DE202019106447U1 - sample chamber - Google Patents
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Abstract
Probenkammer, mindestens umfassend die Bauteile Aufnahme mit Bodenplatte, mindestens zwei Mittel zum spannenden Verschließen sowie ein Verschlusselement und wobei die Bodenplatte und eine, der Bodenplatte gegenüberliegende Oberseite der Probenkammer jeweils transparente Bereiche aufweisen und wobei das Material der transparenten Bereiche einen an das Metall der Aufnahme und des Verschlusselements angepassten Ausdehnungskoeffizient aufweist.Sample chamber, at least comprising the components receptacle with base plate, at least two means for exciting closure and a closure element and wherein the base plate and an upper side of the sample chamber opposite the base plate each have transparent areas and the material of the transparent areas is attached to the metal of the seat and of the closure element has adjusted expansion coefficient.
Description
Technisches GebietTechnical field
Die Erfindung betrifft eine Probenkammer zur Aufnahme von Mikrotiterplatten, die Proben beinhalten, die vor Sauerstoff zu schützen sind. Eine solche Probenkammer kommt dabei z.B. in der Kristallzucht von Proteinkristallen bzw. der Präparation von Proteinkristallen für die Röntgendiffraktion zum Einsatz.The invention relates to a sample chamber for receiving microtiter plates which contain samples which are to be protected against oxygen. Such a sample chamber comes e.g. in the crystal growing of protein crystals or the preparation of protein crystals for X-ray diffraction.
Stand der TechnikState of the art
Die Kenntnisse über die dreidimensionale Struktur biologischer Makromoleküle haben dramatische Auswirkungen sowohl auf die Entwicklung der modernen Biotechnologie als auch in der therapeutischen Behandlung von Krankheiten. So kann z. B. die Bestimmung der dreidimensionalen Struktur eines Proteintargets entscheidende Informationen für die Identifikation und Entwicklung neuer Wirkstoffe liefern, die mit dem jeweiligen Proteintarget interagieren. Die Aufklärung dreidimensionaler Strukturen biologischer Makromoleküle erfolgt am genauesten durch die Röntgenstrukturanalyse. Voraussetzung für die Strukturaufklärung ist, dass die Makromoleküle, wie Proteine oder deren Komplexe, als Einkristalle zur Verfügung stehen.Knowledge of the three-dimensional structure of biological macromolecules has dramatic effects on the development of modern biotechnology as well as in the therapeutic treatment of diseases. So z. B. the determination of the three-dimensional structure of a protein target can provide crucial information for the identification and development of new active substances that interact with the respective protein target. The most precise way to elucidate three-dimensional structures of biological macromolecules is through X-ray structure analysis. A prerequisite for the structure elucidation is that the macromolecules, such as proteins or their complexes, are available as single crystals.
Viele der Proteinkristalle sind sauerstoffempfindlich, d.h. sie werden bei Kontakt mit Sauerstoff zerstört. Schon kleinste Mengen Sauerstoff können dazu genügen. Die Handhabung solcher Proteinkristalle und deren Zucht findet von daher vor allem in den sogenannten „Glove-Boxen“ (dt. Handschuh-Box) unter definierten Atmosphären und unter Sauerstoffausschluss statt. Zum Tempern der Proteinkristalle oder zur Beobachtung mit dem Mikroskop müssen diese aus der Glove-Box evakuiert werden, während weiterhin der Sauerstoffausschluss gewährleistet sein muss. Zusätzlich müssen auch noch andere Bedingungen während eines Transfers oder der Weiterbehandlung der Proben eingehalten oder gewährleistet sein wie Druck- und Temperaturbeständigkeit. Insbesondere ist auch die Handhabung von Proben in den Glove-Boxen erschwert, da die Proben hier nur unter Benutzung der, in den Glove-Boxen integrierten Handschuhe manipuliert werden können.Many of the protein crystals are sensitive to oxygen, i.e. they are destroyed on contact with oxygen. Even the smallest amounts of oxygen can suffice. The handling and cultivation of such protein crystals therefore takes place primarily in the so-called “glove boxes” under defined atmospheres and with the exclusion of oxygen. To anneal the protein crystals or to observe them with a microscope, they have to be evacuated from the glove box, while the exclusion of oxygen must still be guaranteed. In addition, other conditions such as pressure and temperature resistance must be maintained or guaranteed during transfer or further processing of the samples. In particular, the handling of samples in the glove boxes is made more difficult, since the samples can only be manipulated here using the gloves integrated in the glove boxes.
