CZ20011343A3

CZ20011343A3 - Pregnanglukuronidy

Info

Publication number: CZ20011343A3
Application number: CZ20011343A
Authority: CZ
Inventors: Christopher Paul Miller; Bach Dinh Tran; Michael David Collini
Original assignee: American Home Products Corporation
Priority date: 1998-10-13
Filing date: 1999-10-07
Publication date: 2002-04-17
Also published as: KR20010080102A; NO20011825D0; AU6511599A; HUP0103992A2; BR9914521A; PL347270A1; CN1330659A; HUP0103992A3; NO20011825L; AU751708B2; EA200100437A1; AR020778A1; JP2002527448A; TW499435B; ZA200103012B; WO2000021977A1; IL142441A0; EP1121376A1; CA2346693A1

Description

Pregnanglukuronidy

Oblast techniky

Vynález se týká pregnanglukuronidů a jejich farmaceuticky přijatelných soli, způsobu jejich výroby a použiti těchto látek pro výrobu farmaceutických prostředků, určených pro léčeni nebo inhibici zhoubných nádorů, léčeni poruch centrálního nervového systému nebo Alzheimerovy choroby nebo ke stimulaci tvorby červených krvinek u savců.

Dosavadní stav techniky

Použití přírodně se vyskytujících estrogenních prostředků s vysokou čistotou a nízkou toxicitou, například prostředku Premarin (konjugované estrogeny koně) se v poslední době pokládá za výhodný léčebný postup při úpravě příznaků, vyskytujících se po menopauze, zejména pokud jde o osteoporózu a osteopenii, vyvolanou u žen v důsledku sníženého množství estrogenu a také v případě dalších poruch, souvisejících s hormonální nerovnováhou. Estrogenní složky přírodně se vyskytujících estrogenních prostředků jsou obecně sulfátové estery estronu, equilinu, equileninu, 17beta-estradiolu, dihydroequileninu a 17beta-dihydroequileninu, tyto látky byly popsány v US 2834712. Prostředky s obsahem estrogenních látek obvykle obsahují také pufr nebo jsou stabilizovány solemi organických nebo anorganických kyselin s alkalickými kovy na v podstatě neutrální pH v rozmezí 6,5 až 7,5. Jako stabilizátor pro tyto prostředky byla navrhována také močovina podle US 3608077. Bylo také navrhováno zařazení antioxidačních látek ke stabilizaci synthetických konjugovaných estrogenů a ke stabilizaci pH, zejména spolu s použitím tris(hydroxymethyl)aminomethanu (tris), aby nedošlo k hydrolýze uvedených látek, toto opatření je popsáno v US 4154820.

Ze složek, obsažených ve svrchu uvedeném prostředku Premarin v menším množství, je možno uvést sodnou sůl 5alfa-pregnan-3beta,(20S), 21-triol-20-0-beta-glukuronidu a sodnou sůl 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-glukoronidu.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří 5alfa-pregnan-3beta,(20S), 21-triol-20-O-beta-glukuronid a 5alfa-pregnan-3beta,(20R)-diol-2O-O-beta-glukuronid a farmaceuticky přijatelné soli těchto látek, které je možno použít jako progestační látky. Způsob výroby pregnanglukuronidů vzorce 7 a 12 je znázorněn dále ve schématech.I a II. Mimo to je ve schématech uvedena také přeměna těchto glukuronidů na přírodně se vyskytující sodné soli vzorce 8 a 13.

Farmaceuticky přijatelné soli svrchu uvedených látek však nejsou omezeny na přírodně se vyskytující formy, je možno použít také soli s alkalickými kovy, soli s kovy alkalických zemin, amonné soli, alkylamonné soli nebo dialkylamonné soli, obsahující vždy 1 až 6 atomů uhlíku v alkylových skupinách a také trialkylamonné soli, rovněž obsahující 1 až 6 atomů uhlíku v každé alkylové skupině, sůl je možno vytvořit s jakýmkoliv dalším atomem nebo molekulou s kladným nábojem.

Vzhledem k tomu, že 5alfa-pregnan-3beta, (20S) , 21-triol-20-O-beta-glukuronid a 5alfa-pregnan-3beta,(20R)-diol-20-O-beta-glukuronid jsou v nepatrném množství přítomny také v prostředku Premarin, tvoří podstatu vynálezu 5alfa-pregna.n-3beta, (20S), 21-triol-20-O-beta-glukuronid a 5alfa-pregnan-3beta, (20R)-diol-20-O-beta-glukuronid a jejich farmaceuticky přijatelné soli s čistotou vyšší než 1 %.

