CZ20004845A3 - Sloučeniny odvozené od alfa-D-xylozy, způsob jejich přípravy, farmaceutický prostředek a terapeutické použití - Google Patents

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém X a Y představují navzájem na sobě nezávisle atom kyslíku nebo síry, R] znamená skupinu CN, CF3 nebo SO2CH3, a R znamená atom vodíku nebo alifatickou acylovou skupinu obsahující 2 až 5 atomů uhlíku. Způsob přípravy spočívá v reakci benzofenolové sloučeniny s D-xylosovou v rozpouštědle a v přítomnosti Lewisovy kyseliny. Je popsán farmaceutický prostředek a použití těchto látek pro přípravu antiateromatozního léčiva pro léčení aterosklerózy.

Description

Oblast vynálezu

Vynález se týká nových derivátů a-D-xylozy definovaných dále uvedeným obecným vzorcem I, které představují nové průmyslově využitelné produkty. Rovněž se předmětný vynález týká způsobu přípravy těchto sloučenin, farmaceutického prostředku a rovněž tak i terapeutického použití, zejména prostředků obsahujících tyto látky jako účinné složky.

Dosavadní stav techniky

Z dosavadního stavu techniky jsou již známy různé deriváty β-D-xylózy, zejména deriváty benzoyl- anebo a-hydroxy-benzyl-fenyl-p-D-xylosidů, které jsou doporučené pro použití v léčivech pro léčbu venózní trombózy, například podle EP-A-0051023.

Rovněž j sou z dosavadního stavu techniky známy deriváty benzyl-fenyl^-D-xylosidů, které projevují hypocholesterolemickou a/nebo hypolipidemickou aktivitu, podle EP-A-0133103.

Rovněž jsou z dosavadního stavu techniky známy deriváty typu β-D-fenylthioxylosidů, používané pro svou antitrombotickou aktivitu, podle EP-A-0365397,

EP-A-0290321, EP-A-0133103 a EP-A-0051023.

Antitrombotická aktivita určitého počtu derivátů β-D-xylózy byla také popsána a studována v publikaci J. Med. Chem. (36, (č. 7), 898-903, 1993). Výzkum prováděný v laboratoři prokázal, že tyto deriváty β-D-xylózy jsou dobrými substráty galaktosyltransferázy I. Z tohoto důvodu tyto sloučeniny, aktivní při perorální aplikaci, iniciují syntézu glykosaminoglykanů (GAG). Po podávání těchto sloučenin perorálně je znatelně zvýšen cirkulující podíl GAG a přibližně 20 % tohoto podílu projevuje aktivitu dermatansulfátového typu schopnou inhibovat trombin prostřednictvím HC II (kofaktor heparinu II), tato iniciace biosyntézy GAG je pravděpodobně zodpovědná za antitrombotickou aktivitu pozorovanou experimentálně u sloučenin dříve uvedených. V korelaci s potenciálem těchto sloučenin snižovat vytváření venózní trombózy, pouze deriváty D-xylózy s konfigurací β zvyšují syntézu GAG. Kromě toho bylo prokázáno, že další deriváty glykopyranosidového typu jsou na tomto poli inaktivní, jak z hlediska biologického, co se týče syntézy GAG, tak z hlediska farmakologického, co se týče redukce nebo prevence venózní trombózy.

Aktivita určitých derivátů β-D-xylozy, zejména estradiol- β-D -xylosidu, byla popsána v publikaci Journal of Biological Chemistry, 1991, 266, (No. 11), str. 6674-6677, přičemž autoři tohoto článku zjistili vzájemný vztah mezi uvedenou sloučeninou a biosyntézou heparansulfátu, a rovněž tak iniciační roli β-D-xylosidu při syntéze chondroitinsulfátu. Tyto studie potvrdili přínos derivátů β-S-xylozy při léčeni nebo prevenci venózní trombózy.

Podstata vynálezu

Podle předmětného vynálezu bylo navrženo nové technické řešení, které umožňuje dospět k novým produktům, které jsou biologicky přínosné pokud se týče arteriálních ateromatózních plátů.

Podle tohoto nového technického řešení podle vynálezu se používá produktů typu α-D-xylózy nebo a-D-thioxylózy.

Podle předmětného vynálezu bylo zcela neočekávatelné zjištěno, že deriváty D-xylózy nebo 5-thio-D-xylózy, které již nevykazují β-konfiguraci, ale α-konfiguraci na anomerním uhlíku, projevují zejména příznivý účinek pokud se týče prevence nebo regrese arteriálních ateromatózních plátů.

Tyto nové produkty podle předmětného vynálezu, které představují sloučeniny typu a-D-xylózy, jsou charakterizovány tím, že jsou zvoleny ze souboru sloučenin obecného vzorce I:

ve kterém:

X a Y představují navzájem na sobě nezávisle atom kyslíku nebo síry, znamená skupinu CN, CF^ nebo SC^CH^, a

R znamená atom vodíku nebo alifatickou acylovou skupinu obsahující 2 až 5 atomů uhlíku.

