DE3780340T2 - Reagenz zur enzymatischen bestimmung von primaeren c1-c4-alkoholen und dasselbe verwendendes verfahren. - Google Patents
Reagenz zur enzymatischen bestimmung von primaeren c1-c4-alkoholen und dasselbe verwendendes verfahren.Info
- Publication number
- DE3780340T2 DE3780340T2 DE8787105040T DE3780340T DE3780340T2 DE 3780340 T2 DE3780340 T2 DE 3780340T2 DE 8787105040 T DE8787105040 T DE 8787105040T DE 3780340 T DE3780340 T DE 3780340T DE 3780340 T2 DE3780340 T2 DE 3780340T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- reagent
- alcohols
- primary
- determination
- peroxidase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 108010025188 Alcohol oxidase Proteins 0.000 claims abstract description 14
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N Aminoantipyrine Natural products CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract description 11
- HLVXFWDLRHCZEI-UHFFFAOYSA-N chromotropic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(O)=C2C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=C1 HLVXFWDLRHCZEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N antipyrine Chemical compound CN1C(C)=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 3
- 229960005222 phenazone Drugs 0.000 claims abstract 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 241000235648 Pichia Species 0.000 claims description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 claims description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 34
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 235000015096 spirit Nutrition 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 description 3
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- -1 aminophenazone Chemical class 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N quinidine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@H]2[C@@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PJVXUVWGSCCGHT-ZPYZYFCMSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;(3s,4r,5r)-1,3,4,5,6-pentahydroxyhexan-2-one Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO PJVXUVWGSCCGHT-ZPYZYFCMSA-N 0.000 description 1
- ILPGQKHPPSSCBS-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-pyrazol-3-one Chemical class O=C1C=CNN1C1=CC=CC=C1 ILPGQKHPPSSCBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- RMMXTBMQSGEXHJ-UHFFFAOYSA-N Aminophenazone Chemical compound O=C1C(N(C)C)=C(C)N(C)N1C1=CC=CC=C1 RMMXTBMQSGEXHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- JEYCTXHKTXCGPB-UHFFFAOYSA-N Methaqualone Chemical compound CC1=CC=CC=C1N1C(=O)C2=CC=CC=C2N=C1C JEYCTXHKTXCGPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N Phenazopyridine Chemical compound NC1=NC(N)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1 QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 229960000212 aminophenazone Drugs 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000006701 autoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIBYAHWJQTYFKB-UHFFFAOYSA-N bezafibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(O)=O)=CC=C1CCNC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 IIBYAHWJQTYFKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000516 bezafibrate Drugs 0.000 description 1
- 235000013532 brandy Nutrition 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N chlordiazepoxide Chemical compound O=N=1CC(NC)=NC2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004782 chlordiazepoxide Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012916 chromogenic reagent Substances 0.000 description 1
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950009887 dibupyrone Drugs 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940120889 dipyrone Drugs 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-N disodium;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003883 furosemide Drugs 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000019534 high fructose corn syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- LVWZTYCIRDMTEY-UHFFFAOYSA-N metamizole Chemical compound O=C1C(N(CS(O)(=O)=O)C)=C(C)N(C)N1C1=CC=CC=C1 LVWZTYCIRDMTEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000564 nitrofurantoin Drugs 0.000 description 1
- NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N nitrofurantoin Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)NC(=O)C1 NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 229960001181 phenazopyridine Drugs 0.000 description 1
- DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N phenobarbital Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002695 phenobarbital Drugs 0.000 description 1
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- DBABZHXKTCFAPX-UHFFFAOYSA-N probenecid Chemical compound CCCN(CCC)S(=O)(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 DBABZHXKTCFAPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003081 probenecid Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- SIXLXDIJGIWWFU-UHFFFAOYSA-N pyritinol Chemical compound OCC1=C(O)C(C)=NC=C1CSSCC1=CN=C(C)C(O)=C1CO SIXLXDIJGIWWFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004986 pyritinol Drugs 0.000 description 1
- 229960001404 quinidine Drugs 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 description 1
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Inorganic materials [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- CGTMEHPODKVIII-UHFFFAOYSA-M sodium;[(1,5-dimethyl-3-oxo-2-phenylpyrazol-4-yl)-(2-methylpropyl)amino]methanesulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(N(CS([O-])(=O)=O)CC(C)C)=C(C)N(C)N1C1=CC=CC=C1 CGTMEHPODKVIII-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 description 1
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 1
- JJSHYECKYLDYAR-UHFFFAOYSA-N thozalinone Chemical compound O1C(N(C)C)=NC(=O)C1C1=CC=CC=C1 JJSHYECKYLDYAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950007145 tozalinone Drugs 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
- Die vorliegende Erfindung betrifft ein Reagens in assoziierter Form für die qualitative und/oder quantitative enzymatische Bestimmung von primären C&sub1;-C&sub4;-Alkoholen sowie eine analytische Methode, die diesen Reagenskomplex verwendet. Es besteht ein dringender Bedarf für eine analytische Methode zur Bestimmung von primären C&sub1;-C&sub4;-Alkoholen, besonders von Methanol und Ethanol, die sowohl empfindlich und schnell, als auch einfach genug ist, um auch durch unerfahrenes Personal und ohne die Notwendigkeit von Laborarbeiten durchgeführt werden zu können.
- Daher wurden einige Systeme entwickelt, die auf einer Reaktion mit Alkoholoxidase beruhen und die in folgendem Reaktionsschema zusammengefaßt sind: RCH&sub2;OH + O&sub2; AlkoholoxidaseR-CHO + H&sub2;O&sub2;.
- Das sich bildende Wasserstoffperoxid wird durch bekannte Verfahren unter Verwendung einer Peroxidase und eines chromogenen Systems des Trindertyps (Phenol/4-Aminoantipyrin) nachgewiesen.
- In den europäischen Offenlegungsschriften EP-A-110 173, EP- A-133 481 und EP-A-164 008 sind Testsysteme beschrieben, bei denen die Alkoholoxidase, die Peroxidase und die chromogenen Reagentien auf einen geeigneten Träger aus hydrophilem Material absorbiert werden. Alle diese Systeme erfordern jedoch besondere Maßnahmen, z.B. die Zugabe von Stabilisatoren oder von Enzymregulatoren, sowie den Einsatz von speziellen Verfahren zur Überwindung der Schwierigkeiten, die mit der geringen Stabilität der Alkoholoxidase und deren Tendenz zur Autoxidation verbunden sind, die folglich zu falsch-positiven Resultaten führt.
- Es konnte jetzt die Möglichkeit aufgezeigt werden, unter Verwendung einer aus Hefe der Gattung Pichia extrahierten Alkoholoxidase und einer modifizierten Trinder-farbgebenden Reaktion, in der der Phenolbestandteil Chromotropsäure (4,5- Dihydroxy-2,7-naphthalindisulfonsäure) oder eines ihrer Salze ist, alle drei Reagentien ohne Stabilitätsprobleme in assoziierter Form zu kombinieren.
- Der Reagentienkomplex ist unbegrenzt stabil und insofern vorteilhaft, als zu seiner Verwendung keine Vorbereitung und keine Zugabe von Stabilisatoren nötig ist und insbesondere, daß das zu untersuchende Serum nicht verdünnt werden muß, was das System verläßlicher macht. Die Analyse von 10 Ethanol-freien Seren mit einer optischen Dichte von 0,028 bis 0,034 zeigte, daß das erfindungsgemäße Verfahren keine falsch-positiven Resultate hervorruft und daß folglich keine Radikalfänger (wie Ascorbinsäure oder Cystein) erforderlich sind.
- Durch das Fehlen der Peroxidradikalfänger wird mit einem Wert von 50 mg/100 ml eine höhere Empfindlichkeit erreicht, als es bei den bekannten Verfahren der Fall ist.