Die Proteinkristallzucht wird meistens mit sogenannten Mikrotiterplatten (engl. microwell plate) durchgeführt. Als Mikrotiterplatte im Sinne der Erfindung ist eine Platte anzusehen, die mindestens eine, insbesondere aber mehrere Kavitäten zur Aufnahme von Stoffen, insbesondere Chemikalien, zur Durchführung von Reaktionen, insbesondere zur Kristallzucht aufweist. Die Mikrotiterplatte entspricht dabei zumeist einem der üblichen Standards (ANSI). Ein Beispiel für solche Platten ist in der
Zum Transfer der Proteinkristalle aus den Glove-Boxen, z.B. zur mikroskopischen Beobachtung, werden diese z.B. in evakuierte Plastikbeutel verbracht, die Sauerstoffabsorber und Sauerstoffindikatoren beinhalten können, wie es z.B. in dem Aufsatz 1 von A. Sato-Tomita und N. Shibayama (Size and Shape Controlled Crystallization of Hemoglobin for Advanced Crystallography, crystals, 7. 2017, 282 - 1-15) beschrieben ist.To transfer the protein crystals from the glove boxes, e.g. for microscopic observation, these are e.g. placed in evacuated plastic bags, which may contain oxygen absorbers and oxygen indicators, e.g. in
Aufgabenstellungtask
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde die Handhabung von Mikrotiterplatten unter Sauerstoffausschluss zu erleichtern. Weiterhin ist es eine Aufgabe der Erfindung zugleich die vor Sauerstoff geschützten Mikrotiterplatten einer mikroskopischen Betrachtung zugänglich zu machen.The invention has for its object to facilitate the handling of microtiter plates in the absence of oxygen. Furthermore, it is an object of the invention at the same time to make the microtiter plates protected from oxygen accessible for microscopic observation.
Diese Aufgabe wird durch den Gegenstand des Anspruchs 1 gelöst. Weitere bevorzugte Ausgestaltungen der Erfindung ergeben sich aus den übrigen, in den Unteransprüchen genannten Merkmalen.This object is solved by the subject matter of
Der Gegenstand des Anspruchs 1 betrifft eine Probenkammer die die Bauteile einer Aufnahme mit Bodenplatte und Verschlusselement sowie mindestens zwei Mittel zum spannenden Verschließen umfasst. Die einzelnen Bauteile sind dabei auch aus mehreren Komponenten zusammensetzbar. Die Aufnahme ist dabei insbesondere rechteckig ausgeführt und in den Dimensionen an eine Mikrotiterplatte angepasst und zu einer Seite geöffnet. Andere Ausführungen, insbesondere runde sind ebenfalls umfasst. Die Bodenplatte der Aufnahme ist insbesondere zum Abstellen einer Mikrotiterplatte in der Kammer vorgesehen. Das Verschlusselement dient insbesondere als Abschluss der Kammer und ist insbesondere zu der Bodenplatte parallel anzuordnen und weist mindestens eine Platte auf, und ist formschlüssig zu der Aufnahme ausgeführt. Ist das Verschlusselement, wie es auch einer Ausführungsform entspricht, parallel zu der Bodenplatte der Aufnahme angeordnet, bildet es zugleich die Oberseite der Probenkammer. Die Funktionalität der Bodenplatte als Abstellfläche für eine Mikrotiterplatte und des Verschlusselements als abschließendes Bauteil ist dabei auch umkehrbar. Das Verschlusselement ist auch im rechten Winkel zu der Bodenplatte der Aufnahme anordenbar und ist insbesondere als ebenes Bauteil ausgeführt. Eine Ausführung des Verschlusselements mit zu der Aufnahme überlappenden oder auf Stoß ausgeführten Rändern ist im erfinderischen Sinne mit umfasst. Die Bodenplatte der Aufnahme und eine der Bodenplatte gegenüberliegende Oberseite der Probenkammer weisen zudem beide transparente Bereiche auf. Im erfinderischen Sinne sind die transparenten Bereiche dabei aus Materialien gefertigt, die für Licht im sichtbaren Spektrum durchlässig sind, so dass mikroskopische Betrachtungen durch die transparenten Bereiche durchführbar sind. Die transparenten Bereiche der Bodenplatte der Aufnahme und der Oberseite der Probenkammer überlappen sich in der Senkrechten zu Ihrer Anordnung. Die transparenten Bereiche nehmen insbesondere mehr als 80 % der Fläche der Bodenplatte und der Oberseite ein und sind insbesondere als separate, einzupassende Bauteile ausgeführt. Die Probenkammer umfasst des Weiteren mindestens zwei Mittel zum spannenden Verschließen. Als Mittel zum spannenden Verschließen sind im erfinderischen Sinne Mittel anzusehen, die bei Verschluss zwischen dem Verschlusselement und der Aufnahme durch Spannung in den Mitteln einen Anpressdruck zwischen dem Verschlusselement und der Aufnahme erzeugen.The subject matter of
