DE2216452A1 - Method for extending the biological activity of glucagon - Google Patents
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Description
Verfahren zur Verlängerung der biologischen Aktivität · Process for prolonging biological activity
von Glucagonof glucagon
Die Erfindung bezieht.sich auf ein Verfahren zur Verlängerung der biologischen Aktivität von Glucagon.The invention relates to a method of lengthening the biological activity of glucagon.
Erfindungsgeraäß wird die biologische Aktivität von Glucagon durch Jodierung von Glucagon unter Bildung eines chemisch modifizierten Glucagons mit durch-" schnittlich bis zu etwa-5 g-Atom Jod pro Mol Glucagon verlängert.Invention device is the biological activity of Glucagon by iodination of glucagon to form a chemically modified glucagon with through- " on average up to about -5 g atom of iodine per mole of glucagon.
Das erfindungsgemäße Verfahren zur Verlängerung der biologischen Aktivität von Glucagon ist-dadurch gekennzeichnet, daß Glucagon mit so viel Jodierungsmittel jodiert wird, daß ein chemisch modifiziertes Glucagon mit durchschnittlich bis zu etwa 5 g-Atom Jod pro Mol. Glucagon erzeugt wird. 'The method according to the invention for extending the biological activity of glucagon is characterized in that that glucagon is iodized with so much iodine that a chemically modified glucagon is produced with an average of up to about 5 g-atom iodine per mole of glucagon. '
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^ach einer bevorzugten Ausführungsfor/: des srfiniiungsge:i"ijSen Verfahrens zur Verlängerung der biologischen Aktivität von Glucagon v/irtl das Glucagon in einer: Ausmaß von etv7a 2 bis etwa 4 g-Atora Jod pro ;.".ol Glucaaon jouiert.According to a preferred embodiment of the specification: i "ijSen Method of prolonging the biological activity of glucagon v / irtl the glucagon to an extent from about 2 to about 4 g-atora iodine per;. ". ol glucaaon judges.
Das GlucagonuiOlekdl entheilb zwei Tyrosinreste in seiner Aminsoäuresequenz. Es v/ird angenommen, daß diese .vieste die Hauptstellen sind, an denen die Jodierung stattfindet. Tyrosin selbst ist dafür bekannt, daß es mit üblichen Jodierungsraitteln rasch reagiert, zuerst unter Bildung von 3-Jodtyrosin und dann unter Bildung von 3,5-Dijodtyrosin. Es wird angenommen, daß bei der erfinc.ungsgeiaäßen Jodierung von Glucagon eine ähnliche Reaktion unter ■ Modifizierung der Tyrosinreste des Glucagons stattfindet. Es ist jedoch nicht beabsichtigt, die Erfindung auf irgendeine Theorie über den .Tleaktionsort, über den Reaktionsmechanismus oder die Produktstruktur zu beschränken. The GlucagonuiOlekdl has two tyrosine residues in it Amino acid sequence. It is assumed that this .vieste are the main places where iodination takes place. Tyrosine itself is known to be common with it Iodination agents react quickly, first with the formation of 3-iodotyrosine and then with the formation of 3,5-diiodotyrosine. It is assumed that in the case of iodination according to the invention of glucagon a similar reaction with ■ modification the tyrosine residues of the glucagon takes place. However, it is not intended to apply to the invention in any way To restrict theory about the .Tleaktionsort, about the reaction mechanism or the product structure.
Die Methode der Durchführung der erfindungsgemäßen Jodierung von Glucagon ist nicht kritisch. Brauchbar ist jedes geeignete' Reagens, mit dem die Addition von Jod erreicht wird. Geeignete Jodierungs;aittel sind beispielsweise Jodmonochlorid, Kaliumtrijodid, eine Kombination aus einem Jodidsalz und Chloramin T, usw. Ein bevorzugtes Jodierungsreagens ist Jodmonochlorid. Unter den gewählten Reaktionsbedingungen erfolgt die Jodierung normalerweise stöchiometrisch. Deshalb wird im allgemeinen nur soviel Jodierungsreagens verwendet, wie zur Erzielung des beabsichtigten Jodierungsgrads des Glucagons erforderlich ist.The method of carrying out the invention Iodination of glucagon is not critical. Any suitable reagent with which the addition of iodine can be used is achieved. Suitable iodizing agents are, for example, iodine monochloride, potassium triiodide, a combination from an iodide salt and chloramine T, etc. A preferred iodination reagent is iodine monochloride. Among the chosen Under the reaction conditions, the iodination is normally stoichiometric. That is why in general only as much iodination reagent is used as is necessary to achieve the intended degree of iodination of the glucagon is.
