CZ462399A3 - Derivát hydrazinu, způsob jeho přípravy, jeho pOužitrafarmaceutický-prostředekykterý-ho---- obsahuje - Google Patents

Abstract

Derivát hydrazinu obecného vzorce I, kde znamenáY CO nebo SQ>, R1 nižší alkyl, alkenyl, cykloalkyl, cykloalkyl nižší alkyl, aryl nebo aiyl nižší alkyl, R2 nižší alkyl, halogen nižší alkyl, aryl nižší alkyl, aryl nižší alkenyl nebo aryl, když Y znamená SO2 a nižší alkyl, halogen nižší alkyl, nižší alkoxy, nižší alkoxykarbonyl, acyl, nižší cykloalkyl, aryl, aryl nižší alkyl, aryl nižší alkoxy nebo NR5R6, když Y znamená CO, R3 é H, nižší alkyl popřípadě substitovaný skupinou ze souboru > CN, NH2, OH, nižší alkoxy, nižší alkoxykarbonyl, heterocykl • nebo heterocyklylkarbonyl, nižší alkenyl, nižší alkinyl, nižší cykloalkyl, nižší cykloalkyl nižší alkyl, aiyl nižší alkyl, aryl nižší alkenyl, aryl nebo heterocyklyl nebo R2 a R3 dohromady 5-, 6-, nebo 7-člennou cyklickou skupinu amido, cyklickou imido, cyklickou sulfonamido nebo cyklickou urethanoskupinu, R4 nižší alkyl, nižší alkenyl, nižšá cykloalkyl, nižší cykloalkyl nižší alkyl nebo skupinu X-aryl, X-heteroaiyl nebo -(CH2)i.2-CH=CR7R8, X mezemíkovou skupinu, R5R6 na sobě nezávisle H, nižší alkyl nebo aiyl nižší alkyl aR7 a R8 spolu dohromady nižší alkylem, ve kterémje popřípadějednaCH2 nahrazena heteroatomem, ajeho farmaceuticky přijatelné soli inhibují uvolňování faktoru nádorové nekrózy, transformují růstový faktor z buněk a inhibují proliferaci keratinocytů. Jsou užitečnéjako léčiva zvláště zánětů, horečky, hemorrhagie, sepse, rheumatické artritidy, osteoartritidy, roztroušené sklerózy a lupénky.

Description

Vynález se týká derivátů hydrazinu, způsobu jejich přípravy a farmaceutických prostředků, které je obsahují. Vynález se také týká použití derivátů hydrazinu jakožto léčiv a pro výrobu farmaceutických prostředků.

Dosavadní stav techniky

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je derivát hydrazinu obecného vzorce I

kde znamená

Y skupinu CO nebo SO2,

R¹ nižší skupinu alkylovou, alkenylovou, cykloalkylovou, cykloalkyl nižší alkylovou, arylovou nebo aryl nižší alkylovou skupinu,

R² skupinu nižší alkylovou, halogen nižší alkylovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkenylovou nebo arylovou skupinu, když Y znamená skupinu SO2 a skupinu nižší alkylovou, halogen nižší alkylovou, nižší alkoxyskupi- 2 ··· · ··

nu, skupinu nižší alkoxykarbonylovou, acylovou, nižší cykloalkylovou, “ařy1ovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkoxyskupinu nebo skupinu NR⁵R⁶, když Y znamená skupinu CO,

R³ atom vodíku, nižší alkylovou skupinu popřípadě substituovanou skupinou ze souboru zahrnujícího kyanoskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, nižší alkoxyskupinu, skupinu nižší alkoxykarbonylovou, heterocyklylovou nebo heterocyk1ylkarbony 1ovou, nižší alkenylovou, nižší alkinylovou, nižší cykloalkylovou, nižší cykloalkyl nižší alkylovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkenylovoú, arylovou nebo heterocyklylovou nebo

R² a R³ spolu dohromady vytvářejí pětičlennou, šestičlennou nebo sedmičlennou cyklickou amidoskupinu, cyklickou imidoskupinu, cyklickou sulfonamidoskupinu nebo cyklickou urethanovou skupinu,

R⁴ skupinu nižší alkylovou, nižší alkenylovou, nižší cyk_l_o-a_l_k_y_l_o_v_o-u_,_nižší_C-y-k-l-O_a_l_k_y_l_nižší_a_Lk_y_l_o_v_0-U_n_e.b-0 skupinu X-arylovou, X-heteroarylovou nabo -(CHz)i - 2-CH=CR⁷R⁸ ,

X mezerníkovou skupinu,

R⁵ a R⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo aryl nižší alkylovou skupinu a

R⁷ a R⁸ spolu dohromady nižší alkylenovou skupinu, .ve které je popřípadě jedna methylenová skupina nahrazena heteroatomem, a jejich farmaceuticky přijatelných solí.

Deriváty hydrazinu podle vynálezu jsou inhibitory fak3

toru q nádorové nekrózy (TNF-α) a transformují růstový faktor (TGF-cr) uvolňovaný z buněk'. 'Inhi bu j í rovněž proliferaci keratinocytů. Proto se deriváty hydrazinu podle vynálezu mohou pouzí vat jako léčiva, zvláště pro ošet řování zánětů, horečky, hemorrhagie, sepse, rheumatické artritidy, osteoartritidy, roztroušené sklerózy a lupénky.

Na rozdíl od strukturálně podobných derivátů hydroxamové kyseliny mají deriváty hydrazinu podle vynálezu jen slabou inhibiční aktivitu se zřetelem na enzymy z rodiny matricové metal1oproteinázy (MMP), jako jsou kollagenázy, stromelyziny a gelat i názy.

(

Výrazem nižší alkyl samotným nebo v kombinaci, například jako halogen nižší alkyl a nižší cykloalkyl nižší alkyl se vždy míní alkylová skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem s až 7 atomy uhlíku, s výhodou skupinas až 4 atomy uhlíku, jako je například skupina methylová, ethylová, n-propylová, isopropylová, n-butylová, isobutylová, sek.-buty1ová, terc.-butylová, n-pentylová a n-hexylová skupina. Jako halogen nižší alkyl se příkladně uvádí skupina trif1uormethylová.

Výrazem nižší alkoxy samotným nebo v kombinaci, například jako nižší alkoxykarbony1 se vždy míní nižší alkylová skupina, shora definovaná, vázaná prostřednictvím atomu kyslíku, jako je například methoxyskupina, ethoxyskupina, n-propoxyskupina, isopropoxyskupina, n-butoxyskupina, isobutoxyskupina, a terc.-butoxyskupina. Jako nižší alkoxykarbony1 se příkladně uvádí methoxykarbony!ová a ethoxykarbony1ová skupina.

Výrazem nižší cykloalkyl samotným nebo v kombinaci, například jako nižší cykloalkyl nižší alkyl se vždy míní cykloalkylová skupina se 3 až 7 atomy uhlíku, jako je například skupina cyklopropylová, cyklobutylová, cyklopentylová, cyklohexylová a cykloheptylová skupina. Jako nižší cykloal nižší

• · · · · ·	• ·		• ·	• ·
• · ·	• ·	• ·	• ·	•	•
• · · ·	• ·		• ·	•	•
				•
• ·	• · • ·	·· ·	• · • ·	• • ·	•

alkylová skupina se příkladně uvádí skupina cyklopropylmethylová,* 2-cyklobutyl ethylová**a cyklohexylpropylová skupina.

Výrazem nižší alkenyl samotným nebo v kombinaci, například jako aryl nižší alkenyl se vždy míní alkenylová skupina se 2 až 7 atomy uhlíku, například skupina allylová, vinylová a butenylová skupina. Výrazem nižší alkinyl se vždy míní alkinylová skupina se 2 až 7 atomy uhlíku, je například skupina propargylová a butinylová.

Výrazem nižší alkylen se vždy míní alkylenová skupina se 2 až 6 atomy uhlíku, například skupina dimethylenová, tri— methylenová a tetramethylenová. Proto R⁷ a R⁸ spolu s atomem uhlíku, na který jsou vázány, znamená například kruh cyklopentanový, cyk1ohexanový nebo tetrahydropyranylový.

Výrazem acyl se vždy míní skupina odvozená od nižší al'kankarboxy 1 ové kyseliny, to je al kankarboxyl ové kyseliny s až '6 atomy uhlíku, nebo od aromatické karboxylové kyseliny. Jako .příklady takových acylových skupin se uvádějí skupina acetylová, propionylová, butyrylová, isobutyrylová, pivaloylová, benzoylová a p-chlorbenzoylová skupina.

Výrazem aryl se vždy míní skupina fenylová nebo naftylová, které jsou popřípadě substituovány například atomy halogenu, například atomy fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinou nižší alkylovou, nižší alkoxyskupinou, skupinou trifluormethylovou, hydroxylovou, nižší alkoxykarbonylovou, nitroskupinou nebo fenylovou skupinou, například skupina fenylová, 1naftylová, 2-methylfeny1ová, 4-methoxyfenylová, 2,4-difluorfenylová, 4-nitrofenylová a 4-methoxykarbonylfeny1ová skupina. Skupina benzylová, 4-chlorbenzylová, 4-brombenzylová, 3-hydroxybenzylová, 4-methoxybenzylová, 4-nitrobenzylová, 2-fenylethylová a 3,4-dimethoxyfenethylová skupina jsou typickými příklady aryl nižších alkylových skupin a benzyloxyskupina, 45

chlorbenzyloxyskupina a 4-nitrobenzyloxyskupina jsou typickými příklady aryl nižších aTkoxyskupin. 2-Fenylvinylová skupina a

3-feny1al1y1ová skupina se uvádějí jako příklady aryl nižších alkenylových skupin.

Výrazem heterocyklyl se vždy míní čtyřčlenná, pětičlenná nebo šestičlenná nasycená nebo částečně nenasycená skupina nebo pětičlenná nebo šestičlenná aromatická heterocyklická skupina, která je vázána prostřednictvím atomu uhlíku nebo skundárního atomu dusíku (to znamená skupinou -NH-), která obsahuje jeden nebo několik heteroatomů ze souboru zahrnujícího atom dusíku, síry a kyslíku a která je popřípadě substituovaná například atomy halogenu, skupinou nižší alkylovou, nižší alkoxyskupinou a/nebo oxoskupinou a/nebo popřípadě kondenzovaná s benzenovou skupinou. Jakožto příklady heterocyklylových skupin se uvádějí skupina pyrrolidinylová, pyrrolinylová, pyrazolinylová, piperidinylová, morfoliny1ová, thiamorfolinylová, tetrahydropyranylová, tetrahydrothiopyrany 1 ová, furylová, thi-^{* 1} enylová, thiazolylová, oxazolylová, isooxazoly1ová, oxethanylová, imidazolidinylová, dioxolany1ová, pyrrolylová, pyridylová, pyri midiny1ová, benzofuranylová, bénzothienylová, benzthiazolyl ová, indolylová, isoindolylová, chinolylová a isochi nolylová skupina.

Výrazem heterocyklylkarbonyl se vždy míní heterocyklylová skupina, shora uvedená, vázaná na skupinu C(0) prostřednictvím skundárního dusíkového atomu. Jakožto typický příklad takové heterocyklylkarbonylové skupiny se uvádí skupina morfo1 i nokarbony!ová.

Výrazem heteroaryl se vždy míní aromatická heterocyklická skupina, definovaná v příadě heterocykl ylové skupiny.

Cyklickými amidovými, imidovými, sulfonamidovými nebo urethanovými skupinami, vytvářenými skupinami symbolu R² a R³ a ·· ··♦· ·· atomy,* na které jsou vázány, to znamená skupiny symbolu Y, nebo na atom dusíku, obecného vzorce (a) až (g), kde znamená R^b spolu vytvářejí zbytek aromatického kruhu:

atomy uhlíku nebo síry jsou například skupiny n 3, 4 nebo 5 a R^a a nebo cykloalkanového

Výhodnými mezerníkovými skupinami symbolu X jsou skupiny vzorce -(CHz)1-5-, -CHz-CH=CH-, -CHz-C=C, -CHz-NHCO-, -(CHz)i nebo 2NHCONH-, -(CHz )i-5-S-, zvláště -CH2S-, -CH2NHSO2-, -CH2NHCH2-, -(CHz )i-5-0-, -0-(CHz)i-5 a -S-.

Sloučeniny obecného vzorce I vytvářejí farmaceuticky přijatelné soli se zásadami, jako jsou například hydroxidy alkalického kovu, jako hydroxid sodný a draselný, hydroxidy kovů alkalických zemin, jako hydroxid vápenatý, barnatý a horečnatý. Sloučeniny obecného vzorce I, které jsou alkalické, vytvářejí farmaceuticky přijatelné soli s anorganickými kyselinami, jako jsou například halogenovodíkové kyseliny, například kyselina chlorovodíková nebo bromovodíková, kyselina sírová, dusičná a fosforečná a s organickými kyselinami, jako jsou například kyselina octová, vinná, jantarová, fumarová, maleinová, jablečná, salicylová, citrónová, methansulfonová a p-tolu• · · · ·· ·· ί· · · · • · · · ensulfonová kyselina.

Jakkoliv uvedený obecný vzorec znázorňuje příslušné sloučeniny v jejich absolutní stereochemii, zahrnuje vynález nejen vyznačené stereoizoméry, nýbrž také odpovídající racemáty a diastereomerní směsi. Kromě toho mezerníková skupina X zahrnuje olefinovou dvojnou vazbu, jako ve skupině -CH2-CH=CH-, která může mít (E) nebo (Z) konfiguraci, s výhodou má (E) konf i guraci.

Výhodnými jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená Y skupinu CO a R² nižší alkoxyskupinu, zvláště methoxyskupinu nebo Y znamená skupinu SO2 a R² nižší alkylovou skupinu, zvláště methylovou skupinu. S výhodou znamená R¹ nižší alkylovou skupinu, zvláště isobutylovou skupinu. .....S výhodou znamená

R³ nižší alkylovou skupinu, zvláště isobutylovou nebo 2-methylbutylovou skupinu, nižší alkenylovou skupina, zvláště 2měťhy1al1y1ovou skupina, aryl nižší alkylovou skupinu, zvláště nesubstituovanou benzylovou skupinu, nebo arylovou zvláště nesubstituovanou fenylovou skupinu. S výhodou znamená R⁴ skupinu obecného vzorce X-aryl, zvláště kdy X znamená mezerníkovou skupinu vzorce -CH2-CH=GH- a aryl znamená nesubstituovanou fenylovou skupinu.

Jakožto zvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce I se uváděj í:

(E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-isobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d, (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i d, (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methan sul fonyl )-4-met hyl-2’-(2(S)-met hylbutyl)valerohyd raz i d, (E)-2(R)-[1(S)—(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-(2-methylal 1 yl )valerohydrazid a ·· ···· *· methyl-(E)-3-[2(R)~[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]

- -» . — o

4-methylvaleryl]-2-isobutylkarbazát.

Způsob přípravy nových derivátů hydrazinu obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, podle vynálezu spočívá v tom, že se odštěpuje chránící skupina symbolu R⁹ ze sloučeniny obecného vzorce II

kde Y, R¹ , R² , R³ a R⁴ mají shora uvdený význam a R⁹ znamená chránící skupinu, a popřípadě se získaná sloučenina obecného vzorce I převádí na svoji farmaceuticky vhodnou sůl. Chránící skupinou symbolu R⁹ může být jakákoliv chránící skupina, s výhodou však R⁹ znamená tetrahydropyranylovou, 4-methoxybenzy1Ονου, benzylovou nebo tri(nižší alkyl)silylovou a především t erc.-but yldi met hylsi1y1ovou skupinu.

Odštěpování chrání skupiny symbolu R⁹ ze sloučeniny obecného vzorce II je možné jakýmkoliv o sobě známým způsobem. Například tetrahydropyranylová skupina se může odštěpovat zpracováním sulfonovou kyselinou například met hansu!fonovou kyselinou nebo p-toluensulfonovou kyselinou v nižším alkanolu, například v methanolu. Skupina 4-methoxybenzy1ová se může odštěpovat zpracováním například trif1uoroctovou kyselinou. Hydrogenolýzou v přítomnosti katalyzátoru, například palladia a v nižším alkanolu, například v methanolu, se může odštěpovat benzylová chránící skupina. Tri(nižší alkyl)si1ylová skupina se může odštěpovat zpracováním vodou nebo za nízklých hodnot pH; takové zpracování se zpravidla provádí v průběhu zpracování sloučeniny obecného vzorce II k její izolaci z prostředí, ve kterém se připravila (jde o štěpení in šitu).

• 9

Konverze získané sloučeniny obecného vzorce I na farmaceuticky- při j at el nou -sůl-se provádí zpracováním vhodnou kyselinou nebo zásadou o sobě známým způsobem.

Sloučeniny obecného vzorce II, používané jakožto výchozí látky pro shora uvedený způsob přípravy, jsou nové a vynález je rovněž jakožto meziprodukty zahrnuje. Mohou se připravovat různými způsoby, jak objasňuje reakční schéma na str. 10, přičemž Y, R¹, R², R³, R⁴ a R⁹ mají shora uvedený význam, *Bu znamená terc.-butylovou skupinu a Me skupinu methylovou.

V prvním stupni reakčního schéma A se sloučenina obecného vzorce III kondenzuje s hydrazinem nebo se substituovaným hydrazinem obecného vzorce IV, čímž se získá hydrazid obecného vzorce V. Tato kondenzace se provádí za o sobě známých podmínek peptidových kopulačních reakcí a za použití kopulačních činidel o sobě známých pro takové kopulační reakce, jako je například 1-hydroxybenzotriazol, v přítomnosti 1-ethyl-3-(3^;d i met hy 1 ami nopropy 1)karbod i imidhydrochloridu.

Hydrazid obecného vzorce V se pak nechává reagovat s chloridem obecného vzorce VI nebo s anhydridem obecného vzorce VII za získání sloučeniny obecného vzorce VIII. Tato reakce se provádí o sobě známým způsobem, například v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek a v přítomnosti organické zásady při teplotě přibližně 0 °C až přibližně teplotě místnosti. Vhodnými rozpouštědly jsou halogenované uhlovodíky, napřiklad.dichlormethan. Jakožto příklady organických zásad se uvádějí tri(nižší alkyl)aminy, například triethylamin, pyridin a 4-dimethylaminopyridin. Pokud je zásada za reakčních podmínek kapalná, může se jí používat v nadbytku a v takovém případě zároveň slouží jako rozpouštědlo.

Reakční schéma A }1

, ‘BuOOC. .

COOH (III) ,4

R³-HN-NH₂ (IV) 'BuOOC

NH (V) '3

R²-Y Cl (VI)or (R²-Y),0 (VH) ^lBuOOC

H

N R² (vin)

TFA

HOOC

(ix) • · » · • ··

R⁹ONH₂ (X)

Y (Π)

Následně se v dalším stupni sloučenina obecného vzorce VIII- zbavuje chránící^ *~skupiny zpracováním trif1uoroctovou kyselinou (TFA) za získání karboxylové kyseliny obecného vzorce IX. Odstraňování chránící skupiny se provádí o sobě známým způsobem, například v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, jako je například halogenovaný uhlovodík například dichlormethan, za teploty odpovídající přibližně teplotě místnosti.

Nakonec se karboxylové kyselina obecného vzorce IX převádí na výchozí látku obecného vzorce II kondenzací s O-chráněným hydroxy1aminem obecného vzorce X. Tato kondenzace se provádí o sobě známým způsobem pro peptidové kopulační reakce za použití obvyklých kopulačních činidel, jako je například 1hydroxybenzotriazol, v přítomnosti 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyljkarbodi i midhydrochloridu.

Sloučeniny používané nebo připravované podle reakčního schéma A se popřípadě mohou navzájem převádět nebo substituovat .

Tak sloučeniny obecného vzorce V, kde znamená R³ atom vodíku, se mohou převádět na odpovídající sloučeniny obecného vzorce V, kde znamená R³ skupinu nižší alkylovou, alkenylovou, alkinylovou, cykl oal kyl ovou nebo aryl nižš-í alkylovou, o sobě známým způsobem. Například sloučenina obecného vzorce V, kde znamená R³ atom vodíku, se může kondenzovat s aldehydem obecného vzorce R^3O-CHO, kde znamená R³⁰ skupinu nižší alkylovou, alkenylovou, alkinylovou, cykloalkylovou nebo aryl nižší alkylovou nebo arylovou, například v přítomnosti p-toluensulfonové kyseliny a molekulárních sít a získaný substituovaný imin se může redukovat, s výhodou in šitu kyanoborhydridem alkalického kovu, zvláště kyanoborhydridem sodným. Nebo se sloučenina obecného vzorce V, kde znamená R³ atom vodíku, může nechávat reagovat s cyklickým anhydridem obecného vzorce XI • · · · * ·

O

O kde n má shora uvedený význam, například s anhydridem kyseliny glutarové, vhodně v přítomnosti organické zásady, jako je tri(nižší alkyl)amin, například triethylamin a v oganickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v aromatickém uzhlovodíku, jako je benzen nebo toluen, při zvýšené teplotě, vhodně při teplotě zpětného toku reakční směsi. Tak se získá sloučenina obecného vzorce VIII, kde znamená R² a R³ s atomy, na které jsou vázány, skupinu obecného vzorce (c), shora uvedenou.

Sloučenina obecného vzorce II, kde znamená R³ atom vodíku, se může převádět na odpovídající sloučeniny obecného vzorce II, kde R³⁰ má shora uvedený význam, reakční známé sloučeniny obecného vzorce R³⁰-X, kde R³⁰ má shora uvedený význam, a -χ—ZTranreTrá—at’om—haire^renu—vbotfně—v—pM-t-omnost-i—z-ás-a-d-y-j—n-a-p-M-k-Ta-d uhličitanu alkalického kovu, například uhličitanu sodného nebo draselného a v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v dimethylformamidu.

Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R⁴ ftalimido nižší alkylovou skupinu se mohou zpracovávat hydrazinhydrátem, vhodně v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v nižším alkanolu, jako v metahnolu nebo v ethanolu, při teplotě odpovídající přibližně teplotě místnosti a získaný produkt, sloučenina obecného vzorce VIII, kde však znamená R⁴ amino nižší alkylovou skupinu, se může nechávat reagovat se vhodnou (hetero)aromatickou karboxylovou kyselinou nebo s halogenidem sulfonové kyseliny, s (hetero)aromatickým isokyanátem nebo s (hetero)aromatickóu karboxylovou kyselinou v přítomnosti kopulačního činidla v přítomnosti zásady k zavedení žádané skupiny R⁴.

·· ··♦· « · • · ·· ·· 9 4 4 4 9

44 4 9 4 · • 4 4 4 4 4 * · 4 4 4 4 4

4 4 9 4 4

499 44 99

Podle reakčního schéma A používané karboxylové kyseliny obecného'vzorce IX jsou nové· a vynález je zahrnuje. Sloučeniny obecného vzorce III, pokud nejsou známé nebo nejsou analogy známých sloučenin, se mohou připravovat způsoby, uvedenými v příkladech nebo podobnými způsoby. Sloučeniny obecného vzorce IV, VI, VII a X jakož také aldehydy obecného R³°-CHO a cyklické anhydridy obecného vzorce XI jsou známé nebo jsou analogy známých sloučenin.

V prvním stupni reakčního schéma B (na str. 14) se provádí konverze karboxylové kyseliny obecného vzorce III na odpovídající methylester obecného vzorce XII. Tato konverze se provádí o sobě známým způsobem například reakcí s methanolem v přítomnosti terciární organické zásady, jako je 4-dimethylaminopyridin a kondenzačního činidla, napřiklad .di i midu, jako je 1-ethyl-3-(3-dimethy1aminopropy1)karbodiimid.

Z methylesteru obecného vzorce XII se pak odstraňuje chránící terc.-butoxykarbonylová skupina zpracováním trifluoroctovou kyselinou. Toto odstraňování chránící skupiny se provádí o sobě známým způsobem, například v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v halogenovaném uhlovodíku, jako v dichlormethanu, při teplotě odpovídající přibližně teplotě místnosti.

Získaná sloučenina obecného vzorce XIII se následně kondenzuje s O-chráněným hydroxy1aminem obecného vzorce X za získání sloučeniny obecného vzorce XIV. Tato kondenzace se provádí za o sobě známých podmínek peptidových kopulačních reakcí a za použití kopulačních činidel o sobě známých pro takové kopulační reakce, jako je například 1-hydroxybenzotriazol, v přítomnost i 1 - ethyl-3-(3-di methylami nopropyl)karbodi imi dhydrochloridu.

·· ···· • · • · ·· • '· • ♦

V dalším stupni se sloučenina obecného vzorce XIV nechává reagovat 's trimethylalúmiriiem a s hydrazinem nebo se substituovaným hydrazinem obecného vzorce IV za získání sloučeniny obecného vzorce XV. Tato reakce se zpravidla provádí v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v halogenovaném uhlovodíku, jako v dichlormethanu, při teplotě odpovídající přibližně teplotě místnosti až 60 °C.

Nakonec se žádaná výchozí látka obecného vzorce II získá reakcí sloučeniny obecného vzorce XV s chloridem obecného vzorce VI nebo s anhydridem obecného vzorce VII. Tato reakce se provádí o sobě známým způsobem, například v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, a v přítomnosti zásady při teplotě přibližně O °C až při teplotě odpovídaj ící přibli žně teplotě místnost i.,Vhodnými rozpouštědly jsou halogenované uhlovodíky, například dichlormethan. Jakožto zásady, kterých se může používat, se příkladně uvádějí tri(nižší alkyl)aminy, například triethylamin, pyridin a 4-dimethy1amínopyridin. Pokud je zásada za reakčních podmínek kapal ná, může se i í používat v nadbytku a v takovém případě zároveň slouží jako rozpouštědlo.

·· ····

- 16 Reakční schéma C

MeOOC

COOH (XVI)

i) aktivace ii) H₂N-NR³-Y_p2 (XVH)

MeOOC

H

K R²

I

R³ (XVHI)

AJMe₃

R⁹ONH₂(X) (Π)

V prvním stupni reakčního schéma C se aktivuje karboxylová kyselina obecného vzorce XVI například .zpracováním oxalylchloridem a nechává se reagovat se substituovaným hydrazinem obecného vzorce XVII za získání sloučeniny obecného vzorce XVIII. Tato reakce se vhodně provádí v přítomnosti zásady, zvláště terciárního organického aminu, jako je například triethylamin, a v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, například v halogenovaném uhlovodíku, jako v dichlormethanu, při teplotě přibližně 0 °C.

Získaná sloučenina obecného vzorce XVIII se následně převádí na žádanou výchozí látku obecného vzorce II reakcí s tri• · 999 9 • 9 9 999

methylaluminiem a s O-chráněným hydroxylaminem obecného vzorce X. Tato reakce se provádí vhodně v organickém rozpouštědle, které je inertní za reakčních podmínek, jako jsou halogenované uhlovodíky, například dichlormethan a při teplotě odpovídající přibližně teplotě místnosti až 60 °C.

Karboxylové kyseliny obecného vzorce XVI a substituované hydraziny obecného vzorce XVII, používané při způsobu podle reakčního schéma C, jsou známé sloučeniny nebo analogické známým sloučeninám, které se mohou připravovat obdobnými způsoby jako známé sloučeniny.

Jak shora uvedeno, inhibují deriváty hydrazinu podle vynálezu uvolňování TNF a TGF-α jakož také proliferaci keratinocytů. Tyto aktivity dokládají dále popsané testy i n. vitro.

Test A: Inhibice uvolňování TNF-a

Buňky THP1 se kultivují v prostředí RPMI 1640 doplněném antibiotiky a 10 % zárodečného telecího séra, získané oastředěním a zředěním na 5 x 10⁵ buněk/ml ve shora uvedeném prostředí doplněném 20 mM pufru HEPES. Podíly (200 ml) buněčné suspenze se vnesou do 96 důlkových kultivačních destiček a inkubují se po dobu půl hodiny při teplotě 37 °C před přidáním testovaných sloučenin. Testované sloučeniny- se rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO) na zásobní koncentraci 1,2 mM, která se ředí fosfátem pufrovaným roztokem solanka/10 % DMSO za získání konečné koncentrace testovaných sloučenin 10^-9 až 10^-5 M, přičemž se každá koncentrace zkouší dvakrát. Buňky se inkubují s testovanými sloučeninami po dobu půl hodiny při teplotě 37 °C, pak se přidá LPS (bakteriální 1 ipopolysacharid) do koncentrace 2 mg/mg a v inkubaci se pokračuje po dobu tří hodin při teplotě 37 °C v prostředí obsahujícím 5 % oxidu uhličitého a o 95% relativní vlhkosti. Po odstředování při 260 g po dobu 10 minut se odstraní podíl každého supernatnatu a stanovuje se množství

99 • · · 9

9 9 9 • · · *

TNF-α ELISA (R & D Systems Europe Ltd., Abingdon, Anglie). Koncent-r adce t estované-* sl oučeni ny, která vede přibližně k 50% inhibici LPS navozenému uvolňováni TNF-α (ICso) se vypočte z křivky dávka-odezva.

Test B: Inhibice uvolňování TGF-a

Tímto téstem je upravený způsob, který popsal R.J. Coffrey, R. Derynk, J.N. Wilcox, T.S. Bringman, A.S. Goustin, H.L. Moses a M.R. Pittelkow (Nátuře, 328, str. 815 až 820, 1987). Normální lidské epidermové keratinocyty (NHEK) (neonatální a dospělé) (produkt společnosti Clonetics Corporation, San Diego, California, Sp. st. a.) se při třetí pasáži vnesou do 96 důlkových kultivačních destiček ve množství 2 x 10³ až 10⁴ buněk na důlek a nechávají se růst ve zvlhčovaném inkubátoru s ovzduším obsahujícím 5 % oxidu uhl i čitého při teplotě 37 °C po dobu pět dní v keracytovém růstovém prostředí prostém séra (KGM; Clonetics Corporation). Testované sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zředí se 10 krát v keratinocytovém bazálním prostředí (KBM; Clonetics Corporation). Připraví se sériová zředění testované sloučeniny v 10 % DMSO v KBM za získání koncentrací 12 krát vyšších než je koncentrace v konečném testu. Zředění testovaných sloučenin (nebo pouhých nosičů jako kontrol) se přidají do buněk a inkubuje se při teplotě 37 °C po dobu půl hodiny. Uvolňování TNF-α (ICso) se stimuluje přidáním 10 ng/ml TPA (forbol 12-myristát 13-acetát). Po další inkubaci při teplotě 37 °C po dobu 24 hodin se zjištuje obsah TNF-α v kultivačním prostředí bud TNF-α ELISA (Oncogene Science lne., Uniondale, New York, Sp. st. a.) nebo detekčním systémem na bázi elektrochemi1 umínescence (Igen lne., Gaithersburg, Maryland, Sp. st. a.). Koncentrace zkoušené sloučeniny, která inhibuje uvolňování TGF-α o 50 % se zřetelem na kontrolu (ICso nMol) se pak vypočte.

