DE3223115A1 - Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats - Google Patents

Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats

Info

Publication number
DE3223115A1
DE3223115A1 DE19823223115 DE3223115A DE3223115A1 DE 3223115 A1 DE3223115 A1 DE 3223115A1 DE 19823223115 DE19823223115 DE 19823223115 DE 3223115 A DE3223115 A DE 3223115A DE 3223115 A1 DE3223115 A1 DE 3223115A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
fungus
cellulose
cellulase
cellulomonas
ray
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE19823223115
Other languages
English (en)
Inventor
Noel William Lugarno New South Wales Dunn
Peter Philip Edgecliffe New South Wales Gray
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Unisearch Ltd
Original Assignee
Unisearch Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Unisearch Ltd filed Critical Unisearch Ltd
Publication of DE3223115A1 publication Critical patent/DE3223115A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/22—Processes using, or culture media containing, cellulose or hydrolysates thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
    • C12P7/08—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate
    • C12P7/10—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate substrate containing cellulosic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C13—SUGAR INDUSTRY
    • C13K—SACCHARIDES OBTAINED FROM NATURAL SOURCES OR BY HYDROLYSIS OF NATURALLY OCCURRING DISACCHARIDES, OLIGOSACCHARIDES OR POLYSACCHARIDES
    • C13K1/00—Glucose; Glucose-containing syrups
    • C13K1/02—Glucose; Glucose-containing syrups obtained by saccharification of cellulosic materials
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Hydrolysieren eines Cellulose-Substrats zur Herstellung von Mono- und/oder Disachariden unter Verwendung von Cellulase-Enzymen.
5
Es ist bekannt, daß Cellulose-Substrate zu Mono- und/oder Disachariden hydrolysiert werden können, wenn man Cellulase-Enzyme verwendet, die aus Pilzen (fungi) und Strahlenpilzen (Actinomyceten) stammen. Es wurde jedoch gefunden, daß die Rate der Enzym-Produktion und die Zeit zur Erzeugung maximaler Ausbeuten von Enzymen aus Pilzen und Strahlenpilzen die Enzym-Gewinnung für derartige Quellen relativ teuer macht.
Es ist ferner bekannt, daß bestimmte Bakterien der Gattungen Cellulomonas oder Pseudomonas cellulosehaltige Substrate nutzen können und auf Kosten der Zucker wachsen können, die durch enzymatische Hydrolyse des Cellulose-Substrats erzeugt werden. In jüngster Zeit wurde gezeigt, daß diese Bakterien mutiert werden können, wobei mutierte Stämme erhalten werden, die in der Lage sind, erhöhte Mengen an Cellulase-Enzymen zu produzieren. Die Kulturen oder die Kultur-Zubereitung derartiger Stämme von Cellulomonas oder Pseudomonas können verwendet werden, cellulosehaltige Substrate bis zu den einfachen Zuckern zu hydrolysieren. Leider sind diese bakteriellen Zubereitungen hinsichtlich des Ausmaßes der Verzuckerung begrenzt, wenn sie in vitro verwendet werden.
Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren zur enzymatischen Hydrolyse von Cellulose-Substraten sowie eine für das Verfahren geeignete enzymatische Zubereitung anzugeben, mit denen auf einfache Weise und
wirtschaftlich vorteilhafte Weise höhere Ausbeuten an Mono- und/oder Disachariden erhalten werden können.
Die vorliegende Erfindung betrifft somit ein Verfahren zum Hydrolysieren eines Cellulose-Substrats unter Bildung von Mono- und/oder Disachariden, das darin besteht, daß man das Cellulose-Substrat mit einer cellulosespaltenden Enzym-Zubereitung aus einem Stamm oder einem mutierten Abkömmling eines Bakteriums der Gattungen Cellulomonas oder Pseudomonas behandelt, die durch eine Cellulase ergänzt ist, die entweder aus einem Pilz (fungus) oder einem Strahlenpilz (Aktinomyceten) stammt.
Es wurde überraschenderweise gefunden, daß ein synergistisches Ergebnis erhalten wird, wenn ein Cellulase-Enzym aus einem Pilz oder einem Strahlenpilz zu einer Kultur eines Bakteriums der Gattungen Cellulomonas oder Pseudomonas zugesetzt wird. Es wurde gefunden, daß eine derartige Kombination das Substrat sehr viel weitgehender hydrolysiert, als eine bakterielle Kultur allein. Verglichen mit einer Pilz-Enzym-Zubereitung allein wird für eine gegebene Zuckerbildung sehr viel weniger Enzymprotein benötigt.
Die vorliegende Erfindung besteht ferner darin, daß eine cellulosespaltende Zubereitung geschaffen wird, die eine cellulosespaltende Enzym-Zubereitung, die aus einem Bakterium der Gattungen Cellulomonas oder Pseudomonas erhalten wurde, enthält, die durch eine Cellulase ergänzt ist, die entweder aus einem Pilz oder einem Strahlenpilz erhalten wurde.
Der beobachtete synergistische Effekt ist sehr unerwartet, und zum gegenwärtigen Zeitpunkt ist keine vollständige Erklärung des beobachteten Phänomens möglich. Es wurde gefunden, daß die Cellulomonas und Pseudomonas in vivo gute Wachstumsraten und gute Raten für die Celluloseumwandlung zeigen, daß jedoch bei ihrer Verwendung in vitro die guten Anfangsraten bald einen konstanten Maximalwert (ein Plateau) erreichen. Selbst sehr geringe Mengen von Cellulaseenzymen aus einem Pilz oder Strahlenpilz, die der Cellulomonas-oder Pseudomonas-Kultur zugesetzt werden, führen zu beträchtlich gesteigerten Ergebnissen. Es ist möglich, daß das eine Folge der hohen Aktivitätsgrade ist, die eine Pilzcellulase in vitro gegenüber kristalliner Cellulose zeigt.
Die bakteriellen Zubereitungen sind sehr viel billiger herzustellen als die Pilz- oder Strahlenpilz-Zubereitungen, da die Raten der Enzymproduktion beträchtlich besser sind. Die Zugabe von kleinen Mengen an Pilzcellulase kann unter bevorzugten Bedingungen zu Hydrolysegraden führen, die das fünffache des Hydrolysegrads betragen, der zu erwarten wäre, wenn die Pilzcellulase allein verwendet worden wäre.
Die bakterielle Enzym-Zubereitung kann eine ganze Kulturzubereitung sein, eine ganze Kulturzubereitung, in der die Zellen aufgeschlossen sind oder es kann eine extracelluläre Zubereitung sein. Die Pilze (fungi) und Strahlenpilze (actinomycetes) scheiden Cellulaseenzyme aus, die von den erzeugenden Organismen abgetrennt und im vorliegenden Verfahren verwendet werden können. Wenn gewünscht, können auch ganze Kulturen der Pilze oder Strahlenpilze verwendet werden.
Als das Ausgangsmaterial für das erfindungsgemäße Verfahren kann eine beliebige Quelle für ein Cellulosematerial bzw. cellulosehaltiges Material verwendet werden. Zu den vielen Cellulosematerialien, die vorteilhaft verwendet werden können, gehören Zuckerrohrbagasse, Sorghum-Bagasse, Weizenstroh, Reisstroh, Malzspreu und Maisspindeln, Gambohanf, Sägemehl, Holzschnitzel· und andere Materialien der Forstwirtschaft, Papierabfälle und Papierpulpe.
Im Falle von Materialien, die nicht schon vorher verarbeitet wurden, ist eine gewisse chemische oder physikalische Vorbehandlung erforderlich. Diese Vorbehandlung maciit die Cellulose und die Hemicellulose dem enzymatischen Angriff zugänglicher, indem die Bindungen zwischen der Cellulose und dem Lignin aufgebrochen werden, die Kristallinität der Cellulose vermindert wird und anorganische Komponenten entfernt werden. Die Vorbehandlung kann die Form einer physikalischen Behandlung wie mahlen annehmen; es kann eine chemische Vorbehandlung , wie eine Behändlung mit verdünntem Alkali vorgesehen sein;oder eine Kombination von physikalischen und chemischen Behandlungen, wie ein Erhitzen auf hohe Temperaturen mit schneller anschließender Entspannung. Im Anschluß an die Vorbehandlung kann das Material in einen Reaktor eingegeben werden, um durch den Cellulase-Komplex in Zucker überführt zu werden.
Die Cellulomonas- oder Pseudomonas-Stämme oder Mutanten, aus denen die bakterielle Cellulase erhalten werden soll, werden vorzugsweise anfangs unter solchen Bedingungen gezüchtet, die das Wachstum und die Enzymproduktion fördern. Wenn einmal eine ausreichende Population von Zellen und von Cellulase-Enzym-Komplex erzeugt wurde, können die
Bedingungen geändert werden, so daß die Zucker-Produktion begünstigt wird. Diese geänderten Bedingungen, die das Zellwachstum behindern, können eine gesteigerte Temperatur sein, eine Begrenzung der Verfügbarkeit eines Schlüssel-Wachstumsnährstoffs, der Betrieb unter anäroben Bedingungen oder die Zugabe von metabolischen Hemmstoffen zu dem Kulturmedium.
Die Cellulase aus dem Pilz oder Strahlenpilz stammt vorzugsweise von einem Pilz, der zu den Gattungen Trichoderma, Penicillium, Aspergillus, Fusarium, Schlerotium gehört, oder von einem Strahlenpilz der Gattungen Streptomyces und Thermoactinomyces.
Besonders bevorzugt ist der Pilz Trichoderma reesei. Ein Synergismus wurde auch beobachtet, wenn Cellulaseenzyme von mehr als einem Organismus der obigen Liste zu Cellulomonas-oder Pseudomonas-Zubereitungen zugesetzt wurde.
Die Pilz- oder Strahlenpilz-Cellulase sollte in einer Menge von mindestens 0,01 FPE/ml und vorzugsweise zwischen 0,1 FPE/ml und 5FPE/ml vorliegen. Über 5 FPE/ml ist die weitere Zugabe von Cellulase wirtschaftlich nicht gerechtfertigt, wobei es jedoch so zu sein scheint, daß der synergistische Effekt gemäß der vorliegenden Erfindung auch oberhalb dieses Niveaus beobachtet wird. Die Zellkultur von Cellulomonas oder Pseudomonas sollte so konzentriert wie möglich sein, um die schnellstmögliche Umwandlung von Cellulose zu Zuckern zu erreichen. In der Praxis sind Zubereitungen mit einem Proteingehalt im Bereich von 0,5 bis 20 mg/ml geeignet.
Zusätzlich zur Erzeugung einfacher Zucker durch die Hydrolyse von Cellulosematerialien kann die Hydrolyse der Cellulose in Gegenwart von Bakterien oder Hefen durchgeführt werden, die in der Lage sind, direkt die erzeugten Zucker durch deren Hydrolyse zu Äthanol zu vergären. Auf diese Weise kann eine einstufige Umwandlung von Cellulose zu Äthanol erreicht werden. Das Äthanol wird aus dem Reaktionsmedium mittels üblicher Techniken gewonnen.
10
Nachfolgend wird die Erfindung in Beispielen anhand von bevorzugten Ausführungsformen näher erläutert.
Beispiel 1
Cellulomonas CS1-17 wurde 24 h auf einem ausgeglichenen Salz-Medium, einem Hefeextrakt und einer mit zweiprozentigem alkalxvorbehandeltem Bagasse bei einer Temperatur von 32° C und einem pH im Bereich von 7,0 bis 8,0 gezüchtet. Die Zukerrohrbagasse wurde durch Erhitzen mit 0,1 NaOH/g Trockengewicht der Bagasse bei 100° C 1 h vorbehandelt. Die Kulturtemperatur wurde dann auf 37° C erhöht, die Kultur wurde anärob gemacht, und es wurden 75 g/l von alkalivorbehandelter Bagasse zugesetzt.
Die Freisetzung von reduzierenden Zuckern wurde durch DNS-Analyse (DNS assay) überwacht, wobei die folgenden Werte erhalten wurden: 18,5 mg/ml bei 18 h, 22 mg/ml bei 24 h, 23 mg/ml bei 48 h.
