DE102017213200B4 - Sample Chamber, System and Method for Light Sheet Microscopy - Google Patents
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Abstract
Probenkammer (1) zur Verwendung in einer Lichtblattmikroskopie, wobei die Probenkammer (1) mit einer Immersionsflüssigkeit befüllbar ist, umfassendeine Oberseite (2) mit einer oberen Öffnung (3), durch die eine Probe in ein Inneres der Probenkammer (1) zur Beleuchtung und Betrachtung einführbar ist, wenn die Probenkammer (1) mit der Immersionsflüssigkeit befüllt ist,eine Unterseite (4) mit einer unteren Öffnung (5),eine seitliche Umwandung (6) mit mindestens einer seitlichen Durchgangsöffnung (7, 7', 7", 7"'), die von einem Objektiv (36', 36", 36"') flüssigkeitsdicht verschließbar ist,gekennzeichnet durcheine abnehmbare Bodenplatte (20), die dazu geeignet ist, die untere Öffnung (5) flüssigkeitsdicht zu verschließen.A sample chamber (1) for use in light sheet microscopy, the sample chamber (1) being fillable with an immersion liquid, comprising a top (2) having an upper opening (3) through which a sample is inserted into an interior of the sample chamber (1) for illumination and Consideration can be introduced when the sample chamber (1) is filled with the immersion liquid, a lower side (4) with a lower opening (5), a lateral wall (6) with at least one lateral passage opening (7, 7 ', 7 ", 7 "'), which is liquid-tightly closed by a lens (36', 36", 36 "'), characterized by a removable bottom plate (20) which is adapted to liquid-tightly close the lower opening (5).
Description
Die Erfindung betrifft eine modulare Probenkammer, die zur Anwendung in der Mikroskopie, insbesondere in der Fluoreszenzmikroskopie, wie zum Beispiel der Lichtblattmikroskopie, aber auch für andere mikroskopische Bildgebungsmodalitäten, wie die optische Projektionstomographie, geeignet ist.The invention relates to a modular sample chamber which is suitable for use in microscopy, in particular in fluorescence microscopy, such as light-sheet microscopy, but also for other microscopic imaging modalities, such as optical projection tomography.
Bei der Lichtblattmikroskopie wird eine Probe mit einem Fluoreszenzfarbstoff markiert oder verfügt über ausreichende Autofluoreszenz. Bei den Proben handelt es sich häufig um lebende Organismen, Organoide und Zellen. Diese werden innerhalb einer Kapillare positioniert und zum Beispiel durch Einbettung in Agarose oder Auffüllen der Kapillare mit einem Nährmedium präpariert. Häufig werden Langzeitbeobachtungen angestrebt, die über mehrere Tage oder Wochen andauern, über die die Probe am Leben erhalten und mit Nährstoffen versorgt werden muss, idealerweise ohne die Beobachtung zu unterbrechen, die Probe entnehmen zu müssen oder in das mechanischoptische Bezugssystem einzugreifen.In light sheet microscopy, a sample is labeled with a fluorescent dye or has sufficient autofluorescence. The samples are often living organisms, organoids and cells. These are positioned within a capillary and prepared for example by embedding in agarose or filling the capillary with a nutrient medium. Often, long-term observations lasting several days or weeks over which the sample must be kept alive and supplied with nutrients, ideally without interrupting the observation, taking the sample or intervening in the mechanical-optical reference system, are sought.
Die Probe wird mit einem Lichtblatt ebenenweise beleuchtet. Um ein dreidimensionales Bild von der Probe rekonstruieren zu können, muss die Probe in den Fokus eines optischen Aufbaus gebracht werden und dann eine Relativbewegung zwischen der Kapillare und dem optischen Aufbau ermöglicht werden, um mit dem Lichtblatt die Probe vollständig zu erfassen. Die Probe kann beispielsweise so gelagert sein, dass sie relativ zu einem festgelegten optischen Aufbau gedreht und verschoben werden kann, um die Probe vollständig auszuleuchten. Ferner sollte die Kapillare über ausreichend Spiel verfügen, dass auch eine innerhalb der Kapillare verrutschte Probe wieder in das Lichtblatt gerückt werden kann. Für eine optimierte Beleuchtung können zwei Beleuchtungsobjektive an gegenüberliegenden Seiten der Probe angeordnet sein. Wird die Probe beleuchtet, so wird die auftretende Fluoreszenz mittels mindestens eines senkrecht zur Beleuchtungsachse stehenden Objektivs detektiert und auf einem Sensor abgebildet.The sample is illuminated plane by layer with a light sheet. In order to be able to reconstruct a three-dimensional image of the sample, the sample must be brought into the focus of an optical setup and then a relative movement between the capillary and the optical structure be made possible to completely detect the sample with the light sheet. For example, the sample may be stored so that it can be rotated and translated relative to a predetermined optical configuration to fully illuminate the sample. Furthermore, the capillary should have sufficient clearance that even a slipped within the capillary sample can be moved back into the light sheet. For optimized illumination, two illumination lenses may be disposed on opposite sides of the sample. If the sample is illuminated, the occurring fluorescence is detected by means of at least one lens perpendicular to the illumination axis and imaged on a sensor.
Aus dem Stand der Technik sind Anordnungen bekannt, bei denen eine Kapillare, die die Probe enthält, mittels einer steuerbar beweglichen Halteeinrichtung in einer mit Flüssigkeit gefüllten Probenkammer positioniert wird, wobei die Probenkammer lichtdurchlässige Fenster für die Beleuchtung und die Detektion aufweist.Arrangements are known from the prior art in which a capillary containing the sample is positioned by means of a controllably movable holding device in a sample chamber filled with liquid, wherein the sample chamber has translucent windows for illumination and detection.
Dabei kommt es an den Übergängen vom Objektiv zur Luft und von der Luft zum Fenster der Probenkammer zu unerwünschter Brechung, die die Qualität der Mikroskopaufnahmen beeinträchtigt.It comes at the transitions from the lens to the air and from the air to the window of the sample chamber to unwanted refraction, which affects the quality of the microscope images.
Aus der Gebrauchsmusterschrift
Aus der Druckschrift
Aus der Druckschrift
Für Langzeitaufnahmen von biologischen Proben, die über mehrere Tage bis hin zu mehreren Wochen dauern, sollte die Probe wie erwähnt mit Nährstoffen versorgt werden. Gleichzeitig soll die Probe aber so wenig wie möglich bewegt werden und die Kanüle nach Möglichkeit nicht aus der Probenkammer genommen werden, um eine Schädigung der Probe zu vermeiden und die Beobachtung nicht unterbrechen zu müssen. Hierfür kann es hilfreich sein, neben einem Zugang zum oberen Ende der Kapillare auch Zugang zu einem unteren Ende der Kapillare zu haben, um die Nährstoff- oder Gaszufuhr zu ermöglichen, ohne die Kapillare aus dem Aufbau entnehmen zu müssen. Ist die Probe innerhalb einer Probenkammer positioniert, so gestaltet sich der Zugang zum unteren Ende der Kapillare schwierig. Schläuche die dort angebracht werden sollen, müssen stark umgebogen werden und können daher abknicken. Ferner können die Schläuche in den Strahlengang der Objektive gelangen wenn sie von dem unteren Ende der Kapillare nach oben geführt werden sollen. For long-term exposures of biological samples lasting from several days to several weeks, the sample should be provided with nutrients as mentioned. At the same time, however, the sample should be moved as little as possible and, if possible, the cannula should not be taken out of the sample chamber in order to avoid damaging the sample and not having to interrupt the observation. For this, it may be helpful to have access to a lower end of the capillary, in addition to access to the upper end of the capillary, to allow for nutrient or gas delivery without having to remove the capillary from the assembly. If the sample is positioned within a sample chamber, access to the lower end of the capillary is difficult. Hoses to be attached there must be bent strongly and can therefore bend. Furthermore, the tubes may enter the optical path of the lenses when they are to be guided upwards from the lower end of the capillary.