4« ··*· • · 4 • ··♦ • · • · &44 · ···

4« 4 ·· 44 • ·· 4 4 4 4

4 4 «4 4

4 4 · 4 4 4

4 «444

444 44 44

Test C: Inhibice keratinocytové proliferace

Tímto testem je upravený způsob, který popsal T. Karashima, H. Hachisuka a Y. Sasai (Dermatol. Sci. 12, str. 246 až 254, 1996) a A. Olaniran, B.S. Baker, J.J. Garioch, A.V. Powles a L. Fry (Arch. Dermatol. Res. 287, str. 231 až 236, 1995). Normální lidské epidermové keratinocyty (NHEK) (neonatální a dospělé) se vnesou do 96 důlkových kultivačních destiček ve množství 2 x 10³ buněk na důlek. Po vázání buněk na destičku inkubací po dobu 24 hodin v zavlhčovaném inkubátoru s ovzduším obsahujícím 5 % oxidu uhličitého při teplotě 37 °C v séru prostém KGM (shora charakterizovaném) se prostředí nahradí prostředím s KBM (shora charakterizovaném) na dobu čtyři dny k zaražení růstu buněk. Testované sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zředí se 10 krát v KBM. Připraví se sériová zředění testované sloučeniny v 10 % DMSO v KBM za získání koncentrací 11 krát vyšších než je koncentrace v konečném testu. Buňky se pak vrátí do KGM a bezprostředně se přidají zředění testovaných sloučenin (nebo pouhých nosičů jako kont rol) .Inkubuje se po dobu tři dnů a buňky se pulzují s 1 pCi/dů,lek ³ H-thymidi η, specifická aktivita 5 Ci/mmol (Amersham International plc, Little Chalfont, Buckinghamshire, UK) po dobu dalších 16 hodin. Buňky se oddělí za použití systému trypsin/ethylendiamintetraoctová kyselina a shromáždí se. Stanovuje se včlenění ³H-thymidinu jako míra -proliferace technikou scinti 1ačního čítání. Koncentrace zkoušené sloučeniny, která inhibuje začleňování ³H-thimidinu o 50 % se zřetelem na kontrolu (ICso nMol) se pak vypočte. Výsledky všech uvedených testů reprezentativních sloučenin obecného vzorce I jsou shrnuty v následující tabulce.

9' ·** ···· • · • ··*

99

9 9 9

9 9 9 ·'

9 9

999

9 9 9

99

Tabulka ·· *

Sloučenina	Test AIC50 (nMol)	Test B IC50 (nMol)	Test C IC50 (nMol)
A	437	210	1300
B	515	255	1100
C	365	N/T	N/T
D	408	N/T	N/T
E	531	N/T	N/T
F	1516	N/T	N/T
G	428	N/T	N/T
H	381	N/T	N/T
I	881	N/T	N/T
J	933	N/T	N/T

N/T= netestováno

A = (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'~ (methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid,

B = (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-f-m.ftj--h-a.n.sjiJ-f-nn-y-l 1-7 ’ -f 4-met hoxvf eny 1 )-4-met hy 1 val erohydrazi d,

C = (E)-2’-benzyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methy 1 val erohydraz id,

D = (E)-2’-(cyklohexylmethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl valerohydrazi d,

E = (E )-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny1]-2'i sobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz id,

F = (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny1]-4met hy1-N-(2,6-dioxopi peri di no)val érami d,

G = (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2'~ (met hansu 1fonyl)-4-met hyl-2’-(2(S)-met hýlbutyljvalerohydrazid,

H = (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-(2^_methylal1y 1 jvalerohydraz i d, • · · · · · t

• · • · ♦

• · · • ·

I = methyl-(E)-3-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3but eny1]-4-met hylvalery1]-2-isobutylkarbazát,

J = (E )-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2'(isobutyl)-2’-(isopent anoy1)-4-methylvalerohydrazid.

Deriváty hydrazinu podle vynálezu se mohou používat jakožto léčiva, například v podobě farmaceut ických prostředků. Farmaceutické prostředky se mohou podávat orálně například v podobě tablet, povlečených tablet, dražé, tvrdých a měkkých želati nových kapslí, roztoků, emulzí nebo suspenzí. Mohou se však podávat také rektálně například v podobě čípků nebo parenterálně například v podobě injekčních roztoků.

Pro výrobu farmaceutických prostředků se deriváty hydrazinu mohou formulovat za použití tetrapeuticky inertních anorganických nebo organických nosičů. Jakožto nosiče pro tablety, povlečené tablety, dražé a tvrdé želatinové kapsle se mohou používat například laktóza, kukuřičný škrob a jeho deriváty, mastek, kysel i na stearová nebo její soli. Vhodnými nosiči pro měkké želatinové kapsle jsou například rostlinné oleje, vosky, tuky, polopevné a kapalné polyoly. V závislosti na povaze účinné látky se nemusejí používat žádné nosiče, obecně jsou však potřebné v případě měkkých želatinových kapslí. Vhodnými nosiči pro výrobu roztoků a sirupů jsou například voda, polyoly, sacharóza, invertní cukr a glukóza. Vhodnými nosiči pro výrobu injekčních roztoků jsou například voda, alkoholy, polyoly, glycerin a rostlinné oleje. Například přírodní a ztužené oleje, vosky, tuky polotekuté polyoly jsou vhodné pro výrobu čípků.

Farmaceutické prostředky mohou obsahovat také konzervační činidla, stabilizátory, smáčedla, emulgátory, sladidla, barviva, ochucovací přísady, soli k úpravě osmotického tlaku, pufry, povlékací či ni dl a .nebo antioxidanty.

ií

Léčiva, obsahu jící, deriváty hydrazinu podle vynálezu a ·· ·· terapeuticky vhodné nosiče a způsoby výroby takových léčiv vynález rovněž zahrnuje. Při takovém způsobu se sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli zpracovávají na galenickou formu spolu s terapeuticky inertním nosičovým materiálem a popřípadě s jedním nebo s několika přídavnými terapeuticky účinnými látkami.

Vynález se také týká použití derivátů hydrazinu obecného vzorce I pro léčení nemocí, zvláště pro ošetřování zánětů, horčky, haemorrhagie, sepse, rheumatické arthritidy, osteoarthritidy, rozptýlené sklerózy a lupénky. Dávky kolísají v širokých mezích a stanovují se podle jednotlivých požadavků každého případu. Obecně v případě dospělých jedinců je přiměřená dávka přibližně 5 mg až přibližně 30 mg, s výhodou přibližně 10 mg až přibližně 15 mg, Jakkoliv .horní .hranice může být vyšší, pokud se to považuje za vhodné.

Následující příklady praktického provedení vynález blíže objasňují, nijak jej však neomezují. Struktura produktů a kJj-čov-ách_me.zj_p_ro_djj_k_t_ů_je potvrzována NMR spektroskopií._

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

2(R)-[1(S) — (Hydroxykarbamoyl)-4-fenylbut yl]-2'-(met hansulfony1)-4-met hyl-2'-fenylvalerohydrazid

Roztok 0,165 g 2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-fenylbutyl]-2'(methansulfony1)-4-methyl-2'-fenylval erohydrazidu ve 4 ml suchého dimethylformamidu se za míchání v prostředí dusíku ochladí na teplotu 0 °C a postupně se přidá 0,09 g 1-hydroxybenzotriazolu a 0,09 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochloridu. Po 40-minutovém míchání při teplotě 0 °C se roztok zpracuje 0,18 g 0-(ťerc.-butyldimethylsi1yl)hydroxyla.2 minu a směs se nechá ohřát na teplotu místnosti, načež se míchá přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová vrstva se promyje postupně vodou, 2M kyselinou sírovou, vodou a solankou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a získá se bledě růžová guma, která po krystalizaci z etheru poskytuje 0,05 g 2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoy1 )-4-fenyl but yl ] -2' (met hansul fonyl )-4-met hyl 2'-fenylvalerohydrazid ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 476 (M+H)⁺.

nmr(d₆DMS0 353K): 10.73 (1H, s); 10,30 (1H, br s); 8,46 (1H, br s); 7,50-7,44 (2H, m); 7,42-7,34 (2H, m); 7,30-7,21 (3H, m); 7,18-7,06 (3H, m); 3,17 (3H, s); 2,64-2,54 (1H, m); 2,50-2,30 (2H, m); 2,25-2,11 (1H, m); 1,59-1,23 (6H, m); 1,10-1,02 (1H, m); 0,84 (1H, d, J = 6,5 Hz); 0,76 (1H, d, J = 7 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 90 % roz-pou-š-t-ěd-l-a—B—z—5—m-i-nu-t—na—1-5—m-i-nut-;—pr-ů_t-o_čjxá_r_y„c_hJ_ost_1_ml za minutu. Retenční doba: 16,77 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΌ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka, 2 (R)-[ 1 (S)-(kar boxy)—4—feny1butyl]-2'-(methansul fony1)-4-methyl-2'-fenylvalerohydrazi6, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,35 g 2(R)-[ 1 -(S )-(terc.-butoxykarbonyl)—4-fenyl butyl ]-4-methylvalerové kyseliny, připravené obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (i) a (ii) a 5 ml dimethylformamidu se ochladí na teplotu 0 °C a zpracuje se postupně 0,1 ml N-methylmorfoli nu, 0,16 g 1-hydroxybenzotriazol u, 0,16 g fenylhydrazinu a 0,27 g , 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodimidhydrochloridu. Roztok’ se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí • · · · · · ·· « mezi ethylacetát a 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová vrstva se promyje posupně vodou, 5% roztokem kyseliny citrónové, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ethylacetát (6:1) jako elučního činidla. Získá se 0,41 g žlutého oleje, který po krystalizací ze systému hexan/ether poskytuje 0,255 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)4-feny1buty1]-4-methy1-2'-feny1 valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:439 (M+H)⁺ .

.(i i ) Roztok 0,19 g produktu podle odstavce (i) ve 3 ml pyridinu se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se 0,15 g methansulfonylchloridu. Roztok se nechá stát při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 2M kyselinu sírovou a ethylacetátová vrstva se promyje promyje postupně, 2M kyselinou sírovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po vy.SJJjšení bezvodým síranem hořečnatým se rozpouštědlo odpaří a zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ethylacetát (6:1) jako elučního činidla. Získá se 0,19 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenylbutyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2'-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky. MS: 517 (M+H)⁺.

(iii) Roztok 0,19 g produktu podle odstavce (ii) se rozpustí ve směsi 8 ml dichlormethanu a 4 ml trif1uoroctové kyseliny a nechá se stát 5 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se znovu odpaří z toluenu. Tento postup se dále dvakrát opakuje k získání zbytku. Ten se trituruje s etherem a pevná látka se odfiltruje. Získá se 0,165 g 2(R)-[1(S)(karboxy)-4-fenylbutyl]-2'-(met hansu 1fonyl)-4-met hyl-2'-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:461 (M+H) ⁺.

··

Příklad 2 (E)-2(R)-[1 (S)-(Hyd roxy karbamoyl -4-f eny 1 -3-but enyl ]-2' (met hansu! f onyl )-4-met hyl-2'-feny1 valerohydrazi d

Roztok 0,095 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2-(RS)-pyraný1 oxy] karbamoyl -4-fenyl -3-butenyl]-2' -(methan sul f onyl )-4-methyl 2'-feny1 valerohydraz idu ve směsi 10 ml methanolu a 5 ml dichlormethanu se zpracuje 0,043 mg 4-toluensulfonové kyseliny. Směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti, načež se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Ethyl acetát.ová vrstva sé vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s étherem, čímž vznikne 0,051 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl-4-fenyl-3-butenyl ]-2 '-(met hansu 1 f ony 1 )-4-met hyl-2 '-fenyl hydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS:474 (M+H)⁺.

nmr (άθ DMSOý 353K): 10,80 (1H, s); 10,30 (1H, br s); 8.48 (1H, br s);

7,51-7,45 (2H, ra); 7,42-7,34 (2H, m); 7,32-7,23 (5H, m); 7,21-7,14 (1H,_

m); 6,22 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,08-5,96 (1H, m); 3,20 (3H, s); 2,70-2,60 (1H, m); 2,42-2,12 (3H, m); 1,58-1,48 (1H, m); V46-3,35 (2H, m); 1,141,05 (1H, m); 0,85 (3H, d, J = 6,5 Hz); 0,76 (3H, d, J = 7,5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 90 % rozpouštědla B z 5 minut na 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 16,76 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1 (S) -[ (Tet rahydro-2-(RS)-pyranyloxy]karbamoyl-4f eny 1 -3-but eny 1 ]-2 ' (met hansu! fonyl )-4-methyl-2'-fenylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

·· ···1 • · · • · ·· t :

směs se míchá 15 5,55 g cinnamyl(i) Roztok 5,19 g 4-terc.-buty1hydrogen-2(R)-isobuty 1 sukcinátu v 50 ml suchého tetrahydrofuranu se ochladí na teplotu -78 °C za míchání v prostředí dusíku. Přikape se 25 ml 2M roztoku 1 ithiumdiisopropylamidu v tetrahydrofuranu a minut při teplotě -78 °C. Přikape se roztok bromidu ve 25 ml suchího tetrahydrofuranu a směs se nechá postupně ohřát na teplotu místnosti. Po míchání přes noc se tetrahydrofuran odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% roztok kyseliny citrónové. Ethylacetátová vrstva se promyje dalšími dvěma dávkami 5% kyseliny citrónové, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří za získání oranžového oleje. Olej se rozpustí ve 100 ml hexanu, do kterého se přidá 2,35 g cyklohexylaminu. Směs se nechá stát dvě hodiny, načež se pevná látka odfiltruje. Pevná látka se suspenduje v ethylacetátu a protřepe se se dvěma dávkami 2M sírové kyseliny za vzniku čirého roztoku. Ethylacetátový roztok se promyje dvakrát vodou a pak nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla se získá 6,41 g _f_E.L^2I R ) - Γ1(R)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl ]- 4 methylvalerové kyseliny ve formě bledě krémově zbarvené pevné látky.

(ii) Produkt, získaný podle odstavce (i), se rozpustí v 50 ml suchého tetrahydrofuranu, ochladí se za míchání na teplotu -78 °C a přikape se 20,5 ml 2M roztoku 1 ithiumdiisopropylamidu v tetrahydrofuranu. Po míchání po dobu 1,75 hodin při teplotě -78 °C se přikape 8 ml methanolu. Směs se nechá postupně ohřát na teplotu místnosti a pak se míchá přes noc. Tetrahydrofuran se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% roztok kyseliny citrónové. Ethylacetátová vrstva se promyje postupně dalšími dvěma dávkami roztoku kyseliny citrónové, dvěma dávkami vody a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření se získá oranžový olej, který obsahuje směs 1(S),2(R) a 1(R),2(R) izoméru (E)-2-[1• · • · · ·

(terč.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylval erové kyseliny. Popsaný epimerizační postup se opakuje třikrát, za získání směsi podstatně obohaceného isomeru 1(S),2(R). Surový produkt se rozpustí ve 100 ml hexanu a roztok se zpracuje 1,9 g cyk1ohexy1aminu. Vysrážená sůl po tříhodinovém stání se odfiltruje a vysuší se. Získá se 5,53 g bledě krémové pevné látky, která se převede na volnou kyselinu obdobným způsobem jako podle odstavce (i). Získá se 4,36 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony1)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny ve formě žluté pevné látky.

(iii) Obdobně jako podle příkladu 1 (i) se připraví z 0,7 g karboxylové kyseliny, připravené podle odstavce (ii) tohoto příkladu jako výchozí látky, 0,466 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-f eny 1-3-but eny 1 ]-4-met hyl-2,'-feny 1 hydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS:437 (M+H)⁺.

(iv) Obdobně jako podle příkladu 1 (ii) a (iii) se připraví z 0,15 g(El-2(R)-Γ1(S)-(t erc.-butoxykarbonyl )-4-fenyl- 3-butenyl ]-4-methyl-2'-fenyl1 valerohydrazidu 0,14 g (E) —2 (R) — [ 1 (S) — karboxy)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2' fenyl1 valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

(v) Karboxylová kyseliny, připravená podle-podle odstavce iv, se rozpustí ve 3 ml dimethylformamidu, ochladí se na teplotu 0 °C a zpracuje se postupně 0,064 g O-(tetrahydro-2H-pyran2(RS)-yl)hydroxylaminu a 0,061 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodi i midhydrochloridu. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi 5% roztok kyseliny citrónové a ethylacetát. Ethylacetátová vrstva se promyje posupně vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Výsledná bílá pevná látka se trituruje s etherem a odfiltruje • ♦ · · • · ·· • ·· ·· • · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · ·· ·9 ·· se, čímž se získá 0,095 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)py raný 1 oxy)karbonyl]-4-feny1-3-but enyl]-2'-(met hansul fony 1 )-4methyl-2'-feny1 valerohydrazidu ve formě bílého prášku.

MS:558 (M+H)⁺.

Příklad 3

Benzy1-3-[2(R)-[ 1 (S)-hydroxy karbamoy 1 -4-f eny 1 but y 1 ]-4-met hy 1 valeryl]-2-fenylkarbazát

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 ;se z 0,05 g benzyl-3-[2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenylbutyl]-4-methylvaleryl]-2-fenylkarbazátu, jako výchozí látky, získá 0,032 g benzyl-3-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenylbutyl]-4-methylvaleryl]-2-fenylkarbazátu ve formě světle krémové pevné látky.

MS:532 (M+H)⁺ .

nmr (d₆ DMSO. 353K): 10.83 (1H, s); 10.47 (1H, br s); 8.62 (1H, br s);

7.64 (2H, m); 7.54 (7H, m); 7.41 (3H, m); 7.33 (1H, m); 7.24 (2H, m);_

5.40 (2H, s); 2.76-2.30 (4H, m); 1.75-1.45 (6H, m); 1.22 (1H, m); 0.97 (3H, d, J= 7 Hz); 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B po dobu 10 minut se zvýšením na 80 % rozpouštědla B z 10 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 19,71 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Benzyl-3-[2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy)karbamoy 1 J-4-feny 1 but yl]-4-methylvaleryl]-2-fenylkarbazát, použit ý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Rozpustí se 0,5 g 2(R)-[1-(S)-(terc.-butoxykarbonyl)~4-fenylbutyl]-4-methyl-2'-fenylvalerohydrazid, připravený podle • · příkladu 1 (i) v 10 ml d i et hy 1 et heru a míchá se s 10 rnl nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného as 1,0 ml benzylchlorformátu. Po 24 hodinách se etherová vrstva oddělí, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla se zbytek čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ethylacetát (9:1) jako elučního činidla. Získá se 0,767 g benzyl-3-[2(R)-[1(S)-terc.-butoxykarbonyl)-4-fenylbutyl]-4-methylvaleryl]-2-fenylkarbazátu ve formě bílé pevné 1 át ky.

MS:573 (M+H)⁺.

(ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iv) a (v) se ze 0,115 g fenylkarbazátu, připraveného podle předchozího stupně jako výchozí látky, získá 0,115 g benzyl 3-[2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2 (RS)-pyraný1oxy)]-4-fenylbutyl]-4-met hylvalery1]-2feny1karbazátu v podobě bezbarvé gumy. MS:6í6 (M+H)⁺.

Pří klad 4

2'-Acetyl-2(R).-[1 (S)-( hydroxy kar bamoyl )-4-f enyl but yl ]-4-met hy 1 -2'-feny1 valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,09 g 2'-acety1-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenylbutyl]-4-methyl-2'-fenylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,062 g 2'-acetyl-2(R)-[1(S)[(t et rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenylbut yl ]-4-met hyl-2'-fenylvalerohydrazidu v podobě bílé pevné látky.

MS:440 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 25 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 60 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 14,97 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % tFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP ·· ·· • » ♦ · ♦ · • 9 9»

3OOA.

'-Acetyl -2(F?) — [1 (S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy)karbamoyl ]]-4-fenylbutyl]-4-met hyl-2'-fenylvalerohydrazid použ i t ý jako výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Směs 0,2 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butylkarbonyl )-4-fenyl butyl]4-methy1-2'-feny1 valerohydrazidu, připraveného .podle příkladu 1 (i)., 0,3 ml acetanhydridu a 0,35 ml N-methylmorfoli nu ve 2 ml dichlormethanu se nechá stát 3 dny při teplotě místnosti. Dichlormethan se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátový roztok se promyje 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, 5% roztokem kyseliny citrónové, vodou a nasyceným rozto.kem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ethylacetát (1:1) jako elučního činidla. Získá se 0,21 g 2'-acetyl'2 (R)- [ 1 (Š) - [ (t erc. - but oxykarbonyl )-4.-f enyl but yl ]-4-met hy l -2 'feny1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky. MS:481 (M+H)⁺.

(i i) Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iv) a (v) se připraví z 0,21 g hydrazidů, připraveného podle předchozího odstavce, jako výchozí látky, 0,09 g 2'-acetyl-2(R)-[1(SΙΕ ( t et rahyd ro-2 ( RS)-pyraný1oxy)karbamoy13-4-fenylbut yl3-4-met hy 1-2'-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 524 (M+H)⁺.

Příklad 5 (E)-2(R)-[1(S)-{(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl] -2'-met hansu!fonyl)-4-met hy1-2'-(2-pyri dyl)val erohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstávce příkladu 2 se připraví z 0,11 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-fenyl-3-butenyl3~2'-(methansulfonyl)- 4 - 31 methy1-2'-(2-pyridyl)valerohydrazidu , jako výchozí látky, po promytí ethylacetátového roztoku produktu 2% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, jakožto volná zásada 0,052 g (E)2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-butenyl]- 2'-(methan sulfony1)-4-methyl-2'-(2-pyridyl)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:475 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO 353K): 10,86 (1H, s); 10,27 (1H, br s); 8,45 (1H, br s);

8,35 (1H, m); 7_;30 (1H, m); 7,34-7,12 (7H, m); 6,32 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,13-6,04 (1H, m); 3,51 (3H, s); 2,79-2,69 (1H, m); ^.50-2,30 (3H, m);

1,53-1.50 (2H, m); 1,19-1,10 (1H, m); 0,91 (3H, d, J = 7.0 Hz); 0,83 (3H, d, J = 6,5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B po dobu 5 miríút še zvýšením na 90 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 16,20 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka, (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]- 4-feny1-3-butenyl]-2'-(methansu 1fony 1)-4- methyl -2'-(2-pyridyl)valerohydrazid, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) se připraví z ( E)-2(R)-[ 1 (S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3butenyl]-4-methylvalerové kyseliny a ze 2-hydrazinopyridinu, jako výchozích látek, (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]- 4-fenyl- 3-butenyl]- 2'-(methansulfonyl)-4methyl-2'-(2-pyridyl)valerohydrazid ve formě bílé pevné látky. MS:559 (M+H)⁺.

Příklad 6 (E)-2 '-(2-Benzot hi azolyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fe• · '· · · * · · • · · • · ··

nyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydraž i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,086 g (E)-2'-(2-benzothiazolyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro- 2(RS)~ pyranyloxy)karbamoyl]- 4-fenyl-3- butenyl]-2'(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, po promytí ethylacetátového roztoku produktu 2% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 0,045 g (E )-2'-(2-benzothiazolyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky MS:531 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 95 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 18,16 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-(2-benzothiazolyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)dvranv1oxy)karbamoyl1-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl) 4-methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) se z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4methylvalerové kyseliny a ze 2-hydrazinobenzothiazolu získá (E)-2'-(2-benzothiazolyl)—2(R)—[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyra nyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4methylvalerohydraz id ve formě bílé pevné látky.

Příklad 7 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl]-2'-(methansul fonyl)-4-methyl-2'-(2-chi nolyl)valerohyd raz i d « · • ·· · ··· • * ·»

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,05 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)~pyranyloxy)karbamoyl]- 4-fenyl- 3-butenyl]- 2'-(methansulfonyl)-4methyl-22-chinoiyl)valerohydrazidu , jako výchozí látky, po promytí ethylacetátového roztoku produktu 2% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 0,026 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2'~(methansulfonyl)-4-methyl-2'(2-chinoiylvalerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS:524 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 90 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 17,90 minut. Rozpouštědlo A: Η’0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R) — [1 (S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4fenyl-3-but enyl]-2'-(methansulfonyl )-4-met hyl -2'-(2-chi noi yl H valerohydraz id, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) se z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4methylvalerové kyseliny a ze 2-hydrazinochinolinu získá (E)2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3butenyl]- 2'-(methansu!fonyl)- 4-methyl-2'-(2-chinoiyl )valerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

Příklad 8 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl] - 2'-(methan sul fonyl )-2'-(4-met hoxyfenyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,338 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-fenyl- 3-butenyl]-2'-(methansu!fonyl)-2'99 99

Β .9 9 » 9 9 ·* 9 99 9

9

9 <9

9 9 (4-methoxyfeny1)-4-methy1 valerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,195 g 1(E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl]2' - (methansulfonyl)-2'-(4-methoxyfenyl-4-methylvalerohydraž idu ve formě krémově zbarvené pevné látky.

MS:504 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 95 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 16,53 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,01 % TFA; rozpouštědlo B:. CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-(4-met hoxyfenyl) -4methy1 valerohydráz id, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) se připraví z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3butenyl]-4-methylvalerové kyseliny a ze 4-methoxyfeny1hydraz i du (E)-2(R)-[1(S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoy1]-4fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-(4-met hoxyfenyl)-4methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

Příklad 9 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2'-(2-methylfenyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,37 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansu!fonyl)-4-methyl2'-(2-methylfenyl)valerohydraz idu, jako výchozí látky, 0,192 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-buteny1]-2'-(met hansulfonyl)- 4-methyl- 2'—(2— methylfenyl)valerohydrazidu ve formě krémově zbarvené pevné látky.

9*

9

9 9 9*9 • · • ···

MS :488 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,37 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tet rahydr0-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4fenyl- 3-butenyl]-2'-(met hansulfony1)-4-met hyl-2'-(2-met hyl fenyl ) val erohydraz i d , použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (i) se připraví z 0,7 g (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny á z o-tolylhydrazi nu 0,5 g(E)2(R)-[1(S)-[(terc.- butoxykarbonyl)-4- fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2'-(2-methylfeny1)valerohydraz idu ve formě krémově zbarvené pevné látky.

MS:451 (M+H) ⁺ .

(ii) Roztok 0,15 g (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbony 1 )4-fenyl-3-butenyl]- 4-methyl-2'-(2-methylfenyl)valerohydrazidu v 5 ml dichlormethanu se zpracuje 0,09 g pyridinu a 0,1 g anhydridu kyseliny methansulfonové. Míchá se po dobu jedné a půl hodiny, přidá se dalších 0,05 g pyridinu á 0,06 g anhydridu kyseliny methansulfonové a směs se míchá po dobu dalších dvou hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% roztok kyseliny citrónové. Ethylacetátový roztok se promyje vodou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla se zbytek čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ ethylacetát (6:1 ) jako.elučni ho činidla. Získá se 0,16 g (E)2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansulfonyl)- 4-methyl- 2'-(2- methylfenyl)va]erohydrazidu ve ··

R 4 4 1

R 4 4 1 » 4 4 1 • 4 4 4

44 • φ- ···· 4 4'

4 44 odstavce, se 1 (iii) a náformě žluté gumy.

(iii) Hydrazid, připravený podle předchozího zpracuje obdobným způsobem jako podle příkladu sledně způsobem podle příkladu 2 (v), čímž se získá (E)-2(R)~ (S)-[(t et rahydro-2-(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but eny1]-2-(met hansu 1fony1)-4-met hy1-2'-(2-met hylfenyl)valerohydrazid ve formě krémově zbarvené pevné látky. MS:572 (M+H)⁺.

Příklad 10 (E)-(2R)-[1(S)-(Hydroxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl]-?'-(methansul f ony 1 )-4-methyl-2'-(1-naftyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,09 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl2'-(1-naftyl)valerohydraz idu, jako výchozí látky, 0,053 g (E)2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3- butenyl]-2'- (methansul fonyl )-4-met hyl -2 '-( 1 -naf t y 1 ) val erohydraz i du ve formě krémově zbarvené pevné látky.

MS:524 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,83 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1 (S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4feny1-3-butenyl]- 2'-(methansulfonyl)- 4-methyl-2'-(1-naftyl)valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 9 (i) až (iii) se připraví z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3butenyl)-4-methylvalergvé kyseliny a z 1-naftylhydrazi nu (E)·· ·· • · « ♦ · 9 · • 9 9 9

9 9 9

9 99 • · ·♦ ···· » · · • ···

2(R)-C1(S) - [(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3butenyl]-2'-(methansu 1 tony1)-4-methyl-2’-(1 -naftyl)valerohyd razid ve formě krémově zbarvené pevné látky.

MS:603 (M+H)⁺.

Příklad 11 (E)-2 '-(3-Hydroxybenzy1)—2 (R) — [ 1(S)-hydroxykarbamoyl)-4-fenyl3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hyl val erohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,375 g (E )-2 '-(3-hydroxybenzy1-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro- 2(RS)- pyranyloxy)karbony1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansul fony1)-4-methy1 valerohydraz idu, jako výchozí látky, 0,29 g (E)-2 '-(3-hydroxybenzyl-2.(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansu 1fony1)-4- methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:503 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO . 353K): 10,23 (1H, br s); 10,09 (1H, s); 8,98 (1H, s);

-8_z-4HTH7bTŠ)r7;30-(4H, m); 7,18 (1H, m); 7.09 (1H, m) 6,83-6,73 (2H, m); 6_;67 (1H, m); 6,24 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,05-5,94 (1H, m); 4^56-4,48 (2H, m), 3,14 (3H, s); 2,55-2,45 (1H, m) 2,33-2,18 (2H, m); 2,16-2,02 (1H, m); 1,50-1,40 (1H, m); 1,38-1,21 (1H, ra) 1,05-0,95 (1H, m); 0,75 (3H, d, J = 7 Hz); 0,71 (3H, d, J = 7 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,95 minut . Rozpouštědl o A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-(3-Hydroxybenzy1-2(R)-[1 (S) — [(tetrahydro-2(RS)pyranyloxy)karbonyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl )-4methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 9 (i) až (iii) se ·· ···· • · · • · ·· ♦ 9

9 99 ·· • ♦ 9 9 9 9 9 9 · · 9 9 9 9 '· · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

9 999 9 9 9 9 připraví z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbony1)-4-fenyl-3butenyl)-4-methylvalerové kyseliny a z 3-hydroxybenzylhydrazi nu (E)-2'-(3-hydroxybenzyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy ) karbamoy 1 ] - 4-fenyl- 3-butenyl]- 2'-(methansulfonyl)-4methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS:588 (M+H)⁺.

Příklad 12 (E)-2'-(2,4-Difluorfenyl )-2(R)-[1(S)-hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-buteny1]-2'-(met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,13 g (E)-2'-(2,4-difluorfenyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro- 2(RS)- pyranyloxy)karbamoy1]-4- fenyl-3- butenyl]-2'(methansu!fonyl)-4-methylvalerohydraz idu, jako výchozí látky, 0,083 g . (E)-2'-(2,4-dif1uorfenyl)- 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 510 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,37 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-(2,4-Difluorfenyl)-2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)4-methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 odstavce (iii) až (v) se připraví z (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-buteny1]-4-methylvalerové kyseliny, jako výchozí látky, (E)-2'-(2,4-di fluorfenyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2-(RS))-py 39 ·« ···· '·· • · · · · · • ··« * 4 • · · · · • · 4 9

9999 999 ·4 4 ranyloxy)karbamoyl]-4- fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

Př í klad 13 (E)-2 (R)-[1(S)-Hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl -3-but enyl]-2'-(met hansu!fonyl)-4-methy1-2'-(4-nitrofenyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,1 g (E)-2(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy 1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'- (methansu!fonyl)-4-methyl-2'-(4nitrofeny1)valerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,06 g (E)— 2(R)-[1(S)- (hydroxykarbamoyl)-4-fenyl - 3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2'-(4-nitrofeny1)val erohydrazidu ve formě žluté pevné látky.

MS: 51 9 (M+H) ⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,54 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ Ότθδ-5-%—T-F-A-^—T-y-p-s-l-ou-pe-e^—H-Y-P-BRP-BP-300A--(Ej-2(R)-[(Tetrahyd ro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hy1-2'-(4-ni trofenyl)valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle odstavce (iii) až (v) příkladu 2 se připraví z (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny a z 4-nitrofenylhyd razinu, jako výchozí látky, (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2 (RS))-pyranýloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansu! fony 1)-4-methyl-2'-(4-nitrofenyl)valerohydrazid ve formě žluté pevné látky.

9999

9 9 • 999 ♦ «

9 ·· «9

9·· · · 9 ·

9 · 9 · 9 ·

9 999 · 9 ·

9 · 9 · 9 ·

999 99 99

Příklad 14 (E)-2'-Acetyl-2(R)-[1(S)-hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]4-methyl-2'-(2-pyridyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,1 g (E)-2'-acetyl-2(R)-[1(S)-[(tetrabydro-2(RS)pyraný1oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-4-methyl-2'-(2-pyri dyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, po promytí ethylacetátového roztoku produktu 2% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného v podobě volné zásady 0,035 g (E)-2'-acetyl-2(R)[1 (S)-(hydroxykarbamoy!)-4-feny 1-3-butenyl]-4-met hy1-2'-(2-pyridyl)valerohydrazidu ve formě krémově zbarvené pevné látky. MS:439 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 5 až 20 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 15,67 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA;

rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-Acetyl-2(R)-[1(S) -Πtet rahyďro=2TR S')-pyraTryUoxy karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-4-methyl-2(2-pyridyl)val ero hydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle odstavce (i) a (i i) příkladu 4 se připraví z (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl3-butenyl]-4-methyl-22-pyridyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, (E)-2'-acetyl-2(R)-[1(S)-tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2'-(2-pyridyl )val e rohydrazid ve formě bílé pevné látky.

Příklad 15 (E)-2(R)-[1(S)—(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'(met hansulfony1 )-2',4-dimet hylvalerohydraz i d ♦ ♦ ···* ·· • · · · · • ··« · · • · φ · · • 9, ·· • · · · « · · · • · · · • · · · • · · «

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,122 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl ]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl2',4-dimethylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,033 g (E)~ 2(R) — [1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3- butenyl]-2'-(methan sulfonyl)-2',4-dimethylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:412 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO): 10,56 (1H, s); 10,46 (1H, s); 8,75 (1H, s); 7_z35-7_y25 (4H, m); 7,23-7,15 (1H, m); 6.31 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,10-6,00 (1H, m); 3,06 (3H, s); 3,04 (3H, s); 2,55-2,45 (1H, m); 2,37 (3H, m); 1,54-1,36 (2H, m);

3,02-0,93 (1H, m); 0,84 (3H, d, J = 7 Hz); 0,81 (3H, d, J = 7,5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použitírozpouštědlaA obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 90 % rozpouštědla B během 5 až 20 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 14,72 minut. Rozpouštědlo A: H20/0.1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansul fonyl )-2',4-dimethylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem :

(i) Směs 11 g pentaf1uorfenolu a 4,12 g 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v 50 ml hexanu se míchá 5 minut při teplotě místnosti. Výsledná pevná látka se odfiltruje, promyje se hexanem, vysuší se a přidá se do roztoku 5,0 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-f enyl-3-but enyl ]-4-met hyl val erové kyseliny v 50 ml dimethoxyethanu. Směs se nechá stát přes noc při teplotě 4 °C a zfiltruje se k odstranění dicyklohexylmočoviny. Filtrát se odpaří, zbytek se rozpustí v 50 ml dichlormethanu a do získaného roztoku se přidají 3 ml hydrazinhydrátu. Směs se míchá 6 hodin a pak se promyje postupně 5% roztokem kyseliny citrónové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a na··«« » * • ··« syceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se trituruje se systémem hexan/ ethylacetát (4:1) a výsledná pevná látka se odfiltruje. Získá se 4,68 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony1)-4-feny1-3-buteny1]-4-methylvalerohydrazidu v podobě špinavě bílé pevné 1át ky.

MS:361 (M+H) ⁺ .

(ii) Obdobným způsobem jako podle odstavce (ii) a (iii) příkladu 9 se připraví z 8,96 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-feny1-3-buteny1]-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 2,83 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2-(RS))-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2(methansulfonyl)-4-methylva 1erohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:482 (M+H)⁺.

(iii) Roztok 0,34 g hydrazidů, připraveného ve stupni (ii), v 7 ml dimethylformamidu se zpracuje 0,126 g methyljodidu a 0,293 g bezvodého uhličitanu draselného. Směs se míchá tři hodiny při teplotě místnosti a těkavé složky se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% kyselinu citrónovou. Ehylacetátová fáze se promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla se zbytek čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití systému hexan/ethylacetát. (4:1) a pak systému hexan/ethylacetát (2:1) jako elučního činidla. Získá se 0,122 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2-(RS))-pyranyloxy)-karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2',4-dimethylva 1erohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

Příklad 16 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se

• 9 ·9

9

9 »· 9999 ··

9« · ♦ · 99 · ·* připraví z 0,151 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,06 g (E)-2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1]-2' -(methansulfonyl)-4 methyl valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:398 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO):10,55 (1H, s); 10,34 (1H, s); 9,52 (1H, s); 8,85 (1H, s);

7.,36-7,25 (4H, m); 7,23-7,16 (1H, m); 6.30 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,08-5,98 (1H, m); 2,96 (3H, s); 2,56-2,46 (1H, m); 2,39-2,13 (3H, m); 1,53-1,33 (2H, m); 1,01-0,93 (1H, m); 0,83 (3H, d, J = 6,5 Hz); 0,80 (3H, d, J = 7 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B se zvýšením na 90 % rozpouštědla B během 5 až 20 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 14,13 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 17 (E)-2'-Benzyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hy1 valerohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,183 g (E)—2 —benzyl-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro ^2-(-RS_)^p_y_ra.ny_1-Ox y 1 karbamoy 1 1 -4-f eny 1 3-but eny 1 ]-2 -(methansul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,142 g (E)-2'- benzyl-2(R)-[1(S)- (hydroxykarbamoyl)-4- fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:488 (M+H)+.

nmr (d₆ DMSO, 353K); 10,22 (1H, br s); 10,1 (lH,s); 8,40 (1H, br s);

7,40-7,24 (9H, m); 7,22-7,15 (1H, m); 6,23 (1H, d, J = 15 Hz); 6,05-5,94 (1H, m); 4.63 (2H, m); 3,15 (3H, s); 2,54-2,44 (1H, m); 2,31-2,17 (2H, m); 2,14-2,01 (1H, m); 1,51-1,49 (1H, m); 1,34-1,18 (1H, m); 1,04-0,95 (1H, m); 0,74 (3H, d, J = 6,5 Hz); 0,70 (3H, d, J = 7,0 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,18 minut. Rozpouštědlo A: HzO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-benzyl-2(R)~[(1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl3-2'-(methansulfonyl)-4-methylva 1erohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)—2(R)—[(1(S)— [(tetrahydro- 2(RS)- pyranyloxy)karbamoy1j-4-fenyl-3-butenylj2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu s benzyl bromidem.

Příklad 13 (E)—2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4—fenyl-3-buteny13-2'-(methan sulfonyl )-2'-(4-methoxybenzy1)-4-methylvalerohydraz id

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,105 g (E)-2(R)-[(1 ( S)-[ ( tetrahydro-2( RS)-pyraný1oxy)karbamoy13-4- fenyl-3- butenyl]-2'-(methansu 1fonyl)-2'-(4methoxybenzy1)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,061 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl3~ ' - (met hansu! fonyl ) - 2 '.-(4-met hoxybenzy 1 )-4-met hyl val erohyd ra -z-i-du—v-e—f-o-rmě—b-í-l-é—pe-v-né—1-á-t-k-y-------MS:518 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 35 % rozpouštědla B po dobu 5 minut se zvýšením na 85 % rozpouštědla B z 5 minut na 20 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba:7,20 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1%TFA; rozpouštědlo B:CH3CN/0,085% TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-(4-methoxybenzy!)-4methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)— 2(R)-[(1(S)—[(tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl3-4-fenyl 3-butenyl3-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu se 4methoxybenzy!bromidem.

V·’' •· ···· • · • ··· ·· • · • · • · · · • · · ·· • ·· ·· ·· · · · · • · · · · • · 9 · 9 · • 9 9 9 9

999 ·· ··

- 45 Příklad 19 (E)-2'-A11y1 -2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-buteny1]2'-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,168 g (E)-2'-al1y1-2(R)~[(1(S )-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,013 g (E)-2'-allyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:438 (M+H) ⁺ . · inmr (d₆ DMSO, .· 353K): 10.26 (1H, br s); 10,08 (1H, s); 8,44 (1H, br s); 7,35-7,25 (4H, m); 7,22-7,15 (1H, m); 6,33 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,13-6,03 (1H, m) 5,90-5,78 (1H, m); 5,.28 (1H, m); 5,18 (1H, m); 4,05 (1H, m); 3,06 (3H, s); 2,63-2,53 (1H, m); 2,44-2,25 (3H, m); 1,59-1,45 (2H, m); 1.141,03 (1H, m); 0,85 (3H, d, J = 7 Hz); 0,82 (3H, d, J = 6,5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut, průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,36 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1% TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085% TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-Allyl-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)~ karbamoyl]-4-fenyl- 3-butenyl]-2'-(met hansu!fonyl)-4-met hylva 1erohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)-2(R)-[(1(S)[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4- fenyl-3-buteny1] 2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu s al 1yl bromidem.

Příklad 20 (E)—2'-(4-Brombenzyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3but enyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d • · · · • ·

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,215 g (E)-2'-(4-brombenzy1)-2(R)-[(1(S)-[(tetra hydro- 2(RS)-pyrany1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,147 g (E)-2'-(4-brombenzy1)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4fenyl-3- butenyl]-2'- (methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:566/568 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95% rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba:12,90 minut. Rozpouštědlo A: H2O/O,1%TFA;rozpouštědlo B : CH3CN/O,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

( E )-2' -(4-Brombenzyl )-2 (R)- [,(1 (S)-[ (t et rahydro-2(RS)-pyrany 1 oxy) karbamoy 1 ] - 4-f eny l -3-b'uťenyl ]-2'-(met Hansu 1 fonyl ) - 4 methyl valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako v příkladu 15 (iii) reakcí (E)-2(R)[ (1 (S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-bu tenyl]-2(met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu se 4-bromb e n z y Tb r om i“děTrn :

Příklad 21 ( E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansul fonyl )-4-met hyl-2'-(4-nitrobenzyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,159 g (E)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy)karbamoy!]-4- feny1-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl )-4-met hyl-2'-(4-nitrobenzyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,085 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but.enyl]2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2'-(4-ni trobenzyl)valerohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS:533 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 • · ···· ·· · · · ·· |«· ···· · · · · • ΦΦΦ < < · · ·· · % rozpouštědla Β se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut;průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,14 minut. Rozpouštědlo A: H2<9/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/ 0,085% TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(1(S)-[(Tetrahyd ro-2(RS)-pyraný 1oxy)-karbamoyl]4-fenyl- 3-butenyl]-2'-(methansulfonyl) - 4- met hy1-2'-(4-ni t robenzyl)va1erohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako v příkladu 15 (iii) reakcí (E)-2(R)[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-bu tenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylval erohydrazidu se 4-nitrobenzylbromidem.

Příklad 22 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'(methansulfonyl)-4-methyl-2'-propargylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,13 g (E)-2(R)-[(1(s)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy /karbamoy l“]^^4~f eny l~3~tĎLTfeny ^^'“(TneUhansu l”f ony Tj^l-met hyl-2'-propargylvalerohydraz idu, jako výchozí látky, 0,04 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-methyl-2'-propargylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:436 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO): 10,57 1H, s); 10,54 (1H, s); 8,84 (1H, br s); 7,35-7,25 (4H, m); 7,22-7,16 (1H, m); 6,30 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,09-5,99 (1H, m);

4,32-4,17 (2H, m); 3,44 (1H, s); 3,11 (3H, s); 2,.63-2,54 (1H, m); 2,41-2,17 (3H, m); 1,56-1,41 (2H, m); 1,03-0,93 (1H, m); 0,85 (3H, d, J = 7.0 Hz);

0,81 (3H, d, J = 6,5 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 40 % rozpouštědla B se zvýšením na 60 % rozpouštědla B během 15 minut;průtočná rychlost 1. ml za minutu. Retenční doba: 11,04 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 3Ό0Α.

» φφφφ φ φ φφφφ (E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahyd ro-2(RS)-pyranyloxy)-karbamoyl]4-feny1-3-but eny1]-2’-(met hansu!fony1)-4-methyl-2’-propargyl valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)-2(R)[ (1 (S)-[ (tet rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)-karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny 1 ]-2'-(met hansu 1fony1)-4-methylvalerohydrazidu s propar gylbromidem.

Příklad 23 (E)-2'-(Kyanomet hyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3but enyl ]-2'-(met hansu 1fony1)-4-met hylvalerohydrazíd

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,1S g (E)-2'-(kyanomethyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2 (RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met han su 1 fony 1)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,124 g (,E )-2'-( kyanomet hyl )-2 (R)-[ 1 (S)-(hyd roxykarbamoy 1 )-4-fenyl-3 buteny 1 ]-2'-(met hansu 1fony1)-4-methy1 valerohydraz idu ve formě .b_í_l-é_p-e-V-n-é_l-á-t-k-y-._:_____ nmr (d₆ DMSO): 10,94 (1H, s); 10.56 (1H, s); 8,56 (1H, br s); 7,37-7,25 (4H, m); 7.23-7,15 (1H, m); 6,33 (1H, d, J = 15,5 Hz); 6,10-5,99 (1H, m);

4,65 (2H, m); 3,17 (3H, s); 2,61-2,52 (1H, m); 2,40-2,19 (3H, m); 1,551.41 (2H, m); 1 06-0,95 (1H, m); 0 85 (3H, d, J = 7 Hz); 0,82 (3H, d, J =

6,5 Hz). ⁷ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,90 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-(Kyanomethyl)-2(R)-[(1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyraný! oxy)- karbamoyl]-4-feny1-3-butenyl]-2'-(methansu 1 fonyl )-4 methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)• · · · · 4 » · · • · ·· ·· ·* • · · · ······ · ·

2(R)-[(1(S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl 3- butenyl]-2'-(methansulfony1)-4-methylvalerohydrazidu s bromacet on i t ri1em.

Příklad 24 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2'(methansulfonyl)-4-methyl-2'-(2-fenylethyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,158 g (Έ )-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]- 4-feny1-3-butenyl]-2'-(met hansu 1fony1)-4-met hyl-2'-(2-feny1ethyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,093 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-buteny1] 2'-(methansulfonyl)- 4-methyl-2'-(2-fenylethyl)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky. MS:502 (M+H) ⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % během 15 minut;průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,90 minut. Rozpouštědlo A: HzO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B:CH3CN/O,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(1(S)-[(t etrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)-karbamoyl]4- fenyl-3-but enyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hyl-2'-(2-fenylethyl )valerohydrazid použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)-2(R)[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-bu teny1]-2'-(methansulfony1)-4-methyl-valerohydrazidu se 2-bromet hylbenzenem.

Příklad 25 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansul fonyl )-4-met hy1-2'-(ft ali mi domet hyl)valerohydraz i d • · · · · <

» · · • · · ·

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,187 g (E)-2(R)-[(1(S)-((tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansu 1fonyl)- 4-met hyl-2'-(ftalimidomethyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,127 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-buteny1] 2'-(met hansu 1fonyl)-4-methyl-2'-(ftalimi domet hyl)valerohydra židu ve formě bílé pevné látky.

MS:557 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO ·. 353K): 10,18 (1H, br s); 10,13 (1H, s); 8,40 (1H, br s);

7,92-7,82 (4H, m); 7,32-7,25 (4H, m); 7,22-7,15 (1H, m); 6,30 (1H, d, J =

15.5 Hz); 6,06-5,96 (1H, m); 5,30 (2H, s); 3,16 (3H, s); 2,56-2,43 (1H, m);

2.40-2.21 (3H, m); 1 60-1,40 (2H, m); 1,10-0,99 (1H, m); 0,80 (3H, d, J =

6.5 Hz); 0,77 (3H, d, J = 7.0 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštěd1 a A obsahujícího 5 % rozpouštědla 8 se zvýšením rozpouštědla B na 35 % během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,03 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B:CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)-karbamoy1]4-fenyl-3-but enyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2'-(ftalimidomethyl)valerohydraz id, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)-karbamoy 1 ]-4-fenyl3-butenyl]- 2'-(met hansu 1 fonyl )-4- met hyl va-1 erohydraz i du s Nbromethylftalimidem.

Příklad 26 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methan sul fonyl )-4-met hyl-2'-(2-ftalimidoethyl)valerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,134 g (E)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl3-4-fenyl- 3-butenyl]-2'-(methansul fonyl )-4-met hyl-2'-(2-ftalimidoethyl)valerohydrazidu, jako výchozí látky, • · · · · · » · · • ··· • · » · · ⁴ » · · « » · · ⁴ » · · ⁴ ·· ··

0,108 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl] 2 ' - (met hansulfonyl ) -4-met hyl-2'-(2-ftalirnidoethyl ) valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:571 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením rozpouštědla B na 95 % během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,56 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)-karbamoyl ]4-fenyl-3-but enyl]-2'-(met hansu 1fony 1)-4-met hyl-2'-(2-ftalimidoethyl)valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) reakcí (E)2(R)—[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)-karbamoyl]-4-fenyl3-buteny11-2'-(met hansu 1fony1)- 4- methylvalerohydrazidu se 2bromethylftalimidem.

Příklad 27

-(-E-)^3=C-y-k-l~obu-t-y-l—2-(-R-)=-[-1-(-S-)^-(-h-y-d-rox-yk-ar-bamoyl--)—4=í-en-y-l-=-3--butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-fenylpropionohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,159 g (E)-3-cyklobutyl-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro2(RS)- pyrany1oxy)karbamoy!]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-fenylpropionohydrazidu, jako výchozí látky, 0,103 g (E)-3-cyklobutyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-feny1propionohydrazidu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS:486 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením rozpouštědla B na 95 % během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,12 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHaCN/

0,08.5 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

• · · · · · » · · • · · · (E)-3-Cyklobutyl-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!]-4-feny!-3-buteny!]-2'-(met hansulfonyl)-2'-fenylpropionohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (i) až (v) ze 4-terc,-butylhyďrogen-2(R)-(cyk1 obutylmethyl)suke inátu se získá (E)-3-cyklobutyl-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4- fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2'-fe nylpropionohydrazid vě formě bílé pevné látky.

MS:570 (M+H)⁺.

Příklad 23 (E)-3-Cyk1opent yl-2(R)~[1(S) -(hyd roxykarbamoy!)-4-feny 1-3butenyl ]-2'-(methansulfonyl)-2'-feny1propi onohydrazí d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se .připraví z 0,2 g (E)-3-cyk1opentyl-2(R)-[(i(S)-[(tetrahydro'2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansul -f-on-y-l-)---2-'---f-en-y-Tp-r-©p-i-ono-h-y-d-r-a-z-i”d-u-,—j-a-k-o—v-ý-e-ho-z-í—1-á-t-k-y-j—0,-1-32—g (E)-3-cyklopentyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-bu tenyl]-2'-(met hansu 1fonyl)-2'-fenylpropionohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS:500 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením rozpouštědla B na 95 % během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,39 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ s1oupce:HYPERPEP 300A.

(E)-3-cyklopentyl-2(R)-[(1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-feny1-3-buteny1]-2'-(methansu 1fonyl)-2'-fe nylpropionohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) až (v)

4 · · 4 · ·· · 4 4 4

4444 4 4

4 4 4 4

4 4 4

4444444 44

- 53 4 4 4 4 » * 4 · ► 4 4 · » 4 4 4 • 4 4 4

44

Obdobným způsobem jako podle příkladu ze 4-terc.-buty1hydrogen-2(R)-(cyklopentylmethyl)sukcinátu se získá (E)-3-cyklopenty1-2(R)-[(1(S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyra nyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-but enyl1-2'-(met hansu!fonyl)- 2' feny1propionohyarazid ve formě bílé pevné látky.

MS:534 (M+H)+.

Příklad 23 ( E)-2'-(4-Bromf eny1)-2 (R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3but eny11-2'-(met hansu!fonyl)-4-methylvalerohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,35 g (E)-2'-(4-bromfenyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methan sul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,272 g (E)-2'-(4-bromfeny1)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3 butenyl]-2'-(met han sulfonyl ) -4-met hyl val erohyd raz.i du ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 5 52 (-M-+-H-)^---nmr (d₆ DMSO): 10,85 (1H, s); 10,31 (1H, br s); 8,48 (1H, br s); 7,58 (2H, m); 7,32 (2H, m); 7,29 (4H, m); 7,23-7,16 (1H, ra); 6,23 (1H, d, J = 15_z5 Hz); 6,07-5.97 (1H, m); 3_;23 (3H, s); 2,60-2,50 (1H, m); 2,41-2,12 (3H, m); 1,57-1,48 (1H, m); 1,47-1.35 (1H, m); 1,16-^06 (lH,.m); 0,85 (3H, d,

J = 6,5 Hz); 0_z78 (3H, d, J = 7,0 Hz).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením rozpouštědla B na 95 % během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,41 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2'-(4-Bromfenyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany 1 oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4 methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví

ná sledujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) z (E)2(R)-[(1(S)-[(t et rc.-butoxykarbony!-4-feny1-3-but eny 13-4-met hylvalerové kyseliny a ze 4-bromfeny1hydrazidu se získá (E)2'-(4- bromfenyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy) karbamoyl3~4-fenyl-3-butenyl1-2'-(methansu 1fonyl)-4-methylva lerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS :636/638 (M+H)⁺.

Příklad 30 ^?(E)-2'-(terč.-Butyl )-2(R)-[1 (S)-( hydroxy karbamoyl )-4-fenyl-3buteny1]-2'-(met hansulfonyl)-4-met hyl val erohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,35 g (E)-2'-(terc.-butyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyToxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-2'-(methan su1fony1)-4-methylvalerohydrazidu, jako výchozí látky, 0,272 g (E)-2'-(terc.-butyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamóy1)-4-fenyl-3 buteny1]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz idu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS:454 (M+H)+.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením rozpouštědla B.na 95 % během 5 až 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 16,56 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA;rozpouštědlo B: CH₃CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E )-2 '-(terč.-Butyl)-2(R)-[(T(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy) karbamoyl 3-4-fenyl-3-butenyl3-2'-(methansulfonyl)-4 methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) z (E)2(R)-[(1(S)-[(tetrc.-butoxykarbony!-4-fenyl-3-butenyl3-4-met • φ

Φ Φ φφφφ φ φ φφφφ φφ φφ hylvalerové kyseliny a z terc.-butylhydrazi nu se získá (E)-2'(terč.-butyl)-2(R)-[ (1(S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-2'- (methansulfonyl)-4-methylvalero hydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS:537 (M+H)⁺.

Příklad 31 (E)-2'-(Cyklohexy1 methyl)-2(R)-[1(S)~(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl -3-but ény13-2'-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,149 g (E)-2'-(cyk1ohexy1 methyl)-2(R)-[(1(S)C(tet rahydro- 2(RS)-pyranyloxy) karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl] 2’-(met hansu 1.fonyl )-4-met hyl val erohydraz i du 0,116 g (E)-2' (cyklohexylmethyl)-2(R)- 1(1(S)^L(hyd roxykarbamoyl]-4-fenyl-3 butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě b.í 1 é pevné 1 át ky.

MS: 494 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 ro-zpoxi-šlredTa^-B~s~e zvýš^_eTTí~m~rozjyoiršTrěTn^a—B na 95 %~]5ěTíem Γ5 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,67 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

( E) — 2'^(Cykl ohexylmet hyl)-2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl) 4-methylvalerohydrazid, používaný jako výchozí látka, se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)2(R)-[(1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl 3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydraz idu reakcí s cyklohexylmethylbromidem.

Příklad 32 (R)-[ 1 (R) — (Hydroxykarbamoyl)-2-ft ali midoet hyl]-2'-(met hansul-, • 9 999 9 • · 9 • 9 · 9 »♦

9 fonyl)-4-methyl)-4-methyl-2’-feny1 valerohydraz id

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,14 g 2(R)-[(1(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy) karbamoyl]- 2-ftali mi doethyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’fenyl valerohydrazidu 0,092 g 2(R)-[1(R)-(hydroxykarbamoyl)-2ftalimidoethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl)-2’-fe ny1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 517 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 10 % rozpouštědla B během 5 minut zvyšující se na 90 % rozpouštědla B od .5 do 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 15,52 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo BrCHsCN; Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2( R)-[(1 (R)-[(Jet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2ft a!i mi doethyl]- 2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalero hydrazid,, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následuj í c írn způsobem:.

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (iii) až (v) se z 2(R)-[1(R)-[(tetrc.-butoxykarbony1)-2-ftali midoet hy1]-4-methylvalerové kyseliny a z fenylhydrazi nu získá 2(R)~ [1 (R)-[(tet rahydr0-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2-ftalimidoet hyl )-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvale rohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 601 (M+H)⁺.

Příklad 33

2(R)-[2-Benzamid0-1(R)-(hyd roxykarbamoyl)et hy1]-2'-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,084 g 2(R)-[2-benzamido-1(R)-[(tetrahydro-2(RS)pyrany1oxy)karbamoyl]ethyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl- 2’ ·· ·*·· • · • · ·· • « fenylvalerohydrazidu 0,055 g 2(R)-[2-benzamido-1(R)-(hydroxykarbamoy1)et hyl]-2'-(met hansu!fonyl)-4-methyl-2’-fenylvalero hydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 491 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla po dobu 5 minut zvyšující se na 95 % rozpouštědla B od 5 do 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 15,54 rninut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA;

rozpouštědlo B: CH3CN/0,0S5 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[2-Benzamido-1(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbony1]ethyl]-2(methansu!fonyl)- 4-methyl-2’-fenylvalero hydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,705 g 2(R)-[1(R)-terc.-but,oxykarbonyl)-2-ftalimidoethyl]-2’-(met hansu!fonyl)-4- methyl-2’-fenylvalerohydra ži du v 1-5 ml methanolu .se zpracovává 0,51 ml hydrazi nhydrátu. Reakční směs se míchá v prostředí dusíku přes noc a odpaří se. Zbytek se míchá se. 25 ml systému dichlormethan/methano!/kyselina octová/voda (120:15:3:2). Po dvou hodinách vysrážená pevná látka se odfiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu 60 za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol/kyseli na octová/voda (240:24:3:2). Frakce, obsahující produkovaný amin, se spojí a odpaří se a zbytek se rozpustí ve 30 ml dichlormethanu a promyje se třikrát 10 ml podíly nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po vysušení bezvodým síranem hořečnatým se roztok odpaří, čímž se získá 0,42 g 2(R)-[2-amino-1(R)-terc.butoxykarbony!)ethyl]-2’-(met hansu!fonyl)-4-methyl-2’-feny1valerohydrazid ve formě bledě žluté pěny. ·

MS: 428 (M+H)⁺. .

(ii) Směs 0,42 g aminu, připraveného způsobem podle odstavce (i), a 0,,138 g benzoové kyseliny v 7 ml dimet hyl formami du se • 9 ···· ·*

9 9 · ·

9·· · ·

9 9 9 ·

9 9 ·

9999 999 ··

9 · ·

9 9 9

9 9 9

99 ochladí na teplotu 0 °C za míchání a přidá se 0,335 g 1-ethyl3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátový roztok se promyje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 5% kyselinou citrónovou, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Ethylacetát se odpaří a zbytek se trituruje se směsí etheru a hexanu, čímž se získá 0,331 g 2(R)-[2-benzamido-1(R)-terc.-butoxykarbonyl )ethyl]-2’(methansuIfony 1)-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazidu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 532 (M+H)⁺.

(iii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (i i i ) až (v) se z 2(R)-[2-benzamido-1(R)-terc.-butoxykarbonyl)et hy 1 ]-2’-(met hansu 1fony1)-4-methyl-2’-fenylvalerohydraz i d získá 2(R)-[2-benzami do-2(R)-[(t et rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamo yl ]et hyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i d ve formě bílé pevné látky.

MS: 575 (M+H)⁺.

Příklad 34

2(R)-[2-[(5-Brom-2-furyl)karboxamido]-1(R)-(hydroxykarbamoy1)ethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerhydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,195 g 2(R)-[2-[(5-brom-2-fury1)karboxamido]-1(R)(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyljethyl]-2’-(methansul fony 1 )-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazidu 0,127 g 2(R)-[2-[(5 brom-2- furyljkarboxamido]- 1(R)-(hydroxykarbamoyl)ethyl ]-2' (met hansu 1fony1)-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazidu ve formě kré mově zabarvené pevné látky.

MS: 560 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5

·» ·· • · • · ·« ···· * r · • ··· ·<·· ·»♦ ·« » ·· ·· · · · * • t ♦ · <

« · · · · · • · * · · *·· ·* ·· % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,69 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[2-[(5-Brom-2~furyl)karboxami do]-1(R)-(tet rahydro2(RS)~ pyranyloxy)karbamoyljethyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 33 (íi) a (iii) se z 2(R)-[2-amino-1(R)-(tetrc.-butoxykarbonyl)ethyl]2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu a z 5brom-2-furové kyseliny získá 2(R)-[2-[(5-brom-2-furyl)karboxamido]-1(R)- (tet rahydro-2(RS)- pyranyloxy)karbamoyl]ethyl]-2’(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 644 (M+H)⁺.

Příklad 35

2(R)-[1(R)-(Hydroxykarbamoyl)-2-[(2-thiazolyl)karboxamidoethyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,1 g 2(R)-[(1(R)-[(tetrahydro-2(RS)- pyranyloxy) karbamoyl]-2-[(2-thiazolyl)karboxamido]ethyl]-2’-(methansulfonyl )-4-met hyl -2 ’ -fenyl val erohydrazi du 0,041 g 2(R)-[1(R)(hydroxykarbamoyl)-2-[(2-thiazolyl)karboxamidoethyl]-2'-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 498 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,14 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ • · • · ·

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-t1(R)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2[(2-t hi azol yl)karboxamido]ethyl]-2(met hansu!fonyl)-4-methyl2’-fenylvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 33 (ii) a (iii) se z 2(R)-[2-amino-1(R)-[(tetrc.-butoxykarbonyl)ethyl]2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu az2thiazolkarboxy!ové kyseliny získá 2(R)-[1(R)-[(tetrahydro 2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]- 2-[(2- thiazolyl)karboxamido]et hyl]-2’-(methansu!fonyl)-4-methyl -2’- fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 582 (M+H)⁺.

Příklad 36

2(R)-[1(R)-(Hydroxykarbamoyl)-2-[(2-thienyl)karboxamido]ethyl] -2' -(methansul fonyl )-4-met hyl-2’-fenylvalerhydrazi d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,2 g 2(R)-[1(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy) karbamoyl]-2-[(2- thienyl)karboxamidoethyl]-2’- (methansulfo nyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu 0,115 g 2(R)-[1(R)-(hydroxykarbamoyl)-2-[(2-thi enyl)karboxami do]ethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerhydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 497 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,39 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(R)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2-

• · [(2-thienyl)karboxamido]ethyl]-2’-(methansulfonyl)- 4-methyl 2’-fenylvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 33 (ii) a (iii) se z 2(R)-[2-amino-1(R)-[(tetrc.-butoxykarbonyl )ethyl ] 2’-(met hansu!fonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu a z thiofen-2-karboxylové kyseliny získá 2(R)-[1(R)-[(tetrahydro 2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2-[(2-thienyl)karboxamido]ethyl] 2(met hansu!fonyl)-4-methyl -2’- fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 581 (M+H)⁺ .

Příklad 37

2(R)-[1(R)-(Hydroxykarbamoyl)-2-(3-fenylurei do)ethyl ]-2'(met hansu!fonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydrazi d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,157 g 2(R)-[1(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)kaTbamoyi^_Í^2^( 3= fenyl u re idoňthyl]-2’-CměfhansulTóTíyl )-4-met hyl-2’-fenylvalerohydrazidu 0,072 g 2(R)-[1(R)-(hydroxykarbamoyl)-2-(3-fenylurei do)ethyl]-2'-(met hansu 1fonyl)-4-methyl-2’fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 507 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,91 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(R)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl ]-2(3-fenylurei do)ethyl]-2’-(methansu!fonyl)-4-methyl-2’-fenylva1erohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Směs 0,8 g 2(R)-[2-amino-(1(R)-[(terc.-butoxykarbonyl)- 62 ethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’ -fenylvalerohydrazidu , připraveného způsobem podle příkladu 33 (i), 0,325 ml N,N-diisopropylethylaminu a 0,21 ml fenylisokyanátu v 10 ml dimethylformamidu se míchá při teplotě 60 °C v prostředí dusíku po dobu 2,5 hodin, Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 1M kyselinu chlorovodíkovou. Ethylacetátový roztok se promyje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyseným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se trituruje diethyletherem, čímž se získá 0,705 g 2(R)-[1(R)-[(terc.~butoxykarbonyl)-2-(3-fenylureido)ethyl]-2’-(methansulfonyl)-4- met hyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 547 (M+H)⁺.

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (i i i) až (v) se z hydrazidů, připraveného podle předešlého odstavce získá 2(R)-[1(R)-[(tet rahydro-2-(RS)-pyrany1oxy)karbamoy!]-2í( 3- fenyl urei do) et hyl ]-2 ’ - (met hansul fonyl )-4-met hyl -2’-fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 590 (M+H)+.

Příklad 38

2(R)-[1(R)-(Hydroxykarbamoy!)-2-[(2-t hi enyl)sulfonami do]ethyl ]-2'-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydraz i d

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,28 g 2(R)-[1(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2-[(2- thienyl)sulfonamido]ethyl]-2’-(methansulfo nyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu 0,066 g 2(R)-[1(R)-(hydroxykarbamoyl)-2-[(2-thienyl)sulfonami do]ethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalěrohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 533 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 ··· · ··· minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,65 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(R)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyrany 1oxy)karbamoyl ]2-[(2-thi enyl)sulfonami do]ethyl]-2'-(methansulfonyl )-4-methyl2’-feny1valerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,504 g 2(R)-[2-amino-1(R)-[(tetrc.-butoxykarbonyl )ethyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazi du ve 20 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 °C za míchání a přidá se 0,242 g 2-thiofensulfonylchloridu, Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% roztok kyseliny citrónové. Ethylacetátový roztok se promyje postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a odpaří se. Zbytek se trituruje s etherem, čímž se získá 0,487 g 2(R)-[1(R)-terc.-butoxykarbonyl)-2-[(2-thíenyl )sulfonami dojet hyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvale rohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 574 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno, v příkladu 2 (iii) až (v) se z hydrazidu, připraveného podle předešlého odstavce, získá 2(R)-[1(R)-[(tet rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-2[(2-thienyl)sulfonamido]ethyl]-2'- (methansulfonyl)-4-methyl 2’-fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 581 (M+H)⁺.

Příklad 39 (E)-2’-(Benzylsulfonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,1 g (E)-2’-(benzylsulfonyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2(RS)pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl 2’-fenylvalerohydrazidu 0,051 g (E)-2’-(benzylsulfonyl)-2(R)[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 550 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,62 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃ CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2’-(Benzylsulfonyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)pyranyloxy)karbamoyl ]-4-f enyil -3-but enyl ]-4-met hyl -2 ’ -f enyl va 1erohydrazid,použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Způsobem podle příkladu 1 (ii) se z 0,3 g (E)-2(R)-[1(S)(t et rc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-4-met hyl-2’-fenylhydrazidu a ze 0,543 g benzylsulfonylchloridu získá 0,316 g (E)-2’-(benzylsulfonyl )—2(R) — [1(S)-[(terc.-butoxykarbony!)-4 fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylhydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 591 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (iii) a v příkladu 2 (v) se z hydrazidu, připraveného podle předešlého odstavce, získá (E)-2-(benzylsulfonyl)-2(R)-[1(S)-(tetrahyd ro- 2(RS)-pyranyloxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’ fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 634 (M+H)⁺.

Příklad 40 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl ]-2'-(methan sul fonyl )-3-methyl-2’-fenylbutylhydrazíd

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se připraví z 0,098 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’- (methansulfonyl)-3-met hyl-2’-fenylbutylhydrazidu 0,054 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(met hansulfonyl)-3-methyl-2’fenylbutylhydrazidu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 460 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,72 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/. 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]4-f enyl-3-but eny1]-2’-(methansulfonyl)-3-methyl-2’-fenylbutylhydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následuj ícím způsobem:

Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (i) až (v) se ze 4-terc.-butylhydrogen-2(R)-isopropylsukcinátu získá (E)-2(R)[ 1 (S)-[(tet řahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!]-4-fenyl -3-butenyl ]-2’-(methansulfonyl)-3-methyl-2’-fenylbutylhydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 544 (M+H)⁺.

Příklad 41 (E)-2’-Acetyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid

Obdobným způsobem jako podle prvního odstavce příkladu 2 se >· ···« • · • ···

připraví z 0,23 g (E)-2’-acetyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenyl va1erohydrazidu 0,09 g (E)-2’-acetyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4- methyl-2’- fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 438 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,29 minut. Rozpouštědlo A: H20/0.1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2’~Acetyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-4-met hyl-2’-fenylvalerohydrazi d, použitý jakožto výchozí látka, se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 4 (i) a (ii) z (E)-2(R)-[1(R)-[(terc.-butoxykarbony!)-4-feny1-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny, připravené způspobem podle příkladu 2 (i).

Příklad 42_____________:-(E)-2’-(Ethylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl3-butenyl]-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i d

Roztok 0,190 g (E)-2’-(ethylkarbamoy-l)-2(R)-[1(S)-(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-but enyl ]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve směsi 2 ml dichlormethanu a 0,5 ml methanolu se zpracovává 9 ml met hansu!fonové kyseliny. Směs se míchá po dobu dvou hodin při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a rozpustí se v diethyl etheru. Roztok se vysuší síranem hořečnatým a odpaří se za získání gumy. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol (19:1) se získá 0,02 g (E)-2’-(et ií hyl karbamoyl)-2(R)-[1(S)4 (hydroxykarbamoyl)-4-fenyl- 3-bute - 67 nyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 467 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 40 % rozpouštědla B zvyšující se na 60 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,80 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2’-(Ethylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl -2’-fenyl valero hydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:.

(i) Roztok 0,8 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc. -butoxykarbony1

4-fenyl-3-but enyl]-4-met hyl-2’-fenylval erohydraz i du, při pravený způsobem podle příkladu 2 (iii), v 8 ml suchého dichlormethanu se uvede na teplotu 0 °C v prostředí dusíku s 0,88 ml ethyl isokyanátu a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a pak se odpaří za získání gumy. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ethylacetát (2:1) se získá 0,65 g (E)-2’-(ethylkarbamoy1)-2(R)[1 (S)-(terc.-butoxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’ fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pěny.

(ii) Zpracovává se 0,64 g terc.-butylesteru, připraveného podle předchozího odstavce, roztokem 50 % trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu po dobu tří hodin při teplotě místnosti a roztok se odpaří. Dvakrát se přidá toluen a roztok se vždy odpaří. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol (19:1) za získání 0,36 g (E)-2’-(ethylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)karboxy-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylval erohydrazi du ve formě skla.

·· ···· • · • ··· • ·

(iii) Rozpustí se 0,35 g karboxylové kyseliny, připravené podle předchozího odstavce, ve 3 ml dimethylformamidu, ochladí se na teplotu O °C a zpracovává se 0,26 g O-(tetrahydro-2H-pyran-2(RS)-yl)hydroxylaminu a 0,215 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a vlije se do vody. Pevná látka se odfiltruje a promyje se postupně 2M kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou a vysuší se ve vakuu. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ethylacetát (1:1) se získá 0,2 g (E)-2’-(ethylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS) pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylva 1erohydrazidu ve formě bílé pěny.

MS: 551 (M+H) ⁺.

Příklad 43 (E)-2’-(Benzylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydraz id

Míchá se 0,17 g ( E)-2’-(benzyl karbamoyl )-^2(R)-[ 1 (S)-{ (Οι érc .-butyl dimethyl si 1y1)hydroxykarbamoy1}-4-fenyl-3-butenyl]4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu v 5 ml systému kyselina octová/voda/tetrahydrofuran (3:1:1) po dobu 1,5 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,03 g (E)-2’-(benzylkarbamoyl)2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’ fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

tle: dichlormethan/methanol (3:1) Rf=0,43.

MS: 529 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,14 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

- 69 ·· ··♦·

(E)-2’-(Benzylkarbamoyl)-2(R)-[1(S) — {(0-t erc.-butyldimethylsilyl)hydroxykarbamoyl}-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-fe nylvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(E)-2’-(Benzylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-karboxy-4-fenyl-3butenyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid se připraví obdobným způsobem, jako je popsáno příkladu 42 (i) az (ii).

Rozpustí se 0,72 g karboxylové kyseliny, připravené způsobem podle předchozího odstavce, ve 2 ml dimethylformamidu, ochlazeného na teplotu 0 °C, a zpracuje se 1,0 g 0-(terc.-butyl dimethyl si lyl)hydroxylaminu, 0,2 ml N-ethylmorfolinu a 0,3 g 1-et hyl- 3-(3-di methylami nopropyl)karbodi imi dhydrochlori du.

Reakční směs se míchá při teplotě, místnost i. přes noc a odpaří se. Zbytek se vyjme do dichlormethanu, promyje se postupně 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 2M kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá hnědá polotuhá hmota. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol (33:1) a následnou triturací s ethylhexanem se získá 0,19 g (E)-2’-(benzylkarbamoyl)-2(R)-[1(S)-{(0terc.-butyldimethylsilyl)hydroxykarbamoyl}-4-fenyl-3-butenyl]4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě pevné látky, tle: dichlormethan/methanol (9:1): Rf - 0,65.

Příklad 44 (E)-2’-Cyklohexyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Rozpustí se 0,09 g (E)-2’-cyklohexyl-2(R)-[1(S)-{(0-4methoxybenzylJhydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve směsi 2,5 ml dichlormethanu, 0,35 ml trifluoroctové kyseliny a 0,1 ml anisolu při ·· ···· » · · • ··· teplotě 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu šesti hodin při teplotě místnosti, udržuje se na teplotě 4 °C přes noc a odpaří se. Dvakrát se přidá 10 ml toluenu a reakční směs se vždy odpaří. Triturováním zbytku s diethyletherem se získá 0,06 g (E)-2’-cyklohexyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-bu tenyl]-2’-(methansulfonyl)-4~methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 480 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,39 minut. Rozpouštědlo A: H2O/O,. % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2’-cyklohexyl-2(R)-[1(S)-{(0-4-methoxybenzy1jhydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl )-4-methyl valerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví ná. sledu jícím způsobem:

(i )_Roztok 10 g (E1-2(R1-Γ1f S1-t e rc.-but oxy kar bony 1 )j^4j=T„e^ nyl-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny ve 100 ml dichlormethanu se zpracovává při teplotě 0 °C 0,61 g 4-dimethylaminopyridinu, 6,1 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu a 2,4 ml methanolu. Reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu jedné hodiny, nechá se ohřát na teplotu místnosti, míchá se po dobu dalších tří hodin a odpaří se. Zbytek v diethyletheru se promyje postupně 2M kyselinou chlorovodíkovou, vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá hnědý olej. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ diethylether (9:1) a následným odpařením se získá 6,9 g diesteru. Tento diester se rozpustí ve směsi 45 ml dichlormethanu a 45 ml trifluoroctové kyseliny a roztok se míchá po dobu dvou hodin a odpaří se. Stopy trifluoroctové kyseliny se odstraní přidáním a odpařením toluenu (2 x 30 ml) a produkt se vysuší ·* .

·· ···· ·· • · · Z · • ··· ! Σ . · · · · ···· ··· ·· ··· ·· ·· ve vakuu, čímž se získá sukcínimátmonomethylester ve formě světle žlutohnědě zabarvené pevné látky.

(ii) Rozpustí se 2,0 g sukcínátmonomethylesteru, připraveného podle odstavce (i), ve 20 ml dimethylformamidu a roztok se ochladí na teplotu 0 °C. Přidá se 1,06 g hydroxybenzotriazolhydrátu, 1,5 g 1-ethyl~3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochl oridu, 1,7 ml N-ethylmorfoli nu a 1,5 g 0-(4-methoxybenzyl)hydroxylaminu. Reakční směs se míchá při teplotě 5 °C podobu půl hodiny a při teplotě místnosti po dobu 2,5 hodin a odpaří se ve vysokém vakuu. Zbytek v ethylacetátu se promyje se postupně 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 2M kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se,.čímž se získá pevná látka. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (1:4) se získá 1,83 g (E)-2(R)-[1(S)-{(ΟΧ4-met hoxybenzyl Jhydroxykarbamoyl )- 4-f enyl-3-butenyl ]^;-4-met hylvalerátu ve formě oleje, který tuhne stánín za získání bílé pevné látky.

MS: 440 (M+H)⁺.

(iii) Po kapkách se přidá 3,45 ml roztoku trimethylaluminia (2M v hexanu) do suspenze 1,03 g cyklohexylhydrazinu v 5 ml dichlormethanu v prostředí dusíku. Pozoruje se intenzivní vývoj plynů a pevná látka se postupně rozpouští v průběhu jedné hodiny za získání roztoku A.

(iv) Rozpustí se 0,44 g methylesteru, připraveného podle odstavce (i i) ve 4 ml dichlormethanu, přidá se roztok A a směs se zahřívá na vodní lázni po dobu šesti hodin (teplota lázně 45 °C). Roztok se ochladí, zpracuje se velmi opatrně nadbytkem 2M chlorovodíkové kyseliny (intenzivní vývoj plynu) a extrahuje se dvakrát vždy 20 ml ethylacetátu. Organická fáze se postupně promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasy99 99 «

• · • 9

9

99 ···· « · • ···

9999 999 ceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá žlutá guma. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/ methanol (24:1) se získá 0,19 g hydrazidu.

MS: 522 (M+H) ⁺ .

(v) Suspenduje se 0,11 g hydrazidu, připraveného podle odstavce (iv) ve směsi 5 ml dichlormethanu a 0,026 ml pyridinu v prostředí dusíku. Přidá se 0,046 g anhydridu methansulfonové kyseliny a reakční směs se míchá po dobu tří hodin při teplotě místnosti a zředí se 15 ml dichlormethanu. Roztok se promyje postupně 2M kyselinou chlorovodíkovou, vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá bílá pěna. Triturcí s diethyletherem se získá 0,095 g (E)-2 ’-cyk 1 ohexyl-2 (R)--[ 1 (S)-{ (0-(4-met hoxybenzy1}hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl) 4-methy1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 600 (M+H)+.

Příklad 45 ________ (E)-(2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)—4—feny1-3-buteny1]-2’-i sobut y 1 -2 ’ -(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Roztok 0,246 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxykarbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-i sobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve směsi 10 ml methanolu a 2 ml dichlormethanu se zpracuje 0,006 ml methansulfonové kyseliny. Reakční směs se míchá po dobu tří hodin při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Ethylacetátová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se trituruje s hexanem a získá se 0,119 g (E)~ 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-i sobut yl 2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

• · · · » · · » · · • · · · · · » · · • ···

MS: 454 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,17 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyranyloxykarbamoyl]-4fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylval erohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,60 g (E)-2(R)-[1(S)-terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu, 0,166 ml isobutyraldehydu a krystalu 4-toluensulfonové kyseliny v 10 ml dichlormethanu se míchá podobu jedné hodiny na 0,4 nm molekulárním sítu. Reakční směs se zfiltruje, rozpouštědlo se odpaří a nahradí se 10 ml methanolu. Přidá se několik krystalů bromkresolové zeleně za získání žlutého roztoku. Do tohoto _roztoku se přidá 0,116 g_kyanoborhydridu sodného v malých dávkách. Žlutá barva roztoku se udržuje periodickým přidáváním 4M roztoku chlorovodíku v dioxanu, Methanol se odpaří a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Vodná vrstva se promyje dvakrát dichlormethanem a spojené organické vrstvy se promyji-dvakrát 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Dichlormethanová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ethylacetát (7:3). Získá se 0,312 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné 1át ky.

MS: 417 (M+H)⁺.

(ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iv) a (v) se ze • · · · • · · · · « • · • · · · • · · (E)-2(R)-[1(S)-[(t et rc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]—2’ — isobutyl-4-methylvalerohydraz idu jako výchozí látky získá 0,249 g (E)-(2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 538 (M+H) ⁺.

Příklad 46 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl -3-but eny1]-2’-isopropyl -2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45 avšak za použití acetonu místo isobutyraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)-4-feny1-3-butenyl]-2’- iso propyl-2(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 440 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B se zvýšením na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,16 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 47 (E)-2(R) — [1 (S)-(Hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-butenyl ]-2’-cyklopentyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz id

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45 avšak za použití cyklopentanonu místo isobutyraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]—2 ’ — cyklopentyl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d.ve f01— mě bílé pevné látky.

MS: 466 (M+H)⁺.

·· • · • · • · · · ·· ··

HPLC: Akceleracím' eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu dvou minut s následným zvýšením na 80 % rozpouštědla B během 18 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 17,57 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 48 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxýkarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2’-(4t et rahyd ropy raný 1)-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45 avšak za použití t et rahyd ro-4-H-^py ran-4-onu místo isobutyraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1 3-butenyl]-2’-(4-t et rahyd ropyranyl)-2’-(met hansulfonyl )-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 482 (M+H)⁺ .

HPLC: AkceTerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu dvou minut s následným zvýšením na 80 % rozpouštědla B během 18 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,72 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 49 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1]-2’-(4-tetrahydrot hi opyraný1)-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45 avšak za použití tetrahydrothiopyran-4-onu místo isobutyraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-j[1 (S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl3-butenyl]-2’-(4-t et rahydrot h Topyraný1)-2’-(met hansulfonyl )-4methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

• · · · ··

MS: 498 (M+H) ⁺ .

HPLC: Akcelerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu dvou minut s následným zvýšením na 80 % rozpouštědla B během 18 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 17,35 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 50 (E)-2(R)-[1(S) — (Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2’-(4-piperidinyl )-2 ’ -(met hansul fonyl )-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45 avšak za použ i t í 1 -t et rc.-butoxykarbonyl-4-pi per i donu mí sto i sobut yraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1 (S)-(hydroxyk.arbamoy 1 )-4-fenyl-3-but enyl ]-2’-(4-pi peri di nyl)-2’-(met hansu 1fonyl)4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 481 (M+H)⁺.

HPLC: Akcelerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu dvou minut s následným zvýšením na 80 % rozpouštědla B během 18 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,39 minut. Rozpouštědlo A: H₂0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 51 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl] -2’-(isobutyl)-2(isopentanoy1)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,097 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy ) karbamoy 1 ]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(isobutyl)-2’-(isopentanoyl )-4-methylvalerohydrazidu získá 0,047 g (E)-2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-but enyl]-2’-isobut yl-2’-(í šopen ·· ·· • · · · · · • · · ⁴ • · · ⁴ ·· ·· tanoyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 460 (M+H)⁺, 4S2 (M+Na)⁺

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,79 minut. Rozpouštědlo A: H20/0.1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!]-4fenyl-3-butenyl]-2’-(i sobut yl)-2’-(i šopent anoy1)-4-met hylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se získá následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,25 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrc.-butoxykarbonyl)-4feny 1-3-buteny1]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazid, 0,061 ml pyridinu a krystalu 4-d i met hy 1 arni nopy r i d i nu v 6 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 °C v prostředí dusíku. Přidá se 0,091 ml isopentanoylchloridu a reakční směs sé nechá ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs se míchá po dobu dvou hodin při teplotě místnosti, zředí se dichlormethanem a promyje se_

2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a solankou. Dichlormethanová fáze se vysuší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v 10 ml roztoku 20 % trif1uoroctové kyseliny v dichlormethanu a míchá se při teplotě místnosti po dobu dvou hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí bleskovou sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla 1 % methanolu v dichlormethanu. Získá se 0,16 g (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-feny1-3-buteny1]-2’-(i sobu tyl)-2 ’-(isopentanoy1)-4-methylvalerohydraz idu ve formě bílé pěny.

MS: 445 (M+H)⁺.

(ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (v) se z 0,16 g ( E )-2(R)-,[ 1 (S)-(karboxy)-4-fenyl -3-but eny 1 ]-2 ’ - (i sobut yl )-2(isopentanoyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,097 g (E)-2(R)~ • · • · · · • · · · « · ···· [ 1 (S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl -3-butenyl]-2’-(i sobut yl)-2’-(isopentanoyl)-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 544 (M+H)⁺.

Příklad 52 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(isopropy 1 )-2’-(cyk1ohexankarbonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 51 avšak za použití cyk1ohexankarbony1chloridu místo isopentanoy1ch1oridu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2 ’ -(isobutyl )-2’-(cyklohexankarbonyl)-4-met hylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 486 (M+H)⁺.

HPLC: Akcelerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 35 % rozpouštědla B po dobu 5 minut s následným zvýšením na 70 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 15,44 minut. Rozpouštědlo A: H₂0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 53 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylN-(2,6-dioxopiperidino)valeramid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45 se z 0,095 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany 1 oxy karbamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-4-met hyl-N-(2,6-di oxopi peri d i no) val érami du získá se 0,027 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykárbamoyl )-4’-f enyl-3-but eny 1 ]-4-methy 1 -N-( 2,6- dioxopiperidi no)-valéramidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 416 (M+H)⁺.

9 9 9

9 · 9 *· ·· · · ·

999 ·

9 9 9 • * * «······ · ·

HPLC: Akceleracím' eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu 5 minut s následným zvýšením na 70 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxykarbamoyl]4-fenyl-3-butenyl]-4-met hy1-N-(2,6-d i oxopi per i d i no)valeramid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 1,0 g (E)-2(R)-{1(S)-terc.-butoxykarbony1)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu, 0,35 g glutaranhydridu a 0,85 ml triethylaminu ve 30 ml suchého toluenu se zahřívá pod zpětným ch 1 ad i čem, v prost řed í dusíku po dobu sedmi hodin. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a promyje se 2M vodnou chlorovodíkovou kyselinou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. ' Zbytek se __trituruje s diethyletherem. Získá se 0,623 g ( E)-2(R)-[1(S)(terč.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-but enyl]-4-met hyl-N-(2,6-dioxopiper idino)valéramid ve formě bílé pevné látky.

MS: 457 (M+H)⁺.

(ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (iv) a (v) se z 0,62 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-N-(2,6-dioxopiperidino)valéramidu získá 0,095 g (E)-2(R)-[1(S)— [(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxykarbamoyl]-4-fe nyl-3-butenyl]-4-met hyl-N-(2,6-dioxopiperidino)valeramid ve formě bílé pevné látky.

MS: 500 (M+H)⁺.

Příklad 54 (E)-N-(tetrahydro-l,2-thiazin-2-yl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarba• · • · · • · · moy 1)-4-fenyl-3-butenyl]-4-met hylval érami d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45 se z 0,048 g (E)-N-(tetrahydro-1,2-thiazin-2-yl )2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxykarbamoyl]-4-fenyl-3 buteny1]-4-methylval éramidu získá 0,01 g (E)-N-(tetrahydro-1,2 thiazin-2-yl)-2(R)-[1(S) - (hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylval éramidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 438 (M+H) ⁺.

(E)-N-(Tetrahydro-1,2-thiazin-2-yl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2 (RS)-py raný 1 oxy kar bamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl valeramid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i ) Roztok 5,64 g terc.-butylesteru 1eucové kyseliny a 3,6 ml pyridinu ve 40 ml dichlormethanu se přidá po kapkách do roztoku 6,0 ml anhydridu trifluormethansulfonové kyseliny v 60 ml d i ch 1 ormet hanu v prostředí dusí.ku při teplotě 0 °C. Po 10 mj_nátách se směs promyje dvakrát vodou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Směs se zkoncentruje přibližně na třetinu původního objemu a po kapkách se do chladného (0 ’C) roztoku ani ontu, připraveného zpracováním 5,22 g terč.-butylmet hy1malonátu v 50 ml dimethylformamidu 1,32 g 60% suspenze hydridu sodného v minerálním oleji v prostředí dusíku v průběhu dvou hodin. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a roztok se promyje vodou: Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá 10,0 g 1,2-terc.butyl-1,4-dimethyl-1,1,2(R)-pentantrikarboxylátu ve formě červeného oleje.

(ii) Přidá se 1,53 g 60% suspenze hydridu sodného v minerálním oleji do míchaného roztoku 12,55 g 1,2-terc.-butyl-1,4-dimet hyl-1 ,1,2(R)-pentantrikarboxy1átu ve 120 ml dimethylforma·· ···· • ·· midu v prostředí dusíku. Reakční směs se míchá až do ukončení vývoje plynu (přibližně jednu hodinu), roztok 7,54 g cinnamylbromidu v 70 ml dimethylformamidu se přidá po kapkách a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnoti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se dvakrát vodou. Organická fáze se vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ethylacetát (9:1). Získá se 15,06 g (E)—1,2— terc.-butyl-1,4-di met hyl-1-(3-fenylprop-2-en-1-yl)-1,1,2(R) pentantrikarboxylátu ve formě bledě žlutého oleje. » (iii) Roztok 2,7 g (E)-1,2-terc.-butyl-1,4r-dimethyl-1-(3-fenylprop-2-en-1-yl)-1,1,2(R)-pentantrikarboxylátu ve 30 ml roztoku 20 % trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu se míchá· při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí ve 20 ml toluenu. Přidá se 1,6,ml triethylaminu a směs se míchá při teplotě zpětného toku podobu dvou hodin. Po ochlazení se směs promyje 2M vodnou kyseli.nO_u__C-h_Lo.r.o_v_o-d-í_k-0_V-0-U_a_v_od-0-u___0xg.anj_cká_f_áz.e_s.e_vy_s.u.šjí_s_e__b.ez-_ vodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za získání bledě žlutého oleje. Olej se rozpustí v 10 ml hexanu a přidá se 0,6 g cyk1ohexy1aminu. Získaná sůl se oddělí filtrací, suspenduje se ve 20 ml etheru a promyje se 1M kyselinou sírovou.

Etherová fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za získání 1,5 g (E)-2(R)-isobutyl-4-methyl-3[(RS)-3-fenylprop2-en-1-yl]sukcinátu ve formě bílé pevné látky.

(iv) Roztok 40 g 4-chlor-1-butansulfonylchloridu ve 400 ml diethyletheru se přidá po kapkách do roztoku 30,4 g terc.-butylkarbazátu a 17 ml pyridinu ve 400 ml diethyletheru o teplotě místnosti. Reakční směs se míchá při teplotě místnoti po dobu 72 hodin a promyje se vodou. Oddělená organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Získaný olejový zbytek po odpaření rozpouštědla sej čistí bleskovou sloupcovou chromatografií

na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ ethylacetát (8:2 až do 6:4). Získá se 10,25 g terc.-butyl-2~ [(4-ch1orbutyl)su1fonyl]karbazátu ve formě bílé pevné látky.

(v) Přidá se 1,7 g 60% suspenze hydridu sodného v minerálním oleji do roztoku 10,25 g terc.-butyl-2-[(4-chlorbutyl)su1fonyl ] karbazát u ve 300 ml suchého tetrahydrofuránu při teplotě místnosti v prostředí dusíku. Míchá se při teplotě místnoti po dobu 43 hodin, rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se vodou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se překrystaluje ze systému ethylacetát/hexan za získání 1,86 g terc.-butyl-(tetrahydro-1,2-thiazin-2-yl)karbamát-S,S-dioxidu ve formě bledě žluté pevné látky.

(vi ) Roztok 1,86 g terc.-buty1 -(tetrahydro-1,2-thiazin-2-y1)~ karbamát-S,S-dioxidu ve 20 ml 4M chlorovodíku v ethylacetátu se míchá při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se míchá po dobu pět minut, zfiltruje se a tak se získá 1,24 g tetrahydro-1,2-thiazin-2-amin-S,S-dioxidu ve formě bílé pevné látky.

(vii) Roztok 1,39 g (E)-2(R)-isobutyl-4-methyl-3-[(RS)-3-fenyl prop-2-en-1-yl]sukcinátu v 15 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu -10 °C v prost ředí dusíku. Přidají se 4 kapky dimethyl formami du a 0,418 ml oxalylchloridu a směs se nechá ořát na 0 °C v průběhu jedné hodiny. Rozpouštwqdlo se odpaří a nahrdí se 2 ml dichlormethanu. Získaný roztok se přidá po kapkách do roztoku 1,24 g tetrahydro-1,2-thiazin-2-amin-S,S-dioxidu a 1,4 ml triethylaminu ve 20 ml dichlormethanu v prostředí dusíku při teplotě 0 °C. Reakční směs se udržuje na teplotě 0 °C přes noc a promyje se vodou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Zbytek po odpaření rozpouštědla se čistí bleskovou jš^oupcovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (2:8 ·· ·» • · · · • · · · ·· ···· » · · • · ·· ·· ·· až do 10:0). Získá se 0,44 g (E)-N-(tetrahydro-1,2-thiazin-2yl )-2(R)-[1(S)-(methoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl valeramidu ve formě bílé pevné látky.

(viii) Přidá se 0,573 ml 2M roztoku trimethylaluminia v toluenu do roztoku 0,134 g 0-(tetrahydro-2H-pyran-2(RS)-yl)-hydroxylaminu v 5 ml sudhého toluenu o teplotě 0 °C v prostředí dusíku. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny a najednou se přidá 0,10 g (E)-N-(tetrahydro-1,2thiazin-2-yl )-2(R)-[1(S)-(met hoxykarbonyl)-4-feny1-3-but eny 1 ]4-methylval éramidu. Reakční směs se zahříváním udržuje na teplotě 55 °C po dobu tří hodin a nechá se vychladnout na teplotu •místnoti přes noc. Směs se zředí ethylacetátem a promyje se postupně 2M kyselinou chlorovodíkovou a 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,048 g (E)-N-(tetrahydro-1,2-thiazin-2-yl)-2 (R)-[1(S)-[(t etrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]4-feny 1 -3-buteny1]-4-methylval éramid ve formě bílé pevné látky -MS-:—5-2-2—(-M-+-H-)*-,-Příklad 55 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-feny1-3-but enyl]-2’-(methansulfonyl)-2’-fenylhexanohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 1 se z 0,37 g (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-fenyl-3-buteny1]-2’-(met hansu 1fonyl)-2’-fenylhexanohydrazidu získá 0,1 g (E)-2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansul fonyl)-2’-fenylhexanohydrazidu ve formě bílé pevné látky MS: 474 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost , 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,97 ·· ···· ·· • · · · φ • Φ·· · · • · · · φ « · φ Φ φ · · Φ • · · · • φ Φ · «· · ·

CHsCN/ minut. Rozpouštědlo A: Η2θ/Ο,1 % TFA; rozpouštědlo Β:

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2 (R)-[ 1 (S)-(Karboxy)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(methansulfonyl)-2’-fenylhexanohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 54 (i) a (ii) avšak za použití benzyl-2-hydroxyhexanoátu místo benzylterc.-butylmalonátu se získá (E)-1,2-terc.-butyl-1-(3-fenylprop-2-en-1-yl)-1,1,2(R)-hexantrikarboxylátu ve formě žlutého oleje.

>

(ii) Roztok 2,27 g hydroxidu sodného ve 20 ml vody se přidá do roztoku 6,47 g (E)-1,2-dibenzy1-1-terc.-buty1-1 -(3-feny1prop-2-en-1-yl)-1,1,2(R)-hexantrikarboxylátu ve 40 ml ethanolu. Reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem přes noc, ochladí se a odpaří. Zbytek se zředí vodou a okyselí se na hodnotu pH 1 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Vodná fáze se extrahuje dvakrát ethylacetátem, spojené organické fáze se promyjí vodou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědla se odpaří a zbytek se rozpustí v 50 ml toluenu. Přidá se 1,53 ml triethylaminu do směsi, která se pak zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 3,5 hodin a nechá se vychladnout přes noc. Směs se promyje 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a získaný žlutý olej se rozpustí v hexanu a zpracovává se s 1,09 g cyklohexylaminu za vzniku soli, která se odfiltruje. Sůl se rozdělí mezi ethylacetát a 1N kyselinu sírovou a organická fáze se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Získá se 1,3 g (E)-2(R)-butyl-4-terc.-butyl-3-[(RS)-(3-fenylprop-2-en-1-yljsukcinátu ve formě bledě žluté pevné látky.

(iii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (i) a (ii) se ·· ···· » · · • · ·· ·· ·· • · 9 ·

9 9 · « · · · • · 9 9

9 9 9 z (E)-2(R)-but y1-4-t erc.-butyl-3-[(RS)-(3-fenylprop-2-en-1-yl] sukcinátu získá (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-fenyl-3-butenyl]2’-(met hansu 1fonyl)-2’-feny1hexanohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 459 (M+H)⁺.

Příklad 55 (E)-2(R)-[1 (S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-2'-(methan sulfonyl)-2’,3-difenylpropionohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 44 se z 0,162 g (E )-2(R)-[1(S)-({0-4-methoxybenzy 1 }hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2(met hansu 1fonyl)-2’,3di fenylpropionohydraz idu získá 0,04 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4~feny1 -3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-2’,3-dife nylpropionohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 508 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 .mlnut_;_._.p_rů_t_o_čná__r_ychJ_o_s_t__1_m_l__z_a__m_i_auJ:-U___Rel-enón_í—do-ďa.:_1-2-,-2-5minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-({0-4-methoxybenzy1}-hydroxykarbamoy! )-4-fenyl-3-butenyl]—2 * — (methansulfonyl)-2’,3- di fenylpropionohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 55 (i) až (iii) avšak za použití benzyl-a-hydroxybenzenpropanoátu, jako výchozí látky, se získá (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methan sul fonyl)-2’,3-difenylpropionohydrazid ve formě bílé pevné látky.

99

9 9 <

• · · ·

9 ·· ···· * * · • fi (ii) Roztok 0,29 g (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-23-difenylpropionohydrazidu v 5 ml di methylformamidu se ochladí na teplotu 0 °C v prostředí dusíku a přidá se 0,18 g (0-4-methoxybenzyl)hydroxylamí nu a 0,124 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbod i imidhydrochloridu. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v dichlormethanu a promyje se vodou. Organické fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,17 g (E)-2(R)-[1(S)-({0-4-methoxybenzyl}-hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfony!)-2’,3-difeny 1propionohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

Příklad 57 ( E)-2(RS)-[1 (RS)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-2,2’-di fenylacetohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci .p-ř_i_kJ-ad-U^5—S-e_z—1-,-05--g_(_E-)—2-(-RS-)—[-1-CR-S-)--.(_tetrahyd r o-2-(-RS-)—P-y-=— raný1oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-2 2’-difenylacetohydrazidu získá 0,598 g (E)-2(RS)-[1(RS)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-2,2’-difenylacetohydrazidu ve formě bílé.pevné látky.

MS: 494 (M+H)⁺.

HPLC: Akcelerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 35 % rozpouštědla B po dobu pěti minut s následným zvýšením na 80 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 8,54 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH₃CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(RS)-[1(RS)-(Tét rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2,2’-di fenylacetohydraz i d použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způso44 44

4 4 4 ·4 4 • · · ·

4444

4 • 444

44 bem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 55 (i) až (iii) avšak za použití benzylmandelátu se získá (E)-2(RS)[ 1 (RS)-(karboxy)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-2,2’ difenylacetohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 479 (M+H)+.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (v) se z (E)-2(RS)-[1(RS)-(karboxy)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-2,2’-difenylacetohydrazidu získá 1,1 g (E)-2(RS)-[1(RS)(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but enyl]-2’(methansulfonyl)-2,2’—difenylacetohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 578 (M+H)⁺.

Příklad 58 .

,(E)-2(R)-[1 (S)-( Hyd roxykarbamoy 1 )-4-(2-thi azolyl )-3-but enyl ]2' - (met hansu 1 fonyl )-4-met hy 1 -2 ’ -fenyl vale rohyd r az_i_d_

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45 se z 0,29 g (E)-2(R)-[1(S)-(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-(2-thiazoly1)-3-butenyl]-2'-(methansul fony1)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu získá 0,17 g (E)-2(R)~ [1(S)— (hydroxykarbamoy1)-4-(2-thiazolyl)-3-buteny 1 ]-2 ’-(met hansu!fony1)-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 481 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,97 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

ΦΦ Φ·φ· • · • ··· φφ φ φφ φφ • φ φ φ φ · · · • φ · · φ φ φ · φφ φφ (Ε)-2 (R)-[1(RS)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoyl ]4-(2-thiazolyl)-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methy1-2’-fenyl val erohydraz i d, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 4,0 g (E)-2(R)-[1(RS)-(terc.-butoxykarbony1)-4-feny1-3-buteny1]-4-methylvalerové kyseliny ve 200 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu -78 °C a ozon se probublává roztokem až do přesmyku na modrou barvu. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a přidá se 20 ml dimethylsulfoxidu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu tří hodin a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou sloupcovou chromatografií na silikagelu za použiti jako elučního činidla systému hexan/ethylacetát (1:1). Získá se 1,8 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl )propan-3-al]-4-met hylvalerová kysel i na ve formě slabě žluté pevné látky.

(ii) Přidá se 0,25 g terc.-butoxidu draselného do roztoku 0,79 g trifeny1 -(2-thiazolylmethy1)fosfoniumchloridu v 10 ml suchého toluenu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu tří hodin a přidá se roztok 0,83 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl ) propan-3-al J -4-met hyl val erové kyseliny v 5 ml toluenu a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu dalších 48 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí bleskovou chromatografi i na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol 95:5). Tak se získá 0,43 g (E)2(R)—[1(S)-[(terč.-butoxykarbonyl)—4—(2—thiazolyl)-3-butenyl]methylvalerová kyselina ve formě slabě žlutého oleje.

MS: 354 (M+H)⁺.

(iii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (i) až (iii) a v příkladu 2 (v) se z (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-(2-thiazolyl)-3-butenyl]methylvalerové kyseliny získá (E)-2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4 -(2thiazolyl)-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methy1-2’-fenylva·· ♦ ·

4 4 4 « · 9 9 ·· ♦··· v · · • · · ·

1erohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 565 (M+H)⁺ .

Příklad 59 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy1)-4-feny1-3-but enyl]-2’-(isobutyryl-2’-i sobutyl-4-met hylvalerohydrazid

Roztok 0,32 g (E )-2(R )-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(isobutyryl-2’-i sobut yl-4methylvalerohydraz idu v 10 ml methanolu se zpracovává 0,03 g 4-toluensulfonové kyseliny. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu dvou hodin a odpaří se, čímž se získá sklo. Tento zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,15 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-but enyl]-2’-(isobut y.ryl-2 ’-i sobut yl-4-met hyl val erohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 446 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla B po dobu 5 minut zvyšující se na 65 % rozpouštědla B během 5 až 20 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 17,48 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP

300A.

(E)-2(R)-[1(RS)-t(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]4-fenyl-3-butenyl]-2’-(.isobutyryl-2’-i sobut yl -4-met hy 1 val ero hydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,70 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu, 0,38 ml pyridinu a krystalu 4-dimethylaminopyridinu'v 8 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 ’C v prostředí dusíku.. Přidá se 0,067 ml anhydridu isomáselné kyseliny a reakční směs se nechá • · • · • · ► · · <

·· 9 9 do dobu 16 *· ···· '· 9 9 • · 99 9 · ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs se míchá hodin při teplotě místnosti, zředí se dichlormethanem a promyje se 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a solankou. Dichlormethanová fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (1: 5), přičemž se po odpaření získá 0,56 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.bu t oxy karbonyl )-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(i sobut yry1)-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pěny,

MS: 4S7 (M+H) ⁺.

(ii) Rozpustí se 0,56 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(i sobutyry1)-2’- isobut yl-4-met hyl valerohydrazidu ve 20 ml roztoku 50 % trif 1uoroctové kyseliny v d i chlormet hanu a míchá se při teplotě mí st nost i . po dobu 1,5 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a stopy trif1uoroctové kyseliny se odstraní přidáním a odpařením toluenu (2 x 10 ml). Zbytek se trituruje se systémem diethylether/hexan (1:1), čímž se získá 0,39 g (E)-2(R)-[1(S)-(karboxy)-4-feny1-3-buteny1]-2’(isobutyry1)-2’-1sobuty1-4-methy1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 431 (M+H)⁺.

(iii Obdobným způsobem jako podle příkladu 2 (v) se z 0,39 g (E)-2(R)-[1( S )-( karboxy )-4-fenyl -3-buteny-l]-2’-(isobutyryl )2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu získá 0,32 g (E)-2(R)[1 (S)-[(t etrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl - 3-but enyl]-2’-(isobutyryl)—2’— isobut yl-4-met hylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 530 (M+H)+.

Příklad 60 (E)-2’-Acetyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 59 avšak za použití acetanhydridu místo anhydridu isomáselné kyseliny ve stupni (i) se získá (E)-2’-acetyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobut yl-4-met hylvalerohydraz i d ve formě bílé pevné látky.

MS: 418 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční rozpouštědlo A; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 4,86 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 61 (E)-2’-Benzoyl-2’-isobutyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl -3-but enyl ]-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 59 avšak za použití benzoy1ch1oridu místo anhydridu isomáselné kyseliny ve stupni (i) se získá (E)-2’-benzoy1-2’-isobuty1-2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoyl)- 4-fenyl-3-butenyl]-4- methylvalerohydraz id y_e__f„o_rm_ě__b„íJ„é„p_ev_n_é.__l_á_t_ky_,_

MS: 480 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,37 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 62

Methyl-(E)-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4methylvalerýl]-1-i sobut ylhydraz i no]glyoxy1át

Roztok g 0,34 methyl-(E)-[2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-but enyl3-4-met hylvaleryl]-1-i sobutylhydrazino]glyoxylátu v 5 ml methanolu se zpracovává 0,04 ·'« ···· • · • ·»· • · ·

» · · 1 » · « « • · ·9 ·« ·· g 4-toluensulfonové kyseliny. Reakční směs se rníchá při teplotě místnosti po dobu 2,5 hodin a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá bílá polotuhá hmota. Tento zbytek v ethylacetátu se promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se za získání pevné látky. Tato pevná látka se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,19 g methyl(E)- [2(R)~[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny 13-4-met hy1 valery13-1-isobutylhydraz i no]glyoxy1átu ve formě bílé pevné látky.

MS: 452 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla 8 zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,26 minut. Rozpouštědlo A: H2O/O, 1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Met hyl-(E)-[2(R)-[1(Š)-[(t et rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl 3-4-fenyl-3-butenyl3-4-methylvaleryl3-1-isobutylhydrazi no3glyoxylát, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následuiícím způsobem:

(i) Roztok 1,0 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-buteny1]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydraz idu, 0,40 ml pyridinu a krystalu 4-dimethy1aminopyridi nu v 10 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 °C v prostředí dusíku. Přidá se 0,27 ml methy1oxalylchloridu a reakční směs se nechá ohřát ná teplotu místnosti. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a odpaří se k suchu. Zbytek v ethylacetátu se promyje 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s hexanem, čímž se získá 0,91 g methyl-(E)-2(R)~ [1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-buteny1j-4-methylvale ryl ]-1-isobutylhydrazinojglyoxylát ve formě' bilé pevné látky. MS: 503 (M+H)⁺.

4444 • 4 4 • ··· ·

·

4444 ··· • · • ·

4 ·· « ·· ·· 44 4 4 4 4

4 4 4 4 • 4 4 ·4 4

4 4 4 4 • 44 ·· ·· (ii) Rozpustí se 0,90 g terč.-butylesteru, připraveného podle odstavce (i), ve 20 ml roztoku 50 % trif1uoroctové kyseliny v dichlormethanu a míchá se při teplotě místnosti po dobu tří hodin. Rozpouštědlo se odpaří a stopy trifluoroctové kyseliny se odstraní přidáním a odpařením toluenu (2 x 20 ml). Zbytek se vysuší ve vakuu, čímž se získá 0,95 g methyl-(E)-2(R)-[1(S)~ (karboxy)-4-feny1-3-buteny1]-4-methylvaleryl]- 1-isobutylhyd razíno]glyoxylát ve formě gumy.

MS: 446 (M+H)⁺.

(iii) Karboxylová kyselina, připravená způsobem podle odstavce (ii), se rozpustí v 5 ml di methylformamidu, ochladí se na teplotu 0 °C a zpracovává se postupně 0,75 g 0-(tetrahydro-2H-pyran-2(RS)-yl)-hydroxylaminu a 0,48 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropy1)karbodi i midhydroch1oridu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou, 2M kyselinou chlorovodíkovou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného,_vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštěd1 o se odpaří, čímž se získá pěna. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethyl acetát/hexan (2:3) a následným odpařením se získá 0,350 g methyl-(E)-2(R)-[1(Šili ( t et rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl] 4-methylvaleryl]-1-isobutylhydrazino]g1yoxyl át ve formě bílé pevné látky.

MS: 546 (M+H)⁺.

Příklad 63 (E)-[2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobut yl-4-methyl-2’-(methylglyoxyloyl)valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 62, se z (E) — 2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3butenyl]-2’-i sobutyl-4-methyl-2’-(met hylglyoxyloyl)valerohyd !V'

ΦΦ ···· φφ φ φ

razidu získá (Ε)-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl ]-2’ -i sobut yl-4-methyl-2’-(met hylglyoxy1oyl)valerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 462 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 .% rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla 3 během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,19 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4fenyl-3-butenyl ] - 2 ’ - i sobut y 1 -4-met hyl -2 ’ -(rnet hyl gl yoxyl oyl )va1erohydrazid, použitý jako výchozí látka, se získá podobným způsobem jako podle příkladu 62 (i) až (iii) za použití pyruvoylchloridu mí sto methyloxalylchloridu.

MS: 530 (M+H)⁺.

Příklad 64 (E)-[2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy1)-4-(3-pyridyl)-3-butenyl]-_

2’-(měthansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i d

Roztok 0,21 g (E)-2(R)-[1(RS)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]—4—(3-pyridyl )-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4 methyl-2’-feny1 valerohydraz id v 5 ml methanolu se zpracovává 0,097 g 4-toluensulfonové kyseliny. Směs se míchá po dobu 2,5 hodin při teplotě místnosti a zředí se vodou. Pevná látka se odfiltruje, promyje se vodou a diethyletherem a vysuší se ve vakuu, čímž se získá 0,138 g (E)-[2(R)-[1(RS)-(hydroxykarbamoy1)^-4-(3-pyridyl)-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’ fenylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 475 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,53 a t

9,92 minut (poměr diastereoizomérů 3:1). Rozpouštědlo A: H2O/ 0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(RS)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl ]-4(3-pyridyl) — 3—buteny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2 ’ - feny 1 valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se získá následuj í cím způsobem:

(i) Roztok 6,81 g 1 ,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-methyl-1(RS)1 ,2(R)-pentantrikarboxylátu v 50 ml suchého tetrahydrofuranu se míchá v prostředí dusíku při teplotě místnosti. Přidá še 0,66 g 60% hydridu sodného a směs se míchá po dobu 10 minut. Přidá se roztok 2,66 g 4-(3-pyridy1)al1ylacetátu a 0,87 g tetrakis(trifeny1fosfin)pal1adia(0) ve 40 ml suchého tetrahydrofuranu a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu čtyř hodin. Tetrahydrofuran se odpaří a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a nasycený roztok 'chloridu sodného. Organická vrstva se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se za získání světle hnědého oleje. Chromatografii na silikagelu za použití jako elučniho činidla systému ethy1acetát/hexan (2: 3) a následným odpařením rozpouštědla se získá 7,50 g (E)1 ,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-met hyl-1-[3-(3-pyridyl)prop-2-en1 —y1] — 1(RS)-1,2(R)-pent ant ri karboxy1átu.

MS: 572 (M+H)⁺.

(ii) Roztok 2,80 g hydroxidu sodného ve 40 ml vody se přidá do roztoku 4,00 g (E)-1,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-methyl-1 -[3(3-pyridyl )-prop-2-en-1-y1]-1(RS) -1,2(R)-pentantrikarboxylátu ve 40 ml ethanolu.Směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 20 hodin, ochladí se a odpaří se. Zbytek se zředí vodou, okyselí se na hodnotu pH 6,5 koncentrovanou kysel inou chlorovodíkovou. Vodná fáze se extrahuje dvakrát diethyletherem a spojené organické fáze se extrahují 50 ml O,25M roztokem hydroxidu sodného. Roztok se okyselí na hodnotu pH 6,5 koncentrovanou ό · · · ·· ·· kyselinou chlorovodíkovou a reextrahuje se diethyletherem (2 x 50 ml). Spojené organické fáze se promyjí solankou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se, čímž se získá 1,73 g (E)-[2(R)-butyl-4-terc.-butyl-3-[(RS)-3-(3-pyri dyl)prop-2-en 1-yl)1sukcinátu ve formě červené gumy.

MS: 348 (M+H) ⁺.

(iii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (i) se z 0,52 g karboxylové kyseliny, připravené způsobem podle odstavce (ii) tohoto příkladu, získá 0,447 g (E)-2(R)-[1(RS)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-(3-pyridyl)-3-butenyl]-4-methyl-2’-fenylvale rohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 438 (M+H)⁺.

(iv) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (ii) z 0,44 g (E)-2(R)-[1(RS)-(terc. -butoxyk.arbonyl )-4-( 3-pyri dyl )-3-bute ny1]-4-methyl-2’-feny 1 valerohydrazidu se získá 0,51 g (E)2(R)—[1(RS)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-(3-pyridyl)-3-butenyl]-4rnet hyl-2 ’-(met hansul fonyl )-2 ’-fenyl val erohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 516 (M+H)⁺ .

(v) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (iii) se z 0,50 g (E)-2(R)-[1(RS)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-(3-pyridyl)-3-but enyl ]-4-met hyl-2’-(met hansulfonyl)-2’-fenylvalerohydraz i du získá 0,36 g (E)-2(R)-[1(RS)-(karboxy)-4-(3-pyridy1)-3-buteny1]4-met hyl-2’-(methansulfonyl)-2’-fenylvalerohydraz i du.

MS: 460 (M+H)⁺ .

(vi) Karboxylová kyselina, připravené způsobem podle odstavce (v), se rozpustí ve 2 ml dimethylformamidu, ochladí se na 0 °C a zpracovává se postupně 0,27 g O-(tetrahydro-2H-pyran-2(RS)~ yl)-hydroxylaminu a 0,16 g 1-ethyl-3-(3-di methylaminopropyl)karbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a

zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Získaná bledě žlutá guma se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,22 g (E)-2(R)-[1(RS)-[(tetrahydro-2(RS)pyraný 1oxy)karbamoy1]-4-(3-pyridyl)-3-buteny1]-2’-(methansul fony 1)-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazidu ve formě bílé pevné 1át ky.

MS: 559 (M+H)⁺ .

Příklad 65

2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-(3-pyridyl)butyl]-2’-isobutyl]2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Roztok 0,33 g 2(R)-[1(S)-[(benzyloxy)karbamoy1]-4-(3-pyridyl)buty1]-2’-i sobuty1-2’-(met hansu 1fony1)-4-met hylvalerohydrazidu v 10 ml methanolu se hydrogenuje v přítomnosti SO mg 10% palladia na uhlí po dobu 1,5 hodin. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,26 g 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)4-(3- pyridyl )butyl ]—2’ -i sobut yl ]-2 ’-(methansul fonyl )-4-rnet hylvalerohydrazidu ve formě bílépevnélátky.

MS: 457 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštěd.la A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,59 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 %.TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(S)-[(Benzyloxy)karbamoy1]-4-(3-pyridyl )butyl]2 ’ - i sobut yl-2’-(met hansu!fonyl)-4-met hylvalerohydraz i d, použ i tý jako výchozí látka, se získá následujícím způsobem:

(i) Roztok 1,71 g (E)-1,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-methyl-1v.

·· ··

Φ· [3-(3-pyri dyl)prop-2-en-1-yl] — 1(RS) — 1 , 2(R)-pentant ri karboxylátu ve 35 rnl isopropanolu se hydrogenuje v přítomnosti 400 mg 10% palladia na uhlí po dobu pět hodin. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Konečné stopy isopropanolu se odstraní přidáním a odpařením toluenu 2 x 10 ml). Zbytek se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin ve směsi 40 ml toluenu a 0,42 ml triethylaminu a rozpouštědlo se odstraní odpařením, čímž se získá červený olej. Olej v 10 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 °C za míchání v prostředí dusíku a přidá se 0,95 ml N-ethy1 morfoli nu a násldně 0,49 g 1hydroxybenzotriazolu a 0,72 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl )karbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se míchá po dobu 15 minut při teplotě 0 °C a roztok se zpracuje 0,98 g isobutylhydrazintosylátové soli a směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou, 5% roztokem hýdrogenuhličitanu sodného a solankou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol (19:1) a odpařením se získá 0,63 g 2(R)-[1(S)-[(t erc.-butoxykarbonyl )-4-(3-pyri dyl)but yl]-2’-i sobut yl-4-methyl valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 420 (M+H)⁺.

(ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu. 1 (ii) se z 0,62 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-(3-pyridyl)butyl]-2’-i sobut yl-4-met hyl val erohydraz idu získá 0,68 g 2(R)-[1(S)-[(terc.butoxykarbony!)-4-(3-pyridyl)butyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 498 (M+H)⁺.

(iii) Obdobným způsobem.jako podle příkladu 1 (iii) se z 0,68 g 2(R) — E1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-(3-pyridyl)butyl]—2’ — i — sobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylval erohydrazidu získá 0,55 g 2(R)-[1(S)-[(karboxy)-4-(3-pyridy1)buty1]-2’ -isobutyl-2’ ··

• · · · · ·	• ·	•	99
• · ·	9 9	9 9	9 9	•
• · · ·	9 9	9	9 ·	•
	• ·
• ·	9	9 9	•
	• ·	···	9 9

(met hansu!fonyl)-4-met hylvalerohydrazidu.

MS: 442 (M+H)⁺ .

(iv) Karboxylové kyselina, připravená podle odstavce (iii), se rozpustí v 3 ml dimethylformamidu, směs se ochladí na teplotu 0 °C a zpracuje se postupně 0,45 g 0-benzy1hydroxy1aminu a 0,25 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Získaná guma se trituruje s diethyletherem a získá se 0,34 g 2(R)-[1(S)[ (benzyloxy)karbamoy1]-4-(3-pyridyl)butyl]-2’-isobutyl-2’(methansu 1fony1)-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky,

MS: 547 (M+H)⁺.

Příklad 66 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-(4-methoxyfenyl )-3-butenyl ]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-feny1 valerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,079 g (E )-2(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 οχ y )karbamoyl]-4-[(4-met hoxyfenyl)-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl )-4-met hyl-2 ’-fenyl val erohydrazi du získá 0,041 g (E)-2(R) [1(S)-(hydroxykarbamoy!) —4—[(4-met hoxyfenyl )- 3-butenyl]-2’(methansu 1fony1)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 504 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,22 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo B:CH3CN. Typ sloupce:

• · · ·

I · · • ··*

- ioo - ,:.....

e ·« ·· • · · ♦ · · • · ·· · • · « · * · • ·» · · » ·♦· ·· ··

HYPERPEP 3OOA.

(E)-2(R)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-[(4methoxyfenyl)-3-butenyl]-2’-(met hansu!f onyl)-4-met hyl -2’-fenylvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Podobně jako podle příkladu 64 (i) až (vi) se z 1,2-dibenzy1-1-t erc.-butyl-4-met hyl-1(RS)-1,2(R)-pentant ri karboxylátu a 4-(4-methoxyfenyl)al1ylacetátu získá (E)-2(R)~[(tetrahydro 2 (RS )-py raný 1 oxy) karbamoy 1 ] -'4- [ ( 4-met hoxyfenyl )-3-butenyl]-2’(methansu!fonyl)-4-methyl-2’-feny1 valerohydraz id ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 538 (M+H)⁺.

Příklad 67

2(R)-[4-Cyklohexy!-1(S)-(hydroxykarbamoy!)butyl]-2’-i sobutyl2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,170 g 2(R)-[4-cyk1ohexy1-1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]butyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulf onyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,110 g 2(R)-[4-cyklohexyl1(S)-(hydroxykarbamoy!)butyl]-2’-i sobutyl-2’-(met hansu!fonyl)4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 462 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,82 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo B:CH3CN. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[4-Cyk1ohexy1-1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]butyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvale- 101 rohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 1,0 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-feny1butyl ]-4-methylvalerové kyseliny ve 30 ml kyseliny octové se hydrogenuje v přítomnosti 300 mg oxidu platiny po dobu 1,5 hodin. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Konečné stopy kyseliny octové se odstraní přidáním a odpařením toluenu (3 x 10 ml). Chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému diethylether/hexan (1:7) a odpařením se získá 0,67 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4cyklo.hexyl butyl ]-4-methyl val erové kyseliny ve formě bílé pevné látky.

TLC: methanol/dich1ormethan (1:19): Rf 0,51 (ii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (i) se z 0,66

2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-cyklohexylbut yl]-4-methylvalerové kyseliny získá 0,27 g 2(R)-[1(S)-[(terč.-butoxykarbonyl)-4-(4-cyklohexy1)butyl]-2’ -isobutyl-4-methylvalero hydrazidů ve formě bílé pevné látky.

MS: 425 (M+H)⁺.

(iii) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (ii) se z 0,26 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-(4-cyklohexyl)butyl] 2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu získá 0,31 g 2(R)-[1(S) [(terc.-butoxykarbonyl)-4-(4-cyklohexyl)butyl]-2’-isobutyl-2’~ (met hansu!fonyl)-4-methylvalerohydrazi du.

MS: 503 (M+H)⁺.

(v) Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 (iii) se z 0,30 g 2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-(4-cyklohexyl)butyl] 2’-isobutyl-2’-(methansulforiyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,24 2(R)-[1(S)-[(karboxy)-4-(4-cyklohexyl )butyl]-2’-isobutyl2’-(met hansu!fonyl)-4-methylvalerohydrazi du.

MS: 447 (M+H)⁺.

9 » · 9 9 · • ·

9 9 ·

- 102 ·· > · · <

> 9 · I (vi) Karboxylové kyselina, získaná podle odstavce (v), se rozpustí ve 3 ml di methylformamidu, směs se ochladí na teplotu 0 °C a zpracuje se postupně 0,19 g 0-(tetrahydro-2H-pyran2(RS)-yl)hydroxylaminu a 0,113 g 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropy1)karbodi i midhydroch1oridu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Získaná pevná látka se trituruje s diethyletherem a získá se 0,18 g 2(R)-[4-cyklohexyl-1(S)-[(tetrahydro-2 (RS)-pyranyloxy)karbamoy1]but y1]-2’-isobut yl-2’-(methansul fonyl )-4-methyl val erohydrazi du ve formě bílé pevné látky. MS: 546 (M+H)+.

Příklad 68 ( E) - 2( R) - [ 1 (S)-(Hydroxykarbamoyl )-4-(4-(methoxykar.bonyl Heny! )-3-but enyl]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hyl-2’-feny1 valerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,11 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy) karbamoyl ]-4-(4-methoxykarbony!)fenyl-3-butenyl]-2’ (methansu!fonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu získá 0,059 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-(4-(methoxykarbony1)fe nyl-3-butenyl ]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 532 (M+H)+.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,09 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo B:CH3CN. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

- 103 ·· ·· ► · · i » · » <

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4(4-methoxykarbony1 feny1)-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl )-4-methyl-2’-fenyTvalerohydrazid, použitý jakožto výchozí látka, se připraví v podobě bílé pevné látky způsobem podobným jako podle příkladu 2 (i) až (v) avšak za náhrady cinnamylbromidu ve stupni (i) 4-met hoxyk.arbonyl ci nnamyl bromi dem.

MS: 616 (M+H)⁺ .

Příklad 63 (É)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy!)-4-(4-nitrofenyl)-3-butenyl]2’-(methansulfony1)-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazid

Roztok 0,080 g (E)-2(R)-[1(5)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-(4-nitrofenyl )-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve směsi 3 ml methanolu a 1,5 ml dichlormethanu se zpracovává 0,02 g 4-toluensulfonové kyseliny. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 5 hodin a rozpouštědlo se odpaří. Získaná guma se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,063 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy 1 )-4-(4-nitrofenyl)-3-butenyl]-2’-(methansulfo nyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazidu ve formě světle hnědé pevné látky.

MS: 519 (M+H) ⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,07 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo B:CH3CN. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)[(Tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1 ]^4(4-ni t rofenyl)-3-but eny1]-2’-(meíhansulfonyl)-4-methyl-2’-fe nylvalerohydraz id, použitý jakožto výchozí látka, se připraví v podobě bílé pevné látky způsobem podobným jako podle příkladu 64 (i) až (vi) avšak za náhrady 4-(3-pyridy1)al1ylacetátu a

- 104 ·· ···· • 9 9 • 999 9 · • 99 • · « 9 · ·

9 9 9 · • 9 9 9 '9 9

9 9 9 9

999 99 ·· tetrakis(trifeny1fosfin)pal 1 ad ia(0) ve stupni (i) 4-nitrocinnamylbromidem.

MS: 603 (M+H)⁺.

Příklad 70 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-buteny1]-2’-(methan sul fonyl )-4-methyl-2’-[(morfolinokarbonyl)methyl]valerohyd raz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,10 g (E)-2(R)-[1 (S)-[(tet rahydro-2.(RS)-pyrany 1 oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methy 1 -2’-[(morfolinokarbony1)methy1]valerohydrazidu získá O,OS g (E)-2(R)-[1(S)-Ohydroxykarbamoy1j-4-'feny1-3-butenyl ]-2’-(met - hansul fonyl )-4-methyl- 2’-[(morfolinok.arbonyl)methyl]val erohyd razidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 525 (M+H)⁺.

nmr (d₆ DMSO): 10.52 (lH,s); 10,47 (1H, s); 8,82 (1H, s); 7,35-7,20 (4H,

m); 7 23-7,17 (1H, m); 6,28 (lH,d,J = 15,5 Hz); 6,09-5,98 (1H, m); 4,40=

4,26 (2H, m); 3,64-3,30 (8H, m); 3,15 (3H, s); 2,63-2,54 (1H, m); 2,372,08 (3H, m); 3,50-3,.28 (2H, m); 0,98-0,89 (1H, m); 0,78 (6H, m).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,19 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl )- 4-met hylvalerohydrazidu a z N-bromacetylmorfoli nu. MS: 609 (M+H)⁺.

·· • φ ΦΦ Φ

Φ ·

ΦΦΦΦ

- 105

Přiklad· 71 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hy1-2’-(2-morfolinoethyl)valerohydraz1d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se po promytí ethylacetátového roztoku produktu roztokem hydrogenuhličitanu sodného pro získání volné zásady z 0,13 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4 feny1-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-(2-morfoli noethyl)valerohydrazidu získá 0,1 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hy1-2’-(2 morfolinoethyl)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 511 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,71 minut. Rozpouštědlo A: H20/0.1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy ) kar bamoyl ] -4- feny 1 -3-but eny 1 ] -2 ’ -(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 4-(2-chlorethy1)morfoli nu.

MS: 595 (M+H)⁺.

Příklad 72

Methyl-(E)-2-[2-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but eny1]-4-met hylvalery1]-1 -[(met hansulfonyl)hyraz i no]acet át

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,12 g methyl-(E)-2-[2-[2(R)-[1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4- fenyl-3-butenyl]-4-methylvale ryl]-1-[(methansulfonyl)hyrazi no]acetátu získá 0,09 g methyl• · · · · ·

- 105 » · · • ··· ·· 99 • · · 4 » · · <

• · · ( • 9 9 (E)-2-[2-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl 1-4 methyl valeryl]-1-[(methansulfonyl)hyrazino]acetátu ve formě bílé pevné 1át ky.

MS: 470 (M+H)+.

nmr (d₆ DMSO): 10,77 (1H, s); 10,53 (1H, m); 8,.83 (1H, m); 7,35-J25 (4H, m); 7,.22-7,16 (1H, m); 6,27 lH,d, J = 15,.5 Hz);6,08-5,99 (1H, m);

4,41-4,17 (2H, m); 3,66 (3H, s); 3,14 (3H, s); 2,62-2,53 (1H, m); 2,35-^07 (3H, m); 1,50-1,40 (1H, m); l_z38-l,25 (1H, m); 1,00-0,92 (1H, m); 0,79 (6H, m).

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B běhern 15 minut; průtočná rychlost 1 rnl za minutu. Retenční doba: 10,93 minut. Rozpouštědlo A: HsO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met “'lYyTva-l^rofrydrirzYďa“^-a~ z~ met'h'yTb’roma;c-et-á't-th-íMS: 554 (M+H)⁺.

Příklad 73 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methan sulfonyl)-4-met hyl-2’-(3-fenylpropyl)valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,166 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS) pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl) 4-methyl-2’-(3-fenylpropyl)valerohydrazidu získá 0,091g (E)2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoyl)-4- fenyl-3-butenyl]-2’-(methan sulfonyl)-4-methyl-2’-(3-feny1propyl)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

07 ·· ··*· • · · • ··· ·· 9· » · ♦ <

I · · <

MS: 516 (Μ+Η) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahuj ícího .5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,01 a 13,19 minut (podvojný pík). Rozpouštědlo A: HzO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O35 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2’- (methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 1-brom-3-feny1 propanu.

MS: 600 (M+H)⁺ .

Příklad 74 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-but enylj -2 ’-(met hansul fonyl)-4-met hyl-2’-[(2-naftyl)methyl]valerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,156 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy )karbamoy1]-4-feny1-3-butenyl]-2’-(methansu 1fonyl)-4 methyl-2’-[(2-naftyl)methyl]valerohydrazidu získá 0,109 g (E)2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoyl)-4- fenyl-3-butenyl3-2’-(met han su 1 fonyl)-4-met hyl-2’-[(2-naftyl)met hyl]valerohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 53S (M+H)+.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,09 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansu!fonyl)-4-met -

	99 9999 9 9 9 9 999	99 · 9 9 9 9 9 9 ·	99 ·· 9 9 9 · 9 9 9 9
108 -	9 9	9 9 · 99 999	9 9 9 9 99 9 9

hyl-2(2-naftyl)methyl]valerohydrazidu a z 2-brommethy1naft alenu.

MS: 622 (M+H)⁺.

Příklad 75 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]—2’ — (methan sulfonyl)-2’-(2-met hoxyet hyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci přikladu 2 se z 0,133 g {E)-2(R)-[1(S)[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoyl]-4~fenyl-3-butenyl]-2’~ (methansulfonyl)-4-met hyl-2’-(2-methoxyethyl)1-4-methylvalerohydrazidu získá 0,073 g (E)~2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1]-2’- (methansulf onyl )-2 ’-(2-met hoxyet hyl )-4-met hylvalerohydrazidu ve formě bílé pevně látky.

MS: 456 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,67 minut. Rozpouštědlo A: H2Q/Ó,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoy1]-4-feny1-3-buteny1]-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 2-bromethylmethy1 etheru.

MS: 540 (M+H)⁺.

Příklad 76 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl]—2’—(2— hydroxyet hyl)-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazi d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci

- 109 ·· ··*· » · · • ··· ·· ·· » · · «

I · · <

• · · 1

I · · I ·· ·· příkladu 2,. se z 0,148 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny11-2’-(2-hydroxyethyl )-2’(methansu 1fony 1)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,041 g (E)2(R) — [1(S)-(hyd roxykarbamoy1 )-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(2-hydro xyethyl)-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz i du ve formě krémové pevné látky.

MS: 442 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B.zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,06 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl valerohydraz idu a z 2-bromethanolu.

MS: 526 (M+H)⁺.

Příklad 77 (E )-2 (R)-[ 1 (S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl )-4-methyl-2’-[(4-pyridyl)methyl]va1erohydrazid ptoluensulfonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,097 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy) karbamoyl ]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl )-4 methyl-2’- [(4-pyridyl)methyl]valerohydrazidu získá 0,077 g ( E)-2(R)-[ 1 (S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but eny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-[(4-pyridyl)methyl]valerohydraz i d- ptoluensulfonátu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 489 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 ·· • · • ·

10 ·· ·· \

·« ···· • · · • ··· ♦ · minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,59 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 4-brommethylpyridinhydrobromidu.

MS: 573 (M+H)⁺.

Příklad 78 (E)-2’-(Cyklopropylmethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but eny1]-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,13 g (E)-2’-(cyklopropy1 methy1)-2(R)-[1(S)[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3- butenyl] 2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,092 g (E)2’-(cyklopropy1 methyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl 3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 452 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,47 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z cyklopropylmethylbromidu.

• 4 ·*<·

-111

Příklad 73 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl)-4-met hyl-2’-[2(S)-met hy1but y1jvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,135 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2 (RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4 methy1-2’-[2(S)-methy1buty11 valerohydrazidu získá 0,101 g (E)2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl ]-2’- (methan sulfonyl)-4-methyl-2’-[2(S)-methylbutyl ]valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 46S (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 ?ó rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,70 minut. Rozpouštědlo A: HsO/O.I % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

_Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z (S)-(+)-1-brom-2-methylbutanu.

Příklad 80 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy!)-4-feny1-3-but enyl]-2’-[3-hydroxy-2(R)-methy1propyl]-2’-(methansul fonyl)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,13 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-feny 1-3-b.uteny 1 ]-2’- [3-hydroxy-2(R)-met hylpropyl]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydraz i du získá 0,095 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1 )-4-fenyl-3-butenyl]112 ·« ···· » · · • ···

2’-[3-hydroxy-2(R)-methylpropyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 470 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,20 minut. Rozpouštědlo A: HžO/O,! % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-2’-(met hansu 1fony1)-4-met hylvalerohydrazidu a z (S)-(+)-3-brom-2-methyl-1-propanolu.

Příklad 81 (E)-2(R)-[1(S) - (Hydroxykarbamoy1)-4-fényl-3-butenyl]-2’-[3-hydroxy-2(S)-met hylpropyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,13 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy) karbamoy 1 ]-4-f eny 1-3-but eny 1 ]-2 ’ -[3-hydroxy-2(S)-met hylpropyl]-2’ -(met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydraz idu získá 0,09 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]~ 2’-[3-hydroxy-2(S)-met hylpropyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hy 1 valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 470 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,11 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle

113

9« ···· • 9 9 999 * «9 99

9 · 9 9 9

9 9 9 * · 9 9 9 · · 9 9 9 příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)~[1(S)[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z (R)-(-)-3-brom-2-methyl-1-přopanolu.

Příklad 32 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl3-2’-isopent y1-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,12 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy ) karbamoy 1 ]-4-feny 1 - 3-buteny 1 ]- 2 ’ - i sopent yl - 2 ’ - (methan sulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,03 g (E)-2(R)-[1(S)( hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but eny1]-2’-i sopent y1-2’-(met hansu! fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky. MS: 468 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,63 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A~

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoy!]-4-feny1-3-butenyl]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 1-brom-3-methylbutanu.

Příklad 83 (E)-2’-(Cyklobutylmethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,13 g (E)-2’-(cyklobutylmethyl)-2(R)-[1(S)[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-fenyl-3-butenyl] 99 • 99

9

-114 • 9 999 9 • · · « 999 • · • ·

9 9

999

99

9 9 9

9 9 9

9 9 9

99

2’-(methansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,075 g (E)2 ’-(cyklobutylmethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 466 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut ; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,34 minut.. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenýl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl val erohydraz i du a z cykl ob.ut ylmet hyl bromi du .

Příklad 34 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl3-2'-(methan sul fonyl )-4-methyl-2’-(3-methyl-2-butenyl)valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,222 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl )-4 methyl-2’-(3-methyl-2-buteny1)valerohydraz idu získá 0,137 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-(3-methyl-2-butenyl)va1erohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 466 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,95 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

- 115 ···· ···

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl1- 4-feny1-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 3,3-dimethylal1ylbromidu.

Příklad 85 (E)-2’-Benzyl-2’-(butansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,117 g (E)-2’-benzy1-2’-(butansu1fony 1)-2(R)[1(S)-[(t etrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-4-methylvalerohydrazidu získá 0,115 g (E)-2’-benzyl-2’(butansulfony1)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-bute ~ nyl]-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 530 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,83 mi nut ~ Rozpoušt ědl o A : H2 0/0, 1 % TFA ; roz poušYěďTo Bi CH3ON7'“ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (ii), se z 0,54 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony1)-4-feny1-3-butenyl ] -4-met hyl val erohyd raz i du a z 1-butansulfonylchloridu získá 0,425 g (E)-2’-(butansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbo ny1)-4-feny1-3-buteny1]-4-methy1 valerohydrazidu ve formě bílé pěny.

MS: 481 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 15 (iii), se z 0,416 g (E)-2’-(butansu1fony1)-2(R)-[1(S)-(tetrc.-butoxy• · • · · · • · • · • · * 1 • · · • ···

- 116 — .··· ··· du a z benkarbonyl)-4-feny]-3-butenyl]-4-methylvalerohydraz i zylbromidu získá 0,463 g (E)-2’-benzyl-2’-(butansulfonyl)-2(R)[1(S)-(tet rc.-butoxykarbony!)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl valerohydrazidu ve formě bledě žluté gumy.

MS: 571 (M+H)⁺.

(iii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (iii), a následně podle příkladu 2 (v) se z 0,46 g (E)-2’-benzyl-2’(butansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(tet rc.-butoxykarbonyl)-4-feny1-3 buteny 1 ]-4-methylvalerohydrazidu získá 0,174 g (E)-2’-benzyl2’-(butansulfonyl)-2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyrany1oxy) karbonyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 614 (M+H)⁺.

Příklad 36 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy1)-4-fenyl-3-but eny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-(2-met hylal1yl)valerohydrazi d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,14 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!]-4-feny1-3- butenyl]-2’ -(methansulfonyl)-4 methyl-2’-(2-methylal1yl)valerohydrazidu získá 0,063 g (E)2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny1]-2’ -(methan sul fonyl )-4-methyl-2’-(2-methylal1yl)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 452 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,75 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle • · · · · ·

-117 ·· · ·· ·· ·· ···« · · · · ···· * * · ϊ í * .· : ·: : : · ι .. ι příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z met bylallylchloridu.

Příklad 87 (E)-2’-(2-Cyklohexylethyl)-2(R)-[1(S)~(hydroxykarbamoy 1)-4-fenyl- 3- butenyl]-2’-( methansulf onyl )-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,133 g (E)-2’-(2-cyklohexy1ethyl)-2(R)-[ 1 (SΙΕ (t et rahydro-2 (RS )-py raný 1 oxy) karbamoyl ] - 4-fenyl-3-butenyl] 2(methansulfony1)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,120 g (E)2’-(2-cyklohexylethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl 3-but eny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 508 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla 8 zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,93, a 14,02 minut (dvojí pík). Rozpouštědlo A: H₂0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2'-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 2-cyklohexylethylbromidu.

Příklad 88 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[2-(3indolyl)ethyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,128 g ·.( E )-2 (R)-[ 1( S)- [(t et rahyd ro-2 (RS )-py·· • · · · · · • · • · · ·

-118 .t ···· ··· ranyloxy)karbamoyl3~4- fenyl-3-buteny13-2’- [2-(3-indolyl )et hyl3~2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,063 g (E)-2(R)-[1(S)-(hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[2-(3i ndoly1)ethyl]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydrazidu ve formě blabě oranžové pěny.

MS: 541 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,52 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl3-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 3-(2-bromethyl)indolu.

Přiklad 89 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-but enyl3-2’-(methansul fonyl)-4-met hyl-2’-(3-fenylallyl)valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,18 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy)karbamoyl3-4-feny1-3- butenyl3~2’ -(methansulfonyl)-4 methyl-2’-(3-fenylal1yl)valerohydrazidu získá 0,123 g (E) 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny13-2’ -(methan sulfonyl)-4-methyl-2’-(3-fenylallyl)valerohydrazidu ve formě slabě žluté pevné látky.

MS: 514 (M+H)+ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost „ 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,69 ,* minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce:JhYPERPEP 300A.

·· ·· • · • · · ·

-119 • , · « · • 9<* · ··· ·« ··

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methánsulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z cinnamylbromidu.

Příklad 90 (E)-2’-Benzyl-2’-(ethansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )4-fenyl-3-but enyl]-4-methylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,10 g (E)-2’-benzyl-2’-(ethansulfonyl)-2(R)[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu získá 0,054 g (E)-2’-benzyl-2’~ (ethansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-bute nyl]-4-methylvalerohydrazidu ve formě špinavě bílé pevné látky. MS: 502 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,70 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3 CN7^— 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 85 (i) až (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu a z ethansulfonylchloridu.

Příklad 91 (E)-2’-(2,2,2-Tri fluorethansulfonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-but enyl]-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,125 g (E)-2’-(2,2,2-trifluorethansulfonyl)4J » · · · · « · • · · ·

- 120 « · · · · * · < · » » • « · · · ··· ·'· ··

2(R)—[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3buteny1]-4-methyl-2’-feny 1 valerohydrazidu získá 0,093 g (E)2’-(2,2,2- tri fluorethansu!fonyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamo yl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’-feny1 valerohydrazi du ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 542 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,42 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka, se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 17 (i) až (iii). z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbony 1 )-4-f eny 1-3-but eny 1 ]-4-met hyl val erohyd raz i du a z 2,2,2trifluorethansulfonylchlor idu.

Příklad 92 (E)-2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[3-hydroxypropyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,191 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyl oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2’- t3rhydroxypropyl]-2’(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,119 g (E)2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[3-hydro xypropyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 456 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,61 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

• · ι · · • * · ·

- 121 • · ··

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz idu a z 3-brom-1-propanolu.

Příklad 93 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methan sul fonyl )-4-met hyl -2’-[2-(3,4,4-t rimet hyl-2,5-di oxo-1-imidazol i diny!) ethyl ] vale rohydrazid

I

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,196 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy) karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-['2-(3,4,4-trimethyl-2,5-dioxo-1-imidazolidinyl) et hyl ] va1 erohydraz i du získá 0,094 g (E)-2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoyl.)4-f enyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’- [2-(3,4,4 t rimet hyl-2,5-dioxo-1-imi dazoli di nyl)ethyl]val erohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 566 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,37 minut. Rozpouštědlo A: HsO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným zpsůsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’ -(methansulfonyl)-4-met hylhydrazidu a z 3-(2-bromethyl-1,5,5-trimethylhydantoinu.

Příklad 94 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl -3-but eny 1 ]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-(4-pent enyl)valerohydraz i d

• 9 ··

- 122

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,168 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy ) karbamoyl ] -4-f enyl -3-but eny 1 ]- 2’- (methansulfonyl)-4 methyl-2’-(4-penteny1)valerohydraz idu získá 0,105 g (E)-2(R)[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl]-2’ -(methansulfo nyl)-4-methyl-2’-(4-penteny1)valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 466 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,31 minut. Rozpouštědlo A: f-120/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3 CN/ '0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl val erohydraz i du a z, 5-brom-1-pent enu .

Příklad 95 (E)-2’-(3-Buteny1)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,137 g (E)-2’-(3-buteny1)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-valerohydrazidu získá 0,081 g (E)-2’-(3-butenyl)-2(R)-[1 (S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 452 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,80 Rozpouštědlo A: H₂0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % • * « ·

- 123 ·· ···· ·· * • · · « · · · •··· · · ♦

4' · · · » ·

TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 3OOA.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]- 4-fenyl-3-butenyl3-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 4-brom-1-butenu.

Příklad 96 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-but enyl3-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’-propylvalerohydraz id

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci (příkladu 2, se z 0,211 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany 1 oxy) kar bamoy 13 -4-f eny 1 -3-but eny 1 ] -2 met hansu 1 fonyl )-4 methyl-2’-propylvalerohydrazidu získá 0,129 g (E)--2(R)-[1 (S)(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-but enyl3 ~2’- (methansulfonyl)-4 .•methyl-2 ’-propyl val erohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 440 (M + H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,77 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy13~4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 1-brompropanu.

Příklad 97 (E)-2’-Butyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl32’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

124

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,181 g (E)-2’-butyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro 2(RS)-pyrany1oxy)karbamoylJ-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansu! fonyl )-4-methylvalerohydrazidu získá 0,129 g (E)-2’-butyl 2(R)-[ 1 (S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’- (methan sul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 454 (M+H)+.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,12 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansu1fonyl)-4-met hyl valerohydrazidu a z 1-brombutanu.

Příklad 98 (E)-2’-(2-Aminoethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3butenyl]-2’-(methansulfonyl )-4-met hylvalerohydraz i d-p-to 1 uensulfonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,1 g (E)-2’-(2-aminoethyl)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]—4—fenyl-3-butenyl ]-2 ’ - (methansu 1 fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,086 g (E)-2’-(2aminoethyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-butenyl ] 2 '-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazi d-p-toluensul fonátu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 441 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,58

- 125

99'9 9 9 ♦ • 9 · 9 · 9 • 9 · · 9 9 ♦' • · i> ·

9 9 9 9.,9 · ·»

9.9 • · « · 9 · • 9’ 9 9' •· · 9 9 '9 9 9 9

9 9 9 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo 8: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

Suspenze 0,926 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-f eny 1-3-b.ut enyl ]-2’-(methansul fonyl )-4 methyl-22-ftali midoethyl)valerohydrazidu v 10 ml methanolu se zpracuje 0,25 ml hydrazinhydrátu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Suspendovaná bílá látka se odfiltruje, filtrát se zkoncentruje a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za použ i tí jako elučního činidla syst ému 5 % methanolu v dichlormethanu. Získá se 0,23 g (E)-2’-(2-aminoet hyl)-2(R)-[1(S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl] 4-f enyl-3-but enyl]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydraz i du ve formě bílé.pevné látky po triturování produktu s etherem. MS: 525 (M+H)⁺. , •Příklad 99 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methy1-2’-[2-(1-pyrrolyl)ethyl]valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,163 g ( E )-2(R)-[ 1 (S)-[(t.et rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4 methyl-2’-[2-(1-pyrrolyl)ethyl]valerohydrazidu získá 0,041 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methyl-2’- [2-(1-pyrrolyl)ethyl]Valerohydrazidů ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 491 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,05 Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/O,O85 %

126

TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 3OOA.

Výchozí látka se připraví podobným způbpoem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)~pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methy1 valerohydraz idu a z 1 -(2-brommethyl)pyrrol u .

Příklad 100 (E)-2’-[2-(1,3-Díoxolan-2-yl)ethyl]-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy 1 )-4-fenyl-3-butenyl]-2’~(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,145 g (E)-2’-[2-(1,3-dioxolan-2-yl)ethyl]2 (R)-[ 1 (S) -[(tet rahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoyl ]-4-feny 1-3butenyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá

0,067 g (E)-2’-[2-(1,3-dioxolan-2-y1)ethy1]-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )-4-fenyl-3-butenyl ]-2’-(.met hansul fony 1 )-4-met hyl valerohydrazidu ve formě slabě oranžové pevné látky.

MS: 49S (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,63 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způbpoem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but enyl]-2 ’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 2-(2-bromethyl)-1,3-dioxol anu .

Příklad 101 (E)~2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1]-2’-(4-met1 27 ·· ··'·'· ·· ·'* *'· « · · <>* ·'· · · Φ *

49 9 4 9 · · ♦’ '* * <’ 9j 1} * · 4 9 9 9 4 4 _β 9 9 4 4 4 · · :·

94 4 994 ·» «»· ·· ♦ · hoxybenzensulfonyl)-4-methy1valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2 se z 0,19 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyra nyl oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(4-met hoxybenzensulfonyl )-4-rnet hyl val erohydraz i du získá 0,115 g (E)-2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(4-methoxybenzensul fony 1)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 490 (M+H)+.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,53 •minut. Rozpouštědlo A: HsÓ/OJ % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (ii), se z 0,54 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-feny1-3-buteny1]-4-methy1 valerohydrazidu a z 4-methoxybenzensulfonyl chloridu získá 0,492 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)4-fenyl-3-butenyl]-2’-(4-met hoxybenzensulfonyl)-4-met hyl val e rohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 531 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (iii), a následně v příkladu 2 (v) se z 0,482 g (E)—2(R)—[1(S)(terč.- butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(4-methoxyben zensulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,194 g (E)-2(R)[1 (S)-[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-bu tenyl]-2’-(4-methoxybenzensulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 574 (M+H)⁺.

Příklad 102

123 ·· ·· ♦ ·· ·· · · · · · ·» · · · 9 • · · · · 9 9 · * ’♦ *’ 9, 4 9 · · 9 9 · 9 9 • · · · · « · · :·

1999 999 49 999 99 49 (Ε,Ε)-2(R) — [1(S) — (Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-4-methyl-2’-fenyl-2’-[(2-fenylvinyl)sulfonyl])valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,245 g (E,E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’ -fenyl-2’ f(2-feny1vinyl)sulfonyl])valerohydrazidu získá 0,086 g (E,E)2(R) — [1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-2’ fenyl-2’-[(2-fenylvinyl)sulfonyl])valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 562 (M+H)⁺.

HPLC·. Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 35 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,94 minut .. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způbpoem jako podle příkladu 1 (ii) a (iii) a následně podle příkladu 2 (v) z (E)2(R)-[1(S)-[(t erc.-butoxykarbony!)-4-fenyl-3-but enyl]-4-methyl-2’-fenylhydrazidu a z trans-p-styrensulfonylchloridu.

Příklad 103 (E)-2’-Furyl-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]2’-(methansulfonyl )-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,071 g (E)-2’-furyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl )-4-methylvalerohydrazidu získá 0,042 g (E)-2’-furyl2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’- (methan sulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky. MS: 478 (M+H)⁺ .

·· ·· ·»♦· » · • ···

- 129 • · *· » · · • · ··

HPLC:Isokratické eluční činidlo za použití systému 50 % CH3CN/ voda; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 3,82. Typ sloupce: Waters symmetry 10 cm, C1s, 0,46 cm vnitřní průměr.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 45 (i) a (ii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-4-methylvalerohydrazidu a z 2-furaldehydu.

Př í klad 104 ( E )-2 ’ - Et hy 1 - 2 (R) - [ 1 (S.)- (Hyd roxy kar barnoyl )-4-fenyl-3-butenyT] 2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,136 g (E)-2’-ethyl-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-buteny1]-2’-(methansul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,087 g (E)-2’-ethyl 2(R)-[ 1 (S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-buteny1]-2’- (methan -s-u-l-f-o-n~y-1“)—4—meť-h-yTva-l-eTOti'yťT^zo~dO ve^-Ťořme ΒΤΓό^-pevně TáTRyL MS: 426 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 20 % rozpouštědla 8 zvyšující se na 80 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 14,12 minut. Rozpouštědlo A: 100% 0,05M triethylamoniumfosfátový pufr, hodnota pH 2,5 (TEAP); rozpouštědlo B: 30 % CH3CN/ (TEAP). Typ sloupce: Waters symmetry 10 cm, Ci s, 0,46 cm vnitřní průměr.

Výchozí látka se připraví podobným zpsůsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny1]-2’ -(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z ethyljodidu.

ΦΦ ···· ř Φ · * φφφ

30

Příklad 105 (E)-2’-(2,6-dichlorbenzyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci'příkladu 2, se z 0,09 g (E)-2’-(2,6-dichlorbenzyl)-2(R)-[1(S)[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3- butenyl] 2’-(met hansu 1fony1)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,05 g (E)2’-(2,5-dichlorbenzyl)-2 (R)-[1(S)~(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl 3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl valerohydrazidu ve fot— mě bílé pevné látky.

MS: 556/558 (M+H) ⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 30 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 7 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 7,30 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHs CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERSIL ODS.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a z 2,6-dich1orbenzylbromidu.

Příklad 106 (E)-2’-(Cyklopent ylmet hyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-( meth ansulf onyl )-4-met hylvalerohydrazíd

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,04 g (E)-2’-(cyklopentylmethyl)-2(R)-[1(S)t(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]- 4-fenyl-3-buteny1] 2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,041 g (E)2’-(cyklopentylmethyl)—2(R)—[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl 3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl val erohydrazidu ve foi—

- 131 ♦· • 9 9 ···

99 • 999 999

999 mě bílé pevné látky.

MS: 480 (M+H)⁺.

HPLC:Isokratické eluční činidlo za použití systému 60 % CH3CN/ TEAP; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 3,25. Typ sloupce: Waters symmetry 10 cm, C1 s , 0,46 cm vnitřní průměr .

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-but eriyl]-2’-(met hansu!fonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z cyk1opentyl methylmet hansu 1fonátu,

Příklad 107 (R)-[2-(2-Benzofu raný 1)-1 (S)-( hydroxy karbamoy 1 ) et hyl ]-2 ’-,i sobut yl-2(met hansu! fonyl )-4-met hyl val erohyd raz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,066 g. 2(R)-[2-(2-benzofuraný1)-1(S)-[(tetra_hydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoy!]ethyl]-2'-i sobut yl ]-2’-(met -_ hansu!fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,015 g 2(R)-[2-(2benzofuranyl) -1(S)-(hydroxykarbamoyl)ethyl3-2’-isobutyl 3—2’ — (methansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 468 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 98 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,34 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/

0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Přidá se 1,14 g 60% hydridu sodného do míchaného roztoku 12,35 g 1,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-methyl-1 ,1 ,2(R)-pentan - 132 «· *··· tt • 9 * 9 9

999 · · » * 9 · · • · · ·

9999 999 99 trikarboxylátu ve 150 ml suchého, ledově chladného dimethylformamidu v prostředí dusíku. Reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 30 minut a při teplotě místnosti po dobu dalších 1,5 hodin. Směs se opět ochladí na teplotu ledu před přidáním 5,76 g 2-brommethylbenzofuranu. Teplota směsi se opět nechá vrátit pomalu na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Roztok se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 5% roztok kyseliny citrónové. Ethylacetátová vrstva se promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ether (9:1). Získá 14,64 g 1,2di-benzyl-1 - t erc,-butyl-1-(2-benzofuranyl)methyl-4-met hyl-1,1 2(R)-pentántrikarboxylátu ve formě bezbarvého oleje.

• i ........ .....

(ii) Destiluje se 14,64 g 1,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-1-(2benzofu raný 1)methyl-4-met hyl-1,1,2(R)-pentantrikarboxylátu ve 150 ethanolu a přidá se roztok 9,8 g hydroxidu sodného v 55 ml vody. Reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin, ochladí se a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí ve 400 ml vody a hodnota pH se nastaví na 3 přidáním 4M roztoku kyseliny sírové. Vodný roztok se extrahuje 400 ml ethalycetátu a extrakt se promyje postupně vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí ve.150 ml toluenu obsahujícího 3,8 ml triethylaminu. Směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin, ochladí se a promyje se postupně 5% roztokem kyseliny citrónové, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v 50 ml hexanu a zpracuje se 2,43 g cyklohexanu. Směs se udržuje v mrazničce po dobu dvou hodin a vytvořená bílá pevná látka se odfiltruje a promyje se hexanem. Pevná látka se suspenzuje ve 150 ml ethylacetátu a vytřepe se se dvěma. 50 ml podíly 2M kyseliny sírové. Ethylacetátový roztok se promyje postupně vodou a nasyceným

- 133 ·· φφφφ φφ · φ Φ Φ «! Φ ··

Φ··· φ φ ·

Φ Φ φ Φ Φ * • Φ Φ Φ · • «φφ ΦΦΦ ΦΦ <ΦΦ

ΦΦ

Φ ΦΦΦ

ΦΦ ΦΦ roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Získá se 3,701 g 4-terc.-butylhydrogen-3(S)-(2-benzofuranyl)methyl-2(R)-isobut ylsuke inát u ve formě bledě žluté gumy.

Obdobným způsobem jako podle příkladu 15 (i) až (iii) se z 4-t erc.-butylhydrogen-3(S)-(2-benzofuranyl)methyl-2(R)-i sobutylsukcinátu a za použití 1-brom-2-methanpropanu při způsobu podle odstavce (iii) získá 2(R)-[2-(2-benzofuranyl)-1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]ethyl]-2’-isobutyl]-2’-(methansu1fony 1)-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky. MS: 552 (M+H)+.

Příklad 108 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4~fenyl-3-but eny1]-2’-(methansul fonyl)-4-met hy1-2’-[(3-pyri dyljmét hyl]valerohydraz i dmethansulfát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, avšak za použití methansulfonové kyseliny místo ptoluensulfonové kyseliny se z 0,2 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2 (RS)- pyranyl oxy) karbamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl]-2 ’-(methan sul fonyl)-4-met hyl-2’-[(3-pyridyl)methyl]valerohydraz i du získá 0,177 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4rfeny 1-3-buteny1] 2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-[(3-pyridyl)methyl]valerohyd razidu ve formě oranžové pevné látky.

MS: 489 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 8,05 minut. Rozpouštědlo A: H20% 0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle ·»♦·

4 4

444

4' ·

134

4 44 44 · 44 4 · 4

4 4 4 4 4

4 4 4 · 4

444 44 44 přikladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-4-feny1-3-butenyl]-2’ -(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 3-brommethylpyridinhydrobromidu.

Příklad 109 (E)-2(R)-[ 1 (S)-(Hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl )-4-met hyl-2’-[2-(pyridyl)ethyl]valerohydrazidmethansulfonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, avšak za použití methansulfonové kyseliny místo p‘tol uensul fonové kyseliny se z 0,176 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2 ( RS )-py raný 1 oxy ) karbamoyl ] -4-f enyl -3-but enyl ]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hyl-2’-[2-(pyr i dyl)ethyl]valerohydraz i du zí? ská 0,13 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-2’-[2-(pyridyl)et hyljvalerohydrazidmethansu 1fonátu ve formě bledě oranžové pevné látky. MS: 503 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,97 minut. Rozpouštědlo A: H20% 0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl valerohydrazidu a z 2-(2-brommethyl)pyridinhydrobromidu.

Příklad 110 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl)-4-methyl-2’-[2-(4-pyri dyl)ethyl]valerohydrazid·· ΦΦ » · · « » * · I ι · · «

I · Φ 4 • φ ·· ·· «·φφ • · ♦ • ΦΦΦ

35 methansulfonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, avšak za použití methansulfonové kyseliny místo ptoluensulfonové kyseliny se z 0,146 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2 (RS) -pyr any 1 oxy) karbamoy! ]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met hansulf onyl)-4-methy1-2 ’ - [2-(4- pyridyl)et hyl]valerohydrazi du získá 0,104 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-[2-(4-pyridyl)ethyl]va1erohydrazidmethansulfonátu ve formě bledě oranžové pevné látky.·

MS: 503 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,74 minut. Rozpouštědlo A: H2 0% 0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle Přík1adu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy)karbamoy!]-4-feny1-3-buteny13 — 2’ -(methansulfonyl)-4-met hy1 valerohydrazidu a z 4-(2-bromethyl)pyridinhydrobromidu.

Příklad 111

2(R)-[3-Cyklohexy!i den-1(S)-(hydroxykarbamoy1)-propyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met ylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,085 g 2(R)-[3-cyklohexyliden-1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!]propyl]-2’- isobutyl-2’-(met hansulfonyl)-4-metylvalerohydrazidu získá 0,042 g 2(R)-[3-cyklohexy1 i den-[1(S)-(hydroxykarbamoy!)propyl]-2’-i sobut yl-2’-(met han sulfony1)-4-metylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 446 (M+H)⁺.

35

'· · Φ···	0 .♦	99	• ·
• · ·	• 9	• ·	9	•	•	9
• ···	• ·	•	•	•	•	9
						9
• ·	• ·		•	•	•	Φ
	9 ·	'9 9 9	• ·		9-9

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 35 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,20 minut. Rozpouštědlo A: Η?0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 107 (i) a (ii) , přičemž se však produkt čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ ether (4:1) místo krystalizací cyklohexylaminové soli se z 1,2di benzy1-1-terc.-buty1-4-methyl- 1,1,2(R)-pentant ri karboxylátu a 2 (2-bromethy1 i den)cyklohexanu získá 4-terc.-butylhydrogen3(S)-[(2-cyklohexylidenethyl]-2(R)-isobutylsukcinát ve formě slabě žluté gumy.

MS: 339 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako podle je popsáno v příkladu 2 (iii) až (v), se z 4-t erc .-but y 1 hyd rogen-3 (S)-Γ (2--cykJjo±i.ej<-V_l-i—_ denethyl]-2(R)-isobuty1 suke inátu a isobutylhydrazinu za použití trimethylsi1yltrif1uormethansu 1fonátu v 1,4-dioxanu místo v trifluoroctové kyselině k odstranění chránící skupiny z terc.butylesteru získá 2(R)-[3-cyk1ohexyliden-1(S)-[(tetrahydro 2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]propyl]-2’-isobutyl-2’-(methansul fony 1)-4-metylvalerohydrazid ve formě žluté pevné látky.

MS: 530 (M+H)⁺.

Příklad 112

2(R)-[3-(Tetrahydro-2H-pyran-4-yliden-1(S)-(hydroxykarbamoyl)propyl]-2’-isobut y1-2’-(methansulfonyl)-4-metylvalerohydrazi d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,09 g 2(R)-[3-(tetrahýdro-2H-pyran-4-y1 i den)1

		»· ·♦>· • · · • ···	·· · • » 9 9 • 9 9	99 99 9 9 « 9 • * · ·
	- 137 -	• ·	• 9 · ·« 9 9··	• * · 9 9 9 99

1(S) — [(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]propyl1-2’-i sobutyl-2(met hansul fonyl )-4-met yl val erohydraz i du získá 0,046 g 2(R)-[3-(t etrahydro-2H-pyran-4-y1i den)-1(S)-(hydroxykarbamoyl )propyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met ylvalerohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 443 (M-í-H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,22 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 107 (i) a (ii) , přičemž se však produkt čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ ether (4:1) místo krystalizací cyklohexyl anii nové sol i se z 1,2dibenzyl-1-terc. - b.utyT-4-met hyl -1 ,1 ,2,2(R)-pent ant ri karboxy!átu a z 4-(2-bromethy li den)tetrahydro-2H-pyranu získá 4-terc.but ylhydrogen-3(S)-[(t et rahydro-2H-pyran-4-yli den)et hy1]-2(R)isobutylsuke inát ve formě slabě žluté gumy.

MS: 341 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako podle je popsáno v příkladu 2 (iii) až (v), se z 4-terc.-butylhydrogen-3(S)-[(tetrahydro-2Hpyran-4-yliden)ethyl]-2(R)-isobutylsukcinátu a z isobutylhydrazinu za použití tri methy1si1y11rif1uormethansulfonátu v 1,4dioxanu místo trifluoroctové kyseliny k odstranění chránící skupiny z terc.-butylesteru získá 2(R)-[3-(tetrahydro-2H-pyran-4-yliden)-1(S)-[(tetrahydro- 2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl] propyl]-2’- isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-metylvalerohydrazid ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 532 (M+H)⁺.

·· ···· * · • · ·· • 9 ··

38

99 • 9 9 9

9 9 · • · · · »·· ·· »·

Příklad 113

2(R)-[3-(Tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1(S) -(hydroxykarbamoy!)propyl3-2’-i sobut yl-2’-(met hansulfony 1)-4-met y1 valerohyd raz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,14 g 2(R)-[3-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1(S)[(tet rahydro-2(RS)-pyrany!oxy)karbamoyllpropyl]-2’-isobutyl 2’-(methansulfonyl)-4-metylvalerohydrazidu získá 0,083 g 2(R)~ [3 —(t etrahydro-2H-pyran-4-yli den)-1(S)-(hyd roxykarbamoy1)pro pyl]-2’-isobutyl-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met y1 valerohydrazi du ve formě špinavě bílé pevné látky.,

MS: 450 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,15 minut. Rozpouštědlo A: H₂0/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,397 g 4-terc.-buty1hydrogen-3(S)-E(tetrahyd ro-2H-pyran-4-y1 i den)ethy13-2(R)-isobuty1 suke inátu v 10 ml methanolu se protřepává v prostředí vodíku v přítomnosti 0,196 g 10% palladia na uhlí až do chvíle, kdy se již žádný vodík nepřijímá. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří. Tak se získá 0,331 g 4-terc.-butylhydrogen-3(S)~E(tetrahydro-2Hpyran-4-yl)ethyl]-2(R)-isobutylsukcinátu ve formě bezbarvé gumy.

MS: 343 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem jako podle je popsáno v příkladu 2 (iii) až (v) se z 4-t erc .-but y 1 hydrogen-^3( S)-[ (t et rahydro-2Hpyran-4-y1)ethyl3-2(R)-isobutylsukcinátu a z isobutylhydrazinu získá 2(R)-[3-(tetrahydro-2H-pyran-4-y 1 )-1 (S)- E(tetrahydro 4« 4444 • · • «44

39 • 4 44 • 4 4- 4

4 4 4

4 « 4

4 4 4

44

2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy 1]propyl]-2’-i sobuty1-2’-(methansul fonyl)-4-metylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 534 (M+H)⁺.

Příklad 114

2(R)-[3-Cyklohexyl-1(S)-(hydroxykarbamoy1)propyl]-2’-i sobutyl2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,145 g 2(R)-[3-cyklohexyl-1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoyl]propyl]-2’-i sobutyl-2’-(met hansu! fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,093 g 2(R)-[3-cyklohe xy1-1(S)-(hydroxykarbamoy!)propyl]-2’-i sobutyl-2’-(met hansu! fony 1)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 44S (M+H)⁺,

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,82 minut. Rozpouštědlo A: H2O; rozpouštědlo B:CH3CN. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobným způsobem jako podle příkladu 113 (i) a (ii) ze 4-terc.-butoxyhydrogen-3(S)-(2-cyklohexyliden)ethyl-2(R)-isobutylsukcinátu.

Příklad 115

2(R)-[1(S)—(Hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butinyl]-2’-isobutyl2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,189 g 2(R)-1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butinyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl ) -4-met hyl val erohydraz i du z í ská 0,098 g 2(R)-1(S)-(hydroxy·· ·· • · · · • · · · ·· ···· • · • ···

40 karbamoyl)-4-fenyl-3-buti nyl]-2’-i sobut yl-2’-(met hansulfonyl)4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 452 (M+H) ⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční.doba: 12,42 minut. Rozpouštědlo A: ΗςΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem (i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 107 (i) a (ii) , se z 1,2-dibenzyl-1-terc.-butyl-4-methyl-1,1,2(R)-pentantrikarboxylátu a z. 1-brom-3-fenyl-2-propinu získá 2(R) [1(S)-t erc.-butoxykarbonyl)-4-feny1-3-but i nyl]-4-met hylval arová kyselina ve formě slabě žluté pevné látky. ~ , ;

(i i) Podobným způsobem, jako podle je popsáno v příkladu 2 (i i i) až (v), se z 2(R)-[1(S)-terc.-butoxykarbonyl)-4-feny1-3butinyl3-4-methylvalerové kyseliny a z isobutylhydrazi nu získá '2TK)~lŤS7'^7T^l^lTyar^2T^ST'^^yT^ra7Tyn^y7+’aTtram'oy1-3~4^f'e’n'yi^3— but inyl3-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 536 (M+H)⁺ .

Pří klad 116

2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoy1)-3-fenoxypropy13-2’-isobutyl-2’(met hansulfonyl )-4-met ylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,23 g 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)~ karbamoyl3-3-fenoxypropy13-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4 metylvalerohydraz idu získá 0,143 g 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl )-3-fenoxypropyl3-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-mety1valerohydrazidu ve formě krémově bílé pevné látky. .

- 141

MS: 453 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 35 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,83 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 107 (i) a (ii) , přičemž se však produkt čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému hexan/ ether (4:1) místo krystal i žací cyk1ohexy1aminové soli se z 1,2dibenzyl-1-terč.-butyl-4-met hyl-1,1,2(R)-pent ant ri karboxyTátu a z (2-jodethoxy)benzenu získá 4-terc.-butylhydrogen-3(S)-(2-fenoxy)ethy1-2(R)-i sobuty1sukcinát ve formě slabě žlutého oleje. MS: 351 (M+H)⁺ .

(ii) Podobným způsobem jako podle je popsáno v příkladu 2 (iii) až (v), se z 4-terc.-butylhydrogen-3(S)-(2-fenoxy)ethyl2 (R ) - i sob.ut yl suke i nát u a z i sobut yl hydraz i nu získá 2(R)-[1(S)[(tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-3-fenoxypropyl]-2’-isobut yť-2’-(met hansu 1 fonyl )-4-rnet yl val erohydraz i d ve formě bí1 é. pevné látky.

MS: 542 (M+H)⁺.

Příklad 117 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansul fonyl)-4-met y1-2’-[(3-methy1-3-oxetanyl)met hy1]valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,34^ (E)-2(R)-[1 (S)-[(t et rahyd ro-2 (RS)-pyranyl oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-but eny1]-2’-(met hansulfonyl)-4-met yl- 142 • ·

2’-Γ(3-methyl-3-oxetanyl)methyl3 valerohydrazidu získá 0,220 g (E)-2(R) — [1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-fenyl-3-but enyl3-2’-(met hansulfonyl)-4-met yl-2’-[(3-met hy1-3-oxet any1)met hyl3Val ero hydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 4S2 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,76 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se připraví podobně jako podle příkladu 45 .(i) a (ii) z (E )-2( R)-[ 1 (S) - [ (t erc . -butoxykarbony 1 )-4-f enyl-3buteny13-4-metylvalerohydrazidu a z 3-methyl-3-oxetankarboxaldehydu.

Příklad 1 1.8

2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-3-butenyl3-2’-(met hansulfonyl)4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,58 g 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy!3-3-but eny13-2’-(methansulfpny1)-4-met hyl-2’-fe nylvalerohydrazidu získá 0,41 g 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)3-butenyl3-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 398 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,97 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(S)-[(Tet rahyd ro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy 13-3but enyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-2’-fenylvalerohyd raz i d ,

- 143

použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 1 (i) a v příkladu 2 (iii) až (v), se z 2(R)-1(S)-[(terc.-butoxykarbony1) 3- buteny1-4-methylvalerové kyseliny získá 2(R)-[1(S)-[(tetra hydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-3-buteny1]-2'-(methansulfo nyl)-4-methyl-2’-fenylvalerohydrazid veformě bílé pevné látky MS: 482 (M+H)⁺.

Příklad 119 (R)-[ 1 (S)-(Hyd roxykarbamoy1)but y1]-2’-(met hansulfonyl)-4-methy1-2’-feny 1 valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 65, se z 0,50 g 2(R)-1(S)-[(benzy1oxy)karbamoy11butyl 3-2’-(met hansu 1fony 1)-4-met hyl-2’-fenylvalerohydraz i du získá 0,360 g 2(R)-1(S)-(hydroxykarbamoyl)butyl]-2’-(met hansu 1fonyl )-4-methyl-2’-feny 1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 400 (M+H)⁺T

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 10,14 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-1(S)-[(Benzy1oxy)karbamoy1]butyl]-2’-(methansulfonyl )4- methyl-2’-feny1 valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 3,0. g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-3-butenyl]-4-methylvalerové kyseliny ve 30 ml. ethanolu se hydrogenuje v přítomnosti 0,3 g 5% palladia na uhlí po dobu čtyř hodin. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se rozpustí ve 30 ml toluenu a rozpouštědlo se opět odpaří. Opa- 144

kováním tohoto způsobu se získá 2,83 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)buty!]-4-methylvalerové kyseliny ve formě bezbarvého o 1 e j e .

(ii) Podobnými způsobem jako podle je popsáno v příkladu 1 (i) a v příkladu 65 (i i) až (iv), se z 2(R)-[(1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)butyl]-4-methylvalerové kyseliny získá 2(R)-1(S)[(benzyloxy)karbamoyl]but yl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hy1-2’ feny1 valerohydrazid ve formě bílé pevné látky,

MS: 490 (M+H)⁺,

Příklad 120 .(E )-2 (R) - [ 1 (S) - (Hyd roxykarbamoyl )-4-fenyl- 3-but enyl ]-4-met hylN-ft al imi doval érami d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45, se z 0,126 g (E)-2(R)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy!]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-N-ftalimi doval érami du 0,034 g (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]4-methyl-N-ftalimidoval éramidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 450 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,00 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-fenyl-3-butenyl]-4-methyl-N-ftali mi doval éramid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 1,0 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony!)-4-fenyl]-3-buteny1]-4-methylvalerohydrazidu a 0,41 g ftalanhydridu v 50 ml toluenu se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin. Reakční směs se ochladí, rozpouštědlo se odstraní a na• · · · «

I · · • ···

- 145

•	• ·		•	• 9		• ·
	•	•	• ·	•	•	•	•
	•	9	•	•	•	9	•
							•
•	•	•	•	•	•	•	•
	• ·		• · ·	« «		··

hradí se ethylacetátem. Ethylacetátový roztok se promyje 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Ethylacetátová fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s diethyletherem, čímž se získá 0,60 g (E)-2(R)[1 (S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl 3-4-methyl-N-ftal imidoval éramid ve formě bílé pevné látky.

MS: 4430 (M+H) ⁺ .

(ii) Podobným způsobem jako podle je popsáno v příkladu 2 (iv) a (v) se z 0,44 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)4-fenyl-3-buteny13-4-methyl-N-ftalimidoval éramidu se získá '0,13 g (E)-2(R)-[(t et rahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-feny1-3-buteny13-4-methyl-N-ftalimidoval éramidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 534 (M+H)⁺.

Příklad 121

Methyl-(E)-3-[2(R)-£l (S) - ( hy d roxykar bamoy 1 )-4-fenyl-3-bute:ny 1 ]-4-met hy 1 val e.ry 1 ]-2-i sobut yl karbazát u

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,27 g methy1-(E)-3-[2(R)-[1(S)-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl3-4-fenyl-3-butenyl3-4-met ylvaleryl3 2-isobutylkarbazátu získá 0,19 g methyl-(E)-3-[2(R)-[1(S)(hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-but enyl3-4-met hylvaleryl3~2-iso butylkarbazátu ve formě bílé pevné látky.

MS: 434 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu.. Retenční doba: 12,08 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Methyl-(E)-3-[2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2(RS)-pyranyloxy)• ···

46 ·· • · · · · ·· karbamoy1]-4-feny1-3-butenyl]-4-met ylvaleryl]-2-isobutylkarbazát , použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Rozpustí se 0,50 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl )-4-fenyl-3-butenyl]-2’-i sobutyl-4-met hylvalerohydrazidu a 0,12 ml pyridinu v 10 ml dichlormethanu a se ochladí na teplotu 0 °C v prostředí dusíku. Postuopně se přidá 0,12 ml methylchlorformátu a několik krystalů 4~di methylaminopyridi nu, reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti, zředí se dichlormethanem a promyje se postupně 5% vodným roztokem hydrogenuh1 i čitanu sodného, vodou, 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a vodou. Dichlormethanová fáze se vysuší síranem hořečnatým a roz- . pouštědlo se odpaří. Získá se 0,54 g methy1 -(E)-3-[2(R)-[1(S)(terc.-butoxykarbonyl)4-feny1-3-but enyl]-4-methylválery1]-2-išobuty1karbazátu ve formě bílé pěny.

MS: 475 (M+H) +.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním příkladu 2 ~CiVj a^-(VY) se z 0,54 g met hy 1 -(E)-3-[2(R)-[ 1 (S)-(t erc . -butoxykarbony1)4-fenyl-3-but enyl1-4-met hylvaleryl]-2-isobutylkarbazátu získá 0,27 g methyl-(E)-3-[2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)pyranyloxy)karbamoyl]-4-feny1-3-butenyl]-4-metylvaleryl]-2-i sobuty1karbazátu ve formě bílé pevné látky.

MS: 518 (M+H)⁺.

Příklad 122 (E)-2’-(Cykloheptyl)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 45, avšak za použití cyk1oheptanonu místo isobutyraldehydu ve stupni (i) se získá (E)-2’-(cyklohepty1)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4- 147 • · « · · · · *« fenyl-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-methy1valerohydrazid ve formě bílé pevné látky.

MS: 494 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,99 minut. Rozpouštědlo A: HzO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

i

Příklad 123 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-feny1-3-but eny1]-2’-(methan sul fonyl)-4-met hyl-2-neopentylvalerohydrazi d

Podobným způsobem, jako je popsáno v’ příkladu 45, avšak za použití pi val al dehyďu ' mí sto' i SobUtýral dehydu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-S-bufenyl]2 ’ - (met hansu 1 fonyl)-4-methyl-2-neopentyl valerohydrazid jako bílá pevná látka.

MS: 468 (M+H)⁺.

-HPtG-:—E-l-u-ě-nT—-g-r-aď+efrt—z-a—potrž-R-í—ro^-pouč-t-ěď-Ta—A—oďs-a-ha-j-rcrho—5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,79 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 124 ( E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoy1) — 4— feny1-3-but enyl] - 2’-isobutyl-2’-(trifluoracetyl)-4-met hylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 59, avšak za použití anhydridu trifluoroctové kyseliny místo anhydridu isomáselné kyseliny ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)~ (hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-2’-(trifluor

- 148 • · · · ··

acetyl)-4-methylvalerohydraz!d ve formě bílé pevné látky.

MS: 472 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,36 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad125 (E)-2(R) -[1(S) - (Hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-but enyl]-2’-i sobut y 1 -4-met hyl-2’-(2-fenylacetyl)valerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 59, avšak za použití fenylacetylchloridu místo anhydridu isomáselné kyseliny ve stupni (i) se. získá ( E )-2 ( R)-[ 1 (S)-( hydroxykar bamoy 1 )-4-feny1-3-butényl]-2’-isobutyl-4-methyl-2’-(2-fenylacetyl ) valerohydrazid ve formě, bílé pevné látky.

MS: 494 (MýH)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 -%__r-O-zpo.u.š-Věo'-Ta—B—zv-y-šu-j-ící—s-e—n-a—95—%—no-z-pouš-t-ěd-l-a—B—během—1-5minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,03 minut. Rozpouštědlo A: H20/0.1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 126 (E)-2(R)-11 (S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-but enyl]-N-(2-i sot h i azoli d i nyl)-4-methylvaleramid-S,S-dioxid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,12 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl3-4-f enyl-3-butenyl]—N—(2—isot hi azolidinyl)4-methylval éramid-S,S-dioxidu získá 0,03 g (E)-2(R)-[1(S) (hydroxykarbamoy!)-4~fenyl-3-butenyl]-N-(2-isothiazolidinyl ) 4-methylval éramid-S,S-dioxidu ve formě bílé pevné látky.

- 149

·· ····			•	• ·		• ·
« · ·	•	•	• ·	«	•	•	«
	•	•	•	•	•	•	•
						•
• ·	• « ·	•	• • · ·	• • ·	•	• • ·	•

MS: 424 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,90 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CM/ 0,035 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E) -2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]4-feny1-3-butenyl]-N- (2-isothiazolidiny1)-4-methy1 val éramid S,S-dioxid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Přidá se 1,35 g 3-chlorpropylsulfonylchlor idu a 0,85 g pyridinu do roztoku 3 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)4-feny1-3-buteny1]-4-methylvalerohydraz idu ve· 40 ml dichloi— methanu. Míchá se po dobu dvou hodin při teplotě místnosti , rozpouštědlo se odpaří a zbytek se trituruje s diethyletherem. Směs se zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá 1,92 g (E)-2 (R) -[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-but eny1]-2’(3-chlorpropylsulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bledě zTuťe'ho oTej e .

MS: 445 (Μ+Η-^τΒυ)⁺.

(ii) Přidá se 1,59 g uhličitanu draselného do roztoku 1,92 g (E)-2(R)-[1 (S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-but eny1]-2’(3-chlorpropylsulfonyl)-4-methylvalerohydraz idu v 50 ml suchého dimethylformamidu . Míchá se přes noc při teplotě místnosti a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v diethyletheru a promyje se vodou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (1:2). Získá se 0,93 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-butenyl]-N-(2-isothiazoli diny!) - 4 methy1 val éramid-S,S-dioxidu ve formě bledě žlutého oleje.

MS: 409 (M+H-^tBu)⁺.

- 150 (iii) Odobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (iv) a (v), se z 0,90 g (E)-2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony1)4-fenyl- 3-butenyl]-N-(2-isothiazolidinyl)-4-methylval éramid S,S-dioxidu získá 0,12 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyrany1oxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-but enyl]-N-(2-isot hi azol idinyl)4-methylval éramid-S,S-dioxidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 508 (M+H)⁺.

Příklad 127 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1]-4-methylN-(2-oxo-3-oxazoli di nyl)val érami d

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 126, avšak za použití 2-bromethylchlorformátu místo 3-chlorpropylsulfonylchloridu ve stupni (i) se získá (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4- feny1-3-buteny1]-4-methyl-N-(2-oxo-3-oxazol idi nyl)val éramid ve formě bílé pevné látky.

MS: 390 (M+H) ⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A. obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,79 minut. Rozpouštědlo A: ΗξΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 128

2(S)-[1(RS)-(Hydroxykarbamoyl)(feny 11 hi o)met hyl ]-2 ’ - isobut y1-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazíd

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 2,98 g 2(S)-[1(RS)-(feny11hi o)[(tetrahydro2 (RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]met hyl]-2’-isobutyl-2’-(met hansul fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 1,92 g 2(S)-[1(RS)-(hydroxykarbamoyl)(feny11hio)methyl]-2’- isobutyl-2’-(methansulfo151 ·· ·· » · · 4 • · · ι nyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 446 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího rozpouštědlo B ve množství zvyšujícím se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,36 až 12,64 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(S)-[1(RS)-(Feny 11 h i o)[(t et rahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy)karbamoy 1]met hyl]-2’- i sobut y1-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalero hydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Odobným způsobem, jako je. popsáno v příkladu 131 (v), vpříkladu 1 (iii) a v příkladu 2 (iii) a (v) se ze 3,45 g 4t erc . - but y 1 est e ru . 2 (S ) - i sobut y 1 -3 (RS ) -f eny 11 h i obut an-1 ,.4-di oové kyseliny (při praveného způsobem podle světového patentového spisu číslo WO 97/4216S) získá 2,98 g 2(S)-[1(RS)-(feny1thio)~ [(t et rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]methyl ]-2’-isobutyl-2’'(met hansul fonyl )-4-met hyl val erohydraz i du ve formě bílé pevné

MS: 530 (M+H)⁺.

Př í k1 ad 123

2(R)-[1(S)-(Hyd roxykarbamoyl)-4-met hylpentyl]-2’-isobutyl-2’(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,77 g 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 oxy)karbamoyl]-4-methylpenty1]-2’-isobut yl-2’-(met hansulfonyl)4-methylvalerohydrazidu získá 0,48 g 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy 1 )-4-met hylpentyl ] - 2 ’ - i sobutyl -2 ’ - (met hansu 1, fonyl )-4 -met hylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 408 (M+H)+ .

• ·· · • ··

- 152

HPLC: Akcerační eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 40 % rozpouštědla 8 po dobu 5 minuta zvyšující se na 80 % rozpouštědla B během 10 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 5,61 minut. Rozpouštědlo A: H2O/ 0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERSIL 120 A.

2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-methylpenty1]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohyd razid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Xi) Roztok 1,5 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony 1 )-4-methy1-3-pent enylj-2’- i sobut yl-2’-(met hansul fonyl )-4-met hylvale rohydrazidu v 50 ml methanolu se hydrogenuje v přítomnosti 0,15 g 10% palladia na uhlí po dobu šesti hodin. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Získá se 1,5 g 2(R)[1 (S)-(t erc.-butoxykarbonyl)-4- met hylpenty1]-2’ -i sobutyl-2’(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bezbarvého oleje.

wsy-tr-s^-í(M+Ay-u (ii) Podobným způsobem, jako podle je popsáno v příkladu 1 (iii) a v příkladu 2 (v), se z 1,5 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-4-methylpentyl]-2’- isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4 methylvalerohydrazidu získá 0,77 g 2(R)-[1(S)—[(tetrahydro 2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-methylpentyl]-2’- isobutyl-2’ (met hansu 1fonyl)-4-methylvalerohydraz idu ve formě bílé pevné látky.

MS: 492 (M+H)⁺.

Příklad 130

2(R)-11(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-methyl-3-pentenyl ]-2’-isobut y1-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i d • · · · · ·

- 1 53

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,25 g 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoy1]-4-met hyl-3-pent eny1]-2’-i sobut y1-2’-(met hansu!fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,15 g 2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoy 1 )-4-met hyl-3-pent enyl]-2’-isobut yl-2’-(met hansulfonyl )-4-methyl valerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 405 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 98 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,59 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo 8: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300 A.

2(R)-[1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyraný1oxy)karbamoyl]-4-methyl -3-pent eny 1 ] -2 ’ - i sobut yl -2 ’ -(met hansu! fonyl )-4-methylvale rohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Roztok 1,5 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbony1)-4-methyl-3-pentenyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvale r o hyd r a zTčfiT] 0,5Ϊ g triethylaminu a 0,93 g t r i met hy 1 s i 1 y 11 r i flátu ve 20 ml 1,4-dioxanu se zahřívá pod zpětným chladičem v prostředí dusíku po dobu čtyř hodin. Reakční směs se ochladí a. rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, vodou a solankou, Ethylacetátová fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá 1,31 g 2(R)-[1(S)(karboxy)-4-methyl-3-pentenyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)4-methylvalerohydrazidu ve formě žluté pěny.

MS: 391 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (v), se z 1,31 g 2(R )-[1(S )-(karboxy)-4-methyl-3-penteny13-2’-isobutyl-2’ -(methansu!fonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,25 9 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-methylφφ φφφφ » φ φ φφφφ

ΦΦ φφ

54

3-pentenyl]-2’-i sobut yl-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydrazidu ve formě bledě žluté pěny.

MS: 490 (M+H)⁺.

Příklad 131

2(R)-[(S)-(Benzyloxy)-(hydroxykarbamoy 1 )met hyl ]-2’-i sobut yl2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45, se z.0,12 g 2(R)-[(S)-(benzyloxy)-[(tetrahydro2(RS)-pyranyloxy )karbamoyljmet hy1]-2’-i sobut yl-2’-(met hansul fony 1)-4-methy1 valerohydrazidu získá 0,07 g 2(R)-[(S)-benzy1oxy)(hydroxykarbamoyl)methyl]-2’-i sobut yl-2’-(met hansu 1fonyl) 4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 444 (M+H)' .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla. B zvyšující se na 98 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 11,86 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ O_T08-5--%-ú'-FA^-~Typ--s-ro-crpceT-HYPERPEP^—3ΌΌΑΤ

2(R)-[(S)-(Benzyloxy)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyljmethyl]-2’ -isobutyl-2’ -(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Míchá se 4,48 g 3(R)-karboxy-2(S)-hydroxy-5-methy1hexanové kyseliny v prostředí dusíku v 10 ml anhydridu trif1uoroctové kyseliny po dobu 1,5 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí ve 20 ml suchého methanolu a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá 5,3 g methy1-3(R)-karboxy-2(S)-hydroxy-5-methy1hexanoátu ve formě oranžového oleje.

(ii) Přidá se 2,1 ml allylbromidu do roztoku 4,52 g methyl- 155 ·· ···· ·· ·«

··

3(R)-karboxy-2(S)-hydroxy-5-metnylhexanoátu a 7,9 g uhličitanu česného ve 30 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá přes noc a odpaří se. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu a promyje se 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, Dichlormethanová fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čití bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (1:9 až 2:3). Získá se 2,88 g methyl-3(R)-(allyloxykarbonyl)-2(S)~ hydroxy-5-methylhexanoátu ve formě slabě žlutého oleje.

(iii) Přidá se 0,51 g oxidu stříbrného a 0,33 ml benzylbromidu do roztoku 0,27 g methyl-3(R)-(allyloxykarbonyl)-2(S)-hydroxy5-methylhexanoátu v 5 ml dimethylformamidu. Reakční měs se míchá po dobu 24 hodin, přidá se 0,36 g uhličitanu česného a v míchání se pokračuje po dobu tří hodin.Reakční směs se zředí diethyl etherem, a zfiltruje se. Filtrát se promyje postupně 5% vodným roztokem kyseliny citrónové, vodou, 5% vodným roztokem uhličitanu sodného, vodou a solankou. Diethyl etherová fáze se vysuší bezvodými síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na silikagelu za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/hexan (1:19) a tak se získá 0,16 g methyl-3(R)-(al1yloxykarbony1)-2(S)-benzyl oxy-5-met hyl hexanoát u ve formě čirého oleje.

(iv) Přidá se 0,39 ml morfolinu a 0,05 g tetrakis(trifenylfosfin)pal1adia(0) do míchaného roztoku 0,15 g methyl-3(R)-(al1y1oxykarbonyl)-2(S)-benzyloxy-5-methylhexanoátu v 5 ml tetrahydrof uranu v prostředí dusíku. Reakční směs se míchá po dobu půl hodiny a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu a promyje se postupně 2M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a vodou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v diethyletheru a zfiltruje se. Diethyletherový roztok se odpaří a tak se získá 0,16 g methyl-3(R)-karboxy-2(S)-benzyloxy5-methylhexanoátu ve formě žlutého oleje.

- 156

f 9 tt ·	9 9- *	··	99
• · ·	• 9	9 ·	•	•	9	•
9 9 99	9 ·	•	•	9	9	•
					«
9 9	• 9 99	• « » ·	• »·	9	• ··	•

(v) Podobným způsobem, jako podle je popsáno v příkladu 1 (i), avšak za použití isobutylhydrazinu místo fenylhydrazi nu a příkladu 1 (ii), se z 0,43 g methy1-3(R)-karboxy-2(S)-benzy1oxy 5-methylhexanoátu získá 0,34 g 2(R)-[(S)-(benzyloxy)-(metoxy karbonyl)met hy1]-2’-isobut yl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu ve formě žlutého oleje.

MS: 443 (M+H)⁺.

(vi) Přidá se 0,530 2M roztoku tri methy1alumini a v toluenu do roztoku 0,124 g 0-(tetrahydro-2H-pyran-2(RS)-yl)hydroxy1aminu v 5 ml suchého toluenu o teplotě 0 °C v prostředí dusíku. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu půl hodiny a přidá se najednou 0,335 g 2(R)-[(S)-(benzyloxy)-(metoxykarbonyl)methyl]-2’isobutyl-2’-(met hansu 1fony1)-4-methylvalerohydrazidu . Reakční směs se nechá ohřát přes noc na teplotu místnosti. Směs se zředí ethylacetátem a promyje postupně 2M vodnou kyselinou ch1orovodíkovou a 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje se systémem hexan/diethylether (2:

1) a získá se 0,119 g 2(R)-[(S)-(benzyloxy)-[(tetrahydro-2(RS)pyrany1oxy)karbamoyl]methyl]-2’-isobutyl-2'-(methansulfonyl) 4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 528 (M+H)⁺.

Příklad 132

2(R)-[(1S)-(Hyd roxykarbamoyl)-2-fenylethyl]-2’-isobutyl-2’(methansulfony1)-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 65, se z 0,063 g 2(R)-[(1S)-(benzyloxykarbamoyl)-2fenylethyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu získá 0,014 g 2(R)-[(1S)-(hydroxykarbamoyl)-2-feny1et hyl]-2’-i sobutyl-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazi du ve formě bílé pevné látky.

•4 4444 • · · • · ··

- 157 -.

Β · · 4

Β 4 4 4

Β 4 4 4 • 4 44

MS: 428 (Μ+Η)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 10 minut:; průtočná rychlost 2 ml za minutu. Retenční doba: 7,55 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: DYNAMAX 300A.

2(R)-[(1S)-(Benzyloxykarbamoy!)-2-fenylethyl]-2’-isobutyl2(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz id, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Odobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (i) a (ii) , avšak za použití benzylbromidu místo cinnamylbromidu ve stupni (i) se získá 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-2-feny 1 ethy1]-4-methylvalerová kyselina ve formě čirého oleje.

MS: 321 (M+H)⁺.

(ii) Odobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 131 (v) a v příkladu 65 (iii) a (iv), se z 1,49. g 2(R)-[1(S)-(terc.butoxykarbony!)-2-fenylethyl]-4-met hylvalerové kyseliny získá 0,063 g 2(R.)-[(1S)-(benzyloxykarbamoyl)-2-fenylethyl]-2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 518 (M+H)⁺.

Příklad 133

2(R)—[1(S)-(Hydroxykarbamoy1)-2-(fenylthi o)ethyl]-2’-i sobutyl 2 ’ - (methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazí d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,315 g 2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-2-(fenylthio)ethyl]-2’-isobutyl-2’-(methansul f ony 1 )-4-met hyl val erohydraz i du získá 0,116 g 2(R)-[1 (S)-(h.ydroxykarbamoyl)-2-(feny1thio)ethyl]-2’-isobutyl-2’-(methansul κ

58

#···	·· ·	·♦	··
• « ·	• ·	« ·	•	•	•	•
• ···	• ·	•	•	♦	♦	•
						•
• ·	• ·	•	•	•	•
	β *		··

fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 450 (M+H)⁺ .

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 rn! za minutu. Retenční doba: 11,95 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CHsCN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

2(R)-[1(S)-[(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoy1]-2-(fenyl t h io)et hyl ] -2 ’ -i sobut yl -2 ’ - (met hansul fonyl )-4-met hy1 valerohydrazid, použitý jako výchozí látka, se při praví následujícím způsobem:

(i) Přidá Se 7,8 ml piperidinu a 20 ml 40% vodného roztoku formaldehydu do roztoku 6,0 g 1-terc;~butyldihydrogen-4-methyl-1 (RS)-1 , 2(R )-pent ant r i karboxy 1 át u v 80 ml isopropylalkoholu a směs se míchá přes noc v prostředí dusíku. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátová fáze se promyje postupně 1M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, teplou vodou a solankou a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří a tak se získá 3,94 g 2(R)-[1(terc.-butoxykarbonyl)vinyl3-4-methylvalerové kyseliny ve formě či rého oleje.

(ii) Odobným způsobem, jako je popsáno y příkladu 131 (v), se z 3,4 g 2(R)-[1-(terc.-butoxykarbonyl)vinyl]-4-methylvalerové kyseliny získá 3,57 g 2(R)-[1(terc.-butoxykarbonyl)viny 13-2’-isobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohyd raz i du ve formě čirého oleje.

(iii) Přidá se 0,183 g thiofenolu a 0,356 ml triethylaminu do roztoku 0,5 g 2(R)-[1(terc.-butoxykarbony1)vinyl]-2’-isobutyl2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydraz idu ve 20 ml toluenu a pokračuje se v míchání po dobu 48 hodin v prostředí dusíku. Přidá se dalších 0,183 g thiofenolu a pokračuje se v míchání

- 159 • ·· <

• ·· po dobu 48 hodin při teplotě 50 °C. Reakční směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti, zředí se ethylacetátem a promyje postupně 1M vodnou kyselinou chlorovodíkovou, 1M vodným roztokem hydroxidu sodného a solankou. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se trituruje s hexanem a tak se získá 0,307 g 2(R)-[1(S)(t erc.-butoxykarbonyl)-2-(feny11 hi o)et hyl3-2’-i sobut yl - 2 ’ (met hansu 1fony 1)-4-methy1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné 1át ky.

MS: 501 (M+H) ⁺ .

(iv) Odobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (iv) a (v) , se získá z 0,307 g 2(R)-[1(S)-(terc.-butoxykarbonyl)-2( f eny11 h i o)et hy1]-2’- i sobut yl-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylva 1erohydrazidu 0,315 g 2(R)-[(1S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 οχ y )karbamoy13^-2-(feny11 hi o)et hy13-2’- i sobuty1-2’-(met hansu 1 fony 1 )-4-met hyl val erohydraz i du ve formě bílé pevné látky.

MS: 544 (M+H)⁺.

Příklad 134 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-(1-naftyl)-3-butenyl3~2’i sobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydraz i d

Podobným způsobem, jako je popsáno v p.rvním odstavci příkladu 2, se z 0,240 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy) karbamoyl3-4-(1-naftyl)-3-butenyl3~2’-isobutyl-2’-(met hansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,155 g (E)-2(R)[ 1 (S)-(hydroxykarbamoyl)-4-(1-naftyl)-3-butenyl3-2’-i sobut yl 2’-(methansu 1fonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 504 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 13,19 ·· φφφφ ° · *

ΦΦΦ · · · · • ··· · · · • φ · · φ · • φ · φ ·

- 160 - .:..... ·· ·· minut. Rozpouštědlo A: H2O/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A, (E)-2(R)-[1(S) — [(Tet rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoylΙΑ- (1-naftyl)-3-but eny1]-2’- i sobutyl-2’-(met hansulfonyl5-4-methyl val erohyd raz i d, použitý jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

Rozpustí se 0,500 g 2(R )-[1(S )-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy ) karbamoy 1]-3-butenyl]-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl -2 ’ fenylvalerohydrazidu, připraveného způsobem podle příkladu 118, 0,449 g 1-bromnaftalenu, 0,219 g triethylaminu, 0,012 g acetátu palladnatého a 0,033 g tri-o-tolylfosfi nu v 5 ml dimethylformamidu a míchá se při teplotě 100 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs se nechá vychladnout na teplotu. .místnosti a rozdělí se mezi vodu a ethylacetát. Vodná fáze se extrahuje dvakrát ethylacetátem a spojené organické fáze se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí bleskovou chromatografii na silikagelu za použití jako elučního činidla systému dichlormethan/methanol (9,5:0,5) a tak se získá 0,260 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy) karbamoyl]-4-(1-naftyl)-3-but enyl]-2’-isobutyl-2’-(met hansu 1fony1)-4-methy1 valerohydraz idu ve formě bílé pevné látky. MS: 504 (M+THP+H)⁺.

Příklad 135 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-(5-pyrimidinyl)-3-butenyl]2’-isobutyl-2’-(methansulfonyl )-4-methylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 134, avšak za použití 5-brompyrimidinu místo 1-bromnaftalenu se získá (E)2 (R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-(5-pyrimidinyl)-3-butenyl]-2’isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid ve formě bílé pevné 1át ky.

4» · « 9

99

- 1 51 • · · · · · • · · • ··· «·

MS: 455 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla 8 zvyšující se na S5 % rozpouštědla 8 během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,89 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo S: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Příklad 135

2(R)-[(S)-(Cyklopent yl )( hydroxykarbamoyl )met hy 13—2 ’ — i sobut yl 2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazid a 2(R)-[(S)-(cyklopentyl )(hydroxykarbamoy1)methyl]-2’-i sobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-3-pentenohydrazi d

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 45,, se z 0,357 g směsi 2(R)-{(S)-(cyk 1 opentyl)[(tetrahyd ro-2 (RS)-pyraný 1oxy)karbamoy!]methyl 1-2’-i sobuty 1 -2’-(methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a 2(R)-[(S)-(cyklopentyl·) [(tet rahydro-2(RS)-pyraný 1oxy)karbamoy1]methyl]-2’-i sobutyl-2’- (methansulfonyl)- 4-methyl-3-pentenohydraz idu získá 0,219 g směsi 2 (R)-[(S.)-(cykl opent yl)(hyd roxykarbamoy 1 )methy 1 ] - 2’- i sobut yl-2’- (methansulfonyl)-4-methyl val erohyd raz i du (sloučenina Á) a 2(R)-[(S)-(cyklopentyl)(hydroxykarbamoyl)methyl]-2’- isobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-3-penteno hydrazidu (sloučenina B) ve formě bílé. pevné látky. Tyto sloučeniny se oddělí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií na sloupci DYNAMAX 5 pm C18 300A o rozměrech 21,4 x 50 mm za použití gradientu elučního činidla za následujících podmínek:

sloučenina A: MS: 405 (M+H)⁺.

HPLC: eluční gradient za použití rozpouštědla B podobu 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za mihnutu. Retenční doba: 11,00 minut, sloučenina B:>MS: 403 (M+H)⁺.

HPLC: eluční gradient uvedený pro sloučeninu A..

« *

- 162 • · ···· » · · · · • ··· * Φ • ♦ · · • · · · • · · · • · · · ·· ··

Retenční doba: 10,77 minut.

Směs 2(R)-[(S)-(cyklopentyl)[(tétrahydro-2(RS)-pyranýloxy)karbamoyl]met hy1]-2’-i sobut yl-2’-(met hansul fonyl )-4-methyl valerohydrazidu a 2(R)-[(S)-(cyklopentyl)[(tetrahydro-2(RS)pyranyloxy)karbamoyl] met hyl]-2’-i sobut yl-2’- (met hansulfonyl)4-rnethyl-3-pentenohydrazidu, použitá jako výchozí látka, se připraví následujícím způsobem:

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 131 (v), se získá z 1,1 g 4-benzylesteru 2(S)-cykopentyl-3(R)-(2-methylal1yl)jantarové, kyseliny (připraveného způsobem podle světového patentového spisu WO 97/19053) 1,14 g 2(R)-[(S)-(benzy 1 oxykarbonyl)(cyklopent yl)met hy1]-2’-i sobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-methy1-4-pentenohydrazidu ve formě bílé pěny, která by.se mohla překrystalovát z hexanu.

(ii) Roztok 1,14 g 2(R)-[(S)-(benzyloxykarbonyl)(cyklopenty 1 )met hyl]-2’- i sobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-4-pente nohydrazidu v 10 ml ethanolu se hydrogenuje v přítomnosti 0,05 g 10% palladia na uhlí po dobu 48 hodin. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá 0,91 g směsi 2(R)-[(S)-(karboxy)(cyklopentyl )methyl]-2’ -isobutyl-2’ -(methansul f ony 1 )-4-met hyl val erohyd raz i du a 2(R)-[(S)-(karboxy) (cyklopentyl)methyl]-2’-isobutyl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hyl-3-pentenohydrazidu ve formě bílé pěny.

(iii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (v), se z 0,31 g směsi 2(R)-[(S)-(karboxy)(cyklopenťy1)methyl]-2 ’ isobutyl-2’- (methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu a 2(R)~ [(S)-(karboxy)(cyklopent yl)methyl]-2’-isobutyl-2’-(methansul fonyl)-4-methyl-3-pentenohydrazidu získá 0,357 g směsi 2(R)[ (S) — (cyklopentyl ) [ (t et rahydro-2 (RS.)-pyranyl oxy) karbamoyl ]met hy 1 ]-2’-i sobut yl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydraz i du a 2(R)-[(S)-(cyklopentyl)[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamo ·· ·'· • · · 9 · · • · · • · ··

- 163 • 999 999 ··

9 9 9

9 99 yl ]methyl]-2’-i sobutyl-2’-(methansulfonyl)-4-methyl-3-pentenohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 512 (M+Na)⁺ a 510 (M+Na)⁺

Příklad 137 (E) —2(R)~[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[2-(1i mi dazolyl)et hyl]-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid, sodná sůl met hansu 1fonové kyseliny

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu· 45, se z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’ -[2-(1-imidazolyl)ethyl]-2’ (met hansu 1fonyl)-4-methy1 valerohydraz i du získá (E)-2(R)-[i(S)(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-[2-(1-imidazolyl)et hyl ]-2(met hansul fonyl )-4-rnet hyl val erohydraz i d v podobě sodné soli methansulfonové kyseliny ve formě bílé pevné látky.

MS: 492 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,34 minut. Rozpouštědlo A: H20/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

(E)-2(R)-[1(S)-[(Tetrahydro-2(RS) - py r.any 1 oxy) kar bamoy 1 ] 4-fenyl-3-butenyl]-2’-[2-(T-imidazolyl)ethyl]-2’-(met hansulfonyl )-4-met hyl val erohydraz i d , použitý jako výchozí látka, se připraví obdobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 15 (iii), z (E)-2(R)-[(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl ]-4-fenyl-3-butenyl3—2’ -(methansulfonyl)-4-methylvalerohyd razidu a z 1-(2-bromethyl)imidazolu.

Příklad 138 (Z)-2(R)-[1(S) — (Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-i so• · · · · · • · · • · ··

- 164 -

butyl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazid

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, se z 0,075 g (Z)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný 1 oxy ) karbamoy 1 ] -4-f eny 1 -3-but eny 1 ]-2 ’- i sobut yl -2 ’ -(methan sulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu získá 0,047 g (Z)-2(R)[1(S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3- butenyl]-2’~ isobutyl-2’ (methansulfonyl)-4-methylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 454 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1.ml za minutu. Retenční doba: 12,19 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí1átka se získá následujícím způsobem:

(i) Roztok 0,1 g 2(R)-[1(S)-terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3but i nyl ]-2 ’-i sobut yl-4-niet hyl val erohydraz i du v 10 ml pyri di nu se· protřepává v prostředí vodíku v přítomnosti 5% palladia na síranu barnatém jakožto katalyzátoru. Po 45 minutách se ktalyzátor odfiltruje a pyridin se odpaří. Zbytek se třikrát odpaří s toluenem a tak se získá 0,1 g (Z)-2(R)-[1(S)-[(terc.butoxykarbony1)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-isobutyl-4-met hylvalerohydrazidu ve formě slámově zabarvené pevné látky.

MS: 417 (M+H)⁺.

(ii) Podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu 2 (iv) a (v), se ze (Z)-2(R)-[1(S)-[(terc.-butoxykarbonyl)-4-fenyl-3buteny1]-2’-isobutyl-4-methylvalerohydrazidu získá 0,075 g (Z)-2(R)-[1(S)-[(t et rahydro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fe nyl-3-butenyl]-2’-i sobutyl-2’-(met hansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazidu ve formě bílé pevné látky.

MS: 538 (M+H)⁺.

- 165 • · · · · · • ·

9 99 • '9 ♦ 9 9·

Příklad 139 (E)-2(R)-[1(S)-(Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(methansul fonyl )-4-methyl-2’-[(2-pyridinyl)methyl]valerohydraž idmethansu 1fonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, avšak za použití met hansu 1fonové kyseliny místo ptol uensul fonové' kyseliny se z 0,266 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd ro-2 (RS)-py raný 1 oxy) kar bamoyl ]-4-fenyl-3-butenylJ-2’-(met hansu 1f ony1)-4-met hyl-2’ -[(2-pyri diny!)methyl]valerohydrazidu získá 0,24 g (E)-2(R)-[ 1 (S)-(hydroxykarbamoy1)-4-feny1-3-butenyl ] -2 ’ -(met hansu 1fonyl)-4-met hy1-2’-[(2-pyridi nyl)methy1]va '1 erohydraz i dmet hansu! fonátu vs formě špinavě bílé pevné látky. MS: 489 (M+H)⁺.

HPLC: Eluční grád ient.zapoužití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 9,95 minut. Rozpouštědlo A: ΗζΟ/Ο,Ι % TFA; rozpouštědlo B: CH3 CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se získá podobným způsobem jako podle příkladu 15 (iii) z (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahydro-2(RS)-pyraný1 οχ y )karbamoy!]-4-feny1-3-buteny1]-2’-(met hansu 1fonyl)-4-met hylvalerohydrazidu a z 2-brommethy1pyridinhydrobromidu.

Příklad 140 (E)-2(R)-[1(S)-rf Hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-buteny1 ]-2'-(methan su 1 fonyl)-4-met hyl-2’-(2,6-dimethyl-4-pyrimidi ny1)valerohydrazi dmet han sul fonát

Podobným způsobem, jako je popsáno v prvním odstavci příkladu 2, avšak za použití methansulfonové kyseliny místo p-to1uensulfonové kyselin se z 0,049 g (E)-2(R)-[1(S)-[(tetrahyd - 166 ro-2(RS)-pyranyloxy)karbamoyl]-4-fenyl-3-butenyl]-2’-(met han sulfonyl)-4-methyl-2’-(2,6-dimet hyl-4-pyr i mi diny!)valerohydrazidu získá 0,039g(E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl3- but eny1]-2’-(methansulfonyl)-4-met hyl-2’-(2,6-dimethyl-4-pyrimidinyl )valerohydrazidmethansul fonátu ve formě špinavě bílé pevné látky.

MS: 504 (M+H) +.

HPLC: Eluční gradient za použití rozpouštědla A obsahujícího 5 % rozpouštědla B zvyšující se na 95 % rozpouštědla B během 15 minut; průtočná rychlost 1 ml za minutu. Retenční doba: 12,00 minut. Rozpouštědlo A: HsO/0,1 % TFA; rozpouštědlo B: CH3 CN/ 0,085 % TFA. Typ sloupce: HYPERPEP 300A.

Výchozí látka se získá podobným způsobem jako podle příkladu 2 (iii) až (v) z ( E )-2 (R)-[ 1 (S) - (t erc .-butoxykar.bony 1 )4- f enyl-3-but eny 1 ]-4-methyl val erové kyseliny a z 2,4-dirnethy1-6-hydrazinopyrimidinu.

Následující příklady objasňují typické farmaceutické prostředky obsahující deriváty hydrazinu podle vynálezu.

Příklad A

Tablety, obsahující následující složky, s.e připraví o sobě známým způsobem.

Složka derivát hydrazinu 1 akt óza kukuřičný škrob mastek stearát hořečnatý

Množstí v tabletě (mg) 10,0

125,0

75,0

4,0 1 ,0

215,0

- 167 • · · · · · • · * • · ·· • · • · • · · · · · · ··

Příklad Β

Kapsle, obsahující následující složky, se připraví o sobě známým způsobem.

Složka derivát hydrazinu 1aktóza kukuřičný škrob mastek

Množstí v tabletě 10,0

165,0

20,0

5,0 (mg)

200,0

Průmyslová využitelnost

Deriváty hydrazinu vhodné jakožto inhibitory faktoru nádorové nekrózy, transformanty růstového faktoru z buněk a pro schopnost inhibovat proliferací keratinocytů jsou vhodné pro výrobu farmaceutických prostředků, zvláště pro ošetřování zánětů, horečky, hemorrhagie, sepse, rheumatické artritidy, osteoartritidy, roztroušené sklerózy a lupénky.

Claims (21)

1. říz

   PATENTOVÉ NÁROK Y@LH 4 1 . Derivát hydrazinu obecného vzorce T 1 0 R^{1 H}°\ Jk N Η Í R⁴ 0 H IjT R² R³ (I) kde znamená Y skupinu CO nebo SO₂ ,

   R¹ nižší skupinu alkylovou, alkenylovou, cykloalkylovou, cykloalkyl nižší alkylovou, arylovou nebo aryl nižší alkylovou skupinu,

   R² skupinu nižší alkylovou, halogen nižší alkylovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkenylovou nebo arylovou

   -s-k-up-i-n u~,—k-d-y-ž—¥-—z-n-amená—s-k-u-p-i-nu—SO2—a~skxrpiTra—nTž”ší~ alkylovou, halogen nižší alkylovou, nižší alkoxyskupinu, skupinu nižší, al koxykarbonyl ovou, acylovou, nižší cykloalkylovou, arylovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkoxyskupinu nebo skupinu NR⁵R⁵, když Y znamená skupinu CO,

   R³ atom vodíku, nižší alkylovou skupinu popřípadě substituovanou skupinou ze souboru zahrnujícího kyanoskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, nižší alkoxyskupinu, skupinu nižší alkoxykarbonylovou, heterocyklylovou nebo heterocyk1ylkarbony1ovou, nižší alkenylovou, nižší alkinylovou, nižší cykloalkylovou, nižší cykloalkyl nižší alkylovou, aryl nižší alkylovou, aryl nižší alkenylovou, arylovou nebo heterocyklylovou nebo

   - 169 ·· ···· ··

   R² a R³ spolu dohromady vytvářejí pětičlennou, šestičlennou nebo sedmičlennou cyklickou amidoskupinu, cyklickou imidoskupinu, cyklickou sulfonamidoskupinu nebo cyklickou urethanovou skupinu,

   R⁴ skupinu nižší alkylovou, nižší alkenylovou, nižší cykloalkylovou, nižší cykloalkyl nižší alkylovou nebo skupinu X-arylovou, X-heteroary1ovou nebo

   -(Clu )i-2-CH=CR⁷R³ , .

   X , mezerníkovou skupinu,

   R⁵ a R⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo aryl nižší alkylovou skupinu a

   R⁷ a R⁸ spolu dohromady nižší alkylenovou skupinu, ve které je popřípadě jedna methylenová skupina nahrazena heteroatomem, a jeho farmaceuticky přijatelné soli. _
2. 2. Derivát hydrazinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená Y skupinu CO nebo SO2, R¹ skupinu nižší alkylovou, nižší cyk1oalkylovou, nižší cykloalkyl nižší alkylovou, arylovou nebo aryl nižší alkylovou skupinu, R² n.ižší alkylovou skupinu, aryl nižší alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, jestliže Y znamená SO2 skupinu a nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxyskupinu, nižší cyk1oalkylovou skupinu, aryl nižší alkoxyskupinu nebo skupinu NR⁵R⁶ jestliže Y znamená skupinu CO, R³ atom vodíku, nižší alkylovou skupinu popřípadě substituovanou kyanoskupinou, aminoskupinou nebo ftali midoskupinou, nižší alkenylovou skupinu, nižší alkinylovou skupinu, nižší cykloalkylovou skupinu, nižší cykloalkyl nižší alkylovou skupinu, aryl nižší alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo heterocyklylovou skupinu nebo R² a R³ spolu dohromady vytvá-

   44 4444 '4 4

   - 170

   4 4 44 řejí pětičlennou, šestičlennou nebo sedmičlennou cyklickou amidoskupinu, cyklickou i midoskupinu, cyklickou sulfonamidoskupinu, R⁴ skupinu ftalimido nižší alkylovou, nebo skupinu X-arylovou nebo X-heteroarylovou, X rnezerní kovou skupinu, přičemž heteroary1ová skupina je vázána na atom uhlíku a R⁵ a R⁶ znamenají na sobě nezávisle atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo aryl nižší alkylovou skupinu a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
3. 3. Derivát hydrazinu podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, kde znamená Y skupinu CO a R² nižší alkoxyskupinu, nebo Y znamená skupinu SO2 a R² nižší alkylovou skupinu a R¹ , R³ a R⁴ mají v nároku 1 nebo 2 uvedený význam.
4. 4. Derivát hydrazinu podle nároku 3 obecného vzorce I, kde znamená Y. skupinu CO a R² methoxyskupinu a R¹ , R³ a R⁴ mají v nároku 3 uvedený význam.
5. 5. Derivát hydrazinu podle nároku 3 obecného vzorce I, kde znamená Y skupinu SO2 a R² methylovou skupinu a R¹ , R³ a R⁴ mají v nároku 3 uvedený význam.
6. 6. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 5 obecného vzorce I, kde znamená R¹ nižší alkylovou skupinu a Y, R², R³, R⁴ mají v nároku 1 až 5 uvedený význam.
7. 7. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 6 obecného vzorce I, kde znamená R¹ isobutylovou skupinu a Y, R², R³, R⁴ mají v nároku 1 až 6 uvedený význam.

   o. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 7 obecného vzorce I, kde znamená R³ skupinu nižší alkylovou, nižší alkenylovou, aryl nižší alkylovou nebo arylovou skupinu a Y, R¹ , R² a R⁴ mají v nároku 1 až 7 uvedený význam.
8. 9. Derivát hydrazinu podle nároku 8 obecného vzorce I, kde ·· ···· *· • · · · · · • · ·· * · • · · · ·

   4 —I 4 « · · ·

   - »71 - .··· ··· ·· · znamená R³ skupinu isobutylovou, 2-methylbutylovou, 2-methylallylovou, nesubstituovanou skupinu benzylovou nebo nesubstituovanou skupinu fenylovou a Y, R¹ , R² a R⁴ mají v nároku 8 uvedený význam.
9. 10- Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 9 obecného vzorce

   I, kde znamená X skupinu vzorce -(CH2 )1-5-, -CH2-CH=CH-,

   -CH₂-CSC, -CH2-NHCO-, -(CH₂)i nebo 2NHCONH-, -CCH2 )l -5-S-, -CH2NHSO2-, -CH2NHCH2-, -(CH₂ )i-5-O-, ' -O-(CH₂ )i -5 nebo -Sa Y, R¹, R² a R³ mají v nároku 1 až 9 uvedený význam.

   II. Derivát hydrazinu podle nároku 10 obecného vzorce I, kde znamená X skupinu vzorce -(CH2 )1-5-, -CH2,-CH=CH-, -CFú-CsC, -CH2-NHCO-, -(CH2 )1 nebo 2NHCONH-, -CH2S-, -CH2NHSO2-, -CH2NHCH2- a Y, R¹, R² a R³ mají v nároku 10 uvedený význam.
10. 12. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 11 obecného vzorce

    I, kde znamená R⁴ skupinu X-arylovou a Y, R¹ , R² a R³ mají v nároku 1 až 11 uvedený význam.

    -1-3- DeTřvút hydrazinu podle nároku 12 obecného vzorce Γ7 kde znamená X skupinu vzorce -CH2-CH=CH- a arylem se míní nesubstituovaná skupina fenylová a Y, R¹ , R² a R³ mají v nároku 12 uvedený význam.
11. 14. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 13 obecného vzorce I ze souboru zahrnujícího (E)-2(R)-[1 (S) — (hydroxykarbamoy!)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-isobut yl-2’-(methansulfonyl)-4-met hylvalerohydrazíd, (E)-2(R) — [1 (S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ]-2'-(metli ansul fonyl )-4-met hyl-2’-fenylvalerohydrazid, (E)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methan sul fonyl )-4-met hy1-2’-2(S)-met hylbutyl)vale.rohydraz i d, (É)-2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl]-2'-(methansulfony1)-4-methyl-2’-(2-methylallyl)vale99 99

    - 172

    99 99 9 9 ·9

    9 9 9 · • · ·· * ·· ·· rohydrazid a methyl-(E)-3-[2(R)-[1(S)-(hydroxykarbamoyl)-4-fenyl-3-butenyl ] 4-methylvaleryl]—2— isobutylkarbazát.
12. 15. Derivát hydrazinu obecného vzorce II

    r⁹o_x Ν' H 0 R¹ R⁴ (Π) o R³ kde Y, R¹ , R² , R³ a R⁴ maj í v nároku 1 uvedený význam a R⁹ znamená chránící s ku p inu, 1 5. Der i vát hydrazinu podle nároku 15 obecného vzorce II,

    kde R⁹ znamená skupinu tetrahydroparanylovou, 4-methoxybenzylovou, benzylovou nebo tri(nižši alkyl)si1ylovou skupinu.
13. 17. Karboxylová kyselina obecného vzorce IX

    R¹ HOOC^ Ř⁴ H ^N^ /Y\ , N R² O R³ (IX) kde Y, R¹ , R² , R³ a R⁴ mají v nároku 1 uvedený význam.
14. 18. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I jako terapeuticky účinná látka pro ošetřování zánětů, horčky, haemorrhagie, sepse, rheumatické arthritidy, osteoarthritidy, rozptýlené sklerózy a lupénky.
15. 19. Způsob přípravy derivátů hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 až 14 uvedený

    - 173 í se t í rn , že se odštěpuje ze sloučeniny obecného vzorce II ·· ···· »· ·· ·· ·· význam, vyznačuj í c chránící skupina symbolu R⁹ kde Y, R¹ chránící vzorce I , R² , R³ a R⁴ mají shora uvdený význam a R⁹ znamená skupinu, a popřípadě se získaná sloučenina obecného převádí na svoji farmaceuticky vhodnou sůl.
16. 20. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje derivát hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I a terapeuticky inertní nosičový materiál.
17. 21. Farmaceutický prostředek pro ošetřování zánětů, horčky, haemorrhagie, sepse, rheumatické arthritidy, osteoarthritidy, rozptýlené sklerózy a lupénky .vyznačující se t í rn , že obsahuje derivát hydrazinu podle nároku 1 až 14 o-becného—v-z-once—I—a—t-e-F-a-p-eum-e-ky—w^-rt-n-í—no-sd-č-ový—m^VeTdái~
18. 22. Způsob výroby farmaceutického prostředku pro ošetřování zánětů, horčky, haemorrhagie, sepse, rheumatické arthritidy, osteoarthritidy, rozptýlené sklerózy a lupénky , v y znáčů j í c í se t í m , že se derivát hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I uvádí na galenicky podávatelnou formu spolu s terapeuticky inertním nosičovým materiálem a popřípadě s další jednou nebo s několika přídavnými terapeuticky účinnými 1át kami.
19. 23. Použití derivátu hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I pro ošetřování nemocí zvláště pro ošetřování zánětů, horčky, haemorrhagie, _;sepse, rheumatické arthritidy, osteoarthritidy, rozptýlené sklerózy a lupénky.

    - 174 ·· ···· ·· • · · · ····* * • · · · • · · ······· · · ·· ··
20. 24. Derivát hydrazinu podle nároku 1 až 14 obecného vzorce I připravený způsobem podle nároku 19 nebo rovnocenným způsobem. ·
21. 25. Nové sloučeniny, meziprodukty, způsoby, farmaceutické prostředky a způsoby zde popsané.