CZ20001636A3 - Farmaceutické přípravky obsahující cyklodextriny a taxoidy - Google Patents

Abstract

Řešení se týká rozpustných pevných farmaceutických přípravků ajejich vodných roztoků, farmaceutické přípravky obsahují a) jako aktivní látku jemně dispergovaný, s velkým povrchem, amorfní, s výhodou lyofilizovaný taxoid, například paclitaxel a docetaxel, případně ve formě jejich solí, nebo jejich polymorfních hydrátů, nebo solvátů například solvátů tvořených s ethanolem; a b) jemně dispergovaný, s velkým povrchem, amorfní, s výhodou lyofilizovaný acetyl-γcyklodextrin, nebo hydroxy-propyl-B-cyklodextrin), kde hmotnostní poměr taxoidu a cyklodextrinu je v rozmezí od 1 : 25 do 1 : 400; c) případně další ve vodě rozpustné auxiliární materiály obvyklé ve farmaceutikách pro parenterální účely.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká ve vodě rozpustných pevných farmaceutických přípravků a jejich vodných roztoků pro parenterální použití obsahující taxoidy a jisté cyklodextriny bez škodlivých rozpouštědel a/nebo detergentů. Konkrétněji se vynález týká nových ve vodě rozpustných pevných farmaceutických přípravků a jejich vodných roztoků, kde uvedené přípravky obsahují

a) jako aktivní látku taxoid, například paclitaxel a docetaxel, případně ve formě jejich solí, nebo jejich polymorfní hydráty, nebo solváty například solváty tvořené s ethanolem; a

b) acetyl-y-cyklodextrin, nebo hydroxy-propyl-β-cyklodextrin s velkým povrchem (dále jen cyklodextrin)

-kde hmotnostní poměr uvedeného taxoidu a uvedeného cyklodextrinu je v rozmezí od 1 :

do 1 : 250;

c) případně další ve vodě rozpustné auxiliární materiály obvyklé ve farmaceutikách pro parenterální účely.

Vynález se také týká přípravy a použití uvedených injekovatelných farmaceutických přípravků.

Dosavadní stav techniky

Taxoid je skupinový název pro paclitaxel a strukturně podobné sloučeniny. Paclitaxel je sloučenina známá svou významnou aktivitou proti rakovině, působící jako mitotický jed a jako účinný inhibitor buněčné replikace. Je také známo, že má špatnou rozpustnost ve vodě tedy asi 0,0005 mg/ml při pokojové teplotě a je o něm zjištěno, že je nestabilní v roztoku při skladování důsledkem hydrolýzy esterové vazby vedoucí ke ztrátě cytotoxické aktivity. Je dodáván v roztoku ve směsi ethanol Cremophor EL (polyhydroxylováný pižmový olej 1:1).

Bylo zjištěno, že Cremophor EL vyvolává některé nežádoucí reakce (přecitlivělost, uvolnění histaminu) během intravenózmho podání, a proto bylo v uplynulých deseti letech učiněno mnoho pokusů o vývoj nových systémů podání tohoto léku.

Pokud je paclitaxel ve formě roztoku v organických rozpouštědlech ethanolu a polyethoxylovaného pižmového oleje, je podáván jako přesycená suspenze oleje ve vodě a rychle se ředí v krvi, vodném prostředí bohaté na hydrofóbní domény poskytované lipidy a proteiny.

Paclitaxel prochází přes hydrofóbní prostředí plasmatické membrány a vstupuje a opouští difúzí buňky.

*· · · ···· ·· ·· ·· ·* · · · · · ·· ··· · · · · • · · · ·· · · · · · • · ··· · · · · ·· *· φ »· ··

Sklon paclitaxelu precipitovat v rozpouštědle a koncentraci závislé jeho agregaci byl překážkou při snaze vyvinout farmaceutickou formu této špatně rozpustné sloučeniny s farmaceuticky přijatelnými excipienty pro klinické podávání.

