CZ20003872A3

CZ20003872A3 - Pyrrolidiny jako inhibitory neuraminidas

Info

Publication number: CZ20003872A3
Application number: CZ20003872A
Authority: CZ
Inventors: Clarence J. Maring; Yu-Gui Gu; Hui-Yu Chen; Yuanwei Chen; David A. Degoey; William J. Flosi; Vincent L. Giranda; David J. Grampovnik; Warren M. Kati; Dale J. Kempf; Larry L. Klein; Allan C. Krueger; Zhen Lin; Darold L. Madigan; Keith F. Mcdaniel; Steven W. Muchmore; Hing L. Sham; Kent D. Stewart; Vincent S. Stoll; Minghua Sun
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1999-04-12
Filing date: 1999-04-12
Publication date: 2001-03-14

Abstract

Jsou publikovány sloučeniny vzorce I, které jsou účinné při inhibování neuraminidas mikroorganismů způsobujících onemocnění, zejména chřipkové neuraminidasy. Také jsou publikovány přípravky a způsoby pro ošetřeni a prevenci proti onemocněním způsobeným mikroorganismy, které mají neuraminidasu, způsoby přípravy sloučenin a syntetické meziprodukty používané při těchto způsobech.

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká nových sloučenin, přípravků a způsobů inhibice neuraminidasy, zejména chřipkové neuraminidasy. Vynález také uvádí přípravek a způsoby ošetření a prevence proti chřipkové infekci a postup pro přípravu sloučenin a syntetických meziproduktů použitých v těchto postupech.

Dosavadní stav techniky

Mnoho mikroorganismů způsobujících onemocnění má neuraminidasu (také známá jako sialidasa), která se podílí na procesu replikace mikroorganizmu. Především viry skupin orthomyxovirus a paramyxovirus mají neuraminidasu. Onemocnění spojená s paramyxoviry zahrnují RSV (s viry spojené syncytiální choroby cest dýchacích), pneumonii a bronchiolitidu (spojená s paramyxovirem typ 3) a laryngotracheobronchitidu. (spojená s paramyxovirem typ 1). Některé mikroorganismy způsobující závažnější onemocnění u lidí a/nebo zvířat, která mají neuraminidasu, zahrnují Vibrio choler ae, Clostridium perfringens, Streptococcus pneumoniae, Arthrobacter sialophilus, vir chřipky, vir parainfluenzy, virus příušnic, vir newcastlovského onemocnění, vir ptačího moru, vir koňské chřipky a vir Sendai.

Mortalita způsobená chřipkou je závážný problém na celém světě. Choroba je zákeřná vůči lidem, nižším savcům a některým ptákům. Ačkoliv vakcíny obsahující zeslabený vir chřipky jsou dostupné, poskytují pouze imunologickou ochranu vůči několika kmenům a jsou méně účinné při jinak imunologicky oslabených populacích, např. stárnoucí, mladé děti, a u těch, kteří trpí chronickým onemocněním dýchacích cest. Pokles produktivity z důvodu absence způsobené onemocněním infekcí chřipkovým virem je odhadován na 1 bilion dolarů ročně.

Jsou dva hlavní kmeny viru chřipky (označené A a B). V současné době je pouze několik osvědčených farmaceutických produktů pro ošetření chřipky. Patří sem amantadin a rimantadin, které jsou aktivní pouze proti kmenu A chřipkového viru a ribavirin, u · · » · · · · ί» · i · · < » kterého je toxicita limitujícím faktorem dávky. Mutantní vir, který je rezistantní vůči amantadinu a rimantadinu, vzniká při ošetření těmito agens velmi rychle.

Neuraminidasa je jeden ze dvou hlavních proteinů viru, které vyčnívají z obalu chřipkového viru. Během uvolňování zárodků viru z infikovaných buněk, odštěpuje neuraminidasa terminální zbytek kyseliny sialové z glykoproteinů, glykolipidů a oligosacharidů na buněčném povrchu. Inhibice enzymatické aktivity neuraminidasy vede ke shlukování zárodků viru na povrchu. Takový vir je pak neschopný infikovat nové buňky a replikace viru je proto bržděna nebo zablokována. Studie rentgenostruktumí analýzy krystalických látek a sekvence připojení ukázaly, že zbytky, které přímo kontaktují část kyseliny sialové substrátu, jsou nekompromisně chráněny v neuraminidase od všech kmenů A a B chřipky. Tím sloučenina, která se váže na vazebnou oblast sialové kyseliny aktivního centra neuraminidasy, bude bránit replikaci obou kmenů A i B chřipkového viru. Sloučeniny, které inhibují chřipkovou neuraminidasu, budou účinné pro ošetření a prevenci proti chřipkové infekci.

Následující odkazy uvádějí deriváty, kyseliny neuraminové a jejich použitelnost, která j e uvedena po j ednotlivých odkazech.

L. Von Itzstein, et al., evropský patent číslo EP539204, vydaný 28.dubna 1993 (antivirotikum);

T. Honda, et al., evropský patent číslo EP823428, vydaný 11.února 1998 (inhibitor sialidasy; ošetření chřipký);

T. Honda, et al., mezinárodní patent číslo W098/06712, vydaný 19.února 1998 (inhibitor sialidasy; lék na chřipku);

L. Von Itzstein, et al., mezinárodní patent číslo W095/20583, vydaný 3.srpna 1995 (inhibitor virové neuraminidasy; ošetření chřipky);

P. Smith, mezinárodní patent číslo W095/18800, vydaný 13.července 1995 (inhibitor virové neuraminidasy);

P. Kolman, et al., mezinárodní patent číslo W092/06691, vydaný 3O.dubna 1992 (inhibitor virové neuraminidasy);

L. Von Itzstein, et al., patent U.S. číslo 5,648,379, vydaný 15.července 1997 (ošetření chřipky);

i,

J iřΆ··

P. Reece, et al., mezinárodní patent číslo W097/32214, vydaný 4.září 1997 (váže se na aktivní centrum neuraminidasy chřipkového viru); a

P. Reece, et al., mezinárodní patent číslo W098/21243, vydaný 23.května 1998 (protichřipkové agens).

Následující odkazy, ve kterých je použitelnost uvedena po jednotlivém odkazu, uvádějí deriváty sialové kyseliny:

Y. Ohira, et al., mezinárodní patent číslo W098/11083, vydaný 19.března 1998 (protívirový agens);

Y. Ohira, evropský patent číslo EP882721, vydaný 9.prosince 1998 (protívirový agens); a

B. Glanzer, et al., Helvetica Chimica Acta' 74 343-369 (1991) (inhibitor neuraminidasy Vibrio cholerae).

Následující odkazy, ve kterých je použitelnost uvedena po jednotlivém odkazu, uvádějí deriváty benzenu, cyklohexanu nebo cyklohexenu:

Y. Babu, et al., patent U.S. číslo 5,602,277, vydaný ll.února 1997 (inhibitory neuraminidasy);

M, Luo, et al., patent U.S. číslo 5,453,533, vydaný 26.září 1995 (inhibitor chřipkové neuraminidasy; ošetření chřipky);

Y. Babu, et al., mezinárodní patent číslo W096/30329, vydaný 3.října 1996 (inhibitor neuraminidasy ; ošetření virové infekce);

N. Bischofberger, et al., patent U.S. číslo 5,763,483, vydaný 9.cervna 1998 (inhibitor neuraminidasy); a

K. Kent, et al., mezinárodní patent číslo 98/07685, vydaný 26.února 1998 (meziprodukty pro přípravu inhibitorů neuraminidasy),

C. Kim, et al., mezinárodní patent číslo WÓ98/17647, vydaný 30.dubna 1998 uvádí deriváty piperidinu, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy

N. Bischofberger, et al., mezinárodní patent číslo W096/26933, vydaný 6.září,1996 uvádí různé sloučeniny se substituovaným 6-ti členným kruhem, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy.

i

Následující odkazy, ve kterých je použitelnost uvedena po jednotlivém odkazu, uvádějí deriváty dihydropyranu, které jsou účinné jako inhibitory virové neuraminidasy:

D. Andrews, et al., mezinárodní patent číslo W097/06157, vydaný 20.února 1997; a P. Cherry, et al., mezinárodní patent číslo W096/36628, vydaný 21.listopadu 1996.

C. Kim, et al., patent U.S. číslo 5,512,596, vydaný 3O.dubna 1996 uvádí deriváty 6-ti členného aromatického kruhu, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy .

G. Diana, et al., mezinárodní patent číslo W098/03487, vydaný 29.1edna 1998 uvádí substituované pyridaziny, které jsou účinné pro ošetření chřipky.

B. Horenstein, et al., mezinárodní patent číslo W099/06369, vydaný 11.února 1999 uvádí deriváty piperazinu, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy.

Y. Babu, et al., mezinárodní patent číslo W097/47194, vydaný 18.prosince 1997 uvádí substituované cyklopentany, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy a jsou účinné pro ošetření chřipky.

L. Czollner, et al., Helvetica Chimica Acta 73 1338-1358 (1990) uvádí pyrrolidinová analoga kyseliny neuraminové, které jsou účinné jako inhibitory sialidasy Vibria cholerae.

Následující odkazy uvádí analoga siastatinu B, které jsou účinné jako inhibitory neuraminidasy:

Y. Nishimura, et al., Natural Product Letters 1 39-44 (1992); a

Y. Nishimura, et al., Natural Product Letters 1 33-38 (1992),

C. Penn, patent UK číslo GB2292081, vydaný 14.února 1996 uvádí použití inhibitorů neuraminidasy v kombinaci s vakcínou proti chřipce.

Záměrem vynálezu je poskytnout sloučeniny, které inhibují neuraminidasu mikroorganismů způsobujících onemocnění; zejména pak virovou neuraminidasu; a hlavně chřipkovou neuraminidasu.

Záměrem vynálezu je také poskytnout sloučeniny, které inhibují neuraminidasu u obou kmenů A a B chřipky.

Dalším záměrem vynálezu je poskytnout prevenci proti infekci chřipky u lidí a jiných zvířat.

Dalším záměrem vynálezu je poskytnout ošetření infekce chřipky u lidí a jiných zvířat.

Dalším záměrem vynálezu je poskytnout sloučeniny, které vykazují aktivitu proti chřipkovému viru kmene A a B pomocí účinného inhibování chřipkové neuraminidasy, při perorální aplikaci těchto sloučenin.

Dalším záměrem vynálezu je poskytnout sloučeniny, které mohou být účinně přeneseny z plazmy do plicní bronchoaveolámí tekutiny lidí a jiných zvířat, aby se zastavila replikace viru chřipky v této tkáni.

Podrobný popis vynálezu

Předložený vynález uvádí sloučeniny mající vzorec I:

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) -CO₂H, (b) -CH2CO2H, (c) -SO3H, (d) -CH2SO3H, (e) -SO₂H, (f) -CH₂SO₂H, (g) -PO₃H₂, (h) -CH₂PO₃H₂, (í)-PO₂H, (j) -CH₂PO₂H, (k) tetrazolylu, (1) -CH₂-tetrazolylu, (m) -C(=O)-NH-S(O)₂-Rⁿ, (n) -CH2C(=O)-NH-S(O)2Rⁿ, (o) -SO2N(T-R¹¹)R¹², a (p)-CH₂SO₂N(T-R^ll)R¹² kde T je vybráno ze skupiny sestávající se z (i) vazby, (ii) -C(=O)-, (iii) -C(=O)O-, (iv) -C(=O)S-, (v) -C(=O)NR³⁶-, (vi) -C(=S)O-, (vii) -C(=S)S- a (viii) -C(=S)NR³⁶-, substituent R¹¹ je vybrán ze skupiny sestávající se z

(i) Cj-Cnalkylu, (ii) C2-Ci2alkenylu, (iii) cykloalkylu, (iv) (cykloalkyl)alkylu, (v) (cykloalkyl)alkenylu, (vi) cykloalkenylu, (vii) (cykloalkenyl)alkylu, (viii) (cykloalkenyl)alkenylu, (ix) arylu, (x) (aryl) alkylu, (xi) (aryl)alkenylu, (xii) heterocyklu, (xiii) (heterocykl)alkylu a (xiii) (xiv) (heterocykl)alkenylu; a substituenty R¹² a R³⁶ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atom vodíku, (ii) Ci-Cnalkylu, (iii) C2-Ci2alkenylu, (iv) cykloalkylu, (v) (cykloalkyl)alkylu, (vi) (cykloalkyl)alkenylu, (vii)cykloalkenylu, (viii) (cykloalkenyl)alkylu, (ix) (cykloalkenyl)alkenylu, (x) arylu, (xi) (aryl)alkylu, (xii) (aryl)alkenylu, (xiii) heterocyklu, (xiv) (heterocykl)alkylu a (xv) (heterocykl)alkenylu;

X je vybráno ze skupiny sestávající se z (a) -C(=O)-N(R*)-, (b) -N (R*)-C(=O)-, (c) -C(=S)-N(R*)-, (d) -N(R*)-C(=S)-, (e) -N(R*)-SO2- a (f) -SO2-N (R*)-, kde substituent R* je atom vodíku, Ci-C3nižšíalkyl nebo cyklopropyl;

substituent R je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) Ci-Cgalkylu, (c) C2-C6alkenylu, (d) C3-C6cykloalkylu, (e) C5Cécykloalkenylu, (f) halogenCi-Cóalkylu a (g) halogenC2-Cf,alkenylu; nebo R2-X-je

kde Y¹ -CH₂-, -0-, -S- nebo -NH- a Y² je -C(=0)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R³³ a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu, 2-hydroxyethylu, aminomethylu, 1-aminoethylu, 2-aminoethylu, thiolmethylu, 1-thiolethylu,

2-thiolethylu, methoxymethylu, N-methylaminomethylu a methylthiomethylu;

substituent R³ a R,⁴ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) cykloalkylu, (c) cykloalkenylu, (d) heterocyklu, (e) arylu a (f)-Z-R¹⁴, kde Z je (i) -C(R^37a)(R^37b)-, (ii) -C(R⁴⁷)=C(R⁴⁸)-, (iii) -OC-, (iv) -C(=0)-, (v) -C(=S)-, (vi) -C(=NR¹⁵)-, (vii) -C(R^37a)(OR^37c)-, (viii) -C(R^37a)(SR^37c)-, (ix) -C(R^37a)(N(R^37b)(R^37c))-, (x) -C(R^37a)(R^37b)-O-, (xi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37c)-,

(xii) -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)-, (xiii) -C(R^37a)(R^37b)-N(OH)-, (xiv) -C(R^37a)(R^37b)-S-, (xv) -C(R^37a)(R^37b)-S(O)-, (xvi) -C(R^37a)(R^37b)-S(O)₂-, (xvii) -C(R^37a)(R^37b)-C(=O)-, (xviii)-C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-, (xix) -C(R^37a)(R^37b)-C(=NR¹⁵)-, (xx) -C(R^37a)(OR^37c)-C(=O)-, (xxi) -C(R^37a)(SR^37c)-C(=O)-, (xxii) -C(R^37a)(OR^37c)-C(=S)-, (xxiii) -C(R^37a)(SR^37c)-C(=S)-, (xxiv) -C(=O)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxv) -C(=O)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxvi) -C(=S)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxvii) -C(=S)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxviii) -C(R^37a)(OR^37c)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxix) -C(R^37a)(SR^37c)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxx) -C(R^37a)(OR^37c)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxxi) -C(R^37a)(SR^37c)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxxii) -C(=O)-C(=O)-, (xxxiii) -C(=S)-C(=S)-, (xxxiv) -C(=0)-0-, (xxxv)-C(=O)-S-, (xxxvi)-C(=S)-O-,.(xxxvii)-C(=S)-S-, (xxxviii) -C(=O)-N(R^37a)-, (xxxix) -C(=S)-N(R^37a)-, (xl) -C(R^37a)(R^37b)-C(=O)-N(R^37a)-, (xli) -C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-N(R^37a)-, ¹ (xlii) -C(R^37a)(R^37b) -0(=0)-0-, (xliii) -C(R^37a)(R^37b)-C(=O)-S-, (xliv)-C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-O-, (xlv)-C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-S-, (xlvi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-, (xlvii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-, (xlviii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-, (xlix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-, (1) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-, (li) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-, (Iii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-N(R^37a)-, (liii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-N(R^37a)-, (lív) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-O-, (lv) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-S-, (lvi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-O-, (lvii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-S-, (lviii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-N(R^37a)-, (lix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-N(R^37a)-, (lx) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-N(R^37a)-, (lxi) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-N(R^37a)-, (Jxii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-O-, (lxiii) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-O-, (lxiv) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-S-, (lxv) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-S-, (lxvi)-C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-O-, (lxvii)-C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-O-, (lxviii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-S-, (lxix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-S- nebo (lxx) -C(R^37a)(R^37b)-C(R^37a)(OR^37c)-;

substituent R¹⁴ je (i) atom vodíku, (ii) Ci-Ci2alkyl, (iii) halogenalkyl, (iv) hydroxyalkyl, (v) alkyl substituovaný thiolem, (vi) alkyl substituovaný R^37cO , (vii) alkyl substituovaný R^37cS, (viii) aminoalkyl, (ix) alkyl substituovaný (R^37c)NH, (x) alkyl substituovaný (R^37a)(R^37c)N, (xi) alkyl substituovaný R³⁷O-(O=)C-, (xii) alkyl substituovaný R^37aS8

(0=)C, (xiii) alkyl substituovaný R^37aO-(S=)C, (xiv) alkyl substituovaný R^37aS-(S=)C, (xv) alkyl substituovaný (R^37aO)2-P(=O), (xvi) kyanoalkyl, (xvii) C2-Ci2alkenyl, (xviii) halogenalkenyl, (xix) C2-Ci2alkynyl, (xx) cykloalkyl, (xxi) (cykloalkyl)alkyl, (xxii) (cykloalkyl)alkenyl, (xxiii) (cykloalkyl)alkynyl, (xxiv) cykloalkenyl, (xxv) (cykloalkenyl)alkyl, (xxvi) (cykloalkenyl)alkenyl, (xxvii) (cykloalkenyl)alkynyl, (xxviii) aryl, (xxix) (aryl)alkyl, (xxx) (aryl)alkenyl, (xxxi) (aryl)alkynyl, (xxxii) heterocykl, (xxxiii) (heterocykl)alkyl, (xxxiv) (heterocykl)alkenyl nebo (xxxv) (heterocykl)alkynyl, s výhradou spočívající v tom, že substituent R¹⁴ je jiný než atom vodíku, pak Z je -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-(=O)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-O-,

-C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-O-,

-C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-S-,

-C(R^37a)(R^37b)-S~C(=O)-S- nebo -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-S-;

substituenty R^37a, R^37b, R⁴⁷ a R⁴⁸ ,v každém případě, jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-C ^alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) hydroxyalkylu, (v) alkoxyalkylu, (vi) C2-Ci2alkenylu, (vii) halogenalkenylu, (viii) C2-Ci2alkynylu, (ix) cykloalkylu, (x) (cykloalkyl)alkylu, (xi) (cykloalkyl)alkenylu, (xii) (cykloalkyl)alkynylu, (xiii) cykloalkenylu, (xiv) (cykloalkenyl)alkylu, (xv) (cykloalkenyl)alkenylu, (xvi) (cykloalkenyl)alkynylu, (xvii) arylu, (xviii) (aryl)alkylu, (xix) (aryl)alkenylu, (xx) (aryl)alkynylu, (xxi) heterocyklu, (xxii) (heterocykl)alkylu, (xxiii) (heterocykl)alkenylu a (xxiv) (heterocykl)alkynylu;

substituent R^37c ,v každém případě, je nezávisle vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-Ci₂alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) C₂-Ci2alkenylu, (v) halogenalkenylu, (vi) C2-Ci2alkynylu, (vii) cykloalkylu, (viii) (cykloalkyl)alkylu, (ix) (cykloalkyl)alkenylu, (x) (cykloalkyl)alkynylu, (xi) cykloalkenylu, (xii) (cykloalkenyl)alkylu, (xiii) (cykloalkenyl)alkenylu, (xiv) (cykloalkenyl)alkynylu, (xv) arylu, (xvi) (aryl)alkylu, (xvii) (aryl)alkenylu, (xviii) (aryl)alkynylu, (xix) heterocyklu, (xx) (heterocykl)alkylu,

(xxi) (heterocykl)alkenylu, (xxii) (heterocykl)alkynylu, (xxiii) -C(=O)-R¹⁴, (xxiv) -C(=S)-R¹⁴, (xxv) -S(O)2-R¹⁴ a (xxvi) hydroxyalkylu;

nebo pokud Z je -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37c)-, pakN(R^37c) a substituent R¹⁴, pokud jsou spojeny dohromady, vytváří azido skupinu;

nebo pokud Z je C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)-, pak N(O)(R^37c) a substituent R¹⁴, pokud jsou spojeny, vytváří N-oxidovaný 3-členný až 7-členný heterocyklický kruh mající alespoň jeden N-oxidovaný dusíkový atom v kruhu;

nebo pokud Z je -C(R^37a)(OR^37c)-, -C(R^37a)(SR^37c)- nebo -C(R^37a)(N(R^37b)(R^37c))-, pak substituenty R^37a, R¹⁴ a atom uhlíku, ke kterému jsou připojeny, pokud jsou spojeny dohromady, vytvářejí cyklopentylový, cyklopentenylový, cyklohexylový nebo cyklohexenylový kruh;

substituent R¹⁵ je vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) hydroxy skupiny, (iii) amino skupiny, (iv) Ci-C^alkylu, (v) halogenalkylu, (vi) C2-C ^alkenylu, (vii) halogenalkenylu, (vili) cykloalkylu, (ix) (cykloalkyl)alkylu, (x) (cykloalkyl)alkenylu, (xi) cykloalkenylu, (xii) (cykloalkenyl)alkylu, (xiii) (cykloalkenyl)alkenylu, (xiv) arylu, (xv) (aryl)alkylu, (xvi) (aryl)alkenylu, (xvii) heterocyklu, (xviii) (heterocykl)alkylu a (xix) (heterocykl)alkenylu; nebo substituenty R³ a R⁴ spojené dohromady s atomem, ke kterému jsou připojeny, vytvářejí karbocyklický nebo heterocyklický kruh mající 3 až 8 atomů v kruhu; substituent R⁵ je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) -CH(R³⁸)2, (c) -O-R⁴⁰, (d) C2-C4alkynylu, (e) cyklopropylu, cyklobutylu, (g) -C(=Q*)-R¹⁷ a (h) -N(R^I9)₂, kde Q¹ je O, S nebo N(R¹⁸);

substituenty R aR jsou nezávisle vybrány, v každém případě, ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, methylu a ethylu;

substituenty R¹⁹, R³⁸ a R⁴⁰ jsou nezávisle vybrány, v každém případě, ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-C ^alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) C2-C ^alkenylu, (v) halogenalkenylu, (vi) cykloalkylu, (vii) (cykloalkyl)alkylu, (viii) (cykloalkyl)alkenylu, (ix) cykloalkenylu, (x) (cykloalkenyl)alkylu, (xi) (cykloalkenyl)alkenylu, (xii) arylu, (xiii) (aryl)alkylu,

·' ··	¥ * ·	11		··
• 4 · 4	19 1 1	• »	•	•
• 11	9 ·	» w	¥	¥
				¥
• '1 ·	• ·	• 4	•	¥
**· ··	··1 1111	• ·		• ·

(xiv) (aryl)alkenylu, (xv) heterocyklu, (xvi) (heterocykl)alkylu a (xvii) (heterocykl)alkenylu;

Y je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atom vodíku, (b) Cj-Csalkylu, (c) Ci-Cjhalogenalkylu, (d) C₂-Csalkenylu, (e) C₂-C₅halogenalkenylu, (f) C₂-Csalkynylu, (9) C₃-C5cykloalkylu, (h) C₃-C5cykloalkyl-Ci-až-C₃-alkylu, (i) Cscykloalkenylu, (j) Cscykloalkenyl-Ci-až-Cs-alkylu, (k) C₅cykloalkenyl-C₂-až-C3-alkenylu, (1) -(CHR³⁹)nOR20, (m) -CH(OR²⁰)-CH2(OR²⁰), (n) -(CHR³⁹)nSR²¹, (o) -(CHR³⁹)„CN, (p) -(CHR³⁹)nN3, (q) fenylu, (r) fenylu substituovaného halogenem, (s) -(CHR³⁹)nC(=Q²)R²², (t) -(CHR³⁹)„N(=Q₃), (u) -N(O)=CHCH₃, (v) -(CHR³⁹)„NR²³R²⁴, (w) halogenu a (x) a heterocyklického kruhu majícího 3 až 6 atomů v kruhu;

kde index nje 0, 1 nebo 2; Q² je O, S, NR²⁵ nebo CHR²⁶; a Q³ je NR⁴¹ nebo CHR⁴²; substituent R²⁰ v každém případě je nezávisle (i) atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) C]-C₃halogenalkyl, (vii) vinyl, (viii) propenyl, (ix) izopropenyl, (x) allyl, (xi) C2-C3halogenalkenyl, (xii) amino skupina, (xiii) -NHCH₃, (xiv)-N(CH₃)₂, (xv)-NHCH₂CH₃, (xvi)-N(CH₃)(CH₂CH₃), (xvii) -N(CH₂CH₃)₂ nebo (xviii) -N(=CH₂);

substituent R je atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) Ci-C₃halogenalkyl, (vii) vinyl, (viii) propenyl, (ix) izopropenyl, (x).allyl nebo (xi) C₂-C₃halogenalkenyl;

substituent R²² je (i) atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) hydroxy skupina, (vii) thiol, (viii) methoxy skupina, (ix) ethoxy skupina, (x) n-propoxy skupina, (xi) izopropoxy skupina, (xii) cyklopropyloxy skupina, (xiii) methylthio skupina, (xiv) ethylthio skupina, (xv) n-propylthio skupina, (xvi) izopropylthio skupina, (xvii) cyklopropylthio skupina, (xviii) vinyl, (xix) propenyl, (xx) izopropenyl, (xxi) allyl, (xxii) -N(R^28a)(R^28b), (xxiii) -CH₂R²⁹, (xxiv) aminomethyl, (xxv) hydroxymethyl,

9, ‘fa e

(xxvi) thiolmethyl, (xxvii) -NHNH2, (xxviii) -N(CH3)NH2 nebo (xxix) -NHNH(CH₃);

substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku nebo methyl; substituenty R⁴¹ a R⁴² jsou nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl; substitent R²⁴ je vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-C4alkylu, (iii) C2-C₄alkenylu, (iv) C2-C₄alkynylu, (v) cyklopropylu, (vi) -C(=Q⁴)-R³⁰, (vii) -OR³¹ a (viii) -N(R³²)2, kde Q⁴ je O, S nebo N (R³³);

substituent R je atom vodíku, hydroxy skupina, methyl, ethyl, amino skupina, -CN nebo -NO₂;

substituent R je atom vodíku, methyl nebo ethyl;

substituent R²⁸ je átom vodíku, hydroxy skupina, methyl, ethyl, amino skupina, -NHGH₃,-N(CH₃)2, methoxy, ethoxy nebo -CN;

R je atom vodíku, methyl nebo ethyl;

nebo substituenty R^28a, R^28b a dusík, kterému jsou připojeny, společně představují azetidinyl;

substituent R je atom vodíku, hydroxy skupina, thiol, methyl, ethyl, amino skupina, methoxy skupina, ethoxy skupina, methylthio skupina, ethylthio skupina, methylamino skupina nebo ethylamino skupina;

substituent R³⁰ je atom vodíku, methyl, ethyl, -OR³⁴, -SR³⁴, -N(R³⁵)2, -NHOH, -NHNH₂,-N(CH₃)NH₂ nebo -N(CH₂CH₃)NH2;

substituenty R³¹ a R³² ,v každém případě, jsou nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl;

substituent R³³ je atom vodíku, hydroxy, methyl, ethyl, amino skupina, -CN nebo NO₂;

substituent R³⁴ je methyl nebo ethyl;

substituent R je nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl;

s výhradou spočívající v tom, že pokud Q² je CHR²⁶, pak substituent R²² je vybrán ze skupiny sestávající se z atom vodíku, -CH₃, -C2H5, -C₃H7, -OCH₃, -SCH₃, -O-C₂H₅ a -S-C₂H₅, a

s výhradou spočívající v tom, že pokud substituenty R³ a R⁴ jsou každý atom vodíku, pak

Y je jiný než atom vodíku;

substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) Ci-C ^alkylu, (c) C2-C]2alkenylu, (d) cykloalkylu, (e) (cykloalkyl)alkylu, (f) (cykloalkyl)alkenylu, (g) cykloalkenylu, (h) (cykloalkenyl)alkylu, (i) (cykloalkenyl)alkenylu, (j) arylu, (k) (aryl)alkylu, (1) (aryl)alkenylu, (m) heterocyklu, (n) (heterocykl)alkylu a (o) (heterocykl)alkenylu; a substituenty R⁸, R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (a) atom vodíku, (b) C,-C₆alkylu, (c) C₂-C6alkenylu, (d) Qs-Cňcykloalkylu, (e) C3-Cécykloalkenylu a (f) fluoru, s výhradou spočívající v tom, že celkový počet atomů, jiných než atom vodíku, v každém ze substituentů R⁸, R⁹ a R¹⁰ je 6 atomů nebo méně.

Výhodné sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem II:

II nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴nejsou stejné.

Další výhodné sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem III:

• ·· · ·« ·« ·· • · · 9 9 · · 9 9 9 9 9

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴nejsou stejné.

Další výhodné sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce 1 nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je definován výše;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R je Ci-C3nižšíalkyl, halogenCi-Canižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂C3alkenyl nebo-X-R² je

kde Y¹ je -CH₂-, -0-, -S- nebo -NH- a Y² je -C(=0)- nebo -C(R^aa)Ř^bb)r, kde substituenty R³³ a R^bb jsou nezávisle vybrány že skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu, 2-hydroxyethylu, aminomethylu,

1-aminoethylu, 2-aminoethylu, thiolmethylu, 1-thiolethylu, 2-thiolethylu, methoxymethylu, N-methylaminomethylu a methylthiomethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku, fluor nebo nižšíalkyl;

• ···· substituent R¹⁰ je atom vodíku, fluor nebo nižšíalkyl; a

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C₅halogenalkenyl, -C(=Q²)R²², -N(=Q³), -N(O)=CHCH₃,

-NR²³R²⁴ nebo heterocyklický kruh mající 3 až 6 atomů v kruhu, kde substituenty

R²², R²³, R²⁴, Q² a Q³ jsou definovány výše,

Výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je definován výše;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R je Ci-C3nižšíalkyl, halogenCi-C₃nižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂C₃alkenyl nebo-X-R² je

kde Y¹ je -CH₂- a Y² je -C(=O)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R^aa a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, C]-C₃nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu a 2-hydroxyethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, ' kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl;

Z- T substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

, substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituent R¹⁰ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; a

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C₅halogenalkenyl, -C(=Q²)R²², -N(=Q³), -N(O)=CHCH₃nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby, kde substituenty R²², Q² a Q³ jsou definovány výše.

Ještě výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je definován výše;

• · • · • · · « fe » · <fe ·· · ·

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl, halogenCi-Canižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂C3alkenyl nebo-X-R² je

kde Y¹ je -CH₂- a Y² je -C(=O)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R³³ a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu a 2-hydroxyethylu;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituent R¹⁰ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; a

Y je C₂-Csalkenyl, C₂-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Ještě výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi ^nižšíalkyl;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-Rⁱ⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituent R¹⁰ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; a • :*’···

Y je Ci-Csalkenyl, C2-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Ještě výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je CO2H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² j e C1 -Canižšíalkyl nebo halogenC 1 -Cjriižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a substituent R³ je heterocykl a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše;

substituent R⁵ je atom vodíku;

substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku;

s substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je Cj-Csalkenyk Cý-Cghalogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Ještě další výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent.R¹ je CO2H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi-Canižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl, (c) cykloalkyl, (d) cykloalkylalkyí, (e) alkenyl, (f) alkynyl, (g) -C(=O)-R¹⁴, (h) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴ nebo (i) -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyí, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)2-P(=O)-;

substituenty R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atom vodíku, (ii) nižšíhoalkylu a (iii) nižšíhoalkenylu; a

• 44 ·«· ·	• ·· • · 4 4	4	• 4 4'	• ι· 4	4
• · ·	4 4	4	4	4	4
· · 4					4
4 4	4	4	4	4
··	·«· ·«··		* ·	4 4

substituent R^37c je atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) nižšíalkenyl;

substituent R⁵ je atom vodíku;

substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku;

substituenty R a R jsou atom vodíku;

substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C2-Csalkenyl, C2-C₅halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Nej výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III B nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R je -CO2H;

í, -X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2-nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi-C₃nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyl, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)₂-P(=O)-;

substituenty R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) nižšíhoalkylu a (iii) nižšíhoalkenylu; a substituent R^37c je atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) allyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R a R jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

·

Další nej výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny vynálezu mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH- nebo R²-SO₂-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižší alkyl nebo halogenCi-C3nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) nižšíalkyl, (ii) nižšíalkenyl, (iii) nižšíalkyl substituovaný hydroxy skupinou nebo (iv) nižšíalkyl substituovaný alkoxy skupinou; substituenty R^37a je (i) atom vodíku, (ii) nižšíalkyl a (iii) nižšíalkenyl; a substituent R^37c je (i)atom vodíku, (ii) Ci ^nižšíalkyl nebo (iii) allyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C₅alkenyl, Cý-Cjhalogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Další nej výhodnější sloučeniny vynálezu jsou sloučeniny mající vzorce I nebo II nebo III nebo jejich soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH- nebo R²-SO₂-NH-, kde substituent R² je Ci-Csnižšíalkyl nebo halogenC i-C3nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; substituenty R^{3 7a} j e nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; a substituent R^37c je atom vodíku, Ci-C3nižšíalkyl nebo allyl; substituent R⁵ je atom vodíku;

•	*·	é ··	•	9 9
Φ	'· ·	• · 9	•	9	9	ta
•	··		•	9	«	•
•	• · ' ··	• 99 99	··	'9 9 9	•	•

A 7 substituenty R aR jsou atom vodíku; substituenty R aR jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je Cs-Csalkenyl, Cs-Cshalogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Výhodné substituenty R¹ zahrnují -CO2H nebo jejich estery nebo prekurzory léčiv. Výhodné estery zahrnují estery C2-C6nižšíhoalkylu nebo substituované nebo nesubstituované estery benzylu.

Výhodné substituenty R¹ také zahrnují -S(O)2NHC(=O)R’ *, kde substituent R¹¹ je definován výše.'

Nejvíce výhodné substituenty R¹ zahrnují -CO2H nebo jejich estery nebo prekurzory léčiv. Nejvíce výhodné estery zahrnují estery C₂-C6nižšíhoalkylu nebo substituované nebo nesubstituované estery benzylu.

Výhodné substituenty -X-R² zahrnují R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO₂7 7 nebo R -SO2-NH-, kde substituent R je Ci-C3nižšíalkyl, halogenCi-Chnižšíalkyl, C₂Cjalkenyl nebo halogenC2-C3alkenyl nebo-X-R² je

kde Y¹ je -CH₂-, -0-, -S- nebo -NH- a Y² je -C(=0)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R³³ a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu, 2-hydroxyethylu, aminomethylu,

• ··	•
e« « ·	V« 9 «	•	•	•	•
• ··	• ·	•	•	•	•
				•
	• ·	•	•	•	•
··« ··	··· · «··	··			··

Výhodnější substituenty -X-R² zahrnují R²-C(=0)-NH-, R²-NH-C(=0)-, R²-NHSO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C₃nižšíalkyl, halogenC i-C3nižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂-C3alkenyl nebo -X-R² je

kde Y¹ je -CH₂- a Y² je -C(=O)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R^aa a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1 -hydroxyethylu a 2-hydroxyethylu;

Ještě výhodnější substituenty -X-R² zahrnují R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C₃nižšíalkyl, halogenCi-C₃nižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂-C₃alkenyl.

Stále ještě výhodnější substituenty -X-R² zahrnují R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C₃nižšíalkyl nebo halogenC]C₃nižšíalkyl.

Stále ještě výhodnější substituenty -X-R² zahrnují R²-C(=Oj-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-S02-NH-, kde substituent R² je Ci-C₂nižšíalkyl nebo halogenCiC₂nižšíalkyl a zejména CH3-C(=O)-NH-, CF₃-C(=O)-NH-, CH₃-SO₂-NH- nebo CF₃-SO₂NH-.

Výhodné substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány jako zhruba většina výše definovaných a kde jeden ze substituentů. R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku.

Výhodnější substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a substituent R³ zahrnuje heterocykl nebo -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány jako zhruba většina výše definovaných.

• 44 ·· * · •, ·· ' 4 · · • '· · • •4 44 • 4« 44 4» • 4 4 4 4 4 4 4

4 · · · 4

4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4

444 4444 44 44

Ještě výhodnější je, když substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a o

substituent R zahrnuje (a) heterocykl, (b) alkyl, (c) cykloalkyl, (d) cykloalkylalkyl, (e) alkenyl, (f) alkynyl, (g) -C(=O)-R¹⁴, (h) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴ nebo (i) -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyl, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R³⁷O)2-P(=O)-;

substituent R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) nižšíhoalkylu a (iii) nižšíalkenylu; a substituent R^37c je (i) atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) nižšíalkenyl,

Nejvýhodnější substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ zahrnuje (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyl, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)2-P(=O)-;

substituenty R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) nižšíhoalkylu a (iii). nižšíhoalkenyl; a substituent R^37c je (i) atom vodíku, (ii) C]-C3nižšíalkyl nebo (iii) allyl,

Také nejvýhodnější jé, když substituent substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ zahrnuje (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴je (i) nižšíalkyl, (ii) nižšíalkenyl, (iii) nižšíalkyl substituovaný hydroxy skupinou nebo (iv) nižšíalkyl substituovaný alkoxy skupinou;

substituent R^37a je (i) atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) nižšíalkenyl; a substituent R^37c je (i) atom vodíku, (ii) Ci-C₃nižšíalkyl nebo (iii) allyl.

Také nejvýhodnější je, když substituent R⁴ je atom vodíku a R³ zahrnuje -C (R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; substituent R^37a je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; a substituent R^37c je atom vodíku, Ci-C3nižšíalkyl nebo allyl a zejména, kde substituent R^37c je atom vodíku nebo methyl.

Výhodné substituenty R⁵ zahrnují atom vodíku nebo nižšíalkyl.

Nejvýhodnější je, když substituent R⁵ je atom vodíku.

Výhodné substituenty R⁶ a R⁷ zahrnují nezávisle atom vodíku a nižšíalkyl.

Nej výhodnější je, když substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku.

Výhodné substituenty R⁸, R⁹ a R¹⁰ zahrnují nezávisle atom vodíku, fluor a nižšíalkyl. Nej výhodnější je, když substituenty R⁸, R⁹ a R¹⁰ jsou atom vodíku.

Výhodný substituent Y zahrnuje C₂-C5alkenyl, C2-C5halogenalkenyl, -C(=Q²)R²²,

-N(=Q³), -N(O)=CHCH₃, -NR²³R²⁴ nebo a heterocyklický kruh mající 3 až 6 atomů v kruhu, kde substituenty R²², R²³, R²⁴, Q² a Q³ jsou definovány výše.

Výhodněji je substituent Y zahrnuje C₂-C5alkenyl, C2-C5halogenalkenyl,

-C(=Q²)R²², -N(=Q³), -N(O)=CHCH3 nebo a heterocyklický kruh mající 5 kruhů v atomu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

Ještě výhodní je substituent Y zahrnuje C₂-C5alkenyl, C2-C₅halogenalkeny nebo heterocyklický kruh mající 5 kruhů v atomu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby. Názorné substituenty alkenylu a halogenalkenylu Y zahrnují:

-CH=CH₂, -CH=CHF, -CH=CH-CH₃, -CH=CH-CF₃, -CH=CHC1, -CH=CHBr, -CH=CF₂, -CH=CF(CH₃), -CÍ NCF(CF₃), -CH=CFC1, -CH=CFBr, -CH=C(CH₃)₂, -CH=C(CH₃)(CF₃), -CH=CC1(CH₃), -CH=CBr(CH₃), -CH=C(CF₃)₂, -CH=CC1(CF₃), -CH=CBr(CF₃),

-CH=CC1₂, -CH=CClBr, -CF=CH₂, -CF=CHF, -CF=CH-CH₃, -CF=CH-CF₃, -CF=CHC1, -CF=CHBr, -CF=CF₂, -CF=CF(CH₃), -CF=CF(CF₃), -CF=CFC1, -CF=CFBr, -CF=C(CH₃)₂, -CF=C(CH₃)(CF₃), -CF=CC1(CH₃), -CF=CBr(CH₃), -CF=C(CF₃)₂, • ·

-CF=CC1(CF₃), -CF=CBr(CF₃), -CF=CC1₂, -CF=CClBr, -C(CH₃)=CH₂, -C(CH₃)=CHF, -C(CH₃)=CH-CH₃, -C(CH₃)=CH-CF₃, -C(CH₃)=CHC1, -C(CH₃)=CHBr, -C(CH₃)=CF₂, -C(CH₃)=CF(CH₃), -C(CH₃)=CF(CF₃), -C(CH₃)=CFC1, -C(CH₃)=CFBr,

-C(CH₃)=C(CH₃)₂, -C(CH₃)=C(CH₃)(CF₃), -C(CH₃)=CC1(CH₃), -C(CH₃)=CBr(CH₃), -C(CH₃)=C(CF₃)₂, -C(CH₃)=CC1(CF₃), -C(CH₃)=CBr(CF₃), -C(CH₃)=CC1₂,

-C(CH₃)=CClBr, -C(CF₃)=CH₂, -C(CF₃)=CHF, -C(CF₃)=CH-CH₃, -C(CF₃)=CH-CF₃, -C(CF₃)=CHC1, -C(CF₃)=CHBr, -C(CF₃)=CF₂, -C(CF₃)=CF(CH₃), -C(CF₃)=CF(CF₃), C(CF₃)=CFCl,-C(CF₃)=CFBr, -C(CF₃)=C(CH₃)₂, -C(CF₃)=C(CH₃)(CF₃),

C(CF₃)=CC1(CH₃), -C(CF₃)=CBr(CH₃), -C(CF₃) =C(CF₃)₂, -C(CF₃)=CC1(CF₃),

-C(CF₃)=CBr(CF₃), -C(CF₃)=CC1₂, -C(CF₃)=CClBr, -CC1=CH₂, -CC1=CHF,

-CC1=CH-CH₃, -CC1=CH-CF₃, -CC1=CHC1, -CCl=CHBr, -CC1=CF₂, -CC1=CF(CH₃), -CC1=CF(CF₃), -CC1=CFC1, -CCl=CFBr, -CC1=C(CH₃)₂, -CC1=C(CH₃)(CF₃),

-CC1=CC1(CH₃), -CCl=CBr(CH₃), -CC1=C(CF₃)₂, -CC1=CC1(CF₃), -CCl=CBr(CF₃), -CC1=CC1₂, -CCl=CClBr, -CH=CH-CH₂CH₃, -CH=CF-CH₂CH₃, -CF=CH-CH₂CH₃, -CF=CF-CH₂CH₃, -CH=C(CH₃)(CH₂CH₃), -CF=C(CH₃)(CH₂CH₃), -CH=CC1(CH₂CH₃), -CF=CC1(CH₂CH₃), -C(CH₃)=CH-CH₂CH₃, -C(CH₃)=CF-CH₂CH_3j -cci=ch-ch₂ch₃, -CC1=CF-CH₂CH₃, -C(CH₂CH₃)=CH₂, -C(CH₂CH₃)=CHF, -C(CH₂CH₃)=CF₂, -C(CH₂CH₃)=CH-CH₃, -C(CH₂CH₃)=CF-CH₃, -C(CH₂CH₃)=CH-C1, -C(CH₂CH₃)=CFC1.

Názorné substituenty Y, které jsou heterocyklické kruhy mající kruh o 5 atomech a také obsahuj ící j ednu až dvě dvoj né vazby zahrnuj í:

furanyl, dihydrofuranyl, didehydrodioxolanyl, dithiolyl, imidazolyl, imidazolinyl, izothiazolyl, izothiazolinyl, izoxazolyl, izoxazolinyl, oxadiazolyl, oxadiazolinyl, oxathiolyl, oxazolyl, oxazolinyl, pyrazolyl, pyrazolinyl, pyrrolyl, dihydropyrrolyl, tetrazolyl, tetrazolinyl, thiadiazolyl, thiadiazolinyl, thiazolyl, thiazolinyl, thienyl, dihydrothienyl, triazolyl, triazolinyl.

Výhodnější substituenty Y zahrnují e«-propeny 1, /ran.v-propenyl, izobutenyl, c«-2-chlorvinyl, vinyl, 2,2-difluorvinyl, imidazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, thiazolyl, izoxazolyl.

Nejvýhodnější substituenty Y zahrnují cw-propenyl, cw-2-chlorvinyl, vinyl, imidazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, thiazolyl, izoxazolyl.

Výhodné sloučeniny vynálezu zahrnují sloučeniny vybráné ze skupiny sestávající se z: (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-Acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3-(cz'5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S ,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxy-2-methyl)pentyl-3-(ez.s-propen-1 -y 1) pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz‘5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

Trifluorctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz's-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,l'R,2'R)-2-(l-Acetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3-(cw-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cz'.s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(-)-(2R,3 S,5R, 1' S)-2-( 1 -Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz.s-rpopen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylát amonný;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-Acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3-(cz'5-propen-lyl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy-2-vinyl)ethyl-3 -(cN-propen-1 -yl)pyrrolidin-5 -karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz5'-propen-l-yl)-pynOlidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l'S,3'S)-2-(l-Acetamido-2-(N-izopropyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3(czs-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l'S,3'S)-2-(l-Acetamido-2-(N-ethyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3-(czÁpropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy)butyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cz'.s’-propen-l-yl)pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 R,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxy)butyl-3 -(pyrazol-3 -yl)pyrrolidin-5 karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(+)-(2R,3S,5R, l'R,2'R)-2-(l-Acetamido-l-(3,6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))propyl-3(ez,s'propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cz'.Y-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S,3’S)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cis propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(+)-(2,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3-(cz'Y-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-l-(3,6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))methyl-3(cz'5propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2,3-diinethoxy)propyl-3-(cz'5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxymethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz'5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cž5-propen-l-yl)pynOlidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ 8)-2-(1 -Acetamido-2-hydroxy-3-dimethyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy-3-vinyl)propyl-3-(cw-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-2-(propeny-2-yl)ethyl-3-(cz'5propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(cz'5-propen-l-yl)pynOlidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-; (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(+)-(2 R,3 S, 5 R, 1 'R,2'R)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxyethyl-2-hydroxy)pentyl-3 -(c Apropen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin5-karboxylová kyselina;

(+)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, l’R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-(cA-propen-1-yl)pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(cA-2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 R,5 R, 1 ’ S)-2-( 1 -Acetamido-3 -methyl)butyl-3 -(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5 karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R)-2-(l-Acetamido-3-hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylová kyselina;

(+)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-4-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-l- t-Butoxykarbonyl-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -Acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2-difluor-vin-1 -y.l)pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-3-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-5-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-(1 -Acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-4-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina; a (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-amino-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo jejich prekurzory léčiv.

Výhodnější sloučeniny vynálezu zahrnují sloučeniny vybrané ze skupiny sestávající se ze sloučenin: ' (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-Acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen-lyl)pyrrolidin-5-karboxyloyá kyselina;

(+)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2’S)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxy-2-methyl)pentyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxyl ová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

Trifluorctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cA-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny:

· , ¹ (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-2-(l -Acetamido-2, 3-dihydroxy)propyl-3-(cA-ptopen-1 -yl)pyrrólidjn-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3 -(cw-propen-1 -yl)pyrrblidin-5-karboxylová kyselina;

(-)-(2R,3 S,5R,TS)-2-( 1-Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cApropen-1-yl)-pyrrolidin-5karboxylát amonný;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-Acetamido-2, 3-dimethoxy)propyl-3-(m-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy-2-vinyl)ethyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rS,3’S)-2-(l-Acetamido-2-(N-izopropyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rS,3’S)-2-(l-Acetamido-2-(N-ethyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3-(cz5propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-2-methoxy)butyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R_J2’S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cz5-propen-l-yl)pyrrolidin5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3R,5R,l ’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'5'-propen-l-yl)pyrrolidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-Acetamido-l-(3, 6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))propyl-3(cApropen-HyP-pyrrolidin-S-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S,3 ’ S)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy-3 -methyl)pentyl-3 -(cis- propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5 R, 1 ’ R,2’ S)-2-( 1 - Acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2'S)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3-(cz.s-propen-1 yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5R, Γ R,2 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-1 -(3,6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))methyl-3-(cispropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3-(cz3'-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxymethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz'5propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cz'5'-propen-l-yl)pynOlidin-5karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-2-( 1 -Aceíamido-2-hydroxy-3-dimethyl)butyl-3-(cz'.v-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

4«

I · ·· »44 ·»·· »·

4 4 • 4 · >4 4 • <4 4 • 4 44 (±)-(2R,3 S,5R, 1’ R,2'S)-2-( 1 - Acetamido-2-ethoxy-3-vinyl)propyl-3-(czs-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylová kyselina;

(±)-(2R,3S,5R,l ’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-2-(propcny-2-yl))ethyl-3-(cz.spropen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina; a (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(cz5'-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylová kyselina;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekutzory léčiv.

Termín skupina chránící kyselinu, jak je. používán zde, se vztahuje na skupiny používáné ke chránění kyselin (např., -CO2H, -SO3H, -SO2H, -PO3H2, -PO2H skupiny apod.) vůči nežádoucím reakcím během postupů při syntéze. Běžně používané skupiny chránící kyseliny jsou publikovány v T.H.Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd edition, John Wily & Sons, New York(1991). K nejčastěji používaným skupinám chránícím kyseliny patří estery.

Takové estery zahrnují;

alkylestery, zejména nižšíalkylestery, včetně, ale není to nikterak limitováno, ethylestery, n-propylestery, izopropylestery, n-butylestery, sec-butylestery, izobutylestery, t-butylestery, n-pentylestery apod.;

arylalkylestery zahrnují, ale není to nikterak limitováno, benzylestery, fenethylestery, 3-fenylpropylestery, naftylmethylestery apod., kde arylová část arylalkylové skupiny je nesubstituováná nebo substituovaná, jak je definováno výše;

silylestery, zejména, (tri-nižšíalkyl)silylestery, (di-nižšíalkyl)(aryl)silylestery a (nižšíalkyl)(di-aryl)silylestery, včetně, ale není to nikterak limitováno, trimethylsilylestery, triethylsilylestery, izopropyldimethylsilylesteiy, t-butyldimethylsilylestery, methyldiizopropylsilylestery, methyl-di-t-butylsilylestery, triizopropylsilylestery, methyldifenylsilylestery, izopropyldifenylsilylestery, butyldifenylsilylestery, fenyldiizopropylsilylestery apod.;

Výhodné skupiny chránící kyseliny jsou nižšíalkylestery.

Termín aktivovaná skupina karboxylové kyseliny , jak je používán zde, se vztahuje na halogenidy kyselin, např. chloridy kyseliny, a také na aktivované esterderiváty zahrnující, ale není to nikterak limitováno, derivované anhydridy kyseliny mravenčí a octové, anhydridy odvozené od alkoxykarbonylhalogenidů, např. izobutyloxykarbonylchlorid apod., anhydridy derivované z reakce karboxylové kyseliny sN,N'-karbonyldiimidazolem apod., estery derivované od N-hydroxysukcinimidu, estery derivované od N-hydroxyftalimidu, estery derivované od N-hydroxybenzotriaolu, estery derivované od N-hydroxy-5-norbomylén-2,3-dikarboximidu, estery derivované od 2,4,5-trichlorfenolu, estery derivované od p-nitrofenolu, estery derivované od fenolu, estery derivované od pentachlorfenolu, estery derivované od 8-hydroxychinolinu a apod.

Termín acyl, jak je používán zde se vztahuje na skupiny mající vzorec -C(=O)R⁹⁵, kde substituent R⁹⁵ je atom vodíku nebo alkylová skupina. Výhodné alkylové skupiny, tzn. substituent R⁹⁵ jsou nižší alkylové skupiny. Názorné příklady acylových skupin zahrnují skupiny, např. formyl, acetyl, propionyl, apod.

Termín „acylamino“, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -NHR⁸⁹, kde substituent R⁸⁹ je acylová skupina. Názorné příklady acylamino skupiny zahrnují acetylamino skupinu, propionylamino skupinu, apod.

Termín „alkenyl“, jak je používán zde, se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený radikálový uhlovodíkový řetězec mající 2 až 15 atomů uhlíku a také obsahující alespoň jednu uhlík-uhlík dvojnou vazbu. Termín „nižší alkenyl“ se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený řetězec alkenylových radikálů mající 2 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkenylových skupin zahrnují skupiny např. vinyl, 2-propenyl, 2-methyl1-propenyl, 3-butenyl, 4-pentenyl, 5-hexenyl, apod.

Termín „alkenylen“, jak je používán zde, se vztahuje na divalentní skupinu odvozenou od rozvětveného nebo nerozvětveného uhlovodíkového řetězce obsahuj ící čího 2 až 15 atomů uhlíku a také obsahujícího alespoň jednu dvojnou vazbu uhlík-uhlík. Termín „nižší alkenylen“ se vztahuje na divalentní skupinu odvozenou od rozvětveného nebo nerozvětveného řetězce alkenové skupiny mající 2 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkenylových skupin zahrnují skupiny, např. -CH=CH-, -CH₂CH=CH-, -C(CH3)-CH-,

-CH₂CH=CHCH₂-, apod.

Termín alkenyloxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec

Ol Q1

-OR , kde substituent R je alkenylová skupina.

Termín alkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -OR⁹⁹, kde substituent R⁹⁹ je alkylová skupina. Výhodné substituenty R⁹⁹ jsou nižšíalkylové skupiny. Názorné příklady alkoxy skupin zahrnují skupiny, např. methoxy skupinu, ethoxy skupinu, Zerř-butoxy skupinu, apod.

Termín alkoxyalkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -O-R⁹⁶-O-R⁹⁷, kde substituent R⁹⁷ je výše definovaný nižšíalkyl a substituent R⁹⁶ je nižšíalkylenová skupina. Názorné příklady alkoxyalkoxy skupin zahrnují skupiny, např. methoxymethoxy skupinu, ethoxymethoxy skupinu, Z-butoxymethoxy skupinu, apod.

Termín “alkoxyalkyl“, jak je používán zde, se vztahuje na alkylový radikál, ke kterému je připojena alkoxy skupina, např. methoxymethyl, methoxylpropyl, apod.

Termín alkoxykarbonyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -C(=O)-R⁸⁰, kde substituent R⁸⁰ je alkoxy skupina.

Termín alkoxykarbonylalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -C(=O)-R⁷⁹ připojené na výchozí molekulovou část přes alkylenovou vazbu, kde substituent R je alkoxy skupina.

Termín „alkyl“, jak je používán zde, se vztahuje na rozvětvené nebo nerozvětvené uhlovodíkový řetězce radikálu mající 1 až 12 atomů uhlíku. Termín „nižšíalkyl“ se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený řetězec alkylových radikálů majících 1 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkylových skupin zahrnují skupiny, např. methyl, ethyl, w-propyl, zzo-propyl, «-butyl, zzo-butyl, .sec-butyl, /-butyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2,2-dimethylbutyl, 2-methylpentyl, 2,2-dimethylpropyl, n-hexyl, apod. Uhlovodíkové řetězce v alkylových skupinách nebo alkylové části substituentu obsahujícího alkyl mohou být • · .případně přerušeny jedním nebo dvěma heteroatomy nebo heteroskupinami nezávisle

27 vybranými ze skupiny sestávající se z kyslíku, -N(R )- a síry, kde substituent R jev každém případě nezávisle atom vodíku, nižšíalkyl, cylkoalkyl, cykloalkylalkyl nebo arylalkyl, a kde dva takové heteroatomy nebo heteroskupiny jsou odděleny alespoň jedním atomem uhlíku.

Termín alkylamino, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -NHR⁹¹, kde substituent R⁹¹ je alkylová skupina. Výhodné substituenty R⁹¹ jsou nižšíalkylové skupiny. Názorné příklady alkylamino skupiny zahrnují methylamino skupinu, ethylamino skupinu, apod.

Termín alkylen, jak je používán zde, se vztahuje na a divalentní skupinu odvozenou od skupiny rozvětveného nebo nerozvětveného nasyceného řetězce uhlovodíku mající 1 až 15 atomů uhlíku. Termín „nižší alkylen“ se vztahuje na divalentní skupinu odvozenou od skupiny rozvětveného nebo nerozvětveného nasyceného řetězce uhlovodíků mající 1 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkylenových skupin zahrnují skupiny, např. methylen (-CH2-), 1,2-ethylen (-CH2CH2-), 1,1-ethylen (-CH(CH3)-), 1,3-propylen (-CH2CH2CH2-), 2,2-dimethylpropylen (-CH₂C(CH3)2CH₂-), apod. Uhlovodíkové řetězce v alkylenových skupinách nebo alkylenové části substituentu obsahujícího alkylen mohou být případně přerušeny jedním nebo dvěma heteroatomy nebo heteroskupinami nezávisle vybranými ze skupiny sestávající se z kyslíku, -N(R )- a síry, kde substituent R , v každém případě, je nezávisle atom vodíku, nižšíalkyl, cylkoalkyl, cykloalkylalkyl nebo aiylalkyl, a kde dva heteroatomy nebo heteroskupiny jsou odděleny alespoň jedním atomem uhlíku.

Termín alkylsulfonyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -SO₂-R , kde substituent R je alkylová skupina. Názorné skupiny substituentu R jsou nižšíalkylové skupiny.

Termín alkylsulfonylamino, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -SO₂-R⁷⁷ připojenou na výchozí molekulovou část přes amino vazbu (-NH-), kde substituent R⁷⁷ je alkylová skupina. Výhodné skupiny substituentů R⁷⁷ jsou nižšíalkylové skupiny.

Termín alkynyl, jak je používán zde, se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec radikálů obsahující 2 až 15 atomů uhlíku á také obsahující alespoň jednu trojnou vazbu uhlík-uhlík. Termín „nižšíalkynyl“ se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený řětězec alkynylových radikálů obsahující 2 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkynylových skupin zahrnují např. acetylenyl, 1-propynyl,

2-propynyl, 3-butynyl, 2-pentynyl, 1-butynyl apod.

Termín alkynylen, jak je používán zde, se vztahuje na divalentní skupinu odvozenou od rozvětveného nebo nerozvětveného uhlovodíkového řetězce obsahuj ícícího 2 až 15 atomů uhlíku a také obsahující alespoň jednu trojnou vazbu uhlík-uhlík. Termín „nižšíalkynylen“ se vztahuje na divalentní skupinu odvozenou od rozvětbeného nebo nerozvětveného řetězce alkynylenové skupiny mající 2 až 6 atomů uhlíku. Názorné příklady alkynylenových skupin zahrnují např. -C=C-, -CFfj-OC-, -CsC-CIN-, CH(CH₃)-C=C-, apod.

Termín aminoalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na alkylový radikál, ke kterému je připojena amino skupina (-NH2-).

Termín aryl, jak je používán zde, se vztahuje na karbocyklický kruhový systém mající 6 - 10 atomů v kruhu a jeden nebo dva aromatické kruhy. Názorné příklady arylových skupin zahrnují skupiny např. fenyl, naftyl, tetrahydronaftyl, indanyl, indenyl, apod.

Arylové skupiny mohou být nesubstituovány nebo substituovány jedním, dvěma nebo třemi substituenty, každý nezávisle vybraný z nižšíhoalkylu, halogenu, halogenalkylu, halogenalkoxy skupiny, hydroxy skupiny, oxo(=O) skupiny, hydroxyalkylu, alkenyloxy skupiny, alkoxy skupiny, alkoxyalkoxy skupiny, alkoxykarbonylu, alkoxykarbonylalkylu, thioalkoxy skupiny, amino skupiny, alkylamino skupiny, alkylsulfonylu, dialkylamino skupiny, acylamino skupiny, nesubstituovaného arylu, nesubstituovaného arylalkylu, nesubstituované arylalkoxy skupiny, nesubstituované aryloxy skupiny, merkapto skupiny, kyano skupiny, nitro skupiny, karboxy skupiny, karboxaldehydu, NH2C(=O)-, cykloalkylu, karboxyalkylu, alkylsulfonylamino skupiny,

nesubstituovaného beterocyklu, nesubstituovaného (heterocykl)alkylu, nesubstituované (heterocykl)alkoxy skupiny, nesubstituované (heterocykl)oxy skupiny a -SO3H. Výhodné arylové substituenty jsou každý nezávisle vybrány ze skupiny sestávajícící se z nižšíhoalkylu, halogenu, halogenalkylu, hydroxy skupiny, hydroxyalkylu, alkenyloxy skupiny, alkoxy skupiny, alkoxyalkoxy skupiny, thioalkoxy skupiny, amino skupiny, alkylamino skupiny, dialkylamino skupiny, alkylsulfonylu, acylamino skupiny, kyano skupiny a nitro skupiny. Příklady substituovaného arylu zahrnují 3-chlorfenyl, 3fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3-chlor-4-fluor-fenyl, 4-methylsulfonylfenyl, apod.

Termín (aryl)alkenyl se vztahuje na nižší alkenylovou skupinu a na ni připojenou arylovou skupinu. Názorné příklady (aryl)alkenylové skupiny zahrnují skupiny např. fenylethylenyl, fenylpropenyk apod.

Termín (aryl)alkyl se vztahuje na nižšíalkylovou skupinu a na ni připojenou arylovou skupinu. Názorné příklady (aryl)alkylových skupin zahrnují skupiny např. benzylu a fenylethylu.

Termín arylalkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -O-R⁷⁶, kde substituent R⁷⁶ je arylalkylová skupina.

Termín (aryl)alkynyl se vztahuje na alkynylenovou skupinu a na ni připojenou arylovou skupinu. Názorné příklady (aryl)alkynylových skupin zahrnují skupiny např. fenylacetylenylu, fenylpropynylu, apod.

Termín aryloxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec

77 ♦

-O-R , kde substituent R je arylová skupina.

Termín karbamoyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -C(=O)-NH₂.

Termín karboxyalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec

-R⁶⁴-COOH, kde substituent R⁶⁴ je nižší alkylenová skupina.

··

Termín kyanoalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na alkylový radikál, ke kterému je připojena kyano skupina (-CN).

Termín cykloalkenyl, jak je používán zde, se vztahuje na alifatický kruhový systém mající 5 až 10 atomů uhlíku a 1 nebo 2 kruhy obsahující alespoň jednu, dvojnou vazbu v kruhové struktuře. Názorné příklady cykloalkenyloých skupin zahrnují např. cyklohexen, cyklopenten, norbomylén apod.

Cykloalkenylové. skupiny mohou být nesubstituované nebo substituované jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle vybranými z hydroxy skupiny, halogenu, amino skupiny, alkylamino skupiny, dialkylamino skupiny, alkoxy skupiny, alkoxyalkoxy skupiny, thioalkoxy skupiny, halogenalkylu, merkapto skupiny, nižšíalkenylu a nižšíalkylu. Výhodné substituenty jsou nezávisle vybrány z nižšíalkylu, nižšíalkenylu, halogenalkylu, halogenu, hydroxy skupiny a alkoxy skupiny.

Termín (cykloalkenyl)alkenyl, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkenylovou skupinů připojenou na nižší alkenylový radikál. Názorné příklady (cykloalkenyl)alkenylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexenylethylen, cyklopentenylethylen, apod.

Termín (cykloajkenyl)alkyl, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkenylovou skupinu připojenou na nižšíalkylový radikál. Názorné příklady (cykloalkenyl)alkylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexenylmethyl, cyklopentenylmethyl, cyklohexenylethyl, cyklopentenylethyl, apod.

Termín (cykloalkenyl)alkyůyl, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkenylovou skupinu připojenou na nižšíalkynylový radikál. Názorné příklady (cykloalkenyl)alkynylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexenylacetylenyl, cyklopentenylpropynyl, apod.

Termín cykloalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na alifatický kruhový systém mající 3 až 10 atomů uhlíku a 1 nebo 2 kruhy. Názorné cykloalkylové skupiny zahrnují

např. cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, norboman, bicyklo[2,2,2]oktan apod.

Cykloalkylové skupiny mohou být nesubstituované nebo substituované jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle vybranými z hydroxy skupiny, halogenu, amino skupiny, alkylamino skupiny, dialkylamino skupiny, alkoxy skupiny, alkoxyalkoxy skupiny, thioalkoxy skupiny, halogenalkylu, merkapto skupiny, nižšíalkenylu a nižšíalkylu. Výhodné substituenty jsou nezávisle vybrány z nižšíhoalkylu, nižšíhoalkenylu, halogenalkylu, halogenu, hydroxy skupiny a alkoxy skupiny.

Termín (cykloalkyl)alkyl, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkylovou skupinu připojenou na nižšíalkylový radikál. Názorné příklady (cykloalkyl)alkylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexylmethyl, cyklopentylméthyl, cyklohexylethyl, cyklopentylethyl, apod.

Termín (cykloalkyl)alkenyl, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkylovou skupinu připojenou na nižšíalkylový radikál. Názorné příklady (cykloalkyl)alkenylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexylethylen, cyklopentylethylen, apod.

Termín (cykloalkyl)alkynyl“, jak je používán zde, se vztahuje na cykloalkylovou skupinu připojenou na nižšíalkynylový radikál. Názorné příklady (cykloalkyl)alkynylové skupiny zahrnují skupiny např. cyklohexylacetylenyl, cyklopentylpropynyl, apod.

Termín dialkylamino, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -N(R⁹⁰)₂, kde každý substituent R⁹⁰ je nezávisle nižší alkylová skupina. Názorné příklady dialkylamino skupiny zahrnují dimethylamino skupinu, diethylamino skupinu, N-methylN-izopropylamino skupinu apod.

Termín halogen, jak je používán zde, se vztahuje na F, Cl, Br nebo I.

Termín halogenalkenyl, jak je používán zde, se vztahuje na a nižšíalkenylovou skupinu, ve které jeden nebo více atomů vodíku je nahrazen halogenem. Příklady

halogenalkenylových skupin zahrnují 2-fluorethylen, 1-chlorethylen, 1,2-difluorethylen, trifluorethylen, 1,1,1 -trifluor-2-propylen apod.

Termín halogenalkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -OR⁶⁹, kde substituent R⁶⁹ je výše definovaná halogenalkylová skupina. Příklady halogenalkoxy skupiny zahrnují chlormethoxy skupinu, fluormethoxy skupinu, dichlormethoxy skupinu, trifluormethoxy skupinu apod.

Termín halogenalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na nižšíalkylovou skupinu, ve které jeden nebo více atomů vodíku bylo nahrazeno halogenem včetně, ale není to nikterak omezeno, trifluormethylu, trichlormethylu, difluormethylu, dichlormethylu, fluórmethylu, chlormethylu, chlorethylu, 2,2-dichlorethylu, pentáfluorethylu apod.

Termín „heterocyklický kruh“ nebo heterocyklický nebo heterocykl, jak je používán zde, se vztahuje na jakýkoliv 3-členný nebo 4-členný kruh obsahující heteroatom vybraný z atomu kyslíku, dusíku a síry; nebo 5-členný, 6-členný nebo 7-členný kruh obsahující jeden, dva, tři nebo čtyři atomy dusíku; jeden atom kyslíku; jeden atom síry; jeden atom dusíku a jeden atom síry; dva atomy dusíku a jeden atom síry; jeden atom dusíku a jeden atom kyslíku; dva atomy dusíku a jeden atom kyslíku; dva atomy kyslíku v nesousedních polohách; jeden atom kyslíku a jeden atom síry v nésousedních polohách; nebo dva atomy síry v nesousedůích polohách. 5-Čleňný kruh má 0-2 dvojné vazby a 6členné a 7-členné kruhy mají 0-3 dvojné vazby. Dusíkové heteroatomy mohou být případně kvatemizovány. Termín heterocykl také zahrnuje bicyklické skupiny, ve kterých jakýkoliv z výše uvedených heterocyklických kruhů je kondenzován na benzenový kruh nebo cyklohexanový kruh nebo jiný heterocyklický kruh (např. indolyl, dihydroindolyl, chinolyl, izochinolyl, tetrahydrochinolyl, tetrahydroizochinolyl, dekahydrochinolyl, dekáhydroizochinolyl, benzofůiyl, dihydrobenzofuryl nebo benzothienyl apod.