Podle dalšího aspektu se předmětný vynález týká prostředku, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství přinejmenším jedné sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I ve spojení s fyziologicky přijatelným excipientem.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží použití sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I jako antiateromatózního léčiva.

Jak je patrné z výše uvedeného obecného vzorce I, sloučeniny podle předmětného vynálezu představují deriváty α-D-xylózy nebo α-D-thioxylozy, substituované na anomerním uhlíku v α-poloze substituovanou benzofenonovou skupinou.

Hydroxylové funkce D-xylozy nebo D-thioxylozy mohou být volné nebo substituované acylovou skupinou obsahující 2 až 5 atomů uhlíku, ve výhodném provedení acetylovou skupinou.

V textu předmětného vynálezu se alifatickou acylovou skupinou obsahující 2 až 5 atomů uhlíku míní acylová skupina s přímým, rozvětveným nebo cyklizovaným řetězcem, jako je zejména CH₃CO, CH₃CH₂CO, (CH₃)₂CHCO, (CH₃)₃CCO nebo cyklopropyl-karbonylová skupina.

Tyto výše uvedené sloučeniny obecného vzorce I je možno připravit postupy, které jsou z dosavadního stavu techniky v tomto oboru běžně známé a používané. Ve výhodném provedení se benzofenon obecného vzorce II:

K—Y

(II!

• · · ·

ve kterém:

Y znamená atom kyslíku nebo síry, a

R-£ představuje skupinu CN, CF-j nebo SO2CH3, uvede do reakce (kopulační reakce) s D-xylozovou sloučeninou (nebo 5-thio-D-xylozovou sloučeninou) obecného vzorce III:

o—Z

OAc |

OAc ve kterém :

představuje vazbu neurčité konfigurace (α, β nebo α/β směsi),

X znamená atom kyslíku nebo síry,

Ac představuje acetylovou skupinu,

Z znamená acetylovou skupinu nebo trichlormethyliminovou skupinu [-C(=NH)-CCI3], přičemž se tato reakce provádí v rozpouštědle a v přítomnosti Lewisovy kyseliny, přičemž se po vyčištění získá sloučenina obecného vzorce I:

ve kterém :

X, Y a R-£ mají stejný význam jako ve výchozích produktech a

R znamená acetylovou skupinu.

Sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I, ve kterém • ·

R znamená atom vodíku, je možno získat z původních sloučenin, ve kterých R znamená acetylovou skupinu, působením bazické látky, jako je například methylát sodný nebo amoniak, která má schopnost nahradit acetylovou skupinu atomem vodíku.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R znamená acylovou skupinu obsahující 2 až 5 atomů uhlíku, které jsou definovány výše, je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce I, ve kterých R znamená atom vodíku, účinkem chloridu nebo anhydridu kyseliny odpovídající požadované acylové skupině obsahující 2 až 5 atomů uhlíku, v přítomnosti aprotického bazického činidla, jako je například triethylamin nebo pyridin, přičemž se tato reakce provádí v rozpouštědle, jako je například dichlormethan.

Ve stručnosti je možno uvést, že postup přípravy sloučenin podle předmětného vynálezu zahrnuje:

(a) kopulační reakci sloučeniny obecného vzorce II + sloučeniny obecného vzorce III a vyčištění takto získané sloučeniny obecného vzorce I (R znamená Ac), (b) v případě potřeby hydrolýzu (saponifikaci) uvedené sloučeniny obecného vzorce I (R znamená Ac) za účelem získání deacetylované sloučeniny obecného vzorce I (R znamená vodík), a (c) v případě potřeby esterifikaci uvedené sloučeniny obecného vzorce I (R znamená atom vodíku) za účelem získání libovolné jiné esterifikované sloučeniny obecného vzorce

I (R znamená acylovou skupinu, zejména acylovou skupinu odlišnou od Ac).

Tyto sloučeniny obecného vzorce I jsou výhodně použitelné v terapeutických prostředcích jako účinné složky • · · · ···· ·· léčiv určených pro léčení nebo prevenci atherosklerózy.

Podle předmětného vynálezu se doporučuje použití produktu vybraného ze skupiny zahrnující sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I pro přípravu antiateromatózních léčiv určených k použití v terapeutických prostředcích souvisících s aterosklerózou.

Výhodné produkty podle předmětného vynálezu, z hlediska přínosných vlastnosti souvisících s aterosklerózou, jsou sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I, ve kterém R^ znamená skupinu CN a z této skupiny zejména produkty, ve kterých X = Y = S nebo produkty, ve kterých X = Y = 0.

Příklady provedení vynálezu

V následujících příkladech je blíže objasněn předmětný vynález, zejména postup přípravy sloučenin podle vynálezu, ze kterých budou lépe patrné výhody vynálezu, přičemž ovšem tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah vynálezu.

Příklad 1

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-2,3,4-tri-0-acetyl-1,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu byla použita suspenze obsahující 5 gramů (15 . 10~³molů) tetra-O-acetyl-5-thio-D-xylopyranozy, 4,3 gramu (18 . 10 molů)

4-(4-merkaptobenzoyl)benzonitrilu a 5 gramů molekulového síta 4 Á, která byla připravena ve 100 mililitrech acetonitrilu, přičemž byly potom přidány 4 mililitry ·· ·* I · · • · ·»·· ·· etherátu fluoridu boritého (48 %, d = 1,13) při teplotě 0 °C za současného promíchávání. Takto získaná reakční směs byla potom ponechána tak, aby se teplota opět upravila na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu jedné hodiny. Takto získaná směs byla potom zfiltrována, načež byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a tento roztok byl potom promyt zředěným roztokem uhličitanu sodného a potom zředěným roztokem kyseliny chlorovodíkové a nakonec vodou až do dosažení neutrálního stavu. Organická fáze byla potom usušena a zkoncentrována za sníženého tlaku. Tento zbytek byl potom přečištěn chromatografíčky na silíkagelu, načež byl tento produktu eluován směsi toluenu a ethylacetátu (v objemovém poměru 6/1). Tímto způsobem bylo získáno 7 gramů požadované sloučeniny ve směsi s β-isomerem (tyto dva isomery jsou v poměru α/β = 60/40). Tato směs byla potom rozpuštěna v 15 mililitrech ethylacetátu, načež bylo přidáno 15 mililitrů ethyletheru. Takto získané krystalky (v podstatě β-isomer) byly odděleny odfiltrováním a filtrát byl zkoncentrován za sníženého tlaku. Tímto způsobem bylo získáno 5,4 gramu požadované sloučeniny obsahující 20% β-isomeru (výtěžek = 63%). Tato požadovaná sloučenina byla připravena o čistotě 98% ve formě α-isomeru po dvou rekrystalizacích z methanolu.

F = 144 - 146 'C, [cd²⁴D = +328° (c = 0,42; CH₂C1₂) .

Příklad 2

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-1,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto postupu byl použit roztok obsahující 2

10,27 gramu (20 . 10” ^J molů) sloučeniny získané postupem • · podle příkladu 1 ve 100 mililitrech methanolu a 35 mililitrech tetrahydrofuranu. Potom bylo k tomuto roztoku přidáno 1,15 mililitru (4 . 10'^ molů) roztoku methylátu sodného při teplotě v rozmezí od 10 do 15 °C.

Po 20 minutách, při kterých probíhalo promíchávání při teplotě v rozmezí od 10 do 15 °C, byla takto získaná reakční směs podrobena perkolaci na pryskyřici IR 120 (H⁺ forma). Získaný roztok byl odbarven za použití aktivního uhlíku, zfiltrován a zkoncentrován za sníženého tlaku. Tento zbytek byl potom podroben krystalizaci z methanolu. Po rekrystalizaci z methanolu bylo získáno 5 gramů požadovaného produktu ve formě bílých krystalků.

Výtěžek : 65%,

F = 142 °C, [oí]^2Od = +508° (c = 0,42; CH₃0H) .

Příklad 3

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-2,3,4-tri-0-acetyl-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu byla použita směs obsahující 9 -1 gramů (28,3 . 10 molů) tetra-O-acetyl-D-xylozy a 8 gramů a

(35,9 . 10 molů) 4-(4-hydroxybenzoyl)benzonitrilu, přičemž tato směs byla připravena v 90 mililitrech dichlormethanu. potom bylo po kapkách při teplotě místnosti přidáno 8 mililitrů (68,4.10 ^J molů) chloridu cíníčitého, načež bylo toto reakční médium zahřáto na teplotu 45 °C a při této teplotě bylo promícháváno po dobu 15 hodin. Získaná reakční směs byla potom nalita na led a zředěna kyselinou chlorovodíkovou, načež byla provedena extrakce ethylacetátem v kyselém médiu, potom byly spojené organické fáze promyty zředěným roztokem kyseliny chlorovodíkové a potom vodou, • · * » • · • v

načež následovalo zředění roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom vodou. Organická fáze byla potom usušena síranem hořečnatým a potom byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Takto získaný surový produkt byl potom přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, načež následovalo eluování za pomoci směsi toluenu a ethylacetátu (v objemovém poměru 5/1). Tímto způsobem bylo připraveno 3,3 gramu požadovaného produktu ve formě bílého prášku.

Výtěžek : 24%,

F = 75 °C, [a]²⁶D = +146,3° (c = 0,36; CH₃OH).

Příklad 4

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu bylo 4,3 gramu (8,94 . 10^ molů) sloučeniny připravené postupem podle příkladu 3 přidáno do 50 mililitrů nasyceného roztoku amoniaku v methanolu pří teplotě 0 °C, načež byla takto získaná směs udržována po dobu 2 hodin při teplotě 0 °C za míchání a potom po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Toto reakční médium bylo potom zkoncentrováno za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi diehlormethanu a methanolu (v objemovém poměru 10/1). Takto získaná čistá frakce byla zkoncentrována za účelem eliminování rozpouštědel, načež byl tento produkt převeden do formy suspenze v destilované vodě, takto připravená směs byla ztužena a vysušena vymrazováním. Tímto způsobem bylo připraveno 2,15 gramu požadovaného produktu ve formě rozdrceného bílého prášku.