- Die Peroxidase kann beliebigen Ursprungs sein. Sie wird in stöchiometrischen Mengenverhältnissen im Überschuß bis zu 100 Enzymeinheiten (U.I.) pro ml eingesetzt. So wurde gezeigt, daß die Peroxidase selbst einen stabilisierenden Einfluß auf die Alkoholoxidase ausübt.
- Bezüglich des in Verbindung mit der Chromotropsäure einzusetzenden 1-Phenyl-pyrazolinonderivats ist 4- Aminoantipyrin besonders bevorzugt. Dieses führt zu einer Reaktion, die ein Absorptionsmaximum bei 590 nm aufweist, also in einem Bereich, der für optimale visuelle Untersuchungen geeignet ist.
- Andere bekannte Verbindungen wie Aminophenazon, Propiphenazon, Methanpyron, Tozalinon, Dibupyron und Sulphapyrin können ebenfalls verwendet werden.
- Es ist erfindungsgemäß möglich, in biologischen Flüssigkeiten Ethanol und andere primäre C&sub1;-C&sub4; Alkohole in einem Linearitätsbereich von 50 bis 400 mg/dl nachzuweisen, ohne dabei die Probe ausfällen zu müssen.
- Die Bestimmung kann sowohl als Endpunktbestimmung als auch in Form einer Kinetik durchgeführt werden. Dabei können beide Formen quantitativ mittels Farbbestimmung gegen einen Standard und halb-quantitativ durch Vergleich mit einer Farbskala ausgeführt werden.
- Dieses Verfahren erfordert nicht die Verwendung von Säuren zum Abstoppen der Reaktion, es kann sowohl manuell als auch in geeigneten automatischen Geräten durchgeführt werden und wird nicht durch Arzneistoffe (z.B. Antikoagulantien) oder biologische Substanzen, die normalerweise in biologischen Flüssigkeiten vorkommen, beeinflußt.
- Insbesondere wurde keine Störung durch Glukose, Harnsäure und Cholesterin beobachtet, da diese Substanzen kein Substrat für die Alkoholoxidase darstellen.
- Der erfindungsgemäße reaktive Komplex kann in lyophilisierter Form hergestellt werden, wobei dieser alle Bestandteile und geeignete Träger für die Lyophilisation wie Zucker, Aminosäuren, Polyole, Proteine und Gemische davon enthält. Vorzugsweise werden Saccharose, Lactose, Mannit, Polyvinylpyrrolidon, Glycin, Glutaminsäure und deren Salze, Asparaginsäure oder deren Salze, Albumin, usw. verwendet.
- Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung, ohne sie einzuschränken.
- Es werden zwei Lösungen mit folgender Zusammensetzung hergestellt:
- Phosphatpuffer, pH 7,50 500 mMol
- Triton X 100 5 g/l
- Phosphatpuffer 10 mMol
- Chromotropsäure 15 mMol
- 4-Aminoantipyrin 3 mMol
- EDTA Na&sub2; 5 mMol
- Peroxidase 20.000 U/l
- Alkoholoxidase 40.000 U/l
- Träger für die Lyophilisation 30 g/l.
- 0,5 ml der Lösung "A" werden in Glasgefäße gefüllt und in einer Tiefkühlzelle 4 h bei -45ºC eingefroren. Anschließend werden in diese Gefäße 0,3 ml der Lösung "B" gegeben.
- Das Reaktionsprodukt wird dann lyophilisiert unter Vermeidung von Erhitzen auf mehr als 40ºC.
- Das so hergestellte Reaktionsagens wird dann in geeigneter Weise verschlossen und kann nach Rekonstitution mit 3 ml destilliertem Wasser für die manuelle Bestimmung verwendet werden. Dabei kann folgendes Verfahren Anwendung finden:
- Probe: Serum oder Plasma
- Temperatur: 20-25ºC oder 37ºC
- Wellenlänge: 570-620 nm (585 nm)
- Küvette: 1 cm optischer Weg.
