DE7212669U

DE7212669U - Polyacrylamidgel fertigpackung

Info

Publication number: DE7212669U
Application number: DE19727212669
Authority: DE
Original assignee: Biotest Serum Institut GmbH
Current assignee: Biotest Serum Institut GmbH
Priority date: 1972-04-05
Filing date: 1972-04-05
Publication date: 1975-07-10

Description

DIPL-ING. HELLA M. DINTER · , "; * · · . *: 607§ Buchschlag b. Frankfurt (MJ.

Patentanwältin " " *' '* ^Eu>«W>·*" /

Telefon: Langen (Hessen) f ZS 85 /

Postscheckkonto: Frankfurt (M) 235572 Bankkonto: Deutsche BanV, Frankfurt (21/IiXBJ

7.3.1975

Dt/Br

Biotest-Serum-Institut GmbH, Frankfurt/M.-Niederrad, Flughafenstr.4

/ Polyacrylamidgel-Fertigpackung

Die Neuerung betrifft eine Polyacrylamidgel-Fertigpackung.

Die Verwendung von Polyacrylamidgelen als Trägermedium für die elektrophoretisch^ Trennung won Proteinen, Nucleinsäuren u.a. ist bekannt. Man erhält solche Gele durch Polymerisation wan Acrylsäureanr'd CbU=CH-CO-NH^ mit N,N'-Nethylenbisacryxsäureamid als Vernetzungsmittel in Gygenuart von bestimmten Katalysator-Redoxsystemen, z.B. aus Ammoniumpersulfat und Ν,Ν,Ν',Ν'-Tetramethyläthylendiamin, die freie Radikale liefern. Durch die Mischpolymerisation entsteht ein Maschenuerk mit etua der folgender- allgemeinen Struktur

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dessen Porengröße in Abhängigkeit von der verwendeten .fienge an Acrylsäureamid und Uernetzungsmittel schwankt i(vgl. H.R. Plaurer, Disk-Elektrophorese, Ualter de Gruyter u. Co., Berlin 1968 ). Daraus ergibt sich, daß die voneinander zu trennenden noleküle nicht nur aufgrund ihrer Ladungsunterschiede im elektrischen Feld, sondern auch aufgrund ihrer flolekülgröße im Netzwerk des Gels getrennt uerd ,n, das den jeueiligen Erfordernissen angepaßt werden kann,

Die Herstellung der Polyamidgelg hat sich jedoch als äußerst umständlich und schwierig gezeigt, weil man mit 4 bis 5 Lösungen arbeiten muß, die eine Aufbewahrung im Kühlschrank und/oder im Dunkeln erfordern, da sie sich teilweise im Licht zersetzen. Ihre Herstellung dauert aber immer 2 bis 3 Stunden. Die einzelnen Lösungen werden für die Polymerisation in einem bestimmten -Verhältnis zusämmengegeoen. QiB Puiyiüorisstion soll unter Luftabschluß durchgeführt werden, da molekularer "Sauerstoff die !polymerisation v/erzögert und dann keine einheitlichen Porengrößen und vor allem keine reproduzierbaren Porengrößen erhalten werden. Die Polymerisation erfolgt üblicherweise innerhalb einer Stunde.

Es wurde nun überraschenderweise festgestellt, daß man die mit der Herstellung und Lagerung der Polyacrylamidgele verbundenen Schwierigkeiten durch Fertiggelpackungen überwinden kann.

Gegenstand der Mauerung ist eine Polyacrylaniidgel-Fertigpackung für ElektrcphGresesysteme- die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie aus einem für sich bekannten Polyacrylamidgel besteht, das luftdicht in einem flachen Beutel aus einem thermoplastischen Material eingeschlossen ist. Vorzugsweise besteht der Beutel aus Polyvinylchlorid.

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Die Verwendung des biegsamen Beutels statt eines starren Materials hat den Vorteil, daß man das Gel nach dem Aufschneiden des Beutels ohne Anwendung von Filterpapierbrücken direkt in die Pufferlösung von üblichen Elektrophoresekammern eintauchen lassen kann.

