DE638418C

DE638418C - Process for obtaining nucleotide nucleotides

Info

Publication number: DE638418C
Application number: DEG86560D
Authority: DE
Original assignee: Gesellschaft fuer Chemische Industrie in Basel CIBA
Current assignee: BASF Schweiz AG
Priority date: 1933-07-21
Filing date: 1933-10-07
Publication date: 1936-11-14

Description

Es wurde gefunden, daß man zu physiologisch hochwirksamen Verbindungen gelangt, wenn man die aus pflanzlichen oder tierischen Extrakten erhältlichen Nucleotide, wie z. B. Hefe- oder Muskeladenylsäure, Adenosintriphosphorsäure, Guanylsäure, Cytidylsäure usw., einer Behandlung mit acylierend wirkenden Mitteln unterwirft. Dabei hat es sich als vorteilhaft erwiesen, die Umsetzung in Gegenwart tertiärer Basen, wie z. B. Pyridin, Chinolin, Dimethylanilin usw., auszuführen. Es werden Abkömmlinge der Nucleotide erhalten, deren Wirksamkeit diejenige der Ausgangsstoffe in hohem Maße übertrifft. Die acylierten Nucleotide können gegebenenfalls nach Methoden gereinigt werden, wie sie in der Chemie der Nucleotide gebräuchlich sind, z. B. durch Fällung mit Schwermetallsalzen oder Überführung in Salze organischer Basen, insbesondere der Alkaloide.It has been found that one arrives at physiologically highly effective compounds, if you obtain the nucleotides from plant or animal extracts, such as. B. Yeast or muscle adenylic acid, adenosine triphosphoric acid, guanylic acid, cytidylic acid etc., subjected to treatment with acylating agents. It has to be Proven to be advantageous, the reaction in the presence of tertiary bases, such as. B. pyridine, Quinoline, dimethylaniline, etc. Derivatives of the nucleotides are obtained, whose effectiveness exceeds that of the starting materials to a large extent. The acylated nucleotides can optionally are purified using methods commonly used in the chemistry of nucleotides, z. B. by precipitation with heavy metal salts or conversion into salts of organic bases, especially the alkaloids.

example 1

ι Gewichtsteil trockene Hefeadenylsäure wird mit 50 Volumteilen trockenem Pyridin Übergossen und das Gemisch nach Zusatz von S Gewichtsteilen Essigsäureanhydrid während 2 Stunden auf 6o° erwärmt. Im Verlaufe einer halben Stunde ist die in Pyridin schwerlösliche Adenylsäure in Lösung gegangen.ι part by weight of dry yeast adenylic acid is mixed with 50 parts by volume of dry pyridine Poured over and the mixture after adding 5 parts by weight of acetic anhydride during Heated to 60 ° for 2 hours. In the course of half an hour, it is sparingly soluble in pyridine Adenylic acid gone into solution.

Das erkaltete Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand mehrmals in Wasser gelöst und dieses wieder abdestilliert, bis das Pyridin vertrieben ist. Nach Verdampfen der Lösung im Vakuum erhält man einen harzartigen, in Wasser leichtlöslichen Rückstand, in welchem mit salpetriger Säure keine freie Aminogruppe mehr nachzuweisen ist. Die wässerige Lösung der Substanz ergibt beim Versetzen mit basischem Bleiacetat einen voluminösen Niederschlag. The cooled reaction mixture is evaporated in vacuo, the residue several times dissolved in water and this distilled off again until the pyridine is driven off. After evaporation of the solution in vacuo, a resinous residue which is readily soluble in water is obtained, in which with nitrous acid no more free amino group can be detected. The aqueous solution the substance produces a voluminous precipitate when mixed with basic lead acetate.

Example 2

ι Gewichtsteil Muskeladenylsäure wird mit 50 Volumteilen Pyridin und S Gewichtsteilen Essigsäureanhydrid ¹J₂ Stunde auf 6o° und ι Stunde auf ioo° erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird gemäß Beispiel 1 aufgearbeitet. Die Acetylverbindung der Muskeladenylsäure wird ebenfalls in Form eines farblosen, bis schwach gelblichen Harzes gewonnen, dessen Eigenschaften im wesentlichen mit denjenigen der acetylierten Hefeadenylsäure übereinstimmen. Part by weight of muscle adenylic acid is heated with 50 parts by volume of pyridine and 5 parts by weight of acetic anhydride for ¹ J for ₂ hours at 60 ° and for 1 hour at 100 °. The reaction mixture is worked up as in Example 1. The acetyl compound of muscle adenylic acid is also obtained in the form of a colorless to pale yellowish resin, the properties of which are essentially the same as those of acetylated yeast adenylic acid.