Heterocyklické skupiny zahrnují, ale není to nikterak omezeno, např. aziridinyl, azetidinyl, epoxid, oxetanyl, thietanyl, pyrrolyl, pyrrolinyl, pyrrolidinyl, pyrazolyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, pyridyl, tetrahydropyridyl, piperidinyl, homopiperidinyl, pyrazinyl, piperazinyl, pyrimidinyl,

pyridazinyl, oxazolyl, oxazolinyl, oxazolidinyl, izoxazolyl, izoxazolidinyl, morfolinyl, thiomorfolinyl, thiazolyl, thiazolinyl, thiazolidinyl, izothiazolyl, izothiazolidinyl, indolyl, chinolinyl, izochinolinyl, benzimidazolyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, oxetanyl, dihydrofuranyl, tetrahydrofuranyl, dihydropyranyl, tetrahydropyranyl, thienyl, dihydrothienyl, tetrahydrothienyl, triazolyl, triazolinyl, tetrazolyl, tetrazolinyl, izoxazolyl,

1.2.3- oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, oxadiazolinyl,

1.2.3- thiadiazolyl, 1,2,4-thiadiazolyl, 1,3,4-thiadiazolyl, 1,2,5-thiadiazolyl, thiadiazolinyl,

1.3- dithiolinyl, 1,2-dithiolyl, 1,3-dithiolyl, 1,3-dioxolinyl, didehydrodioxolanyl, 1,3-oxathiolinyl, oxathiolyl, pyrimidyl, benzothienyl apod. Heterocyklivké skupiny také zahrnují sloučeniny vzorce

kde X* je -CH2 nebo -O- a Y* je -C(O)- nebo [-C(R⁹²)2-]_V, kde substituent R⁹² je atom vodíku nebo Ci-C4alkyl, kde index v je 1,2, nebo 3, např. 1,3-benzodioxolyl,

1,4-benzodioxanyl apod. Heterocyklické skupiny také zahrnují bicyklické kruhy, např. chinuklidinyl apod.

Heterocyklické skupiny mohou být nesubstituované nebo substituované jedním až třemi substituenty, každý nezávisle vybraný z nižšíhoalkylu, hydroxy skupiny, alkoxy skupiny, thioalkoxy skupiny, amino skupiny, alkylamino skupiny, dialkylamino skupiny a halogenu. Navíc heterocyklické kruhy obsahující dusíku mohou být N-chráněny.

Termín (heterocykl)alkenyl, jak je používán zde, se vztahuje na heterocyklickou skupinu připojenou na nižší alkenylový radikál zahrnující, ale není to nikterak omezeno, pyrrolidinylethenyl, morfolinylethenyl apod.

Termín (heterocykl)alkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -OR⁶⁸, kde substituent R⁶⁸ je (heterocykl)alkylová skupina.

(·$

Termín (heterocykl)alkyl, jak je používán zde, se vztahuje na heterocyklickou skupinu připojenou na nižšíalkylový radikál zahrnující, ale není to nikterak omezeno, pyrrolidinylmethyl, morfolinylmethyl apod.

Termín (heterocykl)alkynyl, jak je používán zde, se vztahuje na heterocyklickou skupinu připojenou na nižšíalkynylový radikál zahrnující, ale není to nikterak omezeno, pyrrolidinylacetylenyl, morfolinylpropynyl apod.

Termín (heterocykl)oxy , jak je používán zde, se vztahuje na heterocyklickou skupinu připojenou na výchozí molekulovou část přes atom kyslíku (-O-).

. Termín skupina chránící hydroxy polohu,skupina chránící hydroxyl nebo skupina chrániči -OH, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny používané ke. chránění hydroxy skupin proti nežádoucím reakcím během postupů při syntézách. Běžně používané skupiny chránící hydroxy polohu jsou publikovány v T.H. Green and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd edition, John Wiley & Sons, New York( 1991). Takové skupiny chránící hydroxy polohu zahrnuj í;

methylether;, substituované methylethery zahrnující, ale není to nikterak limitováno methoxymethylether,’ methylthiomethylether, t-butylthiomethylether, (fenyldimethylsilyljmethoxymethylether, benzyloxymethylether, p-methoxybenzyloxymethylethér, (4-methoxyfehoxy)methýletber, t-butoxymethylethér, 2-methoxyethoxymethylether,

2,2,2-trichlorethoxymethylether, 2-(trimethylsilyl)ethoxymethylether, tetrahydropyranylether, tetrahydrothíopyranylether, tetrahydrofuranylether, tetrahydrothiofůranylether apod.

substituované ethylethery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 1-ethoxyethýlether, 1-methyl-1-methoxyethylether, 1-methyl-1-benzyloxyethylether, 2,2,2-trichlorethylether, trimethylsilylethylether, t-butylether apod.;

benzyl ether;

'ií • φ · · φφ φφ «φ φφφ φ φφφ φ » φφ φ φφφ φ φφφφφ φφ φφ φ φ φφ φφ φ φφ φ φφ φφφφ φφφ φφ φφφ φφφφ φφ φφ substituované benzylethery zahrnující, ale není to nikterak omezeno, p-methoxybenzylether, 3,4-dimethoxybenzylether, o-nitrobenzyíether, p-halogenbenzylether, p-kyanobenzylether, difenylmethylether, trifenylmethylether, apod.;

silylethery zahrnující, ale není to nikterak omezeno, trimethylsilylether, triethylsilylether, triizopropylsilylether, dimethylizopropylsilylether, diethylizopropylsilylether, dimethylthexylsilylether, t-butyldimethylsilylether, tbutyldifenylsilylether, tribenzylsilylether, trifenylsilylether, difenylmethylsilylether, apod.;

estery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, estery formiátu, estery acetátu, estery chloracetátu, estery dichloracetátu, estery trichloracetátu, estery trifluoracetátu, estery methoxyacetátu, estery fenoxyacetátu, estery pivaloátu, estery benzoátu, apod.;

Výhodné skupiny chránící hydroxy polohu zahrnují substituované methylethery, benzylether, substituované benzylethery, silylethery a estery.

Termín hydroxyalkyl, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu mající vzorec -R⁶⁵-OH, kde substituent R⁶⁵ je alkylenová skupina.

Termín odstupující skupina, jak je používán zde, se vztahuje na skupinu, která snadno odstupuje ze sloučenin za pomoci nukleofilu. Příklady odstupujících skupin zahrnují halogenidy (např. Cl, Br nebo Ij nebo sulfonát (např. mesylát, tosylát, triílát, apod.) apod.

Termín „N-chránicí skupina“ nebo „N-chráněná“, jak je používán zde, se vztahuje na ty skupiny, které jsou určeny ke chránění N-konce amino skupiny nebo peptidu nebo ke chránění amino skupiny vůči nežádoucím reakcím během postupů při syntéze. Běžně používané N-chránicí skupiny jsou publikovány v T.H. Greene a P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd edition, John Wiley & Sons, New York(1991). Nchránicí skupiny obsahují acylové skupiny, např. formyl, acetyl, propionyl, pivaloyl, Z-butylacetyl, 2-chloracetyl, 2-bromacetyl, trifluoracetyl, trichloracetyl, ftalyl, o-nitrofenoxyacetyl, α-chlorbutyryl, benzoyl, 4-chlorbenzoyl, 4-brombenzoyl, 4-nitrobenzoyl, apod.; sulfonylové skupiny, např. benzensulfonyl, p-toluensulfonyl apod.; skupiny tvořící ·· • · * 9 • 99

9 9 · · ·· · 99 • ·· ·· 9 • 9 9

Φ ·

999 ΦΦΦΦ ·· φφ · · ·

Φ · Φ Φ

9 9 9

9 9 φ *Φ ΦΦ karbamoyl benzyloxykarbonyl, p-chlorbenzyloxykarbonyl, p-methoxybenzyloxykarbonyl, p-nitrobenzyloxykarbonyl, 2-nitrobenzyloxykarbonyl, p-brombenzyloxykarbonyl, 3,4-dimethoxybenzyloxykarbonyl, 3,5-dimethoxybenzyl-oxykarbonyl, 2,4-dimethoxybenzyloxykarbonyl, 4-methoxybenzyloxykarbonyl, 2-nitro-4,5-dimethoxybenzyloxykarbonyl, 3,4,5-trimethoxybenzyloxykarbonyl, 1 -(p-bifenylyl)-1 -methylethoxykarbonyl, α,α-dimethyl-3,5-dimethoxybenzyloxykarbonyl, benzhydryloxy-karbonyl, /-butyloxykarbonyl, diizopropylmethoxykarbonyl, izopropyloxykarbonyl, ethoxykarbonyl, methoxykarbonyl, allyloxykarbonyl, 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl, fenoxykarbonyl, 4-nitro-fenoxykarbonyl, fluorenyl-9-methoxykarbonyl, cyklopentyloxykarbonyl, adamantyloxykarbonyl, cyklohexyloxykarbonyl, fenylthiokarbonyl apod.; alkylové skupiny, např. benzyl, trifenylmethyl, benzyloxymethyl apod.; a silylové skupiny, např. trimethylsilyl apod. Výhodné N-chránicí skúpiny jsou formyl, acetyl, benzoyl, pivaloyl, /-butylacetyl, fenylsulfonyl, benzyl, t-butyloxykarbonyl(Boc) a benzyloxykarbonyl(Cbz).

Termín thioalkoxy, jak je používán zde, se vztahuje na skupiny mající vzorec -SR⁹⁸, kde substituent R⁹⁸ je alkylová skupina. Výhodné skupiny substituentu R⁹⁸ jsou nižší alkylové skupiny.

Termín alkyl substituovaný thio skupinou, jak je používán zde, se vztahuje na alkylový radikál, ke kterému je připojená thiolová skupina (-SH).

Termín „S“ a „R“ konfigurace, jak je používán zde, je definován v IUPAC 1974 Rekommendations for Section E, Fundamental Stereochemistry, Pure Appl. Chem. (1976) 45,13-30.

Sloučeniny vynálezu mohou obsahovat asymetricky substituované atomy uhlíku. V důsledku toho, všechny stereoizomery sloučenin vynálezu jsou zahrnuty ve vynálezu, včetně racemických směsí, směsí diastereomerů, jakož i jednotlivých optických izomerů, včetně enantiomerů a jednotlivých diastereoizomerů sloučenin vynálezu podstatně volných bez jejich enantiomerů nebo jiných diastereomerů. Termín „podstatně volný“ znamená více jak 80% zbaveného dalších enantiomerů nebo diastereoizomerů sloučeniny, výhodněji více jak 90% zbaveného dalších enantiomerů nebo diastereoizomerů sloučeniny, více výhodněji více jak 95% zbaveného dalších enantiomerů nebo diastereoizomerů sloučeniny, • · ještě výhodněji více jak 98% zbaveného dalších enantiomerů nebo diastereoizomerů sloučeniny a nej výhodněji více jak 99% zbaveného dalších enantiomerů nebo diastereoizomerů sloučeniny.

Navíc sloučeniny obsahující možné geometrické izomery dvojných vazeb uhlíkuhlík a dvojné vazby dusík-uhlík jsou také zahrnuty v tomto vynálezu.

Jednotlivé stereoizomery sloučenin tohoto vynálezu mohou být připraveny jakýmikoliv způsoby, které jsou v rozsahu běžného stavu techniky. Tyto způsoby zahrnují stereospecifické syntézy, chromatografickou separaci diastereoizomerů, chromatografické rozlišení enantiomerů, přeměnu enantiomerů v enantiomemí směs na diastereomery, a pak chromatografické separování diastereoizomerů a regeneraci jednotlivých enantiomerů, enzymatické rozlišení, apod.

Z , . .

Stereospecifická syntéza zahrnuje použití příslušných chirálních výchozích látek a syntetických reakcí, které nezpůsobují racemizaci nebo inverzi stereochemie na chirálních centrech.

Diastereoizomemí směsi sloučenin vznikajících při synthetické reakci mohou být často separovány chromatografickými technikami, které jsou velmi dobře známi odborné veřejnosti.

Chromatografické rozlišení enantiomerů může být docíleno na chirálních chromatografických ionexech. Chromatografické sloupce obsahující chirální ionexy jsou komerčně dostupné. V praxi je racemát umístěn v roztoku a nanesen na sloupec obsahující chirální stacionární fázi. Enantiomery jsou pak separovány pomocí HPLC.

Rozlišení enatiomerů může být tako dosaženo přeměnou enantiomerů ve směsi na diastereoizomery reakcí s chirálními pomocnými látkami. Výsledné diastereoizomery mohou pak být odděleny sloupcovou chromatografií. Tato technika je zvláště užitečná, pokud sloučeniny, které mají být separovány, obsahují karboxyl, amino skupinu nebo hydroxylovou skupinu, které budou tvořit sůl nebo kovalentm vazbu s chirální pomocnou látkou. Jako chirální pomocné látky jsou zejména užitečné chirálně čisté aminokyseliny, ·· · · · · · organické karboxylové kyseliny nebo organosulfonové kyseliny. Jakmile jsou diastereoizomery separovány chromatografií, mohou být jednotlivé enantiomery regenerovány. Chirální pomocné látky mohou být opakovaně regenerovány a používány znova.

Enzymy, nápř. esterasy, fosfatasy a lipasy, mohou, být užitečné pro rozlišení derivátů enantiomerů v enantiomerní směsi. Například může být připraven esterový derivát karboxylové skupiny ve sloučeninách, které mají být odděleny. Určité enzymy budou selektivně hydrolyzovat pouze jedny enantiomery ve směsi. Pak může být výsledná enantiomemě čistá kyselina oddělena od nehydrolyzovaného esteru.

Navíc sol váty a hydráty sloučenin vzorce I a II a III jsou zahrnuty v tomto vynálezu.

Pokud jakákoliv proměnná (např. R¹, R², R³, m, n, atd.) se vyskytuje více jak jednou v jakémkoliv substituentu nebo ve sloučenině vzorce I nebo II nebo III nebo v jakémkoliv jiném vzorci zde, je její definice při každém výskytu(případě) nezávislá na svojí definici v každém dalším výskytu (případě). Navíc slučování substituentů je povoleno pouze, pokud takové slučování vede ke stabilním sloučeninám. Stabilní sloučeniny jsou sloučeniny, které mohou být izolovány ž reakční směsi ve výhodném stupni čistoty.

Tento vynález je uveden tak, aby zahrnoval sloučeniny mající vzorce I a II a III, pokud jsou připraveny synthetickými postupy nebo metabolickými procesy. Příprava sloučenin vynálezu metabolickými postupy zahrnuje ty, které se vyskytují v lidském nebo zvířecím těle (in vivo} nebo postupy vyskytující se in vitro.

Sloučeniny vynálezu mohou být připraveny podle způsobů popsaných ve schématech 1-5 uvedených níže.

Ve všech schématech budou znázorněny způsoby, kde substituent R^l je substituent karboxylové kyseliny nebo esteru karboxylové kyseliny. Odborné veřejnosti bude zřejmé, že jiné substituenty R¹ mohou (a) být obdrženy buď od karboxylové kyseliny anebo od • · esteru karboxylové kyseliny, (b) mohou být zavedeny způsoby podobnými k těm, které se používají k zavedení karboxylové kyseliny nebo esteru karboxylové kyseliny nebo (c) mohou být zavedeny jinými způsoby,, které jsou obecně známé z dosavadního stavu techniky.

Navíc ve všech schématech budou znázorněny způsoby, kde substituenty R⁴, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹ a R¹⁰ jsou atom vodíku. Odborné veřejnosti bude zřejmé, že mohou být připraveny jiné sloučeniny, kde jeden nebo více těchto substituentů je jiný než atom vodíku, způsoby, které jsou analogické kjiž popsaným ve schématech nebo jinými způsoby, které jsou obecně známé z dosavadního stavu techniky.

Navíc, ve všech schématech budou znázorněny způsoby, ve kterých se získají sloučeniny vynálezu mající výhodnou relativní konfiguraci. Odborné veřejnosti bude zřejmé, že mohou být připraveny sloučeniny vynálezu mající jinou relativní konfiguraci způsoby, které jsou analogické kjiž popsaným ve schématech nebo jinými způsoby, které jsou obecně známé z dosavadního stavu techniky.

Navíc ve všech schématech budou znázorněny způsoby, kde X je -C(=O)-NH-. Odborné veřejnosti bude zřejmé, že mohou být připraveny jiné skupiny X způsoby, které jsou analogické kjiž popsaným ve schématech nebo jinými způsoby, které jsou obecně známé z dosavadního stavu techniky.

Podle schéma 1 se substituovaný pyrrolidin 2 připraví reakcí akroleinu s esterem Nchráněné α-aminokyseliny 1 (P¹ je N-chránicí skupina, výhodně benzylová skupina apod. a P² je skupina chránící karboxylovou kyselinu , výhodně t-butylová skupina apod.) v inertní rozpouštědle (např. toluen apod.) v přítomnosti kyselého katalyzátoru (např. kyselina octová apod.), následně ustanovení rovnováhy pomocí báze (např. triethylamin apod.) a separací izomerů chromatografií. Alkohol 3 se připraví redukcí aldehydové skupiny na alkohol pomocí redukčního činidla používaného k redukci aldehydu na alkohol (např. borohydrid sodný apod.) v inertním rozpouštědle (např. methanol apod.) a následující chromatografickou separací izomerů. Na alkohol 3 se zavede skupina P chrániči hydroxy polohu (výhodně silylová chrániči skupina, např. t-butyldimethylsilyl apod.) použitím standardních způsobů k chránění alkoholu, čímž se získá sloučenina 4. Oxidace vinylové ··

C. ' * · · · • * · • · · · · · f .

' b > .

skupiny sloučeniny 4 na aldehyd se dosáhne reakcí sloučeniny 4 pomocí OsC^ a N-oxidu

N-methylmorfolinu, čímž se získá odpovídající diol. Tento diol se pak nechá reagovat sjodistanem sodným, čímž se získá aldehyd 5. K získání alkoholu 6 mohou být substituenty R³ zavedeny pomocí reakce aldehydu 5 s Grignardovým činidlem (např. R³MgBr apod.).Oxidace alkoholu 6 (např. Swemovou oxidací apod.) poskytne keton 7. Redukční aminace ketonu 7 (např. reakcí s octanem amonným a kyaiioborohydridem sodným v methanolu apod.) poskytne amin 8, který se pak může dále funkcionalizovat úplným zavedení substituentu R²-X- (např. reakcí aminu s acylačním činidlem, např. anhydridem kyseliny octové apod. nebo jinými acylačními způsoby). Následná chromatografická separace diastereoizomerů poskytne 9a. Další diastereoizomerický amin ' 9b může být také izolován a dále transformován podle schéma 1.

Odstranění skupiny P³ chránící hydroxy polohu (např. reakcí se zdrojem iontu fluoridu, např. fluorid tetrabutylamonný apod., pokud P je silylová chránící skupina) poskytne alkohol 10. Transformace hydroxy skupiny alkoholu 10 umožní zavedení různých substituentů Y.

Například alkylace hydroxy skupiny poskytne ethery 11. Sejmutím chránící skupiny na dusíku (např. kde P¹ je benzylová skupina, hydrogenaci) se dosáhne sloučeniny 12' a následná hydrolýza esteru (např. kyselinou (HCl)) poskytne sloučeninu 12 vynálezu.

Oxidace hydroxy skupiny 10 (např. Swemovou oxidací apod.) poskytne aldehyd

13. Oxidace aldehydu 13 (např..pomocí NaC10₂ apod.) poskytne karboxylovou kyselinu

14. Substituent karboxylové kyseliny 14 může být používán k zavedení různých dalších funkčních skupin v substituentu Y. Například karboxylová kyselina může být esterifikována (např. reakcí s diazomethanem nebo ethanolem a DCC apod.) nebo karboxylová kyselina nebo její aktivovaný derivát se může nechat reagovat s aminy, čímž se získá sloučenina 15 (kde -C(=O)-R²² znázorňuje ester nebo amid). Sejmutí chránící skupiny na dusíku (např. kde P¹ je benzylová skupina hydrogenaci) poskytne sloučeninu 16' a následná hydrolýza esteru (např. kyselinou (HCl)) poskytne sloučeninu 16 vynálezu.

Deriváty aldehydické skupiny 13 nebo skupina karboxylové kyseliny sloučeniny 14 může být používána k zavedení substituentů Y, které jsou -CN nebo různé heterocykly, podle způsobů známých odborné veřejnosti a podle specifických způsobů zde znázorněných příklady.

Reakce aldehydu 13 s nižšímalkyl-Grignardovým činidlem nebo s nižšímalkenylGrignardovým činidlem následovaná oxidací (např. Swemova oxidace apod.) poskytne ketony 17, kde substituent R²² je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl. Sejmutí chrániči skupiny na dusíku (např. kde P¹ je benzylová skupina hydrogenací) poskytne sloučeninu 18' a následná hydrolýza esteru (například kyselinou (HC1) poskytne sloučeniny 18” vynálezu.

Sloučeniny, kde substiuent Y je amino skupina nebo derivát amino skupiny, mohou být připraveny podle schéma 2. Oxidace aldehydu 2 (např. pomocí AgO nebo NaCKT apod.) poskytne karboxylovou kyselinu 19. Curtiův přesmyk karboxylové kyseliny 19 (např. reakce s DPPA, EtsN a benzylalkoholem apod.) a následovaná chromatografickou separací diastereoizomerů poskytne amid 20, kde P⁴ je N-chránicí skupina (nápř. benzyloxykarbonyl apod.). Transformace analogická ktěm, které se používají při konvertování sloučeniny 4 na sloučeinu 9a a 9b ve schéma 1, umožňuje konverzi sloučeniny 20 na 21a a 21b, která může být separována chromatografií. Odstranění chrámci skupiny P⁴ (např. selektivní hydrogenací). poskytne sloučeninu 22. Další derivatizace amino skupiny umožní zavedení substituentů Y, které jsou deriváty aminu. Sejmutí chrámci skupiny z dusíku (např. kde P¹ je benzylová skupina hydrogenací) a následná hydrolýza esteru (např. pomoci kyseliny (HC1)) poskytne sloučeniny vynálezu, kde Y je amino skupina nebo derivát aminu.

Olefmace aldehydu 13 (např. pomocí PhjPCfL apod.), následovaná hydrogenací (způsobující sejmutí chránící skupiny z dusíku (např. kde P¹ je benzylová skupina) a nasycení olefinu, poté hydrolýza esteru (např. kyselinou (HC1)) poskytne sloučeniny vynálezu, kde Y je nižšíalkyl.

Podle schéma 3, oxidace vinylové skupiny sloučeniny 4 na diol (např. OsO₄ a Noxid N-methylmorfolinu apod.) poskytne diol 23. Odstranění N-chránicí skupiny P¹ (např. P¹ je benzylová skupina hydrogenací) poskytne pyrrolidin 24. Další zavedení N-chránicí *· » « • · skupiny P⁵, která je nestálá v kyselém prostředí, (např. t-butoxykarbonyl apod.) poskytne sloučeninu 25. Transformace sloučeniny 25 na aldehyd 26a a 26b může být dosaženo způsobem, který je analogický ke konverzi sloučeniny 4a na sloučeninu 10 a sloučeniny 10 na sloučeninu 13, jak je uvedeno ve schéma 1. Sloučenina 26a a 26b mohou být separovány chromatografií.

Olefinace sloučeniny 26a (např. pomocí Ph3PCH2 nebo trifenylfosfin/methylenchlorid/n-BuLi nebo I'Ph3P⁺CH2CH3/KotBu apod.) poskytne sloučeninu 27, kde Y, je olefinický substituent. Sejmutí skupiny P⁵ chránící dusík hydrolýza esteru za kyselých podmínek poskytne sloučeniny vynálezu 28, kde Y je olefinický substituent.

V dalším jiném způsobu uvedeném ve schéma 4 je na hydroxy skupinu alkoholu 3 zavedena skupina P⁶ chránicí hydroxy polohu, která je nestálá v bazickém prostředí,(např. acetyl apod.), čímž se získá sloučenina 29. Oxidace vinylové skupiny sloučeniny 29 pomocí OsO₄ a N-oxidu N-methylmorfolinu poskytne diol 30. Odstraněním chránicí skupiny P¹ (např. hydrogenací apod.) se získá pyrrolidin 31. Další zavedení N-chránicí skupiny P⁵, která je nestálá v kyselém prostředí, (např. t-butoxykarbonyl apod.) poskytne sloučeninu 32. Selektivní zavedení chránicí skupiny na primární alkohol sloučeniny 32 pomocí skupiny P⁷ chránicí hydroxy polohu (např. silylová chránicí skupina, např. ťriisopropylsilyl apod.) poskytne sloučeninu 33. Oxidace sloučeniny 33 (např. Swemovou oxidací apod.) poskytne keton 34. Redukční aminace ketonu 34 (např. pomocí reakce s octanem amonným a kyanoborohydridem sodným v methanolu apod.) poskytne amin 35, který se pak může dále fiinkcionalizovat k dokončení zavedení substituentu R -X- (např. pomocí reakce aminu s acylačním činidlem, např. anhydridem kyseliny octové apod. nebo dalšími acylačními způsoby) a následná chromatografická separace diastereoizomerů poskytne sloučeninu 36a. Další diastereoizomemí aminy 36b mohou bý také izolovány a , dále transformovány podle tohoto schéma.

Selektivní odstranění skupiny P⁶ chránicí hydroxy polohu ve sloučenině 36a (např. pomocí K2CO3 v methanolu apod.) poskytne alkohol 37. Oxidace alkoholu na aldehyd (např. Swemovou oxidací apod.) poskytuje sloučeninu 38. Aldehyd může sloužit jako prekurzor pro různé substituenty Y ve sloučeninách vynálezu. Například olefinace · · · · · · · ··· ·· ··« ···· <· sloučeniny 38 (např. pomocí PI13PCH2 nebo trifenylfosfin/methylenchlorid/n-BuLi nebo Γ Ph₃P⁺CH2CH₃/KOtBu apod.) poskytne sloučeninu 39, kde Y je olefmický substituent. Odstranění skupiny P⁷ chrániči hydroxy polohu (např. pomocí zdroje fluoridového iontu, např. fluorid tetrabutylamonný apod.) poskytne alkohol 40.

Alkohol může sloužit jako prekurzor pro různé substituenty R ve sloučeninách vynálezu. Například alkohol 40 může být oxidován na aldehyd (například DessMartinovou oxidací apod.), čímž se získá sloučenina 41. Aldehyd 41 se může nechat reagovat s Grignardovým činidlem (R¹⁴MgBr apod.) nebo jiným organokovovým činidlem (např. organolithiovým činidlem, např. R¹⁴Li apod.), čímž se získá sloučenina 42 jako směs alkoholových diastereoizomerů, které mohou být oxidovány (např. Dess-Martinovou oxidací apod.) za vzniku ketonu 43. Redukce ketonu 43 (např. pomocí borohydridu sodného v ethanolu apod.) poskytne alkohol 42b jako majoritní izomer, který může být izolován chromatografií. Sejmutí chránící skupiny P⁵ z dusíku a hydrolýza esteru za kyselých podmínek poskytne sloučeniny vynálezu 44a nebo 44b, kde Y je olefmický substituent.

Alkylace alkoholu 42a nebo 42b poskytne ethery 45a nebo 45b. Sejmutí chránící skupiny P⁵ z dusíku a hydrolýza esteru za kyselých podmínek poskytne sloučeniny vynálezu 48a nebo 48b, kde Y je olefmický substituent.

Podle schéma 5 poskytne reakce ketonu 43 s Grignardovým činidlem (R^37aMgBr apod.) nebo s jinými organokovovými činidly (např. organolithiovými činidly, např. R^37aLi apod.) poskytne alkoholy 46a a 46b jako směs alkoholových diastereoizomerů, které mohou být separovány chromatograficky. Sejmutí chránící skupiny P⁵ z dusíku a hydrolýza esteru za kyselých podmínek poskytne sloučeniny vynálezu 47a nebo 47b, kde Y je olefmický substituent.

Alkylace alkoholu 46a nebo 46b poskytne ethery 49a nebo 49b. Sejmutí chránící skupiny P⁵ z dusíku a hydrolýza esteru za kyselých podmínek poskytne sloučeniny vynálezu 50a nebo 50b, kde Y je olefmický substituent.

Estery nebo prekurzory léčiv sloučenin vynálezu mohou být připraveny podle způsobů, které jsou známé z dosavadního stavu techniky.

·'· ·· «φ ··

·>· φ.φ

SCHÉMA 1

« ·· ·· ·· • fefe · « ·· · fe · · · · · • ••fe fe *···· · • fefe ·· ···· ·»· '·· ··· ···· fe· fe· • fe ·

SCHÉMA 1 (pokrač.)

OP²

R²⁰O—x

R²C(O)HN,,, .OP²

R³ Ř1 o r²⁰or²⁰o-.

FČCfOÍHN,, _OP2 R⁴C(O)HN, / \ _OH _r3 v V —^· Π <

^R H O

12'

R²M

R²C(O)HN,,

R·⁵ H O

O

HO-%

OP²

Ύ

R^J pí o

O

R²²—

R³ O

-.•'ϊΓ--AW ,22, ^R H O

16’

R C(0> je ester nebo amid • · · ·

·· ··· ··· ····

SCHÉMA 1 (pokiač.)

O r²M

16’

R²C(O)HN,,_ .OH

R²C(O)HM,

r?3 i ^R H O

18’

OP*

R²²je nižšíalkyl nebo nižšíalkenvl

O

R²²-^.

R²C(O)HN_/? / \ OH

Ϊ.

^R H O

18’ ····

SCHÉMA 2

h₂n.

R²C(O)HN,,_

OP²

22a ·· '· · ·· ·· ·· ·· • φ φφφφ φ · · · φ φφ ··

SCHÉMA 3

25_// ,0

R²C(O)HN_Zz>

<Ύ

R³ ρ5 ο

26a

Η— _ΟΡ2 R²C(O)HN,

,ΟΡ

R³ p5 o

26b r²c(O)hn_Z/ ΛΛ _op2 —- 1Γ^N T

R^á p5 o

R^ZC(O)HN,, \ _OP2

R p5 o

Y je alken

26a

SCHÉMA 4 • · ··

·· ·· ·· • · · · « · • · '· · · • · · · · ·

Φ · · ♦ « ···· ·· ·· »ϊ

SCHÉMA 4 (pokračj

Y je alken nebo halogenalken

'9 9 9 9

SCHÉMA 4 (pokrač.)

R²C(O)HN_Z, Γ~\ _οη '^ΥΎ

Η Ο

OR a

37a

,14'

SCHÉMA 4 (pokrač.)

• »·	4 ··	44
• '4 ·	44 · 9	•	9	4
• · ·	•	•	4	4
• 44 ·· .44	4 4 •44 4444	• 4 9	•	4

.4 4

44b *

il* k·· *· ·'· ··,··

!ι

·· • v • · '·« • φ ec βίβ ββί?

·· ·· • · · · • · · · • · · · • · · ·

Φ β 68

SCHÉMA 5 (pokrač.)

9«

Další sloučeniny vynálezu mohou být snadno připraveny ze sloučenin popsaných zde použitím technik známých z odborné chemické literatury. Potřebné způsoby jsou známy a mohou je snadno provádět ti, kteří mají obecné znalosti techniky oboru.

Klíčové meziprodukty přípravy sloučenin vynálezu zahrnují následující: (D .0

H-

kde P¹ je N-chránicí skupina (výhodně benzylová skupina nebo substituovaná benzylová skupina) a P je skupina chránící karboxylovou kyselinu (výhodně nižšíalkylová skupina, zejména t-butyl); výhodně mohou být P a P selektivně odstraněny/sejmuta chránící skupina; nebo jejich soli (2)

OP^Z o

kde P¹ je N-chránicí skupina (výhodně benzylová skupina nebo substituovaná benzylová skupina) a P² je skupina chránící karboxylovou kyselinu (výhodně nižšíalkylová skupina, zejména t-butyl); a P je atom vodíku nebo skupina chrániči hydroxy polohu (výhodně acylová chránící skupina, např. acetyl apod. nebo silylová chránící skupina, např. t-butyldimethylsilyl apod.); výhodně mohou být P ,P a P selektivně odstraněny/sejmuta chránící skupina; nebo jejich soli;

(3) p⁴hn

·· • · ·· ·« • · ·· *® • · · · • · · · • · · · · • · · · ·* ββ kde P¹ je N-chránicí skupina (výhodně benzylová skupina nebo substituovaná benzylová skupina) a P² je skupina chrániči karboxylovou kyselinu (výhodně nižšíalkylová skupina, zejména t-butyl); a P⁴ je atom vodíku nebo N-chránicí skupina (výhodně karbamátová N-chránicí skupina, např. benzyloxykarbonyl apod.); výhodně mohou být P',P² a P⁴ selektivně odstraněny/sejmuta chrániči skupina; nebo jejich soli;

(4)

OP^Z

O

,OP^Z nebo

OP skupina (výhodně N-chránicí skupina nestálá v kyselém kde P⁵ je N-chránicí prostředí, např. t-butyloxykarbonyl apod.) a P je skupina chránící karboxylovou kyselinu

(výhodně nižšíalkylová skupina, zejména t-butyl); a P⁶ je atom vodíku nebo skupina chránící hydroxy polohu (výhodně skupina chránící hydroxy polohu, která je néstálá v bazickém prostředí, např. acetyl apod.)); a P⁷ je skupina chránící hydroxy polohu (výhodně silylová chránící skupina, např. triizopropylsilyl apod.); výhodně mohou být P²,P³, P⁶ a P⁷ selektivně odstraněny/sejmuta chránící skupina; nebo jejich soli; a

kde P⁵ je N-chránicí skupina (výhodně N-chránicí skupina nestálá v kyselém prostředí, např. t-butyloxykarbonyl apod.) a P je skupina chránící karboxylovou kyselinu (výhodně nižšíalkylová skupina, zejména t-butyl); a P⁶ je atom vodíku nebo skupina chránící hydroxy polohu (výhodně skupina chránící hydroxy polohu, která je nestálá v bazickém prostředí, např. acetyl apod.)); a P⁷ je skupina chránící hydroxy polohu (výhodně silylová chránící skupina, např. triizopropylsilyl apod.); a substituent R je definován zde (výhodně nižšíalkyl nebo halogennižšíalkyl; nejvýhodněji methyl nebo trifluormethyl); výhodně mohou být P²,P⁵, P⁶ a P⁷ selektivně odstraněny/sejmuta chránící skupina; nebo jejich soli; a

Všechny patenty, přihlášky vynálezů a odkazy na literaturu citované v tomto popisu jsou zde pro úplnost doplněny jako odkaz. V případě nesrovnalostí budou předložené údaje převažující.

Činidla potřebná pro syntézu sloučenin vynálezu jsou snadno dostupná z mnoha komerčních zdrojů, např. Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI, USA); Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA); a Fluka Chemical Corp. (Ronkonkoma, NY, USA); Alfa Aesar (Ward Hill, MA 01835-9953); Eastman Chemical Company (Rochester, New York 1.46523512); Lancaster Synthesis lne. (Windham, NH 03087-9977); Spectrum Chemical Manufacturing Corp. (Janssen Chemical) (New Brunswick, NJ 08901); Pfaltz and Bauer (Waterbury, CT, 06708). Sloučeniny, které nejsou komerčně dostupné mohou být připraveny použitím způsobů známých z odborné chemické literatury.

Následující příklady jsou určeny k ilustraci přípravy sloučenin bez jakékoliv

Příklad 1

Hydrochlorid (±)-(2R,3 R,5 R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)peňtyl-3-(methoxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R)- a (±)-(2S,3S,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (poměr 8:1).

Akrolein (8 ml, 120 mmol) se přidá do roztoku t-butyl-N-benzylglycinátu (4,34 g,

19,6 mmol) a kyseliny octové (5 kapek) v toluenu (100 ml). Roztok se zahřívá při refluxu. Po 1 hodině se reakce ochladí na teplotu přibližně 50°C a přidá se 3 ml akroleinu. Reakce se zahřívá při refluxu po dobu další 2 hodiny a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu 5% ethylacetát/hexany, čímž se získá směs tbutylesterů (±)-(2S,3R,5R)- a (±)-(2S,3S,5R)-Í-benzyl-2-vinyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny v podobě oleje (výtěžek: 2,78 g, 45%). Směs aldehydů se uvede v rovnováhu na poměr 8:1 mícháním surového produktu s triethylaminem (0,5 ml) v ethylacetátu při pokojové teplotě, poté následuje odpaření rozpouštědel.

*H NMR (CDC13)(pouze majoritní izomer): δ 1,45 (s, 9H), 2,26 (ni, 1H), 2,69 (m, 1H), 3,49 (dd, J=7,8, 3,0 Hz, 1H), 3,61 (d, J=13,5 Hz, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,94 (d, J=13,5 Hz, 1H), 5,22-5,33 (dvě dd, 2H), 5,7 (ddd, J=17,7, 10,2, 7,8 Hz, 1H), 7, 21-7,35 (m, 5H), 9,71 (d,J=l,2Hz, 1H).

MS(M+H)⁺= 316.

B. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-v!ny!-3-(hydroxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Roztok 8:1 směsi t-butylester (±)-(2S,3R,5R)- a (±)-(2S,3S,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (6,0 g, 19,0 mmol), připravený podle způsobu popsaného v příkladu 1A, ve 100 ml methanolu se ochladí na teplotu 0°C a nechá reagovat s borohydridem sodným(0,72 g, 19,0 mmol). Směs se míchá po dobu 0,5 hodiny, ohřeje na pokojovou teplotu a míchá po dobu další 1 hodiny. Reakce se zháší vodným chloridem amonným a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi vrstvu ethylacetátu a vodu. Organická vrstva se suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbylý olej se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím gradientu 20-30 % ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 4,0 g, 66%).

’H NMR (CDC13): δ 1,46 (s, 9H), 1,80 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 3,48-3,53 (m, 2H), 3,08 (d, 2H), 3,91 (d, 2H), 5,17-5,22 (m, 2H), 5,70 (m, 1H), 7,23-7,34 (ni. 5H). '

MS (M il)' 318.

1C. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R)-1 -Benzyl-2-vinyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-1 -benzyl-2-vinyl-3-(hydroxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (3,6 g, 11,4 mmol), ter/-butyldimethylsilylchloridu (3,7 g, 24,5 mmol) a imidazolu (2,8 g, 41,2 mmol) v 80 ml DMF se míchá při pokojové teplotě

O.

po dobu 1,5 hodiny. Reakce se zředí ethylacetatem, promyje vodou a solankou, suší nad MgSCL a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina, jako bezbarvý olej (výtěžek: 3,5 g, 71%).

’H NMR (CDC1₃): δ 0,02 (d, 6H), 0,86 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 1,67 (ddd, 1H), 2,11 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 3,40-3,70 (m, 6H), 3,90 (d, 2H), 5,11-5,19 (m, 2H), 5,69 (ddd, 1H),

7,20-7,30 (m, 5H).

MS (M+H)⁺= 432.

TBDMSO—<,

Ή.0Ά' _zO‘Bu o Ph

ID. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-Benzyl-2-formyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Oxid osmičelý (20 mg) se přidá při pokojové teplotě do roztoku t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-1 -benzyl-2-vinyl-3-(t-.butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (3,5 g, 8,12 mmol) v 60 ml 8:1 aceton/vodě a N-oxidu Nmethylmorfolinu (3,0 g, 25,6 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 6 hodin a zháší nasyceným vodným roztokem Na2S2O3. Směs se míchá po dobu dalších 10 minut a rozpouštědlo se odstraní. Nahnědlý zbytek se rozdělí mezi vrstvu dichlormethanu a vody. Organická vrstva se suší nad MgSO4 a koncentruje ve vakuu, čímž se získá meziprodukt diol jako olej (~3,8 g),.který se použije bez dalšího čištění.

MS(surový): (M+H)⁺ = 466.

Surový diol se rozpustí v 6:1 tetrahydrofuran(THF)/vodě (50 ml) a nechá reagovat s jodistanem sodným (3,0 g, 14,0 mmol). Směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny a zředí ethylacetátem, promyje vodou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Surový aldehyd se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 3%

ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 1,6 g, 46%).

’H NMR (CDC1₃): δ 0,03 (d, 6H), 0,86 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,72 (m, 1H), 2,262,45 (m, 2H), 3,53-3,71 (m, 5H), 3,84. (d, 1H), 3,93 (d, 1H), 7,27-7,31· (m, 5H), 9,32 (d, 1H).

MS(M+H)⁺= 434.

IE. t-Butýlester (±)-(2R,3R,5R)-l-Benzyl-2-(l-oxo-3-ethyl)pentyl-3-(tbutyldimethylsilyloxy-methyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Suchá baňká obsahující hořčík(0,14 g, 5,83 mmol), pod atmosférou argonu, se naplní IQ ml suchého THF a 3 kapkami dibromethanu. Poté následuje přidání l-brom-2ethylbutanu (0,95 g, 5,83 mmol). Reakční směs se zahřívá při refluxu po dobu 45 minut, dokud většina hořčíku nezreaguje. Reakční směs se ochladí na -30°C a po kapkách se přidá kyselina t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzýl-2-formyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,5 g, 1,15 mmol) v THF (6 ml). Reakce se pomalu zahřívá při teplotě -10°C po dobu přibližně 2 hodin a zháší vodným chloridem amonným. Výsledná kašovitá směs se zředí ethylacetátem a promyje vodou, solankou a suší nad MgSO₄ a koncentruje. Surový alkoholový produkt, olej(~ Ó,85 g), se se použije bez dalšího čištění.

MS(M+H)⁺ = 520.

Připraví se roztok oxalylchloridu (2,5 ml, 2M v CH2CI2) v 10 ml bezvodého dichlormethanu a udržuje se pod atmosférou dusíku při teplotě -78°C a pomalu se do

roztoku přidá DMSO (0,77 ml, 9,83 mmol). Směs se míchá po dobu 15 minut a nechá reagovat se surovým alkoholem připraveným výše, přibližně 0,85 g, v 5 ml bezvodého dichlormethanu. Roztok se míchá po dobu 1 hodiny a do reakční směsi se pomalu přidá triethylamin (2,3 ml, 16,4 mmol). Roztok se pak pomalu ohřeje na pokojovou teplotu a zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou, suší nad MgSCL a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 3% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina, jako olej (výtěžek: 0,35 g, 66%).

MS(M+H)⁺= 518.

1F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)- a (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-Benzyl-2-(l-amino-3ethyl)-pentyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-Butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3-ethyl)pentyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,20 g, 0,39 mmol), octanu amonného (30 ekviv.) a kyanoborohydridu sodného (10 ekviv.) v 5 ml methanolu se zahřívá při refluxu po dobu 24 hodin s příležitostným přidáním dalších 60 ekvivalentů octanu amonného a 20 ekvivalentů kyanoborohydridu sodného. Rozpouštědlo se odpaří. Výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy dichlormethanu a vody. Organická vrstva se suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje. Produkt se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30-50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 130 mg, 64%).

’H NMR (CDCI3) δ 7,30 (m, 5H), 4,91 (s, 1H), 3,53 (m, 2H), 3,08 (m, 1H), 2,88 (m, 1H), 2,35 (m, 1H), 1,85 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,20-1,40 (m, 7H), 0,88 (s, 9H), 0,85 (m, 6H), 0,03 (s, 6H).

MS(M+H)⁺ = 519.

1G. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-benzyl-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

_r Roztok t-Butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R)- a (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(lamino-3-ethyl)pentyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové r

kyseliny (110 mg, 0,21 mmol) a anhydrid kyseliny octové (214 mg, 2,1 mmol) v 10 ml ' dichlormethanu se míchá po dobu 1 hodiny. Rozpouštědlo a přebytek anhydridů kyseliny octové se odstraní ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 85 mg, 72%).

’H NMR (CDC1₃) δ 7,28 (m, 5H), 5,14 (d, J=14Hz, IH), 4,36 (m, IH), 3,95 (m, 2H), 3,62 (m, IH), 3,52 (m, IH), 3,45 (m, IH), 2,98 (m, IH), 1,98 (s, 3H), 1,60 (m, , 2H), 1,43 (s, 9H), 1,20-1,40 (m, 7H), 0,88 (s, 9H), 0,80 (m, 6H), 0,04 (s, 6H).

MS(M-rH)‘ = 561. .

IH. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(hydroxy-methyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-Butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-amino-3-ethyl)pentyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5- karboxylové kyseliny (85 mg, 0,15 mmol) v suchém THF(5 ml) se připraví a udržuje při pokojové teplotě pod atmosférou dusíku. Pomalu se do roztoku přidá fluorid tetrabutylamonný (1 M v THF, 0,23 ml) pomalu. Reakčni směs se míchá po dobu 1 hodiny. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30-50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pěna (výtěžek: 41 mg, 61 %).

Ή NMR (CDC1₃) δ 7,20-7,35 (m, 5H), 5,20 (d, J=14Hz, 1H), 4,28(m 1H), 4,93 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,50 (m, lří), 3,23 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 1,98 (s, 3H), 1,62 (m, 1 Η), 1,43 (s, 9H), 1,15-1,40 (m, 7H), 0,80 (m, 6H).

MS(M · 11) 447.

11. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(methoxy- methyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Směs t-Butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3(hydroxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (40 mg, 0,09 mmol) a oxidu stříbrného (200 mg, 0,90 mmol) ve 3 ml jodmethanu se zahřívá při refluxu po dobu 3 hodin. Reakce se ochladí, filtruje a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu., čímž se získá požadovaný produkt j ako surový olej.

MS(M+H)⁺ = 461.

O^lBu

Υ

O

1J. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Směs surového t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (32 mg, 0,07 mmol), připraveného podle způsobu popsaného v příkladu 11, a mravenčan amonný (130 mg, 2, 1 mmol) v ethanolu (5 ml) se zahřívají při refluxní teplotě za přítomnosti katalytického množství 10% palladia, aktivním uhlí po dobu 1,5 hodin. Reakce se filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů a následovně 10% methanol/dichlormethanem, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 16 mg, 47%).

MS(M+H)⁺ = 371.

ΌΗ

1K. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (15 mg) se rozpustí v 6 N HCI ve vodě (1 ml) a míchá při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo se odstraní za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka.

00 0 ·» *» ·* ♦ · * 0 · 0 0 0 0 00 ·

00 0 0000· 0 0 0 0 ······«

000 0 0 0 · 0 · • 9 '· 00 ··»<*·· · · · · ‘Η NMR(d₆-DMSO) δ 8,10 (d, J=14Hz, 1Η), 4,28 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,47 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,15-1,42 (m, 7H), 0,82 (t, J=12,5Hz, 3H), 0,79 (t, J=12,5Hz, 3Hý

MS(M+H)⁺ = 315,(M-H) = 313.

Příklad 2

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

2A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-Benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok oxalylchloridu (0,11 ml, 2M v ČH2CI2) v 5 ml bezvodého dichlormethanu se připraví a udržuje, pod atmosférou dusíku, při teplotě -78°C a do roztoku se pomalu přidá ĎMSO (32 mg, 0,42 mmol). Směs se míchá po dobu 15 minut a nechá reagovat s tbutylesterem (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxyměthyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (38 mg, 0,085 mmol) v 5 ml dichlormethanu. Roztok se míchá po dobu 1 hodiny a do reakčni směsi se pomalu přidá triethylamin(86 mg, 0,85 mmol). Roztok se zahřeje na pokojovou teplotu a zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 3% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 39 mg, 97%).

^lH NMR (CDCb) δ 9,68 (d, J=l,0Hz, 1H), 7,28 (m, 5H), 5,06 (d, J=14Hz, 1H),

4,38 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,45 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,20 (m, 2H),

1,98 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,25-1,40 (m, 7H), 0,82 (m, 6H).

*· 9 ·* 9* '9·

9 * 99 ♦ 9 · · · «

99 9 9 · 9 · 9 • · · · · 9 9 9 9 9 9

9 9 · 9 9 9 9 9 • 99 *>· 9·· 9Φ99 99 9«

MS(M+H)⁺ = 445.

2B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3karboxyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Roztok NaC10₂ (0,16 g) a NaH₂PO₄.H₂O (0,17g) ve vodě (1 ml) se přidá do roztoku t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (35 mg, 0,079 mmol) a 2-methyl-2-butenu (0,5 ml) rozpuštěného v t-BuOH(l,5 ml) a acetonitrilu (1,5 ml) při teplotě 0°C. Po 1 hodině se reakce zháší 10% vodným Na₂S₂O₃ a extrahuje dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší (MgSO₄) a koncentruje, čímž se získá požadovaný produkt (výtěžek; ~ 30 mg).

MS(M~H) 461.

2C. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok Diazaldu™ (0,5 g, 2,33 mmol) v 5 ml etheru se přidá pomalu do roztoku vodným KOH (0,5 g v 1 ml vody) a 1 ml ethanolu, udržuje se při teplotě 65°C.

• ·

Diazomethan se destiluje do jímací baňky naplněné roztokem t-butylesteru (±)(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (30 mg, 0,065 mmol) v 3 ml THF. Jímací baňka se ochladí na teplotu 0°C v lázní led/voda. Chladič se ochladí suchým led/acetonem a 3 ml etheru se přidávají dokud jímací baňka není bezbarvá. Reakce se míchá po další 0,5 hodiny při teplotě 0°C. Nažloutlá reakční směs se zháší octovou kyselinou (0,1 ml) a zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje 10% NaHCOs a solankou, suší MgSO4 a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 20 mg, 65%).

’H NMR(CDC1₃) δ 7,25 (m, 511), 5,10 (d, J=14Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,40 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,98 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,20-1,40 (m, 7H), 0,83 (m, 6H).

MS(M+H)⁺= 475.

2D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Směs t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (14 mg, 0,03 mmol) a mravenčanu amonného (0,3 g) v ethanolu (1,5 ml) s katalytickým množstvím 10% palladia na aktivním uhlí se zahřívá při teplotě přibližně 75°C po dobu 1 hodiny. Po filtraci, která odstraní katalyzátor, se rozpouštědlo odstraní ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 8,5 mg, 73%).

MS(M+H)⁺= 385.

2E. Hydrochlorid (+)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-btitylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (8,5 mg, 0,022 mmol) v 4 N HCI v dioxanu (1 ml)· se míchá při pokojové teplotě po dobu 24 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bělavá pevná látka (výtěžek 8 mg, 100%).

NMR (de-DMSO) δ 8,02 (d, J=14Hz, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,85 (t, J 13Hz, 1H), 3.70 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,15 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,12-1,42 (m, 7H), 0,82 (t, J=12,5Hz, 3H), 0,68 (t, 3H).

MS(M+H)' = 329, (M-H)'= 327.

Příklad 3

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyano-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

• »

3A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-Benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(hvdroxyiminoformyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví reakcí roztoku t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pynOlidin-5karboxylové kyseliny, s hydroxylaminhydrochloridem a 10% vodným uhličitanem draselným v methanolu podle způsobu popsaného Cheluccim et al., Tetrahedron: Ásymmetry 5: 1973(1994).

3B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví reakcí roztoku t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(hydroxyiminoformyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny s Ι,Γ-karbonyldiimidazolem v dichlormethanu podle způsobu popsaného Cheluccim et al., Tetrahedron: Ásymmetry 5: 1973(1994).

3C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyano-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3kyano-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

3D. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidín-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 4

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S,)-2-(1-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-propionyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

4A. Z-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S,lR)- a /-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S,lS)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyI-3-(l-hydroxy)propyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Ethylmagnesiumbromid (0, 070ml, 3M v etheru) se přidá do roztoku t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2’(l-acetamido-3-ethyl)-pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (18 mg, 0,041 mmol) ve 3 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se udržuje při teplotě 0°C a míchá po dobu 1 hodiny. Reakce se zháší vodným chloridem amonným a rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu a vody. Organická vrstva se suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje, čímž se získá požadovaný produkt (surový výtěžek: 20mg, 100%).

MS(M+H)⁺· = 475.

4B. t-Bůtylester (±)-(2R,3R,5R,l'S,)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3propionýl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2A, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S,lR)- a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S,lS)1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(1 -hydroxy)propyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20 mg 0,041 mmol) za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-

3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11 mg,

56%).

MS(M+H)⁺ = 473.

4C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S,)-2-(1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-propionylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Směs t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3propionyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11 mg, 0,023 mmol), mravenčanu amonného (250 mg) a palladia (15 mg, 10% na aktivním uhlí) v ethanolu (1,5 ml) se zahřívá při teplotě 70°C po dobu 20 minut. Reakce se filtruje, aby se odstranil katalyzátor a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanol/chloroformu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 8,5 mg, 95%);

MS(M+H)⁺ = 383.

4D. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS,)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-propionylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S,)-2-(1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3propionyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (8 mg) se rozpustí v 4 N HCI v dioxanu (1 ml) a míchá při pokojové teplotě po dobu 24 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bělavá pevná látka (výtěžek: 8 mg, 100%).

’H NMR(DMSO-d₆) δ 8,03 (d, J=14Hz, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 3,92 (m, 1H),

3,68 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 2,00 (m, 1H) 1,84 (s, 3H), 1,10-1,35 (m, 9H), 0,95 (t, J=Hz, 3H), 0,81 (t, J=12,5Hz, 3H), 0,75 (t, J=12,5Hz, 3H)

MS:(M-H)· =325, (M+35)⁺ = 361, (2M-H)’ = 651; (M+H)⁺ = 327, (2M+1)⁺ = 653, (2M+Na)⁺= 675.

Příklad 5

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-methylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

5A. t-Butylester (±)-(2R,3 R,5 R, 1 ’S)-l-benzyl-2-( 1-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nmethyl-karbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,175 mmol) a triethylaminu (18 mg, 0,175 mmol) v 10 ml THF se ochladí v ledové lázni. Přidá se izobutylchlormravenčan (24 mg, 0,175 mmol) a míchá se po dobu 30 min. Pak se přidá methylamin (2,0 M v THF, 0,35 ml, 0,70 mmol). Směs se míchá přes noc, přičemž se ohřeje na pokojovou teplotu. Reakce se pak zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanol/methylenchloridu, čímž se získá požadovaná sloučenina, jako olej (výtěžek: 17,2 mg, 21%).

MS: (M+H)⁺ = 474.

í

I

5B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nmethylkarbamoyl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylestem (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(N-methylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3R,5R, 1 ’ 5)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 13 mg, 94%).

MS: (M; II)' 384.

5C. Hydrochlorid (±)(2R,3R,5R,1 ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nmethylkarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, náhrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l^,S)-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-(Nmethylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. ' ^!H NMR (D₂O): δ 4,43 (t, J=10Hz, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,08(q, J=10Hz, 1H), 2,75 (m, 4H), 2,25 (m, 4H), 2,02 (s, 3H), 1,5-1,15 (br, 7H), 0,80 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 328.

Příklad 6

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 'S)-2-( 1 - Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-aminokarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O ,

BocHNHN-7 AcHNz, 7 \ ďBu

Η Ϊ

Ph

6A. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R, l 'S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(N-(tbutoxykarbonyl)aminokarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-1-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (60 mg, 0,13 mmol), t-butylkarbazátu (21 mg, 0,16 mmol), l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu (EDC, 31 mg, 0,16 mmol) a 1-hydroxybenzotriazolu (9 mg, 0,065 mmol) v 3 ml bezvodého THF se míchá při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Reakce se pak zředí ethylacetátem. Organická Vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSOz,, filtruje a koncentruje ve vakuu.

• 91

Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2% methanol/methylenchloridu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 45,6 mg, 61%).

MS: (M+H)⁺ = 575.

6B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-(tbutoxýkarbonyl) aminokarbamoyl) pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l- acetamido-3-ethyl)pentyl-3(N-(t-butoxykarbonyl) aminokarbamoyl) pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylešter (+)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 28 mg, 75%).

MS: (M+H)⁺ 484.

6C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Naminokarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N(tbutoxykarbonyl)aminokarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

'H NMR (D₂O): δ 4,32 (m, 2H), 4,18 (dd, 1H), 3,14(q, J=8,4Hz, 1H), 2,75 (m, 1HX 2,26 (m, 1H), 2,01 (s, 3H), 1,50-1,15 (m, 7H), 0,80(q, J=7,5Hz, 6H).

MS: (M+ř1) = 329.

Příklad, 7

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

7A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3ethoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (42 mg, 0,091 mmol), ethanolu (0,5 ml), l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu (EDC, 36 mg, 0,188 mmol) a 1-hydroxybenzotriazolu (7 mg, 0,05 mmol) v 2 ml bezvodém THF se míchá při pokojové teplotě přes noc. Reakce se pak zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií • *· φ ·· φφ φφ φφ ·· φφ φ · φφφφ • ΦΦ φ φ φφφφ φφ φφ φ φ .φ φ φφ φ φφφ φ φ ΦΦΦ· ©Φ® ,β β φφφ ιΦ.ΦΦ® .φ Φ .φφ na sloupci silikagelu použitím 2% methanol/methylenchloridu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 36 mg, 33%).

’H NMR (CDC1₃): δ 7,50-7,20 (br, 5H), 5,12 (d, J=9Hz, 1H), 4,60-4,30 (br, 2H), 4,14(q, J=6Hz, 2H), 4,08 (m, 1H), 3,85 (br, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 2,75 (m, 1H),

2,32 (m, 1H), 1,97 (s, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,37 (t, J=6Hz, 3H), 1,20-1,50 (m, 7H), 0,83 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 489.

I;

b, jí

7B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví pódle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-beitzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3ethoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M+H)⁺= 399.

HCI

AcHN,, j, i. OH

Y o

7C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2E, nahrazením t-butylester (±)-(2Ř,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny místo t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (D₂O): δ 4,35 (m, 1H), 4,20(q, J=7,5Hz, 2H), 3,87-3,55 (m, 2H), 3,20(q, >7,5Hz, 1H), 2,67 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,5Hz, 3H), 1,54-1,15 (m, 711), 0,82 (tn, 6 H).

MS: (M+H)⁺ = 343, (M-H)‘ - 341.

Příklad 8

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

8A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S,lR)- a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S,l'’S) 1benzyl-2-(l-aceťamido-3-ethyl)pentyl-3-(l-hydroxy)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 4A nahrazením methylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid.

ti • 4

4

• 4 4 • · 4

4 4

4

8Β. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2A, nahrazením ť-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S, 1R)- a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S,1S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(1 -hydroxy)ethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, připravených podle způsobu popsaného v příkladu 8A, za t-butylester (±)-(2R,3R,5 R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (CDC1₃) δ 5,00 (d, J=9,7Hz, 1H), 3,94 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,20 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,15-11,35 (m,7H), 0,80 (m,6H).

MS:(M+H)⁺= 459.

8C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetyl-pyrrolidm5- karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 4C, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-388 φ · «φ φ φ • ' · φ >9 • · · 99 9 9 • · • 9 • 9 9*9 9999 ·· Μ • · 9

9 9

9 9 * Φ acetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, připraveného podle způsobu popsaného v příkladu 8B, za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acétamido-3-ethyl)pentyl-3propionyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS:(M+H)⁺= 369.

8D. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3acetyl-5karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR(DMSO-dó) δ 8,20 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,03 (m, 1H),

2,43 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,91 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,55 (m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,35 (m, 2H), 1,12 (m, 4H), 0,84 (m, 3H), 0,79 (m, 3H).

MS:(M+H)⁺ = 314, (M-H)' = 312.

Příklad 9

Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-amino-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

9A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R)- a t-butylester (±)-(2S,3S,5R)-l-Benzyl-2-vinyl-3karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Připraví se roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)- a t-butylesteru (±)-(2S,3S,5R)-lbenzyl-2-vinyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (10 g, 31,7 mmol) (8: 1 poměr), v 39 ml ethanolu .Roztok se nechá reagovat suspenzí oxidu stříbrného (8,83 g,

38,1 mmol) a hydroxidu draselného (10,86 g, 194 mmol) v 65 ml vody. Reakce se míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny a filtruje přes vrstvu Čelitu. Ethanol se odstraní ve vakuu. Vodný roztok se okyselí kyselinou octovou přibližně na pH 4. Kyselý roztok se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se promyje se solankou, suší nad Na₂SO₄, filtruje a koncentruje, čímž se získá požadovaná sloučenina jako nahnědlý olej (surový výtěžek: 8,2 g, 77%). Surová kyselina se použije pro další krok bez dalšího čištění.

MS (M+H)⁺ = 332, (M-H)' = 330.

9B. Z-Butylester (±)-(2S,3R,5R)-1 -Benzyl-2-vinyl-3-benzyloxykarbonylaminopyrrolidin-5- karboxylové kyseliny.

Směs t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)- a t-butylesteru (+)-(2S,3S,5R)-l-benzyl-2vinyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (1,0 g, 3,02 mmol), difenylfosfoiylazidu (0,83 g, 3,32 mmol), benzylalkoholu (0,36 g, 4,53 mmol) a triethylaminu (0,32 g, 3,32 mmol) v 30 ml toluenu se zahřívá při refluxu po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 0,86 g,65%).

• · ·	• · ·	• ·			• ·
• · ·	• · · ·	•	•	•	•
• · ·	• ·	1	¥	•	•
				•
• · ·	• ·	•	•	•	•
• · · ·	• · · · · · ·	• ·			• ·

*H NMR (CDC1₃) δ 7,20-7,40 (m, 10H), 5,70 (m, 2H), 5,10-5,23 (m, 3H), 4,10 (m, IH), 3,85 (m, IH), 3,62 (m, IH), 3,45 (m, 2H), 2,50 (m,.lH), 1,70 (m, IH), 1,41 (s, 9H).

I

MS (MNI)' = 437.

CbzHhJ

-, /°'^ΒυA ť k O

Ph

9C. ť-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-benzyloxykarbonylaminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Oxid osmičelý (3 krystaly) se přidá do míchaného roztoku t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (1,10 g, 2,52 mmol), N-oxidu N-methylmorfolinu (0,95 g, 8,07 mmol), v 27 ml aceton/vodě (8: 1), udržuje se při pokojové teplotě. Po 6 hodinách se přidá 10% vodný Na2S2O₃ a pokračuje se v míchání po dobu dalších 15 minut. Reakce se extrahuje dichlormethanem a organická vrstva se koncentruje, čímž še získá surový diol (meziprodukt). Diol se použije v následujícím kroku bez dalšího čištění.

MS (M+H)⁺ = 471.

Jodistan sodný (1,0 g, 4,52 mmol) se po částech přidá do míchaného roztoku surového diolu (-1,25 g, 2,66 mmol) ve 21 ml THF/vodě (6: 1). Reakce se míchá po dobu 1 hodiny, pak zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 15% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 0,66 g, 60%).

• · » I ·· 'H NMR (CDC1₃) δ 9,44 (d, J=l,2Hz, 1H), 7,20-7,40 (m, 10H), 5,98 (d, J=14Hz, 1H), 5,10 (m, 2H), 4,45 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,70 (m, 1H), 1,45 (s, 9H).

MS (M+H)⁺ = 439.

9D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-a t-butyléster (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-Benzyl-2-(lhydroxy-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pynolidin-5-karboxylové kyseliny.

l-Brom-2-ethylbutan (1,7 g, 10,3 mmol) se přidá do roztoku dibromethanu (3 kapky) v 15 ml suchého THF, pod atmosférou argonu, v baňce naplněné hořčíkem (0,25 g, 10,3 mmol). Reakční směs se zahřívá při refluxu po dobu 45 minut, dokud většina hořčíku nezreaguje. Roztok se ochladí na pokojovou teplotu a přenese pomocí kanyly do suspenze CuBr SMe₂(2,12 g, 10,3 mmol) v 15 ml suchého THF, udržuje pod atmosférou argonu, při teplotě -10°C. Směs se míchá po dobu 0,5 hodiny dokud roztok neztmavne. Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-benzyloxykarbonylaminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,45 g, 1,03 mmol) v 10 ml THF se přidává po kapkách a míchá po dobu 1,5 hodin, zatímco teplota se udržuje při teplotě 0°C. Reakce se zháší vodným chloridem amonným, zředí ethylacetátem, promyje vodou a solankou, suší nad MgSOzi, filtruje a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím. 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá alkoholový adukt jako bledě žlutý olej(výtěžek: 160 mg, 30%).

^lH NMR (CDC1₃) δ 7,20-7,40 (m, 10H), 6,10 (d, J=14Hz, 1H), 5,10 (m, 2H), 4,22 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,55 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,00-2,30 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,15 - 1,40 (m, 7H), 0,84 (m, 6H).

MS (M+H)⁺ = 525.

9E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -Benzyl-2-( 1 -oxo-3-ethyl)pentyl-3benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok oxalylchloridu (0,29 ml, 2 M v CH2CI2) v 5 ml suchého dichlormethanu se připraví a udržuje pod atmosférou dusíku při teplotě -78°C, do roztoku se přidá DMSO(90 mg, 1,14 mmol). Směs se míchá po dobu 15 minut. Výše připravený alkoholový adukt (150 mg, 0,286 mmol) v 5 ml dichlormethanu se přidá po kapkách do studené (-78°C) reakční směsi. Roztok se míchá při teplotě -78°C, po dobu 1 hodiny. Pomalu se přidá triethylamin (250 mg, 2,29 mmol). Reakce še pomalu zahřeje na pokojovou teplotu a pak zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 100 mg, 67%).

'H NMR (CDCI3) δ 7,35 (m, 10H), 5,10 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 3,95 (m, 2H), 2,60 (m, 111), 2,40 (m, III), 2,03 (m, 1II), 1,70 (m, 2Η), 1,45 (s, 911), 1.10 - 1,30 (m, 711), 0,70 (ni, 6H).

MS (M+H)⁺ = 523.

9F. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’R)- a t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-l-benzyI-2-(lamino-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karhoxylové kyseliny.

Směs t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-(l -oxo-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (90 mg, 0,172 mmol), octanu amonného (400 mg, 5,17 mmol) a kyanoborohydridu sodného (65 mg, 1,03 mmol) v 5 ml v methanolu se zahřívá při refluxu po dobu 18 hodin. Přidají se další podíly octanu amonného a kyanoborohydridu sodného a pokračuje se v zahřívání po dobu dalších 2 hodin. Reakce se zháší s 1 N hydroxidem sodným a zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l:lethylacetát/hexanů a následně 5% methanol/dichlormethanem, čímž se získají požadované sloučeniny (výtěžek: 58 mg, 64%).

MS (M+H)⁺ = 524.

9G. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2“(l-amino-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (50 mg, 0,096 mmol) a anhydridu octové kyseliny (117 mg, 1,15 mmol) v 5 ml dichlormethanu se míchá po dobu 1 hodiny při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30-50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 51 mg, 97%).

*H NMR (CDC1₃) δ 7,72-7,35 (m, 10H), 5,82 (d, J=14Hz, 1H), 5,10 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,15 (m, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,20-1,35 (m, 7H), 0,80 (m, 6H).

MS (M+H)⁺ = 567.

o‘Bu

Y

O

9H. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-amino-pýrrolidin5- karboxylové kyseliny.

ϊ,ί

Ji f¹

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (49 mg, 0,087 mmol), mravenčanu amonného (150 mg, 0,22 mmol) a 10% palladia na aktivním uhlí v ethanolu (5 ml) se zahřívá při teplotě 80°C po dobu 45 minut. Po filtraci kvůli odstranění katalyzátoru se odstraní rozpouštědlo. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5-10% methanol/dichlormethanu, čímž se získají diastereoizomery, t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S) (19 mg) a t-butylester (+)-(2S,3R,5R,l’R) (8,6 mg) 2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-aminopyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

'Η NMR (CDC1₃) δ 6,00 (d, J=14Hz, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,48 (m, 1H); 2,03 (s, 3H), 1,82 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,15 - 1,42 (m, 7H), 0,85 (m, 6H). '

MS (M+H)⁺= 342.

9Γ; . Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-ácetamido-3-ethyl)pentyl-3aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (17 mg, 0,050 mmol) v 1 ml 6 N HCl se míchá při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo se odstraní za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 15 mg, 100%).

’H NMR(d₆-DMSO) δ 8.28(bs, 1H), 7,90 (d, J=Hz, 1H), 4,71 (d, J=14Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,50 (m, 1H), 1,10 -1,40 (m, 7H), 0,72-0,90 (m, 6H).

MS (M+H)⁺ = 286.

Příklad 10

Hydrochlorid (±)-(2S,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetamido-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

10A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-l-Benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-aminopyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (50 mg, 0,88 mmol) se míchá s 10% palladiem na aktivním uhlí (5 mg) v 50 ml ethylacetátu za tlaku vodíku 1 atm po dobu 45 minut. Reakce se filtruje a koncentruje, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (surový výtěžek: 35 mg, 92%).

MS (M+H)⁺ = 431.

0 * 0 · 00 00 0 0 00 0 0 0 0 0 0 · 0 · 0 0 ·

10B. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3acetamido-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3amino.-pyrrolidin-5-karboxylové . kyseliny .(35, mg, 0,080 mmol) se nechá reagovat s anhydridem octové kyseliny(0,05 ml) v 8 ml dichlormethanu po dobu 1 hodiny. Reakce se koncentruje a zbytek čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů a následně 3% methanol/dichlormethanem, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 30 mg, 80%).

*H NMR (CDC1₃) δ 7,20-7,35 (m, 5H), 6,62 (d, J=14Hz, 1H), 5,34 (d, J=14Hz, 1H), 4,42 (m, 2H), 4,20 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,18 (m, 2H), 2,02 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,25-1,42 (m, 7H), 0,85 (m, 6H).

MS (M + H)⁺ = 474.

10C. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetamidopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3acetamido-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-méthoxymethylpyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanol/dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 11,5 mg, 50%).

*H NMR (CDCb) δ 6,20 (d, J=14Hz, 1H), 5,94 (d, J=14Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,82 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,20-1,42 (m, 7H), 0,85 (m, 6H).

— ..... MS(M Hf 384. ......... · . ...... .......-................