Cellulomonas CS1-17 wurde auf einer alkalivorbehandelten Bagasse, wie oben erläutert, gezüchtet. Nach 24 h Züchtung wurde eine alkalivorbehandelte Bagasse (75g/l) zugesetzt, sowie niedrige Anteile eines Cellulase-Kom-
- ίο -
plexes aus Trichoderma reesei QM 9414, und die Verzuckerung wurde bei 45° C und bei einem pH zwischen 5 und 6 durchgeführt. Es wurden Kontrollversuche durchgeführt, bei denen einmal nur Cellulomonas-Enzyme und nur Trichoderma reesei-Enzym verwendet wurden. Die erhaltenen Werte sind in der nachfolgenden Tabelle gezeigt:
Verdauung von 7,5 % alkalivorbehandelter Bagasse
durch Trichoderma reesei Proteinkon
zentration
(mg/ml)		 QM 94 14 Zucker
48		 (mg/ml)
h
Cellulase 0,25 11, 2
Enzymkonzen
tration		 0,60 14 h Reduzierender
24 h		 25, 5
0,1 FPE/ml 1,45 7, 0 8,4 34, 6
0,25 " 3,00 14, 9 16,9 42, 0
0,5 " 21, 8 26,0
1 ,0 — —
Verdauung von 7,5%iger alkalivorbehandelter Bagasse durch Cellulomonas CS1-17-Cellulase und die Kombination aus Cellulomonasenzym und Trichoderma reesei QM 9414-Enzym
Enzymkomplexe
Proteinkonzentration (mg/ml)
Reduzierender Zucker (mg/ml 14 h 24 h , 48 h
0,1 FPE/ml Trichoderma reesei + CS1-17 Cellulomonas
1 ,18
28,6
33,1
42,2
Enzymkomplexe Proteinkonzentration (mg/ml)
Reduzierender Zucker (mg/ml) 14 h 24 h 48 h
0,25 FPE/ml 1,53 Trichoderma reesei + CS1-17
Ce1Iulomonas
0,5 FPE/ml 2,38
Trichoderma reesei + CS1-17
Ce1Iulomonas
CS1-17
Ce1Iulomonas
allein
0,93
35,1
40,0
16,9
41 ,2
43,6
20,1
49,2
51 ,2
23,2
Beispiel 2
Cellulomonas CS1-17 wurde,wie oben beschrieben, auf einer alkalivorbehandelten Bagasse gezüchtet. Nach 24 h Züchtung wurde alkalivorbehandelte Bagasse (75g/l) zugesetzt, sowie niedrige Anteile eines Cellulase-Komplexes aus Trichoderma reesei Rutgers C-30 und ß-Glucosidase (hergestellt von Novo Industry, Dänemark) und die Verzuckerung wurde bei 45° C unter einem pH-Wert zwischen 5 und 6 durchgeführt. Die erhaltenen Daten sind nachfolgend gezeigt.
3223 Ί 1 5
- 12 -
Verdauung von 7,5%iger alkalivorbehandelter Bagasse durch Cellulomonas CS1-17, Trichoderma reesei Rut C-30 und Novo ß-Glucosidase
Enzymkomplexe
Konzentration des reduzierenden Zuckers (mg/ml)
CS1-1 7 + |i--Glucosidase
2IU/ml + T.reesei C-30
in einer Menge von		 12 h 24 h 48 h
0,5 FPE/ml 50 ,7 56 ,5 60 ,4
0,25 " 44 ,1 52 ,5 56 ,5
0,1 33 ,4 40 ,6 48 ,3
Beispiel 3
Wie oben für Cellulomonas beschrieben, wurde ein Pseudomonas-Stamm PS2-1 auf einer alkalivorbehandelten Bagasse gezüchtet. Unter den für Cellulomonas angegebenen Verzuckerungsbedingungen wurden 12 mg/ml reduzierende Zucker aus 75,5 %iger zugesetzter alkalivorbehandelter Bagasse .freigesetzt. Die Verzuckerung in Gegenwart von 0,1 FPE/ml Cellulase aus Trichoderma reesei QM 9414 führte zur Freisetzung von 28 mg/ml reduzierender Zucker. Es wurde kein Versuch unternommen, die Pseudomonas-Stämme durch Mutation oder auf andere Weise zu verbessern, wobei jedoch der für Cellulomonas beobachtete synergistische Effekt in gleicher Weise auf den untersuchten cellulosespaltenden Pseudomonas-Stamm zutraf.
In den obigen Beispielen wurden Enzyme aus Trichoderma
reesei zusammen mit den Cellulomonas oder Pseudomonasenzymen verwendet. Die vorliegende Erfindung betrifft aber auch die Verwendung von Cellulasen aus anderen Pilz- oder Strahlenpilzquellen in Verbindung mit den Enzym-Zubereitungen aus Cellulomonas oder Pseudomonas.
In den obigen Beispielen bedeutet FPE "Filterpapiereinheit" (eine internationale Einheit) und ist ein anerkanntes Maß der cellulosespaltenden Wirkung von Celluloseenzymen, die aus Pilzquellen gewonnen wurden.

