DE4428025A1 - Inhibitoren der Acyl-Enzym-A-Cholesterin-O-Acyl-Transferase mit therapeutischer Wirksamkeit, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen - Google Patents
Inhibitoren der Acyl-Enzym-A-Cholesterin-O-Acyl-Transferase mit therapeutischer Wirksamkeit, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische ZusammensetzungenInfo
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Description
Die vorliegende Erfindung betrifft heteroaromatische
Thioether mit inhibierender Wirkung auf das Enzym Acyl-Enzym-
A-Cholesterin-O-Acyl-Transferase (ACAT), ihre Herstellung
und ihre therapeutische Verwendung und pharmazeutische
Zusammensetzungen, die sie enthalten. In der europäischen
Patentanmeldung Nr. 520552 der Anmelderin werden Verbindungen
beschrieben und beansprucht, die die folgende allgemeine
Formel I haben:
(HET)Ar-X-CH₂-Y-CH₂-O-R (I)
worin: (HET)Ar einen gegebenenfalls substituierten mono-, bi-
oder tricyclischen Aryl- oder Heteroarylkern darstellt, X -O-
oder -S- darstellt;
Y darstellt: -CO-, eine lineare oder verzweigte Alkyl-Gruppe mit 0 bis 8 Kohlenstoffatomen, -CHOR₁, worin R₁ Wasserstoff oder eine Acyl-Gruppe von einer aliphatischen, aromatischen oder heterocyclischen Carbonsäure ist, unter der Bedingung, daß R₁ nicht Wasserstoff ist, wenn (HET)Ar eine Guanin- oder Adenosin-Gruppe darstellt, -C=N-R₂, worin R₂ Wasserstoff oder eine lineare oder verzweigte Alkyl-Gruppe mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, OH, eine Alkoxyl-Gruppe mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, eine Aryloxy-Gruppe, eine Arylalkoxy- Gruppe, -NH₂, -NHCONH₂, -NHCSNH₂ ist; und R eine in para- Position mit einer Carboxyl- oder (C₁-C₂₀)Alkoxycarbonyl- Gruppe substituierte Phenyl-Gruppe darstellt, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
Y darstellt: -CO-, eine lineare oder verzweigte Alkyl-Gruppe mit 0 bis 8 Kohlenstoffatomen, -CHOR₁, worin R₁ Wasserstoff oder eine Acyl-Gruppe von einer aliphatischen, aromatischen oder heterocyclischen Carbonsäure ist, unter der Bedingung, daß R₁ nicht Wasserstoff ist, wenn (HET)Ar eine Guanin- oder Adenosin-Gruppe darstellt, -C=N-R₂, worin R₂ Wasserstoff oder eine lineare oder verzweigte Alkyl-Gruppe mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, OH, eine Alkoxyl-Gruppe mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, eine Aryloxy-Gruppe, eine Arylalkoxy- Gruppe, -NH₂, -NHCONH₂, -NHCSNH₂ ist; und R eine in para- Position mit einer Carboxyl- oder (C₁-C₂₀)Alkoxycarbonyl- Gruppe substituierte Phenyl-Gruppe darstellt, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
Eine hypolipämische Wirkung ist für diese Verbindungen
beschrieben, die die HDL-Serumspiegel erhöhen und die Spiegel
von Triglyceriden und LDL-Cholesterin senken kann. Es wurde
nun entdeckt, daß eine Familie aromatischer Thioether, wie
nachfolgend identifiziert und beschrieben, eine ACAT-
inhibierende Aktivität hat, wodurch sie eine hypolipämische
Wirkung, begleitet von einer antiatherosklerotischen Wirkung
aufweisen und so die Akkumulation von Cholesterinestern und
die Entwicklung von atheromatöser Plaque verhindern.
Das ACAT-Enzym, das die Übertragung einer Fettsäure von
Coenzym A auf Cholesterin katalysiert, kann die
intrazelluläre Veresterung von Cholesterin regulieren. Diese
Wirkung zeigt sich in den verschiedenen Geweben, in denen
dieses Enzym vorliegt: Darm, Leber, Arterienwände und
Makrophagen.