10D. Hydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetamidopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetamidopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11,0 mg, 0,029 mmol) za t-butylester

(±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(methoxymethyl)-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny (výtěžek: 11,0 mg, 100%).

*H NMR(d₆-DMSO) δ 8,15 (d, J=14Hz, 1H), 8,05 (d, J=14Hz, 1H), 4,35 (m, 1H),

4,28 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), 1,15 - 1,40 (m, 7H), 0,80 (m, 6H).

MS: (M-H)’ = 326, (M+35)⁺ = 362; (M+H)⁺ = 328, (M+23)⁺ = 350.

Příklad 11

Hydrochlorid (±)-(2S ,3 R,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 methoxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxy-karbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3amino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s methylchloromravenčanem a triethylaminem v dichlormethanu. Reakce se rozdělí mezi dichlormethan a vodu. Organická vrstva se koncentruje, čímž se získá požadovaná sloučenina.

O'Bu

11B. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-1 -benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

11C. Hydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,l'S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (+)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny .

Příklad 12

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-4-yl)-5karboxylové kyseliny.

100

12A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-Benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3diazoacetyl- 5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (405,3 mg, 0,88 mmol) a N-methylmorfolin (106 μί, 0,96 mmol) v THF(20 ml) se nechá reagovat s izobutylchlormravenčanem (96 μί, 0,93 mmol) při teplotě -10°C po dobu 30 minut. Do reakční baňky se kanyluje destilovaný roztok diazomethanu v ether připraveného z reakce diazaldu (2,4 g) v etheru (60 ml) s roztokem hydroxidu draselného (2,4 g) v ethanolu (15 ml) a vodě (15 ml). Reakce se míchá po dobu 3 hodin při pokojové teplotě pak zředí etherem. Organická vrstva se promyje solankou, suší (Na2SO4) a koncentruje, čímž se získá požadovaná sloučenina jako hustý olej (430,4 mg).

12B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3bromacetyl-5-karboxylové kyseliny,.

Roztok t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3-diazoacetyl-5-karboxylové kyseliny (427,4 mg, 0,88 mmol) v dioxanu (50 ml) se nechá reagovat s kyselinou bromovodíkovou (0,25 ml, 2,2 mmol) při teplotě 0°C po dobu 0,5 hodin. Reakce se zháší nasyceným vodným kyselým uhličitanem sodným (25 ml) a koncentruje ve vakuu. Zbylá vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí solankou, suší nad síranem sodným, filtrují a

101 • ¥¥ · ·· ·· ¥¥ · · ·· · ¥ · · · · • ·· ¥ · ¥ · · ¥·¥ ¥ · ¥ ¥ ¥ ¥¥· ·· ·¥··»«· '· · ·¥ koncentrují ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanolu v dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pánovitá tuhá látka (379,3 mg, 80,2 %).

MS: (M+H)⁺= 539.

12C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(imidazol-4-yl)-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3bromacetyl-5-karboxylové kyseliny (60 mg, 0,112 mmol) se nechá reagovat s formamidinacetátem (120 mg, 1,15 mmol) v tekutém amoniaku a zahřívají při teplotě 45°C v utěsněné nádobě po dobu 20 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se nechá reagovat s vodným NaHCCh a extrahuje dichlormethanem (5 x 20 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí se solankou, suší nad síranem sodným, filtrují a koncentrují ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanolu v dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (21,2 mg, 39,4 %)·

MS: (M+H)⁺ = 483.

102 * ·· · ·» ·· ·* ···· ·· » · * · · · • ·· · ····· • · · · · »····· ··· · · · · · · • · · ·« '····*·· · · · «·

12D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-4-yl)5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(imidazol-4-yl)-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benžyl-2-(lacetamido-3 -ethyl) pen tyl-3-methoxy-methyl -pyrro] i di n-5 -karboxylové kyseliny (výtěžek:

12,9 mg, 66,2%).

Ή NMR (CDCb): δ 0,75 - 0,81 (m, 6H), 1,17-1, 42 (m, 7H), 1,47 (s, 9H), 2,03 (s, 3H), 2,66 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 7,04(br s, 1H), 7,86(br s, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 393.

12E. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-4yl)-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(imidazol-4yl)-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3103 ··»

I « ·· ·· > · · • · » * · • · ·· ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny, čímž se získá požadovaná sloučenina jako tuhá látka (výtěžek: 12,0 mg, 96,0%).

’H NMR(DMSO-d₆): δ 0,67 (t, J = 7 Hz, 3Ή), 0,75 (t, J = 7 Hz, 3H), 1,11 (m, 3H), 1,23 (m, 4H), 1,78 (s, 3H), 2,33 (m, 1H), 2,70 (m, 1Ή), 3,69 (dt, 1H), 3,95 (dd, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,48 (dd, 1H), 7,63 (s, 1H), 8,28 (d, J = 9 Hz, 1H), 9,06 (s, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 337.

Příklad 13

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(oxazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. ,

13A. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-(2hydroxyethyl) karbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 5A, nahrazením ethanolaminu za N-methylaminhydrochlorid.

<v ϊ .

r~104

13Β. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(oxazolin2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzy!-2-(l-acetamido-3-ethyI)pentyl3(N-(2-hydroxyethyl)karbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, triethylaminu (4 ekviv.), ťetrachlormethanu (3,5 ekviv.) v acetonitrilu se nechá reagovat s trifenylfosfinem (3,15 ekviv.) po dobu 16h při pokojové teplotě. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi vrstvu ethylacetátu a vody. Organická vrstva je promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina.

13C. 't-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(oxazol2- yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl3- (oxazolin-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s niklperoxidem v cyklohexanu podle způsobu popsaného Meyerem v J. Org. Chem, 1979,497-501, čímž se získá požadovaná sloučenina.

13D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(oxazol-2yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)-pentyl-3(oxazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

13E. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(oxazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(oxazol-2yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

ί.»

L.....

f

1:,,

Příklad 14

106

Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-methyl) butyl-3-(N-methyl· amino)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

CH₃

CbzŇ_Z/

Ph

14A. t-Butylester (+)-(2S,3Ř,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylamino)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyI-3-benzyloxykarbonylaminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,08 g, 4,77 mmol) se rozpustí v 50 ml bezvodého DMF a udržuje pod atmosférou dusíku. Roztok se nechá reagovat s hydridem sodným(0,32 g, 8 mmol) a míchá při pokojové teplotě po dobu 30 minut. Roztok se nechá reagovat S jodmethanem (0,8 ml, 12,85 mmol) a míchá po dobu dalších 1 hodiny. Reakce se zháší vodou a extrahuje ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se koncentrují, čímž se získá surový produkt, který se. čistí chromatografií na sloupci silikagelu, čímž se získá požadovaná Sloučenina jako olej (výtěžek: 1,75 g, 81 %).

*H NMR (CDC1₃) δ 7,36-7,20 (m, 10H), 5,75-5,50 (br, 1H), 5,25-5,07 (m, 4H),

4,75 - 4,50 (br, 1H), 3,97 (d, J=13,5Hz, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,61 (d, J=13,5Hz, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,45 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).

MS (M+H)* = 451.

ř

14B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-Benzyl-2-formyl-3-(N-methyl-Nbenzyloxykarbonyl-amino)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 9C, nahrazením t-butylesteru (+)-(2S,3R,5R)- l-benzyl-2-vinyl-3-(N-methyl-Nbenzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 747 mg, 42%,).

MS (M+H)⁺ = 453.

14C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3-methyl)butyl-3-(N-methyl-Nbenzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5-karboxyIové kyseliny.

Izobutylmagnesiumchlorid (2,0 M v etheru, 0,68 ml) se přidává po kapkách po dobu 12 minut do roztoku t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-(N-methyl-Nbenzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (196 mg, 0,43 mmol) v 5 ml bezvodého THF, udržuje se při teplotě -78°C. Výsledný žlutý roztok se míchá při teplotě -78°C po dobu 1 hodiny. Roztok se zháší nasyceným vodným chloridem amonným a extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se koncentruje a surový produkt se oxiduje podle způsobu popsaného v příkladu 9D. Čištění probíhá chromatografií na sloupci silikagelu s 10-25% ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 78 mg, 36%).

·· • · · • · ·

108 ^lHNMR(CDC1₃)δ 7,46-7,25 (m, 10H), 5,09 (br,2H),4,90-4,60(m, 1H), 3,973,65 (m, 4H), 3,00 (s, 3H), 2,60 (br, 1H), 2,20-1,80 (m, 3H), 1,46 (s, 9H), 0,80-0,67 (m, 7H).

MS (M+H)⁺ = 509.

14D. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’R)- a t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(lamino-3-methyl)butyl-3-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 9F, nahrazením t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3-methyl)butyl-3-(N-methylN-benzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5-karboxylové - kyseliny- místo t-butylester (+)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Výtěžek: 97 mg, 65%,).

MS (M+H)⁺= 510.

A

109

14E. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(lacetamido-3- methyl)butyl-3-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-butylesteru (+)-(2S,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l -amino-3-methyl)butyl-3-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (47 mg, 0,094 mmol) se nechá reagovat s anhydridem octové kyseliny (0,15 ml) v 4 ml dichlormethanu při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

λ

K

MS (M+H)⁺= 552.

14F. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(N-methylainino)pyrrolidin-5-karboxylové --------------------. - kyseliny,

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’R)- a t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2(1- acetamido-3-methyl) butyl-3-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylamino)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (0,094 mmol), palladia (40 mg, 10% na aktivním uhlí) a mravenčanu amonného (160 mg) ve 3 ml ethanolu se zahřívá při refluxu po dobu 30 minut. Přidá se další palladium na aktivním uhlí (15 mg) a mravenčan amonný (50 mg). Roztok se míchá po dobu dalších 15 minut a směs se pak filtruje kvůli odstranění tuhých látek a katalyzátoru. Filtrát se odpaří a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu 5% methanol/dichlormethanem a 1% NH4OH, čímž se získá t-butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S) (15,4 mg, nižší R_f) a t-butylester (+)-(2S,3R,5R,l’R)(5,4 mg, vyšší R_f)-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(N-methylamino)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 20,8 mg, 68%).

110

ch₃

14G. Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyÍ-3-(N-methylamino)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl) butyl-3-(Nmethylaminojpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9,4 mg) se míchá s 4 N vodnou HCI (—1,5 ml) po dobú 2 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 10 mg, 100%).

'Η NMR(majoritní píky)(DMSO-dó): δ 52,57 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,47 (m, 3H), 0,91 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,83 (d, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 272.

Příklad 15

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

15A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

111

Plynný amoniak se nechá pomalu probublávat pomalu přes roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (20 mg, 0,045 mmol) a glyoxalu (6,2 μΐ, 0,054 mmol, 1,2 ekviv.) v 5 ml methanolu, udržuje se při teplotě 0°C po dobu 5 minut. Po 7 hodinách při teplotě 0°C se přidá další glyoxal(10 pl)a nechá se probublávat amoniak přes roztok po dobu 5 minut. Reakce se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Přidáním konečného množství glyoxalu (10 μΐ) a amoniaku, jak je uvedeno výše, a následnou reakcí při pokojové teplotě po dobu dalších 4 hodin se docílí kompletního proběhnutí reakce. Reakce se koncentruje ve vakuu a čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů a ( následně 10% methanol/chloroformem, čímž se získá, požadovaná sloučenina jako tuhá látka (výtěžek: 19,9 mg, 91 %).

(' · ‘¹ ί . *H NMR (CDC1₃): δ 0,67 (t, J=7,2 Hz, 3H), 0,73 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,09 - 1,32 (m, ' 7H), 1,41 (s, 911), 2,00 (m, IH), 2,09 (s, 3H), 2,79 (m, IH), 3,29 (m, IH), 3,66 (dd,

J=9,6,2,7 Hz, IH), 3,77 (m, IH), 3,92 (d, J=13,4 Hz, IH), 4,04 (d, J=13,4 Hz, IH), 4,22 (dd, IH), 4,49 (m, IH), 6,08(br s, IH), 7,00 (s, 2H), 7,217,34 (m, 5H).

MS (M+Hý = 483.

15B. t-Butyíester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Směs t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(.l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (17 mg, 0,035 mmol), mravenčanu amonného (250 mg) a 10% palladia na aktivním uhlí (20 mg) v 5 ml ethanolu se zahřívá při refluxu po dobu 15 minut. Reakce se koncentruje ve vakuu a zbytek se čistí

112

·· ·· • · · · « · · · chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanol/dichlormethanu a 0,25% hydroxidu amonného, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: ll,3mg, 81,9%).

MS (M+H)⁺= 393.

15C. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(f-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11 mg, 0,028 mmol) se rozpustí ve 2 ml 6N HCl a míchá při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bělavá pevná látka (výtěžek: 11,3 mg, 100%).

^]H NMR(DMSO-d₆): δ 0,71 (t, J=7 Hz, 3H), 0,75 (t, J=7 Hz, 3H), 1,09 - 1,28 (m, 7H), 1,74 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 4,29 (m, 1H),

4,52 (m, 1H), 7,64 (s, 2H), 8,07(br d, J=9 Hz, 1H).

MS (M+H)⁺ = 337 a (M-H)’ = 335.

Příklad 16

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N,Ndimethylkarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N,Ndimethylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 5 A nahrazením Ν,Ν-dimethylaminu místo N-methylaminu (výtěžek: 10 mg, 23%).

MS: (Μ·II) 488.

16B. t-Butyiester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nmethylkarbamoyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. .

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(N,N-dimethylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 5,5 mg, 67%).

MS: (M+H)⁺ = 398.

• ·

Π4

16C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N,N-dimethylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

. Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N,Ndimethylkarbamoyl)pyrrolidirt-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'Η NMR(majoritní píky)(D₂O) δ 3,15 (s, 3H), 2,94 (s, 311), 1,98 (s, 3H), 0,80 (m,

6H).

MS (M+H)⁺ = 342, (M-H)'= 340.

Příklad 17

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,3R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3 -kyano-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

17A. t-Butylester (±)(2S,3R,5R)-1 -Benzyl-2-vinyl-3-kyano-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t.

115.

Roztok t-butylesteru (±)-(2S,3S,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (poměr 8:l)(5g, 15,9 mmol) s hydroxylaminhydrochloridem (l,28g,

18,5 mmol) a 10% vodným uhličitanem draselným (8 ml) ve 20 ml methanolu, připraveného podle způsobu popsaného Cheluccim et al., Tetrahedron: Asymmetry 5: 1973 (1994), poskytne oxim (meziprodukt).

Surový oxim, připravený výše, se nechá reagovat s Ι,Γ-karbonyldiimidazolem (3,9,

23,9 mmol) v 50 ml dichlormethanu po dobu 3 hodin při pokojové teplotě. Reakce se koncentruje ve vakuu a chromatografuje na sloupci silikagelu s 2-10% ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 2,5g, 50%).

MS (M+H)⁺ = 313.

W-Γ

O Q o Ph

17B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-kyano-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu ID nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-1 -benzyl-2-vinyl-3-kyano-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,2 g, 80%).

MS (M+H)⁺ = 315.

. 116

17C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -Benzyl-2-( 1 -oxo-3-ethyl)pentyl-3-kyano-pyrrolidiri5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu IE nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-1 -benzyl-2-formyl-3-kyano-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrólidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek 0,4 g , 27%).

MS (M il) = 399.

17D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Benzyl-2-( 1 -amino-3 -ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle, způsobu popsaného v příkladu 1F nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3-ethyl)pentyl-3-kyanopýrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3ethyl)pentyl-3-(t-buty ldimethyl si lyloxymethyl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (výtěžek 0,215 g, 50%). .

MS (M+H)⁺ = 400.

117 · · · · · ...

IL—.....-............ ,________________________ _______________G.'________________???..··._________···-·“·___ ι' ý

k’ t 17E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3 -kyanopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1G nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,l^,S)-l-benzyl-2-(l-amino-3-ethyl)pentyí-3kyano-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’R) a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-amino-3-ethyl)pentyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek 0,210 g, 90%).

’H NMR (CDC1₃) δ 7,25 (m, 5H), 5,08 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,78 J (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,52 (s, ^;í 9H), 1,35 (m, 7H), 0,85 (m. 611).

MS: (M+H)⁺= 442

17F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyano-pynOlidin5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příklad 1J nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R, 1 'S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3kyano-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (CDCI3) δ 5,35(bs, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,20-1,45 (m, 7H), 0,85 (m, 6H).

β β ©_φ

MS: (M+H)⁺ =352.

O

17G. , Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyano1’,. pyrrolidin-5-karboxylóvé kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3 ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR(d₆-DMSO) δ 9,12(bs, ÍH), 8,05 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,88 (m, 1HX 3,68 (m, ÍH), 3,00 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,10-1,40 (m, 711), 0,80 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 296, (M-H) = 294.

Příklad 18

I

Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

ďBu

AcHN.

18A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-Benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do ledem chlazené suspenze methyltrifenylfosfoniumbromidu (240 mg, 0,67 mmol) v 5 ml THF se přidá pod dusíkem t-butoxid draselný (60 mg, 0,54 mmol). Barva se ihned změní na světle žlutou. Po hodinovém míchání při pokojové teplotě se přidá tbutylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny (100 mg, 0,225 mmol) v 5 ml THF a míchá při pokojové teplotě přes noc. Reakční se pak zháší nasyceným chloridem amonným a extrahuje ethylacetátem, čímž se získá surový produkt, který se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30% ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 55 mg, 55%).

.'H NMR (CDCI3): δ 7,45-7,20 (m, 5H), 5,94 (ddd, 1H), 5,24 (d, J 12Ilz, 1H), 4,98 (d, J-18Hz, 1H), 4,93 (d, J=10, 5Hz, 1H), 4,37 (m, 1H), 4,06 (d, J 13.51 Iz. lil), 3,80 (d, J=T3,5Hz, 1H), 3,41 (dd, J=9 Hz, J=3Hz, 1H), 3,31(q, J=13,5Hz, 1H), 2,60 (m, 1H), 2,26' (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,40-1,25 (m, 7H), 0,82 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 443.

O^lBu

Ϊ

O

18B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

120L ’Η NMR (CDC1₃): δ 5,71 (br, ΙΗ), 4,00 (br, 1H), 3,68 (t, J=8Hz, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,98 (s, 3H), 1,87 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,55-1,20 (m, 10H), 0,93 (t, J=7,5Hz, 3H), 0,83 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺= 355.

18C. Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-éthyl)pentyl-3-ethyl-pynOlidin5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3 _____________ ei hy I )peniy 1 -3 -(mcthoxytncthy 1 )-pyrrol idi n-5-karboxy lo vé kyseliny. ____________ *H NMR(D₂O): δ 4,30 (br, 1H), 4,25 (t, J=7,5Hz, 2H), 3,58 (br, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,23 (br, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,90 (m, 1H), 1,70-1,20 (m, 9H), 0,92 (t, J=7,5Hz, 3H), 0,81 (m,6H).

MS: (M+H)⁺ = 299.

Příklad 19

Hydrochlorid (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -Acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -propyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

121___________

19A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(cz.vpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-lbenzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(trara-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 18A nahrazením ethyltrifenylfosfoniumbromidů za methyltrifenylfosfoniumbromid.

^lH NMR (CDCb) δ 7,24 (m, 5H), 5,59 (m, 1H), 5,36 (dd, J= 11,7Hz, 1H), 5,28(bs, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,06 (d, J= 12,9Hz, 1H), 3,80 (d, J= 12,9Hz, 1H), 3,42 (dd, J= 8,5, 2,0 Hz, 1H), 3,30 (dd, J= 6,1, 3,1Hz, 1H), 2,88 (m, 1H), 2,29 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,64 (dd, > 6,8, l,7Hz,3H), 1,44 (s,9H), 1,30 (m,7H), 0,81 (m, 6H).

~~^^MB?(M+H)⁺^4377(M+Ná)⁺^479AM^:H)’=’455i

19B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-propyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(tr«z25-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové ___________..1.22.. _.

kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina (výtěžek: 3,5 mg, 54%).

MS: (M+H)⁺ = 369, (M+Na)⁺ = 391, (M-H)' = 367.

19C, Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-propylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-ethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,5 mg, 100%).

'H NMR(DMSO-d₆) δ 8,10.(d, J= 8,3Hz, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,17 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,89 (s, 3H), 1,70 (m, 1H), 1,50-1,20 (m, 12H), 0,87 (t, J= 6,8Hz, 3H), 0,84 (t, J= 7,0 Hz, 3H)_? 0,79 (t, J= 7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335, (M-H)' = 311.

Příklad 20

Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

• ·

20A. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,l’RS)-l-benzyl-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Oxid osmičelý se při pokojové teplotě přidává do roztoku t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (3,5 g, 8,12 mmol) v 60 ml 8:1 aceton/vody a N-oxidu N-methylmorfolinu (3,0 g, 25,6 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 6 hodin a zháší nasyceným vodným Na₂S₂O3. Směs se míchá po dobu dalších 10 minut a rozpouštědlo se odstraní. Nahnědlý zbytek se rozdělí mezi vrstvy dichlormethanu a vody. Organická vrstva se suší nad MgSO₄ a koncentruje ve vakuu, čímž se získá diol(mezipro(iukt) jako oléj (~3,8g), který se použije bez dalšího čištění.

MS:(M~H)’ 466.

20B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'RS)-2-(l ,2-dihydroxy)ethyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylóvé kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’RS)-l-benzyl-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-(tbutyIdimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (21,5g, 46,2 mmol) za tbutylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l -acetamido-3ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

• · • · ¥ ·

124

MS: (M+H)⁺ - 367.

20C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'RS)-l-/-Butoxykarbonyl-2-(l,2-dihydroxy)-ethyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,l ’RS)-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (surový z předešlého kroku) se rozpustí ve 160 ml 3:1 methanol/vodě a di-/er/-butyldikarbonátu (14,0 g, 64 mmol) se přidá. Směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 72 hodin. Pak sé rozpouštědlo odstraní a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako světle žlutá tuhá látka (výtěžek: 15,4 g, 70 %).

’H NMR (CDCb): δ 0,03 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), l,37.(s, 9H)„ 42 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,93 (d, IH), 2,30-2,50 (m, 2H), 3,28 (d, IH), 3,66-3,43 (m, 4H), 3,85 (dd, IH), 4,02 4,52 (rn, IH).------:--—:____ /

MS: (M+l 1)' - 476.

TBDMSO-^

20D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-t-butoxykarbonyl-2-formyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Roztok t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ RS)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1,2-dihydroxy)ethyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (6,0 g, ·· • * · • ♦ · • · · • · · • · ··

125 ··« ·« '·> · ·« • « * • · ·· ·· ·

12,6 mmol) se rozpustí v 6:1 tetrahydrofuran(THF)/vodě (110 ml) a nechá reagovat s jodistanem sodným(4,4 g, 20,6 mmol). Směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 3 hodin a zředí ethylacetátem, promyje vodou, suší nad MgSCb, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 20% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá voskovitá tuhá látka (výtěžek: 4,4 g, 78,6%).

*H NMR (CDCbXsměs dvou rotamerů): δ 0,05 a 0,06(dvě s, 6H), 0,88 a 0,90(dvě s, 9H), 1,42 a l,44(dvě s, 9H), 1,47 a l,48(dvě s, 9H), 1,89-1, 99 (m, 1H), 2,37 -2,43 (m, 2H), 3,54 -3,67 (m, 2H), 4,02 - 4,34 (m, 2H), 9,43 a 9,53(dvě d, 1H).

MS: (M+H)⁺= 444.

20E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rRS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-hydroxy-3methyl)butyl-3-(t-butyldimethylsilyIoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxyIové kyseliny.

Roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-formyl-3-(tbutyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (7,1 g, 16,03 mmol) v diethyletheru (75 ml) se nechá reagovat s izobutylmagnesiumchloridem (24 ml, 2,0 M v etheru, 48 mmol) při teplotě 0°C po dobu 2,5 hodin. Reakce se zháší s nasyceným chloridem amonným a zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO.,, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se použije v následujícím kroku bez dalšího čištění.

MS: (M+H)⁺ = 502.

20F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l -t-butoxykarbonyl-2-(l-oxo-3-methyl)butyl-3-(tbutyIdimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Připraví se roztok oxalylchloridu (16 ml, 2M v CH2CI2) ve 100 ml bezvodého dichlormethanu se připraví a udržuje pod atmosférou dusíku, při teplotě -78°C, pomalu se přidá do roztoku DMSO (4,26 ml, 64,1 mmol). Směs se míchá po dobu 15 minut a nechá reagovat s t-butylem (±)-(2R,3R,5R,l’RS)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-hydroxy-3methyl)butyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny ve 30 ml bezvodého dichlormethanu. Roztok se míchá po dobu 1 hodiny a do reakční směsi se pomalu přidá triethylamin (17 ml, 128 mmol). Roztok se pomalu ohřeje na pokojovou teplotu, zháší nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5-10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 6,3 g, 78,8 %).

¹H NMR (CDCl₃)??0^07(hi76H)rW- 0ý6lmTBH)7R40a^lý4;2Tdvěsý9H)^^

1.46 a 1,47 (dvě s, 9H), 1,72-1,82 (m, 1H), 2,15 - 2,45 ým, 4H), 3,47 - 3,69 (m, 1H), 4,28 4.46 (m, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 500.

20G. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’RS)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -amino-3-methyl)butyl3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'(*

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1 F nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-oxo-3- methyl)butyl-3(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(l-oxo-3-ethyl)pentyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,54 g, 34,1%).

MS: (M+H)⁺= 501.

20H. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pynOlidin-5-kařboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1G nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,VRS)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-amino-3methyl)butyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylove kyseliny² za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)- a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-amino3-ethyl)pentyl-3-(t-butyldiměthylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 462 mg, 79,0 %).

(±)-(2R,3R,5R,l’S) ^JH NMR (CDC1₃): δ 0,03 a 0,04(dvě s, 6H), 0,86 (s, 9H), 0,89 a 0,95(dvě d, 6H), 1,04 (m, 1H), 1,17-1, 25 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,86 (m, 1H),

1,99 (s, 3H), 2,07 (m, 1H), 2,30 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,67 (m, 1H), 4,16 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 7,35(brd, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 543.

• ·

128

201. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3methyl)butyl-3-(hydroxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-kárboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl) butyl-3-Z-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M+H)⁺ = 429.

J. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3methyl)butyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 1,5 g, 91 %).

v

129

’Η NMR (CDC1₃): δ 0,92 a 0,94(dvě d, 6H), 1,07 (m, 1H), 1,23-1,33 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,64 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 2,39 (m, 1H), 2,46 (m, 1H), 3,18 (m, 1H),

4,19 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 7,12(br d, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 427.

20K. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3 methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do suspenze methyltrifenylfosfoniumbromidu (125,6 mg, 0,35 mmol) ve 3 ml bezvodého toluenu se přidává po kapkách při pokojové teplotě t-butoxid draselný (1,0 M v THF, 0,31 mmol). Po 16 hodinovém míchání se přidá po kapkách t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (30 mg, 0,070 mmol) ve 3 ml toluenu a míchá po dobu 0,5 hodiny. Reakce se zháší nasyceným chloridem amonným a zředí methylenchloridem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu pomocí ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina jak bílá pěnovitá tuhá látka (výtěžek: 23,7 mg, 79,4%).

*H NMR (CDCI3): δ 0,92 (m, 6H), 1,26 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,65 (m, 1H), 1,97 (s, 3H), 2,43 (m, 2H), 3,56 (m, 1H), 4,15 (m, 2H), 4,32 (m, 1H), 5,11 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,75 (m, 1H), 7,35 (br, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 425.

Ρ • ·

130

AcHN„

20L. Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R, 1 'S)-2-(l -acetamido-3-methyl)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(methoxymethyl)-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny (výtěžek: 16,0 mg, 99,1%).

Ή NMR(DMSO-d₆): δ 0,82 (d, 3H), 0,88 (d, 3H), 1,29 (m, 1H), 1,42 (m, 1H), 1,57 (m, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,91 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 5,08 (dd, 1H), 5,17 (dd, 1H), 5,72 (ddd, 1H), 8,09 (d, 1H), 9,16(br s, 1H), 9,28(br s, 1H).

MS: (M+H)⁺= 269.

Příklad 21

Hydrochlorid (+)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O’Bu

Y

O

A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pěntyl-3hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M+11) 471.

21B. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,í'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR(DMSO-d₆): δ 8,15 (d, J=9Hz, 1H), 4,28-4,15 (m, 2H), 3,95-3,45 (m, 4H), 2,35 (m, 1H), 1,98 (m, 1H), 1,89 (s, 3H), 1,50-1,45 (m, 7H), 0,81 (t, J=7,4Hz, 3H), 0,77 (t, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 301, (M-H)’ = 299.

132.

Příklad 22

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(pyrrol-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R, 1 'S)-l -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(2trimethylsilylethoxykarbonylamino)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (80 mg, 0,18 mmol), připravený podle postupu popsaného v příkladu 2B, se nechá reagovat s difenylfosforylazidem (0,047 ml, 0,216 mmol), 2-trimethylsilylethanolěm (0,034 ml, 0,234 mmol) a triethylaminem (0,030 ml, 0,216 mmol) vtpluenu (2 ml) při teplotě 75°C po dobu 15 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu a výsledný zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 25% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako světle žlutý olej (výtěžek: 46 mg, 45%).

MS: (M+H)⁺ = 576, (M+Na)⁺ = 598, (M-H)’ = 574.

H,N

,0‘Bu

AcHN,, v

______ 133.______

22B. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R, 1 'S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1H nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(2trimethylsilylethoxykarbonylamino)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M+H)⁺ = 432, (M-H)' = 430.

22C. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(pyrroll-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (34 mg, 0,078 mmol) se nechá reagovat s 40% sukcindialdehydem ve vodě (50 mg, 0,234 mmol), kyselinou octovou (0,00044 ml, 0,0078 mmol) a 4A molekulárními síty (200 mg) v toluenu (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu a výsledný zbytek čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 7,1 mg, 19%).

MS: (M+H)⁺ = 482, (M+Na)⁺ = 504, (M-H)' = 480.

22D. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(pyrrol-l -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(pyrrol-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,5 mg, 61%).

MS: (M+H)⁺ = 392, (M-H)' = 390.

22E. Hydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(pyrrol-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2S,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(pyrrol-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,5 mg, 100%).

• · · 9

-135• ·

9—·-·— 'H NMR (D₂0): δ 7,48(bs, IH), 6,77(bs, 2H), 5,97(bs, 2H), 4,33 (m, 1H), 3,70 (m, IH), 3,07 (m, IH), 2,43 (m, IH), 1,92 (m, IH), 1,75 (s, 3H), 1,55 (m, IH), 1,35-1,10 (m, 7H), 0,81 (m, 3H), 0,75 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 336, (M-H)‘ = 334.

Příklad 23

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(l-cA-N-hydroxyimino)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1' S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3 -(1 -c ΑΝ- hydroxyimino)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-beňzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-acetylpyrrolidin-5-kárboxylové kyseliny (45 . mg, 0,1 mmol), připravený podle způsobu z příkladu 8B, v methanol/methylenchloridu (3/1) se nechá reagovat s roztokem hydroxylaminhydrochloridu (21 mg, 0,3 mmol) a hydroxidem sodným (12 mg, 0,3 mmol) v methanolu (2 ml) po dobu 2 hodin. Reakce se zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 40% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina cA-oxim (skvrna s nižším Rf při TLC) jako olej (výtěžek: 35 mg, 75%) a požadovaná sloučenina Zram-oxim (skvrna s vyšším Rf při TLC) jako olej (výtěžek: 13 mg, 25%).

MS: (M+H)⁺ = 474.

23B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(l-c«-Nhydroxyimino)ethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3(l-c«-N-hydroxyimino)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (CDC1₃): δ 3,92 (br, 1H), 3,70 (m, 2H), 2,82 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,40-1,20 (m, 7H), 0,76 (m, 6H).

_______MS: (Μ Η1)' - 384.

NOH

23C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(l-c«-Nhydroxyimino)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(l -c«-N-

v ίϊ f, l . __ 137 í’’ hydroxyimino)ethyl-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (D₂O): δ 4, 35 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,80 (m, 1H), 3,71 (m„ 1H), 3,63 (m, 1H), 3,13(q, J = 8,4Hz, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,97 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,50-1,10 (m, 7H), 0,77 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 328.

Příklad 24

Hydrochlorid (+)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-hydroxyimino)methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

24A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nhydroxyimino)methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (18 mg, 0,051 mmol), připravený podie způsobu z příkladu 2A se nechá reagovat s hydroxylaminhydrochloridem (7 mg, 0,11 mmol) v 1 N NaOH v methanolu (3 ml) při teplotě 25°C po dobu 1,5 hodin. Reakce se zháší vodným chloridem amonným (3ml) a vodou (3ml) a vytřepává dichlormethanem (2x 10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanolu v dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 6 mg, 32%).

MS: (M+H)⁺ =370.

138

NOH

24B. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(N-hydroxyimino)methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,ES)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(Nhydroxyimino)methyl-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3-ethyl)penty]-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 25 (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-Acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxyiniiňóJmetfiyl^:;pýřrblidin-5karboxylové kyseliny.

A. (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(methoxyimino)methyl-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina.

Oj

139 t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, l’S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-kyanopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20 mg, 0,045 mmol) připravený podle způsobu z příkladu 17E se nechá reagovat s chlorovodíkem (0,45 mmol) v etheru (2 ml) a methanolem (0,1 ml) při teplotě 0°C po dobu 5 hodin. Reakce se neutralizuje vodným hydroxidem amonným a čistí na sloupci silikagelu s 3% methanolem v dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 5 mg, 26%).

MS: (M+H)⁺ = 418.

25B. (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxyimino)methylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2Ř,3R,5Ř, 1 ’Šj-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-etbyl)pentyI-3(imino-methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny(výtěžek: 3,9 mg, 96%).

*H NMR (DMSO-dé) δ 7,52 (d, J=8,7 HZ, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,22 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,23 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 1,78 (s, 3H),

1,40 (m, 1H), 1,26 (m, 3H), 1,13 (m, 3H), 0,78 (t, J=6,5 Hz, 3H), 0,72 (t, J = 6,5 Hz, 3H).

Příklad 26

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(hydroxyacetyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

14Ό

• · • « • « • · <

9999 99

26Α. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S, lRS)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3 methyl)butyl-3-(1,2-dihydroxy)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-l -/-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2S,3R,5R)-lbenzyl-2-vinyl-3-(t-butyldimethylsilyloxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

26B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(hydroxyacetyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S,r'RS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3 methyl)butyl-3-(l ,2-dihydroxy)ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s dibutylcínoxidem v methanolu podle způsobu popsaného Kongem v J. Carbohydrate Chem. 1993, p. 557. Reakce se koncentruje a zbytek se znovu rozpustí v dichlormethanu a nechá reagovat s bromem podle způsobu ve výše uvedeném odkazu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Cl

141

26C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(hydroxyacetyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-hydroxyacetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)pyrroIidin-5karboxylové kyseliny.

Příklad 27

Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R, 1 'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-amino-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

27A. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l'RS)-l -benzyl-2-(l -hydroxy-3-methyl)butyl-3benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 9D nahrazením izobutylmagnesiumbromidu místo 3-pentylmagnesiumbromid.

142

27B. t-Butylester (±)-(2S,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu s 9E-H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’RS)-l-benzyl-2-(l-hydroxy-3-methyl)butyl-3benzyloxykarbonylamino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’RS)-1 -benzyl-2-( 1 -hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-benzyloxykarbonylaminoi pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny jako výchozí látky postupu v příkladu 9E.

·-

27C.> Dihydrochlorid (±)-(2S,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl) butyl-3-aminopyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR(d_ó-DMSO) δ 8,64( bs, ÍH), 8,32(bs, ÍH), 8,23(bs, ÍH), 8,18 (d, J=6Hz, ÍH), 4,79 (d, J=7Hz, ÍH), 4,42 (m, ÍH), 4,33 (m, ÍH), 4,21 (m, ÍH), 4,07 (m, ÍH), 3,76 (m, 2H), 2,73 (m, 2H), 1,92 (m, 3H), 0,80-0,97 (m, 7H).

MS (M+H)⁺ = 258.

i·' s

143

Příklad 28

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

,O*Bu

AcHN,

28Á. t-Butyíester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3methylbutyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l -Z-butoxykarbonyl-2-(l -aeetamido-3methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny i za t-butylester (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1-benzyl-2-( 1-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové-kyseliny,—~--— __________________________;______;_____________

,O‘Bu

28B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-3methyl)butyí-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karb.oxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester

	• · · *» « ·	• ·· ·· ·· • · · · · · · ·
&	144	• ·· • · · ··· ·.·	• · · · · · • · · · · ·

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

28C. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2E nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl -2-( 1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-de): δ 8,24, 8,08 (d, J=9Hz, 1H), 4,44, 4,36 (m, 1H), 4,25, 4,15 (m, lil), 3,98, 3,88 (m. 111), 3,65. 3,64 (s. 311), 3,18, 3.10 (m. 1H), 2,57, 2,20 (m, 211), 1,87, 1,83 (s, 3H), 1,57 (m, 2H), 1,36 (m, 1H), 0,88 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,82 (d, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ -301.

Příklad 29

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-2-yl)/ pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

29A. t-Butylester (tXŽR^KSR^Sj-l-benzyl^-Q-acetamido-S-methyljbutyl-S(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

» Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2V (l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 27,4 ů

V mg, 83, %).

ΐ '

MS: (Μ > II)’ 455.

29B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l^,S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 19,1 mg, 95,5%).

MS: (M+H)⁺ = 365.

29C. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-2yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina sé připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(imidažol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR(DMSO-d₆): δ 0,76 (d, J - 6,6 Hz, 3H), 0,82 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,18 (t,, 2H), 1,44 (m, 1H), 1,71 (s, 3H), 2,43-2,47 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,28 (m, lH), 4,55 (t, 1H), 7,65 (s, 2H), 8,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H). ‘

MS: (MUl·)' = 326.

Příklad 30

Dihydrochlorid (±)-(3R,5 R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3 -(imidazol-4-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

___ 147

30A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2B ůahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny připraveného podle způsobu popsaného v příkladu 20J za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 129,5 mg, >100 %).

MS: (M i-Il)' =443.

30B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3diazoacetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 12A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny ža t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 218,8 mg, 100%).

MS: (M+H)⁺ = 458.

if i·

p.

30C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3bromacetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 12B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3diazoacetyl-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-diazoacetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 107,2 mg, 45,5 %).

*H NMR (CDCb): δ 0,90 (d, 6H), 1,26 -1,35 (m, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,95 (s, 3H),

2,25 (m, 2H), 3,11 (m, 1H), 3,54 (dd, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,93 (dd, 2H), 4,11 (d, 1H), 4,27 (m, 1H), 4,35 (d, 1H), 5,O5(br d, 1H), 7,25-7,32 (m, 5H).

MS: (M+H)⁺ = 509.

30D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3 (imidazol-4-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 12C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3bromacetyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-

149___ β-9 9

benzyl-2-( 1 -acetamido-3 -ethy 1 )penty 1 -3 -bromacetyl-pyrrolidin-5 -karboxylové (výtěžek: 32,3 mg, 60,4%). ¹ kyseliny

MS: (M+H)⁺= 455.

30E. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-4-yl)pyrrol id i n-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(imidazol-4-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 23,9 mg, 96,2%).

'H NMR (CDC1₃): δ 0,87 (d, 311), 0,89 (d, 3H), 1,26 (m, 1H), 1,41 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,59 (m. 111). 1,93 (s, 3H), 2,62 (m, lil), 3,30 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 3,79 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 6,11 (brd, 1H), 6,89 (s, 1H), 7,63 (s, 1H)’

MS: (M+H)⁺ = 365.

HCl

150 • ·· · ·· ·· ·· ··«· ···· · · · « ··· · ····· • c · · · ······ • · · ·· ···· β β β 9 9 9 9 9 9 9 9 9_9 9 9 9 _ fé<

tt

30F. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-4yl)-pyřrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol4-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-(methoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina, čímž se získá požadovaná sloučenina ve formě tuhé látky (výtěžek: 24,4mg, 100%).

. ’H NMR(DMSO-d₆): δ 0,76 (d, J = 3,6 Hz, 3H), 0,88 (d, J = 3,6 Hz, 3H), 1,22 (m,

1H), 1,28 (m, 1H), 1,48 (m, 1H), 1,79 (s, 3H), 2,32 (dt, 1Ή), 2,71 (dt, 1H), 3,68 (m, 1H), jp ' 3,96 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,51 (t, 1H), 7,63 (s, 1H), 8,23 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 9,10 (s, i, , ' ^! '

1H), 9,67(br s, 1H), 14,51(br s, 1H).

MS: (M+H)⁺= 309.

Příklad 31

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,í ’ S )-2-( 1 -acetamido-3-methyí)butyl-3-(thiazol-4-yÍ)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3methyl)butyl-3-(thiazol-4-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

151

Λ y .3/71 • · · · ·

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, Γ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3methyl)butyl-3-bromacetyl-pynolidin-5-karboxylové kyseliny (36,5 mg, 0,07 mmol) se nechá reagovat s thioformamidem (21,4 mg, 0,35 mmol) v ethanolu (5 ml) při refluxní teplotě po dobu 4 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se nechá reagovat s 5 ml vodným NaHCCb a extrahuje dichlormethanem (4x5 ml). Organická vrstva se promyje solankou, suší nad Na₂SO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 23,8 mg, 70,4%).

MS: (M+H)⁺ = 482.

31B. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-4yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(thiazol-4-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 18,5 mg, 100%).

’H NMR(DMSO-dé): δ 0,62 (d, J = 4,2 Hz, 3H), 0,72 (d, J = 4,2 Hz, 3H), 1,05 (m, 1H), 1,12 (m, 1H), 1,30 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 2,14 (dt, 1H), 2,59 (dt, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,92(br m, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,38(br m, 1H), 7,46 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 9,04 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 9,39(br s, 1H), 9,48(br s, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 326.

/

152

Příklad 32

Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O‘Bu y

o

A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-karbamoyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -í-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-karboxyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,258g, 0,584 mmol) se nechá reagovat s izobutylchloromravenčanem (80 mg, 0,84 mmol) a N-methylmorfolinem (59 mg, 0,584 mmol) v THF(10 ml) při teplotě 0°C po dobu 0,25 hodin. Přidá se vodný roztok hydroxidu amonného (0.39 ml) a reakce se míchá při teplotě 0°C po dobu 0,5 hodin. Reakce se zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO-t, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% ethylacetátu až 5 % methanol-etbylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina podobná sklu (výtěžek: 182 mg, 70,7 %).

*H NMR (CD3OD): δ 4,70 (m,lH), 4,36(q,J=3Hz,lH), 4,05 (m,lH), 2,87(q z t, J=9 a 3 Hz, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,36 (m, 1H) 1,94 (d, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,41-1,53 (m, 18H),

1,3 (m, 2H), 0,9-0,18 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 442.

2B. t-Butylester (±)-(2R,3 R,5R, l'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-thiokarbamoyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (+)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-karbamoyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (70 mg, 0,159 mmol) se nechá reagovat s P2S10 (8,5 mg, 0,019 mmol) ve 4 ml tetrahydrofuranu a 1 ml methylenchloridu při pokojové teplotě. Po 1,25 hodině se přidá 9,6 mg P2S10. Výchozí látka zreaguje po 2 hodinách. Směs se zředí ethylacetátem, promyje vodou a solankou, suší nad MgsO₄, filtruje a koncentruje. Při TLC analýze jsou vidět dvě tečky a hmotnostní spektrometrie ukáže na směs mono-thio a di-thio sloučenin. Látka se použije v následujícím kroku bez dalšího čištění.

MS: (M+11)' = 458,474.

32C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-thiokarbamoyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (73 mg, 0,16 mmol) se nechá reagovat s chloracetaldehydem (50% ve vodě) (0,02 ml, 0,16 mmol) v 5 ml acetonu při teplotě 75°C, v průběhu následujících 5 hodin se přidává magnesiumsulfát (0,9 g) a další chloracetaldehyd, dokud nedojde k úplné přeměně výchozí látky. Reakce se zředí

W.

154 ·· » « ·· ····· · · · · ethylacetátem, promyje vodou a solankou, suší nad MgSCb, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina podobná sklu (výtěžek: 12,6 mg, 16,3%).

'H NMR (CDC1₃): δ 7,69 (m, 1H), 7,45 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,28 (m, 2H), 3,52 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 1,99 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,37 (s, 9H), 1,27 (m, 3 H), 0,95 (m, 6 11).

MS: (M+H)⁺ = 482.

32D. Dihydrochlorid (±)-(2R,3R,5R, l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-ačetamido-3methyl)butyl-3-(thiazol-2-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

__________ Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu _1 K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3 methyl)butyl-3-(thiazol-2-y])-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S )-2-( 1 -acetamiďo-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kýseliny (výtěžek: 10,1 mg, 82%).

*H NMR(DMSO-dé): δ .8,1 (d, J=10Hz, 1H), 7,79 (d, J=4Hz, 1H), 7,69(d=4 Hz, 1H), 4,49 (t, J=7,5,1H), 4,22 (m, 1H), 4,14 (t, J=9Hz, 1H), 4,01(q, J=10Hz, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,47 (m, 1H), 1,25 (m, 2H), 0,83 (d, J=6,2Hz, 3H), 0,75 (d, J=6,2Hz, 3H).

MS: (M-Η)' = 324, (2M-1)’ = 649, (M+350)⁺ = 360.

155

Příklad 33

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)- 2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cw-2-chlor-vin1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

33A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyí-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(cz5-2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a t-butylester (+)r(2R,3S,5R,l ’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(/ra«.s-2-chlorvin-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20K nahrazením (chlormethyl)trifenylfosfoniumchloridu za methyltrifenylfosfoniumbromid. Nová skvrna s vyšším R_f 0,73 (ethylacetát) byla identifikována jako czs-izomer (výtěžek: 38,4 mg, 40 %) a skvrna s nižším Rf 0,5 7 (ethylacetát) jako Zra«s-izomer(výtěžek: 42 mg, 43 %).

cN-izomer 'Η NMR (CDC1₃): δ 7,44 (br, 1H), 6,13 (d, J=7,5Hz, 1H), 5,32 (dd, J=9Hz, J=7,5Hz, 1H), 4,31-4,16 (m, 2H), 3,65 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 1,98 (s, 3H), 1,62 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,304,07 (m, 2H), 0,82 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺= 459

Zrazzs-izomer.

156 ·· • · ·· : :

«· >H NMR (CDC1₃): δ 6,12-5,90 (m, 2Η), 4,30-4,07 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 2,62-2,37 (m, 2H), 1,98 (s, 3H), 1,69 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,26 (m, 2H), 0,91 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺= 459.

33B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz's-2chlor-vin-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(czÁ-2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (10 mg, 0,022 mmol) se nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou(l,8 ml) v dichlormethanu (0,4 ml) při pokojové teplotě po dobu 7 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

~ 'li NMR(DMSO-d₆): δ 8,015 (d, J-7,63Hz. IH), 6,42 (d, T 7,02Hz, lil), 5.89 (dd. J=7,02Hz, J=8,7Hz, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,17 (m, IH), 3,59 (m, IH), 3,31 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 1,88 (s, 311), 1,84 (m, IH), 1,58 (m, IH), 1,39 (m, IH), 1,29 (m, 2H), 0,885 (d, J=6, 71Hz, 3H), 0,83 (d, J=6,41,3H).

MS: (M+H)⁺= 303.

Příklad 34

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(/razz5-2-chlor-vin1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

157

• · ·	• ··	··	« ·
• β · β	• * β ·	• ·	• ·
• · ·	« ·	• ·	• ·
			• ·
• · ·	• ·	• ·	• ·
♦ ·· ··	• · · · · · ·	«'·	··

34B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,TS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(Zrara-2chlor-vinyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(/ra/7.s-2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz.s'-2-chlor-vin1 -yl)-py^rrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,04 (d, >7,93Hz, 1H), 6,355 (d, >13,1 Hz, 1H), 5,93 (dd, >13,1 Hz, >9,32 Hz, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,40 (m, 1H),

1,94 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,58 (m, 1H), 1,39 (m, 1H), 1,29 (m, 1H), 0,89 (d, >6, 7 Hz,

3H), 0,825 (d, >6,7 Hz, 3H).

.. . _MS; (Μ Η1)’ 303.

Příklad 35

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(m-propen-l-yl)pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

5 A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do suspenze ethyltrifenylfosfoniumbromidu (479 mg, 1,29 mmol) ve 3 ml bezvodého toluenu se přidá po kapkách při pokojové teplotě t-butoxid draselný (1,0 M v THF, 0,94 mmol). Po 2,5 hodinovém míchání se přidá po kapkách t-butylester (±)(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (90 mg, 0,211 mmol) v 5 ml toluenu a míchá po dobu 1 hodiny. Reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným a zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 70,6 mg, 76%).

MS: (M+H)⁺ = 439.

O

35B. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

¹

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-3 methyl)butyl-3-(m-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(<%?-2-chlor-vinyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(DMSO-d6): δ 8,04 (d, J=7,5Hz, 1H), 5,51 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,18 (m, 1.H), 2,39 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,73 (m, 1H),

1,63 (dd, 3H), 1,58 (m, 1H), 1,38 (m, 1H), 1,28 (m, 1H), 0,88 (d, J=6Hz, 3H), 0,81 (dd, J=6Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 283.

Příklad 36

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2-dimethyl-vinl-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

,36A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TS)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3 -(2,2-dimethyl-vin-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20K nahrazením izopropyltrifenylfosfoniumjodidu místo methyltrifenylfosfoniumbromidu

- — (výtěžek: 22;6 mg. 33%). -------—------------- ---------------------- ________ ’H NMR (CDCI3): δ 7,77 (d, 1H), 5,06 (d, J=10Hz, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,97 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,65 (m, 1H),

1,47 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,30-1,00 (m, 3H), 0,93 (d, J=6Hz, 3H), 0,88 (d, J=6Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 453.

CH₃ ch₃

AcHN

TFA

36B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2dimethyl-vin-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(2,2-dimethyl-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cA-2-chlor-vinl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

I ^JH NMR(DMSO-d₆): δ 8,01 (d, J=7,5 Hz, IH), 4,99 (d, J=10Hz, IH), 4,30 (m, IH),

4,14 (m, IH), 3,40 (m, IH), 3,06 (m, IH), 2,36 (m, IH), 1,86 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 1,63 (s, ί 3H), 1,57 (m, IH), 1,39-1,20 (m, 3H), 0,88 (d, J=6Hz, 3H), 0,81 (d, J=6Hz, 3H).

V '

K,¹ '

MS: (ΜΠ1) = 297.

Příklad 37

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-'aCetamido-3-methyl)bútyl-3-(2,2-difluor-vin-.lyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

7A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3methyl)butyl-3-(2,2-difluor-vin-1 -yl)-pyrrolidin- 5 -karboxylové kyseliny.

Do diizopropylaminu (136 μΐ, 0,97 mmol) ve 4 ml THF při teplotě -78°C se přidá n-butyllithium (1,6M v hexanech, 0,61 ml, 0,97 mmol) a míchá po dobu 30 min, přidá se diethyldifluormethylfosfonát (182 mg, 0,97 mmol). Bezbarvý roztok se po 2 hodinách míchání při teplotě -78°C pomalu změní na žlutý.. Přidá se t-butylester (±)-

(2R,3R,5R,l’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (59 mg, 0,138 mmol) ve 3 ml THF a míchá při teplotě -78°C po dobu 30 min, pak se zahřeje na pokojovou teplotu. Směs se pak zahřívá při refluxu po dobu 1.,-5 hodiny a míchá při pokojové teplotě přes noc. Reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným a zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako světle žlutý olej(23,4 mg, 37%).

*H NMR (CDCls): δ 7,44 (d, 1H), 5,92 (ddd, 1H), 4,30 - 4,00 (m, 2H), 3,55 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 1,451,00 (m, 4H), 0,91 (ni, 611).

MS: (M^: 11)--461.

37B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-aeetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2difluor-vin-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3methyl)butyl-3-(2,2-difluor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3 (czT-2-chlor-vin1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR(DMSO-cU): δ 8,04 (d, J=7,5Hz, 1H), 4,59 (ddd, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,14 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,58 (m,

		• 00 0 ·· ·· ·· ·· · 0 00 0 0 0 0 0 0 0 00 · 0 0 0 0 ·
-........ , __	162	0 0 0 0 0 0 0 '· 0 000 00 000 0000 00 00

1H), 1,40 (m, 1H), 1,31 (m, 1H), 1,22 (m, 1H), 0,89 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,83 (d, J=7,5Hz, 311). .

MS: (M+H)⁺ = 305.

Příklad 38

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

OH

AcHN. Λ A' ň!L.Y

38A. t-Butylester(±)-(2R,3R,5R,l’S,lRS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(l-hydroxy-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

n; Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladů 4A—------_r nahrazením 2-propynylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid a nahrazením tbutylesteru (±)-(2R,3R,5 R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (250 mg, 0,587 mmol) za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, surový produkt se použije v následující reakci.

MS: (M+H)⁺= 453.

: v

163

♦ ·«»	9. 9 9	··		··
9 9 9 9	99 9 9	•	9	•	•
• 99	9 ·	•	9	•	•
					9
9 9 9	• ·	•	•		•
999 99	··· ····	99		··

38B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-( 1 -oxo-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

&

h‘ i

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, Γ S)-1 -i-butoxykarbonyl-2~(l -acetamido-3-methyl)butyl-3-(l-hydroxy-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s Jonesovým činidlem (3,0 M v acetonu, 0,33 ml) v acetonu (90 ml) při teplotě 0°C až pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Reakce se zředí ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, fdtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 143 mg, 54%).

MS: (M+H)⁺ = 451.

38C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(pyrazoL·3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -i-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-(l-oxo-l-ethynyl)methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (140 mg, 0,311 mmol) se nechá reagovat s hydrazinmonohydrátem (0,24 ml, 4,944 mmol) v ethanolu (12 ml) při pokojové teplotě po dobu 4 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 131 mg, 91%).

MS: (M+H)⁺ = 465.

38D. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,TS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(pyrazol-3yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,1’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3R,5Ř, 1 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz.s-2-chlor-vinyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(DMSO-d₆): δ 8, 13 (d, J=7,5Hz, ÍH), 7,65 (d, J=2,2Hz, ÍH), 6,20 (d, .1 2,211 z, lil). 4.39 (m, 111), 4,25 (ni. 111). 3.94 (m, III), 3,56(q, .1 -7,51 Iz, 1II), 2,62 (m, ÍH), 2,17 (m, ÍH), 1,87 (s, 3H), 1,42 (m, ÍH), 1,21 (m, ÍH), 1,11 (m, ÍH), 0,80 (d, J-6.6Hz, 311), 0,71 (d. .1 6,6Hz, 311).

MS: (M+H)⁺ = 309.

Příklad 39

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-3-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido3-methyl)butyl-3-(izoxazol-5-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

165

• ··	9 9 9	··	··
9 · ♦	9· 9 9	• 9	9 .9
• ··	'♦ Φ	9 9	• ·
			• ·
9 · ·	• ·	9 9
·· 99	• · · · · · ·	‘9 9	··

39A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3methyl)butyl-3-(izoxazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxýlové kyseliny a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methy])butyl-3-(izoxazo]-5-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl) butyl-3-(lpxo-l-ethynyl) methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (31 mg, 0,07 mmol) se nechá reagovat s hydroxyaminhydrochloridem (4,9 mg, 0,07 mmol) a uhličitanem sodným (3,7 mg, 0,035 mmol) v ethanolu (3 ml) při refluxní teplotě po dobu 30 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 3% methanol/dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 11,5 mg, 36%).

39B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-5-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 R,5R, Γ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3166 ·· » 4 ·· • · • '9 methyl)butyl-3-(izoxazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-r-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-5-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz5-2-chlor-vinyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

NMR(DMSO-d₆): δ 8,91, 8,54 (d, 1H), 8,12, 8,05 (d, J=7,5Hz, 1H), 6,64, 6,43 (d, 1H), 4,48, 4,51 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,97, 3,89 (m, 1H), 3,70, 3,81 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 1,83, 1,80 (s, 3H), 1,48 (m, 1H), 1,34 - 1,10 (m, 2H), 0,83, 0,84 (d, J=6Hz, 3H), 0,77, 0,78 (d, J=6Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 310.

Příklad 40

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l -acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-(cz.s-propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

40A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-(aceťoxymethyl)-pyrrolidih-5karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-vinyl-3-(hydroxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (54,2 g, 0,17 mol) a 4-(dimethylamino)pyridin(0,5 g, 4,1 mmol) v bezvodém pyridinu (400 ml) se nechá reagovat s anhydridem octové kyseliny(30 ml, 0,32 mol) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny, pak se zahřeje na pokojovou teplotu. Reakce se míchá dalších 16 hodin. Pyridin se odstraní ve vakuu při teplotě 30°C. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (100 ml) a vodu (400 ml). Vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (3 x

167 • '·· » ·· ·· ·· ·· · · ·# · · · · · · ··· · · ♦ · · · • · · '· · · '·· · · · · ··« · 9 9 9 9 9 .'999 99 999 9999 '99 99

100 ml) a spojené ethylacetátové vrstvy se promyjí solankou, suší MgSO₄, filtrují a koncentrují. Surový produkt se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 49,6 g, 81%).

*H NMR (CDC1₃): δ 7,28 (m, 4H), 7,21 (m, 1H), 5,68 (m, 1H), 5,21 (m, 2H), 4,16 (dd, J=6,3,10,7 Hz, 1H), 4,10 (dd, >7,3,10,7 Hz, 1H), 3,92 (d, J=13,7 Hz, 1H), 3,64 (d, J=13,7 Hz, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,62 (m, 1H), 1,45 (s, 9H).

MS (Milí)' =360.

40B. t-Butylester(±)-(2R,3R,5R,l'R)-a(±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-benzyl-2-(l,2dihydroxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Buťylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny(52,5 g, 0,15 mol) a N-oxid 4-methyhnorfolinu (54,7 g, 0,47 mol) v acetonu (540 ml) a vodě(60 ml) se nechá reagovat s oxidem osmičelým (200 mg, 0,8 mmol). Po 24 hodinách se reakce se zháší 10% thiosulfátem sodným (250 ml), koncentruje ve vakuu. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (3 x 300 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí solankou, suší nad MgSO₄, filtrují a koncentrují. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím a gradientově eluce ethylacetátu a dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako viskózní olej (výtěžek: 41,2 g, 72%).

’H NMR(DMSO): δ 7,32 (m, 3H), 7,30 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 4,48 (t, J=5,4 Hz, 1H), 4,42 (d, >5,4 Hz, 1H), 4,04 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,80 (d, >13,2 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 3,07 (t, >4,9 Hz, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,99 (s, 3H), 1,57 (dt, >13,7, 2,0 Hz, 1H), 1,38 (s, 9H).

168

MS (M+H)⁺ = 394.

AcO·

HO

O ,O’Bu ·« *· • · · • · ·

40C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R) a (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-( 1,2-dihydroxy)ethyl-3(ácetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R) a (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyl-2-(l,2dihydroxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (24 g, 61 mmol) v ethanolu (300 ml) se nechá reagovat š mravenčanem amonným (38,5 g, 0,61 mol) a 10% Pd/C(2g) po dobu 2 hodin při refluxní teplotě. Reakce se ochladí a katalyzátor se odstraní filtrací přes Celit. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 16,7 g, 90%).

*H NMR (DMSO): δ 4,56 (m, 1H), 4,30 (m, ÍH), 4,06 (dd, >5,8, 10,9 Hz, 2H),

MS (M+H)⁺ = 304.

AcO—_sHO, l

HO'

40D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R) a (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l,2dihydroxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

·· • · ·· ··

169 ·· ·· » · · · ► · · · ft · · · » · · · ·· ·· t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R) a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l,2dihydroxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (33,4 g, 0,11 mol) v methanolu (250 ml) a vodě (50 ml) se nechá reagovat s di-ř-butylbikarbonátem (33,6 g, 0,15 mol) po dobu 48 hodin při pokojové teplotě. Methanol se odstraní ve vakuu a zbytek se zředí vodou (500 ml) a extrahuje ethylacetátem (3 x 200 ml). Spojené acetátové vrstvy se promyjí solankou, suší MgSCfi, filtrují a koncentrují. Zbytek se chromatografuj e na sloupci silikagelu použitím methanol/dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá pevná látka (výtěžek: 32,8 g, 78%).

*H NMR (DMSO): δ 4, 80 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,28 (m, 2H), 2,48 (m, 1H), 2,07 (m, 2H), 2,01 (m, 3H), 1,39 (m, 1811).

MS (Μ+1I)' = 404.

O‘Bu

Y o

40E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R) a t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -tbutoxykárbonyl-2-(l-hydroxy-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)pyrrolidin-5karboxýlové kyseliny.

t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,l’R) a (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l,2dihydroxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (26,5 g, 66 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (200 ml) se nechá reagovat simidazolem (8,9 g, 0,13 mol) a triizopropylsilylchloridem (19,0 g, 99 mmol) po dobu 4 hodin při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi 300 ml vody a 150 ml ethylacetátu. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml) a spojené ethylacetátové vrstvy se extrahují solankou, suší MgSCL, filtrují a koncentrují. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 28,9 g, 79%).

	« · · • * ♦ 9 9 9 9	• 9 9 99 99 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
i. i-,-,-Z_	170	• 9 9 9 9 · 9 9	9 9 9 9 9 9 999 9999 9 9 9 9

^JH NMR (CDC1₃): δ 4,22 (m, 1Η), 4,04 (m, 3H), 3,87 (t, J=2,0 Hz, 1H), 3,74 (dd, J=4,9,9,8 Hz, 1H), 3,58 (dd, >7,8,10,2 Hz, 1H), 3,39(bs, 1H), 2,61 (m, 2H), 2,03 (s, 3H),

1,75 (m, 1H), 1,46 (m, 18H), 1,07 (m, 18H).

MS (M+H)⁺= 560.

,O^fBu o

40F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-oxo'-2triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Dimethylsulfoxid (6 ml, 85 mmol) se přidá pomalu do roztoku oxalylchloridu (2 M) (19,3 ml, 38,6 mmol) v suchém dichlormethanu (70 ml) při teplotě -78°C. Po 10 minutách se přidá roztok t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R) a t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ^,S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-hydroxy-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3(acetoxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové . kyseliny _(14,4- g, 26 mmol) v suchém dichlormethanu (75 ml) v takové míře, aby teplota nepřesáhla -70°C. Po 1,5 hodině se přidá triethylamin (18 ml, 0,13 mol) a teplota se zvýší na 0°C. Reakce se zháší roztokem chloridu amonného, zředí vodou a extrahuje dichlormethanem (3 x 100 ml). Spojené dichlormethanové vrstvy se extrahují solankou, suší s MgSO₄, filtrují a koncentrují. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 11 g, 77%).

^!H NMR (CDCI3): δ 4,32 (m, 6H), 2,43 (m, 2H), 2,04 (s, 3H), 1,78 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,41 (s, 9H), 1,1 (m, 21H).

MS (M+H)⁺ = 558.

·Λ>

171

AcO—

0‘Bu

40G. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'R) at-butylester(±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Zbutoxykarbonyl-2-(l-amino- 2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -oxo-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (22 g, 39 mmol) v methanolu (1 1) se nechá reagovat s octanem amonným (77 g, 1,0 mol) a kyanoborohydridem sodným (24,8 g, 0,39 mol) při refluxní teplotě po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo se . odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi vrstvu vody (300 ml) a dichlormethanu (300 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (2 x 100 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí solankou, suší s MgSCfi, filtrují a koncentrají, čímž se získá požadovaná sloučenina (surový výtěžek: 22,0 g, 100%).

TIPSO

40H. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R) a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-ZButoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3 -(acetoxymethyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R) a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-amino-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (přibližně 39 mmol) v dichlormethanu (500 ml) se nechá reagovat s anhydridem octové kyseliny (18 ml, 0,19 mol), triethylaminem (27,5 ml, 0,20 mol) a dimethylaminopyridinem (50 mg, 0,39 mmol) po dobu 18 hodin při pokojové teplotě. Reakce se zháší roztokem chloridu amonného. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem

172

(3 χ 100 ml) a spojené organické vrstvy se extrahují solankou, suší MgSO₄, filtrují a koncentrují. Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu použitím ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)-l-t-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9,14 g, 39%) a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-t-butoxykarbonyl-2-(lacetamido-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9,75 g, 41 %) jako bílá pevná látka.

(±)-(2R,3R,5R,l’R) *H NMR (CDC1₃) δ 7,38 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H),

4,20 (dd, J=2,4,10,3 Hz, 1H), 4,09 (dd, J=8,8,1O,2 Hz, 1H), 4,02 (dd, J=7,3, 10,1 Hz, 1H), 3,88 (m, 1H), 3,71 (dd, J=4,4,10,3 Hz, 1H), 3,65 (dd, J=7,9,10,3 Hz, 1H), 2,74 (m, 1H),

2,60 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,69 (dt, J=14,l, 2,5 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,42 (s, 9H), 1,07 (m, 21H).

MS(M+H)⁺ = 601 (±)-(2R,3R,5R,l’S) *H NMR (CDC1₃) δ 6,82 (d, 1H), 4,10 (m, 4H), 3,81 (m, 3H),

2,55 (m, 2H), 1,98 (m, 7H), 1,46 (s, 9H), 1,42 (s, 9H), 1,07 (m, 21H).

MS (M H)‘ 601.

,O‘Bu

TIPSO

401. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2triizopropylsilyloxy)ethyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-triizopropylsilyloxy)ethyl-3-(acetoxymethyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (8,2 g, 13,66 mmol) v methanolu (200 ml) a vodě (50 ml) se nechá reagovat s uhličitanem draselným

173 (19 g, 136 mmol) při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo se pak odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi vodu (100 ml) a dichlormethan (3 x 100 ml). Organické extrakty se suší nad MgSO4, filtrují a koncentrují ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej.

lf o

.O'Bu

40J. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2triizopropylsilyloxy)ethyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2triizopropylsilyloxy)ethyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny ža t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek; 5,9 g, 78%).

'H NMR (CDC1₃): δ 1,04 - 1,07 (m, 21H), 1,42 (s, 911), 1.4.3*(st 911), 1,99 (s, 3H),

2,42 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 3,04 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,57 (t, 1H), 7,33(br d, 1H), 9,65 (s, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 557.

TIPSO

O‘Bu li o

40K. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2triizopropylsiyloxy)ethyl-3-(c«-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

•j·,

174

i í

i¹

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 35A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ^rR)-l -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2triizopropylsilyloxy-)ethyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,9 g, 78%).

’H NMR (CDC1₃) δ 1, 03-1, 10 (m, 21H), 1,44 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,55 (m, 1H),

1,64 (dd, 3H), 1,96 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,62-3,71 (m, 3H), 4,20 (dd, 1H), 4,30 (m, 1H), 5,39 _;(m, 1H), 5,48 (m, 1H), 7,73(brd, 1H).

MS: (M il) = 569.

CH

AcHN

,OBu

40L. t-Butylester (±)^(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butóxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy)ethyl-3-(<7'.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylo\ó kyseliny. -----t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2triizoprbpylsilyloxy)ethyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (4,85 g, 8,54 mmol) v THF(100 ml) se nechá reagovat s tetrabutylamoniumfluoridem (1M v THF) (12,8 ml, 12,8 mmol) po dobu 30 minut při pokojové teplotě. Přidá se voda (100 ml), poté se provede extrakce dichlormethanem (2 x 100 ml). Tyto organické vrstvy se suší nad MgSCL, filtrují a koncentrují ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/1 :ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvá pevná látka (výtěžek: 3,1 g, 89%).

'H NMR (CDCI3): δ 1,44 (s, 9H), 1,47 (s,9H), 1,56 (dd, 3H), 1,80 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 2,67 (m,lH), 3,11 (t, 3H), 3,44 (dd, 1H), 3,59 (dd, 1H), 3,74 - 3,84 (m, 2H),

4,15 (dd, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,58 (m, 1H), 6,42 (brd, 1H).

• ·

175

MS: (M+H)⁺ = 413.

40M. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l 'R)-2-(l -acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-(cz3·propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 33B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l'R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-(cis-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-(/razz.v-2-chlorvinyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 18,0 mg, 100%).

'Η NMR (DMSO-d₆): δ 1,66 (dd, 3H), 1,71 (dt, 1H), 1,87 (s, 3H), 2,41 (dt, 1H),

3,18 (m, 1H), 3,43 (dd, 1H), 3,61 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,51 (m, 1H), 8,05 (d, 1H), 9,16(br s, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 257.

Příklad 41

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz's-propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

176

A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 formyl)methyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-(ó7'.s-propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové . kyseliny (600 mg, 1,46 mmol) v dichlormethanu (50 ml) se nechá reagovat s DMP (Dess-Martin periodinane).(928 mg,

2,18 mmol) po dobu 1 hodiny při pokojové teplotě. Reakce se zháší s 1 M vodným thiosulfátem sodným (50 ml), míchá po dobu 20 minut, pak extrahuje dichlormethanem(3 x 100 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/1:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina(výtěžek: 547 mg, 92%).