Die Mittel zum spannenden verschließen sind im erfinderischen Sinne dabei in einer Größe ausgestaltet, dass eine Handhabung unter erschwerten motorischen Bedingungen, wie diese z.B. in einer Glove-Box vorliegen, erleichtert ist. Das bedeutet, dass diese insbesondere eine Dimensionierung in den Einzelteilen von > 2 cm aufweisen. Gleichzeitig sind die Mittel zur Erleichterung der Handhabung auch mit wenigen Handgriffen zu bedienen. Die Mittel sind in jedem Fall so angeordnet, dass ein Anpressdruck zwischen dem Verschlusselement und der Aufnahme entsteht. Das bedeutet, dass die Mittel an der Aufnahme und dem Verschlusselement angreifen und dabei sowohl an diesen Bauteilen der Probenkammer befestigt angeordnet sein können als auch reversibel.In the inventive sense, the means for exciting closure are designed in such a size that handling under difficult motor conditions, such as these e.g. in a glove box is relieved. This means that they have dimensions of> 2 cm in the individual parts. At the same time, the means for facilitating handling can also be operated with a few simple steps. In any case, the means are arranged such that a contact pressure is created between the closure element and the receptacle. This means that the means engage the receptacle and the closure element and can be arranged attached to these components of the sample chamber as well as reversible.
Eine Ausführungsform der Mittel zum spannenden Verschließen, besteht aus mindestens zwei Paaren von Spannbacken die an gegenüberliegenden Seiten der Probenkammer, in Bezug auf das Verschlusselement, angeordnet sind und wobei jeweils eines der Teile eines Paars an der Aufnahme befestigt ist und das andere an der gegenüberliegend anzuordnenden Seite des Verschlusselements. Dabei ist an einem Teil eines Paars von Spannbacken eine Schraube mit einem ihrer Enden befestigt, so dass die Befestigung ein Gelenk bildet. Dies ist zum Beispiel durch das Vorsehen einer Achse in der Spannbacke, die durch eine Öffnung am Ende einer entsprechend ausgeformten Schraube geführt ist erreichbar. Die Schraube wird zum spannenden Verschluss in die gegenüberliegende Spannbacke eingeschwenkt und dort durch geeignete Mittel gehalten. In der einfachsten Ausführung ist hierzu an dem anderen Ende der Schraube z.B. eine Scheibe befestigt. Zur Erzeugung des Anpressdrucks ist die Länge der Schraube so dimensioniert, dass die Verschlussplatte an die Aufnahme angedrückt werden muss um die Schraube einzuschwenken. Der Anpressdruck wird dann gehalten. Insbesondere ist aber das andere Ende der Schraube mit einer Mutter versehen, die durch Drehung, wenn die Schraube eingeschwenkt ist, in eine Position gebracht wird, die durch die dadurch entstehende Verkürzung der Schraubenlänge einen Anpressdruck erzeugt. Insbesondere ist die Mutter eine Flügelschraube, die eine Drehung mit der Hand erlaubt.One embodiment of the means for the exciting closure consists of at least two pairs of clamping jaws which are arranged on opposite sides of the sample chamber, with respect to the closure element, and in each case one of the parts of a pair is fastened to the receptacle and the other to the one to be arranged opposite Side of the closure element. In this case, a screw is fastened to one part of a pair of clamping jaws with one of its ends, so that the fastening forms a joint. This can be achieved, for example, by providing an axis in the clamping jaw, which is guided through an opening at the end of a correspondingly shaped screw. The screw is pivoted into the opposing clamping jaw for an exciting closure and held there by suitable means. In the simplest version, the other end of the screw e.g. attached a disc. To generate the contact pressure, the length of the screw is dimensioned so that the locking plate must be pressed onto the receptacle in order to pivot the screw in. The contact pressure is then maintained. In particular, however, the other end of the screw is provided with a nut which, by rotation when the screw is pivoted in, is brought into a position which generates a contact pressure due to the resulting shortening of the screw length. In particular, the nut is a wing screw that allows rotation by hand.