Example 3

ι Gewichtsteil Hefeadenylsäure wird mit 50 Volumteilen Pyridin übergössen; dann werden 6 Gewichtsteile Benzoylchlorid zugefügt, worauf man das Ganze über Nacht stehenläßt. Die Adenylsäure geht hierbei in Lösung. Das Reaktionsgemisch wird im g₀ ι part by weight of yeast adenylic acid is poured over with 50 parts by volume of pyridine; then 6 parts by weight of benzoyl chloride are added, whereupon the whole is left to stand overnight. The adenylic acid goes into solution. The reaction mixture is in the g ₀

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■Vakuum abdestilliertj zum Rückstand mehrmals Wasser 'zugegeben und dieses zur Vertreibung des-Pyridins im Vakuum verdampft Der in Wasser" unlösliche' harzartige Rückte stand wird unter Zusatz von wenig verdünnter Natriumcarbonatlösung in Wasser gelöst und durch Eindampfen im Vakuum vom freigewordenen Pyridin befreit. Aus der filtrierten wässerigen Lösung des Natriumsalzes wird sodann die freie Benzoyladehylsäure durch Zusatz von verdünnter Salzsäure gefällt. Zum Schlüsse wird die auf der Nutsche abfiltrierte Substanz durch Waschen mit Äther von etwa beigemengter Benzoesäure befreit. Die Benzoyladenylsäure stellt ein leicht pulverisierbares Harz dar, das in Alkohol sowie in wässerigen Alkalien oder Natriumcarbonat leicht löslich ist, sich dagegen in Wasser oder verdünnten Säuren, wie auch in Äther nicht auflöst. Aus alkoholischer Lösung ist die Substanz durch Ätherzusatz leicht fällbar. Mit salpetriger Säure kann keine freie Aminogruppe mehr nachgewiesen werden.■ Vacuum distilled off the residue several times Water 'added and this evaporated in vacuo to drive off the pyridine The resin-like residue, which is "insoluble" in water, is diluted with the addition of a little Dissolved sodium carbonate solution in water and evaporated it in vacuo Pyridine freed. The filtered aqueous solution of the sodium salt is then converted into free benzoyladehydic acid precipitated by adding dilute hydrochloric acid. Finally, the one on the nutsche the filtered substance is freed from any added benzoic acid by washing with ether. Benzoyladenylic acid is an easily pulverizable resin that is dissolved in alcohol and is easily soluble in aqueous alkalis or sodium carbonate, but in Water or diluted acids, as well as in ether, does not dissolve. From alcoholic solution the substance can be easily precipitated by adding ether. With nitrous acid there can be no free Amino group can be detected more.

Example 4

2 Gewichtsteile wasserfreier Hefeadenylsäure werden mit 25 Volumteilen Essigsäureanhydrid und 2 Gewichtsteilen geschmolzenem Natriumacetat während 90 Minuten im ölbad am Rückflußkühler zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum zur Trockne verdampft, der Rückstand in Wasser aufgenommen und die wässerige Lösung mit Natronlauge neutralisiert. Das2 parts by weight of anhydrous yeast adenylic acid are mixed with 25 parts by volume of acetic anhydride and 2 parts by weight of molten sodium acetate heated to boiling in an oil bath on a reflux condenser for 90 minutes. The reaction mixture is evaporated to dryness in vacuo, the residue is taken up in water and the aqueous Solution neutralized with sodium hydroxide solution. That