^JH NMR (CDC1₃) δ 9,40 (d, J= 1 Hz, IH), 7,88(bd), 5,69 (m, IH), 5,27 (m, IH), 4,78 (dd, J= 9,5,1, Hz, IH), 4,21 (t, J= 8, Hz, IH), 3,45 (m, 2H), 2,41 (m, IH), 2,09 (s, 3H), 1,69 (dd, J= 7,0,1, Hz, 3H), 1,55 (m, IH); 1,46 (s, 9Η)^ 1,40 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 411, (M-H)' = 409.

41B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) a (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5^,-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (780 mg, 1,90 mmol) v THF (20 ml) se přidá po kapkách do roztoku ethylmagnesiumbromidu (3M v etheru) (3,17 ml,

9,51 mmol) v THF(15 ml) při pokojové teplotě a nechá reagovat po dobu 40 minut. Reakce se zháší vodou(20 ml) a nasyceným vodným chloridem amonným (20 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (3 x 50 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím

• ·· • · · 9 9 9 9	9 9 9 99 9 9 9 9	• · · · • 9 9 · 9 · · ·
177	9 9 · 9 9 9 9 9	9 9 • 9 9 9 9 9 9	9 9 9 · 99 99

2/1 :ethylacetát/hexanů, čímž se získají požadované sloučeniny t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(c/5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 472 mg, 56%) a t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz'.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 82 mg, 10%) jako bezbarvý olej.

(+)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R) = MS:(M+H)⁺ = 441, (M+Na)⁺ = 463, (M-H)= 439.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) = MS:(M+H)⁺ = 441, (M+Na)⁺ = 463, (M-H)= 439.

41C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.s'propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3.S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(cz‘s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kýseliny (300 mg, 0,68 mmol) se nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou (8 ml) v dichlormethanu (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu přes noc, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 311 mg) jako bezbarvá pevná látka.

’H NMR(500 MHz, DMSO-4) δ: 7,89 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,41 (m, 1H),

1,82 (s, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,59 (dd, J = 6,8,1,9 Hz, 3H), 1,55 (m, 1H), 1,27 (m, 1H), 0,85 (t, J = 7,3 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H) = 283.

178

Příklad 42

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.s-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3(cE-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(ez'.s'-ptOpen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (460. mg, 1,05 mmol) se nechá reagovat s DMP (Dess-Martin periodinane) (666 mg, 1,57 mmol), v dichlormethanu (30 ml) při pokojové teplotě po dobu 17 hodin. Reakce se zháší s 1 M vodným thiosulfátem sodným (50 ml) a míchá po dobu 20 minut. Reakce se extrahuje dichlormethanem (3 x 100 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje . - ve vakuu. Zbytek se čistí ~ chromatografií .na _ sloupci silikagelu použitím 2/l:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvá polopevná látka (výtěžek: 440 mg, 96%).

MS: (M+H)⁺ = 439, (M+Na)⁺ = 461, (M-H)’ = 437.

O‘Bu

Ií o

O*Bu

Y o

42B. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R) a (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'S)-1 -/-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

V

179 ·* »

β « te ·· ·· *» • · ♦ · * · * * • β · · β · • ······ • · · · · · <♦ · »<·· ·· ·· t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)butyi-3(m-propen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (435 mg, 0,99 mmol) v methanolu (30 ml) se nechá reagovat s borohydridem sodným(188 mg, 4,97 mmol) při pokojově teplotě po dobu 0,5 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a přidá se voda (30 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml). Tato organická vrstva se suší nad MgSCfi, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/l:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-f-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 305 mg, 70%) a sloučenina t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -Tbutoxykarbonyl-2-( l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 17 mg, 4%).

42C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'.spropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(cz'.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (300 mg, 0,68 mmol) se nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou(8 ml) v dichlormethanu (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Reakce se koncentruje ve vakuu přes noc a trituruje acetonitrilem (2x5 ml), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 311 mg) jako bezbarvá tuhá látka.

’H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ: 7,89 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,41 (m, 1H),

1,82 (s, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,59 (dd, J = 6,8, 1,9 Hz, 3H), 1,55 (m, 1H), 1,27 (m, 1H), 0,85 (t, J = 7,3 Hz,3H).

180

• «4	9 ··	»·	«0
00 0 9	4 · 0 «	•	0	0	0
• 00	• a	•	•	0	0
					•
• 0 ·	• ·	•	0	0	0
000 00	··· ····	• 0			*0

MS: (M+H)⁺= 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H)' = 283.

Příklad 43

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-t-butoxykarbpnyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek:, 0065 g, 100%).

'H NMR(DMSO-dé) δ 7,90 (d, J=8,8Hz, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,29 (t, J=9,8 Hz, 1H),

4,29 (t, J=8,8Hz, 1H), 4,02(q, J=6,8Hz, 1H), 3,71 (bt, J=8Hz, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,15 (kvintet, J=8,8Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,7,7,8Hz, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,64 (m, lH), 1,58 (dd, J=6,8, 1,5Hz, 3H), 1,53 (m, 1H), 0,85 (t, J = 7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H)’ = 283, (M+CF₃COOH)- = 397, (2M1)' = 563.

Příklad 44

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3(czb-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

____,____1X1

44A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-řbutoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3 -kyano)propyl-3-(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-Butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (150 mg, 0,37 mmol) v THF(10 ml) se přidá po kapkách do roztoku lithiumenolátu acetonitrilu (1,83 mmol, 5 ekvivalentů) v THF(15 ml) při teplotě -78°C a nechá reagovat po dobu 15 minut. Reakce se zháší s nasyceným vodným chloridem amonným (10 ml) a vodou (lOml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2 x 50 ml). Organická vrstva se suší nad MgSOzt, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/1-ethylacetát/hexanů, čímž se získají požadované sloučeniny t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3kyano)propyl-3-(cz5^,-propén-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 95mg, 58%) a t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-kyano)propyl-3-(czs-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 30 mg, 18%) jako bezbarvý olej.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) = MS:(M+H) =452, (M-H)' = 450 (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) = *H NMR (CDC1₃) δ 8,14 (d, J=8,9Hz, 1H), 5,51 (m, 1H),

5,38 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,22 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,47 (m, 2H), 2,04 (s, 3H), 1,69 (m, 1H), 1,65 (dd, J=6,5, 1,8Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,45 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 452, (M-H)’ =450.

-1-82-

44B, Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3kyano)propyI-3-(cis- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-kyano)propyl-3-(c/5-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(č’z.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,5 mg, 95%).

*H NMR(DMSO-d₆) δ 7,98 (d, >10,0 Hz, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,72-2,58 (m, 2H), 2,41 (m, 1H), 1,85 ; (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,61 (dd, >6,70,1,80 Hz, 3H).

MS: (M+H)* =296, (M-H)-=294.

Příklad 45

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

TFA 'V

Požadovaná sloučenina se připraví podie způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-kyano)propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)-butyl3-(čA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 8 mg, 95%).

^!H NMR(DMSO-d₆) δ 7,75 (d,>9,0 Hz, IH), 5,47 (m, IH), 5,25 (m, IH), 4,46 (m, IH), 4,20 (m, IH), 4,13 (m, IH), 3,56 (m, IH), 3,15 (m, IH), 2,55 (m, 2H), 2,42 (m, IH),

1,82 (s, 3H), 1,72 (m, IH), 1,55 (dd, >6,71,1,83,3H).

MS: (M+H)⁺ =296, (M+23)⁺ =318, (M-H)' =294.

Příklad 46

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3ethoxykarbonyl)propyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

46A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R) al-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-1-Zbutoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-ethoxykarbonyl)propyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l-formyl)έ methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (900 mg, 2,187 mmol) v

THF(40 ml) se přidá po kapkách do roztoku lithiumenolátu ethylacetátu (8,75 mmol, 4 | ekvivalentů) v THF(40 ml) při teplotě -78°C a nechá se reagovat po dobu 15 minut.

Reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným, poté se provede extrakce '· ·

-18-4.

použitím dicniormethanu (3 x). Organická vrstva se suší nad MgSU-t, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1:1 ethylacetát/hexanů, čímž se získají požadované sloučeniny . t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3 -ethoxykarbonyl)propyl-3-(cz's-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 690 mg, 63%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-ethoxykarbonyl)propyl-3-(cw-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 246 mg, 22,5%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) 'H NMR (CDC1₃): δ 5,99 (d, 1H), 5,60 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 4,15 (m, 4H), 3,74 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,48(m 1H),

2,33 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,54 (dd, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,24 (t, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M il)' = 499.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) ’H NMR (CDC1₃): δ 7,93 (d, 1H), 5,44 (m, 2H), 4,19 (m, 4H), 4,03 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,48 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,65 (dd, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,26 (t, J=7,5Hz, 3tí).

MS: (M+H)⁺= 499.

CH;

AcHN .OH

EtO

46B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3ethoxykarbonyl)propyl-3-(cz\-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-ethoxykarbonyl)-propyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny ·· za t-buíy iester (±)-(2R,3 S,5 R, i ’ R,2 ’ S)- i -z-butoxykarbonyi-2-(1 -acetamido-2-hyd roxy)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(DMSO-d₆): δ 7,74 (d, J=9Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,14 (m, 1H), 4,06(q, J=7,5Hz, 2H), 3,54 (m, 1H); 3,16 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,36 (m, 2H), 1,82 (s, 3H), 1,77 (m, 1H), 1,56 (dd, 3H), 1,18 (t, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+II)‘=343.

Příklad 47

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-ethoxykarbonyl)propyl-3-(cz^-5'-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-elhoxykarbonyl)propyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR(DMSO-d₆); δ 7,93 (d, J=9Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 4,06(q, J=7,5Hz, 2H), 3,94 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,54 (dd, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,60 (dd, 3H), 1,19 (t, J=7, 5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ =343.

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)propyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

Příklad 48

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)propyT3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido2-hydroxy)butyl-3’(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0030 g, 100%).

*H NMR (DMSO-de) δ 8,97 (bs, 1H), 7,88 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,28 (t, J = 9, 1Hz, 1H), 4,30 (t, J=8,6Hz, 1H), 3,94 (q, J=7,3Hz, 1H), 3,71 (t, J=8, 0Hz, 1H), 3,62 (m, lH)j 3,15 (kvintet, J= 9,0Hz, 1H), 2,40 (dt, J=12,8, 7,6Hz, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,59 (dd, J=7,0, 1,5Hz, 3H), 1,08 (d, J=5,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 271, (M+Na)⁺ = 293, (M-H)' = 269.

Příklad 49.

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)propyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(c«-propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0143 g, 100%).

‘H NMR(DMSO-d₆) δ 7,70 (d, J=9,l Hz, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,25 (t, J = 9, 1Hz, 1H), 4,43 (t, J=8,6Hz, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 3,55 (t, J=8,5Hz, 1H), 3,17 (kvintet, J=8,5Hz, 1H), 2,42 (dt, J=12,8, 7,3Hz, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,72 (dt, J=12,8, 10,0Hz, 1H), 1,57 (dd, J=6,7,1,8Hz, 3H), 1,04 (d, 3=6,1Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 271, (M+Na)⁺ = 293, (M-H)’ = 269.

Příklad. 50

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamidó-2-hydroxy-2-vinyl)ethyl-3-(c«propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

50A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-l-Zbutoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-vinyl)ethyl-3-(c«-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

• ·

Požadované sloučeniny se připraví podlé způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením vinylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2vinyt)-ethyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,5 mg, 18%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 22 mg, 59%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H) = 439, (M-H)’ = 437. (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) MS: (M+H)⁺ = 439, (M-H)' = 437.

50B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy72-vinyl)ethyl3-(ez.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. , t

Požadovaná sloučenina sé připraví podle způsobů popsaného v příkladu 41Č nahrazením t-butylesteru (i)-(2R,3S,5R, l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l^:ácetamido-2hydroxy-2-vinyl)ethyl-3-(ez,s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R,1’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbony I-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrroIidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5 mg, 96%).

‘H NMR(DMSO-d₆) δ 7, 85 (d, J=9,lHz, 1H), 5,76 (m, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,25 (m, 2H), 5,14 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,18 (m, 1H),

2,41 (m, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,64 (m, 1H), 1,59 (dd, J = 6,71), 1,21 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ =283, (M+23)⁺ =305, (M-H)’ =281.

-1-89

Příklad 51

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-viny l)ethyl-3-(mpropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-vinyl)ethyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové , kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz\-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny(výtěžek: 6 mg, 95%).

*H NMR(DMSO-d₆) δ 7,84 (d, J=9,7Hz, 1H), 5,78 (m, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,23 (m,

34,43 (m, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,73 (m,lH), 1,57 (dd,J=6,72,1,83 HZ, 3H).

MS: (M+H)⁺=283, (M+23)'=305, (M-H)'=281, (2M-H)'=563.

Příklad 52

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-vinyl)propyl-3(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O^lBu n

o

OH

O^lBu lí

O

-1-90 __ φ φ φ.... ··...... φ φ.

52Α. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Zbutoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3 -vinyl)propyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením allylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy2-vinyl)propyl-3 (cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,0 mg, 5%) a t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)propyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 9,0 mg, 22%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H)⁺=453; (M-H)'=451.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) *H NMR(DMSO-d₆) δ 7,70 (d, J=9,3Hz, 1H), 5,80 (m, 1H), 5,51 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 5,00 (m, 2H), 4,58(br d, 1H), 3,93 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,22(br t, 1H), 2,02 (m, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,56 (m, 4H), 1,41 (s, 9H), 1,36 (s, 9H). ·

MS: (M-H)? = 451; (M + H)⁺ = 452, (M+ Na)⁺= 475.

52B. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3vinyl)propyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-2-vinyl)propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-191 butylester (±)-(2R, 3 S, 5 R, ί ’ R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetam ido-2-hydroxy)butyl-3 (cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 7,85 (d, J=9,3Hz, 1H), 5,81 (m, 1H), 5,42 (m, 1H), 5,28 (t, J=7,3Hž, 1H), 5,01(br d, 2H), 3,99 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 3,08 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,57 (dd, J=l,4, 5,4Hz, 4H).

MS: (M-H)' = 295; (M+H)⁺ =297, (M+Na)⁺ = 319.

Příklad 53

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-vinyl)propyl-3(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

TFA

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-vinyl)propyl-3-(cz,s--propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3(cz,s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6 mg, 100%).

’H NMR(DMSO-dé) δ 7,68 (d, J=9,2Hz, 1H), 5,78 (m, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,24 (t, J=7,8Hz, 1H), 5,04 (m, 2H), 4,38 (t, J=7,0, 1H), 4,09 (t, J=7,0, 1H), 3,81 (t, J=4,7, 1H),

3,53 (t, J=8,5, 1H), 3,16 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,11 (m, 2H), 1,83 (s, 3H), 1,70 (m, 1H),

1,55 (dd, J = 5,4, 1,4Hz, 3H).

MS: (M-H)’ = 295; (M+H)⁺ = 297, (M+Na)⁺ = 319.

192

Příklad 54

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz'5-propenl-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^H Boc OH °

O’Bu

54A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-l-řbutoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením propylmagnesiumbromidu za ethylmegnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl3-(cz5-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxy]ové kyseliny (výtěžek: 1 mg, 1%) a t-butylester (+)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-/-butoXykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz5'- . propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 32 mg, 39%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) 'H NMR (CDC1₃): δ 7, 51 (d, J=8,2Hz, IH), 5,46 (m, 2H),

4,17 (dd, J=3,l, 6,8Hz, IH), 4,05 (m, IH) 3,81 (t, J=3,4Hz, IH), 3,54 (m, IH), 3,21 (m, IH), 2,60 (m, IH), 2,02 (s, 3H), 1,70 (dt, J=3,0,7,4Hz, IH), 1,61 (d, J=5,4Hz, 3H), 1,54 (m, IH), 1,47 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,32 (m, 4H), 0,90 (t, >7,1 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 455, (M+Na)⁺ = 477; (M-H)’ = 453.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) ’H NMR (CDC1₃): δ 5,98 (d, >9,5Hz, IH), 5,60 (t,

J=9,8Hz, IH), 5,36 (m, IH), 4,16 (m, IH), 3,75 (d, >10,lHz, IH), 3,64 (m, IH), 3,51 (m,

-1-93

1H), 3,09 (br t, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,81 (d, J=13,9Hz, 1H), 1,57 (m, 4H), 1,54 (dd, J=l,7,5,l Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 0,88 (t, J=6,8Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 453; (M+H)⁺ = 455.

54B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cwpropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pentyl-3-(m-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido2-hydroxy)butyl-3-(cřvpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 1 mg, 100%).

Ή NMR (DMSO-d₆) δ 7,83 (d, J=9,2Hz, 1H), 5,43 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 3,56 (br t, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,08 (m, 2H), 2,32 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,57 (dd, J=l,4, 5,4Hz, 4H), 1,43 (m, 2H), 1,23 (m, 2H), 0,85 (br t, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321.

Příklad 55

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz.spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

tib

194

44 · «· • 44 · ·4 · 4 «4 · 4 t * · 4 · • 4 · ·· ' · 9 9 · · 4« • · 4 • 4 · • · · • e · ·· 4«

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t- butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido2-hydroxy)butyl-3-(cz.s-propen-1 yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0190 g, 100%).

*H NMR(DMSO-d₆) δ 7,64 (d, J=9,3Hz, ÍH), 5,48 (m, ÍH), 5,24 (m, 1H), 4,38 (t, J=8,8Hz, ÍH), 4,06 (m, ÍH), 3,75 (m, ÍH), 3,53 (t, J=8,5Hz, ÍH), 3,16 (kvintet, J=8,5Hz, ÍH), 2,41 (dt, J=12,8,7,3Hz, ÍH), 1,82 (s, 3H), 1,70 (dt, 12,8,9,9Hz, ÍH), 1,55 (dd, J=7,Ó, 1,6Hz, 3H), 1,35 (m, 2H), 1,26 (m 2H), 0,86 (t, J=6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H)' = 297.

Příklad 56

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-2-( 1 -acetamido-2-rhydroxy-3-methyl)butyl-3(cw-propen-1-yl)-pyrrolidÍn-5-karboxylové kyseliny.

56A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)butyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

*>.·		1' ·· • · * ¥ ¥ ··	¥ ¥· 99 ¥» ·¥ « · · V » ¥ • ' · > · · ¥
	195	¥ · ¥ »·· ··	• · ' ¥ ¥ · ¥

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením izopropylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá tbutylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3methyl)-butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0092 g, 10%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-methyl)butyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0385 g, 40%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H)⁺= 455, (M+Na)⁺ = 477, (2M+Na)⁺ = 931, (ΜΗ)' = 453.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) MS: (M+H)⁺ = 455 H)' = 453. .

(M+Na)⁺ = 477, (2M+Na) = 931, (M-

Y o

.OH

56B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3methyl)butyl-3-(cz',s~propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acétamido-2-hydroxy)-butyl3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,010 g, 100%).

^lH NMR(DMSO-dó) δ 7,63 (d, >9,2Hz, IH), 5,48 (m, IH), 5,23 (m, IH), 4,44 (m,

IH), 4,24 (m, IH), 3,57 (t, J=8,7Hz, IH), 3,33 (dd, >8,5, 2,5Hz, IH), 3,21 (kvintet, ·* ··

196

J=9,lHz, IH), 2,43 (dt, J=12,8, 7,6Hz, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,73 (dt, J = 12,8, 10,4Hz, 1H),

1,56 (dd, J=6,7,1,9Hz, 3H), 1,55 (m, 1H), 0,94 (d, J=6,7Hz, 3H), 0,78 (d, J=6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H)' = 297, (M+CF₃COOH)'= 411, (2MH)' = 595.

Příklad 57 ( Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)butyl-3(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

í* p

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 4.1 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Abutoxykarbonyl-2-(baceťamido-2hydroxy-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny místo t-butylesteru (±)-(2R,3S ,5 R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 - Abutoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0433 g, 100%).

^!H NMR(DMSO-d₆) δ 7,88 (d, 1=9,2Hz, 1H), 5,46 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,26 (t, J=8,5Hz, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,39 (dd, J=9,8,l,8Hz, 1H), 3,15(kvintet, >9,1 Hz, 1H), 2,42 (dt, >12,8,7,9Hz, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,73 (m, 1H), 1,62 (m, 1H), 1,57 (dd, >7,0,1,6Hz, 3H), 0,88 (d, >6,7Hz, 3H), 0,75 (d, >6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H2O)⁺ =281, (M-H)'= 297,(M+CF3COOH)· = 411, (2M-H)' = 595.

• · _197 • · r « ··

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(c«-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

CrBu

Y o

.OBu

58A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Zbutoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(c«-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

’ Požadovaná sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením butylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá tbutylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)hexyl-3(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,0 mg, 8%) a t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, l’R,2’R)-1-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(c«propen-l-yl)-pýrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,0 mg, 24%).

58B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(czYpropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy)hexyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylová kyselina za t-butylester (±)198

(2R,3 S,5K, 1 ’ K,2 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyi-2-(l-acetarnido2-hydroxy)buiyl-3 -(ezs-propen-l yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,0 mg, 100%).

'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,34 (d, J=9,3Hz, 1H), 5,24 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,23 (m, lH), 2,90 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 1,75 (s, 3H), l,52(m,3H), 1,45 (m, 1H), 1,08 (brs, 6H), 0,83 (brt,3H).

MS: (M-H)'= 311; (M+H)⁺= 313.

Příklad 59

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(cz5-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. '

TFA

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C, nahrazením t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)hexyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny místo t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy )butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,0 mg, 100%).

'H NMR (DMSO-dé): δ 7,60 (d, >9,3 Hz, 1H), 5,46 (m, 1H), 5,24 (t, >9,2 Hz, 1H), 4,21 (t, >8,3 Hz, 1H), 4,02 (t, >7,9Hz, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,47 (t, >8,8, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,64 (m, 1H), 1,55 (dd, >1,5, 5,4 Hz, 3H), 1,29 (m, 6H), 0,86 (t, >6,9,3H).

MS: (M-H)' = 311; (M+H)⁺= 313, (M+Na)⁺ = 335.

199.

Příklad 60

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4-methyl)pentyl-3(cřs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

60A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-l-/-Butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-4-methyl)pentyl-3-(c/5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením izobutylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá tbutylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4methyl)pentyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 31 mg, 51%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) *H NMR (CDC1₃): δ 5,98 (d, J=9,5Hz, 1H), 5,61 (t, J=8,2Hz, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,51 (dd, 1Hz, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,74 (d, J=10,5Hz, 1H),

3,61 (ni, 2H), 3,09 (t, J=7,5Hz, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,81 (d, J=í3,9Hz, 1H), l,58(br s, 1H), 1,54 (dd, J=l,7, 5, 1Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,42 (m, 1H), 0,87 (dd, J=2,4, 6,7Hz, 6H).

MS: (M-H)' = 467; (M+H)⁺ = 469, (M+Na)⁺ = 491.

• ·· « ·· «· ·· • · · · · · · 9 · 9 · · • ·· · 99999

60B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR)-l-/-Butoxykarbonýl-2-(r-acetamido-4-methyl-2oxo)pentyl-3(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. , f t-Butylesťer (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-4-methyl)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (8,0 mg,

0,02 mmol) se nechá reagovat s DMP (Dess-Martin periodinane) (10 mg, 0,03 mmol) f' ..

v dichlormethanu (0,1 ml) při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Reakce se zháší slM '1 .· 'f vodným thiosulfátem sodným (1 ml) a'míchá po dobu 20 minut. Reakce se extrahuje dichlormethanem (3 x 1 ml). Orgánická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l/l:ethylacetát/hexan, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvá polotuhá látka (výtěžek: 4,8 mg, 61%).

60C. (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'S)-1 -Z-Butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydróxy-4methyl)pentyl-3 -(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-4-methyl-2oxo)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (4,8 mg, 0,01 mmol) v methanolu (0,1 ml) se nechá reagovat s borohydridem, sodným (2,0 mg, 0,05 mmol) při pokojové teplotě po dobu 0,5 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a přidá se voda (1 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3x1 ml). Tato organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/1 :ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina tbutylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-hydroxy-4• ·

201 meťhýl)pentyi-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrGlidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek : 2, 4 mg,.

%).

60D. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4methy l)pentyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxy lové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-r-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-4-methyl)pentyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,4 mg, 100%).

’HNMR(D₂O) δ 5,45 (m, 1H), 5,15 (t, J=U, 0Hz, 1H), 3,88 (m, 1H), 3,62 (t, J = 8,0Hz, 1H), 3,43 (bt t, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 1,81 (s, 3H),'l,60 (m, 1H), 1,51 '' (m, 1H), 1,45 (dd, J=l,3,5,4Hz, 3H), 1,17 (m, 3H), 0,74 (dd, J=6,7, 14Hz, 6H).

MS: (M-H)' = 311; (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335.

« · ·· l 4

202

Přiklad 61 ---Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-4-methyl)pentyl-3(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -t-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-4-methyl)pentyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolÍdin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3(ez.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 1,7 mg, 85%).

*H NMR (DMSO-dó): δ 7,61 (d, J=9,8Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,24 (t, J=7,4Hz, 1H), 4,29(br t, 1H), 4,0(br t, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,49 (t, J=8,8Hz, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,68 (m, 2H), 1,55 (dd, J=l,4,5,4Hz, 3H), 1,31 (m, 1H), 1,04 (m, 1H), 0,86 (dd,J=6,4,8,3Hz, 6H).

MS: (M-H)’ = 311; (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335.

Příklad 62

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)pent-3-ynyl)-3-(cispropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

62A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Zbutoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pent-3-ynyl)-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením propyn-l-ylzinku za ethylmagnesiumbromid , čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, l’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)pent-3-ynýl-3 -(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0073 g, 16%) a t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)pent-3 -ynyl-3 -(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0349 g, 77%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS:(M+H)⁺=451, (M+Na)⁺=473, (2M+Na)⁺ =923, .

(M-H)'=449.

(+)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) MS:(M+H)⁺= 451, (M+Na)⁺=473, (2M+Na)⁺ =923, (M-H)'=449.

62B. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pent-3-ynyl)3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

i*

204

Požadovanásloučenina- se připraví- podle způsobu popsaného- v-příkladu A LC nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pent-3-ynyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0052 g, 100%).

μ ΐ₍ 'ř *H NMR (DMSO-dé): δ 7,97 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 4,35 4,20 (m, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,18(kvintet, 8,8Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,7,7,8Hz, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,81 (d, J=l,9Hz, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,59 (dd, J=6,9,2, 0Hz, 3H).

MS: (M + H)⁺ = 295, (M+Na)⁺ = 317, (M-H)' = 293, (M+CF₃COO')’ = 407, (2M-‘ H)‘=587.

Příklad 63

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pent-3-ynyl)-3-(czspropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxýkarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pent-3-ynyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrólidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0540 g, 100%).

φφ

205 ’Ή ΝΜΚi (DMSO=df):2r 7,90-(ď, J=8;8 Hz, TH); 5,5θ-(πν 1Ή-)_; 5_r25 (m_T TH-)_r4^404,35 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 3,71 (t, J=8,0 Hz, 1H), 3,18(kvintet, 8,3Hz, 1H), 2,42 (dt, J=13,2,7,4Hz, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,82 (d, J=l,9Hz, 3H), 1,71 (dt, J=12,7,10,0Hz, 1H), 1,57 (dd, J=6,9,l,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 295, (M+Na)⁺ = 317, (M-H)’ =293, (M+CF₃COO )’ = 407.

Příklad 64

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2heptafluorpropyl)ethyl-3-(cw-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

CF₃CF₂CF₂ '_0H

CH₃

AcHN.

64A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-heptafluorpropyl)ethyl-3-(cz5^,-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -formyl) methyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (41 mg, 0,10 mmol) a heptafluorpropyljodid (0,144 ml, 1,0 mmol, 10 ekvivalentů) v THF(2 ml) se nechají reagovat s 1 M fenylmagnesiumbromidem (0,90 ml, 0,90 mmol, 9 ekvivalentů) při teplotě -78°C po dobu 5 minut. Reakční směs se zahřívá na pokojovou teplotu po dobu 1 hodiny, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (10 ml) a vodou (10 ml), poté se provede extrakce pomocí ethylacetátu (3 x 25 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/2: ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina t-butylester (±)(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2heptafluorpropyl)ethyl-3 -(cw-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek:

12,6 mg, 22%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) MS: (M+H)⁺=581, (M+Na)⁺=603, (2M+Na)⁺=1183, (MH)'=579.

64B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2heptafluorpropyl)ethyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-heptafluorpropyl)ethyl-3-(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)- l-Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny,(výtěžek: 0,003 g, 100%).

’H NMR (DMSO-de): δ 7,84 (d, >9,3 Hz, IH), 5,45 (m, IH), 5,26 (m, IH), 4,71 (t, >9,7 Hz, IH), 4,63 (d, >22,0 Hz, IH), 4,51 (m, IH), 3,59 (t, >9,3 Hz, IH), 3,19(kvintet, 8,3Hz, IH), 2,43 (dt, >12,7,7,3Hz, IH), 1,76 (s, 3H), 1,74 (m, IH), 1,53 (dd, >6,8,1,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 425, (M+Na)⁺ = 447, (M-H)’ = 423, (2M-1)’ = 847.

Příklad 65

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2 4-dihydroxy)butyl-3-(cApropen-1 -pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

k

• 9

207

65A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2,4dihydroxy)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-ethoxykarbonyl)ethyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (35 mg, 0,07 mmol) se nechá reagovat s borohydridem lithným(8 mg, 0,35 mmol) v THF(5 ml) při teplotě 25°C a nechá reagovat po dobu 3 hodin, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným(2 ml) a vodou(2 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2x10 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanolu v dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2,4-dihydroxy)butyl-3-(cz'spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 14 mg, 44%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)=MS: (M+H)⁺=457, (M-H)‘ = 455.

.OH

65B. Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2,4-hydroxy)butyl-3(czY-propen-l -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2,4dihydroxy)butyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyl208 estera-(T)-(-2-R_T3 S^R_T1 Tv_T2-S)-l-Nbutoxykarbony.l-2-(l-acetamido-2TJiydroxy)butyl’3-(.cŽ5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dé): δ 7, 93 (d, J=9,0 Hz, 1H), 5,56 (m, 1H), 5,31 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,14 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,23 (m, 2H), 3,07 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,06 (s, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,79 (m, 1H), 1,62 (dd, >6,71,1,22 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 301, (M-H)' = 299.

Příklad 66

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-(l-acetamido-2,4-dihydřoxy)butyl-3 -(cispropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O^lBu

X

O

66A. t-Butylester (2R,3S,5R, 1 >2 ^!R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2,4dihydřoxy)butyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 65A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-ethoxykarbonyl)ethyl-3-(cw-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3ethoxykarbonyl)ethyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11 mg, 70%).

·· 44 • · · · • · · 4

209

1τ ί1 NMR (C!)(»: δ 5,58 (m, !!!), 5,38 (in, !! 1), 4,16 (m, ! Η), 4,05 (m, 1 Η), 3,97 (m, IH), 3,78 (m, 2H), 3,20 (m, IH), 2,66 (m, IH) 2,54 (m, IH), 2,04 (s, 3H), 1,80 (m, IH), 1,55 (m, 2H), 1,47 (s, 9H), 1,44 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 457, (M-H)’ = 455.

66B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2,4-dihydroxy)butyl-3(ez.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2,4dihydroxy)butyl-3-(cz'5-přopen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylóvé kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S, 5 R, Γ R,2 ’ S)-1-ř-butoxykarbonyl-2-( 1-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 8 mg, 96%).

*H NMR (DMSO-dé): δ 7,91 (d, >9,1Ηζ, IH), 5,50 (m, IH), 5,25 (m, IH), 4,43 (m, IH), 4,30 (m, IH), 4,22 (m, IH), 3,94 (m, IH), 3,86 (m, IH), 3,62 (m, IH), 3,18 (m, IH), 2,43 (m, IH), 1,85 (s, 3H), 1,75 (m, IH), 1,65 (m, 2H), 1,58 (dd, >6,70,1,81. Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 301, (M-H)’ =299.

Příklad 67 ·«

210 iritluóroctová sůl (±)-(2R,3S;5'R,l^JR,2'S)=2-(T=acetarnido-ⁱ2-hydroxy-2-(-fenylaeety'len-l· yl))ethyl-3-(c«-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

67A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2’R) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1-Zbutoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-(fenylacetylen-2-yl))ethyl-3 -(c«-propen-1 yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením fenylacetylidu lithného za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-(fenylacetylen-1 yl))ethyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0010 g, 4%) a t-butylester (±)-(2R,3 S, 5 R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2(fenylacetylen-l-yl))ethyl-3-(c«-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0050 g, 21%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS:(M+H)⁺=513, (M+Na)⁺ = 535, (2M+Na)⁺= 1047, (M-H)'= 511.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) MS: (M+H)⁺= 513, (M+Na)⁺ = 535, (2M+Na)⁺= 1047, (M-H)’= 511.

Ph

TFA

211

* 44	• ··	49	44
• 9 ·	4 4 4 ·	• 4 4	4
• 9.4	4 ·	9 4 4	4
			4
4 4 4	• ·	4 4 4	4
·· ··	• •4 ·4·4	4 4	4 4

67B7 lřrfluoroctová’sůT(±)-(2R73S;5R7i-^LR^2ⁱS)=2-(T-aeetamido-2“hydrox-y-2(fenylacetylen-1-yl))ethy 1-3-(m-propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41G nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-2-(fenylacetylen-1 -yl))ethyl-3-(cz5^,-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)-butyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 68

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-(fenylacetylen-1 y l))ethy 1 - 3-(m-propen-1 -yl)-pyrrol idin-5 -karboxylové kyseliny.

68A. Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2(fenyíacetylen-1 -yl))ethyl-3 -(ds-propen-1 -yl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-1 -t-butoxykarbony 1-2-(1-acetamido-2hydroxy-2-(fenylacetylen-1 -yl))ethyl-3-(ds-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2bydroxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0034 g, 100%).

'H NMR (DMSO-dé): δ 9,2(bs, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,45-7,35 (m, 5H),

5,50 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,64 (d, J=4,9,1H), 4,5-4,4 (m, 2H), 3,81 (m, 1H), • ·· 4 ·4 ·· 44 • · · 4 ·· » · · · · · • ·'· 4 · 4 4 tf 4

4 · 9 4 »944· 4 • 4» 4 4 44»· • *4 44 444 4·4· ·4 44

8,7,3Hz,HH), ...l.,8SL Xs^3H),„l,74Jdt,_ J=12,7,

10,0Hz, ÍH), 1,58 (dd, J=7,3,l,8Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 357, (M+Na)⁺ = 379, (M-H)' = 355.

Příklad 69

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-(cz\propen-1 -yl))-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny

A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 7-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-oxo-3ethyl)pentyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R, 2'R)-l-t-butoxykařbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'.vpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 8 mg, 81%).

MS: (M+H)⁺= 481, (M-H)' = 479.

213 ·· · φ φ · ·· · ·· · « · φ · • * · φ ·· ··· φ· • ·· ·* • « · * · • 9 9 9 9

Φ · Φ Φ Φ φ • · · · >· ·· ··

69Β. t-Bu^4ester-(4$-(2R-_i3S55R5-lAR52’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(>acetamidoT2T hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo-3ethyl)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3-(cA-/?ro/?e«-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5 mg, 63%).

MS: (M+H)⁺= 483, (M-H)'= 481.

69C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-ácetamido-2-hydroxy-3ethyl)pentyl-3-(cA- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4 mg, 95%).

’H NMR (DMSO-dó): δ 7,67 (d, J=8,9Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,58 (m, 2H), 3,22 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,74 (m, 1H), 1,58 (dd, J=6,71,l,23 Hz, 3H), 1,52 (m, 1H), 1,38 (m, 1H), 1,29 (m, 2Hz), 1,13 (m, 1H), 0,80 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 327, (M-H)' = 325.

I

214

Příklad 70

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-ethyl)pentyl-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R)-1 -i-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy3- ethyl)pentyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením 3-pentylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid (výtěžek: 13 mg, 45%).

MS: (M+H)⁺= 483, (M-H)' = 481.

70B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3ethyl)pentyl-3-(cz'Y-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -t-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-3-ethyl)pentyl-3-(cz\-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyl215 ester (i)-(2R,3S,5K,rR,2’S)M~Z-butoxykarbonyl=2-(>/-buíy}aeetamido=2’hydrexy^;)buty’ 3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3 mg, 96%).

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,85 (d, J=9,2 Hz, 1H), 5,47, (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,58 (dd, >6,71,1,82 Hz, 3H), 1,40 (m, 2H), 1,28 (m, 1H), 1,10 (m, 1H), 1,05 (m, 1H), 0,83 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺= 327, (M-H)'= 325.

I,

L·

Příklad 71 '

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acétamido-2-hydróxy-2_Tfenyl)ethyl-3-(cwi propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

.T

OtBu

A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy2-fenyl)ethyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením fenylmagnesiumbromidu za ěthylmagnesiumbromidu (výtěžek: 36 mg, 60%).

MS: (M+H)⁺ = 489, (M+Na)⁺= 511, (M-H)' = 487.

• ·

71B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2fenyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-fenyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(mpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,5 mg, 100%).

‘H NMR (DMSO-de): δ 7,79 (d, J= 9,2Hz, IH), 7,36 (m, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,22 (m, IH), 5,49 (m, IH), 5,22 (m, IH), 4,94 (d, > 3,0Hz, IH), 4,52 (m, IH), 4,35 (m, IH),

3,62 (t, J= 8,5Hz, IH), 3,22 (m, IH), 2,46 (m, IH), 1,77 (m, IH), 1,65 (s, 3H), 1,57 (dd, J= 6,7,0,8Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 333, (M+Na)⁺ = 355, (M-H)’ = 331.

Příklad 72

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-fenyl)ethyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

OH

Íííi

217

72A, t-Butylesterv(+)-.(2R,3S,5R,l ÍR)-1 -/-butoxvkarhonylT2-íl -acetamido-2-oxo-2J \ / \ ~ s s / J •J \ fenyl)ethyl-3-(cz'.s'-propen-l -yl)-pyrroiidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-fenyl)ethyl-3-(cz,s-propen-l-yl)-pynOlidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -Z-butylacetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 24 mg, 84%).

MS: (M+H)⁺ = 487, (M+Na)⁺= 509, (M-H)'= 485.

72B. t-Butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-2-íěnyl)ethyl-3-(ó‘z.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-oxo-2fenyl)ethyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-oxo)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7,9 mg, 52%).

MS: (M+H)⁺= 489, (M+Na)⁺= 520, (M-H)' = 487.

• · /ze;

218 • ·· • ♦ · · • ·· « ·· ·'· z ......

• · · · · · ······· · · ··

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,1 ’R,2’8)-2^(4-aeetaiiiido=2-hydroxy-2fenyl)ethyl-3-(cis- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-fenyl)ethyl-3-(č‘z.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl~2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7,5 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-dó): δ 7,83 (d, J= 9,2Hz, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,32 (m, 2H), 7,25 (m, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,33 (m, 1H), 4,54 (d, J= 9,8Hz, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,78(m 1H), 3,20 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,63 (m, 1H), 1,56 (dd, J= 6,7,1,2Hz, 3H), 1,53 (s,3H).

MS: (M+H)⁺= 333, (M+Na)⁺= 355, (M-H)' = 331.

Příklad 73

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(thiofen-2yl))ethyl-3-(cA- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

73A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-(thiofen-2-yl))ethyl-3-(cz's-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-formyl)ethyl-3(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (40 mg, 0,098 mmol) v THF (2

-24-9

ml) ^4<apKác>flo>OztoEr ^ÁKiěnyllitHian^l^M^UTHFTTí^OTlnmoB 3 ekvivalentů) v THF (1 ml) při teplotě 25°C a nechá reagovat po dobu 20 minut, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (2 ml) a vodou (5 ml), poté se provede extrakce pomocí dičhlormethanu (2x10 ml). Organická vrstva se suší nad MgSOzt, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/1:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek:

9,5 mg, 20%).

MS: (Μ+Η)* = 495, (M+Na) = 517, (M-H)'= 493.

í-

73B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(thiofen-2yl))ethyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-(thiofen-2-yl))ethyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrTolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz,s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,3 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-dé): δ 7,86 (d, J= 9,8Hz, 1H), 7,63 (dd, J= 5,4,1,0 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,98 (m, 1H), 5,58 (m, 1H), 5,43 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,11 (m, 2H), 2,43 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,80 (m, 1H), 1,57 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺= 339, (M+Na)⁺ = 361, (M-H)' = 337.

Příklad 74

22G • · · • · «

Trifluoroctová sůl (i)-(2K,3S,5R,TR,2^,S)-2-(l-ácetamido-2-hydroxy-3-(4-methyIthiazoi2-yl))propyl-3-(cz'5-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

H,C

\O‘Bu

A

8'

74A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-řbutoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-(4-methylthiazol-2-yl))propyl-3-(cz'5-propen1 '-yl)py^rr°lidin-5-karboxylové kyseliny.

1,6 M n-Butyllithium (0,125 ml, 0,20 mmol, 4 ekvivalenty) se přidá do roztoku 2,4dimethylthiazolu (28,3 mg, 0, 25 mmol, 5 ekvivalentů) v 1 ml THF při teplotě -78°C a nechá reagovat po dobu 30 minut. Přidá se po kapkách t-butylester ((+)-(2R,3S,5R,l’R)-lZ-butoxykarbonyl 2-(l-acetamido-2-formyl)ethyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20,5 mg, 0,050 mmol) v THF (1 ml) do výše uvedeného roztoku a nechá reagovat po dobu 30 minut při teplotě -78°C a pak po dobu 30 minut při pokojové teplotě. Reakční směs se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (5 ml) a vodou (5 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (3 x 25 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/2: ethylacetát/hexanů, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-aeetamido-2-hydroxy-3-(4-methylthiazol-2-yl))propyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,3 mg, 13%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-(4-methylthiazol-2-yl))propyl-3-(cz.y-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7,5 mg, 29%).

(2R,3S,5R,1’R,2’S) MS: (M+H)⁺= 524, (M+Na)⁺= 546, (2M+Na)⁺= 1069, (M-H)' = 522.

221 (2R,3S,5R,1’R,2’R) MS: (M+H)⁺= 524, (M+Na)⁺= 546, (2M+Na)⁺ = 1069, (M-H)' =522.

74B. Trifluoroctové kyseliny (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-(4methylthiazol-2-yl))propyl-3-(ez'.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-(4-methylthiazol-2-yl))propyl-3-(cw-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0030 g, 100%).

^lH NMR (DMSO-df,): δ 9, 0(bs, 1H), 8,10 (d, J=8,3Hz, 1H), 7,11 (d, J=l,0 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,88 (dt, J=9,4,2,6Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 2H), 2,93 (dd, J=15,l,8,3Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,3,7,3Hz, 1H), 2,33 (d, J=l,0Hz, 3H), 1,86 (s, 3H), 1,66 (dt, J=12,7, 10,3Hz, 1H), 1,61 (dd, J=6,8,l,5Hz,3H).

MS: (M+H)⁺ = 368, (M+Na)⁺ = 390, (M-H)’ = 366.

··

222

β · < · ·

Příklad 75

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-(4-methylthiazol2-yl))pr°pyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-(4-methylthiazol-2-yl))propyl-3-(cz5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrroliďin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0030 g, 100%).

'H NMR (DMSO-d₆) δ 9,0(bs, 1H), 7,77 (d, J=9,3Hz, 1H), 7,11 (s, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 3,58 (t, J=9,lHz, 1H), 3,19 (m, lH), 2,96 (m, 2H), 2,41 (m, 1H), 2,33 (d, J=l,0Hz, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,73 (dt, J= 12,7,10,3Hz, 1H),

1,54 (dd, J=6,9,l,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 368, (M+Na)⁺ = 390, (M-H)’ = 366, (M+CF₃COO)’ = 480, (2M-H) =733.

Příklad 76

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2’RS)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-(thiazolin-2-yl))propyl-3 -czT-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny r·

76A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’RS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-3 -(thiazolin-2-yl))propyl-3-(cčs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, l’R)4 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2formyl)ethyl-3(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20,5 mg, 0,05 mmol) vTHF (1 ml) se přidá po kapkách do roztoku (thiazolin-2-yl)methyllithia (0,20 mmol, 4 ekvivalenty, připravený z 0,025 g 2-methylthiazolin a 0,125 ml 1,6 M n-BuLi při teplotě -78°C) v THF (2 ml) při teplotě -78°C a nechá reagovat po dobu 30 minut, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (5 ml) a vodou (5 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (3 x 20 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/1 :ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako směs izomerů (výtěžek: 10 mg, 40%).

MS: (M+H)⁺ = 512, (M+Na)⁺= 534, (M-H)' = 510.

76B. Trifluoroctové sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'RS)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-(thiazolin2-yl))propy]-3-(m-propen-l -yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

224 β · ······· ··

-=---= Požadované^ sloučeniny—se—připraví—podle—způsobu—popsaného—v—příkladu 41Gnahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’RS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-(thiazolin-2-yl))propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,003 g, 100%).

Majoritní izomer 'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,88 (m, 1 M), 7,76 (d, J=8,8Hz, IH),

5,46 (m, IH), 5,19 (m, IH), 4,69 (m, IH), 3,90 (m, IH), 3,85 (m, IH), 3,49 (m, 2H), 3,35 (t, J=9,0 Hz, IH), 3,29 (dd, J=17,6,5,9Hz, IH), 3,04 (t, J=8,9Hz, IH), 2,78 (dd, J=17,6,8,1 Hz, IH), 2,7-2,55 (m, 2H), 1,75 (s, 3H), 1,70 (m, IH), 1,56 (dd, J=6,8, 9,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 356, (M+Na)⁺=378, (2M+Na)⁺ =733, (M-H)' =354.

Příklad 77

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ^,R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3,3-difluor-3vinyl)propyl-3 -(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. .

OtBu

II

77A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3,3difluor-3-vinyl) propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyírolidin-5-karboxylové kyseliny t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)ethyl-3(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (41 mg, 0,10 mmol) a 1,1-difluorallyljodid (94 mg, 0,60 mmol, 6 ekvivalentů) v THF (2 ml) se nechá reagovat se zinkovým práškem (33 mg, 0,50 mmol, 5 ekvivalentů) při teplotě 0°C po dobu 5 minut a pak při pokojové teplotě po dobu 4 hodin. Reakční směs se zháší nasyceným vodným

225 chloridem amonným (15 ml) a vodou (15 m!) a extrahuje 3-x 25 mi dichlormethanu. Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l/3:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina(výtěžek: 35 mg, 71%).

MS: (M+H)⁺ =489, (M+Na)⁺=511, (2M+Na)⁺=999, (M-H)' = 487.

77B. Trifluoroctové sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2Thydroxy-3,3-difluor3- vinyl)propyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu '41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxýkarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3,3 -difluor-3 -vinyl)propyl-3 -(cřs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxyloivé kyseliny za t-butylester > (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0026 g, 96%).

’H NMR (DMSO-d₆) δ 7,68 (d, J=7,8Hz, 1H), 5,97 (m, 1H), 5,55 - 5,45 (m, 2H),

5,43 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,45 (m, 2H), 4,10 (m, 1H), 3,16 (kvintet J=9, 1Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,8,7,3Hz, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,70 (dt, J=12,8, 10,3Hz, 1H), 1,61 (dd, J=6,7,l,2Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 333, (M+Na)⁺ = 355, (M-H)' = 331, (2M-H)' = 663.

Příklad 78

-_226

ΜΦ-Φ4ΦΦ-

Trifluoroctová sůl (Í)-(2R,3 S,5R, TR,2*K)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3,3-ďítluor-3vinyl)propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

O^lBu o

78A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo-3,3difluor-3-vinyl)propyl-3-(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-3,3 -difluor-3 -vinyl)propyl-3 -(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo-3,3-difluor-3,3-difluor-3-vinyl)propyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0050g, 44%).

MS: (M+H)⁺= 487, (M+Na)⁺= 509, (M-2F)⁺= 448, (M-H)’ = 485.

78B. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy3,3 -difluor-3 -vinyl)propyl-3 -(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo-3difluor-3-vinyl)propyT3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyl-

-2-27-

ester (2R,3S,5R,rR)-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

78C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3,3-difluor3-vinyl)propyl-3-(czT-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C

I» .

$ nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2'1 hydroxy-3,3-difluor-3-vinyl)propyl-3-(cz.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R.l ’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 79

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(cz'5'-buten-2yl))ethyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

OtBu

Ϊ

O

A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2-hydroxy2-(czT-buten-2-yl))ethyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

>2-8 t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(1-acetamido-2formvbetbv1-3íc/.v-nror'en-1-vB-nvrrnlidin-S-kflrhovvIové kvselinv ΠΩ ma Ω Ω7Τ rnmol'1 v THF (5 ml) se nechá reagovat s ez.s--2-buten-2-yllithiem (0,75 ml(0,5M), 0,37 mmol) při teplotě 25°C po dobu 45 min, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (5 ml) a vodou (5ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2 x 10 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l/l:ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 20 mg, 59%).

*H NMR (CDC1₃): δ 6,19 (d, J=8,9 Hz, 1H), 5,61 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,77 (m, 2H), 3,10 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 1,99 (s, 3H),

1,82 (m, 1H), 1,73 (m, 3H), 1,55 (m, 6H), 1,47 (s, 9H), 1,44 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 467, (M-H)' = 465.

79B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(czs-buten2- yl))ethy 1-3-(cú-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-2-(cz.s-buten-2-yl))ethyl-3-(cÁs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl3- (cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4 mg, 96%).

'Η NMR (DMSO-dé): δ 8,09 (d, J=9,0 Hz, 1H), 5,50 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,16 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,74 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,62 (m, 3H), 1,58 (m, 3H).

339

• ·*	4 4 4	44			• 4
• · 4	• · * 4	4	4	4	4
• 4 ·	4 4	4	4	4	4
					4
• 4 f	• 4	4	4	4	4
** * · 4	4-44 4’4'4'4	•'4			•’4

MS: (M+H)⁺= 311, (M-H)’ = 309,

Příklad 80

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R,3’R) a trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ R,3 ’ S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3 -methyl)pentyl-3-(cz,s-propen-1 yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

80A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,í'R,2'R,3'R) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R,3'S)-l/-butoxykarbonyl-2-1 -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 formyl)methyl-3(cz\-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karbóxylové kyseliny (60 mg, 0,15 mmol)· v THF(1 ml) se přidá po kapkách do roztoku 2-butylmagnesiumbromidu (3M v etheru)(0,45 ml, 0,85 mmol) při pokojové teplotě a nechá reagovat po dobu 40 ntinut. Reakce se zháší nasyceným NH₄CI(1 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (3 x 1 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/4: ethylacetát/hexanů, čímž se získají požadované sloučeniny t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’R,3 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny Rf = 0,65 (1:1 ethylacetát:hexany)(výtěžek: 19 mg, 27%) a t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R,3^,R)-l-Zbutoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.v-propen-1 -yl)« 4 » 4 «

-230pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny Rf = 0,5) (1:1 ethylacetát:hexany)(výtěžek: 19 mg, 27%).

R_f = 0,65 *H NMR (CDC1₃): δ 5,98 (d, J=8,8Hz, IH), 5,62 (t, J=10,5Hz, IH), 5,35 (m, IH), 4,66 (d, J=4,4Hz, IH), 4,16 (d, >9,5Hž, IH), 3,78 (m, 3H), 3,12 (m, 2H), 2,73 (m, IH), 2,0 (s, 3H), 1,81 (d, J=13,2Hz, IH), l,54(br s, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,44 (s, 9H),

1,25 (m, IH), 0,81 (m,6H).

MS: (M-H)’ = 467; (M+H)⁺ = 469.

R_f = 0,5 ’H NMR (CDCb): δ 6,00 (d, J=10,2Hz, IH), 5,61 (brt, IH), 5,36 (m, IH), 4,58 (d, J=4,7Hz, IH), 4,14 (d, J=8,8Hz, IH), 3,82 (m, 3H), 3,13 (m, 2H), 2,73 (m, IH),

1,99 (s, 3H), 1,80 (d, J=13,9Hz, IH), l,54(br s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,43 (m, IH), 0,97 (d, >6,8Hz, 3H), 0,81 (t, J=7,2Hz, 3H).

MS: (M-H)‘ = 467; (M+H)⁺ = 469.

80B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR„2'R,3'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3methyl)pentyl-3-(cz\-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R,3’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(č'z.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,5 mg, 0,005 mmol) se nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou (0,8 ml) v dichlormethanu (0,2 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 hodin, reakce se koncentruje ve vakuu přes noc a trituruje acetonitrilem (2x1 ml), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 2,0 mg, 100%).

-231• ·· ·· « β · • · · • · » · ♦ · · ··· ·· · »* ·· ·· * 9 9 9 9 9 • · · · · • · · · · · • · · · · ·»·9 ·· ·· ~ ^ΉΓΐΜΚΓ7Μ8Ό<1₆)Τδ“7Γ687371=8;8Ήζ,ΤΉ)Γ5Γ457πΐΓΓΗ)Γ5;23“(ΐΓΐ-773Ηζ7

111), 4,24(brt, 111), 4,18 (m, lil), 3,52 (t, J=7,3Hz, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,16 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,68 (m, 1H), 1,58 (dd, J = 2,0, 4,8Hz, 3H), 1,37 (m, 2H), 0,99 (m, 1H), 0,89 (d, J=6,8Hz, 3H), 0,79 (t, J=7,4Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 311; (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335.

Příklad 81

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'R,3'R)-2-(l-acetariiido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-. 3 -(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrol idin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v přikladu 41C nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R,3 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Rf = 0,5,1:1, ethylacetáthexany) za t-butylester (+)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2(1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cis-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (výtěžek: 1,6 mg,.76%).

‘H NMR (DMSO-dó): δ 7,55 (d, J=9,3Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,31(brt, 1H), 4,20 (t, J=8,3Hz, 1H), 3,51 (t, J=9,3Hz, 1H), 3,43 (d, J=7,4Hz, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,70 (m, 1H), 1,55 (dd, J=l,4, 5,4Hz, 3H), 1,36 (m, 2H),

1,14 (m, 1H), 0,84 (t, J=7,3Hz, 3H), 0,73 (d, >6,9Hz, 3H).

MS: (M-H)’ = 311; (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335.

«· ··

232 r i íMctuoz

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

82A. t-Butylester (Tj-^R^SAKTR^RSj-l-ř-butoxykarbonyl^-Q-acetamido^-oxo-SmethyOpentyWqcA-propen- 1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R,3 ’RS)-1 -í-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny(výtěžek: 12 mg, 63%).

82B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3’R)1 -í-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3 -(czs-propen-1 yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,3’RS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2oxo-3-methyl)pentyl-3-(cz.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Rf = 0,5 a 0,65,l:l,ethylacetát:hexany) za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2233

-ny-a)hiityT^-(dY-pTOperiU^J)=|xynziJ.jitiin=.5Aa.rho.xyJové kyseliny, čímž poskytne t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S,3 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3methyl)pentyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Rf = 0,15, 1:1, ethylacetát:hexany) (výtěžek: 6,0 mg, 50%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2^,S,3’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Rf = 0,10, 1:1, ethylacetát:hexany) (výtěžek: 2,5 mg, 63%).

82C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R,2'S,3'S)-(l-acetamido-2-hydroxy-3methyl)pentyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamiďo2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxýlové .kyseliny (R_f = 0,15, 1:1, ethylacetát:hexany) za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-l-Z-butoxykarbpnyl2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propez7-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,0 mg, 100%).

⁴H NMR (DMSO-d₆): δ 7,78 (d, J=9,2Hz, 1H), 5,42 (m, 1H), 5,29 (t, J=10,3Hz, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,96(brt, 1H), 3,51 (m, 2H), 3,08 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 1,78 (s, 3H),

1,56 (d, J=6,3Hz, 3H), 1,52 (m, 1H), 1,40 (m, 1H), 1,29 (m, 1H), 1,21 (m, 1H), 0,84 (t, J=7,3Hz, 3H), 0,73 (d, J=6,9Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 311; (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335.

234

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.s- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S,3 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (Rf = 0,10, 1:1 ethylacetát:hexany) za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-l-ř-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'5^,-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,5 mg, 100%).

‘H NMR (DMSO-d₆): δ 7,85 (d, J=8,7Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,29 (t, J=9,3Hz, 1H), 4,20. (m, 2H), 3,63 (t, >8,3Hz, 1H), 3,42(br d, 1H), 3,14 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 1,79 (s, 3H), 1,62 (m, 1H), 1,58 (d, J=5,4Hz, 3H), 1,43 (m, 2H), 1,0 (m, 1H), 0,88 (d. J=6,8Hz, 3H), 0,80 (t, J=7,3Hz, 3H).

MS: (M-Η)'= 311; (M+H)⁺= 313, (M+Na)⁺= 335.

Příklad 84

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy)butyl-3-(czT-propenl-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

«· (' r

235

84A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy)butyl-3-(cz,s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (22 mg, 0,05 mmol) se nechá reagovat s methyljodidem (0,016 ml, 0,25 mmol), hydroxidem draselným (14 mg, 0,25 mmol) a 18-korunová konformace-6 (0,7 mg, 0,0025 mmol) v N,N-dimethylformamidu (2 ml) při pokojové teplotě po dobu 23 hodin. Voda (5 ml) se pak přidá do reakční směsi, poté se provede extrakce etherem (2x10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 66% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bezbarvý olej (výtěžek: 5,2 mg, 23%).

MS: (M+H)⁺= 455, (M-H)’ = 453.

CH₃ '>—y AcHN.^J .

Λ Ν . 1 Η η och₃

84Β. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy)butyl-3-(czs·propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy)butyl-3-(cz'ó-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,7 mg, 98%).

236

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,96 (d, J= 9,2Hz, 1H), 5,50 (m, 1H), 5,24 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,19 (m, 2H), 2,40 (m, 2H), 1,86 (s, 3H), .1,68 (m, 2H), 1,62 (dd, J= 7,0, 1,8Hz, 3H), 1,39 (m, 1H), 0,77 (t, J= 7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H)' = 297.

Příklad 85

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2^,R)-2-(l-acetamido-2-methoxy)butyl-3-(cz.spropen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O‘Bu fl o

85A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2melhoxy)butyl-3-(cz'.y-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny, t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxy karbony 1-2-(1-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (17 mg, 0,04 mmol) se nechá reagovat s methyljodidem (28 mg, 0,19 mmol), hydroxidem draselným (8 mg, 0,19 mmol) a 18-korunková konformace-6(0, 002 mmol) v N,N-dimethylformamidu (1,5 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Voda (5 ml) se pak přidá do reakčni směsi, poté provede extrakce etherem (2 x 10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 5 mg, 29%).

MS: (M+H)⁺ =455, (M-H)' = 453.

237

85B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy)butyl-3-(czspropen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu. popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesterů (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’Ř)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2methoxy)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.s·propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4 mg, 95%).

'H NMR (DMSO-d₆): δ 8,00 (d, J=9,8Hz, 1H), 5,57 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,28 (m, lH), 3,95 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 3,28 (s, 3H), 2,80 (m, 1H), 2,30 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,60 (m, 3H), 1,43 (m, 2H), 0,82 (t, J=7,31Hz, 3H).

MS: (M Ml/ =299, (M-H)' 297.

Příklad 86

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-3-methyl)butyl-3(czs-propen-1-yl)-pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny.

• ·

86A. ’t-Butylester-(±)^R73S75Rvl^AR^”S)--l--Z-buíQX54earb0ny-l-2-(T’acetamidox2=_ methoxy-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyl ester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin- 5 -karboxylové kyseliny.

86B. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methóxy-3methyl)butyl-3-(cA- propen-1 -yl)-pyrrolidim5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná, sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy-3-methýl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 87

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-methoxy-3-methyl)butyl-3(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

··

A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-3-methyl)butyl-3-(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-methyl)butyl-3-(c A-propen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny, za t-butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,8 mg, 33%).

MS: (M+H)⁺ = 469, (M+Na)⁺ = 491, (M-H) = 467.

87B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy-3methyl)butyl-3 -(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-3-methyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3 -(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,6 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-cU): δ 7,65 (d, J= 9,2Hz, IH), 5,43 (m, IH), 5,23 (m, IH), 4,42 (m, IH), 4,37 (m, IH), 3,56 (m, IH), 3,46 (s, 3H), 3,17 (m, 2H), 2,44 (m, IH), 1,80 (s, _τι_η ji v,

1/79 i, /υ \iu, iiiy, i

-TÍUro, , u y.i.·

J-5-7JÍztrL _V~v»,

240

T=.6_7J_?LT/7 _ικη n Q4_zd

-'/J \—:

= 6.711/, 3HY.0.82 (d, J= 6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335, (M-H)‘ = 311.

Příklad 88

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,l^,R,2’S)-2-(l-acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(c«propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

88A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy)pentyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. '

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butyiesteru (+)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pentyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyselina za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl) -pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11,9 mg, 36%).

MS: (M+H)⁺ = 469, (M+Na)⁺ = 491, (M-H)’ = 467.

TFA

241 ··

88B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR^'S)^:;2-('l=acetanTido=2-methoxy-)penty' propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'Š)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy)pentyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cwpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11,5 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,95 (d, J=9,8Hz, 1H), 5, 49 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 3,22 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,85. (s, 3H), 1,66 (m, 1H), 1,62 (m, 3H), 1,58 (m, 1H), 1,38 (m, 1H), 1,27 (m, 2H), 0,86 (t,' J= 7,3Hz, 311).

MS: (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺=335, (M-H)‘ = 311.

Příklad 89

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

89A. t-Butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2'R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy)pentyl-3-(c z.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester

··

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’SXNt-butoxykarbonyl^2<-Haeetamido-2-hydr0xy9bufl4=3-(czTpropen-l-yl) -pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,3 mg, 21%).

MS: (M+H)⁺ = 469, (M+Na)⁺ = 491, (M-H)’ = 467.

89B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2’R)-2-(l-acetamido-2-methoxy)pentyl-3(cz's-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,VR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy)pentyl-3-(ez.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ R,2 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,8 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-dň): δ 7,70 (d, J= 9,8Hz, ÍH), 5,45 (m, ÍH), 5,24 (m, ÍH), 4,40 (m, ÍH), 4,25 (m, ÍH), 3,57 (t, J= 8,5Hz, ÍH), 3,40 (m, ÍH), 3,35 (s, 3H), 3,17 (m, ÍH),

2,42 (m, ÍH), 1,82 (s, 3H), 1,69 (m, 1H), 1,56 (dd, J= 7,1,1,2Hz, 3H), 1,24 (m, 4H), 0,88 (t, J = 7,0 Hz, 311). '

MS: (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335, (M-H)' = 311.

Příklad 90

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cz'5propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

90A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-ácetamido-2methoxy-2- allyl)ethyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-2-allyl)ethyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 8 mg, 31%).

MS: (M+H)⁺= 467, (M-H)‘= 465.

90B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2^,S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czÁpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny(výtěžek: 6 mg, 96%).

Ή NMR (DMSO-dó): δ 8,02 (d, J=8,6Hz, IH), 5,75 (m, IH), 5,51 (m, IH), 5,24 (m, IH), 5,05 (m, 2H), 4,27 (m, IH), 4,22 (m, IH), 3,74 (m, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,18 (m, IH), 2,47 (m, IH), 2,39 (m, IH), 2,17 (m, IH), 1,87 (s, 3H), 1,67 (m, IH), 1,63 (dd, >6,71,1,23 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 311, (M-H)’ = 309.

244

9 '9 9 • · '9 9

Příklad 91

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-2-allyl)ethyl-3-(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-2-allyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ^,R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,0 mg, 16%).

MS: (M+H)⁺ = 467, (M-H)' = 465.

91B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl3-(cA- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2ΐπΌίηοχγ^-ΰΗγΙ^είύγί^ΧΓΖϊψΓΟρεηΜΑ/^ΡΥ^ΐΜπΰ^-ΐίύΓ'ΒδχγΙονε^Ιΐγ^Ιίηγ^ΖΗ' t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'5x. propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3 mg, 96%).

'H NMR (DMSO-dé): δ 7,75 (d, >9,2 Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,24 (m, 1H), 5,06 (m, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,17 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,71 (m, 1H), 1,55 (dd, >6,73,1,83 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 311, (M-H)' = 309.

Příklad 92

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(czTpropen-1 -yl )-pyrr°l idin-5-karboxylové kyseliny.

92A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-řbutoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cž.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením l-buten-4-ylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-4vinyl)-butyl-3-(cz.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0030 g, 6%) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy'Λ·

4=vinyl)butyI'-3-(c»-propen- l-yi)-pyrroiidm-5-karbóxyiové kyseliny (výtěžek: 0,0145 g, 28%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H)⁺ = 467, (M+Na)⁺ = 489, (2M+Na)⁺= 955, (M-H)’ = 465.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)- MS: (M+H)⁺= 467, (M+Na)⁺= 489, (2M+Na)⁺= 955, (M-H)’ = 465.

TFA

CH₃AcHN..

92B. Trifluoroctová sůl (±)-2R,3S,5R,rR,2'S(-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl3-(cis- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cz'.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R,1’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-( l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.spropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylovékyseliny(výtěžek: 0,0027 g, 100%).

^JH NMR (DMSO-dó): δ 8,93(bs, 1H), 7,90 (d, >9,2 Hz, 1H), 5,80 (m, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 5,00 (dd, J=17,l,l,8Hz, 1H), 4,94 (dd, >10,4,l,8Hz, 1H), 4,29(bt, >8,3Hz, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,15(kvintet, J=8,5Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,8,7,3Hz, 1H), 2,16 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,79-1,75 (m, 1H), 1,64 (m, 1H), 1,58 (dd, >6,7,l,8Hz, 3H), 1,34 (m, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 311, (M+Na)⁺ = 333, (M-H)' = 309, (M+CF₃COO')· = 423.

247 ,·· · 99··

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 'R,2'R)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

93A. Triflůoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-(l -acetamido-2-hydroxy-4vinyl)butyl-3-(ez'.s- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(ez.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0027 g, 100%).

/H NMR (DMSO-á₆): δ 7,68 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5, 81 (m, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,01 (dd, >l'7,l,l,8Hz, 1H), 4,95 (dd, J=10,3,l,7Hz, 1H), 4,43 (t, J=8,5Hz, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,56 (t, J=8,9Hz, 1H), 3,16 (kvintet, J=8,9Hz, 1H), 2,42 (dt, J=12,8, 7,3Hz, 1H), 2,11 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,72 (dt, J=12,8,9,8Hz, 1H), 1,55 (dd, J=6,7,l,8Hz, 3H), 1,5-1,35 (m, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 311, (M+Na)⁺ = 333, (M-H)' = 309, (M+CF₃COO')' = 423, (2M-H)' = 619.

·.$

248

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-3-methyl)pentyl3-(cis- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

.OH

A. t-Butylester (±)-(2R,3 S ,5 R, 1 ’ R,2 ’ S, 3 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy3-methyl)pentyl-3-(czY-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S,3’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido2- hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(czY-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-r-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3- (cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

94B. Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rR,2'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-3methyl)pentyl-3 -(cw-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S,3 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido2-methoxy-3-methyl)pentyl-3-(czY-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czYpropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

>4

V

Λ-r »·

I « 49

249

V

Příklad 95

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’RS)-2-(l-acetamido-2-oxo-2-heptafluorpropyl)ethyl-3(cz5- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylově kyseliny.

O*Bu lí o

95A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 'RS)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-oxo-3heptafluorpropyl)ethy](d.y-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’RS)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-heptafluůrpropyl)ethyl-3-(cz\-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3S,5R,l^?R,2^,R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.s-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,8 mg, 88%).

MS: (M+H)⁺ = 579, (M-H)’ = 577.

95B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TRS)-2-(l-acetamido-2-oxo-2heptafluorpropyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

V		¥ ·· ·¥ ¥ ¥	• ¥· >·· ⁹⁹ ·· · · · i 1 Ϊ ¥ ¥ · · · ·
	250	¥ ·¥ • ¥ ¥ ¥ ¥ ¥ · ¥¥¥ ¥¥	« · · · · · «····· ·· ··

Požadovaná sloučenina- se -připraví. podle způsobu .popsaného v příkladu 41 C nahrazením í-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’RS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acétamido-2-oxo3-heptafluorpropyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl- 2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0037 g, 100%).

. MS: (M+H)⁺ = 423, (M-H)' = 421.

Příklad 96

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rRS)-2-(l-acetamido-2-oxo-2-heptafluorpropyl)ethyl-3(cA-propen-1-yl)-pyrrolidin’5-karboxylové,kyseliny.

96A. t-Bůtylester (±)-(2R,3S,5R,l ^?RS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo-3heptafluorpropyl)ethyl-3-(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3 -heptafluorpropyl)ethyl-3 -(c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylo vé kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,8 mg, 88%).

MS: (M-H)'= 577.

251 • ·· ·· · · • ·» • · · » • · · ··· *· ·· φ · · • · · • · · • · ♦ ·· «β ·«

96Β. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’RS)-2-(l-acetamido-2-oxo-2heptafluorpropyl)ethyl-3-(č7.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-3-heptafluorpropyl)ethyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-bZ-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0037 g, 100%).

MS: (M+H)⁺ = 423,(M-H)'= 421. ' , ' _t

Příklad 97

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-oxo)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

O‘Bu

Y o

97A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)pentyl3-(cA-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 42A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2’ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester

(±)<2RT3S-,5R,T^?Rv2^)--l-Cbuíox-yk-arbonyT2--^^ propen- l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny (výtěžek: 14 mg, 58%).

MS: (M+H)⁺ = 453, (M+Na)⁺ = 475; (M-H)' = 451.

( 97B. Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-oxo)pentyl-3-(czs-propenl-ylj-pyrrolidin-S-karboxylové kyseliny, s í

1, ¹ , Vř i, Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)pentyl-3-(cz‘ó·propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-lZ-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czs-propen-l -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny t-butylesteru(výtěžek: 1,4 mg, 28%).

‘H NMR (DMSO-de): δ 8,31 (d, J=8,3Hz, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,19(brt, 1H), 4,26 (t, J=6,8Hz, 1H), 3,63 (t, J 8,31 Iz, 1H), 3,35 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,34 (dt, J=3,4, 7,4Hz, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,58 (dd, J=2,4,3Hz, 3H), 1,43 (m, 3H), 0,82 (t, J=7,3Hz, 3H).

MS: (M-H)'= 295; (M+H)⁺= 297, (M+Na)⁺= 319.

Příklad 98

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-oxo)butyl-S-CczÁ-propen-l-ylj-pyrrolidin-S-karboxylové kyseliny připraveného v příkladu 42A za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,0 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,52 (d, J= 8,6Hz, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,39 (dd, J= 11,0,6,7Hz, 1H), 3,84 (t, > 9,2Hz, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,50 (m, 1H),

2,38 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,63 (m, 1H), 1,58 (dd, J= 6,7,1,8Hz, 3H), 0,94 (t, J= 7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 283, (M+Na)⁺= 305, (M-H)'= 281.

Příklady 99-115

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobů popsaných v příkladech 20 a 40 42 nahrazením příslušných reaktantů.

Příklad 99

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR)-2-(l-acetamido-2-oxo-2-allyl)ethyl-3-(czs-propen-lyl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

254

'Η NMR (DMSO-dó): δ 8,38 (d, J- 8,5Hz, 1H), 5,73 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,05 (m, 3H), 4,32 (t, J= 7,9Hz, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,13 (m, 2H), 2,98 (m, 1H),

3,18 (m, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,51 (dd, J= 5,5,í,2Hz, 3H), 1,44 (m, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 295, (M-H); = 293.

Příklad 100 .

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-oxo-3-methyl)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

'H NMR (DMSO-d₆): δ 8,64 (d, J= 8,5Hz, 1H), 5,59 (m, 1H), 5,08 (d, J= 17, 1Hz, 1H), 5,02 (d, J= 9,8Hz, 1H), 4,65 (t, J- 8,6Hz, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,82 (t, J= 9,2Hz, 1H), 2,82(m 2H), 2,36 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,80 (m, 1H), 1,03 (d, J= 6,7Hz, 3H), 0,97 (d, J= 6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 283, (M+Na)⁺= 305, (M-H)'= 281.

Příklad 101

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-oxo)propyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

255

TFA

*Η NMR (DMSO-de): δ 8,96 (d, J= 7,9Hz, 1H), 5,71 (m, 1H), 5,27 (d, J=17,7Hz, 1H), 5,17 (d, J=11,0 Hz, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,81 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,22 (m, 1H), 2,13 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,24 (m, 1H).

) MS: (M+H)⁺ = 255, (M+Na)⁺ = 277, (M-H)’ = 253.

Příklad 102

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,61 (d, J= 8,5Hz, 1H), 5,60 (m, 1H), 5,10 (d, J= 17,7Hz, 1H), 5,03 (dd, J= 10,4,1,2Hz, 1H), 4,54 (t, J= 8,5Hz, 1H), 4,38 (dd, J= 11,0,6,7Hz, 1H), 3,86 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,37 (m, 2H), 1,85 (s, 3H), 1,82 (m, 1H), 0,94 (t, J= 7,0 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 269, (M+Na)⁺ = 291, (M-H)’ = 267.

256

• ·· · ·· ·· ·· ··· · ··· · · · · · β «· · ····· to · » · to ······ • · · ·· ···· ··· ·· ··· ···· ·· ··

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l -acetamido-2-oxo)pentyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

TFA

O 'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,60 (d, J= 9,7Hz, 1H), 5,60 (m, 1H), 5,07 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 1,86 (s, 3H), 1,82 (m, 1H), 1,47 (m, 2H), 0,87 (t, J= 5,8Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 283, (M+Na)⁺ = 305, (M-H)’ = 281.

Příklad 104

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny

AcHN.

TFA *H NMR (DMSO-dó) δ 8,00 (d, J= 9,9Hz, 1H), 5,63 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,38 (m,

1H), 2,83 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 1,78 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 243, (M+Na)⁺ = 265, (M-H)’ = 241.

257

Přiklaď 105 -Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)propyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

.OH fy,;

*í ’H NMR (DMSO-dé) δ 7,96 (d, J= 9,7Hz, 1H), 5,74 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 5,03 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,77(m 1H), 3,65 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,80 (m, 1H), 1,08 (d, J= 6,0 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 257, (M+Na)⁺ = 279, (M-H)’ = 255.

Příklad 106

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

NMR (DMSO-de): δ 7, 99 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,13 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 5,04 (d, J= 10,5Hz, 1H), 4,27 (t, J= 8,4Hz, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 2,89 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,54 (m, 1H), 1,28 (m, 1H), 0,86 (t, J= 7,2Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 271, (M+Na)⁺ = 293, (M-H)' = 269.

258

Příklad 107 '

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S ,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dé): δ 7,99 (d, J= 9,9Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,08 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 4,03 (m, IH), 3,77 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,88 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,86 (s, 3H), 1,75 (m, IH), 1,45 (m, 2H), 1,25 (m, 2H), 0,87 (t, J= 5,9Hz, 3H).

MS: (M+Na)⁺ =307, (M + H)⁺ = 285, (M-H)’ = 283.

Příklad 108

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)butyl-3vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,97 (d, J= 9,3Hz, IH), 5,75 (m, IH), 5,12 (d, J= 17,1 Hz, IH), 5,04 (d, J= 11,2Hz, IH), 4,24 (m, IH), 4,13 (m, IH), 3,74 (dd, J= 9,8,6,1Hz, IH),

3,44 (dd, J= 10,3,2,0 Hz, IH), 2,87 (m, IH), 2,40 (m, IH), 1,84 (m, IH), 1,83 (s, 3H), 1,75 (m, IH), 0,89 (d, J= 6,8,3H), 0,75 (d, J= 6,8Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H)' = 283.

259

Příklad 109

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-cyklopropyl)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

.OH *H NMR (DMSO-d₆): δ 7,81 (d, J= 10,0Hz, 1H), 5,73 (m, 1H), 5,05 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,20(m 1H), 3,90 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,86 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 0,88 (m, 1H), 0,45 (m, 1H), 0,35 (m, 2H), 0,11 (m, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 283, (M+Na)⁺ = 305, (M-H)' = 281.

Příklad 110

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)propyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-tL): δ 7,77 (d, J= 9,7Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,07 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,95(m 1H), 3,57 (m, 1H), 2,86 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,04 (d, J = 6,0 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 257, (M+Na)⁺ = 279, (M-H)' = 255.

• 9

260

Příklad 111

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-dg): δ 7,72 (d, > 9,8Hz, 1H), 5,73 (m, 1H), 5,08 (d, >17,1 Hz, 1H), 5,03 (d, > 10,4Hz, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 2,88 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,38 (m, 2H), 0,84 (t, > 7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 271, (M+Na)⁺ = 293, (M-H)’ = 269.

Příklad 112

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dé): δ 7,72 (d, > 9,9Hz, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,06 (m, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,37 (m, 2H), 1,27 (m, 2H), 0,87 (t, > 5,9Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H)' = 283.

·· ·· · · · · · ·

261

Příklad 113

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-methyl)butyl-3vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dó): δ 7, 71 (d, J= 9,3Hz, 1H), 5,70 (m, 1H), 5,08 (d, J= 17,1Hz, 1H), 5,03 (d, J= 10,3Hz, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,35 (dd, J= 8,3,2,5Hz, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,58 (m, 1H), 0,95 (d, J= 6^8Ηζ, 3H), 0,79 (d, J= 6,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 285, (M+Na)⁺ = 307, (M-H)’ = 283.

Příklad 114

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-cyklopropyl)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dé): δ 7,94 (d, J= 9,6Hz, 1H), 5,76 (m, 1H), 5,12 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,81 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,87 (s, 3H), 0,90 (m, 1H), 0,47 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,15 (m, 1H).

MS: (M+H)⁺ = 283, (M+Na)⁺ = 305, (M-H)’ = 281.

262 -......

Příklad 115

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4-methyl)pentyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^JH NMR (DMSO-d₆): δ 7,71 (d, J= 9,7Hz, IH), 5,83 (m, IH), 5,06 (d, J= 17,1 Hz, IH), 5,02 (d, J = 10,3Hz, IH), 4,41 (m, IH), 4,06 (m, IH), 3,83 (m, IH), 3,59 (t, J= 8,8Hz, IH), 2,84 (m, IH), 2,42 (m, IH), 1,90 (m, IH), 1,82 (s, 3H), 1,71 (m, IH), 1,34 (m, IH), 1,07 (m, IH), 0,89 (d, J= 6,8Hz, 3H), 0,86 (d, J= 6,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H)’ = 297.

Příklad 116

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2’methyl)propyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O^lBu

Ύ

O

AcHN ’ N

H Boc OH

116A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2methyl)propyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

263

t-ButylěštěF’(±)-(2R,3S,5R,l’R)-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)propyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11 mg, 0,027 mmol) se nechá reagovat s methylmagnesiumbromidem (3 M) (0, 05ml, 0, 134 mmol) v THF(2 ml) při teplotě 25°C po dobu 2 hodin, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (2 ml) a vodou (2 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2x5 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/1:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek:

1,9 mg, 17%).

MS: (M+H)⁺= 427, (M-H)'= 425.

116B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-methyl)propyl-3vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-methyl)propyl-3-vinyl-pyrroliďin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(c/.vpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 1,6 mg, 99%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 7,70 (d, J=9,9Hz, ÍH), 5,75 (m, ÍH), 5,02 (m, 2H), 4,37 (m, ÍH), 4,15 (m, ÍH), 3,61 (m, ÍH), 2,78 (m, ÍH), 2,41 (m, ÍH), 1,81 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,12 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ =271, (M+23)⁺ =293, (M-H)' =269.

• ·

264.

Příklad 117

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-ethyl)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

,OBu

AcHN.

117A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2ethyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)butyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (37mg, 0,087 mmol) se nechá reagovat s ethylmagnesiumbromidem (3 M)(0, 15ml, 0, 44mmol) v THF(5 ml) při teplotě 25°C po dobu 2 hodin, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (5 ml) a vodou (5 ml), poté se provede extrakce pomocí dičhlormethanu (2x10 ml)· Organická vrstva se suší nad MgSOzt, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/1 :ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 14 mg, 35%).

MS: (M+H)⁺ = 455, (M-H)’ =453.

.OH

TFA

AcHN

117B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-ethyl)butyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

265

Požadovaná' sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, l’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-2-ethyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'.vpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,8 mg, 98%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 7,62 (d, J=9,6Hz, 1H), 5,75 (m, 1H), 5,03 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 2,88 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,55-1,30 (m, 4H), 0,86 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ =299, (M-H)’ =297.

Příklad 118

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido) allyl-3-(ez.v-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

118A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido)allyl-3-(cz'.s·propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)methyl-3-(m-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxyIové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3 -formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 15,3 mg, 61,4%).

MS: (M+H)⁺ = 409.

• ·

266 c

AcH

··

TFA

imido)allyl-3-(cís-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido)allyl-3(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5 R, Γ R,2 ’ S)-1-Z-butoxykarbonyl-2-( 1-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 13,1 mg, 100%).

H NMR (DMSO-dó): δ 1,58 (dd, 3H), 1,74 (dt, 1H), 1,88 (s, 3H), 2,41 (dt, 1H),

3,17 (m, 1H), 3,56 (dd, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,70 (dd, 1H), 5,22-5,30 (m, 3H), 5,51 (m,

1H), 5,82 (m, 1H), 8,15 (d, 1H), 9,18(br s, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 253.

Příklad 119

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-acetamido-2-(czs a írazzsjbuten-l-yl)-3-(cwpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

,0'BU

26Ί

• 00	• ··	00	• 0
• · · ·	00 0 0	0 0 0	0
• «·	• 0	• · ·	0
		0
0 0 0 ··· 00	0 0 000 0 000	0 0 0 0»	0 0 >

119A. t-Butylester(±)-(2R,3S,5R,TS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(cz.v a Zraz7.s)buten-1 -yl)-3-(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-l-/-butoxykarbony]-2-(l-acetamido-2formyl)methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-3-mcthyl)butyl-3-formy 1pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a ethyltrifenylfosfoniumbromid za methyltrifenylfosfoniumbromid (výtěžek: 12,4 mg, 48,2%).

MS: (M+H)⁺ = 423.

119B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-(cz.s· a /raz7.v)buten-l-yl)-3(ez'.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rS)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(czs' a Zraz7.sjbuten-l-yl)-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2’(l-acetamido2-hydroxy)butyl-3-(czTpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11,8 mg, 100%).

^lHNMR (DMSO-dé): δ 1, 63 (dd, 3H), 1,66 (dd, 3H), 1,74 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 2,41 (dt, 1H), 3,17 (m, 1H), 3,50 (dd, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,95 (m, 1H), 5,23 (m, 1H),

5,39 (m, 1H), 5,53 (m, 1H), 5,68 (m, 1H), 8,21 (d, 1H), 9,18(br s, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 267.

• ·Ρ • ·

268 • ·

Příklad 120

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3,3-dimethyl)allyl-3-(czT-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

120A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3,3dimethyljal lyl-3-(ez.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20K, nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, ]’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)methyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a izopropyltrifenylfosfoniumbromid za methyltrifenylfosfoniumbromid (výtěžek: 8,2 mg, 25,9%).

MS: (M+H)⁺ = 437.

120B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3,3-dimethyl)allyl-3-(cz'spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

• ·

269

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3,3dimethyl)allyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(úApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7,5 mg, 100%), ’H NMR (DMSO-d₆): δ 1,53 (dd, 3H), 1,57 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,66 (m, IH), 1,77 (s, 3H), 2,32 (dt, IH), 3,07 (m, IH), 3,39 (dd, IH), 4,26 (m, IH), 4,75 (m, IH), 5,07 (d, IH), 5,15 (m, IH), 5,44 (m, IH), 8,06 (d, IH).

MS: (M+H)⁺ = 281.

Příklad 121

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l 'S)-2-(l-acetamido-2-(cA a Zran.s)penten-l-yl)-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

121 A. (±)-(2R,3S,5R,rS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(cA a Zran.v)penten-l-yl)3 -3 (c A-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2formyl)methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3-formyl pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a n-butyltrifenylfosfoniumbromid za methyltrifenylfosfoniumbromid (výtěžek: 21,0 mg, 66,2%).

MS: (M+H)⁺ = 437.

Y ο

OH • · » «

I I ··

121Β. Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-aeetamido-2-(ez's a řrazwjpenten-l-yl)^(cz'.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(cz'5· a řruz75)penten-l-yl)-3-(cz's^,-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy )butyl-3-(czYpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny(výtěžek: 16,0 mg, 98,1%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 0,93 (t, 3H), 1,62 (dd, 3H), 1,75 (m, IH), 1,87 (s, 3H), 2,07 (m, 2H), 2,40 (m, IH), 3,17 (m, IH), 3,50 (m, IH), 4,34 (m, IH), 4,94 (m, IH), 5,23 (m, IH), 5,34 (m, IH), 5,53 (m, IH), 5,58 (m, IH), 8,24 (d, IH), s,2H),9,25(br s, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 281.

Příklad 122

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-4-hydroxy-2-(cz'5· a Zran.s)buten-1yl)-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

TBSO

O*Bu

Ϊ

O • · , ' ²⁷¹

122A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1'S)-1 -/-butoxykarbonyT2-(l-acetamido-4-(tbutyldimethylsilyloxy)-2-(cA a /ra/7.s)buten-l -yl)-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’ S)-l-/-buto xykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’ S)-1 -í-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny a 4-(t-butyldimethylsilyloxy)butyltrifenylfosfoniumbromid za methyltrifenylfosfoniumbromid (výtěžek: 23,1 mg, 66,9%).

MS: (M+H)⁺ = 567.

122B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-acetamido-4-hydroxy-2-(cA a /rms)buten-l-yl)-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(cA a /nms)-4-hydroxy-butenyl-2-yl)-3-(cz.s'-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl 2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 16,9 mg, > 100%).

^!H NMR (DMSO-dé): δ 1,67 (dd, 3H), 1,78 (dt, 1H), 1,91 (s, 3H), 2,44 (m, 1H),

2,50 (m, 1H), 2,56 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,47 (m, 2H), 5,01 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,54 (m, 2H), 5,63 (m, 1H), 8,32 (d, 1H), 9,27(br s, 2H).

«· ·

272

MS: (ΜΗ i)' = 297.

Příklad 123

Hydrochlorid (±)-(2R,3 S ,5R, 1'S)-2-( 1 -acetamido)butyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

TBDPSO— \

Ph

123A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l -Benzyl-2-vinyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-Benzyl-2-vinyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (30,8 g, 97,1 mmol) se nechá reagovat s t-butyldifenylsilylchloridem (49,5 ml, 190,4 mmol) a imidazolem v dichlormethanu (650 ml) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny, reakce se zháší methanolem, poté se provede extrakce dichlormethanem (600 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 2/l:chlorform/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 52,9 g, 98%).

*H NMR (CDC1₃): δ 7,62-7,67 (m, 4H), 7,32-7,44 (m, 6H), 7,25-7,30 (m, 5H), 5,58-5,72 (m, 1H), 5,06-5,14 (m, 2H), 3,90 (d, 1H), 3,72-3,78 (m, 1H), 3,58-3,68 (m, 2H),

3,44-3,52 (m, 2H), 2,26-2,40 (m, 1H), 2,10-2,23 (m, 1H), 1,68-1,78 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,03 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺=556.

123B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rRS)-l-Benzyl-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-řbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-Benzyl-2-vinyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (22,7 g, 41 mmol) se nechá reagovat s OsO₄ (4%)(2,5 ml, 0,7 mol, %) a N-oxidem N-methylmorfolinu (18,5 g, 2,77 ekviv.) v acetonu (500 ml) a svódou (60 ml) po dobu 48 hodin při pokojové teplotě, reakce se zháší 10% vodným Na₂S₂O3 (200 ml), reakce se koncentruje ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi vrstvy ethylacetát/vody. Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 35% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 11 g, 55%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,58-7,63 (m, 5H), 7,40-7,48 (m, 7H), 7,20-7,35 (m, 3H),

4,41-4,45 (m, 2H), 3,98 (d, 1H), 3,75-3,84 (m, 2H), 3,50-3,68 (m, 2H), 3,4 - 3,46 (m, 1H), 3,16-3,25 (m, 1H), 2,97-3,0 (m, 1H), 2,09-2,28 (m, 1H), 1,62-1,89 (m, 1Ή), 1,34-1,39 (m, 1H), 1,30 (s, 9H)„ 98„ 96(2s, 9H).

MS: (Mí 11)' = 590.

123C. t-Butylester (2R,3R,5R,rRS)-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

(♦

274, t-Butyléster ~(±)-(2R,3R,5R, 1’ RS)-1-benzyl-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-Abutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11 g, 18,7 mmol) se nechá reagovat pod 1 atmosférou vodíku s 20% Pd(OH)2/C (5 g) a v ethanolu (40 ml) za silného míchání po dobu 2,5 dne při pokojové teplotě, reakce se filtruje a katalyzátor se promyje methanolem (3 x 30 ml). Filtrát se odpaří ve vakuu, čímž poskytne požadovanou sloučeninu jako olej (výtěžek: 8 g, 94%).

TBDPSO— λ

123D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1,2-dihydroxy)ethyl-3-Zbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 40D nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’RS)-2-( 1,2-dihydroxy)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’RS)-2(l,2-dihydroxy)ethyl-3-acetoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 35% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 20,5 g, 60%).

'H NMR (DMSO-dé): δ 7,57-7,60 (m, 4H), 7,38-7,48 (m, 6H), 4,85 - 4,77(2d, 1H),

4,45 - 4,50 (m, 1H), 4,02 - 4,10 (m, 1H), 3,80-3,95 (m, 1H), 3,73 - 3,68 (2s, 1H), 3,453,67 (m, 2H), 3,18 - 3,28 (m, 2H), 2,36 - 2,46 (m, 2H), 1,86 - 1,70 (2d, 1H), 1,40 - 1,35 (2s, 9H), 1,32 - 1,26 (2s, 9H), 1,0 - 0,98 (2s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 600.

• · • ·

275

TBDPSO—

AcO

MsO

,O’Bu

123E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-methansulfonyloxy-2acetoxy)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l,2-dihydroxy)ethyl-3-Zbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20,5 g, 34,2 mmol) se nechá reagovat s anhydridem kyseliny octové (16,1 ml, 171 mmol) a triethylaminem (47,7 ml, 342 mmol) v dichlormethanu (360 ml) při teplotě 0°C po dobu 16 hodin. Reakce se nechá reagovat s methanolem (35 ml) po dobu 10 minut a zředí s dichlormethanem (1300 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se nechá reagovat s methansulfonylchloridem (4,0 ml, 51,3 mmol) a triethylaminem (14,3 ml, 103 mmol) v dichlormethanu (350 ml) při teplotě 0°C po dobu 1,5 hodin, reakce se zháší vodou (300 ml) a zředí dichlormethanem (1200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 23,8 g, 97%).

'H NMR (DMSO-dó): δ 7,58 - 7,62 (m, 4H), 7,38 - 7,50 (m, 6H), 5,12 - 5,26 (2m, 1H), 4,06 - 4,25 (m, 3H), 4,00 (d, 1H), 3,46 - 3,68 (m, 2H), 3,20 - 3,18 (2s, 3H), 2,40 2,48 (m, 1H), 2,02 - 1,99 (2s, 3H), 1,68 - 1,88 (m, 1H), 1,42 - 1,36 (2s, 9H), 1,31 - 1,25 (2s, 9H), 1,00 - 0,98 (2s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 720, (M+Ní^f =737.

TBDPSO— o:

,Ο’Βυ

276 • ··

123F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-Z- ___ butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5 -karboxylová kyselina.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-methansulfonyloxy-2acetoxy)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (23,8 g,

33,1 mmol) se nechá reagovat s uhličitanem draselným (10,1 g, 66,2 mmol) v methanolu (160 ml) a THF (160 ml) při teplotě 25°C po dobu 18 hodin, reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje s vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 25% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 16,7 g, 87%).

’H NMR (CDCls): δ 7,60-7,68 (m, 4H), 7,32-7,45 (m, 6H), 4,02 - 4,28 (m, 2H), 3,67 - 3,78 (na, 1H), 3,52 - 3,62 (m, 1H), 3,0 - 3,08 (m, 1H), 2,68 - 2,75 (m, 1H), 2,47 2,52 (m, 3H), 1,80 - 1,90 (m, 1H), 1,48 - 1,42 (2s, 9H), 1,37 - 1,35 (2s, 9H), 1,07 - 1,03 (2s,9H).

MS: (M+H)⁺ = 582.

,O’Bu

123G. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-ř-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (4,17 g, 7,2 mmol) se nechá reagovat s tetrabutylamoniumfluoridem (1 M) (14 ml, 14,0 mmol) v THF(7 ml) po dobu 20 minut při teplotě 0°C, pak po dobu 1,5 hodin při teplotě 25°C, reakce se koncentruje ve vakuu a zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje pufrem o pH 7,0 a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu (·

277

použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina jako olej (výtěžek: 2,4 g, 97%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 4,72-4,78 (m, 1H), 3,94-4,05 (m, 2H), 3,35-3,47 (m, 1H), 3,18-3,28 (m, 1H), 3,03-3,08 (m, 1H), 2,63-2,73 (m, 1H), 2,37-2,44 (m, 1H), 2,30-2,36 (m, 1H), 2,08-2,20 (m, 1H), 1,58-1,75 (m, 1H), 1,40 (s, 9H), l,37,l,34(2s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 344, (M+Na)⁺ = 366.

H

0=7

123H. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, Γ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,4 g, 7,0 mmol) a triethylamin (3,9 ml 28,0 mmol) v dičhlormethanu (70 ml) při teplotě 0°C se nechá po kapkách reagovat s komplexem pyridinu a sulfurtrioxidu (3,35 g, 21,0 mmol) v dimethylsulfoxidu (21 ml), poté následuje reakce další 3 hodiny. Reakce se zháší vodou (50 ml) a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 2,2 g).

^lH NMR (DMSO-dó) (rotamery): δ 9,58 a 9,56 (2s, 1H), 4,70 a 4,53 (2m, 1H), 3,96 (dd, J=l,4, 9,2 Hz, 1H), 3,25-3,20 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,50-2,28 (m, 3H), 1,42,1,37, 1,34, a 1,30 (4s, 18H).

MS: (M-H)' = 340.

278;

·· • · ·· • · • · » ·· ·· • · · · · • · · · · » · · β · · • · · ·

1231. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-t-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Trifenylfosforanylidenemethylylid (17,6 mmol), připravený reakcí methyltrifenylfosfoniumbormidu (12,63 g, 35,4 mmol) a Ze/7-butoxidu draselného (1 M) (17,6 ml, 17,6 mmol) v THF (70 ml) po dobu 1 hodiny při teplotě 25°C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-ř-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,2 g, 6,5 mmol) v THF (10 ml) se přidá do výše uvedeného roztoku při teplotě 0°C a míchá po dobu 0,5 hodiny, reakce se zháší nasyceným chloridem amonným (50 ml) a zředí s ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 2 g, 84%). .

*H NMR (DMSO-dó): δ 5,80-5,95 (m, ÍH), 5,08 (d, ÍH), 4,94-5,04(ÍH), 4,00 4,07 (m, ÍH), 3,59 - 3,90 (2t, ÍH), 3,07 - 3,16 (m, ÍH), 2,73 - 2,81 (m, ÍH), 2,65 - 2,72 (m, ÍH), 2,35 - 2,48 (m, ÍH), 1,59 - 1,76 (m, ÍH), 1,42 (s, 911), 1,38 - 1,35 (2s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 340.

123J. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -methansulfonyloxy-3azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (+.)-(2R,3S,5R, 1 'S)-1 -/-bůtoxykarbonyl-2-oxiránýí-3-viňýl-pynOlidih5-karboxylové kyseliny (1,72 g, 5,1 mmol) a chlorid amonný (1,36 g, 25,4 mmol) v ethanolu (45 ml) a vodě (5 ml) se nechá reagovat s azidem lithným (1,2 g, 24,5 mmol) po dobu 7 hodin při teplotě 50°C, reakce se koncentruje ve vakuu a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek (2,15 g) se rozpustí v dichlormethanu (50 ml) a nechá reagovat s methansulfonylchloridem (0,8 ml, 10,2 mmol) a triethylaminem (2,8 ml, 20,4 mmol) po dobu 0,5 hodin při teplotě 0°C, reakce se zháší vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 1,87 g, 80%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 5,77-5,98 (m, 1H), 4,94-5,11 (m, 3H), 4,12-4,19 (m, 1H), 3,99-4,06 (m, 1H), 3,66,3,71 (2d, 1H), 3,25,3,22(2s, 3H), 2,92-3,02 (m, 1H), 2,55-2,63 (m, 1H), 1,68-1,82 (m, 1H), l,45,l,42(2s, 9H), l,38,l,36(2s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 461.

123K. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -methansulfonyloxy-3azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,12 g, 4,6 mmol) se nechá reagovat s trifenylfosfinem (1,81 g, 6,9 mmol) v THF (30 ml) a s vodou (7,5 ml) při teplotě 65°C po dobu 1 hodiny, reakce se koncentruje ve vakuu a znovu rozpustí v ethylacetátu (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 4% ·

............-280—

methanolu v dichlormethanu, čímž se získají 2 g surové požadované sloučeniny obsahující přibližně 60% produktu a 40% PhjPO, která se použila přímo pro acylaci.

’H NMR (DMSO-dé): δ 5,78-5,5,98 (m, IH), 4,12 (d, IH), 3,42,3,19(2d, IH), 2,53-2,73 (m, 2H), 2,00-2,15 (m, IH), 1,68-1,76 (m, IH), 1,62-1,68 (m, IH), 1,41 (s, 9H), l,37,l,36(2s,9H).

MS: (M+H)⁺ = 339, (M+Na)⁺ = 361.

acn;

h π Boc

O^lBu

Y

O

123L. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(N-acetylaziridiny)-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (1,03 g, 3,1 mmol) se nechá reagovat s anhydridem kyseliny octové (0,42 ml, 4,7 mmol) a triethylaminem (1,3 ml, 9,3 mmol) v dichlormethanu (30 ml) při teplotě 25°C po dobu 1 hodiny, reakce se zháší vodou (50 ml) a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 20% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek:, 75 g, 64%).

’H NMR (DMSO-dó): δ 5,78-5,98 (m, IH), 5,05 (d, IH), 4,98,4,94(2d, IH), 4,12 4,20 (m, IH), 3,54,3,42(2dd, IH), 2,54-2,98 (m, 3H), 2,40,2,49(2d, IH), 2,15,2,19(2d, IH), 2,02,2,04(2s, 3H), 1,68-1,82 (m, IH), 1,42 (s, 9H), l,48,l,45(2s, 9H).

MS: (2M+Na)⁺= 783.

tr

123M. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do suspenze komplexu bromid-dimethylsulfiddu měďného (0,05lg, 0,248 mmol) v THF (1,0 ml) při teplotě 0°C se přidá ethylmagnesiumbromid (1 M)(l,0 ml, 1,0 mmol) v THF. Po 10 minutovém míchání při teplotě 0°C se tento roztok (0,60 ml) přidá do roztoku t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(N-acetylaziridinyl)-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,020 g, 0,053 mmol) v THF(0,40 ml) při teplotě -78°C. Po míchání po dobu 20 minut při teplotě -78°C se reakce ohřeje na teplotu 0°C a míchá po dobu 30 minut, reakce se zháší nasyceným chloridem amonným (1,0 ml) a zředí ethylacetátem (10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu pomocí a gradientově eluce 0 - 75% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,004 g, 19%).

'H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 7,48 (d, J=9,5Hz, 1H), 5,98-5,80 (m, 1H), 5,004,90 (m, 2H), 4,45-4,25 (m, 1H), 3,96-3,91 (m, 1H), 3,60-3,57 a 3,53-3,50(2m, 1H), 2,912,76 (m, 1H), 2,59-2,42 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,73-1,59 (m, 1H), 1,42 a l,41(2s, 9H), 1,40-1,15 (m, 4H), 1,37 a l,34(2s, 9H), 0,89-0,82 (m, 3H).

MS: (M-H)' = 409, (M+H)⁺ = 411.

fe íi í

HCI

Ί*

282 * · »·' l « ·'·

T23NT Hydřochloridová sůl (±)-(2R,3S;5'R;l’S)-2'-(l-aeetamido)butyl=3-vmyl5)yrrolidm-‘5— karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido)butyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek:

3,1 mg, 99%).

'H NMR (DMSO-dó): δ 8,11 (d, J=7,3Hz, 1H), 5,76-5,69 (m, 1H), 5,16 (d, J = 17,1Hz, 1H), 5,07 (dd, J=l,5, 10,3Hz, 1H), 4,30 (dd, J = 7,3, 9,8Hz, 1H), 4,13 (m, 1H),

3,50 (dd, J=5,9, 9,8Hz, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,39 (m, ΪΗ), 1,92 - 1,85 (m, 1H), 1,87 (s, 3H),

1,52 - 1,18 (m, 4H), 0,85 (t, J=7,3,3H).

MS: (M-H)' = 253, (M+H)⁺ = 255. ,

Příklady 124-130

1. Orgaiioiuěď

2. 6N HCI

Následující sloučeniny se připraví ve dvou krocích podle způsobů popsaných v příkladech 123M a 123N, označená činidla a jejich příslušné způsoby přípravy jsou nahrazeny za diethylkuprát a jeho příprava v příkladu 123M za krok 1.

i »·

·>—

1. '

Přiklaď 124

¥ ¥ ¥ · • ¥ · · ¥ ¥ ¥ ¥ ¥ ¥ · · ·¥ »·

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido)hexyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 123M nahrazením 2M butylmagnesiumchloridu za JM ethylmagnesiumbormide.

'H NMR (MeOD-d₃): δ 5,82 - 5,70 (m, IH), 5,29 (d, >17, 0Hz, IH), 5,17 (dd, >1,3, 10,2Hz, IH), 4,35 (dd, >7,5, 10,2Hz, IH), 4,19 (m, IH), 3,65 (dd, >3,4, 9,8Hz, IH), 3,01 (m, IH), 2,55 (m, IH), 2,08 - 1,97 (m, IH), 2,04 (s, 3H), 1,62 - 1,31 (m, 8H), 0,91 (t, >6,4Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 281, (M+H)⁺ = 283.

Příklad 125

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-4-methyl)pentyl-3-vinylpyrroliďin-5-karboxylové kyseliny.

t.

,fy čr

- 284 • ·· ·· · · • ·· • e · · • · · ,©©.«.. ©e • 44 »« e · • · • · • t «·» ···· ·· ·· r · © • 4 9 ©9 9 9 '4 9 4 ·· ©9

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 123M nahrazením izo-butylmagnesiumchloridu za ethylmagnesiumbromid.

’H NMR(MeOD-d₃): δ 5,83-5,71 (m, IH), 5,29 (dd, J=0,7, 17,0Hz, IH), 5,17 (dd, J=0,7, 10,2Hz, IH), 4,34 (dd, J=7,5, 10,2Hz, IH), 4,15 (m, IH), 3,66 (dd, J=3,4, 9,8Hz, IH), 3,01 (m, IH), 2,55 (m, IH), 2,08 - 1,97 (m, IH), 2,04 (s, 3H), 1,65 - 1,10 (m, 5H), 0,91 (d, J=6,4Hz, 3H), 0,91 (d, J=6,5Hz, 3H).

(M+H)⁺=283.

Příklad 126

OH

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3,3dimethyl)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 123M nahrazením 1M /er/-butylmagnesiumchloridu za 1M ethylmagnesiumbromid.

'H NMR (MeOD-ds): δ 5,84 - 5,71 (m, IH), 5,31 (d, J=17,0Hz, IH), 5,19 (d, J=10,2 Hz, IH), 4,39 - 4,33 (m, 2H), 3,66 (dd, J=3,4, 9,8 Hz, IH), 3,02 (m, IH), 2,57 (m, IH), 2,08 - 1,97 (m, IH), 2,02 (s, 3H), 1,55 (dd, J = 9,5, 14,6 Hz, IH), 1,42 (dd, J=l,4,

14,6 Hz, IH), 0,95 (s, 9H).

v

(ΜΊ1)' 283. · -	. 285
Příklad 127
	AcHN
	iTV
		HCI

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-(l -acetamido-2-fenyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Difenylkuprát lithný se připraví podle způsobu popsaného Lipshutzem, B. H. v Organometallics in Synthesis; Schlosser, M., Ed.; Wiley a Sons: New York, 1994; str. 292. Tento kuprát se použije podle způsobu popsaného v příkladu 123M nahrazením difenylkuprátu lithného za derivovaný Grignardový diethylkuprát.

’H NMR (MeOD-d₃): δ 7,35-7,21 (m, 5H), 5,87-5,75 (m, 1H), 5,37 (d, J=16,6Hz, 1H), 5,26 (dd, >1,0, 10,2Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,37 (dd, >7,5, 9,8Hz, 1H), 3,70 (dd, >3,7, 9,8Hz, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,97 (dd, >6,1, 14,2Hz, 1H), 2,84 (dd, >9,5, 14,2Hz, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,08-1,99 (m, 1H), 1,93 (s, 3H).

(M-H)’= 301, (M+H)⁺= 303.

Příklad 128

AcHN

HCI ·· · ·· ·· ·· • 9.999 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’.S)-2-(l-acetamido-4-fenyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 123M nahrazením 1M fenthylmagnesiumchloridu za 1M ethylmagnesiumbromid.

¹ H NMR (MeOD-da): δ 7,29-7,13 (m, 5H), 5,77-5,65 (m, 1H), 5,24 (d, >16,6Hz, ÍH), 5,13 (dd, >1,0, 9,8Hz, 1H), 4,33 (dd, >7,5, 10,2Hz, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,62. (dd, >3,4, 9,8Hz, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,63 (m, 2H), 2,54 (m, 1H), 2,06-1,95 (m, 1H), 2.0.3 (s. 311). 1,79-1,55 (m, 4H).

(M+H)⁺ = 331, (M-H)’ = 329.

Příklad 129

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-fenyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu

123M nahrazením 2M benzylmagnesiumchlorid za 1M ethylmagnesiumbromid.

*H NMR (MeOD-d₃): § 7,-30-7,17 (m, 5H), 5,82-5,70 (m, 1H),5,28 ýd, >17, OHz,

1H), 5,17 (d, >ll,2Hz, 1H), 4,33 (dd, >7,5, 10,2Hz, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,64 (dd, >3,4,

9,8Hz, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,66-2,50 (m, 2H), 2,07 (s, 3H), 2,07-1,85 (m,

3H).

287

(M+H)⁺ = 317, (M-H)' =315.

Příklad 130

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-propen-2-yl)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

O^lBu

Y o

130A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxýkarbonyí-2-(N-Zbutoxykarbonylaziridinyl)-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny (0,058 g, 0,17 mmol) se nechá reagovat s di-Z-butyldikarbonátem (95 mg, 0,44 mmol) a triethylaminem (0,12 ml, 0,86 mmol) v dichlormethanu (2,0 ml) při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny, reakce se zháší nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (1,0 ml) a zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím gradientově eluce 0-15% ethylacetát/dichlormethanem, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,060 g, 80%).

*H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 5,97-5,78 (m, 1H), 5,06-4,93 (m, 2H), 4,15 (dd, >2,0, 9,8 Hz, 1H), 3,40-3,28 (m, 1H), 2,94-2,49 (m, 3H), 2,39 a 2,33(2d, >6,1, 6,4Hz, 1H), 2,17 a2,ll(2d, >3,7, 3,4,1H), 1,81-1,69 (m, 1H), 1,42-1,36 (m, 27H).

MS: (M+Na)⁺ = 461 (slabý).

130B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-Zbutoxykarbonylamino-2- propen-2-yl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do suspenze komplexu bromid-dimethylsulfidu měďného (0,026g, 0,127 mmol) v THF (1,0 ml) při teplotě 0°C se přidá izopropenylmagnesiumbromid (0,5M)(l,0 ml, 0,50 mmol) v THF. Po 10 minutovém míchání při teplotě 0°C se směs ochladí na teplotu -78°C a po kapkách se přidá roztok t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z- butoxykarbonyl-2-(N-Zbutoxykarbonylaziridinyl)-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,030 g, 0,068 mmol) v THF(l,0 ml). Po 10 minutovém míchání při teplotě -78°C, se reakce ohřeje na 0°C a míchá po dobu 2 hodin, reakce se zháší nasyceným chloridem amonným (1,0 ml) a zředí ethylacetátem (10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím gradientově eluce 0-10% ethylacetát/dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,026 g, 79%).

’H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 6,64 (m, 1H), 5,96-5,76 (m, 1H), 4,98- 4,89 (m, 2H), 4,76 - 4,68 (m, 2H), 4,40 - 4,25 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 3,60-3,53 (m, 1H), 3,02-2,86 (m, 1H), 2,62-2,42 (m, 1H), 2,10-1,99 (m, 2H), 1,72 a l,70(2s, 3H), 1,72-1,55 (m, 1H),

1,44-1,34 (m, 27H).

MS: (M+H)⁺ = 481, (Μ - H)' = 479.

• ·

289

130C:t-Butylester'(±)-(2R;3S,5R;l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2Xl-NrZ-._„__________________ butoxykarbonylacetamido-2-propen-2-yl)ethylyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -N-Z-butoxykarbonylamino-2-propen-2-yl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,024 g, 0,050 mmol) se nechá reagovat s hexamethyldisilazidem lithným (1M) (0,60 ml, 0,60 mmol) v THF(2,0 ml) při teplotě -25°C po dobu 1 hodiny. Do výše uvedené reakce se pak přidá acetylchlorid (0,085 ml, 1,20 mmol) při teplotě -25°C a směs se míchá po dobu 30 minut, reakce se zháší nasyceným hydrogenubličitanem sodným (2,0 ml) a míchá po dobu 30 minut při pokojové teplotě, reakce se zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím gradientově eluce 0-15% ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučenina(výtěžek: 0,015 g, 58%) společně s nezreagovanou výchozí sloučeninou.

^!H NMR (DMSO-dóXrotamery): δ 6,01-5,84 (m, 1H), 4,99-4,89 (m, 2H), 4,76 4,58 (m, 3H), 4,33 a 4,23(2d, J=7,8, 8,1Hz, 1H), 4,13 - 4,04 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,622,42 (m, 1H), 2,29(br s, 3H), 2,35-2,14 (m, 2H), 1,76-1,55 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,50-1,35 (m, 27H).

MS: (M+H)⁺= 523.

.290

AcHN,

130D. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-propen-2-yl)ethyl-3-vinylpyrrolidin- 5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-N-Z-butoxykarbonylacetamido-2-propen-2-yl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cAř. propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 12 mg, 99%).

^lH NMR (MeOD-d₃): δ 5,83-5,70 (m, IH), 5,30 (dd, >0,7, 17,0Hz, IH), 5,19 (d, >10,2Hz, IH), 4,79 (s, IH), 4,71 (s, IH), 4,46 (m, IH), 4,30 (dd, >7,8, 9,8Hz, IH), 3,66 (dd, >3,7, 9,8Hz, IH), 3,03 (m, IH), 2,56.(m, IH), 2,40-2,19 (m, 2H), 2,08-1,96 (m, IH), 2,01 (s,3H), 1,76 (s, 3H).

(M-H)‘ = 265, (M+H)⁺ = 267.

Příklady 131-135 bóchn;

O*Bu

1. Oiganokuprát

2. LiHMDS

3. AcCI

4. TFA/CH₂CI₂

AcHN.

TFA

Následující požadované sloučeniny se připraví ve 4 krocích podle způsobu popsaného v příkladu 130, uvedená činidla pro krok 1 a jejich příslušné způsoby přípravy jsou nahrazeny za izopropenylkuprát a jeho přípravu v příkladu 130B.

291

Příklad 131

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-1 -(cis a /rms)-propen-1 -yl)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulíid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 130B nahrazením 0,5M 1-propenylmagnesiumbromidu (směs cis a trans izomerů) za 0,5M izopropenylmagnesiumbromid.

*H NMR (MeOD-d₃)(poměr 2:1 trans:cis): δ 5,81-5,54 (m, 2H), 5,43-5,30 (m, 1H), 5,33-5,27 (m, 0,33H, cis izomer), 5,31-5, 25 (m, 0,66H, trans izomer), 5,20 - 5,15 (m, 1H),

4,26 - 4,17 (m, 2H), 3,65 (dd, >3,4, 9,8Hz, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,58 - 2,48 (m, 1H), 2,452,19 (m, 2H), 2,08-1,94 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,68 (m, 2H, trans izomer), 1,63 (m, 1 II, cis izomer).

(M-H)'= 265, (M+H)⁺= 267.

Příklad 132

TFA ··

9QO ··· · « ···,.·

Z>Z ···' - ♦· ··· ···· ·· ·· ··

Trifluoroctová7šůT(:f)A2R,3S,5R,rS)-2-(l-ácětámidb^ karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 130B nahrazením 1M vinylmagnesiumbromidu za 0,5M izopropenylmagnesiumbromid.

*H NMR (MeOD-d₃): δ 5,83-5,70 (m, 2H), 5,28 (d, J=17,0Hz, 1H), 5,19-5,13 (m, 3H), 4,28 (m, 1H), 4,19 (dd, J=8,5, 9,1Hz, 1H), 3,66 (dd, J=3,4, 9,5Hz, 1H), 2,99 (m, 1H), 2,57-2,48 (m, 1H), 2,44-2,26 (m, 2H), 2,05-1,93 (m, 1H), 2,01 (s, 3H).

(M+H)⁺ = 253.

Příklad 133.

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido)-2-(l -buten-2-yl)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 130B nahrazením 0,5M l-buten-2-ylmagnesiumbromidu za 0,5M izopropenylmagnesiumbromid.

*H NMR (MeOD-d₃): δ 5,81-5,73 (m, 1H), 5,30 (d, J=17,lHz, 1H), 5,19 (d, J=10, 0Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,31 (dd, J=7,6, 9,8Hz, 1H), 3,69 (dd, J=3,2, 9,8Hz, 1H), 3,03 (m, 1H), 2,59-2,53 (m, 1H), 2,38 (dd, J=5,9, 14,9Hz, 1H), 2,30 • · (dd; j=9;5,14,9Hz, Í H)72;07(q, J=7,6Hz,' 2H); 2;05 - 1,99 (m, 111), 2,01 (s, 3H), T,05 (t>

J=7,6Hz, 3H).

(M+H)⁺ = 281.

293

Příklad 134

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-(Zra«5-2-buten-2-yl)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organoměď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfid měďného podle způsobu popsaného v příkladu 130B nahrazením 0,5M 1-methyl-l- propenylmagnesiumbromidu za 0,5M izopropenylmagnesiumbromid.

'H NMR (MeOD-d₃): δ 5,83-5,71 (m, 1H), 5,41(q, J=6,8Hz, 1H), 5,31 (d, >17,3Hz, 1H), 5,19 (d, >10,2Hz, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,31 (dd, >7,5, 9,8Hz, 1H), 3,61 (dd, >4,0, 9,8Hz, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,62-2,52 (m, 1H), 2,46 (dd, >9,5, 13,9Hz, 1H),

2,26 (dd, >5,8, 13,9Hz, 1H), 2,09-1,99 (m, 1H), 2,00 (s, 3H), 1,72 (s, 3H), 1,59 (d, >6,8Hz, 3H).

(M+H)⁺ = 281.

294 - Příklad 135

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’RS)-2-(l-acetamido-3-methyl)pentyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Činidlo organomeď se připraví pomocí Grignardova činidla a katalytického množství komplexu bromid-dimethylsulfld měďného podle způsobu popsaného v příkladu 130B nahrazením 2M sec-butylmagnesiumbromidu za 0,5M izopropenylmagnesiumbromid.

*H NMR (MeOD-d3) (1:1 směs methyl izomerů): δ 5,82-5,69 (m, 1H), 5,27 (d, J=17,0Hz, 0,5H), 5,25 (d, J=17,0Hz, 0,5H), 5,15 (d, J=10,2Hz, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,18 (dd, J=2,7, 7,5Hz, 0,5H), 4,15 (dd, J=3,0, 7,8Hz, 0,5H), 3,62 (dd, J=3,l, 9,8Hz, 0,5H),

3,57 (dd, J = 4,07, 9,8Hz, 0,5H), 2,97 (m, 1H), 2,57-2,47 (m, 1H), 2,03-1,92 (m, 1H), 2,03 (s, 1,5H), 2,02 (s, 1,5H), 1,72-1,06 (m, 5.H), 0_?95 - 0,86 (m, 6H).

(M+II)’ 283.

Příklad 136

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’RS)-2-(l-acetamido-l-(N-methyl-Nbenzylkarbamoyl)methyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

295

AcHI\

HO _υ .OtBu

136A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-1 -karboxyl) methyl- 3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-1 formyl)methyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-( 1 -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Ph

6B. t-Butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 'S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-(N-methylN-benzylkarbamoyl)methyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-1 -karboxyl)methyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (36 mg, 0,09 mmol) se nechá reagovat s N-methyl-N-benzylaminem (32 mg, 0,26 mmol),. dimethylaminopyridinem (1 mg, 0,008 mmol) a l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridem (30 mg, 0,16 mmol) v DMF (3 ml) při teplotě 25°C po dobu 16 hodin. Reakce se zháší vodou (3 ml) a zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSOzt, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina.

MS: (M+H)⁺ =516, (M-H)’ = 514.

rfy

296

• ♦·	• · ·	··	··
• · · ·	ee · ·	•		•	•
• · ·	• ·	•	•	•	•
					•
• · ·	• ·	• ·	•	•	•
	··· ···<		__	··

AcHN

CH₃N

136C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’RS)-2-(l-acetamido-l-(N-methyl-Nbenzylkarbamoyl)methyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,TRS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(Nmethyl-N-benzylkarbamoyl)methyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cžs'propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7 mg, 95%).

'H NMR (DMSO-d₆): δ 8,52( d, J=9,7Hz, 1H), 7,30 (m, 5H), 5,65 (m, 1H), 5,12 (m, 4H), 4,62 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,20 (m, 2H), 1,96 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 360, (M+23)⁺ =382.

Příklad 138

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R)-2-(l-acetamido-2-(N-fenyl-karbonyloxy)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

OtBu

Ϊ

O

138Λ. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R7l-R)-T-ř-buíoxykarb0nyl-2-(Nacetamido.-2-N-fenyl-, _ karbonyloxy)ethyl-3-vinyl-pyrroIidin-5-karboxyIové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-1 -/-butoxy karbony 1-2-( 1 -acetamido-2hydroxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (18 mg, 0,045 mmol) se nechá reagovat s fenylizokyanátem (16 mg, 0,14 mmol) a pyridinem (0,1 ml) v THF(3 ml) při teplotě 25°C po dobu 16 hodin, reakce se zháší vodou (2 ml) a zředí ethylacetátem (10 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 50% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 7,5 mg, 33%).

MS: (M+H)⁺ = 518, (M-H)’ =516.

H

138B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-l-(Nfenylkarbonyloxy)ethy 1-3 -vinyl-pyrrolidin- 5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-Nfenyl-karbonyloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido2-hydroxy)butyI-3-(c7vpropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4 mg, 95%).

’H NMR (DMSO-dó): δ 8,36( d, J=9,7Hz, IH), 7,30 (m, 5H), 5,78 (m, IH), 5,22 (m, IH), 5,10 (m, IH), 4,58 (m, IH), 4,45 (m, IH), 4,14(, 2H), 3,58 (m, IH), 2,88 (m, IH),

2,27 (m, IH), 2,12 (m, IH), 1,88 (s, 3H).

• ·

298

MS: (M-i i 1)' = 362,(M+23)⁺ =384, (M-H)' 360, (M i 35)' = 396.

Příklad 139

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-l-izobutyryloxy)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

,OtBu

AcHN

O

139A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2izobutyryloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (15 mg, 0,04 mmol) se nechá reagovat s izobutyrylchloridem (8 mg, 0,08 mmol) a triethylaminem (8 mg, 0,08 mmol) v dichlormethanu (4 ml) při teplotě 0°C po dobu 2 hodin, reakce se zháší vodou (3 ml) a zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 30% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 11 mg, 63%).

MS: (M+H)⁺ = 469, (M-H)' =467.

'Τ’·

299 • ·· · ·· ·· *· ·« · « ·· β « φφφφ • φφ · · φ·φφ •φφφ · φφφφφφ •φφ φ· φφφ»

ΦΦΦ. ΦΦ ;.··> <··φ «φ .··

139Β. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-l-izobutyryloxy)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(1 -acetamido-2izobutyryloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,0 mg, 96%).

' *H NMR (DMSO-de): δ 8,00( d, J=9,9Hz, 1H), 5,63 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,55 (m, 1H),.3,45 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 1,78 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ =243, (M+23)⁺ = 265, (M-H)' =241.

Příklad 140

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-2-(l-acetamido-2-N-ethyl-thiokarbonyloxy)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

i

• ··	• ··	··		··
• · ·	·· · ·	•	•	•	•
• ··	• ·	•	•	•	•
					•
• · ·	• ·	•	•	•	•
• · ··	·*· ····	··		··
.....- --	------------ .... ,	. ...	-

, _____...________-, , ....., 300 ···*· ···»««—Wta-.· ,-44.·«· - _u

140Α. t-Butylesíer (3.) (2R,3S,5R,1’-R)-l-ř-butoxykarbonyT2-(l=acetamidO-2.-Nrelhyl-.. thiokarbonyloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (17 mg, 0,04 mmol) se nechá reagovat s ethylizothiokyanátem (19 mg, 0,21. mmol) v pyridinu (2 ml) při teplotě 70°C po dobu 17 hodin, reakce se zháší vodou (3 ml) a zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 70% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 10 mg, 48%).

MS: (M+H)⁺ =486, (M+23)⁺ =508, (M-H)' = 485.

140B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-N-ethylthiokarbonyloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,TR)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-Nethyl-thiokarbonyloxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7 mg, 94%).

’H NMR (DMSO-dó): δ 8, 30 (d, J=9,7Hz, 1H), 5,78 (m, 1H), 5, 25 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,72 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 2,30 (m,

1H), 2,10 (m, 1 Η), 1,82 (s, 3H), 1,17 (m, 3H).

3«?· ··

MS: (ΜΗ 11)¹ =330, (Μ-Η-)'=328.

Příklad 141

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-2-amino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

_z0‘Bu

Y o

141 A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-Zbutoxykarbonylamino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-azido)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9,5 mg, 0,022 mmol) se nechá reagovat s trifenylfosfmem (23,5 mg, 0,090 mmol) v ethanolu (180 pl) a vodě (45 pl) při teplotě 70°C po dobu 30 minut. Reakční směs se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dičhlormethanu (220 μΐ), do kterého se přidá di-ZerZ-butyldikarbonát (7,3 mg, 0,034 mmol) a Ν,Ν-diizopropylethylamin (11,7 ml, 0,067 mmol) při teplotě 25°C. Po 1 hodině se reakční směs zředí vodou a extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se spojí, promyje solankou, suší nad MgSO4 a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% dičhlormethanu až 50% dichlormethan/ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 7,5 mg, 67%).

*H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 7,51 (d, J=10,5Hz, 1H), 6,80-6,66 (m, 1H), 5,90-5,76 (m, 1Ή), 5,02 - 4,90 (m, 2H), 4,38 - 4,19 (m, 1H), 3,98-3,94 (m, 1H), 3,68 3,62 (m, 1H), 3,09-2,73 (m, 2H), 2,60-2,42 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,72-1,62 (m, 1H), 1,421,34 (m, 27H).

MS: (M+H)⁺ = 498, (M+Na)⁺ = 520, (M-H)’ = 496, (M+Cl)’ =532.

141B. Dihydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-amino)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-Zbutoxykarbonylamino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,65 mg, 99%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8, 24 (d, J=7,9Hz, IH), 5,75-5,68 (m, IH), 5,16 (d, J=17,lHz, IH), 5,06 (d, J=10,4Hz, IH), 4,37-4,27 (m, 2H), 3,60-3,16 (m, 2H), 3,002,88 (m, 2H), 2,46-2,36 (m, IH), 1,91-1,81 (m, IH), 1,86 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 242, (M+Na)⁺ = 264, (M-H)' = 240, (2M-H)' =481.

Příklad 142

Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-acetamido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

AcHN

O*Bu

Y

O i

c *

142A. t-Butylester (fj^ZR^SrSíbl-S)-'!-r-butoxykarbonyl-2-(4-acetamido=2acetamido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-r-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-amino)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9,4 mg, 0,024 mmol) se nechá reagovat s anhydridem octové kyseliny (11,2 μΐ) a triethylaminem (33,1 μί) v dichlormethanu (0,23 ml) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny, reakce se zředí vodou (3 ml), extrahuje ethylacetátem (12 ml), promyje solankou, suší nad MgSO₄ a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% ethylacetátu až 90% ethylacetát/methanolu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 6,8mg, 66%).

’Ή NMR (DMSO-dé) (rotameiy): § 7,79-7,74 (m, 1H), 7,54 (d, J=9,8Hz, 1H), 5,97-5,81 (m, 1H), 5,01 - 4,91 (m, 2H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 3,97-3,90 (m, 1H), 3,68 3,63 (m, 1H), 3,21-3,15 (m, 1H), 3,10-2,76 (m, 1H), 2,88-2,78 (m, 1H), 2,58-2,45 (m, 1H),

1,81 (s,3H), 1,7.8 (s, 3Hý 1,76-1,64 (m, 1H), 1,42-1,36 (m, 18H).

MS: (M+H)⁺ = 439, (M+Na)⁺ = 462, (M-H)’ = 438, (M+35)' = 474.

AcHN

OH

If

HCI

142B. Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-2-acetamido)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením hydrochloridové soli (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l,2-di-acetamido)butyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,30 mg, 80%).

·'♦ ··

304.·..·

29· 99 99

9 9 9 9 9 · 9 9 9 9

MS : (M+Gl)' = 31-8,-(-Μ-Η)1= 282,4M±.HÉ = 284.........

Příklad 143

Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

143A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-N-acetamido-2azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(N-acetylaziridinyl)-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (21,6 mg, 0,064 mmol) se nechá reagovat s azidem sodným (41,6 mg, 0,64 mmol) a chloridem amonným (34,2 mg, 0,64 mmol) v ethanolu (270 μΐ) a vodě (30 μΐ) při teplotě 75°C po dobu 1 hodiny. Ethanol se pak odstraní ve vakuu a zbývající voda se extrahuje ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí solankou, suší nad MgSO₄ a koncentrují ve vakuu (surový výtěžek: 20mg, 82%). Do surové.směsi se přidá anhydrid kyseliny octové (31 μΐ, 0,33 mmol) a triethylamin (92 μΐ, 0,66 mmol) v dichlormethanu (330 μΐ) při teplotě 0°C po dobu 30 minut. Reakční směs se pak koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% dichlormethanu až 50% dichlormethan/ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 10 mg, 60%).

*H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 7,85 a 7,81 (d, J=9,5Hz a 9,8Hz, 1H), 5,94-5,80 (m, 1H), 5,04 - 4,93 (m, 2H), 4,58 - 4,38 (m, 1H), 4,04-3,96 (m, 1H), 3,72-3,66 (m, 1H),

3,41-3,21 (m, 2H), 3,09-2,79 (m, 1H), 2,59-2,46 (m, 1H), 1,841,82 (m, 3H), 1,79-1,53 (m, 1H), 1,43-1,35 (m, 18H).

φφ φ φ • Φ φ φ φφφφ φ φ φ I φ ·

3G&.

MS: (Μ+Η)⁺ = 424, (M+Na)⁺= 446, (2M+Na)⁺=869, (M-H)' = 422, (M+C1)'= 458.

143B. Hydrochloridová sůl (+)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-azido)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3 S, 5 R,1’S)-1 -z-butoxykarbony 1-2-(1-acetamido-2azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)2-(l-ácetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,94 mg, 93%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 8,24 (d, J=8,55Hz, 1H), 5,74-5,67 (m, 1H), 5,14 (d, J=17, 1Hz, 1H), 5,06 (d, J=10,4Hz, 1H), 4,41-4,35 (m, 2H), 3,57-3,36 (m, 3H), 2,93 - 2,90 (m, 1H), 2,44-2,38 (m, 1H), 1,96-1,84 (m, 1H), 1,84 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 268, (M-H)' = 266, (M+Cl)' = 302.

Příklad 144

Dihydrochlorid (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-2-N-methylamino)ethyl-3 -vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

144A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-N-acetamido-2-Nmethylamino)ethyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Methylamin(0,016 g, 0,53 mmol) se nechá reagovat s N,O-bis-trimethylsilylacetamidem.(0,079 g, 0,39 mmol) v DMSO (0,8 ml) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(N-acetylaziridinyl)-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,040 g, 0,11 mmol) se pak nechá reagovat s výše uvedeným činidlem N-trimethylsilylmethylaminem při teplotě 75°C po dobu 18 hodin, reakce se zředí ethylacetátem (7 ml), promyje vodou a solankou, suší nad MgSCL, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím chloroform-methanol-amoniaku, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek:, 011 g, 25%).

’H NMR (CDC1₃): δ 5,78-5,98 (m, 1H), 5,90-5,04 (2m, 2H), 4,40-4,55 (brm, 1H), 3,90-4,02 (m, 1H), 3,64-3,75(2m, 1H), 2,25-2,40 (brm 3H), 2,83-2,85(2d, 3H), 1,42, 1,44 (2s,9H), 1,34, l,37(2s,9H).

MS: (M+H)⁺= 412.

144B- Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-N-methylamino)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná“šldučěmňa “šepřipraví' podle způsobu popsaného“ v “pří kládu 1K nahrazením t-Butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S j-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-Nmethylamino)-ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyléster (+)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 7,2 mg, 99%).

H NMR (DMSO-d₆): δ 8,25 (d, 1H), 5,70 (m, 1H), 5,10 (m, 2H), 4,50 (m, 1H),

4,40 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 1,85 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 256.

Příklady 145-164

Následující požadované sloučeniny se připraví podle způsobů pospaných v příkladech 141 - 144, kde substituent R'je ekvivaletní k vodíku. Kde substituent R nebo R' nejsou ekvivaletní k vodíku, použije se odpovídající amin přímo bez mezistupňové trimethylsilylace.

Příklad 145

OH

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-N-izopropylamino)ethyl-3vinyl-pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

308* • e · e » e«e

Ίΐ NMR (DMSTI-dé)^ '(m,~ 2Η)ζΤ,40φ_Γ; 2H),‘

3,52-3,68(br, IH), 3,10-3,20(br, IH), 2,82-2,97(br, IH), 2,37-2,47(br, IH), 1,88 (s, 3H), 1,25 (d,6H).

MS: (M+H)⁺=284.

Příklad 146

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-2-N-butylamino)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dó): δ 8,25 (d, IH), 5,70 (m, IH), 5,10 (m, 2H), 4,50 (m, IH),

4,38 (m, IH), 3,60 (m, IH), 2,90 (m, 3H), 2,40 (m, 2H), 1,87 (s, 3H), 1,62 (m, 2H), 1,33 (m, 2H), 0,90 (t, 3H).

MS:(M+H)⁺= 298.

Příklad 147

i

A-»

¥ * · 9· · · ♦ · * · · · · · • « · · · · ¥ c · ¥ · · · • · ··· ¥ ·'¥¥ ¥·>¥· ’· · - *·-· ¥«

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-2-N-benzylamino)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-de): δ 7,56-7,43 (m, 5H), 5,74-5,67 (m, IH), 5,15 - 4,99 (m, 2H), 4,56 (m, IH), 4,27-3,93 (m, 3H), 3,66-3,15 (m, 3H), 2,91-2,88 (m, IH), 2,642,34 (m, 2H), 1,86 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 332, (M+Na)⁺= 354, (M-H)' = 330, (2M-H)' = 661.

Příklad 148

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1'S)-2-(1 -acetamido-2-N-fenethylamino)ethyl-3 vinyl-pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

‘H NMR (DMSO-d₆): δ 8,25 (d, IH), 7,30 (m, 5H), 5,70 (m, IH), 5,10 (m, 2H), 4,50(br, IH), 4,35(br, IH), 3,61 (m, IH), 3,17 (m, 3H), 2,98 (m, 3H), 2,42 (m, IH), 1,88 (s, 3H).

MS:(M+H)⁺ = 346.

Příklad 149

2HCI

310«· ·· • «· »9 ·· ♦ · 9 9 9 9 9 « . 9 9 9 9 9 9

9 9 9*99 _ ·_ 9 '* _ 9 9 9

999 C6OS -99-- ®«

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-N,N-dimethylamino)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dó) δ 8,34 (d, J=9,2Hz, ÍH), 5,74-5,67 (m, 1H), 5,12 (d, J=17,lHz, ÍH), 5,04 (d, J=10,4Hz, ÍH), 4,67-4,62 (m, ÍH), 4,40 (dd, J=7,3,10,4Hz, ÍH), 3,60-3,11 (m, 3H), 2,96-2,83 (m, ÍH), 2,50 (s, 6H), 2,44-2,38 (m, ÍH), 1,92 - 1,84 (m, ÍH), 1,84 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 270, (M+Na)⁺= 292, (M-H)' = 268.

Příklad 150

Dihydrochloridová sůl (+)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-N,N-diethylamino)ethyl-3vinyl-pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dé): δ 8,23 (d, ÍH), 5,70 (m, ÍH), 5,10 (m, 2H), 4,60(br, ÍH), 4,40(br, ÍH), 3,12 (m, 4H), 2,88 (m, ÍH), 2,42 (m, ÍH), 1,85 (s, 3H), 1,22 (t, 3H).

MS:(M+H)⁺= 298.

Příklad 151

2HCI '9

311

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-N,N-dibutylamino)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

‘H NMR (DMSO-d₆): δ 8,24 (d, ÍH), 5,70 (m, ÍH), 5,08 (m, 2H), 4,48-4,62(br, ÍH), 4,28-4,43(lH), 3,05 (m, 4H), 2,77-2,92(br, ÍH), 2,34-2,46(br, 2H), 1,84 (s, 3H), 1,64 (m, 4H), 1,30 (m, 4H), 0,93 (t, 6H).

MS:(M+H)⁺= 354.

Příklad 152

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-2hydroxyethylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dé): δ 8,20 (d, ÍH), 5,70 (m, ÍH), 5,15 (d, ÍH), 5,08 (d, ÍH), 4,50 (brm, ÍH), 4,38 (brm, ÍH), 3,68 (m, ÍH), 3,0 (brm, 2H), 2,90 (m, ÍH), 2,41 (m, ÍH), 1,85 (s,3H).

MS: (M+H)⁺ = 286.

• φ φ

Λ·9·9 - Φ Φ ΦΦ φ ·· φ'· φ φ φ · • ·

Příklad 15 3

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-(N-2-hydroxyethyl-Nethylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylovc kyseliny.

‘H NMR (DMSO-de): δ 8 5,81-5,74 (m, 1H), 5,38 (d, J=17, 1Hz, 1H), 5,22 (d, J=10, 0Hz, 1H), 4,92-4,88 (m, 1H), 4,48 (dd, >7,6, 9,8Hz, 1H), 3,91 (t, J=4,9Hz, 2H), 3,85 (dd, J=5,6,10,0Hz, 1H), 3,63-3,53 (m, 2H), 3,46-3,39 (m, 4H), 3,16 - 3,13 (m, 1H), 2,66-2,61 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,06-2,01 (m, 1H), 1,38 (t, J=7,33, 3H).

MS: (M+H)⁺= 314, (M+Na)⁺ = 336, (M-H)' = 312, (M+Cl)' =348, (2M-H)'= 625.

Příklad 154

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'S)-2-(l-acetamido-2-(N-2-hydroxyethyl-Npropylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5rkarboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-d₆) δ 8,36 (d, J=8,5Hz, 1H), 5,75-5,68 (m, 1H), 5,13 (d, J=17,lHz, 1H), 5,04 (d, J=10,4Hz, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,77 (t, J=4,9Hz, 2H) 3,63-3,59 (m, 1H), 3,50-3,23 (m, 3H), 3,22-3,19 (m, 2H), 3,08 (t, J=7,3Hz, 2H), 2,91-2,87 (m, 1H), 2,44-2,39 (m, 1H), 1,99-1,88 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,75-1,70 (m, 2H), 0,90 (t, J=6,7Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 328, (M+Na)⁺ = 350, (M-H)’ = 326, (M+Cl)' = 362, (2M-H)’ = 653.

Příklad 155

Y

O .OH

Dihydrochlorid (±)-(2R,3 S,5R, 1 'S)-2-( 1 -acetamido-2-(imidazol-1 -yl))ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^]H NMR (MeOD-d₃): δ 9,06 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 5,84-5,76 (m, 1H),

5,39 (d, J=17,lHz, 1H), 5,23 (d, J=10,25Hz, 1H), 4,70 - 4,66 (m, 1H), 4,52 4,43 (m, 2H), 3,92-3,89 (m, 1H), 3,20-3,17 (m, 1H), 2,67-2,62 (m, 1H), 2,11-2,04 (m, 1H), 1,95-1,89 (m, 1H), 1,91 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 293, (M-H)' = 291, (M+35)⁺= 327.

Příklad 156

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-(N,N-di-(2hydroxyethylamino))ethyl-3 - vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M + H)⁺ = 330, (M+Na)⁺ = 352, (M-H)' = 328, (M+Cl)' = 364.

é · ·<

314--·· · '>· · 9 '9 • 99 9 9*9

Příklad 157

Hydrochlorido vá sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-(N-acetyl-Nmethylamino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dé): δ 8,01, 7,95(2d, 1H), 5,68-5,80 (m, 1H), 5,02-5,22 (m, 2H),

4,30 - 4,45 (brm, 2H), 3,26 - 3,21(2d, 1H), 2,82-2,95(brm, 1H), 2,38-2,48 (m, 1H), 1,98 2,02(2s, 3H), 1,79,1,82(2s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 298.

Příklad 158

AcHN.

^CH3ři OH

L_Z^OH 2HCI

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1'S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-2-hydroxyethyl-Nmethylamino))ethyl-3- vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

• * » · ♦·

315·· ·· ^! 11 N MR (DMSO^)T 6^-83'5Ί(3Π^Ξ9;Γ5ΗζΓ1Κ)7^-5^4-5;67“(ϊηΓΐΉ)7*57ΐ2- (ď, >17,lHz, ÍH), 5,04 (d, >10,4 Hz, IH), 4,70 (m, IH), 4;39 (dd, >7,3,10,4Hz, IH), 3,803,75 (m, 3H), 3,61-3,43 (m, 3H), 3,23-3,16 (m, 2H), 2,91-2,82 (m, IH), 2,82 (s, 3H), 2,442,39 (m, IH), 1,92-1,84 (m, IH), 1,84 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 300, (M+Na)⁺= 322, (2M+H-H₂O)⁺= 581.

