DE1160859B

DE1160859B - Process for the preparation of gramicidin S

Info

Publication number: DE1160859B
Application number: DEC15781A
Authority: DE
Inventors: Dr Robert Schwyzer; Dr Beat Iselin; Dr Max Feurer
Original assignee: Ciba Geigy AG; Ciba AG
Current assignee: Novartis AG; BASF Schweiz AG
Priority date: 1956-12-19
Filing date: 1957-11-14
Publication date: 1964-01-09

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLANDFEDERAL REPUBLIC OF GERMANY

DEUTSCHESGERMAN

PATENTAMTPATENT OFFICE

AUSLEGESCHRIFTEDITORIAL

Internat. Kl.: C 07 cBoarding school Class: C 07 c

Deutsche KL: 12 q- 6/01 German KL: 12 q- 6/01

Nummer: 1160 859Number: 1160 859

Aktenzeichen: C 15781IV b /12 qFile number: C 15781IV b / 12 q

Anmeldetag: 14. November 1957Filing date: November 14, 1957

Auslegetag: 9. Januar 1964Opening day: January 9, 1964

Grgenstand der vorliegenden Erfindung ist die Herstellung des Antibiotikums Gramicidin S, eines cyclischen Dekapeptides mit der zweimal auftretenden Aminosäuresequenz (l - Valin - l - ornithin - l - leucin- dphenylalanin-L-prolin). The subject of the present invention is the production of the antibiotic gramicidin S, one cyclic decapeptide with the amino acid sequence occurring twice (l - valine - l - ornithine - l - leucine- dphenylalanine-L-proline).

Gemäß dem Patent 1 060 380 werden Amide durch Umsatz von Carbonsäureestern, die in der Alkoholkomponente einen Elektronen anziehenden Substituenten aufweisen, mit Aminen erhalten. Im Patent 1 085 881 ist ein Verfahren zur Herstellung von cyclischen Amiden und Polypeptiden aus Aminocarbonsäuren beschrieben, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man Salze von Aminocarbonsäureestern mit einer freien Aminogruppe, in denen diese Gruppe durch mindestens 2 Kohlenstoffatome von der Ester carbonylgruppe getrennt ist und die in der Alkoholkomponente einen oder mehrere elektronenanziehende Substituenten aufweisen, mit anorganischen oder tertiären organischen Basen behandelt und gegebenenfalls in erhaltenen Reaktionsprodukten mit geschützten Aminogruppen diese in an sich bekannter Weise in freie Aminogruppen überführt. Dieses Verfahren wird gemäß Beispielen auch zur Herstellung von Gramicidin S angewendet. Dabei geht man aus von einem Salz eines dem Gramicidin entsprechenden linearen zehn Aminosäurereste aufweisenden Peptidesters. Das Verfahren ist insofern kompliziert, als das als Ausgangsprodukt verwendete Salz des Dekapeptidesters in mehreren Reaktionsstufen aus dem Pentapeptid hergestellt werden muß.According to patent 1,060,380, amides are produced by the conversion of carboxylic acid esters in the alcohol component have an electron attracting substituent, obtained with amines. In the patent 1,085,881 is a process for the preparation of cyclic amides and polypeptides from aminocarboxylic acids described, which is characterized in that salts of aminocarboxylic acid esters with a free amino group in which this group is represented by at least 2 carbon atoms from the ester carbonyl group is separated and the one or more electron-withdrawing groups in the alcohol component Have substituents, treated with inorganic or tertiary organic bases and optionally in reaction products obtained with protected amino groups in a manner known per se in transferred free amino groups. According to the examples, this method is also used for the production of gramicidin S applied. This is based on a salt of a linear one corresponding to gramicidin peptide ester having ten amino acid residues. The process is complicated in that that as a starting product used salt of the decapeptide ester in several reaction stages from the pentapeptide must be made.

