DE1493658A1

DE1493658A1 - Process for the production of hydroxy-aminosaeuretert. butyl ethers and their N-carbobenzoxy compounds

Info

Publication number: DE1493658A1
Application number: DE19641493658
Authority: DE
Inventors: Wuensch Dr Erich; Jentsch Dr Joachim
Original assignee: Hoechst AG
Current assignee: Hoechst AG
Priority date: 1964-02-26
Filing date: 1964-02-26
Publication date: 1969-04-03
Also published as: DE1493658B2

Description

Verfahren zur Herstellung von Hydroxy-aminosaure-tert.butylathern und ihrea N-Carbobenzoxyverbindungen Die Synthese von Peptiden der Hydroxyaminosäuren wurde bisher in vielen Fällen mit ungeschützter Hydroxylfunktion durchgeführt. Zum Schutz der OH-Gruppe eingeführte Acetyl-, Benzoyl-, T3syl- und Carbobenzoxyreste verursachten unter den Bedingungen der Peptid-Synthese Nebenreaktionen, wie z. B. Oxazolin-Ringschlüsse (Serint Threonin), Nitrosierung (Azidmethode bei Tyrosin) partielle Hacemisierung durch Säure-Basenkatalyse (Serin, Threonin) und N,O-Acylwanderungen. Diese Schwierigkeiten konnten durch Verwendung der O-tetrahydropyranyl- oder der O-Benzylather der Hydroxyaminosauren umgangen werden, wobei sich letztere am besten bewährten.Process for the production of hydroxy-amino acid tert-butyl ethers and their a N-carbobenzoxy compounds The synthesis of peptides of hydroxyamino acids has so far been carried out in many cases with an unprotected hydroxyl function. To the Protection of the OH group introduced by acetyl, benzoyl, T3syl and carbobenzoxy radicals caused side reactions under the conditions of peptide synthesis, e.g. B. Oxazoline ring closures (serint threonine), nitrosation (azide method for tyrosine) partial hacemization through acid-base catalysis (serine, threonine) and N, O-acyl migrations. These difficulties could be overcome by using the O-tetrahydropyranyl or the O-benzyl ethers of the hydroxyamino acids are bypassed, the latter being the best proven.

Jedoch konnten O-Benzyläther nur vom Tyrosin und vom Serin dargestellt werden, letzter ! nur durch Totalsynthese ausgehend von Acrylnitril und anschlie#end Racematspaltung. Eine direkte O-Benzyleerung von Serin, Threonin und Hydroxyprolin blieb bislang erfolglos.However, O-Benzyl ethers could only be represented from tyrosine and serine be, last! only by total synthesis starting from acrylonitrile and then Resolution. A direct O-benzylation of serine, threonine and hydroxyproline has so far been unsuccessful.

Im hinblick auf die Anforderungen der Peptid-Naturstoffsynthese,-bei der neuerdings f@r die Maskierung der Amino- und Carboxylgruppe die selektiv und unter schonenden Bedingungen spaltbaren tert,-Butoxycarbonyl- und tert. Butylestergruppen herangezogen werden (Helv. Chim. Acta 45, 2473 (1962)), schien es zweckmäßig, auch die Hydroxylfunktion durch die unter analogen Bedingungen selektiv spaltbare tert.-Butyläthrgruppierung zu schützen. min erster Schritt wurde mit der Darstellung und dem Einsatz von Hydroxyaminosaure-trt.-butyläther-tert.-butylestern getan (Recueil Trav. Chim. 81, 1 (1962), und H. An. Soc. 85, 201 (1963)).With regard to the requirements of peptide natural product synthesis, -bei the more recently for the masking of the amino and carboxyl groups the selective and under mild conditions cleavable tert, -Butoxycarbonyl- and tert. Butyl ester groups (Helv. Chim. Acta 45, 2473 (1962)), it seemed appropriate, too the hydroxyl function through the tert-butyl ether grouping, which can be selectively cleaved under analogous conditions to protect. The first step was the preparation and use of hydroxyamino acid tert-butyl ether tert-butyl esters done (Recueil Trav. Chim. 81, 1 (1962), and H. An. Soc. 85, 201 (1963)).

