CZ20003882A3 - Pyrazolpyrimidinové inhibitory CGMP PDE5 pro léčbu sexuálních dysfunkcí - Google Patents

Abstract

Vynález popsuje sloučeniny vzorce (IA) a (IB), kde R1 je Cr C3alkyl volitelně substituovaný fenylem, Het nebo N-vázanou heterocyklickou skupinou vybranou z piperidinylu a morfolinylu; kde uvedená fenylová skupina je volitelně substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny skládající se z následujících skupin: CrC4alkoxy; halogen; CN; CF3; OCF3 nebo Ci-C4alkyl, kde uvedená Ci-C4 alkylová skupina je volitelně substituovaná Ci-C4 halogenalkylovou nebo C]-C4 halogenalkoxylovou skupinou, které mohou být obě substituované jedním nebo více atomy halogenu; R2 je C)-C4alkyl a R13 je OR3 nebo NR5R6; nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli uvedené sloučeniny nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvátů každé sloučeniny, které jsou účinnými a selektivními inhibitory cyklické guanosin 3',5'-monofosfátfosfodiesterásy typu 5 (cGMP PDE5) a které jsou použitelné pro léčbu, mimo jiné, mužské erektilní dysfunkce (MED) a ženské sexuální dysfunkce (FSD).

Description

Pyrazolpyrimidinové inhibitory cGMP PDE5 pro léčbu sexuálních dysfunkcí

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká série pyrazol[4,3-d]pyrimidin7-onů, které inhibují cyklické guanosin 3',5'-monofosfat fosfodiesterasy (cGMP PDE). Přesněji, sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou účinnými a selektivními inhibitory cyklické 3',5'-monofosfat - fosfodiesterasy 5, typu (cGMP PDE5) a jsou proto použitelné v mnoha terapeutických oblastech.

Dosavadní stav techniky

Tyto sloučeniny mohou být použity pro léčbu erektilní dysfunkce u mužů (MED) a sexuální dysfunkce u žen (FSD), ale je jasné, že mohou být použity také pro léčbu jiných onemocnění, u kterých je indikováno podání selektivního inhibitoru cGMP PDE5, Mezi taková onemocnění patří předčasný porod, dysmenorhea, benigní hyperplasie prostaty (BPH), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalova) angína pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavé srdeční selhání, atherosklerosa, stavy související se sníženou průchodností cév, například po perkutánní transluminální koronární angioplastice (po PTCA), onemocnění periferních cév, mrtvice, bronchitida, alergické asthma, chronické asthma, alergická rhinitis, glaukom a onemocnění charakterizovaná poruchou střevní motility, jako je například syndrom dráždivého tračníku (IBS).

Dalšími stavy jsou preeklampsie, Kawasakiho syndrom, tolerance na nitráty, roztroušená sklerosa, periferní diabetická neuropatie, mrtvice, Alzheimerova nemoc, akutní respirační selhání, psoriasa, nekrosa kůže, nádory, metastasy, plešatost, onemocnění jícnu, anální fissura a hypoxická vazokonstrikce.

Zejména významnými stavy jsou MED a FSD.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje sloučeniny vzorce (IA) a (IB)

nebo jejich farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné solvaty každé skupiny, kde

R¹ je C1-C3 alkyl volitelně substituovaný fenylem, Het nebo N-vázanou heterocyklickou skupinou vybranou z piperidinylu a morfolinylu; kde uvedená fenylová skupina je volitelně substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny skládající se z následujících skupin: Ci~C4alkoxy; halogen; CH; CF3; OCF3; a Ci-C4alkyl, kde uvedená Ci-C4alkylová skupina je volitelně substituovaná Ci-C4halogenalkylovou nebo Ci-C4halogenalkoxylovou skupinou, které mohou být obě substituované jedním nebo více atomy halogenu;

R² je Ci-C6alkyl;

R¹³ je OR³ nebo NR⁵R⁶;

R³ je Ci-C6alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybraný ze skupiny zahrnující následující skupiny: C3-Cscykloalkyl; OH; Ci-C4alkoxy; benzyloxy; NR⁵R⁶; fenyl; furanyl; a pyridinyl; C3-Cecykloalkyl; l-(CiC4alkyl)piperidinyl; tetrahydrofuranyl nebo tetrahydropyranyl; a kde Ci-C6alkylová a Ci-C4alkoxylová skupina mohou být volitelně zakončeny halogenalkylovou skupinou, jako je CF3;

R⁴ je SO₂NR⁷R⁸;

R⁵ a R⁶ jsou každý nezávisle vybrány z H a Ci-C4alkylu volitelně substituovaného C3-C5cykloalkylovou nebo CiC4alkoxylovou skupinou; nebo tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, azetidinylovou, pyrrolidinylovou, piperidinylovou nebo morfolinylovou skupinu;

8

R a R tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, 4-R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více Ci-C4alkylovými skupinami a volitelně ve formě 4-N-oxidu;

R¹⁰ je H; Ci-C4alkyl volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými z následujících skupin: OH; NR⁵R⁶; CONR⁵R⁶; fenyl volitelně substituovaný Ci-C4alkoxy skupinou; benzodioxolyl; a benzodioxanyl; C3-C6alkenyl; pyridinyl nebo pyrimidinyl; a

Het je C-vázaná 6-členná heterocyklická skupina obsahující jeden nebo dva atomy dusíku, volitelně ve formě svého N-oxidu, nebo C-vázaná 5-členná heterocyklická skupina obsahující dva nebo tři atomy dusíku, kde každá z uvedených heterocyklických skupin je volitelně substituovaná Ci-C4alkylem; Ci-C4alkoxyskupinou nebo NHR¹⁵, kde R¹⁵ je H, Ci-C4alkyl nebo Ci-C4alkanoyl.

Ve výše uvedené definici, pokud není uvedeno jinak, mohou být alkylové, alkoxylové a alkenylové skupiny obsahující tři nebo více atomů uhlíku a alkanoylové skupiny obsahující čtyři nebo více atomů uhlíku, přímé nebo rozvětvené. Termín atom halogenu označuje atom Cl, Br, F a I. Halogenalkylová a » · · · · · halogenalkoxylová skupina jsou výhodně CF3 a OCF3, v příslušném pořadí.

Sloučeniny vzorce (IA) a (IB) mohou obsahovat jedno nebo více chirálních center a proto mohou existovat jako stereoizomery, tj. enantiomery nebo diastereomery, stejně jako směsi uvedených sloučenin. Vynález zahrnuje jak jednotlivé stereoizomery sloučenin vzorce (IA) a (IB), tak jakékoliv jejich směsi. Štěpení diastereoizomerů může být provedeno pomocí běžných technik, jako je například trakční krystalizace nebo chromatografie (včetně HPLC) diastereoizomerické směsi sloučenin vz.orce (IA) nebo (IB) nebo jejich vhodných solí nebo derivátů. Jednotlivý enantiomer sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) může být připraven z příslušného opticky čistého meziproduktu nebo pomocí štěpení, buď HPLC racemické směsi za použití vhodného chirálního nosiče, nebo, pokud je to výhodné, frakční krystalizaci diastereoizomerických solí vzniklých reakcí racematu s vhodnou opticky aktivní kyselinou nebo baží.

Sloučeniny vzorce (IA) a (IB) mohou také existovat v tautomerních formách a vynález zahrnuje jak jejich směsi, tak jednotlivé tautomery.

Vynález také zahrnuje radioaktivně značené deriváty sloučenin vzorce (IA) a (IB), které jsou vhodné pro biologické studie.

Farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli sloučenin vzorce (IA) a (IB), které obsahují bazické centrum, jsou například netoxické adiční soli s kyselinami tvořené s anorganickými kyselinami, jako je například kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová a fosforečná, s karboxylovými kyselinami nebo s organo-sulfonovými • * kyselinami. Sloučeniny vzorce (IA) a (IB) mohou také vytvářet farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli kovů, zejména netoxické soli alkalických kovů, s bázemi. Příklady jsou sodné a draselné soli.

Výhodnou skupinou sloučenin vzorce (IA) a (IB) jsou ty sloučeniny, kde R¹ je Ci-C2alkyl volitelně substituovaný Het;

2-(morfolin-4-yl) ethyl nebo benzyl; R² je C2-C4alkyl; R¹³ je OR³ nebo NR⁵R⁶; R³ je Ci-C4alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými z následujících skupin: cyklopropyl, cyklobutyl, OH, methoxy, ethoxy, benzyloxy, NR⁵R⁶; fenyl; furan-3-yl; pyridin-2-yl a pyridin-3-yl; cyklobutyl; 1methylpiperidin-4-yl; tetrahydrofuran-3-yl nebo tetrahydropyran-4-yl; R⁵ a R⁶ jsou každý nezávisle vybrány ze skupiny skládající se z H a Ci-C4alkylu volitelně substituovaného cyklopropylovou nebo methoxy skupinou, nebo tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, azetidinylovou, pyrrolidinylovou nebo morfolinylovou skupinu;

R⁷ a R⁸ tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, 4-R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více methylovými skupinami a volitelně ve formě 4-N-oxidu; R¹⁰ je H, Ci-C3alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými z následujících skupin: OH, NR⁵R⁶; CONR⁵R⁶; fenyl volitelně substituovaný methoxy skupinou, benzodioxol-5-ylem a benzodioxan-2-ylem; allyl; pyridin-2-yl; pyridin-4-yl nebo pyrimidin-2-yl; a Het je vybrán z následujících skupin: pyridin-2-yl; l-oxidopyridin-2-yl; 2-methylpyridin-2-yl; 6methoxypyridin-2-yl; pyridazin-3-yl; pyrimidin-2-yl a 1methylimidazol-2-yl.

Výhodnější skupinou sloučenin vzorce (IA) a (IB) jsou ty sloučeniny, kde R¹ je Ci-C2alkyl volitelně substituovaný Het;

• · · · · · • · · • · · • · · · · »

13

2- (morfolin-4-yl)ethyl nebo benzyl; R je C2-C4alkyl; R je OR³; R³ je Ci-C4alkyl volitelně monosubstituovaný skupinou vybranou z následujících skupin: cyklopropyl, cyklobutyl, OH, methoxy, ethoxy, fenyl; furan-3-yl nebo pyridin-2-yl; cyklobutyl; tetrahydrofuran-3-yl nebo tetrahydropyran-4-yl; R⁷ a R tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány,

4- R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více methylovými skupinami a volitelně ve formě 4-Noxidu; R¹⁰ je Ci-C3alkyl volitelně monosubstituovaný OH; a Het je vybrán z následujících skupin: pyridin-2-yl; 1oxidopyridin-2-yl; 6-methoxypyridin-2-yl; pyridazin-3-yl; pyrimidin-2-yl a l-methylimidazol-2-yl.

Zejména výhodnými jednotlivými sloučeninami podle předkládaného vynálezu jsou:

3- ethyl-5-[2-(2-methoxy)-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

3-ethyl-5-[5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5- [2-(2-methoxyethoxy)-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

(+)-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy1(R)-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

• · · ·

3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy1(R)-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-(6-methylpyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3ethyl-2-(6-methoxypyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[2-i-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]2,3-diethyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on; a 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3ethyl-2-[1-(pyridin-2-yl)ethyl]-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3d]pyrimidin-7-on.

V dalším aspektu předkládaného vynálezu jsou obsaženy sloučeniny vzorce (IA) a (IB) jak byly definovány výše, kde R¹ není nesubstituovaný Cialkyl; volitelný substituent na Ci alkylové skupině není substituovaná fenylová skupina nebo Nvázaná heterocyklická skupina; volitelný substituent na C2 nebo C3 alkylové skupině R¹ není fenyl nebo Het; nebo kde R¹³ není NR⁵R⁶; nebo kde alkylová skupina R³ není C5 nebo C6; nebo kde β

volitelný substituent na R není C3-C5 cykloalkyl; neb kde ani alkylové, ani volitelné alkoxylové substituenty na R nejsou zakončeny halgenalkylovou skupinou; nebo kde Ci-C₄alkylové skupiny R⁵ a R⁶ nejsou substituované C3~C5cykloalkylem ani CiC4alkoxylovouo skupinou; nebo kde Ci-C4alkylové skupiny R⁵ a R⁶ netvoří, spolu s atomem dusíku, na který jsou navázány, azetidinylovou skupinu; nebo kde Het není Ci-C4alkoxylová ani NHR¹⁵ skupina.

V dalším aspektu předkládaný vynález obsahuje způsob přípravy sloučenin vzorce (IA) a (IB), jejich farmaceuticky a veterinárně přijatelných solí a farmaceuticky a veterinárně přijatelných solvatů, který je popsán dále.

• ·

Odborníkům v oboru bude jasné, že v některých popsaných způsobech se může pořadí stupňů syntézy lišit a závisí mimo jiné na faktorech jako je charakter dalších funkčních skupin přítomných na určitém substrátu, dostupnosti klíčových meziproduktů a použité strategii pro chránění skupin (pokud je použita). Je jasné, že takové faktory budou také ovlivňovat volbu činidel použitých v daných stupních syntézy.

Ilustrací použití chránících skupin je příprava 2¹-(2hydroxyethoxy) analogu (příklad 33), jehož prekursor (příklad 32) obsahuje benzyl jako chránící skupinu pro alkohol.

Je třeba si také uvědomit, že různé standardní substituenty nebo interkonverze a transformace funkčních skupin v některých sloučeninách vzorce (IA) a (IB) povedou k zisku jiných sloučenin vzorce (IA) a (IB). Příklady jsou alkoxidový přesmyk ve 2-pozici 5-(pyridin-3-yl) substituentu (viz konverze příkladu 1 na příklady 4B, 9, 11, 13, 23, 24, 32 a 64, příkladu 2 na příklad 14, příkladu 20 na příklad 21, příkladu 26 na příklady 29, 65, 66, 67 a 68, příkladu 35 na příklad 36, příkladu 38 na příklady 39 a 40, a příkladu 45 na příklad 46), aminový přesmyk ve 2-pozici 5-(pyridin-3-yl) substituentu (viz konverze příkladu 78 na příklady 148 a 154) a N-oxidace piperazinu a/nebo pyridinu (viz konverze příkladu 1 na příklad 70, příkladu 28 na příklad 71 a příkladu 4 na příklady 72 a 73) .

Následující způsob ilustruje obecný postup syntézy, který může být použit pro přípravu sloučenin podle předkládaného vynálezu.

může být připravena ze v příslušném pořadí:

1, Sloučenina vzorce (IA) nebo (IB) sloučeniny vzorce (IIA) nebo (IIB),

(ΠΑ) (ΠΒ) kde Y je halogen, výhodně chlor, a R¹, R² a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB), reakcí se sloučeninou vzorce (III):

R⁷R⁸NH (III)

8 kde R a R jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB).

Reakce je obvykle provedena při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně teploty okolí, výhodně za přítomnosti vhodného rozpouštědla, jako je Ci-C3alkanol nebo dichlormethan, za použití nadbytku (III) nebo jiné vhodné baze, jako je triethylamin, pro vychytávání kyselého vedlejšího produktu reakce (HY).

Výhodně je tato reakce sama o sobě vhodná pro syntézu analogu s vysokou rychlostí (HSAS), jak je uvedeno v příkladech 203-212, ve kterých reaguje určitá sloučenina vzorce (IIB) s různými snadno dostupnými aminy vzorce (III).

Sloučenina vzorce (IIA) nebo (IIB) může být připravena ze sloučeniny vzorce (IVA) nebo (IVB), v příslušném pořadí:

• · · ·

(IVA) * » · ·

(IVB)

2 13 kde R , R a R jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IIA) a (IIB), za použití známých metod pro konverzi amino- skupiny na SO2Y skupinu, kde Y je také stejný, jak byl definován výše pro vzorce (IIA) a (IIB). Například, pokud je Y chlor, tak je reakce provedena za použití 2-násobného nadbytku dusitanu sodného ve směsi koncentrované kyseliny chlorovodíkové a ledové kyseliny octové při teplotě od -25 °C do 0 °C a potom reakcí s nadbytkem kapalného oxidu siřičitého a roztoku obsahujícího přibližně 3-násobný nadbytek chloridu měďnatého ve vodném roztoku kyseliny octové při teplotě od přibližně -15 °C do přibližně teploty okolí. Pokud obsahuje R¹³ primární nebo sekundární amino-skupinu, tak je obvykle výhodné chránění uvedené amino-skupiny skupinou stabilní vůči kyselinám, jako je acetyl nebo benzyl.

Sloučenina vzorce (IVA) nebo (IVB) může být připravena cyklizací sloučeniny vzorce (VA) nebo (VB), v příslušném pořadí:

(VA)

(VB) • · · * · « · · · · · • · · · · · · · * • · · ·> · ··· ·· ♦ · « · · · · ···· «· «· ··· «·· » · · ·

2 13 kde R , R a R jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IVA) a (IVB). Výhodně je cyklizace zprostředkována působením baze, za použití soli stericky omezeného alkoholu nebo aminu s alkalickým kovem. Například může být požadovaná cyklizace provedena za použití přibližně 1,5- až 5-násobného, lépe 3- až 5-násobného nadbytku t-butoxidu draselného nebo bis(trimethylsilyl)amidu draselného, volitelně za přítomnosti molekulových sít, ve vhodném rozpouštědle při teplotě zpětného toku reakční směsi, nebo případně v uzavřené zkumavce při teplotě přibližně 100 °C. Pokud je R¹³ OR³ a jako rozpouštědlo je vybrán alkohol, tak může být použit alkohol vzorce R³OH pro zamezení vzniku potenciálních problémů spojených s alkoxidovým přesmykem ve 2-pozici pyridinového kruhu.

Sloučenina vzorce (VA) nebo (VB) může být připravena redukcí sloučeniny vzorce (VIA) nebo (VIB), v příslušném pořadí:

(VIA)

H,NO(

N—R¹ (VIB) kde R¹, R² a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (VA) a (VB), za použití běžných katalytických postupů nebo postupů katalytické hydrogenace. Obvykle je hydrogenace provedena za použití Raneyho niklu jako katalyzátoru nebo za použití palladiového katalyzátoru, jako je 10% Pd na uhlíku, ve vhodném rozpouštědle, jako je ethanol, při tlaku vodíku od přibližně 345 kPa (50 psi) do přibližně 414 kPa (60 psi) při teplotách od přibližně teploty okolí do přibližně 60 °C, výhodně při teplotách od přibližně 40 °C do přibližně 50 °C.

• · · ·

Sloučenina vzorce (VIA) nebo (VIB) může být připravena reakcí sloučeniny vzorce (VIIA) nebo (VIIB), v příslušném pořadí:

kde R¹ a R² jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (VIA) a (VIB), se sloučeninou vzorce (VIII):

co₂h no₂ (Vlil) kde R¹³ je také stejný, jak byl definován výše pro vzorce (VIA) a (VIB). Opět je, jako pro (IVA) a (IVB), výhodné použití běžné strategie pro chránění aminové skupiny pro (VIII), pokud R obsahuje primární nebo sekundární amino- skupinu.

Kopulační reakce může být provedena za použití běžný technik pro tvorbu amidové vazby, například přes acylchloridový derivát (VIII) za přítomnosti až přibližně 5násobného nadbytku terciárního aminu, jako je triethylamin nebo pyridin, který působí jako činidlo vychytávající kyselí vedlejší produkt reakce (HY), volitelně za přítomnosti katalyzátoru, jako je 4-dimethylaminopyridin, ve vhodném rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě od 0 °C do • · · · přibližně teploty okolí. Výhodně je jako rozpouštědlo použito pyridinu.

Konkrétně, může být použito jakékoliv varianty kopulační reakce aminokyselin. Například, kyselina vzorce (VIII) nebo její vhodná sůl (například sodná sůl) může být aktivována za použití karbodiimidu jako je 1,3-dicyklohexylkarbodiimid nebo l-ethyl-3-(3-dimethylaminoprop-l-yl)karbodiimidu, volitelně za přítomnosti 1-hydroxybenztriazolhydratu a/nebo katalyzátoru jako je 4-dimethylaminopyridin, nebo za použití halogentrisaminofosfoniové soli jako je bromtris(pyrrolidino)fosfoniumhexafluorfosfat nebo za použití vhodné pyridiniové soli jako je 2-chlor-l-methylpyridiniumjodid. Každý typ kopulační reakce je proveden ve vhodném rozpouštědle, jako je dichlormethan nebo tetrahydrofuran, volitelně za přítomnosti terciálního aminu jako je N-methylmorfolin nebo Nethyldiisopropylamin (například tehdy, je-li buď sloučenina vzorce (VIIA) nebo (VIIB), nebo aktivační činidlo, přítomno ve formě adiční soli s kyselinou), při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně teploty okolí. Výhodně se použije od 1 do 2 molekulárních ekvivalentů aktivačního činidla a od 1 do 3 molekulárních ekvivalentů jakéhokoliv terciálního aminu.

V další variantě může být skupina karboxylové kyseliny sloučeniny vzorce (VIII) nejprve aktivována za použití až přibližně 5% nadbytku činidla jako je N,N'-karbonyldiimidazol ve vhodném rozpouštědle, jako je ethylacetát nebo butan-2-on, při teplotě od přibližně teploty okolí do přibližně 80 °C, a potom následuje reakce imidazolidového meziproduktu buď s (VIIA) nebo (VIIB) při teplotě od přibližně 20 °C do přibližně 90 °C.

• · · ·

4) · » ·

2, Alternativní, obecně použitelný způsob syntézy sloučenin vzorce (IA) a (IB) využívá inkorporaci R⁴ substituentu v časnějších stupních syntézy.

Tak mohou být sloučeniny vzorce (IA) a (IB) připraveny cyklizací sloučenin vzorců (IXA) a (IXB), v příslušném pořadí:

kde R¹ ,R², R¹³ a R⁴ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB), analogicky s dříve popsanou cyklizací sloučenin vzorce (VA) a (VB).

Alternativními reakčními podmínkami je provedení reakce s přibližně 1,2 až 4 molekulárními ekvivalenty stericky omezené baze v uzavřené zkumavce při teplotě od přibližně 100 °C do přibližně 120 °C, místo alkoholu vzorce R³OH použití stericky omezeného alkoholu, například 3-methylpentan-3-olu, jako rozpouštědla s přibližně 1,5 až 4,5 molekulárními ekvivalenty stericky omezené baze, jako je t-butoxid draselný nebo KHMDS, a volitelně v uzavřené zkumavce při teplotě od přibližně 120 °C do přibližně 150 °C.

Sloučeniny vzorce (IXA) a (IXB) mohou být připraveny rekcí sloučenin vzorců (VIIA) a (VIIB), v příslušném pořadí, kde R¹ a R² jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IXA) a (IXB), se sloučeninou vzorce (X):

• · · ·

Jx.CO₂H (X) kde R¹³ a R⁴ jsou také stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IXA) a (IXB), analogicky s reakcí (VIIA) nebo (VIIB) s deriváty kyseliny nikotinové vzorce (VIII), které již byly popsány. Sloučeniny obecného vzorce (X) mohou být připraveny přímo ze sloučenin obecného vzorce (VIII) redukcí a následnou konverzí na R⁴, jak bylo podrobněji popsáno výše.

3, Jak bylo zmíněno výše, některé sloučeniny vzorce (IA) a (IB) mohou být přeměněny indukcí alkoxidového přesmyku nebo substitucí ve 2-pozici 5-(pyridin-3-yl) substituentu.

(i) Pokud je R¹³ OR³, tak může být toto provedeno reakcí vhodného alkoholu se solí stericky omezeného alkoholu nebo aminu s alkalickým kovem, za vzniku požadovaného alkoxidového aniontu, který potom reaguje se substrátem. Obvykle se ve dvoustupňovém procesu zahřeje směs přibližně 5 až 8 molekulárních ekvivalentů bis(trimethylsilyl)amidu draselného a vybraného alkoholu na teplotu přibližně 80 - 100 °C na dobu přibližně 0,5-1 hodiny a potom se provede adice sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) a reakční směs se zahřívá při teplotě přibližně 100 až 120 °C. Alternativně může, v jednostupňovém procesu, reagovat substrát přímo - ve vybraném alkoholu jako rozpouštědle - s přibližně 1,2 až 6, lépe přibližně 4 až 6, molekulárními ekvivalenty například bis(trimethylsilyl)amidu draselného nebo t-butoxidu draselného, při teplotě přibližně 80 °C až 130 °C. Další varianty využívají vybraného alkoholu • · · · jako rozpouštědla, které je nasyceno amoniakem, při teplotě přibližně 100 °C z uzavřené zkumavce.

(ii) Pokud je R¹³ NR⁵R⁶, tak může substrát reagovat s nadbytkem R⁵R⁶NH nebo s jeho vhodnou adiční solí s kyselinou, za přítomnosti nadbytku stericky omezeného aminu ve vhodném rozpouštědle. Obvykle je R⁵R⁶NH použit jako volná baze s přibližně 3-násobným nadbytkem (vůči substrátu) bis(trimethylsilyl)amidu draselného (KHMDS) v dimethylformamidu (DMF) jako rozpouštědle při teplotě přibližně 100 °C. Alternativně může být nadbytek R⁵R⁶NH použit jako rozpouštědlo a reakce může být provedena za přítomnosti přibližně 50% nadbytku síranu měďnatého při teplotě do teploty zpětného toku reakčního media. Pokud je vybraným aminosubstituentem na sloučenině vzorce (IA) nebo (IB) -NR⁵R⁶ a jeden z R⁵ nebo R⁶ je H, tak může být substituční reakce provedena zahříváním při teplotě zpětného toku s vhodným aminem a penta- nebo hexahydratem síranu měďnatého nebo KHDMS v DMF. Obvykle jsou pro substituce OR³ skupiny za alternativní aminy vzorce NHR⁵R⁶, jak je tomu například u sloučenin, kde jsou R⁵ a R⁶ vybrány z alifatických nebo cyklických aminů, volitelně obsahujících kyslík, reakce výhodně provedeny reakcí s vhodným aminem a přibližně 3 ekvivalenty bis(trimethylsilyl)amidu draselného v DMF během přibližně 18 hodin při teplotě 100 °C. ^{4 * * * * * *}

4, Je jasné, že pro některé sloučeniny vzorce (IA) a (IB), kde

R¹³ je OR³, může být, za použití cyklizace a alkoxidového přesmyku popsaného výše, výhodné připravit sloučeniny vzorce (IA) a (IB) ze sloučenin vzorce (IXA) nebo (IXB), v příslušném pořadí, kde 2-alkoxy skupina 5-(pyridin-3-yl) substituentu první sloučeniny je odlišná od skupiny ve druhé sloučenině, přímo v jedné reakční nádobě.

Pokud je alkohol, který je použit pro dodání nové 2-alkoxy skupiny, příliš vzácný nebo nákladný proto, aby byl použit jako reakční rozpouštědlo, může být výhodné použití vhodné alternativy, jako je 1,4-dioxan.

5, Další obecně použitelný způsob syntézy sloučenin vzorce (IA) a (IB) obsahuje vložení R¹ substituentu v konečném stupni syntézy.

Tak mohou být sloučeniny vzorce (IA) a (IB) připraveny alkylací sloučenin vzorců (IA) a (IB) , kde R¹ je vodík a R², R¹³ a R⁴ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB) , za použití mnoha v oboru známých metod, jako je:

(i) reakce se sloučeninou vzorce R³X, kde R¹ je stejný, jak byl definován výše pro vzorce (IA) a (IB) , a X je vhodná odštěpitelná skupina, například halogen (výhodně chlor, brom nebo jod), Ci-C₄alkansulfonyloxy, trifluormethansulfonyloxy nebo arylsulfonyloxy (jako je například benzensulfonyloxy nebo p-toluensulfonyloxy skupina), za přítomnosti vhodné baze, volitelně za přítomnosti jodidu sodného nebo jodidu draselného, při teplotách od přibližně -70 °C do přibližně 100 °C. Výhodně je alkylace provedena při teplotách od teploty okolí do 80 °C. Vhodné kombinace baze-rozpouštědlo mohou být vybrány z:

(a) uhličitanu sodného, draselného nebo česného, hydrogenuhličitanu sodného nebo draselného nebo terciálního aminu jako je triethylamin nebo pyridin, spolu s CiC4alkanolem, 1,2- dimethoxyethanem, tetrahydrofuranem, 1,4dioxanem, acetonitrilem, pyridinem, dimethylformamidem nebo N,N-dimethylacetamidem;

• · · ·

(b) hydroxidu sodného nebo draselného nebo Ci-C4alkoxidu sodného nebo draselného, společně s Ci-C4alkanolem, vodou nebo jejich směsí;

(c) hydridu lithného, sodného nebo draselného, bis(trimethylsilyl)amidu sodného nebo draselného, diisopropylamidu lithného nebo butyllithia, společně s toluenem, etherem, 1,2-dimethoxyethanem, tetrahydrofuranem nebo 1,4-dioxanem; nebo (d) za katalytických podmínek pro fázový přenos, z tetraalkylammonium halogenidu nebo hydroxidu, společně se směsí vodného roztoku hydroxidu sodného nebo draselného a dičhlormethanu, 1,2-dichlorethanu nebo chloroformu;

(ii) reakce se sloučeninou vzorce R¹OH, kde R¹ je stejný, jak byl definován výše pro sloučeniny vzorce (IA) a (IB), za použití klasické Mitsunobuovi metody. Typická reakce obsahuje reakci substrátu s alkanolem za přítomnosti triarylfosfinu a di (C1-C4)alkylazodikarboxylatu, ve vhodném rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan, při teplotách přibližně -5 °C až teplota okolí.

Obvykle je 10% nadbytek hydridu sodného přidán do roztoku substrátu ve vhodném rozpouštědle, například v bezvodém tetrahydrofuranu, a vzniklý anion reaguje s přibližně 10% nadbytkem vybraného Η^χΧ.

Sloučeniny vzorce (IA) a (IB) , kde R¹ je vodík a R², R¹³ a R⁴ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB), mohou být získány ze sloučenin vzorce (IXA) a (IXB), v příslušném pořadí, kde R¹ je vodík a R², R¹³ a R⁴ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IXA) a (IXB), za použití stejných podmínek jako pro přeměnu sloučenin vzorce (IXA) a (IXB) na sloučeniny (IA) a (IB), v příslušném pořadí, když je • ·

R¹ jiný než vodík, a potom se provede okyselení reakční směsi na pH přibližně 6,

Aminy vzorce (III), 4-aminopyrazol-5-karboxamidy vzorce (VIIA) a (VIIB), karboxylové kyseliny vzorců (VIII) a (X), nitrily vzorce (XIII) a estery vzorce (XVI), ať komerčně dostupné nebo popsané dále, mohou být připraveny analogicky s postupy popsanými v přípravách nebo za použití běžných syntetických postupů uvedených v běžných učebnicích organické chemie nebo v literatuře, ze snadno dostupných výchozích materiálů, za použití vhodných činidel a reakčních podmínek.

Kromě toho, odborníkům v oboru budou známy varianty a alternativy k postupům popsaným dále v příkladech provedení vynálezu a přípravách, které vedou k zisku sloučenin vzorce (IA) a (IB).

Farmaceuticky přijatelné adiční soli sloučenin vzorce (IA) a (IB) s kyselinami, které obsahují bazické centrum, mohou být také připraveny běžným způsobem. Například, roztok volné baze reaguje s vhodnou kyselinou, buď samotnou nebo ve vhodném rozpouštědle, a vzniklá sůl se izoluje buď filtrací, nebo odpařením reakčního rozpouštědla ve vakuu.

Farmaceuticky přijatelné adiční soli s bázemi mohou být připraveny analogicky reakcí roztoku sloučeniny (IA) nebo (IB) s vhodnou baží. Oba typy solí mohou být připraveny nebo přeměněn za použití technik využívajících iontoměničové pryskyřice.

Biologické aktivity sloučenin podle předkládaného vynálezu byly stanoveny následujícími způsoby.

• · · ·

ΟΛ ···· · · ···· ζυ ·· ·· ··· ··· ·· ··

Inhibiční aktivita pro fosfodiesterasu (PDE)

Inhibiční aktivita pro PDE in vitro pro cyklický guanosin 3',5'-monofosfat (cGMP) a cyklický adenosin 3’,5'-monofosfat (cAMP) fosfodiesterasy byly stanoveny měření hodnot IC50 (koncentrace sloučeniny nutná pro 50% inhibici aktivity enzymu).

PDE enzymy byly izolovány z různých zdrojů, včetně lidského corpus cavernosum, lidských a králičích trombocytů, lidské srdeční komory, lidského kosterního svalu a hovězí sítnice, za použití metody dle W.J. Thompson a M.M.Appleman (Biochem.,

1971, 10, 311). Přesněji, cGMP-specifická PDE (PDE5) a cGMPinhibovaná cAMP PDE (PDE3) byly získány z tkáně lidského corpus cavernosum, lidských trombocytů nebo králičích trombocytů; cGMP-stimulovaná PDE (PDE2) byla získána z lidského corpus cavernosum; vápník/kalmodulin (Ca/CAM)dependentní PDE (PDE1) byla získána z lidské srdeční komory; cAMP-specifická PDE (PDE4) byla získána z lidského kosterního svalu; a fotoreceptorová PDE (PDE6) byla získána z hovězí sítnice.

Testy byly provedeny za použití modifikace vsádkové metody, kterou popsal W.J. Thompson et al. (Biochem., 1979,

18: 5228). Výsledky těchto testů ukazují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou účinnými a selektivními inhibitory cGMP-specifické PDE5,

Funkční aktivita

Funkční aktivita byla hodnocena in vitro pomocí stanovení kapacity sloučeniny podle předkládaného vynálezu zvyšovat nitroprusidem sodným indukovanou relaxaci prekontrahovaných • · « · proužků králičí tkáně z corpus cavernosum, jak je popsáno v

S.A. Ballard et al. (Brit. J. Pharmacol. 1996, 118 (suppl.) abstract 153P).

Aktivita in vivo

Sloučeniny byly testovány na psech uvedených do anestesie pro stanovení jejich kapacity po i.v. podání zvyšovat nárůst tlaku v kavernosních tělesech penisu, který je indukován intrakavernosní injekcí nitroprusidu sodného, za použití techniky založené na technice, kterou popsali Trigo-Rocha et al. (Neurourol. and Urodyn., 1994, 13: 71).

Při terapii u člověka mohou být sloučeniny vzorce (IA) a (IB), jejich farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelné solváty podány samostatně, ale obvykle jsou podány ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem vybraným podle plánovaného způsobu podání a standardní praxe. Výhodně jsou tyto sloučeniny podány orálně ve formě tablet obsahujících přísady jako je škrob nebo laktosa, nebo kapsle nebo globule obsahující samostatnou sloučeninu nebo sloučeninu ve směsi s přísadami, nebo ve formě elixírů, roztoků nebo suspenzí obsahující chuťová korigens nebo barviva. Mohou být také podány parenterální injekcí, například intrakavernosně, intravenosně, intramuskulárně nebo subkutánně. Pro parenterální podání jsou nejlépe použity ve formě sterilních vodných roztoků, které mohou obsahovat další substance, například dostatek solí nebo monosacharidů pro dosažení izotonicity roztoku s krví. Při bukkálním nebo sublinguálním podání mohou být podány ve formě tablet nebo oplatek, které mohou být připraveny běžným způsobem. Sloučeniny mohou být také podány intranasálně nebo mohou být připraveny pro dermální aplikaci.

Pro orální, parenterální, bukkální a sublinguální podání pacientů je denní dávka sloučenin vzorce (IA) a (IB) a jejich farmaceuticky přijatelných solí a solvátů v rozmezí od 10 do 500 mg (v jedné dávce nebo rozděleně). Tak mohou, například, tablety nebo kapsle obsahovat od 5 do 250 mg aktivní sloučeniny pro podání v jedné, dvou nebo více dávkách. Lékař v každém případě stanoví dávku, která bude vhodná pro jednotlivého pacienta a která bude záviset na věku, hmotnosti a reakci určitého pacienta. Výše uvedené dávky jsou průměrné; mohou existovat případy, ve kterých musí být použito vyšších nebo nižších dávek a takové případy spadají do rozsahu předkládaného vynálezu. Odborníkům v oboru bude také jasné, že při léčbě některých stavů (včetně MED a FSD) mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu užívány jako jednotlivé dávky v případě potřeby.

Obecně je u člověka výhodným způsobem podání sloučenin podle předkládaného vynálezu orální podání, které je nej snadnější a, například u MED, nemá dobře známé nevýhody spojené s intrakavernosní (i.c.) injekcí. Výhodné orální dávkování při MED u průměrného muže je od 25 do 250 mg sloučeniny v případě potřeby. V případě, že léčený jedinec trpí poruchami polykání nebo zhoršenou absorpcí léku po orálním podání, může být lék podán parenterálně, sublinguálně nebo bukkálně.

Při veterinárním použití je sloučenina vzorce (IA) nebo (IB) nebo její veterinárně přijatelná sůl nebo její veterinárně přijatelný solvát podána v přijatelném prostředku v souladu s běžnou veterinární praxí a veterinář stanoví dávkování a způsob podání, které budou nejvhodnější pro dané zvíře.

to * · ·« ·· to · · « • · · ·

Tak vynález obsahuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo její farmaceuticky přijatelný solvát, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

Dále vynález obsahuje veterinární prostředky obsahující sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) nebo její veterinárně přijatelnou sůl nebo její veterinárně přijatelný solvát, spolu s veterinárně přijatelným ředidlem nebo nosičem.

Vynález také obsahuje sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo její farmaceuticky přijatelný solvát, nebo farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny, pro použití jako léčiv pro člověka.

Vynález také obsahuje sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) nebo její veterinárně přijatelnou sůl nebo její veterinárně přijatelný solvát, nebo veterinární prostředek obsahující tyto sloučeniny, pro použití jako léčiv pro zvířata.

V ještě jiném aspektu vynález obsahuje použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvátů, pro výrobu lidského léčiva pro kurativní nebo profylaktickou terapii stavů, při kterých je indikováno podání cGMP PDE5 inhibitoru. Dále obsahuje použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvátů, pro výrobu léčiva pro terapii stavů, při kterých je žádoucí inhibice cGMP PDE5,

Vynález také obsahuje použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její veterinárně přijatelné soli nebo jejího veterinárně přijatelného solvátů, pro výrobu veterinárního léčiva pro kurativní nebo profylaktickou terapii stavů, při kterých je indikováno podání cGMP PDE5,

Dále vynález obsahuje použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvátů, pro výrobu lidského léčiva pro kurativní nebo profylaktickou terapii erektilní dysfunkce u mužů (MED), sexuální dysfunkce u žen (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty (BPH), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalova) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, stavů souvisejících se sníženou průchodností cév (například po perkutánní transluminální koronární angioplastice (po PTCA)), bronchitidy, alergického asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility (například syndromu dráždivého tračníku (IBS)). Dalšími léčenými stavy jsou preeklampsie, Kawasakiho syndrom, tolerance na nitráty, roztroušená sklerosa, periferní diabetická neuropatie, mrtvice, Alzheimerova nemoc, akutní respirační selhání, psoriasa, nekrosa kůže, nádory, metastasy, plešatost, onemocnění jícnu, anální fissura a hypoxická vazokonstrikce. Nejvýznamnějšími onemocněními je MED a FSD.

Dále vynález obsahuje použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její veterinárně přijatelné soli nebo jejího veterinárně přijatelného solvátů, pro výrobu veterinárního léčiva pro kurativní nebo profylaktickou terapii erektilní dysfunkce u samců (MED), sexuální dysfunkce u samic (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty «··· ·· • »

9 4 » 9 9 « ·· ·· (ΒΡΗ), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalova) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, stavů souvisejících se sníženou průchodností cév (například po perkutánní transluminální koronární angioplastice (po PTCA)), bronchitidy, alergického asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility (například syndromu dráždivého tračníku (IBS)). Dalšími léčenými stavy jsou preeklampsie, Kawasakiho syndrom, tolerance na nitráty, roztroušená sklerosa, periferní diabetická neuropatie, mrtvice, Alzheimerova nemoc, akutní respirační selhání, psoriasa, nekrosa kůže, nádory, metastasy, plešatost, onemocnění jícnu, anální fissura a hypoxická vazokonstrikce.

Nejvýznamnějšími onemocněními je MED a FSD.

Dále vynález obsahuje způsob léčby nebo prevence onemocnění, při kterých je indikováno podání inhibitoru cGMP PDE5, u savců (včetně lidí), ve kterém je uvedenému savci podáno terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvátu, nebo farmaceutického prostředku nebo veterinárního prostředku obsahujícího uvedené sloučeniny.

Ještě dále vynález obsahuje způsob léčby nebo prevence erektilní dysfunkce u mužů (MED), sexuální dysfunkce u žen (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty (ΒΡΗ), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalova) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, • · stavů souvisejících se sníženou průchodností cév (například po perkutánní transluminální koronární angioplastice (po PTCA)), bronchitidy, alergického asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility u savců (včetně lidí), ve kterém je uvedenému savci podáno terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) nebo její farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvátu, nebo farmaceutického prostředku nebo veterinárního prostředku obsahujícího uvedené sloučeniny.

Vynález také zahrnuje všechny nové meziprodukty, které jsou zde popsány, například meziprodukty vzorců (IIA), (IIB), (IVA), (IVB), (IXA), (IXB), (VA) a (VB).

Syntéza sloučenin podle předkládaného vynálezu a meziproduktů pro použití v této syntéze je ilustrována v následujících příkladech a přípravách.

Spektra ³Η nukleární magnetické rezonance (NMR) byla zaznamenávána za použití buď Marian Unit 300 nebo Marian Znova 400 spektrometru a byla ve všech případech v souladu s předpokládanými strukturami. Charakteristické chemické posuny (δ) jsou uvedeny v jednotkách dolů od tetramethylsilanu za použití běžných zkratek pro označení hlavních píků: například s, singlet; d, dublet; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; br, široký (broad).

Hmotnostní spektra (m/z) byla stanovena za použití Fisons Instruments Trio hmotnostního spektrometru v modu termosprejové ionizace.

* · · « ··· · · · · · · ··«· * ·»♦··* · · · · · · ····

Z / «φ »« «.····» · · * «

Teplota okolí je teplota 20-25 °C.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

Alternativa A

60% disperze hydridu sodného v minerálním oleji (14,3 mg, 0,36 mmol) se přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny Přípravy 44 (150 mg, 0,325 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (5 ml) pod atmosférou dusíku. Po 1 hodině se přidá roztok 2(chlormethyl)pyridinu (45,5 mg, 0,36 mmol) v tetrahydrofuranu (1 ml) a reakční směs se zahřívá při 40 °C po dobu 16 hodin a potom se nechá vychladnout. Vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (15 ml) a vodu (5 ml). Organická fáze se separuje, smísí se s dichloromethanovým extraktem (20ml) vodné fáze, suší se (MgSO-i) a odpaří se za redukovaného tlaku. Vzniklá žlutá pěna se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichloromethanu: methanolu (97:3) jako eluens, a potom se provede HPLC za použití 5 pm Spherisorb kolony obsahující oxid křemičitý za použití vody: acetonitrilu: diethylaminu (50:50:0.1 ) jako eluens při rychlosti 1 ml/min, za zisku titulní sloučeniny (30mg, 17%) ve formě bílé pěny. δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,57 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 3,05 (2H,q), 3,12 (4H,m), 4,75 (2H,q), 5,68 (2H,s),

7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m) , 7,64 (1 H,m), 8,56 (1 H,d), 8,64 (1 H,s), 9,04 (1 H,s), 10.65 (1 H,s). LRMS: m/z 553 (M+l)⁺.

