DE2322959A1

DE2322959A1 - PROCESS FOR BREEDING YEAST TORULOPSIS UTILIS (CANDIDA UTILIS) IN SOLUTIONS WITH 2.5 TO 7% SUGAR CONTENT

Info

Publication number: DE2322959A1
Application number: DE19732322959
Authority: DE
Inventors: Jindrich Leopold; Milena Dipl Ing Spanelova
Original assignee: LACHEMA NP
Current assignee: LACHEMA NP
Priority date: 1972-06-26
Filing date: 1973-05-07
Publication date: 1974-01-24
Also published as: DE2322959B2; BE801474A; AT323694B; CS162972B1; FR2190915A1; GB1395842A; NL7306826A; SU548622A1

Description

23229532322953

233—2O.679P 7-5, 1973'233-2O.679P 7-5, 1973 '

LACHEMA. narodni podnik, Brno (CSSR)

Verfahren zur Züchtung der Hefe Torulopsis
utilis (Candida utilis) in Lösungen
mit 2,5 bis 7 $ ZuckergehaltMethod of growing the yeast Torulopsis
utilis (Candida utilis) in solutions
with $ 2.5 to $ 7 sugar content

Der hefenartige Deuteromycet Torulopsis utilis (Candida utilis) wird im großen in billigem oder wertlosem
Zuckermaterial unter Zusatz von mineralischen Nährelementen (Stickstoff-Phosphor, Kalium, Magnesium und Schwefel) zur Gewinnung von Biomasse gezüchtet, die aufgrund ihres Gehaltes an Eiweiß und Vitaminen ein sehr wertvolles Futtermittel für Geflügel, Schweine und Vieh darstellt.The yeast-like deuteromycete Torulopsis utilis (Candida utilis) is found in large quantities in cheap or worthless
Sugar material with the addition of mineral nutrients (nitrogen-phosphorus, potassium, magnesium and sulfur) grown for the production of biomass, which is a very valuable animal feed for poultry, pigs and cattle due to its protein and vitamin content.

In neuerer Zeit beginnt das Interesse bei verschiedenen Gärprozessen für reinen Zucker als Kohlenstoffquelle zu steigen, denn er stellt oft ein preiswertes und vor al·More recently, interest has started in various fermentation processes for pure sugar as a carbon source to increase, because it often represents an inexpensive and above all

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233-(S 7897)-Lp-r (8)233- (S 7897) -Lp-r (8)

lern eindeutiges Substrat dar, das alle Probleme ausschließt, die mit der veränderlichen Zusammensetzung von Zuckerhaltigem Äbifallraaterial verbunden sindo Er verringert auch die Schwierigkeiten bei der Reinigung von Abwässern, die bei den üblichen Abfall-Rohstoffen meist nicht zu überwinden sind«, Die Abwasser aus biochemischen Prozessen, die als Substrat reinen Zucker verwenden, werden vor ihrer Beseitigung" auf der Abwasserstation vorteilhaft durch Züchtung von Futterhefe vom Restzucker befreit, wobei man die Kapazität der Torulafabrik durch Zusatz weiteren Zukkers zur Abfallauge wesentlich erhöhen kann. Während die üblichen Torula-Züchturigsverfahren Gärlösungen mit 1 % bis 1,5 % Zucker verarbeiten, läßt sich durch Erhöhung seiner Konzentration zum Beispiel auf 5 $ Zucker die Kapazität der Einrichtung auf das 3- t>is 5fache erhöhen. learn to be a clear substrate that eliminates all problems associated with the variable composition of sugar-containing abbifallramaterialo It also reduces the difficulties in the purification of wastewater, which can usually not be overcome with the usual waste raw materials «, The wastewater from biochemical processes who use pure sugar as a substrate are "freed from residual sugar by growing fodder yeast at the sewage station before they are disposed of. The capacity of the torula factory can be increased significantly by adding more sugar to the waste eye Process% to 1.5 % sugar, by increasing its concentration, for example to 5 $ sugar, the capacity of the facility can be increased 3 to 5 times.

Fir stellten jedoch fest, daß die Torulopsis utilis in mineralischen Lösungen eine hohe Zuckerkonzgntration bei Zuwachs einer adäquaten Menge Biomasse iiicht assimi-? liert; die relative Ausbeute beträgt bei 2,5 #? Sacharose oder Glukose kaum 80 $, bei 5 $ Zucker sogar nuir 26 $ der zu erwartenden Menge Biomasse, wenn ein üblicher Ausnutzungs-Koeffizient von 50 $ zugrundegelegt wird, dY h, daß sich aus 100 Teilen Zucker 50 Teile Bioma^:sse-<Trockensubstanz bilden. Es zeigte sich, daß bei Lösungen mit 2,5 $ Zucker die Zugabe verschiedener Vitamine, ¥us?hsstoff^-Vitaminträger oder derer Kombinationen den Ertrag an Biomasse nur unwesentlich erhöhte, mit Ausnahme einiger cornsteep-Muster, in deren Gegenwart aiieh größere als theoretische Erträge erzielt wurden. Bei Lösungen mit 5 $ Zukker wirkten die/selben Stoffe, mit Rücksicht auf die niedrigen Erträge an Biomasse in Abwesenheit von Wuchsstoffen,Fir found, however, that the Torulopsis utilis in mineral solutions does not assimilate a high sugar concentration with the addition of an adequate amount of biomass. liert; the relative yield is at 2.5 #? Sucrose or glucose almost $ 80, at $ 5 sugar even nuir 26 $ of, dY h anticipated quantity of biomass as a common Exploitation coefficient is used as a basis of $ 50 that 100 parts of sugar, 50 parts ^Bioma: SSE <dry matter form. It was found that in solutions with 2.5 $ sugar the addition of various vitamins, raw materials, -vitamin carriers or combinations thereof increased the yield of biomass only insignificantly, with the exception of a few cornsteep patterns, in their presence all greater than theoretical Income was achieved. In solutions with $ 5 sugar, the same substances worked, taking into account the low biomass yields in the absence of growth substances,

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relativ stärker stimulierend, doch lagen die Erträge an Biomasse weit unterhalb der theoretischen Grenze, ausgenommen bei der 7"srabe einer größeren Menge Vitamine der B-Gruppe, Hefeautolysats und corn-steep, wobei sich die Erträge der theoretischen Grenze näherten, sie jedoch nicht erreichten. Diese Ergebnisse sind überraschend, denn die Hefe Torulopsis utilis (Candida utilis) wird als ein prototropher Mikroorganismus angesehen, der zur Synthese der nötigen Vitamine und Wuchsstoffe fähig ist. Wie aus obigem hervorgeht, kommt diese Fähigkeit nur bei den niedrigeren Zuckerkonzentrationen im Medium (i - 1,5 $) zur Geltung, Wenn die Hefe jedoch anspruchsvollere Aufgaben erfüllen soll - wie es die Bildung einer weit größeren Menge von Biomasse aus einer größeren Zuckerkonzentration in gleicher Zeitdauer bedingt - was bei niedrigen Substratkonzentrationen eine erhöhte Menge an Wuchsstuffen erfordert, genügt die von ihr laufend gebildete Menge dieser Stoffe nicht mehr, Daher müssen diese von außen zugegeben werden, so daß sich die Hefe unter diesen Umständen wie ein auxotropher Mikroorganismus verhält.relatively more stimulating, but the yields were there Biomass far below the theoretical limit, with the exception of the 7 "supply of a larger amount of vitamins B group, yeast autolysate and corn-steep, whereby the Yields approached the theoretical limit, but did not reach it. These results are surprising because the yeast Torulopsis utilis (Candida utilis) is regarded as a prototrophic microorganism, which for Synthesis of the necessary vitamins and growth substances is capable. As can be seen from the above, this ability only comes at the lower sugar concentrations in the medium (i - 1.5 $) However, when the yeast is supposed to perform more demanding tasks - such as the formation of a far larger amount, it comes into its own of biomass from a higher sugar concentration in the same period of time - which is the case with low substrate concentrations requires an increased amount of growth stages, the amount of these continuously formed by it is sufficient Substances no longer, therefore these must be added from the outside, so that the yeast like under these circumstances an auxotrophic microorganism behaves.

Wie die Ergebnisse aus Tabelle 1 dokumentieren, wurden in diesem Fall zwar wesentlich größere Mengen Biomasse erzeugt als ohne Zusatz von Wuchsstoffen, nicht jedoch Mengen, welche die theoretische Grenze erreichen oder gar überschreiten (Tabelle 1).As the results from Table 1 document, significantly larger amounts of biomass were used in this case produced as without the addition of growth substances, but not quantities, which reach or even exceed the theoretical limit (Table 1).

Table 1

Einfluß von Vitaminen und Wuchsstoffzusätzen auf den Ertrag von Hefetrockensubstanz in mineralischer Lösung mit 5 io Saccharose. Ein 10Oprozentiger Ertrag entspricht derInfluence of vitamins and additives for growth substances on the yield of dry yeast matter in a mineral solution with 5 io sucrose. A 10O percent yield corresponds to that

Bildung von 100 Teilen Hefetrockensubstanz aus 200 Teilen ZuckerFormation of 100 parts of dry yeast substance from 200 parts sugar

Zusatz in $/ bzw. /100 ml Ertrag an Hefetrockensubstanz " in jo do Theorie Addition in $ / or / 100 ml yield of dry yeast substance "in jo do theory

0,k corn-steep 53 0, k corn steep 53

0,75 corn-steep , 670.75 corn steep, 67

0,8 corn-steep 680.8 corn steep 68

1 Vit«, B 321 Vit «, B 32

3,2+6,4 . Biotin 573.2 + 6.4. Biotin 57

1 Vit. B₊ 3,2 Biotin 731 Vit. B ₊ 3.2 biotin 73

0,75 corn-steep + 3,2 Biotin 780.75 corn steep + 3.2 biotin 78

0,75 corn-steep + 1 Vit« B 730.75 corn steep + 1 Vit «B 73

0,75 corn-steep + 1 Vit. B + 3,2 Biotin 710.75 corn steep + 1 Vit. B + 3.2 biotin 71