Die Temperatur und der Druck, bei denen die Jodierungsreaktion durchgeführt wird, sind nicht kritisch, mit derThe temperature and pressure at which the iodination reaction is carried out are not critical with the
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Ausnahme, daß die Temperatur nicht so hoch sein darf, daß sie eine Sersetzung des Glucagons verursacht. Im allgenainen werden RauifiteMiperatur oder niedrigere Teruperaturen angewandt, wobei eine Te.aparatur von -10 G bis + 10 0C besonders bevorzugt wird. Die Jodierung wird gewöhnlich bei Ätr osr>h5ren'üruck vorgenommen > obwohl, .auch Überdrucke anwendbar sind.The exception is that the temperature must not be so high that it causes the glucagon to decompose. In general, Rauifite temperature or lower temperature temperatures are used, with a device of -10 G to + 10 0 C being particularly preferred. The iodination is usually carried out in the case of ethylene oxide, although overpressures can also be used.
iJin Lösungsmittel ist ebenfalls kein kritischer Faktor f'i.r die Jodierungsrsaktion. Jedes Reaktionsntedium, das gegen die Reaktionsteilnehmer inert ist, kann verwendet werden, und die Jodierung kann, außerdem auch mit dem relativ unlöslichen Glucagon in For;?, einer Suspension in dem IeJiUi" durchgeführt werden.iJin solvent is also not a critical factor for the iodination campaign. Any reaction medium that inert to the reactants can be used and the iodination can also be done with the relatively insoluble glucagon in For;?, a suspension in which IeJiUi "are performed.
Der OH-Vfert des Reaktionsrrediuras ist ebenfalls nicht kritisch. Die Jodierung kann in ei.nevn sauren, neutralen oder alkalischen ?ledium durchgeführt werden. Vorzugsweise wird das Glucagon jedoch unter schwach alkalischen Bedingungen, im allgemeinen bei einem pH-Wert von etwa 7,5 bis 9,0, jodiert.The OH value of the reaction redirect is also not critical. The iodination can be carried out in an acidic, neutral or alkaline? Ledium. Preferably however, the glucagon becomes under weakly alkaline conditions, generally at a pH of about 7.5 to 9.0, iodized.
Ls wird eine Reaktionsdauer angewandt, die genügend lang ist, um eine Jodierung in dem beabsichtigten Ausmaß zu gewährleisten. Die Reaktionsdauer hängt selbstverständlich stark von den anderen Reaktionsbedingungen ab.A reaction time is used which is long enough is to ensure iodination to the extent intended. The reaction time depends of course strongly depends on the other reaction conditions.
Da die Erfindung auf eine Verlängerung der biologischen Aktivität von Glucagon durch eine chemische Modifizierung gerichtet ist, werden die Dosierungswer.te des jodierten Glucagons auf die übliche Dosierung an natürlichem Glucagon abgestimmt. Die Dosierung an jodiertem Glucagon liegt daher allgemein im Bereich von etwa 0,1 bis etwa 100 Mikrogramm pro kq.As the invention relates to an extension of the biological activity of glucagon through chemical modification is directed, the dosage values of the iodized glucagon are based on the usual dosage of natural glucagon Voted. The dosage of iodized glucagon therefore generally ranges from about 0.1 to about 100 micrograms per kq.
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Die Dosierung kann ferner eine Einzeldosis oder eine kumulative Dosis sein. Mit Kumulativ ist eine Dosierung von mehreren Einzeldosen gemeint/ wobei jede Einzeldosis vor dem Ende der Reaktion auf die vorhergehende Dosis verabreicht wird.The dosage can also be a single dose or a cumulative dose. With cumulative is a dosage meant by several single doses / with each single dose before the end of the reaction to the previous dose is administered.