In einer nächsten Ausführungsform sind die mindestens zwei Mittel zum spannenden Verschließen aus Bügelverschlüssen gebildet. Diese sind entweder mit schwenkbarer Lagerung an der Aufnahme oder der Verschlussplatte befestigt oder aber reversibel zu befestigen. Der Anpressdruck entsteht durch die Ausführung der Bügelverschlüsse mit entsprechend dimensionierter Federkraft.In a next embodiment, the at least two means for exciting closure are formed from clip closures. These are either attached to the receptacle or the locking plate with swivel bearings or can be attached reversibly. The contact pressure is created by the execution of the clip locks with a correspondingly dimensioned spring force.
Diese Ausführungsform kann auch als befestigte Bügelverschlüsse mit gegenüberliegenden Spannlagern ausgeführt sein.This embodiment can also be designed as a fixed clip fastener with opposing tension bearings.
Die Bügelverschlüsse können auch mindestens einen Bügel umfassen, der mit einem weiteren, gegenüberliegend angeordneten Bügel über einen Kniehebel zusammenwirkt, wie es einer weiteren Ausführungsform entspricht..The clip fasteners can also comprise at least one clip, which interacts with a further clip arranged opposite one another via a toggle lever, as in a further embodiment.
Die Mittel zum spannenden Verschließen sind auch als Spanngummis ausführbar, wie es ebenfalls einer Ausführungsform entspricht.The means for the tensioning closure can also be implemented as tensioning rubbers, as also corresponds to an embodiment.
Insbesondere sind zwischen den Bauteilen der Aufnahme mit Bodenplatte und dem Verschlusselement, entsprechend auch einer Ausführungsform, Dichtungen angeordnet.In particular, seals are arranged between the components of the receptacle with the base plate and the closure element, in accordance with one embodiment.
In vorteilhafter Weise ist in der Probenkammer bei Gebrauch ein Mittel angeordnet, welches sich zum Nachweis etwaiger Kontamination mit Sauerstoff eignet, d.h. ein Sauerstoffindikator. In use, an agent is advantageously arranged in the sample chamber which is suitable for detecting any contamination with oxygen, i.e. an oxygen indicator.
Als Material für die Ausführung der nichttransparenten Bereiche der Probenkammer sind insbesondere Aluminiumlegierungen vorteilhaft oder andere leichte aber hoch-feste Materialien.Aluminum alloys or other light but high-strength materials are particularly advantageous as materials for the execution of the non-transparent areas of the sample chamber.
Die Dimensionen der Probenkammer richten sich nach der vorgesehen Einsatzart.The dimensions of the sample chamber depend on the intended use.
Das transparente Material in der Oberseite der Probenkammer und der Bodenplatte sollte in vorteilhafter Weise hochtransparent sein und dabei dampf- und luftundurchlässig. Ein Material das diese Bedingungen erfüllt ist z.B. Polymethylmethacrylat (PMMA).The transparent material in the top of the sample chamber and the base plate should advantageously be highly transparent and at the same time impermeable to steam and air. A material that meets these conditions is e.g. Polymethyl methacrylate (PMMA).
Das Dehnungsverhalten des Kunststoffes bei Erwärmung, das heißt der Ausdehnungskoeffizient, ist dem des bzw. der verwendeten Metalle so nahe wie möglich zu wählen (z.B. im Temperaturbereich von -20 bis 40 Grad Celsius: Poly(methyl 2-methylpropenoat) (PMMA) 0.5%, Poly(1-methylethylen) oder Polypropylen (PP) 0.7 -1%, Polyethylene-terephthalat (PET) 0.5%, Poly(1-phenylethen) oder Polystyolr PS 0.4%, Polycarbonat (PC) 0.4%). Dies garantiert, das die Probenkammer zerstörungsfrei auch zum tempern von Proben einsetzbar ist und ein direkter Transfer von einer Glove-Box in z.B. einen Ofen möglich ist.The expansion behavior of the plastic when heated, i.e. the expansion coefficient, should be selected as close as possible to that of the metal or metals used (e.g. in the temperature range from -20 to 40 degrees Celsius: poly (methyl 2-methylpropenoate) (PMMA) 0.5% , Poly (1-methylethylene) or polypropylene (PP) 0.7 -1%, polyethylene terephthalate (PET) 0.5%, poly (1-phenylethene) or Polystyrene PS 0.4%, polycarbonate (PC) 0.4%). This guarantees that the sample chamber can also be used non-destructively for annealing samples and that it can be transferred directly from a glove box to an oven, for example.
