CZ20011947A3 - Orální vakcína proti diarea - Google Patents
Orální vakcína proti diarea Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20011947A3 CZ20011947A3 CZ20011947A CZ20011947A CZ20011947A3 CZ 20011947 A3 CZ20011947 A3 CZ 20011947A3 CZ 20011947 A CZ20011947 A CZ 20011947A CZ 20011947 A CZ20011947 A CZ 20011947A CZ 20011947 A3 CZ20011947 A3 CZ 20011947A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cfa
- defined amount
- vaccine
- ctb
- etec
- Prior art date
Links
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 title claims abstract description 21
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 12
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 32
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 22
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 claims abstract description 15
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 claims abstract description 15
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 14
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 14
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 13
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 7
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims 1
- 101710121697 Heat-stable enterotoxin Proteins 0.000 abstract description 4
- 108010001506 colonization factor antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 12
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 12
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 12
- 229960005004 cholera vaccine Drugs 0.000 description 11
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241001076388 Fimbria Species 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 241001428800 Cell fusing agent virus Species 0.000 description 2
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 2
- 206010012742 Diarrhoea infectious Diseases 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 206010060891 General symptom Diseases 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC1=CC=CC=C1N RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940023064 escherichia coli Drugs 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 1
- 238000001558 permutation test Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0258—Escherichia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55544—Bacterial toxins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Orální kompozitní vakcína proti enterotoxigenní E.coli způsobující diarea-průjmové infekční onemocnění u lidí, obsahující definované množství nejméně tří různých typů antigenů a kolonizaěním faktorem (CFA) v množství 100 až 300 pg od každého z druhů vybraných ze skupiny CFA I, CFA II (CS1, CS2 a CS3) a CFA IV (CS4, CS5 a CS6) na usmrcených bakteriích E.coli s chybějícím genem kódujícím teplotně labilní (LT) enterotoxin spolu s definovaným množstvím B-subjednotky chlolerového toxinu (CTB) a prostředek, jako například PBS, kterým je kompozitní vakcína očištěna od případného teplotně stabilního enterotoxinu (ST).
Orální vakcína proti diarea
Oblast techniky
Vynález se týká orální vakcíny proti diarea. Konkrétně se týká orální kompozitní vakcíny proti enterotoxigenním bakteriím E.coli způsobujícím diarea - infekčním průjmové onemocnění u lidí.
Dosavadní stav, techniky
Bakterie a viry často produkují na své membráně nebo uvnitř membrány proteiny, které v určitém prostředí podporující specifická spojení organismů nebo jejich přilnutí k povrchu. Tento povrch může tvořit vnitřní stěna střevního trávícího traktu, jícnu nebo jiný biologický povrch nebo membrána lidského nebo zvířecího těla, kde organismus může najít optimální prostředí pro růst. Membránové mikrobiální proteiny tohoto druhu se často nazývají antigeny s kolonizačním faktorem (dále uváděné jako CFA) nebo fimbrie. V literatuře jsou používány pro stejný druh látek i jiné termíny, jako například pili (vlásečnice) hemaglutininy, vláknité či fibrilární proteiny. Z důvodů jednotnosti bude dále pro všechny druhy membránových proteinů, které mohou mít rovněž antigenní charakter, používána zkratka CFA. U většiny organismů je produkce jejich CFA řízena různými faktory přítomnými v okolním prostředí, které na druhé straně mohou aktivovat regulační geny v plasmidu DNA.
Řada bakterií, které budí zájem lékařské veřejnosti se projevuje produkcí antigenů CFA ve spojitosti s jejich membránami. Z těch, které jsou pro člověka nejdůležitější je třeba jmenovat organismy, které kolonizují v lidském trávícím traktu a dýchacích cestách. Jako příklad organismů, které kolonizují ve střevním trávícím traktu lze uvést enterotoxigenní Escherichia coli, Vibrio cholerae, Helicobacter pylori, Campylobacter, Shigellae, Salmonellae a Yersinia.