- In zwei verschiedene Gefäße, die jeweils das mit 3 ml destilliertem Wasser rekonstituierte Reaktionsagens enthalten, werden 10 mcl der Probe bzw. 10 mcl einer Standardlösung mit bekannter Ethanolkonzentration (von 50 bis 400 mg/dl) gegeben. Die Gefäße werden geschüttelt. Anschließend werden die Reaktionsgemische entweder wenigstens 30 min bei 20-25ºC oder 15 min bei 37ºC inkubiert. Die Absorption der Probenlösung (Ec) und der Referenzlösung (Er) wird in einem geeigneten Spektrofotometer oder Fotokolorimeter bei einer Wellenlänge von 585 nm gemessen. Dazu wird das Gerät mittels einer Lösung, die lediglich rekonstituiertes Reaktionsagens enthält, eingestellt.
- Berechnung: Ethanol mg/dl = Ec/Er Konz.Ref.Lösung (mg/dl).
- Eine Lösung folgender Zusammenstellung wird hergestellt:
- Phosphatpuffer, pH 7,5 100 mMol
- Chromotropsäure 1,5 mMol
- 4-Aminoantipyrin 0,3 mMol
- Peroxidase 2.000 U/l
- Alkoholoxidase 2.000 U/l
- Triton X 100 1 g/l
- Die Lösung wird in automatischen Meßgeräten in einem Proben/Reaktionsagensverhältnis von 1:300 eingesetzt.
- Das Ablesen erfolgt bei 600 nm.
- Inkubationszeit: 15 min bei 37ºC oder 20-25ºC bei der Endpunktbestimmung oder bei der Bestimmung von ΔE/min zwischen 210 und 1000 Sekunden bei 37ºC zur Bestimmung der Kinetik.
- Das Reaktionsagens nach Beispiel 1 kann nach Rekonstitution auch für die Ethanolbestimmung in ausgeatmeter Luft verwendet werden. Dazu reicht es aus, daß die Versuchsperson mittels einer Kanüle wenigstens 10 bis 20 Sekunden lang Luft in das Reaktionsagens ausatmet. Die sich bildende Farbe kann mittels eines Spektrofotometers oder durch Vergleich mit einer Farbskala ausgewertet werden.
- Es ist möglich, das lyophilisierte Reaktionsagens des Beispiels 1 in dem gleichen Verfahren zu verwenden, wobei jedoch zuvor das Agens für Wein und Bier 1:50 und für Brandy und andere Spirituosen 1:100 mit Wasser verdünnt wird. Probe angegebener Wert ermittelter Wert Wein Spirituosen
- 10 Serumproben mit bekannten Mengen an Ethanol wurden unter Verwendung des nach Beispiel 1 hergestellten Reaktionsagens untersucht. Einige Proben wurden im voraus von Protein gereinigt. Die folgende Tabelle zeigt die Unempfindlichkeit des erfindungsgemäßen Verfahrens gegenüber der Anwesenheit von Serumproteinen. Proben ausgefälltes Serum nicht ausgefälltes Serum
- Wie im vorangegangenen Beispiel wurde ein Vergleich ausgeführt, in diesem Fall jedoch zwischen der Endpunktbestimmung und der Bestimmung mittels einer Kinetik. Auch hier sind die Werte, die in der gleichen Probe, aber mit unterschiedlichen Techniken erhalten wurden, praktisch identisch und liegen innerhalb der gewöhnlich auftretenden experimentell bedingten Abweichungsfehler. Proben Endpunktbestimmung Bestimmung der Kinetik
- Die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen zeigen bis zu der angegebenen Konzentration keine Störung bei der Ethanolbestimmung im Serum. Arzneistoff getestete Konzentration (mg/l) Acetylsalicylsäure Ampicillin Ascorbinsäure Bezafibrat Carbochrom Chinidin Chloramphenicol Chlorodiazepoxid Caffein Etaverin Furosemid Glybenzylamid Indomethacin Metaqualon Methyldopa Nikotinsäure Nitrofurantoin Metamizol Ozazepam Oxytetracyclin Paracetamol Phenobarbital Phenoprocumon Phenazopyridin Phenytoin Probenecid Procain Pyridamol Pyritinol (Pyritiazin) Sulphamethoxazol Theophyllin Trimethoprim Dexchloropheniramin Antikoagulantien getestete Konzentration (mg/dl) Heparin Natriumcitrat Natriumfluorid EDTA Biologische Substanzen getestete Konzentration (mg/dl) Glucose Fructose Galactose Bilirubin Hämoglobin Triglycerid
- In bezug auf die Stabilität wurden einige Experimente durchgeführt. Dazu wurden unterschiedliche Träger in Verbindung mit lyophilisierter Alkoholoxidase enthaltenden Reagentien untersucht. Die Ergebnisse sind nachstehend zusammengefaßt.