Součást podstaty vynálezu tvoří rovněž 5alfa-pregnan-3beta, (20S), 21-triol-20-O-beta-glukuronid a jeho farmaceuticky přijatelné soli a 5alfa-pregnan-3beta,(20R)-diol-20-O-beta-glukuronid a jeho farmaceuticky přijatelné soli.

Podstatu vynálezu tvoří rovněž použití Salfa-pregnan-3beta,(20S), 21-triol-20-0-beta-glukuronidu a 5alfa-pregnan-3beta,(20R)-diol-20-O-beta-glukuronidu nebo farmaceuticky přijatelných solí těchto látek jako progestačních látek.

Výchozí látky, použité při výrobě svrchu uvedených sloučenin se běžně dodávají nebo je možno je připravit při použití běžných chemických postupů.

Sloučeniny podle vynálezu je možno z uvedených dostupných výchozích látek připravit způsobem, který je uveden pro 5alfa-pregnan-3beta,(20S), 21-triol-20-0-beta-glukuronid v reakčním schématu I včetně příslušné sodné soli a pro 5alfa-pregnan-3beta,(20R)-diol-20-O-beta-glukuronid v reakční schématu II včetně způsobu výroby sodné soli této látky.

V reakčním schématu I je jako výchozí látka použit pregnenolon-3-acetát vzorce 1, Reakcí této látky s tetraacetátem olova v kyselině octové způsobem podle publikace Purdy a další, Journal of Medicinal Chemistry 33(6), 1572-1581 (1990) se získá sloučenina vzorce 2. Hydrogenací této látky v kyselině octové při použití oxidu platičitého jako katalyzátoru,, se získají sloučeniny vzorce 3 a 4 přibližně v poměru 3:1. Sloučenina vzorce 3 se pak zahřívá s přebytkem methylesteru kyseliny acetobromoglukuronové vzorce 5. Chráněný glukuronid se pak zmýdelní působením hydroxidu lithného a pak se podrobí reprotonaci působením kyseliny, čímž se získá požadovaný konjugát kyseliny 20-glukuronové vzorce 7. Volnou kyselinu je pak možno titrovat při použití mírného přebytku roztoku hydroxidu sodného, čímž vznikne sodná sůl vzorce 8.

Ve schématu II se sloučenina vzorce 10 nechá reagovat s methylesterem kyseliny acetobromoglukuronové vzorce 5 a s uhličitanem stříbrným za vzniku chráněného konjugátu vzorce 11. Tento materiál se zmýdelní a pak podrobí protonaci působením kyseliny, čímž se získá derivát kyseliny glukuronové vzorce 12, zbavený ochranné skupiny. Tento materiál se pak titruje roztokem hydroxidu sodného za vzniku glukuronátu sodného vzorce 13.

Sloučeniny podle vynálezu jsou progestační látky a je proto možno je použít u mužů i u žen jako perorální antikoncepční látky, dále je možno tyto látky použít' při substituční hormonální therapii, zvláště v kombinaci s estrogeny, při léčení endometriózy, defektní fáze žlutého tělíska, u nezhoubných onemocnění mléčné žlázy a prostaty i u zhoubných nádorů prostaty a děložní sliznice. Sloučeniny podle vynálezu je také možno použít k ochraně před epileptickými záchvaty, ke zlepšení kognitivních schopností, při léčení Alzheimerovy choroby, demence, vasomotorických příznaků v přechodu a dalších poruch centrálního nervového systému. Mimo to jsou tyto látky

vhodné pro použiti při stimulaci tvorby červených krvinek.

Sloučeniny podle vynálezu je možno použit jako takové nebo v kombinace s dalšími účinnými látkami, jako .dalšími estrogeny, progestiny a androgeny.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovat na farmaceutické prostředky jako takové, obvykle však spolu s farmaceutickým nosičem, jehož podíl se stanoví podle rozpustnosti a chemické povahy použité účinné látky, v závislosti na zvoleném způsobu podání a s ohledem na běžnou farmakologickou praxi. Použitý farmaceutický nosič může být pevný nebo kapalný.

Pevný nosič může zahrnovat jednu nebo větší počet látek, které mohou působit také jako látky pro úpravu chuti, kluzné látky, pomocná rozpouštědla, suspenzní činidla, plniva, látky, napomáhající slisování, pojivá nebo desintegrační látky, může také jít o zapouzdřující nebo povlakový materiál. V případě prášku je nosič obvykle jemně prášková pevná látka, která se mísí s jemně práškovou účinnou složkou. V případě tablet se účinná složka mísí s nosičem, který má potřebné vlastnosti pro lisování ve vhodném poměru, načež se lisuje na tablety požadovaného rozměru a tvaru. Prášky a tablety s výhodou obsahují až 99 % účinné složky. Vhodné pevné nosiče zahrnují například fosforečnan vápenatý, stearan vápenatý, mastek, cukry, laktózu, dextrin, škrob, želatinu, celulózu, methylcelulózu, sodnou sůl karboxymethylcelulózy, polyvinylpyrrolidon, vosky s nízkou teplotou tání a iontoměničové pryskyřice.