0,75 corn-steep +2,5 Autolysat + 3,2 Biotin 900.75 corn steep +2.5 autolysate + 3.2 biotin 90

2,5 Autolysat + 3,2 Biotin 682.5 autolysate + 3.2 biotin 68

1,0 Sojamehl 681.0 soy flour 68

1 Vit.B = Gemisch der Vitamine B in 100 ml Gärlösung: 10 mg Inositol - 0,3 mg Thiaminhydrochlorid - 0,3 mg Riboflavin - 0,3 mg Pyridoxalhydrochlorid - 0,6 mg Ca-Pantothenat - 1,0 mg Nicotinamid. Corn-steep: eingedickt auf 60 % Trockensubstanz. Hefeautolysat: bei 55 ohne Verdünnen autolysierte Bäckerhefe. Erwartungsgemäß aktiviert der ganze Vitamin-B-Komplex und das Biotin die Bildung der Biomasse und ergänzt die Wirkung des corn-steep oder des Hefeautolysates. Es werden jedoch nicht die theoretischen Erträge an Hefetrockensubstanz erzielt.1 vitamin B = mixture of vitamins B in 100 ml fermentation solution: 10 mg inositol - 0.3 mg thiamine hydrochloride - 0.3 mg riboflavin - 0.3 mg pyridoxal hydrochloride - 0.6 mg calcium pantothenate - 1.0 mg nicotinamide. Corn steep: thickened to 60% dry matter. Yeast autolysate: baker's yeast autolyzed at 55 without dilution. As expected, the entire vitamin B complex and the biotin activate the formation of the biomass and complement the effect of the corn steep or yeast autolysate. However, the theoretical yields of dry yeast matter are not achieved.

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Die angeführten Nachteile verringert wesentlich die vorliegende Erfindung eines entsprechenden Verfahrens zur Züchtung der Hefe Torulopsis utilis (Candida utilis) in Lösungen mit 2,5 bis 7 $ ZuckergehalteThe stated disadvantages significantly reduced the present invention of a corresponding method for Cultivation of the yeast Torulopsis utilis (Candida utilis) in solutions with a sugar content of $ 2.5 to $ 7

Die Grundlage der Erfindung besteht darin, daß man in die Gärlösung jene Stoffe beigibt, die sich im Verlaufe der Zitronensäuregärung mittels des Pilzes Aspergillus niger im Melassesubstrat bilden. Große Erträge' in der Gärlösung mit einer größeren als bisher benutzten Zuckermenge lassen sich durch Zugabe von 40 bis 6o $ (Volumen) von Melasse-Abfallauge nach der Ausfällung der Zitronensäure oder durch Zugabe von Myzelium des Pilzes Aspergillus niger im ursprünglichen oder getrockneten Zustand (Luftstrom von 6o ) erzielen, das im Verlaufe oder nach Beendigung der Gä_rung gewonnen wurde«The basis of the invention consists in adding to the fermentation solution those substances which form in the molasses substrate during citric acid fermentation by means of the fungus Aspergillus niger. Large yields in the fermentation solution with a larger amount of sugar than previously used can be achieved by adding 40 to 60 $ (volume) of molasses waste eye after the precipitation of citric acid or by adding mycelium of the fungus Aspergillus niger in its original or dried state (air flow obtain from 6o), which was _run in the course of or after completion of GAE g won "

Geeignete Mycelgaben des Pilzes A.niger sind 5 - 15 $ bezogen auf das Myzel von 25 % Trockensubstanz. Mit Vorteil läßt sich ebenfalls die Melasse-Abfallauge nach Ausfällung der Zitronensäure mit dem Myzelium des Pilzes A.niger kombinieren, wobei die Dosierungen beider genannter Zusätze entsprechend niedriger sind. Das Verhältnis der Melasse-Abfallauge und des Myzels kann sich in geeigneter Weise ändern.Suitable mycelium doses of the A.niger fungus are $ 5-15, based on the mycelium of 25 % dry matter. The molasses waste eye can also advantageously be combined with the mycelium of the A.niger fungus after the citric acid has precipitated, the doses of both of the additives mentioned being correspondingly lower. The ratio of the molasses waste eye and the mycelium can change appropriately.