Je rovněž známo, že docetaxel, semisyntetický taxoid, je vysoce lipofilní a více rozpustný ve vodě, než paclitaxel (USP 4814470). Komerčně dostupný docetaxel pro injekční podám'je sterilní roztok látky v polysorbátu 80, s 13% (podle hmotnosti) ethanolem jako doprovodným ředidlem ve vodě pro injekční podání. Maximální koncentrace látky, která by měla být použita byla od 0,3 do 0,9 mg/ml. Vyšší koncentrace než 0,9 mg/ml nebyla možná protože nastávaly problémy s precipitací. Reakce hypersensitivity spojená s podáním polysorbátu 80 může působit problémy při použití komerčně dostupných forem.

Bylo vyzkoušeno široké spektrum přístupů k přípravě různých forem včetně vehikul s hydrofobními charakteristikami. Ve většině vehikul je taxoid přítomen v milimolámích koncentracích, což je srovnatelné s koncentracemi za jakých je u taxoidu pozorována agregace vedoucí k precipitací.

Na základě interakcí mezi taxoidy a cyklodextriny byly navrženy některé další postupy. Pomocí studia mobility taxoidu v přítomnosti cyklodextrinu při tenkovrstevné chromatografií (Int. J. Pharm. 1994. 108. 64-75) bylo zjištěno, že interakce mezi taxoidem a cyklodextrinem je velmi slabá. Později (AU-P-35544/93; 645.927) bylo dosaženo určitého zvýšení rozpustnosti taxoidu pomocí nesubstituovaných cyklodextrinů a enzymově modifikovaných větvených β-cyklodextrinů.

Pro vodné parenterální roztoky málo rozpustných látek byla v přítomnosti cyklodextrinů minimalizace precipitace látek v místě injekce, nebo v orgánech bezprostředně po parenterální podání (USP 5 024 998). Bylo také dosaženo zvýšení rozpustnosti při použití vysokých (asi 50% hmotnost/objem) koncentrací CD a že s některými látkami je možno z těchto koncentrátů získat pevné produkty určující, že při koncentracích CD menších než 20% hmotn./obj. může dojít k precipitací. Mezi velkým množstvím látek uvedených v popisu není žádná zmínka o taxoidech ani o acetyl-yCD.

Dalším zlepšením bylo použití roztoků methylovaných β-cyklodextrinů (PCT WO 94/26728) a kombinace methylovaného β-cyklodextrinu a ethanolu jako účinných enhancerů rozpustnosti paclitaxelu pro přípravu jeho roztoků o koncentraci od 1 do 4 mg/ml (EP 788373). Tyto koncentráty taxoidů nevykazují problémy s precipitací při ředění do určitého stupně a nahrazují použití toxických detergentů. Bylo navrženo také použití 2,6-di-O-methyl^•cyklodextrinu jako účinějšího enhancerů rozpustnosti paclitaxelu (EPA 0639380) a byly publikovány výsledky dokumentující jeho potenciál jako látky zvyšující rozpustnost (J. Pharm. Sci. 84. 10. 1223-1230; 1995). Byly vysloveny obavy týkající se použití methylovaných β• · · · · · · · · ·· · · ···· φ · · ···· • ·· · · · ···» ·· · · · φ · · · · · · ··· · · · ···· • •••Φ ·· · · · · ·

-cyklodextrinů plynoucí u jejich povrchově aktivních vlastností, jejich afinity k cholesterolu a dalším lipidových komponent buněčných membrán dokonce i při nízkých koncentracích.

Byly publikovány některé studie o použití cyklodextrinů spolu s ve vodě rozpustnými látkami, aby se omezilo hnisání v porovnání s přípravky bez cyklodextrinů (WO 95/06485). Ačkoliv není paclitaxel rozpustný ve vodě zahrnuje popis patentu také příklad „Taxol“ v 50% ethanolu, aby byl popsán účinek přidání „HPCD“. Výsledky ukazují, že HPCD vykazuje ochranný účinek na kůži, pokud Taxol intradermáně deponován, což vede ke zmenšení rozsahu leze.