Zvláštní pozornost z lékařského hlediska zasluhuje enterotoxigenní Escherichia coli (dále uváděná jako ETEC ), protože je jednou z hlavních příčin průjmových onemocnění cestujících subjektů a průjmových onemocnění dětí v rozvojových zemích a má na svědomí více jak 1 miliardu průjmových onemocnění a nejméně jeden milion úmrtí ročně, především z řad dětí.
Enterotoxigenní E. coli se vyznačují tím, že produkují teplotně labilní enterotoxin (LT) a /nebo teplotně stabilní enterotoxin (ST).
’?·· ' • · · · ······ • · · ······· • · · ·· · · ···· ♦ ·· « · · · ·· ·· ··· · · · · > φφ
V mezinárodní přihlášce WO 92/14487 je popsán způsob výroby a užití orální vakcíny ETEC. Bakterie ETEC s antigeny CFA a jejich subkomponenty (dále antigeny CS ) se kultivují za specifických podmínek Následně formalinem umrtvené bakterie lze pak použít jako orální vakcínu proti bakteriím ETEC. Antigeny CFA a CS pak působí jako antigeny při imunologickém procesu, který nastává ve střevě.
Vyskytly se však problémy s řízenou produkcí bakterií ETEC disponujícími antigeny CFA a řešení těchto problémů bylo popsáno v mezinárodní patentové přihlášce WO 95 /33825.
Bylo prokázáno, že receptury vakcín ETEC obsahující B-subjednotku cholerového toxinu, který je z hlediska antigenu podobný teplotně labilnímu enterotoxinu bakterie ETEC a dále antigeny kolonizačního faktoru ETEC, stimulují příslušné imunitní reakce sliznice jak bylo prokázáno u švédských dobrovolníků ( Jertborh M., et al, Vaccine, 1997; 16:255-260).
Úkolem vynálezu je vytvořit bezpečný výrobek účinné kompozitní vakcíny, která není infekční a obsahuje definované množství aktivních přísad, které bude stejné ve všech šaržích.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu, který řeší výše uvedenou úlohu je orální kompozitní vakcína proti enterotoxigenní E.coli způsobující diarea u lidí, obsahující definované množství nejméně tří různých typů antigenů s kolonizačním faktorem (CFA) vybraných ze skupiny CFA I, CFA II ( CS 1, CS2 a CS3 ) a CFA IV (CS4, CS5 a CS6) na usmrcených bakteriích E.coli s chybějícím genem kódujícím teplotně labilní enterotoxin (LT) spolu s definovaným množstvím B-subjednotky cholerového toxinu (CTB ) a prostředek, kterým je kompozitní vakcína očištěna od možného teplotně stabilního enterotoxinu (ST).
Nová kompozitní vakcína podle vynálezu je tedy založená na usmrcených enterotoxigenních bakteriích E.coli s negativním teplotně labilním enterotoxinem LT obsahující definované množství alespoň tří typů antigenů s kolonizačním faktorem a dále Bsubjednotku cholerového toxinu (CTB), který je z hlediska antigenu podobný teplotně labilnímu enterotoxinu ETEC. Kromě toho je kompozitní vakcína zbavena případného teplotně stabilního exterotoxinu (ST).
LT negativní bakterie ETEC jsou buď laboratorně vybrány z přírodních geneticky modifikovaných kmenů, nebo jsou připraveny rekombinační technikou.
Případně přítomný teplotně stabilní enterotoxin, kterým je relativně malý protein s 19 zbytky aminokyselin se vypere v probíhajícím procesu přípravy kompozitní vakcíny.
Eliminace schopnosti bakterií produkovat teplotně labilní enterotoxin a zabránění možné přítomnosti tepelně stabilního enterotoxinu zvyšuje bezpečnost výrobku.
Usmrcování bakterií by mělo probíhat takovým způsobem, aby antigeny s kolonizačním faktorem byly v podstatě zachovány, například tak, že budou šetrně inaktivovány formalinem.
V konkrétním provedení orální vakcíny podle vynálezu činí definované množství různých typů CFA pro každý typ CFA nejméně 100 pg a definované množství CTB činí nejméně 0,5 mg a jako čistící prostředek je použit fyziologicky přijatelný pufr.
Přednostně pak činí definované množství různých typů CFA pro každý typ CFA 100 až 300 pg a definované množství CTB 0,5 až 2,0 mg.
Jako nejvýhodnější se pak jeví definované množství různých typů CFA ve složení 200 pg CFA /1, 200 pg CS1, 150 pg CS2, 200 pg CS4 a 150 pg CS5 a 1,0 mg CTB a jako fyziologicky přijatelný pufr je použit fosfátem pufrovaný solný roztok.
Jedna šarže kompozitní vakcíny obsahuje přibližně 1011 bakterií.
Kompozitní vakcína se podává osobám ve formě nápoje ve sklenici vody obsahující uhličitanový pufr, například hydrouhličitan sodný.
Příklady .. provedení, vynálezu
Určení množství různých antigenů s kolonizačním faktorem:
Fibriální antigeny E.coli jsou detekovány pomocí enzymatické inhibice ELISA ( test s enzymově vázaným imunosorbentem ) popsané v Lopez-Vídal Y., et al v Journal of Clinical Microbiology, vol. 26, 1967-1972 (1988). Stručně řečeno, bakteriální vzorek k analýze je inkubován spolu s pevně daným množstvím monoklonní protilátky působící proti CFA. Po inkubaci se směs přenese na položku, na kterou byla předtím nanesena CFA, přičemž residuální monoklonní protilátka se může vázat na CFA. Vázaná protilátka se zviditelní přidáním anti-myšího imunoglobulinu konjugovaného s křenovou peroxidázou. Jako substrát se použije o-fenylendiamindihydrochlorid v citrátovém pufru. Optická hustota se měří při 450 nm na spektrofotometru napojeném na počítač vybavený programem pro redukci dat. Sledovaná optická hustota je v obráceném poměru ke koncentraci protilátky ve vzorku.
Receptura kompozitní vakcíny:
Šarže orální vakcíny ETEC podle receptu odvozená od monovalentní fáze formalinem usmrcených CFA/I SBL kmene 101, CS1 SBL kmene 106, CS2 SBL kmene 107, CS4 SBL, kmene 104, CS5 SBL kmene 105, a monovalentní fáze purifikované rCTB.
Složení:
| Názvy přísad | Jednotka ...... fimbrie | Funkce | |
| í. | Monovalentní fáze: E.coli, CFA/I SBL-101, | ||
| usmrcená formalinem | |||
| 2. | Monovalentní fáze: E.coli, CFA/I SBL-106, usmrcená formalinem | 2,0xl02pg fimbrie | K vyvolání |
| 3. | Monovalentní fáze: E.coli, CS2 SBL-107 | 1,5 x 102 pg | imunní reakce |
| usmrcená formalinem | fimbrie | proti bakteriím ETEC | |
| 4. | Monovalentní fáze: E.coli, CFA/I SBL-104, usmrcená formalinem | 2,0 x 102 gg fimbrie | |
| 5. | Monovalentní fáze: E.coli, CFA/I SBL-105, usmrcená formalinem | 1,5 x 102 gg fimbrie | |
| 6. | Monovalentní fáze: rCTB, purifikovaná | 1,0 mg | |
| Prostředek: | q.s. ad 6,0 ml. | pufr |
7. Pufer PBS (WHO), pH 7.2-7,4
Kmeny SBL-104 a SBL-105 produkovaly rovněž CS 6, avšak jeho množství nebylo stanoveno. Kmen SBL-107 produkoval také CS3, avšak jeho množství nebylo stanoveno.
Pilotní studie vyhodnocení účinnosti a reaktogennosti orální celobuněčné vakcíny podle vynálezu působící proti diarea u cestujících subjektů s usmrcenými bakteriemi ETEC, a Bsubjednotkou:
Ve zdvojené slepé, pilotní studii s nahodilým výběrem, s referenčně kontrolním podáváním placeba byly zkoumány tři skupiny cestujících z Austrálie. Kromě vakcíny ETC byla rovněž podávána ústní celobuněčná cholerová vakcína z B-subjednotky, protože již dříve bylo prokázáno, a to jak u cestujících z Bangladéše ( Clemens J., et al, J Infect Dis, 1988, 158:372377) tak u cestujících z Finska ( Peltola H., et al, Lancet, 1991, 338:1285-89 ), že poskytuje významnou ochranu proti diarea způsobené E.coli LT.
Do studie bylo zahrnuto celkem 250 dobrovolníků, dospělých a dětí, kteří podnikli cesty do tropických a subtropických oblastí ( 44 různých zemí v Africe, Asii a Latinské Americe) s délkou pobytu od 7 do 23 dní. Dvanáct z nich bylo odvoláno v důsledku porušení protokolu, takže záměr zkoumat účinky na populaci byl uskutečněn u 238 osob podle protokolu, čímž byly splněny všechny požadavky, podle kterých bylo třeba provést test na 187 cestujících. Dvě po sobě následující dávky vakcíny nebo placeba byly podávány v
· • · · · • · · • 4 •r *· •9 • · ·« intervalech 7-21 dnů, v době nejméně 7 dní a maximálně 30 dní před odjezdem. Post očkovací příznaky a nepříjemné stavy byly hlášeny po podání obou dávek. Všichni dobrovolníci - účastnící studie, byli vybaveni deníkem, ve kterém zaznamenávali výskyty cestovní diarea během jejich pobytu v cizině a dále přenosnými prostředky (trubice Portagerm a Cary Blair) k odběru vzorků stolice v případě výskytu diarea. Cestujícím bylo přikázáno, aby předali svůj cestovní deník a přenosné trubice pro odběr vzorků ihned po návratu z cesty. Vzorky krve pro testování imunogennosti byly odebrány od 73 dobrovolníků před první dávkou a po první dávce vakcíny nebo placeba. Vzorky po první dávce byly odebrány těsně před podáním druhé dávky a vzorky krve po druhé dávce byly odebrány po návratu.
Receptury dávek podávaných třem náhodně vybraným skupinám cestujících byly následující: vakcína ETEC obsahující 1 mg rekombinantní B-subjednotky toxinu cholery plus 1011 formalinem usmrcených bakterií z pěti kmenů produkujících obvyklé antigeny s kolonizačním faktorem (CFA) a to (CFA 1, CFAII (CS1, CS2 a CS3) a CFA IV (CS4, CS5 a CS6 ); celobuněčná cholerová vakcína z B-subjednotky ( registrovaná ve Švédsku od roku 1992), obsahující 1 mg rekombinantní cholerový toxin B-subjednotky a 1011 usmrcených celých buněk (Inaba, Ogawa, klasik a El Tor); placebo obsahující 10n usmrcených E.coli K12. Receptura byla suspendována ve 4 ml pufru a každá dávka vakcíny nebo placeba byla podávána ve formě nápoje ve 150 cc roztoku hydrouhličitanu sodného. Izolace a charakteristika bakterií ETEC a anti-CTB IgA ELISA byly provedeny popsaným způsobem ( Jertborn M., et al ibid).
250 dobrovolníků dostalo jednu dávku vakcíny nebo placeba, a z nich 246 dostalo rovněž druhou dávku. Protokol studie byl schválen místním etickým výborem před započetím studie. Písemná informace obsahující souhlas dobrovolníků byla obdržena před provedením náhodného výběru.
Výsledky reaktogennosti byly následující: celkem 43 dobrovolníků (17%) zaznamenalo mírné příznaky ve trávícím traktu nebo všeobecné příznaky po podání první dávky a to 13 (16 %) ze skupiny, které bylo podáváno placebo, 13 (16 %) ze skupiny s cholerovou vakcínou a 17 (20 %) ze skupiny s vakcínou ETEC. Po druhé dávce mělo příznaky 20 (8 %) dobrovolníků; z toho 6 (7 %) ve skupině, které bylo podáno placebo, 7 (9 %) s cholerovou vakcínou, a 7 (8 %) s vakcínou ETEC. Statisticky nebyly shledány rozdíly v poměrném počtu dobrovolníků jednotlivých skupin, kteří ohlásili příznaky.
Při hodnocení účinnosti vakcín byl případ infekce diarea ETEC definován jako výskyt tří nebo více tekutých stolíc, přičemž ETEC, avšak žádné jiné patogeny, byla detekována v předběžně upravených stolicích.. V populačním vzorku zaznamenaném v protokolu byl • · • · · 9-.999 9 9 9 •® ··· ·· ·· ·· ··· výskyt ETEC 8 % (5 případů ) ve skupině, které bylo podáváno placebo, 10 % (6 případů ) ve skupině s cholerovou vakcínou a 2 % ( 1 případ ) ve skupině s vakcínou ETEC. Účinnost vakcíny při srovnání vakcíny ETEC s aplikací placeba byla 79 % (p = 0,119) a ve srovnání s cholerovou vakcínou 84 % ( p = 0,0496). Srovnání procentuálních relací ETEC diarea bylo provedeno jednostranným přesným testem Fisher.
Všechny izolanty ETEC v populačním vzorku, evidované v protokolu, vykazovaly kolonizační faktory obsažené ve vakcíně.
Cholerová vakcína neposkytovala žádnou evidentní ochranu proti ETEC ve srovnání se skupinou s placebem, avšak je třeba poznamenat, že pouze dva případy s ETEC u skupiny s cholerovou vakcínou byly způsobeny bakteriemi produkujícími pouze tepelně labilní enterotoxin (LT), proti kterému by měla cholerová vakcína ( pomocí své B-subjednotky) teoreticky působit.
Tudíž, v důsledku skutečnosti, že v této skupině byly přítomny téměř výlučně kmeny LT - negativní, lze předpokládat, že cholerová vakcína neměla žádný účinek.
Přes tyto výsledky je třeba mít na mysli, že popsaný způsob disponování se vzorky stolice mohl být zdrojem chyb. Při používání přenosných prostředků pro odběr stolice existuje riziko ztráty citlivých patogenů, přičemž méně citlivé patogeny, jako jsou bakterie E.coli přežívají, což se může projevit v mylně pozitivních případech ETEC diarea ( viz definici ETEC diarea). Z toho důvodu by mohl být podíl případů ETEC diarea přeceněn. Nicméně je nepravděpodobné, že by možné mylné pozitivní případy byly nerovnoměrně rozděleny mezi sledované skupiny.
Z hlediska imunogennosti, by mohlo být prokázáno významné zvýšení protilátek proti B-subjednotce cholerotoxinu (CTB) a to pomocí anti-CTB IgA ELIS A testu u skupiny, které byla podávána vakcína ETEC ( geometrický průměr titrů před vakcinací versus stav po vakcinaci: 7,8 versus 58,7 po první dávce a 62,6 po druhé dávce; konverze séra po 2. dávce 91 %) a u skupiny, které byla podávána cholerová vakcína ( 7,6 versus 54,6 po první dávce a 60,1 po druhé dávce; konverze séra 100 %). Skupina s placebem nevykázala jakýkoli významný nárůst reakce anti-CTB ( 7,9 versus 8,3 po první dávce a 11,8 po druhé dávce; konverse séra 29 %).
Z toho plyne, že ačkoliv CTB cholerová WC vakcína vykázala velmi dobrou reakci proti B-subjednotce - nebyl pozorován žádný významný vliv této vakcíny na diarea ETEC. To by bylo možno především připsat skutečnosti, že většina kmenů ETEC izolovaných od těchto dobrovolníků produkovala pouze ST(9zl2)a proto nemohli být tito dobrovolníci chráněni cholerovou vakcínou. Zřejmě jsou protilátky anti-CFA velmi důležité pro ochranu, zvláště proti diarea vyvolané ETEC s ST.
• · ·· · · · • · · 9 *999 • ·
Prezentované výsledky jsou prvními výsledky, které přispívají k pracovní hypotéze, že anti-CFA/CS imunita u lidí vyvolaná orální vakcínou ETEC může chránit proti diarea způsobené ETEC, které produkují pouze tepelně stabilizovaný enterotoxin (ST).