Die Mengen der Melasse-Abfallauge nach der Ausfällung der Zitronensäure oder des Myzels des Pilzes A.niger wie auch die Kombination dieser Stoffe lassen sich entsprechend senken, wenn noch Wachstumsfaktoren verwendet werden, besonders einzelne Vitamine der Gruppe B oder deren Gemisch und andere Wuchsstoffe, eventuell mit ihrenThe quantities of molasses waste eye after the precipitation of citric acid or the mycelium of the A.niger fungus as well as the combination of these substances can be reduced accordingly if growth factors are still used are, especially individual vitamins of group B or their mixture and other growth substances, possibly with their

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Trägern. Wachstumsstimulatoren werden nur in solchen Mengen verwendet, die allein nicht dazu ausreichen, einen großen Hefeertrag zu stimulieren. Es wurde auch festgestellt, daß man mit Vorteil 75 % des Abfallwassers der Torulagärung, die in einer Zuckerlösung, der Erfindung entsprechend, durchgeführt wurde, von neuem zur Herstellung der Gärlösung verwenden kann. Den Einfluß der Zugaben, der Erfindung entsprechend, illustrieren die Tabellen 2 und 3. Carriers. Growth stimulators are only used in amounts that alone are insufficient to stimulate a large yeast yield. It has also been found that 75 % of the waste water from the torula fermentation, which was carried out in a sugar solution according to the invention, can advantageously be used again for the production of the fermentation solution. Tables 2 and 3 illustrate the influence of the additions according to the invention.

Table 2

Einfluß der Melasse-Abfallauge aus Zitronensäure-Gewinnung mit Aspergillus niger nach der Ausfällung der Zitronensäure (im weiteren Lauge genannt) allein wie auch in Kombination mit weiteren Zusätzen, der Erfindung entsprechend, auf den Ertrag an Hefetrockensubstanz in einer Lösung mit 5 i° SaccharoseEffect (hereinafter referred to as liquor) after precipitation of the citric molasses waste liquor from citric acid extraction with Aspergillus niger alone accordingly as well as in combination with further additives, of the invention, the yield of yeast dry matter in a solution containing 5 i ° sucrose

Zusatz in % Ertrag an Hefe-Addition in% yield of yeast

trockensubstanz in ^ d. Theorie dry matter in ^ d. theory

30 Lauge 7030 lye 70

37 Lauge 8737 Lye 87

42 Lauge 9842 lye 98

50 Lauge 11550 lye 115

20 Lauge +0,4 corn-steep 7820 lye +0.4 corn steep 78

25 Lauge + 0,4 corn-steep 10025 lye + 0.4 corn-steep 100

30 Lauge +0,4 corn-steep 1O530 lye +0.4 corn-steep 1O5

25 Lauge + 0,5 corn-steep 11025 lye + 0.5 corn steep 110

30 Lauge +0,5 corn-steep 12030 lye +0.5 corn-steep 120

25 Lauge + 1 Sojamehl 10425 lye + 1 soy flour 104

25 Lauge +0,6 Sojamehl + 0,6 Autolysat 30 Lauge + 0,5 Vito B 30 Lauge + 1 Vit. B 25 Lauge + 1,5 Autalysat 25 Lauge + 1,75 Autolysat 25 Lauge + 2,0 Autolysat25 lye +0.6 soy flour + 0.6 autolysate 30 lye + 0.5 Vito B 30 lye + 1 Vit. B 25 lye + 1.5 autolysate 25 lye + 1.75 autolysate 25 lye + 2.0 autolysate

20 Lauge bedeutet, daß die Gäflösung 20 # (Vol) Melasse-Abfallauge enthält. Die Bedeutung der übrigen Zeichen ist dieselbe wie in Tabelle 1.20 lye means that the fermentation solution is 20 # (vol) molasses waste eye contains. The meaning of the other characters is the same as in Table 1.

Table 3

Einfluß des feuchten und trockenen Abfall-Myzels (weiterhin f. M. bzw. t. M, genannt) nach der Zitronensäuregärung allein und in Korabination mit weiteren Zusätzen, der Erfindung entsprechend, auf die Erträge an Hefetrockensubstanz in einer Lösung mit 5 $ SaccharoseInfluence of the moist and dry waste mycelium (hereinafter referred to as f. M. and t. M, respectively) after citric acid fermentation alone and in coordination with other additions that In accordance with the invention, on the yields of dry yeast matter in a solution with $ 5 sucrose

Zusatz in $ Ertrag an Hefe-Addition in $ Yeast yield

. trockensubstanz in jo d. Theorie . dry matter in jo d. theory

10 f. M., 4 Tage alt 10510 f. M., 4 days old 105

10 f. M., 8 Tage alt 1O410 f. M., 8 days old 1O4

10 f. M., Abfall 98-10010 f. M., waste 98-100

2,5 t. M. 1042.5 t. M. 104

1,25 t. M. 841.25 t. M. 84

1,25 t. M. + 0,5 corn-steep 941.25 t. M. + 0.5 corn steep 94

1,25 t. M. + 1,6 Autolysat 951.25 t. M. +1.6 autolysate 95

1,25 t. M. + 1 Sojamehl 106 1,25 t. M. + 0,6 Sojamehl + 1 Hefeautolysat 1001.25 t. M. + 1 soy flour 106 1.25 t. M. + 0.6 soy flour + 1 yeast autolysate 100

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⁸ " 2322953 ⁸ "2322953

10 Rübenmelasse 7310 beet molasses 73

10 Rübenmelasse + 1,25 t. M, 10810 beet molasses + 1.25 t. M, 108

1,25 t. M_e + 75 Abfallwasser1.25 t. M _e + 75 waste water

a. d. Torulafabrik 109a. d. Torula Factory 109

1,25 t. M. + 30 Lauge 1021.25 t. M. + 30 lye 102

t. M. = trockenes Myzel, f. Mo = feuchtes Myzel j die Bedeutung der übrigen Zeichen ist dieselbe wie in Tabelle 1.t. M. = dry mycelium, f. Mo = moist mycelium j the meaning the remaining characters is the same as in Table 1.