Bylo uveřejněno použití přes síru větvených cyklodextrinů pro solubilizaci protirakovinných taxoidů (například docetaxel a paclitaxel viz PCT WO 95/19994) bez detailního uvedení týkajících se zlepšení solubility, stability nebo toxicity. Takové formy prokazují podstatné zvýšení rozpustnosti paclitaxelu ve vodě. Avšak při zředění pro parenterální podání je pozorována precipitace látky.

Cílem vynálezu je další vylepšení solubility taxoidů v injekčních formách a stability léků pro parenterální podání obsahujících taxoidy zatímco případná toxicita použitých materiálů je snížena.

Základem vynálezu je poznání, že acetyl-y-cyklodextrin a hydroxy-propyl-β-cyklodextrin vykazují pozitivní účinky na prodloužení stability přesycených směsí z rozpuštěným paclitaxelem a docetaxelem a zamezení předčasné precipitace bez použití ethanolu jako spolurozpouštědla.

Překvapujícím zjištěním bylo, že γ-cyklodextrin a jeho hydroxypropylenované deriváty, které jak známo vytvářejí největší kavity mezi všemi CD, jsou méně vhodné pro solubilizaci a komplexaci paclitaxelu (Int. J. Pharm. 133. 191-201. 1996). Naše studie využívající studium rovnovážné koncentrace paclitaxelu ve vodném roztoku jako funkce koncentrace chemicky modifikovaných γ-cyklodextrinů potvrdily nepravděpodobnost praktického využití při solubilizaci paclitaxelu pro nutnost použití vysokých koncentrací cyklodextrinů. (viz. tabulka 1: Rozpustnost paclitaxelu v závislosti na koncentraci acetyl-y-cyklodextrinu.)

Tabulka 1

Acetyl-y-cyklodextrin (%) m/V	Rozpuštěný (pg/ml)	paclitaxel
2	4,0
5	8,8
10	25,0
20	48,0
40	170,0

·· ·· ···· · · ·· • · ·· · ···· ·· ··· · · · ·

Rozpustnost paclitaxelu ve vodě za pokojové teploty je asi 0,5 pg/ml, 170 pg/ml rozpuštěného paclitaxelu ve 40% acetyl-y-cyklodextrinu tedy znamená dosažení asi 340 násobného zvýšení rozpustnosti. Výše uvedené výsledky jsou však neuspokojivé porovnáme-li je s výsledky popisujícími možnost rozpuštění 800-1000 pg/ml paclitaxelu ve 40% hmotn./obj.DIMEp. Podobně nedobré výsledky byly dosaženy při použití HPpCD jako solubilizátoru. Tyto hodnoty jsou vzdáleny od hodnot žádoucích a odpovídajících terapeutickým dávkám paclitaxelu, protože použití takových dávkových forem by znamenalo podám' více než 70 gramů cyklodextrinu spolu s paclitaxelem jehož dávková jednotka by byla 30 mg.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je způsob přípravy farmaceutických přípravků pro parenterální použití jako okamžitě rozpustných pevných látek a stejně tak jako jejich roztoků ve vodných rozpouštědlech obsahujících acetyl-y-cyklodextrin, nebo hydroxy-propyl-β-cyklodextrin (dále jen cyklodextrin) zahrnující:

a) rozpuštění taxoídu, s výhodou paclitaxelu, nebo docetaxelu, nebo jejich sob, nebo hydrátů s ethanolem, provedené některým z následujících kroků:

i) přidání pevného cyklodextrinu a případně dalších ve vodě rozpustných pomocných látek obvykle v farmaceutik pro účely parenterálního podám', rozpuštění směsi ve vodném rozpouštědle a lyofilizace za získání pevné látky, nebo ii) přidám pevného amorfního cyklodextrinu s velkým aktivním povrchem (s výhodou lyofilizovaného) a případně dalších ve vodě rozpustných pomocných látek obvyklé pro farmaceutika pro účely parenterálního podání, odpaření rozpouštědla a vysušení za získání pevné látky, nebo iii) smíchání roztoku s amorfním cyklodextrinem s velkým aktivním povrchem s výhodou lyofilizovaným (a případně dalších ve vodě rozpustných pomocných látek obvykle farmaceutik pro účely parenterálního podání) a poté rozpuštění ve vodném rozpouštědle případně v přítomnosti účinného množství isotonizujících aditiv za získání roztoku obsahujícího:

a) taxoid jako aktivní složku a

b) cyklodextrin a

c) případně další ve vodě rozpustné pomocné materiály obvyklé pro farmaceutika pro účely parenterálního podání, kde hmotnostní poměr taxoid : cyklodextrin je mezi 1 : 25 a 1 : 400; a případně ·· *· ···· ·· ·· • * · · · · · · • ft · · · ···· •ftft ft· ft· · · · •ftft ··· ···· ····· ·· · a · «»

b) použití kroků i) nebo ii) pro rozpuštění pevné látky ve vodném rozpouštědle k získání parenterálního roztoku určeného pro přímé medicínské použití.

Podle vynálezu je taxoid paclitaxel použit v hydratované polymorfní formě, nebo v solvatované formě, jako je solvát s ethanolem.

Ve výhodném provedení jsou aktivní složka paclitaxel a acetyl-y-cyklodextrin použity v hmotnostním poměru od 1 : 100 do 1 : 250. Dalším výhodným provedením je použití docetaxelu s HPpCD v hmotnostních poměrech od 1 : 25 do 1 : 100.

Při provádění způsobu podle vynálezu je možno jako vodné rozpouštědlo nebo zřeďovadlo použít kteroukoli z následujících kapalin: vodu pro injekční použití, vodné roztoky isotonizujících aditiv, například chlorid sodný, glukosa, manitol, dextrosa. Uvedené roztoky musí obsahovat uvedené složky tak, že splňují následující podmínky. Koncentrace známé jako vhodné při použití isotonizátorů ve farmaceutických roztocích mohou být poněkud modifikovány vzhledem k přítomnosti cyklodextrinů a taxoidů. Koncentrace řádově 0,9% hmotn./obj.chloridu sodného, nebo asi 5% hmotn./obj.glukosy musí být tedy optimalizovány pro konkrétní směs v závislosti na použitém taxoidu a množství a kvalitě použitého CD.

Dalšími předměty podle vynálezu jsou farmaceutické přípravky obsahující jako aktivní látku jakýkoli produkt, pokud tento připraven podle způsobu podle vynálezu.

Ještě dalšími předměty vynálezu jsou ve vodě rozpustné farmaceutické přípravky a jejich roztoky ve vodných rozpouštědlech obsahující:

a) jako aktivní látku jemně dispergovaný taxoid s velkým povrchem, například paclitaxel, nebo docetaxel, případně ve formě jejich solí, nebo jejich polymorfní hydráty, nebo solváty například s ethanolem a

b) jemně dispergovaný acetyl-y-cyklodextrin, nebo hydroxy-propyl-p-cyklodextrin (cyklodextrin) s velkým povrchem hmotnostní poměr taxoidu a uvedeného cyklodextrinů je mezi 1 : 25 a 1 : 250;

c) a případně další ve vodě rozpustné pomocné látky obvykle farmaceutika pro účely parenterálního podání.

Výhodné přípravky podle vynálezu obsahují jako aktivní látku paclitaxel a jako cyklodextrin acetyl-y-cyklodextrin v hmotnostním poměru 1 : 100 až 1 : 250. Dalšími výhodnými přípravky jsou kombinace docetaxelu a hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu v hmotnostním poměru : 25 až 1 : 100.