Es wurde nun gefunden, daß man in einfacherer Weise das Gramicidin S erhält, wenn man ein Salz eines Pentapeptidesters mit der Aminosäuresequenz des Gramicidins, also eines L-Valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D - phenylalanyl - L - prolin - carbonsäureesters, dessen <5-Aminogruppe des Ornithinrestes geschützt ist und der in der Alkoholkomponente einen Elektronen anziehenden Substituenten aufweist, mit tertiären organischen Basen behandelt und sodann die geschützten ό-Aminogruppen in die freien Aminogruppen überführt.It has now been found that the gramicidin S is obtained in a simpler way if a salt is used of a pentapeptide ester with the amino acid sequence of gramicidin, i.e. an L-valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D - phenylalanyl - L - proline - carboxylic acid ester, whose <5-amino group of the ornithine residue is protected and which has an electron-attracting substituent in the alcohol component, with tertiary ones Treated organic bases and then the protected ό-amino groups in the free amino groups convicted.

Es war überraschend, daß in diesem Fall nicht Selbstcyclisierung des Pentapeptidmoleküls eintritt, sondern zwei Peptidmoleküle direkt zum cyclischen Dekapeptid zusammengelagert werden. Eine solche Verdoppelung der Ringbausteine bei der Bildung eines cyclischen Polypeptids wurde bisher nur beim c-Hexaglycyl beobachtet, das aus dem linearen Triglycinpeptid z. B. nach dem beschriebenen Verfahren erhalten wird. Man hielt diese Reaktionsweise der Triglycinderivate bisher für eine Ausnahme, die vielleicht in einer besonderen Unstabilität des c-Triglycyls Verfahren zur Herstellung von Gramicidin S
Zusatz zum Patent: 1 085 881It was surprising that in this case the pentapeptide molecule does not self-cyclize, but that two peptide molecules are directly combined to form the cyclic decapeptide. Such a doubling of the ring building blocks in the formation of a cyclic polypeptide has so far only been observed in c-hexaglycyl, which is derived from the linear triglycine peptide z. B. is obtained by the method described. This mode of reaction of the triglycine derivatives has hitherto been considered to be an exception, possibly resulting in a particular instability of the c-triglycyl process for the preparation of gramicidin S
Addendum to the patent: 1,085,881

Anmelder:Applicant:

CIBA Aktiengesellschaft, Basel (Schweiz)CIBA Aktiengesellschaft, Basel (Switzerland)

Vertreter:Representative:

Dipl.-Ing. E. Splanemann, Patentanwalt,Dipl.-Ing. E. Splanemann, patent attorney,

Hamburg 36, Neuer Wall 10Hamburg 36, Neuer Wall 10

Als Erfinder benannt:Named as inventor:

Dr. Robert Schwyzer,Dr. Robert Schwyzer,

Dr. Beat Iselin,Dr. Beat Iselin,

Dr. Max Feurer, Riehen (Schweiz)Dr. Max Feurer, Riehen (Switzerland)

Beanspruchte Priorität:Claimed priority:

Schweiz vom 19. Dezember 1956 (Nr. 40 869)Switzerland of December 19, 1956 (No. 40 869)

begründet sei (HeIv. Chim. Acta, 39, S. 879 [1956]). Andere Tripeptide, wie z. B. das Glycyl-DL-phenylalanyl-glycin und das Glycyl-glycyl-DL-phenylalanin ergaben das cyclische Tripeptid und kein Hexapeptid. Auch das Tetraglycinpeptid verdoppelt sein Molekül beim Ringschluß nicht. Bekannt ist ferner das c-Glycyl-L-leucyl-glycyl-L-leucyl-glycyl, das aus dem Thioester des Pentapeptidhydrobromids durch Selbstcyclisierung erhalten wird. Schon erwähnt wurde das cyclische Dekapeptid des Gramicidins, das aus dem entsprechenden linearen Dekapeptid ebenfalls ohne Molekülverdoppelung gewonnen wird. Eine Verdoppelung des L-Valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D - phenylalanyl-L- prolinpentapeptides bei der Cyclisierung war daher nicht voraussehbar. Die neue Gramicidinsynthese stellt wegen ihrer Einfachheit einen bedeutenden technischen Fortschritt dar.is justified (HeIv. Chim. Acta, 39, p. 879 [1956]). Other tripeptides, e.g. B. the glycyl-DL-phenylalanyl-glycine and the glycyl-glycyl-DL-phenylalanine gave the cyclic tripeptide and no hexapeptide. The tetraglycine peptide also doubles its molecule not when the ring is closed. Also known is the c-glycyl-L-leucyl-glycyl-L-leucyl-glycyl, which is obtained from the thioester of pentapeptide hydrobromide by self-cycling. The cyclic has already been mentioned Decapeptide of gramicidin, which is derived from the corresponding linear decapeptide, also without doubling the molecule is won. A doubling of the L-valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline pentapeptide the cyclization could therefore not be foreseen. The new gramicidin synthesis represents represents a significant technical advance because of its simplicity.