Alternativa B

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 45B (17,4 g, 30,5 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (7,28 g, 36,5 mmol) v ethanolu (155 ml) se zahřívá při 120 0C v uzavřené zkumavce po dobu 10 hodin, nechá se vychladnout a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodě (200 ml), suspenze se extrahuje dichlormethanem (2x300 ml) a kombinované extrakty se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití dichloromethanu: methanolu (97:3) jako eluens, za zisku světle žluté pěny (11,2 g, 66%), která se krystalizuje z diisopropyletheru-methanolu za zisku titulní sloučeniny ve formě krystalického pevného materiálu. Zjištěno: C, 55,58; H, 5,90; N, 19,58, C26H32N8O4S; 0.50 H2O vyžaduje C, 55,60; H, 5,92; N, 19,95%.

Příklad 2: 5-[2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

1-Methylpiperazin (0.2ml, l,8mmol) se po kapkách přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 63 (450 mg, 0.92 mmol) v ethanolu (40ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a potom se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a ethylacetatu (90ml), potom se organická fáze separuje, promyje se solankou (2x20ml), suší se (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Olejový zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 96:4), a potom se provede krystalizace z hexan-ethylacetatu za zisku titulní sloučeniny (340 mg, 67%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 55,90; H,

5,85; N, 20.04, C26H32N8O4S; 0.50 H₂0 vyžaduje C, 55, 60; H, 5,92.

• · « ·

Ν, 19,95%. δ (CDCls) : 0.94 (3H,t), 1,58 (3H,t), 1,74 (2H,m), 2,27 (3H,s), 2,40 (4H,m), 2,99 (2H,t), 3,14 (4H,m), 4,69 (2H,q), 5,68 (2H,s), 7,09 (1 H,d), 7,23 (1 H,m), 7,63 (1 H,m) ,

8,58 (1 H,d), 8,63 (1 H,s), 9,03 (1 H,s), 10.64 (1 H,s). LRMS: m/z 552 (M)⁺.

Příklad 3: 3-ethyl-5-[2-(2-methoxyethoxy)-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl] -2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo- [4,3-d]pyrimidin-7-on

Triethylamin (83 μΐ, 0,59 mmol) a 1-methylpiperazin (36 mg, 0,356 mmol). se přidají do míšené, ledem ochlazované suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 64 (150 mg, 0.30 mmol) v dichloromethanu (10 ml) a reakční směs se mísí po dobu 2 hodin při teplotě okolí. Získaná směs se promyje vodou (5 ml), suší se (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku béžového pevného materiálu, který se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (98:2 až 95:5) a potom se provede triturace etherem za zisku titulní sloučeniny (145 mg, 85%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 54,53; H, 5,69;

N, 19,38, C26H32N8O5S vyžaduje C, 54,92; H, 5,67; N, 19,71%. δ (CDCla) : 1,30 (3H,t), 2,28 (3H,s), 2,50 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,14 (4H,m), 3,57 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,09 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,62 (1 H,s), 8,97 (1 H,s), 10.81 (1 H,s). LRMS: m/z 569 (M+l)⁺.

Příklad 4: 3-ethyl-5- [5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2-(methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

Alternativa A * β · ·

t-butoxid draselný (56 mg, 0,50 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 45A (200 mg, 0,35 mmol) ve 2-methoxyethanolu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku p dobu 2 hodin a nechá se vychladnout. Přidá se nasycený vodný roztok chloridu amonného (1 ml) a potom voda (5 ml) a směs se extrahuje ethylacetátem (2x10 ml). Kombinované extrakty se suší (MgSCA) , odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny (11 mg, 5%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 1,30 (3H,t), 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,14 (4H,m) , 3,56 (3H,s), 3,87 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,69 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,21 (lH,m), 7,61 (lH,m), 8,56 (lH,d), 8,62 (1 H,s), 8,95 (lH,s), 10.82 (lH,s). LRMS: m/z 583 (M+l)⁺.

Alternativa B

Směs bis(trimethylsilyl)amidu draselného (16,58 g, 83 mol) a 2-methoxyethanolu {250 ml) se mísí při 90°C po dobu 30 minut a potom se nechá vychladnout. Potom se přidá titulní sloučenina z příkladu 1 (9,21 g, 16,7 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě 110 °C po dobu 6 hodin. Vzniklá směs se po vychladnutí odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se rozpustí ve vodě (300 ml) a roztok se neutralizuje na pH 7 pomocí 2 M kyseliny chlorovodíkové a potom se extrahuje ethylacetátem (3x200ml). Kombinované extrakty se promyjí solankou (3x200 ml) , suší se (NažSCU) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého pevného materiálu se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (98:2) jako eluens, potom se provede triturace s etherem, krystalizace z ethylacetatu a rekrystalizace z acetonu, za zisku solvátů (s acetonem) titulní sloučeniny (7,7 g, 79%) ve formě bezbarvých krystalů.

β · · ·

T.t. 171,5 - 173 °C. Zjištěno: C, 55,59; H, 5,94; N, 18,78, C27H34N8O5S; 0,125 C₃H₆O vyžaduje C, 55,72; H, 5,94; N, 19,00%.

Získaný materiál se suspenduje ve vodě (200 ml) , přidá se dostatečné množství 2M kyseliny chlorovodíkové pro dosažení rozpuštění a potom se roztok promyje etherem (3x50 ml) a neutralizuje se nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá sraženina se odebere, promyje se vodou a suší se při 80 °C za zisku hemihydratu titulní sloučeniny (5,99 g, 61,6%) jako bílého pevného materiálu, t.t. 139 - 140 °C. Zjištěno: C, 54,74; H, 5,92; N, 18,86, C27H34N8O5S; 0.50 H₂O vyžaduje C, 54,81; H, 5,96; N, 18,94%.

Příklad 5: 3-ethyl-5-{2- (2-methoxyethoxy) —5—[4— (prop-1-yl) piperazin-l-ylsulfonyl]pyridin-3-yl}-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá jako žlutá pěna (88%) z titulní sloučeniny Přípravy 64 a 1-(prop-l-yl)piperazindihydrobromidu, za použití postupu podle příkladu 3, Zjištěno: C, 56,12; H, 6,06; N, 18,62, C28H36N8O5S vyžaduje C, 56,36; H, 6,08; N, 18,78%. δ (CDC1₃) : 0.86 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,43 (2H,m), 2,30 (2H,t), 2,53 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,12 (4H,m), 3,57 (3H,s),

3,88 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,23 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,62 (lH,s), 8,97 (1 H,s),

10.81 (1 H,s). LRMS: m/z 597 {M+l)⁺.

Příklad 6: 3-ethyl-5-{2-(2-methoxyethoxy)-5-[4-(prop-2-yl) piperazin-l-ylsulfonyl]pyridin-3-yl}-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá jako bílý prášek (78%) z titulní sloučeniny Přípravy 64 a 1-(prop-2-yl)piperazinu, za použití postupu podle příkladu 3, Zjištěno: C, 55,95; H, 6,06; N, 18,46, C28H36N8O5S vyžaduje C, 56, 36; H, 6,08; N, 18,78%. δ (CDC1₃) : 1,00 (6H,2xd), 1,30 (3H,t), 2,61 (4H,m) , 2,68 (lH,m), 3,02 (2H,q), 3,12 (4H,m), 3,57 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,79 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m) ,

8,58 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,97 (1 H,s), 1 0. 71 (1 H,s). LRMS: m/z 597 (M+l)⁺.

Příklad 7: 5-{5-(4-(2-aminoethyl)piperazin-l-ylsulfonyl]-2- (2methoxyethxy)pyridin-3-yl}-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok titulní sloučeniny z přípravy 64 (100 mg, 0.198 mmol) v dichloromethanu (10 ml) se po kapkách přidává během 1 hodiny do míšeného roztoku 1-(2-aminoethyl)piperazinu (102 mg, 0.79 mmol) v dichloromethanu (10 ml) a reakční směs se mísí po dobu další 1 hodiny při teplotě okolí. Získaná směs se promyje vodou (10 ml), suší se (MgSOU a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku béžového pevného materiálu, který se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (90:10:0 až 90:10:1) za zisku titulní sloučeniny (104 mg, 88%) ve formě bílé pěny. δ (CDCI3) : 1,29 (3H,t), 2,43 (2H,t), 2,54 (4H,m), 2,74 (2H,t), 3,04 (2H,q), 3,12 (4H,m), 3,56 (3H,s), 3,88 (2H,t), 4,79 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m) , 7,63 (1 H,m), 8,56 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,99 (1 H,s). LRMS: m/z 598 (M+l)⁺.

Příklad 8: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

t-butoxid draselný (104 mg, 0,97 mmol) se přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny Přípravy 53 (380 mg, 0,618 mmol) ve 3-methylpentan-3-olu (30 ml) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 1 hodiny a nechá se vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě žlutého pryžovitého materiálu se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x10 ml) a kombinované extrakty se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (98:2 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny (75 mg, 13%) ve formě bílé pěny. δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,73 (2H,m), 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,97 (2H,t), 3,13 (4H,m), 3,56 (3H,s), 3,86 (2H,t),

4,78 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,08 (lH,d), 7,21 (lH,m), 7,61 (lH,m), 8,54 (lH,d), 8,62 (lH,s), 8,97 (lH,s), 0.80 (lH,s).

LRMS: m/z 597 (M+l)⁺.

Příklad 9: 5-[2-(2-ethoxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs bis(trimethylsilyl)amide draselného (434 mg, 2,2 mmol) a 2-ethoxyethanolu (2 ml) se za míšení zahřívá při 90 °C po dobu 30 minut a nechá se vychladnout. Přidá se roztok titulní sloučeniny z příkladu 1 (153 mg, 0.27 mmol) ve 2ethoxyethanolu (2ml) a reakční směs se mísí při 110°C po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití dichloromethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (110 mg, 68%) ve formě žluté pěny. δ (CDC1₃) : 1,04 (3H,t), 1,31 (6H,m) , 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m) , 3,04 (2H, q) , 3,14 (4H,m) , 3,72 (2H,q), 3,90 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,67 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,22 (1 H,m), 7,63 (1 H,m) ,

8,57 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,99 (1 H,s), 10.78 (1 H,s). LRMS m/z 597 (M+l)⁺.

Příklad 10: 5-[2-(2-ethoxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs t-butoxidu draselného (110 mg, 0.98 mmol), titulní sloučeniny Přípravy 54 (400 mg, 0.63 mmol) a 3-methylpentan-3 olu (5ml) se mísí při 150 °C po dobu 3 hodin a nechá se vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (5 ml) a ethylacetát (5 ml) . Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x10 ml) kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (99:1:0,5 až 98:2:0,5) za zisku titulní sloučeniny (74 mg, 12%) ve formě bílé pěny. Zjištěno: C, 56, 92; H, 6,33; N, 17,80. C29H36N8O5S vyžaduje: C, 57,21 ; H, 5,96; N, 18,41 %. δ (CDCI3) : 0.94 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1, 72 (2H,m), 2,41 (2H,q),

2,54 (4H,m), 3,14 (4H,m), 3,72 (2H,q), 3,90 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,67 (2H,s), 7,09 (lH,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m),

8,57 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,98 (1 H,s), 10.77 (1 H,s).

Příklad 11: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3methoxyprop-l-oxy)pyridin-3-yl}-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z příkladu 1 (200 mg, 0.36 mmol) • · · · bis(trimethylsilyl)amidu draselného (361 mg, 1,81 mmol) a 3methoxypropan-l-olu (1,5 ml) se mísí při 90°C po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (97,3:3 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny (81 mg, 38%) ve formě pěny. Zjištěno: C,55,36; H, 6,11 ; N, 18,18, C28H36N8O5S; 0.50 H₂O vyžaduje C, 55,52; H,

6,16; N, 18,50%. δ (CDC1₃) : 1,01 (3H,t), 1,29 (3H,t), 2,19 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,02 (2H,q), 3,12 (4H,m), 3,39 (3H,s), 3,65 (2H,t), 4,76 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,09 (1 H,d), 7 .21 .(1 H,m), 7,62 (lH,m), 8,56 (lH,d), 8,62 (lH,s), 8,93 (1H,S), 10.84 (lH,s). LRMS: m/z 597 (M+l)⁺.

Příklad 12: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3methoxyprop-l-oxy) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (26%) z titulní sloučeniny Přípravy 55, za použití postupu podle příkladu 10. Zjištěno: C, 56,86; H, 6,47; N, 17,78, C29H38N8O5S vyžaduje: C, 57 .04; H, 6,27; N, 18,35%. δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,72 (2H,m), 2,20 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,97 (2H,t), 3,12 (4H,m), 3,40 (3H,s), 3,65 (2H,t), 4,77 (2H,t), 5,67 (2H,s), 7,08 (lH,d), 7,21 (1 H,m), 7,61 (1 H,m) ,

8,58 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,94 (1 H,s), 10.83 (1 H,s). LRMS: m/z 611 (M+l)⁺.

Příklad 13: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(1methoxyprop-2 (S) -oxy)pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on • · · ·

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (33%) z titulní sloučeniny příkladu 1 a l-methoxypropan-2(S)-olu (J. Chem.

Soc., Perkin. Trans. I, 1996, 1467), za použití postupu podle příkladu 9, ale s etherem: methanolem: 0,88 vodným amoniakem (97:3:1) jako chromatografickým eluens. Zjištěno:

C, 55,91; H, 6,17; N, 18,10. C₂₈H36N₈O₅S; 0.50 H₂0 vyžaduje C, 55,52; H, 6,16; N, 18,50%. δ (CDC1₃) : 1,04 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,52 (3H,d), 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m), 3,04 (2H,q),

3,14 (4H,m), 3,55 (3H,s), 3,66 (lH,dd), 3,74 (lH,dd), 5,60 (lH,m), 5,68 (2H,s), 7,08 (1 H,d), 7,21 (1 H,m), 7,62 (1 H,m) ,

8,57 (1 H,d), 8,61 (1 H,s), 8,89 (1 H,s), 10.85 (lH,s). LRMS:

m/z 597 (M+.l)⁺.

Příklad 14: 5—[2—(2-methoxyethoxy)-5- (4-methylpiperazin-lylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs bis(trimethylsilyl)amidu draselného (460 mg, 2,3 mmol) a 2-methoxyethanolu (40 ml) se mísí při 90°C po dobu 30 minut a potom se nechá vychladnout. Potom se přidá titulní sloučenina z příkladu 2 (270 mg, 0,46 mmol) a reakčni směs se mísí při teplotě 110 °C po dobu 5 hodin, nechá se vychladnout a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodě (20 ml), pH se upraví na pH 7 pomocí kyseliny chlorovodíkové a získaný roztok se extrahuje ethylacetátem (3x30 ml).

Kombinované extrakty se promyjí solankou (3x20 ml), suší se (Na₂SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 96:4) a potom se provede krystalizace z hexanu-ethylacetatu za zisku titulní sloučeniny (200 mg, 75%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 54,83; H, 5,83; N, 18,90. C₂7H34N₈O₅S; 0.50 H₂0 vyžaduje C, 54,81 ; H, 5,96; N, 18,94%. δ • · · · «

(CDCls) : 0.94 (3H,t), 1,74 (2H,m) , 2,28 (3H,s), 2,50 (4H,m) ,

2,98 (2H,t), 3,15 (4H,m), 3,57 (3H,s), 3,87 (2H,t), 4,80 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,08 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m),

8,57 (1 H,d), 8,64 (lH,s), 8,96 (lH,s), 10.80 (lH,s). LRMS: m/z583 (M+l)⁺.

Příklad 15: 5-[2-(1,3-dimethoxyprop-2-oxy)-5-(4ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin7-on

Směs t-butoxidu draselného (23 mg, 0.20 mmol), titulní sloučeniny Přípravy 72 (70 mg, 0.10 mmol) a 3-methylpentan-3olu (3 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin a nechá se vychladnout a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichloromethanu: methanolu (98:2) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (6 mg, 9%) ve formě špinavě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1, 72 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m), 2,98 (2H,t), 3,16 (4H,m), 3,50 (6H,s), 3,77 (2H,m), 3,86 (2H,m), 5,68 (3H,m), 7,08 (lH,d), 7,21 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,57 (1 H,d), 8,61 (1 H,s), 8,84 (1 H,s), 10.87 (1 H,s). LRMS: m/z 641 (M+l)⁺.

Příklad 16: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-l- (pyridin-2-yl) methyl-1,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (50%) z titulní sloučeniny Přípravy 65, za použití postupu podle příkladu 10. Zjištěno: C, 55,45; H, 5,91 ; N,

18,94, C27H34N8O5S vyžaduje: C, 55, 66; H, 5,88; N, 19,23%. δ (CDC1₃) : 1,02 (3H,t), 1,40 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m) , • ·

3,00 (2H,q), 3,16 (4H,m), 3,55 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,95 (2H,s), 7,01 (lH,d), 7,17 (lH,m), 7,60 (lH,m),

8,57 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 9,02 (1 H,s), 11,04 (1 H,s). LRMS: m/z 583 (M+l)⁺.

Příklad 17: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (tetrahydrofuran-3 (S) -yloxy) pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (29%) z titulní sloučeniny Přípravy 56, za použití postupu podle příkladu 10. Zjištěno: C, 55,85; H, 5,98; N, 17 .86, C28H34N8O5S; 0.20 H2O; 0.10 CH2CI2 vyžaduje: C, 55,24; H, 5,73;

N, 18,41%. δ (CDCI3) : 1,02 (3H,t), 1,28 (3H,t), 2,40 (4H,m) ,

2,55 (4H,m|, 3,02 (2H,q}, 3,13 (4H,m}, 4,00 (2H,m) 4,16 (2H,m), 5,68 (2H,s), 5,86 (lH,m}, 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m),

7,63 (lH,m), 8,56 (lH,d), 8,63 (lH,s), 8,98 (lH,s), 10.42 (lH,s}. LRMS: m/z 594 (M)⁺. [a]_D ²⁵ -13,8° (c = 0.10, CH3OH) .

Příklad 18: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (tetrahydrofuran-3 (R) -yloxy) pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (24%) z titulní sloučeniny Přípravy 75, za použití postupu podle příkladu 10. Zjištěno: C, 55,32; H, 5,82; N, 17,70. C28H34N8O5S; H2O vyžaduje C, 54,88; H, 5,92; N, 18,29%. δ (CDC1₃): 1,02 (3H,t}, 1,28 (3H,t}, 2,40 (4H,m}, 2,55 (4H,m}, 3,02 (2H,q}, 3,13 (4H,m}, 4,00 (2H,m) , 4,16 (2H,m), 5,68 (2H,s}, 5,86 (lH,m}, 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,63 (1 H,m) ,

8,56 (1 H,d), 8,63 (1 H,s}, 8,98 (1 H,s), 1 0.42 (1 H,s). LRMS: m/z 595 (M+l) ⁺ . [a] _D ²⁵ +14,0° (c = 0.14, CH3OH).

• · · ·

Příklad 19: 5—[5—(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (tetrahydropyran-4-yloxy) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (30%) z titulní sloučeniny Přípravy 76, za použití postupu podle příkladu 10. δ (CDCI3) : 1,03 (3H, t) , 1,73 (2H, m) , 2,01 (2H,m), 2,22 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m), 2,98 (2H, t), 3,12 (4H,m), 3,66 (2H,m) , 4,06 (2H,m) , 5,60 (lH,m) , 5,69 (2H,s)/ 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m)), 7,63 (lH,m), 8,57 (lH,d), 8,61 (1H,S), 9,01 (lH,s), 10,55 (lH,s). LRMS : m/z 623 (M+l)⁺.

Příklad 20: 3-ethyl-5-[5- (4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2-npropoxypyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (540 mg, 4,8 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z Přípravy 52 (683 mg, 1,2 mmol) v n-propanolu (10 ml) a reakčni směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny ve formě pěny (290 mg, 44%). Zjištěno: C, 56,32; H, 6,04; N, 19,36, C26H32N8O4S vyžaduje C, 56,50; H, 5,83; N, 20.27%. δ (CDC1₃) : 1,02 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,98 (2H,m) , 2,38 (3H,s), 2,50 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,13 (4H,m), 4,64 (2H,t), 5,69 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,30 (1 H,m), 8,58 (1 • ·

H, d), 8,63 (1 H,s), 9,04 (1 H,s), 10.66 (1 H,s). LRMS: m/z 553 (M+l)⁺.

Příklad 21: 3-ethyl-5-[5- (4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2(prop-2-oxy) pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (290 mg, 2,60 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z příkladu 20 (239 mg, 0.43 mmol) v propan-2-olu (7 ml) pod atmosférou dusíku a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 48 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a rozdělí se mezi vodu (20 ml) a ethylacetát (20 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem a kombinované organické roztoky se suší (MgSCb) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny ve formě pěny (84 mg, 35%). δ (CDCI3) : 1,28 (3H,t),

I, 56 (6H,2xd), 2,28 -(3H,s), 2,50 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,14 (4H,m), 5,68 (3H,m), 7,09 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,62 (lH,m),

8,57 (lH,d), 8,62 (lH,s), 9,02 (1 H,s), 10.68 (1 H,s). LRMS: m/z 553 (M+l)⁺.

Příklad 22: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(prop-2-oxy) pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 45A (200 mg, 0.35 mmol),

60% disperze hydridu sodného v minerálním oleji (400 mg, 10 mmol) a propan-2-olu (20 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Přidá se nasycený vodný roztok chloridu amonného (20 ml), vzniklá směs • · se extrahuje ethylacetátem (3 x 50 ml), potom se kombinované extrakty promyjí vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (150 ml), suší se (MgSCA) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny ve formě pěny (11 mg, 6%). δ (CDC1₃) : 1,04 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,56 (6H,2xd), 2,1 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,13 (4H,m), 5,68 (3H,m) , 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m), 8,57 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 9,02 (lH,s), 10.68 (lH,s). LRMS: m/z 567 (M+l)⁺.

Příklad 23.: 5-[2-n-butoxy-5- (4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-ethyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2, 6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z příkladu 1 (200 mg, 0.36 mmol), bis(trimethylsilyl)amidu draselného (360 mg, 1,81 mmol) a nbutanolu (5 ml) se mísí při teplotě 100 °C po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (5 ml) a dichlormethan (5 ml). Fáze se separují a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (2 x 10 ml), potom se kombinované extrakty promyjí suší (MgSCU) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého pevného materiálu se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97,5:2,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny ve formě pěny (145 mg, 69%). Zjištěno: C, .43; H, 6,29; N, 18,82, C28H36N8O4S ; 0.20 H₂O vyžaduje C, 57,56; H, 6,28; N, 19,18%. δ (CDCI3) : 1,03 (6H,2xt}, 1,30 (3H,t), 1,55 (2H,m), 1,94 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m),

3,03 (2H,q), 3,13 (4H,m), 4,67 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,62 (1 H,m), 8,56 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 9,01 (1 H,s), 10.64 (1 H,s). LRMS: m/z 581 (M+l)⁺.

• · · · · ·

Příklad 24: 5-[2-i-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-ethyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (67%) z titulní sloučeniny příkladu 1 a i-butanolu, za použití postupu podle příkladu 23, Zjištěno: C, 57,25; H, 6,24; N, 18,84, C28H36N8O4S; 0.20 H2O vyžaduje: C, 57,56; H,

6,28; N, 19,18%. δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 1,12 (6H,d), 1,30 (3H,t), 2,30 (1 H,m), 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,13 (4H,m), 4,45 (2H,d), 5,68 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,-63 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,62 (lH,s), 9,02 (lH,s], 10.63 (1H,S}. LRMS: m/z 581 (M+l)⁺.

Příklad 25: 5-[2-cyklobutoxy-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 45A (200 mg, 0.35 mmol), cyklobutanolu (144 mg, 2 mmol), t-butoxidu draselného (80 mg, 0.70 mmol) a 1,4-dioxanu (5 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 24 hodin a nechá se vychladnout. Vzniklá směs se vnese do míšeného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a tato směs se extrahuje ethylacetátem (3x20ml). Kombinované extrakty se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 96:4) za zisku titulní sloučeniny (9 mg, 4%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCls) : 1,03 (3H,t), 1,29 (3H,t), 1,78 (2H,m) , 1,98 (2H,m) , 2,35 (2H,m), 2,55 (6H,m), 3,04 (2H,q), 3,12 (4H,m), 5,48 (1 H,m), 5,68 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,23 (1 H,m), 7,63 (1 H,m) ,

8,56 (1 H,d), 8,60 (1 H,s), 9,01 (1 H,s), 10.67 (1 H,s). LRMS:

m/z 579 (M+l)⁺.

Příklad 26: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2, 6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (2,38 g, 21,2 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny z Přípravy 77 (3,1 g, 5,3 mmol) v absolutním ethanolu (95 ml) a reakční směs se zahřívá při 100 °C v uzavřené nádobě po dobu 40 hodin a potom se nechá vychladnout- Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se rozpustí ve vodě (20 ml) a vodný roztok se okyselí na pH 5 pomocí 2M kyseliny chlorovodíkové. Takto získaná vodná suspenze se extrahuje dichlormethanem (3x30ml) a kombinované extrakty se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědé pěny se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (99:1 až 97:3) za zisku titulní sloučeniny (1,39 g, 46%) ve formě pěny. δ (CDC13): 0.93 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,58 (3H,t), 1,74 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,98 (2H,t), 3,13 (4H,m) , 4,75 (2H,q), 5,68 (2H,s),

7,09 (1 H,d), 7,23 (1 H,m), 7,63 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,63 (1 H,s), 9,02 (1 H,s), 10.64 (1 H,s).

Příklad 27: 5-{5-[4-(3-dimethylaminoprop-l-yl)piperazin-1-ylsulfonyl]-2-ethoxypyridin-3-yl}-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on, trihydrochlorid

Roztok čerstvě destilovaného 1-(3-dimethylaminoprop-lyl ) piperazinu {J. Chem. Soc. (C), 1971, 132; 160 mg, 0.93 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá do míšeného roztoku titulní ··· · · · · · · • * · φ · ······ • · · · · · · · · •φ · · ··· φ·· ·· ·· sloučeniny z Přípravy 63 (230 mg, 0.467 mmol) v ethanolu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a potom se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (30 ml), suspenze se extrahuje ethylacetatem (3x30ml) a kombinované organické extrakty se promyjí solankou (2x30ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 90:10) a získaný materiál se rozpustí v minimálním objemu ethylacetatu. Přidá se nasycený etherální roztok chlorovodíku a vzniklá bílá sraženina se odebere, trituruje se s etherem a suší se při odsávání za zisku titulní sloučeniny (140 mg, 37%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 44,45; H,

6,34; N, 15,38, C30H41N9O4S; 3HC1; 4H₂O vyžaduje C, 44,75; H, 6,51; N, 15,66%. δ (DMSO-de): 0.86 (3H,t), 1,34 (3H,t), 1,64 (2H,m) , 2,12 (2H,m), 2,72 (6H,2xs), 2,95 (2H,t), 3,00 (2H,m), 3,12 (2H,t), 3,18 (2H,m) , 3,56 (2H,m) , 3,84 (2H,m) , 4,50 (2H,g), 5,75 (2H,s), 7,27 {1 H,d), 7,42 (1 H,m), 7,90 (1 H,m) , 8,28 (1 H,s), 8,57 (1 H,d), 8,73 (1 H,s), 10.63 {1 H,s), 11,47 (1 H,s), 11,96 (1 H,s). LRMS: m/z 624 (M+l)⁺.

Příklad 28: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-npropoxypyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bezbarvého pevného materiálu (40%) z titulní sloučeniny Přípravy 80, za použití postupu podle příkladu 20. Zjištěno: C, 57,16: H, 6,15; N, 18,85, C28H36N8O4S: 0.50 H₂O vyžaduje C, 57,03: H, 6,32: N, 19,00%. δ (CDC1₃) : 0.94 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,13 (3H,t), 1,74 (2H,m), 1,98 (2H,m), 2,40 (2H,g), 2,54 (4 H,m), 2,98 (2H,t)

3,12 (4H,m), 4,62 (2H,t), 5,66 (2H,s), 7,09 (lH,d), 7,21 (lH,m), 7,62 (lH,m) , 8,57 (lH,d), 8,62 (lH,s), 9,02 (lH,s),

10.63 (1 H,s). LRMS: m/z 582 (M+2)⁺.

Příklad 29: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(prop-2oxy)pyridin-3-yl]-3-n-propy1-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (48%) z titulní sloučeniny příkladu 26 a propan-2-olu, za použití postupu podle příkladu 21, δ (CDCI3) : 0.94 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,-57 (6H,d), 1,74 (2H,m) , 2,41 (2H,q), 2,56 (4H,m) ,

2,98 (2H,t), 3,12 (4H,m), 5,68 (3H,m), 7,08 (1 H,d), 7,22 (1

H, m), 7,63 (1 H,m), 8,57 (1 H,d), 8,63 (lH,s), 9,02 (lH,s),

10.67 (lH,s). LRMS: m/z 581 (M+l)⁺.

Příklad 30: 5-{2-ethoxy-5-[4-(2-hydroxyethyl) piperazin-1-ylsulf onyl]pyridin-3-yl}-3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (49%) z titulní sloučeniny Přípravy 63 a l—(2— hydroxyethyl)piperazinu, za použití postupu podle příkladu 2, Zjištěno: C, 55,48; H, 5,93; N, 18,85, C27H34N8O5S; 0.10 C₄H₈O2 vyžaduje C, 55, 64: H, 5,93: N, 18,94%. δ (CDCI3) : 0.95 (3H,t),

I, 59 (3H,t), 1,75 (2H,m), 2,28 (1 H,s), 2,58 (2H,m), 2,65 (4H,m), 3,00 (2H,t), 3,16 (4H,m) , 3,60 (2H,t), 4,76 (2H,q), 5,68 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,64 (lH,s), 9,04 (lH,s), 10.66 (lH,s). LRMS: m/z 583 (M+l)⁺.

·*··»« » · ·· ·· ·*· * · ··*· « · · » · · · · » · · • « · * » · ···· • < · · » · · · · · · * · ·

Příklad 31: 5-{2-ethoxy-5-[4-(3-hydroxyprop-l-yl)piperazin-1-ylsulfonyl]pyridin-3-yl}-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (52%) z titulní sloučeniny Přípravy 63 a l—(3— hydroxyprop-l-yl)piperazinu, za použití postupu podle příkladu 2, Zjištěno: C, 56,27; H, 6,13; N, 18,38, C28H36N8O5S vyžaduje C, 56, 36; H, 6,08; N, 18,78%. δ (CDCls) : 0.94 (3H,t), 1,60 (3H,t), 1,72 (4H,m), 2,63 (6H,m), 2,98 (2H,t), 3,12 (4H,m),

3,72 (2H,t), 4,15 (lH,s), 4,77 (2H,q), 5,69 (2H,s), 7,08 (lH,d), 7,23 (lH,m), 7,63 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,61 (lH,s),

9,01 (lH,s), 10.67 (1 H,s). LRMS: m/z 596 (M)⁺.

Příklad 32: 5-[2-(2-benzyloxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-lylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě žlutého oleje (57%) z titulní sloučeniny příkladu 1 a 2-benzyloxyethanolu, za použití postupu podle příkladu 11, δ (CDCI3) : 1,02 (3H,t), 1,32 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,04 (2H,q), 3,13 (4H,m),

3,94 (2H,t), 4,76 (2H,s), 4,80 (2H,t), 5,69 (2H,s), 7,11 (lH,d), 7,20-7,37 (4H,m), 7,41 (2H,m), 7 .64 (1 H,m), 8,60 (2H,m), 8,98 (1 H,s), 10.80 (1 H,s). LRMS: m/z 659 (M+l)⁺.

Příklad 33: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2- (2-hydroxyethyl) pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Mravenčnan amonný (62 mg, 0.99 mmol) se přidá do směsi titulní sloučeniny příkladu 32 (130 mg, 0.197 mmol), 10% ·· ·· • · · « • · « · • · · · • · · ♦ • * · · palladia na uhlíku (15 mg) a acetonu (9 ml) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 14 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichloromethanu: methanolu (100:0 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny (18 mg, 16%) ve formě pevného materiálu, δ (CD3OD): 1,06 (3H,t), 1,28 (3H,t), 2,44 (2H,q), 2,58 (4H,m), 3,06 (2H,q), 3,14 (4H,m), 3,97 (2H,t), 4,68 (2H,t), 5, 75 (2H,s), 7,20 (1 H,d), 7,36 (1 H,m), 7,80 (1 H,m), 8,54 (2H,m), 8,68 (1 H,s). LRMS: m/z 569 (M+l)⁺.

Příklad 34: 5—[2—(2-benzyloxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 84 (500 mg, 0.72 mmol), bis(trimethylsilyl)amidu draselného (347 mg, 3,09 mmol) a 3-methylpentan-3-olu (8 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 36 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (10 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2 x 10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí ve dvou kolech chromatografie na silikagelové koloně, za použití nejprve dichlormethanu:methanolu:vodného amoniaku (90:10:1) a potom gradientu ethylacetatu: methanolu (100:0 až 80:20) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny ve formě oleje, δ (CDCI3) : 0.92 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,73 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,99 (2H,t), 3,1 0 (4H,m), 3,84 (2H,t), 4,58 (2H,s), 4,78 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,09 (lH,d), 7,18-7,42 (6H,m), 7,62

(lH,m), 8,55 (lH,d), 8,61 (lH,s), 8,97 (lH,s), 10.81 (lH,s). LRMS: m/z 673 (M+l)⁺.

Příklad 35: 2-benzyl-5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulf onyl) pyridin-3-yl]-3-ethyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pěny (27%) z titulní sloučeniny Přípravy 87, za použití postupu podle příkladu 10. δ (CDCls) : 0.90 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,28 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,94 (2H,q), 3,12 (4H,m), 4,75 (2H,q), 5,58’(2H,s), 7,22 (2H,m), 7,31 (3H,m), 8,62 (1 H,s), 9,01 (1 H,s), 10.65 (1 H,s). LRMS: m/z 552 {M+l)⁺.

Příklad 36: 2-benzyl-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2- (2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě krémové pěny (80%) z titulní sloučeniny příkladu 35 a 2-methoxyethanolu, za použit postupu podle příkladu 9, Zjištěno: C, 57,05; H, 6,19; N, 16,15, C28H35N7O5S ; 0.10 CH2CI2 vyžaduje C, 57,19; H, 6,01; N,16,61%. δ (CDC1₃) : 1,02 {3H,t), 1,27 (3H,t), 2,40 (2H,q),

2,55 (4H,m), 2,94 (2H,q), 3,13 (4H,m), 3,57 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,56 (2H,s), 7,22 (2H,m), 7 .32 (3H,m),

8,61 (1 H,s), 8,96 (1 H,s), 10.80 (1 H,s).

Příklad 37: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2- (1methylimidazol-2-yl)-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on ···· ·· · • · · ·· · · · · • · « · ·

119 1 · ·· ·· ··· ©

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (33%) z titulní sloučeniny Přípravy 90, za použití postupu podle příkladu 10. δ (CDCls) : 1,05 (3H,t), 1,34 (3H,t), 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m) , 3,13 (4H,m), 3,19 (2H,q), 3,57 (3H,s), 3,79 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,65 (2H,s), 6,84 (1 H,s), 7,00 (1 H,s),

8,62 (1 H,s), 8,94 (1 H,s), 10.83 (1 H,s). LRMS: m/z 586 (M+l)⁺.

Příklad 38: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2- (l-methylimidazol-2-yl) -methyl-3-n-propyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulních sloučeniny z Přípravy 28 (232 mg, 0.58 mmol) a Přípravy 92 (152 mg, 0.58 mmol), triethylaminu (403 μΐ, 2,9 mmol) a dichlormethanu (8 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Přidá se solanka (20 ml) a získaná směs se extrahuje dichlormethanem (2 x 20 ml), kombinované extrakty se suší (MgSC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku.

Míšený roztok tohoto meziproduktu a bis(trimethylsilyl)amidu ' (305 mg, 1,53 mmol) v ethanolu (10 ml) se zahřívá při teplotě 100°C po dobu 14 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichloromethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (163 mg, 49%) ve formě žlutého oleje, δ (CDCla) : 0.96 (3H,t), 1,01 (3H,t), 1,57 (3H,t), 1,72 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,13 (6H,m), 3,77 (3H,s), 4,75 (2H,q), 5,67 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 7,00 (1 H,s), 8,63 (1 H,s), 9,00 (1 H,s), 10.65 (1 H,s). LRMS: m/z 570 (M+l)⁺.

Příklad 39: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2- (l-methylimidazol-2-yl) -methyl-3n-propyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (61%) z titulní sloučeniny příkladu 38 a 2-methoxyethanolu, za použití postupu podle příkladu 9, δ (CDCI3) : 0.97 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,74 (2H,m), 2,41 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,14 (6H,m),

3,57 (3H,s), 3, 76 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,66 (2H,s), 6,86 (1 H,s), 7,00 (1 H,s), 8,62 (lH,s), 8,94 (lH,s), 10.82 (lH,s). LRMS: m/z 600 (M+l)⁺.

Příklad 40: 5-[2~n-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-(l-methylimidazol-2-yl)-methyl-3-n-propyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě krémové pěny (76%) z titulní sloučeniny příkladu 38 a n-butanolu, za použití postupu podle příkladu 9, Zjištěno: C, 54,83; H, 6,74; N,

20.08, C28H39N9O4S ; H₂O vyžaduje C, 54,62; H, 6,71; N, 20.47%. δ (CDC1₃) : 0.93 (3H,t), 1,00 (6H,m), 1,54 (2H,m), 1,77 (2H,m), 1,92 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m) , 3,12 (6H,m), 3,76 (3H,s), 4,66 (2H,t,), 5,67 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 6,98 (1 H,s),

8,62 (1 H,s), 8,97 (1 H,s), 10.64 (1 H,s). LRMS: m/z 599 (M+2)⁺.

Příklad 41: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(prop-2oxy)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridazin-3-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 98 (230 mg, 0.38 mmol), t-butoxidu draselného (258 mg, 2,3 mmol) a propan-2-olu (10 ml) se zahřívá v uzavřené zkumavce při teplotě 100 °C po

dobu 24 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí ve dvou kolech chromatografie na silikagelové koloně, za použití nejprve elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (100:0 až 95:5) a potom elučního gradientu ethylacetatu: methanolu (90:10 až 80:20), za zisku titulní sloučeniny (42 mg, 19%) ve formě oranžové klovatiny. δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,01 (3H,t),

1,55 (6H,d), 1,75 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,02 (2H,t), 3,12 (4H,m), 5,67 (1 H,m), 5,88 (2H,s), 7,47 (2H,m), 8,60 (1 H,s), 8,98 (1 H,s), 9,16 (1 H,d), 10.70 (lH,s). LRMS: m/z 582 (M+l)⁺.

Příklad 42: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-3-n-propyl- (2-pyrimidin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě žluté pěny (14%) z titulní sloučeniny Přípravy 102b, za použití postupu podle příkladu 10. δ (CDC1₃) : 0.99 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,81 (2H,m) , 2,42 (2H,q>, 2,55 (4H,m), 2,97 (2H,t), 3,14 (4H,m), 3,54 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,80 (2H,s), 7,22 (1 H,m),

8,62 (1 H,s), 8,70 (2H,d), 8,99 (1 H,s), 10.72 (1 H,s). LRMS: m/z 597 (M)+.

Příklad 43a: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-l- (pyrimidin-2-yl) methyl-1, 6-dihydro 7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 43b: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2- (pyrimidin-2-yl) methyl-2,6-dihydro

7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulních sloučenin z Přípravy 103a a Přípravy

103b (390 mg, 0.66 mmol), t-butoxidu draselného (224 mg, 2,0 mmol), 4A molekulárních sít a ethanolu (10 ml) se zahřívá v uzavřené nádobě po dobu 18 hodin při 100 °C a potom se nechá vychladnout a filtruje se. Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě hnědého oleje se suspenduje v dichlormethanu (25 ml). Směs se promyje vodou (5 ml), suší se (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (99:1 až 95:5), za zisku oranžové pěny. Tento materiál se dále přečistí HPLC za použití Cis Magellanovi kolony a methanolu:vody:diethylaminu (50:50:0.1) jako eluens, při průtoku 20 ml/min., za zisku první titulní sloučeniny (1-izomeru; 20 mg) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 1,04 (6H,m), 1,58 (3H,t), 1,88 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,57 (4H,m), 2,98 (2H,t), 3,14 (4H,m), 4,75 (2H,q), 6,07 (2H,s), 7,18 (lH,m), 8,64 (3H,m), 9,10 (lH,s), 10.75 (lH,s). LRMS: m/z 568 (M+l)⁺; a potom následoval zisk druhé titulní sloučeniny (2-izomeru; 20 mg) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 1,02 (6H,m), 1,58 (3H,t), 1,82 {2H,m), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m), 2,98 (2H,t), 3,15 (4H,m), 4,74 (2H,q), 5,80 (2H,s), 7,23 (lH,m), 8,63 (lH,s), 8,70 (2H,m), 9,03 (1 H,s), 10.56 (1 H,s). LRMS: m/z 568 (M+l)⁺ Příklad 43b: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyrimidin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Příklad 44: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-l-(pyridin-2-yl)methyl-1,6-dihydro-7H pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 105 (304 mg, 0.52 mmol), t-butoxidu draselného (175 mg, 1,56 mmol) a ethanolu » · · « (10 ml) se zahřívá v uzavřené nádobě po dobu 18 hodin při teplotě 100 °C a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě hnědého oleje se rozdělí mezi dichlormethan (15 ml) a vodu (5 ml). Fáze se separují, organická fáze se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku hnědé pěny, která se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97:3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (230 mg, 78%) ve formě bílého pěny. Zjištěno: C, 56,93; H, 6,03; N, 19,42, C27H34N8O4S vyžaduje: C, 57,22; H,

6,04; N, 19,77%. δ (CDCls) : 1,01 (3H,t), 1,59 (6H,m), 1,86 (2H,m), 2,42 (2H,g), 2,57 (4H,m), 2,97 (2H,t), 3,16 (4H,m), 4,74 (2H,g), 5,94 (2H,s), 7,02 (lH,d), 7,18 (lH,m), 7,60 (lH,m), 8,57 (lH,d), 8,63 (lH,s), 9,10 (lH,s), 10.85 (lH,s). LRMS: m/z 567 (M+l)⁺.

Příklad 45: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-l- (l-methylimidazol-2-yl) methyl-1,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě světle žlutého pevného materiálu (60%) z titulní sloučeniny Přípravy 107, za použití postupu podle příkladu 44, δ (CDCI3) : 1,02 (3H,t), 1,38 (3H,t),

1,59 (3H,t), 2,41 (2H,g), 2,56 (4H,m), 2,97 (2H,g), 3,15 (4H,m), 3, 78 (3H,s), 4, 75 (2H,g), 5,89 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 7,00 (1 H,s), 8,64 (1 H,s), 9,07 (1 H,s), 1 0.87 (1 H,s).

LRMS: m/z 556 (M+l)⁺.