Jodiertes Glucagon wird nach den gleichen Methoden verabreicht, wie sie zur Verabreichung von Glucagon angewandt werden. Dazu gehören alle üblichen parenteralen Verabreichungswege, zum Beispiel intravenöse, intraperitoneale, subcutane oder intramuskuläre Verabreichung. Zum Vergleich der biologischen Aktivität von Glucagon mit der von jodiertem Glucagon müssen beide nach der gleichen Methode verabreicht werden, da im allgemeinen die intravenöse Verabreichung eine rascher einsetzende Reaktion mit kürzerer Dauer, die xntraperitoneale Verabreichung eine mittlere Reaktion und die subcutane oder intramuskuläre Injektion eine verhältnismäßig langsam einsetzende Reaktion mit längerer Dauer ergibt.Iodized glucagon is administered using the same methods how they are used to administer glucagon. This includes all common parenteral routes of administration, for example intravenous, intraperitoneal, subcutaneous or intramuscular administration. To compare the biological activity of glucagon with that of iodized glucagon, both must be after the The same method should be administered, as intravenous administration is generally a more rapid onset Response of shorter duration, intra-peritoneal administration a medium response and subcutaneous administration or intramuscular injection gives a relatively slow onset response with a longer duration.
Die folgenden Beispiele erläutern die Modifizierung von Glucagon zu jodierten Glucagon und zeigen die verlängerte biologische Aktivität von jodiertem Glucagon im Vergleich zu natürlichem Glucagon.The following examples illustrate the modification of glucagon to iodized glucagon and show the prolonged biological activity of iodized glucagon compared to natural glucagon.
350 mg (100 Mikroraol) kristallines Glucagon werden bei 0 0C in 0,2 m Glycin-HCl-Puffer vom pH 3,0 in einer Konzentration von 5 mg pro ml gelöst. Die Glucagonlösung wird tropfenweise unter Rühren während einer Zeit von etwa 5 Minuten mit einer 0,2 π Lösung von 0,8 ml Jodmonochlorid (JCl) versetzt. Nach weiteren 3 Minuten350 mg (100 Mikroraol) crystalline glucagon at 0 0 C in 0.2 m glycine-HCl buffer of pH 3.0 in a concentration of 5 mg dissolved per ml. The glucagon solution is added dropwise with stirring over a period of about 5 minutes with a 0.2 π solution of 0.8 ml iodine monochloride (JCl). After another 3 minutes
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wird das überschüssige J„ durch Zugabe von- 50 MikroÜter Mercaptoäthanol zersetzt. Die Lösung wird sofort über eine 5 χ 60 cm Kolonne von Sephadex G-IO in 1 m Essigsäure geführt. Die erste von Elektrolyten freie UV-absorbierende.Fraktion aus dem Abfluß wird lyophilisiert, wodurch 280 mg (80 % Ausbeute) weißes jodiertes Glucagon mit einem Gehalt von 3,96 g-Atom Jod pro Mol erhalten werden.the excess J "by adding 50 micro-units Mercaptoethanol decomposes. The solution is over immediately a 5 χ 60 cm column of Sephadex G-IO led in 1 M acetic acid. The first UV-absorbing fraction free of electrolytes from the drain is lyophilized, giving 280 mg (80% yield) of white iodinated glucagon with a content of 3.96 g-atom of iodine per mole.
Beispiel 2 ;. .Example 2;. .
Glucagon wird in einer Menge 20 mMol in 4 ml eines 0,05 τα Citrat-Phosphat-Puffers von 0 0C und pH 6,0 suspendiert. Die Suspension wird unter Rühren mit 80 Mikromol JCl versetzt. Dann wird die Suspension mit 4 0C gerührt, bis die blaßgelbe Farbe von J0 verschwindet. Die Reaktionsraischung wird 24 Stunden gegen zwei Chargen von 1000 Volumenteilen 0,01 m Ammoniumacetat mit pH 5,0 dialysiert. Der erhaltene weiße Niederschlag im Inneren des Dialysebeutels wird durch Zentrifugieren gesammelt, in 1 m Essigsäure gelöst und durch eine 2,5 χ 60 cm Säule mit G-IO Sephadex geleitet. Die Proteinfraktion wird lyophilisiert, wodurch in 90 % Ausbeute jodiertes Glucagon mit einem Gehalt von 3,5 g-Atom Jod pro Mol erhalten wird.Glucagon is used in an amount of 20 mmol in 4 ml of a 0.05 τα citrate-phosphate buffer of 0 0 C and pH 6.0 suspension. 80 micromoles of JCl are added to the suspension while stirring. The suspension is then stirred at 4 ° C. until the pale yellow color of J 0 disappears. The reaction mixture is dialyzed against two batches of 1000 parts by volume of 0.01 M ammonium acetate with pH 5.0 for 24 hours. The white precipitate obtained inside the dialysis bag is collected by centrifugation, dissolved in 1 M acetic acid and passed through a 2.5 × 60 cm column with G-IO Sephadex. The protein fraction is lyophilized, whereby iodized glucagon with a content of 3.5 g-atom of iodine per mole is obtained in 90% yield.
