CZ309740B6 - Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo - Google Patents
Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo Download PDFInfo
- Publication number
- CZ309740B6 CZ309740B6 CZ2020-132A CZ2020132A CZ309740B6 CZ 309740 B6 CZ309740 B6 CZ 309740B6 CZ 2020132 A CZ2020132 A CZ 2020132A CZ 309740 B6 CZ309740 B6 CZ 309740B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- substituted
- polymer
- glycopolymer
- linker
- Prior art date
Links
- 229920000550 glycopolymer Polymers 0.000 title claims abstract description 41
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 114
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 58
- VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl methacrylate Chemical compound CC(O)COC(=O)C(C)=C VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 28
- -1 carbonyl- hydrazono-5α-cholestanone Chemical compound 0.000 claims description 24
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 21
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 5
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 4
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- QWENRTYMTSOGBR-UHFFFAOYSA-N 1H-1,2,3-Triazole Chemical group C=1C=NNN=1 QWENRTYMTSOGBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 3
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims description 3
- KCVZZJAURNAJNR-VEKCAGTJSA-N C(=O)=CC(C=NN)CCC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2[C@@H]3CCC4=CC(CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)=O Chemical compound C(=O)=CC(C=NN)CCC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2[C@@H]3CCC4=CC(CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)=O KCVZZJAURNAJNR-VEKCAGTJSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 claims description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 2
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 claims description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 claims description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 claims description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 81
- 108010001517 Galectin 3 Proteins 0.000 description 55
- 102100039558 Galectin-3 Human genes 0.000 description 46
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 22
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 18
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 17
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 17
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 16
- 102000007563 Galectins Human genes 0.000 description 15
- 108010046569 Galectins Proteins 0.000 description 15
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 14
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 14
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 13
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 12
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 10
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 10
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000000802 Galectin 3 Human genes 0.000 description 9
- CDOJPCSDOXYJJF-CAQKAZPESA-N beta-D-GalpNAc-(1->4)-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CDOJPCSDOXYJJF-CAQKAZPESA-N 0.000 description 9
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 9
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 8
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 8
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 7
- 229920000962 poly(amidoamine) Polymers 0.000 description 7
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 6
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- VFXXTYGQYWRHJP-UHFFFAOYSA-N 4,4'-azobis(4-cyanopentanoic acid) Chemical compound OC(=O)CCC(C)(C#N)N=NC(C)(CCC(O)=O)C#N VFXXTYGQYWRHJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 5
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 5
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 5
- SENLDUJVTGGYIH-UHFFFAOYSA-N n-(2-aminoethyl)-3-[[3-(2-aminoethylamino)-3-oxopropyl]-[2-[bis[3-(2-aminoethylamino)-3-oxopropyl]amino]ethyl]amino]propanamide Chemical group NCCNC(=O)CCN(CCC(=O)NCCN)CCN(CCC(=O)NCCN)CCC(=O)NCCN SENLDUJVTGGYIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 125000006730 (C2-C5) alkynyl group Chemical group 0.000 description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PFHOSZAOXCYAGJ-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-cyano-4-methoxy-4-methylpentan-2-yl)diazenyl]-4-methoxy-2,4-dimethylpentanenitrile Chemical compound COC(C)(C)CC(C)(C#N)N=NC(C)(C#N)CC(C)(C)OC PFHOSZAOXCYAGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 4
- KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N N-acetyllactosamine Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KFEUJDWYNGMDBV-LODBTCKLSA-N 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 4
- HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCOCC HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- YNKQCPNHMVAWHN-UHFFFAOYSA-N 4-(benzenecarbonothioylsulfanyl)-4-cyanopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(C)(C#N)SC(=S)C1=CC=CC=C1 YNKQCPNHMVAWHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- HESSGHHCXGBPAJ-UHFFFAOYSA-N N-acetyllactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HESSGHHCXGBPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100490446 Penicillium chrysogenum PCBAB gene Proteins 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical group OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 3
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Natural products C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 238000006352 cycloaddition reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 3
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 3
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 3
- 229960003540 oxyquinoline Drugs 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- MCJGNVYPOGVAJF-UHFFFAOYSA-N quinolin-8-ol Chemical compound C1=CN=C2C(O)=CC=CC2=C1 MCJGNVYPOGVAJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010526 radical polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 3
- KFEUJDWYNGMDBV-UHFFFAOYSA-N (N-Acetyl)-glucosamin-4-beta-galaktosid Natural products OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 KFEUJDWYNGMDBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XXFUZSHTIOFGNV-UHFFFAOYSA-N 1-bromoprop-1-yne Chemical compound CC#CBr XXFUZSHTIOFGNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- QPCKLXWQFRRTAR-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-n-[3-oxo-3-(2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl)propyl]prop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)NCCC(=O)N1CCSC1=S QPCKLXWQFRRTAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYBOVXXFJYJYPC-UHFFFAOYSA-N 3-azidopropan-1-amine Chemical compound NCCCN=[N+]=[N-] OYBOVXXFJYJYPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RNTXYZIABJIFKQ-UHFFFAOYSA-N 4-cyano-4-dodecylsulfanylcarbothioylsulfanylpentanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCSC(=S)SC(C)(C#N)CCC(O)=O RNTXYZIABJIFKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- NXLWUVOHERPLFX-UHFFFAOYSA-N C(#CC)C=1C(=O)NC(C1)=O Chemical compound C(#CC)C=1C(=O)NC(C1)=O NXLWUVOHERPLFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229910021589 Copper(I) bromide Inorganic materials 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- 101000608757 Homo sapiens Galectin-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Chemical group C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010461 azide-alkyne cycloaddition reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- GHWVXCQZPNWFRO-UHFFFAOYSA-N butane-2,3-diamine Chemical group CC(N)C(C)N GHWVXCQZPNWFRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- ZPWOOKQUDFIEIX-UHFFFAOYSA-N cyclooctyne Chemical class C1CCCC#CCC1 ZPWOOKQUDFIEIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical group CC(O)CNC(=O)C(C)=C OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 239000003444 phase transfer catalyst Substances 0.000 description 2
- 229920001562 poly(N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide) Polymers 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- RTWCHRMHGXBETA-UHFFFAOYSA-N prop-1-yn-1-amine Chemical compound CC#CN RTWCHRMHGXBETA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N sec-butyl acetate Chemical compound CCC(C)OC(C)=O DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 2
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 2
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 2
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006650 (C2-C4) alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- WGJCBBASTRWVJL-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazolidine-2-thione Chemical compound SC1=NCCS1 WGJCBBASTRWVJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 1-aminopropan-2-ol Chemical compound CC(O)CN HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHSJSMSBFMDFHK-UHFFFAOYSA-N 1-azido-4-bromobenzene Chemical compound BrC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 WHSJSMSBFMDFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;sodium Chemical compound [Na].[Na].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RVHFLNDFIGIPLJ-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-cyano-5-oxo-5-(2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl)pentan-2-yl]diazenyl]-2-methyl-5-oxo-5-(2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl)pentanenitrile Chemical compound C1CSC(=S)N1C(=O)CCC(C)(C#N)N=NC(C#N)(C)CCC(=O)N1CCSC1=S RVHFLNDFIGIPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- IDSLBLWCPSAZBL-UHFFFAOYSA-N 2-cyanopropan-2-yl benzenecarbodithioate Chemical compound N#CC(C)(C)SC(=S)C1=CC=CC=C1 IDSLBLWCPSAZBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSVOWVXHKOQYIP-UHFFFAOYSA-N 2-dodecylsulfanylcarbothioylsulfanyl-2-methylpropanenitrile Chemical compound CCCCCCCCCCCCSC(=S)SC(C)(C)C#N QSVOWVXHKOQYIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEGDMFMDAGDUOS-UHFFFAOYSA-N 2-ethylsulfanylcarbothioylsulfanyl-2-methyl-5-oxo-5-(2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl)pentanenitrile Chemical compound CCSC(=S)SC(C)(CCC(=O)N1CCSC1=S)C#N VEGDMFMDAGDUOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OCVLSHAVSIYKLI-UHFFFAOYSA-N 3h-1,3-thiazole-2-thione Chemical group SC1=NC=CS1 OCVLSHAVSIYKLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036832 Adenocarcinoma of ovary Diseases 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- XMWRBQBLMFGWIX-UHFFFAOYSA-N C60 fullerene Chemical class C12=C3C(C4=C56)=C7C8=C5C5=C9C%10=C6C6=C4C1=C1C4=C6C6=C%10C%10=C9C9=C%11C5=C8C5=C8C7=C3C3=C7C2=C1C1=C2C4=C6C4=C%10C6=C9C9=C%11C5=C5C8=C3C3=C7C1=C1C2=C4C6=C2C9=C5C3=C12 XMWRBQBLMFGWIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPVVXXQOAJHFRK-UHFFFAOYSA-N CCCC(C[SH2]C(S)=S)C#N Chemical compound CCCC(C[SH2]C(S)=S)C#N SPVVXXQOAJHFRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N Cu+ Chemical compound [Cu+] VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N Dehydrocholesterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000795 Galectin 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010001498 Galectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- QIRXXBPLVZFBKV-UHFFFAOYSA-N [2-cyano-5-oxo-5-(2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl)pentan-2-yl] benzenecarbodithioate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=S)SC(C#N)(C)CCC(=O)N1CCSC1=S QIRXXBPLVZFBKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000002355 alkine group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 108010044715 asialofetuin Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- ZGRWZUDBZZBJQB-UHFFFAOYSA-N benzenecarbodithioic acid Chemical compound SC(=S)C1=CC=CC=C1 ZGRWZUDBZZBJQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)ON1C(=O)CCC1=O PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- VTJUKNSKBAOEHE-UHFFFAOYSA-N calixarene Chemical class COC(=O)COC1=C(CC=2C(=C(CC=3C(=C(C4)C=C(C=3)C(C)(C)C)OCC(=O)OC)C=C(C=2)C(C)(C)C)OCC(=O)OC)C=C(C(C)(C)C)C=C1CC1=C(OCC(=O)OC)C4=CC(C(C)(C)C)=C1 VTJUKNSKBAOEHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000012650 click reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- OCCYFTDHSHTFER-UHFFFAOYSA-N dbco-amine Chemical compound NCCC(=O)N1CC2=CC=CC=C2C#CC2=CC=CC=C12 OCCYFTDHSHTFER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIRLBCOFKPVQLM-UHFFFAOYSA-N dbco-c6-acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(=O)N1CC2=CC=CC=C2C#CC2=CC=CC=C12 NIRLBCOFKPVQLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000359 diblock copolymer Polymers 0.000 description 1
- JGFBRKRYDCGYKD-UHFFFAOYSA-N dibutyl(oxo)tin Chemical compound CCCC[Sn](=O)CCCC JGFBRKRYDCGYKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 229910003472 fullerene Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000048551 human LGALS3 Human genes 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 1
- OGSSEPXEBBNVGN-UHFFFAOYSA-N n-[2-[2-[2-(2-azidoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethyl]-3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanamide Chemical compound [N-]=[N+]=NCCOCCOCCOCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O OGSSEPXEBBNVGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006588 ovary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- QJWFJOSRSZOLKK-UHFFFAOYSA-N prop-2-enamide Chemical compound NC(=O)C=C.NC(=O)C=C QJWFJOSRSZOLKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002568 propynyl group Chemical group [*]C#CC([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011755 sodium-L-ascorbate Substances 0.000 description 1
- 235000019187 sodium-L-ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 208000013076 thyroid tumor Diseases 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/785—Polymers containing nitrogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H99/00—Subject matter not provided for in other groups of this subclass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F20/00—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride, ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F20/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms, Derivatives thereof
- C08F20/52—Amides or imides
- C08F20/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
- C08F20/58—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide containing oxygen in addition to the carbonamido oxygen, e.g. N-methylolacrylamide, N-acryloylmorpholine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F20/00—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride, ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F20/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms, Derivatives thereof
- C08F20/52—Amides or imides
- C08F20/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
- C08F20/60—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide containing nitrogen in addition to the carbonamido nitrogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/34—Introducing sulfur atoms or sulfur-containing groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Glykopolymer sestávající z HPMA polymerů s obsahem od 0,5 do 25 % mol. strukturních jednotek vzorce I a popřípadě koncových skupin o vzorci -S-sukcinimid-(CH2)r-Linker-Substituovaný sacharid nebo -C(CN)(CH3)-(C1-C4 alkylen)-Linker-Substituovaný sacharid. Jeho použití pro léčbu pevných nádorů, lymfomu nebo leukemie.
