test.
Nach vorliegender Erfindung ist .das im Warburg-Test wirksame Cocarboxyl.as@e-di,sulfid
erstmalig dadurch hergestellt worden, daß man Coca,rboxylase mit Hilfe von Chlor,
Brom oder Wasserstoffsuperoxyd in alkalisch.eir Lösung zum entsprechenden Disulfid
oxydierte. Das Hydrochlorid
dieser Verbindung hat die Summenformel
C24 Hag Oll, Na S2 P4 - 2 H Cl und folgende Konstitutionsformel
Das Cocarboxylase-disulfid sst als salzsaures Salz sehr leicht :in Wasser löslich..
Es ist löslich in Methanol und Äthylalkohol und nahezu unlöslich in' den anderen
üblichen organischen Lösungsmitteln.According to the present invention, the Cocarboxyl.as @ e-di, sulfide effective in the Warburg test has been produced for the first time by oxidizing cocarboxylase with the aid of chlorine, bromine or hydrogen peroxide in an alkaline solution to form the corresponding disulfide. The hydrochloride of this compound has the empirical formula C24 Hag Oll, Na S2 P4 - 2 H Cl and the following constitutional formula As a hydrochloric acid salt, cocarboxylase disulphide is very easy: soluble in water. It is soluble in methanol and ethyl alcohol and almost insoluble in the other common organic solvents.
Die neue Verbindung ist wegen ihrer Cocarboxylasewirkung von hohem
therapeutischem Interesse. Es wurde seit längerem vermutet, daß sie die natürjiche
wirksame Form des Vitamins Bi darstellt. Bei;spiel i 26 g Cocarboxylase werden in,
i5o ccm Wasser gelöst und auf -5° gekühlt. Diese Temperatur m,uß bei allen nahfolgenden
Verfahrensstufen beibehalten werden. Eine Lösung von 2o g Ätzna:tron in 25 ccm Wasser
und i5o ccm Methanol werden langsam zugegeben und 3,55 g Chlor in das Gemisch eingeleitet.
Danach bleibt das Ganze noch 15 Minuten stehen, wird dann mit 5 1 Aceton gefällt
und absitzen gelassen. Das überstehende Lösungsmittel gießt man daraufhin
ab, suspendiert den Rückstand in 45o ccm Methanol und leitet bis zur schwach
kongosauren Reaktion Chlorwasserstoff ein, wobei das salzsaure Salz des Cocarboxylasedisulfids
in Lösung geht. Nach dem Absaugen des gebildeten Kochsalzes wird das Filtrat in
5 1 Aceton eingerührt. Das ausgefallene amorphe Produkt wird abgesaugt, mit Äther
gewaschen und im Exsiccator über Phosphorpentoxyd getrocknet. B e.i.spi e1
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23 g Cocarlboxylase werden in 75 ccm Wasser gelöst und bei -5° mit
einer kalten Lösung von io g Ätznatron in 15 ccm Wasser und ioo ccm Methanol langsam
versetzt. Bei der anschließenden Oxydation durch Zugabe von 2,5 g Wasserstoffperoxyd
(3oo/oig) wird die Temperatur unterhalb -5° gehalten. Nachdem das Gemisch noch 15
Minuten gerührt worden ist, wird nach Beispiel i aufgearbeitet. Beispie.l 3 23 g
Cocarboxylase werden bei -5° mit io g Ätznatron in 75 ccm Wasser und ioo ccm Methanol
gelöst und -durch Zusatz von 5 g Brom zum Disulfid oxydiert. Die Aufarbeitung
erfolgt nach Beispiel i.The new compound is of great therapeutic interest because of its cocarboxylase activity. It has long been suspected that it is the naturally effective form of vitamin Bi. For example, 26 g of cocarboxylase are dissolved in 150 cc of water and cooled to -5 °. This temperature must be maintained in all subsequent process stages. A solution of 20 g of caustic soda in 25 cc of water and 150 cc of methanol are slowly added and 3.55 g of chlorine are introduced into the mixture. Then the whole thing remains for 15 minutes, is then precipitated with 5 l of acetone and allowed to settle. The supernatant solvent is then poured off, the residue is suspended in 450 cc of methanol and hydrogen chloride is passed in until the reaction is weakly Congo-acidic, the hydrochloric acid salt of the cocarboxylase disulfide dissolving. After the sodium chloride formed has been filtered off with suction, the filtrate is stirred into 5 l of acetone. The precipitated amorphous product is filtered off with suction, washed with ether and dried over phosphorus pentoxide in a desiccator. For example , 23 g of cocarboxylase are dissolved in 75 cc of water and a cold solution of 10 g of caustic soda in 15 cc of water and 100 cc of methanol are slowly added at -5 °. During the subsequent oxidation by adding 2.5 g of hydrogen peroxide (3oo / oig), the temperature is kept below -5 °. After the mixture has been stirred for a further 15 minutes, it is worked up according to Example i. Example 3 23 g of cocarboxylase are dissolved at -5 ° with 10 g of caustic soda in 75 cc of water and 100 cc of methanol and oxidized to disulfide by adding 5 g of bromine. Working up is carried out according to Example i.