• 9 9 «φφφ • 9Φ φφ φφ φ • · Φ ΦΦΦΦ »· · ·« ·· •r· · Φ φ Φ • Φ ΦΦ

Dalšími předměty vynálezu jsou způsoby pro zamezení samoagregace a předčasné precipitace taxoidů, například paclitaxelu a docetaxelu a jejich solí, solvátů a hydrátů ve vodných roztocích a pro prodloužení udržení přesycených roztoků těchto látek pro použití taxoidů ve formě farmaceutických přípravků podle vynálezu jak jsou detailně popsány výše.

Ještě dalším předmětem vynálezu je způsob ovlivnění nežádoucí proliferace buněk využívající účinná množství farmaceutických přípravků podle vynálezu jak jsou detailně popsány výše. Roztoky paclitaxelu připravené pro okamžité použití zůstávají fyzikálně stálé po pozoruhodně dlouhý čas. Intravenózní léčba obecně vyžaduje, aby použité roztoky byly fyzikálně stabilní alespoň 6 hodin. Jsou-li sloučeniny podle vynálezu rozpuštěny ve vodných roztocích zůstávají stabilní alespoň po 6 až 8 hodin. V případě roztoků kombinace paclitaxel/AcyCD stejně jako docetaxel/AcyCD nebo HPpCD byla zjištěna fyzikální stabilita delší než 24 hodin.

Podle způsobu podle vynálezu je pacientovi, který takovou léčbu potřebuje, podávána dávková forma obsahující farmaceutický přípravek. Dávkové jednotky 100 mg taxoidů mohou být připraveny v lyofílizované formě. Ty mohou být zředěny za získání dávkových roztoků připravených pro použití a aplikovatelných například intravenózně. V závislosti na požadavcích léčby v konkrétním případě může být pacientovi podáno několik 100 mg dávek tak, aby bylo dosaženo účinné dávky odpovídající žádanému množství vyjádřenému obvykle v mg/m² tělesného povrchu. Například doporučená dávka paclitaxelu se pohybuje od 135 do 250 mg/m² tělesného povrchu. Lék se může být účinně používat intravenózně, intraperitoneálně, intramuskulámě v závislosti na typu rakoviny, která má být léčena, a taxoidů a cyklodextrinu zvoleného pro použití. Zlepšené výsledky léčby ve srovnání se známými terapiemi mohou být dosaženy vlivem snížené toxicity dávkové formy ve srovnání s toxicitou vehikul obsažených v doposud používaných směsích. Není také nezbytné podrobovat pacienty premedikaci proti hypersenzitivitě a dalším nežádoucím vedlejším účinkům pomocí steroidů, antihistaminik a antagonistů IL-receptorů před podáváním paclitaxelu, nebo docetaxelu a zabraňovat tak hypersenzitivní reakci.

Následující definice jsou používány v celém rozsahu následujícího popisu a patentových nároků:

paclitaxel = taxol A;

docetaxel = (N-dibenzoyl-N-terc.-butoxykarbonyl)-10-diacetyl-paelitaxel;

„vodná rozpouštědla“ = voda pro injekční podání, nebo vodný roztok obsahující rozpuštěný isotonizer v množství a koncentraci účinné pro isotonizaci uvedených vodných roztoků například chlorid sodný, glukosa;

·♦ • · · · • · ·· „amorfní“

CD γ-cyklodextrin β-cyklodextrin

AcyCD

HPpCD

DIMEp = vykazující amorfní strukturu při zkoumání pomocí rentgenové difrakce;

= cyklodextrin;

= cyklomaltooktaosa;

= cyklomaltoheptaosa;

= acetyl-y-cyklodextrin;

= hydro xypropyl-p-cyklodextrin (asi 2 až 8 hydroxypropylových skupin na CD-jednotku) = heptakis-2,6-di-O-methyl-p-cyklodextrin

Detaily vynálezu jsou objasněny v níže uvedených příkladech, jejichž účelem není omezení rozsahu vynálezu, který má být chráněn.