9 ·	9 9 9	•9 ·
• ·	9 9 ·	9	•		• 9
• · ·	9	•	•	•
• · · · · ·	9 9		• · ’	•
• ·	• ·		•	•
9 9 9	9 · · 9-9 9	•	• ·		9 ·

Kapalné nosiče se užívají při výrobě roztoků, suspenzí, emulzí, sirupů, elixírů'a prostředků, podávaných v nádobkách pod tlakem. Účinnou složku je možno rozpustit nebo uvést do suspenze ve farmaceuticky přijatelném kapalném nosiči, například ve vodě, v organickém rozpouštědle, ve směsi obou těchto látek nebo ve farmaceuticky přijatelném oleji nebo tuku’. Kapalný nosič může obsahovat ještě další farmaceuticky vhodné přísady, například pomocná rozpouštědla, emulgátory, pufry, konzervační prostředky, sladidla, látky pro úpravu chuti, suspenzní činidla, zahušťovadla, barviva, regulátory viskozity, stabilizátory nebo látky, upravující osmotický tlak. Vhodným příkladem kapalných nosičů pro perorální i parenterální podání může být voda, která může obsahovat svrchu uvedené přísady, jako deriváty celulózy, s výhodou jde o.sodnou sůl karboxymethylcelulózy, dále je jako nosič možno použít alkoholy, jednosytně i vícesytné, například glykoly a jejich deriváty, lecithiny a také oleje, jako frakcionovaný kokosový olej a arašídový olej. Pro parenterální podání může být nosičem také ester typu oleje, jako ethyloleát nebo isopropylmyristát. V případě parenterálního podání jsou vhodné sterilní kapalné nosiče. Kapalným nosičem pro podání prostředku v tlakových nádobkách může být halogenovaný uhlovodík nebo jiný farmaceuticky přijatelný hnací prostředek.

Kapalné farmaceutické prostředky, které jsou sterilní roztoky nebo suspenze, je možno využít například jako nitros.valovou, . intraperitoneální nebo podkožní injekci. Sterilní roztoky je možno podávat také nitrožilně. Sloučeniny podle vynálezu je také možno

podávat perorálně ve formě kapalného nebo pevného farmaceutického prostředku.

Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat také rektálně nebo do pochvy ve formě běžných čípků. Pro podání nosní sliznicí nebo pro inhalaci nebo insuflaci přímo do průdušek je možno zpracovávat sloučeniny podle vynálezu na vodné nebo částečné vodné roztoky, které je pak možno rozprašovat ve formě aerosolu. Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat také pokožkou, například při použití transdermální náplasti, která obsahuje účinnou sloučeninu a nosič, který je inertní vzhledem k této sloučenině, je netoxický pro pokožku a dovoluje průchod účinné sloučeniny vstřebáváním do krevního oběhu přes pokožku pro dosažení systemického účinku. Nosič může mít jakoukoliv formu, může jít například o krémy, mazání, pasty, gely a oklizivní obvazy. Krémy a mazání mohou být viskózní, kapalné nebo polotuhé emulze typu olej ve vodě nebo voda v oleji. Pasty mohou obsahovat práškové materiály, dispergované ve vazelíně nebo hydrofilní vazelíně s obsahem účinné složky. K uvolnění účinné látky do krevního oběhu je možno použit také řadu okluzivních obvazů, může jít například o polopropusné membrány, překrývající zásobník s obsahem účinné složky s nosičem nebo bez nosiče nebo může jít o matrici, obsahující účinnou složku. Okluzivní obvazy jsou v literatuře dostatečně popsány.