Příklad 46: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-l-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z příkladu 45 (150 mg, 0.27 mmol), t-butoxidu draselného (126 mg, 1,1 mmol) a 2-methoxyethanolu (6 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 48 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu: 0,88 vodného amoniaku (90:10:1). Získaný materiál se trituruje s diisopropyletherem, směs se filtruje a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (43 mg, 27%) ve formě pěny. δ (CDCI3) : 1,10 (3H,t), 1,36 (3H,t), 2,52 (2H,q), 2,65 (4H,m) , 2,96 (2H,q),

3,22 (4H,m), 3,56 (3H,s), 3, 75 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4, 78 (2H,t], 5,92 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 7,01 (1 H,s}, 8,63 (1 H,s), 8,99 (1 H,s), 11,1 0 (1 H,s). LRMS: m/z 585 (M)⁺.

Příklad 47: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-l- (l-methylimidazol-2-yl)methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě světle žlutého pevného materiálu (11%) z titulní sloučeniny Přípravy 109, za použití postupu podle příkladu 10. Zjištěno: C, 52,43; H, 6,11 ; N, 20.12, C27H37N9O5S; H2O vyžaduje: C, 52,50; H, 6,36; N, 20.41 %. δ (CDCls): 0.98 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,81 (2H,m) , 2,41 (2H,q),

2,55 (4H,m), 2,90 (2H,t), 3,15 (4H,m), 3,58 (3H,s), 3,75 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,78 (2H,t), 5,92 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 7,00 (1 H,s), 8,63 (1 H,s), 9,00 (1 H,s), 11,07 (1 H,s). LRMS: m/z 600 (M+l)⁺.

Příklad 48: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]3-n-propyl-l- (pyrimidin-2-yl)methyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on ·

Titulní sloučenina se získá ve formě žluté pěny (5%) z titulní sloučeniny Přípravy 102a, za použití postupu podle příkladu 10. δ (CDCls) : 1,02 (6H,m), 1,86 (2H,m) , 2,42 (2H,q),

2,56 (4H,m) , 2,97 (2H,t), 3,17 (4H,m) , 3,54 (3H,s), 3,83 (2H,t), 4,77 (2H,t), 6,09 (2H,s), 7,16 (1 H,m) , 8,65 (3H,m) , 9,03 (1 H,s), 11,00 (1 H,s). LRMS: m/z 598 (M+l)⁺.

Příklad 49: 5-{2-ethoxy-5-[4-(pyrrolidin-1ylkarbonylmethyl)piperazin-1-ylsulfonyl]pyridin-3-yl}3-npropyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 63 (350 mg, 0.715 mmol), 1-(pyrrolidin-l-ylkarbonylmethyl)piperazinu (150 mg, 0.715 mmol) a ethanolu (40 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a potom se směs odpaří ze redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a suspenze se extrahuje ethylacetátem (3 x 30 ml). Kombinované extrakty se promyjí solankou (3 x 20 ml), suší se (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Získaný zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 96:4) za zisku oleje, který se trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (240 mg, 52%) ve formě bezbarvé pěny. Zjištěno: C, 56,79; H, 6,30; N, 18,49, C31H39N9O5S; 0,50 H₂O; 0,25 C4H10O vyžaduje C, 56,75; H, 6,32; N, 18,61 %. δ (CDCI3) : 0.94 (3H,t), 1,60 (3H,t), 1,66-1,86 (4H,m) , 1,92 (2H,m) , 2,68 (4H,m), 2,98 (2H,t), 3,14 (2H,s), 3,18 (4H,m) , 3,32-3,46 (4H,m), 4,75 (2H,q), 5,70 (2H,s), 7,18 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,62 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,63 (1 H,s), 9,00 (1 H,s), 10.66 (1 H,s). LRMS: m/z 650 (M+l)⁺.

• ·

Příklad 50: 5-[2-ethoxy-5-(4-allyl-2(S),5R-dimethylpiperazin1-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok (-)-l-allyl-2(R),5(S)-dimethylpiperazinu (WO 93/15062; 502 mg, 3,2 mmol) v ethanolu (4 ml) se po kapkách přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 63 (800 mg, 1,6 mmol) v ethanolu a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a potom se odpaří ze redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodný roztok uhličitanu sodného (20 ml) a ethylacetát (20 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje ethylacetatem (2 x 20 ml). Kombinované organické roztoky se promyjí solankou (20 ml), suší se (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Získaný oranžový olej se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 98:2), po které následuje triturace s etherem, za zisku titulní sloučeniny (550 mg, 57%) ve formě bezbarvé pěny. Zjištěno: C, 59,07; H, 6,37; N, 18,18, C30H38N8O4S vyžaduje: C, 59,39; H, 6,31; N, 18,47%. δ (CDC1₃) : 0.95 (3H,t), 0.99 (3H,d), 1,24 (3H,d), 1,58 (3H,t), 1,72 (2H,m) , 2,27 (1 H,dd), 2,73 (1 H,dd), 2,92 (1 H,m) , 3,00 (4H,m), 3,20 (1 H,dd), 3,48 (1 H,dd), 3,85 (lH,m), 4,75 (2H,q), 5,22 (2H,m), 5,68 (2H,s), 5,74 (lH,m), 7,09 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,67 (lH,s), 9,08 (lH,s), 10.69 (lH,s). LRMS: m/z 607 (M+l)⁺.

Příklad 50a: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(2-methoxy-l(R)-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-(1methylimidazol-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pěny (82%) z titulních sloučenin Příprav 165 a 170, za použití podobného postupu, jako je postup podle příkladu 11, Zjištěno: C, 52,14;

H, 6,15; N, 19,73, C27H37N9O5S; 1,5 H2O vyžaduje: C, 51,74; H, «· ·· «·· ·

6,43; N,	20.11%. δ	(CDC13) :	1,02	(3H, t), 1,32 (3H, t),	1,50
(3H, d),	2,40 (2H,	q), 2,56	(4H,	m), 3,04-3,22 (6H, m),	3,54
(3H, s),	3,62-3,80	(5H, m) ,	5,59	(1 H, m), 5,66 (2H, s)	, 6,83
(1 H, s)	, 6,99 (1	H, s), 8,	60 (1	H, s), 8,84 (1 H, s},	10.87

(1 H,s). LRMS: m/z 600 (M+l)⁺.

Příklady 51 až 60:

Skupina analogů vzorce uvedeného výše, které se liší svým R¹⁰ substituentem, byla syntetizována technikou vysokorychlostní analogové syntézy (HSAS), jak je popsána dále.

0,4 M roztok triethylaminu v dičhlormethanu (100 μΐ, 40 μπιοί) se přidá do každé jamky 96-jamkové plotny obsahující požadovanou škálu 1-substituovaných piperazinů (10 μπιοί) . 0,1 M roztok titulní sloučeniny z Přípravy 63 v dičhlormethanu (100 μΐ, 10 μπιοί) se přidá do každé jamky, potom se plotna zakryje a třepe se při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Reakční směsi se přefiltrují přes 96-jamkový filtrační blok, který se promyje dichlormethanem (1 ml) a filtráty se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytky se rozpustí v dimethylsulfoxidu (1 ml) a a · · · přečistí se HPLC za použití 5 μ Hypersil C18 kolony (10 x 0,46 cm) s průtokem 4 ml/min a za použití elučního gradientu 0,1% kyseliny trifluoroctové ve vodě: acetonitrilu.

Tímto způsobem se získají následující sloučeniny:

Příklad	RW	LRMS (m/z)	Retenční čas (min)
51		581 (M+1)+	5.25
52	Λ	581 (M+1)+	5.10
53	X	629 (M+1)+	5.70
54	oo	659 (M+1)+	6.02
55	XO	672 (M)+	5.36
56	0¼	706 (M+2)+	8.24
57	xo	687 (M+1)+	6.64
58	X	617 (M+2)+	5.45
59	'X	616 (M+1)+	5.57

60		617	7.38
	Ό «r;· , 1...	(M+1)+

* = místo navázání R¹⁰

Příklad 61: 3-ethyl-5-[2-(2-methoxyethoxy)-5-(3,4,5trimethylpiperazin-l-ylsulfonyl) -pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (170 mg, 47%) z titulní sloučeniny Přípravy 64 a 1,2,6-trimethylpiperazinu (J.Med.Chem., 1968, 11, 592), za použití postupu podle příkladu 50. jištěno: C, 55,78; H, 6,42;

N, 18,42, C28H36N₈0sS; 0,50 H₂O vyžaduje: C, 55,22; H, 6,16; N, 18,58%. δ (CDC1₃) : 1,09 (6H,d), 1,31 (3H,t), 2,01 (5H,m), 2,36 (2H,m), 3,04 (2H,q), 3,60 (5H,m), 3,88 (2H,t), 4,79 (2H,t),

5,68 (2H,s), 7,12 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,64 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,95 (1 H,s), 10.79 (1 H,s). LRMS: m/z 597 (M+l)⁺.

Příklad 62: 3-ethyl-5-[2-(2-methoxyethoxy)-5-piperazin-lylsulfonyl]pyridin-3-yl)-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok titulní sloučeniny z Přípravy 64 (200 mg, 0.40 mmol) v dichlormethanu (10 ml) se po kapkách přidá do míšeného roztoku piperazinu (136 mg, 1,58 mmol) a triethylaminu (110 μΐ,

O. 79 mmol) v dichlormethanu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 1 hodiny, potom se promyje vodou (10 ml), suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého pevného materiálu se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (98:2 až 92:8), po které následuje triturace s dichlormethanem, za zisku titulní sloučeniny (189

mg, 86%) ve formě bílé pěny. Zjištěno: C,	52,75; H, 5,43; N,
19,18, C25H30N8O5S;	0,75	H2O vyžaduje C, 52,	85;	H, 5,59; N,
19,72%. δ (CDCls) :	1,30	(3H,t), 2,94-3,13	(10	H,m), 3,58

(3H,s), 3,88 (2H,t), 4,79 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,62 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,98 (1 H,s), 10.82 (1 H,s). LRMS: m/z 555 (M+l)⁺.

Příklad 63: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl] -2-methoxypyridin-3-yl)-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny z příkladu 1 (350 mg, 0.63 mmol), bis(trimethylsilyl)amidu draselného (630 mg, 3,15 mmol) a n-propanthiolu (5 ml) se zahřívá v uzavřené zkumavce při 110 °C po dobu 48 hodin, potom se nechá vychladnout a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se azeotropuje s dichlormethanem: methanolem (95:5), potom se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (15 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x15 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Tento zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97:3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (170 mg, 50%) ve formě žlutého pevného materiálu. Zjištěno: C, 54,50; H, 5,64; N, 19,93, C25H30N8O4S; 0,75 H2O vyžaduje C, 54,38; H, 5,75; N, 20.29%. δ (CDCls) : 1,02 (3H,t), 1,32 (3H,t,) 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,06 (2H,q), 3,14 (4H,m), 4,26 (3H,s), 5,68 (2H,s), 7,14 (1 H,d), 7,22 (lH,m), 7,64 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,66 (1H,S), 9,05 (1H,S), 10.59 (lH,s). LRMS: m/z 540 (M+2)⁺.

Příklad 64: 5-[2-benzyloxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl)-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (360 mg, 1,81 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z příkladu 1 (200 mg, 0.36 mmol) v benzylalkoholu (5 ml) při teplotě 1000 °C a reakční směs se mísí po dobu 14 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se rozdělí mezi dichlormethan (10 ml) a solanku (10 ml), fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (Na2SO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Residuální benzylalkohol se odstraní Kugelrohrovou destilací a potom se surový materiál přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97,5:2,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (86 mg, 39%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno:C, 59,92; H, 5,64; N, 17 .60. C3iH3₄N8O₄S; 0,40 H2O vyžaduje: C, 59, 87; H, 5,64; N, 18,02%. δ (CDCls) : 1,05 (3H,t), 1,29 (3H,t), 2,41 (2H,q), 2,56 (4H,m) , 3,05 (2H,q), 3,15 (4H,m), 5,68 (2H,s)

5,75 (2H,s), 7,1 0 (1 H,d), 7,24 (1 H,m), 7,42 (3H,m), 7,52 (2H,m), 7,64 (lH,m), 8,58 (lH,d), 8,65 (lH,s), 9,02 (lH,s), 10.58 (lH,s). LRMS: m/z 615 (M+l)⁺.

Příklad 65: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(furan-3ylmethoxy)pyridin-3-yl)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (176 mg, 0.88 mmol) se přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z příkladu 26 (100 mg, 0.17 mmol) ve 3-hydroxymethylfuranu (4 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 24 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří se za

redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (33 mg, 31%) ve formě světle žluté pěny. δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,72 (2H,m), 2,41 (2H,q), 2,55 (4H,m) , 2,99 (2H,t), 3,14 (4H,m), 5,63 (2H,s), 5,68 (2H,s), 6,60 (1 H,s), 7,09 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,44 (1 H,s), 7,64 (2H,m), 8,57 (lH,d),

8,68 (1H,S), 9,02 (lH,s), 10.53 (lH,s). LRMS: m/z 619 (M+l)⁺.

Příklad 66: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(pyridin-2-ylmethoxy)pyridin-3-yl)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl2,6-dihydrQ-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs bis(trimethylsilyl)amidu draselného (260 mg,

1.32 mmol) a 2-hydroxymethylpyridinu (5 ml) se zahřívá při 100 °C po dobu 1 hodiny a potom se přidá titulní sloučenina příkladu 26 (150 mg, 0.26 mmol) a reakční směs se mísí při 100 °C po dobu 14 hodin. Získaná chladná směs se rozdělí mezi dichlormethan (10 ml) a solanku (10 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x10 ml). Kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek ve formě žlutého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: ethylacetatu: methanolu (47,5:47,5:5,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (35 mg, 21%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0.94 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,73 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,55 (4H,m) , 2,98 (2H,t), 3,14 (4H,m), 5,69 (2H,s), 5,92 (2H,s), 7,07 (lH,d), 7,21 (lH,m),

7.33 (2H,m), 7,62 (lH,m), 7,76 (lH,m), 8,58 (2H,m), 8,81 (lH,s), 8,85 (lH,d), 12,80 (1 H,s). LRMS: m/z 630 (M+l)⁺.

Příklad 67: 5-[2-(2-dimethylaminoethoxy)-5-(4-ethylpiperazin63

-1-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z příkladu 26 (200 mg, 0.35 mmol), bis(trimethylsilyl)amidu draselného (352 mg,1,76 mmol) a 2-dimethylaminoethanolu (1,5 ml) se mísí při teplotě 90 °C po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Přidá se voda, směs se extrahuje ethylacetátem (3x5 ml) a kombinované extrakty se suší (MgSCU) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (95:5 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny (147 mg, 68%) ve formě špinavě bílé pěny. Zjištěno: C, 56,35; H, 6,37; N, 20.12, C29H39N9O4S; 0,50 H2O vyžaduje: C, 56,29; H, 6,52; N, 20.37%. δ (CDC1₃) : 0.94 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,72 (2H,m), 2,43 (8H,m),

2.56 (4H,m), 2,74 (2H,t), 2,95 (2H,t), 3,15 (4H,m), 4,80 (2H,t), 5,67 (2H,s), 7,07 (1 H,d), 7,21 (1 H,m) , 7,61 (1 H,m) ,

8.56 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,75 (1 H,s), 12,23 (1 H,s). LRMS: m/z 610 (M+l)⁺.

Příklad 68: 5-{5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-[2(morfolin-4-yl)ethoxy]pyridin-3-yl}-3-n-propyl-2-(pyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs bis(trimethylsilyl)amidu draselného (180 mg, 0.88 mmol) a 4-(2-hydroxyethyl)morfolinu (4 ml) se mísí při 100 °C po dobu 1 hodiny, potom se přidá titulní sloučenina z příkladu 26 (100 mg, 0.17 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě 110 °C po dobu 18 hodin. Získaná chladná směs se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (10 ml), fáze se separují a organická fáze se promyje vodou (10 ml), suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: methanolu (90:10 až 80:20), za zisku titulní sloučeniny (33 mg, 30%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0.95 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,74 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m) , 2,64 (4H,m), 2,90 (2H,t), 2,99 (2H,t), 3,15 (4H,m), 3,80 (4H,m), 4,75 (2H,t), 5,68 (2H,s),

7,12 (1 H,d), 7,25 (1 H,m) , 7,63 (1 H,m) , 8,58 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,92 (1 H,s), 11,16 (1 H,s). LRMS: m/z 652 (M+l)⁺.

Příklad 69: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(1methylpiperidin-4-yloxy)pyridin-3-yl)-3-n-propyl-2-(pyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Butoxid česný (76 mg, 0,37 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z přípravy 119 (160 mg, 0,24 mmol) v 3-methylpentan-3-olu (5 ml) a reakční směs se mísí při 120 °C po dobu 3 hodin a nechá se vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a rozdělí se mezi dichlormethan (10 ml) a vodu (10 ml). Fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x10 ml). Kombinované organické roztoky se suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (95:5 až 92,5:7,5), za zisku titulní sloučeniny ve formě žluté pěny δ (CDCI3) : 0.94 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,74 (2H,m), 2,10 (2H,m), 2,22 (2H,m), 2,42 (5H,m), 2,58 (6H,m),

2,78 (2H,m), 2,99 (2H,t), 3,13 (4H,m) , 5,59 (1 H,m) , 5,67 (2H,s), 7,10 (1 H,d), 7 .22 (1 H,m), 7,63 (1 H,m), 8,57 (1 H,d), 8,61 (lH,s), 9,00 (lH,s), 10.63 (lH,s). LRMS: m/z 636 (M+l)⁺.

Příklad 70: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-lylsulfonyl)pyridin-3-yl)-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on • · · ·

Směs titulní sloučeniny z příkladu 1 (180 mg, 0.32 mmol), kyseliny 3-chlorbenzoové (13 mg, 0.08 mmol) a dichlormethanu (10 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 20 minut, přidá se kyselina 3-chlorperoxybenzoová (112 mg, 0.32 mmol) a reakční směs se mísí po dobu dalších 18 hodin, potom se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x20 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu:methanolu (80:20) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (82 mg, 45%) ve formě bílého prášku. Zjištěno: C, 52,73; H, 5,67; N, 17,69, C26H32N8O5S; 0,50 CH2CI2 vyžaduje C, 52,08; H, 5,44; N, 18,34%. δ (CDC1₃) : 1,30 (3H,t), 1,40 (3H,t), 1,58 (3H,t), 3,02 (2H,q), 3,20 (2H,m) , 3,32 (4H,m) , 3,48 (2H,m), 3,72 (2H,m), 4,76 (2H,q), 5,68 (2H,s), 7,08 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,63 (1 H,m) , 8,58 (1 H,d), 8,65 (1 H,s), 9,03 (1 H,s), 10.70 (1H,S).

Příklad 71: 5-[5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl)-2-npropoxypyridin-3-yl)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Kyselina 3-chlorperoxybenzoová (93 mg, 0.27 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z příkladu 28 (155 mg, 0.27 mmol) v dichlormethanu (2 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin a potom se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu:methanolu: 0,88 vodného amoniaku (90:10.1) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (40 mg, 25%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0.93 (3H,t), 1,14 (3H,t), 1,41 (3H:t), 1,72 (2H,m), 2,00 (2H,m), 2,97 (2H,t), 3,15 (2H,m) , 3,31 (4H,m), 3,50 (2H,m) , • · * ·· · · · ··· · · ··

3,70 (2H,m), 4,65 (2H,t), 5,68 (2H,s), 7,06 (l,H,d), 7,24 (1

H, m), 7,64 (1 H,m) , 8,58 (1 H,d), 8,66 (1 H,s), 9,06 (1 H,s), 10.67 (1 H,s). LRMS: m/z 598 (M+l)⁺.

Příklad 72: 3-ethyl-5-[5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-lylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 73: 3-ethyl-5-[5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-lylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(1-oxidopyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3—

d]pyrimidin-7-on

Kyselina 3-chlorbenzoová (15 mg, 0.096 mmol)se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny příkladu 4 (223 mg, 0.38 mmol) v dichlormethanu (3 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 30 minut. Přidá se kyselina 3chlorperoxybenzoová (132 mg, 0.38 mmol) a reakční směs se mísí po dobu dalších 14 hodin, potom se rozdělí mezi dichlormethan (5 ml) a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (5 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (3x10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSOH a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (90:10 až 80:20), za zisku první titulní sloučeniny (78 mg, 34%) ve formě pevného materiálu. Zjištěno: C, 51,77; H, 5,82; N, 17,33, C₂7H34N₈O₆S; 1,75 H₂O vyžaduje C, 51,46; H, 6,00; N, 17 .78%. δ (CDCI3) : 1,28 (3H,t),

I, 42 (3H,t), 3,02 (2H,q), 3,18 (2H,m), 3,30 (4H,m), 3,50 (2H,m), 3,56 (3H,s), 3,72 (2H,m), 3,88 (2H,t), 4,80 (2H,t),

5,68 (2H,s), 7,08 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,64 (1 H,m), 8,58 (1

H,d), 8,68 (1 H,s), 8,99 (1 H,s), 10.84 (1 H,s);

·· ·· ··· ··· a potom byla získána druhá titulní sloučenina (50 mg, 22%) ve formě pevného materiálu. Zjištěno: C, 50.15; H, 5,81; N,

16,85, C27H34N8O6S; 2,0 H2O vyžaduje C, 49, 84; H, 5,89; N,

17,22%. δ (CDCls) : 1,32 (3H,t), 1,42 (3H,t), 3,05 (2H,q), 3,18 (2H,m), 3,32 (4H,m), 3,53 (5H,m), 3,72 (2H,m), 3,86 (2H,t), 4,80 (2H,t), 5,81 (2H,s), 6,78 (1 H,d), 7,22 (2H,m), 8,29 (1 H,d), 8,66 (1 H,s), 8,99 (1 H,s), 10.90 (1 H,s).

Příklad 74: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-2-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-n-propyl-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (110 mg, 0.99 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny z Přípravy 120 (400 mg, 0.66 mmol) ve 3-methylpentan-3-olu (20 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se suspenduje ve vodě (10 ml) a suspenze se extrahuje dichlormethanem (3x10 ml). Kombinované extrakty se suší (MgSOD a odpaří se za redukovaného tlaku a potom se zbytek ve formě žlutého oleje přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dičhlormethanu:methanolu (97,5:2,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (65 mg, 17%) ve formě bílé pěny. Zjištěno: C, 54,51 ; H, 6,95; N, 18,18, C27H40N8O5S; 0,15 CH2CI2 vyžaduje: C, 54,51 ; H, 6,92; N, 18,14%. δ (CDCI3) : 1,04 (6H,m), 1,58 (3H,t), 1,88 (2H,m) , 2,41 (2H,q), 2,54 (8H,m), 2,99 (4H,m), 3,15 (4H,m), 3,68 (4H,m) , 4,40 (2H,t), 4,75 (2H,q), 8,62 (lH,s), 9,04 (1 H,s), 10.61 (1 H,s). LRMS: m/z

589 (M+l)⁺.

Příklad 75: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-npropyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on • · · · • ·

Titulní sloučenina se získá jako bílý pevný materiál (24 %) z titulní sloučeniny příkladu 74 a 2-methoxyethanolu, za použití postupu podle příkladu 66, Zjištěno: C, 53,81 ; H,

6,93; N, 16,89, C28H42N8O6S; 0,30 C4H8O2; 0,20 H2O vyžaduje: C, 54,06; H, 6,96; N, 17,27%. δ (CDCI3) : 1,04 (6H,m), 1,87 (2H,m) , 2,42 (2H,q), 2,55 (8H,m) , 2,99 (4H,m) , 3,16 (4H,m), 3,56 (3H,s), 3,69 (4H,m), 3,88 (2H,t), 4,40 (2H,t), 4,79 (2H,t),

8,63 (1H,S), 8,98 (lH,s), 10.78 (lH,s).LRMS: m/z 619 (M+l)⁺.

Příklad 76: 3-t-butyl-5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-lylsulfonyl) pyridin-3-yl] -1-(pyridin-2-yl)methyl-l,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 121 (150 mg, 0.25 mmol), t-butoxidu draselného (71 mg, 0.625 mmol) a ethanolu (10 ml) se zahřívá při teplotě 100 °C po dobu 18 hodin v uzavřené zkumavce a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (10 ml) a ethylacetát (15 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x15 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSCN) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu:methanolu (100:0 až 95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (140 mg, 97%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 56,30; H, 6,39;

N, 18,43, C28H36N6O4S; H2O vyžaduje: C, 56,17; H, 6,40; N,

18,72%. δ (CDCls) : 1,04 (3H,t), 1,56 (12H,m) , 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m), 3,16 (4H,m) , 4,76 (2H,q), 5,95 (2H,s), 6,94 (1 H,d), 7,18 (1 H,m), 7,60 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,64 (lH,s), 9,08 (1H,S), 10.82 (1H,S). LRMS: m/z 581 (M+l)⁺.

Příklad 77: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl] -2- (2-morfolin-4-yl) ethyl-3-n-propyl1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pevné substance (68%) z titulní sloučeniny přípravy 122, za použití postupu podle příkladu 74, Zjištěno: C, 54,59; H, 6,91 ; N, 18,08, C27H40N8O5S; 0.15 CH2CI2 vyžaduje C, 54,59; H, 6,89; N, 18,08%. δ (CDC1₃) : 1,01 (6H,m), 1,60 (3H,t), 1,84 (2H,m) , 2,42 (2H,q), 2,53 (8H,m), 2,86 (2H,t), 2,94 (2H,t), 3,15 (4H,m) , 3,62 (4H,m), 4,72 (4H,m), 8,63 (1 H,s), 9,09 (1 H,s), 1 0.81 (1 H,s). LRMS: m/z 589 (M+l)⁺.

Příklad 78: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z přípravy 152 (25,9 g, 52,5 mmol), a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (22,0 g, 110.0 mmol) v ethanolu (1500 ml) se zahřívá při 120°C po dobu 18 hodin v uzavřené nádobě. Ochlazený roztok se zahustí při redukovaném tlaku a pre-adsorbuje se na silikagel. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelové koloně za použití elučního gradientu ethylacetatu: diethylaminu (97:3 až 95:5) a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny (11,0 g, 44%) ve formě bílé pevného materiálu.

δ (CDC1₃) : 1,04 (3 H,t), 1,56 (12 H,m) , 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m), 3,16 (4H,m), 4,76 (2H,q), 5,95 (2H,s), 6,94 (1 H,d), 7,18 (1 H,m), 7,60 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,64 (lH,s), 9,08 (lH,s), 10.82 (1H,S). LRMS: m/z 581 (M+l)⁺.

Příklad 79: 5-[2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina z Přípravy (500 mg, 1,0 mmol) se přidá do roztoku bis(trimethylsilyl)amidu draselného (610 mg, 3,06 mmol) v ethanolu (20 ml), a reakčni směs se zahřívá při teplotě 110 °C v uzavřené zkumavce po dobu 18 hodin. Ochlazená směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozpustí ve vodě a neutralizuje se kyselinou chlorovodíkovou. Tato vodná suspenze se extrahuje dichlormethanem (3x30 ml), kombinované extrakty se promyjí solankou (3x30 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (100:0 až 97,5:2,5) a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny (207 mg, 44%) ve formě špinavě bílého pevného materiálu, δ (CDCls) : 1,03 (3H, t) , 1,59 (3H, t) , 1,83 (2H, m) , 2,29 (3H, ·· ·· ··· ··· ·· ··

S) , 2,53 (4H, m), 3,00 (2H, t), 3,16 (4H, m) , 4,10 (3H, s), 4,75 (2H, q), 8,63 (1 H, s), 9,06 (1 H, s), 10.65 (1 H, s). LRMS : m/z 4Ί6 (M+l)⁺.

Příklady 80 až 84

Sloučeniny obecného vzorce:

se připraví z vhodných pyrazol-5-karboxamidů, tj. Příprav 153, 154, 156, 157 a 155, v příslušném pořadí, za použití postupu podobného postupu popsanému v příkladu 79, V příkladech 80 až 84 je R¹ methyl a R¹³ je -OR³'

clad	R1	R2	R3	R10	Data
80	ch3	(CH2)2CH3	ch2ch3	OH2CH3	Zjištěno c, 53.97; H, 6.38; N, 19.75. C22H31N7O4S vyžaduje Q, 53.97; H, 6.38; N, 20.03% δ (CDCb) : 1.03 (6H. t), 1.58 (3H, t), 1.82 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H, m), 2.99 (2H, t), 3.14 (4H, m), 4.09 (3H, s), 4.76 (2H, q), 8.63 (1H, s), 9.05 (1H, s). 10.64 (1H, s). LRMS : m/z 490 (M+1)+
81	ch2ch3	ch2ch3	ch2ch3	ch2ch3	δ (CDCI3) : 1.02 (3H, t), 1.40 (3H, t), 1.58 (6H, m), 2.41 (2H, q), 2.55 (4H, m), 3.00-3.18 (6H, m), 4.38 (2H, q), 4.75 (2H, q), 8.63 (1H, s), 9.04 (1H, s), 10.63 (1H, s). LRMS : m/z 490 (M+1)+
82 1,2	•χτ	ch2ch3	ch2ch3	ch2ch3	zjištěno C, 56.66; H, 6.03; N, 19.57 C27H34N8O4S;0.25 H2O vyžaduje c, 56.78; H. 6.09; N, 19.62%. δ (CDCI3) : 1.02 (3H, t), 1.30 (3H, t), 1.58 (3H, t), 2.41 (2H, q), 2.57 (7H, m), 3.04 (2H, q), 3.15 (4H, m), 4 77 Í2H. Qh 5.64 (2H, s), 6.80

					8.62 (1H, s), 9.02 (1H, s), 10.66 (1H, s). LRMS ; m/z 567 (M+1)+
83		ch2ch3	ch2ch3	ch2ch3	δ (CDCI3) : 1.04 (3H, t), 1.40 (3H, t), 1.58 (3H, t), 2.42 (2H, q), 2.58 (4H, m), 3.01 (2H, q), 3.16 (4H, m), 3.80 (3H, s), 4.75 (2H,q ), 5.82 (2H, s), 6.54 (1H, d), 6.60 (1H, d), 7.46 (1H, m), 8.64 (1H, s), 9.10 (1H,s), 10.85 (1H, s). LRMS : m/z 583 (M+1)+
84 1	7	ch2ch3	ch2ch3	ch2ch3	δ (CDCI3) : 1.03 (3H, t), 1.25 (3H, t), 1.58 (3H, t), 2.13 (3H, d), 2.40 (2H, q), 2.55 (4H, m), 3.01 (2H, q), 3.14 (4H, m), 4.77 (2H, q), 5.84 (1H, q), 7.19 (2H, m), 7.61 (1H, m), 8.56 (1H, d), 8.62 (1H, s), 9.00 (1H, s), 10.60 (1H,s). LRMS : m/z 567 (M+1)+

- použije se 1,5 ekvivalentu bis(trimethylsilyl)amidu draselného = jako chromatografické eluens se použije dichlormethan: methanol: 0,88 amoniak (96:4:0,4).

Příklad 85: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-methoxypyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z příkladu 78 (100 mg, 0.21 mmol), a heptahydratu síranu měďnatého (75 mg, 0.3 mmol) v nasyceném methanolické amoniaku (20 ml) se zahřívá při teplotě 100 °C v uzavřené zkumavce po dobu 4 hodin. Chladná směs se odpaří za

redukovaného tlaku a zbytek se suspenduje ve vodném roztoku uhličitanu sodného (20 ml) a extrahuje se dichlormethanem (3x20 ml) . Kombinované organické extrakty se promyjí solankou (3x20 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku zeleného pevného materiálu. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3), a provede se rekrystalizace za zisku titulní sloučeniny pevného materiálu. Zjištěno: C20H27N7O4S; 0,5 H2O vyžaduje: (CDCI3) : 1,07 (3H, t) , 1,40 (2H, q), 3,19 (4H, m), 4,09 s), 9,05 (1 H, s), 10.58 (1

Příklad 86: 3-ethyl-5-[5-(4-ylsulfonyl)-2-(1(R)-methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3z hexanu/ethylacetatu/methanolu,

(23 mg, 24%) ve formě bílého
c,	51,22; H, 5,81	; N	, 20.61,
c,	51,05; H, 6,00;	N,	20.84%. δ
(3H,	t), 2,40-2,65	(6H	, m), 3,04
(3H,	s), 4,24 (3H,	s) ,	8,65 (1 H

H, s). LRMS : m/z 462 (M+l)⁺.

ethylpiperazin-1n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyld]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina z příkladu 78 (400 mg, 0.84 mmol) se přidá do směsi bis(trimethylsilyl)amidu draselného (840 mg,

4,2 mmol) v (R)-2-butanolu (4 ml) a směs se mísí při 110 °C po dobu 18 hodin. Chladná směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se suspenduje ve vodě (10 ml) a neutralizuje se pomocí

2N kyseliny chlorovodíkové. Tato vodná suspenze se extrahuje ethylacetátem (3x30 ml), kombinované organické extrakty se promyjí roztokem hydroxidu sodného (20 ml), solankou (2x30 ml), suší se (Na2SO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97,5:2,5) a získaný materiál se suspenduje v etheru a odpaří se za redukovaného tlaku. Tento pevný materiál se rekrystalizuje z hexanu/ethylacetatu za zisku titulní sloučeniny (72 mg), 17%) ve formě bílého pevného materiálu.

[a]_D = -20.88° (c=0.083, dichlormethan)

Zjištěno: C, 54,65; H, 6,63; N, 19,25, C23H33N?O₄S; 0,5 H₂0: C, 53,89; H, 6,69; N, 19,13% δ (CDCls) : 1,06 (6H, m) , 1,40 (3H, t) , 1,50 (3H, d) , 1,86 (1 H, m) , 1,99 (1 H, m), 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 3,04 (2H, q) , 3,16 (4H, m) , 4,09 (3H, s), 5,56 (1 H, m), 8,62 (1 H, s) , 9,05 (1 H, s), 10.70 (1 H, s). LRMS : m/z 504 (M+l)⁺.

Příklady 87 až 97:

Sloučeniny následujícího je -OR³:

obecného vzorce, kde R¹ je methyl a

se připraví z vhodných alkoholů a pyrazol[4,3-d]pyrimidin-7onů, za použití postupů podobných postupu popsanému v příkladu

86.

• ·

<lad	R2	R3	R10	Data
87	CH2CH3	A	ch2ch3	Zjištěno: C, 54.02; H, 6.59; N, 18.87 C23H33N7O4S;0.5H2O vyžaduje c, 53.89; H, 6.69; N, 19.13% δ (CDCls) : 1.02 {3H, t), 1.14 (6H, d), 1.40 (3H, t), 2.30 (1H, m), 2.42 (2H, q), 2.58 (4H, m), 3.03 (2H, q), 3.15 (4H, m), 4.09 (3H, s), 4.44 (2H, d), 8.62 (1H, s), 9.03 (1H, s), 10.62
88	(CH2)2CH3	A	ch2ch3	δ (CDCI3) : 1.02 (6H, m), 1.14 (6H, d), 1.82 (2H, m), 2.30 (1H, m), 2.42 (2H, q), 2.56 (4H, m), 2.99 (2H, t), 3.16 (4H, m), 4.08 (3H, s), 4.45 (2H, d), 8.62 (1H, s), 9.03 (1H, s), 10.62 (1H. s). LRMS : m/z 518 (M+1)+
89	ch2ch3	X,	ch2ch3	zjištěno c, 55.11; H, 6.25; N, 19.45. C23H31N7O4S vyžaduje c, 55.07; H, 6.23; N, 19.55%. δ (CDCI3): 1.04 (3H, t), 1.40 (3H, t), 1.90 (1H. m), 1.98 (1H, m), 2.30-2.44 (4H, m), 2.57 (6H, m), 3.02 (2H, q), 3.14 (4H, m), 4.09 (3H, s), 5.50 (1H, m), 8.60 (1H, s), 9.04 (1H, s), 10.68 (1H. s). LRMS : m/z 502 (M+1)+
90 1	(CH2)2CH3	'X/	ch2ch3	zjištěno · C) 56>08; H) 6>45· Nj 18 72 C24H33N7O4S vyžaduje C, 55.90; H, 6.45; N, 19.01% δ (CDCI3) : 0.47 (2H, m), 0.77 (2H, m), 1.02 (6H, m), 1.47 (1H, m), 1.83 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H, m), 2.99 (2H, t), 3.15 (4H, m), 4.09 (3H, s), 4.50 (2H, d), 8.60 (1H, s), 9.05 (1H. s), 10.76 (1H. s). LRMS : m/z 516 (M+1)’

91 2	(CH2)2CH3	XO	ch2ch3	zjištěno: C, 56.53; H, 6.68; N, 18.43. C25H35N7O4S vyžaduje c, 56.69; H, 6.66; N, 18.51% δ (CDCI3) : 1.02 (6H, m), 1.82 (2H, m), 1.912.10 (4H, m), 2.26 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.57 (4H, m), 2.98 (3H, m), 3.14 (4H, m). 4.08 (3H. s), 4.62 (2H, d), 8.61 (IH, s), 9.02 (1H, s), 10.60 (1H,s). LRMS : m/z 530 (M+1)+‘
92	ch2ch3		ch2ch3	zjištěno C, 52.20; H, 6.16; N, 19.26. C22H31N7O5S vyžaduje C, 52,26; H, 6.18; N, 19.39% δ (CDCI3): 1.04 (3H, t), 1.40 (3H. t), 2.42 (2H, q), 2.56 (4H, m), 3.03 (2H, q), 3.15 (4H, m), 3.58 (3H, s), 3.86 (2H, t), 4.09 (3H, s), 4.79 (2H, t), 8.62 (1H, s), 9.00 (1H, s), 10.78 (1H, s). LRMS: m/z 506 (M+1)+

93 3	(CH2)2CH3		ch2ch3	Zjištěno; c, 52.86; H, 6.39; N, 18.67. C23H33N70sS vyžaduje C, 53.16; H, 6.40; N, 18.62% δ (CDCI3) : 1.04 (6H, m), 1.82 (2H, m), 2.40 (2H, q), 2.55 (4H, m), 2.98 (2H, t), 3.14 (4H, m), 3.57 (3H, s), 3.85 (2H, t), 4.07 (3H, s), 4.78 (2H, t), 8.61 (1H, s), 8.99 (1H, s), 10.76 (1H,s). LRMS : m/z 520 (M+1)+
94 3	ch2ch3	OH O	ch2ch3	zjištěno : c, 53.16; H, 6.48; N, 18.32. C23H33N7OsS;0.5H2O vyžaduje C, 52.26; H, 6.48; N, 18.55% δ (CDC!3) : 1.04 (3H, t), 1.38 (6H, m), 1.50 (3H, d), 2.41 (2H, q), 2.57 (4H, m), 2.96 (1H, s), 3.01 (2H, m), 3.15 (4H, m), 4.08 (3H, s), 4.18 (1H, m), 5.22 (1H, m), 8.60 (1H, s), 8.82 (1H, s), 11.27 (1H, s). [a]o = +35.46° (c=0.073. dichloromethanc)
95 2	(CH2)2CH3	05	ch2ch3	δ (CDCI3) : 1.04 (6H, m), 1.84 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H m), 2.99 (2H, t), 3.15 (4H, m), 4.08 (3H, s), 5.91 (2H, s), 7.24-7.37 (2H, m), 7.76 (1H, m), 8.59 (1H, s), 8.83 (2H, m), 12.70 (1H, s). LRMS : m/z 553 (M+1)+
96 1	(CH2)2CH3		ch2ch3	zjištěno; C, 55.22; H. 5.76; N, 19.42, C26H32NgC>4S;0.2CH2CI2 vyžaduje c, 55.24; H, 5.73; N, 19.67% δ (CDCI3) ; 1.01 (6H, m), 1.82 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H, m), 2.98 (2H, t), 3.15 (4H, m), 4.09 (3H, s), 5.78 {2H, s), 7.38 (1H, m), 7.88 (1H, d), 8.61 (2H, m), 8.79 (1H. s), 9.02 (1H, s), 10.45 (1H, s). LRMS : m/z 553 (M+1)+

• ·

97 1

(CH2)2CH3

ch2ch3

δ (CDCIs) : 1.02 (6H, m), 1.82 (2H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H, m), 2.98 (2H, t), 3.16 (4H, m), 4.06 (3H, s), 5.62 (2H, s), 6.60 (1H, s), 7.43 (1H, s), 7.62 (1H. s), 8.66 (1H. s), 9.02 (1H, s), 10.51 (1H, s). LRMS : m/z 542 (M+1)+

= dichlormethan: methanol: 0,88 amoniak (100:0:0,5 až 99,5:1:0,5) se použije jako chromatografické eluens a sloučenina se izoluje bez krystalizace.

2=1= dichlormethan: methanol: 0,88 amoniak (100:0:0,5 až 99,5:1:0,5) se použije jako chromatografické eluens a sloučenina se trituruje s etherem.

= izolováno s krystalizací.

Příklad 98: 5-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-(R)-methoxy-1-(R)-methylpropoxy)pyridin-3yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

(R,R)-2,3-butandiol (7,78 ml, 85 mmol) se po kapkách přidá do ledově chladného roztoku hydridu sodného (3,74 g, 60% ······ · * a·· · · *· · * · · · · · • · · · ♦ ··· • · « · · · · • * · · ··· »·· disperze v minerálním oleji, 93,5 mmol) v etheru (800 ml) a roztok se mísí při teplotě okolí po dobu 30 minut. Po kapkách se přidá methyljodid (5,6 ml, 89,3 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 48 hodin. Přidá se 1,3dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(1H)-pyrimidinon (10,24 ml, 85 mmol) a míšení pokračuje po dobu dalších 90 minut při teplotě zpětného toku. Chladná reakční směs se promyje vodným roztokem chloridu amonného (500 ml) , suší se (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu etheru: pentanu (10:90 až 50:50) za zisku světle žlutého oleje. Titulní sloučenina příkladu 78 (100 mg, 0,2 mmol) a bis(trimethylsilyl)amid draselný (121 mg, 0,61 mmol) v alkoholovém meziproduktu (1 ml) se zahřívají za při teplotě 110 °C po dobu 30 hodin, potom se reakční směs ochladí a zahustí se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědé pevné látky se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití diethylaminu: ethylacetatu (5:95) jako eluens a tento stupeň se opakuje s použitím methanolu: ethylacetatu (5:95) jako eluens. Získaný materiál se trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (7 mg, 6%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,03 (3H, t), 1,25 (3H, d), 1,40 (3H, t),

1,48	(3H, d),	2,41 (2H, q),	2,55	(4H, m),	3,03	(2H, q), 3,15
(4H,	m), 3,52	(3H, s), 3,70	(1H,	m) , 4,09	(3H,	s), 5,39 (1H,
m) ,	8,60 (1H,	s), 8,97 (1H,	s) .	LRMS: m/z	534	(M+l)+.

Příklad 99: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(pyridin-2-yl)methoxypyridin-3-yl]-2-methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on • · · ·

N

N

Směs titulní sloučeniny z příkladu 78 (100 mg, 0,2 mmol), bis(trimethylsilyl)amidu draselného (210 mg, 1,1 mmol) v pyridin-2-methanolu (1 ml) se zahřívá při teplotě 110 °C po dobu 18 hodin. Chladná směs se rozdělí mezi ethylacetát (10 ml) a vodu (10 ml) a fáze se separují. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (2x5 ml) a dichlormethanem (10 ml), kombinované organické roztoky se suší (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití methanolu: ethylacetatu (10:90) jako eluens, a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny (49 mg, 43%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCls) : 1,02 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 2,40 (2H,q), 2,55 (4H, m) , 3,04 (2H, q), 3,14 (4H, m), 4,10 (3H, s), 5,90 (2H, s), 7,32 (2H, m), 7,76 (IH, m), 8,58 (IH, s), 8,82 (2H, m), 12,72 (IH, s). LRMS: m/z 539 (M+l)⁺.

Příklad 100: 5-[2-cyklobutylmethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina (69%) se získá z titulní sloučeniny příkladu 78 a cyklobutanmethanolu, za použití postupu podobného postupu podle příkladu 99,

Zjištěno: C, 55,71; H, 6,44; N, 18,83, C24H33N7O4S vyžaduje: C 55,90; H, 6,45; N, 19,01%.

δ (CDC1₃) : 1,03 (3H,t), 1,40 (3H,t), 1,98 (4H,m), 2,26 (2H,m) 2,42 (2H,q), 2,57 (4H,m), 3,02 (3H,m), 3,15 (4H,m), 4,10 (3H,s), 4,62 (2H,d), 8,62 (lH,s), 9,04 (lH,s), 10,61 (lH,s). LRMS: m/z 516 (M+l)⁺.

Příklad 101: 5-[2-n-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6-dihydro-7H pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 90 (104 mg, 0,2 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (200 mg, 1,0 mmol) v n81 butanolu (5 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 5 dnů. Chladná směs se koncentruje za redukovaného tlaku, zbytek se suspenduje v ethylacetatu (20 ml) a směs se neutralizuje 1M kyselinou chlorovodíkovou. Vrstvy se separují, organická fáze se promyje solankou (10 ml) , suší se (MgSOU a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se trituruje s etherem a získaný pevný materiál se přefiltruje a dále se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (100:0:0,5 až 99:1:0,5), za zisku titulní sloučeniny (86 mg, 82%) ve formě pevného materiálu.

δ (CDC1₃) : 1,02 (9H, m) , 1,57 (2H,m) , 1,82 (2H,m) , 1,95 (2H,m) , 2,42 (2H,g), 2,58 (4H,m), 2,99 (2H,t), 3,15 (4H,m), 4,08 (3H,s), 4,68 (2H,t), 8,62 (lH,s), 9,02 (1H,S), 10,62 (1H,S). LRMS : m/z 518 (M+l)⁺.

Příklad 102: 3-ethyl-5-[2-methoxy-l-methylethoxy)-5-(4-npropylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 103: 3-ethyl-5-[2-methoxy-l-methylethoxy)-5-(4-npropylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-2, 6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (325 mg, 1,63 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny příkladu 119 (200 mg, 0.41 mmol) v l-methoxy-2-propanolu (6 ml) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5), za zisku 193 mg bezbarvého oleje.. Tento materiál se dále přečistí HPLC za použití AD250 kolony, za použití hexanu: isopropanolu: diethylaminu (70:30:0,3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny příkladu

(58 mg, 26%,	99, 5%ee) . δ (CDC13) :	0.86	(3H, t),	1,40
1,50 (3H, d)	, 2,32 (2H, t), 2,56	(4H,	m), 3,03	(2H,
(4H, m), 3,	55 (3H, s), 3,66 (1H,	m) ,	3,76 (1H,	m) ,
(3H, s), 5,	61 (1 H, m), 8,61 (1	H, s)	, 8,92 (1	H, s)

10.82 (1 H, s) .

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺, a titulní sloučeniny příkladu 103 (47 mg, 21%, 98,7%ee). δ (CDCls) : 0.86 (3H, t) , 1,41 (5H, m), 1,50 (3H, d) , 2,32 (2H, t), 2,56 (4H, m) , 3,04 (2H, q), 3,14 (4H,

m), 3,55 (3H, s), 3,66 (1H, m), 3,76 (1H, m), 4,08 (3H, s),

5,61 (1 H, m), 8,60 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 1 0.82 (1 H,s). LRMS :: m/z 534 (M+l) ⁺ .

Příklad 104: (+)-5-[2-methoxy-l-methylethoxy)-5-(4methylpiperazin-1-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-npropyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 105: (-)-5-[2-methoxy-l-methylethoxy)-5-(4methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-npropyl—2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Titulní sloučenina příkladu 79 (198 mg, 0,42 mmol) se přidá do roztoku bis(trimethylsilyl)amidu draselného (415 mg, 2,1 mmol) v l-methoxy-2-propanolu (5 ml) a reakční směs se zahřívá při 110 °C po dobu 72 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se rozpustí ve vodě a neutralizuje se za použití 2M kyseliny chlorovodíkové. Tento vodný roztok se extrahuje ethylacetátem (3x30 ml), kombinované organické extrakty se promyjí solankou (3x20 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3) a odpaří se z etheru za zisku bílé pevné látky.

Racemický produkt se přečistí chirální HPLC za použití AD 250 kolony a hexanu: isopropanolu: kyseliny trifluoroctové (80: 20:0,5) jako eluens. První enantiomer se znovu rozpustí ve vodě, alkalizuje se pomocí vodného roztoku uhličitanu sodného a tato směs se extrahuje ethylacetátem (3x20 ml). Kombinované organické extrakty se promyjí solankou (2x20 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Tento materiál se potom přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3) a odpaří se z etheru, za zisku titulní sloučeniny příkladu 104 (39 mg, 18%, 98,1% ee) ve formě bezbarvého pevného materiálu.

[cc]d = +30.31 o (c=0.067 , dichlormethan).

Zjištěno: C, 53,32; H, 6,49; N, 18,48, C23H33N7O5S vyžaduje C, 53,16; H, 6,40; N, 18,87 %.

δ (CDC1₃) : 1,02 (3H, t) , 1,50 (3H, d), 1,82 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,53 (4H, m), 2,98 (2H, t), 3,16 (4H, m), 3,55 (3H, s), 3,66 (IH, m), 3,76 (IH, m), 4,07 (3H, s), 5,61 (1 H, m), 8,61 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 10.82 (1 H, s).

LRMS : m/z 520 (M+l)⁺.

« *

Titulní sloučenina příkladu 105 se izoluje stejným způsobem jako titulní sloučenina příkladu 104 (26 mg, 12%, 94,0% ee) .

[a]D ~ -30.31° (c=0.067 , dichlormethan).
δ (CDC13) : 1,02	(3H, t)	, 1,51	(3H, d), 1,82	(2H,	m) , 2,29 (3H
s), 2,53 (4H, m), 2,98	(2H, t)	, 3,14 (4H, m)	, 3,	55 (3H, s),
3,65 (1 H, m) ,	3,77 (1	H, m) ,	4,08 (3H, s),	5,61	(1 H, m) ,
8,61 (1 H, s),	8,92 (1	H, s),	10.82 (1 H, s)	•
LRMS : m/z 520	(M+l)+.

Příklad 106: (+)-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxy-l-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 107: (-)-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxy-l-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomery 1 a 2)

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (1,47 g, 7,4 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny příkladu 80 (720 mg, 1,5 mmol) v l-methoxy-2-propanolu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 72 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě hnědé klovatiny se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu:diethylaminu (97:3) jako eluens. Tato racemická směs se přečistí chirální HPLC za použití AD 250 kolony a • ·

hexanu: isopropanolu: diethylaminu (70: 30: 0,3) jako eluens, za zisku obou enantiomerů. První enantiomer se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a vodný roztok uhličitanu sodného (10 ml), fáze se separují, organická vrstva se suší (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Tento materiál se potom přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu: methanolu (95:5), za zisku titulní sloučeniny příkladu 106 (130 mg, 16%, 99,76% ee) ve formě bílé pěny.

[a)_D= +15,65° (c = 0, 093, methanol).

Zjištěn: C, 53,47; H, 6,66; N, 17,92, C24H35N7O5S; 0,3 H₂O vyžaduje C, 53,48; H, 6,66; N, 18,19% δ (CDCls) : 1,02 (6H, m), 1,52 (3H, t), 1,82 (2H, m), 2,42 (2H, q), 2,57 (4H, m), 2,98 (2H, t), 3,14 (4H, m), 3,55 (3H, s) , 3,65 (1 H, m), 3,76 (1 H, m), 4,08 (3H, s), 5,60 (ÍH, s) , 8,61 (ÍH, s), 8,90 (ÍH, s), 10.81 (ÍH, s) .

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺.

Titulní sloučenina příkladu 107 (94 mg, 12%, 97,2 ee) se získá ve formě bílé pěny, za použití stejného postupu jako pro příklad 106, [a]_D = -14,52° (c = 0.10, methanol).

Zjištěno: C, 53,66; H, 6,73; N, 17,89, C24H35N7O5S; 0,25 H₂O vyžaduje C, 53,57; H, 6,65; N, 18,22%

δ	(CDI	3.I3) : 1,03	(6H,	m)	, 1,50	(3H,	d) , 1,82 (2H, m)	, 2,42 (2H
q)	, 2	,57 (4H, m), 2,	98	(2H, m)	z 3,	17 (4H, m), 3,55	(3H, s),
3,	65	(1 H, m) ,	3,75	(1	H, m) ,	4,08	(3H,5 s), 5,60	(1 H, m) ,
8,	60	(1 H, s) ,	8,91	(1	H, s) ,	10.8	1 (1 H, s) .
LR	MS	: m/z 534	(M+l)	+

Příklad 108: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(2-methoxy-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

• · • · ·

Příklad 109: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(2-methoxy-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Titulní sloučeniny se připraví z titulní sloučeniny příkladu 78 a 2-methoxy-l-propanolu, stejným postupem, jako je postup popsaný pro příklady 104 a 105.

Racemická směs se dále přečistí HPLC za použití AD250 kolony a hexanu: ethanolu: diethylaminu (60:40:1) jako eluens, za zisku izomeru 1, Tento materiál se znovu přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3) a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny příkladu 108 (8 mg, 2%, 82% ee) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,19-1,36 (6H, m), 1,40 (3H, t), 2,68-3,10 (8H, m), 3,32-3,59 (7H, m), 3,92 (1 H, m), 4,09 (3H, s), 4,47 (1 H, m), 4,72 (1 H, m), 8,62 (1 H, s), 8,97 (1H, s), 10.90 (1H, s).

LRMS : m/z 520 (M+l)⁺.

Titulní sloučenina příkladu 109 (5 mg, 1%, 93% ee) se izoluje ve formě bílého pevného materiálu, za použití stejného postupu, jako je postup popsaný pro příklad 108, δ (CDC1₃) : 1,26 (3H, t) , 1,32 (3H, d) , 1,40 (3H, t) , 2,80-3,1 0 (8H, m), 3,38-3,60 (7H, m), 3,92 (1H, m), 4,09 (3H, s), 4,48 (1H, m), 4,72 (1H, m), 8,61 (1H, s), 8,98 (1 H, s), 10.89 (1 H, s) .

LRMS : m/z 520 (M+l)⁺.

Příklad 110: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(3-methoxy-l-methyl-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 111: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(3-methoxy-l-methyl-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomery 1 a 2)

Směs titulní sloučeniny příkladu 78 (330 mg, 0,70 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (693 mg, 3,47 ml) v titulní sloučenině Přípravy 166 (2,5 ml) se zahřívá při 110 °C po dobu 16 hodin. Chladná reakčni směs se suspenduje v ethylacetatu (25 ml) a promyje se nasyceným roztokem chloridu amonného (5 ml), potom nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití methanolu:dichlormethanu: (5:95) jako eluens, a potom za použití diethylaminu: ethylacetatu (10:90) jako eluens, za zisku klovatiny.

Tato racemická směs se dále přečistí HPLC za použití AD250 kolony a hexanu: ethanolu: diethylaminu (85:15:1) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny příkladu 110 (25 mg, 6,7%,

98,9%ee) δ (CDCls) : 1,04 (3H, t) , 1,39 (3H, t) , 1,49 (3H, d) , 2,04 (1 H m), 2,24 (1 H, m), 2,42 (2H, q), 2,56 (4H, m), 3,01 (2H, m) , 3,16 (4H, m), 3,33 (3H, S), 3,57 (1 H, m), 3,68 (ÍH, m), 4,06 (3H, S), 5,75 (ÍH, m), 8,61 (1H,S),8,88 (ÍH, S), 10.99 (1 H,

S) .

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺;

a titulní sloučeniny příkladu 111 (29 mg, 7,8%, 99,7%ee). δ (CDCls): 1,03 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 1,48 (3H, d) , 2,04 (1 H m), 2,24 (1 H, m), 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 3,02 (2H, q) , 3,16 (4H, m),3,34 (3H, s), 3,57 (1 H, m), 3,66 (1 H, m) , 4,08 (3H, s),5,74 (1 H, m), 8,60 (1 H, s), 8,98 (1 H, s), 10.98 (1 H, s) .

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺.

Příklad 112: (+)-3~ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) 2-(2-ethoxy-l-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro 7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 113: (-)-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) 2-(2-ethoxy-l-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro 7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Racemická směs (70%) se připraví z titulní sloučeniny příkladu 78 a l-ethoxy-2-propanolu, stejným postupem, jako je postup popsaný pro příklady 104 a 105.

Racemická směs se dále přečistí HPLC za použití AD250 kolony a hexanu: ethanolu: diethylaminu (70:30:0,3) jako eluens, za zisku enantiomeru 1, Tento materiál se znovu přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97:3) jako eluens a odpaří se z etheru, za zisku titulní sloučeniny příkladu 112 (52 mg, 15%, 99,5% ee) ve formě pěny.

[a] d = + 18,60° (c=0.067 , dichlormethan).

Zjištěno: C, 53,20; H, 6,70; N, 17,78, C24H35N7O5S; 0,5 H2O vyžaduje: C, 53,12; H, 6,69; N, 18,07% δ (CDC1₃) : 1,04 (3H, t) , 1,25 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,52 (3H, d), 2,42 (2H, q), 2,57 (4H, m), 3,02 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,60-3,82 (4H, m), 4,08 (3H, s), 5,60 (1 H, m), 8,61 (1 H, s), 8, 94 (1 H, s) , 10.81 (1 H, s) .

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺.

Titulní sloučenina příkladu 113 se izoluje (11 mg, 3%,

99,5%ée) stejným způsobem, jako je způsob popsaný pro příklad 112.

[a]_D = -19,43° (c=0.070, dichlormethan).

Zjištěno: C, 53,34; H, 6,66; N, 17,86, C24H35N7O5S; 0,5 H2O vyžaduje: C, 53,12; H, 6,69; N, 18,07% δ (CDCla) : 1,04 (3H, t) , 1,25 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,52 (3H, d), 2,42 (2H, q), 2,57 (4H, m), 3,03 (2H, q), 3,16 (4H, m), 3,60-3,82 (4H, m), 4,09 (3H, s), 5,60 (1 H, m), 8,62 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 10.82 (1 H, s).

LRMS : m/z 534 (M+l)⁺.

Příklad 114: (+)-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)

2-(2-methoxymethyl-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 115: (-)-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)

2-(2-methoxymethyl-n-propoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

N k

Titulní sloučeniny příkladů 114 a 115 se získají (11%, 93%ee) a (6,7%, 97%ee), v příslušném pořadí, z titulní sloučeniny příkladu 78 a l-methoxy-2-butanolu, za použití postupů popsaných v příkladech 108 a 109.

[CC]d = +37,04° (c=0.097	, dichlormethan).
Zjištěno: C, 53,36; H,	6,73; N, 17,84, C24H35N7O5S; 0,5 H2O
vyžaduje: C, 53,12; H,	6,69; N, 18,07%.
δ (CDCla) : 1,03 (6H, m)	, 1,39 (3H, t), 1,92 (2H, m), 2,42
q) , 2,57 (4H, m) , 3,02	(2H, q) , 3,16 (4H, m) , 3,51 (3H, s)
3,66 (1 H, m), 3,77 (1	H, m), 4,08 (3H, s), 5,57 (1 H, m),
8,60 (1 H, s), 8,88 (1	H, s), 10.84 (1 H, s) .
LRMS : m/z 534 (M+l)+;	a

a_D =-40.08° (c=0.093, dichloromethanu)

Zjištěn: C, 53,44; H, 6,75; N, 17,76, C24H35N7O5S; 0,5 H₂O vyžaduje: C, 53,12; H, 6,69; N, 18,07% δ (CDC1₃) : 1,03 (6H, m) , 1,40 (3H, t), 1,92 (2H, m), 2,42 (2H q) , 2,57 (4H, m), 3,02 (2H, q), 3,16 (4H, m), 3,51 (3H, s) , )

• ·

3,68 (1 H, m), 3, 78 (1 Η, m), 4,1 Ο (3Η, s), 5,57 (ÍH, m),

8,61 (ÍH, m), 8,89 (ÍH, s), 10.83 (ÍH, s).

Příklad 116: (-)-3-ethyl-5-{5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2—[1— (pyridin-2-yl) ethoxy]pyridin-3-yl}-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 117: (+)-3-ethyl-5-{5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2-[l- (pyridin-2-yl) ethoxy]pyridin-3-yl}-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Titulní sloučeniny příkladů 116 a 117 se získají ve formě pevných látek (4%, 99,0%ee) a (2%, 99,0%ee), v příslušném pořadí, z titulní sloučeniny příkladu 78 a 1-(pyridin-2-yl)ethanolu (Helv. Chim. Acta., 1955, 38, 1114), stejným postupem jako je postup popsaný pro příklady 112 a 113, s výjimkou použití hexanu: isopropanolu: diethylaminu (70:30:1) jako HPLC eluens.

[a] _D = -90.11° (c=0.033, dichlormethan).

δ (CDCls): 1,02 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 1,80 (3H, d) , 2,41 (2H, q), 2,54 (4H, m), 3,00-3,17 (6H, m), 4,10 (3H, s), 6,69 (ÍH, q), 7,32 (2H, m), 7,75 (ÍH, m), 8,54 (ÍH, s), 8,75 (ÍH, s), 8,80 (ÍH, d), 13,14 (ÍH, s).

LRMS : m/z 553 (M+l)⁺.

[cc]d = +82,02° (c=0.040, dichlormethan).

δ (CDCls) : 1,04 (3Η, t) , 1,40 (3H, m), 1,80 (3H, d), 2,41 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,00-3,18 (6H, m), 4,10 (3H, s), 6,69 (IH, q) , 7,34 (2H, m) , 7,75 (IH, m), 8,52 (1 H, s), 8,76 (1 H, s) , 8,80 (1 H; d), 13,16 (1 H, s) .

LRMS : m/z 553 (M+l)⁺.

Příklad 118: ( + )-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) 2- (2-methoxy-l (R) -methylethoxy) pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 78 (2,0 g, 4,2 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (4,2 g, 21,0 mmol) v titulní sloučenině Přípravy 165 (16 ml), se zahřívá při 110 °C p dobu 18 hodin. Chladná směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu diethylaminu: methanolu: ethylacetatu (2,5:0:97,5 až 0:10:90). Získaný materiál se dále přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití methanolu: ethylacetatu (2,5:97,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (640 mg, 29%) ve formě pevného materiálu. Zjištěno: C, 53,16; H, 6,54; N, 18,37, C23H33N7O5S; 0,2 CH3CO2C2H5 vyžaduje C, 53,21 ; H, 6,49; N, 18,25% [<x]d = +16,6° (c=0.10 methanol) δ (CDCls) : 1,04 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,52 (3H, d), 2,42 (2H, q) , '2,57 (4H, m), 3,03 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,56 (3H, s), ·« φ» • · · *

3,66 (ΙΗ, m), 3,77 (1 H, m), 4,09 (3Η, s), (ΙΗ, s), 8,93 (IH, s), 10,82 (IH, s).LRMS

5,61 (1 H, m) , 8,62 m/z 520 (M+l)⁺.

Příklad 119: 5-[2-ethoxy-5-(4-n-propylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3 — d]pyrimidin-7-on

1-n-propylpiperazin (308 mg, 1,01 mmol) a triethylamin (440 ml, 3,2 mmol) se přidají d roztoku titulní sloučeniny z Přípravy 164 (211 mg, 0,53 mmol) v dichlormethanu (6 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Směs se přečistí přímo chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (210 mg, 85%) ve formě bílé pěny. δ (CDC1₃) : 0,86 (3H, t), 1,42 (5H, m), 1,58 (3H, t), 2,29 (2H, t), 2,56 (4H, m), 3,03 (2H, q), 3,14 (4H, m), 4,10 (3H, s) , 4,76 (2H, q) , 8,62 (1 H, s), 9,04 (1 H, s), 10,67 (1 H, s) . LRMS : m/z 490 (M+l)⁺.

Příklad 120: 5-{5-ethoxy-5-(4-(prop-2-yl)piperazin-lylsulfonyl]pyridin-3-yl] -3-ethy 1-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

r ···· ·· ···· ·· • · · • · · • · · * • · · · ·· ··

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (71%) z titulní sloučeniny Přípravy 164 a 1-(prop-2· -yl)-piperazinu, postupem podle příkladu 119, δ (CDCIs) : 0,99 (6H, d), 1,40 (3H, t) , 1,57 (3H, t), 2,62 (4H, m), 2,70 (1H, m), 3,02 (2H, q), 3,13 (4H, m), 4,08 (3H, s), 4,74 (2H, q), 8,62 (1 H, s), 9,03 (1 H, s), 10,64 (1 H, s). LRMS : m/z 490 (M+l)⁺.

Příklad 121: 5-{2-ethoxy-5-(4-(pyridin-2-yl)piperazin-1-y 1 sulfonyl]pyridin-3-yl}-3-ethyl-2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (58%) z titulní sloučeniny Přípravy 164 a 1(pyridin-2-yl)piperazinu, postupem podle Příkladu 119, δ (CDCIs) : 1,41 (3H,t), 1,59 (3H,t), 3,05 (2H,q), 3,22 (4H,m),

3,70 (4H,m), 4,10 (3H,s), 4,75 (2H,q), 6,62 (2H,m), 7,47 (lH,m), 8,16 (lH,d), 8,64 (lH,s), 9,07 (lH,s), 10,65 (lH,s). LRMS: m/z 525 (M+l)⁺.

Příklad 122: 3-ethyl-5-{2-methoxy-l-methylethoxy)-5-[4(pyridin-2-yl) pipera z in-l-yl sul f onyl]pyridin-3-yl} -2-methy 1-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

• ·

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (76 mg, 0,38 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny příkladu 121 (50 mg, 0,095 mmol) v l-methoxy-2-propanolu (5 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Chladná směs se přečistí přímo chromatografií na silikagelové koloně, za použití dičhlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (32 mg, 59%) ve formě žlutého oleje, δ (CDC1₃) : 1,40 (3H, t) , 1,50 (3H, d) , 3,04 (2H, q) , 3,22 (4H, m) , 3,54 (3H, s), 3,69 (6H, m), 4,09 (3H, s), 5,60 (1 H, m) , 6,63 (2H, m) , 7,47 (1 H, m), 8,16 (1 H, d), 8,63 (1H, s) , 8,94 (1H, s), 10,81 (1H, s) .

LRMS : m/z 569 (M+l)⁺.

Příklad 123: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-l-methyl-l, 6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 158 (596 mg, 1,21 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (723 mg, 3,62 mmol) v ethanolu (20 ml) se zahřívá v uzavřené zkumavce při 120 °C po dobu 18 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se dvakrát přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dičhlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens. Získaný materiál se trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (358 mg, 62%) ve formě špinavě bílého pevného materiálu.

Zjištěno: C, 52,71 ; H, 6,00; N, 20.48, C2iH29N7O₄S vyžaduje: C, 53,04; H, 6,15; N, 20.62% δ (CDC1₃) : 1,04 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 1,60 (3H, t) , 2,42 (2H q), 2,58 (4H, m) , 2,99 (2H, q), 3,16 (4H, m), 4,28 (3H, s), 4,78 (2H, q) , 8,64 (1 H, s), 9,08 (1 H, s), 10.80 (1H, s).

LRMS : 476 (M+l)⁺.

Příklad 124: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-lylsulfonyl) pyridin-3-yl]-l-methyl-3-n-propyl-l, 6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina (42%) se získá z titulní sloučeniny Přípravy 159, postupem podle příkladu 123,

Zjištěno: C, 53,68; H, 6,34; N, 19,97, C22H3iN7O₄S vyžaduje C, 53,97; H, 6,38; N, 20.03% δ (CDCls) : 1,02 (6H, m), 1,60 (3H, t), 1,85 (2H, m), 2,42 (2H, q) , 2,58 (4H, m), 2,95 (2H, t), 3,16 (4H, m), 4,29 (3H, s),

4,78 (2H, q), 8,63 (1 H, s), 9,08 (1 H, s), 10.78 (1H, s).

LRMS : m/z 491 (M+l)⁺.

Příklad 125: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxy-1 (R) -methylethoxy) pyridin-3-yl]-l-methyl-l, 6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 123 (70 mg, 0.15 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (150 mg, 0.74 mmol) v titulní sloučenině z přípravy 165 (1 ml) se mísí při 110 °C po dobu 18 hodin. Chladná směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (5 ml) a dichlormethan (5 ml) a směs se neutralizuje přidáním oxidu uhličitého v pevné formě. Vrstvy se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x5 ml), kombinované organické roztoky se suší ( (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu: diethylaminu (97:3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (62 mg, 80%).

δ (CDC1₃) : 1,04 (3H, t) , 1,39 (3H, t) , 1,50 (3H, d) , 2,42 (2H, q) , 2,58 (4H, m), 2,98 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,58 (3H, s),

3,70 (2H, m), 4,28 (3H, s) , 5,58 (1 H, m), 8,62 (1 H, s) , 8,90 (1 H, s), 11,07 (1 H, s).

LRMS : m/z 520 (M+l)⁺.

Příklad 126: 5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

/

N

O=s=o o

N

Směs titulní sloučeniny z příkladu 124 (111 mg, 0.23 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (226 mg, 1,13 mmol) ve 2-methoxyethanolu (5 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (96:4) jako eluens, a trituruje se s etherem, za zisku titulní sloučeniny (75 mg, 64%) ve formě bílého krystalického pevného materiálu. Zjištěno: C, 52,87; H, 6,35; N, 18,68, C23H33N7O5S vyžaduje: C, 53,16; H, 6,40; N, 18,87% δ (CDCla) : 1,02 (6H, m), 1,85 (2H, m), 2,42 (2H, q), 2,57 (4H, m) , 2,94 (2H, t), 3,16 (4H, m), 3,60 (3H, s), 3,86 (2H, t), 4,27 (3H, s), 4,78 (2H, t), 8,62 (IH, s), 9,00 (IH, s), 10.51 (IH, s) .

LRMS : m/z 521 (M+2)⁺.

Příklad 127: 5-{5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-[ (pyridin2-yl)methoxy]pyridin-3-yl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 124 (100 mg, 0.20 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (204 mg, 1,02 mmol) v pyridin-2-methanolu (2 ml) se mísí při 110 °C po dobu 18 hodin a potom se ochladí. Rozpouštědlo se odstraní Kugelrohrovou destilací a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové

koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens. Tento materiál se trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (8 mg, 7%) ve formě pevného materiálu.

δ (CDCls) : 1,03 (6H, m) , 1,87 (2H, m) , 2,42 (2H, q) , 2,56 (4H, m) , 2,95 (2H, t) , 3,16 (4H, m) , 4,30 (3H, s) , 5,94 (2H, s) , 7,36 (2H, m), 7,68 (1 H, m) , 8,60 (1 H, s), 8,86 (2H, d) ,

13,34 (1 H, s).

LRMS : m/z 554 (M+l)⁺.

Příklad 128: ( + )— 5—[5—(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxy-l-methylethoxy) pyridin-3-yl]-l-methyl-3-n-propyl-l, 6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on a

Příklad 129: (-) —5—[5—(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxy-l-methylethoxy) pyridin-3-yl]T-methyl-3-n-propyl-l, 6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1 a izomer 2)

Titulní sloučeniny příkladů 128 a 129 se připraví z titulní sloučeniny příkladu (17%, 99,5%ee) a (15%, 98,6%ee), v příslušném pořadí, za použití postupu popsaného pro příklady 106 a 107, s výjimkou použití hexanu: isopropanolu: diethylaminu: kyseliny trifluoroctové (85:15:0.2:0.3) jako HPLC eluens.

[a]_D = +31,21° (c=0.067, dichlormethan).

100

Zjištěno: C. 53, 77; H, 6,71; N, 17,89, C24H35N7O5S; 0,5 H₂0 vyžaduje: C, 53,12; H, 6,69; N, 18,07% δ (CDCls) : 1,02 (6H, m), 1,50 (3H, d), 1,84 (2H, m), 2,42 (2H, q) , 2,58 (4H, m) , 2,94 (2H, t), 3,17 (4H, m), 3,58 (3H, s) ,

3,72 (2H, m), 4,28 (3H, s), 5,58 (1 H, m), 8,62 (1 H, s), 8,90 (1 H, s), 11,08 (1 H, s); a [a]_D = -34,1 0° (c=0.072, dichlormethan).

Zjištěno: C, 53, 75; H, 6,67; N, 18,04, C24H35N7O5S vyžaduje: C, 54,02; H, 6,61 ; N, 18,37% δ (CDCls) : 1,02 (6H, m) , 1,50 (3H, d) , 1,84 (2H, m) , 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 2,94 (2H, t), 3,15 (4H, m), 3,59 (3H, s) ,

3,70 (2H, m), 4,28 (3H, s), 5,59 (1 H, m), 8,62 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 11,17 (1 H, s), v příslušném pořadí.

Příklad 130: 5—[5—(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 93 (130 mg, 0.25 mmol) a kyseliny 3-chloroperbenzoové (95 mg, 0.275 mmol) v dichlormethanu (6 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 2 a 1/2 hodiny. Reakční směs se promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5 ml), suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě pěny se přečistí * ·

1Λ1 · » · · ιοί ·» ♦· «»· a.» .. «4 chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (93:7:0 až 93:7:1) za zisku titulní sloučeniny (110 mg, 82%) ve formě bílého pevného materiálu.

Zjištěno: C, 50.71; H, 6,27; N, 17,82, C23H33N7O6S vyžaduje C, 50.72; H, 6,30; N, 18,00% δ (CDC1₃) : 1,00 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,81 (2H, m), 2,98 (2H, t), 3,19 (2H, m), 3,33 (4H, m), 3,54 (5H, m), 3,70 (2H, m), 3,86 (2H, t), 4,06 (3H, s), 4,78 (2H, t), 8,63 (1H, s), 8,97 (1H, s), 10.87 (1H, s) .

LRMS : m/z 536 (M+l)⁺.

Příklad 131: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-2-methyl-3-n-propyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pěny (81%) z titulní sloučeniny příkladu 80, postupem podle příkladu 130. δ (CDCls) : 1,00 (3H, t) , 1,40 (2H, t) , 1,38 (3H, t) , 1,81 (2H, m), 2,97 (2H, t), 3,16 (2H, m), 3,30 (4H, m), 3,50 (2H, m),

3,70 (2H, m), 4,08 (3H, s), 4,74 (2H, q), 8,64 (1H, s), 9,00 (1H, s), 10.75 (1H, s). LRMS : m/z 506 (M+l)⁺.

Příklad 132: 3-ethyl-5-[5- (4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy-l(R)-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on • · · · « » • · « * · · • · · ·

102

Kyselina 3-chloroperbenzoová (95 mg, 0.28 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny příkladu 118 (130 mg, 0.25 mmol) v dichlormethanu (2 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu:0,88 amoniaku (95:5:0 až 90:10:1) za zisku titulní sloučeniny (130 mg, 87%).

δ (CDC1₃) : 1,40 (6H, m) , 1,52 (3H,d), 3,01 (2H,q), 3,22 (2H,m) , 3,34 (4H,m), 3,54 (5H,m), 3,73 (4H,m), 4,08 (3H,s), 5,62 (lH,m), 8,64 (lH,s), 8,94 (lH,s). LRMS: m/z 536 (M+l)⁺.

Příklad 133: 5—[5—(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl) -2- (2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-1 -methyl-3-npropyl-1,6-dihydro-7H-ovrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pevné látky (51%) z titulní sloučeniny příkladu 126, postupem podle příkladu 130.

• * « 9 • ·

103 δ (CDC1₃) t), 3,32 m) , 3,86 9,01 (IH,

1,02 (3H, t), 1,41 (3H, t), 1,84 (2H, q), 2,92 (2H, (2H, d), 3,36 (4H, m) , 3,46-3,50 (5H, m), 3,74 (2H, (2H,t), 4,29 (3H, s), 4,78 (2H, t), 8,64 (IH, s), s), 11,05 (IH, s). LRMS : m/z 535 (M+l)⁺.

Příklad 134: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-yl]-2, 6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 81 (200 mg, 0.41 mmol), a bis(trimethylsilyl)amid draselného (407 mg, 2,04 mmol) v npropanolu (5 ml) se mísí při 110 °C po dobu 18 hodin a chladná reakční směs se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: diethylaminu (100:0 až 95:5) a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny (160 mg, 68%) ve formě pevného materiálu.

δ (CDC13)	: 1,	02 (3H, t)	, 1,	10	(3H, t), 1,	42	(3H, t), 1,59 (3H,
t), 2,00	(4H,	m), 2,42	(2H,	q)	, 2,58 (4H,	m)	, 3,02 (2H, q),
3,14 (4H,	m) ,	4,38 (2H,	q) >	4,	63 (2H, t),	8,	63 (1 H, s) , 9,04
(1 H, s) .
LRMS: m/z	504	(M+l)+.

Příklad 135: 5-[2-i-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-2,3-diethyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

104

Titulní sloučenina se získá ve formě pevné látky (65%) z titulní sloučeniny příkladu 81 a i-butanolu, postupem podle příkladu 134,

δ	(CDC13)	1,02	(3H, t),	1,15	(6H, d),	1,42	(3H, t), 1,58 (3H,
t)	, 2,30	(1H,	m), 2,42	(2H,	q), 2,57	(4H,	m), 3,06 (2H, q),
3,	16 (4H,	m) ,	4,38 (2H,	q)'	4,45 (2H,	d) ,	8,62 (1 H, s) , 9,03

(1 H, s) .

LRMS : m/z 518 (M+l)⁺.

Příklad 136: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

N

105

Titulní sloučenina se získá ve formě pevné látky (33%) z titulní sloučeniny příkladu 81 a 2-methoxyethanolu, postupem podle příkladu 134,

Zjištěno: C, 53,29; H, 6,20; N, 18,19, C23H33N7O5S vyžaduje: C, 53,16; H, 6,40; N, 18,87%.

δ (CDCls) : 1,02 (3H,t), 1,42 (3H,t), 1,59 (3H,t), 2,44 (2H,q), 2,57 (4H,m), 3,05 (2H,q), 3,16 (4H,m), 3,58 (3H,s), 3,86 (2H,t), 4,28 (2H,q), 4,79 (2H,t), 8,62 (lH,s), 8,89 (lH,s). LRMS: m/z 520 (M+l)⁺.

Příklad 137: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-yl sul f onyl) -2- (3-hydroxy-n-propoxy) pyr idin-3-yl]-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 81 (200 mg, 0.41 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (407 mg, 2,04 mmol) v 1,3propandiolu (3 ml) se mísí při 110 °C po dobu 18 hodin, potom se ochladí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: diethylaminu (100:0 až 95:5). Zbytek se rozdělí mezi vodu (5 ml) a dichlormethan (10 ml) a fáze se separují. Organická vrstva se promyje vodou (2x5 ml,

106 • · suší se (MgSCh) , odpaří se za redukovaného tlaku a trituruje se s etherem, za zisku titulní sloučeniny (90 mg, 42%) ve formě pevného materiálu.

(CDCla) : 1,02 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,57 (3H, t) , 2,16 (2H, m) , 2,42 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,02 (2H, q), 3,15 (4H, m) ,

4,00 (2H, t), 4,37 (2H, q), 4,80 (2H, t), 8,62 (1 H, s) , 8,96 (1 H, s). LRMS : m/z 520 (M+l)⁺.

Příklad 138: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2- (1-methyl-n-propoxy) pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 139: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2- (1-methyl-n-propoxy) pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

> k

Směs titulní sloučeniny z příkladu 81 (500 mg, 1,02 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (1,01 g, 5,11 mmol) v 1-methyl-n-propanolu (5 ml) se mísí při teplotě 110 0C po dobu 18 hodin, potom se ochladí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: diethylaminu (100:0 až 95:5), a trituruje se s etherem za zisku pevné látky. Tato racemická směs se dále přečistí HPLC za použití AD 250 kolony a hexanu: isopropanolu: diethylaminu (90:10:1) jak eluens, za » · · · I • · · ,

107 • · · • * · • · II zisku titulní sloučeniny příkladu 138 (40 mg, 8%, 95% ee) ve formě pevné látky. Zjištěno: C, 54,41; H, 6,71; N, 18,17; C24H35N7O4S; 0,2 CH2CI2 vyžaduje: C, 54,37; H, 6,67; N, 18,34% δ (CDC1₃) : 1,04 (6H, m), 1,41 (3H, t), 1,50 (3H, d), 1,58 (3H, t) , 1,86 (1 H, m), 1,98 (1 H, m), 2,41 (2H, q), 2,58 (4H, m) , 3,02 (2H, q), 3,15 (4H, m), 4,38 (2H, q), 5,55 (1 H, m) , 8,61 (1 H, s), 9,02 (1 H, s), 10.66 (1 H, s) ;

a titulní sloučeniny příkladu 139 (70 mg, 13%, 86%ee) ve formě pevné látky.

Zjištěno: C, 55,91 ; H, 7 .11 ; N, 18,55, C24H35N7O4S vyžaduje: C, 55,69; H, 6,82; N, 18,95% δ (CDC13): 1,05 (6H, m), 1,40 (3H, t), 1,50 (3H, d), 1,57 (3H, t), 1,84 (1 H, m),l,98 (1 H, m) , 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 3,04 (2H, q), 3,15 (4H, m), 4,38 (2H, q) , 5,54 (1 H, m) , 8,61 (1 H, s), 9,03 (1 H, s), 10.67 (1 H, s).

Příklad 140: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2-(2-methoxy-l-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 141: 2,3-diethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)2- (2-methoxy-l-methylethoxy) pyridin-3-yl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

• · · ·

108

Titulní sloučeniny se získají ve formě pevných materiál (10%, 99,5% ee) a (10%, 99,1% ee), v příslušném pořadí, z titulní sloučeniny příkladu 81 a l-methoxy-2-propanolu (5 ml), za použití stejného postupu, jako byl popsán výše, s tou výjimkou, že hexan: isopropanol: diethylamin (70:30:1) byly použity jako HPLC eluens.

δ (CDC13) : 1,03	(3H,	t) ,	1,40	(3H, t),	1,50	(3H, d),.l,58 (3H,
t), 2,42 (2H,	q), 2	, 58	(4H,	m) , 3,03	(2H,	q), 3,15 (4H, m) ,
3,55 (3H, s),	3, 64	(1H,	m) ,	3,76 (1H,	m) ,	4,37 (2H, q) , 5,60
(1 H, m), 8,60	(1 H,	s) ,	8,90	(1 H, s) .

LRMS : m/z 535 (M+2)⁺.

Zjištěno: C, 54,09; H, 6,91; N, 17,03, C24H35N7O5S vyžaduje C, 54,02; H, 6,61; N, 18,38% δ (CDCls) : 1,04 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,50 (3H, d), 1,58 (3H, t), 2,42 (2H, q) , 2,58 (4H, m), 3,02 (2H, q), 3,12 (4H, m),

3,56 (4H, m), 3,65 (1H, m), 3,74 (1H, m), 4,37 (2H, q) , 5,60 (1 H, m), 8,60 (1 H, s), 8,90 (1 H, s) .

LRMS : m/z 535 (M+2)⁺, v příslušném pořadí.

Příklad 142: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2- ( 6-methyl-pyridin-2-yl) methyl2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 82 (100 mg, 0.176 mmol), a • · ·

109 ·· ·· ··· ··.....

bis(trimethylsilyl)amidu draselného (175 mg, 0.88 mmol) v 2methoxyethanolu (1 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin a potom se ochladí. Roztok se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (5 ml) a dichlormethan (10 ml) a směs se neutralizuje pomocí (2N) kyseliny chlorovodíkvé. Fáze se separují, vodná vrstva se extrahuje dichlormetanem (10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSO.}) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (96:4:0,4) jako eluens, a trituruje se s pentanem, za zisku titulní sloučeniny (27 mg, 26%) ve formě špinavě bílé pevné substance.

Zjištěno: C, 56,14; H, 6,09; N, 18,53, C28H36N8O5S vyžaduje C, 56,36; H, 6,08; N, 18,78% δ (CDCls) : 1,02 (3H, t), 1,30 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,57 (7H, m), 3,04 (2H, q), 3,16 (4H, m), 3,58 (3H, s), 3,86 (2H, t) ,

4,79 (2H, t), 5,63 (2H, s), 6,78 (ÍH, d), 7,08 (1 H, d), 7,48 (1 H, m), 8,61 (1 H, s), 8,98 (1 H, s), 10.82 (1 H, s) .

Příklad 143: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy-1 (R) -methylethoxy) pyridin-3-yl]-2- (6-methylpyridin-2yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

• · · ·

110

Titulní sloučenina se získá ve formě bílého pevného materiálu (12%) z titulních sloučenin příkladu 82 a 165, za použití postupu podobného postupu podle příkladu 142, s tou výjimkou, že získaný materiál se dále přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu:methanolu:0,88 amoniaku (100:0:0 až 90:10:0), a potom se trituruje s pentanem.

δ (CDCls) : 1,03 (3H,t), 1,30 (3H,t), 1,50 (3H,d), 2,42 (2H,q),

2,55 (6H,m),	3,02 (2H,q),	3,15	(4H,m)	, 3,56 (4H,m), 3,66
(lH,m), 3,76	(lH,m), 5,62	(3H,	m), 6,	78 (lH,d), 7,06 (lH,d),
7,49 (lH,m),	8,61 (lH,s),	8,90	(lH,s)	, 10,84 (lH,s).
LRMS: m/z 611	(M+l)+.

Příklad 144: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2-[l- (pyridin-2-yl) ethyl]-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 1) a

Příklad 145: 3-ethyl-5-[5- (4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl]-2-[l- (pyridin-2-yl) ethyl]-2, 6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on (izomer 2)

Směs titulní sloučeniny příkladu 84 (200 mg, 0,35 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (350 mg, 1,76 mmol) v 2methoxyethanolu (5 ml) se mísí při 120 0C po dobu 18 hodin.

Ί

111

Chladná směs se zahustí při redukovaném tlaku a zbytek se roozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a ethylacetát (20 ml). Fáze se separují, vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (2x10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:

methanolu (100:0 až 95:5), za zisku pěny. Tato racemická smis se dále poeěistí HPLC za použití AD 250 kolony a hexanu: isopropanolu: diethylaminu (50:50:1) jak eluens, za zisku titulní sloučeniny příkladu 144 (24 mg, 11%, 100,0% ee). δ (CDC13) : · 1,02 (3H, t), 1,25 (3H, t), 2,10 (3H, d) , 2,40 (2H, q) , 2,56 (4H, m), 3,00 (2H, q), 3,13 (4H, m), 3,58 (3H, s), 3,86 (2H, t), 4,77 (2H, t), 5,83 (1 H, q), 7,18 (2H, m), 7,60 (1H, m), 8,55 (1H, d), 8,60 (1H, s), 8,96 (1H, s), 10.82 (1H, s) .

LRMS : m/z 598 (M+l)⁺.

a titulní sloučeniny příkladu 145 (28mg, 13%, 99,8%ee). δ (CDC1₃) : 1,00 (3H, t) , 1,24 (3H, t) , 2, 1 0 (3H, d) , 2,40 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,00 (2H, q), 3,14 (4H, m), 3,57 (3H, 5), 3,84 (2H, t), 4,78 (2H, t), 5,82 (1H, q), 7,18 (2H, m), 7,60 (1 H, m), 8,54 (1 H, d), 8,60 (1 H, s), 8,94 (1 H, s), 10.82 (1 H, s).

LRMS : m/z 598 (M+l)⁺.

Příklad 146: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2- (pyridazin-3-yl) methyl]-2, 6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

• · · · • ·

112

Suspenze titulní sloučeniny Přípravy 142 (1,12 g, 4,55 mmol) a triethylaminu (1,5 g, 13,7 mmol) se přidá d ledově chladné suspenze titulní sloučeniny Přípravy 28 (2,0 g, 5,0 mmol) v dichlormethanu (25 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Reakční směs se promyje solankou (15 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x10 ml), větším množstvím solanky (15 ml), suší se (MgSCN) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (99:0:1 až 96:3:1), za zisku pevného materiálu (1,73 g) .

Směs tohoto meziproduktu (829 mg, 1,45 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (347 mg, 1,74 mmol) v 3methyl-3-pentanolu (3 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 6 hodin a potom se mísí po dobu 72 hodin při teplotě okolí. Přidá se další bis(trimethylsilyl)amid draselný (87 mg, 0.43 mmol) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu dalších 5 hodin, potom se ochladí, přidá se 2M kyselina chlorovodíková (2 ml) a směs se zahustí za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a vodu (10 ml, vrstvy se separují, organické fáze se postupně promyjí vodou (10 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), solankou (10 ml), suší se (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 98:2), za zisku titulní sloučeniny (1,24 g, 49%) ve formě hnědé pěny. δ (CDC1₃) : 1,02 (3H, t) , 1,36 (3H, t) , 1,59 (3H, t) , 2,40 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,14 (6H, m), 4,76 (2H, q), 5,90 (2H, s), 7,46 (ÍH, m), 7,56 (ÍH, m), 8,63 (ÍH, s), 9,01 (ÍH, s), 9,18 (ÍH, d), 10.70 (ÍH) s).

LRMS : m/z 554 (M+l)⁺.

113 • ·

Příklad 147: 5-[2-n-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2- (pyridazin-3-yl)methyl]-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (35 mg, 0. 176 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny příkladu 146 (80 mg, 0,145 mmol) v n-butanolu (2 ml), a reakční směs se mísí při 110 °C po dobu 6,5 hodin. Chladná směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (20 ml) a roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml). Fáze se separují, organická vrstva se promyje dalším roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), solankou (10 ml), suší se (MgSOU a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu:0,88 amoniaku (100:0:0 až 99,6:0,4:0,5), za zisku titulní sloučeniny (50 mg, 59%) ve formě bílé pěny.

δ (CDC1₃) : 1,04 (6H, m) , 1,35 (3H, t) , 1,58 (2H, m) , 1,95 (2H,

m) , 2,41	(2H,	q), 2,57 (4H, m), 3,	1 0 (6H,	m) , 4,	66 (2H, t),
5,90 (2H,	s) ,	7,46 (1 H, m), 7,56	(1 H, m)	, 8,62	(IH, s), 9,01
(IH, s),	9,17	(IH, d), 10.79 (IH,	s) .

LRMS : m/z 582 (M+l)⁺.

• *

114 • · · ♦ · · ·

Příklad 148: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (2-methoxyethylamino) pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 78 (200 mg, 0,42 mmol) a pentahydratu síranu měďnatého (150 mg, 0,60 mmol) v 2methoxyethylaminu (2 ml), se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin a potom se ochladí. Reakční směs se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a vodný roztok uhličitanu sodného (5 ml) a vrstvy se separují. Organická fáze se suší (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (98:2 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (150 mg, 69%).

δ (CDC1₃) : 1,04 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 2,42 (2H, q) , 2,55 (4H,

m) , 2,92 (3H, s), 3,01 (2H, q) , 3,13 (4H, m) , 3,50 (4H, m), 3,48 (3H, s), 3,68 (2H, t), 3,88 (2H, t), 4,07 (3H, s), 8,34 (1 H, s), 8,58 (1 H, s) .

LRMS : m/z 519 (M+l)⁺.

Příklady 149 až 153:

Sloučeniny obecného vzorce:

115

se připraví z vhodných pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-onů a aminů za použití postupů podobným postupu podle příkladu 148.

Příklad 149	R1	R13	Data
ch3		δ (CDCI3) : 1.02 (3H, t), 1.37 (3H, t), 2.26-2.42 (4H, m), 2.54 (4H, m), 3.01 (2H, q), 3.10 (4H, m), 4.05 (7H, m), 8.00 (1H, s), 8.57(1 H, s). LRMS : m/z 487 (M+1)+
150	ch3		δ (CDCI3): 1.02 (3H, t), 1.35 (3H, t), 1.89 (4H, m), 2.39 (2H, q); 2.55 (4H, m), 3.00 (2H, q), 3.11 (4H, m), 3.40 (4H, m), 4.08 (3H, s), 8.00 (1H, s), 8.57(1 H, s). LRMS : m/z 501 (M+1)+
151	ch2ch3	O	zjištěno: C, 55.53; H, 6.70; N, 21.52. C^H^NgOsS vyžaduje C, 56.01H, 6.66; N, 21.77% δ (CDCI3): 1.03 (3H, t), 1.38 (3H, t), 1.60 (3H, t), 1.88 (4H, m), 2.41 (2H, q), 2.57 (4H, m), 3.01 (2H,q ), 3.10 (4H, m), 3.42 (4H, m), 4.38 (2H, q), 8.00 (1H, s), 8.58 (1H, s), 9.20 (1H, s). LRMS : m/z 515 (M+1)+
152	P		zjištěno: C, 54.63; H, 6.15; N, 20.97. C27H35NgO4S vyžaduje C, 54.89; H, 6.14; N, 21.34% δ (CDCIs) : 1.01 (3H, t), 1.33 (3H, t), 2.38 (2H, q), 2.54 (4H, m), 3.07 (2H. q), 3.16 (4H, m), 3.41 (3H, s), 3.65 (2H, t), 3.85 (2H, q), 5.67 (2H, s), 7.19 (1H, d), 7.25 (1H, m), 7.68 (1H, m), 8.14 (1H, s), 8.56 (1H, s), 8.58 (1H, d), 9.92 (1H, s), 10.07 (1H, m). LRMS : m/z 582 (M+1)+

153

116

δ (CDCI₃) : 1.03 (3Η, t), 1.26 (3Η, t), 1.92 (4H, m), 2.41 (2H, q), 2.56 (4H, m), 3.02 (2H, q), 3.10 (4H, m), 3.42 (4H, m), 5.68 (2H, s), 7.19 (1H, d), 7.26 (1H, m), 7.67 (1H, m), 8.01 (1H, s), 8.58 (2H, m), 9.24 (1H,s).

LRMS : m/z 578 (M+1)⁺

Příklad 154: 5-[2-(Ncyklopropylmethyl-N-methylamino)-5-(4ethylpiperazin-l-ylsulf onyl) pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-methyl-2,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny příkladu 78 (200 mg, 0.42 mmol) a N-cyklopropylmethyl-N-methylaminu (600 mg, 7,05 mmol; získaného z titulní sloučeniny Přípravy 168) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (250 mg, 1,26 mmol) v N,Ndimethylformamidu (2 ml), se mísí při 100 °C po dobu 18 hodin. Chladná směs se rozdělí mezi ethylacetát (20 ml) a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a fáze se separují. Organická vrstva se suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:

· · · · * *· » * 117 *· *· ··· **· ·· *· methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (100 mg, 46%) ve formě pevného materiálu.

δ (CDCla) : 0.54 (2H, m) , 0. 71 (2H, m) , 1,02 (3H, t) , 1,37 (4H m), 2,40 (2H, q), 2,56 (4H, m) , 2,78-3,13 (11 H, m), 4,08 (3H, s), 8,32 (1 H, s), 8,60 (1 H, s).

LRMS : m/z 515 (M+l)+

Příklady 155 až 156:

Sloučeniny obecného vzorce:

se připraví z titulní sloučeniny příkladu 78 a vhodných aminů, za použití podobných postupů, jako v příkladu 154,

Příklad	R13	Data
155	0	δ (CDCI3) : 1.01 (3H, t), 1.40 (3H, t), 1.58 (2H, m), 1.64 (2H, m), 1.77 (4H, m), 2.41 (2H, q), 2.55 (4H, m), 3.02 (2H, q), 3.12 (4H, m), 3.26 (2H, m), 4.10 (3H, s), 8.55 (1H, s), 8.63 <1H, s), 10.63 (1H, s). LRMS : m/z 515 (M+1)+
156	0	δ (CDCb) : 1.04 (3H, t), 1.40 (3H, t), 2.42 (2H, q), 2.58 (4H, m), 3.03 (2H, q), 3.16 (4H, m), 3.35 (4H, m), 3.86 (4H, m), 4.10 (3H, s), 8.55 (1H, s), 8.68 (1H,s), 10.40 (1H, s). LRMS : m/z 517 (M+1)+

*»·· ·· •4 ·· ··

118 * · 4 · · « ¢, ·«·« · ·»·.„« • · · # * ·*>*· • 4 44 44« ··· ·· ··

Příklad 157: 3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-ηpropylaminopyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl]-2,6-dihydro7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 160 (226 mg, 0.39 mmol) a t-butoxidu draselného (112 mg, 1,0 mmol) v n-propanolu (20 ml), se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 5 dnů a potom se ochladí. Přidá se nasycený roztok chloridu amonného (5 ml), tento roztok se vnese do ethylacetatu (50 ml) a vrstvy se separují. Organická fáze se promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml), potom solankou (20 ml), suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 94:6), za zisku oleje. Tento olej se krystalizuje z etheru za zisku titulní sloučeniny (9 mg, 4%) ve formě bílého pevného materiálu.

δ (CDCls) : 1,00 (3H, t) , 1,18 (3H, t) , 1,28 (3H, t) , 1,70 (2H, m), 2,38 (2H, q), 2,50 (4H, m), 3,00 (2H, q), 3,07 (4H, m), 3,57 (2H, q), 5,62 (2H, s), 7 .19 (1 H, m), 7 .63 (1 H, m), 8,02 (1 H, s), 8,55 (2H, m), 9,60 (1 H, s), 9,80 (1 H, s).

LRMS : m/z 566 (M+l)⁺.

• · · • t> · • · · ·

119 ·* ·*

Příprava 1: Kyselina 2-ethoxypyridin-3-karboxylová

Roztok t-butoxidu draselného (44,9 g, 0,40 mol) a absolutním ethanolu (300 ml) se pomalu přidá do roztoku kyseliny 2-chlornikotinové (30 g, 0,19 mol) v absolutním ethanolu (100 ml) a reakční směs se zahřívá při 170 0C po dobu 20 hodin a potom se ochladí. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se rozpustí ve vodě (200 ml) a roztok se okyselí na pH 3 kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se dichlormethanem (4x200 ml). Kombinované extrakty se suší (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (27,4 g, 41%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,53 (3H,t), 4,69 (2H,q), 7,13 (1 H,m), 8,37 (1 H,d) , 8,48 (1 H,d) .

Příprava 2: Kyselina 2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-karboxylová

Titulní sloučenina se získá jako hnědý pevný materiál (92%) z kyseliny 2-chlornikotinové a 2-methoxyethanolu, za použití postupu podle Přípravy 1, Zjištěno: C, 54,89; H, 5,61 ; N, 7,03, C9H11NO4 vyžaduje: C, 54,82; H, 5,62; N, 7,10%; δ (CDCI3) : 3,45 (3H,s), 3,79 (2H,t), 4,74 (2H,t), 7,14 (lH,m), 8,36 (lH,d), 8,46 (lH,d). LRMS: m/z 198 (M+l)⁺.

Příprava 3: Ethylester kyseliny 2-ethoxypyridin-3-karboxylové

Suspenze titulní sloučeniny Přípravy 1 (16,4 g, 98 mmol) a uhličitanu česného (32 g, 98 mmol) v dimethylformamidu (240 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Přidá se ethyljodid (7 .85 ml, 98 mmol) a reakční směs se mísí po dobu 24 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodný roztok uhličitanu sodného (100 ml) a ethylacetát (100 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje

120 ethylacetatem (2x100 ml). Kombinované organické roztoky se promyjí solankou, suší se (Na2SC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (18,0 g, 94%) ve formě světle žlutého oleje.

δ (CDC1₃) : 1,41 (6H,m) , 4,36 (2H,q), 4,48 (2H,q), 6,90 (1 H,m) , 8, 12 (1 H,d), 8,28 (1 H,d).

Příprava 4: Ethylester kyseliny 2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3karboxylová

Titulní sloučenina se získá jako hnědý olej (98%) z titulní sloučeniny· Přípravy 2, za použití postupu podle Přípravy 3, Zjištěno: C, 58,36; H, 6, 7 4; N, 6,04, C11H15NO4 vyžaduje: C, 58,66; H, 6,71; N, 6,23%. δ (CDC1₃) : 1,37 (3H,t), 3,44 (3H,s), 3,78 (2H,t), 4,34 (2H,q), 4,56 (2H,t), 6,92 (1 H,m) , 8,13 (1 H,d), 8,26 (1 H,d). LRMS: m/z 226 (M+l)⁺.

Příprava 5: Ethylester kyseliny 2-ethoxy-5-nitropyridin-3karboxylové

Dusičnan amonný (5,36 g, 66 mmol) se po částech přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 3 (4,66 g, 22,3 mmol) v anhydridu kyseliny trifluoroctové (50 ml) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a potom se opatrně vnese do ledově chladné míšené vody (200 g). Vzniklá suspenze se mísí po dobu 1 hodiny, sraženina se odebere, promyje se vodou a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (3,29 g, 61%). δ (CDCI3) : 1,41 (3H,t), 1,48 (3H,t), 4,41 (2H,q), 4,62 (2H,q), 8,89 (1 H,s), 9,16 (1 H,s).

Příprava 6: Ethylester kyseliny 2-(2-methoxyethoxy)-5nitropyridin-3-karboxylové • · « • · · «

121 “ **

Dusičnan amonný (10,57 g, 131 mmol) se po částech přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 4 (14,80 g, 65,7 mmol) v anhydridu kyseliny trifluoroctové (150 ml) a reakčni směs se mísí po dobu 3 hodin při teplotě okolí a potom se opatrně vnese do míšeného ledu (120 g). Získaný roztok se extrahuje dichlormethanem (3x150 ml), potom se kombinované extrakty suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oranžového oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3), za zisku titulní sloučeniny (11,49 g, 65%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 48, 78; H, 5,13; N, 10,29, C11H14N2O6 vyžaduje: C, 48,89; H, 5,22; N, 10,37%. δ (CDC1₃) :

1,42 (3H,t), 3,46 (3H,s), 3,83 (2H,t), 4,41 (2H,q), 4,70 (2H,t), 8,92 (lH,s), 9,16 (1 H,s). LRMS: m/z 271 (M+l)⁺.

Příprava 7: Ethylester kyseliny 5-amino-2-ethoxypyridin-3karboxylové

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 5 (5,3 g, 22 mmol), Raneyho niklu (2,50 g) a ethanolu (150 ml) se hydrogenuje při 345 kPa (50 psi) a 50 °C po dobu 18 hodin, potom se nechá vychladnout a přefiltruje se. Filtrát se kombinuje s ethanolovým výplachem (150 ml) filtrační vrstvy a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se trituruje s dichlormethanem a získaný pevný materiál se odebere a suší se za zisku titulní sloučeniny (4,56 g, 98%) ve formě světle hnědého pevného materiálu. Zjištěno: C, 57,12; H, 6, 79; N, 12,98, C10H14N2O3 vyžaduje: C, 57,13; H, 6,71; N, 13,33%. δ (CDCI3) : 1,39 (6H, 2xd), 3,41 (2H,s), 4,35 (4H,m), 7,55 (lH,s), 7,78 (lH,s).

LRMS: m/z 211 (M+l)⁺.

Příprava 8: Kyselina 5-ethoxy-5-nitropyridin-karboxylová • · · ·

122

5M vodný roztok hydroxidu sodného (4 ml, 20 mmol) se po kapkách přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 5 (5,1 g, 20 mmol) v ethanolu (100 ml) a reakčni směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodě (50 ml) a míšená suspenze se okyselí na pH 3 kyselinou chlorovodíkovou. Získaný vodný roztok se extrahuje ethylacetátem (3x100 ml) , kombinované extrakty se promyjí solankou (100 ml), suší se (NazSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku béžového pevného materiálu. Surový materiál se krystalizuje z hexanuethylacetatu za zisku titulní sloučeniny (3,32 g, 78%) ve formě béžových krystalů, δ (CDCI3) : 1,55 (3H,t), 4,78 (2H,q), 9,17 (1 H,s), 9,23 (1 H,s).

Příprava 9: Kyselina 2-(2-methoxyethoxy)-5-nitropyridin-3-karboxylová

M vodný roztok hydroxidu sodného (40 ml, 40 mmol) se přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 6 (4,0 g, 14,8 mmol) v 1,4-dioxanu (40 ml) a reakčni směs se mísí po dobu 1,5 hodiny, zahustí se za redukovaného tlaku na poolovinu svého objemu a okyselí se kyselinou chlorovodíkovou na pH 3, Vzniklá suspenze se extrahuje dichlormethanem (3x50 ml), potom se kombinované extrakty suší (MgSO-t) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (2,61 g, 73%) ve formě šamoového pevného materiálu. Zjištěno: C, 44,11 ; H, 4,04; N, 11,46, C9H10N2O6 vyžaduje: C, 44,63; H, 4,16; N, 11,57%. δ (CDC1₃) : 3,47 (3H,s), 3,83 (2H,t),

4,82 (2H,t), 9,15 (lH,s), 9,21 (lH,s). LRMS: m/z 243 (M+l)⁺.

Příprava 10: Kyselina 2-aminopyridin-5-sulfonová

2-aminopyridin (80 g, 0,85 mol) se po částech přidá během • · · ·

123

minut do míšené dýmavé kyseliny sírové (320 g) a vzniklý roztok se zahřívá při 140 °C po dobu 4 hodin a potom se nechá vychladnout. Reakční směs se vnese do míšeného ledu (200 g) a tato směs se mísí při teplotě ledové-solné lázně po dobu dalších 2 hodin. Získaná suspenze se filtruje, potom se získaný pevný materiál promyje postupně ledem-vodou (200 ml) a chladným průmyslovým methylovaným alkoholem (IMS) (200 ml) a nakonec se suší za odsávání za zisku titulní sloučeniny (11,3 g, 75%) ve formě pevného materiálu. LRMS: m/z 175(M+1)⁺.

Příprava 11: Kyselina 2-amino-3-brompyridin-5-sulfonová

Brom (99 g, 0,62 mol) se po kapkách přidá, během 1 hodiny, do míšeného, horkého roztoku titulní sloučeniny Přípravy 10 (108 g, 0,62 mol) ve vodě (600 ml), takovou rychlostí, aby se udržoval stabilní reflux. Po dokončení adice se reakční směs nechá vychladnout a potom se přefiltruje. Získaný pevný materiál se promyje vodou a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (53,4 g, 34%). δ (DMSOd6): 8,08 (lH,s), 8,14 (ÍH,s). LRMS: 253 (M)+.

Příprava 12: 3-brom-2-chloorpyridin-5-sulfonylchlorid

Roztok dusitanu sodného (7,6 g, 110 mml) ve vodě (30 ml) se přidá po kapkách do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 11 (25,3 g, 100 mmol) ve 20% kyselině chlorovodíkové (115 ml), takovou rychlostí, aby se teplota udržela pod 6 °C. Reakční směs se mísí po dobu 30 minut při 0 °C a po další 1 hodinu při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suší ve vakuu při 70 °C po dobu 72 hodin, potom se směs pevného materiálu, chloridu fosforečného (30 g, 144 mmol) a fosforoxychloridu (1 ml) zahřívá při 125 °C po dobu 3 hodin a potom se nechá • · · ·

124**·*

vychladnout. Reakční směs se vnese do míšeného ledu (100 g) a vzniklý pevný materiál se odebere a promyje se voodou. Surový materiál se rozpustí v dichlormethanu, potom se roztok suší (MgSOí) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (26,58 g, 91%) ve formě žlutého pevného materiálu, δ (CDCls) : 8,46 (1 H,s), 8,92 (1 H,s).

Příprava 13: 3-brom-2-chlor-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin

Roztok 1-ethylpiperazinu (11,3 ml, 89 mmol) a triethylaminu (12,5 ml, 89 mmol) v dichlormethanu (150 ml) se po kapkách poidá do míšeného, ledoví chladného roztoku titulní slouěeniny Poípravy 12 (23 g, 79 mmol) v dichlormethanu (150 ml) a reakění smis se mísí poi 0 °C po dobu 1 hodiny a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (99:1 až 97:3), za zisku titulní sloučeniny 14,5 g, 50%) ve formě oranžového pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,05 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,12 (4H,m), 8,24 (1 H,s), 8,67 (1 H,s).

Poíprava 14: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin

Bis(trimethylsilyl)amid draselý v toluenu (8,1 ml,

4,07mmol) se poidá do míšeného, ledoví chladného roztoku 2methoxyethanolu (416 μί, 5,4 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (30ml) a vzniklý roztok se mísí p0Í 0 0C po dobu 1 hodiny.

Potom s epo cástech přidá titulní sloučenina Přípravy 13 (1,0 g, 2,71 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin a potom se ředí ethylacetátem (40 ml). Získaná směs se promyje vodou (10 ml) , suší se (MgSCH) a odpaří se za • · · · ·· ·· ♦·· ··· ·· ·· redukovaného tlaku za zisku žlutého oleje, který se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97:3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (1,02 g, 92%) ve formě bezbarvého oleje. Zjištěno:

C, 40,83; H, 5,32; N, 9,99, Ci4H22BrN3O4S vyžaduje C, 41,18; H, 5,43; N, 10,29%. δ (CDCls) : 1,04 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,53 (4H,m) , 3,07 (4H,m), 3,46 (3H,s), 3,78 (2H,t), 4,60 (2H,t),

8,10 (1 H,s), 8,44 (1 H,s). LRMS: m/z 408 (M)⁺.

Příprava 15: 3-brom-2-(2-ethoxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin

Sodná sůl kovu (93 mg, 4 mmol) se přidá do míšeného roztoku 2-ethoxyethanolu (537 μΐ, 5,5 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (5 ml). Po rozpuštění sodíku se po částech přidá titulní sloučenina Přípravy 13 (1,0 g, 2,7 mmol) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a zahustí se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (10 ml) a solanku (10 ml). fáze se separují a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x10 ml). Kombinované organické roztoky se promyjí solankou, suší se (MgSC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu hexanu: dichlormethanu: methanolu (50:50:0 až 0:98:2) za zisku titulní sloučeniny (985 mg, 86%) ve formě žlutého oleje, δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 1,22 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m) , 3,07 (4H,m) , 3,61 (2H,q),

3,82 (2H,t), 4,59 (2H,t), 8,10 (1 H,s), 8,43 (1 H,s). LRMS: m/z 423 (M+l)⁺.

Příprava 16: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3methoxyprop-l-oxy)pyridin • · · · ·«·· · · ··►

126.....*........

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (95%) z titulní sloučeniny Přípravy 13 a 3-metthoxypropan-l-olu, za použití postupu podle Přípravy 15, δ (CDCI3) : 1,04 (3H,t), 2,09 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,52 (4H,m) , 3,08 (4H,m), 3,37 (3H,s), 3,57 (2H,t), 4,54 (2H,t), 8,09 (lH,s), 8,45 (lH,s). LRMS: m/z 423 (M+l)⁺.

Příprava 17: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2(tetrahydrofuran-3(S)-yloxy)pyridin

Směs 2M roztoku bis (trimethylsilyl)amidu sodného v tetrahydrofuranu (1,83 ml, 3,66 mmol), (S)-(+)-3hydroxytetrahydrofuranu (272 μΐ, 6 mmol) a tetrahydrofuranu (40 ml) se mísí po dobu 30 minut při teplotě okolí. Potom se přidá titulní sloučenina Přípravy 13 (750 mg, 2 mmol) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu hexanu: ethylacetatu (25:75 až 0:100), za zisku titulní sloučeniny (430 mg, 51%) ve formě oleje, δ (CDCla) : 1,06 (3H,t), 2,20 (1 H,m), 2,30 (1 H,m), 2,42 (2H,q), 2,56 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,94 (2H,m), 4,02 (1 H,m), 4,11 (1 H,m), 5,62 (1 H,m), 8,12 (1 H,s), 8,44 (1 H,s). LRMS: m/z 420 (M)⁺.

Příprava 18: Ethylester kyseliny 2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazinl-ylsulf onyl )pyridin-3-karboxylové

Nitrit sodný (2,22 g, 32,1 mmol) se přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 7 (4,5 g, 21,4 mmol) ve směsi koncentrované kyseliny chlorovodíkové (90 ml) a ledové kyseliny octové (90 ml) při -20 °C a vzniklá směs se mísí po dobu 2 hodin, během kterých se nechá teplota dosáhnout 0 °C. Směs se znovu ochladí na -20 °C, přidá se kapalný oxid siřičitý * · • · · · · · · ’

127..............

(50 ml) a roztok chloridu měďnatého (8,4 g, 62,5 mmol) ve smisi vody (9 ml) a kyseliny octové a reakční směs se mísí po doobu 30 minut při 0 °C a potom po dobu 2 hoodin při teplotě okolí. Získaná směs se vnese do míšeného ledu (80 g) a takt získaný vodný roztok se extrahuje dichlormethanem (3x50 ml). Kombinované extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku surového sulfonylchloridu ve formě hnědého oleje.

1-ethylpiperazin (10,9 ml, 85,6 mmol) se přidá do míšeného roztoku sulfonylchloridu v ethanolu (60 ml) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rzdělí mezi vodu (20 ml) a dichlormethan (30 ml), separované vodné fáze se extrahují dichlormethanem (2x30 ml), a potom se kombinované organické roztoky suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 98:2), za zisku titulní sloučeniny (5,0 g, 63%) ve formě světle hnědého oleje. Zjištěno: C, 51,40; H, 6,77; N, 11,15, C169H25N3O5S vyžaduje: C, 51,74; H, 6,78; N, 11,31%.

δ (CDCls) : 1,02 (3H,t), 1,39 (3H,t), 1,45 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,08 (4H,m), 4,38 (2H,q), 4,55 (2H,q), 8,37 (1 H,s), 8,62 (1 H,s). LRMS: m/z 372 {M+l)⁺.

Příprava 19: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-karboxylové

Triethylamin (3 ml, 19 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin) palladium (260 mg, 0,22 mmol) se přidají do roztoku titulní sloučeniny Přípravy 14 (1,30 g, 3 mmol) v ethanolu (15 ml) a směs se zahřívá pod atmosférou oxidu uhelnatého při 100 °C a i

• · · · · ·

128 • · · · · · • » · ··· «· * ·

1034 kPa (150 psi) v uzavřené nádobě po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Reakční směs se přefiltruje a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku žlutého pevného materiálu. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3), za zisku titulní sloučeniny (1,10 g, 92%) ve formě žlutého oleje, δ (CDC1₃) : 1,02 (3H,t), 1,38 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m) , 3,08 (4H,m), 3,43 (3H,s), 3,80 (2H,t), 4,38 (2H,q), 4,63 (2H,t), 8,40 (1 H,s), 8,61 (1 H,s). LRMS: m/z 402 (M+l)⁺.

Příprava 2-0: Ethylester kyseliny 2-(2-ethoxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě klovatiny (96%) z titulní sloučeniny Přípravy 15, postupem podle Přípravy 19, δ (CDC1₃) : 1,03 (3H,t), 1,22 (3H,t), 1,38 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,60 (2H,q), 3,83 (2H,t), 4,38 (2H,q), 4,62 (2H,t), 8,40 (lH,s), 8,62 (lH,s). LRMS: m/z 416 (M+l) ⁺.

Příprava 21: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3-methoxyprop-l-oxy)pyridin-3-karboxylové

Směs triethylaminu (5 ml, 35,9 mmol), tetrakis(trifenylfosfine) palladia (200 mg, 0,17 mmol), titulní sloučeniny Přípravy 16 (1,08 g, 2,54 mmol) a ethanolu (25 ml) se zahřívá pod atmosférou oxidu uhelnatého při 100 °C a 1034 kPa (150 psi) v uzavřené nádobě po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Reakční směs se přefiltruje a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se rozpustí v ethylacetatu (40 ml) a roztok se postupně promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml), solankou (20 ml) a 2M kyselinou chlorovodíkovou (5x10 ml). Kombinované acidické extrakty se alkalizují za použití pevného hydrogenuhličitanu sodného a roztok se extrahuje ethylacetátem (2x25 ml). Kombinované organické extrakty se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (640 mg, 68%) ve formě oleje, δ (CDCI3) : 1,05 (3H,t), 1,39 (3H,t), 2,09 (2H,m), 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,36 (3H,s), 3,58 (2H,t), 4,39 (2H,q), 4,57 (2H,t), 8,40 (lH,s), 8,64 (lH,s). LRMS: m/z 416 (M+l)⁺.

Příprava 22: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydrofuran-3(S)-oxy)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (78%) z titulní sloučeniny Přípravy 17, postupem podle Přípravy 19, δ (CDCI3) : 1,05 (3H,t), 1,39 (3H,t), 2,20 (1 H,m), 2,30 (1 H,m), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m) , 3,09 (4H,m) , 3,97 (3H,m), 4,14 (lH,m) , 4,38 (2H,q), 5,70 (lH,m), 8,41 (lH,s), 8,62 (lH,s). LRMS: m/z 414 (M+l) ⁺ .

Příprava 23: Kyselina 2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny Přípravy 18 (4,96 g, 13,35 mmol),

2M vodného roztoku hydroxidu sodného (25 ml, 50 mmol) a ethanolu (25 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Získaná směs se zahustí za redukovaného tlaku na polovinu svého objemu, promyje se etherem a okyselí se na pH 5 za použití 4M kyseliny chlorovodíkové. Tento vodný roztok se extrahuje dichlormethanem (3x30 ml), potom se kombinované extrakty suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (4,02 g, 88%) ve formě světle hnědého pevného materiálu, δ (DMSO-de) : 1,18 (3H,t), 1,37 (3H,t), 3,08 • · · · · · · « · · · · · »

130 ·· ·♦ ··· ··· ·· ·· (2H,q), 3,17-3,35 (8H,m), 4,52 (2H,q), 8,30 (1 H,s), 8,70 (1 H,s) .

Příprava 24: Sodná sůl kyseliny 2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazinl-ylsulfonyl )pyridin-3-karboxylové

1M vodný roztok hydroxidu sodného (85 ml, 85 mmol) se pomalu přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 18 (30,2 g, 85 mmol) v ethanolu (300 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (225 ml) a ethylacetát (250 ml). Fáze se separují, vodná fáze se promyje ethylacetátem (2x200 ml) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (29,6 g, 81%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 0,90 (3H,t), 1,25 (3H,t), 2,24 (2H,q), 2,40 (4H,m), 2,82 (4H,m), 4,39 (2H,q), 7:76 (1 H,s), 8,28 (1 H,s).

Příprava 25: Hydrochlorid kyseliny 4-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-karboxylové

Roztok titulní sloučeniny Přípravy 19 (1,18 g, 2,94 mmol) ve směsi ethanolu (10 ml) a 1M vodného roztoku hydroxidu sodného (10 ml, 10 mmol) se mísí po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Získaná směs se zahustí za redukovaného tlaku na polovinu svého objemu, zbytek ve formě vodného roztoku se promyje ethylacetátem (10 ml) a okyselí se na pH 3 za použití ředěné kyseliny chlorovodíkové. Tento acidický roztok se extrahuje dichlormethanem: methanolem (95:5; 6x20 ml), potom se kombinované extrakty suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (995 mg, 82%) ve formě bílé pěny. δ (DMSO-d6) : 1,06 (3H,t), 2,28 (2H,Q),

131

• ·

2,753,20 (8H,m), 3,28 (3H,s), 3,69 (2H,t), 4,56 (2H,t), 8,29 (1 H,s), 8,68 (1 H,s). LRMS: m/z 374 (M+l)⁺.

Příprava 26: Hydrochlorid kyseliny 2-(2-ethoxyethoxy)-5-4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 20 (859 mg, 2,07 mmol),l M vodného roztoku hydroxidu sodného (4,6 ml, 4,6 mmol) a 1,4-dioxanu (5ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. 1,4dioxan se odstraní odpařením za redukovaného tlaku a pH vodného zbytku se upraví na pH 3 pomocí kyseliny chlorovodíkové. Vzniklý roztok se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se trituruje s horkým ethanolem a směs se filtruje. Filtrát se potom odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (760 mg, 87%) ve formě světle hnědého pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 1,08 (3H,t), 1,18 (3H,t), 2,98 (2H,m), 3,07 (4H,m), 3,37 (2H,m) , 3,48 (2H,q), 3,72 (4H,m) , 4,55 (2H,t), 8,30 (1 H,s), 8,72 (1 H,s). LRMS: m/z 387 (M)⁺.

Příprava 27: Hydrochlorid kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3-methoxyprop-l-oxy)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě pevné substance (87%) z titulní sloučeniny Přípravy 21, za použití postupu podle příkladu 26, δ (DMSO-d6): 1,17 (3H,t), 1,96 (2H,m) , 3,08 (2H,q), 3,22 (3H,s), 3,33 (8H,m), 3,48 (2H,t), 4,48 (2H,t), 8,30 (1 H,s), 8,73 (lH,s). LRMS: m/z 388 (M+l)⁺.

Příprava 28: Hydrochlorid chloridu kyseliny 2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Oxalylchlorid (0,77 ml, 8,85 mmol) se po kapkách přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy • · · ·

132 (1,52 g, 4,42 mmol) a dimethylformamidu (2 kapky) v dichlormethanu (30 ml) a a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se trituruje s ethylacetátem a získaný pevný materiál se odebere, promyje se etherem a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (1,68 g, 95%). Zjištěno: C, 41,51 ; H,

5,27; N, 10,32, C14H21CI2N3O4S; 0,10 CH2CI2 vyžaduje C, 41,73; H, 5,02; N, 10,36%. δ (CDCls): 1,46 (6H,m), 2,95 (2H,q), 3,11 (2H,m), 3,48 (2H,m) , 3,55 (2H,m) , 3,92 (2H,m) , 4,60 (2H,q), 8,58 (1 H,s), 8,66 (1 H,s), 13,16 (1 H,s).

Příprava 29: Hydrochlorid chloridu kyseliny 5—(4—

-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2- (2-methoxyethoxy)pyridin-3-karboxylové

Oxalylchlorid (270 μΐ, 3,13 mmol) se po kapkách přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 25 (390 mg, 1,04 mmol) a dimethylformamidu (100 μΐ) a suchého dichlormethanu (20 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se azeotropuje s toluenem (2x20 ml) za zisku titulní sloučeniny (390 mg, 95%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-de): 1,20 (3H,t), 2,92 (2H,q), 3,08 (4H,m), 3,30 (3H,s), 3,49 (2H,m), 3,70 (2H,t), 3,76 (2H,m), 4,58 (2H,t), 8,32 (1 H,s), 8,72 (1 H,s), 14,20 (1 H,s).

Příprava 30: Ethyl-3-ethyl-lH-pyrazol-5-karboxylat

Ethanolický roztok ethoxidu sodného (21 % hmot./hmot.; 143 ml, 0,39 mol) se po kapkách přidá do míšeného, ledově chladného roztoku diethyloxalatu (59,8 ml, 0,44 mol) v absolutním ethanolu (200 ml pod atmosférou dusíku a získaný roztok se mísí po dobu 15 minut. Potom se po kapkách přidá

• · · ·

133 butan-2-on (39 ml, 0,44 mol), chladící lázeň se odstraní a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a potom po dobu 6 hodin při 40 °C a potom se znovu použije chladící lázeň. Potom se po kapkách přidá ledová kyselina octová (25 ml, 0,44 mmol), vzniklá směs se mísí po dobu 30 minut při 0 °C, po kapkách se přidá hydrazin hydrát (20 ml, 0,44 mmol) a reakční směs se nechá zahřát na teplotu okolí a takto se ponechá po dobu 18 hodin před tím, než se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (300 ml) a vodu (2x100 ml), suší se (Na2SC>4) a zahustí se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (66,0 g). δ (CDCla) : 1,-04 (3H,t), 1,16 (3H,t), 2,70 (2H,q), 4,36 (2H,q), 6,60 (1 H,s). LRMS: m/z 169 (M+l)⁺.

Příprava 31: Kyselina 3-ethyl-lH-pyrazol-5-karboxylová

Vodný roztok hydroxidu sodného (10 M; 100 ml, 1,0 mol) se po kapkách přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 30 (66,0 g, 0,39 mol) v methanolu (400 ml) a získaný roztok se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Chladná reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku na přibližně 200 ml, ředí se vodou (200 ml) a tato směs se promyje toluenem (3x100 ml). Získaná vodná fáze se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 4 a bílá sraženina se odebere a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (34,1 g) . δ (DMSO-d6) : 1,13 (3H,t), 2,56 (2H,q), 6,42 (1 H,s).

Příprava 32: Kyselina 4-nitro-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxylová

Dýmavá kyselina sírová (17,8 ml) se po kapkách přidá do míšeného, ledově chladného roztoku dýmavé kyseliny dusičné « · · ·

134 (16,0 ml), vzniklý roztok se zahřeje na 50 °C a potom se pomalu během 30 minut přidává kyselina 3-n-propyl-lH-pyrazole-5-karboxylová (Chem. Pharm. Bull., 1984, 32, 1568; 16,4 g,

0,106 mol), za udržování teploty pod 60 °C. Vzniklý roztok se zahřívá po dobu 18 hodin při 60 °C, nechá se vychladnout a potom se vnese na led. Bílá sraženina se odebere, promyje se vodou a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (15,4 g), t.t. 170-172 °C. Zjištěno: C, 42,35; H, 4,56; N, 21,07, C7H9N3O4 vyžaduje C, 42,21 ; H, 4,55; N, 21,10%. δ (DMSO-de) : 0,90 (3H,t), 1,64 (2H,m), 2,83 (2H,m), 14,00 (1 H,s).

Příprava 33: Kyselina 3-ethyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxylová

Titulní sloučenina ve formě hnědé pevné substance (64%) se získá ze sloučeniny z Přípravy 31, postupem analogickým s postupem Přípravy 32, δ (DMSO-de): 1,18 (3H,t), 2,84 (2H,m) , 13,72 (1 H,s) .

Příprava 34: 4-nitro-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxamid

Roztok titulní sloučeniny z Přípravy 32 (15,4 g, 0,077 mol) v thionylchloridu (75 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin a potom se chladná reakční směs odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se azeotropuje s tetrahydrofuranem (2x50 ml) a potom se suspenduje v tetrahydrofuranu (50 ml), míšená suspenze se potom ochladí ledem a reaguje s plynným amoniakem po dobu 1 hodiny. Přidá se voda (50 ml) a vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku za zisku pevné substance, ze které, po trituraci s vodou a sušení za odsávání, vznikne titulní sloučenina (14,3 g), t.t. 197-199°C. Zjištěno: C, 42,35; H, 5,07; N, 28,38, C7H10N4O4 vyžaduje C, • · · ·

42,42; Η, 5,09; Ν, 28,27%. δ (DMSO-de) : 0,90 (3H,t), 1,68 (2H,m), 2,86 (2H,t), 7,68 (1 H,s), 8,00 (1 H,s).

Příprava 35: 3-Ethyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina ve formě bílé pevné substance (90%) se získá ze sloučeniny z Přípravy 33, postupem analogickým s postupem Přípravy 34, δ (DMSO-d6) : 1,17 (3H,t), 2,87 (2H,m) ,

7,40 (1 H,s), 7,60 (1 H,s), 7,90 (1 H,s). LRMS: m/z 185 (M+l)⁺.

Příprava 36: 4-Amino-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 34 (10,0 g, 0,050 mol), 10% palladia na uhlíku (1,5 g) a ethanolu (400 ml) se hydrogenuje po dobu 18 hodin při 345 kPa (50 psi) a 50 °C a potom se přefiltruje. Filtrát se kombinuje s ethanolovým výplachem (200 ml) filtrační vrstvy a potom se odpaří za redukovaného tlaku za zisku oranžové pevné substance, ze které po krystalizací z ethylacetatu-methanolu vznikne titulní sloučenina (6,8 g) ve formě bílé pevné substance, t.t. 196-201 °C. Zjištěno: G, 48,96; H, 6,98; N, 32,08, C7H12N4O; 0,25 H₂O vyžaduje C, 48,68; H, 7,30; N, 32,44%. δ (DMSO-de): 0,88 (3H,t), 1,55 (2H,m), 2,46 (2H,t), 4,40 (2H,s), 7,00 (1 H,s), 7,12 (1 H,s), 12,20 (1 H,s).

Příprava 37: 4-7\mino-3-ethyl-lH-pyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina ve formě hnědé pevné substance (80%) se získá ze sloučeniny z Přípravy 35, postupem analogickým s postupem Přípravy 36, δ (DMSO-de): 1,08 (3H,t), 2,45 (2H,q), 4,50 (lH,s), 6,88 (lH,s), 7,10 (lH,s), 7,26 (2H,s). LRMS: m/z 155 (M+l)⁺.

Příprava 38a: 3-ethyl-4-nitro-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5— karboxamid • · • ·

a

Příprava 38b: 3-ethyl-4-nitro-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5— karboxamid

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 35 (20,0 g, 109 mmol),

2-(chlormethyl)pyridinhydrochloridu (17,9 g, 109 mmol), uhličitanu česného (74,7 g, 222 mmol) a dimethylformamidu (120 ml) se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (100 ml) a dichlormethan (100 ml) a fáze se separují. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3x100 ml) a kombinované extrakty se suší (MgSCH) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se krystalizuje z dichlormethanu-methanolu za zisku první titulní sloučeniny (1-izomer; 6,5 g, 21%). δ (CDCI3) : 1,24 (3H,t),

2,90 (2H,q), 5,54 (2H,s), 6,03 (lH,s), 7,27 (lH,m), 7,36 (lH,d), 7,76 (1 H,m), 8,52 (1 H,d), 8,58 (1 H,s).

Původní kapalina se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku druhé titulní sloučeniny (2-izomer; 17,36 g, 58%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 1,16 (3H,t), 3,06 (2H,q), 5,48 (2H,s), 5,88 (1 H,s), 7,19 (1 H,d), 7,27 (1 H,m), 7,70 (1 H,m), 8,57 (1 H,d).