Im Darm spielt ACAT eine fundamentale Rolle bei der
Cholesterinabsorption dadurch, daß das exogene Cholesterin in
den Darmwänden verestert werden muß, um absorbiert und in die
Chylomikronen ausgeschieden zu werden. In der Leber ist die
Veresterung des darin befindlichen Cholesterins durch ACAT
notwendig für den Sekretionsprozeß der VLDL. Infolgedessen
weisen therapeutische Mittel, die in der Lage sind, die
Wirkung von ACAT effizient zu inhibieren, eine hypolipämische
Wirkung auf und verhindern die Cholesterinabsorption im Darm
ebenso wie ihre systemische Sekretion durch die Leber.
Es wurde gezeigt, daß während des atherosklerotischen
Prozesses die Wirkung des Enzyms deutlich erhöht wird und
eine Akkumulation von Cholesterinestern in den Arterienwänden
und in den darin residierenden Makrophagen auftritt. Die
Wichtigkeit, die Verbindungen mit ACAT-inhibierender Wirkung
haben können, ist daher offensichtlich.
Verbindungen, die den Gegenstand der Erfindung darstellen,
lassen sich allgemein durch die Struktur II darstellen:
Het-S-CH₂-Y-CH₂-O-R (II)
worin:
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n- worin 0 < n < 10;
-CHOH-, womit die racemische Mischung ebenso wie jede der chiralen Formen gemeint ist,
-C=N-R₂, worin R₂=OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy oder -NHCONH₂ ist;
R = Phenyl, das in der para-Position mit einer Carboxyl- oder einer C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n- worin 0 < n < 10;
-CHOH-, womit die racemische Mischung ebenso wie jede der chiralen Formen gemeint ist,
-C=N-R₂, worin R₂=OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy oder -NHCONH₂ ist;
R = Phenyl, das in der para-Position mit einer Carboxyl- oder einer C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
Die Verbindungen der Formel II sind neu, da sie niemals in
der Literatur beschrieben wurden, mit der Ausnahme von
solchen, in denen Y = -CHOH ist und die in der obigen
europäischen Patentanmeldung Nr. 520552 beispielhaft erwähnt
wurden, für die statt dessen die vorliegende Erfindung die
Verwendung als ACAT-Inhibitoren ins Auge faßt.
Es ist bemerkenswert, daß die neuen Verbindungen der Formel
II, wie aus den Ergebnissen von ersten pharmakologischen
Experimenten ersehen wird, durch eine außergewöhnliche
hypolipämische Wirkung gekennzeichnet sind, die durch die
Eigenschaften ähnlicher Verbindungen, die in der obigen EP-A-
520552 beschrieben wurden, nicht nahegelegt wird.
Daher besteht ein erster Gegenstand der vorliegenden
Erfindung in Verbindungen mit der vorhergehenden Formel II,
solange Y verschieden von -CHOH ist. Einen zweiten Gegenstand
der vorliegenden Erfindung stellen pharmazeutische
Zusammensetzungen dar, die als Wirkstoff eine Verbindung mit
der Formel II enthalten, wobei Y verschieden von -CHOH ist.
Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung liegt in
der Verwendung der Verbindungen der Formel II als ACAT-
Inhibitoren und als antiatherosklerotische Arzneimittel ohne
Beschränkung bezüglich der Bedeutungen der verschiedenen
Substituenten.
Die folgenden Beispiele erläutern in nicht beschränkender
Weise die Herstellung von Verbindungen in dieser Erfindung.
Das allgemeine Verfahren zur Herstellung von
erfindungsgemäßen Verbindungen umfaßt die Reaktion von 4,5-
Diphenylimidazol-2-thiol mit einem Epoxid der Formel:
oder mit einem Haloketon mit der Formel:
X-CH₂-CO-CH₂-O-R
oder mit einem Halogenid mit der Formel:
X-CH₂-(CH₂)n-CH₂-O-R
worin R wie zuvor definiert ist, X = Cl, Br, I; O < n < 10.
Insbesondere wird das racemische oder optisch aktive Epoxid
zur Synthese der Produkte in den Beispielen 1 bis 4
verwendet. Das Haloketon wird zur Synthese wie in Beispiel 5
verwendet und das Halogenid für die Beispiele 11 bis 20.
Die Produkte in den Beispielen 6 bis 10 werden erhalten,
indem man die Verbindung des Beispiels 5 mit dem geeigneten
Hydroxylamin oder Semicarbazid umsetzt.
Die Reaktionen werden in Gegenwart eines protischen oder
aprotischen polaren organischen Lösungsmittels wie Alkohol,
Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid und dgl., vorzugsweise in
Gegenwart eines basischen Katalysators, der im wesentlichen
aus der Klasse der sterisch gehinderten tertiären Amine wie
Trialkylamin, 2,6-Lutidin, Pyridin etc. gewählt wird,
ausgeführt.
Die Reaktion wird vorzugsweise bei Raumtemperatur ausgeführt,
obgleich es manchmal vorteilhaft sein kann, um ihren Verlauf
zu beschleunigen, vorsichtig auf Temperaturen zwischen
Raumtemperatur und 100°C und vorzugsweise auf
Rückflußtemperatur eines niederen Alkohols wie Ethanol oder
Isopropanol zu erhitzen. Die Reaktion ist im allgemeinen nach
einer Zeit vollständig, die von 1 bis 24 h in Abhängigkeit
vom verwendeten Substrat und Katalysator variieren kann.
Am Ende der Reaktion wird das kristallisierte Produkt
abfiltriert oder das Lösungsmittel entfernt und der Rückstand
durch klassische Kristallisationsverfahren aus geeigneten
Lösungsmitteln oder aus Mischungen durch Chromatographie
gereinigt.
Die folgenden Beispiele beschreiben Details über die
erfindungsgemäßen Verbindungen.
Eine Lösung von Isobutyl-p-(2,3-epoxy)propyloxybenzoat
(9,9 g; 39,6 mMol) in absolutem Ethanol (50 ml) wird zu einer
Suspension von 4,5-Diphenylimidazol-2-thiol (10 g; 39,6 mMol)
in absolutem Ethanol (100 ml) und 2,6-Lutidin (1 ml) bei 90°C
unter Rühren in Stickstoffatmosphäre zugetropft. Die Reaktion
ist nach 2 h beendet.
Die klare Lösung wird abgekühlt, konzentriert und mit
Ethylacetat aufgenommen, die organische Phase anschließend
mit gesättigter wäßriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung und
gesättigter wäßriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, mit
wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum zu
einer trockenen Substanz konzentriert. Das Rohmaterial (20 g)
wird aus kochendem n-Hepten durch Zugabe von etwas Ethanol
kristallisiert.
17,2 g (34,3 mMol) kristallines Produkt werden erhalten.
Ausbeute 86%, Schmelzpunkt 135-138°C. Die folgenden
Derivate werden nach demselben Verfahren hergestellt:
Aus Isobutyl-p-[2(S),3-epoxy]-propyloxybenzoat, Ausbeute
50%, Schmelzpunkt 100-101°C, [α]D (0,5% in Aceton) =
-26,89°.
Aus Isobutyl-p-[2(R),3-epoxy]-propyloxybenzoat, Ausbeute
56%, Schmelzpunkt 68-69°C, [α]D (0,5% in Aceton) =
+26,89°.
Aus p-[2,3-Epoxy]-propyloxybenzoesäure, Ausbeute 58%,
Schmelzpunkt 219-221°C.
Zu einer Lösung von 4,5-Diphenylimidazol-2-thiol (5 g;
19,8 mMol) in absolutem Ethanol (50 ml) und 2,6-Lutidin
(2,8 ml; 23,8 mMol) wird eine Lösung aus Isobutyl-p-(3-brom-
2-oxo)propyloxybenzoat (6,5 g; 19,8 mMol) in absolutem
Ethanol (100 ml) zugetropft. Die Reaktionsmischung wird bei
Raumtemperatur 1 h gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen,
der Rückstand mit Ethylacetat aufgenommen, mit einer wäßrigen
Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen und über
wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Der nach Abziehen des
Lösungsmittels erhaltene Feststoff wird aus Petrolether
kristallisiert, filtriert und getrocknet. 8,8 g (17,56 mMol)
Produkt werden erhalten. Ausbeute 88%, Schmelzpunkt 149-
150°C.
Eine Mischung aus 2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2-
oxopropylthio}-4,5-diphenylimidazol (8 g; 16 mMol), Imidazol
(6,5 g; 96 mMol) und Hydroxylaminhydrochlorid (5,6 g;
80 mMol) in Isobutanol (250 ml) wird unter Rückfluß 15 min
erhitzt. Das Lösungsmittel wird durch Strippen mit n-Heptan
beinahe vollständig abgedampft; der Rückstand wird mit
Ethylacetat (200 ml) aufgenommen, mit einer gesättigten
wäßrigen Natriumhydrogencarbonat-Lösung bis zum Verschwinden
des Imidazols gewaschen, dann mit Wasser und einer
gesättigten wäßrigen Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Es wird
über Natriumsulfat getrocknet und Diethylether zugegeben.
Umkristallisation ergibt 3,5 g (6,8 mMol) eines weißen
Feststoffs. Ausbeute 42,5%, Schmelzpunkt 157-158°C.
Die folgenden Derivate werden nach demselben Verfahren
hergestellt:
Aus O-Methylhydroxylaminhydrochlorid, Reinigung durch Silica-
Chromatographie, Eluierung mit CH₂Cl₂/MeOH 50 : 1. Ausbeute
73%, Schmelzpunkt 49-52°C.
Aus O-Decylhydroxylaminhydrochlorid in absolutem Ethanol bei
Raumtemperatur. Reinigung durch Silica-Chromatographie,
Eluierung mit CH₂Cl₂/MeOH 100 : 1. Ausbeute 63%, Öl.
Aus O-(3-Hydroxypropyl)hydroxylaminhydrochlorid in absolutem
Ethanol bei Raumtemperatur. Reinigung durch Silica-
Chromatographie, Eluierung mit n-Hexan/Ethylacetat 7 : 3.
Ausbeute 53%, Schmelzpunkt 68°C.
Aus Semicarbazidhydrochlorid in 95% Ethanol/Wasser. Ausbeute
25%, Schmelzpunkt 172-174°C.
Eine Lösung von 4,5-Diphenylimidazol-2-thiol (2,6 g;
10 mMol), Isobutyl-p-(5-brom)pentyloxybenzoat (3,5 g;
10 mMol) und 2,6 Lutidin (2,4 ml; 21 mMol) in wasserfreiem
Dimethylformamid (30 ml) wird auf 70°C unter Stickstoff und
Rühren 24 h erhitzt. Die Lösung wird abgekühlt und in eine
gesättigte wäßrige Natriumcarbonat-Lösung unter Rühren
gegossen. Der Niederschlag wird abfiltriert, mit Petrolether
gewaschen und aus absolutem Ethanol kristallisiert, wodurch
man 1,84 g (3,5 mMol) eines weißen kristallinen Feststoffs
erhält. Ausbeute 36%, Schmelzpunkt 123-124°C.
Die folgenden Derivate werden nach demselben Verfahren
hergestellt:
Aus Isobutyl-p-(2-chloro)ethoxybenzoat. Ausbeute 42%,
Schmelzpunkt 163-164°C.
Aus Isobutyl-p-(3-bromo)propyloxybenzoat. Ausbeute 60%,
Schmelzpunkt 154-155°C.
Aus Isobutyl-p-(4-chloro)butyloxybenzoat. Ausbeute 40%,
Schmelzpunkt 152-155°C.
Aus Isobutyl-p-(6-bromo)esyloxybenzoat. Ausbeute 62%,
Schmelzpunkt 135-136°C.
Aus Isobutyl-p-(8-bromo)octyloxybenzoat. Ausbeute 35%,
Schmelzpunkt 113-115°C.
Aus Isobutyl-p-(10-bromo)decyloxybenzoat. Ausbeute 57%,
Schmelzpunkt 108-109°C.
Aus Isobutyl-p-(12-bromo)dodecyloxybenzoat. Ausbeute 28%,
Schmelzpunkt 90°C.
Aus Ethyl-p-(5-bromo)pentyloxybenzoat. Ausbeute 48%,
Schmelzpunkt 130°C.
Aus p-(5-Bromo)pentyloxybenzoesäure. Ausbeute 74%,
Schmelzpunkt 187-190°C.
Die Verbindungen, auf die sich diese Erfindung bezieht,
wurden einem speziellen pharmakologischen Screening
unterworfen.
Die Aktivität des ACAT-Enzyms wird in vitro gemessen, indem
man die Übertragung von Ölsäure aus Coenzym A auf Cholesterin
im Verfahren der Bildung von Cholesterinoleat auswertet.
Endogenes Cholesterin, das aus der mikrosomialen Fraktion
kommt, und [14-C]-Oleyl-CoA wurden als Substrate verwendet.
Die mikrosomiale Fraktion wird aus der Leber von männlichen
SD-Ratten (Charles River) mit einem Gewicht von 150 bis 300 g
hergestellt, die "ad libitum" mit einer normalen
Standardnahrung ernährt wurden. Nach Opferung durch
Enthauptung wird die Leber der Tiere entfernt und in
2,58 Volumina 0,25 M Sucrosepuffer mit 1 mM EDTA (pH 7,4)
homogenisiert. Die Mikrosomen werden dann durch
Differentialzentrifugation erhalten; der Überstand einer
ersten Zentrifugation mit 10 000 g während 20 min (4°C) wird
dann wieder in 0,1 M Phosphatpuffer (pH 7,4) bei 105 000 g
1 h zentrifugiert, damit die geforderte Fraktion
sedimentiert. Die so erhaltenen Mikrosomen werden dann wieder
im selben Puffer suspendiert, noch einmal zentrifugiert und
dann bei -80°C bis zur Verwendung aufbewahrt.
Der Test wird in Teströhrchen unter Verwendung eines
Inkubationsendvolumens von 200 µl ausgeführt. Zu jedem
Testrohr werden 100 µl Puffer und 150 mg mikrosomiale
Proteine gegeben. Die getesteten Verbindungen (solubilisiert
in absolutem Ethanol) und der Träger (absolutes Ethanol)
werden in Volumina von nicht mehr als 1 µl zugegeben. Die
Teströhrchen werden dann 10 min bei 37°C präinkubiert, dann
mit 100 µl [14-C]-Oleyl-CoA versetzt (6,1 µCi,
Endkonzentration 50 µM). Die Inkubation wird nach 10 min
durch Zugabe einer Mischung (4 ml) Chloroform/Methanol (2 : 1
V/V) beendet. Zu den Proben werden dann 20 000 dpm [3-H]-
Cholesteryloleat als interner Standard zugesetzt.
Die organische Phase, die die Lipide enthält, wird
abgetrennt, nachdem die Proben 18 h bei 4°C gehalten wurden.
Die Proben werden unter einem Stickstoffstrom getrocknet und
wieder in 100 µl Ethylacetat suspendiert. Dann werden 50 µl
auf Silicagel-Platten (HPTLC, Merck) aufgebracht und mit
einer mobilen Phase aus Hexan : Diethylether : Essigsäure
(80 : 20 : 1) eluiert. Die Bande, die Cholesterinoleat
entspricht, wird sichtbar gemacht, indem man die Platte
Joddämpfen aussetzt. Die so identifizierte Bande wird von der
Platte abgekratzt, in ein Gefäß eingebracht, zu dem
Szintillationsflüssigkeit zugesetzt wird, und die Summe der
Radioaktivität wird mittels eines Flüssig-Szintillators
(Beckmann) ausgewertet. Die Basal-Counts werden mittels
Kontrollpräparaten, die 10 min gekocht wurden, ausgewertet.
Die prozentuale Inhibierung der ACAT-Enzymaktivität, die in
Gegenwart der in Frage stehenden Verbindung erhalten wird,
wird prozentweise im Vergleich zu den Kontrollwerten
berechnet. Die in Gegenwart des Solubilisierungsträgers
bestimmten Kontrollwerte entsprechen im Durchschnitt 50 nMol
[14-C] gebildetes Cholesterinoleat/h/mg Mikrosomialproteine.
Die inhibitorische Wirkung des ACAT-Enzyms für die
erfindungsgemäßen Verbindungen und für die Referenz-
Verbindungen (Ci-976 und RP-70676) wird in Tabelle 1
demonstriert und als Konzentration ausgedrückt, bei der die
ACAT-Aktivität um 50% inhibiert wird (IC₅₀).
| Beispiel Nr. | |
| IC₅₀ (µM) | |
| 1 | |
| 4,2 | |
| 2 | 6,1 |
| 3 | 2,7 |
| 4 | 14,2 |
| 5 | 18,3 |
| 6 | 0,4 |
| 7 | 11,4 |
| 8 | »10 |
| 9 | 1,8 |
| 10 | 2,0 |
| 11 | 1,3 |
| 12 | 120,0 |
| 13 | 8,2 |
| 14 | 1,9 |
| 15 | 9,2 |
| 16 | 29,7 |
| 17 | 422,0 |
| 18 | 330,0 |
| 19 | 0,3 |
| 20 | 3,4 |
| CI-976 | 2,6 |
| RP-70676 | 2,0 |
Die hypolipämische Wirkung wird in vivo in Ratten unter
Verwendung von männlichen SD-Tieren (Charles River) mit einem
Anfangsgewicht von 130-150 g ausgewertet, die unter
kontrollierten Bedingungen bei einer Temperatur von 21 ± 1°C,
60% relativer Luftfeuchtigkeit und 12 h Licht/Dunkelzyklen
gehalten wurden.
Das verwendete experimentelle Modell umfaßt die Verwendung
von Tieren, die "ad libitum" mit einer modifizierten Nath-
Diät (Atherosklerosis, 30, 1978, S. 45) mit der folgenden
Zusammensetzung gefüttert wurden:
| hydriertes Kokosnußöl|24% | |
| Cholesterin | 0,5% |
| Cholsäure | 0,5% |
| Casein und Vitamine | 21% |
| Mineralsalze | 4% |
| Maisöl | 1% |
| Sucrose | 48% |
Die Tiere werden mit dieser Diät 15 aufeinanderfolgende Tage
gefüttert, währenddessen ihnen die getesteten Verbindungen
einmal täglich auf oralem Wege gegeben werden. 24 h nach der
letzten Verabreichung werden die Tiere durch Enthauptung
geopfert, wobei ihr Blut zur Bestimmung der Serumlipide und
ihre Leber zur Auswertung der Lipide in der Leber entfernt
wird.
Dieses Experimentalmodell hat das Ziel der Bewertung der
Effizienz der Produkte, die "in vitro" am aktivsten und am
repräsentativsten für die chemische Klasse bei einem
konsolidierten Hyperlipämie-Modell sind, und das Ziel,
gleichzeitig die Effizienz und Sicherheit der Verbindungen in
der Leber zu kontrollieren.
Die Bestimmung der Triglyceride, des Gesamtcholesterins,
assoziiert mit freiem HDL, und des freien Cholesterins, wird
mittels im Handel erhältlicher enzymatischer Kits ausgeführt.
Die Konzentration von Cholesterin VLDL + LDL wird aus der
Differenz zwischen Gesamtcholesterin und HDL bestimmt.
Die Konzentration des in der Leber veresterten Cholesterins
wird aus der Differenz zwischen dem gesamten und freien
Cholesterin bestimmt. Die Lipide werden nach der Folch′schen
Methode (J. Biol. Chem., 226, 1957, S. 497) mit einer
Mischung aus Chloroform : Methanol (2 : 1) nach Homogenisierung
extrahiert. Die in der organischen Phase enthaltenen Lipide
werden dann unter einem Stickstoffstrom getrocknet, wieder in
Isopropanol gelöst und unter Verwendung von handelsüblichen
Kits ausgewertet. Die im experimentellen in vivo Modell
erhaltenen Ergebnisse für einige der interessantesten und
repräsentativsten Verbindungen der Erfindung werden in
Tabelle 2 wiedergegeben. Dieselbe Tabelle gibt die Daten
bezüglich zweier Referenz-Verbindungen (CI-976 und RP-70676)
wieder.
Die Werte werden als prozentuale Abweichung im Vergleich zu
den hyperlipämischen Kontrollen, die Carboxymethylcellulose
(CMC) 0,5% in Wasser mit einer Dosis von 10 ml/kg/Tag auf
oralem Weg erhielten, ausgedrückt.
Derselbe Träger wird zur Suspendierung der in Frage stehenden
Verbindungen verwendet, die in den Dosen von 10 und
50 mg/kg/Tag auf oralem Weg getestet wurden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben eine sehr starke
ACAT-hemmende Aktivität in vitro und eine sehr interessante
hypolipämische Aktivität in vivo, die Cholesterin ebenso wie
Serum-Triglyceride beeinflußt. Bezüglich der Wirkung auf
Cholesterin sind diese Verbindungen in der Tat imstande, die
Fraktion, die mit den VLDL- und LDL-Lipoproteinen assoziiert
ist, signifikant zu verringern, während sie einen Anstieg der
Fraktion, die an die HDL gebunden ist, bestimmen. Auch die
zirkulierenden Triglyceride werden verringert, wenngleich in
geringerem Ausmaß. Zur Verwendung als hypolipämische Mittel
werden die Verbindungen der vorliegenden Erfindung
vorzugsweise auf oralem Weg verabreicht. Die neuen
Verbindungen können daher in Form von Kapseln, Tabletten,
Dragees, Pulvern, oralen Lösungen oder flüssigen Suspensionen
dargereicht werden. All die oben erwähnten Präparate können
herkömmliche Zusatzstoffe und Arzneiträger enthalten. Die
Dosierung der Verbindung, die zur hypolipämischen Therapie
verabreicht wird, hängt von der Art der verwendeten Verbindung,
vom Gewicht, Alter und Geschlecht des Patienten, von der
speziellen zu behandelnden Krankheit und auch für diesen
speziellen Typ von Verbindungen vom gewünschten
therapeutischen Effekt ab. Im allgemeinen kann die Tagesdosis
zwischen 10 und 1000 mg Wirkstoff, verteilt auf 1 bis 3
Verabreichungen, variieren. Die Zusammensetzungen werden im
allgemeinen rund 5 bis 500 mg Wirkstoff pro Dosierungseinheit
enthalten.
Als Schlußfolgerung können auf der Grundlage dessen, was hier
berichtet wurde, die erfindungsgemäßen Verbindungen aufgrund
ihrer inhibitorischen Wirkung auf das Enzym Acyl-CoA :
Cholesterin-Acyl-Transferase (ACAT) hypolipämisch wirken,
indem sie die Cholesterinabsorption durch den Darm ebenso wie
die Sekretion von VLDL-Lipoproteinen durch die Leber
verringern. Außerdem können sie dadurch, daß das Enzym direkt
auf die Gefäßwand wirkt, mit dem Akkumulationsmechanismus von
Cholesterinestern interferieren und infolgedessen die
Prozesse, die mit der Entwicklung von atherosklerotischem
Plaque verbunden sind, verlangsamen, blockieren oder im
Ausmaß vermindern. Diese Verbindungen können daher bei allen
Krankheiten verwendet werden, die von der Gegenwart eines
atherosklerotischen Phänomens herrühren, wie beispielsweise
stabiler oder instabiler Angina pectoris, Myokardinfarkt,
Herzinsuffizienz, Thrombose, Cerebralischaemie,
Niereninsuffizienz und nephrotischen Syndromen.
Claims (6)
1. Verbindungen mit der allgemeinen Formel (II):
Het-S-CH₂-Y-CH₂-O-R (II)worin:
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n-, worin O < n < 10;
-C=N-R₂, wobei R₂ = OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy, -NHCONH₂;
R = Phenyl, das in para-Position mit einer Carboxyl- oder C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n-, worin O < n < 10;
-C=N-R₂, wobei R₂ = OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy, -NHCONH₂;
R = Phenyl, das in para-Position mit einer Carboxyl- oder C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann.
2. Verbindungen gemäß Anspruch 1, nämlich:
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- oxopropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy)-2- hydroxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- methoxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2-n- decyloxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{2-[O-(3-Hydroxypropyl)oxyimin]-3-[(4- isobutyloxycarbonyl)phenoxy]propylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- hydrazoncarboxamidpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{5-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n- pentylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{2-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]ethylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]propylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{4-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]butylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{6-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n-hexylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{8-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n-octylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{10-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n- decylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{12-(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy)-n- dodecylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{5-[(p-Ethoxycarbonyl)phenoxy]-n-pentylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{5-[(p-Carboxy)phenoxy]-n-pentylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- oxopropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy)-2- hydroxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- methoxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2-n- decyloxyiminpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{2-[O-(3-Hydroxypropyl)oxyimin]-3-[(4- isobutyloxycarbonyl)phenoxy]propylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-2- hydrazoncarboxamidpropylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{5-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n- pentylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{2-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]ethylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{3-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]propylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{4-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]butylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{6-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n-hexylthio}- 4,5-diphenylimidazol
2-{8-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n-octylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{10-[(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy]-n- decylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{12-(p-Isobutyloxycarbonyl)phenoxy)-n- dodecylthio}-4,5-diphenylimidazol
2-{5-[(p-Ethoxycarbonyl)phenoxy]-n-pentylthio}-4,5- diphenylimidazol
2-{5-[(p-Carboxy)phenoxy]-n-pentylthio}-4,5- diphenylimidazol
3. Pharmazeutische Zusammensetzungen, dadurch
gekennzeichnet, daß sie als Wirkstoff eine
Verbindung gemäß Anspruch 1 zusammen mit den
gewöhnlichen Trägerstoffen und Verdünnungsmitteln
enthalten.
4. Pharmazeutische Zusammensetzungen gemäß Anspruch 3,
dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung aus
denen des Anspruchs 2 ausgewählt wird.
5. Verwendung der Verbindungen mit der allgemeinen Formel
(II)
Het-S-CH₂-Y-CH₂-O-R (II)worin:
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n-, worin O < n < 10;
-CHOH-, womit die racemische Mischung ebenso wie jede der beiden chiralen Formen gemeint ist;
-C=N-R₂, worin R₂ = OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy, -NHCONH₂;
R = Phenyl, das in para-Position mit einer Carboxyl- oder C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann, als ACAT-inhibierende Mittel.
Het = 4,5-Diphenylimidazol-2-yl;
Y = -CO-;
-(CH₂)n-, worin O < n < 10;
-CHOH-, womit die racemische Mischung ebenso wie jede der beiden chiralen Formen gemeint ist;
-C=N-R₂, worin R₂ = OH, C₁-C₁₀-Alkoxy, ω-Hydroxy- C₁-C₁₀-alkoxy, -NHCONH₂;
R = Phenyl, das in para-Position mit einer Carboxyl- oder C₁-C₂₀-Alkoxycarbonyl-Gruppe substituiert ist, wobei die Alkoxy-Gruppe linear oder verzweigt sein kann, als ACAT-inhibierende Mittel.
6. Verwendung gemäß Anspruch 5, dadurch
gekennzeichnet, daß sie auf die Behandlung der
Atherosklerose gerichtet ist, unter besonderem Bezug auf
die Akkumulation von Cholesterin und die Entwicklung von
atheromatösem Plaque.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI931806A IT1270976B (it) | 1993-08-06 | 1993-08-06 | Composti inibitpri di acil enzima-a-colesterolo-o-acil transferasi ad attivita' terapeutica, loro uso e composizioni farmaceutiche che li contengono |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE4428025A1 true DE4428025A1 (de) | 1995-02-09 |
Family
ID=11366803
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE4428025A Withdrawn DE4428025A1 (de) | 1993-08-06 | 1994-08-08 | Inhibitoren der Acyl-Enzym-A-Cholesterin-O-Acyl-Transferase mit therapeutischer Wirksamkeit, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07149733A (de) |
| DE (1) | DE4428025A1 (de) |
| GB (1) | GB2280675A (de) |
| IT (1) | IT1270976B (de) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2382676A1 (en) * | 1999-11-05 | 2001-05-17 | Warner-Lambert Company | Prevention of plaque rupture by acat inhibitors |
| RU2358734C2 (ru) * | 2003-08-29 | 2009-06-20 | Кова Ко., Лтд. | Способ стабилизации бляшки с высоким содержанием липидов и способ профилактики ее разрушения |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1248528B (it) * | 1991-06-21 | 1995-01-19 | Pierrel Spa | Derivati di eteri e tioeteri (etero) aromatici aventi attivita` antiiperlipidemica, procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono. |
-
1993
- 1993-08-06 IT ITMI931806A patent/IT1270976B/it active IP Right Grant
-
1994
- 1994-08-05 GB GB9415873A patent/GB2280675A/en not_active Withdrawn
- 1994-08-05 JP JP6204436A patent/JPH07149733A/ja active Pending
- 1994-08-08 DE DE4428025A patent/DE4428025A1/de not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2280675A (en) | 1995-02-08 |
| IT1270976B (it) | 1997-05-26 |
| ITMI931806A1 (it) | 1995-02-06 |
| ITMI931806A0 (it) | 1993-08-06 |
| GB9415873D0 (en) | 1994-09-28 |
| JPH07149733A (ja) | 1995-06-13 |
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