„ acetylierte Nucleotid wird sodann durch vorsichtigen Zusatz von Bleiessig in das schwerlösliche Bleisalz übergeführt, dieses auf der Nutsche abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das in Wasser fein zer.teilte Bleisalz wird durch Einleiten von Schwefelwasserstoff zerlegt und nach dem Abnutschen des niedergeschlagenen Bleisulfids eine farblose wässerige Lösung der freien Acetyladenylsäure gewonnen. Nach dem Verdampfen des Wassers im Vakuum erhält man die freie Säure als farbloses, durchsichtiges Harz, das sich besonders leicht in Gegenwart von Aceton pulverisieren läßt. Man erhält dann die Acetyladenylsäure nach dem Trocknen als schwach hellgelbes Pulver, das sich“Acetylated nucleotide is then cautious Addition of lead acetic acid converted into the sparingly soluble lead salt, this was filtered off on the suction filter and washed with water. The lead salt, which is finely divided in water, is made by introducing hydrogen sulfide disassembled and a colorless one after filtering off the precipitated lead sulfide obtained aqueous solution of free acetyladenylic acid. After evaporation of the water in a vacuum, the free acid is obtained as a colorless, transparent resin, which is particularly easy in the presence pulverized by acetone. The acetyladenylic acid is then obtained after drying as a pale pale yellow powder, which

in Wasser leicht mit stark saurer Reaktion auflöst.Easily dissolves in water with a strongly acidic reaction.

Example 5

4 Gewichtsteile entwässerter Hefeadenylsäure werden mit 120 Volumteilen Pyridin und 40 Volumteilen Essigsäureanhydrid während 2 Stunden auf 6o° erhitzt. Die erhaltene Lösung wird im Vakuum zur Trockne gebracht, der Rückstand in 500 Volumteilen Wasser gelöst und die Lösung mit Natronlauge neutralisiert. Dann wird die acetylierte4 parts by weight of dehydrated yeast adenylic acid are mixed with 120 parts by volume of pyridine and 40 parts by volume of acetic anhydride heated to 60 ° for 2 hours. The received Solution is brought to dryness in vacuo, the residue in 500 parts by volume Dissolved water and neutralized the solution with sodium hydroxide solution. Then the acetylated

Säure . mit der geringsten erforderlichen Menge basischen Bleiacetats gefällt. Nach scharfem Absaugen des Bleisalzes und gründlichem Auswaschen mit Wasser zerlegt man die Substanz in wässeriger Suspension mit Hilfe von Schwefelwasserstoff. Nach dem Abfiltrieren des Bleisulfids wird die klare wässerige Lösung der freien Säure im Vakuum zur Trockne verdampft. Man erhält die Acetyladenylsäure als nahezu farbloses Harz, das besonders unter Aceton leicht pulverisiert werden kann. Die Substanz ist in Wasser leicht löslich; sie ergibt mit salpetriger Säure nach van Slyke keinen Stickstoff. Die Zusammensetzung entspricht einer Monoacetyladenylsäure. Durch Neutralisieren einer wässerigen Lösung mit methylalkoholischer Brucinlösung scheidet sich das kristallisierte Brucinsalz ab, aus welchem sich nach Überführung in das Ammonium- und das Bleisalz wieder die freie Säure gewinnen läßt.Acid. precipitated with the least amount of basic lead acetate required. To sharp suction of the lead salt and thorough washing out with water are broken down the substance in aqueous suspension with the help of hydrogen sulfide. After this Filtering off the lead sulfide is the clear aqueous solution of the free acid in vacuo evaporated to dryness. Acetyladenylic acid is obtained as an almost colorless resin, which can be easily pulverized, especially under acetone. The substance is in water easily soluble; it gives no nitrogen with nitrous acid according to van Slyke. The composition corresponds to a monoacetyladenylic acid. By neutralizing an aqueous solution with methyl alcoholic brucine solution The crystallized brucine salt separates out, from which after transfer the free acid can be recovered in the ammonium and lead salts.

