CZ2000327A3 - Beta-glukanáza - Google Patents
Beta-glukanáza Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2000327A3 CZ2000327A3 CZ2000327A CZ2000327A CZ2000327A3 CZ 2000327 A3 CZ2000327 A3 CZ 2000327A3 CZ 2000327 A CZ2000327 A CZ 2000327A CZ 2000327 A CZ2000327 A CZ 2000327A CZ 2000327 A3 CZ2000327 A3 CZ 2000327A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- enzyme
- seq
- amino acid
- acid sequence
- thr
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Rozšířené oblasti použití β-glukanáz, které se obvykle
používají ve slabě kyselé až neutrální oblasti pH tak, že jsou
stabilní při technických procesech probíhajících v alkalických
podmínkách. Podle řešení je možno použít enzymu získaného
z Bacillus alkalophilus DSM9956 s glukanolytickou aktivitou.
Description
Beta-glukanáza
Oblast technikv
Předkládaný vynález se týká enzymu který může hydrolyticky štěpit směsné glukany, které jsou svázány střídavě v polohách 1,3- a
1,4-3-glukosidické vazby na oligosacharidy, a mikroorganismu, který tvoří tento enzym.
Dosavadní stav techniky
Tyto enzymy patří do třídy endo-1,3-1,4-p-D-glukan-4glukanohydroláz (EC 3.2.1.73; lichenázy) nebo endo-1,3-p-Dglukosidáz (EC 3.2.1.39; laminarinázy). Ve smyslu předkládaného vynálezu se takový enzym bude označovat jako β-glukanáza nebo beta-glukanáza.
Polymerní směsné glukany výše uvedeného typu se nacházejí v různém množství prakticky ve všech výrobcích z obilí. Enzymy, které tyto látky mohou štěpit, se používají především v potravinářském, nápojovém a krmivářském průmyslu, textilním průmyslu a škrobárenském průmyslu (R.Borris, „β-Glucan-spaltende Enzyme“, v H. Ruttloff, „Industrielle Enzyme“, kapitola 11.5, Behr’s Verlag, Hamburk, 1994). Jedno z nejdůležitějších použití β-gkukanáz je v oblasti průmyslu nápojů a v pivovarství, protože tyto enzymy se používají k odbourávání β-glukanu sladu a ječmene. Enzymy, které pro toto použití přichází v úvahu, se získávají převážně z Bacillus subtilis, jak se například popisuje v německém patentovém spise DD 226 012 A1, nebo Bacillus amyloliquefaciens, ale známé jsou také β-glukanázy z jiných mikroorganismů, například Achromobacter lunatus, Athrobacter Luteus, Aspergillus aculeatus, Aspergillus niger, Disporotrichum dimorphosporum, Humicola insolens, Penicillium • « emersonii, Penicillium funiculosum nebo Trichoderma reesei.
Obchodně dostupný produkt se nabízí například pod označením
Cereflo® (Novo Nordisk A/S) pro použití v pivovarském průmyslu.
Dosud známé β-glukanázy mají optimum pH v slabě kyselé až neutrální oblasti, takže jejich použití je omezeno na způsoby, které je možno provádět při těchto hodnotách pH. Cílem vynálezu je rozšířit oblast použití β-glukanáz a vyvinout β-glukanázu - která s ohledem na použití při technických procesech, které probíhají v alkalickém prostředí, vykazuje dostatečnou stabilitu i za těchto podmínek.
Podstata vynálezu
Předmětem předkládaného vynálezu je enzym získatelný z Bacillus alkalophilus DSM 9956, který má výše uvedenou glukanolytickou aktivitu, mikroorganismus Bacillus alkalophilus DSM 9956 produkující β-glukanázu a gen kódující β-glukazánu z Bacillus alkalophilus DSM 9956, který byl v rámci prací, které vedly k předkládanému vynálezu, identifikován a sekvenován (SEQ ID No. 2). Tento gen může být v případě potřeby klonován v podstatě známým způsobem do jiných bakterií, ve kterých může být exprimována β-glukanáza. Dalším předmětem vynálezu jsou tedy také v podstatě mikrobiologickým způsobem získatelné produkční organismy, které obsahují uvedený gen. Aminokyselinová sekvence odvozená ze sekvence β-glukanázového genu z Bacillus alkalophilus DSM 9956 pro β-glukanázu získatelnou z tohoto mikroorganismu (SEQ ID No. 1) je uvedena v jednopísmenkovém kódu v obr. 1. β-glukanáza z Bacillus alkalophilus DSM 9956 včetně signálního peptidů, který je po transportu přes buněčnou stěnu mikroorganismu odštěpen signální peptidázou, a který obsahuje po srovnání s literárními údaji [Μ. E. Louw, S. J. Reid, Watson, Appl. Microbiol. Biotech. 39 (1993), 507 513] pravděpodobně 31 aminokyselin, se skládá z 308 aminokyselin.
- 3 Odpovídající mikroorganismus je grampozitivní, bakterie má tyčinkový tvar (šířka přibližně 0,7 pm až 0,9 pm, délka přibližně 2,5 pm až 4,0 pm); byl uložen přihlašovatelem 13. 4. 1995 ve sbírce DSMDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg 1b, 38124 Braunschweig pod depozitním číslem DSM 9956.
β-glukanáza podle vynálezu má s výhodou homologii více než 70 %, zvláště 75 % až 99 % vzhledem k β-glukanáze z Bacillus alkalophilus DSM9956. Stejné údaje platí pro příslušný gen pro uvedenou β-glukanázu.
Výhodná oblast použití enzymu podle vynálezu je v potravinářském průmyslu, zvláště v průmyslu nápojů a v pivovarském průmyslu, přičemž enzym se hodí zvláště pro odstraňování glukanu a/nebo lichenanu při čištění membrán a jiných zařízení v tomto průmyslovém odvětví.
Dalším předmětem vynálezu je způsob odstraňování glukanu a/nebo lichenanu při čištění membrán a jiných zařízení v potravinářském průmyslu, zvláště v pivovarském průmyslu, s použitím β-glukanázy podle vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Chromozomální DNA z Bacillus alkalophilus C/M2-3 byla částečně štěpena enzymem Sau3A a frakce o velikosti fragmentů 4 až 8 kb byly elektroforeticky izolovány. Po ligaci do štěpícího místa SamH1 plasmidů pMK4, kyvadlového vektoru E. coli - Bacillus [M. A. Sullivan a další, Gene 29 (1984), 21 - 26], byl plasmid transformován do kompetentních buněk E. coli DH5a. Rekombinantní klony s βglukanázovou aktivitou byly identifikovány barvením kongočervení na plotnách LB s 0,2 % licheninu (pH 8,5).
β-glukanáza byla čištěna ze supernatantu klonu v E. coli DH5a pmK4. Po dialýze bez buněčného supernatantu proti 20 mM pufru fosforečnanu sodného (pH 7,5) byl dialyzát navázán na materiál QSepharose (Pharmacia) a eluován lineárním gradientem 0 - 1 M NaCl ve 25 mM pufru fosforečnanu sodného (pH 7,5 nebo pH 9,0).
Důkaz a určení glukanolytické aktivity je založeno na modifikaci způsobu popsaného v M. Lever v Anal. Biochem. 47 (1972), 273 - 279 a Anal. Biochem. 81 (1977), 21 - 27. K tomu účelu se připraví roztok β-glukanu (Sigma No. G6513) s koncentrací 0,5 % hmotnostních v 50 mM glycinovém pufru (pH 9,0). 250 pl tohoto roztoku se přidá k 250 pl roztoku obsahujícího glukanolytickou aktivitu testovaného prostředku a směs se inkubuje 30 min při 40 °C. Potom se přidá 1,5 ml roztoku hydrazidu kyseliny p-hydroxybenzoové (PAHBAH) s koncentrací 1 % hmotnostní v 0,5 M NaOH, obsahující 1 mM dusičnan vismutitý a 1 mM vínan sodnodraselný a roztok se zahřívá 10 min na 70 °C. Po ochlazení (2 min, 0 °C) se stanoví absorpce při 410 nm (například s použitím fotometru Uvikon® 930) s použitím kalibrační křivky pro glukózu proti slepému pokusu. Jako slepý pokus se použije roztok, který byl připraven stejně jako měřený roztok s tím rozdílem, že se roztok glukanu přidal teprve po přidání roztoku PAHBAH. 1 U odpovídá množství enzymu, které vytvoří za těchto podmínek 1 pmol glukózy za minutu.
Specifická aktivita takto získaného enzymu byla přibližně 4390 mU na mg proteinu, na rozdíl od výchozího roztoku, který měl aktivitu o faktor 152 nižší. Enzym se vybarvil jako homogenní pruh na gelové elektroforéze SDS-polyakrylamid (barvení stříbrem).
Pomocí markerových proteinů (Cytochrom c, koňský myoglobin, chimotrypsinogen, vaječný albumin, hovězí sérový albumin) jako vnitřního standardu byla určena pomocí gelové elektroforézy SDS• · polyakrylamid molekulová hmotnost β-glukanázy z Bacillus alkalophilus DSM 9956 jako přibližně 30 000.
Metodou isoelektrické fokusace (pH 3 až 9) byl určen isoelektrický bod β-glukanázy pomocí aktivitního barvení jako pH 5,2.
Příklad 2: Profil pH
Určení glukanolytické aktivity při různých hodnotách pH se provádělo v Daviesově univerzálním pufru (21,01 g kyseliny citrónové . H2O, 13,61 g KH2PO4i 19,7 g Na2B4O7 . 10 H2O, 12,11 g Tris a 7,46 g
KCI v 1 I destilované vody; 50 ml tohoto zásobního roztoku bylo nastaveno 0,4 N NaOH na požadovanou hodnotu pH a roztok byl doplněn destilovanou vodou na 200 ml) při 40 °C a 30 minutové inkubaci. Jak je vidět z profilu pH znázorněného na obr. 2 (relativní glukanolytické aktivita, rei. A., vynesená proti hodnotě pH), je enzym nejaktivnější v oblasti mezi pH 6 a pH 10,5. Optimum je u pH 9.
Příklad 3: Profil teploty
Teplotní závislost glukanolytické aktivity β-glukanázy získané z Bacillus alkalophilus DSM 9956 byl měřen v pufru glycin/NaOH při pH 9 s 15 minutovou inkubací. Hodnota pH testovacího roztoku byla upravována, protože pufr měl teplotní závislost pH přibližně 0,033 jednotek pH na °C. Maximum glukanolytické aktivity je u 60 °C, jak je zřejmé z obr. 3, ve kterém je relativní glukanolytické aktivita (rei. A.) enzymu vynesena v závislosti na teplotě (T).
- 6 • · · ·
VÝPIS SEKVENCÍ
Obecné informace:
Žadatel:
Jméno: Cognis Gesellschaft fur Biotechnologie mbH
Ulice: Henkelstrasse 67, Gebáude Y 20
Město: Dusseldorf
Země: Nordrhein-Westfalen
PSČ: 40589
Telefon: 0211 - 7976763
Telefax: 0211 - 7987607
Název vynálezu: Nová β-glukanáza z Bacillus Počet sekvencí: 2 Adresa pro korespondenci:
Jméno: Cognis Gesellschaft fur Biotechnologie mbH
Ulice: Henkelstrasse 67, Gebáude Y 20
Město: Dusseldorf
Země: Nordrhein-Westfalen
PSČ: 40589
Počítačová forma:
Typ media: disketa Počítač: IBM PC kompatibilní Operační systém: MS-WINDOWS Software: MS WORD 97
INFORMACE PRO SEQ ID NO:1:
CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
DÉLKA: 308 aminokyselin TYP: aminokyselina TOPOLOGIE: neznámá
TYP MOLEKULY: protein HYPOTETICKÁ: ne • ·
POPIS SEKVENCE: SEQ ID NO:1:
Met | Lys | Arg | Lys | Thr | Phe | Val | Leu | Phe | Ser | Leu | Phe | Thr | Leu | Leu | Ile |
1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||||
Gly | Met | Phe | Ser | Thr | Gly | Phe | Ala | Asn | Thr | Gly | Val | Val | Gin | Ala | Glu |
20 | 25 | 30 | |||||||||||||
Asp | Gly | Arg | Pro | Met | Gly | Ser | Thr | Phe | His | Glu | Thr | Phe | Asp | Thr | Phe |
35 | 40 | 4.5 | |||||||||||||
Asn | Thr | Asp | Arg | Trp | Ser | Thr | Ala | Gly | Val | Trp | Thr | Asn | Gly | Ala | Met |
50 | 55 | 60 | |||||||||||||
Phe | Asn | Ala | Thr | Trp | Tyr | Pro | Glu | Gin | Val | Thr | Ile | Ser | Asp | Gly | Lys |
65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
Met | Lys | Leu | Gin | Ile | Asp | Lys | Glu | Asp | Asp | Glu | Asp | Ala | Thr | Pro | Glu |
85 | 90* | 95 | |||||||||||||
Tyr | Lys | Ala | Gly | Glu | Leu | Arg | Thr | Asn | Gin | Phe | Tyr | Gin | Tyr | Glv | Leu |
100 | 105 | 110 | |||||||||||||
Phe | Glu | Val | Asn | Met | Lys | Pro | Ala | Lys | Ser | Thr | Gly | Thr | Val | Ser | Ser |
115 | 120 | 125 | |||||||||||||
Leu | Phe | Thr | Tyr | Thr | Gly | Pro | Trp | Asp | Trp | Asp | Asn | Asp | Pro | Trp | Asp |
130 | 135 | 140 | |||||||||||||
Glu | Ile | Asp | Ile | Glu | Phe | Leu | Gly | Lys | Asp | Thr | Thr | Arg | Val | Gin | Phe |
145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
Asn | Tyr | Phe | Thr | Asn | Gly | Val | Gly | Asn | Asn | Glu | His | Tyr | His | Glu | Leu |
165 | i | 170 | 175 | ||||||||||||
Gly | Phe | Asp | Ala | Ser | Glu | Ser | Phe | Asn | Thr | Tyr | Ala | Phe | Glu | Trp | Arg |
180 | 185 | 190 | |||||||||||||
Pro | Glu | Ser | Ile | Ser | Trp | Tyr | Val | Asn | Gly | Glu | Leu | Val | Tyr | Thr | Ala |
195 | 200 | 205 | |||||||||||||
Thr | Glu | Asn | Ile | Pro | Gin | Thr | Pro | Gin | Lys | Ile | Met | Met | Asn | Leu | Trp |
210 | 215 | 220 | |||||||||||||
Pro | Gly | Ile | Gly | Val | Asp | Gly | Trp | Thr | Gly | Val | Phe | Asp | Gly | Glu | Asp |
225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
Thr | Pro | Val | Val | Thr | Glu | Tyr | Asp | Trp | Val | Arg | Tyr | Thr | Pro | Leu | Glu |
245 | 250 | 255 | |||||||||||||
Glu | Leu | Asp | Asn | Asn | Gly | Glu | Gin | Pro | Lys | Pro | Val | Val | Pro | Gly | Lys |
260 | 265 | 270 | |||||||||||||
Pro | Glu | Lys | Pro | Gly | Lys | Pro | Gly | Lys | Asn | Gin | Lys | Asn | Gin | Glu | Asn |
275 | 280 | 285 | |||||||||||||
Gin | Glu | Asn | Gin | Lys | Asn | Gin | Glu | Asn | Gin | Lys | Asn | Gin | Lys | Ile | Arg |
290 | 295 | 300 | |||||||||||||
Lys | Thr | Ser | Ser | ||||||||||||
305 | 308 |
INFORMACE PRO SEQ ID NO:2:
CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
DÉLKA: 927 párů basí TYP: nukleová kyselina TOPOLOGIE: dvojřetězcová
TYP MOLEKULY: genomová DNA • ·
HYPOTETICKÁ: ne
ANTI-SENSE: ne PŮVOD:
KMEN: Bacillus alkalophilus DSM 9956
POPIS SEKVENCE: SEQ ID NO:2:
ATG | AAA | AGG | AAG | ACA | TTT | GTA | TTA | TTT | TCT | TTT | ACG | TTG | TTA | 45 | |
ATT | GGT | ATG | TTC | TCA | ACA | GGG | TTT | GCA | AAT | ACA | GGT | GTG | GTT | CAG | 90 |
GCA | GAA | GAT | GGG | AGA | CCA | ATG | GGG | TCG | ACG | TTT | CAT | GAA | ACG | TTT | 135 |
GAT | ACC | TTT | AAT | ACG | GAC | CGC | TGG | TCA | ACA | GCT | GGG | GTA | TGG | ACA | 180 |
AAT | GGA | GCA | ATG | TTT | AAT | GCG | ACA | TGG | TAT | CCA | GAA | CAG | GTG | ACC | 225 |
ATT | TCA | GAT | GGG | AAA | ATG | AAG | TTG | CAA | ATT | GAC | AAG | GAA | GAT | GAT | 270 |
GAA | GAT | GCA | ACC | CCA | GAA | TAT | AAG | GCT | GGG | GAA | TTA | AGA | ACG | AAT | 315 |
CAG | TTT | TAT | CAA | TAC | GGG | TTG | TTT | GAA | GTC | AAT | ATG | AAG | CCA | GCG | 360 |
AAA | TCA | ACA | GGA | ACC | GTC | TCT | TCA | CTC | TTT | ACA | TAT | ACG | GGT | CCA | 405 |
TGG | GAT | TGG | GAT | AAT | GAT | CCT | TGG | GAT | GAA | ATC | GAT | ATT | GAG | TTC | 450 |
CTT | GGA | AAG | GAT | ACA | ACA | AGA | GTC | CAA | TTT | AAC | TAT | TTT | ACT | AAC | 495 |
GGA | C-TA | GGA | AAC | AAT | GAA | CAT | TAC | CAC | GAA | TTA | GGG | TTC | GAT | GCA | 540 |
TCA | C-AA | TCT | TTT | AAT | ACG | TAT | GCT | TTT | GAA | TGG | AGA | CCA | GAA | TCA | 585 |
ATT | AGT | TGG | TAC | GTA | AAC | GGA | GAA | TTA | GTA | TAT | ACA | GCA | ACA | GAA | 630 |
AAT | ATC | CCG | CAA | ACA | CCA | CAA | AAA | ATT | ATG | ATG | AAC | TTA | TGG | CCT | 675 |
GGA | ATT | GGA | GTG | GAT | GGA | TGG | ACA | GGC | GTT | TTT | GAC | GGA | GAA | GAC | 720 |
ACT | CCA | GTT | GTA | ACG | GAG | TAT' | GAT | TGG | GTA | AGG | TAC | ACT | CCA | CTA | 765 |
GAG | GAA | TTA | GAT | AAT | AAC | GGA | GAA | CAA | CCG | AAA | CCT | GTA | GTG | CCA | 810 |
GGA | AAA | CCA | GAA | AAA | CCA | GGA | AAA | CCA | GGG | AAA | AAC | CAG | AAA | AAC | 855 |
CAG | GAA | AAC | CAG | GAA | AAC | CAG | AAA | AAC | CAG | GAA | AAC | CAG | AAA | AAC | 900 |
CAA | AAA | ATC | AGA | AAA | ACC | AGT | AGT | TGA | 927 |
Zastupuje:
Claims (11)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Mikroorganismus Bacillus alkalophilus DSM 9956 produkující β5 glukanázu.
- 2. Enzym vykazující β-giukanolytickou aktivitu, vyznačující se tím, že má aminokyselinovou sekvenci uvedenou na obr. 1.
- 3. Enzym vykazující β-glukanolytickou aktivitu, vyznačující se tím, že má homologii více než 70 % s aminokyselinovou sekvencí enzymu uvedenou jako SEQ ID No. 1.
- 4. Enzym podle nároku 3, vyznačující se tím, že má homologii 75 % až 99 % s aminokyselinovou sekvencí enzymu uvedenou jako SEQ ID No. 1.20
- 5. Gen kódující enzym podle některého z nároků 2 až 4.
- 6. Gen podle nároku 5, vyznačující se tím, že má sekvenci uvedenou jako SEQ ID No. 2 nebo je s touto sekvencí z více než 70 % homologní.
- 7. Gen podle nároku 6, vyznačující se tím, že má se sekvencí uvedenou jako SEQ ID No. 2 homologii od 75 % do 99 %.- 10 • ·
- 8. Průmyslový produkční organismus získaný v podstatě mikrobiologickým způsobem obsahující gen podle některého z nároků 5 až 7.
- 9. Použití enzymu s β-glukanolytickou aktivitou s aminokyselinovou sekvencí uvedenou v obr. 1 pro odstranění glukanu a/nebo lichenanu při čištění membrán a zařízení v potravinářském průmyslu, zvláště pivovarském průmyslu.
- 10. Použití enzymu s β-glukanolytickou aktivitou, který je homologní z více než 70 %, zvláště ze 75 až 99 % s aminokyselinovou sekvencí enzymu uvedenou jako SEQ ID No. 1, pro odstranění glukanu a/nebo lichenanu při čištění15 membrán a zařízení v potravinářském průmyslu, zvláště pivovarském průmyslu.
- 11. Způsob odstraňování glukanu a/nebo lichenanu při čištění membrán a zařízení v potravinářském průmyslu, zvláště20 v pivovarském průmyslu, vyznačující se tím, že se použije enzym s β-glukanolytickou aktivitou, který má aminokyselinovou sekvenci uvedenou na obr. 1, nebo je homologní z více než 70 % s enzymem s aminokyselinovou sekvencí uvedenou jako SEQ ID No. 1.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ2000327A CZ2000327A3 (cs) | 1998-07-21 | 1998-07-21 | Beta-glukanáza |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ2000327A CZ2000327A3 (cs) | 1998-07-21 | 1998-07-21 | Beta-glukanáza |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ2000327A3 true CZ2000327A3 (cs) | 2000-07-12 |
Family
ID=5469427
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ2000327A CZ2000327A3 (cs) | 1998-07-21 | 1998-07-21 | Beta-glukanáza |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CZ (1) | CZ2000327A3 (cs) |
-
1998
- 1998-07-21 CZ CZ2000327A patent/CZ2000327A3/cs unknown
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4222723B2 (ja) | バシラス由来の新規なβ−グルカナーゼ | |
FI106315B (fi) | Menetelmä entsyymien stabiilisuuden parantamiseksi sekä stabiloidut entsyymit | |
JP4571604B2 (ja) | トリペプチジルアミノペプチダーゼ | |
Saul et al. | celB, a gene coding for a bifunctional cellulase from the extreme thermophile" Caldocellum saccharolyticum" | |
Ganter et al. | Production of thermostable, recombinant α-galactosidase suitable for raffinose elimination from sugar beet syrup | |
JP2000210081A (ja) | 耐熱性アルカリセルラ―ゼ遺伝子 | |
PEREZ‐PONS et al. | A β‐glucosidase gene (bgl3) from Streptomyces sp. strain QM‐B814: Molecular cloning, nucleotide sequence, purification and characterization of the encoded enzyme, a new member of family 1 glycosyl hydrolases | |
Lee et al. | Cloning, nucleotide sequence, and hyperexpression of α-amylase gene from an archaeon, Thermococcus profundus | |
Morales et al. | Purification and characterization of alkaline xylanases from Bacillus polymyxa | |
NZ240305A (en) | Protease derived from bacillus licheniformis | |
Montiel et al. | Evaluation of an endo-β-mannanase produced by Streptomyces ipomoea CECT 3341 for the biobleaching of pine kraft pulps | |
US5705379A (en) | Nucleotide sequences encoding a thermostable alkaline protease | |
AU754791B2 (en) | Phenolic acid esterases, coding sequences and methods | |
JP3081434B2 (ja) | アルカリセルラーゼ | |
CZ2000327A3 (cs) | Beta-glukanáza | |
EP1498476B1 (en) | Mutated alkaline cellulase | |
EP0302838B1 (en) | Cloning of the gene coding the isoamylase enzyme and its use in the production of said enzyme | |
HENNINGSEN et al. | Cloning, sequencing and expression of the sialidase gene from Actinomyces viscosus DSM 43798 | |
Yosida et al. | Purification, Properties, and N-Terminal Amino Acid Sequences of Guar Gum-degrading Enzyme from Bacillus circulans Kl | |
JP4380874B2 (ja) | アルカリセルラーゼ遺伝子 | |
US6280984B1 (en) | DNA constructs and methods of producing cellulytic enzymes | |
JP4358984B2 (ja) | アルカリセルラーゼ遺伝子 | |
JP2002085078A (ja) | アルカリセルラーゼ遺伝子 | |
JP2000262292A (ja) | プロトペクチナーゼをコードする遺伝子、該遺伝子を含有する形質転換体、及び該形質転換体を用いる繊維の精練方法 | |
Kim et al. | Characterization of the arfA Gene from Bacillus stearothermophilus No. 236 and Its Protein Product, $\alpha $-L-Arabinofuranosidase |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |