DE1084437B - Process for obtaining a red dye from Penicillium purpurogenum - Google Patents

Process for obtaining a red dye from Penicillium purpurogenum

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DE1084437B
DE1084437B DEB51444A DEB0051444A DE1084437B DE 1084437 B DE1084437 B DE 1084437B DE B51444 A DEB51444 A DE B51444A DE B0051444 A DEB0051444 A DE B0051444A DE 1084437 B DE1084437 B DE 1084437B
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penicillium purpurogenum
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Dr Isolde Schmid
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    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/40Colouring or decolouring of foods
    • A23L5/42Addition of dyes or pigments, e.g. in combination with optical brighteners
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Description

Zierfahren zur Gewinnung eines roten Farbstoffes aus Penicillium purpurogenum Es ist bekannt, daß im Laufe seines Wachstums das Mycel von Penicillium purpurogenum sich rot färbt und daß dann durch Extraktion mit organischen Lösungsmitteln daraus ein Farbstoff »Purpurogenon« isoliert werden kann, für den die Formel eines Dihydroxy-chromanobenzochinons vorgeschlagen wurde (Roberts und W a r r e n , J. Chem. S oc., London, 1955, S. 2992 ff.).Zierfahren to obtain a red dye from Penicillium purpurogenum It is known that in the course of its growth the mycelium of Penicillium purpurogenum turns red and that then by extraction with organic solvents from it a dye "purpurogenon" can be isolated, for which the formula of a dihydroxy-chromanobenzoquinone proposed (Roberts and Warren, J. Chem. S oc., London, 1955, p. 2992 ff.).

Für die Gewinnung dieses Farbstoffes war der Pilz auf verschiedenen sauren Nährmedien - gezüchtet worden, deren PH bei etwa 4 liegt (B r e n n e r, Svensk Botanisk Tidskr. 12 [1918], S.92; Raulin-Thom, Biochem. Journ., 59 [1955], S. 480). Auf diese Weise gelang es, auf 701 Nährlösung 250 g Mycel zu züchten, aus dem 21 mg Purpurogenon isoliert werden konnten.The fungus used various methods to obtain this dye acidic culture media - with a pH of around 4 (B r e n n e r, Svensk Botanisk Tidskr. 12 [1918], p.92; Raulin-Thom, Biochem. Journ., 59 [1955], P. 480). In this way it was possible to grow 250 g of mycelium on 701 nutrient solution from which 21 mg of purpurogenon could be isolated.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung eines roten Farbstoffes aus Penicillium purpurogenum in erheblich größeren Ausbeuten, da der Farbstoff zum größeren Teil in der Nährlösung enthalten ist, wodurch seine Aufarbeitung wesentlich vereinfacht ist. Dies wird dadurch erreicht, daß ein Substrat verwendet wird, in welchem der Farbstoff löslich ist. Er wird dann vorn Mycel laufend an das Substrat abgegeben und ständig neu gebildet. In der gleichen Zeit bildet dann der Pilz etwa das 500-bis 700fache an Farbstoff.The invention relates to a method for obtaining a red dye from Penicillium purpurogenum in considerably larger yields, since the dye is used for larger part is contained in the nutrient solution, which makes its processing essential is simplified. This is achieved by using a substrate in which the dye is soluble. It is then in front of the mycelium running against the substrate given up and constantly being re-formed. In the same time the fungus then forms about 500 to 700 times more dye.

Für die Durchführung des Verfahrens geeignet sind Nährlösungen, deren pH beim Beginn der Züchtung zwischen 6 und 7,5 liegt; da im Laufe des Wachstums das pg sich zur sauren Seite hin verschiebt, ist es vorteilhaft, in an sich bekannter Weise durch Zugabe eines Puffers oder durch wiederholten Zusatz eines basischen Mittels das pH nicht unter 5 absinken zu lassen. Als Puffer hat sich ein üblicher Phosphatpuffer bewährt; als basischer Zusatz erwies sich K H C 03-Lösung gut geeignet. Nach etwa 18 bis 21 Tagen wird die Kultur geerntet; der überwiegende Teil des Farbstoffes befindet sich dann in der tiefrot gefärbten Lösung, aus der dieser in bekannter Weise, z. B. durch Extraktion mit Butanol und anschließende Reinigung gewonnen wird. Die Ausbeute beträgt etwa 150 bis 200 mg pro Liter.For the implementation of the method are suitable nutrient solutions, their pH at the start of cultivation is between 6 and 7.5; because in the course of growth if the pg shifts to the acidic side, it is advantageous in itself to be more familiar Way by adding a buffer or by repeatedly adding a basic one Do not let the pH drop below 5 by means of this. As a buffer it has become a common one Phosphate buffer proven; K H C 03 solution proved to be well suited as a basic additive. The culture is harvested after about 18 to 21 days; the majority of the dye is then in the deep red colored solution, from which this is known in Way, e.g. B. is obtained by extraction with butanol and subsequent purification. The yield is about 150 to 200 mg per liter.

Zur Deutung der dabei verlaufenden Vorgänge können folgende Tatsachen dienen: Der Farbstoff ist in Säure unlöslich. An ein saures Nährmedium kann er vom Pilze nicht abgegeben werden, er reichert sich im Mycel an, und dies stellt bald die weitere Produktion ein. Da durch den Stoffwechsel des Pilzes stets auch Säuren gebildet werden, tritt nach kurzer Zeit der gleiche Zustand auch dann ein, wenn man von einem zunächst neutralen Substrat ausgeht. Verhindert man jedoch, daß die Nährlösung stärker sauer wird, so kann der Farbstoff vom Mycel ständig abgegeben und neu gebildet werden. Der so gewonnene Farbstoff ist in seinen Eigenschaften von den für Purpurogenon angegebenen teilweise verschieden; so blieben die in der Literatur beschriebenen Farbreaktionen mit Fe C 13, NaOH und H2 S 04 aus, ebenso die Fällung mit K O H. Auch aus dem Infarotspektrum läßt sich nicht auf eine Identität mit Dihydroxy-chromano-benzochinon schließen. Außer den schon genannten Unterschieden erweist sich der neue Farbstoff gegenüber den üblichen Reduktionsmitteln im Gegensatz zum Purpurogenon beständig. Es wurde bei der Hydrierung in Eisessig mit Platinoxyd während 48 Stunden kein Wasserstoff verbraucht. Auch verschwindet die rote Farbe beim Erwärmen der alkalischen Lösung mit Zinkstaub nicht, während Purpurogenon bei dieser Behandlung entfärbt wird. In pharmakologischen Untersuchungen erwies sich der erfindungsgemäße Farbstoff als völlig ungiftig, er ist deshalb zur Färbung von Lebensmitteln sowie pharmazeutischen und kosmischen Zubereitungen besonders geeignet. Die folgenden Beispiele sollen das erfindungsgemäße Verfahren deutlich machen, ohne es zu beschränken.The following facts can be used to interpret the processes involved serve: the dye is insoluble in acid. He can access an acidic nutrient medium from Mushrooms are not released, it accumulates in the mycelium, and this soon sets in further production. Because of the metabolism of the fungus there are always acids are formed, the same state occurs after a short time even if an initially neutral substrate is assumed. However, if you prevent the If the nutrient solution becomes more acidic, the mycelium can continuously release the dye and be formed anew. The dye obtained in this way is unique in its properties partly different from those given for Purpurogenon; so they stayed in the Color reactions with Fe C 13, NaOH and H2 S 04 described in the literature, as well the precipitation with K O H. Even the infrared spectrum cannot be used to identify an identity close with dihydroxy-chromano-benzoquinone. Except for the differences already mentioned the new dye turns out to be in contrast to the usual reducing agents constant to purpurogenon. It was hydrogenated in glacial acetic acid with platinum oxide no hydrogen consumed for 48 hours. The red color also disappears not when heating the alkaline solution with zinc dust, while Purpurogenon does this treatment is decolorized. In pharmacological studies it was found the dye according to the invention as completely non-toxic, it is therefore used for coloring Particularly suitable for foodstuffs as well as pharmaceutical and cosmic preparations. The following examples are intended to make the process according to the invention clear, without to limit it.

Beispiel 1 Eine Nährlösung, bestehend aus 1200g Melasse, 320 g Malzextrakt, 100 ccm 10o/oige K3 P 04 Lösung, 200 ccm 10o/oige Nag N 0.-Lösung, 20 g Pepton, 320 g Hefeextrakt, wird mit Leitungswasser auf 31 aufgefüllt und sterilisiert. Jeweils 50 ccm dieser Lösung werden auf 600 ccm verdünnt, in 1-1-Kolben abgefüllt und 1- bis 2mal bei 1 atü 30 Minuten sterilisiert. Dies Substrat wird mit einer Stammkultur von Penicillium purpurogenum Stoll beimpft und bei 30° C bebrütet.Example 1 A nutrient solution consisting of 1200 g molasses, 320 g malt extract, 100 ccm 10% K3 P 04 solution, 200 ccm 10% Nag N 0 solution, 20 g peptone, 320 g yeast extract is made up to 31 with tap water and sterilized. Respectively 50 ccm of this solution are diluted to 600 ccm, filled into 1-1 flasks and 1- Sterilized up to 2 times at 1 atm for 30 minutes. This substrate is made with a stock culture inoculated by Penicillium purpurogenum Stoll and incubated at 30 ° C.

Nach 21- Tagen wird die blutrote Lösung von dem Mycel abfiltriert und mit Butanol extrahiert. Nach dem Waschen mit angesäutertem Wasser wird der Alkohol abdestilliert und der rote Farbstoff getrocknet. *hie Ausbeute4bQträgt 190 mg pro Liter.After 21 days, the blood-red solution is filtered off from the mycelium and extracted with butanol. To washing with acidified water the alcohol is distilled off and the red dye is dried. * here yields 4bQ 190 mg per liter.

Beispiel 2 Eine Nährlösung aus 1200g Melasse, 100 ccm 10o/oige K3 P 04 Lösung, 200 ccm 10o/oige Nag N 03 Lösung, 200 g Maisquellewasserdickstoff wird mit Leitungswasser auf 3 1 aufgefüllt und sterilisiert. Wie im Beispiel 1 wird diese Stammlösung verdünnt und sterilisiert, dann wird mit einer Stammkultur von Penicillium purpurogenum Stoll beimpft und bei 30° C bebrütet. Nach 10 bis 14 Tagen hat sich eine geschlossene grüne Myceldecke gebildet, dann beginnt die Farbstoffbildung, während das p$ absinkt. Durch Zugabe von Kaliumbicarbonat wird bis zur Beendigung des Versuches das pH auf mindestens 6 gehalten. Nach 20 Tagen wird entsprechend Beispiel 1 aufgearbeitet. Die Ausbeute beträgt etwa 180 mg pro Liter.Example 2 A nutrient solution made from 1200 g molasses, 100 ccm 10% K3 P 04 solution, 200 ccm 10% Nag N 03 solution, 200 g corn spring water thickener made up to 3 l with tap water and sterilized. As in example 1, this Stock solution is diluted and sterilized, then mixed with a stock culture of Penicillium purpurogenum Stoll inoculated and incubated at 30 ° C. After 10 to 14 days a closed green mycelium cover is formed, then the dye starts to form, while the p $ sinks. Adding potassium bicarbonate to completion the pH was kept at at least 6 during the experiment. After 20 days it will be accordingly Example 1 worked up. The yield is about 180 mg per liter.

Claims (1)

PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Gewinnung eines roten Farbstoffs aus Penicillium purpurogenum durch Züchten des Mikroorganismus auf Nährlösungen, dadurch gekennzeichnet, daß man den pH-Wert der Nährlösung anfänglich zwischen 6 und 7,5 einstellt und ihn zweckmäßig während der Züchtung durch Zugabe einer Pufferlösung oder durch mehrmalige Zugabe einer basisch reagierenden Substanz auf mindestens 5 hält, worauf man nach einer Kulturdauer von 18 bis 21 Tagen den Farbstoff durch Extraktion mit Butanol gewinnt. Claim: method for obtaining a red dye from Penicillium purpurogenum by cultivating the microorganism on nutrient solutions, characterized in that the pH of the nutrient solution is initially set between 6 and 7.5 and it is expedient to adjust it during cultivation by adding a buffer solution or several times Addition of a basic substance to at least 5, whereupon, after a culture period of 18 to 21 days, the dye is obtained by extraction with butanol.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2009026923A2 (en) * 2007-08-28 2009-03-05 Dtu, Technical University Of Denmark Production of monascus-like azaphilone pigment

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009026923A2 (en) * 2007-08-28 2009-03-05 Dtu, Technical University Of Denmark Production of monascus-like azaphilone pigment
WO2009026923A3 (en) * 2007-08-28 2009-10-29 Dtu, Technical University Of Denmark Production of monascus-like azaphilone pigment

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