In der Fluoreszenzmikroskopie kommen außerdem verschiedene Aufbauten in Frage: Für die Lichtblattmikroskopie können zwei Objektive in einem Winkel von 90 Grad zueinander angeordnet werden, wobei ein Objektiv als Beleuchtungsobjektiv und ein Objektiv als Detektionsobjektiv betrieben wird. Ferner kann noch ein weiteres Objektiv, gegenüberliegend zum ersten Beleuchtungsobjektiv, als Beleuchtungsobjektiv fungieren, sowie ein weiteres Detektionsobjektiv, gegenüberliegend zum ersten Detektionsobjektiv angeordnet sein. In der optischen Projektionstomographie können beispielsweise ein Beleuchtungsobjektiv und ein Detektionsobjektiv gegenüber voneinander angeordnet sein. Die Anordnung der Objektive zueinander ist für die Qualität der Aufnahme entscheidend. Für die unterschiedlichen in Betracht kommenden Mikroskopieverfahren oder wenn eine Probenkammer getauscht oder manipuliert wurde, muss die Optik jedes Mal neu justiert werden.In fluorescence microscopy also different constructions come into question: For the light sheet microscopy, two lenses can be arranged at an angle of 90 degrees to each other, wherein a lens is operated as an illumination objective and a lens as a detection objective. Furthermore, a further objective, opposite the first illumination objective, can function as the illumination objective, as well as a further detection objective, opposite to the first detection objective. In optical projection tomography, for example, an illumination objective and a detection objective can be arranged opposite one another. The arrangement of the lenses to each other is crucial for the quality of the recording. For the different microscopy procedures under consideration, or when a sample chamber has been swapped or manipulated, the optics must be readjusted each time.
Aufgabe der vorliegenden Anmeldung ist es, die oben genannten Probleme zumindest zum Teil zu umgehen.The object of the present application is to at least partially circumvent the above-mentioned problems.
Hierzu wird eine modulare Probenkammer nach Anspruch 1 vorgeschlagen. Weitere Ausführungen, die bei der Umgehung der Probleme helfen, ergeben sich mit den Merkmalen der Unteransprüche und aus den Ausführungsbeispielen.For this purpose, a modular sample chamber according to
Die Funktionalität und das Innenvolumen der erfindungsgemäßen Probenkammer sind durch eine abnehmbare Bodenplatte, die mit funktionalen Elementen ausgestattet sein kann, veränderbar. In einer bestimmten Ausführung erlaubt die Bodenplatte auch einen Zugang zum unteren Ende der Kapillare. Die Probenkammer weist außerdem seitliche Durchgangsöffnungen auf, die so ausgestaltet sind, dass Immersionsobjektive direkt in die seitlichen Durchgangsöffnungen eingeführt werden können und diese flüssigkeitsdicht verschließen. So müssen Beleuchtung und Detektion nicht durch ein Fenster in der Probenkammer erfolgen. Gleichzeitig wird dadurch der optische Pfad in Relation zur Probenkammer festgelegt und somit eine Justierung vereinfacht. Durch abnehmbare Seitenplatten, die mit Fenstern ausgestattet sein können, kann allerdings die gleiche Funktionalität wie bei einer herkömmlichen Probenkammer hergestellt werden.The functionality and the internal volume of the sample chamber according to the invention are variable by a removable bottom plate, which may be equipped with functional elements. In a particular embodiment, the bottom plate also allows access to the lower end of the capillary. The sample chamber also has lateral passage openings, which are designed such that immersion objectives can be introduced directly into the lateral passage openings and seal them in a liquid-tight manner. Thus, illumination and detection need not be through a window in the sample chamber. At the same time thereby the optical path is determined in relation to the sample chamber, thus simplifying an adjustment. However, removable side panels, which may be fitted with windows, can provide the same functionality as a conventional sample chamber.
So eröffnet die Probenkammer zahlreiche unterschiedliche Möglichkeiten der Mikroskopie, insbesondere der Langzeitmikroskopie biologischer Proben.Thus, the sample chamber opens up numerous different possibilities of microscopy, in particular the long-term microscopy of biological samples.
Die Probenkammer weist in einer Ausführungsform an ihrer Unterseite oder in einem unteren Bereich Füße und/oder Aussparungen auf und/oder weist in einem oberen Bereich oder seitlich Arme auf. Diese Füße, Aussparungen oder Arme sind bei der genauen Positionierung der Probenkammer auf einer Haltevorrichtung hilfreich. Durch diese Art der Positionierung der Probenkammer kann ein festes optisch-mechanisches Bezugssystem definiert werden.In one embodiment, the sample chamber has feet and / or recesses on its underside or in a lower area and / or has arms in an upper area or laterally. These feet, recesses or arms are helpful in accurately positioning the sample chamber on a fixture. By this type of positioning of the sample chamber, a fixed optical-mechanical reference system can be defined.
Die Füße oder Aussparungen können in einer Ausführungsform auch seitlich an der Probenkammer angebracht sein und nach unten über sie hinaus ragen. Die Füße oder Aussparungen können in einer weiteren Ausführungsform auch an der Bodenplatte angebracht sein, um weiter innen zu liegen. In einer weiteren Ausführungsform sind die Füße weiter nach außen versetzt, indem sie an einer Struktur angebracht sind, die unten an der Probenkammer angebracht ist und seitlich über die Probenkammer hinausragt. Die Füße oder Aussparungen sollen eine Positionierung der Kammer auf einer dafür vorgesehenen Haltevorrichtung, zum Beispiel durch Aufstecken, ermöglichen. Die Haltevorrichtung weist in einigen Ausführungsformen zu den Füßen oder Aussparungen der Probenkammern korrespondierende Aussparungen oder Füße auf, sodass Probenkammern verschiedener Größe in der Vorrichtung verwendbar sind. Weiterhin kann die Probenkammer im Bereich der Füße oder Aussparungen oder an den Füßen Löcher oder Bohrungen zum Einbringen von Befestigungsmitteln umfassen, um eine form- und/oder kraftschlüssige Verbindung mit der Vorrichtung zur Positionierung zu ermöglichen. In einer weiteren Ausführungsform weist die Probenkammer Arme auf, die mit einer Haltevorrichtung verbindbar sind. Hierfür können die Arme und die Haltevorrichtung entsprechende Bohrungen zum Einbringen von Befestigungsmitteln aufweisen. Somit ist die Position der Probenkammer durch die Haltevorrichtung vorab festlegbar, was später die Justierung der Optik vereinfacht.The feet or recesses may also be mounted laterally on the sample chamber and project down beyond them in one embodiment. The feet or recesses may be mounted in a further embodiment also on the bottom plate to be located further inside. In another embodiment, the feet are further outwardly displaced by being attached to a structure which is attached to the bottom of the sample chamber and projects laterally beyond the sample chamber. The feet or recesses should allow positioning of the chamber on a designated holding device, for example by plugging. The holding device, in some embodiments, has recesses or feet corresponding to the feet or recesses of the sample chambers so that sample chambers of different sizes can be used in the device. Furthermore, the sample chamber in the area of the feet or recesses or on the feet may comprise holes or holes for the introduction of fasteners to allow a positive and / or non-positive connection with the device for positioning. In a further embodiment, the sample chamber has arms that can be connected to a holding device. For this purpose, the arms and the holding device may have corresponding holes for the introduction of fastening means. Thus, the position of the sample chamber is preceded by the holding device fixable, which later simplifies the adjustment of the optics.
Die Probenkammer umfasst eine seitliche Umwandung mit Durchgangsöffnungen, sowie eine obere Öffnung durch welche die Probe in das Innere der Kammer eingeführt werden kann. Weiterhin umfasst die Kammer eine Bodenplatte und eine untere Öffnung, die durch die Bodenplatte flüssigkeitsdicht verschlossen werden kann. Ebenso sind Seitenplatten vorgesehen, mit welchen sich bei Bedarf die seitlichen Öffnungen flüssigkeitsdicht verschließen lassen.The sample chamber includes a lateral wall with through-holes, and an upper opening through which the sample can be introduced into the interior of the chamber. Furthermore, the chamber comprises a bottom plate and a lower opening, which can be closed liquid-tight by the bottom plate. Likewise, side plates are provided, with which, if necessary, the side openings can be sealed liquid-tight.
Die Probenkammer ist vorzugsweise quaderförmig. In einer Ausführungsform ist die Probenkammer mit Ausnahme der abnehmbaren Bodenplatte integral gefertigt. Die Bodenplatte ist in dieser Ausführungsform für sich integral, aber separat gefertigt. Insbesondere besteht die Probenkammer in einer Ausführungsform aus einem starren Material. Die Probenkammer ist in einer Ausführungsform aus einem biokompatiblen Edelstahl oder aus Titan gefertigt, um zu verhindern, dass eine biologische Probe oder eine lebende Probe durch toxische Substanzen geschädigt wird. In einer Ausführungsform ist die Probenkammer aus einem nicht transparenten Material gefertigt.The sample chamber is preferably cuboidal. In one embodiment, the sample chamber is made integral except for the removable bottom plate. The bottom plate is integral in this embodiment, but manufactured separately. In particular, in one embodiment, the sample chamber is made of a rigid material. In one embodiment, the sample chamber is made of a biocompatible stainless steel or titanium to prevent a biological sample or live sample from being damaged by toxic substances. In one embodiment, the sample chamber is made of a non-transparent material.
Die Ausgestaltung und Anordnung der seitlichen Durchgangsöffnungen, durch welche die Beleuchtung und Detektion vorgenommen wird, ist dabei von Bedeutung. Sie sind, wie erwähnt, so konfiguriert, dass ein Objektiv eingeführt und/oder angepresst werden kann und die Öffnung damit flüssigkeitsdicht verschlossen wird. Gleichzeitig wird die Position des Objektivs in seinem eingeführten oder angepressten Zustand in Relation zur Kammer festgelegt und so seine optische Achse und sein Strahlengang, also auch die mögliche Position des Lichtblatts und die Detektionsebene festgelegt. Die Durchgangsöffnung verjüngt sich in einer Ausführungsform von außen nach innen, so dass ein Objektiv von außen angedrückt werden und ein Dichtschluss erzeugt werden kann. Weiterhin kann Dichtungsmaterial wie zum Beispiel ein Dichtungsring zwischen der Wand der Durchgangsöffnung und dem Objektiv angeordnet werden. In einer möglichen Ausgestaltung weist die Wand der Durchgangsöffnung eine Stufe auf, an die das Objektiv und der Dichtungsring angedrückt werden können. Die optische Achse des Objektivs folgt dabei üblicherweise einer geometrischen Achse der Durchgangsöffnung, die durch die Mittelpunkte oder Flächenschwerpunkte der Eintrittsöffnung der Durchgangsöffnung, die in der Außenwand der seitlichen Umwandung der Kammer liegt, und der Austrittsöffnung der Durchgangsöffnung, die in der Innenfläche der seitlichen Umwandung liegt, verläuft. Sind die Eintrittsöffnung und die Austrittsöffnung konzentrisch angeordnet, so ergeben sich eine geometrische Achse und somit eine optische Achse, die senkrecht zur Umwandung verlaufen. Es sind aber auch Durchgangsöffnungen möglich, die eine geometrische Achse besitzen, die in einem Winkel zur seitlichen Umwandung angeordnet sind, sodass Objektive schräg eingebracht werden können. Um eine Beleuchtung und Detektion einer Probe im Sinne der Lichtblattmikroskopie, wie eingangs beschreiben, zu ermöglichen, sind zum Beispiel zwei Öffnungen an gegenüberliegenden Seiten der seitlichen Umwandung so positioniert, dass ihre Achsen zusammenfallen. Darin können die Beleuchtungsobjektive angebracht werden. In einer senkrecht dazu liegenden Wand wird auf der gleichen Höhe eine Öffnung bereitgestellt, deren Achse orthogonal zu der Achse der anderen beiden Öffnungen steht. Die Achsen schneiden sich dann im Inneren der Kammer. In einer Ausführungsform sind Kammer und Objektive so konfiguriert, dass die Brennpunkte der Objektive in diesem Schnittpunkt oder in der Nähe dieses Schnittpunkts liegen. An diesen Schnittpunkt kann dann die Probe zur Beleuchtung sowie Beobachtung geführt werden. In der optischen Projektionstomographie sind hingegen die Öffnungen für die Beleuchtung und die Detektion an gegenüberliegenden Seiten angeordnet, so dass ihre Achsen zusammenfallen. In einer Ausführungsform befinden sich vier Öffnungen auf gleicher Höhe an den vier Seiten einer quaderförmigen Probenkammer, wobei die jeweils zwei gegenüberliegen Durchgangsöffnungen in Flucht zueinander liegen und sich die Achsen der Durchgangsöffnungen in der Mitte der Kammer schneiden. An diesen Schnittpunkt kann dann die Probe zur Beleuchtung sowie Beobachtung geführt werden. Es ist außerdem möglich, statt der oder zusätzlich zu den oben beschriebenen seitlichen Durchgangsöffnungen in der seitlichen Umwandung, Durchgangsöffnungen, die zum Einführen und/oder Anpressen von Objektiven wie oben geeignet sind, in austauschbaren Seitenplatten anzubringen. Dann kann durch unterschiedliche Seitenplatten mit unterschiedlichen Durchgangsöffnungen der Einsatz unterschiedlicher Objektive ermöglicht werden oder der Brennpunkt der eingeführten Objektive verschoben werden.The design and arrangement of the lateral passage openings, through which the illumination and detection is carried out, is of importance. They are, as mentioned, configured so that a lens can be inserted and / or pressed and the opening is thus sealed liquid-tight. At the same time, the position of the lens in its inserted or pressed state is determined in relation to the chamber and so its optical axis and its beam path, including the possible position of the light sheet and the detection plane set. In one embodiment, the passage opening tapers from the outside inwards, so that a lens can be pressed from the outside and a tight seal can be produced. Furthermore, sealing material such as a sealing ring between the wall of the through hole and the lens can be arranged. In one possible embodiment, the wall of the passage opening has a step to which the objective and the sealing ring can be pressed. The optical axis of the lens usually follows a geometric axis of the passage opening through the centers or centroids of the inlet opening of the through hole, which is located in the outer wall of the lateral wall of the chamber, and the outlet opening of the through hole, which is located in the inner surface of the lateral wall , runs. If the inlet opening and the outlet opening are arranged concentrically, the result is a geometric axis and thus an optical axis which run perpendicular to the wall. But there are also through holes possible, which have a geometric axis, which are arranged at an angle to the lateral conversion, so that lenses can be introduced obliquely. For example, to facilitate illumination and detection of a sample in light sheet microscopy as described above, two openings on opposite sides of the lateral wall are positioned so that their axes coincide. In it, the illumination lenses can be attached. In a wall lying perpendicular thereto an opening is provided at the same height, the axis of which is orthogonal to the axis of the other two openings. The axes then intersect inside the chamber. In one embodiment, the chamber and objectives are configured so that the focal points of the objectives are at or near that intersection. At this point of intersection, the sample can then be guided for illumination and observation. In optical projection tomography, on the other hand, the openings for the illumination and the detection are arranged on opposite sides, so that their axes coincide. In one embodiment, there are four openings at the same height on the four sides of a cuboid sample chamber, wherein the two opposite through holes are in alignment with each other and intersect the axes of the through holes in the center of the chamber. At this point of intersection, the sample can then be guided for illumination and observation. It is also possible, instead of or in addition to the above-described lateral through holes in the side panel, to provide through holes suitable for inserting and / or pressing lenses as above into replaceable side panels. Then can be made possible by different side plates with different through holes, the use of different lenses or the focus of the inserted lenses are moved.
Wenn nicht alle seitlichen Durchgangsöffnungen für Objektive benötigt werden, so können verbleibende Öffnungen mit vorzugsweise undurchsichtigen Seitenplatten, die in einer Ausführungsform aus dem gleichen Material wie die Probenkammer gefertigt sind, flüssigkeitsdicht verschlossen werden, bevor die Kammer und die Objektive positioniert werden. Um die untere Öffnung mit der Bodenplatte und die seitlichen Öffnungen mit den Seitenplatten flüssigkeitsdicht verschließen zu können, wird vorzugsweise ein Dichtungsmaterial, wie zum Beispiel ein Dichtungsring, in eine dafür vorgesehene Nut in der Bodenplatte oder den Seitenplatten eingebracht und eine formschlüssige und/oder kraftschlüssige Verbindung zwischen der Bodenplatte oder den Seitenplatten und der Kammer ermöglicht. Hierfür können die Bodenplatte und die Probenkammer entsprechende Bohrungen oder Gewindebohrungen zum Einbringen von beispielsweise Schrauben oder Bolzen aufweisen. Sind dann Unterseite und Seiten der Probenkammer flüssigkeitsdicht verschlossen, kann in die Probenkammer eine Immersionsflüssigkeit, zum Beispiel Wasser eingefüllt werden. Die Spitzen der Objektive, die vorzugsweise als Immersionsobjektive ausgebildet sind, befinden sich dann direkt in der Immersionsflüssigkeit, so dass optimale Bedingungen für die Beleuchtung sowie Detektion herrschen. Es sind außerdem auch Seitenplatten mit einem transparenten Bereich, zum Beispiel Seitenplatten, die eine Scheibe umfassen, vorgesehen. Die Scheibe kann transparent oder opak sein, sowie Filtereigenschaften aufweisen, und zum Beispiel aus Glas oder Acryl gefertigt sein. Solche Scheiben werden dann mit Luftimmersionsobjektiven verwendet, die nicht in die Durchgangsöffnungen eingeführt werden, sondern außerhalb der Kammer verbleiben und durch die Scheiben oder den transparenten Bereich der Seitenplatten die Probe beleuchten oder detektieren.Unless all the side apertures are needed for lenses, remaining apertures with preferably opaque side plates, which in one embodiment are made of the same material as the sample chamber, can be sealed in a liquid-tight manner before the chamber and objectives are positioned. In order to close the bottom opening with the bottom plate and the side openings with the side plates liquid-tight, preferably a sealing material, such as a sealing ring, is introduced into a groove provided in the bottom plate or side plates and a positive and / or non-positive connection between the bottom plate or the Side plates and the chamber allows. For this purpose, the bottom plate and the sample chamber corresponding bores or threaded holes for the introduction of, for example, screws or bolts. If the underside and sides of the sample chamber are then closed in a liquid-tight manner, an immersion liquid, for example water, can be introduced into the sample chamber. The tips of the lenses, which are preferably designed as immersion objectives, are then located directly in the immersion liquid, so that optimal conditions for illumination and detection prevail. There are also provided side plates with a transparent area, for example side plates comprising a disk. The disc may be transparent or opaque, as well as having filter properties, and be made of glass or acrylic, for example. Such disks are then used with air immersion objectives that are not inserted into the through-holes but remain outside the chamber and illuminate or detect the sample through the disks or the transparent region of the side plates.
Die Bodenplatte verfügt außerdem über Sensoren, zum Beispiel Temperatursensoren und/oder aktive Elemente, wie zum Beispiel Elemente zur Temperaturregulierung. So kann über die Bodenplatte die ins Innere der Probenkammer eingefüllte Flüssigkeit auf eine bestimmte Temperatur eingestellt werden. Für das Überleben biologischer Proben kann es notwendig sein, die Umgebungstemperatur sehr genau einstellen zu können. Das kann mit der hier vorgestellten Ausführung bewerkstelligt werden.The bottom plate also has sensors, for example, temperature sensors and / or active elements, such as elements for temperature regulation. Thus, the liquid filled into the interior of the sample chamber can be adjusted to a specific temperature via the bottom plate. For the survival of biological samples it may be necessary to be able to set the ambient temperature very accurately. This can be done with the presented version.