Das Verfahren wird, ausgehend vom L-Valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin in der im Hauptpatent 1 085 881 beschriebenen Weise durchgeführt. Die (5-Aminogruppe des Ornithinrestes ist bei der Reaktion zu schützen, zweckmäßigerweise durch Einführung eines Restes, der ohne Ringöffnung abspaltbar ist, wie z. B. der Tosyl-, Trityl-, Carbobenzoxy- oder Trifluoracetylrest.The procedure is based on L-valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline carried out in the manner described in the main patent 1,085,881. The (5-amino group of the ornithine residue is at to protect the reaction, expediently by introducing a residue which can be split off without ring opening is, such as B. the tosyl, trityl, carbobenzoxy or trifluoroacetyl radical.

Die Alkoholkomponente der als Ausgangsmaterial verwendeten Ester kann irgendein organischer RestThe alcohol component of the esters used as the starting material can be any organic radical

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sein, der einen oder mehrere Elektronen anziehende Substituenten aufweist, insbesondere die Cyan-, Nitro-, Sulfo- oder Methansulfonylgruppe, die vorzugsweise durch eine Kohlenstoffkette von 1 bis 5 C-Atomen vom Estersauerstoff getrennt sind. Beispiele solcher Alkoholkomponenten sind z. B. der Rest des Cyanmethylalkohols, des p-Nitrophenols oder des p-Methansulfonylphenols. be, which has one or more electron-attracting substituents, especially the cyano, nitro, Sulpho- or methanesulphonyl group, which is preferably formed by a carbon chain of 1 to 5 carbon atoms are separated from the ester oxygen. Examples of such alcohol components are e.g. B. the rest of the cyanomethyl alcohol, of p-nitrophenol or p-methanesulfonylphenol.

Die als Ausgangsmaterial verwendeten Salze der Peptidcarbonsäureester, die in der Alkoholkomponente einen Elektronen anziehenden Substituenten aufweisen, lassen sich beispielsweise durch Umsatz des N-Triphenylmethyl-pentapeptids mit einem Halogenwasserstoffester des entsprechenden Alkohols in Gegenwart einer tertiären organischen Base und anschließende Abspaltung des Triphenylmethylrestes durch Behandlung mit verdünnter Säure oder durch katalytische Hydrierung eines entsprechenden Esters des N-Carbobenzoxy-pentapeptids in Gegenwart einer Säure herstellen. Als zurernndungsgemäßen Umsetzung geeignete Salze sind insbesondere die der Halogenwasserstoffsäuren, wie der Salzsäure, oder von halogenierten Fettsäuren, wie der Trifluoressigsäure, zu nennen.The salts of the peptide carboxylic acid esters used as starting material in the alcohol component have an electron-attracting substituent can, for example, by conversion of the N-triphenylmethyl-pentapeptide with a hydrogen halide ester of the corresponding alcohol in the presence of a tertiary organic base and then Cleavage of the triphenylmethyl radical by treatment with dilute acid or by catalytic Hydrogenation of a corresponding ester of N-carbobenzoxypentapeptide in the presence of an acid. Suitable as implementation in accordance with the appointment Salts are in particular those of the hydrohalic acids, such as hydrochloric acid, or of halogenated ones Fatty acids, such as trifluoroacetic acid, should be mentioned.

Als tertiäre organische Base wird vorzugsweise Pyridin verwendet.Pyridine is preferably used as the tertiary organic base.

Das Verfahren wird vorteilhaft in Gegenwart von organischen Lösungsmitteln, wie Dimethylformamid, Acetonitril, Dioxan, Tetrahydrofuran oder von deren Gemischen, gegebenenfalls auch in Anwesenheit von Wasser durchgeführt. Die Ausbeute kann durch Zusatz von sauren Katalysatoren, beispielsweise Eisessig oder Schwefelsäure, zum Salz des Peptidesters weiter gesteigert werden.The process is advantageous in the presence of organic solvents such as dimethylformamide, Acetonitrile, dioxane, tetrahydrofuran or mixtures thereof, optionally also in the presence of Water carried out. The yield can be increased by adding acidic catalysts, for example glacial acetic acid or sulfuric acid, can be increased further to the salt of the peptide ester.

Die Erfindung wird im folgenden Beispiel näher beschrieben. Die Temperaturen sind in Celsiusgraden angegeben.The invention is described in more detail in the following example. The temperatures are in degrees Celsius specified.

example 1

340 mg L-Valyl-N^ä-tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-nitrophenylester-trifluoracetat werden in 6 ml Dimethylformamid gelöst, mit 6 Tropfen Eisessig versetzt und in 5 Stunden unter Rühren bei 55⁰C in 70 ml Pyridin eingetropft. Anschließend wird noch 2 Stunden bei dieser Temperatur gerührt, dann werden die Lösungsmittel im Vakuum vollständig verdampft. Der Rückstand wird in 60 ml Methanol—Isopropanol—Wasser 1:1:1 gelöst und durch je eine Säule mit stark saurem und basischem Ionenaustauscher filtriert. Dieser wird noch mit 200 ml des gleichen Gemisches ausgewaschen; die vereinigten Filtrate werden im Vakuum zur Trockne verdampft. Der Rückstand wird aus Methanol—Wasser kristallisiert, wobei 125 mg Di-<3-tosyl-gramicidin S in Form des Dihydrates erhalten werden. Die Mutterlauge wird zur Trockne verdampft und der Rückstand an 2 g Aluminiumoxyd Chromatographien. Mit Chloroform und mit Essigester lassen sich 20 mg Rohprodukt eluieren; diese ergeben nach Umkristallisation aus Methanol—Wasser noch 10 mg reines Di-tosyl-gramicidin-S-dihydrat. Die Gesamtausbeute beträgt demnach 135 mg = 31 °/₀ der Theorie.340 mg of L-valyl-N ^ä -tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-nitrophenyl ester trifluoroacetate are dissolved in 6 ml of dimethylformamide, 6 drops of glacial acetic acid are added and the mixture is stirred at 55 ° for 5 hours ⁰ C added dropwise to 70 ml of pyridine. The mixture is then stirred for a further 2 hours at this temperature, then the solvents are completely evaporated off in vacuo. The residue is dissolved in 60 ml of methanol-isopropanol-water 1: 1: 1 and filtered through a column each with a strongly acidic and basic ion exchanger. This is washed out with 200 ml of the same mixture; the combined filtrates are evaporated to dryness in vacuo. The residue is crystallized from methanol-water, 125 mg of di- <3-tosyl-gramicidin S being obtained in the form of the dihydrate. The mother liquor is evaporated to dryness and the residue is chromatographed on 2 g of aluminum oxide. 20 mg of crude product can be eluted with chloroform and with ethyl acetate; After recrystallization from methanol-water, these give a further 10 mg of pure di-tosyl-gramicidin-S-dihydrate. The overall yield is therefore 135 mg = 31 ° / ₀ of theory.

Dieses Produkt wird wie folgt in das Gramicidin S umgewandelt:This product is converted into the gramicidin S as follows:

60 mg des Dihydrates des Di-tosyl-gramicidins S werden in 20 ml flüssigem Ammoniak gelöst und mit 100 mg Natrium (in kleinen Stücken) versetzt. Nach vollständiger Lösung des Natriums bleibt die Lösung blau. Nach Zugabe von wenig Ammoniumchlorid wird der Ammoniak verdunstet und der Rückstand im Hochvakuum von entstandenem Merkaptan befreit. Das Reaktionsprodukt wird mit absolutem Äthanol, dem einige Tropfen einer Lösung von Salzsäure in Essigester beigefügt sind, aufgenommen. Das Lösungsmittel wird nach der Filtration verdampft. Der Rückstand wird in wenigen Tropfen 65°/„igen Äthanol gelöst und bei 50" so lange mit Wasser versetzt, bis eine deutliche Trübung entstanden ist. Darauf kristallisiert das Dihydrochlorid des Gramicidins S in Form feiner Nadeln. Schmp. 268 bis 270^: unter Zersetzung (Einführung des Schmelzpunkröhrchens bei 250°).60 mg of the dihydrate of di-tosyl-gramicidins S are dissolved in 20 ml of liquid ammonia and mixed with 100 mg of sodium (in small pieces). After the sodium has completely dissolved, the solution remains blue. After adding a little ammonium chloride, the ammonia is evaporated and the residue is freed from the mercaptan formed in a high vacuum. The reaction product is taken up with absolute ethanol to which a few drops of a solution of hydrochloric acid in ethyl acetate are added. The solvent is evaporated after filtration. The residue is dissolved in a few drops of 65% ethanol and water is added at 50 "until a clear cloudiness has formed. The dihydrochloride of gramicidine S then crystallizes in the form of fine needles. Mp. 268 to 270 ^: with decomposition (Introduction of the melting point tube at 250 °).

Das als Ausgangsstoff verwendete trifluoressigsäure Salz des L-Valyl-N^-tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylesters kann wie folgt erhalten werden:The trifluoroacetic acid salt of L-valyl-N ^ -tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester used as starting material can be obtained as follows:

500 mg N-Trityl-L-valyl-(N'³-tosyl)-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin (dargestellt z. B. nach Patent 1085 881) und 800 mg Di-(p-nitrophenyl)-sulfit werden in 1,5 ml absolutem Pyridin 20 Stunden bei Zimmertemperatur stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird dann mit Essigester verdünnt, dreimal mit einer Citronensäurelösung, dann mit Wasser ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne verdampft. Das zurückbleibende Harz wird mit Äther—Petroläther 1: 1 verrieben, wobei der Nitrophenylester fest zurückbleibt. Die Ausbeute beträgt 550 mg = 98 % der Theorie.500 mg N-trityl-L-valyl- (N ' ³ -tosyl) -L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline (shown e.g. according to patent 1085 881) and 800 mg di- ( p-nitrophenyl) sulfite are left to stand in 1.5 ml of absolute pyridine for 20 hours at room temperature. The reaction mixture is then diluted with ethyl acetate, extracted three times with a citric acid solution, then extracted with water, dried over sodium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The remaining resin is triturated with ether-petroleum ether 1: 1, the nitrophenyl ester remaining solid. The yield is 550 mg = 98% of theory.

435 mg des so erhaltenen Nitrophenylesters werden in 10 ml Trifluoressigsäure gelöst und bei —5° langsam mit 10 ml Wasser versetzt. Es bildet sich eine Fällung von Triphenylcarbinol. Die Lösungsmittel werden im Hochvakuum bei 30^D vollständig verdampft, dann der Rückstand mehrmals mit Äther—Petroläther 1: 1 und absolutem Äther verrieben. Als feste Fällung werden 340 mg Trifluoracetat erhalten.435 mg of the nitrophenyl ester obtained in this way are dissolved in 10 ml of trifluoroacetic acid, and 10 ml of water are slowly added at -5 °. A precipitate of triphenylcarbinol forms. The solvents are completely evaporated in a high vacuum at 30 ^D , then the residue is triturated several times with ether-petroleum ether 1: 1 and absolute ether. 340 mg of trifluoroacetate are obtained as a solid precipitate.

Example 2

350 mg L-Valyl-N^-tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-nitrophenylester-hydrochlorid werden nach dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren kondensiert, wobei 130 mg Di-rJ-tosyl-gramicidin-S-dihydrat erhalten werden. Dieses kann, wie im Beispiel 1 beschrieben, in Gramicidin S übergeführt weiden. Das als Ausgangsmaterial verwendete Pentapeptidester-hydrochlorid kann wie folgt hergestellt werden: 500 g N-Trityl-L-valyKN^-tosylVL-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester werden in 5 ml Eisessig gelöst und mit 2 ml 2 η-Salzsäure versetzt. Nach 3 Minuten bei 50^c wird das Lösungsmittel verdampft und der Rückstand mit absolutem Äther verrieben, wobei 350 mg eines unlöslichen Pulvers zurückbleiben.350 mg of L-valyl-N ^ -tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-nitrophenyl ester hydrochloride are condensed according to the method described in Example 1, 130 mg of di-rI-tosyl-gramicidin -S-dihydrate can be obtained. As described in Example 1, this can be converted into gramicidin S. The pentapeptide ester hydrochloride used as starting material can be prepared as follows: 500 g of N-trityl-L-valyKN ^ -tosylVL-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester are dissolved in 5 ml of glacial acetic acid and mixed with 2 ml of 2η hydrochloric acid. After 3 minutes at 50 ^{° C.} , the solvent is evaporated and the residue is triturated with absolute ether, 350 mg of an insoluble powder remaining.

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Example 3

360 mg L-Valyl-N^-tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-i,-prolin-nitrophenylester-hydrobromid werden nach dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren kondensiert, wobei 125 mg Dw'S-tosyl-gramicidin-S-dihydrat erhalten werden. Dieses kann, wie im Beispiel 1 beschrieben, in Gramicidin S übergeführt werden. Das als Ausgangsmaterial verwendete Pentapeptidesterhydrobromid kann wie folgt hergestellt werden: 500 g N-Trityl-L-valyl-iN^tosyO-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester werden in 5 ml Eisessig gelöst und mit 2 ml 2normaler wässeriger Bromwasserstoffsäure versetzt. Nach 3 Minuten bei 50° wird das Lösungsmittel verdampft und der Rück-360 mg L-valyl-N ^ -tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-i, -proline-nitrophenylester-hydrobromide are condensed according to the method described in Example 1, with 125 mg of Dw'S-tosyl-gramicidin-S-dihydrate can be obtained. As described in Example 1, this can be converted into gramicidin S. The pentapeptide ester hydrobromide used as the starting material can be prepared as follows: 500 g of N-trityl-L-valyl-iN ^ tosyO-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester are dissolved in 5 ml of glacial acetic acid, and 2 ml of 2N aqueous hydrobromic acid are added. After 3 minutes at 50 ° the solvent is evaporated and the return

stand mit absolutem Äther verrieben, wobei 360 mg eines unlöslichen Pulvers erhalten werden.stood triturated with absolute ether, giving 360 mg of an insoluble powder.

Example 4

320 mg L-Valyl-N^-tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-nitrophenylester-acetat werden nach dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren umgesetzt. Man erhält 140 mgDi-tosyl-gramicidin-S-dihydrat, das nach dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren in Gramicidin S übergeführt werden kann.320 mg L-valyl-N ^ -tosyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline nitrophenyl ester acetate are implemented according to the method described in Example 1. 140 mg of di-tosyl-gramicidin-S-dihydrate are obtained, the can be converted into gramicidin S by the method described in Example 1.

Das als Ausgangsmaterial verwendete Pentapeptidesteracetat kann wie folgt hergestellt werden:The pentapeptide ester acetate used as the starting material can be prepared as follows:

500 g N-Trityl-L-valyl-CN^-tosyO-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-prolin-p-nitrophenylester werden in einer Mischung von 5 ml Eisessig und 2 ml Wasser gelöst. Nach 3 Minuten bei 50° wird das Lösungsmittel verdampft und der Rückstand mit absolutem Äther verrieben, wobei 320 mg eines schaumartigen festen Rückstandes erhalten werden.500 g of N-trityl-L-valyl-CN ^ -tozyO-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline-p-nitrophenyl ester are dissolved in a mixture of 5 ml of glacial acetic acid and 2 ml of water. After 3 minutes at 50 ° the solvent becomes evaporated and the residue triturated with absolute ether, leaving 320 mg of a foam-like solid Can be obtained residue.

2020th

Claims

Patent claims:

1. Process for the production of gramicidins by reacting salts of aminocarboxylic acid esters with a free amino group in the Alcohol component have one or more electron-attracting substituents, with tertiary organic bases and optionally release of protected amino groups by the process of the main patent 1085 881, characterized in that a salt of a L-valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline ester, which has an electron-attracting substituent in the alcohol component, with treated tertiary organic bases.

2. The method according to claim 1, characterized in that the starting compounds Salts of the p-nitrophenyl ester used.

3. The method according to claim 1 and 2, characterized in that the <5-amino group des Protects the ornithine residue by the tosyl residue.

4. The method according to claim 1 to 3, characterized in that the salt of L-valyl-L-ornithyl-L-leucyl-D-phenylalanyl-L-proline ester the trifluoroacetate used.

5. The method according to claim 1 to 4, characterized in that the tertiary organic Base pyridine used.

Considered publications:
Angewandte Chemie, 68 (1956), p. 518;
HeIv. Chim. Acta, 39, pp. 872 to 883 (1956).