Pokud jde o dávky účinných látek, mohou se měnit v závislosti na použití určité lékové formy, na způsobu, podání, na závažnosti příznaků a na celkovém stavu nemocného. Na základě výsledků, které byly získány při standardních farmakologických pokusech, je předpokládaná denní dávka účinné látky v rozmezí 0,02 až 750 μς/kg. Léčení bude obvykle zahajováno s dávkou nižší než je optimální dávka použité sloučeniny. Pak se bude dávka zvyšovat tak dlouho, až se dosáhne optimálního účinku za daných podmínek. Přesné dávky v případě perorálního podání, parenterálního podání, podání nosní sliznici nebo intrabronchiální podání stanoví vždy ošetřující lékař. Výhodnou farmaceutickou lékovou formou je forma s obsahem jednotlivé dávky účinné’látky, jako tableta nebo kapsle. V těchto lékových formách je prostředek rozdělen na jednotlivé dávky, obsahující příslušné množství účinné látky. Tyto jednotlivé dávky mohou být baleny po jedné dávce například jako balený prášek, lahvičky, ampule, předem naplněné injekční stříkačky nebo plastové polštářky, obsahující kapalný prostředek. Lékovou formou s obsahem jednotlivé dávky účinné látky může být také kapsle nebo tableta, tyto lékové formy se obvykle dodávají ve formě větších balení.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

*

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Pregnan-3beta,20R,21-triol-3,21-diacetát vzorce 3 g, 14,4 mmol sloučeniny vzorce 2 v 0,2 litru AcOH se zpracovává působením 1,75 g, 7,7 mmol oxidu platičitého a současně se roztok hydrogenuje vodíkem při tlaku 0,28 MPa. Po 18 hodinách se katalyzátor odfiltruje, surová reakční směs se zahustí a pak se chromatografuje

• ·	• · ·	··	•
• · ·	«· ♦ ·	•	•	• ·
• · ·	• 9	•	•	•
• · ··· 9	9 9	• 9	•	•
• ·	• ·	•	•	•
• · · ·	··· ····	• *		• ·

na silikagelu, jako elučni činidlo se užije směs ethylacetátu a hexanů 1:4, čímž se získají 2 produkty vzorce 3 a 4. První produkt je hlavní složka, jde o sloučeninu vzorce 3, která se získá v množství 2,40 g jako bílá pevná látka s teplotou tání 164 až 166 °C. ¹H NMR (CDC1₃) 4,75-4, 60 (m, 1 Η) , 4,16 (dd, 1 H, J = 11,4 Hz, 2,2 Hz), 3,94-3,87 (m, 1 Η), 3,81-3,73 (m, 1 Η), 2,10 (s, 3 Η), 2,10-2,05 (m, 1 Η), 2,02 (s, 3H) , 1?84 (d, IH, J = 5,2 Hz), 1,82-0,88 (m, 21H), 0,83 (s, 3H) , 0,76 (S, 3H) , 0, 68 (dt, IH, J = 10, 6 Hz) ;

MS (+ESI) 421 (M+H)⁺; IR (KBr) 3520, 2920, 2880, 1740, 1710 cm'¹.

Příklad 2

Pregnan-3beta,20R,21-triol-3,20-diacetát vzorce 4

Druhý produkt vzorce 4 je menší složkou, která se získá jako 0,73 g bílé pevné látky s teplotou tání 189 až 191 °C.

^XH NMR (DMSO) 4,91 (dq, IH, J = 5,5 Hz, 2,2 Hz), 4,744,63 (m, IH), 3,81-3,74 (m, IH), 3,57-3,49 (m, IH), 2,09 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,91 (dd, IH, J = 7,2 Hz, 5,0 Hz), 1,85-0,83 (m, 22H) , 0,82 (s, 3H) , 0,72-0,61 (m,. IH) , 0,65 (s, 3H);

MS El 420 (M+); IR (KBr) 3410, 2920, 1730, 1700 cm^-1.

Příklad 3

Methylester kyseliny 2,3,4-O-triacetyl-l-O-(3beta,21-diacetoxy-5alfa-pregnan-20S-yl)-beta-D-glukuronové vzorce 6

6,6 g, 15,7 mmol sloučeniny vzorce 3 se rozpustí ve 125 ml chloroformu, přidá se 4,3 g, 15,7 mmol uhličitanu

« · · stříbrného a 6,2 g, 15,7 mmol glukuronylbromidu vzorce 5 [21085-72-3]. Směs se vaří 1,5 hodiny pod zpětným chladičem, načež se přidá ještě 0,5 ekvivalentu uhličitanu stříbrného a 0,5 ekvivalentu glukuronylbromidu. Po další 1,5 hodině se přidání těchto reakčních složek opakuje a stejně se přidají uvedené složky ještě po další 1,5 hodině. Reakční směs se vaří celkem '5,5 hodin pod zpětným chladičem, pak.se reakční směs nechá zchladnout a anorganické soli se odfiltrují. Filtrát se odpaří a chromatografuje se na silikagelu při použití směsi ethyacetátu a hexanů v poměru 3:7, frakce sobsahem produktu se koncentrují a znovu se . chromatografuji za týchž podmínek, čímž se získá 4,1 g sloučeniny vzorce 6, která se rozetře s methanolem, čímž se získá 3,05 g sloučeniny vzorce 6 jako bílé pevné látky s teplotou tání 180 až 183 °C.