Die Fertigpackungen zeigten nach 3 Monaten Lagerung im Kühlschrank bzu. nach 14 Tagen Lagerung'bei Raumtemperatur noch alle gewünschten Eigenschaften.

Die Herstellung des neuen Produktes uird wie folgt erreicht: Die Reaktionsteilnehmer uerden in den vorbestimmten Anteilen in einem beliebigen Gefä8 vermischt, das nicht luftfrei zu sein braucht. Die fertige Polymerisationslösung uird dann in den flachen Beutel gefüllt und dieser durch Abklemmen oder in anderer Ueise luftdicht verschlossen, auf eine ebene Fläche gelegt und mit einer Glasplatte oder dgl. beschwert, so daß ein flaches Gel entstBTit^

Eine bevozugte Polymerisationslösung hat die Zusammen-

setzung:

26,51 g Acrylsäureamid

1,35 g Njfd-Nethylenbisacrylsäuxeamid o,25 g Ammoniumperoxodisulfat

o,5 ml Ν,Ν,Ν',N'-Tetramethylenäthylendiamin in 500 ml

Puffer.

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Die Neuerung uird nachstehend mit Bezug auf die bei

liegenden Zeichnungen näher erläutert, Es zeigen Figur 1 eine Ansicht einer Fertigpackung und Figur ihre Anwendung in einer Elektrophoresekammer im Schnitt.

Der in Figur 1 gezeigte Beutel 1 hat für eine optimale Durchführung der Elektrphorese vorzugsweise eine pr^it© VXSn htTess 1©6 ätrd eifvs LMfs^e yen sfeya 2QQ mm* Selbstverständlich sind grundsätzlich beliebige andere Abmessungen möglich. Oa für verschiedene Untersuchungen sin Uaschen der Gele vorteilhaft ist, um insbesondere 1 bis 2 Tage nach der Polymerisation etwa zurückgebliebene Monomere mit Wasser auszuspülen, hat der Beutel 1 zuei Öffnungen 2 und 3, die getrennt verschlossen werden können. Beutel mit nur einer Einfüllöffnung genügen aber durchaus. Ein Beutel mit den bevorzugten abaßen wird mit etua 120 ml Polymerisationslösung gefüllt und ergibt ein etua 9 mm dickes Gel.

Gemäß Figur 2 der Zeichnung uird der mit dem Gel 4 gefüllte Beutel 1 vor der Benutzung am Rand aufgeschnitten und dann das Gel 4 über eine Glasplatte in eine Elektrophoresekammer 6 eingelegt, wobei op-.ie zusätzliche Verwendung von Filterbruckan in Elektrophoresesystemen, wie sie beispielsweise im Patent.... ( Patentanmeldung P 22 01 579.8 der Anmeldexin ) vorgeschlagen sind, das erforderliche

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Medium qebildet uird. Beim Aufschneiden des Beutels entstehen zuei Folienflächen 7 und 8« Die Fo.lienfläche 7 wird zur besseren Handhabung unter dem Gel 4 belassen. Die Folienfläche 8 kann nach dem Aufbringen der zu untersuchenden Proben zum Abdecken über das Gel gelegt uerden, um insbesondere bei langdauernden Elektrophoresen ein Austrocknen des Gels zu vermeiden.

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Claims

Schutzansprüche:

1.) Polyacrylamidgel-Fsrtigpackung für tiektrophoresesysteme, dadurch gekennzeichnet, daß sie aus einem üblichen Polyacrylamidgel besteht, das luftdicht in einem flachen Beutel aus einem thermoplastischen Material eingeschlossen ist.

2.) Fertigpackung nach Anspruch 1. dadurch gekennzeichnet, daß der Beutel aus Polyvinylchlorid besteht, 1D8 mm breit und 200 mm lang ist und vorzugsueise zuei verschließbare Öffnungen hat.

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