Sowohl die Melasse-Abfallauge nach der Ausfällung der Zitronensäure als auch das Myzel des Pilzes Aspergillus niger, das während der Zitronensäuregarung entsteht, enthalten, der Erfindung entsprechend, Vitamine und Wuchsstoffe oder organische "Suppline", von denen vielleicht noch manche unbekannt sind, welche als solche oder in Kombination mit einer kleinen Menge von Vitaminen oder Wuchsstoffen (die allein ungenügend ist) das Wachstum der Hefe in Lösungen mit 2,5 h±s 7 $ Zucker mit wesentlich größerer Bildung von Biomasse weit intensiver zu stimulieren vermögen, als es bisher bekannt war, und dies in derselben Zeitspanne wie bei einer niedrigen Zuckerkonzentration. Both the molasses waste eye after the precipitation of citric acid and the mycelium of the fungus Aspergillus niger, which is formed during citric acid fermentation, contain, according to the invention, vitamins and growth substances or organic "supplines", some of which are perhaps still unknown, which as those or in combination with a small amount of vitamins or growth substances (which alone is insufficient) are able to stimulate the growth of yeast in solutions with 2.5 h ± s 7 $ sugar with much greater biomass formation than previously known and this in the same period of time as with a low sugar concentration.

Die gewonnene Hefe ist hell, von neutralem Geschmack, mit einem Gehalt von etwa 50 $ Roheiweiß, geeignet für Verwendung in menschlicher Nahrung. Sie ist reicher an Vitaminen und Wuchsstoffen als Bäckerhefe, denn aus ihr bereitetes Autolysat stimuliert das Wachstum der Torula intensiver als das Autolysat aus Bäckerhefe.The yeast obtained is light, has a neutral taste, containing about $ 50 crude protein, suitable for use in human food. It is richer in vitamins and growth substances than baker's yeast because what is prepared from it Autolysate stimulates the growth of the torula more intensely than the autolysate made from baker's yeast.

Durchführungsbeispiele des erfindungsgemäßen Verfahrens :Implementation examples of the method according to the invention:

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1. Die mineralische Gärlösung wurde in folgender Weise zubereitet? Xn 2 1 Wasser wurden 200 g Saccharose (Raffinade), 32 g NH₄Cl, 8,4 g K₂SO₄, 1,8 g MgSO₄.7H₃O und 17 g Na„P0. „10 HO gelösto Zu dieser Lösung wurden 2 1 Melasse-Abfallauge nach der Ausfällung der Zitronensäure beigefügt (sp.G. 1,O380) und der pH-Wert wurde auf 4,5 eingestellt« Es ist vorteilhaft, das Ammonchlorid (bzw. Ammonsulfat) nur im ersten Anteil der Gärlösung, der etwa i/5 des Endvolumens ausmacht, zu verwenden, und zwar 5 S NHjlCI bzw., 8 g /NH^/pSO. und den Stickstoffrest im Verlaufe der weiteren Gärung in Form von NH„ zuzugeben« Die Lösung wurde 20 min gekocht und nach Abkühlen auf das ursprüngliche Volumen aufgefüllt; in dieser Lösung wurde die Torulahefe (Einsaat 32 g gepreßter Hefe mit 8 g Trokkensubstanz) nach dem ZuIaufverfahren in der Fink-Apparatur 8 - 9 Stο gezüchtet. Die Hefe wurde abgeschleudert, gewaschen, auf der Nutsche abgesaugt (25 $ Tröckensiibstanz) und gewogen« Nach Substraktion der Einsaathefe wurde der Hefeertrag ermittelte Dieser betrug 115 g Trokkensubstanz, überschritt demnach die theoretische Grenze (100 g) um 15 g.1. The mineral fermentation solution was prepared in the following way? Xn 2 l of water were 200 g of sucrose (refined), 32 g of NH ₄ Cl, 8.4 g of K ₂ SO ₄ , 1.8 g of MgSO ₄ .7H ₃ O and 17 g of Na “PO. "10 HO dissolved o To this solution, 2 liters of molasses waste eye were added after the precipitation of the citric acid (sp.G. 1, O380) and the pH was adjusted to 4.5." It is advantageous to use the ammonium chloride (or ammonium sulfate ) to be used only in the first portion of the fermentation solution, which makes up about 1/5 of the final volume, namely 5 S NHjlCI or, 8 g / NH ^ / pSO. and "add" the nitrogen residue in the course of further fermentation in the form of NH. The solution was boiled for 20 minutes and, after cooling, made up to the original volume; the torula yeast (sowing 32 g of pressed yeast with 8 g of dry substance) was grown in this solution using the Fink 8-9 Sto apparatus. The yeast was spun off, washed, sucked off on the suction filter (25 $ dry matter) and weighed. After subtracting the sowing yeast, the yeast yield was determined.This was 115 g dry matter, thus exceeding the theoretical limit (100 g) by 15 g.