Description
Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo
Oblast techniky
Vynález se týká multivalentních vodorozpustných nebo micelárních polymerů, tj. homopolymerů i kopolymerů, se sacharidovými strukturami obsahujícími terminální monosacharid v galaktokonfiguraci, které jsou účinné jako inhibitory galektinů. Tyto glykopolymery lze využít jako léčiva pro terapii a prevenci rakovinných onemocnění spojených s nadprodukcí galektinů, zvláště lidského galektinu-3 (Gal-3).
Dosavadní stav techniky
V poslední době se vývoj léčiv v protinádorové terapii posouvá od klasických nízkomolekulárních léčiv k hledání nových léčiv nebo lékových forem umožňujících cílené působení aktivní látky především v místě, kde je terapeutický účinek třeba. V současnosti vstupují do klinického využití jako léčiva monoklonální protilátky, které jsou poměrně účinné u různých typů malignit, ovšem často je jejich použití spojené s poměrně silnými toxickými účinky pro pacienta. Vedle protilátek se cíleně působící formy léčiva dají využít především u takových látek, jejichž vedlejší účinky mohou vést až k poškození zdravých částí organizmu. Využití polymerních nosičů, především vodorozpustných nebo micelárních polymerů, pro cílenou dopravu léčiv je jednou z významných možností řešení zmíněného problému. Vysoká molární hmotnost polymeru s aktivní složkou zabraňuje rychlému vyloučení z organizmu glomerulární filtrací. Tím se významně prodlužuje doba cirkulace v krvi i celkové setrvání v organizmu vedoucí ke zvýšení biologické využitelnosti systému. Kromě toho vysoká molární hmotnost polymerního systému vede ke zvýšené akumulaci v pevných nádorech díky EPR (enhanced permeability and retention) efektu.
Tohoto efektu lze využít v případě navázání léčiva na makromolekulární nosič pro jeho cílenou akumulaci v nádoru. V minulosti byla vyvinuta celá řada systémů, které jsou založeny na využití EPR efektu pro cílení léčiv, např. polymerní micely, liposomy, nanočástice, nanokapsle nebo vodorozpustné polymerní konjugáty. Polymerní micely jsou na rozdíl od rozpustných polymerních systémů obvykle připravovány samouspořádáním amfifilních diblokových kopolymerů do vysokomolekulárních micelárních útvarů tvořících koloidní roztoky. Mezi vodorozpustnými systémy tvoří jednu z nejvýznamnějších skupin polymerní systémy připravené na bázi polymerů obsahujících jednotky N-(2-hydroxypropyl)methakrylamidu (HPMA polymery). Jediný a hlavní nedostatek omezující využití HPMA polymerů jako nosičů léčiv v humánní medicíně je jejich neštěpitelný uhlíkový řetězec a s tím spojené omezení molárních hmotností použitelných pro přípravu polymerního nosiče na molární hmotnosti menší než 50 000 až 60 000 g/mol. (pod vylučovací mezí organizmu). Bohužel, polymery nad touto mezí nejsou efektivně a dostatečně účinně z těla vylučovány, a tudíž jejich použití jako léčiva by vedlo k nežádoucí akumulaci polymeru v organizmu. Navýšení molární hmotnosti HPMA polymerů, a tedy prodloužení jejich cirkulace v organizmu, je možné vmezeřením biodegradovatelných spojek mezi jednotlivé bloky HPMA kopolymerů. Vhodné jsou zvláště spojky enzymově, hydrolyticky nebo reduktivně štěpitelné. Struktury vzniklé spojením bloků k sobě se nazývají multiblokové, roubované nebo hvězdicovité. Variantou může být též příprava amfifilního HPMA polymeru, který se do nadmolekulární micelární struktury sám složí a po poklesu koncentrace pod kritickou micelární koncentraci se sám rozpadne na krátké kopolymery vyloučitelné z organizmu.
Nedávno bylo popsáno, že HPMA polymer může sloužit jako nosič několika scFv řetězců antiCD20 a díky své multivalenci může způsobovat apoptózu CD20 pozitivních buněk (Kopeček J. Adv. Drug Delivery Rev. 2013, 65, 49-59). Tento koncept byl popsán jako „drug-free therapeutics“ (terapeutika bez léčiv) a v USA nyní probíhají jeho zkoušky. Základem pro účinnost tohoto systému je multivalence polymeru daná již samotnou strukturou použitého polymeru.
- 1 CZ 309740 B6
Galektin-3 (Gal-3) je lektin patřící do rodiny galektinů - proteinů vážících glykany s terminálním β-galaktosidem. V současné době je tomuto galektinu věnována značná pozornost s ohledem na jeho významný vliv na procesy ovlivňující nádorové bujení, jako je vznik metastáz, překonání imunitní odpovědi organizmu, mRNA splicing, genová exprese, apoptóza a vznik zánětu. Gal-3 je exprimován řadou nádorových tkání a buněk, a to jak intracelulárně, tak extracelulárně, kdy je jednak asociován s glykostrukturami na povrchu buněk, jednak je uvolňován do mezibuněčného prostředí. Zvýšená exprese Gal-3 v nádorových tkáních (Thijssen V. L. et al. Biochim. Biophys. Acta 2015, 1855, 235-247) vede k zhoršené prognóze vývoje onemocnění a zvýšenému riziku vzniku metastáz. Dále byla prokázána klíčová role extracelulárního Gal-3 produkovaného do nádorového mikroprostředí při potlačení imunitní odpovědi T buněk proti nádorovým buňkám a snížení funkce NK buněk, což následně vede k rozšíření nádorového bujení a vzniku metastáz. Bylo prokázáno, že inhibice extracelulárního Gal-3 vede k ochraně T buněk imunitního systému proti apoptóze vyvolané Gal-3.
Gal-3 produkovaný nádorovými buňkami může být lokalizován především v jádře, v cytoplazmě a na membráně. Extracelulární Gal-3 je produkován do mikroprostředí nádoru a rovněž krví do celého těla. Zvýšená přítomnost Gal-3 je v přímé korelaci s horší prognózou vývoje nádorového onemocnění, např. v případě nádorů štítné žlázy, některých nádorů tlustého střeva, hlavy a krku nebo nádorů mozku. Jedním z důvodů může být vliv volného Gal-3 na apoptózu protinádorových T lymfocytů. Gal-3 může díky své zvýšené expresi v nádorové tkáni sloužit jako terapeutický marker a současně terapeutický cíl. Také jeho přítomnost v krevním řečišti či mikronádorovém prostředí může být sledována s ohledem na vývoj nádorového onemocnění; ovlivnění hladiny volného Gal-3 může ovlivnit efektivitu protinádorové imunitní odpovědi (Sano H. et al. J. Immunol. 2000, 165 (4), 2156-2164, Guha P. PNAS 2013, 110 (13), 5052-5057).
V posledních letech byly intenzivně studovány různé modifikace základních sacharidových ligandů galektinů - galaktosy, laktosy (Galb4Glc) nebo N-acetyllaktosaminu (Galb4GlcNAc) - a vliv těchto modifikací na afinitu připravených glykomimetik k jednotlivým galektinům, zvláště pak biomedicínsky nejvíce studovaným galektinu-1 a -3. Vnesení aromatické skupiny na C-3 mateřského galaktosového zbytku bylo demonstrováno jako nejvýhodnější pro zvýšení afinity ke galektinům. Strukturní analogy N-acetyllaktosaminu a thiodigalaktosidů (TDG; Gale1-ieGal) se vyprofilovaly v rozsáhlou skupinu účinných glykomimetických inhibitorů galektinů odolných vůči enzymové degradaci in vivo, což je důležitým faktorem pro budoucí klinickou aplikaci. Byla popsána i multivalentní prezentace těchto glykomimetik na hovězím sérovém albuminu jako nosiči.
