DD154622A1 - PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE - Google Patents
PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE Download PDFInfo
- Publication number
- DD154622A1 DD154622A1 DD22533280A DD22533280A DD154622A1 DD 154622 A1 DD154622 A1 DD 154622A1 DD 22533280 A DD22533280 A DD 22533280A DD 22533280 A DD22533280 A DD 22533280A DD 154622 A1 DD154622 A1 DD 154622A1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- paper
- activated
- acid chloride
- vacuum
- dried
- Prior art date
Links
Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Stabilisierung von mit Cyanursaeurechlorid aktiviertem Papier, das zum Transfer von Verbindungen aus Trenngelen und affinitaetschromatografischen Untersuchungen verwendet wird. Es wurde gefunden, dass bei Lagerung des aktivierten, gewaschenen und im Vakuum getrockneten Papiers unter Vakuum eine Lagerungsfaehigkeit von mindestens 8 Wochen ohne Aktivitaetsverlust erreicht wird. Durch Vakuumverpackung sind die Vorraussetzungen fuer eine breite Anwendung des aktivierten Papiers ohne aufwendige Vorbereitungen gegeben.The invention relates to a process for the stabilization of cyanuric acid activated paper which is used for the transfer of compounds from separating gels and affinity chromatography studies. It has been found that storage of the activated, washed and vacuum-dried paper under vacuum achieves a storage life of at least 8 weeks without loss of activity. Vacuum packaging provides the prerequisites for a broad application of the activated paper without elaborate preparations.
Description
Dr, He-De.HungerDr, H e -D e .Hunger
"Verfahren zur Stabilisierung von mit Cyanursäurechlorid aktiviertem Papier" __«____«, __ __"Method of Stabilizing Paper Activated with Cyanuric Acid Chloride" __ "____", __ __
Anwendungsgebiet, der. ErfindungApplication area, the. invention
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Stabilisierung von mit Cyanursäurechlorid aktiviertem Papier, Das Papier findet in der Biochemie bei affinitätschromatografischen Untersuchungen Anwendung»'The invention relates to a process for the stabilization of paper activated with cyanuric acid chloride. The paper is used in biochemistry in affinity chromatographic investigations.
Charakteristik der bekannten technischen Lösungen Der Transfer von Nucleinsäuren bzw«, Proteinen wird in verstärktem Maße bei affinitätschromatografischen Untersuchungen herangezogen« . ·Characteristics of the Known Technical Solutions The transfer of nucleic acids or "proteins is increasingly used in affinity chromatographic investigations". ·
Nitrocellulose (E. M. Southern, J. Mol. Biöl. 98, 503 (1975)) ist nur für einen DHS-Transfer geeignet. Es erfolgt keine kovalente Kopplung an das Trägermaterial* Diazobenzyloxymethyl (DBM)-Papier (G. M. Wahl, M. Stern and G. R. Stark Proc. Hatl. Acad. Sei. USA 76, (1979) 3683; E. Stellwag, A. E. Dahlberg Uucl· Acid Research Vol. 8, 299 (1980)) ist zwar für kovalente Kopplung von Proteinen und Nukleinsäuren geeignet, muß aber wegen der Kurzlebigkeit der aktiven Diazogruppen immer frisch präpariert werden. Die chemische Aktivierung ist relativ aufwendigeNitrocellulose (E.M. Southern, J. Mol. Biol., 98, 503 (1975)) is only suitable for DHS transfer. There is no covalent coupling to the support material * diazobenzyloxymethyl (DBM) paper (GM Wahl, M. Stern and GR Stark Proc. Hatl, Acad., USA 76, (1979) 3683, E. Stellwag, AE Dahlberg Uucl · Acid Research Vol. 8, 299 (1980)) is indeed suitable for covalent coupling of proteins and nucleic acids, but must always be freshly prepared because of the short-lived nature of the active diazo groups. The chemical activation is relatively complicated
In Y/P C 12 D/218 847 wurde vorgeschlagen, die Kopplung von Nukleinsäuren an durch Cyanursäurechlorid aktiviertes Papier durchzuführen. In WP G 01 1/222 315 wurde vorgeschlagen, die Kopplung von lukleinsäuren bzw. Proteinen durch Elektrotransfer vorzunehmen.In Y / P C 12 D / 218 847 it has been proposed to carry out the coupling of nucleic acids to cyanuric chloride-activated paper. In WP G 01 1/222 315 it was proposed to carry out the coupling of nucleic acids or proteins by electrotransfer.
Das. aktivierte Papier ist für den Transfer sehr gut geeignet, jedoch unter Uormalbedingungen nur kurze Zeit haltbar.The. activated paper is very well suited for transfer, but it can only be stored for a short time under normal conditions.
225332225332
Ziel der Erfindung ist, ein Verfahren zur Stabilisierung von mit Gyanursäurechlorid aktiviertem Papier zu entwickeln.The aim of the invention is to develop a method for the stabilization of activated with gyanuric chloride paper.
Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention
Aufgabe der Erfindung ist die Schaffung eines Verfahrens zur Stabilisierung von mit Cyanursäurechlorid aktiviertem Papier durch geeignete Vorbehandlung·The object of the invention is to provide a process for the stabilization of paper activated with cyanuric chloride by suitable pretreatment.
Erfindungsgemäß wird mit Cyanursäurechlorid aktiviertes Pa~ pier nach Abschluß der Y/aschprozedur (2 χ Dioxan, 1 χ Dioxan/ Eisessig/Wasser, 1 χ Y/asser) im Vakuum getrocknet und anschließend unter Vakuum aufbevrahrt· Dabei kann die Aktivierung über einen längeren Zeitraum erhalten v/erden. Das Verfahren hat den Vorteil, daß das getrocknete, vakuumverpackte CC-Papier ohne Aktivitätsverluste lagerungsfähig ist,According to the invention, with cyanuric chloride activated Pa ~ pier after completion of the Y / aschprozedur (2 χ dioxane, 1 χ dioxane / glacial acetic acid / water, 1 χ Y / asser) dried in vacuo and then aufzubevrahrt under vacuum · The activation over a longer period received. The process has the advantage that the dried, vacuum-packed CC paper can be stored without loss of activity,
Es kann ohne weitere Vorbereitungen sofort für die Kopplung von Verbindungen, u. a, von Nukleinsäuren (V/P C 12 D/218 847) and von Proteinen mit üblichen Transfermethoden (Southerntechnik, Elektrotransfer usw.), eingesetzt werden.It can without further preparations immediately for the coupling of connections, u. a, of nucleic acids (V / P C 12 D / 218 847) and of proteins with customary transfer methods (Southern technology, electrotransfer etc.).
AusführunssbeisnielAusführunssbeisniel
ο ο
Runde FiIterblättchen (0,5 cm ) Whatman 540-Papier werden mit Cyanursäurechlorid aktiviert:Round Leaves (0.5 cm) Whatman 540 paper are activated with cyanuric chloride:
Kach 2 stündiger Waschung mit destilliertem Wasser bei Raumtemperatur wird das Papier 15 Min in 3 N NaOH geschüttelt, zwischen Filterpapier getrocknet und durch intensives Rühren in einer 5 %igen lösung von Cyanurchlorid in einem Gemisch Dioxan/Xylol (1:1) 30 Min aktiviert.After washing with distilled water for 2 hours at room temperature, the paper is shaken for 15 min in 3 N NaOH, dried between filter paper and activated by intensive stirring in a 5% solution of cyanuric chloride in a mixture dioxane / xylene (1: 1) for 30 min.
Danach wird das Papier je 10· mit folgenden Lösungsmitteln gewaschen: 2 χ Dioxan, 1 χ Essigsäure/Dioxan/Wasser (1:2:1),The paper is then washed 10 × each time with the following solvents: 2 × dioxane, 1 × acetic acid / dioxane / water (1: 2: 1),
1 χ Wasser. -1 χ of water. -
Das mit Cyanurchlorid aktivierte Papier (CC-Papier) wird kurz zwischen Filterpapier und anschließend im Vakuum getrocknet und im Vakuum aufbewahrt (Zimmertemperatur). Each verschiedenen Lagerungszeiten (0-56 Tage) v/urden Filterblättchen (CC-The cyanuric activated paper (CC paper) is briefly dried between filter paper and then vacuum dried and stored in vacuum (room temperature). Each different storage time (0-56 days) contains filter papers (CC-
_ 3 _ 2 2 5 3 3 2_ 3 _ 2 2 5 3 3 2
Papier) in einem DNS-Kopp!ungstest eingesetzt: Beschallte, entsalzte ^H-Maus DNS wurde vor dem Test 2 Min bei 900C geschmolzen und danach in einem Eisbad abgekühltPaper) ion test used in a DNS Kopp: Sonicated, ^ H-mouse DNA desalinated was melted before testing 2 min at 90 0 C and then cooled in an ice bath
Die Kopplung der DIJS an das aktivierte Papier erfolgte in ei- The coupling of the DIJS to the activated paper took place in a
nem Stahdardansatz (0,5 cm CC-Papier, 100 /Ul Sörensen-Puffer pH 5s5f DHS Konzentration 0,5 /Ug/yUl) durch 2 stündiges Schütteln bei 40C* . .a Stahdard approach (0.5 cm CC paper, 100 / Ul Sörensen buffer pH 5 s 5 f DHS concentration 0.5 / Ug / yUl) by shaking for 2 hours at 4 0 C *. ,
Danach wurden die Pilterblättchen mehrmals mit Wasser gewaschen, luftgetrocknet und die gebundene Radioaktivität mittels Szintillationsmessung bestimmt.Thereafter, the pilates were washed several times with water, air dried and the bound radioactivity determined by scintillation measurement.
