CZ9999A3

CZ9999A3 - Krystalická forma I clarithromycinu

Info

Publication number: CZ9999A3
Application number: CZ9999A
Authority: CZ
Inventors: Jih-Hua Liu; David A. Riley; Stephen G. Spanton
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1996-07-29
Filing date: 1997-07-25
Publication date: 1999-05-12
Also published as: KR100498800B1; DK0915898T3; WO1998004573A1; JP2000515894A; ES2173056T3; ATE255589T1; BR9710768A; NZ333380A; EP0915898A1; EP0915898B1; TR199900083T2; CN1229411A; CA2627035A1; DE69726577T2; JP5290136B2; CN1216892C; KR20000029644A; AU3739797A; DE69726577D1; IL127581A

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká sloučeniny mající terapeutický význam a způsobu pro její přípravu. Přesněji, předkládaný vynález se týká nové sloučeniny 6-0-methylerythromycinu A, krystalické formy I, způsobu pro její přípravu, farmaceutických

1·^..*. »» M te*· - 0M^-· -γ» ·ι,ιι|Η·ι -η -,.·.·* Μ·ι·ίΐ· ι· —. ₅ ^,J“ <

přípravků obsahujících tuto sloučeninu a způsobů jejího použiti jako terapeutického činidla.

Dosavadní stav techniky

6-0-methylerythromycin A (clarithromycin) je semisyntetické makrolidové antibiotikum vzorce

6-0-methyl erythromycin A které vykazuje vynikající antibakteriální aktivitu proti gram-pozitivním bakteriím, některým gram-negativním bakteriím, anaerobním bakteriím, Mycoplasma a Chlamydia. Je stabilní • · φ · ♦ Φ 9

Φ' Φ · · Φ

Φ Φ ·

Φ Φ ΦΦΦ •Φ ΦΦΦΦ

Φ Φ · Φ • · · Φ Φ Φ

ΦΦΦ ΦΦΦ

Φ· za kyselých podmínek a je účinné při orálním podání.

Clarithromycin je použitelnou terapií pro infekce horního respiračního traktu u dětí a dospělých.

Popis obrázků na připojených výkresech

Obr. la, lb a lc ukazují, v příslušném pořadí, rentgenové _difrakční_Tspektrum y_prášku,^infračervené spektrum^a diferenční scaning kalorimetrický (DSC) termograf formy I

6-0-methylerythromycinu A.

Obr. 2a, 2b a 2c ukazují, v příslušném pořadí, rentgenové difrakční uapektrumvv„prášku, .-infračervené..spektrum a ..diferenčním —. scaning kalorimetrický (DSC) termograf formy II

6-0-methylerythromycinu A.

Podstata vynálezu ’

Zjistili jsme, že 6-0-methylerythromycin A může existovat v alespoň dvou různých krystalických formách, které jsou kvůli identifikaci označeny foEna I a forma II. Krystalické formy jsou identifikovány podle charakteru jejich infračerveného spektra, diferenčního scaning kalorimetrického termogramu a rentgenové difrakce v prášku. Forma I a forma II mají stejné spektrum antibakteriální aktivity, ale forma I krystalů má neočekávaně vlastní rychlost rozpouštění rovnou přibližně trojnásobku rychlosti pro krystaly formy II. Výzkum v naší laboratoři ukázal, že 6-0-methylerythromycin A při rekrystalizaci z ethanolu, tetrahydrofuranu, isopropylacetatu a isopropanolu, nebo směsí ethanolu, tetrahydrofuranu, isopropylacetatu a isopropanolu s běžnými organickými • 4 ·· • 4 · * · * fc· ♦** ··· «44V44 ·· «4 4*4 e· 4·44 44 44 rozpouštědly vede ke vzniku výlučně krystalů formy I, což doposud nebylo identifikováno,

---Léky, 'které jsou v současnostina'trhu, jsou připraveny 2****“ termodynamicky stabilnějších krystalů formy II. Proto vyžaduje příprava současných komerčních léků přeměnu krystalů formy I na formu II. Typicky je toto provedeno zahříváním krystalů formy I ve vakuu při teplotě .vyšší„než_80 ,.°C._rtProto vede objev nové formy 6-0-methylerythromycinu A, která může být připravena bez zpracování při vysoké teplotě, ke značnému zlevnění zpracování. Kromě toho, lepší charakteristiky rozpustnosti formy I vzhledem k formě II zvyšují biodostupnost antibiotika a umožňují přípravu výhodnějšího přípravku.- .....

V souladu s tím poskytuje předkládaný vynález v hlavním provedení nové krystalické antibiotikum nazvané

6-0-methylerythromycin A forma I, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

Předkládaný vynález také obsahuje farmaceutické přípravky, které obsahují terapeuticky účinné množství

6-O-methylerythromycinu A formy I v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem.

Vynález se dále týká způsobu pro léčbu bakteriálních infekcí u savců, kteří potřebují takovou léčbu, ve kterém je savcům podáno terapeuticky účinné množství formy I

6-0-methylerythromycinu A.

V jiném provedení obsahuje předkládaný vynález způsob pro přípravu formy I 6-0-methylerythromycinu A, který obsahuje:

(a) přeměnu erythromycinu A na 6-0-methylerythromycin A;

(fc>) reakci 6-0-methylerythromycinu A s rozpouštědlem 'vybraným'ze~skupiny skládající‘'sez'(i)*ethanolu7 (ii)“ ^L......^r11'· isopropylacetatu, {iii} isopropanolu, (iv) tetrahydrofuranu, a (v) směsí prvního-rozpouštědla-vybraného ze skupiny skládající se z ethanolu, isopropylacetatu, isopropanolu a .tetrahydrofuranu .a^druhého^. rozpouštědla, vybraného ..ze ,skupiny - skládající se z uhlovodíků'o 5 až 12'atomech uhlíku, ketonu o 3 až 12 atomech uhlíku, esterů karboxylové skupiny o 3 až 12 atomech uhlíku, etheru o 4 až 10 atomech uhlíku, benzenu, benzenu substituovaného jedním nebo více substituenty.vybranými ze skupiny skládájící-se z alkylu o jednom-až čtyřech atomech- -- uhlíku, alkoxy o jednom aŽ čtyřech atomech uhlíku, nitro a halogenu, a polárního rozpouštědla;