2. Es wurde dieselbe Gärlösung wie unter Beispiel 1 verwendet und auch der Gärprozeß wurde in derselben Weise durchgeführt. Beginnend mit der 8. Stunde wurde nach dem kontinuierlichen Verfahren vorgegangen, wobei der stündliche Abzug der vergorenen Lösung und der Zulauf des frischen Substrates 17 $ des Gesamtvolumens (4 l), d, h. 0,63 1 betrugen. Die Generationsdauer der Hefe betrug 2,8 St. Das Gesamtvolumen der Lösung im Fermenter wurde demnach je nach 6 St. ausgewechselt, und da der Versuch 74 St. lief, wurde das Substrat 10mal ausgewechselt. Der2. The same fermentation solution was used as in Example 1 and the fermentation process was also carried out in the same way carried out. Starting with the 8th hour, the continuous process was used, with the hourly Deduction of the fermented solution and the inflow of fresh substrate 17 $ of the total volume (4 l), d, h. 0.63 1. The generation time of the yeast was 2.8 hours. The total volume of the solution in the fermenter was therefore changed every 6 hours, and there the attempt 74 hours ran, the substrate was changed 10 times. Of the

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Gesamtertrag an, Hefetrockensubstanz betrug 1270 g und war mindestens um etwa 350 g größer, als sich in der gleichen Zpit durch diskontinuierliche Versuche erzielen ließe, die inj °stündigen Intervallen wiederholt würden; hierbei sind nicht die Verluste in Form der Ansatzhefe eingerechnet, die für den Start eines jeden Gärungs-.zyklus nötig wäre.Total yield, yeast dry matter was 1270 g and was at least about 350 g greater than could be achieved in the same Zpit by discontinuous experiments that would be repeated every hour; this does not include the losses in the form of the starting yeast, which would be necessary for the start of each fermentation cycle.

3. Im Gemisch von 2,8 1 Wasser und 1,2 1 Melasse-Abfallauge nach der Ausfällung der Zitronensäure (sp„ G. 1»0375) wurden 200 g Raffinade, sämtliche unter Beispiel 1 angeführten Mineralsalze und außerdem 0,4 $ eingedickter corn-steep (60 $ Trockensubstanz) aufgelöst» Der Gärungsprozeß wurde in derselben Weise wie unter Beispiel 1 . durchgeführt» Der Ertrag an Hefetrockensubstanz war 105 St also höher als es dem theoretischen Wert entspricht. Venn die hösung aus 1,0 1 Melasse-Abfallauge nach der Zitronensäuregärung bestand und die gleiche Menge an Zucker und Mineralien, außerdem jedoch noch 1,75 g Hefeautolysat (mit 25 % Trockensubstanz) enthielt, war der Ertrag an Trockenhefe 117 g» d» h. um 17 g größer, als es die Theorie ergibt.3. In a mixture of 2.8 l of water and 1.2 l of molasses waste eye after the precipitation of citric acid (sp "G. 1» 0375), 200 g of refined sugar, all of the mineral salts listed under Example 1 and also 0.4% of thickened material were thickened corn-steep ($ 60 dry matter) dissolved »The fermentation process was carried out in the same way as in Example 1. performed "The yield of yeast dry matter was 105 St this is higher than that corresponding to the theoretical value. If the solution consisted of 1.0 1 molasses waste eye after citric acid fermentation and contained the same amount of sugar and minerals, but also 1.75 g of yeast autolysate (with 25% dry matter), the yield of dry yeast was 117 g " H. 17 g larger than the theory suggests.

4. Zu 4 1 mineralischer Gärlösung (s» Beispiel i), jedoch mit 3,8 g MgSO^.7 H_0, wurden 400 g feuchtes (i0 #) oder 100 g (2,5 $>) trockenes Myzel des Produktionspilzes Aspergillus niger aus der Zitronensäuregärung beigegeben und wie üblich ungefähr 20 min gekocht. Nach dem Abkühlen wurde die Lösung abgezogen oder das Myzel abgeseiht. In der derart gewonnenen Lösung wurde die Hefe Torulopsis utilis gezüchtet, wie im Beispiel 1 angeführt. Der Ertrag an Hefetrockensubstanz betrug 105 g und überschritt demnach den theoretischen Wert.4. To 4 liters of mineral fermentation solution (see example i), but with 3.8 g of MgSO ^ .7 H_0, 400 g of moist (10 #) or 100 g (2.5 $>) of dry mycelium of the production fungus Aspergillus niger were added added from the citric acid fermentation and cooked as usual for about 20 minutes. After cooling, the solution was drawn off or the mycelium was strained. In the solution obtained in this way, the yeast Torulopsis utilis was grown as described in Example 1. The yield of dry yeast substance was 105 g and accordingly exceeded the theoretical value.

