DE1095276B

DE1095276B - Process for the preparation of therapeutically active steroid compounds

Info

Publication number: DE1095276B
Application number: DEU5982A
Authority: DE
Inventors: Raymond Leroy Pederson; Milton Edwin Herr; John Claude Babcock; J Allan Campbell; John Alexander Hogg
Original assignee: Upjohn Co
Current assignee: Pharmacia and Upjohn Co
Priority date: 1958-02-19
Filing date: 1959-02-12
Publication date: 1960-12-22

Description

Verfahren zur Herstellung von therapeutisch wirksamen Steroidverbindungen Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung neuer 6a- und 6ß-Fluorsteroide der allgemeinen Formeln in denen R1 eine H, OH- oder H, Acyloxygruppe, deren Acylrest von einer organischen Carbonsäure mit vorzugsweise 1 bis 12 C-Atomen abgeleitet ist, oder Ketosauerstoff bedeutet und R2 Wasserstoff, H, O H oder Ketosauerstoff ist, durch an sich bekannte mikrobiologische oder chemische Dehydrierung einer Verbindung der allgemeinen Formel in der R Wasserstoff ist oder die Methylgruppe darstellt und R1 und R2 die oben angegebene Bedeutung haben. Falls die Dehydrierungsprodukte in 17ß-Stellung eine Hydroxylgruppe enthalten, können sie nachfolgend acyliert werden, worauf man die 3-ständige Acyloxygruppe der so erhaltenen 3,17ß-Diacylate selektiv hydrolysiert. Anschließend können die als 6ß-Fluorsteroide erhaltenen Produkte der Erfindung in bekannter Weise einer Epimerisierung zu den 6a-Fluorverbindungen unterzogen werden.Process for the production of therapeutically active steroid compounds The subject of the invention is a process for the production of new 6a and 6ß-fluoro steroids of the general formulas in which R1 is an H, OH or H, acyloxy group, the acyl radical of which is derived from an organic carboxylic acid with preferably 1 to 12 carbon atoms, or keto oxygen and R2 is hydrogen, H, OH or keto oxygen, by microbiological or known per se chemical dehydration of a compound of the general formula in which R is hydrogen or represents the methyl group and R1 and R2 have the meanings given above. If the dehydrogenation products contain a hydroxyl group in the 17β-position, they can subsequently be acylated, whereupon the 3-position acyloxy group of the 3,17β-diacylates thus obtained is selectively hydrolyzed. The products of the invention obtained as 6β-fluorosteroids can then be subjected in a known manner to an epimerization to give the 6α-fluorine compounds.

Die erfindungsgemäß herstellbaren neuen Steroidverbindungen besitzen wervolle, therapeutische Eigenschaften. So weisen die Verbindungen der Formel II anabolische, antiöstrogene und androgene Wirksamkeit auf. Antiosteoporotische, gonadotropinhemmende, das zentrale Nervensystem regulierende und blutlipoidreinigende Eigenschaften sind sowohl den Verbindungen der Formel II wie den Verbindungen der Formel III eigen. Sie können deshalb zur Behandlung von Entkräftungszuständen, Unterfunktion der Geschlechtsdrüsen sowie osteoporotischen und artherosclerotischen Leiden verwendet werden. Insbesondere zeichnen sich die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen durch ihr günstiges Verhältnis von anabolischer zu androgener Wirkung aus, die beim 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-on z. B. 4,6:1, beim Methyltestosteron dagegen 1 :1 beträgt. Sie können daher, ohne unerwünschte Nebenwirkungen zu verursachen (Libido bei Männern, Vermännlichung bei Frauen), vor allem zur Behandlung von senilen Patienten verwendet werden.The novel steroid compounds which can be prepared according to the invention have valuable therapeutic properties. Thus, the compounds of the formula II anabolic, antiestrogenic and androgenic effectiveness. Anti-osteoporotic, gonadotropin-inhibiting, are central nervous system regulating and blood lipoid cleansing properties peculiar to both the compounds of the formula II and the compounds of the formula III. They can therefore be used to treat debilitating states, underactive sex glands as well as osteoporotic and atherosclerotic conditions. In particular the compounds which can be prepared according to the invention are distinguished by their favorable properties Ratio of anabolic to androgenic effects from 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-one z. B. 4.6: 1, while methyltestosterone is 1: 1. You can therefore without cause unwanted side effects (libido in men, masculinization in Women), mainly used to treat senile patients.

Die erfindungsgemäß als Ausgangsstoffe zu verwendenden 6a-Fluor-4-androsten-Derivate können, wie vorgeschlagen wurde, dadurch hergestellt werden, daß man 6-Fluor-5a,17ß-dioxyandrostan-3-on bzw. 6-Fluor-5a-17ß-dioxy-androstan-3,11-dion oder deren 19-Nor-Derivate, gegebenenfalls nach Acyllerung der 17-Stellung, in 4(5)-Stellung dehydratisiert oder daß man das durch Chromsäureoxydation von 6-Fluor-3,5a, 11ß,17ß-tetraoxyandrostan, 6-Fluor-5a, 11ß,17ß-trioxyandrostan-3-on bzw. 6-Fluor-5a, 17ß-dioxyandrostan-3,11-dion oder deren 19-Nor-Derivaten und nachfolgende Dehydratisierung erhältliche 6-Fluor-4-androsten-3,11,17-trion bzw. dessen 19-Nor-Verbindung mit einem Alkandiol umsetzt, das erhaltene 3,17-bis-(Alkylenketal) mit einem Reduktionsmittel behandelt und das so hergestellte 6-Fluor-1 lß-oxy-4-androsten-3,17-dion-3,17-bis-(alkylenketal) hydrolysiert oder daß man 6-Fluor-4-androsten-3,11,17-trion bzw. dessen 19-Nor-Derivat mit einem sek. cyclischen Amin behandelt, das erhaltene 3-Enamin mit einem Reduktionsmittel umsetzt und das so hergestellte 6-Fluor-1 1ß,17ß-dioxy-4-androsten-3-on-3-enamin hydrolysiert.The 6a-fluoro-4-androstene derivatives to be used as starting materials according to the invention can, as has been suggested, be prepared by 6-fluoro-5a, 17ß-dioxyandrostan-3-one or 6-fluoro-5a-17ß-dioxy-androstane-3,11-dione or their 19-nor derivatives, if appropriate after acylation of the 17-position, dehydrated in the 4 (5) -position or that the by chromic acid oxidation of 6-fluoro-3,5a, 11ß, 17ß-tetraoxyandrostane, 6-fluoro-5a, 11ß, 17ß-trioxyandrostan-3-one or 6-fluoro-5a, 17ß-dioxyandrostan-3,11-dione or their 19-nor derivatives and subsequent dehydration obtainable 6-fluoro-4-androstene-3,11,17-trione or its 19-nor compound reacts with an alkanediol, the resulting 3,17-bis (alkylene ketal) treated with a reducing agent and the 6-fluoro-1 lß-oxy-4-androstene-3,17-dione-3,17-bis (alkylene ketal) thus prepared hydrolyzed or that 6-fluoro-4-androstene-3,11,17-trione or its 19-nor derivative with a sec. cyclic amine treated, the 3-enamine obtained with a reducing agent converts and the 6-fluoro-1 1ß, 17ß-dioxy-4-androsten-3-one-3-enamine thus prepared hydrolyzed.

Die fermentative Dehydrierung der erfindungsgemäß eingesetzten Ausgangsstoffe, in denen R Wasserstoff oder die Methylgruppe ist, kann mit Mikroorganismen der Gattung Septomyxa, Corynebacterium, Fusarium, Didymella, Calonectria, Alternaria, Colletotrichum, Cylindrocarpon, Ophiobolus, Listeria, Erysipelothrix, Mycobacterium, Tricotheciüm, Leptospharia, Cucurbitaria, Nocardia oder mit Enäymen von Pilzen der Familie Tuberculariaceae z. B. nach dem Verfahren der USA.-Patentschrift 2 602 769 erfolgen.The fermentative dehydrogenation of the starting materials used according to the invention, in which R is hydrogen or the methyl group, can with microorganisms of the genus Septomyxa, Corynebacterium, Fusarium, Didymella, Calonectria, Alternaria, Colletotrichum, Cylindrocarpon, Ophiobolus, Listeria, Erysipelothrix, Mycobacterium, Tricotheciüm, Leptospharia, Cucurbitaria, Nocardia or with enzymes from fungi of the family Tuberculariaceae z. B. by the method of U.S. Pat. No. 2,602,769.

Für die Dehydrierung von Ausgangsstoffen, die in 1lß-Stellung eine Hydroxylgruppe enthalten, mit Mikroorganismen der Gattung Septomyxa verwendet man vorteilhaft einen Steroid-Promotor, z. B. Progesteron, 3-Ketobisnor-4-cholen-22-al, 3-Ketobisnorcholensäure, llß,21-Dioxy-1,4,17(20)-pregnatrien-3-on und ähnliche Stoffe. Da bei der mikrobiologischen Dehydrierung eine gegebenenfalls in 17-Stellung vorhandene Estergruppe verseift wird, ist es zweckmäßiger, als Ausgangsstoffe solche zu verwenden, deren 17-ständige Hydroxylgruppe nicht verestert ist. Die bei der Dehydrierung von Verbindungen der Formel I, in denen R Wasserstoff ist, erhaltenen Stoffe mit einer Doppelbindung in 1- und 4-Stellung sind unbeständig und lagern sich sofort zu den entsprechenden Östradiolderivaten um. Falls gewünscht, können die durch mikrobiologische Dehydrierung von in 17-Stellung eine freie oder veresterte Hydroxylgruppe enthaltenden Steroidverbindungen erhaltenen Produkte nachfolgend in die entsprechenden 17-Acylate übergeführt werden. Geeignete Veresterungsmittel sind organische Carbonsäuren, insbesondere aus Kohlenstoff, Wasserstoff und Sauerstoff aufgebaute Carbonsäuren mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, sowie deren Anhydride oder Halogenide. Für die Acylierung kommen vor allem gesättigte, gerad- und verzweigtkettige, aliphatische Säuren, cycloaliphatische gesättigte Säuren, Aralkylsäuren, gesättigte, zweibasische Säuren, die in wasserlösliche Salze, z. B. Natriumsalze, übergeführt werden können, ungesättigte Säuren, zweibasische, ungesättigte Säuren, die in wasserlösliche Salze, z. B. Natriumsalze, übergeführt werden können, sowie deren Anhydride und Halogenide in Betracht.For the dehydrogenation of starting materials that have a Containing hydroxyl group, one used with microorganisms of the genus Septomyxa advantageously a steroid promoter, e.g. B. progesterone, 3-ketobisnor-4-cholen-22-al, 3-ketobisnorcholenic acid, llß, 21-dioxy-1,4,17 (20) -pregnatrien-3-one and similar substances. Since in the case of microbiological dehydration a possibly present in the 17-position Ester group is saponified, it is more appropriate to use those as starting materials, whose 17-position hydroxyl group is not esterified. Those involved in the dehydration of Compounds of the formula I in which R is hydrogen, substances obtained with a Double bonds in the 1- and 4-positions are unstable and immediately add to the corresponding estradiol derivatives. If desired, they can be carried out by microbiological Dehydrogenation of those containing a free or esterified hydroxyl group in the 17-position Steroid compounds are subsequently converted into the corresponding 17-acylates be transferred. Suitable esterifying agents are organic carboxylic acids, in particular Carboxylic acids composed of carbon, hydrogen and oxygen with 1 to 12 Carbon atoms, as well as their anhydrides or halides. Come for the acylation especially saturated, straight and branched chain, aliphatic acids, cycloaliphatic saturated acids, aralkyl acids, saturated, dibasic acids, which are soluble in water Salts, e.g. B. sodium salts, unsaturated acids, dibasic, unsaturated acids, which can be converted into water-soluble salts, e.g. B. sodium salts, transferred can be, as well as their anhydrides and halides into consideration.

Wird für die Veresterung die freie Säure verwendet, so erfolgt die Umsetzung vorzugsweise in Gegenwart eines Katalysators, z. B. von p-Toluolsulfonylchlorid, Trifluoressigsäureanhydrid, p-Toluolsulfonsäure, Trifluoressigsäure, Schwefelsäure u. dgl. Wird als Acylierungsmittel ein Säurechlorid oder Säureanhydrid verwendet, so führt man die Umsetzung zweckmäßig in Gegenwart einer tert. Base, wie Pyridin, Dimethylanilin u. dgl., aus. Ist das Acylierungsmittel fest, so wird ein inertes Lösungsmittel, wie Toluol, Xylol oder Dioxan, verwendet. Man kann aber auch- die Dehydrierung der Ausgangsstoffe, falls diese eine 17-ständige Hydroxyl- oder Acyloxygruppe enthalten, auf chemischem Wege durchführen, z. B. in an sich bekannter Weise mit Selendioxyd oder seleniger Säure.If the free acid is used for the esterification, this takes place Implementation preferably in the presence of a catalyst, e.g. B. of p-toluenesulfonyl chloride, Trifluoroacetic anhydride, p-toluenesulfonic acid, trifluoroacetic acid, sulfuric acid and the like. If an acid chloride or acid anhydride is used as the acylating agent, the reaction is conveniently carried out in the presence of a tert. Base, such as pyridine, Dimethylaniline and the like. If the acylating agent is solid, it becomes an inert one Solvents such as toluene, xylene or dioxane are used. But you can also - that Dehydration of the starting materials, if they have a 17-position hydroxyl or acyloxy group contain, carry out by chemical means, z. B. in a known manner with Selenium dioxide or selenious acid.

Die aus den Östradiolderivaten durch Acylierung erhaltenen 3,17ß-Diacylate, die vorzugsweise durch Umsetzung mit einem Säurehalogenid hergestellt werden, werden anschließend dadurch in die 17ß-Acylate übergeführt, daß man sie nach Beispiel 2 der USA.-Patentschrift 2611 723 selektiv in 3-Stellung verseift.The 3,17ß-Diacylate obtained from estradiol derivatives by acylation, which are preferably prepared by reaction with an acid halide are then characterized converted into the 17-acylates that they are according to Example 2 of the USA. Patent 2611 723 selectively 3- Saponified position.

Die erfindungsgemäß herstellbaren Steroidverbindungen enthalten in 6-Stellung einen Fluorsubstituenten, der sowohl a- wie ß-ständig sein kann. Bei Verwendung eines 6ß-Fluor-Steroids als Ausgangsstoff und Einhaltung nahezu neutraler Reaktionsbedingungen erhält man das entsprechende 6ß-Epimere als Endprodukt. Dieses kann durch Behandlung mit einer Mineralsäure, wie Chlorwasserstoffsäure, bei 0° C oder einer etwas höheren oder tieferen Temperatur in einem organischen Lösungsmittel, wie Chloroform, Methylenchlorid, Äther u. dgl., in Gegenwart eines Protonen abgebenden Stoffes, wie Alkoholen, organischen Säuren, in das 6a-Epimere übergeführt werden. Während des Säurezusatzes soll das Reaktionsgemisch vorzugsweise auf O' C oder nur wenig über oder unter dieser Temperatur gehalten werden. Darauf wird das Reaktionsgemisch abwechselnd mit verdünntem Alkali und Wasser gewaschen, dann getrocknet und unter verringertem Druck eingeengt. Aus dem rohen Reaktionsprodukt wird das 6a-Fluor-Epimere durch Umkristallisation gewonnen.The steroid compounds which can be prepared according to the invention contain a fluorine substituent in the 6-position, which can be in the α or β position. If a 6β-fluoro-steroid is used as the starting material and virtually neutral reaction conditions are observed, the corresponding 6β-epimer is obtained as the end product. This can be achieved by treatment with a mineral acid such as hydrochloric acid at 0 ° C. or a slightly higher or lower temperature in an organic solvent such as chloroform, methylene chloride, ether and the like in the presence of a proton-donating substance such as alcohols or organic acids , be converted into the 6a-epimer. During the addition of the acid, the reaction mixture should preferably be kept at 0 ° C. or only slightly above or below this temperature. The reaction mixture is then washed alternately with dilute alkali and water, then dried and concentrated under reduced pressure. The 6a-fluoro-epimer is obtained from the crude reaction product by recrystallization.

Die Epimerisierung kann auch mit einem Alkali erfolgen, z. B. mit Lösungen von Natriumhydroxyd und Kaliumhydroxyd in einem organischen Lösungsmittel, wie Methanol.The epimerization can also be done with an alkali, e.g. B. with Solutions of sodium hydroxide and potassium hydroxide in an organic solvent, like methanol.

Das folgende Beispiel erläutert das erfindungsgemäße Verfahren. Beispiel a) 6a-Fluor-llß-oxy-1,4-androstadien-3,17-dion (Dehydrierung auf mikrobiologischem Wege) Dreimal 100 ccm eines Mediums aus 10/, Glucose, 20/, Maisquellwasser (600/, Feststoffe) und Leitungswasser in drei 250 ccm fassenden Erlenmeyerkolben wurden auf einen p11-Wert von 4,9 eingestellt, 45 Minuten bei einem Druck von etwa 1 kg/qcm sterilisiert und darauf mit einer 1 bis 2 Tage alten vegetativen Kultur von Septomyxa affinis ATCC 6737 geimpft. Anschließend wurden die Erlenmeyerkolben 3 Tage bei Raumtemperatur (etwa 26 bis 28° C) geschüttelt.The following example explains the method according to the invention. Example a) 6a-fluoro-11ß-oxy-1,4-androstadiene-3,17-dione (dehydration by microbiological means) three times 100 ccm of a medium made from 10 %, glucose, 20 %, corn steep liquor (600 %, solids) and Tap water in three 250 cc Erlenmeyer flasks was adjusted to a p11 value of 4.9, sterilized for 45 minutes at a pressure of about 1 kg / sq cm and then inoculated with a 1 to 2 day old vegetative culture of Septomyxa affinis ATCC 6737. The Erlenmeyer flasks were then shaken at room temperature (about 26 to 28 ° C.) for 3 days.

Nach Ablauf dieser Zeit wurden die 300 ccm als Impfmaterial für 51 des gleichen Glucose-Maisquellwasser-Mediums verwendet, das außerdem noch 5 ccm eines Antischaummittels enthielt (ein Gemisch aus Specköl und Octadecanol). Der Gärbehälter wurde in ein Wasserbad gestellt, auf 28°C gebracht und sein Inhalt (mit 300 Umdrehungen pro Minute) gerührt und (mit 0,3 1 Luft je Minute je 5 1 Gärmedium) belüftet. Nach einer Inkubationszeit von 20 Stunden, nachdem sich ein gutes Wachstum entwickelt hatte, wurden 1 g 6a-Fluorllß-oxy-4-androsten-3,17-dion plus 0,5 g 3-Ketobisnor-4-cholen-22-al, gelöst in 16 ccm Dimethylformamid, zugesetzt und die Inkubation bei gleicher Temperatur (28° C) und gleicher Belüftung 48 Stunden fortgesetzt (End-pH-Wert 8,3). Das Mycel wurde abfiltriert und dreimal mit je 200 ccm Aceton extrahiert. Das filtrierte Gärmedium wurde dreimal mit je 1 1 i%Iethylenchlorid extrahiert. Die Aceton- und Methylenchloridextrakte wurden vereinigt, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft und der erhaltene Rückstand über eine Säule aus wasserfreiem Magnesiumsilicat (bekannt unter der Handelsbezeichnung »Florisil«) chromatographiert. Die Säule wurde mit Hexan-Kohlenwasserstoffen, die zunehmende Mengen Aceton enthielten - 6 bis 160/, -, eluiert. Die so erhaltenen Fraktionen wurden zur Trockne eingedampft. Die Rückstände wurden einer Infrarotabsorptionsanalyse unterzogen. Die die charakteristischen Banden des 6a-Fluor-1 lß-oxy-1,4-adrostadien-3,17-dions aufweisenden Rückstände wurden vereinigt und aus Methylenchlorid-Hexan-Kohlenwasserstoffen umkristallisiert, wonach man 6a-Fluor-1 lß-oxy-1,4-androstadien-3,17-dion in Form eines kristallinen Feststoffes erhielt. Zur Einführung der 1(2)-ständigen Doppelbindung können an Stelle von Mikroorganismen der Gattung Septomyxa auch Arten anderer Gattungen als der obengenannten verwendet werden.At the end of this time, the 300 cc was used as inoculum for 51 of the same glucose-corn steep liquor medium, which also contained 5 cc of an antifoam agent (a mixture of lard oil and octadecanol). The fermentation tank was placed in a water bath, brought to 28 ° C. and its contents stirred (at 300 revolutions per minute) and aerated (with 0.3 l of air per minute per 5 l of fermentation medium). After an incubation time of 20 hours, after good growth had developed, 1 g of 6a-Fluorllß-oxy-4-androstene-3,17-dione plus 0.5 g of 3-ketobisnor-4-cholen-22-al, dissolved in 16 cc of dimethylformamide, added and the incubation continued for 48 hours at the same temperature (28 ° C.) and the same aeration (final pH 8.3). The mycelium was filtered off and extracted three times with 200 cc of acetone each time. The filtered fermentation medium was extracted three times with 11% ethylene chloride each time. The acetone and methylene chloride extracts were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated, and the residue obtained was chromatographed on a column of anhydrous magnesium silicate (known under the trade name "Florisil"). The column was eluted with hexane hydrocarbons containing increasing amounts of acetone - 6 to 160 /, -. The fractions thus obtained were evaporated to dryness. The residues were subjected to infrared absorption analysis. The residues exhibiting the characteristic bands of 6a-fluoro-1 lß-oxy-1,4-adrostadiene-3,17-dione were combined and recrystallized from methylene chloride-hexane hydrocarbons, after which 6a-fluoro-1 lß-oxy-1 , 4-androstadiene-3,17-dione was obtained in the form of a crystalline solid. To introduce the 1 (2) double bond, species of other genera than those mentioned above can also be used instead of microorganisms of the genus Septomyxa.

Auf die gleiche Weise, wie oben beschrieben, wurden unter Verwendung von Septomyxa affinis ATCC 6737, jedoch ohne Zugabe eines Steroidpromotors, 6a-Fluor-4-androsten-3,11,17-trion, 6a-Fluor-17ß-oxy-4-androsten-3,11-dion, 6a-Fluor-19-nor-4-androsten-3,17-dion und 6 a-Fluor-19-nor-4-androsten-3,11,17-trion in 6 a-Fluor-1,4-androstadien-3,11,17-trion, 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3,11-dion, 6a-Fluoröstron und 6a-Fluor-11-keto-östron umgewandelt. b1) 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-on (Dehydrierung auf chemischem Wege) 0,918 g (0,003 Mol) 6a-Fluor-17ß-oxy-4-androsten-3-on, die in 18 ccm tert. Butylalkohol und 0,18 ccm Essigsäure gelöst waren, wurden mit 0,21 g gereinigter seleniger Säure 5 Stunden unter Rühren auf Rückflußtemperatur erhitzt. Danach wurden 0,12 g gereinigte selenige Säure zugegeben und das Gemisch 16 Stunden unter Rühren auf Rückflußtemperatur erhitzt. Dann wurde gekühlt, filtriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in 50 ccm Methylenchlorid gelöst, mit Wasser, zweimal mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung und wieder mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in 60 ccm Benzol gelöst und über 50 g synthetisches Magnesiumsilicat (»Florisil«) chromatographiert. Die Säule wurde dann wie folgt entwickelt: Fraktion 1 (1000 ccm) ..... Hexan-Kohlenwasserstoffe 40/, Aceton Fraktion 2 (1000 ccm) ..... Hexan-Kohlenwasserstoffe -E- 6 »/o Aceton Fraktionen 3 bis 43 (Fraktio- nen von je 50 ccm) ....... Hexan-Kohlenwasserstoffe 8 »/o Aceton das 17-Propionat, das 17-Hemusuccinat, das 17-Benzoat USW. In the same way as described above, using Septomyxa affinis ATCC 6737 but without the addition of a steroid promoter, 6a-fluoro-4-androstene-3,11,17-trione, 6a-fluoro-17ß-oxy-4- androstene-3,11-dione, 6a-fluoro-19-nor-4-androstene-3,17-dione and 6a-fluoro-19-nor-4-androstene-3,11,17-trione in 6 a- Fluoro-1,4-androstadiene-3,11,17-trione, 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadiene-3,11-dione, 6a-fluoroestrone and 6a-fluoro-11-keto-estrone . b1) 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-one (chemical dehydration) 0.918 g (0.003 mol) 6a-fluoro-17ß-oxy-4-androsten-3-one, which in 18 ccm tert. Butyl alcohol and 0.18 cc of acetic acid were dissolved, were heated to reflux temperature with 0.21 g of purified selenous acid for 5 hours while stirring. Thereafter 0.12 g of purified selenious acid was added and the mixture was heated to reflux temperature for 16 hours with stirring. It was then cooled, filtered and the filtrate evaporated to dryness in vacuo. The residue was dissolved in 50 cc of methylene chloride, washed with water, twice with saturated sodium bicarbonate solution and again with water, dried over sodium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The residue was dissolved in 60 cc of benzene and chromatographed over 50 g of synthetic magnesium silicate ("Florisil"). The column was then developed as follows: Fraction 1 (1000 ccm) ..... hexane hydrocarbons 40 /, acetone Fraction 2 (1000 ccm) ..... hexane hydrocarbons -E- 6% acetone Fractions 3 to 43 (fraction nes of 50 ccm each) ....... hexane hydrocarbons 8% acetone 17-propionate, 17-hemusuccinate, 17-benzoate, etc.

b2) 6a-Fluor-11ß,17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-on 100 mg 6a-Fluor-11ß,17ß-dioxy-4-androsten-3-on, die in 6 ccm tert. Butylalkohol und 0,55 ccm Essigsäure gelöst waren, wurden zusammen mit 30 mg Selendioxyd etwa 24 Stunden unter Rühren auf etwa 75° C erhitzt. Anschließend wurden weitere 30 mg Selendioxyd zugefügt und das Gemisch unter kontinuierlichem Rühren nochmals etwa 24 Stunden erhitzt. Dann wurde gekühlt, filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde in 50 ccm Methylenchlorid gelöst, mit Natriumbicarbonatlösung und mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel abgedampft. Der Rückstand wurde über eine Säule aus wasserfreiem Magnesiumsilicat (»Florisil(o chromatographiert. Die Säule wurde mit Hexan-Kohlenwasserstoffen, die Mengen Aceton - 5 bis 20 °/o - enthielten, eluiert. Die einzelnen Fraktionen wurden zur Trockne eingedampft und die erhaltenen Rückstände einer Infrarotabsorptionsanalyse unterzogen. Die die charakteristischen Banden des 6a-Fluor-1 lß,17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-ons aufweisenden Rückstände wurden vereinigt und aus Methylenchlorid-Hexan-Kohlenwasserstoffen umkristallisiert, worauf man 6a-Fluor-llß,17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-on in Form eines kristallinen Feststoffes erhält.b2) 6a-fluoro-11ß, 17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-one 100 mg 6a-fluoro-11ß, 17ß-dioxy-4-androsten-3-one, which in 6 ccm tert. Butyl alcohol and 0.55 cc acetic acid were dissolved together heated with 30 mg selenium dioxide for about 24 hours with stirring to about 75 ° C. Afterward another 30 mg of selenium dioxide were added and the mixture under continuous Stirring heated again for about 24 hours. It was then cooled, filtered and evaporated. The residue was dissolved in 50 cc of methylene chloride with sodium bicarbonate solution and washed with water, dried over sodium sulfate and the solvent evaporated. The residue was passed through a column of anhydrous magnesium silicate (»Florisil (o chromatographed. The column was filled with hexane hydrocarbons, the amounts of acetone - 5 to 20% - contained, eluted. The individual fractions became dry evaporated and the residue obtained subjected to infrared absorption analysis. The characteristic bands of 6a-fluoro-1ß, 17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-one containing residues were combined and made from methylene chloride-hexane hydrocarbons recrystallized, whereupon 6a-fluoro-11ß, 17ß-dioxy-1,4-androstadien-3-one in the form a crystalline solid is obtained.

Auf die gleiche Weise, wie unter b2) beschrieben, wurde aus 6a-Fluor-17ß-oxy-19-nor-4-androsten-3-on 6a-Fluoröstradiol vom Schmelzpunkt 232° C und aus 6a-Fluor-11ß,17ß-dioxy-19-nor-4-androsten-3-on 6a-Fluor-llßoxy-östradiol erhalten.In the same way as described under b2), 6a-fluoro-17ß-oxy-19-nor-4-androsten-3-one became 6a-fluoroestradiol with a melting point of 232 ° C. and from 6a-fluoro-11ß, 17ß-dioxy-19-nor-4-androsten-3-one 6α-fluoro-llβoxy-estradiol obtained.

c) Das nach a) erhaltene 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3,11-dion wurde nachfolgend in das 17-Propionat übergeführt, indem man 0,85 g 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3,11-dion in 3 ccm Pyridin löste, die Lösung mit 1,5 ccm Propionsäureanhydrid behandelte und darauf 5 Stunden stehenließ. Das Reaktionsgemisch wurde gekühlt und ihm 9 ccm Wasser tropfenweise unter Rühren zugegeben, worauf ein Feststoff ausfiel. Nach 1 Stunde wurde filtriert und der Niederschlag im Vakuum bei 70° C getrocknet. Man erhielt das 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3,11-dion-17-propionat in Form eines kristallinen Feststoffes.c) The 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadiene-3,11-dione obtained according to a) was subsequently converted into the 17-propionate by adding 0.85 g of 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadiene-3,11-dione dissolved in 3 cc of pyridine, treated the solution with 1.5 cc of propionic anhydride and then left to stand for 5 hours. The reaction mixture was cooled and it was given 9 cc of water added dropwise with stirring, whereupon a solid precipitated. After 1 hour was filtered and the precipitate was dried in vacuo at 70.degree. One received 6a-fluoro-17ß-oxy-1,4-androstadiene-3,11-dione-17-propionate in the form of a crystalline Solid.

In gleicher Weise können die übrigen d i,4-Steroidverbindungen, falls sie in 17ß-Stellung eine Hydroxylgruppe enthalten, verestert werden, wobei man auch andere Carbonsäuren oder deren Anhydride oder Halogenide an Stelle des Propionsäureanhydrids verwenden kann.In the same way, the remaining di, 4-steroid compounds, if they contain a hydroxyl group in the 17ß-position, are esterified, whereby one also other carboxylic acids or their anhydrides or halides instead of the propionic anhydride can use.

Bei Einhaltung etwa neutraler Reaktionsbedingungen und Verwendung von 6ß-Fluorsteroidverbindungen als Ausgangsstoffen werden nach den obigen Verfahren die entsprechenden 6ß-Fluorderivate erhalten. Sie können nach folgenden Verfahren in die 6a-Fluorsteroide umgewandelt werden.If approximately neutral reaction conditions and use are observed of 6ß-Fluorsteroidverbindungen as starting materials are according to the above method the corresponding 6ß-fluoro derivatives obtained. You can use the following procedure converted into the 6a-fluoro steroids.

d) Eine Lösung von 1 g 6ß-Fluor-llß-oxy-1,4-androstadien-3,17-dion in 100 ccm Chloroform und 0,1 ccm Alkohol wird auf etwa -10° C in einem Eis-Salz-Bad gekühlt und langsam ein Strom aus wasserfreiem Chlorwasserstoff etwa 2i/2 Stunden durch die Lösung geleitet, wobei die Temperatur zwischen etwa - 5 und - 15° C gehalten wird. Dann wird die Lösung mit verdünnter Natriumbicarbonatlösung und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter verringertem Druck eingedampft. Nach der Umkristallisation des Rückstandes aus Aceton-Hexan-Kohlenwasserstoffen erhält man 6a-Fluor-1 lß-oxy-1,4-androsten-3,17-dion, wie es nach Beispiel 1 hergestellt werden kann. Die Rückstände aus den Fraktionen 13 bis einschließlich 37 wurden durch Infrarotabsorptionsanalyse und Schmelzpunktsbestimmung identifiziert. Sie ergaben nach ihrer Vereinigung 0,361 g Feststoff, der, aus Methylenchlorid-Hexan-Kohlenwasserstoffen umkristallisiert, 0,308g 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-on mit einem Schmelzpunkt von 182 bis 184°C ergab. Analyse für C"H"F02: Berechnet ...................... C 74,97, H 8,08; gefunden ....................... C 74,79, H 8,31. Verwendet man an Stelle des 6a-Fluor-17ß-oxy-4-androsten-3-ons 6a-Fluor-17ß-oxy-4-androsten-3-on-17-acylate, so erhält man die entsprechenden 6a-Fluor-17ß-oxy-1,4-androstadien-3-on-17-acylate, z. B. das 17-Acetat,d) A solution of 1 g of 6β-fluoro-11β-oxy-1,4-androstadiene-3,17-dione in 100 cc of chloroform and 0.1 cc of alcohol is brought to about -10 ° C in an ice-salt bath cooled and slowly passed a stream of anhydrous hydrogen chloride for about 2½ hours through the solution, the temperature being kept between about -5 and -15 ° C. Then the solution is washed with dilute sodium bicarbonate solution and water, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated under reduced pressure. After recrystallization of the residue from acetone-hexane hydrocarbons, 6α-fluoro-1 lβ-oxy-1,4-androstene-3,17-dione, as can be prepared according to Example 1, is obtained. The residues from fractions 13 to 37 inclusive were identified by infrared absorption analysis and melting point determination. After combining, they gave 0.361 g of solid which, recrystallized from methylene chloride-hexane hydrocarbons, gave 0.308 g of 6a-fluoro-17β-oxy-1,4-androstadien-3-one with a melting point of 182 to 184.degree. Analysis for C "H" F02: Calculated ...................... C 74.97, H 8.08; found ....................... C 74.79, H 8.31. If 6a-fluoro-17ß-oxy-4-androsten-3-one is used instead of 6a-fluoro-17ß-oxy-4-androsten-3-one-17-acylate, the corresponding 6a-fluoro-17ß is obtained -oxy-1,4-androstadien-3-one-17-acylate, e.g. B. the 17-acetate,

Claims

PATENT CLAIMS: 1. Process for the preparation of therapeutically active steroid compounds of the general formulas in which R1 is an H, OH or H, acyloxy group, the acyl radical of which is derived from an organic carboxylic acid with preferably 1 to 12 carbon atoms, or is keto oxygen and R2 is hydrogen, an H, OH or keto oxygen, characterized in that one Compound of the general formula in which R represents hydrogen or the methyl group and R, and R2 have the above meaning, dehydrogenated in a manner known per se by microbiological or chemical means in the 1 (2) position, optionally acylated the dehydrogenation products containing a hydroxyl group in the 17ß-position and then acylated thereon the 3-position acyloxy group of the 3,17β-diacylates obtained is hydrolyzed and, if necessary, the 6β-fluorosteroids are converted into their 6α-fluoro-epimers.

2. The method according to claim 1, characterized in that that the microbiological dehydration with microorganisms of the genus Septomyxa in the presence of a steroid promoter and chemical dehydration with seleniger Acid or selenium dioxide. Documents considered: J. A. C. S., 79 (1957), p. 2658.