Výtěžek : 67%,

F = 186 - 187 °C, [α]²⁶β = +155° (c = 0,40; CH₃OH).

Příklad 5

Postup přípravy [4(4-kyanobenzoyl)fenyl]-2,3,4-tri-0-acetyl1-thio-a-xylopyranosidu.

Postup podle tohoto příkladu byl prováděn obdobným způsobem jako postup v příkladu 3, přičemž jako výchozí látka byl použit 4-(4-merkaptobenzoyl)benzonitril, a požadovaný produkt byl získán ve formě bílé pevné látky. Výtěžek = 11%,

F = 158 - 159 C, [a]²⁶D = +161° (c = 0,38; CH₃0H).

Příklad 6

Postup přípravy [4(4-kyanobenzoyl)fenyl]-l-thio-a-D-xylopyranosidu.

Postup podle tohoto příkladu byl prováděn obdobným způsobem jako postup v příkladu 4, přičemž jako výchozí látka byl použita sloučenina podle příkladu 5 a požadovaný produkt byl získán ve formě krémově zbarveného prášku. Výtěžek : 90%,

F = 198 °C, [a]²⁶D = +245° (c = 0,30; CH₃0H).

Příklad 7

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-2,3,4-tri-0acetyl-5-thio-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu byla použita suspenze obsahující 2 gramy (9 . 10'^ molů) 4-(4-hydroxybenzoyl)benzonitrilu ve 40 mililitrech dichlormethanu, načež byl přidán 1 gram 4 Á * · • · molekulového síta a tato směs byla ochlazena na teplotu -30 °C. V dalším postupu bylo potom pomalým způsobem přidáno

O

1,8 mililitru (8.10 molů) triethylsilyltrifluormethan-sulfonátu za současného promíchávání této reakční směsi _ a a potom byl přidán roztok obsahující 3,9 gramu (9.10 molů) 2,3,4-tri-0-acetylo-5-thio-a-D-xylopyranosyltrichlor-acetimidátu ve 20 mililitrech dichlormethanu. Tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 4 hodin při teplotě -30 °C a potom po dobu 16 hodin při teplotě 0 °C. Po neutralizaci, která byla provedena za pomoci kolodinového roztoku, bylo toto reakční médium zfiltrováno. Oddělený filtrát byl zředěn 200 mililitry ethylacetátu a získaná organická fáze byla promyta roztokem zředěného uhličitanu sodného, potom vodou, potom bylo použito zředěného roztoku kyseliny chlorovodíkové, potom bylo provedeno promytí vodou a produkt byl usušen síranem hořečnatým. Po zkoncentrování tohoto roztoku za sníženého tlaku byl získaný zbytek přečištěn chromatografickým způsobem na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylcyklohexanu a ethylacetátu (v objemovém poměru 5/2). Tímto shora uvedeným postupem bylo připraveno 0,86 gramu požadovaného produktu ve formě béžové zbarveného prášku.

Výtěžek : 19%,

F = 85 °C, [a]²¹D = +366° (c = 0,3; CH₂C1₂).

Příklad 8

Postup přípravy [4-(4-kyanobenzoyl)fenyl]-5-thio-a-D-xylopyranosidu.

Postup podle tohoto příkladu byl prováděn obdobným způsobem jako postup v příkladu 4, přičemž jako výchozí látka byl použita sloučenina podle příkladu 7 a požadovaný • · » c · produkt byl získán ve formě béžové zbarveného prášku.

Výtěžek : 73%,

F = 180 °C, [a]²⁶D = +476° (c = 0,32; CH₃0H).

Příklad 9

Postup přípravy [4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-2,3,4-tri-0-acetyl-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu byl použit roztok obsahující a

2,5 gramu (což je 9,4 . 10 molů) (4-hydroxyfenyl)•3

-[4-(trifluormethyl)fenyl]methanonu a 3,5 gramu (11 . 10”^J molů) tetra-O-acetyl-D-xylózy ve 30 mililitrech acetonitrilu, načež byl přidán 1 gram molekulového síta 4 Á. Tato směs byla potom ochlazena na teplotu 0 °C a potom bylo pomalým způsobem po kapkách za současného promíchávání přidáno 7,2 mililitru (58 . 10^-2 molů) etherátu fluoridu boritého. Tato reakční směs byla potom zředěna ethylacetátem a organická fáze byla promyta roztokem zředěného roztoku uhličitanu sodného, potom vodou, dále bylo použito zředěného roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom opět vody. Po usušení takto získaného produktu na síranu hořečnatém byla organická fáze zkoncentrována za sníženého tlaku a získaný zbytek byl přečištěn chromatografickým způsobem na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylcyklohexanu a ethylacetatu (v objemovém poměru 5/2). Tímto způsobem bylo získáno 0,46 gramu požadovaného produktu ve formě amorfní béžové pevné látky.