Průmyslová využitelnost
Vakcína podle vynálezu je využitelná jako ochrana proti účinkům enterotoxigenních bakterií Escherichia coli produkujících pouze tepelně stabilní enterotoxin a vyvolávajících průjmové onemocnění u lidí.
Ή V Ί - 4 Η • · •· •· •· •· • · • · ·
Patentové nároky
Claims (4)
1. Orální vakcína proti enterotoxigenní E.coli způsobující diarea u lidí, obsahující definované množství nejméně tři různých typů antigenů s kolonizačním faktorem (CFA) vybraných ze skupiny CFA I, CFA II ( CS 1, CS2 a CS3 ) a CFA IV (CS4, CS5 a CS6) na usmrcených bakteriích E.coli s chybějícím genem kódujícím teplotně labilní enterotoxin (LT) spolu s definovaným množstvím B-subjednotky cholerového toxinu (CTB ) a prostředek, kterým je kompozitní vakcína očištěna od možného teplotně stabilního enterotoxinu (ST).
2. Orální vakcína podle nároku lvyznačujícíse tím, že definované množství různých typů CFA činí pro každý typ CFA nejméně 100 pg a definované množství CTB činí nejméně 0,5 mg a prostředek je fyziologicky přijatelný pufr.
3. Orální vakcína podle nároku 2 vyznačující se tím, že definované množství různých typů CFA činí pro každý typ CA 100 až 300 pg a definované množství CTB činí 0,5 až 2,0 mg.
4. Orální vakcína podle nároku 3vyznačujícíse tím, že definované množství různých typů CFA činí 200 pg CFA /1, 200 pg CS1, 150 pg CS2, 200 pg CS4 a 150 pg CS5 a 1,0 mg CTB a fyziologicky přijatelný pufr je fosfátem purfrovaný solný roztok.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9804415A SE515285C2 (sv) | 1998-12-18 | 1998-12-18 | Oralt vaccin mot diarré |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20011947A3 true CZ20011947A3 (cs) | 2001-12-12 |
Family
ID=20413742
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20011947A CZ20011947A3 (cs) | 1998-12-18 | 1999-12-09 | Orální vakcína proti diarea |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1140159A1 (cs) |
| JP (1) | JP2002532562A (cs) |
| KR (1) | KR20010101233A (cs) |
| CN (1) | CN1330552A (cs) |
| AP (1) | AP1426A (cs) |
| AU (1) | AU778223B2 (cs) |
| BR (1) | BR9916278A (cs) |
| CA (1) | CA2352309A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ20011947A3 (cs) |
| EE (1) | EE200100309A (cs) |
| HR (1) | HRP20010433A2 (cs) |
| HU (1) | HUP0104552A3 (cs) |
| ID (1) | ID29857A (cs) |
| IL (1) | IL143808A0 (cs) |
| IS (1) | IS5967A (cs) |
| MX (1) | MXPA01006200A (cs) |
| NO (1) | NO20012889L (cs) |
| NZ (1) | NZ527559A (cs) |
| OA (1) | OA11729A (cs) |
| PL (1) | PL198438B1 (cs) |
| SE (1) | SE515285C2 (cs) |
| TR (1) | TR200101542T2 (cs) |
| WO (1) | WO2000037106A1 (cs) |
| YU (1) | YU41701A (cs) |
| ZA (1) | ZA200104362B (cs) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005504002A (ja) * | 2001-02-13 | 2005-02-10 | ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ、 アズ リプリゼンティッド バイ ザ セクレタリィ オブ ジ アーミイ | 経皮免疫感作のためのワクチン |
| GB0121998D0 (en) | 2001-09-11 | 2001-10-31 | Acambis Res Ltd | Attenuated bacteria useful in vaccines |
| EP1543836A1 (en) * | 2003-12-17 | 2005-06-22 | Berna Biotech AG | Recombinant Vibrio cholerae strain and vaccine comprising said strain |
| CN101730737B (zh) * | 2007-04-24 | 2016-06-01 | 赛尔戴克斯治疗公司 | 超表达重组霍乱毒素b亚单位的霍乱弧菌显示双重免疫原性 |
| AU2012307540B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-09-22 | Scandinavian Biopharma Holding Ab | Method for increasing ETEC CS6 antigen presentation on cell surface and products obtainable thereof |