Příprava 39a: 4-nitro-3n-propyl-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol5—karboxamid a

Příprava 38b: 4-nitro-3n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol5—karboxamid • · « ·

2-(Chlormethyl)pyridinhydrochloride (24,6 g, 150 mmol) se po částech přidá do míšeného roztoku titulní sločueniny z Přípravy 34 (30,0 g, 150 mmol) a uhličitanu česného (123,5 g, 380 mmol) v dimethylformamidu (300 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje ev vodě a vzniklá pevná substance se odebere a suší se za odsávání. Surový materiál se přečistí dvěma chromatografiemi na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (98:2) a ethylacetatu: pentanu (20:80) jako eluens, za zisku první titulní (1-izomer; 424 mg,

%) ve formě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 53,74; H, 5,20; N, 23,91, C13H15N5O3 vyžaduje C, 53, 97; H, 5,23; N,

24,21%. δ (CDC1₃) : 0,94 (3H,t), 1,68 (2H,m) , 2,86 (2H,t), 5,55 (2H,s), 6,07 (1H,S), 7,35 (lH,d), 7,75 (lH,m), 8,51 (lH,d), 8,56 (lH,s). LRMS: m/z 290 (M+l)⁺; a za zisku druhé titulní sloučeniny (2-izomer; 16,7 g, 38%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0,84 (3H,t), 1,46 (2H,m), 2,95 (2H,t), 5,49 (2H,s), 7,31 (2H,m), 7,60 (1 H,s), 7,79 (1 H,m), 7,90 (1 H,s), 8,49 (1 H,d).

Příprava 40: 4-Amino-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 38b (16,36 g, 59 mmol), 10% palladia na uhlíku (4 g) a ethanolu (150 ml) se hydrogenuje po dobu 4 hodin při 345 kPa (50 psi) a potom se přefiltruje. Filtrát se kombinuje s ethylacetatovým výplachem (150 ml) filtrační vrstvy a potom se zahustí za redukovaného tlaku na objem přibližně 70 ml. Získaná sraženina se odebere a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (12,6 g, 87%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 2,53 (2H,q), 4,00 (2H,s), 5,22 (lH,s), 5,36 (2H,s), 6,60 (lH,s),

138

6,81 (lH,d), 7,20 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,57 (1 H,d). LRMS: m/z

246 (M+l)⁺.

Příprava 41: 4-Amino-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny z Přípravy 39b (1,0 g, 3,46 mmol), Raneyho niklu (1 g) a ethanolu (50 ml) se hydrogenuje po dobu 18 hodin při 345 kPa (50 psi) a 50 °C a potom se ochladí a přefiltruje. Filtrát se kombinuje s ethanolovým výplachem (50 ml) filtrační vrstvy a potom se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (830 mg, 93%) ve formě krystalického pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 0,79 (3H,t),'l,33 (2H,m), 3,28 (2H,t), 4,60 (2H,s), 5,30 (2H,s), 6,88 (1 H,d), 6,98 (1 H,s), 7,13 (1 H,s), 7,30 (1 H,m), 7,74 (1 H,m), 8,50 (1 H,d). LRMS: m/z 274 (M)⁺.

Příprava 42: 4-Amino-3-ethyl-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina ve formě pevné substance (94%) se získá ze sloučeniny z Přípravy 38a, postupem analogickým s postupem Přípravy 40, δ (CDC1₃) : 1,20 (3H,t), 2,52 (2H,q), 3,72 (2H,s), 5,50 (2H,s), 7,21 (1 H,m) , 7,34 (1 H,d), 7,68 (1 H,m), 8,49 (1 H,d) . LRMS: m/z 246 (M+l)⁺.

Příprava 43: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-lH-pyrazol-5-karboxamid, hydrochlorid

Směs titulní sločueniny z Přípravy 28 (1,0 g, 2,51 mmol), přípravy 37 (387 mg, 2,51 mmol) a pyridinu (15 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Vzniklá směs se odpaří za

139 redukovaného tlaku a zbytek se trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (1,05 g, 87%) ve formě purpurového pevného materiálu. Zjištěno: C, 44,82; H, 5,72; N, 18,62, C20H29N7O5S; HCI; H2O vyžaduje C, 44,98; H, 6,04; N, 18,36%. δ (DMSO-d6) : 1,17 (6H,m), 1,46 (3H,t), 2,77 (2H,q), 3,09 (2H,q), 3,49 (4H,m), 3,78 (4H,m), 4,68 (2H,q), 7,30 (1 H,s), 7,49 (1 H,s), 8,52 (1 H,s), 8,76 (1 H,s), 10,54 (1 H,s). LRMS: m/z 480 (M+l)⁺.

Příprava 44: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (943 g, 8,41 mmol) se přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 43 (1,10 g, 2,1 mmol) v absolutním ethanolu (50 ml) a reakční směs se zahřívá v uzavřené zkumavce po dobu 18 hodin při 100 °C a potom se nechá vychladnout. Získaná směs odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozpustí ve vodě (15 ml). Vodný roztok se okyselí na pH 6 za použití kyseliny chlorovodíkové a získaný pevný materiál se odebere, promyje se vodou a suší se za odsávání. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (97:3) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (445 mg, 46%) ve formě žlutého pevného materiálu. Zjištěno: C, 51,95; H, 5,89; N,

20, 87, C20H27N7O4S vyžaduje: C, 52,05; H, 5,90; N, 21,24%. δ (DMSO-de) : 0,92 (3H,t), 1,30 (6H,m), 2,30 (2H,q), 2,42 (4H,m) , 2,86 (2H,q), 2,95 (4H,m), 4,49 (2H,q), 8,20 (1 H,s), 8,64 (1 H,s), 12,19 (1 H,s), 13,80 (1 H,s). LRMS: m/z 462 (M+l)⁺.

Příprava 45: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

140

Alternativa A

Směs titulní sloučenin z Přípravy 28 (1,09 , 2,5 mmol), Přípravy 40 (620 mg, 2,5 mmol), triethylaminu (1,35 ml, 10 mmol) a dichloromethanu (50 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Získaná směs se vnese do míšené vody (50 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x50 ml). Kombinované organické roztoky se suší (MgSOd a odpaří se za redukovaného tlaku a potom se zbytek přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (1,29 g, 90%) ve formě pěny. δ (CDCI3) : 1,00 (6H,m), 1,55 (3H,t), 2,37 (2H,q), 2,50 (4H,m), 2,87 (2H,q),

3,08 (4H,m), 4,77 (2H,q), 5,28 (lH,s), 5,45 (2H,s), 6,68 (1 H,s), 6,90 (1 H,d), 7,18 (1 H,m) , 7,61 (1 H,m) , 8,57 (1 H,d), 8,62 (1 H,s), 8,80 (1 H,s), 10,57 (1 H,s).

Alternativa B

1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochlorid (17,6 g, 91,8 mmol) se po částech přidává během 5 minut do míšené, ledově chladné suspenze 1-hydroxybenzotriazol hydrátu (12 g, 88,9 mmol) a titulní sloučeniny 24 (24 g, 65,7 mmol) v tetrahydrofuranu (300 ml) a potom se směs mísí po dobu 1 hodiny. Přidá se N-ethyldiisopropylamin (12,7 g, 98,3 mmol) a titulní sloučenina Přípravy 40 (12,9 g, 52,6 mmol) a reakčni směs se mísí při teplotě okolí po dobu 14 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (100 ml) a ethylacetat (200 ml), fáze se separují a organická fáze se postupně promyje vodou (50 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), potom se suší (MgSCh) a zahustí se za redukovaného tlaku na nižší objem. Výsledná suspenze se chladí na ledu po dobu 1 hodiny,

141 • · • ·

potom se odebere sraženina, která se suší za odsávání za zisku titulní sloučeniny (14,1 g, 47%) ve formě bílého krystalického materiálu, t.t. 185-187°C. Zjištěno: C, 54,59; H, 6,05; N, 19,32, C26H34N8O3S vyžaduje: C, 54,72; H, 6,00; N, 19,63%.

Příprava 46: Kyselina 2-n-propoxypyridin-3-karboxylová

Titulní sloučenina se získá ve formě světle hnědého oleje (50%) z kyseliny 2-chlornikotinové a n-propanolu, za použití postupu podle příkladu 14, δ (CDCI3) : 1,08 (3H,t), 1,92 (2H,m), 4,56 (2H,t), 7,10 (lH,m), 8,35 (lH,d), 8,45 (lH,d).

Příprava 47: Methylester kyseliny 2-n-propoxypyridin-3karboxylové

Diethylazodikarboxylat (2,2 ml, 14 mmol) se po kapkách přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 46 (2,30 g, 12,7 mmol), trifenylfosfinu (3,67 g, 14 mmol) a methanolu (0,60 ml, 15 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se trituruje s pentanem:etherem (80:20) a směs se přefiltruje. Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití pentanu:etheru (50:50) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (2,2 g, 89%) ve formě světle žlutého oleje, δ (CDCI3) : 1,07 (3H,t), 1,86 (2H,m), 3,92 (3H,s), 4,38 (2H,t), 6,93 (1 H,m), 8,15 (1 H,d), 8,30 (1 H,d).

Příprava 48: Methylester kyseliny 5-nitro-2-n-propoxypyridin3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě žlutých jehliček (32%) po rekrystalizací z methanolu, z titulní sloučeniny Přípravy • · · · • ·

142

47, za použití postupu podle Přípravy 5, δ (CDCI3) : 1,04 (3H,t), 1,84 (2H,m), 3,92 (3H,s), 4,48 (2H,t), 8,88 (1 H,s),

9,14 (1 H, s) .

Příprava 49: Methylester kyseliny 5-amino-2-n-propoxypyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 48 (1,8 g, 7 .46 mmol), Raneyho niklu (500 mg) a methanolu (50 ml) se hydrogenuje při 345 kPa (50 psi) a 50 °C po dobu 3 hodin a potom se ochladí a přefiltruje se. Filtrát se kombinuje s methanolovým výplachem (100 ml) filtrační vrstvy a potom se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (1,5 g, 95%) ve fromě hnědého oleje, δ (CDCI3) : 1,04 (3H,t), 1,80 (2H,m) , 3,40 (2H,s), 3,89 (3H,s), 4,28 (2H,t), 7,57 (1 H,s), 7,80 (1 H,s). LRMS: m/z 211 (M+l)⁺.

Příprava 50: Methylester kyseliny 5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (56%) z titulní sloučeniny Přípravy 49 a 1-methylpiperazinu, za použití postupu podle přípravy 18,

Příprava 51: Kyselina 5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pevné substance (82%) z titulní sloučeniny Přípravy 50, za použití postupu podle přípravy 23, δ (DMSO-d6) : 0,97 (3H,t), (2H,m) , 2,15 (3H,s), 2,38 (4H,m), 2,93 (4H,m), 4,37 (2H,t), 8,15 (lH,s), (1

H, s) .

143

Příprava 52: 3-ethyl-4-[5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-ylkarboxamido]-2-(pyridin-2-yl) methylpyrazol-5-karboxamid

Oxalylchlorid {550 μΐ, 6,37 mmol) a po něm dimethylformamid (2 kapky), se opatrně přidají do míšené, ledově chladné suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 51 (605 mg, 1,59 mmol) v dichlormethanu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se azeotropuje s toluenem za vzniku prášku.

Roztok Surového chloridu kyseliny v dichlormethanu (10 ml) se po kapkách přidá do míšené, ledově chladné suspenze titulní sloučeniny Přípravy 40 (430 mg, 1,76 mmol), triethylaminu (558 μΐ, 4 mmol) a dichlormethanu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 1,5 hodiny. Vzniklá směs se postupně promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, potom se organická fáze suší (MgSO-i) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu hexan:ethylacetát:methanol (70:30:0 až 0:90:10), za zisku titulní sloučeniny (395 mg, 76%) ve formě pevného materiálu. Zjištěno: C, 53,96; H, 6,09; N, 19,00, C26H34N8O5S vyžaduje: C, 54,22; H, 6,00; N, 19,64%. δ (CDCls) : 1,07 (6H,m), 2,01 (2H,m), 2,26 (3H,s), 2,48 (4H,m), 2,88 (2H,q), 3,10 (4H,m),

4,67 (2H,t), 5,34 (lH,s), 5,48 (2H,s), 6,70 (lH,s), 6,94 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,66 (lH,m), 8,59 (lH,d), 8,65 (lH,s),

8,82 (lH,s), 10,48 (lH,s). LRMS: m/z 572 {M+2)⁺.

Příprava 53: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

144 *· *’ ........ ·»

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé pěny (70%) z titulních sloučenin Přípravy 29 a Přípravy 41, za použití postupu podle přípravy 45A. δ (CDCI3) : 0,81 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,46 (2H,m), 2,39 (2H,q), 2,51 (4H,m), 2,82 (2H,t), 3,10 (4H,m), 3,39 (3H,s), 3,94 (2H,t), 4,85 (2H,t), 5,30 (1

H, s), 5,46 (2H,s), 6,69 (1 H,s), 6,90 (1 H,d), 7,21 (1 H,m) , 7,65 (1 H,m), 8,60 (1 H,d), 8,65 (1 H,s), 8,82 (1 H,s), 10,46 (1 H,s). LRMS: m/z 615 (M+l)⁺.

Příprava 54: 4-[2-(2-ethoxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (69%) z titulních sloučenin Přípravy 26 a Přípravy 41, za použití postupu podle přípravy 52, Zjištěno: C, 55, 13; H, 6,45; N, 17,27, C29H40N8O6S vyžaduje C, 55,39; H, 6,41; N, 17,82%. δ (CDCls) : 0,80 (3H,t),

I, 02 (3H,t), 1,1 0 (3H,t), 1,45 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,50 (4H,m), 2,81 (2H,t), 3,09 (4H,m), 3,54 (2H,q), 3,98 (2H,t), 4,80 (2H,t), 5,30 (1 H,s), 5,47 (2H,s), 6,70 (1 H,s), 6,89 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,63 (1 H,m) , 8,59 (lH,d), 8,65 (lH,s), 8,82 (1H,S), 10,45 (lH,s). LRMS: m/z 629 (M+l)⁺.

Příprava 55: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(3-methoxyprop-l-oxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (52%) z titulních sloučenin Přípravy 27 a Přípravy 41, za použití postupu podle přípravy 52, δ (CDCls): 0,82 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,44 (2H,m), 2,25 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 2,84 (2H,t), 3,10 (4H,m) , 3,29 (3H,s), 3,57 (2H,t), 4,79 (2H,t), 5,34 (1 H,s), 5,47 (2H,s), 6,70 (1 H,s), 6,92 (1 H,d), 7,22 (1 H,m), 7,66 (1

145

H, m), 8,59 (1 H,d), 8,65 (lH,s), 8,81 (lH,s), 10,45 (lH,s). LRMS: m/z 629 (M+l)⁺.

Příprava 56: 3-ethyl-4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydrofuran-3(S)-yloxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Roztok titulní sloučeniny Přípravy 22 (330 mg, 0,80 mmol) a 1 M vodného roztoku hydroxidu sodného (800 μΐ, 0,80 mmol) v ethanolu (3 ml) se mísí po dobu 3 hodin při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku.

Směs získaného pevného materiálu, titulní sloučeniny Přípravy 40 (196 mg, 0,80 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (135 mg, 0,88 mmol), N-ethyldiisopropylaminu (307 μΐ,

I, 76mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydrochloridu (169 mg, 0,88 mmol) a tetrahydrofuranu (15 ml) se mísí po dobu 72 hodin při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (50 ml) a vodu (15 ml), fáze se separují a organická fáze se suší (NazSOí) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan:methanol (95:5 až 90:10) za zisku titulní sloučeniny (382 mg, 78%) ve formě pěny. δ (CDCls) : 1,05 (6H,m), 2,40 (3H,m), 2,54 (5H,m), 2,85 (2H,q), 3,11 (4H,m), 3,54 (lH,m), 4,15 (3H,m), 5,31 (lH,s), 5,48 (2H,s), 5,90 (1 H,m), 6,69 (1 H,s), 6,94 (1 H,d), 7,24 (1 H,m), 7,67 (1 H,m) , 8,60 (1 H,m) , 8,66 (lH,s), 8,87 (lH,s), 10,27 (lH,s). LRMS: m/z 613 (M+l)⁺.

Příprava 57: 4-(2-ethoxy-5-nitropyridin-3-ylkarboxamido)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

146 • · · ··* ·· * ·

Oxalylchlorid (2,73 ml, 31 mmol) se po kapkách přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny z Přípravy 8 (3,31 g, 15,7 mmol) v dichlormethanu (50 ml) a potom se přidá dimethylformamid (2 kapky) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se azeotropuje s hexanem za vzniku pevné substance.

Roztok surového chloridu kyseliny v dichlormethanu (20 ml) se po kapkách přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny Přípravy 41 (4,06 g, 15,7 mmol), triethylaminu (4,37 ml, 31 mmol) a dichlormethanu (80 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 20 hodin. Vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (200 ml) a dichlormethan (300 ml). Fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x300 ml). Kombinované organické roztoky se promyjí solankou, suší se (NažSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku fialového pevného materiálu. Surový materiál se trituruje s etherem a získaný pevný materiál se odebere a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (6,26 g, 88%) ve formě špinavě bílého pevného materiálu. Zjištěno: C, 55,42; H, 5,05; N, 21,49, C21H23N7O5 vyžaduje C, 55, 62; H, 5,11 ; N,

21,62%. δ (CDC1₃) : 0,83 (3H,t), 1,46 (2H,m) , 1,60 (3H,t), 2,89 (2H,t), 4,85 (2H,q), 5,32 (1 H,s), 5,48 (2H,s), 6,72 (lH,s), 6,95 (lH,d), 7,24 (lH,m) , 7,67 (lH,m) , 8,60 (lH,d), 9,16 (1 H,s), 9,30 (1 H,s), 10,59 (1 H,s). LRMS: m/z 454 (M+l)⁺.

Příprava 58: 3-ethyl-4-[2-(2-methoxyethoxy)-5-nitropyridin-3-ylkarboxamido]-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

1-hydroxybenzotriazol hydráte (1,87 g, 12,2 mmol), N-ethyl-diisopropylamin (2,13 ml, 12,2 mmol), 1—(3— • ·

147

-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochloride (2,34 g, 12,2 mmol) a titulní sloučenina Přípravy 40 (3,0 g, 12,2 mmol) se přidají do míšené, ledově chladné suspenze titulní sloučeniny Přípravy 9 (2,96 g, 12,2 mmol) v dichlormethanu (80 ml) a reakční směs se mísí po dobu 18 hodin při teplotě okolí. Získaná směs se postupně promyje vodou (25 ml), 2M kyselinou chlorovodíkovou (2x25 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (25 ml) a solankou (25 ml), potom se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Získaný oevný materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan: methanol (99:1 až 97:.3), za zisku titulní sloučeniny (3,36, 58%), ve formě bílé pevné substance. Zjištěno: C, 53,41 ; H, 4,90; N, 20, 65, C21H23N7O6 vyžaduje: C, 53,72; H, 4,94; N, 20, 89%. δ (CDC1₃) : 1,08 (3H,t), 2,88 (2H,q), 3,40 (3H,s), 3,98 (2H,t),

4,90 (2H,t), 5,28 (1 H,s), 5,48 (2H,s), 6,70 (1 H,s), 6,92 (1 H,d), 7,23 (1 H,m), 7,66 (1 H,m), 8,60 (1 H,d), 9,15 (1 H,s), 9,31 (lH,s), 10,50 (lH,s). LRMS: m/z 470 (M+l)⁺.

Příprava 59: 4-(5-amino-2-ethoxypyridin-3-ylkarboxamido)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy (5 g, 11 mmol), Raneyho niklu (2,5 g) a ethanolu (150 ml) se hydrogenuje při 345 kPa (50 psi) a 40°C po dobu 3 hodin a potom dalších 72 hodin při teplotě okolí. Získaná směs se přefiltruje a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku světle žluté pevné substance. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan: methanol (99:1 až 95:1) a potom se provede triturace s etherem, za zisku titulní sloučeniny (4,4 g, 94%) jako béžové pevné substance. Zjištěno: C, 59,42; H, 5,96; N, 22,98, C21H25N7O3 vyžaduje C, 59,56: H, 5,95; N, 23,15%. δ

148

(CDCls): 0,78 (3H,t), 1,43 (2H,m) , 1,52 (3H,t), 2,82 (2H,t),

3,49 (2H,s), 4,59 (2H,q), 5,30 (1 H,s), 5,46 (2H,S), 6,70 (lH,s), 6,93 (lH,d), 7,22 (lH,m) , 7,65 (lH,m), 7,78 (lH,s), 7,94 (1 H,s), 8,58 (1 H,d), 10,53 (1 H,s).

Příprava 60: 4-[5-amino-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 58 (3,3 g, 7,0 mmol), Raneyho niklu (2 g) a ethanolu (120 ml) se hydrogenuje při 345 kPa -(50 psi) a 50°C po dobu 18 hodin. Získaná směs se přefiltruje a filtrát s eodpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (3,01 g, 98%) ve formě světle šedé pěny. Zjištěno: C, 56, 47 , H, 5,82; N, 21,40, C21H25N7O4; 0,40 H₂O vyžaduje C, 56,47; H, 5,82; N, 21,95%. δ (CDCls): 1,06 (3H,t), 2,81 (2H,q), 3,38 (3H,s), 3,50 (2H,s), 3,92 (2H,t), 4,65 (2H,t), 5,33 (lH,s), 5,46 (2H,s), 6,70 (lH,s), 6,92 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,64 (lH,m), 7,76 (lH,s), 7,94 (lH,s), 8,60 (lH,d), 10,47 (lH,s). LRMS: m/z 440 (M+l)⁺.

Příprava 61: 5-(5-amino-2-ethoxypyridin-3-yl)-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-7-on t-butoxid draselný (2,32 g, 20 mmol) se opatrně přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny Přípravy 59 (2,11 g, 5 mmol) a 4A molekulárních sít v ethanolu (50 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin, ochladí se a přefiltruje se. Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbyetk se rozdělí mezi 1M kyselinu chlorovodíkovou (30 ml) a ethylacetát (30 ml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x30 ml) a kombinované organické roztoky se * ·

149 promyjí solankou, suší se (Na2SO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan: methanol (100:0 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (1,22 g, 60%) ve formě světle žluté pevné substance. Zjištěno: C, 61,92; H, 5,69; N, 23,95, C21H23N7O2 vyžaduje: C, 62,21; H, 5,72; N, 24,18%. δ (CDCI3) : 0,94 (3H,t), 1,51 (3H,t), 1,62 (2H,m) , 2,95 (2H,t), 3,57 (2H,s), 4,50 (2H,q), 5,68 (2H,s), 7,06 (lH,d), 7,21 (lH,m), 7,60 (lH,m), 7,78 (lH,s), 8,16 (1 H,d), 8,57 (1 H,s), 11,07 (1 H,s) .

Příprava 62: 5-[5-amino-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl)-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-7-on

Bis(trimethylsilyl)amid draselný (6,58 g, 33,0 mmol) se přidá do míšené suspenze titulní sloučeniny Přípravy 60 (2,90 g, 6,60 mmol) ve 2-methoxyethanolu (70 ml) a a reakční směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Vzniklá směs se nechá ochladnout a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku béžového pevného materiálu. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan: methanol (98:2 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (2,21 g, 79%) ve formě bílé pevné substance. Zjištěno: C, 59,10; H, 5,44; N, 22,86, C21H23N7O3 vyžaduje: C, 59,85, H, 5,50; N, 23,26%. δ (CDCI3) : 1,28 (3H,t), 3,01 (2H,q), 3,53 (3H,s), 3,58 (2H,s), 3,82 (2H,t), 4,62 (2H,t), 5,66 (2H,s), 7,08 (1 H,d), 7,20 (lH,m), 7,61 (lH,m), 7,75 (1H,S), 8,09 (lH,s), 8,57 (lH,d), 11,14 (lH,s). LRMS: m/z 422 (M+l)⁺.

Příprava 63: 5-(5-chlorsulfonyl-2-ethoxypyridin-3-yl)-3-n150

-propy1-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-7-on

Dusitan sodný (295 mg, 4,4 mmol) se po částech přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny 61 (900 mg, 2,2 mmol) ve směsi ledové kyseliny octové (20 ml) a koncentrované kyseliny chlorovodíkové (20 ml) takovou rychlostí, aby se teplota udržela pod -20 °C. Po dokončení adice se směs nechá pomalu ohřát na 0 °C během 2 hodin a potom se znovu ochladí na -15 °C. Potom se přidá kapalný oxid siřičitý (22 ml) a roztok chloridu měďnatého (860 mg, 6,6 mmol) ve směsi vody (2 ml) a ledové kyseliny octové (14 ml) a reakční směs se mísí při 0 °C po dobu 30 mintu a potom další 2 hodiny při teplotě okolí. Získaná směs se opatrně vnese do míšeného ledu-vody (300 ml) a takto získaná suspenze se extrahuje dichlormethanem (3x100 ml). Kombinované extrakty se promyjí solankou, suší se (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku a potom se zbytek ve formě oleje trituruje s etherem za zisku titulní sloučeniny (720 mg, 67%) ve formě špinavě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 0,97 (3H,t), f..6O (3H,t), 1,73 (2H,m), 3,01 (2H,t), 4,82 (2H,q), 5,70 (2H,s), 7,10 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,64 (1 H,m), 8,58 (1 H,d), 8,90 (1 H,s), 9,29 (1

H,s), 10,55 (1 H,s).

Příprava 64: 5-[5-chlorsulfonyl-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-7-on

Titulní sloučenina se získá ve formě krémové pevné substance (84%) z titulní sloučeniny Přípravy 62, za použití postupu podle Přípravy 63, δ (CDCI3) : 1,32 (3H,t), 3,08 (2H,q),

3,58 (3H,s), 3,89 (2H,t), 4,85 (2H,t), 5,69 (2H,s), 7,12 (1

151

H, d), 7,22 (1 H,m), 7,64 (lH,m), 8,57 (lH,d), 8,89 (lH,s),

9,26 (1H,S), 10,75 (lH,s). LRMS: m/z 505 (M+l)⁺.

Příprava 65: 3-ethyl-4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-1-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě krystalické pevné substance (44%) z titulních sloučenin Přípravy 19 a Přípravy 42, za použití postupu podle Přípravy 56, δ (CDCI3) : 1,02 (3H,t), 1,20 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m) , 2,66 (2H,q),

3,10 (4H,m) ·, 3,39 (3H,s), 3,90 (2H,t), 4,81 (2H,t), 5,62 (2H,s), 5,70 (lH,s), 7,26 (2H,m), 7,71 (lH,m), 8,53 (lH,d),

8,66 (lH,s), 8,82 (lH,s), 9,04 (lH,s). LRMS: m/z 601 (M+l)⁺.

Příprava 66: 3-brom-2-(1,3-dimethoxyprop-2-oxy)-5-(4ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin

60% disperze hydridu sodného v minerálním oleji (133 mg, 3,33 mmol) se přidá do míšeného, ledově chladného roztoku

I, 3-dimethoxypropan-2-olu (J. Amer. Chem. Soc., 1939, 61, 433; 400 mg, 3,33 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) a směs se mísí po dobu 30 minut. Přidá se titulní sloučenina Přípravy 13 (500 mg, 1,35 mmol) a reakčni směs se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 1 hodiny a nechá se vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (30 ml) a ethylacetát (30 ml). Fáze se separují a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x30 ml), potom se kombinované organické extrakty promyjí solankou (30 ml) , suší se (MgSO-s) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (566 mg, 93%) ve formě žluté pevné substance, δ (CDCI3) : 1,06 (3H,t), 2,43 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,40 (6H,2xs),

152

3,70 (4H, 2xd), 5,60 (lH,m), 8,10 (1 H,s), 8,44 (1 H,s). LRMS:

m/z 452,

Příprava 67: Ethylester kyseliny 2-(1,3-dimethoxyprop-2-oxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě žluté pevné substance (84%) z titulní sloučeniny Přípravy 66, za použití postupu podle Přípravy 19, δ (CDC1₃) : 1,05 (3H,t), 1,40 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,09 (4H,m), 3,40 (6H, 2xs), 3,70 (4H,

2xd), 4,37 (2H,q), 5,70 (lH,m), 8,40 (lH,s), 8,62 (lH,s).

LRMS: m/z 446 (M+l)⁺.

Příprava 68: 3-brom-5-(4- ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydropyran-4-yloxy)pyridin

Titulní sloučenina se získá ve formě čirého oleje (70%) z titulní sloučeniny Přípravy 13 a

4-hydroxytetrahydropyranu, podle postupu Přípravy 14, po přečištění chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu jako eluens. δ (CDCI3) : 1,05 (3H,t), 1,88 (2H,m), 2,08 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,66 (2H,m), 3,99 (2H,m) 5,40 (lH,m), 8,10 (lH,s), 8,42 (lH,s). LRMS: m/z 434 (M)⁺.

Příprava 69: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydropyran-4-yloxy)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (92%) z titulní sloučeniny Přípravy 68, za použití postupu podle Přípravy 19, δ (CDC1₃) : 1,04 (3H,t), 1,40 (3H,t), 1,88 (2H,m), 2,08 (2H,m),

2,43 (2H,q), 2,55 (4H,m) , 3,09 (4H,m) , 3,66 (2H,m) , 4,00 ······ « · ·· • · · * · · · φ

153

(2H,m), 4,40 (2H,q), 5,50 (1 H,m), 8,40 (1 H,s), 8,60 (lH,s).

LRMS: m/z 427 (M)⁺.

Příprava 70: Sodná sůl kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydropyran-4-yloxy)pyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny Přípravy 69 (611 mg, 1,4 mmol), 1 M vodného roztoku hydroxidu sodného (1,6 ml, 1,6 mmol) a ethanolu (6 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 6 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozpustí ve vodě (16 ml), promyje se ethylacetatem (2x10 ml) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (520 mg, 93%) ve formě světle hnědého pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 1,19 (3H,t), 1,70 (2H,m), 2,00 (2H,m), 2,80-3,88 (14H,m), 8,32 (1 H,s), 8,73 (1 H,s), 10,93 (1 H,s). LRMS: m/z 400 (M+l)⁺.

Příprava 71: Sodná sůl kyseliny 2-(1,3-dimethoxyprop-2-oxy) -5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě pevné substance (92%) z titulní sloučeniny Přípravy 67, za použití postupu podle Přípravy 70, LRMS: m/z 418 (M+l)⁺.

Příprava 72: 4-[2-(1,3-dimethoxyprop-2-oxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulních sloučenin Přípravy 71 (418 mg, 0,95 mmol) a Přípravy 41 (250 mg, 1,0 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (270 mg, 2,0 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydročhloridu (380 mg, 2,0 mmol), triethylaminu (280 μί, 2,0 mmol) a tetrahydrofuranu (10 ml) se

154

mísí při teplotě okolí po dobu 36 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku, zbytek se rozdělí mezi dichloromethan (10 ml) a solanku (lOml), fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x10 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSOd a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě žlutého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethan: methanol (98:2 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (350 mg, 56%) ve formě špinavě bílé pevné substance, δ (CDCla) : 0,81 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,44 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 2,80 (2H,t), 3,10 (4H,m) , 3,38 (6H,s), 3/78 (2H,dd), 3,92 (2H,dd), 5,31 (lH,s), 5,47 (2H,s), 5,93 (lH,m), 6,70 (1 H,s), 6,92 (1 H,d), 7,23 (1 H,m), 765 (1

H, m), 8,58 (1 H,d), 8,65 (1 H,s), 8,80 (1 H,s), 10,26 (1 H,s). LRMS: m/z 660 (M+2)+.

Příprava 73: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydrofuran-3(R)-yloxy)pyridin

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (89%) z titulní sloučeniny Přípravy 13 a (R)-(-)-3-hydroxytetrahydrofuranu, podle postupu Přípravy 17, δ (CDCI3) :

I, 05 (3H,t), 2,20 (1 H,m) , 2,30 (1 H,m) , 2,42 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,07 (4H,m), 3,94 (2H,m), 4,02 (1 H,m), 4,10 (1 H,m), 5,63 (1 H,m), 8,11 (1 H,s), 8,43 (lH,s). LRMS: m/z 421 (M+l)⁺.

Příprava 74: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydrofuran-3(R)-yloxy)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (84%) z titulní sloučeniny Přípravy 73, podle postupu Přípravy 19, δ (CDCI3) : 1,03 (3H,t), 1,40 (3H,t), 2,26 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,55

155 • · (4H,m), 3,10 (4H,m) , 3,98 (3H,m) , 4,12 (1 H,m) , 4,38 (2H,q),

5, 70 (1 H,m), 8,42 (1 H,s), 8,62 (1 H,s). LRMS: m/z 414 (M+l)⁺.

Příprava 75: 3-ethyl-4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydrofuran-3(R)-yloxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pěny (78%) z titulních sloučenin Přípravy 74 a Přípravy 40, postupem podle Přípravy 56, δ (CDCla): 1,04 (6H,m), 2,40 (3H,m), 2,52 (5H,m) , 2,84 (2H,q), 3,10 (4H,m), 3,94 (1 H,m), 4,15 (3H,m), 5,28 (lH,s), 5,48 (2H,s), 5,90 (lH,m), 6,68 (lH,s), 6,92 (lH,d), 7,22 (1 H,m), 7,67 (1 H,m), 8,60 (1 H,d), 8,64 (1 H,s), 8,86 (1 H,s), 10,28 (1 H,s). LRMS: m/z 613 (M+l)⁺.

Příprava 76: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(tetrahydropyran-4-yloxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny z Přípravy 70 (520 mg, 1,3 mmol) a Přípravy 41 (285 mg, 1,1 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydrochloridu (250 mg, 1,3 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (199 mg, 1,3 mmol), N-ethyldiisopropylaminu (226 μΐ, 1,3 mmol) a tetrahydrofuranu (20 ml) se mísí po dobu 1 týdně při teplotě okolí. Potom se přidá ethylacetat (150 ml) a vzniklá směs se promyje solankou (2x50 ml), suší se (MgSOU a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: dichlormethanu: methanolu (32:64:4 až 0:95:5), za zisku titulní sloučeniny (603 mg, 86%) ve formě bílé pěny. δ (DMSO-de): 0,74 (3H,t),

0,91 (3H,t), 1,39 (2H,m), 1,90 (2H,m) , 2,05 (2H,m) , 2,30

156

(2H,q), 2,42	(4H,m)	, 2,74	(2H,t),	2,95	(4H,m)	, 3,50	(2H,m) ,
3,85 (2H,m),	5,48 (	2H,s) ,	5,52 (1	H,m) ,	7,09	(lH,d),	7,35
(3H,m), 7,48	(lH,m)	, 8,39	(lH,s),	8,54	(lH,d)	, 8,65	(1H,S),

10,18 (lH,s). LRMS: m/z 641 (M+l)⁺.

Příprava 77: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulních sloučenin z Přípravy 28 (3,07 g, 7,71 mmol) a Přípravy 41 (2,0 g, 7,71 mmol) v pyridinu (50 ml) se zahřívá při .50 °C po dobu 48 hodin, potom se nechá vychladnout a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (100 ml) a vodu (20 ml), potom se organické fáze separují, suší se (MgSO}) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědé pěny se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu:methanolu (100:0 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny (3,19 g, 71%) ve formě bílé pěny. Zjištěno C,

54,66; H, 6,17; N, 18,38, C27H36N8O5S; 0,40 H2P vyžaduje C,

54,79; H, 6,27; N, 18,93%. δ (CDCI3) : 0,82 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,45 (2H,m), 1,58 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 2,86 (2H,t), 3,10 (4H,m) , 4,79 (2H,q), 5,29 (1 H,s), 5,46 (2H,s), 6,70 (1 H,s}, 6,93 (1 H,d}, 7,21 (1 H,m), 7,64 (1 H,m), 8,59 (lH,d), 8,64 (lH,s), 8,81 (lH,s), 10,56 (lH,s). LRMS: m/z 585 (M+l)⁺.

Příprava 78: Methylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-propoxypyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (53%) z titulní sloučeniny Přípravy 49 a 1-ethylpiperazinu, postupem podle Přípravy 18, δ (CDC1₃) : 1,05 (6H,m), 1,86 (2H,m), 2,41 (2H,q),

157 • ·

2,54 (4H,m), 3,08 (4H,m) , 3,92 (3H,s), 4,46 (2H,t), 8,40 (1 H,s), 8,62 (1 H,s). LRMS: m/z 372 (M+l)⁺.

Příprava 79: Kyselina 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-karboxylová

Směs titulní sloučeniny Přípravy 78 (370 mg, 1,0 mmol), 2M vodného roztoku hydroxidu sodného (1 ml, 2 mmol) a methanolu (10 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Vzniklá směs se zpracuje s oxidem uhličitým v pevném stavu pro úpravu pH na 7 a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se trituruje s dichlormethanem (3x50 ml) a kombinované organické roztoky se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (340 mg, 95%) ve formě bílé pevné substance. LRMS: m/z 357 (M)⁺.

Příprava 80 : 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propoxypyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Oxalylchlorid (122 μΐ, 5,6 mmol) se po kapkách přidá do míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 79 (478 mg, 1,4 mmol) a dimethylformamidu (3 kapky) v dichlormethanu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se azeotropuje s dichlormethanem (3x10 ml) a potom se přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 41 (360 mg, 1,4 mmol) v pyridinu (10 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku, zbytek se rozdělí mezi vodu (50 ml) a dichlormethan (50 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x50 ml). Kombinované organické roztoky se suší (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku a potom se surový získaný materiál přečistí chromatografií na • *

158 « « • · • · • · silikagelové koloně, za použití ethylacetatu:methanolu (80:20) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (500 mg, 37%) ve formě bezbarvé skloviny. δ (CDCI3) : 0,81 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,27 (3H,t), 1,46 (2H,m), 2,00 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 2,86 (2H,t), 3,09 (4H,m), 4,66 (2H,t), 5,27 {1 H,s), 5,47 (2H,s), 6,68 (1 H,s), 6,93 {1 H,d), 7,21 (1 H,m), 7,66 (1

H, m), 8,59 (1 H,d), 8,64 (1 H,s), 8,80 (1 H,s), 10,47 (1 H,s). LRMS: m/z (M+l)⁺.

Příprava 81: 2-(2-benzyloxyethoxy)-3-brom-5-(4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl)pyridin

Směs 2M roztoku bis(trimethylsilyl)amidu sodného v tetrahydrofuranu (4,1 ml, 8,2 mmol), 2-benzyloxyethanolu (1,16 ml, 8,2 mmol) a tetrahydrofuranu (5 ml) se mísí při teplotě přibližně 0 °C po dobu 1 hodiny. Přidá se titulní sloučeniny Přípravy 13 (2,0 g, 5,43 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 5 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se suspenduje v ethylacetatu (10 ml) a suspenze se extrahuje 2M kyselinou chlorovodíjkovou (3x10 ml).

Kombinované extrakty se alkalizují vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahují se ethylacetátem (3x15 ml). Tyto kombinované extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku a získaný surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu:methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (1,95 g, 74%) ve formě oleje, δ (CDCI3) :

I, 02 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 3,07 (4H,m), 3,88 (2H,t), 4,62 (4H,m) , 7,26 (1 H,m), 7,34 (4H,m), 8,09 (1 H,s), 8,42 (1 H,s). LRMS: m/z 486 (M+2)⁺.

Příprava 82: Ethylester kyseliny 2-(2-benzyloxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové • tt · ·· • •to · · t P · · •v · · · · » · o · ·

CQ * · · · » · ··♦»

l)” ·· 99 99· ··« _v« ··

Titulní sloučenina se získá ve formě oleje (42%) z titulní sloučeniny Přípravy 81, postupem podle Přípravy 21, δ (CDCI3) : 1,04 (3H,t), 1,38 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,08 (4H,m), 3,90 (2H,t), 4,38 (2H,q), 4,67 (4H,m), 7,28 (1 H,m) , 7,35 (4H,m), 8,41 (1 H,s), 8,62 (1 H,s). LRMS: m/z 478 (M+l)⁺.

Příprava 83: Hydrochlorid kyseliny 2-(2-benzyloxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě světle žlutého pevného materiálu (.88%) z titulní sloučeniny Přípravy 82, postupem podle Přípravy 26, δ (CDC13): 1,45 (3H,t), 2,82 (2H,m), 3,09 (2H,q), 3,26 (2H,m), 3,64 (2H,m) , 3,90 (4H,m) , 4,64 (2H,s), 4,78 (2H,t), 7,33 (1 H,m), 7,37 (4H,m), 8,58 (1 H,s), 8,64 (1 H,s), 12,17 (1 H,s). LRMS: m/z 450 (M+l)+.

Příprava 84 : 4-[2-(2-benzyloxyethoxy)-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě oranžového pevného materiálu (80%) z titulních sloučenin Přípravy 83 a Přípravy 41, postupem podle Přípravy 52, δ (CDC13): 0,80 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,42 (2H,m), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m), 2,81 (2H,t), 3,10 (4H,m), 4,06 (2H,t), 4,57 (2H,s), 4,86 (2H,t), 5,26 (1 H,s), 5,45 (2H,s), 6,68 (lH,s), 6,90 (lH,d), 7,17-7,27 (5H,m), 7,34 (lH,m), 7,63 (lH,m), 8,59 (lH,d), 8,62 (lH,s), 8,82 (1 H,s), 10,50 (1 H,s). LRMS: m/z 692 {M+2)⁺.

Příprava 85: 2-benzyl-3-ethyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid ···· ·· ι ζλ » · · · r · · · · · lOU · · * · ···»*· >« »·

Uhličitan česný (2,9 g, 9,0 mmol) se přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 35 (1,7 g, 8,8 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) a suspenze se mísí po dobu 30 minut. Přidá se benzylbromid (10,6 ml, 9,0 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (125 ml) a solanku (100 ml), fáze se separují a organická fáze se suší (MgSOU a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (1,13 g, 47%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-ds): 0,97 (3H,t), 2,96 (2H,q), 5,44 (2H,s), 7,24 (2H,m), 7,33 (3H,m), 7,68 (lH,s), 7,95 (lH,s). LRMS: m/z 274 (M+l)⁺.

Příprava 86: 4-amino-2-benzyl-3-ethylpyrazol-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě světle růžového pevného materiálu (90%) z titulní sloučeniny Přípravy 85, postupem podle Přípravy 40, δ (DMSO-ds): 0,87 (3H,t), 2,49 (2H,q), 4,46 (2H,s), 5,22 (2H,s), 6,85 (1 H,s), 7,09 (3H,m), 7,25 (1 H,m), 7 .31 (2H,m). LRMS: m/z 245 (M+l)⁺.

Příprava 87: 2-benzyl-4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě bílé krystalické pěny (46%) z titulních sloučenin Přípravy 18 a Přípravy 86, postupem podle Přípravy 56, δ (DMSO-ds): 0,92 (6H,m), 1,44 (3H,t), 2,30 (2H,q), 2,41 (4H,m), 2,74 (2H,q), 2,95 (4H,m),

4,62 (2H,q), 5,40 (2H,s), 7,17 (2H,m), 7,31 (4H,m), 7,50 • · · · • ·

161 (lH,s), 8,39 (1 H,s), 8,65 (1 H,s), 10,38 (1 H,s). LRMS: m/z

571 (M+2)⁺.

Příprava 88a: 3-ethyl-2-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid a

Příprava 88b: 3-ethyl-2-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 35 (2,2 g, 11,95 mmol), 2 -chlormethyl-l-methylimidazolu, hydrochloridu (J. Chem. Soc., 1957 , 3305; 2,0 g, 11,95 mmol), uhličitanu česného (8,5 g,

26,3 mmol) a dimethylformamidu (100 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 6 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku.