Diese Derivate der Hydroxyaminosäuren eignen sich aber @egen der blockierten Carboxylgruppe bei der Peptid-Synthese nur für den Einsatz als Komponente. Gegenstand der vorliegenden Anneldung ist ein Verfahren zur Herstellung der freien Hydroxyaminosaure-tert.-butyläther als Ausgangsmate@ial für die Synthese von Peptiden aus Hydroxyaminosäure@.These derivatives of hydroxyamino acids are suitable because of the blocked ones Carboxyl group in peptide synthesis only for use as a component. object of the present application is a process for the preparation of the free hydroxyamino acid tert-butyl ether as a starting material for the synthesis of peptides from hydroxyamino acid @.

Es wurde gefunden, daß man die gewünschten Hydroxyaminos@ure-tert.-butyläther sowie ihre N-α-Carbobenzo@ verbindungen erhält, indem man die N-α-Carbobenz-s hydroxyaminosäuren iuit p-Nitrobenzylbromid und TriathylP amin verestert, hierauf mit Isobuten in Anwesenheit von Katalysatoren, vorzugsweise konzentrierter Schwefelsäure, umsetzt .d schlie#lich durch katalytische Reduktion sowohl den Cerbobenzoxyrest sie den p-Nitrobenzylrest abspaltet. Durch Behandeln mit Alkali ist es auch möglich, nur den Esterrest abzuspalten unter Erhaltung des N-α-Carbobenzoxyrestes. It has been found that the desired Hydroxyaminos@ure-tert.-butyläther as well as their N-α-Carbobenzo @ compounds obtained by the N-α-Carbobenz-s hydroxyamino acids esterified with p-nitrobenzyl bromide and triethyl-p amine, then with isobutene in the presence of catalysts, preferably concentrated sulfuric acid, finally converts both the cerbobenzoxy radical through catalytic reduction it splits off the p-nitrobenzyl radical. By treating with alkali it is also possible only split off the ester residue while retaining the N-α-carbobenzoxy residue.

Bei dem erfindungsgem@#en Verfahren bleibt die O-Butyläthergruppe während des esainten Ablaufs der Peptidsynthese erhalten und wird erst in einer der letzten Stufen gleichzeitig mit den Schutzgruppen anderer Seitenkettenfunktionen abgespalten. Ein besonderer Vorteil des Vrfahrens liegt darin, daß sämtliche Zwischenprodukte in gut kristallisierender Form und hoher Reinheit isoliert werden können, Die-Erhaltung der optischen Reinheit ist durch die Überführung in optisch reines Ausgangsmaterial gesichert. Darin liegt ein erheblicher Fortschritt gegenüber den bisher bekannten Methoden, die zu einer mehr oder weniger starken Racemisierung der Aminosauren führen.In the process according to the invention, the O-butyl ether group remains obtained during the esainten course of the peptide synthesis and is only in one the last stages simultaneously with the protecting groups of other side chain functions cleaved. A particular advantage of the process is that all Intermediates Can be isolated in well-crystallizing form and high purity, Die-Preservation the optical purity is due to the conversion into optically pure starting material secured. This is a considerable advance compared to the previously known Methods which lead to a more or less strong racemization of the amino acids.