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5. Zu 4 1 mineralischer Gärlösung (s„ Beispiel 4) werden 50 g (1,25 $) getrocknetes Abfallmyzel des Pilzes Aspergillus niger und 40 g (1,O $) Sojamehl beigegeben, worauf die Lösung wie üblich 20. min gekocht wird. Nach Abkühlen wird die Lösung filtriert und in ihr die Hefe Torulopsis utilis gezüchtet, wie unter Punkt 1 angeführt wurde«. Der Ertrag an Hefe trockensubs tanz betrug 1O6 g und überschritt demnach die theoretische Grenze.5. To 4 1 mineral fermentation solution (see "Example 4) will be 50 g ($ 1.25) of dried waste mycelium of the fungus Aspergillus niger and 40 g (1, O $) soy flour added, whereupon the solution is boiled for 20 minutes as usual. After cooling, the solution is filtered and the yeast in it Torulopsis utilis bred as described in point 1 became". The yeast dry substance yield was 106 g and therefore exceeded the theoretical limit.

6. Es wird eine Melasselösung (etwa 10 $ Rübenmelasse in Wasser), welche 5 $ Zucker enthält, hergestellt, und es werden die auf 4 1 Endvolumen,erforderlichen Mengen an Nährsalzen beigefügt? 32 g NH^Cl (oder 40 g) NH^/^SO^/, 3,6 g MgSO^₅,7 H₂O und 6 g H PO^/80 #/; das pH wird mit HCl oder H SO. auf 4,5 eingestelltο In die Lösung gibt man 1,25 $ (50 g) trockenes Abfall-Myzel der Zitronensäuregärung, die Lösung.wird 20 min gekocht und nach dem Auskühlen filtrierte Nach Züchtung der Torulahefe werden 108 g Hefetrockensubstanz gewonnen, demnach mehr als es dem theoretischen Wert entspricht. Ein in derselben Weise durchgeführter Versuch, jedoch ohne Zugabe des Abfall-Myzels des Pilzes A.niger aus der Zitronensäuregärung, gab einen Ertrag an Hefetrockensubstanz von nur 73 g» also weit unterhalb der theoretischen Grenze. Ein gleicher Versuch unter Verwendung von Zuckerrohr-Melasse erfordert zur Sicherung des Ertrages von 105 g Trockensubstanz eine Zugabe von etwa 55 g trockenen Abfall-Myzels aus der Zitronensäuregärung; beim Versuch ohne Zusatz von Myzel wurden nur 68 g Hefetrockensubstanz erzielt.6. A molasses solution (about 10 $ beet molasses in water) which contains 5 $ sugar is prepared, and the amounts of nutrient salts required for 4 1 final volume are added? 32 g NH ^ Cl (or 40 g) NH ^ / ^ SO ^ /, 3.6 g MgSO ^ ₅ , 7 H ₂ O and 6 g H PO ^ / 80 # /; the pH is adjusted with HCl or H SO. set to 4.5 o 1.25 $ (50 g) of dry waste mycelium from citric acid fermentation are added to the solution, the solution is boiled for 20 minutes and filtered after cooling it corresponds to the theoretical value. An experiment carried out in the same way, but without the addition of the waste mycelium of the A.niger fungus from citric acid fermentation, gave a yield of dry yeast matter of only 73 g, which is far below the theoretical limit. A similar experiment using sugar cane molasses requires about 55 g of dry waste mycelium from citric acid fermentation to be added to ensure the yield of 105 g of dry matter; when testing without the addition of mycelium, only 68 g of dry yeast substance were obtained.

7. In 2 1 Wasser wurden 280 g Raffinade (d. h. 7 ^), 45 g NH₇₁Cl, i4g Na₂HPO^. 12 H.,0 und 5 g MgSO^.7 H.,0 (je-7. In 2 liters of water were 280 g of refined sugar (ie 7 ^), 45 g of NH ₇₁ Cl, 14 g of Na ₂ HPO ^. 12 H., 0 and 5 g MgSO ^. 7 H., 0 (each-