Zbytek se rozdělí mezi vodu (150 ml) a dichlormethan (150 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x150 ml) . Kombinované extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku, potom se zbytek trituruje s dichlormethanem:methanolem (90:10) a vzniklý pevný materiál se odebere a suší se za odsávání za zisku první titulní sloučeniny (1-izomeru; 305 mg, 9%) ve formě krémového pevného materiálu, δ (DMSO-de): 1,16 (3H,t), 2,82 (2H,q), 3,69 (3H,s), 5,40 (2H,s), 6,81 (lH,s), 7,13 (lH,s), 7,13 (lH,s), 8,20 (lH,s), 8,50 (lH,s). LRMS: m/z 279 (M+l)⁺.

Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu:methanolu:0,88 vodného amoniaku (90:10:1) jako eluens, za zisku druhé titulní sloučeniny (2-izomeru; 480 mg, 14%) ve formě pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 1,16 (3H,t), 3,20 (2H,q), 3,77 (3H,s), 5,48 (2H,s), 6,22 (1 H,s), 6,68 (1 H,s), 7,00 (1H,S), 7,25 (lH,s). LRMS: m/z 279 (M+l)⁺.

• · · ·

162

Příprava 89: 4-amino-3-ethyl-2-(l-methylimidazol-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě růžového pevného materiálu (92%) z titulní sloučeniny Přípravy 88b, postupem podle Přípravy 40, δ (CDC13): 1,00 (3H,t), 2,68 (2H,q), 3,60 (3H,s), 5,34 (2H,s), 5,40 (1 H,s), 6,55 (1 H,s), 6,82 (1 H,s), 6,98 (1 H,s). LRMS: m/z 249 (M+l)⁺.

Příprava 90: 3-ethyl-4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-(1-methy1imidazol-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (48%) z titulních sloučenin Přípravy 29 a Přípravy 89, postupem podle Přípravy 45A. δ (CDCI3) : 1,01 (3H,t), 1,10 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 2,98 (2H,q), 3,08 (4H,m), 3,36 (3H,s), 3,66 (3H,s), 3,92 (2H,t), 4,82 (2H,t), 5,35 (1 H,s), 5,42 (2H,s), 6,61 (1 H,s), 6,86 (1 H,s), 7,00 (1 H,s), 8,64 (1 H,s), 8,81 (1 H,s), 10,33 (1 H,s). LRMS: m/z 604 (M+l)⁺.

Příprava 91a: 1-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid a

Příprava 91b: 2-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 34 (5,0 g, 25,3 mmol), 2-chlormethyl-l-methylimidazolu, hydrochloridu (J.

Chem. Soc., 1957 , 3305; 4,6 g, 27,7 mmol), uhličitanu česného • · · · (18,1 g, 55,6 mmol) a acetonitrilu (100 ml) se zahřívá při 50 °C po dobu 5 hodin a potom se nechá vychladnout. Přidá se ethylacetát (300 ml) a směs se promyje vodou (2x400 ml), suší se (MgSO4) a zahustí se za redukovaného tlaku na objem přibližně 200 ml. Vzniklá sraženina se odebere a kombinuje se s materiálem vzniklým při krystalizací zbytku získaného po odpaření filtrátu za redukovaného tlaku z ethylacetatu, za zisku - po sušení - první titulní sloučeniny (1-izomeru; 1,0 g, 13%) ve formě bílých krystalů, δ (DMSO-de): 0,89 (3H,t), 1,60 (2H,m), 2,76 (2H,t), 3,66 (3H,s), 5,39 (2H,s), 6,80 (1 H,s), 7,12 (lH,s), 8,20 (lH,s), 8,48 (lH,s). LRMS: m/z 293 (M+l)⁺.

Krystalizační kapalina se odpařila za redukovaného tlaku a zbytek se rekrystalizoval z ethylacetatu za zisku druhé titulní sloučeniny (2-izomeru; 700 mg, 9%) ve formě pevného materiálu, δ (DMSO-de): 0,92 (3H,t), 1,52 (2H,m), 3,04 (2H,t), 3,68 (3H,s), 5,49 (2H,s), 6,82 (1 H,s), 7,14 (1 H,s), 7,66 (1 H,s), 7,93 (1 H,s). LRMS: m/z 293 (M+l)⁺.

Příprava 92: 4-amino-2-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 91 b (500 mg, 1,71 mmol), 10% palladia na uhlíku (150 mg) a ethanolu (20 ml) se hydrogenuje po dobu 4 hodin při 345 kPa (50 psi) a potom se přefiltruje. Směs se kombinuje s dichlormethanovým:

methanolovým (80:20) výplachem filtrační vrstvy, odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se krystalizuje z ethylacetatu za zisku titulní sloučeniny (320 mg, 71%) ve formě světle růžového pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0,90 (3H,t), 1,40 (2H,m), 2,60 (2H,t), 3,58 (3H,s), 3,94 (2H,s), 5,32 (3H,m),

6,54 (1 H,s), 6,82 (1 H,s), 6,98 (1 H,s) • 4 • · · ·

164

Příprava 93: 3-(2-fenylethenyl)pyridazin

Chlorid zinečnatý (820 mg, 6 mmol) se přidá do míšené směsi benzaldehydu (6,11 ml, 60 mmol) a 3-methylpyridazinu (2,83 g, mmol) a vzniklá směs se zahřívá po dobu 20 hodin při 150 °C. Chladná reakční směs se rozdělí mezi dichlormethan (40 ml) a 2M vodný roztok hydroxidu sodného (20 ml), organická fáze se separuje, kombinuje se s dichlormethanovým extraktem (80 ml) vodné fáze, suší se (Na2SCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (99:1) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (59%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCI3) : 7,12 (lH,d), 7,34 (3H,m), 7,56 (2H,d), 7,72 (1 H,d), 8,37 (1 H,s), 8,50 (1 H,s), 8,60 (1 H,s). LRMS: m/z 183 (M+l)⁺.

Příprava 94: 3-hydroxymethylpyridazin

Ozon se probublá míšeným roztokem titulní sloučeniny Přípravy 93 (3,60 g, 0,02 mol) v methanolu (150 ml) při -10 °C. Po 30 minutách se směs probublá dusíkem, po částech se přidá borohydrid sodný (750 mg, 0,02 mol) a vzniklý roztok se mísí po dobu 2 hodin při teplotě okolí. Reakční směs se okyselí 2M kyselinou chlorovodíkovou, potom se alkalizuje 0,880 vodným roztokem amoniaku a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (98:2 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (76%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCls): 3,66 (1 H,s), 4,92 (2H,s), 7,48 (2H,m) , 9,06 (1 H,d).

Příprava 95: 3-chlormethylpyridazin, hydrochlorid

165 ······ · · · · ·· • · · · · ·· ♦ · · · «·· · · ···* ·· · · · · ·· · ···· · · ···· c « ·· · · · · · · ·· ··

Thionylchlorid (3,05 ml, 42 mmol) se přidá do ledem chlazené nádoby obsahující titulní sloučeninu Přípravy 94 (920 mg, 8 mmol) a reakční směs se mísí po dobu 45 minut při teplotě okolí a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se azeotropuje s toluenem (40 ml) za zisku surové titulní sloučeniny (1,4 g) ve formě hnědého pevnéh materiálu, δ (DMSOde): 4,98 (2H,s), 7,80 (1 H,m), 7,90 (1 H,d), 8,19 (1 H,s),

9,22 (1 H,d) .

Příprava 96: 4-nitro-3-n-propyl-2-(pyridazin-3-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulních sloučenin Přípravy 95 (700 mg, 4,24 mmol) a Přípravy 34 (840 mg, 4,24 mmol), uhličitanu česného (3,45 g, 10,6 mmol) a acetonitrilu (30 ml) se mísí při 80 °C po dobu 2 hodin a potom se nechá vychladnout. Přidá se solanka (30 ml), směs se extrahuje dichlormethanem (2x80 ml) a kombinované extrakty se suší (NažSCri) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny (480 mg, 39%) ve formě žlutého pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,02 (3H,t), 1,60 (2H,m) , 3,06 (2H,t), 5,72 (2H,s), 5,87 (1 H,s), 7,25 (1 H,s), 7,54 (2H,m), 9,20 (1 H,s).

Příprava 97: 4-amino-3-n-propyl-2-(pyridazin-3-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě růžové klovatiny (97%) z titulní sloučeniny Přípravy 96, postupem podle

Přípravy 40, δ (CDC1₃) : 0,90 (3,tJ, 1,47 (2H,m}, 2,51 (2H,t},

166

5,25 (lH,s), 5,58 (2H,s), 6,58 (lH,s}, 7,09 (lH,d), 7,43 (lH,m), 9,14 (lH,d). LRMS:m/z 261 (M+l)⁺.

Příprava 98: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2- (pyridazin-3-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě oranžové klovatiny (42%) z titulních sloučenin Přípravy 28 a Přípravy 97, postupem podle Přípravy 45A. δ (CDCI3) : 0,81 (3H,t), 1,01 (3H,t), 1,47 (2H,m), 1,55 (3H,t), 2,39 (2H,q), 2,50 (4H,m), 2,87 (2H,t), 3,07 (4H,m), 4,77 (2H,q), 5,58 (lH,s), 5,69 (2H,s), 6,71 (lH,s), 7,18 (lH,d), 7,45 (lH,m), 8,63 (lH,s), 8,79 (lH,s), 9,15 (lH,s), 10,52 (lH,s). LRMS: m/z 586 (M+l)⁺.

Příprava 99: 2-methylpyrimidin-l-oxid

Čerstvě připravený roztok sodného soli kovu (11,5 g, 0,50 mol) v ethanolu (170 ml) se po kapkách přidá během 1 hodiny do míšené suspenze hydroxylaminu, hydrochloridu (34,75 g,

0,50 mol) a fenolftaleinu (50 mg) v ethanolu (200 ml) tak, aby se zachoval bezbarvý roztok, a směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Přidá se acetonitril (26 ml, 0,50 mol) a tato směs se mísí po dobu dalších 2 hodin při teplotě okolí a potom po dobu 48 hodin při 45 °C. Vzniklá směs se přefiltruje a filtrát se zahustí za redukovaného tlaku na objem přibližně 100 ml a potom se ochladí na 0 °C. Vzniklá sraženina se odebere a suší se za odsávání za zisku acetamidoximového meziproduktu (9,9 g, 27%) ve formě bílých krystalků.

• · • ·

167

Komplex fluoridu boritého-diethyletheru (9,5 ml, 75 mmol), a potom 1,1,3,3-tetramethoxypropan (11,5 ml, 70 mmol), se přidá do míšené směsi dimethylformamidu (100 ml) a toluenu (100 ml). Potom se přidá acetamidoxim (5,0 g, 67,5 mmol) a reakčni směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 45 minut a potom se nechá vychladnout. Vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek ve formě hnědého oleje se rozdělí mezi dichlormethan: methanol (80:20) (100 ml) a vodný roztok uhličitanu sodného (lOOml). Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethanem: methanolem (80:20) (10x50 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (98:2) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (2,5 g, 34%) jako oranžového pevného materiálu, δ (CDCI3) · 2,74 (3H,s), 7,19 (1 H,m), 8,16 (1 H,d), 8,39 (1 H,d).

Příprava 100: 2-chlormethylpyrimidin

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 99 (2,5 g, 22,7 mmol) a oxychlorid fosforitý (18 ml, 193 mmol) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin a potom se nechá vychladnout. Vzniklá směs se vnese do mísenéh ledu a neutralizuje se pomocí pevného uhličitanu sodného po dobu 3 hodin. Takto získaný vodný roztok se extrahuje dichlormethanem (3x100 ml) kombinované extrakty se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědého oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 97:3), za zisku titulní sloučeniny (510 mg, 17%). δ (CDCI3) : 4,72 (2H,s), 7,22 (lH,m), 8,75 (2H,d). LRMS: m/z 129 (M+í)⁺.

• · • · · · · » • · to * • « · • · · ·

168

Příprava 101a: 4-amino-3-n-propyl-l-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid a

Příprava 101b: 4-amino-3-n-propyl-2-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Hydroxid draselný (393 mg, 7 mmol) se přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 36 (1,2 g, 6 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) a směs se mísí po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Potom se přidá titulní sloučenina Přípravy 100 (900 mg, 7 mmol) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (15 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x15 ml). Kombinované organické roztoky se suší (MgSO-j) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku směsi titulních sloučenin (neseparovaných) (1,06 g, 67%) ve formě světle růžového pevného materiálu. Analýza ¹H-NMR spektra ukázala poměr N was then added and the reaction mixture N1:N2 (t.j. izomeru l:izomeru 2) 22:78, δ (DMSO-d6) : 0,81 (3H,t),

0,88 (3H,t), 1,38 (2H,m), 1,52 (2H,m), 2,48 (2H,t), 4,10 (2H,s), 4,44 (2H, s), 5,41 (2H,s), 5,73 (2H,s), 6,90 (lH,s), 7,06 (lH,s), 7,35 (lH,m), 7,42 (lH,m), 7,50 (2H,s), 8,68 (2H,d), 8,77 (2H,d). LRMS: m/z 261 (M+l)⁺.

Příprava 102a: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-l-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

169

Příprava 102b: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Triethylamin (1,12 ml, 8,0 mmol)se přidá do míšené, ledově chladné suspenze titulních sloučenin Přípravy 29 (680 mg, 1,6 mmol) a Příprav lOla/lOlb (417 mg, 1,6 mmol) v dichlormethanu (20 ml) a potom se reakční směs mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin, promyje se vodou (10 ml), suší se (MgSCu) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě hnědé pěny se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (98:2 až 95:5), za zisku první titulní sloučeniny (1-izomeru; 56 mg, 6%) ve formě oranžové klovatiny. δ (CDCI3) : 0,96 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,76 (2H,m), 2,42 (2H,q), 2,54 (4H,m), 3,38 (3H,s), 3,86 (2H,t),

4,76 (2H,t), 6,13 (2H,s), 7,11 (lH,m), 8,44 (lH,s), 8,62 (2H,d), 8,78 (lH,s), 10,17 (1 H,s). LRMS: m/z 616 (M+l)⁺; a potom druhé titulní sloučeniny (2-izomeru; 460 mg, 47%) ve formě oranžové pěny. δ (CDCI3) : 0,84 (3H,t), 1,03 (3H,t), 1,50 (2H,m) , 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 2,88 (2H,t), 3,11 (4H,m),

3,39 (3H,s), 3,96 (2H,t), 4,85 (2H,q), 5,23 (1 H,s), 5,58 (2H,s), 6,70 (1H,S), 7,25 (lH,m), 8,63 (lH,s), 8,74 (2H,d),

8,84 (lH,s), 10,52 (1 H,s). LRMS: m/z 616 (M+l)⁺.

Příprava 103a: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-l-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid a

Příprava 103b: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyrimidin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

170

Titulní sloučeniny se získají jako směs izomerů (88%) z titulních sloučenin Přípravy 28 a Příprav lOla/lOlb, za použití postupu podle Přípravy 45A. LRMS: m/z 586 (M+l)⁺.

Příprava 104: 4-amino-3-n-propyl-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (92%) z titulní sloučeniny Přípravy 39a, za použití postupu pdole Přípravy 41, δ (DMSO-d6) : 0,88 (3H,t), 1,55 (2H,m) , 2, (2H,t), 4,18 (2H,s), 5,59 (2H,s), 6,73 (lH,d), 7,22 (lH,m), 7,57 (2H,s), 7,69 (1 H,m), 8,47 (1 H,d). LRMS: m/z 260 (M+l)

Příprava 105: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě hnědé pěny (74%) z titulních sloučenin Přípravy 28 a Přípravy 104, za použití postupu podle Přípravy 45A. δ (CDCI3) : 0,94 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,62 (5H,m), 2,40 (2H,q), 2,52 (4H,m), 2,64 (2H,t),

3,09 (4H,m), 4,77 (2H,q), 5,58 (2H,s), 5,71 (lH,s), 7,26 (lH,m), 7,40 (lH,d), 7,74 (lH,m), 8,52 (lH,d), 8,67 (lH,s),

8,82 (1H,S), 9,60 (lH,s), 9,96 (1 H,s). LRMS: m/z 585 (M+l)⁺,

Příprava 106: 4-amino-3-ethyl-l-(l-methylimidazol-2yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě růžové pěny (95%) z titulní sloučeniny Přípravy 88a, za použití postupu podle Přípravy 40, δ (DMSO-de): 1,09 (3H,t), 2,43 (2H,q), 3,72 • ·

171 (3H,s), 4,37 (2H,s), 5,44 (2H,s), 6,79 (lH,s), 7,08 (lH,s).

LRMS: m/z 249 (M+l)⁺.

Příprava 107: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-l-(l-methylimidazol-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (78%) z titulních sloučenin Přípravy 28 a Přípravy 106, za použití postupu podle Přípravy 45A. δ (CDCI3) : 1,01 (3H,t),

1,21 (3H,t), 1,60 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 2,72 (2H,q), 3,08 (4H,m), 3,94 (3H,s), 4,76 (2H,q), 5,54 (2H,s), 5,93 (lH,s), 6,83 (lH,s), 6,92 (1 H,s), 8,65 (1 H,s), 8,82 (1 H,s), 9,95 (1 H,s), 10,27 (1 H,s). LRMS: m/z 575 (M+2)⁺.

Příprava 108: 4-amino-l-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě krémového pevného materiálu (78%) z titulní sloučeniny Přípravy 91a, za použití postupu podle Přípravy 40, δ (DMSO-d6) : 0,87 (3H,t), 1,52 (2H,m), 2,38 (2H,t), 3,70 (3H,s), 4,35 (2H,s), 5,44 (2H,s), 6,78 (lH,s), 7,08 (lH,s). LRMS: m/z 263 (M+l)⁺.

Příprava 109: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2methoxyethoxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-1-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina (67%) se získá z titulních sloučenin Přípravy 25 a Přípravy 108, za použití postupu podle Přípravy 52, δ (CDC1₃) : 0,95 (3H,t), 1,02 (3H,t), 1,66 (2H,m) , 2,40 (2H,q), 2,51 (4H,m) , 2,63 (2H,t), 3,09 (4H,m) , 3,39 (3H,s), *7*1 · · * · · · ~

172 · · ♦· ·«···♦ ·· · *

3.88 (3H,s), 3,93 (2H,t), 4,80 (2H,t), 5,56 (2H,s), 5,81 (1 H,s), 6,83 (1 H,s), 6,92 (1 H,s), 8,65 (1 H,s), 8,82 (1 H,s), 9,60 (1 H,s), 10,08 (1 H,s) .

Příprava 110: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(1methylpiperidin-4-yloxy)pyridin

Směs 4-hydroxy-l-methylpiperidinu (560 mg, 4,89 mmol),

60% disperze hydridu sodného v minerálním oleji (200 mg,

4.89 mmol) a tetrahydrofuranu (30 ml) se mísí při teplotě přibližně 0 °C po dobu 30 minut. Přidá se titulní sloučenina Přípravy 13 (600 mg, 1,63 mmol) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 90 minut a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se suspenduje v ethylacetatu (50 ml) a suspenze se postupně promyje 2M vodným roztokem hydroxidu sodného (2x20 ml), vodou (20 ml) a solankou (20 ml). Vzniklý roztok se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (660 mg, 70%) ve formě žlutého oleje, δ (CDC1₃) : 1,05 (3H,t), 1,92 (2H,m) , 2,04 (2H,m) , 2,33 (3H,s), 2,42 (4H,m), 2,55 (4H,m), 2,66 (2H,m), 3,08 (4H,m), 5,24 (1

H,m), 8,09 (1 H,s), 8,42 (1 H,s). LRMS: m/z 447 (M)⁺.

Příprava 111: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-lylsulfonyl) -2-(l-methylpiperidin-4-yloxy)pyridin-3karboxylové

Triethylamin (2 ml, 1,43 mmol) a tetrakis(triphenylphosphine)palladium (0) (200 mg, 0,173 mmol) se přidají do míšeného roztoku titulní sloučeniny

Přípravy 110 (640 mg, 1,43 mmol) v ethanolu (20 ml) a reakční směs se mísí pod atmosférou oxidu uhelnatého při 100 °C a při

173 tlaku 1034 kPa (150 psi) v uzavřené nádobě po dobu 18 hodin a nechá se vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (96,5:3,5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (550 mg, 87%) ve formě oranžového pevného materiálu, δ (CDCI3) : 1,02 (3H,t), 1,40 (3H,t), 2,16 (2H,m), 2,41 (2H:q), 2,56 (6H,m), 2,72 (3H,s), 3,08 (4H,m), 3,19 (4H,m) , 4,38 (2H,q), 5,60 (lH,m) , 8,42 (1H,S), 8,62 (lH,s). LRMS: m/z 441 (M+l)⁺.

Příprava 112: Sodná sůl kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-lylsulfonyl) -2-(l-methylpiperidin-4-yloxy)pyridin-3karboxylové

Směs titulní sloučeniny Přípravy 111 (550 mg, 1,25 mmol), 1 M vodného roztoku hydroxidu sodného (2,4 ml, 2,40 mmol) a ethanolu (5 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (15 ml) a ethylacetát (15 ml), fáze se separují a vodná fáze se promyje za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (510 mg, 94%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-de) : 0,93 (3H,t), 1,94 (2H,m), 2,10 (2H,m), 2,16 (3H,s), 2,29 (2H,q), 2,40 (4H,m), 2,68 (4H,m), 2,88 (4H,m) , 5,08 (lH,m), 7,75 (1H,s), 8,28 (1H,s).

Příprava 113a: 4-amino-l-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid a

Příprava 113b: 4-amino-2-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-npropylpyrazol-5-karboxamid

4-(2-Chlorethyl)morfolin (získaný alkalizací hydrochloridové soli (2,67 g, 14,35 mmol)) se přidá do

174

míšeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 36 (2,0 g, 11,96 mmol) a hydroxidu draselného (800 mg, 14,35 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin a potom se nechá vychladnout. Získaná směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu: ledové kyseliny octové (95:5:1) jako eluens, za zisku druhé titulní sloučeniny (2:izomeru; 480 mg, 14%). δ (CDCI3) : 0,98 (3H,t), 1,60 (2H,m), 2,48 (4H,m), 2,55 (2H,t), 2,76 (2H,t), 3,69 (4H,m), 3,94 (2H,s), 4,08 (2H,t), 5,19 (1 H,s), 6,55 (1 H,s). LRMS: m/z 282 (M+l)⁺; a potom první titulní sloučeniny (1-izomeru; 350 mg, 10%). δ (CDCIs): 0,97 (3H,t), 1,64 (2H,m), 2,50 (6H,m), 2,81 (2H,t), 3,48 (2H,s), 3,64 (4H,m) , 4,50 (2H,t).

Příprava 114: Hydrochlorid kyseliny 3-t-butyl-lH-pyrazol-5-karboxylové

Hydrát hydrazinu (1,7 ml, 35 mmol) se po kapkách přidá do míšeného roztoku ethylesteru kyseliny 5,5-dimethyl-2,4dioxohexanové (J. Org. Chem., 1997 , 62, 5908; 6,1 g, 30,5 mmol) v ethanolu (20 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 4 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku.

Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (20 ml) a vodu (20 ml), fáze se separují a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x20 ml). Kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku surového esteru ve formě žlutého pevného materiálu.

Směs tohoto materiálu, 1,4-dioxanu (100 ml) a 2M vodného roztoku hydroxidu sodného (25,5 ml, 51 mmol) se mísí při teplotě okolí po dobu 72 hodin, potom se pH reakční směsi • · « · · ·

175 upraví na 2 pomocí kyseliny chlorovodíkové. Vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se trituruje s horkým ethanolem. Tato směs se přefiltruje a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (5,06 g, 81%) ve formě oranžové pevné substance, δ (DMSO-d6) : 1,26 (9H,s), 6,46 (1 H,s) .

Příprava 115: Kyselina 3-t-butyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxylová

Titulní sloučenina Přípravy 114 (1,5 g, 7,3 mmol) se po částech přidá do míšené, ledově chladné koncentrované kyseliny sírové (7,5 ml), směs se ohřeje na 40 °C a potom se po kapkách přidá dýmavá kyselina dusičná (1,13 ml) tak, aby se vnitřní teploty udržela pod 50 °C. Reakční směs se mísí při 50 °C po dobu 7 hodin, nechá se vychladnout a opatrně se vnese do ledu/vody (100 g). Vzniklá suspenze se mísí po dobu 2 hodin a přefiltruje se, potom se odebraný pevný materiál promyje vodou a suší se za odsávání za zisku titulní sloučeniny (975 mg,

63%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-d6) : 1,33 (9H,s). LRMS: m/z 231 (M+18)⁺.

Příprava 116: 3-t-butyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamid

Oxalylchlorid (1,59 ml, 18,2 mmol) se po kapkách přidá do míšeného, ledem chlazeného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 115 (970 mg, 4,55 mmol) a dimethylformamidu (1 kapka) v dichloromethanu (20 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku.

Zbytek se azeotropuje nejprve s dichlormethanem a potom s 0,88 vodným roztokem amoniaku. Vzniklý materiál se trituruje s horkým ethanolem, potom s acetonitrilem, směs se filtruje a

176 filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (955 mg, 99%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (DMSO-de): 1,36 (9H,s), 7,60 (lH,s), 7,88 (lH,s). LRMS: m/z 230 (M+18)⁺.

Příprava 117: 3-t-butyl-4-nitro-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 116 (960 mg, 4,55 mmol), uhličitanu česného (3,7 g, 11,36 mmol) a 2-(chloromethyl)pyridinu, hydrochloridu (821 mg, 5,00 mmol) v acetonitrilu (20 ml) se mísí při 70 °C po dobu 20 hodin a potom se nechá vychladnout a přefiltruje se. Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (300 mg, 22%) ve formě žluté pevné substance, δ (DMSO-dg): 1,35 (9H,s), 5,40 (2H,s), 7,18 (lH,d), 7,32 (lH,m), 7,80 (lH,m), 8,10 (1 H,s), 8,46 (1 H,s), 8,51 (1 H,d). LRMS: m/z 304 (M+l)⁺.

Příprava 118: 4-amino-3-t-butyl-l-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Míšená směs titulní sloučeniny Přípravy 117 (290 mg, 0,96 mmol) a 10% palladia na uhlíku (29 mg) v ethanolu (20 ml) se hydrogenuje při 345 kPa (50 psi) a při teplotě okolí po dobu 7 hodin a potom se přefiltruje. Filtrační vrstva se promyje ethanolem a kombinované výplachy a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní

177 ..............

sloučeniny (220 mg, 84%) ve formě oranžové pevné substance, δ (CDCls) : 1,36 (9H,s), 4,00 (2H,s), 5,50 (2H,s), 7,23 (1 H,m) , 7,38 (lH,d), 7,71 (lH,m), 8,50 (lH,d). LRMS: m/z 274 (M+l)⁺.

Příprava 119: 4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(1methylpiperidin-4-yloxy)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-n-propyl-2-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid (350 mg, 1,8 mmol) se přidá do míšeného roztoku 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (250 mg, 1,8 mmol), triethylaminu (350 μΐ, 2,5 mmol) a titulních sloučenin Přípravy 112 (510 mg, 1,18 mmol) a Přípravy 41 (330 mg, 1,25 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 72 hodin a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se několikrát trituruje s ethylacetátem za zisku titulní sloučeniny (175 mg, 21%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 0,81 (3H,t), 1,04 (3H,t), 1,47 (2H,m), 2,17 (4H,m), 2,32 (5H,m), 2,40 (2H,q), 2,53 (4H,m), 2,76 (2H,m), 2,84 (2H,t), 3,10 (4H,m), 5,49 (3H,m), 5,64 (1 H,s), 6,90 (2H,m), 7,22 (1 H,m) , 7,68 (1 H,m) , 8,60 (1 H,d), 8,64 (1 H,s), 8,82 (1 H,s), 10,35 (1 H,s). LRMS: m/z 654 (M+l)⁺.

Příprava 120: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochloride (280 mg, 1,5 mmol) se po kapkách přidá do míšeného roztoku 1hydroxybenzotriazolu, hydrátu (200 mg, 1,5 mmol), triethylaminu (278 μΐ, 2,0 mmol) a titulních sloučenin

Přípravy 23 (371 mg, 1,0 mmol) a Přípravy 113b (250 mg, 0,9

178 mmol) v dichlormethanu (20 ml) a reakčni směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Vniklá směs se promyje vodou (10 ml), suší se (MgSCU) a odpaří se za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (97:3 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny (430 mg, 68%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDCI3) : 0,93 (3H,t), 1,02 {3H,t), 1,58 (5H,m), 2,40 (2H,q), 2,52 (8H,m), 2,82 (2H,t), 2,90 (2H,t), 3,12 (4H,m) , 3,72 (4H,m), 4,20 (2H,t), 4,79 (2H,q),

5,28 (1 H,s), 6,63 (1 H,s), 8,64 (1 H,s), 8,82 (1 H,s), 10,50 (1 H,s) .

Příprava 121: 3-t-butyl-4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-1-(pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina Přípravy 28 (384 mg, 0,967 mmol) se po kapkách přidá do míšeného, ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 118 (220 mg, 0,805 mmol) a triethylaminu (330 μί, 2,42 mmol) v dichlormethanu (10 ml) a reakčni směs se mísí při teplotě okolí po dobu 14 hodin. Získaná směs se promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) a solankou (5 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí dvěma běhy chromatografie na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu ethylacetatu: methanolu (100:0 až 90:10) a potom dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (156 mg, 32%) ve formě bílého pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,02 (3H,t), 1,36 (9H,s), 1,55 (3H,t), 2,42 (2H,q), 2,55 (4H,m), 3,10 (4H,m), 4,77 (2H,q), 5,68 (3H,m), 7,02 (lH,d), 7,19 (lH,m), 7,65 (lH,m), 7,98 (lH,s), 8,56 (lH,d), 8,70 (lH,s), 8,87 (lH,s), 9,35 (lH,s). LRMS: m/z 599 (M+l)⁺.

···· ··

179

Příprava 122: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-1-(2-morfolin-4-yl)ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid (1,34 g, 7,0 mmol) se přidá do míšeného roztoku 1hydroxybenzotriazolu, hydrátu (945 mg, 7,0 mmol), Nethyldiisopropylaminu (1,22 ml, 7,0 mmol) a titulních sloučenin Přípravy 113a (1,82 g, 6,5 mmol) a Přípravy 23 (428 mg, 1,25 mmol) v tetrahydrofuranu (120 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 72 hodin. Vzniklá směs se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodný roztok uhličitanu sodného (50 ml) a dichlormethan (100 ml) . Fáze se separují, vodná fáze se extrahuje dichlormethannem (2x100 ml) a kombinované organické roztoky se promyjí solankou (3x50 ml) , suší se (Na₂SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se trituruje s etherem, potom se krystalizuje z ethylacetatu-methanolu, za zisku titulní sloučeniny (310 mg, 42%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 0,92 (3H,t),

1,01 (3H,t), 1,54 (3H,t), 1,62 (2H,m) , 2,36-2,60 (12H,m), 2,80 (2H,t), 3,08 (4H,m), 3,64 (4H,m), 4,49 (2H,t), 4,72 (2H,q), 5,78 (1 H,s), 8,30 (1 H,s), 8,66 (1 H,s), 8,80 (1 H,s), 9,49 (1 H,s). LRMS: m/z 607 (M+l)⁺.

Příprava 123: 3-ethyl-l-methyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid a

Příprava 124: 3-ethyl-2-methyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid

180 ·*·· · · · · · · • · ·· ··· ··· ·· ··

Směs titulní sloučeniny Přípravy 35 (100 g, 0,54 mol), a uhličitanu česného (194 g, 0,60 mol) v N,N-dimethylformamidu (1000 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 45 minut a potom se ochladí v ledové lázni. Po kapkách se přidá methyljodid (37,2 ml, 0,60 mol) a po dokončení přidávání se reakční směs mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (500 ml) a vodu (300 ml). Vrstvy se separují, vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (4x500 ml) a kombinované organické roztoky se suší (MgSC>4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se rekrystalizuje z dichlormethanu/ ethylacetatu za zisku určitého množství NI izomeru (17,0 g,

16%) .

Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu: pentanu (80:20) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny Přípravy 123 (25,0 g, 23%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCls) : 1,27 (3H, t) , 2,94 (2H, q), 4,06 (3H, s), 6,00 (1 H, br s), 7 .56 (1 H, br s).

LRMS : m/z 216 (M+ 18)+ a titulní sloučeniny Přípravy 124 (28,4 g, 27%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 1,29 (3H, t) , 3,00 (2H, q), 3,92 (3H, s), 5,98 (1 H, s), 7,32 (1 H, s).

Příprava 125: Ethylester kyseliny 2-methyl-3-n-propyl-pyrazol-5-karboxylové

Roztok diethyloxalatu (27,2 ml, 0,2 mol) ve 2-pentanonu • · · ·

181 (21,2 ml, 0,2 mol) se po kapkách přidá do roztoku sodíku (4,83 g, 0,21 mol) v ethanolu (200 ml), a reakční směs se mísí při 60 0C po dobu 5 hodin a potom se ochladí v ledové lázni.

Roztok se neutralizuje za použití kyseliny octové (11,5 ml,

0,2 mol) a potom se po kapkách přidá N-methylhydrazin (10,6 ml, 0,2 mol). Směs se mísí po dobu dalších 4 hodin při teplotě okolí a zahustí se za redukovaného tlaku. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (300 ml) a vodu (200 ml) a fáze se separují. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3x100 ml), kombinované organické roztoky se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití ethylacetatu: hexanu (25:75) jako eluens, za zisku ethyl-1-methyl-3-n-propyl-pyrazol-5-karboxylatu (6,1 g} a titulní sloučeniny (22,1 g, 56%).

δ (CDC1₃) : 1,00 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 1,70 (2H, m) , 2,60 (2H, t), 3,87 (3H, 5), 4,40 (2H, q), 6,60 (1 H, 5).

Příprava 126: Kyselina 2-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Směs titulní sloučeniny Přípravy 125 (21,5 g, 0,11 mol) ve vodném roztoku hydroxidu sodného (50 ml, 6N, 0,3 mol) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin. Chladná směs se ředí vodou (50 ml) a okyselí se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (25 ml) a vzniklá sraženina se přefiltruje a suší se za zisku titulní sloučeniny (17,3 g, 94%) ve formě světle žluté pevné substance. Část (1 g) tohoto pevného materiálu se rekrystalizuje z vody/ethanolu.

• · · ·

t.t. 120-122°C. δ (DMSO-de) : 0,95 (3H, t), 1,59 (2H, m), 2,60 (2H, t), 3,78 (3H, s), 6,48 (1 H, s), 12,45 (1 H, s).

Příprava 127: Kyselina 2-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (89%) z titulní sloučeniny Přípravy 126, za použití postupu podle Přípravy 32, δ (DMSO-d6) : 0,95 (3H, t) , 1,60 (2H, m) , 2,96 (2H, t), 3,88 (3H, s), 13,75 (1 H, s).

Příprava 128: 2-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 127 (18,6 g, 87,3 mmol) v thionylchloridu (75 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin. Chladná reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se nalije na směs ledu/hydroxidu amonného. Tato směs se extrahuje dichlormethanem (4x10 ml) a kombinované organické extrakty se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu: 0,88 amoniaku (95:5:1) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (6,8 g, 37%) ve formě pevného materiálu, δ (CDCI3) :

• · · ·

183

1,07 (3H, t), 1,72 (2H, m), 3,00 (2H, t), 3,97 (3H. s) , 6,14 (1 H, s), 7,40 (IH, s).

Příprava 129: 2,3-diethyl-4-nitro-pyrazol-5-karboxamid

Ethyljodid (7,2 ml, 90,0 mmol) se přidá do suspenze titulní sloučeniny Přípravy 35 (15,0 g, 81,0 mmol), a uhličitanu česného (29,3 g, 90,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (100 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin.

Směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se trituruje s vodou (100 ml) a vzniklý pevný materiál se odfiltruje a suší se. Suspenze tohoto pevného materiálu v etheru (250 ml) se zahřívá při 35 °C po dobu 1 hodiny a sraženina se odfiltruje a suší se. Získaný materiál se rekrystalizuje z ethylacetatu za zisku titulní sloučeniny ve formě krystalické pevné substance (5,8 g, 34%). δ (CDC1₃) : 1,30 (3H, t), 1,54 (3H, t), 3,00 (2H, q), 4,20 (2H, q), 5,92 (1 H, s), 7,27 (IH, s). LRMS : m/z 212 (M) ⁺ .

Příprava 130: 3-ethyl-4-nitro-2-(pyridazin-3-yl)methyl-pyrazol-5-karboxamid

Směs titulních sloučenin Přípravy 35 (2,66 g, 14,5 mmol), a 95 (2,65 g, 16,1 mmol) a uhličitanu česného (13,1 g, 40,2 • · · · • ·

184

mmol) v acetonitrilu (100 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Chladná reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku, zbytek se suspenduje ve vodě a extrahuje se dichlormethanem (5x100 ml). Kombinované organické extrakty se suší (Na2SO₄) , adsorbují se na silikagel a materiál se izoluje chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu methanolu: dichlormethanu (5:95 až 10:90) za zisku 3-ethyl-4-nitro-l-(pyridazin-3-yl)methylpyrazol-5-karboxamidu (1,31 g), a titulní sloučeniny (1,81 g, 45%) ve formě světle žluté pevné substance.

δ (CDC1₃) : 1,20 (3H, t) , 3,11 (2H, q) , 5,72 (2H, s), 5,89 (1H, s), 7,29 (ltf, s), 7,55 (2H, m), 9,20 (1 H, d). LRMS : m/z 277 (M+1)⁺.

Příprava 131: 3-ethyl-4-nitro-2-[l-(pyridin-2-yl) ethyljpyrazol-5-karboxamid

Směs 2-ethylpyridinu (20,0 g, 187 mmol), N-bromsukcinimidu (38,0 g, 213 mmol), a benzoylperoxidu (1,0 g, 75% ve vodě) v 1,1,1-trichlorethanu (200 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin. Chladná směs se přefiltruje a filtrát se promyje vodou (2x100 ml), vodným roztokem thiosulfatu sodného (100 ml) a solankou (100 ml). Roztok se suší (MgSO₄) , přefiltruje se přes živočišné uhlí a potom se přidá kyselina bromovodíková (25 ml, 62%). Tento roztok se zahustí za redukovaného tlaku a azeotropuje se s toluenem za zisku 2-(lbromethyl)pyridinu, hydrochloridu ve formě tmavého oleje (66,0 g) · • · · ·

185

Směs titulní sloučeniny Přípravy 35 (8,0 g, 43,4 mmol), uhličitanu česného (35,0 g 107,4 mmol) a surového 2—(1— -bromoethyl)pyridinu, hydrochloridu (13,6 g, 52,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (80 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 20 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (150 ml) a vodu (50 ml). Vrstvy se separují a organická fáze se promyje znovu vodou (3x50 ml), solankou (50 ml), potom se suší (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě oleje se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu pentanu: ethylacetatu: methanolu (90:10:0 až 0:100:0), za zisku NI izomeru (4,3 g) a titulní sloučeniny (5,7 g, 45%).

δ (CDC1₃) : 1,14 (3H, t) , 2,01 (3H, d) , 3,00 (2H, q) , 5,66 (2H, q), 5,88 (1 H, s), 6,98 (IH, s), 7,18 (IH, d), 7,25 (IH, m), 7,68 (IH, m), 8,56 (IH, d).

LRMS : m/z 290 (M+l)⁺.

Příprava 132: 3-ethyl-2-(6-methylpyridin-2-yl)methyl-4-nitropyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 35 (4,32 g, 23,5 mmol) a 6-methyl-2-pikolylchloridu, hydrochloridu (5,0 g, 23,4 mmol) v N,N-dimethylformamidu (50 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 20 hodin. Reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi vodu (50 ml) a dichlormethan (50 ml). Vrstvy se separují a vodná fáze se extrahuje

186 dichlormethanem (3x50 ml), kombinované organické roztoky se promyjí solankou (50 ml), suší se (MgSO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, dvakrát, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens a potom za použití elučního gradientu pentanu: ethylacetatu (50:50 až 0:100) za zisku NI izomeru (1,0 g) a titulní sloučeniny (2,47 g, 36%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCI3) : 1,18 (3H, t), 2,53 (3H, s), 3,06 (2H, q), 5,42 (2H, s), 5,97 (1 H, s), 6,90 (ÍH, d),

7,12 (ÍH, d), 7,22 (ÍH, s), 7,58 (ÍH, m). LRMS : m/z 312 (M+23)⁺.

Příprava 133

2-methoxy-6-methylpyridin

% 'N'

Trimethyloxoniumtetrafluoroborat (10,0 g, 67,6 mmol) se po částech přidá do suspenze 6-methylpyridin-2-onu (7,3 g, 67 .0 mmol) dichlormethanu (100 ml), a po dokončení přidání se reakční směs mísí při teplotě okolí po dobu 24 hodin. Přidá se dichlormethan (50 ml) a vodný roztok hydroxidu sodného (50 ml, 2N) a vrstvy se separují. Vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (2x50 ml), kombinované organické roztoky se promyjí solankou (50 ml), suší se (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu pentanu: dichlormethanu (66:34 až 0:100) za zisku titulní sloučeniny (2,25 g, 27%) ve formě bezbarvého oleje.

δ (CDCls) : 2,49 (3H, s) , 3,90 (3H, s) , 6,38-6,73 (2H, m) ,

7,23-7,40 (ÍH, br d).

187

Příprava 134: 6-brommethyl-2-methoxypyridin

Směs titulní sloučeniny Přípravy 133 (2,5 g, 20,3 mmol), Nbromsukcinamidu (3,7 g, 20,8 mmol) a benzoylperoxidu (100 mg, 0,41 mmol) v 1,1,1-trichlorethanu (50 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin a dalších 16 hodin při teplotě okolí. Reakční směs se promyje vodou (2x25 ml), vodným roztokem thiosulfatu sodného (25 ml), solankou (25 ml) a suší se (MgSOG-a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se dobře protřepe s kyselinou bromovodíkovou (62%, 2,4 ml) a suspenze se zahustí za redukovaného tlaku a azeotropuje se dvakrát s toluenem, za zisku titulní sloučeniny ve formě žluté pevné substance, δ (CDCb): 3,95 (3H, s) , 4,46 (2H, s), 6,63 (1 H, d), 6,98 (1 H, d), 7,53 (1 H, m). LRMS : m/z 202/204 (M+l)⁺.

Příprava 135: 3-ethyl-2-(6-methoxypyridin-2-yl)methyl-4-nitro-pyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny 134 (5,2 g, 18,4 mmol), uhličitanu česného (6,58 g, 32,5 mmol) a a titulní sloučeniny Přípravy 35 (3,4 g, 18,4 mmol) v N,N-dimethylformamidu (30 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku, zbytek se rozdělí mezi ether (100 ml) a vodu (50 ml) a fáze se separují. Organická vrstva se promyje solankou (20 ml), suší se (MgSO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě klovatiny se trituruje s etherem, za • 9 zisku titulní sloučeniny (640 mg, 11%) ve formě bílého pevného materiálu.

188 • ·* * toto > « ♦ » · * • · ♦ · • · · · ·« ··

9 9 9 9 '· 9 9

Filtrát se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití pentanu: ethylacetatu (66:34) jako eluens, za zisku dalšího množství (280 mg, 5%) titulní sloučeniny.

