DE2122286A1

DE2122286A1 - Reaktionsbehälter für die Durch fuhrung von chemischen Analysen

Info

Publication number: DE2122286A1
Application number: DE19712122286
Authority: DE
Inventors: George H Bncktown Ewing Robert J Colts Neck NJ Brown (V St A ) P
Original assignee: Worthington Biochemical Corp
Current assignee: EMD Millipore Corp
Priority date: 1970-05-06
Filing date: 1971-05-05
Publication date: 1971-11-18
Also published as: FR2091259A5; DE2166461C3; DE2166461A1; CA943048A; US3691017A; GB1353632A; DE2122286C3; GB1353631A; DE2122286B2; DE2166461B2

Description

DIPL-CHEM. DR. ELISABETH JUNG . 3 München 23. 2 1 2 2 2 8 6

DIPL.-CHEM. DR. VOLKER VOSSIUS Clemensstrasse 30

TELEFON 3450<i7

DIPL.-PHYS. DR. JÜRGEN SCHIRDEWAHN telegramm-adresse: !,mvent/monchen

PATENTANWÄLTE TELEX 5-29 686

5.5.1971

u.Z. : G 138 M (Dr.S./ri)

WORTHINGTON BIOCHEMICAL CORPORATION Freehold, New Jersey, V.St.A.

ReaKtxonsbehalter für die Durchführung von chemischen Analysen

Priorität: 6. Mai 197o, Nr. 34,926

Die Erfindung bezieht sich atif einen Reaktionsbehälter für die Durchführung chemischer Analysen, .der für den einmaligen Gebrauch gedacht ist, also nach seiner Verwendung wegwerfbai" ist.

Die Analyse soll automatisch oder halbautomatisch ablaufen, wobei der Behälter insbesondere für die Analyse von Körperfluiden, wie Blut, Urin und dergleichen geeignet ist.

Auf dem Gebiet der Biochemie besteht ein großes Bedürfnis für chemische Untersuchungen in Form von quantitativen und qualitativen Analysen von Substanzen, von denen man weiß, daß sie mit möglichen Fehlfunktionen biochemischer Prozesse von Säugetieren in Zusammenhang stehen. Man schätzt, daß die Anzahl von Blutuntersuchungen in den USA I969 über eine "Milliarde betrug

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und sich in nächster Zukunft verdoppeln kann. Wenn man die große Anzahl von Versuchen in Betracht zieht, die aas Durchleuchtungen, diagnostischen Untersuchungen und Patientenüberwachung besteht , sieht man, daß sowohl die Ausrüstung als auch das die Ausrüstung verwendende Personal bei den bestellenden Untersuchungsanlagen hoch beansprucht ist. Man hat bereits eine Vielzahl von Vorschlägen für automatische odor halbautomatische Untersuchungsausrüstungen und entsprechende Verfahren gemacht. Diese Vorschläge haben jedoch den Nachteil, daß sie äußerst komplex und kostspielig sind, ihre Genauigkeit den gewünschten Anforderungen nicht entspricht, ihre Flexibilität ψ begrenzt ist und besonders ausgebildetes technisches Personal verlangt. ■ ·.

Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht deshalb darin, einen Behälter der eingangs genannten Art zu schaffen, der einfach und billig herzustellen ist und mit welchem sich Analysen der vorstehenden Art mit hoher Genauigkeit durchführen lassen, ohne daß speziell geschultes technisches Personal erforderlich ist.

Der erfindungsgemäße Behälter soll aus billigem Material herstellbar sein, keine beweglichen Teile aufweisen und für die automatisierte Handhabung bei der Messung der optischen Dichte " bezüglich der Lichtdurchlässigkeit durch eine vorher festgelegte Dicke einer Reaktionsmassenschicht in dem Behälter geeignet sein. Der Behälter soll als Träger für die getrennte Lagerung von Reaktionsteilnehmern in fester Form in einer gemeinsamen Kammeranordnung dienen. Die chemische Reaktion im Behälter soll durch Einführen einer Schlüsselkornponente in einem gewünschten Zeitpunkt einleitbar sein. Schließlich soll der Behälter dazu geeignet sein, daß, nachdem alle Komponenten der Reaktionsmasse in ihm enthalten sind, die Reaktionsmasse auf eine gewünschte Temperatur gebracht und atif dieser Temperatur während einer Inkubationszeit gehalten werden kann.

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BAD ORIGINAL

Diese Aufgabe wird durch einen für den einmaligen Gebi~cmch vorgesehenen Reaktionsbehälter dadurch gelöst, daß der Behälter aus steifem oder halbsteifem Material hergestellt ist und transparente Fenster in einem vorher festgelegten Abstand zueinander aufweist. Durch diese Fenster soll Licht hindurchtreten und dann eine Schicht vorher festgelegter Stärke der Reaktionsmasse in dem Behälter durchdringen. Unter transparenten Fenstern sind solche Fenster zu verstehen, durch die Licht hindurchgeht, unabhängig davon, ob das Licht im sichtbaren Bereich liegt. Für die Analysen, wie sie beispielsweise im folgenden angeführt w'erden, wird üblicherweise ein Spektrophotometer als raonocliroraatische Lichtquelle mi+, einem Wellenlängenbereich von 33° mp bis 6oo nip verwendet. Üblicherweise wird ultraviolettes Licht mit einer Wellenlänge von im wesentlichen 3'io mp verwendet.

Der Reaktionsbehälter für den einmaligen Gebrauch umfaßt eine Kammerauordnung, die nicht nur mit transparenten Fenstern sondern auch mit Bereichen für die Ablagerung bzw. das Aufbringen von Reaktionskomporienten in fester Form versehen ist, so daß das endgültige Handelsprodukt lösbare Reaktionsteilnehmer aufweist, die in fester Form, ohne Kontakt miteinander" zu haben, darauf deponiert sind. Diese Bereiche haben vorzugsweise Rippen zwischen sich, die nach innen in die Reaktionskanimer vorstehen, sich jedoch nicht über deren Weite erstrecken. Dadurch wird das Ablagern der festen Reaktionskoinponenten getrennt voneinander erleichtert. Dadurch wird die Möglichkeit auf ein Minimum beschränkt, das die Komponenten infolge eines vorzeitigen Vermischens unbrauchbar werden. Darüber hinaus ist jeder der Bereiche vorzugsweise mit einer Vielzahl von Vorsprüngen versehen, die eine Beibehaltung der eigentlichen Anordnung der Feststoffe in der Kammeranordnung des Reaktionsbehälters begünstigen und das Fließen an der Oberfläche auf ein Minimum beschränken, wenn die Komponenten ursprünglich in Form einer Lösung aufgebracht werden. Auf diese Weise ist es

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möglich, einen Reaktionsbehälter für den einmaligen Gebrauch als Handelsware zu schaffen, in dem die verschiedenen Komponenten der Reaktionsmasse außer dem Lösungsmittel und der Probe gelagert sind, die bei der Ausführung der Analyse eingebracht wird.

Die Reaktionskammer wird erfindungsgemäß am Anfang in getrennten Abschnitten hergestellt, so daß das Ablagern der Feststoffkomponenten in den gewünschten Bereichen in der Kammeranordnung des Reaktionsbehälters erleichtert wird. In der Praxis werden die Lösungen, welche vorher festgelegte Mengen von gelöstem Feststoffreaktionskomponenten enthalten, auf den ausgewählten Bereichen der Abschnitte aufgebracht und die Reaktionskomponenten durch Lyophilisierung in die feste Form reduziert. Danach werden die Abschnitte zu der Gesamtanordnung vereinigt. Normalerweise umfaßt jeder Abschnitt eines der transparenten Fenster. Die Abschnitte werden miteinander Fläche gegen Fläche liegend verbunden. Dabei können für das In-Lage-Halten zweckmäßige Vereinigungseinrichtungen verwendet werden. Vorzugsweise verwendet man relativ zueinander im Reibungskontakt bewegliche Flächen, so daß die Abschnitte nur durch Aufbringen von Druck aneinander befestigbar sind; Die Verwendung einer Zunge und einer Nut als Pass teile ist für das Erreichen eines Preßsitzes und das Zusammenhalten der Abschnitte durch Reibung besonders geeignet. Zusätzlich oder alternativ kann Klebstoff verwendet werden, üblicherweise ist ein Bindemittel jedoch nicht erforderlich.

Der erfindungsgemäße, mit Kammern versehene, diaförmige Objektträger hat eine innere Kainmeranordnung, die mit einer Öffnung oder Öffnungen versehen ist, welche mit dem Inneren in Verbindung stehen. Vorzugsweise ist die Öffnung oder sind die Öffnungen am Rand des Objektträgers angeordnet. Dieser Aufbau ermöglicht es in Verbindung mit der Verwendung von

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steifem oder halbsteifem Material für den Reaktionsbehälter, daß dieser als relativ dünner Objektträger oder als Platte handhabbar ist, die mit der Öffnung oder den Öffnungen nach oben gehalten werden kann. Diese Ausbildung und dieser Aufbau des Behälters für den einmaligen Gebrauch ermöglichen die leichte Handhabung durch automatisierte Einrichtungen bei der Durchführung einer Analyse oder einer Untersuchung, was später näher erläutert wird.

Die Kammeranordnung umfaßt eine Reaktionskammer und in Kombination damit eine weitere Kammer, die im folgenden als Zusatzkammer bezeichnet wird. Die Reaktionskammer hat eine Öffnung, die mit ihrem Inneren in Verbindung steht und durch welche das Lösungsmittel und die Probe eingeführt werden können. Die Zusatzkammer hat ebenfalls eine Öffnung, die mit ihrem Inneren in Verbindung steht. Die Öffnung ist nach oben gerichtet, wenn sich der Reaktionsbehälter in einer Lage befindet, in welcher die Öffnung für die Reaktionskammer oben angeordnet ist. Die Reaktionskammer und die Zusatzkammer stehen durch einen Durch-· laß von verringertem Querschnitt miteinander in Verbindung, der gewöhnlich in Teilen der Reaktionskammer und der Zusatzkammer angeordnet ist, die von den vorstehend genannten Öffnungen entfernt liegen. Wenn der Reaktionsbehälter die Form eines mit Kammern versehenen diaförmigen Objektträgers hat, sind die Öffnungen für die Reaktionskammer und für die Zusatzkammer vorzugsweise benachbart an einem Rand des Objektträgers angeordnet. Wenn eine Kammeranordnung verwendet wird, die sowohl eine Reaktionskammer als auch eine Zusatzkammer aufweist, können die Reaktionskomponenten in bestimmten Bereichen der Innenfläche der Reaktionskammer und eine andere davon verschiedene Reaktionskomponente auf der Innenseite der Zusatzkammer deponiert werden. Die abgelegte Substanz auf der Oberfläche der Zusatzkammer ist vorzugsweise eine Substanz, die erforderlich ist, um die chemische Reaktion einzuleiten oder

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auszulösen. Eine dieser Forderung genügende Komponente wird nachstehend als "Schlüssel- bzw. Ilauptkoinponente" bezeichnet.

Wenn der Reaktionsbehälter für den einmaligen Gebrauch mit einer Kammeranordnung versehen ist, die eine Reaktionskamnier und eine Zusatzkammer, wie vorstehend erwähnt, umfaßt, sind die Komponenten mit Ausnahme des Lösungsmittels und der zu untersuchenden Probe in der Reaktionskammer und in der Zusatzkammer, wie erwähnt, in fester Form vorhanden. Wenn die Analyse durchgeführt werden soll, wird ein Lösungsmittel, beispielsweise Wasser, in die Reaktionskammer in einer vorher

^ festgelegten Menge,bezogen auf das Fassungsvermögen der Reaktionskammer und der Zusatzkammer.eingebracht, so daß die Fenster in der Reaktionskammer überdeckt sind. Danach wird die Probe zugegeben. Da das Lösungsmittel früher in die Zusatzkammer geflossen ist, wandert nur sehr wenig oder überhaupt nichts von der Komponente in der Zusatzkammer, nachdem sie gelöst worden ist, in die Reaktionskammer. Wenn sich der Jnhalt in diesem Zustand befindet, kann der Inhalt des Reaktionsbehälters auf die gewünschte Temperatur für die Reaktion gebracht werden, wobei man dem Inhalt eine bestimmte Zeit als Inkubationszeit geben kann. Wenn indessen die Reaktion eingeleitet werden soll, wird die Lösung der Hauptkomponente in der Zusatzkammer daraus durch den verengten Durchlaß in die Reaktionskammer zwangsweise geführt. Nach dem Einführen der Lösung der Hauptkomponente in die Reaktionskammer aus der Zusatzkammer wird sie mit der Lösung der anderen Komponenten in der Reaktionskammer, einschließlich der Probe, vermischt und die Reaktion eingeleitet. Die Rippen in der Reaktionskammer und die oben erwähnten Vorsprünge unterstützen das Auftreten der Turbulenz beim Einführen. Um ein inniges und gänzliches Vermischen der Reaktionsteilnehmer zu gewährleisten, kann die Lösung in der Mischkammer dazu gebracht werden, daß sie in die Zusatzkammer zurückströmt, wonach das Einführen bzw. Injizieren mehrere Male wiederholt werden kann.

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Das zwangsweise Abströmen der Lösung in der Zusatzkaninier durch den Durchlaß mit reduziertem Querschnitt wird vorzugsweise durch Anwendung eines Preßluftstoßes erreicht. Für diesen Zweck ist die Öffnung in der Zusatzkamtner für die Aufnahme eines Stutzens bzw. einer Düse rund gestaltet, die eine konische Außenfläche an dem Ende einer Leitung hat, welche die Druckluft in Form eines Druckstoßes zuführt. Die Rückkehr der Lösungen in die Zusatzkammer kann durch den Druck erreicht werden, der durch die Schwerkraft ausgeübt wird. Dieser Druck kann jedoch jeweils dadurch begünstigt werden, daß an das Innere der Zusatzkaninier 'über einem kurzen Zeitintervall ein Unterdruck angelegt wird, der über die Öffnung und die Düse einer Luftleitung in der Öffnung in der·-Reaktionskammer wirkt, wobei die Öffnung in diesem Falle üblicherweise für die Aufnahme eines Rohrstutzens mit einer kegelförmigen Außenfläche rund ausgebildet ist. Das Einsetzen des Rohrstutzens in eine der Öffnungen kann von Hand erfolgen. Erfindungsgemäß soll jedoch die Handhabung der mit Kammern versehenen Objektträger durch Vorrichtungen erfolgen, durch welche die Düse oder die Düsen im geeigneten Zeitpunkt in Verbindung mit der Öffnung oder mit den Öffnungen in dem Objektträger gebracht werden, worauf dieser Eingriff gelöst wird, wenn die gewünschte Mischwirkung erreicht ist.

Erfindungsgemäß ist in dem Reaktionsbehälter für den Einmalgebrauch eine Inkubationskammer vorgesehen, die dazu dient, das Reaktionsgemisch auf eine gewünschte Temperatur während der Inkubationszeit vor der Einleitung der Reaktion zu bringen. Bei einer bevorzugten Ausführungsform ist die Inkubationskammer in der Nähe der Kammeranordnung angeordnet. Die Inkubationskainmer kann ein in ihr verteiltes Metall enthalten, das, wenn es erhitzt wird, dazu beiträgt, den Reaktionsbehälter und seinen Inhalt auf die gewünschte Temperatur zu bringen und auf dieser Temperatur zu halten. Das Metall in dem Behälter kann durch Wärmeleitung von einer Fortsetzung des Metalls

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erhitzt werden, die sich auf der Außenseite erstreckt, die durch Kontakt mit einem beheizten Halter oder durch Luft oder ansprechend auf Energie erwärmt wird, die von einem Erregerfeld, beispielsweise einem Hochfrequenzfeld aufgenommen wird.

Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird die Reaktionskammer für den Einmalgebrauch anfänglich so präpariert, daß sie die festen Komponenten des Reaktionsgemisches enthält, die vorzugsweise durch Lyophilisierung in situ auf den Oberflächen der Abschnitte des Behälters abgelagert wurden, bevor diese miteinander vereinigt wurden. Wegen des Auf-

W baus und der Formgebung der Flächenbereiche der Karntneraaordnung kann eine Anzahl von unterschiedlichen Reaktionskomponenten in dem Behälter in fester Form und in vorher festgelegten Mengen, die für die in Frage kommende Analyse zweckmäßig sind, deponiert werden. Wie später näher erläutert wird, kann die Kammeranordnung eines mit Kammern versehenen Objektträgers leicht acht oder mehr einzelne Flächen haben, auf welchen Komponenten in fester Form abgelagert werden können. Die besonderen Komponenten, die im speziellen Fall verwendet werden, hängen von der Art der durchzuführenden Analyse ab. Ein großer Vorteil ergibt sich bei der Erfindung * dadurch, daß sie eine große Flexibilität in ihrer Kapazität zuläßt, um den automa-

^ tischen oder halbautomatischen Vorgang einer großen Vielfalt von Analysen und Untersuchungen trotz großer Schwierigkeiten durch die Art und Anzahl der Reaktionskomponenten anzupassen.

Wenn ein Reaktionsbehälter verwendet werden soll, dessen Kammeranordnung eine Zusatzkammer hat, ist es lediglich erforderlich, eine vorher festgelegte Menge von Wasser und die Probe zuzugeben, beispielsweise eine kleine Menge eines Blutserums. Der Behälterkann gewünschtenfalls in einer automatischen Vorrichtung mit den Öffnungen für die Aufnahme des Lösungsmittels und der Probe nach oben angeordnet werden. Nach der

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Einführung des Lösungsmittels und der Probe wird der Behälter, der jetzt mit allen Zusätzen für die Reaktionsmasse versehen ist, üblicherweise auf eine vorher festgelegte Temperatur für die Durchführung der Reaktion gebracht. Wenn eine Inkubationszeit erforderlich ist, wird die gewünschte Temperatur während der Inkubationszeit aufrechterhalten. Nach derEinleitung der chemischen Reaktion durch zwangsweises Injizieren der eine Hauptkomponente enthaltenden Lösung aus der Zusatzkammer in die Reaktionskammer wird der Reaktionsbehälter bezüglich eines Strahls von monochromatischem Licht aus einer geeigneten Lichtquelle, beispielsweise einem Spektrophotometer, geeignet angeordnet. Dabei werden entsprechend den bekannten Verfahren Ablesungen bezüglich der optischen Dichte "-vorgenommen, wobei der Reaktionsbehiilter selbst seiner Wirkung nach als Küvette dient. Wenn die Reaktionsgeschwindigkeit bestimmt werden soll, können die Ablesungen für die optische Dichte in festgelegten Zeitabständen vorgenommen werden, woraus die Geschwindigkeit der Änderung der optischen Dichte errechnet werden kann.

Die Erfindung kann also für irgendeine Kombination von Reaktionsteilnehmern und Komponenten verwendet werden, die für die Verwendung in der Reaktionsmasse bei der Durchführung von Untersuchungen und Analysen geeignet sind, welche Reaktionen einschließen, die eine Wirkung auf die optische Dichte haben, wobei insbesondere Reaktionen eingeschlossen sind, die in einem wässerigen Medium unter Verwendung von Wasser als Lösungsmittel ausgeführt werden. Die Erfindung eignet sich jedoch besonders vorteilhaft für die Durchführung von enzymetisehen Reaktionen mit enzymatischen Reagenzien. Es kann jede der bei derartigen Reaktionen üblicherweise verwendeten Reaktionskomponenten zur Anwendung gelangen, beispielsweise Enzyme, Co-Enzyme, ausgewählte Substrate und andere Komponenten, wie beispielsweise Puffer und anorganische Salze.

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Bei der Durchführung einer Analyse unter Verwendung eines erfindungsgemäßen Reaktionsbehälters, bei welchem die Kamraoranordnung eine Reaktionskammer in Kombination mit einer Zusatzkaninier aufweist, die eine Hauptkomponente enthält, und enzymatische Reagenzien, die ein Substrat umfassen, zur An~< Wendung gelangen, wird üblicherweise bevorzugt, daß das Substrat zuerst in der Zusatzkammer in. einer derartigen Menge deponiert wird, wie vorzugsweise für die Verwendung des Substrats als Hauptkomponente verwendet wird, die die Reaktion einleitet, nachdem eine Lösung davon in die Reaktionskammer eingeführt worden ist.

Während vorzugsweise ein Reaktionsbehälter mit einer mit Fenstern versehenen Reaktionskammer zusammen mit einer benachbarten Zusatzkammer verwendet wird, die von der Reaktionskammer getrennt ist, mit Ausnahme eines Durchlasses von reduziertem Querschnitt, kann erfindungsgemäß auch nur eine einzige Kammer, nämlich die Reaktionskammer, verwendet werden. In diesem Falle können alle Reaktionskoniponenten in fester Form in Flächenbereichen in der Reaktionskammer mit Ausnahme der Hauptkomponente angeordnet Airerden, die in diesem Falle üblicherweise die Probe ist. Menn die -Analyse durchgeführt werden soll, wird das Lösungsmittel in die Kammer eingeführt. Der Inhalt des Reaktionsbehälters kann dann auf die gewünschte f Temperatur wärend einer Inkubationsperiode, wie vorstehend beschrieben, gebracht werden. Wenn die Reaktion eingeleitet oder ausgelöst werden soll, wird eine Lösung der Probe in die Reaktionskammer eingebracht und mit deren Inhalt vermischt, beispielsweise durch Verwendung eines Luftstrahls oder durch Einführen eines Rührers. Danach wird das Ausmaß der Auswirkung auf die optische Dichte, wie vorstehend beschrieben, beobachtet.

Anhand der beiliegenden Zeichnungen werden beispielsweise Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung näher erläutert.

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Fig. 1 zeigt perspektivisch einen Reaktionsbehälter für den einmaligen Gebrauch in der bevorzugten Aus führung sf orni eines Kammern aufweisenden, diapositivartigen Objektträgers.

Fig. 2 ist ein Querschnitt längs der Linie 2-2 von Fig. 1. Fig. 3 ist ein Schnitt längs der Linie 3~3 von Fig. 2. Fig. k ist ein Schnitt längs der Linie k-k von Fig. 2.

Fig. 5 zeigt schematisch eine Fig. 3 entsprechende Ansicht mit den Flüssigkeitsniveaus in der Reaktior-s- und Zusatzkammer,

Fig. 6 zeigt in einer Fig. k entsprechenden Ansicht den Flüssigkeitsstrom von der Zusatzkammer in die Reaktionskammer infolge aufgedüster Luft und das Mischen in der Reaktionskammer .

Fig. 7 zeigt den Kammern aufweisenden Objektträger perspektivisch mit Druckluftzuführung und Lichtquelle.

Fig. 8 zeigt in einer Fig. k entsprechenden Ansicht eine andere Kammeranordnung.

Bei der in den Zeichnungen gezeigten Ausführungsform hat der für den einmaligen Gebrauch gedachte Reaktionsbehälter eine bevorzugte Form, nämlich die Form eines Kammern aufweisenden, diapositivartigen Objektträgers lo. Der Objektträger ist aus zwei aneinanderliegenden, planaren Abschnitten 11 und 12 zusammengesetzt, die, wie in Fig. 2 gezeigt, durch Vorsprünge gegeneinander!iegend gehalten sind, die in Nuten Ik in einem Gleitreibesitz derart passen, daß die Abschnitte zusammengedrückt und von dem Reibungskontakt zwischen den Paßflächeii der Vorsprünge und Nuten lösbar gehalten sind. Die Anordnung der

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Teile im Abschnitt 11 ist in Fig. 3 gezeigt, während die Anordnung der Teile im Abschnitt 12 in Fig. k zu sehen ist. Die Anordnungen sind komplementär, so daß die verschiedenen Teile eines jeden Abschnittes einander gegenüberliegen, wenn die Abschnitte, wie in Fig. 2, zusammengebracht werden. Im Mittelteil des Abschnittes 11 ist ein transparentes Fenster 15 vorgesehen, das im Abstand einem Fenster 16 im Abschnitt 12 gegenüberliegt.

In dem Mittelteil der planparallelen Flächen des Objektträgers ist eine Kammeranordnung vorgesehen. Bei der gezeigten Aus-

W führungsform ist der größere Teil der in dem Bereich der Fenster liegenden Kammeranordnung die Reaktionskammer -17· Die Kaniraeranordnung weist weiterhin eine Zusatzkamnier 18 auf, die von der Reaktionskammer 17 durch eine Wand 19 mit Ausnahme eines Durchlasses 2o getrennt ist, der einen verringerten Querschnitt hat. Die Reaktionskammer ist mit einer Öffnung 21 versehen, die mit dem Kammerinneren eine Verbindung herstellt, während die Zusatzkammer 18 mit einer Öffnung 22 für die Verbindung mit dem Inneren versehen ist. Die Öffnungen 21 und 22 sind nahe beieinander in einem der Ränder des mit Kammern versehenen Objektträgers angeordnet. Wenn sich der Objektträger in einer Lage befindet, wo eine der Öffnungen nach oben liegt,

k weist die andere Öffnung ebenfalls nach oben. Der Durchlaß 2o ist gemäß einer bevorzugten Ausführung in dem Teil der Kammeranordnung angeordnet, die den Öffnungen 21 und 22 gegenüberliegt.

Die Innenseite des Abschnittes 11, die in der Nähe des Fensters 15 liegt, ist mit einer Vielzahl von kleinen, davon ausgehenden Vorsprüngen versehen, die, wie gezeigt, die Form von aufeinanderfolgenden kleinen Wülsten bzw. Erhebungeti 23 haben. In gleicher- Weise ist der Teil dos Abschnittes 12 dos Objektträgers angrenzend an das Fenster l6 mit kleinen Erhebungen 2k, die davon vorstehen, versehen. Im Abschnitt 11

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trennen die Rippen 25 die Innenseite der Kammer in drei Bereiche 26, 27 und 28 auf. Ähnliche Rippen 29 begrenzen das Fenster 15. Im Abschnitt 12 unterteilen die Rippen 39 und ko den das Fenster 16 umgebenden Bereich in Bereiche 3o, 31 und 32. Die Rippen 25, 29, 39 und 4o stehen in die Reaktionskammer vor, erstrecken sich jedoch nicht ganz hindurch.

Die Zusatzkammer 18 hat auf der Innenseite gleichermaßen Vorsprünge 33 in der Form von kleinen Wulsten bzw.' Erhebungen.

Wenn die Abschnitte 11 und 12 Fläche gegen Fläche aneinander befestigt sind, sorgt die Zungen-Nut-Verbin ung um die Kammeranordnung herum dafür, daß Flüssigkeit darin gehalten bleibt, wenn die Offnungen 21 und 2 2 nach oben weisen.

Bei der gezeigten, bevorzugten Ausführungsform umgrenzt eine weitere Kammer 35 die Mittelkammeranordnung, welche die Reaktionsmasse enthält. Die Kammer 35 wird im folgenden als Inkubationskammer bezeichnet. Sie weist eine Einrichtung auf, die ein Teil des Reaktionsbehälters selbst ist, wodurch die Reaktionsmasse nach ihrer Vervollständigung, ausgenommen für das Vermischen der Hauptkomponente mit den anderen Komponenten, auf die gewünschte Temperatur gebracht und auf dieser Temperatur während eines Inkubationszeitraumes gehalten werden kann. Bei der gezeigten Ausführungsform ist in der Kammer 35 Metall angeordnet, das üblicherweise Aluminiumfolie 38 ist. Aluminium ist ein Metall, das ein guter Wärmeleiter ist und das, wenn es einem Erregerfeld, beispielsweise einem Hochfrequenzfeld, ausgese tzt ist, Energie in Form von Wärme absorbiert. Diese Eigenschaften können dazu verwendet werden, den Objektträger und seinen Inhalt auf die gewünschte Temperatur zu bringen und auf dieser Temperatur zu halten. Bei der gezeigten Ausführungsform erstreckt sich eine Fortsetzung 38A der Aluminiumfolie in der Kammer 3° so, daß sie einen

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wesentlichen Teil der Außenfläche des Objektträgers mit Ausnahme der Fenster überdeckt. Bei Verwendung des Objektträger« wird eine Vielzahl dieser Träger in einem geeigneten Halter angeordnet, der aus Aluminium hergestellt sein kann. Durch die Anordnung des Halters in einer auf einer gewünschten Temperatur gehaltenen Umgebung erwärmt er sich auf im wesentlichen die gleiche Temperatur. Dabei nimmt die die Außenfläche des Objektträgers überdeckende Aluminiumfolie aus der Umgebung und infolge des Kontaktes mit den Flächen des Halters Wärme auf. Die so aufgenommene Wärme wird durch Leitung auf die k Folie in der Kammer 35 übertrafen, so daß der Behälter und sein Inhalt schneller auf die gewünschte Temperatur gebracht werden können. Die Aluminiumfolie kann auch dadurch erhitzt werden, daß sie einem Hochfrequenzfeld ausgesetzt wird. Dabei kann eine automatische Regulierung durch einen Thermostat vorgesehen werden, der das Erregerfeld abhängig davon aktiviert und desaktiviert, ob die Temperatur über die vorher festgelegte, aufrechtzuerhaltende Temperatur hinausgeht oder unterschreitet. Die außenseitige Fortsetzung 3^A der Folie kann für ein leichtes Bestimmen der Temperatur der Aluminiumfolie verwendet werden.

Die Temperaturregulierung kann auch noch auf andere Arten er- ψ folgen. So kann die Kammer 35 weggelassen werden und die gewünschte Temperatur während der Inkubation durch teilweises Eintauchen des Objektträgers in eine Flüssigkeit erreicht werden, die auf einer gewünschten Temperatur gehalten wird. GewünschtenfaIls kann wahlweise die Metallfolie in der Kammer 35 weggelassen werden. Durch Verwendung geeigneter, nicht gezeigter Einlaß- und Auslaßexnrichtungen für die Kammer 35 kann ein Fluid mit der gewünschten, vorher festgelegten Temperatur durch die Kammer 35 während der Inkubationszeit zwangsweise geführt werden.

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Bei dein in Fig. 8 gezeigten abgeänderten Reaktionsbehälter besteht die hauptsächliche Modifizierung darin, daß die Wand 19 mit einer Verlängerung I9A. versehen ist, die parallel zum Boden der Kammeraiiordnung und durch eine Pufferzone I8B im Abstand dazu verläxift, die eine Verlängerung der Hauptzone I8A der Zusatzkammer l8 ist. Der Durchlaß 2o mit verringez'tem Querschnitt befindet sich in Fig. 8 an einer Stelle, die von der Hauptzone 18a durch die Längserstreckung der Pufferzone 18b getrennt ist, welche üblicherweise eine Längserstreckung hat, die wesentlich größer ist als die Breite. Bei der Zusatzkaimner l8 einschließlich- der Zone I8B sind die mit Erhebungen versehenen Oberflach erbereiche 39 in der Zone I8A und ko in der Zone I8B durch die Rippe kl getrennt. Die Reaktionskammer 17 hat Flächenbereiche ^ιί2, 4 3 und kk mit ivulstartigen Erhebungen, die voneinander und von dem Fenster l6 durch die Rippen 45 getrennt sind.

Fig. 8 zeigt nur einen Abschnitt des Objektträgers. Der andere Abschnitt ist in allen Einzelheiten kompleinentär ausgebildet. Dies muß jedoch nicht notwendigerweise der Fall sein. So kann die Anordnung der Oberflächenbereiche gegenüber Fig. 8 unterschiedlich sein. Alternativ können die Flächen auf der Innenseite der Zusatz- und Reaktioiiskaminer eben sein, wenn man es nicht für erforderlich hält, darin irgendwelche Reaktionskomponenten zu deponieren.

Die in Fig. 8 gezeigte Kammeranordrmug kann gewünschtenfalls die zusätzliche Sicherheit aufweisen, daß während der Inkubationszeit keine der Hauptkoinponenten von der Zusatzkammer in die Reaktioiiskaminer wandert, wie es beispielsweise der Fall ist, wenn man die Inkubationszeit verlängern möchte oder wenn die Komponenten der Reaktionsmasse eine schnelle Diffusion der Hauptkoinponente fördern. Bei Benutzung der in Fig. 1 gezeigten Ausführungsform wird die Haupt- bzw. Schlüsselkomponente,

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beispielsweise das Substrat, einer enzymatischen Reaktion gewöhnlich auf die mit Wulsten versehene Oberfläche der Hauptzone ISA abgelegt, während eine oder mehrere andere und unterschiedliche Reaktionsteilnehmer auf der mit Wulsten versehenen Oberfläche eines oder aller Bereiche 42, 43 und 44 angeordnet werden, die von der Innenfläche der Reaktionskammer gebildet werden· Auf der mit Wulsten versehenen Oberfläche der Pufferzone l8li der Zusatzkammer kann nichts oder eine lösbare Komponente der Reaktionsmasse, beispielsweise ein Puffer, abgelagert werden, der bezüglich der in der Zone ISA abgeleg-

k ten Komponente inert ist. In beiden Fällen strömt, wenn der Reaktionsbehälter durch Einführen von Wasser in die Reaktionskammer in Benutzung genommen wird, das Wasser in die Zusatzkammer über die Öffnung 2o und die Zone IBB, ehe es in die Zone ISA eintritt. Trotz der Lösung der Hauptkomponente in der Zone 18a ist die Möglichkeit der Wanderung durch Diffusion irgendeines Teils der Hauptkomponente während der Inkubation von der Zone l8A in die Reaktionskammer zweifach durch das Erfordernis gewährleistet, daß ein Weg durch die Pufferzone IBB sowie durch den Durchlaß 2o mit verringertem Querschnitt vorhanden ist. Wenn die Zone l8B für ein Ablagern einer lösbaren Feststoffkomponente der Reaktionsmasse nicht verwendet wird, kann die Pufferzone l8B annähernd die Querschnittsab-

jt messungen des Durchlasses 2o des verringerten Querschnitts haben und dadurch für einen langgestreckten Kanal sorgen, der im wesentlichen die gleichen engen Querschnittsabmessungen über seiner Länge hat.

Bei der beschriebenen Ausführungsform haben die gegenüberliegenden Abschnitte des Reaktionsbehälters Zungen und Nuten für das durch Reibung bedingte Zusammenhalten der Abschnitte und für fluiddichte Umfangswände der Zusatz- und Reaktionskamaier sowie für eine fluiddichte Wand zwischen der Zusatz- und Reaktionskamrner. Anstelle dieser Verbindungsteile können

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jedoch auch andere Einrichtungen verwendet werden. So kann gevriinsentenfälls ein zufälliges Trennen durch Verwendung von herkömmlichen, zusammenwirkenden Verschlußteilen verhindert werden, die elastisch in Arretierlagen schnappen, wenn die gegenüberliegenden Abschnitte zusammengepreßt werden.

Anhand der nachstehenden Beispiele wird die Verwendung eines mit Kammern versehenen Objektträgers gemäß der Erfindung näher erläutert.

BEISPIEL 1

Der erfindungsgemäße, mit Kammern versehene Objektträger wird für die Analyse zur Bestimmung der Lactatdehydrogenase-Menge in einer Blutserumsprobe verwendet.

Wenn ein Mensch das Leiden hat, bei welchem sich das Herz in einem Zustand befindet, der als Myocardialinfarkt bekannt ist, setzt der Körper bestimmte Enzyme in den Blutstrom frei. Eines der auf diese Weise freigesetzten Enzyme ist Milchsäuredehydrogenase bzw. Lactatdehydrogenase. Die Anwesenheit von mehr als einer Normalmenge an Lactatdehydrogenase in einer Blutserumsprobe ist für einen Myocardialinfarktzustand symptomatisch. Die bei der* Analyse für die Feststellung von Lactatdehydrogenase verwendeten Reagenzien sind Milchsäure und Diphosphopyridinnucleotid (DPN) und ein Phosphatpuffer.

Die Komponenten des Reafcti onsgemisches außer Wasser und der Probe werden zuerst auf dem gewünschten Flächenbereich des Objektträgers aufgebracht, während die Abschnitte 11 und 12 sich, wie in Fig. 3 und k gezeigt, im getrennten Zustand befinden. Bei der zu betrachtenden Reaktion ist die Milchsäure das Substrat und die Hauptkomponente, welche die Reaktion einleitet oder auslöst. Die Milchsäure wird aus einer Lösung

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auf einem Oberflächenbereich in der Zusatzkanuner l8 abgeschieden, nämlich der Oberfläche 33 des Abschnittes 11 oder der Oberfläche 3*1 des Abschnittes 12 oder auf beiden Oberflächen. Eine Lösung von DPN kann auf den Bereich 26 des Abschnittes oder den Bereich 3o des Abschnittes 12 oder auf beiden Bereichen abgelagert- werden. Auf den Zonen 27 oder 28 oder auf beiden Zonen des Abschnittes 11 oder auf den Zonen 31 und 33 oder auf beiden Zonen des Abschnittes 12 oder auch auf allen vier der vorstehenden Bereiche kann eine Pufferlösung aufgetragen werden. Nachdem die Lösungen auf die jeweiligen Bereiche aufgebracht sind, werden sie in die feste Form zurückgeführt, P vorzugsweise durch Lyophilisierung. Jedes der Reagenzien ist in einer vorher festgelegten Menge vorhanden, um die gewünschte Konzentration davon in der Reaktionsmasse zu haben, wenn diese durch Zusatz von Wasser und der Probe vervollständigt wird.

In der Praxis kann der Objektträger mit den Kammern eine quadratische Form mit ^o mm Seitenlänge (2 inch) und 8 mm (5/16 inch) Stärke sein. Der Abstand zwischen der Innenfläche der Fenster beträgt 5 mm. Die Abmessungen der Fenster sind 12,7 mm x 6, ^t mm (1/2 χ 1/4 inch). Der Durchmesser der runden Öffnung, die die Verbindung mit dem Inneren der Reaktionskamk mer herstellt, beträgt 3i2 mm (1/8 inch) und der Durchmesser der runden Öffnung, die eine Verbindung mit dem Inneren der Zusatzkammer herstellt, beträgt ebenfalls 3>2 mm. Die Abmessungen des Durchlasses 2o sind 1,6 mm (I/I6 inch) x 2,5 mm. Das Fassungsvermögen der Kammeranordnung beträgt beispielsweise 1,4 ml Wasser. Die Kanuneranordnung kann jedoch auch mit einem anderen Lösungsmittel bis zur in Fig. 5 gezeigten Höhe gefüllt sein. Der Objektträger kann aus irgendeinem steifen oder halbsteifen Material hergestellt sein, beispielsweise aus Styrolharz oder einem durchsichtigen Acrylharz ±_m Hinblick auf die Fenster bestehen, die eine adäquate Durchlässigkeit für monochromatisches Licht haben, das für die Untersuchung durch Betrachtung verwendet wix~d. Unter steif oder halbsteif ist zu

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verstehen, daß der Behälteraufbau eine ausreichende Steife hat, damit der Abstand zwischen den Fenstern im wesentlichen genau auf einem vorher festgelegten Wert gehalten wird.

Wenn die Reaktionskonipoiieiiten in die feste Form gebracht sind, haften sie an den verschiedenen Flächen und bleiben getrennt voneinander. Wenn ein Metall, beispielsweise Aluminiumfolie, in der Inkubatioiiskaininer verwendet wird, wird es in einem der Abschnitte angeordnet. Die Abschnitte werden dann in die in Fig. 2 gezeigte Lage gebracht, wodurch der Objektträger für den Handel fertiggestellt ist. Der vervollständigte Objektträger kann unmittelbar danach verwendet werden oder für den Transport und die Lagerung vor der Verwendung durch einen Verbraucher in Schachteln verpackt werden.

Für die Durchführung der Analyse gibt die den Objektträger verwendende Person durch die Öffnung 21 1,4 ml Wasser zu. Während dieses Vorgangs strömt das zugesetzte Wasser in die Zusatzkammer. Danach Airerden o,l ml der Serumsprobe in die Reaktionskammer eingeführt. Diese Zusätze können in irgendeiner Weise eingebracht werden, beispielsweise durch Verwendung einer Mikropipette oder einer Mikrospritue. Was die Wasserzugabe betrifft, so kann eine genaue Wassermenge in den Objektträger dann abgemessen zugesetzt werden, wenn die Menge bekannt ist, die erforderlich ist, um ihn auf eine angezeigte Höhe zu füllen. Nach dem Zugeben des Wassers und der Serumsprobe werden der Objekttx'äger und sein Inhalt auf eine konstante Temperatur gebracht, die bei dem zur Diskussion stehenden Versucli zwischen 3o C und 37 C liegt, was von der Einstellung abhängt, die in diesem Bereich gewünscht ist. Für einen vorgegebenen Versuch sollte die Temperatur auf + o,2 C der Reaktionstemperatur, die gewünscht wird, gebracht werden. Dies erfordert üblicherweise etwa eine Minute. Um die gewünschte Inkubation der Reaktionsmasse zu erreichen, kann diese

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Temperatur für weitere vier Minuten aufrechterhalten werden. Für den Start der Reaktion wird die Öffnung 22 in der Zusatzkammer in Verbindung mit der Düse 36 einer Luftleitung 37 gebracht und die Reaktion dadurch ausgelöst, daß in die Zusatzkammer stoßartig ein kleines Luftvolumen, beispielsweise

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ο, 5 ^cm 1 eingeführt wird, wodurch der Inhalt der Zusatzkamnier durch den verengten Durchlaß 2o in die Reaktionskammer I7 zwangsweise geführt wird, wobei sich eine Wirbelwirkung einstellt, wie in Fig. 6 gezeigt ist. Wenn dieser Vorgang von Hand durchgeführt wird, kann ein kurzes Stück eines elastin sehen Gummischlauches verwendet werden, das eine konische Mündung an seinem eiren Ende hat, die in die Öffnung 22 der Zusatzkamnier paßt. Das stoßartige Einführen von Luft kann durch Quetschen des Gummischlauches erreicht werden. Die Mündung der Öffnung 22 kann etwas erweitert sein, so daß sie der konischen Oberfläche der Düse 36 angepaßt ist. Das Vorhandensein von aus der Oberfläche der Reaktionskammer vorstehenden Rippen unterstützt die Mischwirkung. Gewünschtenfalls kann der Luftdruck in der Zusatzkammer aufgehoben werden, so daß die Flüssigkeitshöhe wieder hergestellt werden kann, worauf ein zweites Luftvolumen stoßartig für eine weitere Mischwirkung in der Mischkammer verwendet werden kann. Gewünschtenfalls kann dies wiederholt werden. Ganz allgemein kann eine vor- und zurückgerichtete Strömung durch den verengten Kanal 2o durch Unterdruck oder Überdruck bewirkt werden, der entweder an der Zusatzkammer oder an der Reaktionskammer angelegt wird. Anstelle von Liift kann wahlweise ein mechanischer Kolben verwendet werden.

Wenn die Durchmischung des Reaktionsgemisches vollendet ist, wirkt die gesamte Lactatdehydrogeiiase in der Blutprobe als Katalysator für die Beschleunigung der Reaktion, bei welcher als Reaktionsprodukte Brenztraubensäure und DPN in der reduzierten Form (DPNH) erzeugt werden. Da das als Reaktionsprodukt erzeugte DPNH eine wesentlich höhere optische Dichte

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für Licht von 3^o mit hat als DPN, ist die Zunahme der optischen Dichte eine Funktion der Menge von Lactatdehydrogenase in der Blutserumsprobe. Nach dem Einsetzen der Reaktion als Ergebnis des Vermischens des Substrats mit den anderen Reaktionskomponenten, kann die Reaktionsgeschwindigkeit durch Bewegung des Objektträgers in eine Lage festgelegt werden, wo Licht von 3^o mu durch die transparenten Fenster des Objektträgers und die Reaktionsmassenstärke zwischen den beiden Fenstern hindurchgeht, die bei diesem Beispiel 5 nun beträgt. Dabei kann jede Änderung der optischen Dichte pro Zeiteinheit gemessen werden. Die so erhaltenen Daten können in bekannter Weise in Werte für die Menge an Lactatdehydrogenase umgesetzt werden, die in der Blutserumsprobe enthalten sind. Bei der Analyse, wie sie vorstehend beschrieben wurde, sind zehn Ablesungen in Abständen von einer Minute ausreichend.

BEISPIEL 2

Der erfindungsgemäße Reaktionsbehälter wird für die Bestimmung von Kreatinphosphokinase (CPK) verwendet. Die Anwesenheit von CPK im Blutserum ist im allgemeinen eine Anzeige für eine Muskelkrankheit. Die verwendeten Reagenzien sind Kreatin, Adenosintriphosphat, Glutathion, Phosphoenolpyruvat, Pyruvatkinase, Lactatdehydrogenase, reduziertes Diphosphopyridinnucleotid (DPNH) und ein Phosphatpuffer.

Bei der Präparierung des Objektträgers bringt man das Kreatin dazu, welches ein Substrat ist und als Schlüsselkomponente wirkt, sich in fester Form auf dem Oberflächenbereich innerhalb der Zusatzkammer abzuscheiden. Die anderen Komponenten können in irgendeiner zweckmäßigen Weise auf den Oberflächenbereichen in der Reaktionskammer aufgebracht werden. Gewünschtenfalls können bestimmte, miteinander verträgliche Reaktionskomponenten kombiniert werden, beispielswei-se das Glutathion

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mit dem Phosphatpuffer. Gleichermaßen können die beiden Enzyme kombiniert werden. Wenn die Analyse durchgeführt werden soll, wird Wasser und dann eine Probe des Blutserums zugesetzt. Der Objektträger und sein Inhalt Airerden' auf die gewünschte Reaktionstemperatur gebracht und der Inkubation ausgesetzt, wie es oben anhand von Beispiel 1 beschrieben wurde. Darauf folgt das Ingangsetzen der Reaktion durch Injizieren der Kreatinlösung in die Reaktionskammer. In bestimmten Intervallen werden Ablesungen der optischen Dichte, wie ebenfalls vorstehend beschrieben, vorgenommen. Wenn das Reaktionsgemisch

^ vollständig ist, wird die Reaktion von Kreatin und Adenosintriphosphat durch die ganze Kreatinphosphokinase in dem Blutserum beschleunigt, wobei Kreatinphosphat und Adenosindiphosphat erzeugt werden. Pyruvatkinase wiederum beschleunigt die Reaktion von Adenosindiphosphat mit Phosphoenolpyruvat unter Rückbildung von Adenosintriphosphat und Pyruvat, das auf diese Weise für die Indikatorreaktion verfügbar wird, bei welcher die Lactatdehydrogenase die Reaktion zwischen Pyruvat und dem reduzierten Diphosphopyridinnucleotid (DPNH) beschleunigt. Dabei bildet sich Lactat und Diphosphopyridinnucleotid (DPN), das eine geringere optische Dichte für monochromatisches Licht von 3^o mu hat als DPNH. Bei dieser Analyse sind nacheinander in bestimmten Zeitabständen vorgenommene Bestimmungen der zunehmenden optischen Dichte ein Maßstab für die Reaktionsgeschwindigkeit und wiederum die Konzentration von Kreatinphosphokinase in der Probe des Blutserums .

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Claims

PATENTANSPRÜCHE

1. Reaktionsbehälter für den einmaligen Gebrauch, dadurch gekennzeichnet, daß die Wände des aus steifem oder halbsteifem Material bestehenden Behälters Innenflächen (11, 12) haben, die eine Reaktionskammer (17) und eine Zusatzkammer (l8) umgeben, daß der Behälter (lo) eine erste Öffnung (21), die mit dem Inneren der Reaktionskammer (17) in Verbindung steht, eine zweite Öffnung (22), die mit dem Inneren der Zusatzkammer (18) in Verbindung steht und die oben angeordnet ist, wenn sich der Behälter in einer Lage mit der ersten Öffnung (21) auf der Oberseite befindet .und einen Durchlaß (2o) von verengtem Querschnitt für die Verbindung zwischen der Reaktionskammer (I7) und der Zusatzkammer (l8) angrenzend an deren Teile entfernt von der ersten (21) und zweiten Öffnung (22) hat, wobei der Durchlaß (2o) für das Einführen von Flüssigkeit aus der Zusatzkammer (l8) in die Reaktionskammer (I7) angeordnet ist, die mit der Flüssigkeit in der Reaktionskammer (I7) nach dem zwangsweisen Zuführen der Flüssigkeit aus der Zusatzkammer (.18) durch den Durchlaß (2o) vermischt wird, und daß die Reaktionskammer (I7) transparente Fenster (15, l6) für den Lichtdurchlaß durch den Flüssigkeitskörper vorher festgelegter Dicke in der Reaktionskammer (17) zwischen den Fenstern (15i l6) hat.

2. Behälter nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch zwei Abschnitte (11, 12), von denen jeder einen Teil der Innenfläche der Reaktionskammer (I7) und einen Teil der Innenfläche der Zusatzkammer (l8) bildet, und durch Einrichtungen (13j 1^) zum Zusammenhalten der Abschnitte (11, 12), so daß die Kammern (17, l8) Flüssigkeit

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enthalten können, wenn der. Behälter (lo) mit den Öffnungen (21, 22) nach oben angeordnet ist.

.3· Behälter nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Einrichtungen zum Zusammenhalten der Abschnitte (11, 12) aus komplementären Teilen (13, 14) bestehen, die relativ im Reibkontakt bewegliche Oberflächen aufweisen.

4. Behälter nach einem der vorhergehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine erste lösbare Reaktionskomponente in fester Form in der Reaktionskammer (17) und eine zweite lösbare Reaktionskpmponente in fester Form, die von der ersten Komponente verschieden ist, in der Zusatzkammer (18).

5· Behälter nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß die zweite Komponente eine Hauptkomponente für die Reaktion ist.

6. Behälter nach Anspruch 4 oder 5.i dadurch gekennzeichnet, daß die zweite Reaktionskompoiiente ein Substrat für eine enzymatisch induzierte Reaktion mit der ersten Reaktionskomponente ist»

7· Behälter nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Zusatzkammer (18) eine Hauptzone (ISA) und eine Pufferzone (!SB) aufweist, wobei die Pufferzone (IBB) zwischen der Hauptzone (18A) und der Öffnung (2o) mit verringertem Querschnitt

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angeordnet, ist und eine wesentliche Trennung der Hauptzone (18a) von der Öffnung (2o) bewirkt.

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8. Behälter nach Anspr\ich 7i dadurch gekennzeichnet, daß die Länge der Pufferzone (l8B) zwischen der" Hauptzone (18a) und der Öffnung (2o) wesentlich größer als ihre Breite ist.

9· Behälter nach Anspruch 8, gekennzeichnet durch einen lösbaren Puffer in Festform, der in der Pufferzone (18b) angeordnet ist.

lo_. Behälter nach einem der vorhergehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine mit einer unter Druck stehenden Gasquelle in Verbindung stehende Leitung (37)» deren Düse (36) in die Öffnung (22) münde.t , durch die der Gasdruck auf die Flüssigkeit in der Zusatzkammer (18) zur Einwirkung gebracht werden kann, so daß diese Flüssigkeit durch den Durchlaß (2o) zwangsweise in die Reaktionskammer (17) führbar ist.

11. Behälter nach einem der vorhergehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine Inkubatxonskammer (35), die der Reaktionskammer (I7) und der Zusatzkammer (l8) benachbart, jedoch getrennt davon, ist, und die eine Substanz enthält, die auf eine gewünschte Inkubationstemperatur erwärmbar ist, wodurch der Inhalt der Kammern (17 j l8) auf die Inkubationsteinperatur erhitzt und auf dieser Temperatur gehalten werden kann.

12, Behälter nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Inkubationskammer (35) aufheizbares Metall (38) enthält, das auf eine Energieubermittlung eines elektrischen Feldes anspricht.

13· Behälter nach Anspruch 11 oder 12, dadurch gekennzeichnet, daß die Inkubationskammer (35) ein wärmeleitendes Metall (38) enthält und das Metall eine

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Fortsetzung (3^A) beträchtlicher Atisdehnung hat, die auf der Außenseite des Reaktionsbehälters (lo) angeordnet ist.

lA. Behälter nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Oberfläche der Dereiche, auf denen die Reaktioiiskomponeiiten abgeschieden sind, eine Vielzahl von Vorsprüngen (25, 29, 39, ko, 33) aufweist, die die Flüssigkeitsströmung längs der Oberfläche einschränken.

15. Behälter nach Anspruch Ik, dadurch gekennzeichnet, daß die Kamnieranordnung eine Vielzahl von Flächenbereiche (26 bis 28, 3o bis 32) aufweist, auf denen verschiedene Reaktionskomponenten in vorher festgelegter Menge abgeschieden sind.

16. Verfahren zur Festlegung der optischen Dichteänderung infolge einer chemischen Reaktion, die in einem Reaktionsbehälter nach einem der Ansprüche 1 bis I5 durchgeführt wird, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens eine der Komponenten -des Reaktionsgemisches in fester Form und getrennt davon eine

ψ Schlüsselkomponente ebenfalls in fester Form vorhanden

ist, daß ein Lösungsmittel mit den Komponenten in Kontakt gebracht und diese gelöst werden, ohne daß ein Vermischen der gelösten Komponenten einsetzt, daß in die eine Komponente eine weitere Komponente zur Vervollständigung des Reaktionsgemisches eingebracht wird,und daß dann die Lösungen zwangsweise zusammengebracht und vermischt Airerden, wodurch die Reaktion in Gang gesetzt wird, wobei die gewünschten Ergebnisse durch die festgestellte Änderung der optischen Dichte gemessen werden.

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17· Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß die lösbaren Reaktionskomponenten in fester Form durch Lyophilisierung in situ abgeschieden werden.

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