Příklad 159

AcHN.

CH₃N

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-(N-propyl-Nmethylamino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H .NMR (DMSO-d₆)(široký): δ 8,3(1H), 5,7(1H), 5,12-5,04(2H), 4,6(1H), 4,35(1H), 2,61-2,35(1 IH), 1,9(3H), 1,78-1,63(2H), 1,9(3H).

MS: (M+H)⁺= 298, (M+Ná)⁺= 320, (M-H)' = 296, (M+Cl)-332, (2M-H)-=593.

Příklad 160

AcHN „ PH lí ch₃n

2HCI ··

316

9 • 9 ····

9 '9 9 « 9 9' 9

9 9 9

HydrochŤoridová 8ύ1·(±)=(·2Κ;3875ί^-1-^!·8-)-2-(4-3Θ6ΐ3ηιΐάΘ-2-(Ν-ο^^]ί1οΗεχ^1=Ν^ methylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’Η NMR (DMSO-d₆): δ 8,26 (m, 1H), 5,75-5,65 (m, 1H), 5,08 (d, J=17,lHz, 1H), 5,02 (d, J=10,3Hz, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,43-4,40 (m, 1H), 3,62-3,58 (m, 1H), 3,46-3,16 (m, 2H), 2,89-2,84 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,44-2,39 (m, 1H), 2,07-1,80 (m, 5H), 1,81 (s, 3H),

1,63 (m, 1H), 1,45-1,06 (m,6H).

MS: (M+H)⁺= 338, (M+Na)⁺= 360, (M-H)' = 336, (M+C1)'= 372.

Příklad 161

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-benzyl-Nmethylamino))ethyl-3-vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-de): δ 8,36 (m, 1H), 7,61-7,46 (m, 5H), 5,69-5,64 (m, 1H), 5,07 (d, J=17,lHz, 1H), 4,99 (d, J=10,lHz, 1H), 4,77 (m,.lH), 4,44-4,39 (m, 2H), 4,25 (d, J=12,9,1H), 3,61 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,22 (m, 1H), 2,93-2,85 (m, 1H), 2,73 (s, 3H),

2,44-2,38 (m, 1H), 1,92-1,85 (m, 1H), 1,85 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 346.

Příklad 162 ch₃n

317

• fefe	♦ ··	··	• fe
• · ''·	fefe fe ·	«	• fe ·
• ··	• ·	•	• · fe

• · ·	• ·	•	• 'fe fe
	-.··-© ·«·· -	-- . 'JfeTfe	fe·

AcHN.

.OH

HCI

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-(l-acetamido-2-(N-tenethyl-Nmeíhyíamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxyíové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 8,34 (d, J=8,55Hz, 1H), 7,37-7,26 (m, 5H), 5,765,69 (m, 1H), 5,14 (d, J=17,lHz, 1H), 5,06 (d, J=10,4Hz, 1H), 4,72 (m, 1H), 4,464,42 (m, 1H), 3,83-3,20 (m, 6H), 3,13-2,99 (m, 2H), 2,86 (s, 3H), 2,95-2,83 (m, 1H), 2,46-2,40 (m, 1H), 1,95-1,81 (m, 1H), 1,86 (s, 3H).

MS:(M+H)⁺=360.

Příklad 163

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-(N-naftylmethyl-Nmethylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dé): δ 8,41 (d, J=7,3Hz, 1H), 8,32-7,59 (m, 7H), 5,60 (m, 1H), 5,04 (d, J=17,lHz, 1H), 4,91 (d, J=9,8Hz, 1H), 4,97-4,73 (m, 3H), 4,39 (m, 1H), 3,70-3,13 (m, 3H), 2,90 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,43-2,41 (m, 1H), 2,01-1,74 (m, 1H), 1,87 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺= 395, (M+Na)⁺= 418, (M-H)’ = 394, (M+Cl)’ = 430, (2M-H)' = 789.

3i

Λ·-·..

Příklad 164

Dihydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2<l-acetamido-2-(N-morfolinyl))ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,28 (d, 1H), 5,75-5,78 (m, 1H), 5,15 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,65(brm, 1H), 4,42 (m, 1H), 3,72-3,98(brm, 3H), 3,62 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,382.48 (m, lil), 1,85 (s, 311).

MS:(M+H)⁺= 312.

Příklad 165

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-Z-butylaminoN- oxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Ϊ o

,O^lBu

165A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R) a (±)-(2R,3S,5R,l’ S,3’S)-1-Z-butoxykarbony 12-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-ř-butylamino-N-oxid))ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

319.

	* ··		··	♦ «
• · <	♦ · · ·	•	•	* ·
• ··	• ·	«	•	• ·

• · ·	• ·	•	•	• ·
·· .··	• · · · · · ·		··	··♦

t-Butylester (d )-(2 R, 3 S,5R, 1 ’ S)- l--Z-butoxykarbonyl-2-(4 -acetamido-2-(N=rnethylN-í-butylamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (37 mg, 0,08 mmol) se nechá reagovat s m-chlorperoxybenzoovou kyselinou (20 mg, 0,08 mmol) v CH2CI2 (0, 9 ml) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny, reakční směs se přímo chromatografuj e na sloupci silikagelu gradientem acetonu až aeeton/30% MeOH, čímž se získají požadované sloučeniny - izomer (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R) (výtěžek:, 010 g, 27%) a izomer (±)(2R,3S,5R,1 ’S,3’S)(výtěžek :,011 g, 29%).

165B. Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-Zbutylamino-N-oxid))eťhyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2(N-methyl-N-Z-butylamino-N-oxid))ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 6 mg, 80%).

‘H NMR(CD₃OD): δ 5,72-5,87 (m, 1H), 5,40 (d, 1H), 5,20-5,28 (m, 2H), 4,44 4,53 (dd, 1H), 3,73-3,95 (m, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,08-3,19 (m, 1H), 2,59-2,72 (m, 1H), 2,052,15 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,54 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 328.

320

» *4	4 44		49		4©
• · «	4 4 4 4	4	4	4	4
• 4·	4 ·	4	4	4	4
					9
4 4 4	4 9	'4	4	9	9
• · 4 9	9 44 9 44«		4 9		99

Příklady 166-178

O

3. 6 N HCI

1. MCPBA

2. chromatografická separace

Následující požadované sloučeniny se připraví podle způsobu pospaného v příkladu

165.

Příklad 166

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N- .

izopropylamino-N-oxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*HNMR (MeOD-d₃): δ 5,87-5,74 (m, IH), 5,46-5,40 (m, IH), 5,27-5,23 (m, IH),

5,21-5,18 (m, IH), 4,50 (dd, J=8,l, 9,8Hz, IH), 4,04-3,87 (m, 4H), 3,54 (s, 3H), 3,20-3,14 (m, IH), 2,69-2,60 (m, IH), 2,12-2,01 (m, IH), 2,05 (s, 3H), 1,50 (d, J=6,4Hz, 3H), 1,48 (d, J=6,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 314, (M+Na)⁺= 336, (2M+l)⁺= 627, (2M+Na)⁺=649.

,3.21·.

ΦΦ » « ·« ·· «· » Φ φ • · 9 9

Přiklaď 167’

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS,3'S)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-propylaminoN-oxidethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (MeOD-d₃): δ 5,87-5,74 (m, .lH), 5,46-5,40 (m, 1H), 5,27-5,23 (m, 1H),

5,21-5,18 (m, 1H), 4,50 (dd, J=8,l, 9,8Hz, 1H), 4,04-3,87 (m, 4H), 3,54 (s, 3H), 3,20-3,14 (m, 1H), 2,69-2,60 (m, 1H), 2,12-2,01 (m, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,50 (d, J=6,4Hz, 3H), 1,48 (d, J=6,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 314, (M+H-H₂0)· = 295.

Příklad 168

AcHN. >

d ch₃

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-ethylaminoN-oxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (MeOD-ds): δ 5,82-5,75 (m, 1H), 5,44 (d, J=17,lHz, 1H), 5,26 (d, J=10,4Hz, 1H), 5,14-5,11 (m, 1H), 4,48 - 4,45 (m, 1H), 4,9 (d, J=4,9Hz, 2H), 3,87 (dd, J=4,9,10,4Hz, 1H), 3,76(q, J=6,7Hz, 2H), 3,54 (s, 3H), 3,17-3,09 (m, 1H), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,06 (s, 3H), 2,09-2,03 (m, 1H), 1,45 (t, J=7,3Hz, 3H).

322 ··

I « ·· • ·· • · ··· ···· *· ·· • · 4 9 • 9 · · • · 4 4 · · · • 4 44

MS: (MH1)' - 300, (M.-Náf - 322, (Μ-+Ή-Η2Θ)^±=282.

Příklad 169

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-(N,N-dimethylamino-Noxid)ethyl-3 -vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

‘H NMR (DMSO-d_ó): δ 8,58 (d, ÍH), 5,67-5,78 (m, ÍH), 5,20 (d, ÍH), 5,08 (d, ÍH), 4,62 - 4,78 (brm, ÍH), 4,25-4,42 (brm, ÍH), 4,06 (d, ÍH), 3,85-3,95 (brm, ÍH), 3,883,98 (brm, ÍH), 3,35-3,50 (br s, 6H), 2,36-2,48 (m, lH), 1,92 (m, ÍH), 1,85 (s, 3H).

MS:(M+H)⁺= 286.

Příklad 170

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-benzylaminoN-oxid))ethyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

φφ φ · • ·· ·· · · β e

323’ • · ··· ···· φφ ·· • · · φ φ φφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ ¹11 Ν Μ R (iMěOD-d;,): δ 7,60-7,47 (nu 5 Π), 5_Γ75=5^5-(ηιΗΉ)^9-(4,- >6,35 Hz, III),' 5,21 (d, .1 8,8 Hz, 1H), 5, Í8-5,11 (m, 111)? 5,00 4,70 (íň, 2H)r4r35-4727-(m_r 1H),

4,00-3,94 (m, 2H), 3,86-3,79 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,14-3,05 (m, 1H), 2,77-2,50 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,10-2,94 (m, 1H).

MS: (M+H)⁺= 362, (M+Na)⁺= 385, (M-H)' = 360, (M+35)' = 396.'

Příklad 171

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'S,3’S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-methyl-N-Z-butylaminoN-oxid)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

‘H NMR (CD₃OD): δ 5,80 (m, 1H), 5,44 (d, 1H), 5,27 (d, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,34 4,44 (dd, 1H), 3,83-3,94 (m, 3H), 3,38 (s, 3H), 3,02-3,18 (m, 1H), 2,58-2,72 (m, 1H), 2,08 (s,3H), 1,97-2,08 (m, 1H), 1,55 (s,9H).

MS:(M'II)‘ 328.

Příklad 172

.OH

O

HCI

. 324 • · ·

Hydrochloriďová'’sůI^_(±)-(2R73S75R7’S73-S-)-2-(-l-aeetamido-2-(N=methyLN- ------- —......

izopropyIarnmo-N-dxid))ěthyl-3-vinýl-pýřfolÍdte-5-karboxylové kyseliny.- * = -- ----‘Η NMR (MeOD-d₃): δ 5,86-5,74 (m, 1H), 5,53-5,47 (m, 1H)‘, 5,29-5,25 (m, 1H),

5,22-5,19 (m, 1H), 4,50 (dd, J=8,l, 9,5Hz, 1H), 4,13-4,04 (m, 2H), 3,96 (dd, J=4,l, . 10,5Hz, 1H), 3,87-3,82 (m, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,23-3,17 (m, 1H), 2,70-2,61 (m, 1H), 2,11 (s, 3H), 2,08-2,00 (m, 1 Η), 1,50 (ď, J=6,4Hz, 3H), 1,49 (d, >6,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 314, (M+Na)⁺ = 336, (2M+l)⁺= 627, (2M+Na)⁺=649.

Příklad 173

AcHN.

₀<^Ν,ΌΗ₃ HCI

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l 'S,3'R)-2-(l -acetamido-2-(N-methyl-N-propylaminoN-oxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'HNMR (MeOD-d₃): δ 5,82-5,75 (m, 1H), 5,45 (d, J=17,lHz, 1H), 5,26 (d, J=10,4Hz, 1H), 5,07-5,13 (m, 1H), 4,48 -4,42 (m, 1H), 3,98 (d, J=5,5Hz, 2H), 3,86 (dd, J=4,3, 9,8Hz, 1H), 3,67-3,64 (m, 2H), 3,46 (s, 3H), 3,16-3,01 (m, 1H), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,09-2,02 (m, 1H), 2,06 (s, 3H), 1,92-1,86 (m, 2H), 1,04 (t, J=7,3Hz, 3H).

MS: (M + H)⁺ = 314, (M+H-H₂O)' = 295.

9

PnklaďTO *'

O

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-ethylaminoN-oxid))ethyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

*H NMR (MeOD-da): δ 5,82-5,75 (m, 1H), 5,45 (d, >17, 1Hz, 1H), 5,26 (d, >10,4Hz, 1H), 5,13-5,10 (m, 1H), 4,48 - 4,44 (m, 1H), 4,02-3,94 (m, 2H), 3,89 (dd, >4,3, 9,8Hz, 1H), 3,82 (q, >7,3Hž, 2H), 3,46 (s, 3H), 3,18-3,10 (m, 1H), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,09 (s, 3H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,46 (t, >7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 300, (M+Na)⁺= 322, (M+H-H₂O)⁺= 282.

Příklad 175

.OH

O

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-(N-methyl-N-benzylaminoN-oxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(MeOD-d3) δ 7,60-7,47 (m, 5H), 5,75-5,65 (m, 1H), 5,39 (d, >6,35Hz, 1H), 5,21 (d, >8,8Hz, 1H), 5,18-5,11 (m, 1H), 5,00 - 4,70 (m, 2H), 4,354,27 (m, 1H), 4,00-3,94 (m, 2H), 3,86-3,79 (m, 1H), 3,40 (s, 3H), 3,14-3,05 (tn, 1H), 2,77-2,50 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,10-2,94 (m, 1H).

MS: (Μ Ί I)’ = ·3’627(ΜΤΝα/3857tM^H)'-=-360r(-M+35)·-=396.

326

• ·

Příklad 176

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-(N,N-diethylamino-Noxid))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (MeOD-d₃): δ 5,84-5,78 (m, IH), 5,45 (d, J=16,85Hz, IH), 5,26 (d, J=10,0Hz, IH), 5,09-5,05 (m, IH), 4,45 - 4,42 (m, ÍH), 3,96-3,86 (m, 3H), 3,76(q, J=6,6Hz, 2H), 3,70(q, J=7,3Hz, 2H), 3,15-3,11 (m, IH), 2,68-2,62 (m, IH), 2,08-2,02 (m, IH), 2,08 (s, 3H), 1,44-1,38 (m, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 314, (M+Na)⁺= 336, (M+2Na)⁺= 358.

Příklad 177

O

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-pyrrolidinyl-Noxid))ethyl-3-vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

•V·

....._ . . ______________327

4 α

«

4

------- ^!h NMR*lDMSO-dt)_:-3-8774-(d7TH-)-5365-§_y80 -(m, 1-H>5,284d,JH),-5.,l_Q (d,_

I I I), 4,82 (ιη^ΎΗ), 4,40-^4,50 (dd,'TH)<4;30(d7 ΗΙ)? 3;-60-4;^

IH), 2,38-2,48 (m, IH), 2,05-2,20(brm, 5H), 1,88-1,98 (m, IH), 1,87 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 312.

Příklad 178

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-morfolinyl-N-oxid)ethyl-3vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-de): δ 8,65 (d, IH), 5,66-5,80 (m, IH), 5,22 (d, IH), 5,09 (d, IH), 4,78(br s, IH), 4,32 - 4,42 (dd, IH), 4,10 - 4,17 (brm, 2H), 3,50 - 4,02 (brm, 9H), 2,92-3,04(brm, IH), 2,37-2,48 (m, IH), 1,88-1,96 (m, IH), 1,87 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺=328.

Příklad 179

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R, l'S,3'S)-2-( 1 -acetamido-2-(N-ethyl-N-methylaminoN-oxid))ethyl-3-(cz's-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

328

179A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-(cA-propen-l -yl)pyrrolidin- 5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1231 nahrazením ethyltrifenylfosfoniumbromidu za methyltrifenylfosfoniumbromid (výtěžek: 350 mg, 77%).

'H NMR (CDCl₃)(rotaměry): δ 5,55-5,43 (m, 2H), 4,13 - 4,04 (m, 2H), 3,14 - 3,11 (m, 2H), 2,76-2,50 (m, 3H), 1,75-1,70 (m, 1H), 1,64 (d, 3H), 1,48-1,43 (m, 18H).

MS: (M+H)⁺= 354, (M+Na)⁺= 376, (2M+Na)⁺=729.

179B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-methansulfonyloxy-3azido)ethyl-3-(cřs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/butoxykarbonyl-2-(l -acetamido)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 1,08 g, 84%).

’H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 5,53-5,33 (m, 2H), 5,05 - 4,93 (m, 1H), 4,203,90 (m, 2H), 3,76-3,62 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 2,59-2,49 (m, 1H), 1,64 - 1,55 (m, 5H), 1,43-1,36 (m, 18H).

329

• »9	0 0 0	0 0 · 0

• 0 ·	• *	0 0 0 0

• · ·	• 0	0 0 0 0
0 0 0 · ·	0 0 0 0 0 0 0	0 0 00

MS: (Μ»11) * = 473, (M i-Naý = 497, (2M-i Na)' - 97T.

HN

,0’Bu

179G. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-(cA-propen-1 yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123K nahrazením t-butylesteru (2R,3S,5R,l’S)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-methansulfonyloxy-3azido)ethyl-3-(c/.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (2R,3 S,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -methansulfonyloxy-3-azido)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (surový výtěžek: 564 mg, 71%).

⁴Η NMR (DMSO-d6)(rotamery): δ 5,45;5,30 (m, 2H), 4,15-3,99 (m, 1H), 3,30. 3,08 (m, 1H), 3,07-2,84 (m, 1H), 2,68-2,51 (m, 1H), 2,13-1,85 (m, 1H), 1,801,05 (m, 3H),

1,57 (d, J=5,4Hz, 3H), 1,41-1,35 (m, 18H).

MS: (M+H)⁺= 352, (M+23)⁺= 375, (2M+H)⁺= 705, (2M+23)⁺= 727.

AcN

179D. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(N-acetylaziridinyl)-3-(cžspropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123L nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1’S)-1-Z. .. 330

’Η NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 5,74-5,34 (m, 2H), 4,17 (dd, J=2,4, 6,35Hz,

1H), 3,41 (dd, J=l,95, 6,35Hz, 1H), 3,14-2,99 (m, 1H), 2,73-2,58 (m, 2H), 2,40 (d, J=6,35Hz, 1H), 2,17-2,12 (m, 1H), 2,05-2,00 (m, 3H), 1,66-1,55 (m, 1H), 1,56 (d,

J=6,8Hz, 3H), 1,41-1,31 (m, 18H).

MS: (M+H)⁺ = 395, (M+Na)⁺= 417, (M+H+Na)⁺ = 418.

179E. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1'S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-N-ethyl-Nmethylamino)ethyl(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 150 nahrazením N-ethyl-N-methyl-aminu za diethylamin (výtěžek: 30 mg, 87%).

MS: (M+H)⁺ = 454, (M+Na)⁺ = 476, (M-H)’ = 452, (M+35)' = 488.

o* CH₃

Bu

179F. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’S)-l-Zbutoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(N-ethyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3-(cA-propen1-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

..... 331 ·· ·· • · · 9 * * · *

Tožadovaná -sioučenina^se- připraví podle- -způsobu-popsaného- ~v—příkladu _J .65A _ _ nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S ,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-(Nethyl-N-methylamino))-ethyl-3-(cz7-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-N-methyl-N-Zbutylamino)-ethyl-3-(c/.s’-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 15,2 mg, 51%).

179G. Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-ethyl-Nmethylamiňo-N-oxid))ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidih-5-karboxylové kyseliny..

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,Γ S,3’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2(N-methyl-N-ethyl-N-oxid))ethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny zá t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-( l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 8,7 mg, 29%).

’H NMR (MeOD-da): δ 5,75-5,69 (m, 'lH), 5,37-5,30 (m, ÍH), 5,07-5,04 (m, ÍH), 4,49. (dd, >7,8, 10,2Hz, 1H), 4,05-3,74 (m, 4H), 3,61-3,32 (m, ÍH), 3,55 (s, 3H), 2,692,60 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,95-1,84 (m, ÍH),' 1,75 (dd, >2,0, 7,1 Hz, 3H), 1,44 (t, >7,1 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 314, (M+35)⁺ = 348.

Příklady 179-184

AcHN. Λ- /^0H . hS Í

R'RN ^υ

Následující požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu

179.

Příklad 180

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3’S)-2-(l-acetamido-2-(N-ethyl-N-methylaminoN-oxid))ethyl- 3 -(tís-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^JH NMR (MeOD-ds): δ 5,75-5,69 (m, IH), 5,38-5,30 (m, IH), 5,02-4,98 (m, IH),

4,47 (dd, J=7,8,9,8Hz, IH), 4,02-3,77 (m, 4H), 3,56-3,39 (m, IH), 3,47 (s, 3H), 2,69-2,59 (m, IH), 2,07 (s, 3H), 1,95-1,84 (m, IH), 1,76 (dd, J=l,7, 7,1 Hz, 3H), 1,46 (t, J=7, 1Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 314, (M+35)⁺ = 348.

Příklad 1Έ1

O ·· ··

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'R)-2-(l-acetamido-2-(N-izopropyl-Nmethylamino-N-oxid))ethyl-3-(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Ή NMR (MeOD-d₃): δ 5,76-5,66 (m, 1H), 5,39-5,31 (m, 1H), 5,17-5,11 (m, 1H),

4,51 (dd, >7,5,10,2Hz, 1H), 4,07-3,76 (m, 4H), 3,55 (s, 3H), 3,52-3,39 (m, 1H), 2,692,60 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 2,08-1,84 (m, 1H), 1,75 (dd, >1,7, 7,1 Hz, 3H), 1,50 (d, >6, 1Hz, 3H), 1,48 (d, >6,4Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 314, (M+35)⁺= 348.

Příklad 182

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S,3'S)-2-(l-acetamido-2-(N-izopropyl-Nmethylamino-N-oxid))ethyl-3-(cz5-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (MeOD-d₃): δ 5,76-5,68 (m, 1H), 5,39-5,31 (m, 1H), 5,10-5,05 (m, 1H),

4,49 (dd, 8Hz, 1H), 4,12-3,84 (m, 4H), 3,55-3,44 (m, 1H), 3,41 (s, 3H), 2,69-2,60 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,07-1,84 (m, 1H), 1,76 (dd, >1,7, 6,8Hz, 3H), 1,51 (d, >2,4Hz, 3H), 1,49 (d, >2,4Hz, 3H).

I .334

MS: (M+H)⁺= 314, (M+35)⁺= 348.

Příklad 183

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’S,3’S)-2-(l-acetamido-2-(N-izobutyl-Nmethylamino-N-oxid))ethy]-3-(cz',s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (MeOD-da): δ 5,75-5,69 (m, 1H), 5,38-5,31 (m, 1H), 5,18-5,12 (m, 1H),

4,53 (dd, J=7,5, 9,8Hz, 1H), 4,25-3,42 (m, 6H), 3,65 (s, 3H), 2,68-2,58 (m, 1H), 2,44-2,36 (m, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,94-1,87 (m, 1H), 1,76 (d, J=2,7Hz, 3H), 1,14 (d, J=6,8Hz, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 342, (M+Na)⁺= 364, (M-H)' = 340.

Příklad 184

.OH

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’R)-2-(l-acetamido-2-(N-izobutyl-Nmethylamino-N- oxid))ethyl-3-(ez.s-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

• · ·· » « ··

333 ^_,Ή NMR(MeOD~-d₃)T~6^_5’,75-5j697(ih7 1Ή)Γ573’8Ζ573>(ϊη7ΤΉ)~5706-570Ζ7δϊ,^_1Ή),

4,48 (dd, J=7,5,9,8Hz, 1H), 4,08-3,85 (m, 3H), 3,70-3,57 (m, 2H), 3,52 (s, 3H), 3,48-3,41 (m, 1H), 2,70-2,60 (m, 1H), 2,40-2,36 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 1,951,84 (m, 1H), 1,75 (dd, J=l,7, 7,1 Hz, 3H), 1,14 (d, J=6,8Hz, 6H).

MS: (M+H)⁺= 342, (M+Na)⁺= 364, (M-H)’ = 340.

Příklad 185

Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-(N-izopropyl-Nhydroxyamino))ethyl-3-vinyl- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

185A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(Nizopropyl-N-hydroxyamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-izopropylamino)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (21 mg, 0,048 mmol) se rozpustí v 0,95 ml acetonu, pak se trituruje 0,14 ml roztoku dimethyldioxiranu (0,1 M) v acetonu při teplotě -45°C po dobu 0,5 hodiny. Reakce se zastaví koncentrací směsi ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií ha sloupci silikagelu použitím 100% dichlormethanu až 90% dichlormethan/methanolu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 5,3 mg, 24%) a regenerovaná výchozí látka (výtěžek 12 mg, 57%).

'H NMR (MeOD-d₃): δ 5,95-5,89 (m, 1H), 5,08-4,94 (m, 2H), 4,75-4,68 (m, 1H), 4,13-3,83 (m, 2H), 2,85-2,47 (m, 4H), 1,96 (s, 3H), 1,82-1,76 (m, 1H), 1,52-1,44 (m, 18H),

1,45-1,29 (m, 1H), 1,07-1,04 (m, 6H).

-336 • · · · • · · · • · · 9 • _ ·_· · • O ii

MS: (M+H)⁺ = 456, (M+Na)⁺ = 478, (M-H)' = 454, (M+35)' = 490.

185B. Hydrochloridová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-(N-izopropyl-N-hydro amino))ethyl- 3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1 K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-ř-butqxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(Nizopropyl-N-hydroxyamino))ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karbqxylqvé kyseliny (výtěžek: 3,0 mg, 87%).

’H NMR (MeOD-d₃): δ 5,83-5,71 (m, IH), 5,40 (d, J=17,3Hz, IH), 5,24 (d, J=10,2 Hz, IH), 4,48 (dd, J=7,8, 10,2Hz, IH), 3,88-3.59 (m, 4H), 3,17-3,10,(m, IH), 2,67-2,58 (m, IH), 2,10-1,99 (m, IH), 2,09 (s, 3H), 1,33-1,17 (m, IH), 1,38 (d, J=6,4 Hz, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 300, (M-H)' = 298, (2M-H)' = 597.

Příklad 186

TFA

,337 ·· '· '·

rifiuoroctová sůl (í)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-oxo-2-fenyl)ethyl-3-(cz5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2oxo-2-fenyl)ethyl-3-(cz.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz.$'propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,9 mg, 100%).

. ’H NMR (DMSO-de): δ 8,62 (d, J= 9,8Hz, ÍH), 7,93 (m, 2H), 7,68 (m, ÍH), 7,55 (t, J= 7,9Hz, 2H), 5,61 (m, ÍH), 5,48 (m, ÍH), 5,19 (m, ÍH), 4,50 (m, ÍH), 3,98 (t, J= 9,8 Hz, ÍH), 3,30 (m, ÍH), 2,38 (m, ÍH), 1,73 (m, ÍH), 1,71 (s, 3H), 1,59 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 331, (M+Na)⁺ = 353, (M-H)' = 329.

Příklad 187

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-( 1 -acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.vpropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

I ,O*Bu

187A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S, 5 R, 1 ’ R,2 ’ R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2bydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2k,3S,5k, rR,2'S)-i-z-butoxykarbonyi-2-fi-acetamido-2-hydroxy)butyÍ-3-(cz.spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

338

187B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-methoxy-4vinyl)butyl-3-(cz.s- propen-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pynolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czspropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 188

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

188A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy-4-vinyl)butyl-3-(czó-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

339 ·· *· re· i » · · « > · · 1 ► · · «

Fozadovana^Yloucenina se připraví podle způsobu popsaného v prikiaaů'847\r nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S).-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(č'z.s'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0044 g, 22%).

MS: (M+IÍ) = 481, (M-H)’ = 479.

TFA

188B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-methoxy-4vinyl)butyl-3-(m- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5 R, Γ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3 -(c ispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0031 g, 100%).

Ή NMR (DMSO-cU): δ 7,93 (d, J=9,2Hz, 1H), 5,81 (m, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,1-4,9 (m, 2H)> 4,29(m 1H), 4,03 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,26 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,18 (kvintet, J=8,5Hz, 1H), 2,40 (dt, >12,7, 7,3Hz, IH), 2,32 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 2,02 (m, IH), 1,85 (s, 3H), 1,68 (m, IH), 1,64 (m, IH), 1,61 (dd, >6,7, 1,8Hz, 3H), 1,551,40 (m,2H).

MS: (M+H)⁺= 325, (M+Na)⁺= 347, (M-H)’ = 323.

-340 • ·· ·· · · • . *»· . e .

• · ·

------9:9 9 -9:9 ·· • · • · '·- · »

9--9999-- ί ·· • · · V • · · · • · 9 9 • 9 9 9

9» ββ

Prikiad~T89

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3-(czTpropen-l-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O^lBu

Y

O

189A. t-Butylester (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-1 -methansulfonyloxy-3 azido)ethyl-3-/-butyldifénylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123J nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylóvé kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)2-oxiranyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 9,0 g, 90%).

Ή NMR (DMSO-de) (rotamery): δ 7,62-7,58 (m, 4H), 7,49-7,38(m 6H), 4,97-4,79 (m, 1H), 4,19 - 4,02 (m, 2H), 3,79-3,48 (m, 2H), 3,15 a 3,13(2s, 3H), 2,49-2,39 (m, 2H), 1,98-1,74 (m, 1H), 1,43-1,25 (m, 18H), 1,02 a l,00(2s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 703, (M+Na)⁺ = 725.

TBDPSO—\

189B. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-/butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

341

-požaďovaná-slOuěenina-se-připraví-podle-způsobu-pópsaného—v—příkladu—1-23Knahrazením t-butylesteru (±)-(2Ř,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l- methansulfonyloxy- 3 -azido)ethyl - 3 -Z-butyl di feny 1 sily 1 oxymcthy 1 -py rroli d i n-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-methansulfonyloxy3-azido)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,9 g, 79%).

*H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 7,60-7,56 (m, 4H), 7,49-7,39(m 6H), 4,11 4,05 (m, IH), 3,67-3,48 (m, 2H), 3,42-3,30 (m, IH), 2,49-2,39 (m, IH), 2,25 - 1,61 (m, 5H), 1,40,1,35,1,33, a l,27(4s, 18H), 0,99 a 0,98(2s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 581, (M+Na)⁺= 603.

189C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-N-acetylaziridinyl-3-řbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123L nahrazením t-butylesteru (±)-(2Ř,3 Ř,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-aziridiny 1 -3-Z-butyl difenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyI-2-aziridinyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5-karboxy lové kyseliny (výtěžek: 3,1 g, 96%).

’Η NMR (DMSO-dó)(rotamery): δ 7,60-7,57 (m, 4H), 7,49-7,39(m 6H), 4,18-4,11 (m, IH), 3,71-3,51 (m, 3H), 2,76-2,68 (m, IH), 2,58-2,45 (m, IH), 2,46 a 2,39 (2d, >6,1,

6,1 Hz, IH), 2,40 a 2,47 (2m, IH), 2,08 a 2,05 (2d, >3,1, 3,1 Hz, IH), 2,02 a 1,99 (2s, 3H), 1,94-1,79 (m, IH), 1,41, 1,36, 1,35 a 1,29 (4s, 18H), 0,99 a 0,98 (2s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 623, (M+Na)⁺ = 645.

.342

TBDPSO-

,0 Bu

189D. t-Butylester (+)-(2R,3R,5R,l'R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2acetoxy)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'S)-l-í-butoxykarbonyl-2-N-acetylaziridinyl-3-Zbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,75g, 4,40 mmol) se nechá reagovat s octanem draselným (2,49 g, 25,37 mmol) a octovou kyselinou (1,45 ml,

25,37 mmol) v DMSO (45 ml) při teplotě 100°C po dobu 16 hodin, reakce se zháší 1 N NaHCO₃ (100 ml) a zředí ethylacetátem (300 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 100% dichlormethanu až 50% dichlormethan/ethylacetátu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 2,45g, 81%).

MS: (M+H)⁺= 683, (M+Na)⁺= 705, (M-H)' = 681, (M+Cl)' = 717.

TBDPSO—

OBu

189E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-acetoxy)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (2,45 g, 3,58 mmol) se nechá reagovat s uhličitanem draselným (1,48 g, 10,73 mmol) v methanolu (18 ml) a THF (18ml) při teplotě 25°C po dobu 45 minut, reakce se zháší vodou (100 ml) a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci •t

silikagelu použitímTSS^^dicliionrietíiaiVeíhylaeetáíu-až—l-O0%-eíhylaeetát-u—čímž—se-z-íská343 požadovaná sloučenina (výtěžek: 2,05 g, 90%).

MS: (M+H)⁺ = 641, (M+Na)⁺= 663, (2M+Na+H)⁺ = 1304, (M-H)’ = 639, (M+Cl)' = 675.

189F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,rR)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)ethyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pynOlidin-5 -karboxylové kyseliny za tbutyl-ester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)ethyl-3(cw-propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 9,49 (d, J=16,3, 1H), 8,33 a 8,29 (2d, J=8,8 a 8,8 Hz, 1H), 7,58-7,38 (m, 10H), 4,94 a 4,84 (2dd, J=4,4, 8,8Hz a 4,4, 8,8Hz, 1H), 4,263,37 (m, 4H), 2,47-2,30 (m, 1H), 1,97-1,83 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 1,42-1,18 (m, 18H),

1,42-1,18 (m, 1 Η), 1,00-0,97 (m, 9H).

MS: (M+H)⁺= 639, (M-H)’ = 637.

TBDPSO^

AcHN-

O‘Bu lí o

T89G. t-Butylěšter(+)-(2R5R75R7l'S)=l=í=butexykarbonyl-2-(4-aeetamido-l———---vinyl)methyl-3 -/-butyldiDhenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 118A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2formyl)ethyl-3-ř-butyidifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-butoxykarbonyl 2-(l-acetanudo-2-formyl)ethyI-3-(cz.spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^fH NMR (DMSO-dóXrotamery): δ 7,99-7,74 (m, 1H), 7,59-7,39 (m, 10H), 5,805,68 (m, 1H), 5,21-5,01 (m, 3H), 3,97-3,31 (m, 1H), 3,78-3,74 (m, 1H), 3,60-3,46 (m, 2H), 2,53-2,37 (m, 1H), 2,09-1,72 (m, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,42-1,23 (m, 19H), 1,00-0,99 (m, 9H).

TBDPSO—\

189H. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'R,2'R) a (±)-(2R,3R,5R,l'R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 20A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2vinyl)ethyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R)-l-benzyl-2-vinyl-3-ř-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S) izomer (výtěžek: 311mg, 24%) (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R) izomer(výtěžek: 700 mg, 54%).

(±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S) *H NMR (DMSO-cLXrotamery): δ 7,62-7,39 (m, 11H),

4,56 a 4,51 (d, J=4,8,1H), 4,46 - 4,39 (m, 2H), 3,97-3,82 (m, 1H), 3,74 - 3,47 (m, 3H), <· ·· ·» · 9 9··

9 9 9 · · · · · ·

345

O 9 ·3;28-3;2r(m,-2H)7 2;89-2;64-(TO7--l-H)r2r5-l--2^45-(-m-l-H-)-2-i05-U8-(-m,-l-H),-l,8-7M.,8.6_(m,_ 3H), 1,43-1,23 (m, 19H), 0,99-0,98 (m, 9H).

(±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R) 'HNMR (DMSO-d₆)(rotamery): δ 7,63-7,40 (m, 11H), 4,56 - 4,54 (d, J=4,8,1H), 4,47 - 4,33 (m, 2H), 3,94-3,80 (m, 1H), 3,85-3,80 (m, 1H), 3,763,68 (m, 1H), 3,60-3,51 (m, 1H), 3,44-3,35 (m, 1H), 3,30-3,21 (m, 1H), 2,78-2,62 (m, 1H),

2,46-2,31 (m, 1H), 2,07-l,98(m 1H), 1,83 (s, 3H), 1,39-1,29 (m, 19H), 1,00-0,99 (m, 9H).

TBDPSO—.

1891 t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -(2,2dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymelhylpyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2,3dihydroxy)propyÍ-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny sc nechá reagovat' s 2,2-dimethoxypropanem (1,1 ml, 9,09, mmol) a p-toluensulfonovou kyselinou (4,3 mg, 0,023 mmol) v tetrahydrofuranu (4,5 ml) při teplotě 25°C po dobu 45 minut, reakce se zháší triethylaminem (3 ml). V míchání se pokračuje po dalších 10 minut. Reakce se pak zředí 10% NaHCOa (15 ml) a extrahuje ethylacetátem (45 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSOzt, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu použitím 100% dichlormethanu až 94% dichlormethan/methanolu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 194 mg, 91%).

• ·

346

HO

AcH

189J- t-Butylester (±)-(2R,34,5R, 1 ’R,2'S)-1 -í-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 (2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123G nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-1(2,2-dimethy.l-1,3 -dioxolan-4-yl))methyl-3 -/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-Zbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. Výsledný zbytek se čistí chromatografií na sloupci, silikagelu použitím 100% dichlormethanu až 94% dichlormethan/methanolu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 194 mg, 91%).

H

O=d

O

189J. t-Butylester (±)-(2R,3Ř,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -(2,2dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-1 (2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-í-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3hydroxymethyl-pyrřolidin-5-karboxylové kyseliny.

• 9 9

--------------- 347 «Ο ·«··

189Κ. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l-(2,2dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-(m-propen-1 -yÍ)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 35A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’ R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-1(2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 11,5 mg, 59%).

’H NMR (CDC1₃): δ 6,62 (d, 1H), 5,56 (m, 1H), 5,40 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,16 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 3,54(m 1H), 3,14 (m, 1H), 2,54(m 1H), 2,04 (s, 3H), l,71(m 1H), 1,60 (dd, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,40 (s, 3H), 1,32 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺=483.

189L. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3(cis- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 • · • · · · · ·

348 «β (2^=dime1hyl=Í73-dtoxol^>4'-yl))m^3^~3^žs^rOpen4^1)pyiwlidin^Jau4x»QdQjíé._____ kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,84 (d, J=9Hz, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,17 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,18 (m, 1H),

2,43 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,55 (dd, 3H).

MS: (M+H)⁺=287.

Příklad 190

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2, 3-dihydroxy) propyl-3-(c«propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

TBDPSO—

190A, t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2'R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1-(2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl)methyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1891 nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rR,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2,3dihydroxy)propyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pynoIidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3R,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamído-2,3-dihydroxy)propyl-3-t-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

• 9

349.

190B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-1 -(2,2dimethyl-1, 3-dioxolan-4-yl))methyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123G nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R,rR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l(2,2-dimethyl-l,3-dioxolan4-yl))methyl-3-X-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R.5R.l ’S)-l-X-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3X-butyldifenylsilyloxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

H

190C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2'R)-1 -X-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-1 -(2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-formyl-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-1 -X-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-1 (2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-X-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

_ . 350 • o-

190D. t-Butylešter (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2'R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-1 -(2,2dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-(cw_;propen-1 -yl))-pyrroíidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 35A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-1 (2,2-dimethyl-l ,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 42 mg, 61%).

‘H NMR(CDC1₃): δ 7,88 (d, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,34,(m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,96 (m, 2H), 3,83 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 2,53 (m, 1H), 1,98 (s, 3H), 1,66 (dd, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,41 (s, 3H), 1,33 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ -- 483.

190E. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-ácetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3(cis- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S, 5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l(2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl))methyl-3-(cA-propen-l-yl))pyrrolidin-5-karboxylové .- - -..., - .......- -,. 351 ... - ··· ··.... . ······· ··.....

·* - ά» »......

kyseliny za t-buíyiester (±)44R3~St5R4—R024S-j-l-ř-butoxy-karbony^-^l-acetamidQrA. hydroxy)buty 1-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dó): δ 7,98 (d, >9Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 3,76 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,32 (m, 1H),

3,18 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,60 (dd, 3H).

MS: (M+H)⁺= 287.

Příklad 193

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cz\-propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

193A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2ethoxy)pentyl-3 (cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 88A nahrazením ethyljodidu za methyljodid (výtěžek: 3,6 mg, 28%).

MS: (M+H)⁺ = 483, (M+Na)⁺ = 505, (M-H)' = 481.

352.

.OH

193Β. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2ethoxy)pentyl-3-(ó'z.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -ačetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,2 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 7,92 (d, J= 9,2Hz, IH), 5,47 (m, IH), 5,25 (m, IH), 4,25 (m, 2H), 3,70 (m, IH), 3,52 (m, IH), 3,33 (m, 2H), 3,18 (m, IH), 2,39 (m, IH), 1,85 (s, 3H), 1,66 (m, IH), 1,61 (dd, J= 6,7, 1,8Hz, 3H), 1,56 (m, IH), 1,37 (m, IH), 1,28 (m, 2H), 1,13 (ni, 3H), 0,86 (t, J= 7,3Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 327, (M+Na)⁺= 349, (M-H)’ = 325.

Příklad 194

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cA-propen1-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Bu

T94A. t-ButylešterXdO-CZR^vSR^R^R^l^MmtoxykarbonyTŽ-ÍT-aeetajnido-Z-i·—--— ethoxy)pentyl-3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karbóxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 88A nahrazením ethyljodidu za methyljodid.

194B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R_i3S,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamidó-2-ethoxy)pentyl-3-(cApropen-l-ylj-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-l-Z-bůtoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2ethoxy)pentyl-3-(cř'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -aeetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 195

TFA

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

-Požadovaná-slouěenina—se-připrav-í—podle-zpásobu-popsaného_y_pnkladu_4.1_íl· nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cčs·propenyl-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 19,9 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,80 (d, J= 8,8Hz, ÍH), 5,76 (m, ÍH), 5,23 (d, J= 17,1Hz, ÍH), 5,15 (m, ÍH), 4,31 (m, ÍH), 4,03 (m, 1H), 3,62 (m, ÍH), 3,53 (m, 2H), 2,79 (m, ÍH),

2,42 (m, ÍH), 1,90 (s, 3H), 1,85 (m, ÍH).

MS: (M+H)⁺ = 243, (M+Na)⁺ = 265, (M-H)’ = 241.

- J—

354

Příklad 196 ¹

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3dimethylfosfonyl)propyl-3-(cŽ5-propen-l-yl)-pyrrolidih-5-karboxylové kyseliny.

_zO‘Bu lí o

196A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,2’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’R)-1-Zbutoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-dimethylfosfonyl)propyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (78 mg, 0,19 mmol) v THF(5 ml) se přidá po kapkách do roztoku dimethylfosfonylmethylu lithného (3M)(0,32 ml, 0,95 mmol) v THF(20 ml) při teplotě -78°C a nechá reagovat po dobu 40 minut, reakce šě^zbasí vbdoů~(TO~ml)~a^tasyceným-vodným-ebloridem-amonným-(-l-0-ml-),-poté_se_ provede extrakce pomocí dichlormethanu (2 x 50 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5-10% methanolu v dichlormethanu, čímž se získají požadované sloučeniny - izomer (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) (výtěžek: 27 mg, 27%) a izomer (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) (výtěžek: 5,5 mg, 6%).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R) = *HNMR (CDC1₃): δ 5, 98 (m, IH), 5,58 (m, IH), 5,35 (m, IH), 4,94 (m, IH), 4,14 (m, 2H), 3,74 (m, 8H), 3,06 (m, IH), 2,64 (m, IH), 2,03 (s, 3H), 1,95 (m, IH), 1,83 (m, 3H), 1,53 (s, 9H), 1,46 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 535, (M-H)' = 533.

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H)⁺= 535, (M-H)'= 533.

och₃

196B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3dimethylfosfonyl)propyl-3-(cžs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-dimethylfosfonyl)propyl-3 -(ds-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3 mg, 96%).

-356 >· »♦ • · · » • · · · • · · · • · · · ·· ··

-------------^-_ΝΜΚ-~φ_Μ§0^,^ (m, ÍH), 4,30 (m, ÍH), 4,08 (m, 2H), 3,70 (m, 2H), 3,60 (m, 6H), 3,18 (m, ÍH), 2,40 (m, ÍH), 2,05 (m, ÍH), 1,85 (s, 3H), 1,60 (dd, J=6,2,l,2 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 379, (M-H)' = 377.

Příklad 197

OCH₃

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3dimethylfosfonyl)propyl- 3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2hydroxy-dimethylfosfony l)propyl-3 -(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 13 mg, 96%).

c *H NMR (DMSO-de): δ 7,72 (d, J=9,2 Hz, ÍH), 5,48 (m, ÍH), 5,24 (m, ÍH), 4,44 (m, ÍH), 4,15 (m, 2H), 3,62 (m, 7H), 3,54 (m, ÍH), 3,15 (m, ÍH), 2,40 (m, ÍH), 1,95 (m, ÍH), 1,82 (s, 3H), 1,72 (m, ÍH), 1,54 (dd, J=6,7,l,2 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 379, (M-H)' = 377.

- 357 • *· »· · · • ·· • « · · · ... · · • · » «·*

:.....‘ _Ί

•	99
··	9 9
•	9
	9
9_	9

99

9 9 9

9 9 9 • · · 9

99- 09

Příklad Ϊ98

Trifluoroctová sůl (+)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-hydroxy propyI-3-(cz'.s-propen-lyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

198A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,í’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l-(cA atrans2-methoxyvinyl))methyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxyloyé kyseliny (113 mg, 0,28 mmol) se přidá do roztoku (methoxymethyl)trifenylfosfoniurnbromidu (240 mg, 0,70 mmol) a t-butoxidu draseliného (0,56 ml, 0,56 mmol, 1 M v THF) v toluenu (3 ml) při teplotě 0°C po dobu 15 minut, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (3 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2 x3 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO/t, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/4:ethylacetát/hexanů, čímž se získají požadované sloučeniny.

’H NMR (CDC1₃): δ 8,65(br d, IH) 6,01 (d, J=5,7Hz, IH), 5,40 (m, 3H), 5,1 l(brt, IH), 4,15 (m, 2H), 3,72 (m, IH) 3,61 (s, 3H), 3,00 (m, IH), 2,42 (m, IH), 1,94 (s, 3H),

1,64 (dd, J = 1,4, 5,0 Hz, 3H), 1,45 (m, 9H), 1,25 (m, 9H).

MS: (M+H)⁺= 439.

358

198B. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 'S)-l -Z-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2formyl)ethyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrroIidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-(cz.$· a trans2-methoxyvinyl))methyl-3-(cz'.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (21 mg, 0,048 mmol) se nechá reagovat s LiBr (37 mg, 0,43 mmol) a měniče iontů AG50W-X2 v CH₃CN (2 ml) a vodou (0,1 ml) při pokojové teplotě po dobu 45 minut, reakce se filtruje a zháší s nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (1 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2 x 1 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 1/4:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Ή NMR (CDC1₃): δ 9,70 (dd, >1,3, 2,4Hz, 1H), 8,11 (d, >7,8Hz, 1H), 5,54 (m, 1H), 5,41 (t, >5,8Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,13 (dd, >4,4, 4,8Hz, 1H), 3,75 (dd, >2,7, 3,1Hz, 1H), 2,86 (m, 1H), 2,47 (m, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,63 (dd, >1,6, 5,1 Hz, 3H), 1,46 (s, 911). 1,45 (m, 111), 1,44 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺ = 425; (M-H)' = 423.

198C. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1'S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-3hydroxy)propyl-3 -(c /'.s-propen-1 -yl)-pyrrol idin-5 -karboxylové kyseliny.

• ·

359 '·

-------------t=B_uty}_eS{_er-- —(±)-(2R₅3S_?5Rvl-S-)-l-Z-butQx-ykar-bony-U2-(-l-acetamido-2xformyl)r_ ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (9 mg, 0,02 mmol) se nechá reagovat s borohydridem sodným (1 mg, 0,02 mmol) v methanolu (0,1 ml) při pokojové teplotě po dobu 20 minut, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (1 ml), poté se provede extrakce pomocí dichlormethanu (2x1 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO4, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l/4:ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Ή NMR (CDCb): δ 8,45 (d, J=7,5Hz, 1H), 5,55 (m, 1H), 5,34 (t, >7,8Hz, 1H),

4,20 (dd, >3,0, 5,4Hz, 2H), 3,71 (d, >6,1Ηζ, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,50 (t, >9,1Ηζ, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,66 (dd, >2,0, 5,1Hz, 3H), 1,62 (m, 1H), 1,47 (S, 9H), 1,45 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,22 (m, 2H).

MS: (M+H)⁺ = 427; (M-H)' = 425.

198D. Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-3-hydroxy)propyl-3-(cApropen-l-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy) propyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)- 1 -Z-butoxykarbony 1-2-( l-acetamido-2hydroxy)buty 1-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, ester(výtěžek: 4,6 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-dé): δ 9, 25(br s, 1H), 8,13 (d, >7,3Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,28(brt, 1H), 4,32(brt, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,49 (m, 4H), 3,18 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,73 (m, 1H), 1,63 (dd, >l,8,5,5Hz, 3H), 1,57 (m, 1H).

*β ee

360 • ·

MS: (M-H)’ = 269; (M+H)⁺ = 271.

Příklad 199

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'S,3'S)-2-(l-acetamido-3-hydroxy)pentyl-3-(czs-propenl-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

199A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,3'S) a (±)-(2R,3S,5R,l'R,3'R)-l-/-butoxykarbonyl2-( 1 -acetamido-3-hydroxy)ethyl-3-(czT-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ S)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-formyl)ethyl-3-(czs^,-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (26 mg, 0,061 mmol) se nechá reagovat s ethylmagnesiumbromidem (3,0 M)(0,122 ml, 0,367 mmol) v THF (4 ml) při pokojové teplotě po dobu 30 minut, reakce se zháší nasyceným vodným chloridem amonným (10 ml) a vodou (10 ml), poté se provede extrakce pomocí ethylacetátu (3 x 25 ml). Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím l/l:ethylacetát/hexanů, poté 2/1 :ethylacetát/hexany, čímž se získá požadovaná sloučeniny (±)-(2R,3S,5R,l’S,2’S)(výtěžek: 6,7 mg, 24%) a (±)-(2R,3S,5R,l’S,2’R)(výtěžek: 6,8 mg, 24%).

(±)-(2R,3S,5R,l’S,2’S) MS: (M+H)⁺= 455, (M+Na)⁺= 477, (M-H)' = 453.

(±)-(2R,3S,5R,l’S,2’R) MS: (M+H)⁺= 455, (M+Na)⁺= 477, (M-H)' = 453.

ee

361

199B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS,3'S)-2-(l-acetamido-3-hydroxy)pentyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S,3’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,2 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 9,20(bs, IH), 8,18 (d, >7,3 Hz, IH), 5,51 (m, IH), 5,27 (m, IH), 4,30 (m, IH), 4,25 (m, IH), 3,58 (m, IH), 3,41 (m, IH), 3,18 (m, IH), 2,39 (m, IH), 1,90 (s, 3H), 1,75 (m, IH), 1,64 (dd, >7,5, 1,5Hz, 3 H), 1,51 (m, IH), 1,38 (m, IH), 1,32 (m, IH), 0,83 (t, >7,3 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 299, (M+Na)⁺- 321, (M-H)‘= 297, (2M-H)'= 595.

Příklad 200

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS,3'R)-2-(l-acetamido-3-hydroxy)pentyl-3-(cA-propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

«· • *

362

----------Požadovaná- -sloučenina—se—připraví—podle—způsobu—popsaného__v„příkladu_.41C_____ nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ S,3 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3hydroxy)pentyl-3-(cŽ5-propen-l-yl)-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5 R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acétamido-2-hydroxy)buty 1-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 6,5 mg, 100%).

’H NMR (DMSO-dg): δ 9,25(bs, 1H), 8,15 (d, >7,3 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 3,52 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,19(kvintet, >8,5Hz, 1H), 2,38 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 1,75 (m, 1H), 1,64 (dd, >7,3,l,5Hz, 3H), 1,48 (m, 1H), 1,33 (m, 2H), 0,85 (t, .1 =7,31 Iz, 311). , '

MS: (M+H)⁺ = 299, (M+Na)⁺ = 321, (M-H)' = 297, (2M-11)' = 595.

Příklad 201

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-oxo-3,3-difluor-3-vinyl)propyl-3(cis- propen-1-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-oxo3,3-difluor-3-vinyl)propyl-3-(czT-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0050 g, 100%).

^!H NMR (DMSO-dó): δ 8,67 (d, >8,5Hz, 1H), 6,1-5,95 (m, 1H), 5,78 (dd, >17,1, 2,4Hz, 1H), 5,71 (d, 11,0 Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 4,94 (t, >9,2Hz, 1H), 4,51 ·· » « • *

363

3H), l,66(q,

J=ll,9Hz, 1H), 1,57 (dd, 1=6,7,1,8Hz,3H).

MS: (M+H)⁺ = 331, (M+H₂O)⁺= 349, (M+Na)⁺ = 353, (M-H)' = 329, (2M-H)' =

659.

Příklad 202

202A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'R,2'S)- a (±)-(2R,3R,5R,l'R,2'R)-l-Z-butoxykarbonyl2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-difenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2formyl)ethyl-3-Z-butyldifenyl sily loxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-formyl)ethyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny, čímž se získá izomer (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S) . (výtěžek: 370 mg, 17%) a (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R) izomer(výtěžek: 1,2 g, 55%).

(±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S) ’H NMR (d₆-DMSO): δ 7,4-7,65 (m, 10H), 4,47 (d, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,87 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 2,7 (m, 1H),

2,45 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,83 (d, 3H), 1,28-1,4 (m, 18H), 0,95 (d, 9H), 0,83 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 667, (M+35)⁺ = 703; (M+H)⁺ = 669, (M+Na)⁺ = 691 —-LH-NMR-(d₆-DMS0)=6-7^4-7_?65-(m,-l-OH),-4.,4O_(dd,_

1H), 4,12-4,32 (m, 1H), 3,82-3,96 (m, 1H), 3,66 (m, 2H), 3,52 (t, 1H), 2,6-2,8 (m, 1H),

2,45 (m, 1H), 1,76-2,0 (m, 1H), 1,87 (d, 3H), 1,25-1,4 (m, 18H), 0,95 (d, 9H), 0,83 (dt,

3H).

364

MS: (M-H)' = 667, (M+35)⁺ = 703; (M+H)⁺ = 669, (M+Na)⁺ = 691.

202B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’ S)-l -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamidó-2Λ ' hydroxy)butyl-3-Z-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,58 g, 0,87 mmol) se nechá reagovat s methoxymethylchloridem (1,15 ml, 10,07 mmol) a diizopropylethylaminem (3,5 ml, 20,1 mmol) v dichlormethanu (1 ml) při pokojové teplotě po dobu 5 hodin, reakce se zháší nasyceným NH₄C1 (100 ml) a zředí ethylacetátem (200 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 5% methanol/methylenchloridu, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,64 g, 98%).

*H NMR (de-DMSO) δ 7,4-7,65 (m, 10H), 4,70 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,35- 4,55 (m, 2H), 3,75-3,95 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,28-1,4 (m, 18H), 0,99 (d, 9H), 0,8 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 755, (M+35)⁺ = 791; (M+H)⁺ = 757, (M+Na)⁺ = 779.

----- ³⁶⁵ • · ·«

k·

202C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methnxvmethvlnxvlbutvl-3-bvdrnxvmethv1-nvrrolidin-5-karboxv1ové kvselinv.

-----------------J J J----J _ —J------J-------J _r J ----- - - J - - - * —- -—^A-J Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123G nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’R,2’S)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-ř-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-34-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,416 g, 95%).

’H NMR (d₆-DMSO): δ 7,45 (t, 1H), 4,62-4,74 (m, 3H), 4,48 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 3,55-3,6 (m, 2H), 3,45 (t, 1H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,25 (d, 3H), 2,4 (m, 2H), 1,82 (d, 3H), 1,58 (m, 3H), 1,324,45 (m, 18H), 0,82 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 517, (M+35)⁺ = 553; (M+H)⁺ = 519, (M+Na)⁺ = 541.

202D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3 -hydroxymethyl-pyrrolidin-5 -karboxylové za t-butylester

(±)-(2R,3R,5R,i S)-i-Z-buioxykarbonyi-2-oxirányÍ-3-hydroxymethyÍ-pyrroÍidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,335 g, 80,8%).

’H NMR (dg-DMSO): δ 9,55 (d, 1H), 7,48 (m, 1H), 4,55 - 4,72 (m, 4H), 3,9 (d, 1H), 3,6 (m, 2H), 3,45 (m, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,05 (t, 1H), 2,25-2,45 (m, 4H), 1,83 (s, 3H),

1,58 (m, 3H), 1,30-1,45 (m, 18H), 0,86 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 515, (M+35)⁺= 551; (M+H)⁺ = 517.

202E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S,l''RS)-l-Z-butoxykárbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-(l-hydroxy-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 38A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-formyl-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3 -methyl)butyl-3 -formyl pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,27 g, 83%).

MS: (M-H)' = 541, (M+35)⁺ = 577; (M+H)⁺ = 543, (M+Na)⁺ = 565.

• ·

202F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-(1-oxo-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 38B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S, lRS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(lacetamido-2-methoxymethyloxy)butyl-3 -(1 -hydroxy-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S,lRS)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(lacetamido-3-methyl)butyl-3-(l-hydroxy-2-propyn-l-yl)-.pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,2 g, 74%).

’H NMR (dó-DMSO): δ 7, 49(br d,. 1H), 5,0 (d, 1H), 4,7(br s, 1H), 4,55-4,7 (m, 3H), 3,88 (br d, 1H), 3,5-3,7 (m, 2H), 3,43 (t,'2H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 2,4-2,7 (m, 2H), 1,84 (s, 3H), 1,5-1,7 (m, 2H), 1,30-1,45 (m, 18H), 0,86 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 539, (M+35)⁺ = 575; (M+H)⁺ = 541, (M+Na)⁺ = 563.

O^lBu

Ύ o

202G. t-Butylester(±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina Še připraví podlé způsobu popsaňefič v příkladu 38Č nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-( 1 -oxo-2-propyn- l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3R,5R,l’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(loxo-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxýlové kyseliny (výtěžek: 180 mg, 87%).

*H NMR (de-DMSO): δ 7,57 (br t, 2H), 6,1 (d, IH), 4,50 - 4,7 (m, 4H) 3,95 (m, IH), 3,4-3,6 (m, 3H), 3,3-3,4 (m, 3H), 3,22 (d, 3H), 2,55-2,65 (m, IH), 2,2 (m, IH), 1,85 (s, 3H), 1,5-1,7 (m, 2H), 1,15-1,45 (m, 18H), 0,86 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 553, (M+35)⁺ = 589; (M+H)⁺ = 553, (M+Na)⁺ = 577.

.OH

202H. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(pyrazol-3-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S)-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny. Chromatografie na sloupci silikagelu systémem 2-propanol:octová kyselina:ethylacetát:voda 1:1:3:1, poté přidání 0,1 % trifluoroctové kyseliny poskytne požadovanou sloučeninu (výtěžek: 15 mg, 55%).

’H NMR (d₆-DMSO): δ 7, 95 (d, IH), 7,65(br s, IH), 6,18 (d, IH), 4,37 (m, IH), 4,23 (m, IH), 4,38 (m, IH), 4,56 (m, IH), 2,63 (m, IH), 2,10 (m, IH), 1,78 (s, 3H), 1,50 (m, IH), 1,25 (m, IH), 0,83 (t, J=7,46 Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 309, (M+35)⁺ = 345; (M+H)⁺ = 311, (M+Na)⁺ = 333.

369

Příklad 203

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(pyrazol-3yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

TBDPSO—

O‘Bu

Y

o.

203B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,TR,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 202B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l ’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)butyl-3-/-butyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl3-/-butyldifenylsilyloxymethylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,217 g, 96%).

*H NMR (d₆-DMSO): δ 7,4-7,65 (m, 10H), 4,70 (s, IH), 4,62 (s, IH), 4,35 - 4,55 (m, 2H), 3,75-3,95 (m, 2H), 3,68 (m, IH), 3,55 (m, IH), 3,25 (m, IH), 3,24 (s, 3H), 2,55 (m, IH), 2,45 (m, IH), 2,0 (m, IH), 1,85 (s, 3H), 1,28-1,4 (m, 18H), 0,99 (d, 9H), 0,8 (dt, 3H).

MS: (M-H)' = 755, (M+35)⁺ = 791; (M+H)⁺ = 757, (M+Na)⁺ = 779.

370

··

HO

níJQf' , o.....1 — /i\ znn or* rn 1 :γί n;n\ 1 . -, .i n /1 . . .z._m· J . <» zujo. i-DuiyicSicr íx)-fziv,jiv,jr<,i iv,z jv)-i-z-uULoxyKaroonyi-z-(i-aceiamiao-zmethoxymethyloxy)butyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123G nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-/-butyldif'enylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-Zbutyldifenylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,124 g, 83%).

*H NMR (de-DMSO): δ 7,42 (dd, 1H), 4,62-4,8 (m, 3H), 4,48 (m, 1H), 3,6-3,85 (m, 3H), 3,35-3,6 (m, 4H), 3,25 (s, 3H), 2,25 (m, 1H), 2,4 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,58 (m, 3H), 1,32-1,45 (m, 18H), 0,9 (dt, 3H).

MS: (M-H)‘ = 517, (M+35)⁺ = 553; (M+H)⁺ = 519, (M+Na)' = 541.

H

O‘Bu

O

203D. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l'R,2'R) -l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

371

Požadovaná sl óůč ěňi ňa s e připraví podle způsobu popsaného v příkladu 123H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-X-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-X-butoxykarbonyl-2-oxiranyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,106 g, 86%).

’H NMR (de-DMSO): δ 9,58 (d, IH), 7,58 (dd, IH), 4,6-4,72 (m, 3H), 4,48 (d, IH), 3,88 (d, IH), 3,4-3,65 (m, 5H), 3,24 (s, 3H), 3,15 (dd, IH), 2,20-2,48 (m, 4H), 1,86 (s, 3H), 1,58 (m, 3H), 1,30-1,40 (m, 18H), 0,86 (t, 3H).

MS: (M-H)' = 515, (M+35)⁺ = 551; (M+H)⁺ = 517.

OH

203 E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'R,2'R, 1 RS)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3 -(1 -hydroxy-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 38A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-X-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’S, 1 RS)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-formylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 32 mg, 76%).

MS: (M-H)’ = 541,(M+35)⁺ = 577;(M+H)⁺ = 543,(M+Na)⁺ = 565.

203F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido2methoxymethyloxy)butyl-3 -(1 -oxo-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina, se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 38B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-( 1 -hydroxy-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S, lRS)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3methyl)butyl-3-(l-oxo-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 25 mg, 78%).

‘H NMR (d₆-DMSO): δ 7,49(br d, IH), 5,0 (d, IH), 4,7(br s, IH), 4,55-4,7 (m, 3H), 3,88 (br d, IH), 3,5-3,7 (m, 2H), 3,43 (t, 2H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 2,4-2,7 (m, 2H), 1,84 (s, 3H), 1,5-1,7 (m, 2H), 1,30-1,45 (m, 18H), 0,86 (dt, 3H).

. MS: (M-H)’= 539, (M+35)⁺= 575; (M+H)⁺= 541, (M+Na)⁺= 563.

203G. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 'R,2'R)-17-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3 -(pyrazol-3 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina še připraví podle způsobů popsaného/ v příkladu 38C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R,l’R,2’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-( 1 -oxo-2-propyn-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, Γ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-3-methyl)butyl-3-( 1 oxo-2-propyn-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 18 mg, 72%).

*H NMR (d₆-DMSO): δ 7,57 (m, 2H), 6,1 (d, 1H), 4,40-4,7 (m, 4H) 3,93 (m, 1H),

3,4-3,6 (m, 3H), 3,3-3,4 (m, 3H), 3,22 (d, 3H), 2,55-2,65 (m, 1H), 2,2 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,5-1,7 (m, 2H), 1,15-1,45 (m, 18H), 0,86 (m, 3H).

MS: (M-H)’ = 553, (M+35)⁺ = 589; (M+H)⁺ = 553, (M+Na)⁺ = 577.

203H. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,TR,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(pyrazol-3-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxymethyloxy)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-1 -benzyl-2-(l -acetamido-3-ethyl)pentyl-3-(imidazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny. Chromatografie na sloupci silikagelu systémem 2-propanol:octová kyselina:ethylacetát:voda 1:1:3:1, poté přidání 0,1 % trifluoroctové kyseliny poskytne požadovanou sloučeninu (výtěžek: 4 mg, 45%).

’H NMR (rU-DMSO): δ 7,65 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 6,16 (d, 1H), 4,37 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,56 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,25-1,40 (m, 2H), 0,83 (t, J=7,46 Hz, 3H).

774MS: (M-H)’ = 309, (M+35)⁺ = 345; (M+H)⁺ = 311, (M+Na)⁺ = 333.

·»

I · '··

Příklad 204

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

TBDMSO

H₂N

OtBu

Ph

204A. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-aminomethyl-3-/-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1F nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-formyl-3-Z-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrroIidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-(loxo-3-ethyl)pentyl-3-Z-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

MS: (M+H)⁺= 435.

TBDMSO—

204B. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-acetamidomethyl-3-Zbutyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

375 ·· ·· · * • ·· • e «9 • · ·

----9 9-9—99—

99

9 9

9

9 »99 9999

9 9

99

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobůpopsaného v přikladu TG nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-aminomethyl-3-/-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’R)- a t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(1-amino-3-ethyl)pentyl-3-/-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (CDCb): δ 7,2-7,35 (m, 511). 6.140. 1H), 3,86 (dd, J=18Hz, 13,5Hz, 2H), 3,67 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,28 (m, 1H), 3,06 (m, 1H), 2,19 (m, 2H),

1,95 (s, 3H), 1,45 (s, 9H),.0,91 (s, 9H), 0,07 (s, 6H).

MS: (Milí)'- 477.

HO—ý

AcNH.^X Χ °®υ • N [f O Ph

204C. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-acetamidomethyl-3-hydroxymethylpyrrolidin-5-karboxylóvé kyseliny. .

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1H nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-acetamidomethyl-3-í-butyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-lbenzyl-2-(l-acetamido-3-ethyl)pentyl-3-/-bůtyldimethylsilyloxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

AcNH

H

OtBu

Ph ' . . ·♦ · · · ·· · . ·· · β · · · ί . · ·· · · · · · · » • · · · · · · · ·

------------ --------------- ------------------ - 376 >.. ···· , .· ·°

204D. t-Butyiester (±)-(2K3R,5R)-r-b^_enzyl-2-áčéťamidóméťhyl-3-fomíyi-pyrToiidi'n-5karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-l-benzyl-2-acetamidomethyl-3-hydroxymethylpyrrolidín-5-karboxylové kyseliny za. t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-l-benzyí-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-hydroxymethyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (CDC1₃): δ 9,70 (s, 1H), 7,22-7,36(m 5H), 5,82(br, 1H), 3,83 (dd, J= 3,3Hz, 13,5Hz, 2H), 3,74 (m, 1H), 3,56 (d, J= 9Hz, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,362,10 (m, 2H), 1,98 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 361.

O .OtBu

Ph

204E. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2B a 2C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-1 -benzyl-2-acetamidomethyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(l-acetamido3-ethyl)pentyl-3-formyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (CDCI3): δ 7,45-7,20 (m, 5H), 5,96(br, 1H), 3,90-3,73 (m, 4H), 3,71 (s,

3H), 3,52 (dd, J = 9Hz, 2Hz, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 2,18 (m, 1H),

1,97 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).

SS —377 . Ο_^_._Τ_Τ2\+ Ο 0.1 ινίδ: (ivirt-n) = ονι.

Ο

CH₃O-A AcNH

204F. t-Butylester (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2D nahrazením t-butylesteru. (±)-(2R,3R,5R)-1-benzyl-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-l-benzyl-2-(lacetamido-3-ethyl)pentyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (CDCl₃): δ 6,l9(br, ÍH), 3,72 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,43 (m, ÍH), 3,28 (m, ÍH), 2,74 (m, ÍH), 2,44(m ÍH), 2,21 (m, ÍH), 2,00 (s, 3H), l,48 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺= 301.

204G. Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 2E nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-methoxykarbonylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3ethyl)pentyl-3-methoxykarbonyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

378 ’Η NMR (d₂0): δ 4,42 (t, J=8,25Hz, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,70-3,60 (m, 2H), 3,26 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,03 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺=245.

Příklady 205-213

HO

AcHN

N Ύ Boc β ,0‘Bu

AcHN

Ά-. z°^h ‘ Ií

Přiklad 204C

Následující požadované sloučeniny se připraví podle způsobů popsaných v příkladech 1 - 39 z obecných meziproduktů připravených podle způsobu popsaného v příkladu 204C.