Beispiel 1 a) N-Carbobenzoxy-threonin 238,2 g Threonin werden in 1000 ml 2n Natronlauge gelöst und bei 0 - 3° mit 1500 ml 2n Natriumcarbonatlösung und 340 @ Varbobenzoxychlorid portionsweise umgesetzt. Die alkalische lösung wird mit Äther ausgeschüttelt und d'nn mit 6n Salzsäurebis zum kongoroten Umschlag @ngesäuert. Das ausgefallene Öl extrahiert man dreimal mit Essigester. Zuletzt wird die wässrige Phase mit Kochsalz gesattigt und mit Essigester ausgeschüttelt. Die Essigesterphasen werden vereinigt und mit wasser und Kochsalzlösung gewaschen, schließlich getrocknet und im Vakuum eingeengt. Nach Umkristallisieren aus Essigester/Petrol@ther schmilzt das Produkt bei 98, - 99,50; Ausbeute 480 g (95 % der Theorie). b) N-Carbobenzoxy-threonin-p-nitrobenzylester 1a) Man löst 50,6 g N-Carbobenzoxy-threonin und 42 ul Triäthylamin in 200 ml Essigester, fügt 64,8 g p-Nitrobenzylbromid hinzu und erhitzt 8 - 9 Stunden auf 80°C. Nach Abkühlung wird vom Äminhydrobromid abgesaugt und mit Essigester gewaschen. Die vereinigten Essigesterphasen werden mit 2n salzsäure, 10%iger Natriumbicarbonatlösung und schließlich +it Kochsalzlösung bis zur Neutralität gewaschen. Iach den Trocknen wird eingeengt, in wenig Essigester gelöst und bis zur Trübung mit Petrolather versetzt.Example 1 a) N-carbobenzoxy-threonine 238.2 g of threonine are in 1000 ml of 2N sodium hydroxide solution and at 0-3 ° with 1500 ml of 2N sodium carbonate solution and 340 @ varbobenzoxychloride reacted in portions. The alkaline solution is with Shaken out ether and acidified with 6N hydrochloric acid until it turns into a Congo-red envelope. The precipitated oil is extracted three times with ethyl acetate. Last is the watery Phase saturated with table salt and shaken out with ethyl acetate. The ethyl acetate phases are combined and washed with water and brine, finally dried and concentrated in vacuo. After recrystallization from ethyl acetate / petroleum ether melts the product at 98.00 99.50; Yield 480 g (95% of theory). b) N-carbobenzoxy-threonine-p-nitrobenzyl ester 1a) Dissolve 50.6 g of N-carbobenzoxy-threonine and 42 μl of triethylamine in 200 ml of ethyl acetate, add 64.8 g of p-nitrobenzyl bromide and heat to 80 ° C. for 8-9 hours. After cooling down is sucked off from the Äminhydrobromid and washed with ethyl acetate. The United Acetate phases are mixed with 2N hydrochloric acid, 10% sodium bicarbonate solution and finally + Washed with saline solution until neutral. After the drying is concentrated, dissolved in a little ethyl acetate and mixed with petroleum ether until cloudy.

Das Ausfallende Produkt wird mit Essigester/Petroläther gewaschen.The precipitated product is washed with ethyl acetate / petroleum ether.

Schmelzpunkt : 111,5 - 112,5°, Ausbeute: 75,4 g (97 ffi der Theorie).Melting point: 111.5-112.5 °, yield: 75.4 g (97 ffi of theory).

Zur Bestimmung der optischen Reinheit dieser Verbindung wurden die Schutzgruppen durch Hydrierung mit H2/Pd abgespalten. Dabei entstand optisch reines L-Threonin: [α]D20: -27,96 ~ 0,5°; [α]54620 : -33,67 ~ 0,5° (c=2,0; Wasser). Ausgangsmaterial: [α]D20: -27,85 ~ 0,5°; [α]54620 : -33,64 (c=a; Wasser). c) N-Carbobenzoxy- fh eonin~TE t. b = butyläthe -ntrobenzYlj ester 40 g N-Carbobenzoxy-threonin-p-nitrobenzylester werden in einem dickwandigen Rundkolben in 400 ml Methylenchlorid gelöst und auf 0° gekühlt. Nun setzt man 36G ml Isobuten und 5 ml konzentrierte Schwefelsäure langsam zu. Der Kolben wird luftdicht verschlossen und vier Tage bei Raumtemperatur aufbewahrt. Dann wird er auf 5° gekühlt und vorsichtig geöffnet. Die Lösung schüttelt man anschließend dreimal mit eiskalter 5%iger Natriumcarbona@tlösung.To determine the optical purity of this compound, the protective groups were split off by hydrogenation with H2 / Pd. This resulted in optically pure L-threonine: [α] D20: -27.96 ~ 0.5 °; [α] 54620: -33.67 ~ 0.5 ° (c = 2.0; water). Starting material: [α] D20: -27.85 ~ 0.5 °; [α] 54620: -33.64 (c = a; water). c) N-carbobenzoxy- fh eonin ~ TE t. b = butyl ether -ntrobenzYlj ester 40 g of N-carbobenzoxy-threonine-p-nitrobenzyl ester are dissolved in 400 ml of methylene chloride in a thick-walled round bottom flask and cooled to 0 °. 36G ml of isobutene and 5 ml of concentrated sulfuric acid are now slowly added. The flask is sealed airtight and stored for four days at room temperature. Then it is cooled to 5 ° and carefully opened. The solution is then shaken three times with ice-cold 5% sodium carbonate solution.