(d, 1H, J = 1H, J = 9,5 J = 10,0 2H) , 3,63 (s, 3H), 2,16-2,07 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,97 (S, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 1,78-1,63 (m, 3H), 1,62-1,39 (m,. 6H), 1,36-1,10 (m, 8H), 1,06-0,85 (m, 5H), 0,79 (s, 3H), 0,68 (s, 3H) ;

MS (APCI) 754 (M+NH4 ⁺ ) .

Příklad 4

5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronid vzorce 7

3,76 g, 5,1 mmol sloučeniny vzorce 6 se rozpustí ve 25 ml THF a přidá se roztok 1,35 g, 56,1 mmol hydroxidu lithného ve 13 ml vody. K tomuto roztoku se přidají 4 ml ^XH NMR (DMSO) 5,36 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 5,.06 8,0 Hz), 4,91 (T, 1H, J = 9,8 Hz), 4,70 (dd, Hz, 8,1 Hz), 4,63-4,50 (m, 1H), 4,47 (d, 1H, Hz), 4,16 (d, 1H, J = 11,3 Hz), 3,92-3,75 (m, methanolu a reakčni směs se 2 hodiny zahřívá na 75 °C.

Pak se. roztok zchladí a zahustí. Vodný zbytek se rozpustí v 15 ml vody. Pak se přidá 43 ml 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Tvorba pevné látky se vyvolá škrábáním na skleněnou stěnu. Filtrací se získá 2,6 g sloučeniny

vzorce 7 jako bílé pevné látky s- teplotou	tání
231-235 °C.
¹³C NMR (75 MHz, MeOD) (C=O chybí), 102,6,	82,1,	77,6,
76, 8, 75,3, 73,1, 71,9, 63,6, 57,6, 56,1,	51,5,	49,9, ~
46,3, 43, 6, 40,3, 39,0, 38,3, 36,9, 36, 7,	33,5,	32,2,
30,0, 25,9, 25, 4, .22,3, 12,8, 11, 9;
^XH NMR (300 MHz, MeOD) 4,54 (d, 1H, J = 7,	7 Hz),	3, 82-
3,71 (m, 3H), 3,59-3,22 (m, 5H), 2,30 (d,	1H, · J	= 12,6
Hz), 1,75-1,66 (m,6H), 1,53-1,18 (m, 9H),	1,17'	-0,88 (m,
6H) , 0,83 (s, 3H), 0,78 (s, 3H), 0,70-0,58	(m,	1H) ;
MS (-)ESI 511 (M-H); IR (KBr) 3410, 2910,	2830,	1730,
17 00 cm^-1.
Příklad 5
Sodná sůl 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol	-20-0	-beta-D-

glukuronidu. vzorce 7

1,57 g, 1,7 mmol sloučeniny vzorce 7 se uvede do suspenze ve 20 ml methanolu, přidá se 6,4 ml 0,5 N vodného roztoku hydroxidu sodného a směs se míchá 5 minut, za tuto dobu se rozpustí všechna výchozí látka. Roztok se pak smísí s 0,65 g produktu z předchozího stupně a výsledná směs se podrobí rychlé chromatografií na silikagelu a pak chromatografií na sloupci silikagelu při použití směsi methanolu a methylenchloridu v poměru 4:6 a pak 5:5. Produkt se rozetře se směsí methanolu a dioxanu v poměru 1:1, celkový objem směsi je 60 ml, čímž

se získá 1,57 g produktu vzorce 8 jako bílá pevná látka s teplotou táni 240 až 244 °C.

¹³C NMR (75 MHz, DMSO) (C=O chybí), 100,4, 79, 8, 76, 7,

73, 9, 73,7, 72,2, 69,3., 66,3, 62,0, 55, 6, 54,0, 49,8,

44.3, 41,9 , 38,1, 36,6 35,1, 35,0, 31,8, 31,3, 28,4,

24.4, 23,9, 20,8, 12,1, 11,4;

IR (KBr) 3400 (H₂O) , 2920, 2870, 1610 cm'¹.