Kromě již uvedených sloučenin byla v literatuře popsána řada dalších sacharidů jako ligandů galektinů. Jedná se zvláště o struktury na bázi poly-N-acetyllaktosaminu. Tyto komplexní oligosacharidové struktury a další, jednodušší sacharidy na bázi laktosy, galaktosy či Nacetyllaktosaminu bez zmíněných substitucí byly též v minulosti vystaveny v multivalentní prezentaci na řadě nosičů, jako např. na peptidech, polymerech, oligonukleotidech, fullerenech a kalixarenech, i na dendrimerech a nanočásticích. Multivalentní prezentace často výrazně zvýšila nízkou afinitu monovalentního sacharidu. I když byly v některých případech demonstrovány vysoké afinity ke galektinům metodou ELISA, jednalo se vždy pouze o modelový systém, který nelze použít pro in vivo aplikace. Žádný z dosud připravených multivalentních nosičů nenabízí unikátní kombinaci vlastností glykopolymerů podle předkládaného vynálezu (konkrétně dobrou definovatelnost a reprodukovatelnost přípravy, biokompatibilitu, stabilitu in vivo a výhodnou farmakokinetiku).
HPMA polymery nesoucí protirakovinné léčivo doxorubicin a kovalentně navázané jednoduché mono- a disacharidy (laktosa, galaktosa, galaktosamin) byly v minulosti studovány (David A. Pharmaceut. Res. 2002, 19, 1114-1122; David A. et al. Eur. J. Cancer 2004, 40, 148-157) pro možnost aktivního cílení do buněk vybraných rakovinných linií, z nichž některé exprimovaly Gal3. V popsaných případech nebylo uvažováno o účinku konjugátů na inhibici Gal-3 a korelace získaných výsledků s expresí Gal-3 na buňkách nebyla průkazná. V publikaci autorů tohoto
- 2 CZ 309740 B6 vynálezu (Bojarová P. et al. J. Nanobiotechnol. 2018, 16, 73) byla syntetizována série HPMA konjugátů s jednoduchým disacharidem LacdiNAc a demonstrován jejich inhibiční účinek (IC50 v řádu μΜ) na Gal-3 ve stanovení ELISA. Předkládaný vynález si klade za cíl poskytnout glykopolymery se zlepšeným inhibičním účinkem na Gal-3, a při tom mající vhodné vlastnosti pro přípravu a aplikaci, které jsou nezbytnými podmínkami pro možnost praktického využití.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je struktura, syntéza a použití nového polymerního léčiva s dobře kontrolovatelným obsahem navázaných substituovaných sacharidů. Obsah navázaných substituovaných sacharidů se reguluje množstvím přidané sacharidové složky k polymernímu nosiči, protože je mu úměrný. Nové léčivo jeví prodlouženou farmakokinetiku a zvýšenou akumulaci v nádoru díky obsahu polymerní složky, a zároveň silnou inhibici galektinů.
Glykopolymery nesoucí substituované sacharidy podle tohoto vynálezu mají nejen vyšší afinitu ke Gal-3 ve vazebných testech typu ELISA, než je tomu u glykopolymerů známých ze stavu techniky, ale především mají prokazatelně silnější účinek v biologických testech, jak je doloženo ve srovnávacím příkladu 26. Oproti nejbližšímu stavu techniky jsou tak jednoznačně účinnější na inhibici Gal-3, která má přímý dopad na protinádorovou imunitní odpověď a migraci nádorových buněk.
Na rozdíl od všech dříve připravených systémů jsou glykopolymery podle vynálezu jediným prostředkem s inhibičním účinkem vůči Gal-3, který lze použít in vivo pro terapii nádorového bujení, a to díky odpovídající farmakokinetice zajištěné polymerní složkou, biokompatibilitě, in vivo stabilitě, a dobré reprodukovatelnosti přípravy. V rámci tohoto vynálezu byl prokázán silný účinek připravených glykopolymerů nejen na potlačení indukce apoptózy u buněk imunitního systému, ale též dosud nedemonstrovaný účinek na potlačení migrace nádorových buněk. Oba tyto účinky mají přímý dopad na léčbu nádorů a potlačení metastatického procesu.
Jedním z důležitých znaků systému podle předkládaného vynálezu jsou polymerní řetězce tvořené inertním, nenabitým, s organizmem neinteragujícím vodorozpustným polymerem na bázi HPMA, který je využit jako multivalentní nosič pro navázání substituovaných sacharidů s cílem dosáhnout zvýšené interakce s lektiny, a též zlepšené farmakokinetiky nesených substituovaných sacharidů. V kombinaci se specifickými substituovanými sacharidy se pak dosahuje zde popsaných účinků.
Struktura glykopolymeru podle vynálezu vychází z polymerních nosičů na bázi HPMA polymerů, na které jsou kovalentně navázány substituované sacharidy, jejichž interakce s galektiny má díky polymernímu nosiči multivalentní charakter a dochází k aviditě při vazbě na zmíněné galektiny. Popsaná silná interakce s galektiny vede k samotnému biologickému účinku, který spočívá v několika bodech, a to v protektivním efektu na buňky imunitního systému proti apoptóze indukované Gal-3, dále v inhibici migrace nádorových buněk a s tím spojené inhibici metastatického rozsevu.
Pod pojmem „léčivo“ se zde rozumí látka přímo mající léčebné účinky, nebo adjuvans, nebo imunomodulant.
Termínem „polymer“ jsou zde zahrnuty kopolymery i homopolymery. Zejména termínem „HPMA polymer“ je zahrnut jako HPMA kopolymer, tak HPMA homopolymer.
Předmětem předkládaného vynálezu je tedy glykopolymer obsahující polymerní nosič na bázi HPMA polymerů s obsahem od 0,5 do 25 % mol.
- strukturních jednotek vzorce I:
- 3 CZ 309740 B6
Linker
Substituo\aný sacharid (I) kde
Y1 je vybrán ze skupiny tvořené alkylenem majícím 1 až 8 atomů uhlíku;
Y2 je vybrán ze skupiny zahrnující karbamoyl, karbamoyl-(Cl-C8-alkylen), přičemž karbamoylem se rozumí skupina -C(=O)-NH- i skupina -NH-C(=O)-;
Linker je vybrán ze skupiny zahrnující 1,2,3-triazolylen, (Cl alkyl)-l,2,3-triazolylen;
Substituovaný sacharid je substituovaný sacharid obecného vzorce lila;
a popřípadě
- koncových skupin o vzorci -S-sukcinimid-(CH2)r-Linker-Substituovaný sacharid nebo C(CN)(CH3)-(C1-C4 alkylenj-Linker-Substituovaný sacharid; kde r je vybráno ze skupiny zahrnující 1, 2 a 3, a Linker a Substituovaný sacharid jsou definovány výše;
přičemž substituovaný sacharid obecného vzorce lila je
R’ (lila) a kde
R11 je vybrán ze skupiny obsahující C1-C3 alkyl s vazbou k Línkem, a fenyl-(Cl-C3)alkyl s vazbou k Línkem;
X je [l,2,3]-triazol nebo vazba,
Y je CH2,
Z je O,
-4CZ 309740 B6
R1 je vybrán ze skupiny obsahující fenyl, fenyl substituovaný alespoň jedním halogenem, fenyl substituovaný alespoň jednou nitroskupinou, fenyl substituovaný alespoň jedním halogen(ClC5)alkyltriazolylem, fenyl substituovaný alespoň jednou kyanoskupinou;
R2 je hydroxyskupina,
R4 je hydroxyskupina,
R5 a R6 jsou vodíky;
přičemž glykopolymer, popřípadě dále obsahuje větvící jednotky vybrané ze skupiny zahrnující amidoaminové jednotky nebo 2,2-bis(hydroxymethyl)propionové jednotky.
Glykopolymer může kromě poly(HPMA) řetězců obsahovat také větvící jednotky, například amidoaminové jednotky vhodné pro přípravu dendrimerních (hvězdicovitých) polymerních jader poly(amidoaminu) (PAMAM), nebo 2,2-bis(hydroxymethyl)propionové jednotky vhodné pro tvorbu dendrimerních jader. Například může glykopolymer hvězdicové struktury obsahovat jádro z PAMAM a postranní řetězce z poly(HPMA), obsahující výše uvedené koncové skupiny a/nebo monomerní jednotky vzorce I.
Postup přípravy glykopolymerů podle předkládaného vynálezu obsahuje následující kroky:
a) polymeraci monomerů polymerního nosiče a případně větvících jednotek,
b) volitelný krok polymer-analogických reakcí, c) navázání substituovaného sacharidu.
Monomery zahrnují X-(2-hydroxypropyl)methakrylamid (HPMA) a methakryloyl(aminoacyl) estery, a popřípadě větvící jednotky. HPMA je komerčně dostupný a jeho syntéza je publikována (např. Chytil P. et al. Eur. J. Pharm. Sci. 2010, 41 (3-4), 472-482). Komerčně dostupné monomery jsou dále například X-aminoethylmethakrylamid, X-aminopropylmethakrylamid, nebo jejich /Boc chráněné analogy.
Syntézu dalších fůnkcionalizovaných monomerů odvozených od HPMA lze popsat následovně. Funkcionalizované monomery, methakroylované sloučeniny, lze popsat obecným vzorcem II
kde
Y1 je vybrán ze skupiny tvořené alkylenem majícím 1 až 8 atomů uhlíku;
Y2 je vybrán ze skupiny zahrnující karbamoyl, karbamoyl-(Cl-C8-alkylen); přičemž karbamoylem se rozumí skupina -C(=O)-NH- i skupina -NH-C(=O)-;
Y3 je vybrán ze skupiny zahrnující azid, terminální alkynyl mající 2 až 8 atomů uhlíku, fenyl substituovaný alespoň jedním azidem nebo C2-C4 alkynylem.
- 5 CZ 309740 B6
Větvící jednotky jsou obvykle komerčně dostupné, v některých případech jsou komerčně dostupná i větvená či hvězdicovitá jádra pro dendrimerní polymery.
Prvním krokem postupu podle vynálezu je krok a), tj. krok syntézy polymerních nosičů polymerací monomerů, popřípadě s větvícími jednotkami. Polymerní nosič obvykle obsahuje statistický polymer obsahující od 0,5 do 25 % mol. monomerních jednotek obecného vzorce II a/nebo koncových jednotek hlavního polymerního řetězce popsaných výše, a alespoň 75 % mol. (75 až 99,5 % mol.) jiných jednotek, což zahrnuje monomerní jednotky odvozené od HPMA a popřípadě i větvící jednotky. Polymerizace typicky probíhá při teplotě v rozmezí od 30 do 100 °C, s výhodou 40 až 80 °C, v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující vodu, vodné pufry, dimethylsulfoxid, dimethylacetamid, dimethylformamid, methanol, ethanol, dioxan, tercbutylalkohol nebo jejich směsi, za iniciace iniciátorem, s výhodou vybraným ze skupiny zahrnující zejména azoiniciátory 2,2'-azobis(2-methylpropionitril) (AIBN), 4,4'-azobis(4-kyanopentanová kyselina) (ACVA), 2,2'-azobis(4-methoxy-2,4-dimethylpentannitril) (V70), za přítomnosti přenosového činidla, s výhodou vybraného ze skupiny obsahující 2-kyano-2-propylbenzodithioát, 4-kyano-4-(thiobenzoylthio)pentanovou kyselinu, 2-kyano-2-propyldodecyltrithiokarbonát, 2kyano-2-propylethyltrithiokarbonát a 4-kyano-4[(dodecylsulfanylthiokarbonyl)sulfanyl]pentanovou kyselinu. Molární hmotnost MQ takto připravených polymerů je v rozmezí od 4000 do 100 000 g/mol, s výhodou 20 000 až 50 000 g/mol.
Volitelně může být zahrnut i krok odstranění koncových skupin obsahujících síru z polymerů, při jejichž přípravě bylo použito přenosové činidlo, ve kterém jsou tyto polymery reagovány s přebytkem azoiniciátoru ze skupiny iniciátorů polymerace popsaných výše. Polymerní nosič je pak zakončen zbytkem z radikálu vzniklého rozpadem použitého iniciátoru. Reakce typicky probíhá při teplotě v rozmezí od 50 do 100 °C, s výhodou 60 až 80 °C, a v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující dimethylsulfoxid, dimethylacetamid a dimethylformamid.
Volitelným krokem b) je zavedení azidové či alkylové skupiny (i) reakcí Y3 skupiny na polymeru, pokud ta je odstupující skupinou (tj. je vybraná z thiazolin-2-thionové skupiny (TT), 4-nitrofenoxy skupiny, 2,3,4,5,6-pentafluorfenoxy skupiny, sukcinimidylové skupiny, a OH skupiny), s aminosloučeninou (např. amino(C 1-C8 alkanem)) zakončenou skupinou vybranou z azidu, ethynylu, fenylu substituovaného alespoň jedním azidem, C2-C5 terminálním alkynylem, nebo substituovaným cyklooktynem, s výhodou 3-amino-1-(11,12-didehydrodibenzo[b,f]azocin-5(6 H) yl)propan-1 -onem, či N-[(1R ,8 S,9 s )-bicyklo[6.1.0]non-4-yn-9-ylmethyloxykarbonyl]-1,8diamino-3,6-dioxaoctanem; nebo (ii) reakcí Y3 skupiny na polymeru, pokud ta je primární aminoskupinou, s karboxy(C1-C8 alkanem) zakončeným skupinou vybranou z azidu, ethynylu, fenylu substituovaného alespoň jedním azidem, C2-C5 alkynylem, nebo substituovaným cyklooktynem, s výhodou 6-(11,12-didehydrodibenzo[b,f]azocin-5(6H)-yl)-6-oxohexanovou kyselinou, či jejím N-hydroxysukcinimidyl esterem a (1R,8S,9s)-bicyklo[6.1.0]non-4-yn-9ylmethyl N-sukcinimidyl karbonátem, nebo funkčními deriváty tohoto karboxyalkanu obsahujícími dobře odstupující skupinu tvořenou s výhodou TT, 4-nitrofenoxy, 2,3,4,5,6pentafluorofenoxy, nebo sukcinimidylovou skupinou. Tyto polymer-analogické reakce typicky probíhají při pokojové teplotě v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující dimethylsulfoxid, dimethylacetamid, dimethylformamid, methanol a ethanol.
Jedno výhodné provedení polymerního nosiče je takové, že volitelně může dále obsahovat 0,5 až 12 % mol. dalších strukturních jednotek odvozených od obecného vzorce II, kde Y1 a Y2 jsou jak je definováno výše, ale Y3 je vybrán ze skupiny tvořené karbonyl-hydrazono-(C12-C18 alkanonem), karbonyl-hydrazono-5α-cholestanonem, karbonyl-hydrazono-cholest-4-en-3-onem, případně jiným substituentem odvozeným od ketoderivátů cholesterolu; nebo je vybrán ze skupiny tvořené karbonyl-(C9-C15 alkoxy), karbonyl-cholesterylu, nebo jiných sloučenin odvozených od cholesterolu, např. 7-dehydrocholesterolu, či vitamínu D; nebo je vybrán ze skupiny tvořené karboxamido-(C10-C18 alkylem) a karbohydrazido-(C10-C18 alkylem), nebo karboxamido-(C10C18 alkenylem) a karbohydrazido-(C10-C18 alkenylem), obsahujícím aspoň jednu dvojnou vazbu (C=C), s výhodou odvozené od kyseliny olejové, linolové, linoleové.
- 6 CZ 309740 B6
Polymerní nosič může obecně mít lineární, větvenou, nebo síťovanou strukturu.
V případě lineární struktury se obvykle jedná o polymerní nosič obsahující 0,5 až 25 % mol. monomerních jednotek vzorce II a/nebo koncových jednotek popsaných výše, a alespoň 75 % mol. HPMA monomerních jednotek.
V případě větvené nebo síťované struktury je obsaženo alespoň 75 % mol. HPMA monomerních jednotek a větvících jednotek.
V některých provedeních polymerního nosiče větvené struktury je jen část funkčních skupin vhodných pro vazbu substituovaných sacharidů rozmístěna podél polymerního řetězce, nebo dokonce nejsou monomery vzorce II obsaženy vůbec. Funkční skupiny vhodné pro vazbu substituovaných sacharidů, nebo alespoň jejich část, mohou mít formu koncových skupin umístěných na jednom konci polymerního řetězce HPMA polymeru, přičemž druhý konec polymerního řetězce je navázaný k multivalentní molekule, např. dendrimeru, např. PAMAM dendrimernímu jádru nebo k jádru na bázi 2,2-bis(hydroxymethyl)propionového dendrimeru. Prvním krokem přípravy je v takových provedeních polymerizace HPMA, která typicky probíhá při teplotě v rozmezí od 30 do 100 °C, s výhodou 40 až 80 °C, v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující vodu, vodné pufry, dimethylsulfoxid, dimethylacetamid, dimethylformamid, methanol, ethanol, dioxan, terc-butylalkohol nebo jejich směsi, za iniciace iniciátorem, s výhodou vybraným ze skupiny zahrnující zejména azoiniciátory AIBN, ACVA, V70, za přítomnosti přenosového činidla obsahujícího karboxylovou skupinu nebo její funkční derivát obsahující dobře odstupující skupinu tvořenou s výhodou TT, 4-nitrofenoxy, 2,3,4,5,6-pentafluorofenoxy, nebo sukcinimidylovou skupinou; přenosové činidlo je s výhodou vybrané ze skupiny obsahující 4kyano-4-(thiobenzoylthio)pentanovou kyselinu, 4-kyano-4[(dodecylsulfanylthiokarbonyl)sulfanyl]pentanovou kyselinu, 1-kyano-1-methyl-4-oxo-4-(2thioxothiazolidin-3-yl)butyl dithiobenzoát, 2-kyano-5-oxo-5-(2-thioxo- 1,3-thiazolidin-3yl)pentan-2-yl ethylkarbontrithioát. V druhém kroku jsou polymery navázány amidovou vazbou k multivalentní sloučenině nesoucí koncové primární aminoskupiny, s výhodou tvořené poly(amidoaminovým) (PAMAM), nebo 2,2-bis(hydroxymethyl)propionovým dendrimerem, přičemž reakce typicky probíhá v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující dimethylsulfoxid, dimethylacetamid, dimethylformamid, methanol a ethanol. Dendrimer může tvořit až 3 % mol. obsahu výsledného polymerního konjugátu. Následně jsou in situ zablokovány zbývající primární aminoskupiny nízkomolekulární aminoreaktivní sloučeninou, s výhodou acetanhydridem. Ve třetím kroku jsou síru obsahující skupiny na druhém konci polymeru buď redukovány borohydridem sodným a in situ dojde k adici SH skupin na N-derivovaný maleimid, s výhodou propynylmaleimid či azido-PEG3-maleimid, přičemž reakce probíhá v rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující vodu, dimethylacetamid, dimethylformamid, methanol a ethanol. Popřípadě jsou síru obsahující skupiny na druhém konci polymeru reagovány s přebytkem azoiniciátoru nesoucím karboxylovou skupinu, nebo její funkční derivát obsahující dobře odstupující skupinu tvořenou s výhodou TT, 4-nitrofenoxy, 2,3,4,5,6-pentafluorofenoxy, nebo sukcinimidylovou skupinou, a to při teplotě v rozmezí od 50 do 100 °C, s výhodou 60 až 80 °C a rozpouštědle s výhodou vybraném ze skupiny zahrnující dimethylsulfoxid, dimethylacetamid a dimethylformamid. Molární hmotnost Mn takto připravených polymerů je v rozmezí od 60 000 do 1 000 000 g/mol, s výhodou 100 000 až 400 000 g/mol.
Finálním krokem c) přípravy je vazba substituovaného sacharidu vybraného ze skupiny sestávající ze substituovaných sacharidů obecného vzorce III:
- 7 CZ 309740 B6
kde kombinace U, V a W je obecného vzorce lila (se znázorněním vazby na skupinu R4):
r'1 (lila) kde V a W je jen vazba, a kde U je Ι-ί/ζζο-β-D-galaktopyranosyl substituovaný na atomu C-2 skupinou R4, na atomu C-3 uskupením -Z-Y-X-R1 a na atomu C-6 skupinou -OR6;
a kde
R1 je vybrán ze skupiny obsahující fenyl, fenyl substituovaný alespoň jedním halogenem, fenyl substituovaný alespoň jednou nitioskupinou, fenyl substituovaný alespoň jedním halogen(ClC5)alkyltiiazolylem, fenyl substituovaný alespoň jednou kyanoskupinou; fenyl substituovaný alespoňjedním C2-C5 alkynylem, fenyl substituovaný alespoň jedním C1-C5 azidoalkylem, fenyl substituovaný alespoň jednou azidoskupinou, a C2-C5 alkynyl;
X je [l,2,3]-triazol nebo vazba,
Y je CH2,
Z je O,
R2 je hydroxyskupina,
R4 je hydroxyskupina,
R5 a R6 jsou vodíky;
přičemž substituovaný sacharid obecného vzorce III obsahuje vždy právě jednu terminální aminoskupinu, azidoskupinu nebo C2-C5 alkynyl, a to jako součást substituentu R1.
Sacharid v substituentu R1 je s výhodou monosacharid, výhodněji 1 -O-a-D-galaktopyranosyl nebo 2-O-a-sialyL
Substituované sacharidy se k polymernímu nosiči navazují azid-alkynovou cykloadicí, tzv. „click“ reakcí (za tvorby Línkem ze skupiny Y3 a ze substituentu R1 na substituovaném sacharidu obsahujícího terminální azidové nebo alkynylové skupiny). Cykloadiční reakce je s výhodou katalyzovaná, s výhodou měďnými ionty, nebo může být nekatalyzovaná. Reakce typicky probíhá ve vodě, případně ve směsných rozpouštědlech tvořených vodou, vodnými pufry, alkoholy,
-8CZ 309740 B6 aprotickým rozpouštědlem, s výhodou vybraným ze skupiny zahrnující dimethylsulfoxid, dimethylacetamid a dimethylformamid, případně jejich směsi. V případě cykloadiční reakce katalyzované mědí obsahuje reakční směs měďné či měďnaté kationty s výhodou díky přítomnosti CuSO4 nebo CuBr, a redukční činidlo, s výhodou kyselinu askorbovou nebo askorbát sodný. Ve všech případech je výhodné využít čištění pomocí gelové filtrace na koloně (např. s náplní Sephadex G-25) ve vodě a případně další čištění od kationtů mědi, s výhodou pomocí komplexace s 8-chinolinolem, a následného čištění na koloně (např. Sephadex LH-20) s methanolem jako mobilní fází.
Důležitým přínosem vynálezu je vhodná prezentace substituovaného sacharidu na polymerním nosiči, přičemž jeho obsah v glykopolymeru tvoří 0,5 až 25 % mol, s výhodou 3 až 18 % mol. Multivalentní uspořádání substituovaných sacharidů na polymerech umožňuje multivalentní interakci s Gal-3, a tím významně navyšuje vazebnou aktivitu ke Gal-3 a obecně ke galektinům.
Předmětem vynálezu je dále imunomodulační účinek polymerních konjugátů se substituovanými sacharidy díky vazbě ke Gal-3 výše popsanou multivalentní interakcí. Aplikací polymerních nosičů se sacharidy dochází k vyvázání extracelulárního Gal-3 v nádorové tkáni, a tím k inhibici Gal-3 indukované apoptózy T lymfocytů v nádoru, což umožní navýšení imunitní odpovědi proti nádorovým buňkám přímo v nádoru. Vazba polymerních nosičů s navázanými substituovanými sacharidy na Gal-3 přímo produkovaný nádorovými buňkami dále vede ke snížení migrace nádorových buněk. Vzhledem k tomu, že Gal-3 v některých typech nádorových buněk zvyšuje pravděpodobnost vzniku metastáz prostřednictvím inhibice vazby buněk k podkladu a buněk vzájemně mezi sebou, vede aplikace polymerních konjugátů se substituovanými sacharidy prostřednictvím vazby na Gal-3 ke snížení možnosti migrace buněk do metastatických ložisek a snížení jejich motility.
Předmětem vynálezu je farmaceutická kompozice, která se vyznačuje tím, že obsahuje glykopolymer podle vynálezu obsahující aktivní substituovaný sacharid a alespoň jednu farmaceuticky přijatelnou pomocnou látku vybranou ze skupiny zahrnující plniva, antiadheziva, pojiva, potahovací látky, barviva, bobtnadla, ochucovadla, maziva, konzervanty, sladidla, sorbenty.
Předmětem vynálezu je glykopolymer podle vynálezu a/nebo jeho farmaceutická kompozice pro použití jako léčivo k léčbě pevných nádorů a/nebo lymfomu a/nebo leukemie, zejména kolorektálního karcinomu, karcinomu prostaty, karcinomu prsu, melanomu, lymfomu, leukemie.
Předmětem vynálezu je rovněž glykopolymer podle vynálezu a/nebo jeho farmaceutická kompozice pro použití jako adjuvancium při protinádorové terapii.
Objasnění výkresů
Obr. 1: Inhibice galektinem-3 indukované apoptózy Jurkat buněk pomocí konjugátu P13a (obsah substituovaného sacharidu 9 byl 5,1 % mol).
Obr. 2: Inhibice galektinem-3 indukované apoptózy Jurkat buněk pomocí konjugátu P13b (obsah substituovaného sacharidu 9 byl 8,9 % mol).
Obr. 3: Inhibice galektinem-3 indukované apoptózy Jurkat buněk pomocí konjugátu HPMA s jednoduchým disacharidem LacdiNAc (obsah LacdiNAc byl 12,3 % mol.).
Seznam zkratek
ACVA, 4,4'-azobis(4-kyanopentanová kyselina); AIBN, 2'-azobis(2-methylpropionitril); Gal-3, galektin-3; HPMA, N-(2-hydroxypropyl)methakrylamid; MA-AP-TT, 3-(3
- 9 CZ 309740 B6 methakrylamidopropanoyl)thiazolidin-2-thion; MA-propynyl, 2-methyl-A-(prop-2-yn-1 -yl)prop2-enamid; 3-(3-methakrylamidopropanoyl)thiazolidin-2-thion; MA skupina, A-methakryloyl skupina; /Boc skupina, terc-butoxykarbonylová skupina; TT skupina, thiazolin-2-thionová skupina; TBAB, tetra-n-butylamoniumbromid; THPTA, trishydroxypropyltriazolylmethylaminový ligand; V70, 2,2'-azobis(4-methoxy-2,4dimethylpentannitril); LacdiNAc (GalNAc[14GlcNAc); LacNAc (Gaip4GlcNAc); laktosa (Gaip4Glc), 4T1 (buněčná linie myšího nádoru prsu); B16-F10 (buněčná linie myšího kožního melanomu); CT26 (buněčná linie myšího kolorektálního karcinomu); DLD-1 (buněčná linie lidského kolorektálního adenokarcinomu); HEK293 (linie lidských embryonálních buněk z ledvin); HT-29 (buněčná linie lidského kolorektálního adenokarcinomu); Jurkat (imortalizovaná buněčná linie T lymfocytů); LNCaP (buněčná linie lidského adenokarcinomu prostaty); OVCAR3 (buněčná linie lidského adenokarcinomu vaječníků); PC3 (buněčná linie lidského adenokarcinomu prostaty); Ráji (lidská buněčná linie Burkittova lymfomu); SU-DHL-5 (buněčná linie lidského B-lymfomu); SU-DHL-6 (buněčná linie lidského B-lymfomu);
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad 1: Syntéza monomerů
A-(2-hydroxypropyl)methakrylamid (HPMA)
HPMA byl připraven podle dříve popsaného postupu (Chytil P. et al. Eur. J. Pharm. Sci 2010, 41 (3-4), 473-482). Produkt byl chromatograficky čistý. Ή-NMR (300 MHz, (CD3)2SO, 296 K): δ 1,00-1,02 (d, 3H, CHOH-CH3), 1,85 (s, 3H, CH3), 3,00-3,12 (m, 2H, CH2), 3,64-3,73 (m, 1H, CH), 4,68-4,70 (d, 1H, OH), 5,30 a 5,66 (d, 2H, CH2=), 7,59 (br, 1H, NH).
A-Methakryloylpropynylamin (MA-propynylamin) byl připraven podle dříve popsaného postupu. (Lynn G.M. et al., Biomacromolecules, 2019, 20 (2), 854-870) Produkt byl chromatograficky čistý. Ή-NMR (300 MHz, (CD3)2SO, 296 K): δ 1,85 (s, 3H, CH3), 3,05 (s, 1H, =CH), 3,88 (d, 2H, -CH2-), 5,37 a 5,68 (d, 2H, =CH2), 8,37 (s, 1H, NH).
3-(3-Methakrylamidopropanoyl)thiazolidin-2-thion (MA-AP-TT)
MA-AP-TT byl připraven podle dříve popsaného postupu (Subr V. et al. Biomacromolecules 2006, 7 (1), 122-130). Produkt byl chromatograficky čistý. Ή-NMR (300 MHz, (CD3)2SO, 295 K): δ 1,20-1,27 (m, 2H, CH2-y), 1,40-1,54 (m, 4H, CH2-p, CH2-8), 1,82 (s, 3H, CH3), 2,28 (t, 2H, CH2a), 3,04-3,34 (m, 2H, CH2-s), 3,57 (s, 3H, OCH3), 5,28 a 5,60 (d, 2H, CH2=), 7,88 (br, 1H, NH).
Příklad 2: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-AP-Tl) radikálovou polymerací (Pl)
833 mg HPMA (5,82 mmol), 167 mg MA-AP-TT (0,646 mmol) a AIBN (160 mg; 0,974 mmol) byly rozpuštěny v 6,2 ml dimethylsulfoxidu. Polymerační směs byla probublána argonem a
- 10CZ 309740 B6 zatavena ve skleněné ampuli. Po 6 h ve vodní lázni termostatované na 60 °C byla ampule ochlazena a otevřena.
Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (150 ml) a přesrážen z methanolu (6 ml) do směsi aceton - diethylether (3:1; 120 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek 850 mg, 85 %; molární hmotnosti Mw = 23 900 g/mol, Mn = 12 100 g/mol, D = 1,98.
Příklad 3: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-AP-Tl) řízenou RAFT radikálovou polymerací (P2)
800 mg HPMA (5,59 mmol) bylo rozpuštěno v 5,52 ml fórc-butylalkoholu a smícháno s roztokem 160 mg MA-AP-TT (0,621 mmol), 4,97 mg AIBN (17,7 pmol) a 7,84 mg 2-kyanopropan-2-yl dithioáto (35,5 pmol) v 1,38 ml dimethylsulfoxidu. Polymerační směs byla probublána argonem a zatavena ve skleněné ampuli. Po 16 h ve vodní lázni termostatované na 70 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (150 ml) a přesrážen z methanolu (6 ml) do směsi aceton - diethylether (3:1; 120 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek 730 mg, 76 %; molární hmotnosti = 22 900 g/mol, Mn = 20 600 g/mol, £>= 1,11.
Příklad 4: Odstranění koncových skupin na polymeru pocházejících, z přenosového činidla
700 mg polymeru P2 nesoucího koncové dithiobenzoátové skupiny a 70 mg iniciátoru AIBN bylo rozpuštěno v 5 ml dimethylsulfoxidu, probubláno argonem a zataveno ve skleněné ampuli. Po 2 h ve vodní lázni termostatované na 80 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (150 ml) a přesrážen z methanolu (6 ml) do směsi aceton diethylether (3:1; 120 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek polymeru byl 621 mg.
Příklad 5: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-propynyt) řízenou RAFT radikálovou polymerací (P3)
264 mg HPMA (1,84 mmol) a 12 mg V-methakryloylpropynylaminu (MA-propynyl) (97,0 pmol) bylo rozpuštěno v 1,3 ml destilované vody a smícháno s roztokem 1,3 mg ACVA (4,7 pmol) a 2,6 mg 4-kyano-4-(thiobenzoylthio)pentanové kyseliny (9,5 pmol) v 0,65 ml dioxanu. Polymerační směs byla probublána argonem a zatavena ve skleněné ampuli. Po 7 h ve vodní lázni termostatované na 70 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (150 ml) a zcentrifugován. Čištění probíhalo gelovou filtrací s použitím kolony
- 11 CZ 309740 B6 s náplní Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl získán srážením do diethyletheru, filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek 127 mg, 46 %; molární hmotnosti = 22 900 g/mol, Mn = 20 600 g/mol, D= 1,11.
Příklad 6: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-AP-propynyt) korjugací propynylaminu s póly (PÍP MA-co-MA-AP-ΊΊ) (P4)
600 mg polymerního prekurzoru (obsahujícího 0,54 mmol TT skupin) bylo rozpuštěno v 6 ml dimethylformamidu a za míchání při pokojové teplotě bylo k roztoku přidáno 40 μΐ propynylaminu (0,65 mmol) a 108 pl V-ethyldiisopropylaminu (0,65 mmol). Reakce probíhala 16 h při pokojové teplotě. Polymer byl čištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (120 ml), filtrací a sušením. Výtěžek: 560 mg; molární hmotnosti: = 21 800 g/mol, Mn = 20 200 g/mol, D = 1,08.
Příklad 7: Syntéza hvězdicového kcpolymeru obsahující PAMAM dendrimerní jádro a ramena tvořená poly(HPMA)-propynylem (P5)
500 mg HPMA (3,49 mmol) bylo rozpuštěno v 3,4 ml /erc-butyl alkoholu a smícháno s roztokem 2,8 mg 2-[l-kyano-l-methyl-4-oxo-4-(2-thioxo-thiazolidin-3-yl)-butylazo]-2-methyl-5-oxo-5-(2thioxothiazolidin-3-yl)-pentannitrilu (5,4 pmol) a 4,4 mg 1-kyano-1-methyl-4-oxo-4-(2thioxothiazolidin-3-yl)butylesteru dithiobenzoové kyseliny (10,7 pmol) v 0,85 ml dimethylsulfoxidu. Polymerační směs byla probublána argonem a zatavena ve skleněné ampuli. Po
- 12 CZ 309740 B6 h ve vodní lázni termostate váné na 70 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (120 ml) a přesrážen z methanolu (6 ml) do směsi aceton - diethylether (3:1; 120 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek: 345 mg, 69 %; molární hmotnosti: = 29 800 g/mol, Mn = 27 100 g/mol, D = 1,10.
340 mg polymerního prekurzoru (obsahujícího 11,2 pmol terminálních TT skupin) bylo rozpuštěno v 2,2 ml dimethylsulfoxidu a přidáno k 20% hmotn. methanolovému roztoku 1,5 mg PAMAM dendrimeru (1,4 pmol dendrimeru G2 s diaminobutanovým jádrem). Po 1,5 h míchání při pokojové teplotě byla reakce zastavena přidáním 50 pL acetanhydridu. Polymer byl vyčištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (120 ml), následně filtrací a sušením. Výtěžek konjugační reakce byl 85 % hvězdicového kopolymeru.
100 mg hvězdicového polymerního prekurzoru bylo rozpuštěno v 1 ml methanolu. Do míchaného roztoku polymeru bylo přisypáno 10 mg práškového borohydridu sodného. Po 1 h míchání při pokojové teplotě bylo in situ přidáno 10 mg propynylmaleimidu rozpuštěného v 0,2 ml methanolu. Po 1 h reakce byl polymer čištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (25 ml), následovně filtrací a sušením. Molární hmotnosti: Mw = 210 000 g/mol, D = 1,19. Obdobným způsobem byly připraveny vzorky využívající jako jádro 2,2-bis(hydroxymethyl)propionový dendrimer.
Příklad 8: Syntéza hvězdicového kcpolymeru obsahující PAMAM dendrimerní jádro a ramena tvořená poly(HPMA)-TT (P6)
500 mg HPMA (3,49 mmol) bylo rozpuštěno v 3,4 ml terc-butylalkoholu a smícháno s roztokem 2,8 mg 2-[l-kyano-l-methyl-4-oxo-4-(2-thioxo-thiazolidin-3-yl)-butylazo]-2-methyl-5-oxo-5-(2thioxothiazolidin-3-yl)-pentannitril (5,4 pmol) a 4,4 mg 1-kyano-1-methyl-4-oxo-4-(2thioxothiazolidin-3-yl)butylesteru dithiobenzoové kyseliny (10,7 pmol) v 0,85 ml dimethylsulfoxidu. Polymerační směs byla probublána argonem a zatavena ve skleněné ampuli. Po 6 h ve vodní lázni termostate váné na 70 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (120 ml) a přesrážen z methanolu (6 ml) do směsi aceton - diethylether (3:1; 120 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Výtěžek: 345 mg, 69 %; Molární hmotnosti: M^ = 29 800 g/mol, Mn = 27 100 g/mol, D = 1,10.
- 13 CZ 309740 B6
340 mg polymerního prekurzoru (obsahujícího 11,2 pmol terminálních TT skupin) bylo rozpuštěno v 2,2 ml dimethylsulfoxidu a přidáno k 20% hmotn. methanolového roztoku 1,5 mg PAMAM dendrimeru (1,4 pmol dendrimer G2 s diaminobutanovým jádrem). Po 1,5 h míchání při pokojové teplotě byla reakce zastavena přidáním 50 pL acetanhydridu. Polymer byl čištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (120 ml), následován filtrací a sušením. Výtěžek konjugační reakce byl 85 % hvězdicového kcpolymeru.
100 mg hvězdicového polymerního prekurzoru a 10 mg 2-[l-kyano-l-methyl-4-oxo-4-(2-thioxothiazolidin-3-yl)-butylazo]-2-methyl-5-oxo-5-(2-thioxothiazolidin-3-yl)-pentannitrilu bylo rozpuštěno v 0,7 ml dimethylsulfoxidu, probubláno argonem a zataveno ve skleněné ampuli. Po 3 h ve vodní lázni termostatované na 70 °C byla ampule ochlazena a otevřena. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (25 ml) a přesrážen z methanolu (1 ml) do směsi aceton diethylether (3:1; 25 ml). Polymer byl získán filtrací a sušením pod vakuem. Molární hmotnosti:
= 205 000 g/mol, D = 1,20. Obdobným způsobem byly připraveny vzorky využívající jako jádro 2,2-bis(hydroxymethyl)propionový dendrimer.
Příklad 9: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-AP-azadibenzocyklookíyr) konjugací azadibenzocyklookíynaminu s poly(HPMA-co-MA-AP-Tl) (P7)
200 mg polymerního prekurzoru (obsahujícího 0,11 mmol TT skupin) bylo rozpuštěno v 2 ml dimethylformamidu a za míchání při pokojové teplotě bylo k roztoku přidáno 32 mg azadibenzocyklookíynaminu (0,12 mmol) rozpuštěného v 0,1 ml dimethylformamidu a 22 μΐ Nethyldiisopropylaminu (0,13 mmol). Reakce probíhala 16 h při pokojové teplotě. Polymer byl čištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (50 ml), následován filtrací a sušením. Výtěžek: 184 mg; Molární hmotnosti: = 28 000 g/mol, Mn = 25 200 g/mol, D = 1.11.
Příklad 10: Syntéza statistického kcpolymeru poly(HPMA-co-MA-AP-propylazia) konjugací 3azido-l-propylaminu spoly(HPMA-co-MA-AP-Tl) (P8)
-14 CZ 309740 B6
300 mg polymerního prekurzoru P2 bylo rozpuštěno v 3,5 ml methanolu a za míchání při teplotě místnosti přidáno 40 pl 3-azido-l-propylaminu (0,40 mmol). Po 30 min bylo do reakční směsi přikapáno pomalu 92 μΐ V-ethyldiisopropylaminu (0,53 mmol). Po 20 h reakce při teplotě místnosti bylo přidáno 40 μΐ 1-aminopropan-2-olu (0,29 mmol) a mícháno dalších 30 min. Polymer byl čištěn od nízkomolekulárních příměsí gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Polymer byl izolován srážením do nadbytku acetonu (50 ml), následován filtrací a sušením. Výtěžek: 234 mg; Molární hmotnosti: = 23 700 g/mol, Mn = 21 100 g/mol, D = 1.1; obsah azidových skupin 16,7 % mol.
Příklad 11: Syntéza 3'-O-[4-(azidomethyl)benzyl]-b-D-galaktopyranosyl-(l—>l)-3-O-(4-{[4(brommethyl)-1 //-1,2,3-triazol-1 -yl]methyl}benzyl)-1 -thio- b-D-galaktopyranosidu (3)
Výchozí látka 3-D-galaktopyranosyl)-(l—>l)-l-thio-3-D-galaktopyranosid (1) reagovala v přítomnosti dibutylcínoxidu (Bu2SnO) s nadbytkem bromidu za vzniku selektivně C-3, C-3’ disubstituované sloučeniny 2. Reakce probíhala v přítomnosti katalyzátoru fázového transferu tetra-n-butylamoniumbromidu (TBAB) v suchém dioxanu za zvýšené teploty (82 až 84 °C). Následně byla pomocí cykloadiční click reakce terminální azidové funkční skupiny a alkynové skupiny propynylbromidu (0,5 eq.) za katalýzy Cu(I) v přítomnosti trishydroxypropyltriazolylmethylaminového ligandu (THPTA) připravena sloučenina 3.
Příklad 12: Syntéza 3-O-propynyl-3-D-galaktopyranosyl-(l—>l)-3-O-[(4-bromfenyl)-l//-(l,2,3triazol-4-yl)methyl]-3-D-galaktopyranosidu (9)
- 15 CZ 309740 B6
OH
CuSOi
L-askorbát sodný
THPTA p-azldophenyibromld t-butylalkohol/HzO (1/1)
24-0, 2-4Π
Br
Výchozí látka p-D-galaktopyranosyl)-( 1 —>l)-l-//?zo-p-D-galaktopyranosid (1) reagovala v 5 přítomnosti cínového komplexu (Bu2SnO) s nadbytkem propynylbromidu za vzniku selektivně C-
3, C-3’ disubstituované sloučeniny 8. Reakce probíhala v přítomnosti katalyzátoru fázového transferu (TBAB) v suchém dioxanu za zvýšené teploty (82 až 94 °C). Druhý reakční krok založený na Cu(I)-katalýzováné azid-alkynové cykloadici 4-bromfenylazidu za katalýzy THPTA byl proveden ve směsi fórc-butylalkoholu a vody za vzniku sloučeniny 9.
Příklad 13: Syntéza konjugátu substituovaného sacharidu 3 spoly(HPMA-co-MA-AP-prcpynyQem (P10)
- 16CZ 309740 B6
Ke 2 mg CUSO45H2O (16 pmol) rozpuštěným v 25 μΐ vody bylo přidáno k roztoku 25 mg j>o/y(HPMA-co-MA-AP-propynylu), P4, (17,4 pmol propynylových skupin), 1,6 mg askorbátu 5 sodného (16,2 pmol) a 12,9 mg sloučeniny 3 (16,2 pmol) rozpuštěných v 225 pl vody. Reakční směs byla probublána argonem před a po přídavku síranu měďnatého a míchána 1 h při pokojové teplotě. Poté byl roztok naředěn 1 ml 5% roztoku disodné soli ethylendiamintetraoctové kyseliny, polymerní konjugát byl přečištěn gelovou filtrací na koloně Sephadex G-25 ve vodě a lyofilizován. Konjugát byl rozpuštěn ve 2 ml methanolu a přidán nadbytek 8-chinolinolu. Po 20 min byl vzorek 10 čištěn od zbytkové mědi gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Po odpaření rozpouštědla byl polymer rozpuštěn ve vodě a lyofilizován. Výtěžek: 29,4 mg; 84,0 %; Molární hmotnosti: = 27 500 g/mol, Mn = 25 200 g/mol, D = 1,09; Obsah cukerné složky v konjugátu byl 9,8 % mol.
Příklad 14: Syntéza koijugátu substituovaného sacharidu 9 s poly(HPMA-co-MA-APpropylazidem) (PÍ 3)
-17CZ 309740 B6
Br
Polymerní konjugát P13 byl připraven s různým obsahem cukerné složky. 15 mg polymerního prekurzoru P8 bylo rozpuštěno v 150 μΐ dimethylformamidu a smícháno s 3,54 mg (5,6 pmol), nebo 6,3 mg (9,9 pmol) substituovaného sacharidu 9 v 300 dimethylformamidu pro přípravu P13a, či P13b, resp. Poté bylo přidáno 0,88 mg (6,2 pmol), nebo 2,42 mg (12,9 pmol) CuBr v případě P13a, či P13b, resp., a mícháno při teplotě místnosti Po 20 h byl přidán nadbytek 8-chinolinolu, roztok byl míchán dalších 30 min a naředěn 2 ml methanolu. Polymerní konjugát byl přečištěn gelovou filtrací na koloně Sephadex LH-20 v methanolu. Frakce obsahující polymer byla odpařena, produkt rozpuštěn ve vodě a lyofilizován. P13a: Výtěžek: 15,3 mg; molární hmotnosti:
= 28 600 g/mol, Mn = 25 900 g/mol, £>=1,1; obsah cukerné složky v konjugátu byl 4,5 % mol. P13b: Výtěžek: 17,4 mg; molární hmotnosti: = 30 600 g/mol, Mn = 28 100 g/mol, D = 1,1; obsah cukerné složky v konjugátu byl 8,9 % mol.
Příklad 15: Přiklad charakterizace polymernich prekurzoru a kor,jugátů
Připravené kopolymery, polymerní prekurzory i jejich konjugáty se substituovanými sacharidy byly charakterizovány stanovením váhového i početního průměru molárních hmotností (Mw, Mk) a příslušného indexu disperzity (£>) pomocí gelové permeační chromatografie (GPC) na systému vybaveném UV detektorem (Shimadzu, Japan), RI detektorem (Optilab REX, Wyatt Technology Corp., USA) a víceúhlovým detektorem rozptylu světla (DAWN Heleos-II, Wyatt Technology Corp., USA). Pro charakterizaci byla v případě SEC použita kolona TSK 3000 Super SW a jako mobilní fáze směs MeOH (80 %) a 0,3 M octanového pufru o pH 6,5 (20 %). Koncentrace vzorků byla ve všech případech 3 mg/ml.
Obsah TT skupin byl stanoven spektra fotometricky na UV-VIS spektrofotometru Specord 205 (Analytik Jena, Německo) v methanolu (£305 = 10 800 L.mol '.cm1) podle literatury (Subr V. et al. Biomacromolecules 2006, 7 (1), 122-130).
Obsah trojných vazeb a konjugovaných substituovaných sacharidů byl stanoven pomocí nukleární magnetické rezonance (NMR) na spektrometru Bruker Avance III 600 MHz ve vodě.
- 18 CZ 309740 B6
Příklad 16: ELISA
Afinita Gal-3 k substituovaným sacharidům a jejich konjugátům s polymery byla stanovena za použití kompetitivního ELISA stanovení (Bojarová P. et al. J Nanobiotechnol. 2018, 16, 73; Bumba L. et al. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 372). Toto stanovení dává předběžnou informaci o síle vazby Gal-3 na glykokopolymery, ale je třeba jej brát pouze jako orientační pomůcku a vzít v úvahu zvláště biologický účinek glykopolymerů (viz příklady 25-27). V jamkách mikrotitračních destičkových modulů F16 Maxisorp NUNC-Immuno Modules (Thermo Scientific, Roskilde, Dánsko) byl imobilizován přes noc asialofetuin (Sigma Aldrich, Steinheim, Německo; 0,1 μm v PBS pufru, 50 μl, 5 pmol na jamku). Jamky byly následně vyblokovány BSA (2 % w/v) rozpuštěném v PBS (1 h, teplota místnosti). Posléze byla do jamek přidána směs testované sloučeniny v různých koncentracích a Gal-3 (celkový objem 50 μl; 4.5 μm finální koncentrace Gal3) a inkubovány po dobu 2 hodin. Detekce navázaného Gal-3 byla provedena pomocí monoklonální anti-His6-IgG1 myší protilátky konjugované s křenovou peroxidasou (Roche Diagnostics, Mannheim, Německo) rozpuštěné v PBS pufru (1:1000, 50 μl, 1 h, teplota místnosti). Substrátový roztok TMB One (Kem-En-Tec, Taastrup, Dánsko) byl použit k zahájení kolorimetrické reakce konjugované peroxidasy. Tato reakce byla zastavena přídavkem 3 M HCl (50 μl). Vazebný signál navázaného Gal-3 byl stanoven spektrofotometricky při 450 nm (Spectra Max Plus, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). Získané výsledky byly analyzovány za použití softwaru Prism 7.0 (GraphPad, USA) a byly vyhodnoceny jako IC50.
Tabulka 2. Inhibiční potenciál vybraných sloučenin a konjugátů (IC50) stanovený metodou ELISA
| Název konjugátu | Obsah cukerné složky [mol%]* | IC50 na glykan [ μM] | IC50 glykopolymeru [μMl |
| Laktosa | - | 132 | - |
| Substituovaný sacharid 9 | - | 16 | - |
| Glykopolymer P13a | 4,5 | 28 | 4,2 |
| Glykopolymer P13b | 8,9 | 6,9 | 0,62 |
*Obsah substituovaných sacharidů byl stanoven pomocí 1H-NMR.
1 Převzato z literatury (Bocker S. et al. Biomolecules 2015, 5, 1671-1696)
Příklad 17: Kvantfikace produkce Gal-3 u vybraných nádorových linií.
| Buněčná linie | Detekce Gal-3 s využitím průtokové cytometrie | Exprese Gal-3 detekovaná pomocí metody Western blot | |
| Lokalizace na membráně | Lokalizace na membráně | Intracelulární | |
| 4T1 | Netestováno | + | ++ |
| B16-F10 | Netestováno | + | ++ |
| CT26 | Netestováno | - | ++ |
| DLD-1 | ++ | + | ++ |
| HEK293 | ++ | + | ++ |
| HT-29 | + | Netestováno | Netestováno |
| Jurkat | Netestováno | - | - |
| LNCaP | - | - | - |
- 19 CZ 309740 B6
| OVCAR3 | ++ | + | ++ |
| PC3 | + | + | ++ |
| Raji | - | Netestováno | Netestováno |
| SU-DHL5 | - | - | - |
| SU-DHL6 | + | Netestováno | Netestováno |
Vysvětlivky: Míra exprese Gal-3 - „-“ = nedetekovatelná, „+“ = výrazná, „++“ = silně výrazná.
Příklad 18: Inhibice galektinem-3 indukované apoptózy lidských T buněk pomocí glykopolymerů
Schopnost glykopolymerů účinně inhibovat apoptózu indukovanou Gal-3 byla prokázána prostřednictvím annexin Npropidiumjodid apoptotického testu průtokovou cytometrií. Experimenty byly provedeny na imortalizované buněčné linii lidských T lymfocytů Jurkat. Bylo prokázáno, že lidský Gal-3 produkovaný nádorovými buňkami do okolního prostředí indukuje u této linie apoptózu.
V pokusech in vitro byly Jurkat buňky preinkubovány s různými koncentracemi glykopolymerů P13 (0,1; 1; 5; 10 a 50 μM) po dobu 5 minut a poté k nim byl přidán 10 μM Gal-3. Glykopolymery vyvazovaly volný Gal-3 z roztoku (okolí buněk), a ten tak nemohl indukovat apoptózu Jurkat buněk. Účinnost inhibice Gal-3 glykopolymery byla stanovena jako míra apoptózy buněk. Pro kontrolní experiment byl využit čistý HPMA polymer bez substituovaných sacharidů.
Glykopolymery inhibovaly apoptózu indukovanou Gal-3. Čistý HPMA polymer bez substituovaných sacharidů vykazoval mírný protektivní účinek, a to v 50 pM koncentraci. Glykopolymer P13 prokázal vysoký inhibiční efekt (viz obr. 1 a 2).
Příklad 19 (srovnávací): Inhibice galektinem-3 indukované apoptózy lidských T buněk (Jurkat) pomocí glykopolymeru nesoucího jednoduchý disacharid LacdiNAc
Tabulka 4. Charakteristika srovnávacího glykopolymeru nesoucího jednoduchý disacharid LacdiNAc
| Název konjugátu | Obsah cukerné složky (mol%)* | Mw (g/mol)t | Mn (g/mol)t | D t | IC50 na glykan [ μM] | IC50 na glykopolymer [ μM] |
| LacdiNAcHPMA | 12,3 | 30100 | 28000 | 1,07 | 38,5 | 2,3 |
*Obsah sacharidu byl stanoven pomocí 1H-NMR.
tMolární hmotnosti a disperzita byly stanoveny pomocí GPC, jak je uvedeno v příkladu 21.
Obr. 3 znázorňuje inhibici galektinem-3 indukované apoptózy Jurkat buněk pomocí konjugátu HPMA polymeru s jednoduchým disacharidem LacdiNAc (obsah LacdiNAc byl 12,3 % mol., viz tabulka 4). S analogickým konjugátem s obsahem 8,4 % mol. LacdiNAc byly dosaženy stejné výsledky. Jedná se o totožný disacharid jako v publikaci (Bojarová P. et al. J. Nanobiotechnol. 2018, 16, 73). Je evidentní, že v buněčných testech vykázal tento konjugát výrazně nižší schopnost inhibovat apoptózu Jurkat buněk než konjugáty se substituovanými disacharidy, které jsou předmětem vynálezu.
Claims (6)
1. Glykopolymer sestávající z HPMA polymerů s obsahem od 0,5 do 25 % mol.
- strukturních jednotek vzorce I:
Linker
Substituovaný sacharid (I), kde
Y1 je vybrán ze skupiny tvořené alkylenem majícím 1 až 8 atomů uhlíku;
Y2 je vybrán ze skupiny zahrnující karbamoyl, karbamoyl-(Cl-C8-alkylen), přičemž karbamoylem se rozumí skupina -C(=O)-NH- i skupina -NH-C(=O)-;
Linker je vybrán ze skupiny zahrnující 1,2,3-triazolylen, (Cl alkyl)-l,2,3-triazolylen;
Substituovaný sacharid je substituovaný sacharid obecného vzorce lila;
a popřípadě
- koncových skupin o vzorci -S-sukcinimid-(CH2)r-Linker-Substituovaný sacharid nebo C(CN)(CH3)-(C1-C4 alkylenj-Linker-Substituovaný sacharid; kde r je vybráno ze skupiny zahrnující 1, 2 a 3, a Linker a Substituovaný sacharid jsou definovány výše;
přičemž substituovaný sacharid obecného vzorce lila je
(lila), a kde
R11 je vybrán ze skupiny obsahující C1-C3 alkyl s vazbou k Linkeru, a fenyl-(Cl-C3)alkyl s vazbou k Linkeru;
-21 CZ 309740 B6
X je [l,2,3]-triazol nebo vazba,
Y je CH2,
Z je O,
R1 je vybrán ze skupiny obsahující fenyl, fenyl substituovaný alespoň jedním halogenem, fenyl substituovaný alespoň jednou nitroskupinou, fenyl substituovaný alespoň jedním halogen(ClC5)alkyltriazolylem, fenyl substituovaný alespoň jednou kyanoskupinou;
R2 je hydroxyskupina,
R4 je hydroxyskupina,
R5 a R6 jsou vodíky;
přičemž glykopolymer popřípadě dále obsahuje větvící jednotky vybrané ze skupiny zahrnující amidoaminové jednotky nebo 2,2-bis(hydroxymethyl)propionové jednotky.
2. Glykopolymer podle nároku 1, který dále obsahuje 0,5 až 12 % mol. strukturních jednotek s obecným vzorcem odpovídajícím obecnému vzorci I, kde Y1 a Y2 jsou jak je definováno v nároku 1, ale struktura -Linker-Substisacharid je nahrazena substituentem vybraným ze skupiny tvořené karbonyl-hydrazono-(C12-C18 alkanonem), karbonyl-hydrazono-5a-cholestanonem, karbonyl-hydrazono-cholest-4-en-3-onem; karbonyl-(C9-C15 alkoxy), karbonyl-cholesterylem, karbonyl-7-dehydrocholesterylem; karboxamido-(C10-C18 alkylem), karbohydrazido-(C10-C18 alkylem), karboxamido-(C10-C18 alkenylem) a karbohydrazido-(C10-C18 alkenylem), obsahujícím aspoň jednu dvojnou vazbu C=C.
3. Glykopolymer podle nároku 1, kde strukturní jednotka vzorce I je:
,nebo
-22CZ 309740 B6
4. Glykopolymer podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako léčivo, adjuvans nebo imunomodulant
5
5. Glykopolymer podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití pro léčbu pevných nádorů, lymfomu nebo leukemie; nebo pro použití pro inhibici migrace nádorových buněk a potlačení metastatického rozsevu nádorových onemocnění; nebo pro použití pro inhibici indukce apoptózy u buněk imunitního systému v nádoru.
6 . Farmaceutická kompozice, vyznačená tím, že obsahuje glykopolymer podle kteréhokoliv 10 z nároků 1 až 3 a alespoň jednu farmaceuticky přijatelnou pomocnou látku vybranou ze skupiny zahrnující plniva, antiadheziva, pojivá, potahovací látky, barviva, bobtnadla, ochucovadla, maziva, konzervanty, sladidla, sorbenty.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2020-132A CZ309740B6 (cs) | 2019-09-09 | 2019-09-09 | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo |
| PCT/CZ2020/050067 WO2021047699A1 (en) | 2019-09-09 | 2020-09-09 | Glycopolymer, method of preparation thereof, use thereof as medicament |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2020-132A CZ309740B6 (cs) | 2019-09-09 | 2019-09-09 | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2020132A3 CZ2020132A3 (cs) | 2021-05-05 |
| CZ309740B6 true CZ309740B6 (cs) | 2023-09-06 |
Family
ID=75686126
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2020-132A CZ309740B6 (cs) | 2019-09-09 | 2019-09-09 | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ309740B6 (cs) |
-
2019
- 2019-09-09 CZ CZ2020-132A patent/CZ309740B6/cs unknown
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| "Biocompatible glyconanomaterials based on HPMA-copolymer for specific targeting of galectin-3" Journal of Nanobiotechnology (2018) 16:73, https://doi.org/10.1186/s12951-018-0399-1 * |
| "Dual thio-digalactoside-binding modes of human galectins as the structural basis for the design of potent and selective inhibitors" Scientific Reports 6, 29457 (2016) https://doi.org/10.1038/srep29457 * |
| "Extracellular and intracellular small-molecule galectin-3 inhibitors" Scientific Reports 9, 2186 (2019) https://doi.org/10.1038/s41598-019-38497-8 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2020132A3 (cs) | 2021-05-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Suriano et al. | Synthesis of a family of amphiphilic glycopolymers via controlled ring-opening polymerization of functionalized cyclic carbonates and their application in drug delivery | |
| JP6223824B2 (ja) | 新規な自己反応性アーム及び同物を含むプロドラッグ | |
| US7041818B2 (en) | DDS compound and method for measurement thereof | |
| US20090104143A1 (en) | Hyaluronic acid containing bioconjugates: targeted delivery of anti-cancer drugs to cancer cells | |
| EP2531221B1 (en) | Polyanionic multivalent macromolecules for intracellular targeting of proliferation and protein synthesis | |
| JP2000506899A (ja) | ドキソルビシン耐性腫瘍に対する高活性を有するビス―アントラサイクリン | |
| Cheng et al. | Construction and evaluation of PAMAM–DOX conjugates with superior tumor recognition and intracellular acid-triggered drug release properties | |
| CA2487720A1 (en) | Therapeutic agent-containing polymeric nanoarticles | |
| Arslan et al. | A modular and orthogonally reactive platform for fabrication of polymer–drug conjugates for targeted delivery | |
| Bayram et al. | HER2‐Targeted, Degradable Core Cross‐Linked Micelles for Specific and Dual pH‐Sensitive DOX Release | |
| Sahoo et al. | Multifunctional alternating “Bitter-Sweet” macromolecular architecture | |
| CA3082835A1 (fr) | Prodrogues polymeres et leur administration sous-cutanee et/ou intramusculaire | |
| Sedlar et al. | Glycopolymer Inhibitors of Galectin-3 Suppress the Markers of Tissue Remodeling in Pulmonary Hypertension | |
| CZ309740B6 (cs) | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo | |
| US20230293432A1 (en) | Polymeric micelles comprising glucuronide-prodrugs | |
| CZ309738B6 (cs) | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo | |
| CZ309634B6 (cs) | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo | |
| WO2003094929A2 (en) | Preblocking with non-ha gags increases effectiveness of ha conjugated anticancer agents | |
| CZ2020137A3 (cs) | Glykopolymer, způsob jeho přípravy a jeho použití jako léčivo | |
| WO2021047699A1 (en) | Glycopolymer, method of preparation thereof, use thereof as medicament | |
| US20050129769A1 (en) | Polymeric articles for carrying therapeutic agents | |
| Zhukova et al. | Preparation of a Doxorubicin Conjugate with (Co) Polymers of Methacrylic acid for Targeted Tumor Therapy | |
| JP7749247B2 (ja) | 癌治療のための標的化アントラサイクリン送達システム | |
| Etrych et al. | Micellar and Antibody‐Targeted Polymer Therapeutics | |
| Šťastná | Polymeric nanomaterials for targeted inhibition of tumor growth |