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doch ohne Mg-SaIz) gelöst. Zu dieser Lösung wurden 2 1 Melasse-Abfallauge nach Ausfällung der Zitronensäure zugegeben, und der pH-Wert wurde auf 4,5 eingestellt. Als Einsaathefe wurde so viel abgepreßte Hefe verwendet, als es 12g der Trockensubstanz entsprach. Die Gärung und Aufarbeitung der Gärlösung erfolgte wie im Beispiel 1« Der Ertrag betrug 138 g Hefetrockensubstanz, d. s„ 98 »5 i° des theoretischen Wertes (i40 g). Dieser praktisch lOOprozentige Ertrag wurde, der Erfindung entsprechend, in einer 7 $ Saccharose enthaltenden Lösung erzielt und dies im Verlaufe der üblichen 8 - 9stündigen Gäfzeit, die für niedrigprozentige Zuckerlösungen erforderlich ist»but without Mg salt) dissolved. 2 l of molasses waste eye after the precipitation of the citric acid were added to this solution, and the pH was adjusted to 4.5. As much pressed yeast was used as the yeast for sowing, as it corresponded to 12g of the dry matter. The fermentation and work-up of the fermentation solution took place as in Example 1. The yield was 138 g of dry yeast substance, i.e. s "98» 5 % of the theoretical value (i40 g). According to the invention, this practically 100 percent yield was achieved in a solution containing 7% sucrose and this was achieved in the course of the usual 8 - 9 hour brewing time, which is required for low-percentage sugar solutions »

8. Das Gärsubstrat wurde unter Verwendung von ausgenutzter Gärlösung nach der ersten Separation der Torulahefe zubereitet, die in der mineralischen Nährlösung unter Zusatz von Melasse-Abfallauge nach der Zitroriensäuregärung gezüchtet worden war; in 4 1 dieser Abfallösung wurden 200 g Raffinade und Mineralsalze gelöst, wie im Beispiel 6 angegeben ist. Es wurden 64 g Hefetrockensubstanz gewonnen, während bei Verwendung von reinem Wasser statt Abfalllösung nur 26 g Hefetrockensubstanz gewonnen wurden (siehe Tabelle 1). Dies bedeutet, daß die erste Abfallösung nach der Zentrifugierung der Torulahefe aus ihrer vorangegangenen Verwendung noch eine genügende Menge an Wuchsstoffen enthält, um eine Vergrößerung der Bildung der Biomasse von 26 g (mit reinem Wasser) auf 64 g zu bewirken. Es wird jedoch ein den theoretischen Wert überschreitender Ertrag (115 g) erzielt, wenn in die Abfallösung der Torulazüchtung neben den Mineralien und dem Zucker noch 1,25 $ (50 g) trockenes Abfallmyzel aus der Zitronensäuregärung oder 50 io Melasse-Abfallauge nach der Zitronensäuregärung beigegeben wird» Die erste Abfallösung nach der Zentrifugierung der Torula läßt sich demnach im erneuten Umlauf wiederverwenden. 8. The fermentation substrate was prepared using used fermentation solution after the first separation of the torula yeast, which had been grown in the mineral nutrient solution with the addition of molasses waste eye after citric acid fermentation; 200 g of refined sugar and mineral salts were dissolved in 4 l of this waste solution, as indicated in Example 6. 64 g of dry yeast substance were obtained, while when using pure water instead of waste solution, only 26 g of dry yeast substance were obtained (see Table 1). This means that the first waste solution after centrifuging the torula yeast from its previous use still contains a sufficient amount of growth substances to bring about an increase in the formation of the biomass from 26 g (with pure water) to 64 g. However, it is achieved (115 g), a theoretical value border revenue when dry Abfallmyzel from the citric acid fermentation or 50 io molasses waste liquor (g 50) in the waste solution of the Torulazüchtung besides the minerals and sugar still $ 1.25 after the citric acid fermentation is added »The first waste solution after centrifuging the torula can therefore be reused in the new circulation.

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Claims

, 1 j Method for growing the yeast Torulopsis utilis (Candida utilis) in solutions with $ 2.5 to $ 7 sugar content, characterized by * indicates that the fermentation solution Substances are added that are produced during citric acid fermentation by means of the Aspergillus niger fungus on molasses substrate arise =

2 _U method according to claim 1, characterized in that molasses is added to the fermentation broth waste liquor after precipitation of the citric acid in an amount of up to 6o kO Volum- $.

3c method according to claim 1, characterized in that that the fermentation solution molasses waste eye after the precipitation of citric acid in combination with growth stimulators added, especially with individual or combined vitamins of group B, with other growth substances or together with their bearers »

k. Process according to claim 1, characterized in that molasses waste eye is added to the fermentation solution after the precipitation of citric acid and mycelium of the fungus Aspergillus niger

5. The method according to claim 1, characterized in that the fermentation solution is mycelium of the fungus Aspergillus Niger in various forms in an amount ranging from $ 5 to $ 15> added, converted to mycelium with 25 5 ° dry matter content.

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6. The method according to claim 1, characterized in that the fermentation solution mycelium of the fungus Aspergillus niger is added in combination with growth stimulators, especially with individual or combined vitamins of group B, with other growth substances or together with
their bearers »

7 «The method according to claim 1, characterized in that the fermentation solution molasses waste eye after
Precipitation of citric acid in combination with the mycelium of the fungus Aspergillus niger and with growth stimulators, especially with single or combined
Vitamins of group B, with other growth substances or together with their carriers «,

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