Příklad 6

Pregnan-3beta,20S, 21-triol vzorce 9

1,6 g, 3,8 mmol sloučeniny vzorce 3 se rozpustí v 8 ml THF. Pak se přidá roztok 0,27 g, 11,4 mmol hydroxidu lithného ve 3 ml vody. K získání jednofázového roztoku se k reakční směsi přidá ještě 1 ml methanolu. Po 30 minutách varu pod zpětným chladičem se reakční směs smísí s 1,1 ml kyseliny octové a dělí se mezi 60 ml vody a organickou vrstvou, která je tvořena směsí 100 ml ethylacetátu, 20 ml methylenchloridu, 10 ml methanolu. .. Organická vrstva se pak promyje nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Roztok se , odpaří a výsledná pevná látka se rozetře s étherem, čímž se získá 1,1 g sloučeniny vzorce 9 ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 210 až 212 °C.

¹H NMR (DMSO) (3 OH - protony chybí) 4,43 (d, 1H, J = 4,6

Hz) ,

4,31 (t,

1H, J = 5,5 Hz) , 4,05 (d, 1H, J = 5,2 Hz) ,

3,16-3,05 (m, 1H), 2,10 (d, 1H, J

12,4 Hz), 1765-0,78 (m, 21 Η), 0,75 (s, 3H), 0,68 (s, 3H), 0,65-0,54 (m, 1H);

MS El 336 M+; IR (KBr) 3400, 2930, 2880 cm^-1.

Příklad 7

Methylester kyseliny 1-0-(3beta-acetoxy-pregn-20-yl)2,3,4-triacetyl-beta-D-glukuronové vzorce 11 >»M-V

♦		♦	4 4'	44	«
	•	« ·	4 '4'	♦	4·	««
•	• ·	•	4	♦	4	4
•		4	•	4 ·	4	4
4	♦	4	4	«	«	4
• · *		««·.		• ·		4 ·

g, 11,0 mmol 5alfa-pregnan-3beta,20beta-diol-3-acetátu vzorce 10, 5,5 g, 13,8 mmol glukuronylbromidu vzorce 5 [21085-72-3] a 4,5g, 16,1 mmol uhličitanu stříbrného se míchá ve 40 ml toluenu' při teplotě místnosti v nádobě, chráněné před světlem hliníkovou fólií. Po 16. hodinách se reakční směs zředí methylenchloridem, zfiltruje, zahustí a .chromatografuje na silikagelu při použití směsi ethylacetátu a hexanů 2:8 a pak 4:6, čímž se získá pevná látka, která .se rozetře s methanolem, čímž se získá 3,0 g produktu vzorce 11 jako bílá pevná látka s teplotou tání 248 až 251 °C.

^XH NMR (DMSO) 5,33 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 4?95-4,88 (m, 2H) , 4,68 (dd, 1H, J = 9,5 Hz, 8,1 hZ), 4,62-4,49 (m, 1H) , 4,44 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 3,71-3,65 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 2,11 (d, 1H, J = 12,6 Hz), 1,98 (s, 3H), 1,97 (s, 3 Η) , 1,96 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,77-1, 64 (m, 2H) , 1,63-1,10 (m, 14H) , 0,99 (d, 3H, J = 5,8 Hz), 0,95-0,83 (m, 5H), 0,78 (s, 3H), 0,66 (s, 3H), 0,65-0,58 (m, 1H) ; IR (KBr) 2930, 2900, 2830, 1750, 1730 cm'¹;' MS ( + )ESI 696 (M+NH₄) ⁺ .

Příklad 8

5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-glukoronid vzorce 12

2,5 g, 3,7 mmol sloučeniny vzorce 11 se rozpustí v roztoku 25 ml THF a 15 ml methanolu a přidá se roztok 0,9 g, 37,5 mmol hydroxidu lithného v 10 ml vody. Reakční směs se 1. hodinu vaří pod zpětným chladičem. Pak se reakční směs nechá zchladnout na teplotu místnosti a odpaří se. Produkt se rozpustí ve 20 ml vody a roztok se okyselí 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové. Vytvoří se

sraženina, která se odfiltruje, čímž se získá 1,5 g produktu vzorce 12 ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 255 až 260 °C.

T NMR (DMSO) (3H chybí) 4,98 (d, 1H, J = 3,8 Hz), 4?91 (d, 1H, J = 4,6 Hz), 4,42 (br s, 1H) , 4,25 (d, 1H, J =

7,7 Hz), 3,71-3, 62 '(m, ΊΗ) , 3,58 (d, 1H, J= 9,7Hz), 3,23-3,12 (m, 1H), 2,96-2,87 (m, 1H) , 2,15 )d, 1H, J = 12,3 Hz),1,67-1,46 (m, 5H), 1,45-0,80 (m, 17H), 1,01 (d, 3H, J = 5,8 Hz), 0,74 (s, 3H) , 0,65 (s, 3H) , 0,65-0,52 (m, 1H);

IR (KBr) 3520, 3400, 2920, 2820, 2800, 1710 cm^-1; '

MS (-)ESI 495 (m-H)'.