Claims (9)

PATENTANWÄLTE DR. KADOR & DR. KLUNKER K 14487 Unisearch Limited 221-227 Anzac Parade, Kensington New South Wales 2033 Australien Verfahren zum Hydrolisieren eines Cellulosesubstrats PATENTAN SPRÜCHE
1. Verfahren zum Hydrolisieren eines cellulosehaltigen Substrats unter Bildung von Mono- und/oder Disachariden, dadurch gekennzeichnet, daß das cellulosehaltige Substrat mit einer cellulosespaltenden Enzym-Zubereitung aus einem Stamm oder einem mutierten Abkömmling eines Bakteriums der Gattung Cellulomonas oder Pseudomonas behandelt wird, durch eine Cellulase ergänzt wird, die entweder aus einem Pilz oder aus einem Strahlenpilz stammt.
10
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die entweder aus einem Pilz oder aus einem Strahlenpilz stammende Cellulase in einer Menge im Bereich von 0,01 FPE/ml bis 5 FPE/ml vorliegt.
ο _
3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die entweder aus einem Pilz oder einem Strahlenpilz stammende Cellulase in einer Menge im Bereich von 0,1 bis 5 FPE/ml vorliegt.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Pilzcellulase aus einem Pilz (fungus) stammt, der einer der folgenden Gattungen angehört: Trichoderma, Penicillium, Aspergillus, Fusarium oder Schlerotium.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Pilz Trichoderma reesei ist.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die bakterielle cellulosespaltende Enzym -Zubereitung aus Bakterien erhalten wurde, die unter solchen Bedingungen gezüchtet wurden, die die Enzymproduktion begünstigen.
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Hydrolyse in Gegenwart eines Bakteriums oder einer Hefe durchgeführt wird, die in der Lage sind, Zucker unter Bildung von Äthanol zu vergären.
8. Verfahren zum Hydrolysieren eines cellulosehaltigen Substrats unter Bildung von Mono- und/oder Disachariden wie es im wesentlichen hierin unter Bezugnahme auf ein beliebiges Beispiel der Beschreibung beschrieben ist.
9. Eine cellulosespaltende Zubereitung, die eine cellulosespaltende Enzym-Zubereitung enthält, die aus einem
Bakterium der Gattungen Cellulomonas oder Pseudomonas erhalten wurde, die durch eine Cellulase ergänzt ist, die entweder aus einem Pilz oder einem Strahlenpilz stammt.
DE19823223115 1981-07-16 1982-06-21 Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats Withdrawn DE3223115A1 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AUPE977381 1981-07-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE3223115A1 true DE3223115A1 (de) 1983-02-03

Family

ID=3769129

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19823223115 Withdrawn DE3223115A1 (de) 1981-07-16 1982-06-21 Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats
DE19823226606 Withdrawn DE3226606A1 (de) 1981-07-16 1982-07-16 Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19823226606 Withdrawn DE3226606A1 (de) 1981-07-16 1982-07-16 Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats

Country Status (6)

Country Link
AU (1) AU8496382A (de)
BR (1) BR8204206A (de)
DE (2) DE3223115A1 (de)
FR (1) FR2509749A1 (de)
GB (1) GB2102428A (de)
ZA (1) ZA824421B (de)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0562003B2 (de) * 1990-12-10 2015-04-01 Danisco US Inc. Verbesserte saccharifizierung von zellulose durch klonierung und vervielfältigung des beta-glukosidase genes aus trichoderma reesei
EP0733025A1 (de) * 1993-12-09 1996-09-25 Reckitt & Colman Inc. Zusammenstellung und verfahren zur abwasseraufbereitung mit hilfe von pilzlichen und bakteriellen enzymen
RU2223327C1 (ru) * 2002-08-09 2004-02-10 Орлова Валентина Сергеевна Способ получения глюкозы из целлюлозосодержащего сырья, преимущественно отходов пивного производства
UA114465C2 (uk) * 2005-07-19 2017-06-26 Інбікон А/С Спосіб перетворення целюлозного матеріалу в етанол

Also Published As

Publication number Publication date
DE3226606A1 (de) 1983-02-24
GB2102428A (en) 1983-02-02
BR8204206A (pt) 1983-07-12
AU8496382A (en) 1983-01-20
FR2509749A1 (fr) 1983-01-21
ZA824421B (en) 1983-05-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2603889C3 (de) Verfahren zur enzymatischen Hydrolyse von Cellulose zu wasserlöslichen Zuckern
DE2541960C3 (de) Herstellung von Alkohol aus Cellulose
DE2559218C2 (de) Verfahren zur Herstellung von α-Galactosidase und ihre Verwendung zur Hydrolyse von Raffinose
DE3207676C2 (de) Verfahren zur Verzuckerung von Rhizomen und anschließende Fermentierung zu Alkohol
DE69415034T2 (de) Neue xylanase, verfahren zur herstellung derselben, methode zur behandlung von papierbrei, und herstellung von xylo-oligosacchariden
DE2637386A1 (de) Verfahren zur herstellung von aethanol aus cellulosehaltigen abfaellen
DE2308596A1 (de) Enzyme und verfahren zu ihrer herstellung
DE112012005586T5 (de) Verzuckernde Enzymzusammensetzung und Verfahren zur Herstellung einer verzuckerten Lösung unter Verwendung der selbigen
DE3116655A1 (de) Verfahren zur verwertung von bei der tabakherstellung anfallendem celluloseabfallmaterial
DE69116192T2 (de) Für die Polysaccharidhydrolyse aus einem lignozellulosehaltigen Substrat geeignete Enzymzusammensetzung, ihre Herstellung und Verwendung
DE3221869C2 (de)
DE1517810C3 (de) Verfahren zur Herstellung von hochwertigen Maltosesirup
DE3223115A1 (de) Verfahren zum hydrolisieren eines cellulosesubstrats
AT394730B (de) Verfahren zur herstellung exo- und endocellulasefreier xylanase
DE1792748B2 (de) Verfahren zur Herstellung von glucoseisomerisierendem Enzym
DE69219325T2 (de) Xylanase, bazillusstämme die xylanase produzieren und ihre verwendung
DE3137534A1 (de) Verfahren zur herstellung von zuckersirup und von daraus stammenden produkten aus pflanzlichen cellulose-substraten
DE2754650A1 (de) Einstufiges verfahren zur herstellung von aceton und butanol aus cellulose
DE3025098C2 (de) Vorbehandeln von aus Lignozellulosematerialien gewonnenen Hydrolysaten
DE2239210C3 (de) Verfahren zur Herstellung von a- Galactosidase, die eine starke a- Galactosidase-Aktivität und eine äußerst geringe Invertase-Aktivität aufweist, und deren Verwendung zur Zerlegung von Raffinose
AT394865B (de) Verfahren zur herstellung einer xylanase-reichen und cellulase-armen enzymloesung
DE1442108A1 (de) Verfahren zur Zersetzung der Zellwaende von Hefearten mittels ss-Glucanase,welche durch Mikroorganismen erzeugt wird
DE3151176A1 (de) Verfahren zur herstellung von futterhefe und/oder aethylalkohol
DE1642581C3 (de) Verfahren zur Herstellung von alpha-D-Galactosidase
DE2825700A1 (de) Verfahren zur herstellung von glucose

Legal Events

Date Code Title Description
8139 Disposal/non-payment of the annual fee