Die vereinigten Nattiumcarbonatlösungen werden zweimal@mit Methylenchlorid und die Methylenchloridphasen zweimal mit Wasser bis zur Neutralitat gewaschen. Nach dem Trocknen wird bei 350 Wasserbadtemperatur im Vakuum eingeengt. £8 verbleibt ein hellgelbes kristallines Produkt, welches in wenig Essigester gelöst und solange mit Petrolather versetzt wird, bis sich ein dunkelbraune3 Öl abgeschieden hat. Es wird abgetrennt und die Lösung vorsichtig mit weiteren Mengen Petroläther versetzt, wonach (rasch durch Animpfen) feine wei@e Kristaile ausfallen, die in Essigester und Äther leicht löslich, i@ Petroläther unlöslich sind. Ausbeute 37 g (81 ffi der Theorie); Schmelzpunkt 55 - 56,500. d) Threonin-tert.butyläther 29 g N-Carbobenzoxy-p-nitrobenzyl-threonin-tert. butyläther werden in wässrigem Methanol gelöst und in Gegenwart von 4,5 ml Essigsaure mit Pd-Katalysator hydriert. Nach Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum kristallisiert der Rückstand. Er wird zur Beseitigung von p-Toluidin mit Äthanol verrieben und aus Methanol/ Aceton umgefällt; Schmelzpunkt 259 - 2600(Z). Ausbeute 9,7 g % % der Theorie). e) N-Carbobenzoxy-threonin-tert.butyläther@Dicyclohexylaminsalz Eine Lösung von 9,4 g N-Carbobenzoxy-threonin--p-nitrobenzyl-ester tert.butyläther# in Dioxan-Wasser wird mit 10,6 ml 2n NaOH unter Zusatz von Phenolphtalein als Indikator durch 2-ständiges Rühren verseift. Die mit 1n HOL auf pH 7 gestellte Lösung wird am Rotationsverdampfer im Vakuum weitgehend vom Dioxan befreit, das ausgeschiedene Öl wieder mit Wasser in Lösung gebracht.The combined sodium carbonate solutions are twice @ with methylene chloride and the methylene chloride phases washed twice with water until neutral. After drying, it is concentrated in vacuo at a water bath temperature of 350. £ 8 remains a light yellow crystalline product, which dissolved in a little ethyl acetate and for so long petroleum ether is added until a dark brown3 oil has separated out. It is separated and the solution is carefully mixed with further amounts of petroleum ether, after which (quickly by inoculating) fine white crystals precipitate, which in ethyl acetate and ether are easily soluble, i @ petroleum ether are insoluble. Yield 37 g (81 ff Theory); Melting point 55-56,500. d) Threonine tert-butyl ether 29 g of N-carbobenzoxy-p-nitrobenzyl-threonine-tert. butyl ether are dissolved in aqueous methanol and in the presence of 4.5 ml of acetic acid hydrogenated with Pd catalyst. After evaporation of the solvent in vacuo it crystallizes the residue. It is rubbed with ethanol to remove p-toluidine and reprecipitated from methanol / acetone; Melting point 259-2600 (Z). Yield 9.7 g%% of Theory). e) N-Carbobenzoxy-threonin-tert.butyläther@Dicyclohexylaminsalz A solution of 9.4 g of N-carbobenzoxy-threonine - p-nitrobenzyl ester tert-butyl ether # in dioxane water with 10.6 ml of 2N NaOH with the addition of phenolphthalein as an indicator by 2-hour stir saponified. The solution set to pH 7 with 1N HOL is on Rotary evaporator largely freed from dioxane in vacuo, the precipitated Oil brought back into solution with water.

Diese wird mit Äther überschichtet und mit Zitronensäure angesäuert. Aus der abgetrennten, gewaschenen und getrockneten ätherischen Phase wird N-Carbobenzoxy-threonin-tret.butyläther mit Kaliumbicarbonatlösung erschöpfend extrahiert, die vereinigten KHC 03-Lösungen erneut mit Zitronensäure angesäu@rt und das abgeschiedene Öl in Äther aufgenommen. Nach Waschen, Trocknen und Eindampfen im Vakuum hinterbleibt ein weißer kristalliner Rückstand, der in Äther-Petrolatiler gelöst und mit 3,84 g Dicyclohexylamin in das entpprechende Salz übergeführt wurde. Umkristallisieren aus Äthanol/Äther/ Petroläther ergibt farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 146 -1470. Ausbeute 8,3 g (80 % der Theorie).This is covered with ether and acidified with citric acid. The separated, washed and dried ethereal phase becomes N-carbobenzoxy-threonine-tret.butylether exhaustively extracted with potassium bicarbonate solution, the combined KHC 03 solutions acidified again with citric acid and the separated oil taken up in ether. After washing, drying and evaporation in vacuo, a white crystalline residue remains Residue, which was dissolved in ether petrolatum and mixed with 3.84 g of dicyclohexylamine in the corresponding salt was transferred. Recrystallize from ethanol / ether / petroleum ether gives colorless needles with a melting point of 146-1470. Yield 8.3 g (80% of theory).

Beispiel 2 a) N-Carbobenzoxy-serin Die Verbindung wurde nach der Vorschrift von St. Guttmann, R.A. Boissonnes, Helv. chir. Acta 41, 1852 (1958) synthesiert. b) N-Carbobenzoxy-serin-p-nitrobenzylester Man erhält die Verbindung wie unter 1b) beschrieben aus 47,8 g N-Carbobenzoxy-serin, 42 ml Triäthylamin, 64,8 g p-Nitrobenzylbromid und 300 ml Essigester. Sie bildet aus Essigester/Petrolätherfarblose Kristalle vom Schmelzpunkt 115,5 - 116,50. Ausbeute 73,3 g (98 % der Theorie).Example 2 a) N-Carbobenzoxy-serine The connection was made according to the instructions from St. Guttmann, R.A. Boissonnes, Helv. Chir. Acta 41, 1852 (1958). b) N-carbobenzoxy-serine-p-nitrobenzyl ester The compound is obtained as under 1b) described from 47.8 g of N-carbobenzoxyserine, 42 ml of triethylamine, 64.8 g of p-nitrobenzyl bromide and 300 ml of ethyl acetate. It forms colorless crystals from ethyl acetate / petroleum ether Melting point 115.5-116.50. Yield 73.3 g (98% of theory).

Zur Bestimmung der optischen Reinheit wurde die Verbindung hydriert. Dabei entstand optisch reines L-Serin: [α]n20: + 14,63 # 0,5°; [α]54620 : + 17,69 + 0,5° (c=2; 1n Salzsaure). Ausgangsmaterial: [α]D20 : ~ 14,64 ~ 0,5° ; [α]54620 : + 17,69 ~ 0,5° (c=2; 1n Salzsäure). c) N-Carbobenzoxy- Lerin-teFt.butyläthsrp-nitrabsneyr- er lan erhält die Verbindung wie unter 1c) beschrieben aus 40 g N-Carbobenzoxy-serin-p-nitrobenzylester, 360 ml Isobuten, 400 ml Methylenchlorid und 5 ml konz. H2SO4. Sie bildet aus Essigester/Petrolather farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 68 - 70,5°.The compound was hydrogenated to determine the optical purity. This resulted in optically pure L-serine: [α] n20: + 14.63 # 0.5 °; [α] 54620: + 17.69 + 0.5 ° (c = 2; 1N hydrochloric acid). Starting material: [α] D20: ~ 14.64 ~ 0.5 °; [α] 54620: + 17.69 ~ 0.5 ° (c = 2; 1N hydrochloric acid). c) N-carbobenzoxy- Lerin-teFt.butyläthsrp-nitrabsneyr- er Lan receives the compound as described under 1c) from 40 g of N-carbobenzoxy-serine-p-nitrobenzyl ester, 360 ml of isobutene, 400 ml of methylene chloride and 5 ml of conc. H2SO4. From ethyl acetate / petrolatum it forms colorless needles with a melting point of 68 - 70.5 °.

Ausbeute 41 g (89,5 ffi der Theorie). d) Serin-tert.butyläther b 1 H20 T Die Verbindung entsteht wie unter 1d) beschrieben durch Hydrieren von 20 g N-Carbobenzoxy-p-nitrobenzyl-serin-trt.butyläther. Sie wurd aus Methanol/Aceton umgefällt und bei 50° im Vakuum über P205 getrocknet. Schmelzpunkt 2500 (Z). Ausbeute 6,9 g (90 % der Theorie). e) N-Carbobenzoxy-serin-tert.butyläthr-dicyclohexylaminsalz Die Verbindung entsteht wie unter le) beschrieben aus 19 g N-Carbobenzoxyp-nitrobenzyl-serin-tert.butyläther und 22 ml 2n NaOH. Aus Äthanol erhält man farbiose Nadeln vom Schmelzpunkt 143 - 150°. Ausbeute 17,9 g (85 % der Theorie).Yield 41 g (89.5 ffi of theory). d) Serine tert-butyl ether b 1 H20 T The compound is formed as described under 1d) by hydrogenating 20 g N-carbobenzoxy-p-nitrobenzyl-serine-trt.butylether. It was made from methanol / acetone reprecipitated and dried at 50 ° in vacuo over P205. Melting point 2500 (Z). yield 6.9 g (90% of theory). e) N-carbobenzoxy-serine-tert-butyl-ether-dicyclohexylamine salt The compound is formed as described under le) from 19 g of N-carbobenzoxyp-nitrobenzyl-serine tert-butyl ether and 22 ml of 2N NaOH. Colorless needles with a melting point of 143 are obtained from ethanol - 150 °. Yield 17.9 g (85% of theory).

Beispiel 3 a) N-Carbobenzoxy-tyrosin-athylester Zu einer Lösung von 131 g Tyrosinathylester in 640 ml CHCl3 gibt man unter Kühlung und Rühren 48,7 ml Carbobenzoxychlorid.Example 3 a) N-carbobenzoxy-tyrosine ethyl ester To a solution of 131 g of ethyl tyrosine ester in 640 ml of CHCl3 are added to 48.7 ml with cooling and stirring Carbobenzoxychloride.

Anschließend versetzt man nftt 202 G Na2CO3. 10 H20 (0,706 Mol) in 385 ml Wasser und zuletzt abermals mit 48,7 ml Carbobenzoxychlorid Das ausgefallene Produkt wird abgesaugt, mit Wasser neutral gewaschen, getrocknet und aus Essigester/Petroläther umkristallisiert. Aus der Chloroform-Lösung gewinnt man eine zweite Fraktion. Die Ausbeute beträgt 205,7 g (95,7 % der Theorie) vom Schmelzpunkt 88 - 910. b) N-Carbobenzoxy-@yrosin 80 g N-Carbobenzoxy-tyrosin-äthylester in Dioxan-Wasser werden mit 233 ml 2n NaOH 2 Stunden verseift, (Indikator Phenolphthalein). Mit 1n HCL wird auf pH 8 gestellt, am Rotationsverdampfer bei 30° das Dio@an abgedampft, mit Wasser verdunnt und bei +5°C mit 5n H2SO4 unter Rühren angesäuert. D£is ausgallende farblose Öl kristallisiert beim Abkühlen und Animpfen völlig. Das Kristallisat wird abgesaugt @n KHCO3-Lösung gelöst und mit 5n H2S04 wieder ausgefällt. Nach Trocknen über P2O5 schmilzt das Product bei 92 - 95° (Lit.: 101°). Die Ausbeute beträgt 67 g (91,2 s der Theorie). c) N-Carbobenzoxy-tyrosin-p-nitrobenzylester Die Herstellung erfolgt wie unter 1 b) beschrieben durch Umsetzung von 62 g N-Carbobenzo.xy-tyrosin mit 64,8 g p-Nitrobenzylbromid in 42 ml Triäthylamin und 300 ml Essigester. Nach 8-ständiger Reaktion wird die Lösung mit Methylenchlorid verdünnt. Nach Aufbrbeitung kristallisiert man aus Essigester/ Benzol/Petroläther um. Man erhält Nadeln vom Schmelzpunkt 117 -119° in einer Ausbeute von 84 g (95 % der Theorie).Subsequently, 202 G Na2CO3 are added. 10 H20 (0.706 moles) in 385 ml of water and finally again with 48.7 ml of carbobenzoxychloride The precipitated Product is filtered off with suction, washed neutral with water, dried and made from ethyl acetate / petroleum ether recrystallized. A second fraction is obtained from the chloroform solution. the The yield is 205.7 g (95.7% of theory) with a melting point of 88-910. B) N-carbobenzoxy- @yrosine 80 g of N-carbobenzoxy-tyrosine ethyl ester in dioxane-water are mixed with 233 ml of 2N NaOH Saponified for 2 hours, (indicator phenolphthalein). The pH is adjusted to 8 with 1N HCL, on a rotary evaporator at 30 ° the Dio @ evaporated, diluted with water and at + 5 ° C acidified with 5N H2SO4 while stirring. The colorless oil which precipitates out crystallizes when cooling and inoculating completely. The crystals are suctioned off @n KHCO3 solution dissolved and precipitated again with 5n H2S04. After drying over P2O5, the melts Product at 92 - 95 ° (lit .: 101 °). The yield is 67 g (91.2 s of theory). c) N-carbobenzoxy-tyrosine-p-nitrobenzyl ester The production takes place as described under 1 b) by reacting 62 g of N-carbobenzo.xy-tyrosine with 64.8 g of p-nitrobenzyl bromide in 42 ml of triethylamine and 300 ml of ethyl acetate. After 8 hour Reaction, the solution is diluted with methylene chloride. Crystallizes after working up to convert from ethyl acetate / benzene / petroleum ether. Needles with a melting point of 117 are obtained -119 ° in a yield of 84 g (95% of theory).

Zur Bestimmung der optischen Reinheit wurde das Produkt hydriert.The product was hydrogenated to determine the optical purity.

Dabei entstand optisch reines L-Tyrosin [α]D20: -10,70 + 0,50; [α]54620 : -12,25 ~ 0,5° (c=2; in Salzsäure). Ausgangsmaterial: [α]D20: - 10,3 ~ 0,5° (in 1n HCL). d) N-Carbobenzoxy-tyrosin-tret .butyläthr-p-nitrobenzyl-ester Man erhält das Produkt wie unter 1c) beschrieben durch Umsetzung von 20 g N-Carbobe: zoxy-tyrosin-p-nitrobenzylester mit 200 ml Isobuten in 120 ml Methylenchlorid und 1,5 ml konz. H2S04. Aus Essigester/Benzol/Petroläther erhält man farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 73,5 - 74,50 in einer Ausbeute von 17,9 g (80 % der Theorie). e) Tyrosin-trt.butyläther. @ H2O Die Verbindung entsteht wie unter 1d) beschrieben durch Hydrieren von 20 g N-Carbobenzoxy-tyrosin-tert .butyläther-p-nitrobenzylester.This resulted in optically pure L-tyrosine [α] D20: -10.70 + 0.50; [α] 54620: -12.25 ~ 0.5 ° (c = 2; in hydrochloric acid). Starting material: [α] D20: - 10.3 ~ 0.5 ° (in 1n HCL). d) N-carbobenzoxy-tyrosine-tret .butyläthr-p-nitrobenzyl-ester The product is obtained as described under 1c) by reacting 20 g of N-carbobe: zoxy-tyrosine-p-nitrobenzyl ester with 200 ml of isobutene in 120 ml of methylene chloride and 1.5 ml conc. H2S04. Colorless needles are obtained from ethyl acetate / benzene / petroleum ether melting point 73.5-74.50 in a yield of 17.9 g (80% of theory). e) Tyrosine trt.butyl ether. @ H2O The connection is created as described under 1d) by hydrogenating 20 g of N-carbobenzoxy-tyrosine tert -butyl ether p-nitrobenzyl ester.

Aus Wasser/Methanol erhält man Blättchen vom Schmelzpunkt 248 -249,50(Z), in einer Ausbeute von 8,3 g (87 % der Theorie). f) N-Carbobenzoxy-tyrosin-tert.butyläther-Dicyclohexylaminsalz Die Verbindung wird wie unter 1e) beschrieben durch Verseifen von 22,5 g N-Carbobenzoxy-tyrosin-tert. butyläther-p-nitrobenzylester mit 9 ml 2n HaOE hergestellt. Aus Äthanol erhält man farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 160 - 161,5° in einer Ausbeute von 22,8 g (92 % der Theorie).Leaflets with a melting point of 248-249.50 (Z) are obtained from water / methanol, in a yield of 8.3 g (87% of theory). f) N-carbobenzoxy-tyrosine-tert-butyl ether-dicyclohexylamine salt The compound is as described under 1e) by saponifying 22.5 g of N-carbobenzoxy-tyrosine-tert. butyl ether p-nitrobenzyl ester prepared with 9 ml of 2N HaOE. From ethanol is obtained colorless needles with a melting point of 160 - 161.5 ° in a yield of 22.8 g (92% the theory).

Claims

Patent a n e p ruc hr Process for the preparation of hydroxyamino acid tert. butyl esters and their N - # - carbobenzoxy compounds, characterized in that if N-carbobenzoxyhydroxyamino acids are esterified with p-nitrobenzyl bromide, the product with isobutene in the presence of catalysts, preferably concentrated sulfuric acid, converts and by catalytic reduction the carbobenzoxy radical and the p-nitrobenzyl radical or hydrolytically only splits off the p-nitrobenzyl radical.