(c) izolaci krystalického 6-0-methylerythromycinu A vyrobeného v kroku (b); a (d) sušení izolátu 6-0-methylerythromycinu A kroku (c) při teplotě mezi okolní teplotou a přibližně 70 °C za vzniku

6-0-methylerythromycinu A, formy I. 6-0-methylerythromycin A je připraven methylací 6-hydroxy skupiny erythromycinu A. Nicméně, kromě 6-pozice obsahuje erythromycin A hydroxy skupiny v pozicích ll, 12, 2* a 4'a dusík ve 3' pozici, kde všechny tyto skupiny jsou potenciálně reaktivní s alkylačními činidly. Proto je nutné chránit různé reaktivní skupiny před alkylací 6-hydroxy skupiny. Representativní přípravky 6-0-methylerythromycinu.A jsou • · · ·

popsány v U.S. patentech č. 4331803, 4670549, 4672109 a 4990602 a v Evropské patentové přihlášce 260938 HB, které jsou zde uvedeny jako odkaz. Po konečném odstranění chránících skupin může' e-CKmethylerythromycin Áexisťovatjako solidní, - ——— semisolidní substance nebo jako sirup obsahující zbytková rozpouštědla z reakcí odstranění ochranných skupin,- anorganické soli a další nečistoty. Forma I 6-0-methylerythromycinu A může —: být.rekrystalizována přímo_ze,sirupu,nebo^semisolidní substance za použití rozpouštědel popsaných výše. Alternativně, pokud surový reakční produkt solidifikuje, pak může být solidní substance rekrystálizována z jakéhokoliv rozpouštědla popsaného výše. Čistá forma I 6-0-methylerythromycinu A může být získána rekrystalizaci formy II nebo směsi formy I a formy II z jakéhokoliv systému rozpouštědel popsaného výše. Termín 6-0-methylerythromycin A, jak je zde použit, znamená formu I nebo II 6-0-methylerythromycinu A v jakémkoliv stupni čistoty, nebo jejich směsi.

Termín ošetření označuje krystalizací nebo rekrystalizaci

6-0-methylerythromycinu A jak je definován výše z jakéhokoliv systému rozpouštědel popsaného výše.

Termín uhlovodík, jak je zde použit, označuje alkany s přímým nebo rozvětveným řetězcem mající vzorec Uhlovodíky použitelné ve směsích rozpouštědel podle předkládaného vynálezu zahrnují hexan, heptan, oktan a podobně.

Termín alkyl označuje monovalentní skupinu odvozenou od nasyceného uhlovodíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem pomocí odstranění jednoho atomu vodíku. Příklady alkylových skupin jsou methyl, ethyl, n- a iso-propyl, η-, sec-, iso- a

O * ? 5 · 4 4

4 4 «44 terc-butyl a podobně.

Termín keton označuje rozpouštědlo vzorce RC(O)R', kde R a

R'~ jsou alkyl' s přímým nebo s’rozvětveným řetězcem.”Ketony................

použitelné ve směsích rozpouštědel podle předkládaného vynálezu zahrnují aceton, methylethylketon, 2-, a,-3-pentanon a-podobně..

.. .„Termín estery karboxylové_skupiny^_znamená rozpouštědlo* _ vzorce RCCTR'7 kde R a R' jsou alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Estery karboxylové skupiny použitelné ve směsích rozpouštědel podle předkládaného vynálezu zahrnují methylacetat, ethylacetat, isobutylacetat a podobně.

Termín ether znamená rozpouštědlo vzorce ROR', kde R a R' jsou alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Ethery použitelné ve směsích rozpouštědel podle předkládaného vynálezu zahrnují ethylether, diisopropylether, methyl-terc-butylether a podobně.

Termín polární aprotické rozpouštědlo označuje rozpouštědla, která neobsahují hydroxy skupiny, ale mají relativně vysoký dipolový moment. Polární aprotická rozpouštědla použitelná ve směsích rozpouštědel podle předkládaného vynálezu zahrnují acetonitril,

Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO),

1,1-dimethoxyethan (DME), triamid kyseliny hexamethylfosforečné (HMPA) a podobně.

Termín farmaceuticky přijatelná sůl označuje ty soli, které jsou, v rozsahu platných lékařských znalostí, vhodné pro použití v kontaktu se tkáněmi lidí a nižších živočichů bez • * « · A A

A A A A « * • A · · A «* ·» A ·» AAAA nežádoucí toxicity, dráždění, alergické odpovědi a podobně, a které mají výhodný poměr zisk/riziko. Farmaceuticky přijatelné soli jsou v oboru dobře známé. Například, S.M. Berge et al., popisůjé^fármaceutický^přijátelné^soli^podrobně v J. —

Pharmaceutical Sciences, 1977, 66: 1 - 19. Soli mohou být připraveny in šitu v průběhu konečné izolace a přečištění sloučenin podle předkládaného vynálezu, nebo mohou být připraveny separátně, reakcí-volné.baze„S-vhodnou..organickou kyselinou. Příklady adičních solí s kyselinou zahrnují acetat, adípat, algínat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, kyselý síran, boritan, butyrat, sůl kyseliny kafrové, kamfersulfonat, citrát, cyklopentanpropionat, diglukonat, dodecylsíran, ethansulfonat, fumarat, glukoheptonat, glycerofosfat, hemisulfat, heptonat, hexanoat, hydrobromid, hydrochlorid, hydrojodid, 2-hydroxy-ethansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauryl síran, malat, maleinan, malonat, methansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrát, oleát, oxalat, palmitat, pamoat, pektinat, peroxosíran,

3-fenylpropionat, fosforečnan, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, síran, vinan, thiokyanat, toluensulfonat, undekanoat, valerat a podobně. Příkady alkalických solí nebo solí kovů alkalických zemin zahrnují soli sodíku, lithia, draslíku, vápníku, hořčíku a podobně, stejně jako netoxické amonné, kvarterní amonné a aminové kationty, včetně, ale bez omezení, amoniové soli, tetrámethylamoniové soli, tetraethylamoniové soli, methylaminu, dimethylaminu, trimethylaminu, triethylaminu, ethylaminu a podobně.