Příklad 9

Sodná sůl 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-glukoronidu vzorce 13

Suspenze 1,5 g, 3,0 mmol sloučeniny vzorce 12 ve ml methanolu se smísí s 6,0 ml, 3,0 mmol 0,5 N roztoku hydroxidu sodného a směs se míchá 5 minut, v průběhu této doby se všechny složky rozpustí. Roztok se pak odpaří do sucha a odparek se rozetře s ethanolem, čímž se získá 1,1 g sloučeniny vzorce 13 ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 223 až 226 °C za rozkladu.

T NMR (DMSO) 7,26 (s, 1H), 4,76 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 4,67 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 4,43 (D, 1H, J = přibližně 4

Hz) ,	4,12 (d,	1H, J = 7,	6 Hz) , 3	,78-3,71 (m, 1H), 3	,45-
3,35	(m, 1H),	3,17-3,03	(m, 3H) ,	3,38-3,29 (m, 1H) ,	2,17
(d,	1H, J = 12	,4 Hz), 1,	67-1,49	(m, 5H), 1,45-0,80	(m,
17H)	, 0,99 (d,	3H, J = 5	,9 Hz),	0,76 (s, 3H), 0,75	(s,
3H) ,	0,65-0,53	(m, 1H);	IR (KBr)	3400, 2920, 2830,
1610	cm'¹; MS (	:-)ESI 495	(M-H).

Zastupuj e:

Claims

PATENTOVÉ

NÁROKY

1,. Pregnanglukuronid, kterým je 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
2. Pregnanglukuronid podle nároku 1, ve formě farmaceuticky přijatelné soli 20-glukuronidu .ze skupiny sůl alkalického kovu, sůl kovu alkalických zemin, amonná sůl, alkylamonná sůl o 1 až 6 atomech uhlíku v alkylové části, dialkylamonná sůl nebo trialkylamonná sůl vždy o 1 až 6 atomech uhlíku v každé alkylové části.
3. Pregnanglukuronid, kterým je 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo, jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
4. Pregnanglukuronid podle nároku 3, ve formě farmaceuticky přijatelné soli 20-glukuronidu ze skupiny sůl alkalického kovu, sůl kovu alkalických zemin, amonná sůl, alkylamonná sůl o 1 až 6 atomech uhlíku v alkylové části, dialkylamonná sůl nebo trialkylamonná sůl vždy o 1 až 6 atomech uhlíku v každé alkylové části.
5. Pregnanglukuronid, kterým je 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl s čistotou alespoň 1 %.
6. Pregnanglukuronid, kterým je 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl s čistotou alespoň 1 %.
7. Pregnanglukuronid, kterým je v podstatě 5alfa-

-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronid nebo . jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
8. Pregnanglukuronid, kterým je v podstatě 5alfa-

-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl. ....._
9. Pregnanglukuronid, tvořený v podstatě sodnou soli 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu.
10. Pregnanglukuronid, tvořený v podstatě sodnou soli 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronidu.
11. Farmaceutický prostředek, vyzná.čuj ici se t i m, že jako svou účinnou složku obsahuje 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s.. farmaceutickým nosičem.
12. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t i m, že jako svou účinnou složku obsahuje 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s farmaceutickým nosičem.
13. Farmaceutický prostředek podle nároku 11 nebo 12, vyznačující se tím, že dále obsahuje ještě účinnou látku ze skupiny estrogenů, progestogenů a androgenů.
14. Farmaceutický prostředek podle nároku 11,

v. yznačující se tím, že je tvořen v podstatě 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-

« ♦ « · • · · • · · · • a • « • · • • · • • • · ·*· ♦ • .· • · • • • • · • 4» • · · • ··♦ ···· • ·

--glukuronidem nebo jeho farmaceuticky přijatelnou soli a alespoň jedním farmaceutickým nosičem..
15. Farmaceutický prostředek podle nároku 12, vyznačující, se tím, že je tvořen v podstatě 5alfa-pregnan-3beta, 20R-diol-20-0-beta-D-glukuronidem nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí a alespoň jedním farmaceutickým nosičem.
16. Farmaceutický prostředek, vyznačující, se t i m, že obsahuje více než 1 % hmotnostní nebo více než 1 g/100 .ml 5alfa-pregnan-3beta, 20S, 21-triol-20Ό-běta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli spolu.s alesopň jedním farmaceutickým nosičem.
17. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se t i m, že obsahuje více než '1 % hmotnostní nebo více než 1 g/100 ml 5alfa-pregnan-3beta, 20R-diol-20-0beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli spolu s alespoň jedním farmaceutickým nosičem.
18. 5alfa-pregnan-3beta,20S, 21-triol-20-O-beta-Dglukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití k léčebným účelům u savců.
19. 5alfa-pregnan-3beta,20R-didl-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití k léčebným účelům u savců.
20. 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-0-beta-Dglukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití jako progestační činidlo.

• φ o Φ· • φ φ · φ φφφ φφφ φ φ φ φφφφ
21. 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití jako progestační činidlo.
22. 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-Dglukuronid nebo jeho .farmaceuticky přijatelná sůl pro. použití k léčení nebo inhibici nádorů, poruch centrálního nervového systému, demencí, nebo- Alzheimerovy ..choroby u. savců.
23. 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronid nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl pro použití k léčení nebo inhibici nádorů, poruch'· centrálního nervového systému, demencí, nebo Alzheimerovy choroby u savců.
24. Použití 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu farmaceutického prostředku pro použití jako progestační činidlo nebo pro léčení nebo inhibici nádorů, poruch centrálního nervového systému, demencí, nebo Alzheimerovy choroby u savců.
25 . Použití.5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu farmaceutického prostředku pro použití jako . progestační činidlo nebo pro léčení nebo inhibici nádorů, poruch centrálního nervového systému, demencí, nebo Alzheimerovy choroby u savců.
26. Způsob progestačního léčení u savců, vyznačující se tím, že se podává účinné množství 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.

• « • · ·· · • · · ♦ · · · • • • · • · • • · • • • · ··· · 4 a • · • a · ♦ • ··· • « · · ·· · · ·· '« ♦
27. Způsob progestačního léčení u savců, vyznačující se tím, že se podává účinné množství 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-0-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.
28. Způsob léčení nebo inhibice zhoubných nádorů, poruch centrálního nervového systému, demencí'nebo.Alzheimerovy choroby u savců, vyznačující se tím, že se podává účinné množství 5alfa-pregnan-3betá,20S,21-triol-ŽO-O-beta-D-glukuronidu- nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.. „
29. Způsob léčení nebo inhibice zhoubných . nádorů, poruch centrálního nervového systému, demencí nebo Alzheimerovy choroby u savců, vyznačující se tí m, 'že se podává účinné množství 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-O-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.
30. Způsob výroby 5alfa-pregnan-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že se nechá reagovat pregnenolon-3-acetát s tetraacetátem olova v kyselině octové za vzniku sloučeniny vzorce 2

• · * ·· ·· · • · • · · · • • • · • · • • 9 • • • · ··· · • · • · • • · • • • · • ·»· ··♦· « · • ·

která se pak hydrogenuje při použiti PtO₂ v kyselině octové za vzniku sloučeniny vzorce 3 která se pak zahřívá s přebytkem ekvivalentů sloučeniny vzorce 5

• « • ·· ·· • • · • · • · • ♦ • « • • • • • • · • • • ··· * • • • · · • • • • • • · • ·· • ··· · • « ···

která se pak zmýdelní a podrobí reprotonaci působením kyseliny za získání 5alfa-pregnan-3beta, 20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu, který se pak po případě převede na svou farmaceuticky přijatelnou sůl.
31. Způsob · výroby 5alf a-pregnan-3beta, 20R-diol- .. . .. -20-O-beta-D-glukuronidu, vyznačující se t i m, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 10 se sloučeninou vzorce 5 a s uhličitanem stříbrným za vzniku sloučeniny vzorce 11 která se pak zmýdelni a podrobí reprotonaci působením kyseliny za vzniku 5alfa-pregnan-3beta, 20R-diol-20-O-beta-D-glukuronidu, který se pak po případě převede na svou farmaceuticky přijatelnou sůl.
32. Způsob výroby monosodné soli 5alfa-pregnan- .. ____

-3beta,20S,21-triol-20-O-beta-D-glukuronidu, vyznačující se t i m, že :se uskuteční titrace s mírným přebytkem roztoku NaOH.

• · • Φ φ φφφ φ φφφφ φ φ φ φφφ φ

• ·· ·· 9 φφ φ Φ Φ • Φ Φ • Φ • • Φ φ · • Φ Φ Φ φ Φ Φ Φ • φφ» φφφφ ·· • Φ Φ
33. Způsob výroby monosodné soli 5alfa-pregnan-3beta,20R-diol-20-O-beta-D-glukuronidu vyznačující se t i m, že se uskuteční titrace s mírným přebytkem roztoku NaOH.