B eis ρ i e 1B ice ρ i e 1
Kristallines Glucagon in einer Menge von 5 Millimol wird in 5 m Guanidin-HCl bei 0 °C gelöst. Der pH-Wert der Lösung wird durch Zugabe von 0,2 m Glycinpuffer auf. 8,5 eingestellt. Die Glucagonlösung wird mit einerCrystalline glucagon is used in an amount of 5 millimoles dissolved in 5 M guanidine HCl at 0 ° C. The pH of the Solution is made up by adding 0.2 M glycine buffer. 8.5 set. The glucagon solution is made with a
0-9842/12270-9842 / 1227
— Q —- Q -
Lösung von 20 Millimol JCl in kleinen Anteilen aus einer Mikrobürette während einer Zeit versetzt, die ein Äquivalent Jod pro 5 Minuten entspricht. Mit dem Stärketest wird kein überschüssiges J- festgestellt. Während der Reaktion wird der pH-Wert der Lösung durch Zugabe von Puffer bei 8,0 bis 8,5 gehalten. Dann wird die Reaktionsmischung sofort 1β Stunden bei 4 C gegen 1000 Volumenteile 0,1 m Acetatpuffer mit pH 5,0 dialysiert. Innerhalb von 30 Minuten tritt im Inneren der Visking-Membrana ein starker weißer Niederschlag auf. Der Inhalt des Dialysebeutels wird lyophilisiert und das trockene Pulver wird in 1 m Essigsäure gelöst und durch eine 2,5 χ 60 era Säule mit G-IO Sephadex geleitet. Die Proteinfraktion wird lyophilisiert, wodurch jodiertes Glucagon mit einem Gehalt von etwa 4 g-Aton Jod pro Mol erhalten wird.Solution of 20 millimoles of JCl in small portions from a Microburette displaced for a time corresponding to one equivalent of iodine per 5 minutes. With the strength test no excess J- is found. During the reaction, the pH of the solution is increased by adding held at 8.0 to 8.5 by buffer. Then the reaction mixture Immediately dialyzed for 1β hours at 4 ° C. against 1000 parts by volume of 0.1 M acetate buffer with pH 5.0. A heavy white precipitate appears inside the Visking membrane within 30 minutes. The content of the dialysis bag is lyophilized and the dry powder is dissolved in 1 M acetic acid and poured through a 2.5 60 era column with G-IO Sephadex passed. the Protein fraction is lyophilized, producing iodized glucagon containing about 4 g-aton of iodine per mole is obtained.
Vergleich der biologischen Aktivität von Jodglucagon und natürlichem GlucagonComparison of the biological activity of iodine glucagon and natural glucagon
A. Herzkontraktionskraft und Herzfrequenz.A. Heart contraction force and heart rate.
Die biologische Aktivität von Jodglucagon und natürlichen Glucagon wird in bezug auf die Herzkontraktionskraft und die Herzfrequenz verglichen.The biological activity of iodine glucagon and natural Glucagon is compared for heart contraction force and heart rate.
Für den Versuch werden vier Hunde verwendet. Die Hunde werden mit Phenobarbital anästhetisiert, vagotomisiert und zur überwachung der Herzfrequenz und Herzkontraktionskraft präpariert. Es werden Reaktionen auf kumulative Dosen bestimmt und die Parameter werden während 3 Stünden nach Verabreichung der letzten DosisFour dogs are used for the experiment. The dogs are anesthetized with phenobarbital, vagotomized and to monitor heart rate and cardiac contraction force prepared. Responses to cumulative doses are determined and the parameters are determined for 3 hours after the last dose was administered
209842/1227209842/1227
jedes Glucagonpräparats in verschiedenen Abständen gemessen. Die kumulative' Dosierung erfährt keine Verzögerung, indem die Vollendung der Reaktion auf die vorhergehende Dosis abgewartet wird. Stattdessen wird eine weitere Dosis verabreicht, sobald die Reaktion auf die unmittelbar vorhergehende Dosis einen Plateauwert erreicht hat, und in dieser XVeise wird fortgefahren, bis das Versuchstier die kumulative Henge erhalten hat. Die Prüfung wird in zv/ei Abschnitten durchgeführt. Im ersten Abschnitt erhalten zwei der Hunde natürliches Glucagon, während die beiden anderen Jodglucagon erhalten» Ira zweiten Abschnitt wird die gleiche Verfahrensweise mit der Ausnahrae wiederholt, daß die beiden Hunde, die in ersten Abschnitt natürliches Glucagon erhielten, jetzt Jodglucagon erhalten und umgekehrt. . "each glucagon preparation measured at different intervals. There is no delay in adding to the cumulative 'dosing the completion of the response to the previous dose is awaited. Instead, another dose is given administered as soon as the response to the immediately preceding dose has reached a plateau, and this procedure is continued until the test animal received the cumulative henge. The exam is in zv / ei sections carried out. Received in the first section two of the dogs received natural glucagon while the other two received iodine glucagon »Ira second section will repeat the same procedure with the Ausnahrae that the two dogs mentioned in first section are natural Received glucagon, now received iodine glucagon, and vice versa. . "
Das Jodglucagon, das in diesem Versuch zum Vergleich der biologischen Aktivität verwendet wird, enthält etwa 4 g-Atom Jod pro Mol Glucagon. Die Tabellen I und II zeigen die erzielten Ergebnisse. Tabelle I gibt die biologische Aktivität von jodraodif iziertem Glucagon im: Vergleich zu natürlicher.! Glucagon an. Tabelle II zeigt die ausgeprägte Verlängerung der biologischen Aktivität von Glucagon bei Modifizierung mit Jod.The iodine glucagon used in this experiment to compare the biological activity used, contains about 4 g-atom Iodine per mole of glucagon. Tables I and II show the results obtained. Table I gives the biological Activity of iodinated glucagon compared to more natural.! Glucagon on. Table II shows the pronounced Prolongation of the biological activity of glucagon Modification with iodine.
kumulative Dosis mcg/kg cumulative dose mcg / kg
Delta-Herζfrequenz,
Schläge/MinuteDelta heart rate,
Beats / minute
Delta-Kontraktionskraft,Delta contraction force,
nunwell
JGJG
0,50.5
16 3216 32
0,0
+0,2
+0,5
+2,0
+3,3
+4,1
+4,6 0.0
+0.2
+0.5
+2.0
+3.3
+4.1
+4.6
0,0 0,0 +0,4 +2,0 +4,3 +5,7 +6,30.0 0.0 +0.4 +2.0 +4.3 +5.7 +6.3
a - natürliches Glucagon
b - Jodglucagona - natural glucagon
b - iodine glucagon
Tabelle IITable II
■ 0■ 0
•a
•
Min.Time,
Min.
Jvjt τη
Jvjt
2020th
40 50 60 9040 50 60 90
120 180120 180
98 92 68 50 38 28 23 10 7 098 92 68 50 38 28 23 10 7 0
a - Maximale Reaktion von Tabelle I b - isiatürliches Gluqagon c - Jodglucagona - Maximum response from Table I b - isi natural gluqagon c - iodine glucagon
— 9 —- 9 -
B. Hyperglycämie B. Hyperglycemia
Die folgende Tabelle III zeigt den Einfluß von natürlichem Glucagon und von J-, J2"' J3~' ^4~ un<^ Jg-Glücagon auf die Glucoseijienge im Blut von Kaninchen in verschiedenen Zeitabständen bis zu 4 Stunden nach Injektion der Glucagon- oder jodmodifizierten Glucagonprobe. Jedes Kaninchen wird mit Cortison vorbehandelt und erhält dann eine subcutane Injektion von 8 Mikrogramm/kg Glucagon oder modifiziertem Glucagon. Die Ergebnisse zeigen deutlich die verlängerte hyperglycamxsche Wirkung von modifiziertem Glucagon im Vergleich zu natürlichem Glucagon. Aus den Werten von Tabelle III ist ferner zu ersehen, daß die Verlängerung des hyperglycämischen Effekts dem Jodierungsgrad direkt proportional ist.The following table III shows the influence of natural glucagon and of J-, J 2 "' J 3 ~' ^ 4 ~ un < ^ Jg-Glücagon on the amount of glucose in the blood of rabbits at different time intervals up to 4 hours after injection of the glucagon - or iodine-modified glucagon sample. Each rabbit is pretreated with cortisone and then receives a subcutaneous injection of 8 micrograms / kg of glucagon or modified glucagon. The results clearly show the prolonged hyperglycamic effect of modified glucagon compared to natural glucagon. From the values in Table III it can also be seen that the prolongation of the hyperglycemic effect is directly proportional to the degree of iodination.
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Zeit nach Injektion, Stunden · Time after injection, hours
mittlerer Anstieg des Glycösespiegels im Blut, mg/100mean increase in blood glycose level, mg / 100
JGJG
J2GJ 2 G
J3GJ 3 G
J4GJ 4 G
J5GJ 5 G
Ö CD OOÖ CD OO
0,50.5
124 (104) 129 (16)124 (104) 129 (16)
147147
185185
(32)(32)
(48)(48)
220220
(80)(80)
220220
136 (64)136 (64)
224224
2 42 4
5555
-10-10
114114
248248
6060
255255
9494
264264
159159
In der Tabelle bezeichnet G Glucagon, JG Monojodglucagon, J2G Dijodglucagon, J3G Trijodglucagon, J4G Tetrajodglucagon und J5G Pentajodglucagon*In the table, G denotes glucagon, JG monoiod glucagon, J 2 G diiodo glucagon, J 3 G triiodo glucagon, J 4 G tetraiodo glucagon and J 5 G pentajod glucagon *
Die Zahl in runden Klammern bezeichnet die Zahl der geprüften Kaninchen.The number in parentheses indicates the number of rabbits tested.
- 11 -- 11 -
C. Verminderung des Aminosäurespiegels im Blut.C. Decrease in the level of amino acids in the blood.
Eine weitere Methode zum Vergleich der Dauer der Wirkung verschiedener Glucagonpräparate beruht auf ihrer Verminderung des Aminosäurengehalts des Bluts nach Bromer und Chance, Diabetes 18, 748 (1969). Die Wirkungen von Glucagon und Tetrajodglucagon werden durch Verabreichung subcutaner Dosen von 50 Mikrogramm/kg an gefütterte Kaninchen verglichen. Die Ergebnisse zeigt Tabelle IV. Auch hier ist der Einfluß der Jodierung von Glucagon auf die Verlängerung der biologischen Wirkung ersichtlich.Another method of comparing the duration of the action of different glucagon preparations is based on their reduction the amino acid content of the blood according to Bromer and Chance, Diabetes 18, 748 (1969). The effects of Glucagon and tetraiodoglucagon are administered subcutaneous doses of 50 micrograms / kg to fed rabbits compared. The results are shown in Table IV. Here, too, the influence of the iodination of glucagon is on the prolongation of the biological effect can be seen.
209842/1227209842/1227
Verminderung von Aminosäuren im Blut Decrease in amino acids in the blood
Zeit nachTime after
Injektion,Injection,
Stundenhours
Blutaminosäuren, % der AnfangskonzentrationBlood amino acids ,% of initial concentration
Salzlösung (16)Saline solution (16)
Glueagon
(10)Glueagon
(10)
J.-Glucagon (10)J. Glucagon (10)
O CD OO ■ΡΙΟ O CD OO ■ ΡΙΟ
3 53 5
100100
9a9a
9090
8585
100
57
68
87100
57
68
87
100 47 41 47100 47 41 47
Die Zäh,! in runden Klammern bezeichnet die Zahl der geprüften Kaninchen.The tough! in round brackets denotes the number of rabbits tested.
K3 KJ)K3 KJ)
Wie daraus zu ersehen ist, wird eine beträchtliche Verbesserung der biologischen Aktivität von Glucagon durch chemische Modifizierung seiner Struktur durch Einführung von bis zu etwa 5 g-Atom Jod erzielt.As can be seen from this, there is a considerable improvement in the biological activity of glucagon chemical modification of its structure is achieved by introducing up to about 5 g-atom of iodine.
2098U2/12272098 U 2/1227
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