Výtěžek : 10 %,

F = 65 °C, [a]²⁶D = +141° (c = 0,32; CH₂C1₂).

Příklad 10

Postup přípravy [4-(4-trifluormethyl)benzoyl]feny1-a-D-xylopyranosidu.

Podle tohoto příkladu bylo použito 0,370 gramu (0,7 . 10 ^J molu) sloučeniny získané postupem podle příkladu 9, přičemž tento podíl byl rozpuštěn ve 20 mililitrech methanolu a potom bylo přidáno 40 μΐ roztoku methylátu sodného v methanolu o koncentraci 25%. Tento roztok byl potom uchováván po dobu dvou hodin za míchání, načež bylo přidáno přibližně 0,5 gramu pryskyřice 120 IR v kyselé formě. Po zfiltrování byl získaný filtrát zkoncentrován za sníženého tlaku. Tímto shora popsaným způsobem bylo připraveno 240 miligramů požadovaného produktu ve formě béžové pevné látky.

Výtěžek : 85 %,

F = 188 °C, [a]²⁶D = +165° (c = 0,27; CH₃OH).

Příklad 11

Postup přípravy [4-[4-trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-2,3,4-tri-O-acetyl-5 -thi o-a-D-xylopyranosidu.

Postup podle tohoto příkladu byl prováděn obdobným způsobem jako je postup v příkladu 7, přičemž jako výchozí látky bylo použito (4-hydroxyfenyl)[4-(trifluormethyl)-fenyl]methanolu, přičemž tímto způsobem byla získána požadovaná sloučenina ve formě béžové amorfní pevné látky. Výtěžek ; 101%,

F = 188 °C, [a]²⁶D = +165° (c = 0,27; CH₃OH).

• » • ·

Příklad 12

Postup přípravy [4-[4-trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-5-thio-a-D-xylopyranosidu.

Postup podle tohoto příkladu byl prováděn obdobným způsobem jako postup v příkladu 10, přičemž jako výchozí látka byl použita sloučenina podle příkladu 11 a požadovaný produkt byl získán ve formě amorfního bíle zbarveného prášku.

Výtěžek : 80 %,

F = 82 °C, [a]²²D = +378° (c = 0,25; CH^OH).

Příprava I

Postup přípravy 0-[4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-esteru kyseliny dimethylkarbamothiové.

Podle tohoto postupu byl použit roztok obsahující 10 gramů (37,6 . 10“^ molů) (4-hydroxyfenyl)[4-(trifluor-methyl)fenyl]methanonu ve 100 mililitrech acetonu, přičemž k tomuto roztoku byl přidán roztok obsahující 2,94 gramu (45 . 10^-2 molů) hydroxidu sodného (80%) v 80 mililitrech vody za současného promíchávání při teplotě místnosti. Potom _ a byl přidán roztok obsahující 5,11 gramu (41,3 . 10 molů) dimethylthiokarbamoylchloridu v 70 mililitrech acetonu. Tato reakční směs byla potom udržována při teplotě místnosti po dobu 8 hodin za současného promíchávání, načež byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl potom umístěn do suspenze 60 mililitrů 1 mol/litr roztoku hydroxidu draselného a tento produkt byl promícháván po dobu 20 minut při teplotě v rozmezí od 10 do 15 “C. Získaná pevná látka byla potom zfiltrována, opláchnuta ve formě suspenze ve vodě do neutrální hodnoty pH, načež byla usušena • · re· * ·

v sušárně. Tímto způsobem bylo připraveno 10,3 gramu požadovaného produktu ve formě béžového prášku.

Výtěžek : 78 %,

F = 174 °C.

Příprava II

Postup přípravy S-[4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-esteru kyseliny dimethylkarbamothiové.

Podle tohoto postupu bylo 10,3 gramu (29 . 10 molů) sloučeniny získané postupem podle Přípravy I umístěno do nádoby pod atmosférou dusíku, načež byl tento produkt udržován při teplotě 250 až 260 °C po dobu 1 hodiny. Po ochlazení bylo přidáno přibližně 15 mililitrů ethylacetátu, načež byla tato směs přivedena k mírnému refluxu, potom byla ponechána ochladit na teplotu 0 °C. Po přibližně 10 hodinách, kdy byla tato směs udržována při uvedené teplotě, byla zkrystalizovaná pevná látka zfiltrována a pevný produkt byl potom opláchnut přibližně 10 mililitry cyklohexanu. Po usušení, v sušárně bylo získáno tímto shora popsaným způsobem 6,2 gramu požadovaného produktu ve formě béžových krystalků. Výtěžek : 60%,

F = 140 °C.

Příprava III

Postup přípravy (4-merkaptofenyl)-[4-(trifluormethyl)-fenyljmethanonu.