| CA2846354C (en) * | 2011-09-12 | 2023-04-25 | Scandinavian Biopharma Holding Ab | Vaccine for protection against etec-induced diarrhea comprising dmlt |
| RU2753410C2 (ru) * | 2020-01-14 | 2021-08-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE9100556D0 (sv) * | 1991-02-26 | 1991-02-26 | Holmgren Jan | Preparation and use of formalin-killed colonization-factor-antigen (cfa)-expressing e coli organisms for vaccination against enteric infection/diarrhea caused by enterotoxigenic e coli bacteria in humans |
-
1998
- 1998-12-18 SE SE9804415A patent/SE515285C2/sv not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-12-09 AP APAP/P/2001/002174A patent/AP1426A/en active
- 1999-12-09 ID IDW00200101304A patent/ID29857A/id unknown
- 1999-12-09 CA CA002352309A patent/CA2352309A1/en not_active Abandoned
- 1999-12-09 KR KR1020017007484A patent/KR20010101233A/ko not_active Ceased
- 1999-12-09 EP EP99964847A patent/EP1140159A1/en not_active Withdrawn
- 1999-12-09 CN CN99814553A patent/CN1330552A/zh active Pending
- 1999-12-09 HU HU0104552A patent/HUP0104552A3/hu unknown
- 1999-12-09 NZ NZ527559A patent/NZ527559A/en unknown
- 1999-12-09 TR TR2001/01542T patent/TR200101542T2/xx unknown
- 1999-12-09 PL PL348257A patent/PL198438B1/pl unknown
- 1999-12-09 HR HR20010433A patent/HRP20010433A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1999-12-09 AU AU30889/00A patent/AU778223B2/en not_active Ceased
- 1999-12-09 BR BR9916278-4A patent/BR9916278A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-12-09 CZ CZ20011947A patent/CZ20011947A3/cs unknown
- 1999-12-09 EP EP04010662A patent/EP1444987A3/en not_active Withdrawn
- 1999-12-09 IL IL14380899A patent/IL143808A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-12-09 OA OA1200100151A patent/OA11729A/en unknown
- 1999-12-09 YU YU41701A patent/YU41701A/sh unknown
- 1999-12-09 WO PCT/SE1999/002306 patent/WO2000037106A1/en not_active Application Discontinuation
- 1999-12-09 JP JP2000589216A patent/JP2002532562A/ja not_active Withdrawn
- 1999-12-09 EE EEP200100309A patent/EE200100309A/xx unknown
- 1999-12-09 MX MXPA01006200A patent/MXPA01006200A/es not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-05-28 ZA ZA200104362A patent/ZA200104362B/en unknown
- 2001-06-12 NO NO20012889A patent/NO20012889L/no not_active Application Discontinuation
- 2001-06-13 IS IS5967A patent/IS5967A/is unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL143808A0 (en) | 2002-04-21 |
| AP1426A (en) | 2005-06-06 |
| HRP20010433A2 (en) | 2002-06-30 |
| YU41701A (sh) | 2005-07-19 |
| MXPA01006200A (es) | 2002-04-17 |
| AU3088900A (en) | 2000-07-12 |
| PL198438B1 (pl) | 2008-06-30 |
| AU778223B2 (en) | 2004-11-25 |
| TR200101542T2 (tr) | 2001-10-22 |
| PL348257A1 (en) | 2002-05-20 |
| WO2000037106A1 (en) | 2000-06-29 |
| IS5967A (is) | 2001-06-13 |
| EE200100309A (et) | 2002-08-15 |
| EP1444987A3 (en) | 2005-12-21 |
| JP2002532562A (ja) | 2002-10-02 |
| NO20012889D0 (no) | 2001-06-12 |
| ID29857A (id) | 2001-10-18 |
| NZ527559A (en) | 2005-01-28 |
| BR9916278A (pt) | 2001-09-04 |
| OA11729A (en) | 2005-05-12 |
| EP1140159A1 (en) | 2001-10-10 |
| SE515285C2 (sv) | 2001-07-09 |
| KR20010101233A (ko) | 2001-11-14 |
| HUP0104552A3 (en) | 2002-08-28 |
| CN1330552A (zh) | 2002-01-09 |
| EP1444987A2 (en) | 2004-08-11 |
| SE9804415D0 (sv) | 1998-12-18 |
| NO20012889L (no) | 2001-06-12 |
| HUP0104552A2 (hu) | 2002-04-29 |
| SE9804415L (sv) | 2000-06-19 |
| CA2352309A1 (en) | 2000-06-29 |
| ZA200104362B (en) | 2002-01-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mirhoseini et al. | Review on pathogenicity mechanism of enterotoxigenic Escherichia coli and vaccines against it | |
| Simanjuntak et al. | Safety and immunogenicity of single-dose live oral cholera vaccine CVD 103-HgR in 5-9-year-old Indonesian children | |
| Black et al. | Protective efficacy in humans of killed whole-vibrio oral cholera vaccine with and without the B subunit of cholera toxin | |
| Katz et al. | Oral immunization of adult volunteers with microencapsulated enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) CS6 antigen | |
| Kaminski et al. | Development and preclinical evaluation of a trivalent, formalin-inactivated Shigella whole-cell vaccine | |
| Åhrén et al. | Intestinal antibody response after oral immunization with a prototype cholera B subunit—colonization factor antigen enterotoxigenic Escherichia coli vaccine | |
| Ruan et al. | Genetic fusions of a CFA/I/II/IV MEFA (multiepitope fusion antigen) and a toxoid fusion of heat-stable toxin (STa) and heat-labile toxin (LT) of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) retain broad anti-CFA and antitoxin antigenicity | |
| Jertborn et al. | Intestinal and systemic immune responses in humans after oral immunization with a bivalent B subunit-O1O139 whole cell cholera vaccine | |
| Seo et al. | Preclinical characterization of immunogenicity and efficacy against diarrhea from MecVax, a multivalent enterotoxigenic E. coli vaccine candidate | |
| Lu et al. | L-DBF elicits cross protection against different serotypes of Shigella spp | |
| KR100221452B1 (ko) | 장감염에 대한 백신조성물의 제조방법 | |
| CZ20011947A3 (cs) | Orální vakcína proti diarea | |
| Lu et al. | The L-DBF vaccine cross protects mice against different Shigella serotypes after prior exposure to the pathogen | |
| Nandy et al. | Serum antibacterial and antitoxin responses in clinical cholera caused by Vibrio cholerae O139 Bengal and evaluation of their importance in protection | |
| HUT77574A (hu) | Eljárás fokozott antigénaktivitású Helicobacter sp. és azt tartalmazó vakcina előállítására | |
| Chaicumpa et al. | Immunogenicity of liposome-associated and refined antigen oral cholera vaccines in Thai volunteers | |
| Holmgren et al. | Enterotoxigenic Escherichia coli diarrhea in an endemic area prepares the intestine for an anamnestic immunoglobulin A antitoxin response to oral cholera B subunit vaccination | |
| TW200418874A (en) | Passive vaccine for the prevention of campylobacter colonization, and its preparation method | |
| Jarząb et al. | Outer membrane protein C is a protective and unique vaccine antigen against Shigella flexneri 3a | |
| US12171823B2 (en) | Polypeptides of Fusobacterium and methods of use | |
| Chongsa-nguan et al. | Immunogenicity of two f0ormulations of oral cholera vaccines in Thai volunteers | |
| Khan et al. | Bibliography on diarrhoeal diseases | |
| Bleakley | Characteristics of Vibrio cholerae proteinases | |
| STOLL | Enterotoxigenic Escherichia coli Diarrhea in an Endemic Area Prepares the Intestine for an Anamnestic Immunoglobulin A | |
| Tiels et al. | The excretion of F18 E. coli is reduced after |