Wie erwähnt, kann die Probe zu ihrer Beleuchtung und Betrachtung beispielsweise in die optischen Achsen der Objektive gebracht und dort auch weiterhin bewegt werden. Eine Kapillare mit der Probe wird von oben in die Probenkammer eingeführt und oben mit einer entsprechend ausgestalteten Vorrichtung gehalten, die die Bewegung der Probe, das heißt, Translation, Senken und Anheben sowie Kippen und Rotieren der Kapillare, ermöglicht. So kann die Probe an eine für die Mikroskopie geeignete Stelle innerhalb der Kammer, zum Beispiel in den Fokus der Objektive gerückt werden, und dort rotiert werden um das Volumen der Probe schichtweise mikroskopisch zu erfassen, was eine Rekonstruktion dreidimensionaler Daten ermöglicht. Verrutscht die Probe innerhalb der Kapillare, so kann nachjustiert werden. Im Inneren der Probenkammer ist die Bewegung der Probe jedoch nicht unbegrenzt möglich, da die Kapillare, wenn sie nach unten bewegt wird, am Boden der Probenkammer anstößt. In einer Ausführungsform ist eine Bodenplatte vorgesehen, die einen Stempel aufweist, der in die untere Öffnung der Probenkammer passt und einen ebenen Boden der Probenkammer herstellt. Bei Verwendung einer solchen Bodenplatte kann jedoch insbesondere die Kapillare nicht sehr weit abgesenkt werden, da sie den Boden der Probenkammer oder die Oberseite des Stempels erreicht. In einer anderen Ausführungsform wird deshalb eine Bodenplatte vorgeschlagen, die ein Sackloch aufweist, in welches die Probe hinein gesenkt werden kann. Somit wird der Bewegungsspielraum der Kapillare nach unten vergrößert und die Detektion der Probe auch dann ermöglicht wenn die Probe innerhalb der Kapillare nach oben rutscht.As mentioned, the sample can be brought to its illumination and viewing, for example, in the optical axes of the lenses and there continue to be moved. A capillary containing the sample is introduced from above into the sample chamber and held at the top with a suitably designed device which allows movement of the sample, that is, translation, lowering and lifting, and tilting and rotating of the capillary. Thus, the sample can be moved to a location suitable for microscopy within the chamber, for example in the focus of the lenses, and rotated there to microscopically record the volume of the sample, which allows a reconstruction of three-dimensional data. If the sample slips inside the capillary, readjustment is possible. Inside the sample chamber, however, the movement of the sample is not unlimited because the capillary, when moved down, abuts the bottom of the sample chamber. In one embodiment, a bottom plate is provided having a die that fits into the bottom opening of the sample chamber and establishes a flat bottom of the sample chamber. However, when using such a bottom plate, in particular, the capillary can not be lowered very far as it reaches the bottom of the sample chamber or the top of the punch. In another embodiment, therefore, a bottom plate is proposed, which has a blind hole, in which the sample can be lowered into it. Thus, the range of motion of the capillary is increased downwards and the detection of the sample is possible even if the sample slips up inside the capillary.
Weiterhin wird eine Ausführungsform vorgeschlagen, die ein Balgensystem mit einem Loch, gefertigt aus einem flexiblen Material wie zum Beispiel Gummi, oder eine Folie mit einem Loch aufweist. Durch das Loch im Balgensystem oder in der Folie kann die Kapillare durchgeschoben werden, so dass sie auf der anderen Seite herausragt. Wird die Kapillare also von oben eingeführt, ragt der untere Teil der Kapillare unten aus der Bodenplatte heraus. Hierbei ist das Balgensystem oder die Folie so ausgestaltet, dass die in dem Loch befindliche Kapillare von dem Balgensystem oder der Folie dicht umschlossen wird, damit keine Immersionsflüssigkeit zwischen Kapillare und Balgensystem oder Folie nach außen dringen kann. Damit ist die Probenkammer weiterhin flüssigkeitsdicht, wenn die Bodenplatte mit Balgensystem oder Folie eingebracht ist und die Kapillare durch das Loch geschoben ist. Gleichzeitig sitzt die Kapillare aber so in dem Loch, dass sie weiterhin nach oben und unten verschoben und rotiert werden kann ohne dass der Dichtschluss beeinträchtigt wird. So kann die Probe, bei entsprechender gleichzeitiger Verformung des Balgensystems und/oder indem sie in dem Loch verrutscht, bei dieser Konfiguration besonders weit nach unten geschoben werden, da sie durch die Bodenplatte hindurchgeführt wird und nicht an ihr anstoßen kann. Dadurch, dass das Balgensystem oder die Folie flexibel sind, lässt sich die Kapillare weiterhin auch kippen. Eine weitere Eigenschaft einer Bodenplatte mit Balgensystem oder Folie ist, dass das untere Ende der Kapillare außerhalb der Kammer liegt und somit der Anschluss eines Flusssystems am unteren Ende der Kapillare ermöglicht wird, das zum Austausch von Nährmedien dient oder durch welches das Einbringen von Stoffen oder Substanzen möglich ist, um die Reaktion der Probe auf die Substanzen beobachten zu können.Furthermore, an embodiment is proposed, which has a bellows system with a hole made of a flexible material such as rubber, or a film with a hole. Through the hole in the bellows system or in the film, the capillary can be pushed through, so that it protrudes on the other side. If the capillary is thus inserted from above, the lower part of the capillary protrudes down from the bottom plate. Here, the bellows system or the film is designed so that the capillary located in the hole is tightly enclosed by the bellows system or the film, so that no immersion liquid between capillary and bellows system or film can escape to the outside. Thus, the sample chamber is still liquid-tight when the bottom plate is introduced with bellows system or film and the capillary is pushed through the hole. At the same time, however, the capillary sits in the hole so that it can continue to be moved up and down and rotated without the tightness is impaired. Thus, the sample, with appropriate simultaneous deformation of the bellows system and / or by slipping in the hole, in this configuration can be pushed particularly far down because it is passed through the bottom plate and can not abut it. Because the bellows system or the film is flexible, the capillary can still be tilted. Another characteristic of a bellows-type bottom plate or foil is that the lower end of the capillary lies outside the chamber and thus allows the connection of a flow system at the lower end of the capillary, which serves for the exchange of nutrient media or through the introduction of substances or substances is possible in order to observe the reaction of the sample to the substances.
Um eine wie oben beschriebene Aufnahme machen zu können, muss die Kammer nebst Objektiven in einen optischen Aufbau integriert werden. Zur Beleuchtung wird ein Laser oder eine kollimierte schmalbandige Beleuchtungsquelle benötigt, deren Strahl mit Hilfe von Spiegeln in die Beleuchtungsobjektive geleitet wird. Außerdem wird ein Sensor oder eine Kamera benötigt, um das vom Detektionsobjektiv detektierte Signal zu erfassen. Diese und mögliche andere Einheiten oder Geräte, wie zum Beispiel Linsen, können in einer Ausführungsform auf einem optischen Tisch oder einer optischen Platte mit einem Raster positioniert werden, sodass eine Verschraubung ermöglicht wird, und der Strahlengang eingestellt werden kann und gegen Verrutschen oder Verschieben gesichert ist. In einer weiteren Ausführungsform können diese Einheiten oder Geräte kompakt in ein Mikroskop integriert werden, in welches die Probenkammer eingesetzt wird.In order to make a recording as described above, the chamber must be integrated together with lenses in an optical design. For illumination, a laser or a collimated narrow-band illumination source is needed, the beam of which is guided by mirrors into the illumination objectives. In addition, a sensor or a camera is needed to detect the detected by the detection lens signal. These and possible other units or devices, such as lenses, may in one embodiment be mounted on an optical stage or on an optical disc A grid can be positioned so that a screw connection is made possible, and the beam path can be adjusted and secured against slippage or displacement. In another embodiment, these units or devices can be compactly integrated into a microscope into which the sample chamber is inserted.
Eine Eigenschaft der beschriebenen Konfigurationen ist, dass ein festes optisch-mechanisches Bezugssystem hergestellt werden kann und der Strahlengang zu den Beleuchtungsobjektiven und vom Detektionsobjektiv gleich bleibt, auch wenn die Kammer oder ihre Bodenplatte getauscht wird. Damit ein solches festes optisch-mechanisches Bezugssystem hergestellt werden kann wird in einer Ausführungsform eine Vorrichtung bereitgestellt, die die genaue Positionierung der Probenkammer in diesem Bezugssystem ermöglicht. Diese Vorrichtung besteht beispielsweise aus einer Grundplatte, die sich ebenfalls mit dem Raster eines optischen Tischs oder einer optischen Platte verschrauben lässt, sowie einem Sockel, auf den die Probenkammer aufgesteckt werden kann und einem äußeren Rahmen, so dass die Vorrichtung als eine äußere Kammer zum Aufnehmen der Probenkammer ausgebildet ist. Der äußere Rahmen ist so ausgestaltet, dass er eine Positionierung der Objektive ermöglicht. Der äußere Rahmen hat einen Durchgang, in welchen das Objektiv eingebracht werden kann oder durch welchen ein Lichtstrahl oder Laserstrahl dringen kann. Zudem können an dem äußeren Rahmen Führungsschienen befestigt werden, an welchen wiederum Objektivplatten angebracht werden können. Die Objektivplatten weisen eine Öffnung mit einem Gewinde auf, so dass ein Objektiv in die Objektivplatte eingeschraubt werden kann. Dann kann die Objektivplatte mitsamt Objektiv entlang der am äußeren Rahmen der äußeren Kammer befestigten Führungsschienen verschoben werden. So kann bei der Verwendung von Immersionsobjektiven ein Immersionsobjektiv entlang der Führungsschiene in die seitliche Durchgangsöffnung der Probenkammer eingeführt und angepresst werden oder bei Verwendung von Luftimmersionsobjektiven das Luftimmersionsobjektiv entlang der Führungsschienen verschoben werden und somit sein Brennpunkt verschoben werden. Damit das Immersionsobjektiv wie beschrieben in die seitliche Durchgangsöffnung eingeführt werden kann oder mittels eines Luftimmersionsobjektivs eine in der Kammer befindliche Probe durch eine Scheibe beleuchtet oder betrachtet werden kann, muss die Position der Probenkammer in Relation zu der äußeren Kammer und dem seitlichen Rahmen der äußeren Kammer festgelegt sein.A characteristic of the configurations described is that a fixed optical-mechanical reference system can be made and the beam path to the illumination lenses and detection lens remains the same even if the chamber or its bottom plate is replaced. In order to be able to produce such a fixed optical-mechanical reference system, in one embodiment a device is provided which enables the exact positioning of the sample chamber in this reference system. This device consists for example of a base plate, which can also be screwed to the grid of an optical table or an optical disk, and a base on which the sample chamber can be plugged and an outer frame, so that the device as an outer chamber for receiving the sample chamber is formed. The outer frame is designed to allow positioning of the lenses. The outer frame has a passage in which the lens can be inserted or through which a light beam or laser beam can penetrate. In addition, guide rails can be fastened to the outer frame, to which in turn objective plates can be attached. The lens plates have an opening with a thread, so that a lens can be screwed into the lens plate. Then, the lens plate together with the lens along the attached to the outer frame of the outer chamber guide rails can be moved. Thus, when using immersion objectives, an immersion objective along the guide rail can be introduced and pressed into the lateral passage opening of the sample chamber or, when using air immersion objectives, the air immersion objective can be displaced along the guide rails, thus shifting its focal point. In order for the immersion objective to be inserted into the lateral passage opening as described, or for a specimen located in the chamber to be illuminated or viewed through a disk by means of an air immersion objective, the position of the specimen chamber must be determined in relation to the outer chamber and the lateral frame of the outer chamber his.
Das wird in einer Ausführungsform bewerkstelligt, indem der Sockel an einer bestimmten Position auf der Grundplatte befestigt wird und der Sockel so ausgestaltet ist, dass sich die Kammer aufstecken lässt und nicht verrutschen kann und die aufgesteckte Kammer außerdem eine bestimmte Höhe hat, damit zum Beispiel die Immersionsobjektive genau auf der Höhe der seitlichen Durchgangsöffnungen sind oder die Luftimmersionsobjektive auf Höhe der Fenster der Seitenplatten sind. Damit die Kammer aufgesteckt werden kann, verfügt die Kammer über mindestens einen Fuß oder eine Aussparung an der Unterseite. Dadurch, dass der Sockel in seinem oberen Bereich eine Struktur aufweist, die komplementär zu dem Fuß/den Füßen oder der Aussparung/den Aussparungen der Probenkammer ist, wird ein Verrutschen der Probenkammer verhindert. Zusätzlich zu den Füßen oder Aussparungen oder anstatt der Füße oder Aussparungen können der Sockel und die Probenkammer auch Bohrungen, Gewindebohrungen oder Löcher aufweisen zum Einbringen von Befestigungsmitteln wie beispielsweise Schrauben oder Bolzen, so dass ein Verrutschen ebenfalls verhindert wird.This is accomplished in one embodiment by attaching the socket to a specific position on the base plate and designing the socket so that the chamber can be plugged on and can not slip and the plugged chamber also has a certain height, such as the Immersionsobjektive are exactly at the height of the lateral passage openings or the Luftimmersionsobjektive are equal to the windows of the side panels. To allow the chamber to be fitted, the chamber has at least one foot or recess at the bottom. Characterized in that the base has a structure in its upper region, which is complementary to the foot / feet or the recess / the recesses of the sample chamber, a slipping of the sample chamber is prevented. In addition to the feet or recesses or instead of the feet or recesses, the base and the sample chamber may also have holes, tapped holes or holes for the introduction of fasteners such as screws or bolts, so that slippage is also prevented.
Der Sockel hat in einer Ausführungsform außerdem eine Aussparung, die so angeordnet ist, dass ein Teil der Unterseite der Bodenplatte der aufgesteckten Probenkammer freiliegt. Dadurch wird bewirkt, dass bei Verwendung der Bodenplatte mit Balgensystem oder mit Folie bei eingesteckter Kapillare der untere Bereich der Kapillare in die Aussparung des Sockels ragt und nicht an dem Sockel anstößt und innerhalb der Aussparung auch bewegt werden kann ohne anzustoßen. In einer Ausführungsform ist die Aussparung groß genug um den Anschluss eines Flusssystems, zum Beispiel eine Schlauchs, am unteren Ende der Kapillare zu ermöglichen.The socket also has, in one embodiment, a recess arranged to expose a portion of the underside of the bottom plate of the plugged-on sample chamber. This has the effect that when using the base plate with bellows system or with foil with inserted capillary, the lower portion of the capillary protrudes into the recess of the base and does not abut the base and can also be moved within the recess without abutting. In one embodiment, the recess is large enough to allow the connection of a flow system, for example a hose, to the lower end of the capillary.
In einer möglichen Ausführungsform wird die Probenkammer durch die eingeführten Objektive an einer definierten Position gehalten, sodass der Sockel nicht benötigt wird.In one possible embodiment, the sample chamber is held by the inserted lenses at a defined position, so that the base is not needed.
In einer weiteren möglichen Ausführungsform wird, um eine genaue Positionierung der Probenkammer im Inneren der äußeren Kammer zu ermöglichen, anstatt des Sockels oder zusätzlich zu dem Sockel, die Probenkammer mit Armen ausgestattet, die mit dem seitlichen Rahmen der äußeren Kammer verbunden werden können. Die Arme sind so konfiguriert, dass die verbundene Probenkammer an einer definierten Position gehalten wird und wie oben beispielsweise die seitlichen Durchgangsöffnungen auf Höhe der Objektive gebracht werden. In einer Ausführungsform liegt die Probenkammer dabei nicht auf der Grundplatte auf, sondern weist einen definierten Abstand zur Grundplatte auf, so dass beispielsweise an der Unterseite der Bodenplatte angeschlossene Schläuche eines Flusssystems Platz finden.In another possible embodiment, to allow accurate positioning of the sample chamber within the outer chamber, instead of the pedestal or in addition to the pedestal, the sample chamber is provided with arms which can be connected to the lateral frame of the outer chamber. The arms are configured to hold the associated sample chamber at a defined position and, as above, for example, bring the lateral through openings at the level of the lenses. In one embodiment, the sample chamber is not on the base plate, but has a defined distance from the base plate, so that for example, located on the underside of the bottom plate tubes of a flow system place.
Somit ist in allen genannten Ausführungsformen der Zugang zu der Bodenplatte gewährleistet, sodass Flusssysteme, Sensoren oder aktive Elemente seitlich oder unten an der Bodenplatte angeschlossen werden können.Thus, access to the bottom plate is guaranteed in all the above embodiments, so that flow systems, sensors or active Elements can be connected laterally or down to the bottom plate.
Weiterhin ist in den oben genannten Ausführungen mit Hilfe der Arme bzw. Füße eine feste Anordnung von Probenkammer und äußerer Kammer herstellbar, bei der die Position der Probenkammer durch die äußere Kammer vorab festgelegt ist, so dass ein mechanisch-optisches Bezugssystem definiert ist. Mit Hilfe der Arme oder Füße ist es möglich, für jeden neuen Versuch, oder nach einem möglichen Eingriff in das System, verlässlich die gleichen optischen Bedingungen wiederherzustellen, indem die Optik und/oder Probenkammer gegenüber der, vorzugsweise ortsfesten, äußeren Kammer ausgerichtet wird.Furthermore, in the abovementioned embodiments with the aid of the arms or feet, a fixed arrangement of sample chamber and outer chamber can be produced, in which the position of the sample chamber is predetermined by the outer chamber, so that a mechanical-optical reference system is defined. With the help of the arms or feet, it is possible to reliably restore the same optical conditions for each new attempt, or after a possible intervention in the system, by aligning the optics and / or sample chamber with the, preferably stationary, outer chamber.
In den letzten beiden Ausführungsformen, in denen die Probenkammer direkt von den Objektiven oder mit Hilfe der Arme gehalten wird, ist außerdem der Einsatz stark unterschiedlicher Bodenplatten, zum Beispiel sehr viel größerer Bodenplatten, die nicht auf den Sockel passen, möglich.Moreover, in the last two embodiments where the sample chamber is held directly by the lenses or by means of the arms, it is possible to use widely differing floorboards, for example much larger floorboards which do not fit on the pedestal.
Die äußere Kammer kann in einer Ausführungsform in dem äußeren Rahmen Aussparungen aufweisen, durch welche ein angeschlossenes Flusssystem und/oder die Verkabelung der Sensoren oder der aktiven Elemente der Bodenplatte geführt werden können.The outer chamber may, in one embodiment, have recesses in the outer frame through which a connected flow system and / or the cabling of the sensors or the active elements of the bottom plate may be passed.
Es folgt eine Kurzbeschreibung der Figuren.
-
1 zeigt eine perspektivische Ansicht der Probenkammer mit ihren Öffnungen; -
2 zeigt die Unterseite der Probenkammer; -
3 zeigt einen Querschnitt durch die seitliche Umwandung und eine Durchgangsöffnung; -
4a zeigt eine perspektivische Ansicht der Unterseite einer Bodenplatte mit Balgensystem; -
4b zeigt eine perspektivische Ansicht der Oberseite einer Bodenplatte mit Balgensystem; -
4c zeigt eine Seitenansicht der Bodenplatte mit Balgensystem wie in4a und b, mit einer Probe; -
5a zeigt eine perspektivische Ansicht der Oberseite einer Bodenplatte mit Stempel; -
5b zeigt eine perspektivische Ansicht der Unterseite einer Bodenplatte mit Stempel; -
6a zeigt eine perspektivische Ansicht der Oberseite einer Bodenplatte mit Sackloch; -
6b zeigt eine perspektivische Ansicht der Unterseite einer Bodenplatte mit Sackloch; -
7 zeigt eine perspektivische Explosionsdarstellung eines Mikroskopaufbaus; -
8 zeigt eine Seitenansicht einer Grundplatte mit Sockel und seitlichem Rahmen; -
9 zeigt eine Draufsicht auf eine Grundplatte mit Sockel und seitlichem Rahmen; -
10a zeigt eine Seitenansicht der Grundplatte mit Sockel und auf dem Sockel montierter Probenkammer mit montierter Bodenplatte; -
10b zeigt eine Explosionsdarstellung einer Seitenansicht der Grundplatte mit Sockel, Probenkammer und Bodenplatte; -
10c zeigt eine perspektivische Ansicht der Grundplatte mit Sockel und auf dem Sockel montierter Probenkammer mit montierter Bodenplatte; -
11 zeigt einen Schnitt durch eine perspektivische Ansicht der Grundplatte mit Sockel und auf dem Sockel montierter Probenkammer mit montierter Bodenplatte mit Sackloch; -
12 zeigt eine perspektivische Ansicht der Grundplatte mit Sockel und auf dem Sockel montierter Probenkammer größerer Größe, mit montierter Bodenplatte; -
13a zeigt eine perspektivische Explosionsdarstellung der äußeren Kammer, einer Probenkammer mit Armen und einer Bodenplatte; und -
13b zeigt eine perspektivische Darstellung der äußeren Kammer, einer Probenkammer mit Armen, und einer Bodenplatte in montiertem Zustand.
-
1 shows a perspective view of the sample chamber with its openings; -
2 shows the bottom of the sample chamber; -
3 shows a cross section through the lateral conversion and a passage opening; -
4a shows a perspective view of the underside of a bottom plate with bellows system; -
4b shows a perspective view of the top of a bottom plate with bellows system; -
4c shows a side view of the bottom plate with bellows system as in4a and b, with a sample; -
5a shows a perspective view of the top of a bottom plate with stamp; -
5b shows a perspective view of the underside of a bottom plate with stamp; -
6a shows a perspective view of the top of a bottom plate with blind hole; -
6b shows a perspective view of the underside of a bottom plate with blind hole; -
7 shows an exploded perspective view of a microscope assembly; -
8th shows a side view of a base plate with base and side frame; -
9 shows a plan view of a base plate with base and side frame; -
10a shows a side view of the base plate with base and mounted on the base sample chamber with mounted bottom plate; -
10b shows an exploded view of a side view of the base plate with base, sample chamber and bottom plate; -
10c shows a perspective view of the base plate with base and mounted on the base sample chamber with mounted bottom plate; -
11 shows a section through a perspective view of the base plate with base and mounted on the base sample chamber with mounted bottom plate with blind hole; -
12 shows a perspective view of the base plate with base and on the base mounted sample chamber of larger size, with mounted bottom plate; -
13a shows an exploded perspective view of the outer chamber, a sample chamber with arms and a bottom plate; and -
13b shows a perspective view of the outer chamber, a sample chamber with arms, and a bottom plate in the assembled state.
BezugszeichenlisteLIST OF REFERENCE NUMBERS
- 1.1.
- Probenkammersample chamber
- 2.Second
- Oberseite der ProbenkammerTop of the sample chamber
- 3.Third
- Obere Öffnung der ProbenkammerUpper opening of the sample chamber
- 4.4th
- Unterseite der ProbenkammerBottom of the sample chamber
- 5.5th
- Untere Öffnung der ProbenkammerLower opening of the sample chamber
- 6.6th
- Seitliche UmwandungLateral conversion
- 7.7th
- Seitliche DurchgangsöffnungLateral passage opening
- 7'.7 '.
- Erste seitliche DurchgangsöffnungFirst lateral passage opening
- 7".7 ".
- Zweite seitliche DurchgangsöffnungSecond lateral passage opening
- 7"'.7 " '.
- Dritte seitliche DurchgangsöffnungThird lateral passage opening
- 8.8th.
- Bohrung an der Kammer zum Befestigen der SeitenplattenBore on the chamber to secure the side panels
- 9.9th
- Bohrung an der Kammer zur Befestigung der Kammer am SockelBore on the chamber to secure the chamber to the base
- 10.10th
- Aussparung an der Unterseite der ProbenkammerRecess at the bottom of the sample chamber
- 11.11th
- Fuß der ProbenkammerFoot of the sample chamber
- 12.12th
- Bohrung an der Kammer zur Befestigung der Bodenplatte an der KammerBore on the chamber for fixing the bottom plate to the chamber
- 13.13th
- Außenfläche der seitlichen UmwandungOuter surface of the lateral conversion
- 14.14th
- Innenfläche der Seitlichen UmwandungInner surface of the lateral transformation
- 15.15th
- Eintrittsöffnung der seitlichen DurchgangsöffnungEntry opening of the lateral passage opening
- 15'.15 '.
- Flächenschwerpunkt der Eintrittsöffnung der seitlichen DurchgangsöffnungCentroid of the inlet opening of the lateral passage opening
- 16.16th
- Austrittsöffnung der seitlichen DurchgangsöffnungOutlet opening of the lateral passage opening
- 16'.16 '.
- Flächenschwerpunkt der Austrittsöffnung der seitlichen DurchgangsöffnungCentroid of the outlet opening of the lateral passage opening
- 17.17th
- Wand der seitlichen DurchgangsöffnungWall of the lateral passage opening
- 18.18th
- Stufe in der Wand der seitlichen DurchgangsöffnungStage in the wall of the lateral passage opening
- 19.19th
- Achse der seitlichen DurchgangsöffnungAxis of the lateral passage opening
- 20.20th
- Bodenplattebaseplate
- 20'.20 '.
- Bodenplatte mit BalgensystemBase plate with bellows system
- 20".20 ".
- Bodenplatte mit StempelBase plate with stamp
- 20"'.20 ' ".
- Bodenplatte mit SacklochBottom plate with blind hole
- 21.21st
- Bohrung in der Bodenplatte zur Befestigung der Bodenplatte an der KammerBore in the bottom plate for fixing the bottom plate to the chamber
- 22.22nd
- Balgensystembellows system
- 23.23rd
- Durchgangsöffnung im Balgensystem zum Einführen einer ProbeThrough opening in the bellows system for introducing a sample
- 24.24th
- Aussparung in der Bodenplatte für Sensoren oder aktive ElementeRecess in the bottom plate for sensors or active elements
- 25.25th
- Nut in der Bodenplatte zum Einbringen eines DichtungsringsGroove in the bottom plate for inserting a sealing ring
- 26.26th
- Stempel auf der BodenplatteStamp on the bottom plate
- 27.27th
- Sackloch in der BodenplatteBlind hole in the bottom plate
- 28.28th
- Dichtungsring für die BodenplatteSealing ring for the bottom plate
- 29.29th
- Seitenplatteside plate
- 30.30th
- Dichtungsring für die SeitenplatteSealing ring for the side plate
- 31.31st
- Seitenscheibeside window
- 32.32nd
- Grundplattebaseplate
- 33.33rd
- Seitlicher RahmenSide frame
- 34.34th
- Äußere KammerOuter chamber
- 35.35th
- Objektivplattelensboard
- 36'.36 '.
- Erstes ObjektivFirst lens
- 36".36 ".
- Zweites ObjektivSecond lens
- 36"'.36 " '.
- Drittes ObjektivThird lens
- 37.37th
- Führungsschieneguide rail
- 38.38th
- Bohrung in der Objektivplatte zur Anbringung einer FührungsschieneHole in the lens plate for attaching a guide rail
- 39.39th
- Durchgang in der Objektivplatte zum Einbringen eines ObjektivsPassage in the lens plate for inserting a lens
- 4040
- Durchgangsbohrung in der Objektivplatte zur Befestigung der ObjektivplatteThrough hole in the lens plate for attaching the lens plate
- 41.41st
- Dichtungsring zum Einbringen zwischen Objektiv und seitlicher DurchgangsöffnungSealing ring for insertion between the lens and the side passage opening
- 42.42nd
- Bohrung im seitlichen Rahmen zur Anbringung einer FührungsschieneHole in the side frame for attaching a guide rail
- 43.43rd
- Durchgang im seitlichen Rahmen zum Einbringen eines ObjektivsPassage in the side frame for inserting a lens
- 44.44th
- Durchgangsbohrung im seitlichen Rahmen zur Befestigung der ObjektivplatteThrough hole in the side frame for attaching the lens plate
- 45.45th
- Materialaussparungmaterial cut
- 46.46th
- Sockelbase
- 47.47th
- Aussparung im SockelRecess in the base
- 48.48th
- Kapillare mit ProbeCapillary with sample
- 49.49th
- Unteres Ende der KapillareLower end of the capillary
- 50.50th
- Aussparung in der Grundplatte zum Einbringen eines BefestigungsmittelsRecess in the base plate for introducing a fastener
- 51.51st
- Arme der ProbenkammerArms of the sample chamber
- 52.52nd
- Bohrung in den Armen der ProbenkammerBore in the arms of the sample chamber
- 53.53rd
- Bohrung im seitlichen Rahmen zum Befestigen der ArmeHole in the side frame for attaching the arms
Claims (15)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE102017213200.0A DE102017213200B4 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Sample Chamber, System and Method for Light Sheet Microscopy |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE102017213200.0A DE102017213200B4 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Sample Chamber, System and Method for Light Sheet Microscopy |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE102017213200A1 DE102017213200A1 (en) | 2019-01-31 |
DE102017213200B4 true DE102017213200B4 (en) | 2019-04-18 |
Family
ID=65003946
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE102017213200.0A Expired - Fee Related DE102017213200B4 (en) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Sample Chamber, System and Method for Light Sheet Microscopy |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE102017213200B4 (en) |
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