Podle tohoto postupu byla použita suspenze obsahuj ící -2

6,1 gramu (17,3 . 10”^J molů) sloučeniny získané postupem podle Přípravy II v 65 mililitrech methanolu. Po deoxygenaci tohoto média probubláváním dusíku tímto médiem bylo přidáno - *3 mililitrů (34.10 molu) roztoku methylátu sodného • « v methanolu. Potom byla teplota této reakční směsi zvýšena na 40 °C za současného promíchávání a při této teplotě byla udržována po dobu tří hodin. Potom bylo provedení parciální zkoncentrování (odstraněno bylo přibližně 25 mililitrů methanolu), což bylo provedeno za sníženého tlaku, a takto získaný roztok byl nalit do směsi ledu a zředěné kyseliny chlorovodíkové. Požadovaný produkt se tímto způsobem vysrážel. Tento pevný produkt byl oddělen odfiltrováním a promyt vodou až do dosažení neutrální hodnoty pH. Po usušení v sušárně bylo získáno 4,8 gramu požadovaného produktu ve formě čiré zelené pevné látky,

F = 150 C.

Příklad 13

Postup přípravy [4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-1-thio-2,3,4-tri-0-acetyl-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v příkladu 9, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny podle Přípravy III, a požadovaný produkt byl připraven ve formě béžové pevné látky.

Výtěžek : 27%,

F = 60 °C, [a]²²D = +145° (c = 0,25; CH₂C1₂).

Příklad 14

Postup přípravy [4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-1-thio-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v příkladu 10, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny podle příkladu 13, a požadovaný produkt byl připraven ve formě krémově zbarvené amorfní pevné látky.

Výtěžek : 95%,

F = 172 °C, [a]²⁴D = +211° (c = 0,35; CH₃OH).

Příklad 15

Postup přípravy [4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-2,3,4-tri-O-acetyl-l,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v příkladu 9, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito 1,2,3-tetra-0-acetyl-5-thio-D-xylózy a sloučeniny získané postupem podle Přípravy III, a požadovaný produkt byl připraven ve formě bílého pevného prášku.

Výtěžek : 18%,

F = 70 °C, [a]²⁴D = +215° (c = 0,45; CH₂C1₂).

Příklad 16

Postup přípravy [4-[4-(trifluormethyl)benzoyl]fenyl]-l,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v příkladu 10, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle příkladu 15, a požadovaný produkt byl připraven ve formě bílé práškovité pevné látky.

Výtěžek : 84%,

F = 104 °C, [a]²⁵D = +399° (c = 0,50; DMSO).

• · « ·

Příprava IV

Postup přípravy (4-hydroxyfenyl)[4-(methylsulfinyl)fenyl]-methanonu.

Podle tohoto postupu byl použit roztok obsahující 15 gramů (61,4 . 10 ^J molů) (4-hydroxyfenyl)[4-(methylthio)~

-fenyljmethanolu ve 200 mililitrech methanolu. Tento roztok byl ochlazen na teplotu přibližně 5 °C za pomoci ledové lázně, načež bylo přidáno 14,12 gramu (61,4 . 10 ^J molů) 3-chlor-benzenkarboperoxové kyseliny (mCPBA), přičemž tento přídavek byl proveden po částech s titrací 75%. Toto reakční médium bylo potom udržováno za míchání po dobu 15 minut po dokončení výše uvedeného přídavku, načež byla provedena hydrolýza za použití zředěného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Dále byla provedena extrakce za použití ethylacetátu, přičemž získaná fáze s produktem byla promyta vodou až do neutrálního stavu, potom byla usušena a zkoncentrována za sníženého tlaku. Tímto způsobem bylo získáno 13,2 gramu bílé pevné látky obsahujíc! požadovaný produkt ve směsi se (4-hydroxyfenyl)[4-(methylsulfonyl)-fenyl]methanolem.

Příprava V

Postup přípravy (4-hydroxyfenyl)[4-(methylsulfonyl)-fenyl]methanonu.

Podle tohoto postupu byla použita suspenze obsahující 13,2 gramu sloučeniny získané postupem podle Přípravy IV ve 150 mililitrech methanolu, načež bylo přidáno 11,7 gramu (50,8 . 103 molů) mCPBA, přičemž tento přídavek byl proveden po částech za současného promíchávání (s titrací 75%). Tato reakční směs byla potom udržována za míchání po dobu 30 minut, načež byla provedena hydrolýza za použití chladného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. V dalším postupu byla provedena extrakce za použití ethylacetátu, přičemž organická fáze byla promyta vodou až do neutrálního stavu, potom byla usušena a zkoncentrována za sníženého tlaku. Tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 13,6 gramu požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky.

Výtěžek : 97%,

F = 144 °C.

Příprava VI

Postup přípravy O-[4-[4-(methylsulfonyl)benzoyl]fenyl]-esteru kyseliny dimethylkarbamothiové.

Při provádění tohoto postupu se postupovalo podobným způsobem jako v případě Přípravy I, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle Přípravy V, a požadovaný produkt byl připraven ve formě béžové zbarvené pevné látky.