Example 6

ι Gewichtsteil Cytosinphosphorsäure wird mit 80 Volumteilen trockenem Pyridin und 10 Raumteilen Essigsäureanhydrid während 2¹Z₂ Stunden auf dem siedenden Wasserbade erhitzt. Das Reaktionsgemisch wind im Vakuum zur Trockne gebracht und der Rückstand mehrmals in Wasser gelöst und dieses unter vermindertem Druck verdampft, bis auch das Pyridin vollständig vertrieben ist. Nach dem Abdestillieren des Wassers erhält man die neue Verbindung als hellgelbes, leicht wasserlösliches Harz.ι part by weight of Cytosinphosphorsäure is heated with 80 parts by volume of dry pyridine and 10 parts by volume of acetic anhydride for 2 ¹ Z ₂ hours on a boiling water-bath. The reaction mixture is brought to dryness in vacuo and the residue is dissolved several times in water and this is evaporated under reduced pressure until the pyridine has also been completely driven off. After the water has been distilled off, the new compound is obtained as a light yellow, easily water-soluble resin.

Example 7

ι Gewichtsteil kristallisierter Guanylsäure wird mit 75 Raumteilen trockenem Pyridin übergössen und nach Zusatz von 7,5 Raumteilen Essigsäureanhydrid S Stunden auf dem siedenden Wasserbade erhitzt. Das Reaktionsprodukt wird wie im obigen Beispiel aufgearbeitet, wobei man die Acetylguanylsäure als hellgelbes Harz erhält.Part by weight of crystallized guanylic acid is combined with 75 parts by volume of dry pyridine poured over and after adding 7.5 parts by volume of acetic anhydride for S hours on the heated to a boiling water bath. The reaction product is worked up as in the above example, acetylguanyl acid is obtained as a light yellow resin.

Example 8

ι Gewichtsteil kristallisierter Uridinphosphorsäure wird mit 90 Raumteilen Pyr- no idin und 6 Raumteilen Essigsäureanhydrid während 2¹J₂ Stunden auf dem siedenden Wasserbade erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird gemäß obigen Beispielen aufgearbeitet, und es wird dabei die Acetyluridinphosphorsäure als gelbliches Harz erhalten.ι part by weight of crystallized Uridinphosphorsäure is heated with 90 parts by volume of pyrrole no idin and 6 parts by volume of acetic anhydride for 2 ¹ J ₂ hours on a boiling water-bath. The reaction mixture is worked up according to the above examples, and the acetyluridine phosphoric acid is obtained as a yellowish resin.

Example 9

ι Gewichtsteil wasserfreie Hefeadenylsäure wird mit 40 Raumteilen entwässertem Pyridin auf ungefähr ioo° erwärmt und das Gemisch nach dem Abkühlen in Eis tropfenweise" mitι Part by weight of anhydrous yeast adenylic acid is dehydrated with 40 parts by volume of pyridine warmed to about 100 ° and the mixture after cooling in ice drop by drop "with

2,3 Gewichtsteilen frisch destilliertem Chlorameisensäureäthylester versetzt. Nach 15~ stündigem Stehen bei 5° erwärmt man auf 30° und fügt tropfenweise nochmals 1,14 Gewichtsteile des Esters zu. Nunmehr wird das Ganze unter vermindertem Drucke unterhalb einer Temperatur von 40⁰ zur Trockne gebracht, der Rückstand in wenig Wasser gelöst und mit Natronlauge oder Natriumcarbonat neutralisiert. Das hierbei frei gewordene Pyridin wird durch Eindampfen im Vakuum vertrieben und der Prozeß des Neutralisierens und Eindampfens so oft wiederholt, bis alles Pyridin beseitigt-ist. Man erhält schließlich ein Gemisch des neuen Urethans mit.Natriumchlorid. Die Carbäthoxyhefeadenylsäure kann über ihre Schwermetall- oder Alkaloidsalze· gereinigt werden.2.3 parts by weight of freshly distilled ethyl chloroformate are added. After standing at 5 ° for 15 hours, the mixture is heated to 30 ° and a further 1.14 parts by weight of the ester are added dropwise. Now the whole is brought under reduced pressures below a temperature of 40 ⁰ to dryness, the residue dissolved in a little water and neutralized with sodium hydroxide or sodium carbonate. The pyridine released in this way is driven off by evaporation in a vacuum and the process of neutralization and evaporation is repeated until all the pyridine has been removed. Finally, a mixture of the new urethane with sodium chloride is obtained. The carbethoxy yeastic acid can be purified using its heavy metal or alkaloid salts.

Claims

Claim:

Method for obtaining descendants of the nucleotides, characterized in that that they are treated with acylating agents.