In vorteilhafter Weise können zudem auf der Unterseite der Probenkammer Aufsteller angebracht sein. Diese dienen zum einen als Abstandshalter zur Standoberfläche, um ein Verkratzen der Bodenplatte und damit, ein die optischen Eigenschaften einschränkenden Verschleiß einzuschränken, und zum anderen als Positionierungshilfen. Die Aufsteller können mit in der Oberseite der Probenkammer angeordneten Vertiefungen zusammenfallen und - greifen, so dass bei einem Stapeln mehrerer Probenkammern diese rutschfest übereinander fixiert sind. Zudem ist an den äußeren Rändern der Probenkammer, insbesondere der Aufnahme, das Materials aufgeraut und erlaubt dadurch eine klare Markierung und Beschriftung der Kammer zur einfachen Identifikation der gewünschten Zielplatte in einem Stapel. Die Rauheit der Oberfläche ist so gewählt, dass eine Markierung mit den typischen alkoholischen Reinigungslösungen entfernt werden kann.In addition, stands can advantageously be attached to the underside of the sample chamber. These serve on the one hand as a spacer to the stand surface, in order to limit scratching of the base plate and thus to limit wear and tear, and on the other hand as positioning aids. The stands can coincide and grip with depressions arranged in the top of the sample chamber, so that when a number of sample chambers are stacked, they are fixed one above the other in a non-slip manner. In addition, the material is roughened on the outer edges of the sample chamber, in particular the holder, and thus allows the chamber to be clearly marked and labeled for easy identification of the desired target plate in a stack. The roughness of the surface is chosen so that a marking can be removed with the typical alcoholic cleaning solutions.
Die erfindungsgemäße Probenkammer ist auf Grund ihrer Merkmale in vorteilhafter Weise zur einfachen Handhabung, auch in einer Glove-Box geeignet und ermöglicht zudem eine mikroskopische Beobachtung der in ihr angeordneten Proben in Mikrotiterplatten. Bei Ausführung mit entsprechenden Materialien, ist auch eine direkte Überführung von Mikrotiterplatten in z.B. Öfen zum tempern möglich.Due to its features, the sample chamber according to the invention is advantageously suitable for simple handling, even in a glove box, and also enables microscopic observation of the samples arranged in it in microtiter plates. When using appropriate materials, a direct transfer of microtiter plates into e.g. Tempering ovens possible.
Figurenlistelist of figures
Die Erfindung wird nachfolgend in einem Ausführungsbeispiel und anhand der zugehörigen Zeichnung erläutert. Es zeigt:
-
1 eine schematische Darstellung einer Ausführung der Erfindung als Explosionszeichnung.
-
1 is a schematic representation of an embodiment of the invention as an exploded view.
Die
Die Aufnahme mit Bodenplatte
Die Rahmen
Die Probenkammer ist damit in vorteilhafter Weise zur einfachen Handhabung, auch in einer Glove-Box geeignet und ermöglicht zudem eine mikroskopische Beobachtung der in ihr angeordneten Proben in Mikrotiterplatten. In der Ausführung mit den Materialien des Ausführungsbeispiels, ist auch eine direkte Überführung der Probenkammer und damit auch der in ihr angeordneten Mikrotiterplatten mit Proben, z.B. in Öfen zum tempern, möglich.The sample chamber is thus advantageously suitable for easy handling, even in a glove box, and moreover enables microscopic observation of the samples arranged in it in microtiter plates. In the embodiment with the materials of the exemplary embodiment, a direct transfer of the sample chamber and thus also of the microtiter plates with samples, e.g. in annealing furnaces, possible.
ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG QUOTES INCLUDE IN THE DESCRIPTION
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Zitierte PatentliteraturPatent literature cited
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