Výtěžek : 69%,

F = 150 °C.

Příprava VII

Postup přípravy S-[4-[4-(methylsulfonyl)benzoyl]fenyl]-esteru kyseliny dimethylkarbamothiové.

Při provádění tohoto postupu se postupovalo podobným způsobem jako v případě Přípravy II, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle Přípravy VI, a požadovaný produkt byl připraven ve formě béžové zbarvených krystalů.

Výtěžek : 91%,

F = 172 °C.

« « • · • » * « ·

• · • »

Příprava VIII

Postup přípravy (merkaptofenyl)[4-(methylsulfonyl)fenyl]-methanonu.

Při provádění tohoto postupu se postupovalo podobným způsobem jako v případě Přípravy III, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle Přípravy VII (za použití přídavku dimethylformamidu, k rozpuštění produktu) a požadovaný produkt byl připraven ve formě krémově zbarvené pevné látky.

Výtěžek : 95%,

F = 176 °C.

Příklad 17

Postup přípravy [4-[4-(methylsulfonyl)benzoyl]fenyl]-2,3,4-tri-O-acetyl-l,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v případě příkladu 15, přičemž, jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle Přípravy VIII, a požadovaný produkt byl připraven ve formě béžové zbarvené pevné látky.

Výtěžek : 31%,

F = 86 °C, [<x]²¹d = +293° (c = 0,44; DMSO).

Příklad 18

Postup přípravy [4-[4-(methylsulfonyl)benzoyl]fenyl]-l,5-dithio-a-D-xylopyranosidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo podobným způsobem jako v případě příkladu 10, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny « · získané postupem podle příkladu 17, a požadovaný produkt byl připraven ve formě světle žluté pevné látky.

Výtěžek : 90,5%,

F = 100 °C, [a]²⁶D = +381° (c = 0,58; DMSO).

Protiateromová aktivita sloučenin podle vynálezu byla demonstrována na myších samicích s deficitem apolipoproteinu E (homozygoti). Podle záznamu tohoto testu je testovaný produkt podáván v potravě (standardní dieta) po dobu 14 týdnů. Na konci pokusu myši podstoupily eutanázii a ze srdce a oblouku aorty byly odebrány histologické řezy. Poškozené oblasti byly vyhodnocovány podle způsobu popsaném v časopise Arteriosclerosžs, 10, 316-323, 19990).

Tabulka I ukazuje výsledky získané podle tohoto testu prováděného se sloučeninou z příkladu 2 v různých dávkách. Výsledky jsou vyjádřeny jako procento zmenšení poškozené oblasti aortického sinusu ve srovnání se skupinou neošetřovaných kontrolních myší.

TABULKA I

Podávaná dávka (mg/kg)	10	100	300
Redukce (%)	-32	-51	-71

Pro srovnání byla také testována sloučenina [4 - (4-kyanobenzoyl) fenyl] -1,5-dithio^-D-xylopyranosid , uváděná v EP-A-0 290 321. V dávce 300 mg/kg tato sloučenina zmenšuje poškozenou oblast o 30 %. Jak bylo ukázáno v tabulce I, stejný biologický výsledek je dosažen dávkou pouhých 10 mg/kg sloučeniny podle příkladu 2. To dokazuje převahu sloučeniny podle vynálezu v této aktivitě v případech, kdy je anomerní uhlík xylózy v konfiguraci a.

Během 14 týdnů testu popsaného výše, cíleného na vyhodnocení protiateromových vlastností sloučeniny, byla měřena sérová hladina cholesterolu ošetřených a kontrolních myší, a výsledek byl vyjádřen ve formě oblasti pod křivkou (AUC) cholesterolu v průběhu celkového trvání testu. Výsledky dosažené se sloučeninou z příkladu 2 jsou uvedeny v tabulce II, kde AUC představuje oblast pod křivkou (vyjádřená v g.den.l a odchylka (v procentech) je vyhodnocena ve vztahu ke kontrolní skupině.

TABULKA II

Dávka (mg/kg)	0 (kontrolní)	10	100	300
AUC	583 ± 23	585 ± 15	507 ± 16	505 ± 20
Změna (%)	-	0	-13	-13

Analýza pozorovaných hodnot odhalila účinek na snížení cholesterolu, který se v průběhu 14 týdnů objevil pouze u dávky 100 mg/kg, zatímco protiateromový účinek byl významný od dávky 10 mg/kg.