- In allen Lyophilisationsversuchen wurde die Alkoholoxidase in einer etwa 35%igen Saccharoselösung in 0,02 M Phosphatpuffer, pH 6,6, verdünnt. Enzymaktivität 37ºC behandeltes Testset Gehalt vor der Lyophilisation Gehalt nach Lyophilisation Tage verwendeter Träger n.b. = nicht bestimmt 4 A.A. = 4-Amino-antipyrin POD = Peroxidase Glut. = einbasisches Natriumglutamat
Claims (3)
1. Reagenz, in assoziierter Form, für die enzymatische
Bestimmung von primären C&sub1;-C&sub4;-Alkoholen in Abwesenheit
von Radikalfängern, umfassend eine Alkoholoxidase,
extrahiert aus Hefe der Gattung Pichia, einen Überschuß
an Peroxidase und Chromotropsäure/Antipyrin.
2. Reagenz nach Anspruch 1, in lyophilisierter Form auf
inerten Trägern, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
Zuckern, Aminosäuren, Polyolen, Proteinen und Gemischen
davon.
3. Verfahren für den enzymatischen Nachweis von primären C&sub1;-
C&sub4; Alkoholen mittels einer Alkoholoxidase, Peroxidase und
eines farbgebenden Systems, gekennzeichnet durch die
Verwendung eines Reagenzes bestehend aus Alkoholoxidase,
extrahiert aus Hefe der Gattung Pichia, Peroxidase im
Überschuß und Chromotropsäure/Antipyrin als farbgebendem
System, in assoziierter Form.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT20012/86A IT1204297B (it) | 1986-04-09 | 1986-04-09 | Complesso di reagenti per la determinazione enzimatica di alcoli primari c1-c4 e metodo relativo |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE3780340D1 DE3780340D1 (de) | 1992-08-20 |
| DE3780340T2 true DE3780340T2 (de) | 1992-12-17 |
Family
ID=11163108
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE8787105040T Expired - Lifetime DE3780340T2 (de) | 1986-04-09 | 1987-04-04 | Reagenz zur enzymatischen bestimmung von primaeren c1-c4-alkoholen und dasselbe verwendendes verfahren. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0240964B1 (de) |
| AT (1) | ATE78300T1 (de) |
| DE (1) | DE3780340T2 (de) |
| ES (1) | ES2041653T3 (de) |
| GR (1) | GR3005331T3 (de) |
| IT (1) | IT1204297B (de) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE137738T1 (de) * | 1991-03-21 | 1996-05-15 | Moeller Willi Ag | Verfahren zur bestimmung von alkoholen und verwendung einer vorrichtung zur alkoholbestimmung |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1157399A (en) * | 1979-06-05 | 1983-11-22 | Thomas R. Hopkins | Alcohol oxidase from pichia-type yeasts |
| CA1205731A (en) * | 1982-11-01 | 1986-06-10 | Roger C. Phillips | Test device and method for measurement of analyte levels in colored aqueous fluids |
| DE3477812D1 (en) * | 1983-01-12 | 1989-05-24 | Alcoholism & Drug Addiction | Rapid analysis of ethanol in body fluids |
| JPS59183698A (ja) * | 1983-04-02 | 1984-10-18 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 基質又は酵素活性の定量方法 |
| US4734360A (en) * | 1983-07-12 | 1988-03-29 | Lifescan, Inc. | Colorimetric ethanol analysis method and test device |
| US4556635A (en) * | 1983-08-29 | 1985-12-03 | Phillips Petroleum Company | Determination of alcohol content in water imiscible organic systems |
| US4642286A (en) * | 1984-05-07 | 1987-02-10 | Moldowan Mervin J | Composition and method for ethanol determination |
| US4810633A (en) * | 1984-06-04 | 1989-03-07 | Miles Inc. | Enzymatic ethanol test |
-
1986
- 1986-04-09 IT IT20012/86A patent/IT1204297B/it active
-
1987