Příklad 205

AcHN

Q

->í

TFA .OH

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-ethoxykarbonyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

*H NMR (d₂O): δ 4,30 (t, J=8,2Hz, 1H), 4,21 (m, 3H), 3,62 (dd, >2,4, 3,4Hz, 2H), 3,23 (m, 1H), 2,74 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,26 (m, 3H).

379

• ·· • · · · * · ·	.1 .··. é ·	β · • · · • · ·
• · ·	• ·	• · ·

MS: (Μ+Η)⁺ = 259; (Μ-Η)' = 257.

Příklad 206

Υν ηνΥ «ΗΝχ/Τ ΟΗ «Μ Í

HCI

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-(imidazol-2-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

'H NMR (d₂O): δ 7,46 (s, 2H), 4,53 (dd, J=9,5Hz, J=8,5 Hz, IH), 4,28 (m, IH),

3,96 (m, IH), 3,65 (m, 2H), 3,03 (dt, J=13,5Hz, J=7,6Hz, IH), 2,46 (m, IH), 1,94 (s, 3H).

MS: (M + H)⁺ = 253, (M-H)' = 251.

Příklad 207

AcHN

TFA

OH

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R)-2-acetamidomethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (d₂O): δ 5,74 (m, IH), 5,24 (m, 2H), 4,20 (dd, J=l,7,8, 1Hz, IH), 3,65 (m, 2H), 3,50 (m, IH), 2,84 (m, IH), 2,61 (m, IH), 2,03 (s, 3H), 1,95 (m, IH).

MS: (Μ+Η)⁺ = 213.

Příklad 208 «I

380 • · ·· * ee <9 • · · * • · · ·

......β*··· β-e • Φ · · • · · · • * β · ·

H₃C .

H₃C /“Λ ACHN^X > OH , Í

TFA

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-(2,2-dirnethyl-vinyl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny. \ .

Ή NMR (d₂O): δ 5,01 (br d, 1H), 4,18 (dd, J=2,l, 8,1Hz, 1H), 3,53 (m, 3H), 3,04 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,0 (s, 3H), 1,75 (m, 1H), 1,72 (s, 311), 1,67 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 241, (M+Na)⁺ = 263; (M-H)' = 239.

, Příklad 209

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-(N,N-dimethylkarbamoyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

H NMR- (d₂O)-: δ 4^60-ý»8?4Hz; IH); 4,23 (m, TH), 3,5'6'(ďf J=5,8Hž, 2H) 3750' (m, IH), 3,10 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,88 (m, IH), 2,19 (m, IH), 2,00 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 258, (M-H)' = 256.

Příklad 210

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-(N-methylkarbamoyl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

^!H NMR (d₂O): δ 4,49 (t, J=8,5Hz, IH), 4,10 (m, IH), 3,57 (d, J=5,8Hz, 2H), 3,03 (m, IH), 2,76 (m, IH), 2,74 (s, 3H), 2,29 (m, IH), 2,00 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 244.

Příklad 211

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-propionyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

—Τ»-·’·· ·'* ·· * · · · 4 · • ® ·

382

40 9

9 ·· ..· · · 1 * * * • · · 9« i 4 9 _____... .4-.4.4..4.4.4.4-.-._______4'4- —4-4— !! NMR (d_?(>): δ 4,24 (m, 2Η). 3,55(d,4=4,71ίζ, i ί ί), 3,40 (m, iii), 2,8b (m, 1H),

2,64 (m, 3H), 2,16 (m, ÍH), 2,01 (s, 3H), 1,02 (t, J=7,lHz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 243; (M-H)’ = 241.

Příklad 212

Hydrochlorid (±)-(2R,3R,5R)-2-acetamidomethyl-3-methoxymethyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

‘H NMR (d₂O): δ 4,44 (t, J=6Hz, 2H), 3,77 (m, ÍH), 3,65-3,48 (m, 3H), 3,35 (s, 3H), 2,64 (m, ÍH), 2,56 (m, ÍH), 2,03 (s, 3H), 2,00 (m, ÍH).

MS: (M+H)⁺= 231, (M-H)'= 229.

Příklad 213

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R)-2-acetamidomethyl-3-methyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

383

• · • 9 « * · · ·

'Η NMR (d₂O): δ 4,30 (m, !Η), 3,64 (m, 11-1), 3,48 (rn, 111), 3,20 (m, iii), 2,64 (m, IH), 2,03 (s, 3H), 1,76 (m, IH), l,32(brt, IH), 1,12 (m, 4H).

MS: (M+H)⁺ = 201, (M+Na)⁺ = 223.

Příklad 214

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR)-2-(l-acetamido-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

,O^lBu

214A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-Z-butoxykarbonylamino2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Do roztoku ethanthiolu (0,047 ml, 0,63 mmol) v THF (2 ml) při teplotě 0°C se přidá

2,5 M n-BuLi/hexan(0,248 ml, 0,62 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 45 minut a přidá se roztok t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(N-Zbutoxykarbohylaziridinyl)-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (0,08 g, 0,182 mmol) v THF(0,5 ml), poté následuje přidání DMF(1,5 ml) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 2 hodin, reakce se zháší 1 N NaHCOs (10 ml) a zředí ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 61 mg, 67%).

’H NMR (dó-DMSO): δ 6,74(br d, IH), 5,85 (m, IH), 4,9-5,0 (m, 2H), 4,20 (m, IH), 3,95 (m, IH), 3,75 (d, IH), 2,8-3,0 (dd, IH), 2,5 (m, 3H), 1,65 (m, IH), 1,32-1,45 (m, 27H), 1,17 (dt, 3H).

384

MS: (M-H)' = 499; (M+H)⁺ = 504, (M-‘ Na)' = 523

O^lBu

214B. t-Butylester (+)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-z-butoxykarbonyi-2-(I-N-ř-butoxykarbonylacetamido-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karbqxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S ,5 R, 1 ’ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-ř-butoxykarbonylamino-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (58 mg, 0,116 mmol) se nechá reagovat s hexamethyldisilazidem lithným (1 M)(l,16 ml, 1,16 mmol) v THF (3 ml) při teplotě -78°C. Po 0,5 hodině při teplotě -78°C a 1 hodině při teplotě -40°C, se výše uvedená směs nechá reagovat s acetylchloridem (0,166 ml, 2,33 mmol) při teplotě -30°C po dobu 0,3 hodiny, reakce se zháší 1 N NaHCO₃ (10 ml) a extrahuje ethylacetátem (20 ml). Organická vrstva se promyje vodou a solankou, suší nad MgSO₄, filtruje a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 10% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 28 mg, 44%).

’H NMR (d₆-DMSO): δ 5,88 (m, 1H), 4,9-5,0 (m, 2H), 4,52 (m, 1H), 4,33 (m, 1H),

4,1 (m, 1H), 2,78 (dd, 1H), 2,3-2,5 (m, 6H), 1,7 (m, 1H), 1,32-1,5 (m, 27H), 1,11 (t, 3H).

MS: (M+H)⁺= 543.

O

214C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3R,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-ethylitio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

··

-385

Požadovaná-sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkládu přikladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l'R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-N-/butoxykarbonylacetamido-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7 mg, 95%).

*H NMR (dé-DMSO): δ 8,15 (d, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,05-5,2 (m, 2H), 4,2- 4,4 (m, 2H), 4,33 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,7-2,8 (2d, 1H), 2,3-2,6 (m, 3H), 1,85 - 1,95 (m, 1H),

1,93 (s, 3H), 1,17 (t, J=7,46 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 287.

Příklad 215

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,3’S)-2-(l-acetamido-2-ethylsulfínyl)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

215A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,3’S) a t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l'R,3'R)-l-Zbutoxykarbonyl-2( 1 -N-/-butoxykarbonylacetamido-2-ethyl sul finyl)ethyl-3 - vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-ř-butoxykarbonylacetamido-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (72 mg, 0,132 mmol) se nechá reagovat s 55% m-chlorperoxybenzoovou kyselinou (41 mg, 0,132 mmol) v CHCb (1,5 ml) při teplotě -40°C po dobu 30 minut, reakce se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím ethylacetátu, čímž se získají

386

9·.....

sloučeniny - izomer (±>(2R,3S;5R, Í’R,?’ S) (výtěžek: 14 mg, i 8,9%) a izomer (+)-(2R,3S,5R,rR,3’R)(výtěžek: 45 mg, 60,7%).

(2R,3S,5R,1’R,3’S) 'HNMR (d₆-DMSO): δ 5,88 (m, 1H), 4,9-5,0 (m, 2H), 4,50 (m, 1H), 4,0-4,15 (m, 1H), 2,7-2,9 (m, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 1,7 (m, 1H), 1,321,5 (m, 27H), 1,12 (t,3H).

MS: (M+H)⁺ = 559, (M+Na)⁺ = 581 (2R,3S,5R,1’R,3’R) ’H NMR (cb-DMSO): δ 5,88 (m, 1H), 4,9-5,0 (m, 2H), 4,50 (m, 1H), 4,03 - 4,15 (m, 1H), 3,2 (m, 1H) 3,1 (dd, 1H), 2,5-2,7 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 1,75 (m, 1H), 1,32-1,5 (m, 27H), 1,12 (t, 3H).

MS: (M+H)⁺= 559, (M+Na)⁺= 581.

215B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,3’S)-2-(í-acetamido-2-ethylsulfinyl)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R,3’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-N-Zbutoxykarbonylacetamido-2-ethylsulfinyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz3'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 9 mg, 86%).

’H NMR (dé-DMSO): δ 8,39 (d, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,15-5,2 (dd, 2H), 4,5 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 2,85-3,04 (m, 3H), 2,6-2,85 (m, 2H), 2,4 (m, 1H), 1,831,95 (m, 1H), 1,86 (s, 3H), 1,20 (t, 3=7,46 Hz, 3H).

387

MS: (M-H)' = 301; (M+H)⁺ = 303, (M+Na)⁺ = 325.

Příklad 216

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,3'R)-2-(l-acetamido-2-ethylsulfinyl)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,TR,3’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-N-/-butoxy-. karbonylacetamido-2-ethylsulfínyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2-hýdroxy)-butyl3-(č7.s-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 12 mg, 94%).

, 'H NMR (d₆-DMSO): δ 8,39 (d, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,15-5,2 (dd, 2H), 4,53 (m, 1H), 4,41 (t, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,2 (dd, 1H), 2,9-3,0 (m, 2H), 2,65-2,9 (m, 2H), 2,4 (m, 1H), 1,83-1,95 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,20 (t, >7,46 Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 301; (M+H)⁺ = 303, (M+Na)⁺ = 325.

Příklad 217

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-2-( 1 -N-t-butoxykarbonylacetamido-2ethylsulfonyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

388

217A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -N-Zbutoxykarbonylacetamido-2-ethylsulfonyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,3’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-N-Z-butoxykarbonylacetamido-2-ethylsulfmyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (25 mg, 0,0448 mmol) se nechá reagovat s 55% m-chlorperoxybenzoovou kyselinou (14 mg, 0,0448 mmol) v ClICf(r,5 ml) při teplotě 0°C po dobu 1 hodiny. Reakce-se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 25% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 23,7 mg, 92%).

*H NMR (d₆-DMSO): δ 5,88 (m, 1H), 4,85-5,0 (m, 2H), 4,38 (m, ÍH), 4,15 (m, ÍH), 3,7 (m, ÍH) 3,45 (dd, ÍH), 2,9-3,2. (m, 3H), 2,5-2,7 (m, ÍH), 2,3-2,4 (m, 3H), 1,62,04 (m, ÍH), 1,35-1,55 (m, 27H), 1,15 (t, 311).

MS:(MHI)’ = 575.

AcHN

TFA

217B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-ethylsulfonyl)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1-N-Z-bu toxykarbonylacetamido-2-ethylsulfonyl)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za

389 t-butylester (+)-(2R₅3.S_s5R,T’R_;,2tS)-l-ř-butox-ykarb0nyl-2-(T-aeetarnido=24rydroxy)buťyr3-(czÁ-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 12 mg, 94%).

‘H NMR (dó-DMSO): δ 8,34 (d, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,05-5,25 (dd, 2H), 4,68 (m, 1H), 4,39 (dd, 1H), 3,7(2d, 1H), 3,48 (dd, 1H), 3,3-3,4 (dd, 2H), 3,O8(q, 2H), 2,95 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 1,9 (m, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,23 (t, >7,46 Hz, 3H).

MS: (M-H) = 317, (M+35)⁺ = 353; (M+H)⁺ = 319, (M+Na)⁺ = 341.

Příklad 218, 220

1. RSH

BocHN

,O‘Bu

2. LiHMDS/AcCI

3. TFAZCH2CI₂

AcHN.

TFA

Následující požadované sloučeniny se připraví v 3 krocích podle způsobů popsaných v příkladu 214.

Příklad 218

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-izopropylthio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

O’Bu

Y

O

390

218A. t-Butvleste.r (±)-(2R,3S,5R, 144)-1-í-butoxykarbonyl·butoxykarbonylamino-2-izopropylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 214A nahrazením izopropylthiolu za ethanthiol (výtěžek: 22 mg, 62%).

‘H NMR (dé-DMSO): δ 6, 73 (d, 1H), 5,85 (m, 1H), 4,9-5,0 (m, 2H), 4,18 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,75 (br d, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,32-1,45 (m, 27H), 1,18 (dd, 6H).

MS: (M-H)' = 513; (M+H)⁺ = 515, (M+Na)⁺ = 537.

218B. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -(N-Z-butoxykarbonyl-Nacetamido)-2-izopropylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 214B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-Z-butoxykarbonylamino-2-izoproylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-N-í-butoxykarbonylamino-2ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 12 mg, 50%).

*H NMR (d₆-DMSO): δ 5,86 (m, 1H), 4,88-5,0 (m, 2H), 4,54 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,13 (d, 1H), 3,05 (m, 1H), 2,73-2,84 (m, 2H), 2,38(br s, 3H), 1,72 (m, 1H), 1,32-1,5 (m, 27H), 1,14 (dd, 6H).

MS: (M+H)⁺ = 557, (M+Na)⁺ = 579.

·' • · ·♦ ·· ·· • '·· . · e <· · · • .· · · · · * • · · · f · · · · • · · · · · · • ,·«· ···· '···- ·®

218C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-izopropylthio)ethyl-3vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 15B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ^<R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l -N-Z-butoxykarbonylacetamido-2-izopropylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za tbutylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 8 mg, 97%).

^!H NMR (de-DMSO): 8 8,14 (d, IH), 5,72 (m, IH), 5,05-5,2 (dd, 2H), 4,24,4 (m, 2H), 3,68 (dd, IH), 2,93 (m, 2H), 2,74 (dd, IH), 2,58 (dd, IH), 1,93 (m, IH), 1,87 (s, 3H), 1,2 (t, 6H).

MS: (M-H)' = 299; (M+H)⁺ = 301, (M+Na)⁺ = 323.

Příklad 219

Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-fenylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny.

H₂t< Λ \ _yO^lBu

CX Y BOC Í

219A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -amino-2-fenylthio)ethyl3-vinyl-pynOlidin-5-karboxylové kyseliny.

v

392

• ··	• ··	»·			·«
e e í e		e		9	•
• ··	• ·	♦	•	9	•
					•
• · ·	• ·	•	•	9	•
··· ··	····	• ·			M

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-aziridinyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (20,3 mg, 0,06 mmol) se nechá reagovat s fenylthiolem (19,9 mg, 0,18 mmol) a triethylaminem (0,047 ml, 0,34 mmol) v MeOH (0,06 ml) při pokojové teplotě po dobu 3,5 hodiny. Reakční roztok se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí preparativní tenkovrstvou chromatografií na silikagelu použitím ethylacetát/methanol/hydroxidu amonného, 99/0,05/0,05, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 20,7 mg, 77%).

‘H NMR (d₆-DMSO): δ 7,31 (m, 4H), 7,17 (m, IH), 5,87 (m, IH), 5,03 (ď, J=17Hz, 0,4H), 5,01 (d, J=17Hz, 0,6H), 4,91 (d, J=11H, 0,4H), 4,90 (d, J=llHz, 0,6H),

4,15 (m, IH), 3,82 (m, 0,6H), 3,76 (m, 0,4H), 3,39 (m, IH), 2,92 (m, 2H), 2,55 (m, IH),

1,64 (m, 2H), 1,42 (s, 5,4H), 1,37 (s, 3,6H), 1,34 (s, 5,4H), 1,22 (s, 3,6H).

MS: (M+H)⁺ = 449, (M+Na)⁺ = 471.

219B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2fenylthio)ethyl- 3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -amino-2-fenylthio)ethyl3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (17,2 mg, 0,04 mmol) se nechá reagovat s anhydridem kyseliny octové (0,011 ml, 0,11 mmol) a triethylaminem (0,032 ml, 0, 23 mmol) v CH2CI2 (0,3 ml) při pokojové teplotě po dobu 4,25 hodin. Reakční roztok se koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí preparativní tenkovrstvou chromatografií na silikagelu použitím 5% methanol/dichlormethanu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

*H NMR (d₆-DMSO): δ 7,75 (d, J=9Hz, 0,6H), 7,73 (d, J=9Hz, 0,4H), 7,32 (m, 4H), 7,19 (m, IH), 5,87 (m, IH), 5,04 (d, J=17Hz, 0,4H), 5,00 (d, J=17Hz, 0,6H), 4,95 (d, J=10Hz, 0,6H), 4,93 (d, J=10Hz, 0,4H), 4,59 (m, 0,4H), 4,45 (m, 0,6H), 3,99 (dd, J=10Hz,

393

2Hz. 0.611), 3.94 (dd, J lOIlz. 2.5 Hz. 0.411). 3,84 (m, 0,611). 3.77 (m. 0.4H), 3,07 (dd, 13Hz, 5Hz, 0,6H), 2,95 (m, 1,8H), 2,83(brt, J=8Hz, 0,6H), 2,48 (m, IH), 1,84 (s, 1,2H),

1,81 (s, 1,8H), 1,68 (m, IH), 1,41 (s, 5,4H), 1,36 (s, 3,6H), 1,34 (s, 5,4H), 1,26 (s, 3,6H).

MS: (M-H)' = 489, (M+35)⁺ ; (M+H)⁺ = 490, (M+Na)⁺ = 513.

219C. Hydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-2-(l-acetamido-2-fenylthio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny:

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 1K nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l'R)-l-t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2fenylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny., za t-butylester (±)-(2R,3R,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -acetamido-3 -ethyl)pentyl-3 -(methoxymethyl)-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny (výtěžek: 14,6 mg, 100%,).

‘H NMR (d4-methanol): δ 7,43 (m, 2H), 7,31 (m, 3H), 5,75 (ddd, J=17Hz, 10Hz, 8Hz, IH), 5,32(br d, J=17Hz, IH), 5,19 (dd, J=10Hz, 1,4Hz, IH), 4,58 (m, 2H), 3,89 (dd, J=10Hž, 3Hz, IH), 3,19 (dd, J=14Hz, 6Hz, IH), 3,09 (dd, J=14Hz, 9Hz, IH), 3,04 (m, IH), 2,57 (dt, J=13Hz, 7Hz, IH), 2,04 (s, 3H), 2,03 (m, IH).

MS: (M-H)' = 333; (M+H)⁺ = 335, (M+Na)⁺ = 357.

Příklad 220

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-2-(l-acetamido-2-benzylthio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

·· ¥ »· ·« *· • · ·· · ¥ · · · ·¥ ¥ ¥ ¥ · » · *·· · ······

220A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 'R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-Zbutoxykarbonylamino-2-benzylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 214A nahrazením benzylmerkaptanu za ethanthiol (výtěžek: 28 mg, 72%).

‘HNMR (d₆-DMSO): δ 7,2-7,35 (m, 5H), 6,80(br d, IH), 5,84 (m, IH), 4,86 - 4,96 (m, 2H), 4,25 (m, IH), 3,95 (m, IH), 3,7-3,8 (m, 3H), 2,76-2,94 (m, IH), 2,35-2,45 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,32-1,45 (m, 27H).

MS: (M-H)’ = 561; (M+H)⁺ = 563, (M+Na)⁺ = 585.

,OBu

220B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-(N-Zbutoxykarbonylacetamido)-2-benzylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 214B nahrazením t-butylesteru (+)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-N-Z-butoxykarbonylamino-2-benzylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-Z-butoxykarbonylamino-2-ethylthio)ethyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 3,3 mg, 61%).

395

(m, 1H), 4,32 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 3,56-3,65 (m, 2H), 2,9 (m, 1H), 2,3-2,65 (m, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,76 (d, 1H), 1,25-1,55 (m, 27H).

MS: (M+H)⁺ = 605, (M+Na)⁺ = 627.

.OH

220C. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(l-acetamido-2-benzylthio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -N-ř-butoxykarbonylacetamido-2-benzylthio)ethyl-3-vínyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2’ S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,2 mg, 95%).

'H NMR (de-DMSO): δ 8,18 (d, 1H), 7,2-7,32 (m, 5H), 5,68 (m, 1H), 5,02- 5,2 (m, 2H), 4,3 - 4,45 (m, 2H), 3,76 (s, 2H), 3,68 (dd, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,62 (dd, 1H), 2,322,55 (m, 2H), 1,85-1,95 (m, 1H), 1,89 (s, 3H).

MS: (M-H)’ = 347; (M+H)⁺ = 349, (M+Na)⁺ = 371.

Příklad 221 .OH

2HCI

396 .·· ) « ·· ·· fe • ···· ·· ·· fe · · · • · · · • · · · • ·· · ·· ··

Dihydrochlorid (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-(4-pyridinthio)ethyl-3-vinylpyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu příkladu 219A-C nahrazením 4thiopyridinu za thiofenol jako činidlo v příkladu 219A.

^!H NMR (d₄-methanol): δ 8,57 (d, J=7Hz, 2H), 7,97 (d, J=7Hz, 2H), 5,85 (ddd, J=17Hz, 10Hz, 9Hz, ÍH), 5,40(br d, J=17Hz, ÍH), 5,25 (dd, J=17Hz, 10Hz, ÍH), 4,67 (dt, J=10 Hz, 4Hz, ÍH), 4,47 (dd, J=10Hz, 8Hz, ÍH), 4,01 (dd, J=10Hz, 4Hz, ÍH), 3,68 (dd, J=14Hz, 5Hz, ÍH), 3,45 (dd, J=14Hz, 10Hz, ÍH), 3,16 (m, ÍH), 2,65 (dt, J=14Hz, 7Hz, ÍH), 2,07 (m, ÍH), 2,04 (s, 3H).

MS: (M-H)’ = 334; (M+H)⁺ = 336, (M+Na)⁺ = 358.

Příklad 222

Ethylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(c/s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Thionylchlorid (1,49 ml, 20,5 mmol) se nechá reagovat s ethanolem (25 ml) při teplotě 0°C po dobu 10 minut, do výše uvedeného roztoku se přidá trifluorooctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (815 mg, 2,05 mmol) v ethanolu (50 ml) a nechá reagovat při pokojové teplotě po dobu 17 hodin, reakce se koncentruje ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu s 90/10/0,5 dichlormethan/methanol/hydroxidem í;

-V .

397

-. - amonným, čímž se získá požadovaná sloučenina jako bílá tuhá látka (výtěžek: 462 mg,

72%).

*H NMR (DMSO-dg): δ 7,49 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 5,31 (m, 2H) 4,11 (m, 2H), 3,72 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 2,22 (m, 1H),

1,76 (s, 3H), 1,54 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 1,45 (m, 1H), 1,39 (m, 1H), 1,21 (m, 1H), 1,19 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7, 3 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 313, (M+Na)⁺= 335, (M-H)' = 311.

Příklad 223

Ethylester (±)-(2R,3Rj5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(pyrazol-3yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.,

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluoroctové soli (+)-(2R,3R,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxyloyé kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cw-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 32 mg, 52%).

’H NMR (dó-DMSO): δ 7,6(br s, 1H), 6,l(br s, 1H), 4,08(q, J=7,12Hz, 2H), 3,78 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,45 (m, 1H), 1,2 (m, 1H), 1,16 (t, J=7,12 Hz, 3H), 0,82 (t, J=7,46 Hz, 3H).

MS: (M-H)' = 337, (M+35)⁺ = 373; (M+H)⁺ = 339, (M+Na)⁺ = 361.

v

Ethylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S,3 ’ S)-2-'( 1 -acetamido-2-(N-izopropyl-N-methylamino-Noxid))ethyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluorooctové soli (±)-(2R,3S,5R,rS,3’S)-2-(l-acetamido-2-(N-izopropyl)N-methylarnino-N-oxid))ethyl-3-(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5Ř,l ’R,2’S)-2-(L·acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czs-propenl-yl)-py^πΌlidiⁿ-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 25 mg, 34%).

’H NMR (MeOD-d₃): δ 5,51-5,43 (m, 1H), 5,34-5,27 (m, 1H), 4,36-4,30 (m, 1H), 4,18(q, >7, 1Hz, 2H), 3,88 (dd, >6,8, 8,8Hz, 1H), 3,82-3,67 (m, 2H), 3,49 - 3,42 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,14-2,96 (m, 1H), 2,42-2,33 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 1,641,52 (m, 1H),

1,63 (dd, >1,7, 6,8Hz, 3H), 1,41-1,24 (m, 1H), 1,39 (d, >6,4 Hz, 3H), 1,31 (d, >6,4Hz, 3H), 1,26(1, J 7, 1 Hz, 311).

MS: (M+H)⁺ = 356, (M+Na)⁺ = 378, (M-H)' = 354, (M+35)⁺ =390.

Příklad 225

v v

399

«'·

Ethylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -acetamido-3-methyl )butyl-3-(cz.v-propen-1 -yl)pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluoroctové soli (±)-(2R,3S,5R,l^,S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz.ypropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’ R,2’ S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(czs-propen-1 -yl)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 838 mg, 94%).

’H NMR (CDC1₃): δ 5,50 (m, 1H), 5,41 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,21(q, J=7, 5Hz, 2H), 4,06 (m, 1H), 3,87 (t, J=7,5Hz, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 1,97 (s, 3H), 1,66 (dd, 3H), 1,60 (m, 1H), 1,40 (m, 2H), 0,94 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,93 (d, J=7,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 311.

Příklad 226

Ethylester (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz'5'-2-chlor-vin-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluoroctové soli (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(cz5·2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'5-propen-l-yl)pynOlidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 28 mg, 46%).

V

400 ’Η NMR (CDC1₃): δ 6,05 (d, J=7,5Hz, ΙΗ), 5,90 (dd, Jl=9 Hz, J2=6Hz, 1H), 5,31 (d, J=9Hz, 1H), 4,19 (q, J=7,5Hz, 2H), 4,06 (m, 1H), 3,82 (t, J=7,5Hz, 1H), 3,17 (m, 2H),

2,45 (m, 1H), 1,98 (s, 3H), 1,67 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 1,37 (m, 2H), 1,27 (t, J=7,5Hz, 3H), 0,91 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,89 (d, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺=331.

Příklad 227

Záměrně prázdné

Příklad 228

Ethylester (+)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2-difluor-vinyl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluoroctové soli (±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2difluor-vinyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'.s-propen-l -yl)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 28 mg, 57%).

401

Ή NMR (CDCb): δ 4,22 (q, J=7,5 Hz, 2H-), 4,14 (m, IH), 4,03 (m. IH), 3,29 (br, IH), 2,85 (m, IH), 2,52 (m, IH), 2,01 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,64 (m, 2H), 1,49 (m, IH),

1,38 (m, IH), 1,29 (t, J=7,5Hz, 3H), 0,93 (d, J=7,5Hz, 3H), 0,90 (d, J=7,5Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 333.

Příklad 229

Ethylester (±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 222 nahrazením trifluoroctové soli (±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za trifluoroctovou sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5karboxylové kyseliny (výtěžek: 48 mg, 75,5%).

‘H NMR (CDCb): δ 7,49 (d, IH), 7,26 (s, IH), 6,18 (d, IH), 4,18 (q, J=7,5Hz, 2H), 4,12 (m, IH), 3,91 (t, J=7,5Hz, IH), 3,51 (t, J=7,5Hz, IH), 3,40 (q, J=9Hz, IH), 2,64 (m, IH), 2,00 (m, IH), 1,82 (s, 3H), 1,75 (m, IH), 1,36 (m, IH), 1,26 (t, >9Hz, 3H), 0,855 (d, 3H), 0,84 (d, 3H).

MS: (M+H)⁺= 337.

v

402 • ·

Příklad 230

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3-(czs'propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

CH₃

AcHN.^Á A • N H Boc

O*Bu f

O

230A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-ethyl-2hydroxy)butyl-3 -(člv-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S.5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2oxo)butyl-3-(czY-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3-(cz.v-propen 1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,021 g, 51%).

MS: (M+H)⁺= 469, (M+Na)⁺ = 491, (2M+Na)⁺=959, (M-H)’ = 467.

230B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-ethyl2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester '5 (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R.2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamidQ-2-hydroxy)buty!-3 -(eispropen- l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0039 g, 100%).

403

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7, 52 (d, >10,3Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,68 (t, >8,8Hz, 1H), 3,16 (kvintet, J=8,5Hz, 1H), 2,41 (dt, J=13,2,8,3Hz, 1H),

1,81 (s, 3H), 1,59 (m, 1H), 1,53 (dd, >6,8,l,5Hz, 3H), 1,52 - 1,42 (m, 3H), 1,30 (m, 1H), 0,86 (t, >7,3 Hz, 3H), 0,83 (t, >7,3 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 313, (M+Na)⁺ = 335, (M-H)’ = 311, (2M-H)' = 623.

Příklad 231

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-methyl)pentyl-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

231 A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-l-Z-butóxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy2-methyl)pentyl-3-(cz's-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2oxo)pentyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -ř-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 -formyl)methyl-3-(czT-propen-1 yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny a methylmagnesiumbromid za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,0285 g, 45%).

MS: (M+H)⁺ = 469, (M+Na)⁺ = 491.

o

231B. Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-(l -acetamido-2-hydroxy-2methyl)penty 1-3-(cis- propen-1 -yl)-pyrrolidin- 5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2hydroxy-2-methyl)pentyl-3-(c7s-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0040 g, 100%).

'H NMR (DMSO-de): δ 9,25 (bs, ÍH), 8,75(bs, ÍH), 7,54 (d, >10,3Hz, ÍH), 5,45 (m, ÍH), 5,29 (m, ÍH), 4,37 (bt, >8,3Hz, ÍH), 4,22 (t, J=9,7Hz, 1H), 3,62 (t, J=8,8Hz, ÍH), 3,12 (kvintet, J=8,5Hz, ÍH), 2,41 (dt, >12,7, 7,8Hz, ÍH), 1,78 (s, 3H), 1,59 (m, ÍH),

1,53 (dd, >6,8, 2,0Hz, 3H), 1,4-1,25 (m, 4H), 1,17 (s, 3H), 0,81 (t, >6,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 313, (M+Na)⁺= 335, (M-H)‘ = 311, (2M-H)’= 623.

Příklad 232

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)pentyl-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

405

232A. t-Butylester (±)-(2R,3S_r5R_jl’R,2’S)-l-i-butoxykarbonyl-2-(l-aeetamido-2-ethyl-2hydroxy)pentyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l ’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2oxo)pentyl-3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l-formyl) methyl-3-(cz'.s-propenlyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 0,0222 g, 33%).

MS: (M+H)⁺ = 483, (M+Na)⁺ = 505, (M-H)’ = 481.

232B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2hydroxy)pentyl-3-(cis- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,TR,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(czT-propen-l-yl)-pyrrolidm-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboXylové kyseliny (výtěžek: 0,0035 g, 100%).

'H NMR (DMSO-dó): δ 9, l(bs, 1H), 8,75(bs, 1H), 7,53 (d, J=9,8Hz, 1H), 5,44 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,35-4,25 (m, 2H), 3,67 (m, 1H), 3,16(kvintet, J=8,5Hz, 1H), 2,41 (dt, J=12,8,7,9Hz, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,60 (m, 1H), 1,53 (dd, 8Hz, 3H), 1,46 (m, 2H), 1,4-1,20 (m, 4H), 0,86 (t, J=7,3Hz, 3H), 0,82 (t, 3=6,7 Hz, 3H). \

MS: (M+H)⁺ = 327, (M-H)’ = 325, (M+CF₃COOH)’ = 439, (2M-H)’ = 651.

406

Příklad 233

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-propyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 232 nahrazením propylmagnesiumbromidu za ethylmagnesiumbromid.

’H NMR (DMSO-d₆): δ 0,81 (t, 3H), 0,91 (t, 3H), 1,24-1,49 (m, 8H), 1,54 (dd, 3H), 1,60 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 2,41 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,69 (t, 1H), 4,28 (t, 1H), 4,35 (t, 1H), 5,17 (br s, 1H), 5,28 (td, 1H), 5,45 (dq, 1H), 7,54 (d, 1H), 8,80 (br s, 1H), 9,12(br s, 1H).

MS: (M+H)⁺=341,

Příklad 234

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R)-2-( 1 -acetamido-2-ethyl-2-methoxy)butyl-3-(cApropen-1 -yI)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

407

γ ο

.OtBu

234A. t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-ethyl-2(mcthylthio)methyloxy)butyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-ethyl-2methoxy)butyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s dimethylsulfoxidem a anhydridem kyseliny octové podle způsobu popsaného Marshallem, J. A. v J. Org. Chem. 1979, vol. 44, str. 2994, čímž se získá požadovaná sloučenina.

OtBu

234B. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-ethyl-2methoxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)- l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-ethyl-2(methylthio) methyloxy)butyl-3-(cz.s’-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat s Raneyovým niklem podle způsobu popsaného Marshallem, J. A. v J. Org. Chem. 1979, vol. 44, str. 2994, čímž se získá požadovaná sloučenina.

408

Trifluoroctová sůl (±)-.(2R₅3S,5R.,l ’R,2’S-) -2-(l aeetamid taMMau-2-ethyl-2-iuethoxy)butyl-3-(cz5propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2ethyl-2-methoxy)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cz'spropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Příklad 235

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-methoxy)pentyl-3(cz.v-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 234 nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,TR)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)-butyl-3(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny v příkladu 234A.

Přiklaď 236

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxymethyl-2hydroxy)pentyl-3-(cis- propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

• ·· 9 4 9 44 4 9 • ••4 44 44 4444

44 4 44494

409

236A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-((lethoxy)ethyloxymethyi)-2-hydroxy)pentyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-oxo)pentyl-3(cA-propen-l-yl)-pyrřolidin-5-karboxylové kyseliny (50 mg, 0,11 mmol) se nechá reagovat s (ethoxyethyloxymethyljtributylstannanem (260 mg, 0,66 mmol) podle způsobu popsaného Stillem, W. C. (J. Am. Chem. Soc. , 100,1481(1978)), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 26,8 mg, 43,8%).

'H NMR (CDC1₃): δ 0,89 (t, 3H), 1,19 (m, 3H), 1,29 (dd, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,52-1,73 (m, 8H), 1,99 (s, 3H), 2,44. (m, ÍH), 3,24-3,74 (m, 5H), 3,91 - 4,22 (m, 3H), 4,49 (m, ÍH), 4,62 (m, ÍH), 5,37 (m, 1Ή), 5,64 (m, ÍH), 5,97 - 6,41 (m, ÍH).

MS: (M+H)⁺= 557.

236B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxymethyl-2hydroxy)pentyl- 3-(cz.v-propen-l -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-( 1 ethoxy-2-ethoxymethyl)-2-hydroxy)pentyl-3-(cz\-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové

410 kyseliny (1.3.,5 mg, 0,024- mmol) se rozpustí v THF (1 ml) a nechá reagovat s 0,5 N HCI (1 ml) při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Rozpouštědla se odstraní a výsledná bílá tuhá látka se nechá reagovat s trifluoroctovou kyselinou(0,8 ml) v dichlormethanu (0,2 ml) při pokojové teplotě po dobu 6 hodin, reakce se koncentruje ve vakuu přes noc , čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 10,7 mg) jako bělavá tuhá látka.

’H NMR (DMSO-dé): δ 0,81 (t, 3H), 1,24-1,38 (m, 4H), 1,52 (dd, 3H), 1,62 (m, IH), 1,78 (s, 3H), 2,41 (m, IH), 3,11 (m, IH), 3,51 (q_AB, 2H), 3,77 (t, IH), 4,23 (t, IH),

4,40 (m, IH), 5,27 (t, IH), 5,45 (m, IH), 7,55 (d, IH), 8,87 (br s, IH), 9,26 (br s, IH).

MS: (M+H)⁺= 329.

Příklad 237

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-aeetamido-2-allyloxy-2-vinyl)ethyl-3-(cApropen-Nyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

237A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-allyloxy2-vinyl)ethyl-3-(čA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy-2-vinyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením allyljodidu za methyljodid (výtěžek: 28 mg, 80%).

MS: (M+H)⁺= 479, (M-H)' = 477.

237B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-allyloxy-2-vinyl)ethyl3-(cis- propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-ř-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2allyloxy-2-vinyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-(1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropén-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny,(výtěžek: 4 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-dó): δ 7,98 (d, >7,8 Hz, IH), 5,90 (m, IH), 5,55 (m, IH), 5,48 (m, IH), 5,32 (m, 2H), 5,26 (m, 2H), 5,16 (m, IH), 4,28 (m, 2H), 3,96 (m, IH), 3,79 (m, IH), 3,73 (m, IH), 3,66 (m, IH), 3,26 (m, IH), 2,40 (m, IH), 1,81 (s, 3H), 1,70 (m, IH),

1,64 (dd, >6,9,1,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺- 323, (M-H)’ = 321.

Příklad 238

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-l-(2,5-dihydrofuran-2yl))methyl-3-(6'A- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

412

• ·· · 4 • ··

4 4 • 44 44 • 4* »4 4 4 • 4

4

4 4 44 4

44

4 4 4

4 4

238Α. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-l-(2,5-dihydrofuran-2yl))methyl-3-(cz5-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-allyloxy-2-vinyl)ethyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (21 mg, 0,044 mmol) připravený podle postupu z příklad 23 7A se nechá reagovat sdichloridem bis(tricyklohexylfosfin)benzylidinrutheničitým [Grubbův katalyzátor] (7,5 mg, 0,009 mmol) v methylenchloridu (5 ml) při teplotě 25°C po dobu 2 hodin pod atomosférou dusíku, reakce se koncentruje ve vakuu a výsledný zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu použitím 75% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 18 mg, 90%).

MS: (M+H)⁺ =451, (M-H)' = 449.

238B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-l-(2,5-dihydrofuran-2yl))methyl-3-(ó-z.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -X-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-1 (2,5-dihydrofuran-2-yl))mcthyl-3-(cz.s·-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl -2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)-butyl3-(cz.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 7 mg, 100%).

Φ φ

413

(m, ΙΗ), 5,27 (m, ΙΗ), 4,68 (m, 2H), 4,58 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,68 (m, 1H), 1,60 (dd, 1=6,8,1,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 295, (M-H)' = 293.

Příklad 239

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 -acetamido-2-allyloxy-2-allyl)ethyl-3-(dspropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny

239A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l -acetamido-2aIlyloxy-2-allyl)ethyl-3-(č'z.s'-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

t-Butylester (2R,3 S,5R, 1 ’R,2'S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy2allyl)ethyl-3-(ó'z.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny se nechá reagovat podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením allyljodidu za methyljodid (výtěžek: 19 mg, 36%).

MS: (M+H)⁺= 493, (M-H)'= 491.

• · · · · ·

239B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-allyloxy-2-allyl)ethyl3-(czs-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2allyloxy-2-allyl)propyl-3-(ds-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester. (+)-(2R,3S,5R,l ’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(dspropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,7 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,06 (dd, J= 8,8 Hz, 1Ή), 6,92 (m, IH), 6,77 (m, IH),

5,50 (m, IH), 5,29 (m, 2H), 5,17 (m, IH), 5,05 (m, 2H), 4,27 (m, 2H), 4,10 (dd, J= 12,2,

5,4 Hz, IH), 3,83 (m, IH), 3,78 (m, IH), 3,40 (m, IH), 3,20 (m, IH), 2,46 (m, IH), 2,38 (m, IH), 2,20 (m, IH), 1,88 (s, 3H), 1,69 (m, IH), 1,63 (dd, J= 6,8, 1,5 Hz, 3H).

. MS: M + H)⁺= 337, (M-H) = 335, (M+Na)⁺= 359.

Příklad 240

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-l-(3,6-dihydro-2-//-pyran-2yl))methyl-3-(ds-propen-1 -yl)-pyrr°Iidin-5-karboxylové kyseliny.

·»

240A. t-Butylester (f)-(7R,3S.5R,!'R.2'S)-2 (-l-aeeíamide-l-(3₃6-dihydro-2-H=pyran-2415 yl))methyl-3(cz's-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-allyloxy-2-allyl)ethyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (11,5 mg, 0,023 mmol) připravený podle postupu z příkladu 239A se nechá reagovat s dichloridem bÍs(tricyklohexylfosfin)benzylidinrutheničiíým [Grubbův katalyzátor](3, 8 mg, 0,005 mmol) v methylenchloridu (3 ml) při teplotě 25°C po dobu 3 hodin pod atmosférou dusíku, reakce se koncentruje ve vakuu a výsledný zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu použitím 75% ethylacetát/hexanů, čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 5,7 mg, 53%).

MS: (M+H)⁺= 465, (M+Na)⁺= 487, (M-H)' = 463.

240B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-1-(3,6-dihydro-2-/7pyran-2-yl) methyl-3-(c/s-propcn-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-/-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-l-(3,

6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))propyl-3-(cz3^,-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-1 -/-butoxykarbony 1-2-( 1 -acetamido-2hydroxy)butyl-3-(c«-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 5,9 mg, 100%).

*H NMR (DMSO-dó): δ 8,04 (d, J= 8,8 Hz, ÍH), 5,77 (m, 2H), 5,50 (m, ÍH), 5,25 (m, ÍH), 4,21 (m, 2H), 4,14 (m, ÍH), 4,04 (m, ÍH), 3,81 (m, ÍH), 3,40 (m, ÍH), 3,23 (m, fc.

·· ·

416 lil), 2,41 (m. 1H), 2,09 (m, lll)_: 1,88 (s, 311), 1,83 (m, 1H), 1,70 (m, 111), 1,63 (d, T 6,8Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 309, (M+Na)⁺ = 331, (M-H) = 307.

Následující sloučeniny se syntetizují podle výše uvedených způsobů v příkladech 1 - 240.

Příklad 241

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-( 1 -acetamido-1 -(3,6-dihydro-2-H-pyran-2yl))-propyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,90 (d, 9,1 Hz, 1H), 5,79 (m, 2H), 5,48 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,24 (m, 2H), 4,17 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,64 (m, 1H), 3,19 (m, 1H),

2,42 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,78 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,56 (dd, J= 7,5, l-,5 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 309, (M+Na)⁺ = 331, (M-H)' = 307.

Příklad 242 φ φ

417

-··♦ -φ-φ-φ-0' φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ βΟ ~φ«

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'RS)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(czTpropen-l-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Ή NMR (DMSO): δ 7,7 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 5,61 (m, 1H), 5,19 (dt, J= 1,8, 11,0 Hz, 1H), 4,33 (dd, J= 6,7, 10,3 Hz, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,70 (dd, 1,8, 10,3 Hz, 1H), 3,54(q, > 6,1 Hz, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,35 (dt, J= 12,8, 6,8 Hz, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,7 (m, 1H), 1,59 (dd, J= 0,7, 7,3 Hz, 3H), 1,4 (m, 3H), 1,2 (m, 2H), 0,90 (t, J= 6,7 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺=299.

Příklad 243

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'RS)-2-(l -acetamido-2-hydroxy-3-ethoxykarbonyI)propyl-3-(cz'.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO): δ 7,75 (m, 1H), 5,60 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,55 - 4,25 (m, 3H), 4,15-4,0 (m, 3H), 3,9-3,6 (m, 3H), 3,15 (m, 1H), 2,45-2,3(m 2H), 1,9 (s, 3H), 1,8-1,5 (m, 5H), 1,2 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺= 343.

« 9 • 9

418 • 9

Příklad 244

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-niethyoxy-2-vinyl)ethyl-3(cřs-propcn-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-dé): δ 7,91. (d, >8,05Hz, 1H), 5,50 (m, 2H), 5,30 (m, 3H), 4,27 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,15 (s, 3H), 2,40 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,68 (m, 1H), 1,64 (dd, >1,83, 7,32Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 297, (M-H)'= 295. ‘

Příklad 245

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l^,R,2^,S)-2-(l-acetamido-2-eíhoxy-2-vinyI)ethyl-3-(cz'.s’propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-dó): δ 7,90 (d, >7,85 Hz, 1H), 5,57 (m, 2.H), 5,48 (m, 3H), 4,27 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,23 (m, 2H), 2,39 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,70 (m, 1H), 1,64 (dd, >1,47, 6,73 Hz, 3H), 1,12 (t, >6,83 Hz, 3H).

• •6 · β β '*··'· · *«R» *ν ⁴¹⁹

MS: (Μ UI)¹ 311, (M-HV 309.

Příklad 246 λ%Ρμ Γ\ —-ϊ<Χ

Η η ’ΟΗ

TFA

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(propeny-2yl))ethyl-3 -(cis- propen- l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-cb): δ 7,69 (d, J=9,75Hz, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 5,03 (m, IH), 4,86 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,21 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,59 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 297, (M-H)’ = 295.

Příklad 247

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-2-(propeny-2-yl)-3(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,65 (d, J=9,80 Hz, 1H), 5,48 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,22 (m, «β -- e . e« «« • ·· · · · · · · • · · · · · · ·

111), 2,44 (rn, 1H), 1,78 (s, 311). 1,75 (m. lil), 1,65 (s, 311), 1,58 (dd, 1=1,23, 6,70 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 297, (M-H)' = 295.

Příklad 248

O

TFA

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-methyoxy-2-(propeny-2yl))ethyl-3-(č7,s- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,77 (d, J=9,8 Hz, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,07 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,75 (m, 1), 3,48 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,08 (s, 3H), 2,40 (m, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,68 (m, 1H), 1,64 (dd, J=l,22, 6,71 Hz, 3H), 1,56 (s, 3H).

MS: (M+H)⁺ =311, (M-H)' =309.

Příklad 249

Trifluoroctovásůl (+)-(2R,3.S,5R,-lTt,2'S)-2-(l-aeetaniid0-2-eíhyl)butyl-3-(cA^propen=f421

yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,62 (d, >9, 21 Hz, IH), 5,58 (m, IH), 5,28 (m, IH), 4,37 (m, IH), 3,98 (m, IH), 3,57 (m, IH), 3,10 (m, IH), 2,45 (m, IH), 1,92 (s, 3H), 1,76 (m, IH), 1,62 (dd, >1,83, 6,72 Hz, 3H), 1,24 (m, 5H), 0,84 (t, >7, 61 Hz, 3H), 0,77 (t, >7,

MS: (M+H)⁺ = 297, (M-H)’ = 295.

Příklad 250

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz.v-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 7,76 (d, >9,2 Hz, IH), 5,46 (m, IH), 5,29 (rn, IH), 4,23 (m, IH), 3,63 (m, IH), 3,15 (m, IH), 3,0.1 (m, IH), 2,38 (m, IH), 1,87 (s, 3H), 1,71 (m, IH), 1,60 (m, 3H), 1,36 (m, IH), 1,20 (m, 4H), 0,83 (t, >7,3 Hz, 6H).

MS: (M+H)⁺= 297, (M-H)'= 295.

Příklad 251

,OEt • ·

422

4 4 4 • · · ·

9- - © 4 «

Ethylester (-)-(2 R, 3 S,5R,l'S)-2-(l-acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz.s-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny a ethylester (+)-(2S,3S,5S,l’R)-2-(l-acetamido-2-ethyl)butyí-3(cz.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Ethylester (±)-(2R,3S,5R,l^,S)-2-(l-acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz\-propen-l-yl)pyrroiidin-5-karbcxylové kyseliny (100 mg) se ehromatografuje jedním nastříknutím na sloupec kolony (5 x 30 m) HPLC. Sloupec je naplněn chirální stacionární fází Chiralpak AD zakoupenou od ChiralTechnologies. Mobilní fáze se skládá z 1:9 ethanol.hexanů a protéká rychlostí 117 ml/min.Byly zjištěny dva píky v (24-36) minutách (-)-(2R,3S,5R,l’S) (výtěžek: 45 mg) a v (66-96) minutě (+)-(2S,3S,5S,l’R)(výtěžek: 45 mg).

(-)-(2R,3S,5R,l’S) [cx]d = -26° (c = 0,78, dichlormethánu).

Příklad 252

Amonná sůl (-),-(2R,3S,5R, 1 ·’S)-2-( 1 -acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cA-propen-1 -y 1)pyrrolidin-5-karboxylátu.

Ethylester (-)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-acetamido-2-ethyl)butyl-’3-(cw-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (4,9 mg, 0,0157 mmol) připravený podle postupu z příkladu 251 se nechá reagovat s hydroxidem lithným (0,75 mg, 0,0314 mmol) ve směsi methanolu (0,75 ml) a vody (0,25 ml) při teplotě 0°C po dobu 7 hodin. Pak se přidá 0,1 N vodná chlorovodíková kyselina (1 ml), reakce se koncentruje ve vakuu a výsledný zbytek se čistí iontově výměnnou chromatografií na Dowexu 50WX8-400 od firmy Aldrich se silně kyselým ionexem. Zbytek se umístní na sloupec a promyje vodou (5 ml), poté se

423

eJuuje použitím 0,5 N vodného -hydroxidu amonného,sloučenina jako bezbarvá tuhá látka (výtěžek: 3,9 mg, 83%) požadovaná [ajo = -40°, c = 0,08 (voda).

’H NMR (DMSO-d₆): δ 7,71 (d, > 9,2 Hz, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 3,65 (t, > 8,5 Hz, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,33 (m, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,23 (m, 1H),

1,76 (s, 3H), 1,54 (dd, > 6,7, 1,8 Hz, 3H), 1,46 (m, 2H), 1,23 (m, 1H), 0,84 (t, > 7, 3 Hz,

MS: (M+H) = 285, (M+Na)⁺= 307, (M-H)' = 283.

[a]o = -40° , (c = 0,08, voda).

Příklad 253

OH

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3-(cz\propen-l-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

^lH NMR (MeOD-da): δ 7,8 (d, J=9,3Hz, 1H), 5,49-5,43 (m, 1H), 5,25 (dd, >1,95, 9,3Hz, 1H), 4,38-4,31 (m, 2H), 3,57-3,50 (m, 1H), 3,46 (dd, >4,9, 10,3 Hz, 1H), 3,42 (s, 3H), 3,35-3,32 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,16-3,09 (m, 1H), 2,46-2,40 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,72-1,65 (m, 1H), 1,55 (d, >6,8 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 315, (M+Na)⁺= 337, (M-H)’ = 313, (M+Cl)' = 349, (2M-H)' = 627.

'β ο

Příklad ,254

TFA

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rR,2'R)-2-(l-acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3-(cwpropen-l-yl)- pyrrolidin-5-karboxylqvé kyseliny.

’H NMR (MeOD-ds): δ 8,04 (d, J=8,5Hz, 1H), 5,52-5;48 (m, ÍH), 5,27 - 5,22 (m, 1H), 4,32-4,25 (m, 2H), 3,74-3,71 (m, ÍH), 3,53 (dd, >2,4, 10,1 Hz, ÍH), 3,33-3,25 (m, 2H), 3,31 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,21-3,17 (m, ÍH), 2,42-2,36 (m, ÍH), 1,86 (s, 3H), 1,711,63 (m, ÍH), 1,62 (d,>7,3 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 315, (M+Na)⁺= 337, (M-H)' = 313, (M+Cl)’ = 349, (2M-H)’= 627.

Příklad 255

Trifluóroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'R)-2-(l-acetamido-2-hydroxyethyl-2hydroxy)pentyl-3-(c/.s-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

425

Ή NMR (!}MSO-d₍,): § 7,60 (m, Π!), 5,46 (m, !!!), 5,30 (m, III), 4,54 (m, i ii),

4,35 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,98 (m,2H), 1,80 (s, 3H), 1,70-1,50 (m, 5H), 1,38 (m, 3H), 0,83 (m, 3H).

MS: (M+H)⁺= 343, (M-H)' = 341.

Příklad 256

Trifluoroetová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R)-2-(1 -acetamido-2-(3-pentyloxy))ethyl-3-(m-proen1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

*H NMR (MeOD-d₃): δ 5,69-5,59 (m, 1H), 5,33-5,25 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,34 (dd, J=7,8, 10,2 Hz, 1H), 3,73 (dd, J=4,8, 10,2 Hz, 1H), 3,58-3,47 (m, 2H), 3,38-3,24 (m, 1H), 3,27-3,20 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,90-1,78 (m, 1H), 1,70 (dd, J=l,7, 6,8 Hz, 3H), 1,60-1,50 (m, 4H), 0,92 (t, >7,5 Hz, 6H).

(M+H)⁺ = 327, (M+Na)⁺ = 349.

Příklad 257

OH

TFA • · ·

Ο β β • · ·

6« β

426

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-acetamido-2-(3-pentyloxy))ethyl-3-(czs-propen1-yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(MeOD-d₃) δ 5,73-5,66 (m, 1H), 5,32-5,25 (m, 1H), 4,36 (dd, >7,8, 10,2 Hz, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,68 (dd, >6,1, 10,2 Hz, 1H), 3,61 (d, >4,4 Hz, 2H), 3,35-3,23 (m, 1H), 3,24=3,16 (m, 1H), 2,65-2,55 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,92 - 1,80 (m, 1H), 1,70 (dd, >2,0, 7,1 Hz, 3H), 1,59-1,47 (m, 4H), 0,94-0,88 (m, 6H).

(M+H)⁺ = 327, (M+Na)⁺ = 349.

Příklad 258

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,2'S)-2-(l -acetamido-2-ethoxy-3-vinyl)propyl-3-(czTpropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

*H NMR (DMSO-dó): δ 8,01 (d, > 8,6 Hz, 1H), 5,76 (m, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,05 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 1,87 (s, 3H),

1,69 (m, 1H), 1,63 (dd, >6,7, 1,2 Hz, 3H), 1,12 (t, >6,7 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺ = 325, (M-H)’ = 323.

Příklad 259

• φφ ·· ·· φ · β- · a 99 a • · ' Φ · φ Φ

Φ » ’,β β Ο 9 Ο

Φ . Φ ΦΦΦ Φ

ΦΦΦ Φ Φ9 9 99 99

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-allyloxy)ethyl-3-(cw-propen-lyl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

, ’Η NMR (DMSO-ds): δ 9,16 (m, 2H), 8,13 (d, J=7,5Hz, 1H), 5,88 (m, 1H), 5,50 (m, 1H), 5,15-5,32 (m, 3H), 4,35 (m, 211), 3,95 (m, 2H), 3,61 (m, 1H), 3,40 (m, 2H), 3,20 (m, III),2,40 (m, 111), 1,87 (s, 311). 1,72 (m, 1H), 1,62 (d, .16,2,311).

MS:(M+1) = 297, (M+23) = 319, (2M+23) = 615.

Příklad 260

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'RS)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-(2ethoxykarbonyl))pentyl- 3-(m-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR (DMSO-ds): δ 7,57 (d, J=10Hz, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,29 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,65-1,56 (m, 2H), 1,53 (m, 3H), 1,50-1,30 (m, 3H), 1,21 (t, J=7,5 Hz, 3H), 0,80 (t, J=7,5 Hz, 3H).

** * ·· e« ee

428;

···· · ····«· ® ..-9. · 9 - - . -9 . 9.- - · 9 - · · -9 9 ^:··· ' ··, »·« eeee __ee

MS: (M+H)⁺= 385, (M-H)’ = 383.

Příklad 261

.OH

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TS ,3'R)-2-( 1 -acetamido-3,4-dihydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

'H NMR(CD₃OD): δ 5,58-5,70 (m, IH), 5, 24-5,38 (m, IH), 4,34-4,50 (m, 2H), 3,58-3,72 (m, 2H), 3,42-3,48 (d, 2H), 2,50-2,63,(m,, IH), 2,04 (s, 3H), 1,77 - 1,95 (m, IH), 1,65-1,76 (m, 4H), 1,50-1,63 (m, IH).

MS: (M+H)⁺=301,

Příklad 262

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’S)-2-(l-acetamido-3,4-dihydroxy)butyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

429 <··· ·· ’Η NMR (CD-jOD): δ 5,58-5,72. (m, 1Η), 3,25.-537 (m. 1H), 430-4.45 (m, 2H),

3,63-3,77 (m, 2H), 3,44-3,49 (d, 2H), 2,50-2,63 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,761,95 (m, 2H),

1,65-1,75 (m,4H).

·· ·· ·· c » · β e β • · · · · t β β · « · • · · · ·

MS: (M+H)⁺= 301.

Příklad 263

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-methoxy)ethyl-3-(czs-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

H₃CO

263A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-1 -/-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2methoxy)ethyl-3 -(czT-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 84A nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3S,5R,l’R)-l-/-buťoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2hydroxy)ethyl-3-(cz'.v-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cispropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 4,2 mg, 20%).

MS: (M+H)⁺ = 427, (M+Na)⁺ = 449, (M-H)' = 425.

H₃CO' ·«

430

7'

CH

AcHN

.OH

TFA

263B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-acetamido-2-methoxy)ethyl-3-(cApropen-1 -yl)- pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením t-butylesteru (±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R)-1 -Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2methoxy)ethyl-3-(c A-propen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butylester (+)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-Z-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 0,0031 g, 100%).

*H NMR (DMSO-d₆): δ 8,12 (d, >7,9Hz, IH), 5,50 (m, IH), 5,23 (m, IH), 4,33 (m IH), 3,56 (dd, >9,7, 8,0 Hz, IH), 3,4-3,3 (m, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,19 (m, IH), 2,39 (dt, >12,8, 7,3 Hz, IH), 1,86 (s, 3H), 1,71 (m, IH), 1,61 (dd, >6,7, 1,8 Hz, 3H).

MS: (M+H)⁺= 271, (M+Na)⁺ = 293.

Příklad 264

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3 S,5R, TR,2'S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-3-dimethyl)butyl-3(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

CH₃

ACHN, ,O'Bu

264A. t-Butylester (±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-l-í-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy3-dimethyl)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny.

431

4 4·	4 4 9,	49			44
·« « 4	'•4 4 9	4	9	4	9
4 44	4 4	4	4	9	4
					•
4 4 ·	9- 4	4	4	«	4
449 94	• 49 *994	99			• 9

Požadované sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 B nahrazením t-butyllithia za ethylmagnesiumbromid, čímž se získá t-butylester (±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S)-1 -t-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3-dimethyl)butyl3-(ds-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,5 mg, 11 %).

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S) MS: (M+H)⁺ = 469; (M-H)’ = 467.

264B. Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy-4vinyl)butyl-3-(ds- propen-1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu popsaného v příkladu 41 C nahrazením (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-t-bůtoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy-3dimethyl)butyl-3-(ds-propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny za t-butyl-ester (±)(2R,3S,5R,l’R,2’S)-l-i-butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(ds-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny (výtěžek: 2,3 mg, 100%).

’H NMR (d₂O): δ 5,40 (m, IH), 5,10 (t, >5,5 Hz, IH), 4,13 (t, >9,2 Hz, IH), 3,46 (m, IH), 3,22 (d, >7,3 Hz, IH), 3,00 (m, IH), 2,41 (m, IH), 1,70 (s, 3H), 1,45 (m, IH),

1,39 (d, >4,9 Hz, 3H), 1,07 (t, >5,5 Hz, IH), 0,70 (s, 9H).

MS: (M+H)⁺ =313.

Použitím výše popsaných způsobů a obecných znalostí známých odborné veřejnosti mohou být připraveny sloučeniny vynálezu, které jsou znázorněny tak, že se vezme jedno jádro z tabulky l(kde Ac znamená acetyl), jeden substituent Y z tabulky 2, jeden substituent R z tabulky 3 a jeden substituent R³ z tabulky 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f nebo 4g.

·· • ·

Tabulka 1

Y.

AcHN. 7 > /OR '3Ř Β

R^3H H O

AcHN

OR !,ú N R^3H h

CH3SO2HN.__7 v /OR

R^{3 H} H O

CHaSOaHN^V > OR I?Λ Ν 1T r^3M H o cf₃c-hn. >. / tis í , 5 o ^YII

OR CF3C-HN.J > _/OR

Tabulka 2

HoC

H₃c

H

Cl

O O

N=< O—( π₃ς

H₃C h₃c .0 s-4

S^N \=z p

-436.

112 ť, h₃c cf₃

F,C

Cl

F,C CH, h₃c

109

110 ch₃ h₃c cf₃f₃c^z cf₃ f₃c ch₃

111

F,C

Cl

F

F₃C _zCF₃HaC

113	114	115	116
_Cl	w	Cl\ ^F	Cl /=(
wwv		vSWV* ·	Γ
117	118	119	120

Cl

121 ^cw

Cl

122

123

C· ·· • · · · • · ·

Cl -WZV 124

Cl F

M

125

F A 126

Cl.

127

Cl. ,CF₃

128

F₃C Cl /=\ F₃C

129

CF, f₃c Cl

A

130 ř₃C Cl ^F3C\₌₌/^CF3 cM

131

132

133

F P^F3

137

Cl C, CF₃

F₃C Cl

134

F p^F3 F

138

135

F CF,

F,C

139

Cl. .CF,

F,C

136

140 » · ·· b“437 • · ·»

f₃c f

X

141 f₃c. / P^F3

F •JWW f—

142

F F₃C CF₃

F C⁷^ r ₃u

145

146

Cl. F E __ Cl /\

H₃C h₃c

149 150

H₃C CF₃

K

Cl

153

F₃C CH₃ cX

157

143

H,C ,F

Cl

147

P P^H3 CI^Z

151

H₃C

F. CF₃

H

161 _FK

F₃C

165

NH

H,N-#

169 f₃c f f₃c

144

H₃C Cl

XL

148 <\_P^H3 F

152 h₃c Cl f₃c „^CX^F> rl3tz

F₃C Cl H₃C '

154

155

156

Cl ch₃ H₃C_CF₃ H₃CI=

GX F C~Y f₃c

H,C νΑΛΑΑΑ

158

159

160 ^F>T

X^s

H₂N

170

162

166

F₃C F

K h₃c X

F₃c

H₂N h₃c

163

167

171 f₃c ch₃

X

164

Cl f cf₃

H

172

168 /

HoN

2'v

NH

H,nA

NH

173

174

Tabulka 3

-H i

438

-CH ·» ·· fefe fe · · · · · • · · · · fe · · · β - ca^h>

CH₃ 5 n_Z~^CH’ i > HCH₃ ch_{3 7} ch₃ ? \

CH_{3 g}

H,C

CH, <CH₃ ch_{3 13} < /^CH3

MtCH₃ ch₃ ,j

H\ z^CH3

N

CH₃ ,14 £H₃

CH₃ |2

ACH₃

-N

CH

15

V^:··

439.

·· 4»

S'

440ř'

4· ♦ et • · “* 4 4 4 · · 4

V<«w

p-r-

*4^· 4·'“·

441 „

-v 4 *·.*· .«i* •'•' •H γ • · · ·

—..... -Tabulka 4b r ‘a* J,

OH

OCH₃

OH

O CH₃

OH CH₃

OCH₃

Ό CH₃

OH CH₃

OH

HO γ OH • OH

442

och₃ och₃

CH3O γ och₃och₃

ΟΗ

Η₃0γΧ,_ο^χ_εΗ3

^H3YV>

H₃c-^>>_OH

ΟΗ ^Η3°Ύ^*ΟΟΗ₃

fci

443

h₃c.

h₃c

OH

OH ³ OH

OH CH₃

O-^0H <1 —CH₃ <Υ^Η .

Tabulka 4c

H,C

Ach₃

OH

h₃c

CH

CH₃

ΛΑΑ.

··

Φ·

449

. Τ' ch₃. H₃L'·^	Τ ch₃		h₃c W^Hí
145	146	147	148
LIT	\χρ	I CH₃	Ό* CH3 V¹--¹
			ch₃
149	150	150A	150B
CH₃-p CH₃	Γ Γ	ch₃~~ ch₃	ch₃ ch₃
		ch₃
151	152	153	154

CH₃ ch₃

CH

H₃C ch₃ ch₃ ch₃

163 164 165 h₃c ch₃166

H₃C·

h₃c

OH

167

OH

16S

OH

369

OH

170 ·· • ·

450

·· ♦· • · · a • · · I • · · a • · · a «· ··

• ·

456

Tabulka 4e

4

2

OH h₃c^>-^oh

23

H₃C ch₃

OH

Ť

457

*> · • '

459 ·· ·· • 4 • ··

4 « • 4 4 44 4

Tabulka 4f

CH,

· 4 4 • 4

460 ♦ « » <··>«·

W . · · · · · · • ·· ···· ·* · ··

ί/

4<

_ 461

---·/*·· <

<4 ·· ·» 44 ·· ·' · 4 · 4 9 « 4 . '4 4 4 • «·«·«· 4 4 · · 4 · <44 4444 ·♦ <4

,ιΐ

HO, ,-ch₃ ch₃

109

Tabulka 4g

HiC·

CH ₃OH

h₃c

.Λ-™, AOH 2

_yCH₃

OH

464 ·'< · * 19 9 ’ i 9 9 9 9 ί 99 '¥ · · · · · • · · · 1 ····<· 9 9 9 9 9 9 9 9 9 «·· 99 \999 9999 ·· 91

··

469 ··

HgC^U och₃

OCH

173

h₃c

UOH

OH

177

OH

-OH

178

h₃c^J,-och₃ '^OH

181

Γ³ L

K>-och₃ ''—OH

182

OCH₃—ÓH

183

OCH₃

-OH

184

470

• '· φ φ φ φφφ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ * φ · φ φ φ φ φ φ φ φ

471 • ·· β · » «

·· tt • · · « « · · · f · « * • · · « • · ··

213 214

215 216

Schopnost sloučenin vynálezu inhibovat neuraminidasu in vitro může být stanovena podle níže popsaného způsobu.

Stanovení inhibice neuraminidasy

Chřipkový virus A/N1/PR/8/34 se kultivoval v alantoické kavitě fertilizováných vajec a čištěn odstřeďováním v cukerném hustotním gradientu provedeným podle „Fundamental Techniques in Virology (K. Habel a N. P. Salzman, eds.) str.92-86, Academie Press, New York). Chřipkový virus A/N2/Tokyo/3/67 se získal z tkáňové kultury supematantů viru kultivovaného na buňkách MDCK. Neuraminidasa viru B/Memphis/3/89 se připravila digerováním viru s TPCK-trypsinem následované centriíugací a pak čištěním katalytických fragmentů neuraminidasy použitím odstřeďování v cukerném hustotním gradientu a dialýzou podle způsobu uvedeného ve výše citované literatuře (Air, G. M., Laver, W. G., Luo, M., Stray, S. J., Legrone, G,. a Webster, R. G. (1990) Virology 177, 578-587).

Při provádění stanovení inhibice neuraminidasy se využívala enzymatická aktivita neuraminidasy spojená s celým virusem A/N1/PR/8/34 nebo A/N2/Tokyo/3/67 nebo

472

• ··	• ··	« ·	99
·· · ·	·· · ·	• · ·	•
♦ ··	• ·	< · ·	•
			•
• · · ··· ··	• · ··· ··	* · » « ·	• ··

S Η1’3.νίϊ1ΤΪ1- katalytickým fragmentem B/Memphis/3/89. Celý virus nebo katalytický fragment se příslušně zředil v den provedení experimentu 20 mM N-ethylmorfolinem, 10 mM chloridu vápenatého, pufrem o pH 7,5. Stanovení inhibice neuraminidasy se provádělo ve 20 mM N-ethylmorfolinu, 10 mM chloridu vápenatého, pufru o pH 7,5 s 5 % DMSO. Reakční směsi obsahovaly neuraminidasu, inhibitor (testovací sloučenina) a 20 - 30 μΜ substrátu - 4-methylumbelliferyl sialové kyseliny v celkovém objemu 200 μΐ a umístnily se do plátů tvaru U o 96 zkumavkách. Pro každé měření hodnoty Kj se typicky používalo pět až osm koncentrací inhibitoru. Reakce se iniciovaly přidáním enzymu a poté zpracovávaly po dobu 30 - 60 minut při pokojové teplotě. Pro každou zkumavku plátu byla změřena během reakce fluorescence jednou za minutu pomocí měřícího přístroje Fluoroskanu II (ICN Biomedical) vybaveného filtry 355 +/- 35 nm pro excitaci a filtry 460 +/- nm pro emisi. Měřící přístroj byl řízen softwarem DeltaSoft II (Biometallics) na počítači Macintosh. Pokud sloučenina během reakce vykazovala lineární reakční rychlost, pak reakční rychlosti pro studie odezvy na dávku byly dosazeny do rovnice 1 pomocí programu pro nelineární regresi (Kaleidagraph) ke stanovení celkové hodnoty Ki (Segel, I.

H. (1975) in Enzyme Kinetics, str. 105-106, Wiley-Interscience, New York).

(1-Vj/Vo) = [I]/{[I] + Kj (1 +[S]/Km)} rovnice !

V rovnici 1 označují Ví a Vo inhibované a neinhibované reakční rychlosti a K_m = 16 - 40 μΜ v závislosti na testovaném kmenu neuraminidasy. Pro ty sloučeniny, které vykazovaly malou inhibicí vazby (Morrison, J. F. (1982) Trends Biochem. Sci. 7, 102105), se provedl druhý experiment způsobem, který byl identický k prvnímu, kromě toho, že se inhibitor a neuraminidasa předem inkubovaly za přítomnosti substrátu po dobu 2 hodin při pokojové teplotě před iniciací reakcí se substrátem. Analýza dat výsledných lineárních reakčních rychlostí se provedla výše popsaným způsobem.

Reakce 2 se používala k měření hodnot Kj v rozmezí menším než nanomol. (Morrison, J. F. a Stone, S. R. (1985) Comments Mol. Cell Biophys. 2, 347 - 368).

V = A { sqrt {(Ki' + It - Et)^A2 + 4Ki' Et} - (Ki'+ It - Et)] rovnice 2

473

• ··	• ··	¥¥		·¥
• ¥ ·	·· · ¥	•	¥	¥	¥
• ··	• ·	•	¥	¥	¥
• · ·	• ·	¥	¥	¥	¥ ¥
·· ··	··· ····	¥·		>·

V rovnici 2 je V = rychlost; A = akcat[S]/2(Km + (SJ); α je faktor konvertování jednotek fluorescence na molámí koncentraci; Ki' = Ki (1 + [S]/K_m); It = celková koncentrace inhibitoru a Et = celková aktivní koncentraci neuraminidasy.

Sloučeniny vynálezu inhibují neuraminidasu chřipky kmene A a neuraminidasu chřipky kmene B s hodnotami Kj v rozpětí 0,1 nanomol až přibližně 500 mikromol. Výhodné sloučeniny vynálezu inhibují neuraminidasu chřipky kmene A a neuraminidasu chřipky B s hodnotami Ki v rozpětí 0,1 nanomol až přibližně 3,5 mikromol.

Schopnost sloučenin vynálezu inhibovat vznik plaků v buněčných kulturách může být stanoveno způsobem popsaným níže.

Stanovení inhibice vzniku plaků v buněčných kulturách

Buněčné kultury: Buňky MDCK zakoupené u American Type Culture Collection se kultivovaly v Dulbecco's Modified Eagle Medium (dMEM) s glukosou (GibcoBRL) doplněnou 10% fetálního telecího séra (JRH Biosciences), 40 mM pufru HEPES (GibkoBRL) a antibiotiky (GibkoBRL). Buňky se rutinně kultivovaly v baňkách nebo válcovitých baňkách při teplotě 37°C a 5% CO₂. Shlukující buňky se zredukovaly na hostotu 500 000 buněk v ml pomocí reakce monomolekulámí vrstvy s trypsinem/EDTA (GibkoBRL), poté následovalo odstřeďování buněk, resupenzace a zředění na růstové prostředí (substrát). Buňky se naočkovaly v objemu na oblast povrchu v poměru 1 ml na 1 cm² růstového povrchu.

Postup stanovení plaků: Na souvislém nárůstu buněk MDCK v 6 plátech zkumavek se odstraní růstové médium a buňky se překryjí 1,5 ml stánovovacího média (dMEM s 1% fetálním telecím sérem, 40 mM HEPES pufru a antiobiotik) obsahujícího předem smíchaný virus (chřipka A/Tokyo/3/67 [H2N2] (40 - 100 jednotek tvořících plaků) a 2 x koncentrace testované sloučeniny. Pláty se umístnily na centrovací desku a inkubovaly po dobu 2 hodin při pokojové teplotě. Během fáze adsorpce viru na agar se připravilo nanášecí médium. V mikrovlně troubě se roztavila 2 x agaróza (konečná koncentrace 0,6 % agarosy) v nanášecím médiu (dMEM s 40 mM prufrem HEPES) a pak umístnil do vodní lázně o

I», fe

474 teplotě 48°G pro temperování. Po skončení fáze adsorpce viru se na médium přidalo 1,5 ml agaru a smíchal se s 1,5 ml viru a testovací sloučeniny obsahující médium na jednu zkumavku.

Kultury se inkubovaly při teplotě 35°C po dobu nezbytnou pro vznik plaků, běžně několik dnů. Plaky se ukotvily 3,7% formalinem v PBS po dobu 20 minut, poté následovalo odstranění nanášecího agaru a barvení 0,1% krystalovou violetí v destilované vodě po dobu 15 minut. Plaky se spočítaly a stanovila se koncentrace EC 50 z vícenásobných koncentrací testované sloučeniny pomocí regresní analýzy.

Zásobní tanky s virem: Zásobní tanky se připravily ve válcovitých baňkách se souvislým růstem MDCK a inkubovaly při teplotě 37°C v DMEM doplněném 1% FCS, 40 mM pufru HEPES a antibiotiky. Baňky se inokulovaly mnohonásobnou injekcí přibližně 0,1 jednotky vzniku plaku pro každou buňku. Z válcovitých baněk se odebíralo až po kompletním patologickém účinku viru na buňku. Zásobní tanky se připravily ze supematantu vznikající ho z centrifugace média a buněčného lyzátu pomalou rychlostí. Zásobní tanky se titrovaly a uskladnily při teplotě 80°C.

Sloučeniny vynálezu inhibovaly vznik plaků chřipkového viru A/N2/Tokyo v MDCK buňkách s hodnotami EC50 mezi 100 mikromoly až přibližně 1 nanomolem. Výhodné sloučeniny vynálezu inhibovaly vznik plaků viru chřipky A/N2/Tokyo v MDCK buňkách s hodnotami EC50 mezi 1 mikromolem až přibližně 1 nanomolem.

Sloučeniny vynálezu mohou být testovány na protivirovou aktivitu in vivo použitím způsobu popsaného níže.

Způsob in vivo testování účinnosti proti viru:

Samičím myším BALB/c se provedla anestézie (sevoflurane) a intranazálně se inokulovaly (IN) 0,1 ml chřipky kmene A VR-95 (Puerto Rico PR8-34) při 10'² (zředěný ze zmrazeného zásobního tanku). Tato koncentrace viru trvale vytvářela onemocnění u myší v průběhu 5 dnů inokulace. Zvířata se ošetřovala 4 hodiny před injekcí a 4 hodiny po injekci, a potom periodicky jednou z následujících terapií: bez ošetření; testovací sloučeninou (100, 25, 6,25, 1,39 mg/kg/denně BID, PO); nebo nosičem (sterilní voda BID, PO). Skupina deseti zvířat (označená jako kontrolní) se inokulovala 0,9% fyziologickým roztokem. Byla stanoveno procentuální hodnota přežití. V pátý den se odejmuly plíce, • · zvážily se a stanovilo se skóre O, 1, 2, 3 nebo 4 na základě procentuální konsolidace (0; 10

- 20; 25 - 50; 50 - 75; 75 - 100%). Navíc každý pár plic se podrobil analýze obrazu ke stanovení objektivní plicní konsolidace v procentech.

475

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být používány ve formách solí odvozených od anorganických nebo organických kyselin. Tyto soli zahrnují, ale není to nikterak limitováno, následující: acetát, adipát, alginát, citrát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, bisulfát, butyrát, ester kyseliny kafrové, kafrsulfonát, diglukonát, cyklopentanpropionát, dodecylsulfát, ethansulfonát, glukohepťanoát, glycerofosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, fumarát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxy-ethansulfonát(isethionát), laktát, malát, methansulfonát, nikotinát, 2-naftalensulfonát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartrát, thiokyanát, p-toluensulfonát a undekanoát. Také bazické skupiny obsahující dusík mohou být kvatemizovány pomocí agens, např. nižší alkylhalogenidy, např. methyl, ethyl, propyl a butylchloridy, bromidy a jodidy; dialkylsulfáty, např. dimethyl, diethyl, dibutyl a diamyl sulfáty, halogenidy s dlouhým řetězcem, např.decyl, lauryl, myristyl a stearyl chloridy, bromidy a jodidy, aralkylhalogenidy, např. benzyl a fenethylbromidy a další. Tímto způsobme se mohou obdržet také ve vodě nebo v oleji dispeřgovatelné produkty.

Příklady kyselin, které mohou být používány k vytvoření farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou, zahrnují riapř. anorganické kyseliny, např. kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová a kyselina fosforečná a např. organické kyseliny, např. kyselina šťavelová, kyselina maleinová, kyselina sukcinová a kyselina citrónová. Další soli zahrnují soli s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, např. sodné, draselné, lithné, vápenaté nebo hořečnaté soli nebo s amonnými solemi nebo soli N(R**)₄ ⁺ (kde R** je nižšíalkyl).

Navíc se uvažují také soli sloučenin tohoto vynálezu s jednou z přirozeně vyskytujících se aminokyselin.

.Z

'............... ....... 476,

Výhodné soli sloučenin vynálezu zahrnují hydrochloridové, methansulfonátové, sulfonátové, fosfonátové, a isethionátové soli.

Sloučeniny vzorce I, II a III tohoto vynálezu mohou mít substituent, který je kyselinová skupina (naříklad , -CO2H, -SO3H, -SO2H, -PO3H2, -PO2H). Sloučeniny vzorce I, II a III tohoto vynálezu mající substituent, který je ester takovéto kyselinové skupiny, jsou také zahrnuty v tomto vynálezu. Takové estery mohou sloužit jako prekurzory léčiv. Prekurzory léčiv tohoto vynálezu jsou metabolizovány in vivo k získání výše uvedených kyselého substituentu parentálních sloučenin vynálezu I, II nebo III. Prekurzory léčiv mohou také sloužit ke zvýšení rozpustnosti těchto látek a/nebo k absorpci z gastrointestinálního traktu. Tyto prekurzory léčiv mohou také sloužit ke zvýšení rozpustnosti pro intravenózní aplikaci sloučenin. Prekurzory léčiv mohou také poskytovat zvýšení hydrofobicity sloučenin. Prekurzory léčiv mohou také sloužit ke zvýšení perorální biologické dostupnosti sloučenin zvýšením absorpce a/nebo snížením prvotního metabolismu. Prekurzory léčiv mohou také poskytovat zvýšení penetrace sloučenin přes tkáň, což vede ke zvýšení aktivity v infikovaných tkáních a/nebo redukci míry clearance.

Estery, které jsou brány v úvahu v tomto vynálezu zahrnují:

alkylestery, zejména nižšíalkyl estery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, ethyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sec-butyl, izobutyl, t-butyl, n-pentyl estery apod.;

' alkoxyalkylestery, zejména, nižšíalkoxynižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, methoxymethyl, 1-ethoxyethyl, 2-methoxyethyl, izopropoxymethyl, t-butoxymethyl estery apod.;

alkoxyalkoxyalkylestery, zejména, alkoxyalkoxy-substituované nižšíalkyl estery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 2-methoxyethoxymethyl estery apod.;

aryloxyalkylestery, zejména, aryloxy-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, fenoxymethylestery apod., kde arylová skupina je výše definovaným způsobem nesubstituovaná nebo substituovaná;

haiogenalkoxyaikylestery, zejména, halogenalkoxy-substituo varié * nižší alky lestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 2,2,2-trichlorethoxymethylestery apod.;

alkoxykarbonylalkylestery, zejména, nižšíalkoxykarbonyl-substituované nižšíalkyl estery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, methoxykarbonylmethylestery apod.;

kyanoalkylestery, zejména, kyano-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, kyanomethyl, 2-kyanoethylestery apod.;

thioalkoxymethylestery, zejména, nižšíthioalkoxy-substituované methylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, methylthiomethyl, ethylthiomethyl estery apod.;

alkylsulfonylalkylestery, zejména, nižšíalkylsulfonyl-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 2-methansulfonylethylestery apod.;

arylsulfonylalkylestery, zejména, arylsulfonyl-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 2-benzensulfonylethyl a 2-tbluensulfonylethylestery apod.;

acyloxyalkylestery, zejména, nižšíalkylacyloxy-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, formyloxymethyl, acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, acetoxyethyl, pivaloyloxyethyl estery apod.;

cykloalkylkarbonyloxyalkylestery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, cyklopentankarbonyloxymethyl, cyklohexankarbonyloxymethyl, cyklopentankarbonyloxyethyl, cyklohexankarbonyloxyethyl estery apod.;

arylkarbonyloxyalkyl estery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, benzoyloxymethyl estery apod.;

(alkoxykarbonyloxy)alkylestery, zejména, (nižšíalkoxykarbonyloxy)-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, methoxykarbonyloxymethyl,

478 • ·'· • * · · • » ' · ·* ι ·· * ee ♦♦·« -9 9 9-9 --*< ^thoY3zVarK/YT35dov''w,Txi£*t..l-xw..1.

•V ťXX\> 2 VJ XVVXX ΌΟ XXj X Ο 2\.J X ΧΧ<- VX1J λ _?

Ζ ΤΥΛ L r1 rý rl., iixiuáy jvcti“ooiij'ivAy yc liry ij

Ω Z^X-L· ,u„„k j_____\ z, -\c QioAy Kaiuvtiy roxyjethylestery apod.;

(cykloalkyloxykarbonyloxy)alkylestery, zejména, (cykloalkyloxykarbonyloxy)substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, cyklohexyloxykarbonyloxymethyl, cyklopentyloxykarbonyloxyethyl, cyklohexyloxykarbonyloxypropylestery apod.;

oxodioxolenylmethylestery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, (5-fenyl-2oxo-1,3 -dioxolen-4-yl)methyl, [5-(4-methylfenyl)-2-oxo-1,3 -dioxolen-4-yl]methyl, [5 -(4methoxyfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl]methyl, [5-(4-fluorofenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4yljmethyl, [5-(4-chlorfenyl)-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl]methyl,(2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-methyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-ethyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-propyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-izopropyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methyl, (5-butyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)methylestery apod.;

ftalidylestery, kde fenylový kruh ftalidylové skupiny je výše definovaným způsobem nesubstituován nebo substituován, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, ftalidyl, dimethylftalidyl, dimethoxyftalidylestery apod.;

arylestery zahrnující, ale není to nikterak limitováno, fenyl, nafiyl, indanylestery apod.;

arylalkylestery, zejména, aryl-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, benzyl, fenethyl, 3-fenylpropyl, naftylmethylestery apod., kde arylová část arylalkylové skupina je výše uvedeným způsobem nesubstituována nebo substituována;

dialkylaminoalkylestery, zejména dialkylamino-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, 2-(N,N-dimethylamino)ethyl, 2-(N,Ndiethylaminojethylester apod.;

479 (heíeroeykljalkylesíery, zejména, heteroeykl-substrtuované nižšíalkylestery, kde heterocykl je dusík obsahující heterocykl, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, (heterocykl)methylestery apod., kde heterocyklická část (heterocykl)alkylové skupiny je výše definovaným způsobem nesubstituována nebo substituována; a karboxyalkylestery, zejména, karboxy-substituované nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, karboxymethylestery apod.;

apod.

Výhodné esterové prekurzory léčiv sloučenin vzorce I, II nebo III obsahující kyselinové skupiny jsou nižšíalkylestery, zahrnující, ale není to nikterak limitováno, ethyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sec-butyl, izobutyl, t-butyl, n-pentyl estery a benzylestery, kde fenylový kruh je výše definovaným způsobem nesubstituován nebo substituován.

Způsoby přípravy esterových prekurzorů léčiv sloučenin vzorce I, II nebo III jsou dobře známy v oboru a zahrnují:

reakci kyseliny s odpovídajícím halogenidem (například , chlorid nebo acylchlorid) a bází (například , triethylamin, DBU, Ν,Ν-dimethylaminopyridin apod.) v inertním rozpouštědle (například, DMF, acetonitril, N-methylpyrrolidon, apod.);

reakci aktivovaného derivátu kyseliny (například chlorid kyseliny, sulfonylchlorid, monochlorfosfonát, apod.) s odpovídajícím alkoholem nebo alkoxidem soli; apod.

Další příklady prekurzorů léčiv předloženého vynálezu zahrnují estery hydroxylsubstituované sloučeniny vzorce I, II nebo ΠΙ, které se acylovaly s chráněným nebo nechráněným aminokyselinovým zbytkem, fosforečnanovou funkcí, hemisukcinátovým zbytkem, acylovým zbytkem vzorce R^,00C(O)- nebo R¹⁰⁰C(S)-, kde substituent R¹⁰⁰ je atom vodíku, nižšíalkyl, halogenalkyl, alkoxy skupina, thioalkoxy skupina, alkoxyalkyl, thioalkoxyalkyl nebo halogenalkoxy skupina nebo acylový zbytek vzorce R^a-C(R^b)(R^d)C(O)- nebo R^a-C(R^b)(R^d)-C(S)-, kde substituenty R^b a R^d jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku nebo nižšíhoalkylu a substituent R^a je -N(R^e)(R^f),-OR^e nebo -SR^e, kde substituenty

480

Ť?q D rcoii rrorzojHjol<a xrtr.l^-no.rx·,

--».· .....-· » 1 · v // ΐ<1 'V 1 V. V V II I Zl I I «Κ xr.~d.il

Uzd^z>.

cHk jouu iicz-fci v rbie vybxxuij z. atomu warrcu, mx^moaxivy ra a TiarogcnarKj/raiicw uniiliuacylového zbytku majících vzorec R^I01NH(CH2)2NHCH2C(O)- nebo R^10lNH(CH2)₂OCH₂C(O)-, kde substituent R¹⁰¹ je atom vodíku, nižšíalkyl, (aryl)alkyl, (cykloalkyl)alkyl, acyl, benzoyl nebo a-aminoacylová skupina. Jednotlivé estery aminokyselin jsou glycin a lysin; nicméně další aminokyselinové zbytky mohou být také používány, včetně jakýchkoliv přirozeně se vyskytujících aminokyselin a také včetně těch, ,102 ,103 kde aminoacylová skupina je -C(O)CH₂NR¹⁰²R¹⁰³, kde substituenty R^1UZ a R^IUJ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku a nižšíhoalkylu nebo skupina -NR¹⁰²R¹⁰³, kde substituenty R¹⁰² a R¹⁰³, spojené dohromady, vytvoří heterocyklický kruh obsahující dusík.

Další prekurzory léčiv zahrnují hydroxyl-substituované sloučeniny vzorce I, II nebo III, kde hydroxylová skupina funkcionalizovaná substituentem vzorce -CH(R¹⁰⁴)OC(O)R¹⁰⁵ nebo -CH(R¹⁰⁴)OC(S)R¹⁰⁵, kde substituent R¹⁰⁵ je nižší alkyl, halogenalkyl, alkoxy skupina, thioalkoxy skupina nebo halogenalkoxy skupina a substituent R¹⁰⁴ je atom vodíku, nižšíalkyl, halogenalkyl, alkoxykarbonyl, aminokarbonyl, alkylaminokarbonyl nebo dialkylaminokarbonyl. Takové prekurzory mohou být připravovány podle postupu popsaném Schreiberem (Tetrahedron Lett. 1983, 24, 2363) pomocí ozonolýzy odpovídajícího methallyletheru v methanolu a poté reakcí s anhydridem kyseliny octové.

Příprava esterů hydroxyl-substituovaných sloučenin vzorce I, II nebo III se provádí reakcí hydroxyl-substituované sloučeniny vzorce I, II nebo III s aktivovaným aminoacylem, fosforylem, hemisukcinylem nebo acylderivátem.

Prekurzory léčiv hydroxyl-substituovaných sloučenin vynálezu mohou být také připraveny alkylací hydroxyl substituované sloučeniny vzorce I, II nebo III s (halogen)alkylestery, transacetalizací s bis-(alkanoyl)acetaly nebo kondenzací hydroxylové skupiny s aktivovaným aldehydem a poté acylací hemiacetalového meziproduktu.

Při přípravě prekurzorů léčiv je často nezbytné chránit další reaktivní, funkční skupiny kvůli zabránění nežádoucích vedlejších reakcí. Po zavedení chránících skupin na reaktivní skupiny může být požadovaná skupina funkcionalizována. Výslednému funkcionalizo vánému produktu se pak sejme chránící skupina, která byla předem zavedena *1 481 β>κ zamezeni nezaaoueien vcaiej sierr reakci, cimz se ziSKa pozauovany prekurzor reciva. Vhodné reakční podmínky pro přípravu chránících skupin jsou dobře známy v oboru. Zde uvádíme jeden zdroj z literatury T. H. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd edition, John Wiley & Sons, New York (1991).

Tento vynález také zahrnuje sloučeniny vzorce I, II nebo III, které jsou estery nebo prekurzory léčiv, a které jsou také soli. Například sloučenina vynálezu může být ester karboxylové kyseliny a také adiční sůl aminu s kyselinou nebo substituent obsahující dusík ve stejné sloučenině.

Sloučeniny předloženého vynálezu jsou účinné při inhibování neuraminidasy mikroorganismů způsobujících onemocnění, které mají neuraminidasu. Sloučeniny vynálezu jsou účinné (u lidí, dalších savců a ptáků) při ošetření nebo prevenci onemocnění způsobených mikroorganismy, které mají neuraminidasu.

Sloučeniny předloženého vynálezu jsou účinné při inhibování neuraminidasy chřipkového viru kmene A a neuraminidasy chřipkového viru kmene B in vitro nebo in vivo (zvláště u savců a částečně u lidí). Sloučeniny předloženého vynálezu jsou také účinné při inhibici virů influenzy, orthomyxovirů a paramyxovirů in vivo, zejména inhibici chřipkového viru kmene A a chřipkového viru kmene B u lidí a jiných savců. Sloučeniny, předloženého vynálezu jsou také účinné při ošetření infekcí způsobených viry influenzy, orthomyxoviry a paramyxoviry in vivo, zejména lidských onemocnění způsobovanými chřipkovými viry kmene A a B. Sloučeniny předloženého vynálezu jsou také účinné pro profylaxi infekce, způsobené viry influenzy, orthomyxoviry a paramyxoviry in vivo u lidí a dalších savců, zejména profylaxi infekce chřipkovým virem kmene A a B; a zejména profylaxi infekce chřipkovými viry kmene A a B u lidských subjektů, u kterých existuje vyšší riziko vypuknutí jiných dýchacích onemocnění současně nebo jako důsledek infekce chřipkovým virem nebo u lidských subjektů, které trpí chronickým onemocněním dýchacích cest, např. astmatem, emfýzémem nebo cystickou fybrózou.

Celková denní dávka aplikovaná lidem nebo jiným savcům v jediné nebo v rozdělených dávkách může být v množství, např. od 0,001 do 300 mg/kg denní tělesné i

482. _

• · ·	• · ·	• ·
e · ·	♦ · φ ·	• · ·
• ··	«ί Φ	• · ·
• « ·	« ·	• · ·
· ··	·'·· ····	« ·

-váhy -a -lépe od O_rl do l-O-mg/kg denní tělesné váhy. Jednotková dávka přípravků může obsahovat taková množství rozdělených dávek, která vytvoří denní dávku.

Množství aktivní složky, které může být spojeno s nosičem látek k vytvoření jednotlivé dávkovači formy se bude různé v závislosti na ošetřovaném hostiteli a jednotlivém způsobu aplikace.

Nicméně je jasné, že specifická hladina dávky pro jakéhokoliv jednotlivého pacienta bude záviset na různých faktorech zahrnujících aktivitu použité specifické sloučeniny, věku, tělesné váze, celkovém zdraví, pohlaví, stravě, době aplikace, způsobu aplikace, míře exkrece, kombinaci léčiv a vážnosti onemocnění a s tím spojené podstoupené terapie,

Aplikace sloučenin tohoto vynálezu se má provést před propuknutím nebo v době propuknutí infekce nebo po dostavení prokázaných symptomů a/nebo při potvrzení infekce.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být aplikovány perorálně, parenterálně, subligválně, intranazálně, intrapulmonální aplikací, inhalací nebo insuflací jako roztok, suspenze nebo suchý prášek (například ve spreji) nebo rektálně v dávkovači jednotce preparátů obsahujících, konvenční netoxické farmaceuticky přijatelné nosiče, adjuvans nosiče, jak je požadováno. Termín „parenterální“, jak je používán zde, zahrnuje subkutánní injekce, intravenozní, intrarnuskulámí, intrastemální injekce nebo infuzní techniky.

Injikovatelné přípravky, např. sterilní injikovatelné vodné nebo olejovité suspenze mohou být formulovány způsobem známým z oboru použitím vhodných dispergačních, a smáčecích a suspendačních agens. Sterilní injikovatelný přípravek může také být sterilní injikovatelný roztok nebo suspenze v netoxickém parenterálně přijatelné ředícím roztoku nebo rozpouštědle, např. jako roztok v 1,3-propandiolu. Mezi přijatelné nosiče a rozpouštědla, která se mohou použít patří voda, fyziologický roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Navíc sterilní netuhnoucí oleje jsou konvenčně používány jako rozpouštědlo nebo suspendační médium. Pro tento účel se může použít jakýkoliv nedráždivý netuhnoucí olej, včetně syntetických monoglyceridů nebo diglyceridů. Navíc φ φ

Φ φ

483.

mo.otnÁ .„1rv.ó#*1.i.nv

AAAVAOVAAV* AVJ OV1111J 5

I/LV.OéJ.WO

AVj OVAAAAIA jíaxdnn lAUjUVU tnn.T7.iti V J UAiHl .n i .i V n 11 π t ρ 1 xi v e fo

AAA| A AW» V 'M.W1AAJ Vil roztoků.

Vkládané čípky pro rektální aplikaci léčiva mohou být připraveny smícháním léčiva s vhodným nedráždivým excipientem, např. kakaovým máslem a polyethylenglykoly, které jsou tuhé při normálních teplotách, ale tekuté při rektální teplotě, a proto se rozpustí v konečníku a uvolní tím léčivo.

Dávky v tuhé formě pro perorální aplikaci mohou zahrnovat kapsule, tablety, pilule, prášky a granule. V takových dávkách v pevné formě může být aktivní sloučenina přimíchána s alespoň jedním inertním rozpouštědlem, např. sacharózou, laktózou nebo škrobem. Takové dávkovači formy mohou zahrnovat, což je normální praxe, další látky jiné než inertní ředící roztoky , např. lubrikační agens, např. stearát hořečnatý. V případě kapsulí, tablet a pilulí se dávkovači formy mohou také zahrnovat tlumicí agens. Tablety a pilule mohou navíc být připraveny enterosolventním potahováním.

Dávky v tekutých formách pro perorální aplikaci mohou zahrnovat farmaceuticky přijatelné emulze, roztoky, suspenze, sirupy a léčebné nápoje obsahující inertní ředící roztoky běžně používané v oboru, např. vodu. Takové přípravky mohou obsahovat také adjuvans, např. smáčecí agens, emulgační agens a suspendační agens a přislazovací, ařomatizační a parfumační agens.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou také být aplikovány ve formě lipozómů. Jak je známo, v oboru, jsou lipozómy obecně odvozeny od fosfolipidů nebo jiných lipidových látek. Lipozómy jsou formovány monolamerálními nebo multilamelámími hydrato vánými tekutými krystaly, které jsou dispergovány ve vodném mediu. Může být použit jakýkoliv netoxický, fyziologicky přijatelný a metabolizovatelný lipid schopný formování lipozomů. Předložené přípravky v lipozómální formě mohou obsahovat, vedle sloučeniny předloženého vynálezu, stabilizátory, konzervační prostředky, excipienty, apod. Výhodné lipidy jsou fosfolipidy a fosfatidylcholiny (lecithiny) jak přírodní, tak i syntetické.

Způsoby formování lipozómů jsou známy v oboru. Viz např. Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academie Press, New York, N.Y. (1976), str. 33 et seq.

484e»·

¥	·¥ ··	¥·
• ·	¥ · ¥ · ·	¥
•	¥ ¥ · ·	¥
¥	• · ¥ · ¥	¥
•	¥ ¥ ¥ ¥	¥

Sloučeniny vynálezu mohou být aplikovány nejen jako jediný aktivní farmaceutický agens, ale mohou být používány také v kombinaci s jedním nebo více protiinfekčních agens a/nebo jinými agens používaných k ošetření jiných akutních nebo chronických respiračních onemocnění. Další agens, která mohou být aplikována v kombinaci se sloučeninou předloženého vynálezu, zahrnují: vakcínu proti chřipce; jiné inhibitory chřipky, např. amantadin, rimantadin, ribavirin, apod.; jiné inhibitory chřipkové neuraminidasy, např. zanamivir nebo GS 4104, apod.; agens používaná k ošetření dýchacích onemocnění způsobená bakteriemi a bronchitida, např. erythromycin, klarithromycin, azithromycin, apod.; a agens používaná k ošetření astma, např. zileuton, albuterol (salbutamol), salmeterol, formoterol, ipratropiumbromid, inhalované steroidy, apod. nebo. protizánětová agens prd ošetření astma, např. beklomethasondipropionát, flutikasonpropionát, budesonid, triamcinolonacetonid, flunisolid, kromolyn, zafirlukast, montelukast používané v kombinaci se sloučeninou předloženého vynálezu.

Pokud se aplikace podává jako kombinace, mohou být terapeutická agens připravovány jako separované přípravky, které jsou podávány ve stejnou nebo v rozdílných dobách nebo mohou být terapeutická agens podávána jako jednotlivý přípravek.

Předchozí popis je zde uveden pouze pro ilustraci vynálezu a nemá nikterak omezovat rozsah vynálezu. Odchylky a změny, které jsou zřejmé odborné veřejnosti, jsou zamýšleny v rozsahu a povaze vynálezu, který je definován v přiložených patentových nárocích.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. S loučenina vzorce:

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekurzory léčiv, kde substituent R¹ je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) -CO₂H, (b) -CH₂CO₂H, (c) -SO₃H, (d) -CH₂SO₃H, (e) -SO₂H, (f) -CH₂SO₂H, (g) -PO₃H₂, (h) -CH₂PO₃H₂, (í)-PO₂H, (j) -CH₂PO₂H, (k) tetrazolylu, (1) -CH₂-tetrazolylu, (m) -C(=O)-NH-S(O)₂-Rⁿ, (n) -CH^Oj-NH-SCOhR¹¹, (o) -SO2N(T-R“)R¹² a (p) -CH2SO₂N(T-R^il)R¹² kde T je vybráno ze skupiny sestávající se z (i) vazby, (ii) -C(=O)-, (iii) -C(=O)O-, (iv) -C(=O)S-, (v)-C(=O)NR³⁶-, (vi) -C(=S)O-, (vii) -C(=S)S- a (viii) -C(=S)NR³⁶-, substituent R¹¹ je vybrán ze skupiny sestávající se z (i) Ci-Ci₂alkylu, (ii) C₂-C]₂alkenylu, (iii) cykloalkylu, (iv) (cykloalkyl)alkylu, (v) (cykloalkyl)alkenylu, (vi) cykloalkenylu, (vii) (cykloalkenyl)alkylu, (viii) (cykloalkenyl)alkenylu, (ix) arylu, (x) (aryl) alkylu, (xi) (aryl)alkenylu, (xii) heterocyklu, (xiii) (heterocykl)alkylu a (xiii) (xiv) (heterocykl)alkenylu; a substituenty R a R jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atom vodíku, (ii) C]-Ci₂alkylu, (iii) C₂-Ci₂alkenylu, (iv) cykloalkylu, (v) (cykloalkyl)alkylu, (vi) (cykloalkyl)alkenylu, (vii)cykloalkenylu, (viii) (cykloalkenyl)alkylu, (ix) (cykloalkenyl)alkenylu, (x) arylu, (xi) (aryl)alkylu, (xii) (aryl)alkenylu, (xiii) heterocyklu, (xiv) (heterocykl)alkylu a (xv) (heterocykl)alkenylu;

X je vybráno ze skupiny sestávající se z

486

Z \ ./Π f \ T ZTV4-X ,Z_1 _x ., .¾ J.Z.T>.4».\ 07 Z~\> Z. 5 _ ιΤΛ / ΠΛ -T ZT>.O- _ Z, 1\ > ΧΖ.ΤΤ».Φ>._Z“J z rs.\ ·

W -^=uj-ínuvj-, (oj -rN(K-‘j-ct=uj-,ycj -u=ňj-iNiK'j-, <aj -í\(k - j-v4=ňj-, (e) -N(R*)-S0₂- a (f) -S0₂-N(R*)-, kde substituent R* je atom vodíku, Ci-C3nižšíalkyl nebo cyklopropyl;

substituent R je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) C]-C₆alkylu, (c) C₂-C6alkenylu, (d) C₃-C6cykloalkylu, (e) Cs-Cócykloalkenylu, (f) halogenCi-Cóalkylu a (g) halogenC₂-Cóalkenylu; nebo kde Y¹ -CH2-, -0-, -S- nebo -NH- a Y² je -C(=0)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R^aa a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, C)-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu, 2-hydroxyethylu, aminomethylu, 1-aminoethylu, 2-aminoethylu, thiolmethylu, 1-thiolethylu, 2-thiolethylu, methoxymethylu, N-methylaminomethylu a methylthiomethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) cykloalkylu, (c) cykloalkenylu, (d) heterocyklu, (e) arylu a (f) -Z-R¹⁴, kde Z je (i) -C(R^37a)(R^37b)-, (ii) -C(R⁴⁷)=C(R⁴⁸)-, (iii) -C=C-, (iv)-C(=O)-, (v) -C(=S)-, (vi) -C(=NR¹⁵)-, (vii) -C(R^37a)(OR^37c)-, (viii) -C(R^37a)(SR^37c)-, (ix) -C(R^37a)(N(R^37b)(R^37c))-, (x) -C(R^37a)(R^37b)-O-, (xi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37c)-, (xii) -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)-, (xiii) -C(R^37a)(R^37b)-N(OH)-, (xiv) -C(R^37a)(R^37b)S-, (xv) -C(R^37a)(R^37b)-S(O)-, (xvi) -C(R^37a)(R^37b)-S(O)₂-, (xvii) -C(R^37a)(R^37b)C(=0)-, (xviii) -C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-, (xix) -C(R^37a)(R^37b)-C(=NR¹⁵)-, (xx) -C(R^37a)(OR^37c)-C(=O)-, (xxi) -C(R^37a)(SR^37c)-C(=O)-, (xxii) -C(R^37a)(OR^37c)-C(=S)-, (xxiii) -C(R^37a)(SR^37c)-C(=S)-, (xxiv) -C(=O)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxv) -C(=O)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxvi) -C(=S)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxvii) -C(=S)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxviii) -C(R^37a)(OR^37c)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxix) -C(R^37a)(SR^37c)-C(R^37a)(OR^37c)-, (xxx) -C(R^37a)(OR^37c)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxxi) -C(R^37a)(SR^37c)-C(R^37a)(SR^37c)-, (xxxii) -0(=0)-0(=0)-, (xxxiii) -C(=S)-C(=S)-, (xxxiv) -0(=0)-0-, (xxxv) -C(=O)-S-, (xxxvi) -C(=S)-O-, (xxxvii) -C(=S)-S-,

487

9 9 9 9 9· 9 9© 4© 49 4 · 9 9 9 '9 9 4 4 · • ·· • · • · • 4 © · · • 4 4 4 • 4 999 -99- ¢¢¢ ¢¢¢5 · -©1·©· - ©-.© -

ZvwwTit _rV=m_M/.U^37a5 PAzCYMřni ^ΛΛΛΠΙΙ^ VZ2^_±>f-lV \ΛΛΛ1Λ^ '-Λ

37a\ )(xi) -C(R^37a)(R^37b)-C(=O)-N(R^37a)-, (xii) -C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-N(R^37a)-, (xiii) -C(R^37a)(R^37b) -C(=0)-0-, (xliii) -C(R^37a)(R^37b)-C(=O)-S-, (xliv) -C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-O-, (xiv) -C(R^37a)(R^37b)-C(=S)-S-, (xlvi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-, (xlvii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-, (xlviii) -C(R^37a)(R^37b)-0-C(=0)-, (xlix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-, (1) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-, (li) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-, (Iii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-N(R^37a)-, (liii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-N(R^37a)-, (liv) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-O-, (lv) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-S-, (lvi) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-O-, (lvii) -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)’S-, (lviii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-N(R^37a)-, (lix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-N(R^37a)-, (lx) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-N(R^37a)-, (lxi) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-N(R^37a)-, (lxii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-O-, (Ixiii) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-O-, (lxiv) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-S-, (Ixv) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-S-, (lxvi) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-O-, (lxvii) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-O-, (lxviii) -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-S-, (lxix) -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-S- nebo (lxx) -C(R^37a)(R^37b)-C(R^37a)(OR^37c)-;

substituent R¹⁴ je (i) atom vodíku, (ii) Ci-Ci2alkyl, (iii) halogenalkyl, (iv) hydroxyalkyl, (v) alkyl

I substituovaný thiolem, (vi) alkyl substituovaný R^37cO , (vii) alkyl substituovaný R^37cS, (viii) aminóalkyl, (ix) alkyl substituovaný (R^37c)NH, (x) alkyl substituovaný (R^37a)(R^37c)N, (xi) alkyl substituovaný R^37aO-(O=)C-, (xii) alkyl substituovaný R^37aS(O=)C, (xiii) alkyl substituovaný R^37aO-(S=)C, (xiv) alkyl substituovaný R^37aS-(S=)C, (xv) alkyl substituovaný (R^37aO)2-P(=O), (xvi) kyanoalkyl, (xvii) C₂-C^alkenyl, (xviii) halogenalkenyl, (xix) C2-C]2alkynyl, (xx) cykloalkyl, (xxi) (cykloalkyl)alkyl, (xxii) (cykloalkyl)alkenyl, (xxiii) (cykloalkyl)alkynyl, (xxiv) cykloalkenyl, (xxv) (cykloalkenyl)alkyl, (xxvi) (cykloalkenyl)alkenyl, (xxvii) (cykloalkenyl)alkynyl, (xxviii) aryl, (xxix) (aryl)alkyl, (xxx) (aryl)alkenyl, (xxxi) (aryl)alkynyl, (xxxii) heterocykl, (xxxiii) (heterocykl)alkyl, (xxxiv) (heterocykl)alkenyl nebo (xxxv) (heterocykl)alkynyl, s výhradou spočívající v tom, že substituent R¹⁴ je jiný než atom vodíku, pokud Z je -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=O)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37b)-C(=S)-S-,

488 ·«<

-C(R³⁷?)(R^37b)-0-C<=0-)-0-, -C(R^37a)(R^37b)-O-G(=S)-G-, -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-O-, -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=O)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-O-C(=S)-S-, -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=O)-S- nebo -C(R^37a)(R^37b)-S-C(=S)-S-;

substituenty R^37a, R^37b, R⁴⁷ a R⁴⁸, v každém případě, jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-C]₂alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) hydroxyalkylu, (v) alkoxyalkylu, (vi) C₂-Ci₂alkenylu, (vii) halogenalkenylu, (viii) C₂-Ci₂alkynylu, (ix) cykloalkylu, (x) (cykloalkyl)alkylu, (xi) (cykloalkyl)alkenylu, (xii) (cykloalkyl)alkynylu, (xiii) cykloalkenylu, (xiv) (cykloalkenyl)alkylu, (xv) (cykloalkenyl)alkenylu, (xvi) (cykloalkenyl)alkynylu, (xvii) arylu, (xviii) (aryl)alkylu, (xix) (aryl)alkenylu, (xx) (aryl)alkynylu, (xxi) heterocyklu, (xxii) (heterocykl)alkylu, (xxiii) (heterocykl)alkenylu a (xxiv) (heterocykl)alkynylu;

substituent R^37c, v každém případě, je nezávisle vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-Ci₂alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) C₂-Ci2alkenylu, (v) halogenalkenylu, (vi) C₂-Ci₂alkynylu, (vii) cykloalkylu,

.. (viii) (cykloalkyl)alkylu, (ix) (cykloalkyl)alkenylu, (x) (cykloalkyl)alkynylu, (xi) cykloalkenylu, (xii) (cykloalkenyl)alkylu, (xiii) (cykloalkenyl)alkenylu, (xiv) (cykloalkenyl)alkynylu, (xv) arylu, (xvi) (aryl)alkylu, (xvii) (aryl)alkenylu, (xviii). (ary ljalkynylu, (xix) heterocyklu, (xx) (heterocykl)alkylu, (xxi) (heterocykl)alkenylu, (xxii) (heterocykl)alkynylu, (xxiii) -C(=O)-R¹⁴, (xxiv) -C(=S)-R¹⁴, (xxv) -S(O)₂-R¹⁴ a (xxvj) hydroxyalkylu;

nebo pokud Z je -C(R^37a)(R^37b)-N(R^37c)-, pakN(R^37c) a substituent R¹⁴, pokud jsou spojeny dohromady, vytváří azido skupinu;

nebo pokud Z je -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)-, pak N(O)(R^37c) a substituent R¹⁴, pokud jsou spojeny dohromady, vytváří N-oxidovaný 3-členný až 7-členný heterocyklický kruh mající alespoň jeden N-oxidovaný dusíkový atom v kruhu; nebo pokud Z je -C(R^37a)(OR^37c)-, -C(R^37a)(SR^37c)- nebo -C(R^37a)(N(R^37b)(R^37c))-, pak substituenty R^37a, R¹⁴ a atom uhlíku, ke kterému jsou připojeny, pokud jsou

489 •999- 99 ·· ·· > 9 9 9 » · · · » · · · » 9 9 © • «β..... -99- · spoj eny dohromady, vytvářej í eyklopeníyiový, eyklopentenyiový, eyklohexyíový nebo cyklohexenylový kruh;

substituent R¹⁵ je vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) hydroxy skupiny, (iii) amino skupiny, (iv) C|-C|₂alkylu, (v) halogenalkylu, (vi) C₂-Ci2alkenylu, (vii) halogenalkenylu, (viii) cykloalkylu, (ix) (cykloalkyl)alkylu, (x) (cykloalkyl)alkenylu, (xi) cykloalkenylu, (xii) (cykloalkenyl)alkylu, (xiii) (cykloalkenyl)alkenylu, (xiv) arylu, (xv) (aryl)alkylu, (xvi) (aryl)alkenylu, (xvii) heterocyklu, (xviii) (heterocykl)alkylu a (xix) (heterocykl)alkenylu; nebo substituenty R³ a R⁴ spojené dohromady s atomem, ke kterému jsou připojeny, vytvářejí karbocyklický nebo heterocyklický kruh mající 3 až 8 atomů v kruhu; substituent R⁵ je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) -CH(R³⁸)2, (c) -O-R⁴⁰, (d) C2-C4alkynylu, (e) cyklopropylu, (f) cyklobutylu, (g) -C(=Q’)-R¹⁷ a (h) -N(R¹⁹)₂, kde Q¹ je O, S nebo N(R¹⁸);

substituenty R a R jsou nezávisle vybrány, v každém případě, ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, methylu a ethylu;

substituenty R¹⁹, R³⁸ a R⁴⁰ jsou nezávisle vybrány, v každém případě, ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Cj-C^alkylu, (iii) halogenalkylu, (iv) C₂-Cj₂alkenylu, (v) halogenalkenylu, (vi) cykloalkylu, (vii) (cykloalkyl)alkylu, (viii) (cykloalkyl)alkenylu, (ix) cykloalkenylu, (x) (cykloalkenyl)alkylu, (xi) (cykloalkenyl)alkenylu, (xii) arylu, (xiii) (aryl)alkylu, (xiv) (aryl)alkěnylu, (xv) heterocyklu, (xvi) (heterocykl)alkylu a (xvii) (heterocykl)alkenylu;

Y je vybrán ze skupiny sestávající se z (a) atom vodíku, (b) Ci-C₅alkylu, (c) C]-C₅halogenalkylu, (d) C₂-C₅alkenylu, (e) C₂-C5halogenalkenylu, (f) C₂-C5alkynylu, (9) C3-C₅cykloalkylu, (h) Ca-Cscykloalkyl-Ci-až-Ca-alkylu, (i) Cscykloalkenylu, (j) C5cykloalkenyl-Ci-až-C₃-alkylu, (k) C5cykloalkenyl-C₂-až-C3-alkenylu, (1) -(CHR³⁹)nOR20, (m) -CH(OR²⁰) -CH2(OR²⁰), (n) -(CHR³⁹)_nSR²¹, (o) -(CHR³⁹)nCN, (p) -(CHR³⁹)nN3, (q) fenylu, (r) fenylu substituovaného

490 • ·· 9 99 99 ··

9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9

9 99 · 9 9 9 9 9

9 9 9 '9 9 9, 9 9 9 9 9

9 9 9 · 9 ' 9 9 9 9

- -9-9-9 ^99 999-9999- -.9-9.....9 9 halogenem, (s) -(Cl lR³⁹)nC(=Q²)R²², (t) -(CHR³⁹)nN(=Qy), (u) -N(O)=C1 iCi i₃.

(v) -(CHR³⁹)_nNR²³R²⁴, (w) halogenu a (x) a heterocyklického kruhu majícího 3 až 6 atomů v kruhu;

kde index n je 0, 1 nebo 2; Q² je O, S, NR²⁵ nebo CHR²⁶; a Q³ je NR⁴' nebo CHR⁴²; substituent R , v každém případě, je nezávisle (i) atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) Ci-C₃halogenalkyl, (vii) vinyl, (viii) propenyl, (ix) izopropenyl, (x) allyl, (xi) C2-C₃halogenalkenyl, (xii) amino skupina, (xiii) -NHCH₃, (xiv) -N(CH₃)₂, (xv) -NHCH₂CH₃, (xvi) -N(CH₃)(CH₂CH₃), (xvii) -N(CH₂CH₃)₂ nebo (xviii) -N(=CH₂);

substituent R je atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) Ci-C₃halogenalkyl, (vii) vinyl, (viii) propenyl, (ix) izopropenyl, (x) allyl nebo (xi) C₂-C₃halogenalkenyl;

substituent R²² je (i) atom vodíku, (ii) methyl, (iii) ethyl, (iv) n-propyl, (v) izopropyl, (vi) hydroxy skupina, (vii) thiol, (viii) methoxy skupina, (ix) ethoxy skupina, (x) n-propoxy skupina, (xi) izopropoxy skupina, (xii) cyklopropyloxy skupina, (xiii) methylthio skupina, (xiv) ethylthio skupina, (xv) n-propylthio skupina, (xvi) izopropylthio skupina, (xvii) cyklopropylthio skupina, (xviii) vinyl, (xix) propenyl, (xx) izopropenyl, (xxi) allyl, (xxii) -N(R^28a)(R^28b), (xxiii) -CH₂R²⁹, (xxiv) aminomethyl, (xxv) hydroxymethyl, (xxvi) thiolmethyl, (xxvii) -NHNH₂, (xxviii) -N(CH₃)NH₂ nebo (xxix) NHNH(CH₃);

substituenty R²³ a R³⁹ jsou nezávisle atom vodíku nebo methyl;

substituenty^ R⁴¹ a R⁴² jsou nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl; substitent R²⁴ je vybrán ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Cj-C₄alkylu, (iii) C₂-C₄alkenylu, (iv) C₂-C₄alkynylu, (v) cyklopropylu, ,(vi) -C(=Q⁴)-R³⁰, (vii) -OR³¹ a (viii)-N(R³²)₂, kde Q₄ je O, S nebo N (R³³);

substituent R²⁵ je atom vodíku, hydroxy skupina, methyl, ethyl, amino skupina, -CN nebo -NO₂;

substituent R²⁶ je atom vodíku, methyl nebo ethyl;

491

• 00 • 0 · • 0 0 0 · 0 0 00 « • 0 : ·. 0 0 0 0 0 0 0 0 • 0 0 0 0 0'0' 00- - eec-eees·- . ee -- - -

___~+jn2_8a~ . . . .

5UU5LÍIUC1U ΓΚ jC atom vodíku, hydroxy skupina, methyl, ethyl, amino skupina, -NHCH3, tN(CH₃)₂, methoxy, ethoxy nebo-CN;

7Ok

R je atom vodíku, methyl nebo ethyl;

nebo substituenty R^28a, R^28b a dusík, kterému jsou připojeny, společně představují azetidinyl;

substituent R je atom vodíku, hydroxy skupina, thiol, methyl, ethyl, amino skupina, methoxy skupina, ethoxy skupina, methylthio skupina, ethylthio skupina, methylamino skupina nebo ethylamino skupina;

substituční R³⁰ je atom vodíku, methyl, ethyl, -OR³⁴, -SR³⁴, -N(R³⁵)₂, -NHOH, -NHNH₂,-N(CH₃)NH₂ nebo-N(CH₂CH₃)NH₂;

substituenty R³¹ á R³² ,v každém případě, jsou nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl;

substituent R je atom vodíku, hydroxy, methyl, ethyl, amino skupina, -CN nebo -NO₂;

substituent R³⁴ je methyl nebo ethyl;

substituent R je nezávisle atom vodíku, methyl nebo ethyl;

s výhradou spočívající v tom, že pokud Q² je CHR²⁶, pak substituent R²² je vybrán ze skupiny sestávající se z atom vodíku, -CH₃, -C₂H5, -C3H7, -OCH3, -SCH3, -O-C2H5 a -S-C₂H₅, a s výhradou spočívající v tom, že pokud substituenty R³ a R⁴ jsou každý atom vodíku, pak Y je jiný než atom vodíku;

Z «7 substituenty R a R jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (a) atomu vodíku, (b) C|-Ci₂alkylu, (c) C₂-Ci₂alkenylu, (d) cykloalkylu, (e) (cykloalkyl)alkylu, (f) (cykloalkyl)alkenylu, (g) cykloalkenylu, (h) (cykloalkenyl)alkylu, (i) (cykloalkenyl)alkenylu, (j) arylu, (k) (aryl)alkylu, (1) (aryl)alkenylu, (m) heterocyklu, (n) (heterocykl)alkylu a (o) (heterocykl)alkenylu; a

492

• ·· • 99 ·· · · • · · · e • • • • · · • * • • • • d· • · · • · • • • -eeeeeee -— 99

substituent-y-R-^e, R^y a-R¹⁰ jsou-nezávisle vybrány lě skupiny sestávající sez (a) atomu vodíku, (b) Ci-Csalkylu, (c) C₂-C6alkenylu, (d) Ca-C^cykloalkylu, (e) C₃-C6cykloalkenylu a (f) fluoru, s výhradou spočívající v tom, že celkový počet atomů, jiných než atom vodíku, v každém ze substituentů R⁸, R⁹ a R¹⁰ je 6 atomů nebo méně.
2. Sloučenina podle nároku 1 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
3. Sloučenina podle nároku 1 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.

493

• ♦ · ·· »· • · · · ·· · · » • • • · · • · • ¥ • • • • · · • · • • • • *4« '^J««' e-e -- 1-9
4. Sloučenina-podle nároku1, kde

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je C]-C₃nižšíalkyl, halogenCi-C₃nižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂C₃alkenyl nebo-X-R² je kde Y¹ je -CH₂-, -0-, -S- nebo -NH- a Y² je -C(=0)- nebo -C(R^aa)(R^bb)-, kde substituenty R^aa a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-CYnižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu, 2-hydroxyethylu, aminomethylu,

1-aminoethylu, 2-aminoethylu, thiolmethýlu, 1 -thiolethylu, 2-thiolethylu, methoxymethylu, N-methylaminomethylu a methylthiomethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku, fluor nebo nižšíalkyl;

substituent R¹⁰ je atom vodíku, fluor nebo nižšíalkyl; a

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C₅halogenalkenyl, -C(=Q²)R²², -N(=Q³), -N(O)=CHCH₃,

-NR R nebo heterocyklický kruh mající 3 až 6 atomů v kruhu, kde substituenty

R²², R²³, R²⁴, Q² a Q³ jsou definovány výše,
5. Sloučenina podle nároku 4 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

4-94

Φ· φ φφ ·· φ® • φ φφφ φ · φφ · kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
6. Sloučenina podle nároku 4 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
7. Sloučenina podlé nároku 1, kde

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C₃nižšíalkyl, halogenC|-C3nižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂-C₃alkenyl nebo -X-R² je • v

495, ·· • 9 ·· • · · • · • ·· • ··

99 9 9 • · to to • to ·«· ··«· • to •

to e

to • to • to • · • to kde Y¹ ie -CHr,.- a Y² ie -ΟΩΥ nehn -CÍRKVI?^bb>,

----- - - j- __v — y --·— —7\---7 ?

kde substituenty R^aa a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Cj-Csnižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu a 2-hydroxyethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl;

6 7 substituentyR aR jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituent R¹⁰ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; a.

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C₅halogenalkenyl, -C(=Q²)R²², -N(=Q³), -N(O)=CHCH₃nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby, kde substituenty R , Q aQ jsou definovány výše.
8. Sloučenina podle nároku 7 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
9. Sloučenina podle nároku 7 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

• 4

496 • 44 ee β β • ·· • · 4 · • · · ··· ··

4444 • 4 • 4 4

4 4 4

4 4 · 4

4 4 4

44 44 kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
10. Sloučenina podle nároku 1, kde

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíaíkyl, halogenCi-Canižšíalkyl, C₂-C3alkenyl nebo halogenC₂C3alkenyl nebo -X-R je kde Ý¹ je -CH₂- a Y² je -C(=O)- nebo -C(R³³)(R^bb)-, kde substituenty R³³ a R^bb jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z atomu vodíku, Ci-C3nižšíhoalkylu, hydroxymethylu, 1-hydroxyethylu a 2-hydroxyethylu;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl; substituent R¹⁰ j e atom vodíku nebo nižšíalkyl; a

Y je C₂-C5alkenyl, C₂-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

497 ,
1 1 Slo.něpni.na _norljp nároku .1.0. maiírí relativní knn.fi.ajirac.i znázorněnou · ...—— . „ j— „----.... ----—o----- ------...----vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
12. Sloučenina podle nároku 10 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
13. Sloučenina podle nároku 1, kde substituent R¹ je -CO₂H

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi-Csnižšíalkyl;

substituenty R³ a R⁴ jsou nezávisle vybrány z atomu vodíku, heterocyklu a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše a kde jeden ze substituentů R³ a R⁴ je jiný než atom vodíku;

'1

498 substituent R⁵ je atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituenty R a R jsou nezávisle atom vodíku nebo nižšíalkyl;

substituent R¹⁰ je atom vodíku nebo nižšíalkyl; a

Y je C2-C5alkenyl, Cs-Cshalogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.
14. Sloučenina podle nároku 13 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné;
15. Sloučenina podle nároku 13 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.

4QQ · · · · · · _ . . ... .· ··_··.
16. Sloučenina podle nároku 1, kde substituent R¹ je -CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi-Csnižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a substituent R³ je heterocykl a -Z-R¹⁴, kde Z a substituent R¹⁴ jsou definovány výše;

substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R⁶ a R⁷ jsou nezávisle atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou nezávisle atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C5alkenyl, C₂-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.
17. Sloučenina podle nároku 16 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
18. Sloučenina podle nároku 16 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

• ·

500 kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
19. Sloučenina podle nároku 1, kde substituent R¹ je -CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenCi -^nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku nebo nižšíalkyl a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl, (c) cykloalkyl, (d) cykloalkylalkyl, (e) alkenyl, (f) alkynyl, (g) -C(=O)-R¹⁴, (h) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴ nebo (i) -C(R^37a)(R^37b)-N(O)(R^37c)R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyl, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)₂'P(=O)-;

substituenty R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) nižšíhoalkylu a (iii) nižšíhoalkenylu; a substituent R^37c j e atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) nižšíalkenyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R aR jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C₅alkenyl, Q-Cshalogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.

501
20. Sloučenina podle nároku 19 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
21. Sloučenina podle nároku 19 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty Ř³ a R⁴ nejsou stejné.
22. Sloučenina podle nároků 1, kde substituent R¹ je -CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH-, R²-NH-C(=O)-, R²-NH-SO2- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenC j-C3nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je í' (i) alkyl, (ii) cykloalkyl, (iii) cykloalkylalkyl, (iv) alkenyl, (v) halogenalkyl, (vi) halogenalkenyl, (vii) aryl, (viii) arylalkyl, (ix) heterocykl, (x) (heterocykl)alkyl, (xi) hydroxyalkyl, (xii) alkoxyalkyl, (xiii) kyanoalkyl, (xiv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)-(O=)C- nebo (xv) alkyl substituovaný skupinou (R^37aO)₂-P(=O)-;

substituenty R^37a a R^37b jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající se z (i) atomu vodíku, (ii) Ci-C3nižšíhoalkylu a (iii) nižšíhoalkenylu; a substituent R^{3 7c} j e atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) allyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C₅alkenyl, Č₂-C₅halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.
23. Sloučenina podle nároku 22 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
24. Sloučenina podle nároku 22 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R\ R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, Xa Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
25. Sloučenina podle nároku 1, kde substituent R¹ je -CO₂H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH- nebo R²-SO₂-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenC i-C3nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je (a) heterocykl, (b) alkyl nebo (c) -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je (i) nižšíalkyl, (ii) nižšíalkenyl, (iii) nižšíalkyl substituovaný hydroxy skupinou nebo (iv) nižšíalkyl substituovaný alkoxy skupinou; substituent R^37aje (i) atom vodíku, (ii) nižšíalkyl nebo (iii) nižšíalkenyl; a substituent R^37c je (i) atom vodíku, (ii) Ci-C3nižšíalkyl nebo (iii) allyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C5alkenyl, C₂-C5halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.
26. Sloučenina podle nároku 25 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

504 kde substituenty R¹, R², R^J, R⁴, R³, R⁶, R', R⁸, R⁹, R^1U, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
27. Sloučenina podle nároku 25 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.
28. Sloučenina podle nároku 1, kde substituent R¹ je -CO2H;

-X-R² je R²-C(=O)-NH- nebo R²-SO2-NH-, kde substituent R² je Ci-C3nižšíalkyl nebo halogenC i-C3nižšíalkyl;

substituent R⁴ je atom vodíku a substituent R³ je -C(R^37a)(OR^37c)-R¹⁴, kde substituent R¹⁴ je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; substituenty R^37a je nižšíalkyl nebo nižšíalkenyl; a

505 ββ© substituent R^37c je atom vodíku, Ci-C3nižšíalkyl nebo allyl; substituent R⁵ je atom vodíku; substituenty R⁶ a R⁷ jsou atom vodíku; substituenty R⁸ a R⁹ jsou atom vodíku; substituent R¹⁰ je atom vodíku; a

Y je C₂-C₅alkenyl, C₂-C₅halogenalkenyl nebo heterocyklický kruh mající 5 atomů v kruhu a také obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby.
29. Sloučenina podle nároku 28 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

kde substituenty R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, X a Y jsou definovány výše a kde substituenty R³ a R⁴ nejsou stejné.

,
30. Sloučenina podle nároku 29 mající relativní konfiguraci znázorněnou vzorcem:

• · «4:.%,. τ> 1 j>2 , τ>3 ...r>4 ^τί5 ..r>6. χ>7 ..'nJ τύ9_γ»10 λτ.- w '____J ,______:.χ_ _ j.j.

kuc suusuiucmy iv, ιγ , rv ,ιν ,r< , r< , iv, iv , ιν , ιν , λ a i jsuu ueiuiuvauy vysc a kuc

506 substituenty R⁵ a R⁴ nejsou stejné.
31. Sloučenina vybraná ze skupiny sestávající se z:

(±)-(2R,3S,5R,TR)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S)-2-( 1 -acetamido-2-hydroxy-2-methyl)pentyl-3-(cz.s-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(czY-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(czT-propen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(+j-(2R,3R,5R,TR,2'R)-2-(l-Acetamido-2,3-dihydroxy)propyl-3-(czó'-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(czY-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

^,(-)-(2R,3S,5R,TS)-2-(l-Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(czx-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylát amonný;

(±)-(2R,3S,5R,TR,2'R)-2-(l-Acetamidó-2,3-dimethoxy)propyl-3-(czT-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, 1 'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy-2-vinyl)ethyl-3-(cz.s-propen-1 -y 1)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’S)-2-( 1 -Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(rá-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rS,3'S)-2-(l-Acetamido-2-(N-izopropyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3(czs-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, 1 'S,3'S)-2-(l -Acetamido-2-(N-ethyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3-(cz5propen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)butyl-3-(czx-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,TR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cz\-propen-l-yl)-pynOlidinz.·

A fo

507

9' • 9 • · · ·· • · « · • · » 9 9 * 9 · • · 9 » 9 9 • · • · • · 9 · • 9 we - - ©-© β © © 9 β9 · β 9 99

Z 1-k<-»»«> />v.r r.1,O5 τό .1/»r,no.1.i»5 7.· J-Rail7UA)lU VV ivjyovilllj', (±)-(2R,3R,5R,rR,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l'R,2'R)-2-(l-Acetamido-l-(3,6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))propyl-3-(cApropen- l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l'R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy-2-allyl)ethyl-3-(cz5'-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’ S,3 ’S)-2-(l -Acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(czY propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, 1'R,2'S)-2-( 1-Acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cz's-propen-1-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l ’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3-(cz.s-propen-l -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R, 2’ S)-2-( 1 -Acetamido-1 -(3,6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))methyl-3 (cispropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3-(ew-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)'-2-(l-Acetamido-2-hydroxymethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz'5propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R,l ^,R,2^,S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cz.s-propen-l -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-3-dimethyl)butyl-3-(cz'5'-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy-3-vinyl)propyl-3-(cw-propen-l-yl)pyrroíidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-2-(propen-2-yl))ethyl-3-(cz5'-propen-lyl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(cz'5-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(czó'-propen-l-yl)-pyrrolidin-5508 karboxylovékyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxyiové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, l’R,2’S)-2-(l - Acetamido-2-hydroxy)pentyl-3 -vinyl-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R, l'R,2'R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxyethyl-2-hydroxy)penty]-3-(eA-propen1 -yl)-pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S ,5 R, 1 ’ R,2 ’ R)-2-( 1 - Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cis-propen-1 -yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R,l^,R,2’R)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-vinyl-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R, 1 ’R)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy)ethyI-3-(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(cA-2-chlor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rS,3’R)-2-(l-Acetamido-3-hydroxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-4-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,rS)-l-t-Butoxykarbonyl-2-(l-acetamido-3-methyl)butyl-3-(thiazol-2-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-vinyl-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(2,2-difluor-vin-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 R,5R, 1 ’ S)-2-( 1 -Acetamido-3 -methyl)butyl-3-(pyrazol-3-yl)-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,l'S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-3-yl)-pyrrolidin-5ι.

509 karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,TS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(izoxazol-5-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,rS)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-2-yl)-pynOlidin-5karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-(imidazol-4-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny; a (±)-(2S,3R,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-3-methyl)butyl-3-amino-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo jejich prekurzory léčiv.
32. Sloučenina vybraná ze skupiny sestávající se z: (±)-(2R,3S,5R,l’R)-2-(l-Acetamido-2-ethyl-2-hydroxy)butyl-3-(czÁ-propen-l-yl)pyrrolidin-5 -karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-2rmethyl)pentyl-3-(cz's-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Ačetamido-2-ethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cz'5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

Trifluoroctová sůl (±)-(2R,3S,5R,TR,2’S)-2-(l-acetamido-2-hydroxy)pentyl-3-(cz5propen- l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5R, 1 ’R,2’R)-2-(l-Acetamido-2, 3-dihydroxy)propyl-3-(cz,s-propen-1 -yl)pyrroliďin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 - Acetamido-2-hydroxy-4-vinyl)butyl-3-(cA-propen-1 -yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(-)-(2R,3 S,5R, 1' S)-2-( 1 -Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz's-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5karboxylát amonný;

(±)-(2R,3S ,5R, 1 ’ R,2 ’ R)-2-( 1 - Acetamido-2, 3 -dimethoxy)propyl-3-(cz.v-propen-1 -y 1)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’R,2’ S)-2-( 1 -Acetamido-2-methoxy-2-vinyl)ethyl-3-(cz.v-propen-1 -y 1)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’S)-2-(l-Acetamido-2-ethyl)butyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin-5510- β φφφφ «« .1λ.Ο*·.1>/>ΛΛΛ 4.AJ .1/2« ΓΠΟ.1.·».»ί».·» τ· ,

IVU.1 ΜΜΛ-J IV» W JVJOVlillj 5 (±)-(2R,3S,5R,l’S,3’S)-2-(l-Acetamido-2-(N-izopropyl-N-methylamÍno-N-oxid))ethyl-3(cA-propen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R,l’S,3’S)-2-(l-Acetamido-2-(N-ethyl-N-methylamino-N-oxid))ethyl-3-(cApropen-1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)butyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3R,5 R, 1 ’ R, 2 ’ S ) - 2 - (1 -Acetamido-2-hydroxy)butyl-3 -(pyrazol-3 -yl)-pyrrolidin-5 karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, Γ R,2 ’ S)-:2-( 1-Acetamido-2-hydroxy)butyl-3-(cA-propen-1-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny; , (±j-(2R,3S,5R,l’R,2’R)-2-(DAcetamido-l-(3, 6-dihydro-2-H-pyran-2-yl))propyl-3(cApropen-1-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-měthoxy-2-allyl)ethyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny; . ...

(±)-(2R,3S,5R, 1 ’R,2’S,3’S)-2-( 1 -Acetamido-2-hydroxy-3-methyl)pentyl-3-(cA- propen-1 yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;;

(+)-(2R,3S_i5R,rR,2’S)-2-(l-Acetamido-2-methoxy-4-vinyl)butyl-3-(cA-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l^,R,2'S)-2-(l-Acetarnido-2-hydroxy-3-kyano)propyl-3-(cz5-propen-l-yl)pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S ,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-1 -(3,6flihydro-2-H-pyran-2-yl))methyl-3 -(cApropen-l-yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3 S,5R, 1 ’ R,2 ’ S)-2-( 1 - Acetamido-2,3-dimethoxy)propyl-3 -(cA-propen-1 -y 1) pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxymethyl-2-hydroxy)pentyl-3-(cApropen1 -yl)-pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(±)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-ethoxy)pentyl-3-(cA-propen-l-yl)-pyrrolidin-5karboxylové kyseliny;

Í.+W2R 3S 5R 1 ’R 2’S)-2-řl-Acetaⁿ’idⁿ-7-hvHrnw-'t-dimp.thv.1Abiitv.1.-'t-řr/.Y=nronen-1 -vltV—J V—·¹’-?-' * “5“ “ .J ----J. ~ _v , j----- - J-, pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

511 f-jLX /O© TQ SR 1 ⁹R ^7¹ _/1 _ Λ ζ->ρ+ο»-»-ιírlLirxvi7izlλτΛττχτΛ^zl ₌ z^7c_nmrx=»n_ 1 _\z1 A_ l _L_ I ÍZ,A_?JOjJÍ\jl Γν,Ζ- U) Z. (inwidiiliuvz. VUlvAj ~J \yi-<3 |yrv/pr^ix X J ^A/ pyrrolidin-5-karboxylové kyseliny;

(+)-(2R,3S,5R,l’R,2'S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy-2-(propeny-2-yl))ethyl-3-(cz5-propenl-ylj-pyrrolidin-S-karboxylové kyseliny; a (±)-(2R,3S,5R,l’R,2’S)-2-(l-Acetamido-2-hydroxy)hexyl-3-(cz5-propen-l-yl)-pyrrolidin5-karboxylové kyseliny;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery nebo prekurzory léčiv.
33. Farmaceutický přípravek pro inhibici chřipkové neuraminidasy, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
34. Farmaceutický přípravek pro ošetření chřipkové infekce, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
35. Farmaceutický přípravek určený pro prevenci proti chřipkové infekci, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
36. Farmaceutický přípravek pro inhibici chřipkové neuraminidasy, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 31.

_T-»s ·· · ·*

512
37.. Farmaceutický přípravek pro ošetření chřipkové infekce, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku podle nároku 31.
38. Farmaceutický přípravek určený pro prevenci proti chřipkové infekci, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 31.
39. Způsob inhibice neuraminidasy mikroorganismu, který způsobuje onemocnění, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1.
40. Způsob podle nároku 39, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.
41. Způsob podle nároku 40, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.
42. Způsob ošetření onemocnění způsobené mikroorganismem, který má neuraminidasu, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1.
43. Způsob podle nároku 42, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.
44. Způsob podle nároku 43, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.

00 I «

513
45. Způsob ošetření onemocnění způsobené mikroorganismem, který má neuraminidasu, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1.
46. Způsob podle nároku 45, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.
47. Způsob podle nároku 46, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.
48. Způsob inhibice neuraminidasy mikroorganismu, který způsobuje onemocnění, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 31.
49. Způsob podle nároku 48, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.
50. _: Způsob podle nároku 49, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.
51. Způsob ošetření onemocnění způsobené mikroorganismem, který má neuraminidasu, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 31.
52. Způsob podle nároku 51, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.

514 • ·· · ·* ·4 ·· ·· Π · 99 9 9 9 9 9 9

9 99 9 ·»··· • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 999 9999 99 99
53. Způsob podle nároku 52, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.
54. Způsob prevence proti onemocnění způsobené mikroorganismem, který má neuraminidasu, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci lidem nebo jiným savcům, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 31.
55. Způsob podle nároku 54, vyznačující se tím, že mikroorganismus způsobující onemocnění je vir.
56. Způsob podle nároku 55, vyznačující se tím, že vir je vir chřipky.