Ovšem z hlediska pravděpodobnosti korelace mezi pozorovanou protiateromovou aktivitou a kapacitou sloučeniny snižovat hladinu sérového cholesterolu, a ve snaze získat co nej rychleji výsledek testu, jak je jen možné, byly sloučeniny podle vynálezu vyhodnocovány podle svého potenciálu snížit cholesterolémii u myší vystavených dietě bohaté na tuky. Test byl prováděn podáváním sloučenin myším samicím kmene C57BL/6J. Protokol byl tento: první den (JO) myši hladověly od 9,00 do 17,00 hodin, ve 14,00 hodin byl odebrán vzorek krve. V 17,00 hodin bylo rozdáno určené množství potravy (tučná dieta obsahující 1,25 % cholesterolu a 0,5 % kyseliny cholové). Druhý den (JI) v 9,00 hodin byly zváženy zbytky jídla a myši hladověly od 9,00 do 14,00 hodin. Ve 14,00 hodin byl odebrán vzorek krve. Skupinám léčených myší byla sloučenina podávána sondou v suspenzí roztoku arabské gumy, ve 3 %, druhý den (JI) v 9,00 hodin. Kontrolní skupina dostala pouze arabskou gumu.

Sloučeniny byly testovány v dávce 100 mg/kg. Byl analyzován celkový sérový cholesterol a výsledky byly vyjádřeny jako procento inhibice zvýšené cholesterolémie ve srovnání s kontrolní skupinou. Získané výsledky jsou zaneseny do sloupce Aktivita v tabulce III. Kromě toho je možné pozorovat, že analýza obsahu cholesterolu v různých třídách sérových lipoproteinů odhalila prospěšný účinek produktu na poměr HDL-cholesterol/celkový cholesterol.

Sloučeniny obecného vzorce I podle předmětného vynálezu je možno podávat výhodně perorálně ve formě tablet nebo kapslí, přičemž každá z nich obsahuje 20 až 500 miligramů sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I jako aktivní léčivo ve spojení s excipienty. Dávkování je asi 1 až 4 dávky za den. Tyto produkty je možno předepisovat pro prevenci nebo léčení ateromatózního rizika.

Př.	R1	X	Y	R	účinnost (%)
1	CN	s	Q v-*	Ac	-40
2	CN	s	s	H	-38
3	CN	0	0	Ac	-46
4	CN	0	0	H	-39
5	CM	0	c	Ac	-41
6	CN	0	s	H	-38
7	CN	s	0	Ac	-26
8	CN	s	0	H	- 12
9	cf3	0	0	Ac	-
10	cf3	0	0	H	-5
11	cf3	s	0	Ac	-23
12	cf3	s	0	H	-7
13	cf3	0	s	Ac	-24
14	cf3	0	s	H	-26
15	cf3	s	s	Ac	- 17
16	cf3	c v-í	c	H	- 19
17	SO2CH3	s	s	Ac	-36
18	so2ch3	s	s	H	-

Claims (7)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. α-D-xylosová sloučenina vybraná ze skupiny sloučenin obecného vzorce I:

   R, ve kterém:

   X a Y představují navzájem na sobě nezávisle atom kyslíku nebo síry,

   R^ znamená skupinu CN, CF^ nebo SO2CH3, a R znamená atom vodíku nebo alifatickou acylovou skupinu obsahující 2 až 5 atomů uhlíku.
2. 2. α-D-xylosová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, ve které R^ znamená skupinu CN.
3. 3. α-D-xylosová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, ve které X = Y = S, a R^ znamená skupinu CN.
4. 4. α-D-xylosová sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, ve které X = Y = 0, a R-j znamená skupinu CN.
5. 5. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že (a) benzofenonová sloučenina obecného vzorce II:

   • · ve které;

   Y znamená atom kyslíku nebo síry, a R^ znamená skupinu CN, CFg nebo SC^CH j, se uvede do reakce s D-xylosovou sloučeninou obecného vzorce III :

   OAc |

   OAc ve kterém:

   X znamená tom kyslíku nebo síry,

   Ac znamená acetylovou skupinu, a Z znamená acetylovou skupinu nebo trichlormethyliminovou skupinu [-C(=NH)-CCI3], přičemž se tato reakce provádí v rozpouštědle a v přítomnosti Lewisovy kyseliny a po vyčištění se získá sloučenina obecného vzorce I;

   ve kterém;

   X, Y a mají stejný význam jako ve výchozích produktech, a

   R znamená acetylovou skupinu, (b) v případě potřeby se tato takto získaná sloučenina obecného vzorce I, ve které R znamená acetylovou skupinu, uvede do reakce s bazickou látkou za účelem nahrazení acetylové skupiny atomem vodíku, přičemž se získá sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R znamená atom vodíku, a (c) v případě potřeby se takto získaná sloučenina obecného vzorce I, ve které R znamená atom vodíku, uvede do reakce s chloridem kyseliny obsahující 2 až 5 atomů uhlíku nebo anhydridem alifatické alifatické kyseliny obsahující

   2 až 5 atomů uhlíku v přítomnosti aprotické bazické látky v rozpouštědle, za účelem získání sloučeniny obecného vzorce I, ve které R znamená acylovou skupinu.
6. 6. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje ve spojení s fyziologicky přijatelnou nosičovou látkou terapeuticky přijatelné množství přinejmenším jedné sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1.
7. 7. Použité produktu vybraného ze skupiny sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu antiateromatozního léčiva určeného pro použití v terapeutických činidlech v souvislosti s aterosklerózou.