Dabei konnte gezeigt werden, daß unter Vakuum aufbewahrte CG-Filter selbst nach 8 wo'chiger Lagerungszeit noch die volle Kopplungsalctivität zeigen (15 - 20 /Ug DUS/cm Papier)β Andere Lagerungsbedingungen (z.' B. ohne Vakuum in Folie eingeschweißt, andere Vorbehandlung der Filter) führten wegen der Hydrolyse der aktiven Cl-Gruppen zur schnellen Inaktivierung des Papiers.It could be shown that even after 8 weeks of storage time, CG filters stored under vacuum still show the full coupling activity (15-20 / Ug DUS / cm paper) β Other storage conditions (eg, welded without vacuum in foil, other pretreatment of the filters) led to rapid inactivation of the paper due to hydrolysis of the active Cl groups.
Claims (1)
Papier nach der Aktivierung mit Dioxan, Dioxan/Eisessig/Wasser und Waeser gewaschen, im Vakuum getrocknet und im Vakuum aufbewahrt wird.Process for the stabilization of cyanuric chloride activated paper, characterized in that the activated
After activation, paper is washed with dioxane, dioxane / glacial acetic acid / water and water, dried in vacuo and stored in vacuo.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD22533280A DD154622A1 (en) | 1980-11-20 | 1980-11-20 | PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD22533280A DD154622A1 (en) | 1980-11-20 | 1980-11-20 | PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD154622A1 true DD154622A1 (en) | 1982-04-07 |
Family
ID=5527327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD22533280A DD154622A1 (en) | 1980-11-20 | 1980-11-20 | PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD154622A1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0111340A2 (en) * | 1982-12-13 | 1984-06-20 | Genzyme Corporation | Binding nucleic acid to a support |
| EP0136153A2 (en) * | 1983-09-19 | 1985-04-03 | Orgenics Ltd. | Modified sheet of material and method of making and using same in connection with biochemical procedures |
-
1980
- 1980-11-20 DD DD22533280A patent/DD154622A1/en unknown
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0111340A2 (en) * | 1982-12-13 | 1984-06-20 | Genzyme Corporation | Binding nucleic acid to a support |
| EP0111340A3 (en) * | 1982-12-13 | 1987-03-25 | Integrated Genetics, Inc. | Binding nucleic acid to a support |
| EP0136153A2 (en) * | 1983-09-19 | 1985-04-03 | Orgenics Ltd. | Modified sheet of material and method of making and using same in connection with biochemical procedures |
| EP0136153A3 (en) * | 1983-09-19 | 1986-01-22 | Orgenics Ltd. | Modified sheet of material and method of making and using same in connection with biochemical procedures |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0743948B2 (en) | Separation of nucleic acids by chromatography | |
| EP0830376A1 (en) | Process for producing erythropoietin containing no animal proteins | |
| EP0000028B1 (en) | Process for the preparation of a water-insoluble enzyme composition | |
| DE2600971A1 (en) | THERAPEUTIC INSULIN PREPARATION AND PROCESS FOR MANUFACTURING A STABLE INSULIN PREPARATION WITH PERMANENT EFFECT. | |
| DE3034142C2 (en) | ||
| EP0134041A1 (en) | N-Chlorocarbonyloxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide, process for its preparation and its use | |
| EP0041180B1 (en) | Method for the concentration of nikkomycin mixtures | |
| DE3132497C2 (en) | ||
| DE1102973B (en) | Process for the production of highly purified kallikrein preparations | |
| DE3707910A1 (en) | METHOD FOR PRODUCING LOW MOLECULAR ALKALIHUMINATES | |
| DD154622A1 (en) | PROCESS FOR STABILIZING PAPER ACTIVATED WITH CYANOIC ACID CHLORIDE | |
| CH653345A5 (en) | Analogs of vasopressin. | |
| CH649090A5 (en) | Analogs of oxytocin and its manufacturing method. | |
| DE2415310C3 (en) | Process for the enzymatic production of L-malic acid | |
| DE926085C (en) | Process for the production of inhibitors of the blood coagulation system | |
| DE248886C (en) | ||
| DE2159579A1 (en) | INSULINE DERIVATIVES | |
| DE3234332C2 (en) | Production of immobilized strictosidine synthase and its use | |
| DE521126C (en) | Process for cleaning biocatalysts, such as co-enzymes and hormones as well as water-soluble vitamins | |
| Löffler et al. | Kinetische und proteinchemische Untersuchungen am Succinyl-Papain/Kinetic and Chemical Investigations of Succinyl-Papain | |
| DE3334847A1 (en) | IMMOBILIZED 5'-PHOSPHODIESTERASE, METHOD FOR THE PRODUCTION AND THEIR USE | |
| DE964137C (en) | Process for stimulating the growth of microorganisms | |
| DE939108C (en) | Process for the digestion of vitamin B, its precursor or culture fluids containing vitamin B-like substances | |
| DE2456369A1 (en) | NICKEL CATALYST | |
| DE1593194C (en) | Process for the preparation of 5-nitro-2-furfurylidenecarbazic acid-betha-chloroethyl ester |