δ (DMSO-de): 1,18 (3H, t) , 2,84 (2H, q) , 3,68 (3H, s) , 5,34 (2H, s), 6,73 (2H, m), 7,66 (1H, m), 8,17 (1H, s), 8,39 (1H, s). LRMS : m/z 306 (M+l)⁺.

Příprava 136: 4-amino-2-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 128 (6,17 g, 29,0 mmol) a dihydratu chloridu cínatého (32,8 g, 145 mmol) v průmyslovém methylovaném alkoholu (IMS) (100 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin. Chladná směs se zahustí za redukovaného tlaku na přibližně poloviční objem, alkalizuje se na pH 9 pomocí 2N roztoku hydroxidu sodného a extrahuje se dichlormethanem (3x300 ml). Kombinované organické extrakty se suší (MgSCH) a odpaří se za redukovaného tlaku a surový materiál se rekrystalizuje z ethylacetatu/methanolu za zisku titulní sloučeniny (4,86 g, 92%). T.t.170-174°C.

δ (DMSO-de): 0,90 (3H, t) , 1,47 (2H, m) , 2,50 (2H, t) , 3,68 (3H, s), 4,43 (2H, s), 6,92 (1H, s), 7,04 (1H, s).

Příprava 137: 4-amino-2,3-diethyl-pyrazol-5-karboxamid

189 • · · ·

Směs titulní sloučeniny Přípravy 129 (5,7 g, 26,9 mmol) a dihydratu chloridu cínatého (29,0 g, 128 mmol) v ethanolu (200 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 45 minut. Chladná reakční směs se odpaří za redukovaného tlaku a znovu se rozpustí v ethylacetatu (200 ml). Tento roztok se vnese do 10% vodného roztoku uhličitanu sodného (400 ml) a směs se důkladně mísí po dobu 1 hodiny. Vrstvy se separují a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2x100 ml) . Kombinované organické roztoky se suší (NažSCh) a zahustí se za redukovaného tlaku na objem 50 ml a vzniklé krystaly se odfiltrují a suší se, za zisku titulní sloučeniny (3,3 g, 67%).

δ (CDC1₃) : 1,19 (3H, t) , 1,40 (3H, t) , 2,59 (2H, q) , 3,94 (2H, s), 4,02 (2H, q), 5,20 (1 H, s), 6,57 (1 H, s).

LRMS : m/z 183 (M+l)⁺.

Příprava 138: 4-amino-3-ethyl-2-methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 124 (5,8 g, 29,3 mmol) a 10% palladia na uhlíku (650 mg) v ethanolu (100 ml) se hydrogenuje při 60 psi a při teplotě okolí po dobu 20 hodin. Reakční směs se filtruje přes Arbocel® a filtrační vrstva se důkladně promyje horkým ethanolem (200 ml). Kombinovaný filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny ve formě pevné substance (4,7 g, 95%). δ (CDCls) : 1,20 (3H,t), 2,59 (2H,q), 3,77 (3H,s), 3,95 (2H,s), 5,21 (lH,s), 6,54 (lH,s).

Přípravy

139 až 142 • ·

190 » · · · · · • · · · < · · • · · · • · · « · · · ·

Sloučeniny uvedené v následující tabulce obecného vzorce:

se připraví z příslušných nitropyrazolů, za použití podobného postupu, jako je postup uvedený v Přípravě 138,

Příprava.. 3	R	LRMS: m/z	’H nmr
139			δ (CDCI3) : 0.98 (3H, t), 1.93 (3H, d), 2.50 (2H, q), 3.98 (2H, s), 5.23 (1H, s), 5.50 (1H, q), 6.68 (-1H, s), 6.80 (1H, d), 7.17 (1H, m), 7.59 (1H, m), 8.54 (1H, d).
140	χ	282 (M+23)+	δ (CDCI3) : 1·04 (3H, t), 2.55 (5H, m), 4.00 (2H, s), 5.19 (1H, s), 5.30 (2H, s), 6.52 (1H, d), 6.60 (1H, s), 7.03 (1H, d), 7.48 (1H, m).
1411		298 (M+23)+	δ (CDCla) : 1.22 (3H, t), 2.57 (2H, q), 3.78 (2H, s), 3.84 (3H, s), 5.45 (2H, s), 6.68 (1H, d), 6.90 (1H, d). 7.58 (1H. m).
142	X	247 (M+1)+	δ (CDCla) : 1.05 (3H, t), 2.58 (2H, q), 4.01 (2H, s), 5.28 (1H, br s), 5.59 (2H, s), 6.60 (1H, br s), 7.11 (1H, d), 7.42 (1H, m), 9.15 (1H, d).

= přečištění chromatografií na koloně za použití ethylacetatu jako eluens

Příprava 143: 4-amino-3-ethyl-l-methyl-pyrazol-5-karboxamid

• · · · • · ·· · ·· ·· · · · · ··· · · ·«·· • · · · · ···«.',» • · · · · · ····

191 ..............

Směs titulní sloučeniny Přípravy 123 (940 mg, 4,75 mmol) a 10% palladia na uhlíku (200 mg) v ethanolu (100 ml) se hydrogenuje při 50 °C a 50 psi po dobu 18 hodin. Chladná směs se filtruje přes Arbocel® a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny ve formě (786 mg, 98%) ve formě čirého oleje.

δ (CDCls) : 1,23 (3H,t), 2,59 (2H,q), 2,82 (2H,s), 4,12 (3H,s). LRMS: m/z 169 (M+l)⁺.

Příprava 144: 3-brom-2-chlor-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin

Cl

N-methylpiperazin (7,65 ml, 69,0 mmol) se po kapkách přidá do roztoku titulní sloučeniny Přípravy 12 (10,0 g, 34,5 mmol) v ethanolu (200 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 3 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (200 ml) a vodu (100 ml) a vrstvy se separují. Organická fáze se suší (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (10,53 g, 87%) ve formě žlutého pevného materiálu.

δ (CDC1₃) : 2,28 (3H,s), 2,51 (4H,m) , 3,14 (4H,m) , 8,24 (lH,s), 8,67 (1H,S).

Příprava 145: 3-brom-2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin .

o

Br • · · ·

192

Směs titulní sloučeniny Přípravy 13 (1,11 g, 3,0 mmol) a n propylaminu (590 mg, 10,0 mmol) v toluenu (20 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 90 minut. Chladná směs se rozdělí mezi ethylacetát (50 ml) a vodu (20 ml) a vrstvy se separují. Organická fáze se promyje solankou (20 ml), suší se (Na2SO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (1,15 g, 98%) ve formě žlutého krystalického pevného materiálu.

δ (CDCla) : 1,02 (6H, m), 1,68 (2H, m), 2,41 (2H, q), 2,54 (4H, m), 3,06 (4H, m), 3,47 (2H, q), 5,57 (1H, m), 7,86 (1H, s) , 8,40 (1H, s).

LRMS : m/z 393 (M+2)⁺.

Příprava 146: 3-brom-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n— -propylaminopyridin

Br

Směs titulní sloučeniny Přípravy 13 (1,11 g, 3,0 mmol) a n propylaminu (590 mg, 10,0 mmol) v toluenu (20 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 90 minut. Chladná směs se rozdělí mezi ethylacetát (50 ml) a vodu (20 ml) a vrstvy se separují. Organická fáze se promyje solankou (20 ml), suší se (Na₂SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanuzmethanolu (100:0 až 96:4), za zisku • · · ·

193 titulní sloučeniny (1,15 g, 98%) ve formě žlutého krystalického pevného materiálu.

δ (CDC1₃) : 1,02 (6H,m) , 1,68 (2H,m) , 2,41 (2H,q), 2,54 (4H,m) , 3,06 (4H,m), 3,47 (2H,q), 5,57 (lH,m), 7,86 (lH,s), 8,40 (lH,s) .

LRMS: m/z 393 (M+2)⁺.

Příprava 147: Ethylester kyseliny 2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Titulní sloučenina se získá ve formě orenžové pevné substance (85%) z titulní sloučeniny Přípravy 145, za použití postupu podobného jako v Přípravě 21.

δ (CDCls) : 1,40 (3H, t), 1,46 (3H, t}, 2,28 (3H, s), 2,50 (4H, m), 3,09 (4H, m), 4,40 (2H, q), 4,57 (2H, q), 8,40 (1 H, s), 8,63 (1 H, s). LRMS : m/z 358 (M+l)⁺.

Příprava 148: Ethylester kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propylaminopyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny Přípravy 146 (1,10 g, 2,81 mmol), triethylaminu (5 ml), a tetrakis(trifenylfosfineIpalladia (0)

194 (250 mg, 0,216 mmol) v ethanolu (25 ml) se mísí v atmosféře oxidu uhelnatého při 100 °C a 100 psi po dobu 16 hodin. Chladný roztok se odpaří za redukovaného tlaku a zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (1,07 g, 99%) ve formě žlutého oleje, δ (CDC1₃) : 1,02 (6H, t), 1,40 (3H, t), 1,69 (2H, m), 2,40 (2H, q) , 2,55 (4H, m), 3,05 (4H, m), 3,54 (2H, q), 4,37 (2H, q) ,

8,37 (1 H, 5), 8,57 (2H, m).

LRMS : m/z 385 (M+l)⁺.

Příprava 149: Hydrochlorid kyseliny 2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-karboxylové

Roztok hydroxidu sodného (21 ml, 2M, 42,0 mmol) se přidá do roztoku titulní sloučeniny Přípravy 147 (7,57 g, 21,0 mmol) v dioxanu (150 ml) reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Směs se neutralizuje kyselinou chlorovodíkovou, dioxan se odstraní za redukovaného tlaku a zbývající vodný roztok se okyselí na pH 2 pomocí kyseliny chlorovodíkové. Roztok se odpaří za redukovaného tlaku, zbytek se resuspenduje v horkém ethanolu, přefiltruje se a filtrát se opět odpaří za zisku titulní sloučeniny (5,46 g, 71%).

δ (DMSO-de) : 1,37 (3H, t), 2,50 (4H, m), 2, 72 (3H, 5), 3,133,39 (4H, m), 4,53 (2H, q), 8,30 (ÍH, 5), 8,75 (ÍH, 5).

LRMS : m/z 330 (M+l)⁺.

195

Příprava 150: Sodná sůl kyseliny 5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-n-propylaminopyridin-3-karboxylové

Směs titulní sloučeniny Přípravy 148 (1,06 g, 2,76 mmol) \ roztoku hydroxidu sodného (1,5 ml, 2N, 3,0 mmol) a ethanolu (10 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Reakční směs se odpaří za redukovaného tlaku, pevný materiál se trituruje s etherem a suspenze se přefiltruje a suší se za zisku titulní sloučeniny (950 mg).

δ (DMSO-de): 0,87 (6h,t), 1,50 (2H,m) , 2,43 (2H,q), 2,56 (4H,m), 2,78 (4H,m), 3,34 (2H,t), 8,08 (lH,s), 8,16 (lH,s).

Příprava 151: 4-[2-ethoxy-5-(4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina Přípravy 136 (525 mg, 2,88 mmol) se přidá do směsi titulní sloučeniny Přípravy 149 (1,04 g, 3,2 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (470 mg, 3,5 mmol), 1 • · · ·

196

-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydrochloridu (670 mg, 3,5 mmol) a N-ethyldiisopropylaminu (2,4 ml, 14,0 mmol) v tetrahydrofuranu (50 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 36 hodin. Reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se suspenduje v roztoku uhličitanu sodného (20 ml) a extrahuje se dichlormethanem (3x20 ml). Kombinované organické extrakty se promyjí solankou (3x20 ml), suší se (Na2SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Surový materiál se trituruje s etherem za zisku žluté pevné substance, které se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 96:4), za zisku titulní sloučeniny (720 mg, 51%) ve formě bílé pevné substance. Vzorek (50 mg) tohoto materiálu se rekrystalizuje z ethylacetatu za zisku bezbarvých krystalů (32) titulní sloučeniny.

T.t. 242-244°C.

δ (CDC1₃) : 0,95 (3H, t), 1,59 (5H, m), 2,27 (3H, s) , 2,48 (4H, m), 2,89 (2H, t), 3,10 (4H, m), 3,86 (3H, s), 4, 79 (2H, q) , 5,27 (1 H, s), 6,63 (1 H, s), 8,65 (1 H, s), 8,84 (1 H, s),

10,53 (1 H, s) .

LRMS : m/z 494 (M+l)⁺.

Příprava 152: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-2-methylpyrazol-5-karboxamid

I H,N o

N

O

O=S=0

• · ·

197

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (65%) z titulních sloučenin Přípravy 23 a 138, postupem podle Přípravy 151.

δ (CDC1₃) : 1,02 (3H, t) , 1,21 (3H, t) , 1,58 (3H, t) , 2,39 (2H, q) , 2,54 (4H, m), 2,90 (2H, q) , 3,10 (4H, m), 3,84 (3H, s), 4,78 {2H, q), 5,30 (1 H, s), 6,63 (1 H, s), 8,64 (1 H, s) , 8,83 (1 H, s), 10,54 (1 H, s).

LRMS : m/z 494 (M+l)⁺.

Příprava 153: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-2-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (64%) z titulních sloučenin Přípravy 23 a 136, postupem podle Přípravy 151 s tou výjimkou, že jako chromatografické eluens se použije eluční gradiennt methanol: ethylacetát (7:93 až 10:90) .

δ (CDC1₃) : 0,94 (3H, t) , 1,02 (3H, t) , 1,60 (5H, m) , 2,40 (2H, q) , 2,54 (4H, m), 2,89 (2H, t), 3,10 (4H, m), 3,84 (3H, s) , 4,78 (2H, q), 5,25 (IH, s), 6,63 (IH, s), 8,65 (1 H, s) , 8,83 (1 H, s), 10,52 (1 H, s).

LRMS : m/z 508 (M+l)⁺.

Příprava 154: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-2,3-diethylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina Přípravy 137 (3,3 g, 16,8 mmol) a triethylamin (7,5 ml, 54,0 mmol) se přidají do ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 28 (6,51 g, 18,0 mmol) v dichlormethanu (100 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Směs se postupně promyje solankou (50 ml), vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x50 ml), potom se suší (Na2SO₄) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny ve formě pevného materiálu.

δ (CDC1₃) : 1,04 (3H, t) , 1,22 (3H, t), 1,50 (3H, t), 1,59 (3H, t), 2,40 (2H, q), 2,54 (4H, m), 2,91 (2H, q), 3,10 (4H, m) , 4,16 (2H, q), 4,78 (2H, q), 5,30 (1H, s), 6,68 (1 H, s), 8,65 (1 H, s), 8,84 (1 H, s), 10,55 (1 H, s).

LRMS : m/z 508 (M+l)⁺.

Přípravy 155 až 157

Sloučeniny uvedené v vzorec:

následuj ící tabulce mající obecný

199 se připraví z titulní sloučeniny Přípravy 28 a příslušných aminů, za použití postupu podobného postupu uvedenému v Přípravě 154,

Prep.	R1	Data
1551	ŮO	δ (CDCb) : 1.02 (6H, m), 1.59 (3H, t), 1.98 (3H, d), 2.40 (2H, q), 2.54 (4H, m), 2.86 (2H, q), 3.09 (4H, m), 4.79 (2H, q), 5.32 (1H, s), 5.67 (1H, q), 6.77 (1H, s), 6.94 (1H, d), 7.20 (1H, m). 7.63 (1H, m). 8.58 (1H, d), 8.65 (1H, s), 8.82 (1H, s), 10.55 (1H, s). LRMS : m/z 585 (M+1)+
1562	AT	δ (CDCb) : 1-04 (6H, m), 1.59 (3H, t), 2.40 (2H, q), 2.52 (4H, m), 2.59 (3H, s), 2.89 (2H, q), 3.09 (4H, m), 4.80 (2H, q), 5.30 (1H, s), 5.42 (2H, s), 6.62 (1H, d), 6.70 (1H, s), 7.08 (1H, d), 7.54 (1H, m), 8.64 (1H, s), 8.82 (1H, s), 10.61 (1H, s).
1572	•χτ	Ó(CDCb) : 1.04 (3H, t), 1.23 (3H, t), 1.59 (3H, t), 2.41 (2H, q), 2.54 (4H, m), 2.70 (2H, q), 3.10 (4H, m), 3.86 (3H, s), 4.78 (2H, q), 5.52 (2H, s), 5.66 (1H, s), 6.70 (1H, d), 6.93 (1H, d), 7.59 (1H, m), 8.68 (1H, s), 8.83 (1H, s), 9.02 (1H, s), 9.90(1 H, s). LRMS : m/z 601 (M+1)+

= titulní sloučenina byla izolována triturací s etherem = jako chromatografické eluens se použije ethylacetát: methanol (94:6).

• ·

200 • · · ·

Příprava 158: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)»· ·· pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-l-methylpyrazol-5-karboxamid

Titulní sloučenina se získá ve formě pevného materiálu (51%) z titulních sloučenin Přípravy 23 a 143, postupem podle Přípravy 151, δ (CDCls) 1,03 (3H, t) , 1,25 (3H, t) , 1,57 (3H, t) , 2,42 (2H, q), 2,58 (6H, m), 3,10 (4H, m), 4,06 (3H, s), 4,76 (2H, q) , 5,57 (1 H, br s), 7,55 (1 H, br s), 8,70 (1 H, s), 8,83 (1 H, s), 9,24 (1 H, s) .

LRMS : m/z 494 (M+l)⁺.

Příprava 159: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulních sloučeniny Přípravy 24 (2,0 g, hydrochloridové soli 4-amino-l-methyl-3-n5,48 mmol), • · · · » ·

I ·

201

-propylpyrazol-5-karboxamidu, EPA-0463756; (1,08 g, 4,94 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (920 mg,

6,87 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydrochloridu (1,15 g, 6,0 mmol) a N-ethyldiisopropylaminu (2,86 ml, 16,5 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs se zahustí za redukovaného tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a vodu (50 ml). Vrstvy se separují a organická fáze se suší (MgSCh) a odpaří se za redukovaného tlaku, zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (940 mg, 38%) ve formě bílé pevné substance, δ (CDCls) : 0,95 (3H, t) , 1,02 (3H, t) , 1,52 (3H, t) , 1,63 (2H, m) , 2,40 (2H, q), 2,54 (6H, m), 3,09 {4H, m), 4,05 (3H, s), 4,75 (2H, q), 5,81 (1 H, s), 7,58 (1 H, s), 8,67 (1 H, s),

8,80 (1 H, s), 9,25 (1 H, s) .

LRMS : m/z 509 (M+2)⁺.

Příprava 160: 3-ethyl-4-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl) -2-n-propylaminopyridin-3-ylkarboxamido]-2- (pyridin-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid (250 mg, 1,3 mmol) se přidá do roztoku titulních sloučenin Přípravy 40 (245 mg, 1,0 mmol) a 150 (456 mg, 1,2 mmol), Nethyldiisopropylaminu (194 mg, 1,5 mmol) a 1hydroxybenzotriazolu, hydrátu (203 mg, 1,5 mmol) v dichloromethanu (10 ml), a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 16 hodin. Reakční směs se vnese do ethylacetatu (30 ml), promyje se vodou (10 ml) a solankou (10 ml), suší se (MgSCH) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 96:4) a trituruje se s etherem za zisku titulní sloučeniny (242 mg, 41%) ve formě bílé pevné substance.

δ (CDCls) : 0,95 (3H, t) , 1,01 (6H, m) , 1,62 (2H, m) , 2,39 (2H, q) , 2,52 (4H, m), 2,86 (2H, q) , 3,09 (4H, m), 3,46 (2H, q) , 5,39 (1 H, s), 5,43 (2H, s), 6,64 (1 H, s) , 6,87 (1H, d), 7,20 (1H, m), 7,63 (1H, m), 8,17 (1H, s), 8,53 (1H, s) , 8,58 (1H, d), 8,64 (1 H, m), 9,58 (1 H, s).

LRMS : m/z 584 (M+l)⁺.

Příprava 161: 4-(2-ethoxy-5-nitropyridin-3-ylkarboxamido)-3-ethyl-2-methylpyrazol-5-karboxamid

Oxalylchlorid (2,6 ml, 30,2 mmol) se po kapkách přidá do ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 8 (1,6 g, 7,55 mmol) a N, N-dimethylformamidu (1 kapka) v dichloromethanu (40 ml) , a reakční směs se mísí při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a několikrát se azeotropuje s dichlormethanem. Tento chlorid kyseliny, který

203 je meziproduktem, se přidá do ledově chladného roztoku titulní sloučeniny Přípravy 138 (960 mg, 5,74 mmol) a triethylaminu (2,6 ml, 18,7 mmol) v dichlormethanu (40 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Směs se promyje vodou (20 ml), solankou (20 ml), suší se (Na₂SO4) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny (2,06 g, 99%).

δ (CDC1₃) : 1,24 (3H, t) , 1,61 (3H, t) , 2,92 (2H, q) , 3,88 (3H, s), 4,84 (2H, q), 5,27 (1 H, s), 6,66 (1 H, s), 9,17 (1 H, s), 9,33 (1 H, s), 10,57 (1 H, s) .

LRMS : m/z 363 (M+l)⁺.

Příprava 162: 4-(5-amino-2-ethoxypyridin-3-ylkarboxamido)-3-ethyl-2-methylpyrazol-5-karboxamid

Směs titulní sloučeniny Přípravy 161 (2,06 g, 5,7 mmol) a 10% palladia na uhlíku (200 mg) v ethanolu (70 ml) se hydrogenuje při teplotě okolí a 50 psi po dobu 6 hodin. Reakční směs se filtruje přes Arbocel®, filtrační vrstva se promyje dalším ethanolem a kombinované filtráty se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny (760 mg, 40%) ve formě pevné substance.

204 ····«« > * ·· ·· »· · * © · * « · < · ·«· · * · · · » • C · * · · · · ·« · »··« · · ···· ·· 99 ··· ·»· »· ·· δ (CDC1₃) : 1,23 (3H,t), 1,54 (3H,t), 2,87 (2H,q), 3,50 (2H,s),

3,87 (3H,s), 4,60 (2H,q), 5,24 (lH,s), 6,62 (lH,s), 7,78 (1H,S), 7,96 (lH,s), 10,54 (lH,s). LRMS: m/z 333 (M+l)⁺.

Příprava 163: 5-(5-amino-2-ethoxypyridin-3-yl)-3-ethyl-2-methylpyrazol-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

Směs titulní sloučeniny Přípravy 162 (760 mg, 2,29 mmol) a bis(trimethylsilyl)amidu draselného (685 mg, 3,43 mmol) v ethanolu (50 ml) se zahřívá při 100 °C v uzavřené zkumavce po dobu 20 hodin. Chladná směs se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: methanolu (100:0 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny (550 mg, 76%) ve formě pevného materiálu, δ (CDC1₃) : 1,41 (3H,t), 1,53 (3H,t), 3,03 (2H.q), 3,58 (2H,s), 4,09 (3H,s), 4,58 (2H,q), 4,78 (lH,s), 8,20 (1H,S), 11,17 (lH,s).

LRMS: m/z 315 (M+l)⁺.

Příprava 164: 5-(5-chlordulfonyl-2-ethoxypyridin-3-yl)-3-ethyl-2-methylpyrazol-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin7-on

O=s=o

Cl • » • · · * β tf

205

Titulní sloučenina (72%) se získá z titulní sloučeniny Přípravy 163, postupem podobným postupu popsanému v Přípravě 63, δ (CDCls) :1,42 (3H,t), 1,60 (3H,t), 3,07 (2H,q), 4,14 (3H,s), 4,82 (2H,q), 8,92 (lH,s), 9,36 (lH,s), 10,58 (lH,s).

Příprava 165: (R)-l-methoxy-2-propanol

Methoxid sodný (54 g, 1,0 mol) se po částech přidá do ledově chladného methanolu (1000 ml) a vzniklý roztok se mísí po dobu 20 minut v ledové lázni. Po kapkách se během 30 minut přidá propylenoxid (58 g, 1 mol) a po dokončení přidávání se reakční směs mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Směs se zahustí za redukovaného tlaku a okyselí se, za chlazení ledem, 1M etherickou kyselinou chlorovodíkovou a vzniklá směs se mísí po dobu 1 hodiny a přefiltruje se. Filtrát se suší (K2CO3) , přefiltruje se a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se zahřívá při 70 °C přes suchý oxid vápenatý po dobu 30 minut a potom se destiluje za atmosférického tlaku za zisku titulní sloučeniny (25,4 g, 28%) ve formě oleje.

T.t. 118 - 120 °C δ (CDCls): 1,16 (3H,d), 2,28 (lH,d), 3,20 (lH,m), 3,36 (lH,m) , 3,40 (3H,s), 3,97 (lH,m).

[a]d -20,83° (c=l,02, dichlormethan).

Příprava 166: 4-methoxy-2-butanol

OH

206 ···· · · ···· ·· · to · · · · · ® ·· · ·

Hydrid lithno-hlinitý (220 ml, 1,0 M roztok v tetrahydrofuranu, 220 mmol) se po kapkách přidá během 15 minut do ledově chladného roztoku 4-methoxybut-3-en-2-onu (20,0 g, 200 mmol) v tetrahydrofuranu (200 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 16 hodin. Roztok se znovu ochladí v ledové lázni, po kapkách se přidá voda (8 ml) a potom 15% vodný roztok hydroxidu sodného (8 ml) a po dalších 10 minutách další voda (24 ml). Směs se mísí po dobu 20 minut, přefiltruje se a filtrát se zahustí za redukovaného tlaku na objem 100 ml. Přidá se 10% palladium na uhlíku (500 mg) a směs se hydrogenuje při 60 psi po dobu 16 hodin. Reakční směs se přefiltruje přes Arbocel® a filtrát se odpaří za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití elučního gradientu dichlormethanu: etheru (99:1 až 50:50), za zisku titulní sloučeniny (4,0 g, 19%). δ (CDCls): 1,20 (3H,d), 1, 67-1,78 (2H,m) , 2,80 (lH,s), 3,38 (3H,s), 3,55-3,65 (2H,m), 4,00 (lH,m).

Příprava 167: N-methoxycyklopropylkarboxamid

O

Kyselina cyklopropankarboxylová (15,83 ml, 200 mmol) se po kapkách přidá do teplého (40 °C) roztoku thionylchloridu (16,71 ml, 213 mmol) v toluenu (80 ml) a po dokončení přidání se reakční směs mísí při 80 °C po dobu 2 hodin. Směs se ochladí v ledové lázni, přidá se roztok methylaminu v tetrahydrofuranu (300 ml, 2M, 600 mmol), směs se nechá ohřát při teplotě okolí a zahustí se při redukovaném tlaku. Zbytek se suspenduje v dichlormethanu (200 ml), promyje se nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (200 ml), solankou (200 • · · ·

207 ml), suší se (MgSCL) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek ve formě bílého pevného materiálu se rekrystalizuje z hexanu/etheru, za zisku titulní sloučeniny (11,3 g, 57%) ve formě bílého krystalického pevného materiálu.

Zjištěno: C, 58,73; H, 9,30; N, 13,70, C5H9NO; 0,2 H₂O vyžaduje: C, 58,46; H, 9,22; N, 13,63%.

δ (CDC1₃) : 0,70 (2H,m) , 0,95 (2H,m) , 1,32 (lH,m) , 2,81 (3H,d), 5,73 (lH,s). LRMS: m/z 199 (M+l)⁺.

Příprava 168: N-cyklopropylmethyl-N-methylamin, hydrochlorid

Roztok· titulní sloučeniny Přípravy 167 (7,90 g, 79,7 mmol) v etheru (75 ml) se po kapkách přidá během 5 minut do suspenze hydridu lithno-hlinitého (3,03 g, 96,0 mmol) v etheru (100 ml) a reakční směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Chladná směs se utlumí postupným přidáním vody (3 ml), 10% vodného roztoku hydroxidu sodného (9 ml) a vody (3 ml). Vzniklá suspenze se mísí po dobu 5 minut, přefiltruje se a pevný materiál se důkladně promyje etherem (100 ml) .

Kombinované filtráty se suší (MgSCU) , ochladí se v ledové lázni a nasytí se kyselinou chlorovodíkovou. Tento roztok se odpaří za redukovaného tlaku za zisku titulní sloučeniny (8,7 g, 90%) ve formě klovatiny.

δ (CDCla) : 0,45 (2H,m), 0,72 (2H,m), 1,24 (lH,m), 2,70 (3H,t),

2,88 (3H,t), 2,88 (2H,m), 9,48 (2H,brs).

Příprava 169: 4-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-3-ethyl-2- (l-methylimidazol-2-yl)methylpyrazol-5-karboxamid

• · · ·

208 ·* ··

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid (1,2 g, 6,25 mmol) se přidá do roztoku titulních sloučenin Přípravy 23 (1,6 g, 4,66 mmol) a 89 (1,2 g, 4,84 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu, hydrátu (960 mg, 6,2 mmol) a N-ethyldiisopropylaminu (2,5 ml, 14,5 mmol) v tetrahydrofuranu (15 ml) a N,N-dimethylformamidu (3 ml) a reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs se ředí vodou (100 ml) a extrahuje se dichlormethanem (3x150 ml).

Kombinované organické extrakty se suší (NažSCL) a odpaří se za redukovaného tlaku. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelové koloně, za použití dichlormethanu: methanolu (95:5) jako eluens, za zisku titulní sloučeniny (1,42 g, 2,55 mmol).

δ (CDC1₃) : 0,98-1,16 (6H,m), 1,52-1,70 (6H,m), 2,40 (2H,q),

2,55 (4H,m), 2,99-3,16 (6H,m), 3,72 (3H,s), 4,78 (2H,q), 5,30 (lH,br s), 5,44 (2H,s), 6,60 (lH,br s), 6,86 (lH,s), 7,00 (lH,s), 8,65 (lH,s), 8,82 (lH,s), 10,48 (lH,s).

LRMS : m/z 574 (M+18)⁺.

Příprava 170: 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(l-methylimidazol-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on

• · « ·

209

Titulní sloučenina se získá ve formě krémové pěny (62%) z titulní sloučeniny Přípravy 169, za použití postupu podobného postupu popsanému v příkladu 78.

δ (CDCls): 1,00 (3h,t), 1,30 (3H,t), 2,40 (2H,q), 2,54 (4H,m) , 3,06-3,20 (6H,m), 3,78 (3H,s), 4,75 (2H,q), 5,64 (2H,,s), 6,84 (lH,s), 6,99 (lH,s), 8,61 (lH,s), 8,99 (lH,s), 10,66 (lH,s). LRMS: m/z 556 (M+l)⁺.

Biologická aktivita

Následující tabulka ilustruje in vitro aktivity různých sloučenin pódle předkládaného vynálezu jako inhibitorů cGMP PDE5,

Tabulka

Příklad	IC50 (nm)
10	10,1
11	10,0
18	8,9
43b	3,6
46	8,1
48	6,9
98	7,0
99	5,7
127	7,3
153	7,2

Bezpečnost

Několik sloučenin podle předkládaného vynálezu bylo testováno na myších v dávkách až 3 mg/kg i.v. a na psech v dávkách až 0,5 mg/kg p.o., a nebyly pozorovány žádné nežádoucí účinky.

Claims (19)

1. Sloučenina vzorce (IA) nebo (IB):

(IA) (IB) nebo jejich farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné solváty každé skupiny, kde

R¹ je C1-C3 alkyl volitelně substituovaný fenylem, Het nebo N-vázanou heterocyklickou skupinou vybranou z piperidinylu a morfolinylu; kde uvedená fenylová skupina je volitelně substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny skládající se z následujících skupin: Ci-C4alkoxy; halogen; CH; CF3; OCF3; a Ci-C4alkyl, kde uvedená Ci-C4alkylová skupina je volitelně substituovaná Ci-C4halogenalkylovou nebo Ci-C4halogenalkoxylovou skupinou, které mohou být obě substituované jedním nebo více atomy halogenu;

R² je Ci-C6alkyl;

R¹³ je OR³ nebo NR⁵R⁶;

R³ je Ci-C6alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybraný ze skupiny zahrnující následující skupiny: C3-Cscykloalkyl; OH; Ci-C4alkoxy; benzyloxy; NR⁵R⁶; fenyl; furanyl; a pyridinyl; C3-C6cykloalkyl; 1-(CiC4alkyl)piperidinyl; tetrahydrofuranyl nebo tetrahydropyranyl; a kde Ci-C6alkylová a Ci-C4alkoxylová skupina mohou být volitelně zakončeny halogenalkylovou skupinou;

R⁴ je SO₂NR⁷R⁸;

• ·

211 .......... ·· *

R⁵ a R⁶ jsou každý nezávisle vybrány z H a Ci-Cíalkylu volitelně substituovaného Cs-Cscykloalkylovou nebo Ci~ C4alkoxylovou skupinou; nebo tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, azetidinylovou, pyrrolidinylovou, piperidinylovou nebo morfolinylovou skupinu;

R a R tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, 4-R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více Ci-C4alkylovými skupinami a volitelně ve formě 4-N-oxidu;

R¹⁰ je H; Ci-C4alkyl volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými z následujících skupin: OH; NR⁵R⁶; CONR⁵R⁶; fenyl volitelně substituovaný Ci-C4alkoxy skupinou; benzodioxolyl; a benzodioxanyl; C3-C6alkenyl; pyridinyl nebo pyrimidinyl; a

Het je C-vázaná 6-členná heterocyklické skupina obsahující jeden nebo dva atomy dusíku, volitelně ve formě svého mono-Noxidu, nebo C-vázaná 5-členná heterocyklická skupina obsahující dva nebo tři atomy dusíku, kde každá z uvedených heterocyklických skupin je volitelně substituovaná CiC4alkylem; Ci-C4alkoxy- skupinou nebo NHR , kde R je H, CiC4alkyl nebo Ci~C4alkanoyl a halogen je Br, Vel, F nebo I.

2. Sloučenina podle nároku 1, kde kde R¹ je Ci-C2alkyl volitelně substituovaný Het; 2-(morfolin-4-yl)ethyl nebo benzyl; R² je C2-C4alkyl; R¹³ je OR³ nebo NR⁵R⁶; R³ je Ci-C4alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými z následujících skupin: cyklopropyl, cyklobutyl, OH, methoxy, ethoxy, benzyloxy, NR⁵R⁶; fenyl; furan-3-yl; pyridin2-yl a pyridin-3-yl; cyklobutyl; l-methylpiperidin-4-yl; tetrahydrofuran-3-yl nebo tetrahydropyran-4-yl; R⁵ a R⁶ jsou každý nezávisle vybrány ze skupiny skládající se z H a CiC4alkylu volitelně substituovaného cyklopropylovou nebo methoxy skupinou, nebo tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou

212 navázány, azetidinylovou, pyrrolidinylovou nebo morfolinylovou skupinu; R a R tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, 4-R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více methylovými skupinami a volitelně ve formě 4-N-oxidu; R¹⁰ je H, Ci-C3alkyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty vybranými z následujících skupin: OH, NR⁵R⁶; CONR⁵R⁶; fenyl volitelně substituovaný methoxy skupinou, benzodioxol-5-ylem a benzodioxan-2-ylem; allyl; pyridin-2-yl; pyridin-4-yl nebo pyrimidin-2-yl; a Het je vybrán z následujících skupin: pyridin-2-yl; l-oxidopyridin-2-yl; 2-methylpyridin-2-yl; 6-methoxypyridin-2-yl; pyridazin-3-yl; pyrimidin-2-yl a 1-methylimidazol-2-yl.

3. Sloučenina podle nároku 2, kde R¹ je Ci-C2alkyl volitelně substituovaný Het; 2-(morfolin-4-yl)ethyl nebo benzyl; R² je C2~C4alkyl; R¹³ je OR³; R³ je Ci-C4alkyl volitelně monosubstituovaný skupinou vybranou z následujících skupin: cyklopropyl, cyklobutyl, OH, methoxy, ethoxy, fenyl; furan-3yl nebo pyridin-2-yl; cyklobutyl; tetrahydrofuran-3-yl nebo tetrahydropyran-4-yl; R⁷ a R⁸ tvoří, společně s atomem dusíku, na který jsou navázány, 4-R¹⁰-piperazinylovou skupinu volitelně substituovanou jednou nebo více methylovými skupinami a volitelně ve formě 4-N-oxidu; R¹⁰ je Ci-C₃alkyl volitelně monosubstituovaný OH; a Het je vybrán z následujících skupin: pyridin-2-yl; l-oxidopyridin-2-yl; 6-methylpyridin-2-yl; 6— -methoxypyridin-2-yl; pyridazin-3-yl; pyrimidin-2-yl a 1-methylimidazol-2-yl.

4, Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 3 vybraná ze skupiny zahrnující:

213 • »

3-ethyl-5- [2- (2-methoxy) -5- (4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

3-ethyl-5-[5-(4-ethyl-4-oxidopiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy)pyridin-3-yl]-2-(pyridin-2-yl)methyl-2, 6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5- [2- (2-methoxyethoxy) -5- (4-methylpiperazin-l-ylsulfonyl) pyridin-3-yl] -3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl] -3-n-propyl-2- (pyridin-2-yl)methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

(+)-3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy -1(R)-methylethoxy)pyridin-3-yl]-2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

3-ethyl-5-[5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-2-(2-methoxy-1(R) -methylethoxy)pyridin-3-yl]-2- ( 6-methylpyridin-2-yl)methyl-2, 6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-(6-methoxypyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on;

5-[2-i-butoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl] -2,3-diethyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on; a 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-yl]-3-ethyl-2-[1-(pyridin-2-yl)ethyl]-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on.

5. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím že obsahuje sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo její

214 farmaceuticky přijatelný solvát, společně s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

6. Veterinární prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její veterinárně přijatelnou sůl nebo její veterinárně přijatelný solvát, společně s veterinárně přijatelným ředidlem nebo nosičem.

7. Sloučenina vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo její farmaceuticky přijatelný solvát, nebo farmaceutický prostředek obsahující jakoukoliv z výše uvedených sloučenin, pro použití jako léčivo u člověka.

8. Sloučenina vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její veterinárně přijatelná sůl nebo její veterinárně přijatelný solvát, nebo veterinární prostředek obsahující jakoukoliv z výše uvedených sloučenin, pro použití jako léčivo u zvířete.

9. Použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvatu pro výrobu lidského léku pro kurativní nebo profylaktickou léčbu stavů, při kterých je indikováno podání inhibitoru cGMP PDE5.

10. Použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její veterinárně přijatelné soli nebo jejího veterinárně přijatelného solvatu pro výrobu veterinárního léku pro kurativní nebo profylaktickou léčbu stavů, při kterých je indikováno podání inhibitoru cGMP PDE5.

• · · ·

11. Použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky přijatelného solvatu pro výrobu lidského léku pro kurativní nebo profylaktickou léčbu erektilní dysfunkce u mužů (MED), sexuální dysfunkce u žen (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty (BPH), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalovy) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, stavů souvisejících se sníženou průchodností cév, bronchitidy, alergického, asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility.

12. Použití sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 1, nebo její veterinárně přijatelné soli nebo jejího veterinárně přijatelného solvatu pro výrobu veterinárního léku pro kurativní nebo profylaktickou léčbu erektilní dysfunkce u samců (MED), sexuální dysfunkce u samic (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty (BPH) , obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalovy) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, stavů souvisejících se sníženou průchodností cév, bronchitidy, alergického asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility.

13. Způsob pro léčbu nebo prevenci onemocnění, při kterých je indikováno podání inhibitoru cGMP PDE5, u savců (včetně lidí) vyznačující se tím, že uvedenému savci je

216 podáno terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB), nebo její farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu, nebo farmaceutického prostředku nebo veterinárního prostředku obsahujícího jakoukoliv z uvedených sloučenin.

14. Způsob pro léčbu erektilní dysfunkce u mužů (MED), sexuální dysfunkce u žen (FSD), předčasného porodu, dysmenorhey, benigní hyperplasie prostaty (BPH), obstrukce ústí močového měchýře, inkontinence, stabilní, nestabilní a variabilní (Prinzmetalovy) angíny pectoris, hypertense, plicní hypertense, městnavého srdečního selhání, atherosklerosy, mrtvice, onemocnění periferních cév, stavů souvisejících se sníženou průchodností cév, bronchitidy, alergického asthmatu, chronického asthmatu, alergické rhinitis, glaukomu nebo onemocnění charakterizovaných poruchou střevní motility u savců (včetně lidí) vyznačující se tím, že uvedenému savci je podáno terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB), nebo její farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli nebo jejího farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu, nebo farmaceutického prostředku nebo veterinárního prostředku obsahujícího jakoukoliv z uvedených sloučenin.

(IIA) (ΠΒ) • ·

217 kde Y je halogen a R¹, R² a R¹³ jsou stejné, v nároku 1, jak byly definovány

16.

17 .

Sloučenina

Sloučenina podle nároku 15, kde Y je chlor.

vzorce (IVA) nebo (IVB):

O R¹

NH₂ (IVA) (IVB) nh₂ kde R

R² a

R jsou stejne, jak byly definovány v nároku 1

18. Sloučenina vzorce (VA) nebo (VB):

1 2 13 kde R , R a R jsou stejné, jak byly definovány v nároku 1.

19. Sloučenina vzorce (IXA) nebo (IXB):

(IXA) (IXB) • · · · kde R¹, R², R⁴ a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány v nároku

1.

20.

218

Způsob přípravy sloučenin vzorce (IA) nebo (IB):

kde R¹, R², R⁴ a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány v nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje reakci sloučeniny vzorce (IIA) nebo (IIB) , v příslušném pořadí:

(IIA)

O

SO₂Y (ΠΒ) kde Y je halogen a R¹, R² a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány výše v tomto nároku, se sloučeninou vzorce (III):

R⁷R⁸NH (III)

7 8 kde R a R jsou stejné, jak byly definovány výše v tomto nároku, po které případně následuje příprava farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli uvedené sloučeniny nebo

219 farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu každé sloučeniny.

21. Způsob přípravy sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 20, nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli uvedené sloučeniny nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu každé sloučeniny vyznačuj ící se t i m, že obsahuje cyklizaci sloučeniny vzorce (VA) nebo (VB), v příslušném pořadí:

kde R¹, R² a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány výše pro vzorce (IA) a (IB) v nároku 20, za zisku sloučenin vzorce (IVA) nebo (IVB):

(IVA)

O (IVB) nh₂ které mohou být přeměněny na sloučeniny vzorce (IIA) nebo (IIB) reakcí se sloučeninou vzorce (III R⁷R⁸NH, kde R⁷ a R⁸ jsou stejné, jak byly definovány v nároku 20, kde uvedené sloučeniny vzorce (IIA) nebo (IIB) mohou být nakonec přeměněny způsobem podle nároku 20 za zisku sloučenin vzorce (IA) nebo • ·· ·

220 • · · » ··*· • · · · · *«···· ··· · · ···· • · ··· · · · · · · · (IB) , a potom případně následuje příprava farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli uvedené sloučeniny nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu každé sloučeniny.

22. Způsob přípravy sloučeniny vzorce (IA) nebo (IB) podle nároku 20, nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelné soli uvedené sloučeniny nebo farmaceuticky nebo veterinárně přijatelného solvatu každé sloučeniny vyznačuj ící se t i m, že obsahuje cyklizací sloučeniny vzorce (IXA) nebo (IXB), v příslušném pořadí:

kde R¹, R², R⁴ a R¹³ jsou stejné, jak byly definovány v nároku