CZ2000292A3 - Farmaceutický prostředek aktivní při snižování produkce proteinu MCP-1 - Google Patents

Abstract

Použití sloučeniny vzorce (I) ajejí soli s farmaceuticky přijatelnými organickými nebo anorganickými bázemi pro přípravu farmaceutického prostředku aktivního při léčení poruch charakterisovaných produkcí proteinu MCP-1.

Description

Farmaceatický prostředek aktivní při snižování produkce proteinu MCP-1

Oblast techniky

Předložený vynález se vztahuje k použití indazo1 oxya1 Ranových kyselin a pro přípravu farmaceutického přípravku aktivního při léčení poruch charakter isováných p r o du k c í proteinu MCP-1.

Dosavadní stav techniky

US patent č .. 3 -470 194 popisuje kyselinu ( 1-benzyl-1H-indazo1-3-yl)oxyoctovou vzorce (I),

(I) která ma proti zánět 1 ivé účinky a je známa rovněž pod jménem benzadak.

Kromě toho použití benzadaku a jeho solí s farmaceuticky přijatelnými bázemi je známo v terapií některých případů dyslipemie (US patent č. 4 352 813). pigmentální retinitidy (EP-B-131 317) a kataraktu (US patent č. 4 451 477).

Navíc bylo použití benzadaku a jeho solí popsáno jako prevence proti zakalování kontaktních čoček (EP 255 967).

• · β φ « « ♦ • · · · ·

Nyní bylo zjištěno, že sloučenina vzorce (I) aktivní při snižování produkce proteinu MCP-1.

je rovněž

Jak je již známo, protein MCP-1 (monoeytový chemotaktický protein-1) je chemokin náležející do β podskupiny chemokinů (basofilních krvinek). Má silnou chemotaktickou aktivita pro monocyty a působí také na T lymfocyty, mastocyty a basofily.

Ostatní chemokiny, náležející do β podskupiny, jsou například MCP-2 (monoeytový chemotaktický protein-2), MCP-3, MCP-4, MIP-Iúc, a ΜΙΡ~1β, RANTES a protein 1309.

Podskupina β se liší od podskupiny a ve struktuře. Zatímco první dva cysteiny chemokinů podskupiny a jsou ve skutečnosti odděleny vloženou aminokyselinou, první dva cysteiny podskupiny β spolu navzájem sousedí. MCP-1 je produkován několika typy buněk (leukocyty, krevními destičkami, fibroblasty a endotelními buňkami).

Ze všech známých chemokinů, vykazuje nejvyssi specifičnost, pokud se týká monocytů a makrofágů, MCP-1, pro které je nejenom přitahujícím faktorem, ale rovněž stimulem aktivace vyvolávajícím proces produkce superoxidů a kyseliny arachidonové. Současně je podnětem pro zvýšení aktivity f agocytů.

Sekrece chemokinů obecně vyvolávána mnoha faktory jako (IL-1), interleukin-2 (IL-2), a), r-interferon a bakteriální a sekrece MCP-1 obzvláště, je jsou například in t e r1euk i n-1 TNF α (faktor tumorové nekrozy i ρ o ρ o 1 ys a c ha r i d ( LP S) .

φφφ φ · • · · · · · · · · · · φ φφφ φφφφ φφφφ φφφφφ φφ ·< φ · ··

ΦΦΦ

U člověka byl. .MCP-1 nalezen u velkého počtu poruch s akutním nebo chronickým průběhem, který není v homogenních kategoriích tradiční medicíny klasifikován.. Jedná se například o intersticiální ne moce plic (ILD), vaskulitidy , aterosklerosy a nemoce ledvin, jako jsou například nefritidy n efrí t i cké syn dro my, nefrosy charakterisované progresivnί, profil ickou, membránovou nebo membranoprofi 1 ickou g 1 o mo r u 1 o n e f r i t i do u.

Při intersticiálních poruchách plic MCP-1, uvolněný pl i čními endotelními buňkami, přitahuje a aktivuje buňky, která jsou zodpovědné za následující uvolnění mediátorδ poškozujících alveolární strukturu plic.

Při vaskulitidě MCP-1, uvolněný po škodlivých stimulech endotelními buňkami cév, přitahuje a aktivuje monocyty a ostatní typy buněk, které jsou zodpovědné za poškození va s k u , á r η í s t ě n y,

Při aterosklerose je MCP-1 produkován vaskulárním endothelem po čemž následuje poškození hladkých vaskulárních svalových buněk. MCP-1 přitahuje monocyty, které se zpočátku pe vn ě drž í a rteri á1 η í stěny a poté migrací skrze stě ny přispívají ke tvorbě atheromu tím, že podněcují bujení hladkých svalových buněk.

Při ledvinových poruchách jsou fatogenetické mechanismy charakter isovány aktivací humorálních a buněčných faktorů, které na počátku přispívají k poškozování glomeruly a tubulusu. Ve zvláštním případě je počáteční jev téměř vždy charakterisován střevní infiltrací buněk bílého typu. Takový jev je podnícen a monitorován rozpustnými faktory, mezi kterými hraje v těchto poruchách důležitou roli MCP-1, díky • · • · · • · · · · • ·

4 svému charakteru chemotaktického proteinu, vybaveného vysokou specifičností vzhledem k monocytftm a makrofágům.

Terapie v současnosti užívané při těchto poruchách,, jsou nespecifické, protože působí proti patologickému jevu a velmi často mají četné a občas velice vážné vedlejší účinky.

Výše uvedené terapie, na druhé straně, navíc pouze umožňují dočasné vymizení patologického jevu a jejich vysoká toxicita zabraňuje jejich dlouhodobějšímu používání v případech nezbytných p.ro nemoce chronického typu..

Specielně při aterosk1 erose působí v současnosti používané léky pouze na určité faktory, které přispívají ke tvorbě ateromu, jako je hypercho 1 estero 1emie nebo hypertense, zatímco na cíl patologického procesu, to jest na vaskulární stěnu, nemají žádný vliv.

Chemotaktické faktory obecně a MCP-1 zvláště jsou také velmi důležité v případech, kdy dochází ke komplikacím následujících po chirurgických zásazích jako jsou například angi op 1astika, aterektomie, techniky obnovení oběhového systému, transplantace, náhrady orgánů, náhrady tkání a protetické implantace.. Počátek takových komplikací často nutí pacienta podstoupit další intensivní terapie nebo dokonce nový zákrok.

US patent, č. 5 571 7 1 3 nárokuje prostředek obsahující opačně orientovaný oligonukleotid MCP-1 pro in vitro inhibici produkce MCP-1 pomocí mononuk 1eárηích lidských buněk a hladkého svalu.

tohoto důvodu je stále naléhavá potřeba $

9

• · farmaceutického prostředku, účinného při léčení poruch charakterisovaných produkcí MCP-1, například aterosklsrosy, vaskulitidy, intersticiá1 ních plicních poruch, ledvinových poruch, pooperačních komplikací při kardiovaskulární chirurgii, při transplantaci orgánů něho náhradě tkání a při protetických implantacích.

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu je tedy zajistit použiti kyše I i ny ( 1 -benzy 1 -1 H-i ndazo 1 -3 ~y 1 ) oxyoc t o vé (benzadak) vzorce (I)

(Ό a její soli s farmaceuticky přijatelnými organickými nebo anorganickými basemi pro přípravu farmaceutického přípravku aktivního při léčení poruch charakterisovaných produkcí proteinu MCP-1.

Typickými příklady poruch charakter isovaných produkcí proteinu MCP-1 jsou: aterosklerosa, vaskulitida, intersticiální poruchy plic, onemocnění ledvin, pooperační komplikace kardiovaskulární orgánů nebo náhradách tkání chirurgie, při transplantacích a při protetických implantacích.

Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu jsou přednostně připravovány ve vhodných dávkovačích formách • ·

• · ··

obsahujících účinnou dávku alespoň jedné sloučeniny obecného vzorce (I) nebo její soli s farmaceuticky přijatelnou bází a alespoň jednu farmaceuticky přijatelno u inertní přísadu..

Příklady vhodných dávkovačích forem jsou tablety,

Raps1e_r povlečené tablety, granu1e, r o zto R v a s i r upy pro orální podávání, med i kál ní hojivé náplasti pro transdermální podávání, čípky pro rektální podávání a sterilní roztoky pro podávání i nj t kovat.e 1 nými , aerosolovými nebo oftalmickými c e s t a m i .

Další vhodné dávkovači formy jsou pomalu se uvolňující formy na základě liposomů, pro podávání orální cestou nebo i n j e k c e m i .

Dávkovači formy mohou též obsahovat další vhodné přísady například stabi1 i sující ochranné látky, povrchově aktivní látky, pufry, soli pro regulaci osmotickáho tlaku, emu1sifikační činidla, sladidla, barvící látky, aromatizující 1á t k y a podobně.

Pokud to speciální terapie vyžadují, muže farmaceutický prostředek podle předkládaného vynálezu obsahovat jiné farmakologicky aktivní přísady, jejichž průvodní podávaní je terapeuticky užitečné.

Množství sloučeniny vzorce (I) nebo její soli s farmaceuticky přijatelnou bází ve farmaceutickém prostředku podle předkládaného vynálezu, se může v širokém rozsahu měnit, v závislosti na známých faktorech jako jsou například, typ nemoci, která má být léčena, vážnost onemocnění, hmotnost pacientova těla, forma dávkování, zvolená cesta podávání léku, četnost denních dávek a účinnost vybrané sloučeniny

vzorce (I). Optimální množství lze však odborník v oboru snadno a běžným způsobem stanovit.

V typickém případě bude množství sloučeniny vzorce (I) nebo její soli s farmaceuticky přijatelnou bází ve f ermacent jcitém prostředku podle předk 1 ádané ho vynálezu takové, že zajistí hladinu podávání od 1 do 100 mg/kg za den. Preferuje se hladina podávání od 5 do 50 mg/kg za den nebo, ještě lépe, od 2 do 20 mg/kg za den.

Formy dávkování farmaceutického prostředku podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny technikami, které jsou farmakologovi známé a zahrnují míchání, granulaci, slisování, rozpouštění, sterilizaci a podobně.

Aktivita prostředku podle předkládaného vynálezu může být vyhodnocena následujícími testy.

Příklady provedení vynálezu

Test 1

Vliv léku na produkci MCP-1

Byla hodnocena schopnost léčiva snížit produkci MCP-1 leukocity (PBMC) stimulavané pomocí LPS. Bílé krevní buňky byly izolovány odstředěním na Ficoll gradientu a poté stimulovány LPG v přítomnosti nebo v nepřítomnosti skalárních koncentrací vyhodnocovaného léčiva. Nakonec byla sebrána supernatální tekutina a hladiny MCP-1 byly změřeny pomocí specifického imunoenzymatického testu.

·· ·* ftft ftft ftftft · · · · • ftftftft · ·· · • ftft ftftft ftft · ft ftft · · ftft · • ft ftft ftft ftft

Test 2

V1 i v 1éku na buněčnou př f taž 1 i vost v mys ím vzdušném váčku

Účinek léku byl studován na experimentálním modelu na myši, kterýžto model je charaktertsován produkcí MCP-1, infiltrací buňky a tvorbou exudátu. Myši dostávaly podle libosti standartní krmivo pro hlodavce nebo stejnou stravu s přídavkem vyhodnocovaného léku. Pod etherovou anestesí byl pod dorsální pokožku myší vstříknut sterilní vzduch takovým způsobem, aby se vytvořil váček. Do takto vytvořeného váčku byl vstříknut sterilní fysiologický roztok nebo dráždící látka. Uvedenou dráždící látkou může být karrageen nebo IL-1 .. Myši byly usmrceny udušením pomocí oxidu uhličitého. Vytvořený exudát byl sebrán a použit pro stanovení počtu leukocytů a pro měření vyrobených mediátorů.

Claims (2)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití sloučeniny vzorce (I) a její soli s farmaceuticky přijatelnými organickými nebo anorganickými bázemi, pro přípravu farmaceutického prostředku aktivního při léčení poruch charakteristických produkcí proteinu MCP-1.
2. 2. Použití sloučeniny vzorce (I) podle nároku 1, kde poruchy charakterisované produkcí proteinu MCP-1 jsou vybrány ze souboru zahrnujícího aterosklerosu, vaskulitidu, intersticiální plicní poruchy, pooperační komplikace v kardiovaskulární chirurgii, při transplantaci orgánu nebo při náhradě tkání a při protetických implantacích.