6-0-methylerythromycin A je připraven z erythromycinu A různými syntetickými způsoby. V jednom způsobu je erythromycin A přeměněn na 2'-0-3'-N-bis(benzyloxykarbonyl)-N* · ·

• ·

1*4 4 demethylerythromycin A (I).

o

6-hydroxy skupina je potom methylována reakcí s alkylačním ..... Činidlem jako je brommethan nebo jodmethan a baží. Při odstranění benzoyl-skupin-katalyt ickou hyčrogenací- a redukční methylací 3'N vzniká 6-0-methylerythromycin A. Viz U.S patent Č. 4331803.

Alternativní způsob syntesy obsahuje methylaci

6-0-methylerythromycin A-9-oximu. 6-0-methylerythromycin A-9-oxim je připraven způsoby dobře známými v oboru jako je reakce erythromycinu A s hydroxylaminhydrochloridem za přítomnosti baze, nebo reakcí s hydroxylaminem za přítomnosti .kyseliny jak je popsáno v U S patentu č.-5274085. Reakce oximu s RX, kde R je alyl nebo benzyl a X je halogen vede ke vzniku 2¹-0,3'-N-dialyl nebo dibenzylerythromycinu A-9-O-alyl nebo benzyloxim halogenidu. Methylace tyto kvarterní soli je popsána výše a je následována eliminací R skupin a deoximací za vzniku 6-0-methylerythromycinu A. Viz U S patent č. 4670549.

Při methylaci derivátů 6-0-methýlerythromycin A oximu vzorce

II « * • «

Φ · * 9 « «· · · 9 9 ·

kde R je alkyl, alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný benzyl, oxyalkyl nebo substituovaný fenylthioalkyl, R² je benzoyl a R³ je methyl nebo benzoyl, po které následuje odstranění ochranných skupin, deoximace a redukční methylace, kdy R³ je benzoyl, vzniká 6-0-methylerythromycin A. Viz U S patent č. 4672109.

Zvláště výhodný způsob přípravy 6-O-methylerythromycinu A obsahuje methylaci oximového derivátu III

kde R¹ je alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný benzyl nebo alkoxyalkyl, R² je substituovaný silyl a R³ je R²nebo H. Odstraněni ochranných skupin a deoximace je potom provedena v jednom kroku reakcí s kyselinou za vzniku ·» ·'» • ·, · · « · · · » » » * * · • Φ

6-O-methylerythromycinu A. Viz Evropská patentová přihláška 260938 B1 a U S patent č. 4990602.

................................... Výhodný způsob' přípravy”6-0-methylerythromycinu*A j e uveden”“ ve schématu 1. Erythromycin A, připravený fermentací

................ Streptomyces-erythreus, je oximován za zisku oximu 4, kde R¹ jealkoxyalkyl, Skupina R¹ může být zapracována reakcí . , erythromycinu A_se..substituovaným.hvdroxvlaminem R^ONH₂,,.nebo .

reakcí erythromycinu A s hydroxylaminhydřochloridem za přítomnosti baze, nebo s hydroxy1aminem za přítomnosti kyseliny a potom reakcí s R^X. Dvě hydroxy skupiny jsou potom chráněny simultáně tam, kde jsou R²a R³ shodné, nebo sekvenčně, tam kde _: .. jsou R² a R³ odlišné. Zejména výhodnými ochrannými skupinami jsou substituované silyl skupiny, jako je trimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl, t-butyldifenylsilyl a podobně. Ochranné skupiny jsou potom odstraněny a sloučenina je deoximovaná za zisku 6-O-methylerythromycinu A. Pořadí odstranění ochranných skupin/deoximace. není zásadní. Pokud jsou ochranné skupiny ?

substituovaný silyl, pak může být odstranění ochranných skupin a deoximace provedena v jednom kroku reakcí s kyselinou, například za.použití kyseliny mravenčí nebo kyselého siřičitanu sodného. Viz U S patent č. 4990602.

P 9 ·

9 4 • 9* 99·»

I. » β

I 9 · ·

Schéma 1

Erythromycin A »♦,1 i

Odstranění ochranných skupin

e-O-mathylerythrofTiycin A

VI *» · · ♦ · ♦ · r · i

9 9 9i * · > 4· »

Ρ · β

I 4 ♦ ··

V souladu se způsobem podle předkládaného vynálezu je 6-O-methylerythromycin A připravený jakýmkoliv způsobem popsaným výše suspendován v požadovaném rozpouštědle a zahřát

......... ·’ na přibl i žně- refluxní^- teplotu ro zpouš t ědl a. Zahřívání potom pokračuje a suspenze se míchá po dobu dostatečnou pro

- rozpuštění většinu pevné hmoty, obyčejně okolo 10 minut až 2 hodin. Suspenze se filtruje horká. Pokud je to nutné, může být _potom filtrát zahřát na přibližně, refluxní.teplotu rozpouštědla pro vznik čirého roztoku. Filtrát se potom pomalu ochladí a okolní teplotu s dalším volitelným ochlazením v ledové lázni. Pro účely této přihlášky je okolní teplota od přibližně 20 °C do přibližně 25 °C. Krystalický 6-O-methylerythromycin A je potom izolován, výhodně filtrací a vlhká pevná substance je přeměněna na formu I 6-0-methylerythromycinu A sušením ve vakuu při teplotě v rozmezí okolní teploty a přibližně 70 °C, lépe mezi 40 °C a 50 °C a při tlaku mezi tlakem 2 couly rtuti a atmosferickým tlakem pro odstranění jakéhokoliv zbývajícího rozpouštědla.

Podle jednoho aspektu předkládaného vynálezu, kde je 6-O-methylerythromycin A rekrystalizován ze směsi rozpouštědel, je 6-O-methylerythromycin A suspendován v-prvním rozpouštědle a zahřát na přibližně refluxní teplotu rozpouštědla. Zahřívání potom pokračuje a suspenze se míchá po dobu dostatečnou pro rozpuštění většinu pevné hmoty, obyčejně okolo 10 minut až 2 hodin. Suspenze se filtruje horká. Pokud je to nutné, může být potom filtrát zahřát na přibližně refluxní teplotu rozpouštědla pro vznik čirého roztoku. Potom se do horkého filtrátu přidá druhé rozpouštědlo a směs se pomalu ochladí na okolní teplotu s dalším volitelným chlazením v ledové lázni. Příklady druhých rozpouštědel zahrnují, ale nejsou omezeny na hexan, heptan,

ΦΦ ΦΦ ► Φ I ř Μ i • Φ Φ . Φ 9 <

φφ ** ·· · »· • φ φ* • _ * .

»^— φ •φ » φ φ · φ

φ

9 99 oktan, aceton, methylethylketon, 2- a 3-pentanon, methylacetat, ethylacetat, isobutylacetat, ethylether, diisopropylether, methyl t-butylether, acetonitril, N,N-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, 1,1-dimethoxyethanT^triamid kyseliny hexamethyfosforečné, benzen,'toluen a chlorbenzen. Výhodnými druhými rozpouštědly jsou uhlovodíky o 5 až-12 atomech uhlíku. Nejvýhodnějším druhým rozpouštědlem je heptan. Po ochlazení je krystalická, forma I.. 6-0-methylerythromycinu A izolována . „ filtrací a sušením, jak je popsáno výše. Přidané množství druhého rozpouštědla závisí na rozpustnosti léku v prvním rozpouštědle a druhém rozpouštědle a může být odborníkem v oboru snadno určeno. Typické poměry jsou v rozmezí od přibližně ..1.: 10 do přibližně 2:1 objemových dílů druhého rozpouštědla. Výhodný poměr prvního rozpouštědla ke druhému rozpouštědlu je 1:1 objemových dílů.

Výhodnými rozpouštědly pro izolaci formy I 6-0-methylerythromycinu A jsou ethanol, isopropylacetat, tetrahydrofuran a isopropanol.

Nejvýhodnějším rozpouštědlem pro izolaci formy I 6-0-methylerythromycinu A je ethanol. Farmaceutické přípravky

Předkládaný vynález, také poskytuje farmaceutické přípravky, které obsahují formu I 6-0-methylerythromycinu A s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými netoxickými nosiči.

Farmaceutické přípravky mohou být speciálně vyrobeny pro orální podání v pevné nebo kapalné formě, pro parenterální podání nebo pro rektální podání.

*0 ···· ·· ·* 00 ··

Farmaceutické přípravky podle předkládaného vynálezu mohou být podány lidem nebo jiným zvířatům orálně, rektálně, parenterálně, intracisternálně, intravaginálně, “intraperitoneálně, lokálně (jako-prášky·,-masti nebo kapky),-- bukálně nebo jako orální nebo nasální spraye. Termín parenterální podání, jak je zde použit, označuje způsob podání, který zahrnuje intravenosní, intramuskulární, _ ___intraperitoneální,~intrasternální,_subkutánní a intraartikulární injekci a infusi.

Farmaceutické přípravky podle předkládaného vynálezu pro parenterální podání zahrnují farmaceuticky přijatelné sterilní vodné nebo nevodné roztoky, disperze, suspenze nebo emulze, stejně jako sterilní prášky pro rekonstituci na sterilní injekční roztoky nebo disperze těsně před použitím. Příklady vhodných vodných a nevodných nosičů, ředidel, rozpouštědel nebo vehikul zahrnují vodu, ethanol, polyoly (jako je glycerol, propylenglykol, polyethylenglykol a podobně) a jejich vhodné směsi, rostlinné oleje (jako je olivový olej) a injikovatelné organické estery jako je ethyloleat. Správná tekutost může být udržována, například, použitím potahových materiálů jako je lecitin, udržováním požadované velikosti částic v případě disperzí a pomocí surfaktantů.

Přípravky mohou také obsahovat pomocná činidla jako jsou konzervační činidla, zvlhčovači činidla, emulgační činidla a dispergační činidla. Ochrana před účinky mikroorganismů může být zajištěna obsažením různých antibakteriálních a antimykotických činidel, například parabenu, chlorobutanolu, kyseliny fenolsorbové a podobně. Může být také žádoucí, aby byla obsažena izotonická činidla jako jsou cukry, chlorid sodný

444' ? a

4·4

15'

• 4

- 4-ϊ • 9 9

4« - 44 a 9 '9 9 t 9 9 a podobně. Prodloužená absorpce injekčních farmaceutických forem může být dosažena za použití činidel, které zpomalují absorpci jako je monostearan hlinitý a želatina.

I

V některých případech, pro prodloužení účinku léčiva, je žádoucí zpomalení-absorpce .léčiva ze subkutánní nebo intramuskulární injekce. Tohoto může být dosaženo za použití kapalné^suspense krystalického nebo amorfního materiálu se

- - -I w ... * . _ - — . .* „. ,^_r 'špatnou rozpustností ve vodě. Rychlost absorpce léčiva potom závisí na jeho rychlosti rozpouštění, která nakonec závisí na velikosti krystalů a jejich formě. Alternativně, zpomalená absorpce parenterálně podané formy, léčiva může být dosažena .rozpuštěním nebo suspendováním léčiva v olejovém vehikulu.

Injekční depotní formy jsou vyrobeny za použití mikrozapouzdřených matricí léčiva v biodegradovatelných polymerech jako je polylaktid-polyglykolid. Podle poměru léku k polymeru a charakteru použitého polymeru může být kontrolována rychlost uvolňování léčiva. Příklady jiných biodegradovatelných polymerů zahrnují póly{ortoestery) a póly(anhydridy). Depotní injekční přípravky jsou také připraveny zapouzdřením léčiv do liposomů nebo mikroemulsí, které jsou kompatibilní s tělesnými tkáněmi.

. Injekční přípravky mohou být sterilizovány například filtrací přes antibakteriální filtr nebo obsažením sterilizačních činidel v sterilním solidním přípravku, který může být rozpuštěn nebo dispergován ve sterilní vodě nebo sterilním injekčním mediu těsně před použitím.

Pevné dávkové formy pro orální podání zahrnují kapsle, »9 999· ·· *9 « 9 · ♦ « ♦ * • · ·«· ♦ · 9 • _ · ···_· · · 9 9 * ·* · ·9 *9 »··« · 9 9 • 9 9 9 a as 5 • •9 ··· tablety, pilulky, prášky a granule. V pevných dávkových formách je aktivní sloučenina smísena s alespoň jednou inertní, farmaceuticky přijatelnou přísadou nebo nosičem jako je citrát sodný nebo střední fosforečnanvápenatý a/nebo a) plnidly^nebo_ nastavovadly jako jsou škroby, laktosa, sacharosa, glukosa, manitol a kyselina křemičitá; b) pojivý jako je například karboxymethylcelulosa, alginaty, želatina, polyvinylpyrrolidon, sacharosa a akacie; c).,zvlhčujícími činidly jako je glycerol;

d) činidly podporujícími rozpadavost jako je agar-agar, uhličitan vápenatý, bramborový nebo tapiokový škrob, kyselina alginová, některé křemičitany a uhličitan sodný; e) činidly zpomalujícími rozpouštění jako je parafin; f) činidly urychlujícími absorpci jako- jsou kvarterní, amoniové sloučeniny; g) smáčivými Činidly jako je například cetylalkohol a glycerolmonostearat; h) absorbenty jako je kaolin a bentonitová klovatina; a i) kluznými činidly jako je talek, stearan vápenatý, stearan hořečnatý, solidní polyethylenglykoly, lauryl síran sodný a jejich směsi. V případě kapslí, tablet a pilulek mohou dávkové formy také obsahovat pufrovací činidla.

Přípravky v pevné formě podobného typu mohou být také použity jaké náplň v kapslích z tuhé a měkké želatiny za použití takových přísad jako je laktosa nebo mléčný cukr, stejně jako polyethylenglykoly o vysoké molekulové hmotnosti a podobně.

Pevné dávkové formy tablet, dražé, kapslí, pilulek a granulí mohou být připraveny s potahem a povlakem jako jsou enterální potahy dobře známé v oboru přípravy farmaceutických přípravků. Tyto mohou volitelně obsahovat činidla nepropustná pro světlo a

9««9

999 ' ·*“« 9

99«

99 ♦· ·· • * 5 · S 3 9

9' 9 9 9 9«

9,·'· ¢.=-- s - 3= β ® - = - · * 9 · mohou mít také takové složení, že budou uvolňovat aktivní složku pouze, nebo přednostně, v určitých částech střevního traktu, volitelně zpomaleným způsobem. Příklady obalových přípravků, které mohou být'použity,^-zahrnují polymerické’ substance a vosky.

Aktivní sloučeniny mohou také být - pokud je to vhodné - v mikrozapouzdřené formě za použiti jedné .nebo více z výše—. uvedených přísad.

Kapalné dávkové formy pro orální podání zahrnují farmaceuticky přijatelné emulse, roztoky, suspense, sirupy a elixíry. Kromě aktivních sloučenin mohou kapalné dávkové formy obsahovat inertní ředidla běžně používaná v oboru, jako je například voda nebo jiná rozpouštědla, solubilizační činidla a emulgační činidla jako je ethylalkohol, isopropylalkohol, ethylkarbonat, ethylacetat, benzylbenzoat, benzylalkohol, propylenglykol, 1,3-butylenglykol, dimethylformamid, oleje (zejména z bavlníkových semen, podzemnicový olej, kukuřičný olej, kličkový olej, olivový olej, ricinový olej, a sezamový olej), glycerol, tetrahydrofurfuryl alkohol, polyethylenglykoly a sorbitanové estery mastných kyselin a j-ejich směsi.

Kromě inertních ředidel mohou také orální přípravky obsahovat pomocná Činidla jako jsou zvlhčovači činidla, emulgační a suspendační činidla, sladidla, chuúová korigens a činidla upravující zápach.

Suspense mohou kromě aktivních sloučenin obsahovat suspendační činidla jako jsou například ethoxylováné isostearyl alkoholy, polyoxyethylensorbitol a sorbitanové estery.

«a*·

Ϊ8

99 * 9 9 9

9 ·

9 9 « _ .. 9 9 — •9 9999*

9 9 9 9.9 9 ·

99«. 999 _ 9j. 9

- « »' · 9 9 mikrokrystalická celulosa, metahydroxid hlinitý, bentonit, agar-agar a tragant, a jejich směsi.

—- Přípravky pro rektální nebo vaginální-podání jsou výhodně čípky, které mohou být připraveny smísením sloučenin podle předkládaného vynálezu s vhodnými nedráždivými.přísadami nebo nosiči jako je kakaové máslo, polyethylenglykol nebo vosk pro čípky, které jsou v pevném stavu při pokojové teplotě, ale v kapalném stavu při tělesné teplotě, a proto tají v rektu nebo ve vagině a uvolňují aktivní sloučeninu.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být také podány ve formě liposomů. Jak je v oboru známo, liposomy jsou obecně odvozeny od fosfolipidů nebo jiných lípidových substancí. Liposomy jsou tvořeny mono- nebo multi-lamelárními hydratovanými kapalnými krystaly, které jsou dispergovány ve vodném mediu. Může být použit jakýkoliv netoxický, fyziologicky přijatelný a metabolizovatelný lipid schopný tvorby liposomů. Přípravky podle předkládaného vynálezu ve formě liposomů mohou obsahovat, kromě sloučeniny podle předkládaného vynálezu, stabilizační činidla, konzervační činidla, přísady a podobně. Výhodnými lipidy jsou fosfolipidy a fosfatidylcholiny (lecitiny), jak přirozené, tak syntetické.

Způsoby pro výrobu liposomů jsou v oboru známé. Viz například Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, svazek XIV, Academie Press, New York, N.Y. (1976), str. 33 a dále.

Dávkové formy pro lokální podání sloučenin podle předkládaného vynálezu zahrnují prášky, spraye, masti a inhalační prostředky. Aktivní sloučenina'je smísena za *· ♦♦

4· *

4 · 4 _··4_·4· _ _# 44 44 • «

19' í»í< 1« · · •t ····

·.

4' · · ·* ·♦♦ »4 • · • = · 4 · • 4 sterilních podmínek s farmaceuticky přijatelným nosičem a jakýmkoliv potřebným konzervačním činidlem, pufrem nebo pohoným činidlem. Předkládaný vynález také obsahuje oční přípravky, oční'masti, prášky a roztoky:*-*-**-—- - <» . . . ,,

Aktuální koncentrace aktivních složek ve farmaceutických přípravcích podle předkládaného vynálezu se mohou lišit tak, .^,aby_bylo. získáno^množ_styí_aktiyní_ sloučeniny, které je účinné pro dosažení požadované terapeutické odpovědi pro určitého pacienta, přípravek a způsob podání. Vybrané koncentrace budou záviset na aktivitě určité sloučeniny, způsobu podání, závažnosti léčeného stavu a celkového stavu a jiných onemocnění pacienta, který je léčen. Nicméně, do znalostí v oboru patří začít s dávkami, které jsou nižší, než jsou dávky nutné pro dosažení požadovaného terapeutického účinku a tyto dávky postupně zvyšovat, dokud není dosažen požadovaný efekt.

Obecně jsou savcům podány dávky v rozmezí od přibližně 1 do přibližně 1000, lépe od přibližně 5 do přibližně 200 mg formy I 6-0-methylerythromycinu A na kilogram tělesné hmotnosti a den. Pokud je to žádoucí, může být účinná denní dávka rozdělena do více dávek za podání napříkl-ad dvou až čtyř jednotlivých dávek za den.

Následující příklady jsou uvedeny pro umožnění provedení předkládaného vynálezu a jsúu pouze ilustrací předkládaného vynálezu. Neměly by být považovány za omezení rozsahu předkládaného vynálezu, jak jej definují připojené patentové nároky.

«V

Žij “ ' V. .i.*· ·· -···

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 - Příprava formy I 6-0-methylerythromycinu

6-0-methylerythromycin A se připraví z erythromycinu A oximací C-9 karbonylu, chráněním..C-2 ’ a. Ct.4.’ hydroxy. skupin, ., methylací C-6 hydroxy skupiny, deoximací a odstraněním ochranných skupin.a rekrystalizací z ethanolu podle způsobu popsaného v'U.S. patentu č. 4990602. Materiál získaný z rekrystalizace se suší ve vakuové pícce (40 - 45 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I 6-0-methylerythromycinu A.

Forma I 6-0-methylerythromycinu A je charakterizována svým infračerveným spektrem, diferenčním scaning kalorimetrickým (DSC) termogramem a charakterem rentgenové difrakce v prášku. Diferenční scaning kalorimetrický termogram je získán způsoby v oboru známými a je ilustrován na obrázku lc. Na obrázku 1c je možno pozorovat exotermický přechod při 132,2 °C o kterém se soudí, že je způsoben fázovým přechodem. Endotermický pík při 223,4 °C, který může být způsoben táním, je také pozorovatelný. Jiný endotermický pík při 283,3 °C následovaný exotermickým pikem při 306,9 °C může být způsoben dekompozicí. Po DSC scanu byla barva vzorku černá.

Charakter rentgenové difrakce v prášku je získán způsoby v oboru známými. Obrázek la ilustruje charakter rentgenové difrakce v prášku. 2-theta úhlové pozice při rentgenové difrakci v prášku formy I 6-0-methylerythromycinu A jsou 5,l6°±0,2, 6,68°±0,2, 10,20°+0,2, 12,28°±O,2, 14,20°±0,2, 15,40°±0,2, 15,72°±0,2 a 16,36°±0,2.

444« • 4 4

4 · · 4' «--* · « • 4 4

4 ·« ·

4« 4»

4 4 4

4 4

4... 4

4 4

4444 ·4 '4 4 » 4 « 4 · . 4

_.. 44 4 _’·· • 4 • 4 4 4

Příklad 2 - Přeměna krystalů formy I 6-0-methylerythromycinu A na krystaly formy II ‘-“Krystaly formy I 6-0-methylerythromycinu A (0,40 g)· ........................

připravené způsobem podle příkladu 1 se umístily do zkumavky a zahřívaly se ve. vakuové pícce (4. - .9 coulů Hg, 100 - 110 °C) po dobu 18 hodin za zisku krystalů formy II g^O-methylerythromycinu.A._Forma II 6-0-methylerythromycinu A taje při 223,4 °C. V diferenčním scaning kalorimetrickém termogramu formy II 6-0-methylerythromycinu A je možno pozorovat endotermický pík při 283,3 °C, který může být způsoben rozkladem. Po DSC pokusu byla barva vzorku, černá., ......

2-theta. úhlové pozice při rentgenové difrakcí v prášku formy I 6-0-methylerythromycinu A.jsou 8,52°±0,2, 9,48°±0,2,.

1O,84°±O,2, ll,48°±0,2, U,88°±0,2, 12,36°±0,2, 13,72°±0,2,

14,12°+0,2, 15,16°±0,2, 16,48°±0,2, 16,92°±0,2, 17,32°+0,2,

18,08°+0,2, 18,40°+0,2, 19,04°±0,2, 19,88°±0,2 a 20,48°±0,2.

Příklad 3 - Izolace formy I 6-0-methylerythromycinu A pomocí rekrystalizace

Rekrystalizace z tetrahydrofuranu

Směs 6-0-methylerythromycinu A (20 g), připravená podle příkladu 1, v tetrahydrofuranu (100 ml) se zahřívá do refluxu a míchá se po dobu 15 minut. Horký roztok se filtruje pro odstranění stop nerozpustného materiálu a ochladí se na teplotu okolí. Neprobíhá žádná krystalizace, proto se do roztoku přidá 10 g 6-0-methylerythromycinu A a suspense se znovu zahřeje do refluxu, horká se filtruje a ochladí se v ledové lázni. Vzniklá solidní hmota se odebere filtrací a suší se ve vakuové pícce «4 ·444 • 44 ·

0944 4 · 4 · * • * 4

44 “22 « 444

44*4

4 ~4 4 (40 - 45 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I

6-0-methylerythromycinu A (16,74 g).

Rekrystalizace z isopropylalkoholu— -- - ........ -...Směs-6-0-methylerythromyc.inu A. (.15 g).., připravená podle příkladu 1, a isopropylalkoholu (100 ml) se ohřeje do refluxu a zahřívá se, po dobu_20 minut . Horký roztok se filtruje pro odstranění' stop· nerozpustného materiálu. Filtrát se přenese do jiné nádoby spolu s 50 ml isopropanolového výplachu a roztok se znovu zahřívá do refluxu. Čirý roztok se potom pomalu ochladí na- okolní teplotu a nechá- se stát po dobu sedmi hodin. Vzniklá . solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (40 - 45 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I

6-0-methylerythromycinu A (13,3 g).

Rekrystalizace z isopropylacetatu

Směs 6-0-methylerythromycinu A (10 g), připravená podle příkladu 1, a isopropylacetatu (100 ml) se ohřeje na 73 °C. Horký roztok se filtruje pro odstranění stop nerozpustného materiálu. Čirý roztok se potom pomalu ochladí na okolní teplotu. Vzniklá solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (40 - 45 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I 6-0-methylerythromycinu A (3,6 g).

Rekrystalizace z isopropylacetat-heptanu

Směs 6-0-methylerythromycinu A (10 g), připravená podle příkladu l, a isopropylacetatu (100 ml) se zahřívá do refluxu. Malé množství nerozpustného materiálu se odstraní filtrací

• 9* 99 · * 9 9 · · ·

Ο β 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 · · a filtrát se přenese do jiné nádoby. Filtrační.nádoba se promyje isopropylacetatem (5 ml) a filtrát a vyplach se kombinují a zahřejí se do refluxu. Do výsledného čirého roztoku

-se· přidá heptan (100 ml) a. čirv^roztok .se_ochladí na. okolní , _Ίteplotu v průběhu 1,5 hodiny, během níž se vytvoří sraženina.

..... Vzniklá .solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (45 - 50 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I 6-0-methýlerythromycínu A (7,0 g).

Rekrystalizace z isopropylacetat-N,N-dimethylformamidu

Směs. 6-0-methylerythromycinu A ..(12 g), připravená podle příkladu 1, a isopropylacetatu (100 ml) se zahřívá do refluxu. Malé množství nerozpustného materiálu se odstraní filtrací a filtrát se přenese do jiné nádoby. Filtrát se zahřeje do refluxu a přidá se N,N-dimethylformamid¹(30 ml).

Čirý roztok se ochladí na okolní teplotu v průběhu 1,5 hodiny, během níž se vytvoří sraženina. Vzniklá solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (49 - 50 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I 6-0-methylerythromycinu A (6,4 g).

Rekrystalizace z tetrahydrofuranuheptanu

Do čirého rztoku 6-0-methylerythromycinu A (10 g), připraveného podle příkladu 1, v tetrahydrofuranu (75 ml) se přidá heptan (150 ml). Vzniklý kalný roztok se zahřeje na 71,5 °C, kdy se projasní. Směs se ochladí na okolní teplotu v průběhu 2 hodin a potom se chladí v ledové lázni po dobu 0,5 hodiny. Vzniklá solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (45. - 50 °C, 3-4 coulů Hg) po dobu čtyř dní za zisku formy I 6-0-methylerythromycinu A (0,50 g) .

“’^r24 » 4 4*4 ·

4«· • · 4 4 · · · • 4« 4 4 · · • 4 4 4 · · ♦ · _ 4 4 444 444 • · ' 4 · · >· β 4 41 44 ·

Rekrystalizace z ethanol-heptanu

Směs 6-0-methylerythromycinu A {10 g) , připravená podle -příkladu^ 1, a ethanolu .(100-ml)^se»zahřívá do refluxu. Malé- _______ množství nerozpustného materiálu se odstraní filtrací a filtrát se přenese do jiné nádoby. Filtrační nádoba se promyje ethanolem (20 ml) a filtrát a výplach se kombinují a zahřívají se při 78 °C, dokud se nezíská čirý roztok. Do čirého roztoku se přidá heptan (100 ml) a čirý roztok se pomalu ochladí na okolní teplotu a míchá se po dobu čtyř dní. Vzniklá solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (45 - 50 °C, 4-8 coulů Hg) za zisku formy I

6-0-methylerythromyčinu A (4,5 g). _

Rekrystalizace z isopropanol-heptanu

Směs 6-0-methylerythromycinu A (4,0 g), připraveného podle příkladu 1, a isopropanolu (50 ml) se zahřeje do refluxu. Přidá se heptan (50 ml) a roztok se ochladí na okolní teplotu a potom se chladí v ledové lázni. Vzniklá solidní substance se získá filtrací a suší se ve vakuové pícce (4-8 coulů Hg) za zisku formy I 6-0-methylerythromycinu A (3,6 g)..

Příklad 4 - Rychlosti rozpouštění forem I a 11 6-0-methylerythromycinu A

Studie rozpustnosti byly provedeny při 60 rpm ve 300 ml 0,05

M fosfátového pufru při 37 °C za použití konstantní povrchové plochy (13/32' ' průměr) léku. Aliquoty byly odebírány periodicky a byly přímo testovány HPLC (5cm x 4,6 mm 3μ ODS-2

Little Champ {Regis) kolona; mobilní fáze 50:50 acetonitril ·· *·*·

- 0,05 M fosfátový pufr, pH 4,0; průtok 1,0 ml/min). Jak je ukázáno v tabulce 1, forma I 6-0-methylerythromycinu A má vlastní rychlost rozpouštění přibližně třikrát vyšší než forma

H - —-m»*·· -»·^»|Ιι|ΐΊ.................. .. _ , fl| ; | · . _L,, _J/Ťt,

Tabulka 1

Vlastní rychlosti rozpouštění forem I a II 6-0-methyleryťhromycinu A

Krystalická forma Rychlost rozpouštění + S.D.

........... ......{gg/min/cm²)

I -636 _± 2,5

II 203 ± 14

Popsané příklady jsou uvedeny pouze pro ilustraci a nejsou míněny jako omezení rozsahu vynálezu. Variace a změny v provedení, které jsou odborníkům v oboru jasné, spadají do rozsahu předkládaného vynálezu jak je definován připojenými patentovými nároky.

iM^MI '

·· ·« v 4··

Claims

Patentové nároky

1. Sloučenina 6-0-methylerythromycin A, forma I, *—*-4-charakterizovaná vrcholy v rentgenové* difrakci-v-prášku-* přihodnotách dvou theta 5,16°±0,2, 6,68°±0,2, 10,20°±0,2,

7l2,.28°±0,2, 14,20°±0,2, . 15,40°±0,2 . 15,72°±0,2 ,.a .16,36°±0,.2, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. Přípravek, vyznačuj i c í- se t í m, že obsahuje terapeuticky účinné množství 6-0-methylerythromycinu A, formy I, v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem.

____
3, Způsob_ l·éčbybakteriá1ηí infekce u sa vc e potřebuj.í-e-t-fro'''^ takovou léčbu, vyzná č^u^j^í__c__í___.s-e-^'t í m,' že savci je podáno terapeuticky_úě-i-nně množství 6-0-methylerythromycinu A, formy-:El
4. Způsob pro přípravu 6^0-methylérythromycinu A, formy I, vyznačující se tím, že obsahuje:

(a) přeměnu erythromycinu A na 6-0-methylerythromycin A;

(b) podrobení 6-0-methylerythromycinu A působení rozpouštědla vybraným ze skupiny skládající se z (i) ethanolu, (ii) isopropylacetatu, (iii) ' isopropanolu, (iv) tetrahydrofuranu, a (v) směsi prvního rozpouštědla vybraného ze skupiny skládající se ž ethanolu, isopropylacetatu, isopropanolu a tetrahydrofuranu a druhého rozpouštědla «· ····

Α· «9 • Λ · β · · · _··_··· . _φ.---- . _φ ·· ·* vybraného ze skupiny skládající se z uhlovodíku o 5 až 12 atomech uhlíku, ketonu o 3 až 12 atomech uhlíku, esteru karboxylové*skupiny*0“3-až 12 atomech uhlíku,— etheru o 4 až 10 atomech uhlíku, benzenu, ... ...

benzenu substituovaného jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny skládáj ící se z alkylu o jednom až čtyřech atomech uhlíku, alkoxy skupiny o jednom až čtyřech atomech uhlíku, nitro a halogenu, - - ...

__________polárního aprotického rozpouštědla;

(c) izolaci krystalického 6-0-methylerythromycinu A připraveného v kroku (b); a (d) sušení izolátu 6-0-methylerythromyčinu A kroku (c) při teplotě mezi okolní teplotou a přibližně 70 °C za vzniku 6-0-methylerythromycinu A, formy I,
5. Způsob podle nároku 4_fv yznačující se tím, že 6-O-methylerythromycin A je sušen při teplotě od přibližně 40 °C do přibližně 50 °C.
6. Způsob podle nároku 4₍ vyznačující se tím, že krok (a) obsahuje:

(i) přeměnu erythromycinu A na erythromycin A 9-oximový derivát;

(ii) chránění 2' a 4¹’ hydroxy skupin erythromycin A

28^ «9 · » « ·· « · · · · «9 * · » · ·

9 . . 9 ·___♦ 9 9 · _ 9 9 9 »'·'·' · · «9 9999 99 99

9-oximového derivátu připraveného v kroku a;

(iii) reakci produktu kroku(b) s methyiačním činidlem;

(iv) odstranění chránících skupin a deoximaci produktu kroku za vzniku 6-0-methylerythromycinu A.
7. Způsob podle nároku 6 v y z...n a. č u.j ící s e _t í m, že 6-0-methylerythromycin A je sušen při teplotě od přibližně 40_n°C. do přibližně _50 °C.
8. Způsob pro přípravu 6-0-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 7, vyznačující se tím, že rozpouštědlo je vybráno ze skupiny skládající se z (a) ethanolu, (b) isopropylacetatu, (c) isopropanolu, (d) tetrahydrofuranu.
9. Způsob pro přípravu 6-0-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 7₍ vyznačuj ící se tím, že rozpouštědlo je ethanol.
10. Způsob pro přípravu 6-0-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 7. vyznačující se tím, že rozpouštědlo obsahuje směs prvního rozpouštědla vybraného ze skupiny skládající se z ethanolu, isopropylacetatu, isopropanolu a tetrahydrofuranu a druhého rozpouštědla vybraného ze skupiny skládající se z uhlovodíku o 5 až 12 atomech uhlíku, ketonu o 3 až 12 atomech uhlíku, esteru karboxylové skupiny o 3 až 12 atomech uhlíku, ► ·0 4

I · 0 4 »··_·»!

0000 00 00 etheru o 4 až 10 atomech uhlíku, benzenu, benzenu substituovaného jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny skládající se z alkylu o jednom až čtyřech atomech uhlíku, alkoxy skupiny, o jednom až čtyřech atomech uhlíku,, nitro a „ halogenu, __ _ _ _ ___ . _ _ polárního aprotického rozpouštědla.
11. Způsob pro přípravu 6-Ó-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 10, vyznačující se tím, že druhé rozpouštědlo je uhlovodík o 5 až 10 atomech.uhlíku. ____________
12. Způsob pro přípravu 6-Ó-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 11, vyznačuj ící se tím, Se druhé rozpouštědlo je heptan.
13. Způsob pro přípravu 6-0-methylerythromycinu A, formy I, podle nároku 7vyznačující se tím, že rozpouštědlo je vybráno ze skupiny skládající se z:

(a) ethanolu, (b) isopropylacetátu, (c) isopropanolu, íd.) tetrahydrofuranu, (e) isopropylacetat-heptanu, (f) isopropylacetat-N,N-dimethylformamidu, (g) tetrahydrofuran-heptanu, (h) ethanol-heptanu, a (i) isopropanol-heptanu.

• 4 44 • * * • 4 ·4·· _ ·· 4*4·

4 · *
14. 6-0-methylerythromycin, forma I připravený způsobem podle nároku 7.