- 1987-04-04 EP EP87105040A patent/EP0240964B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-04-04 DE DE8787105040T patent/DE3780340T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-04-04 ES ES198787105040T patent/ES2041653T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-04-04 AT AT87105040T patent/ATE78300T1/de not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-07-31 GR GR920401668T patent/GR3005331T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0240964A1 (de) | 1987-10-14 |
| EP0240964B1 (de) | 1992-07-15 |
| ES2041653T3 (es) | 1993-12-01 |
| GR3005331T3 (de) | 1993-05-24 |
| DE3780340D1 (de) | 1992-08-20 |
| IT1204297B (it) | 1989-03-01 |
| ATE78300T1 (de) | 1992-08-15 |
| IT8620012A0 (it) | 1986-04-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Glatzle et al. | Glutathione reductase test with whole blood, a convenient procedure for the assessment of the riboflavin status in humans | |
| Apstein et al. | Improved automated lactate determination | |
| DE2442561B2 (de) | Diagnostikum und verfahren zur bestimmung des alpha-amylasegehalts einer probe | |
| DE3620817A1 (de) | Verfahren zur spezifischen bestimmung des serumfructosamingehalts sowie hierfuer geeignetes reagenzgemisch | |
| DE3205301C2 (de) | ||
| DE2924249C2 (de) | Spezifische bindungs-untersuchungsmethode zur bestimmung eines liganden in einem fluessigen medium und reagentien zur durchfuehrung dieser methode | |
| DE3743405A1 (de) | Verfahren zur bestimmung von fructosamin | |
| DE3446714A1 (de) | Verfahren zum nachweis des vorliegens einer allergie und zum spezifischen nachweis des fuer die allergie verantwortlichen allergens | |
| DE3780340T2 (de) | Reagenz zur enzymatischen bestimmung von primaeren c1-c4-alkoholen und dasselbe verwendendes verfahren. | |
| CH670709A5 (de) | ||
| EP0863995B1 (de) | Verbessertes verfahren zur bestimmung von lipase | |
| EP0048347B1 (de) | Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Glycerin | |
| DE3874611T2 (de) | Verfahren und reagens zur bestimmung von ld-1-isoenzym. | |
| DE3006789A1 (de) | Verfahren und enzymzusammensetzung zur hydrolyse von glycerinestern | |
| DE2612725C3 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin | |
| SU416969A3 (de) | ||
| CH651318A5 (de) | Verfahren und reagenz zur bestimmung der peroxidase. | |
| EP0498260B1 (de) | Verfahren zur Stabilisierung von 1-Methylhydantoinase, Verwendung einer stabilisierten 1-Methylhydantoinase zur Bestimmung eines Analyten, entsprechendes Bestimmungsverfahren sowie hierfür geeignete Mittel | |
| DE4237479A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Konjugaten aus einem spezifischen Bindungspartner und einem kohlenhydrathaltigen Protein | |
| DE4242794A1 (en) | Quantitative automated determn. of 1,5-anhydro:glucitol - using pyranose oxidase from Basidiomycetes fungi no.52 | |
| EP0351790A2 (de) | Verfahren zur Bestimmung von Fructosamin | |
| DE60022961T2 (de) | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Mannose und Reagenz hierzu | |
| Foder et al. | Activator-associated Ca2+-ATPase in erythrocyte membranes from cystic fibrosis patients | |
| EP0874994A1 (de) | Bestimmung der endständigen sialinsäurereste des human-transferrin-moleküls | |
| DE2213729A1 (de) | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Äthanol in Äthanol enthaltendem Material |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |