Verfahren zur Herstellung reiner Folinsäure
I)ie l@c@@innung reiner Volinsäure ist ein
schwieriges Problem: so bietet die Trennung der
l@olins;itire von den bei der Synthese (z. I3. aus
I'teridylal<lehy<l und li-@@minohenzoylglutaminsäure)
orhandenen oder entstehenden Begleitsubstanzen
vor allem desv,egen Schwierigkeiten, weil letztere
in Bezug auf Salzbildung und Löslichkeit sehr ähn-
liche Eigenschaften besitzen wie die Folinsäure
selbst (Iwi(Icu sind sehr schwer 1<islich), un#d weil die
liegleitsul>staii@zen eine ausgeprägte Fähigkeit zur
\dsorption der Folinsäure aufweisen.
Fs t%,tircle nun gefunden, daß die Gewinnung
iriner Folinsä ure auf \-erhältnisniäßig einfache
\\'eie dadurch gelingt, claß nian die rohe Folinsäure
in Forni ihr(#r @orinylverl»nditng einer Reinigung
unterwirft und die reine Fortnylfoliiisäure zu Folinsäure hydrolysiert. Die Reinigung
der in verschiedenen Lösungsmitteln, wie z. B. Ameisensäure, Äthylenglvkol, Glycerin
und Wasser, löslichen Formylfolinsäure kann beispielsweise durc'li Extraktion eines
formylfolinsäurehaltigen Rohproduktes mit einem Gemisch aus Äther und Ameisensäure
oder durch fraktionierte Fällung mit Äther aus einer Lösung des Rohproduktes in
konzentrierter Ameisensäure oder durch fraktionierte Kristallisation, z. B. aus
Wasser oder Eisessig, bewerkstelligt werden. Die Verseifung der gereinigten Formvlfolinsäure
zu Folinsäure muß unter schonenden Bedingungen vorgenommen werden, damit eine Spaltung
der -C I-12 N H-Birndung vermieden
wird; die Hydrolyse gelingt z.
B. durch Einwirkung wässeriger Alkalien oder verdünnter Mineralsäuren bei Zimmertemperatur.
Formylfolinsäure, welcher nach T. D. Spiess und Mitarbeiter (Blood 11I, 121, 1948)
folgende Formel
zukommen dürfte, kann durch Formylierung von Foiinsäure nach einer üblichen Methode
gewonnen werden; sie ist auch durch Kondensation von Pteridy laldehyd und p-Aminobenzoylglutaminsäure
in Gegenwart von Ameisensäure erhältlich.Process for the production of pure folinic acid I) ie l @ c @@ guild of pure volic acid is a
difficult problem: so provides the separation of the
l @ olins; itire from the synthesis (e.g. I3. from
I'teridylal <lehy <l and li - @@ minohenzoylglutamic acid)
existing or emerging accompanying substances
especially desv, egen difficulties because the latter
very similar in terms of salt formation and solubility
Liche properties like folinic acid
themselves (Iwi (Icu are very difficult 1 <islich), and because the
liegleitsul> staii @ zen a pronounced ability to
\ dsorption of folinic acid.
Fs t%, tircle now found that extraction
irine folinic acid is relatively simple
\\ 'One succeeds in this way, using crude folinic acid
in Forni her (#r @orinylverl »nditng a cleaning
and the pure Fortnylfoliiisäure hydrolyzed to folinic acid. The cleaning of the in various solvents, such as. B. formic acid, Äthylenglvkol, glycerol and water, soluble formylfolinic acid can for example durc'li extraction of a formylfolinsäurehaltigen crude product with a mixture of ether and formic acid or by fractional precipitation with ether from a solution of the crude product in concentrated formic acid or by fractional crystallization, z. B. from water or glacial acetic acid. The saponification of the purified formolfolinic acid to folinic acid must be carried out under gentle conditions so that the -C I-12 N H bond is avoided; the hydrolysis succeeds z. B. by the action of aqueous alkalis or dilute mineral acids at room temperature. Formylfolinic acid, which according to TD Spiess and coworkers (Blood 11I, 121, 1948) the following formula can be obtained by formylating foiic acid by a conventional method; it is also obtainable by condensation of pteridy aldehyde and p-aminobenzoylglutamic acid in the presence of formic acid.
Beispiel i 2o Gewichtsteile eines Gemisches, welches etwa 50% Formylfolinsäure
enthält, wie es aus der Synthese anfällt, werden in ioo Raumteilen konzentrierter
Ameisensäure kalt gerührt. Nach etwa io Minuten gibt man 9o Raumteile Äther zu,
wodurch die schwerer löslichen Begleitsubstanzen ausgefällt werden. Man filtriert
und wiederholt die gleiche Operation noch zweimal mit dem Filterrückstand und je
ioo Raumteilen Ameisensäure und go Raumteilen Äther. Die vereinigten Filtrate werden
nun mit Äther versetzt, bis keine weitere Fällung mehr entsteht. Nach Filtrieren
und gründlichem Auswaschen des Rückstandes mit Äther erhält man 8 Gewichtsteile
Formylfolinsäure. Diese wird in 4o Raumteilen wässeriger 3 n-Natronlauge gelöst,
wobei spontan Verseifung stattfindet. Die Lösung wird mit ioo Teilen Wasser verdünnt
und mit 5 Gewichtsteilen aktiver Tierkohle geschüttelt, filtriert und in 4ooo Teile
Wasser von 9o° gegossen. Nach Ansäuern mit Essigsäure auf etwa PH 3,8 fällt die
Folinsäure beim Erkalten in Form von Nadeln ttnd Rosetten aus. Ausbeute etwa 6 Gewichtsteile.
Beispiel 2 2o Gewichtsteile eines Gemisches, welches 2o% Folinsäure enthält, werden
in ioo Raumteilen Ameisensäure 5 Minuten gekocht und gerührt, wodurch die Folinsäure
formyliert wird. Nach dem Abkühlen wird die Lösung mit ioo Raumteilen Äther versetzt;
der dabei anfallende Niederschlag wird abfiltriert, mit ioo Raumteilen kornzentrierter
Ameisensäure gerührt und durch Zusatz von ioo Raumteilen Äther wieder ausgefällt.
Die vereinigten Äther-Ameisensäurelösungen werden wie in Beispiel i weiterverarbeitet.
Man erhält so 3 Gewichtsteile Formylfolin.säure, welche wie in Beispiel i verseift
werden können.Example i 2o parts by weight of a mixture containing about 50% formylfolinic acid
contains, as it is obtained from the synthesis, are more concentrated in 100 parts of the space
Formic acid stirred cold. After about 10 minutes, add 90 parts of the volume of ether,
whereby the less soluble accompanying substances are precipitated. Filter
and repeat the same operation twice more with the filter residue and each time
ioo space parts formic acid and go space parts ether. The combined filtrates are
now mixed with ether until no further precipitation occurs. After filtering
and thoroughly washing out the residue with ether, 8 parts by weight are obtained
Formylfolinic acid. This is dissolved in 4o parts by volume of aqueous 3N sodium hydroxide solution,
with spontaneous saponification taking place. The solution is diluted with 100 parts of water
and shaken with 5 parts by weight of active animal charcoal, filtered and divided into 4,000 parts
Poured water at 90 °. After acidification with acetic acid to about pH 3.8 the falls
Folinic acid takes the form of needles and rosettes as it cools. Yield about 6 parts by weight.
Example 2 20 parts by weight of a mixture which contains 20% folinic acid
Boiled in 100 parts by volume of formic acid for 5 minutes and stirred, whereby the folinic acid
is formylated. After cooling, 100 parts by volume of ether are added to the solution;
the resulting precipitate is filtered off, with 100 parts by volume more grain-centered
Stirred formic acid and precipitated again by adding 100 parts by volume of ether.
The combined ether-formic acid solutions are processed as in Example i.
This gives 3 parts by weight of formylfolinic acid, which is saponified as in Example i
can be.
Beispiel 3 2o Gewichtsteile eines fein gesiebten Gemisches, welches
etwa 50%Formylfolinsäure enthält-, werden in 2ooo Gewichtsteilen Eisessig kurz gekocht
und gerührt. Man läBt auf 2o° erkalten und filtriert. Die Lösung wird im Vakuum
zur Trockne verdampft. Es bleiben etwa 12 Gewichtsteile einer hellgelben bis braunen,
trockenen Substanz zurück. Diese wird wie in Beispiel i verseift und weiterverarbeitet.Example 3 2o parts by weight of a finely sieved mixture which
Contains about 50% formylfolinic acid, are briefly boiled in 2ooo parts by weight of glacial acetic acid
and touched. It is allowed to cool to 20 ° and filtered. The solution is in vacuo
evaporated to dryness. About 12 parts by weight of a light yellow to brown,
dry substance back. This is saponified and further processed as in example i.