Příklady provedení vynálezu

I. Příprava farmaceutických forem

Příklad 1.1

Příprava rekonstituovatelné, pevné kombinace paclitaxel/acetyl-y-cyklodextrin vysušením.

mg paclitaxelu (rozpuštěného v 0,3 ml ethanolu) bylo přidáno do 500 mg práškového acetyl-y-cyklodextrinu (lyofilizát vodného roztoku). Tato směs byla 18 hodin udržována ve vakuu nad oxidem fosforečným, aby byl odstraněn ethanol. Části tohoto ethanol neobsahujícího prášku byly rozpuštěny v 5, 4, 3 a 2 ml 5% vodného roztoku glukosy. Fyzikální stabilita těchto rekonstituovaných roztoků je ukázána v tabulce 2.

Tabulka 2

	ml přidaného 5% roztoku glukosy
	5 ml	4 ml	3 ml	2 ml
konečná konc. Paclitaxelu mg/ml	0,6	0,75	L0	1,5
konečná konc. AcyCD mg/ml	100	125	167	250
vizuálně určená stabilita v hodinách	>120	>48 >48 >48 precipitace byla pozorována po 72 hod.
rozpuštěný paclitaxel mg/ml (HPLC)	0,576

Tento experiment byl opakován s nižšími množstvími acetyl-y-cyklodextrinu. 3 mg paclitaxelu (rozpuštěného v 0,3 ml ethanolu) bylo přidáno do 450 mg, 400 mg, nebo 350 mg lyofilizovaných vzorků acetyl-y-cyklodextrinu a 18 hodin udržováno ve vakuu nad oxidem fosforečným, aby byl odstraněn ethanol.

• ·· «····· ·· ftft ♦♦·· · * ft ··«·

Ο ·····♦··♦»

Ο ·♦····· ftlftoft ··· ··< «ft·· • ftft ·· ·· ·

Tyto kombinace byly rozpuštěny v 5, 4, 3 a 2 ml 5% vodného roztoku glukosy. V tabulkách 3, 4 , 5 je vyznačeno složení a fyzikální stabilita těchto rekonstituovaných roztoků paclítaxelu připravených podle příkladu 1.1 s použitím různých množství aeetyl-y-cyklodextrinu.

Tabulka 3

	ml přidaného 5% roztoku glukosy
	5 ml	4 ml	3 ml	2 ml
konečná konc. Paclitaxelu mg/ml	0,6	0,75	1,0	1,5
konečná konc. AcyCD mg/ml	90	112,5	150	225
vizuálně určená stabilita v hodinách	opalescentní roztok	>48	>48	>48

Tabulka 4

	ml přidaného 5% roztoku glu	kosy
	5 ml	4 ml	3 ml	2 ml
konečná konc. paclitaxelu mg/ml	0,6	0,75	1,0	1,5
konečná konc. AcyCD mg/ml	80	100	133	200
vizuálně určená stabilita v hodinách	>4 lehce opalescentní			>24 čirý roztok
rozpuštěný paclitaxel mg/ml po přípravě po 22 hodinách	0,41 0,42			1,26 1,25

Tabulka 5

	ml přidaného 5% roztoku glukosy
	5 ml	4 ml	3 ml	2 ml
konečná konc. paclitaxelu mg/ml	0,6	0,75	1,0	1,5
konečná konc. AcyCD mg/ml	70	86	117	175
vizuálně určená stabilita v hodinách		zvyšující se opalescence	zvyšující se opalescence	>24 téměř čirý roztok
rozpuštěný paclitaxel mg/ml (HPLC) po přípravě po 22 hodinách				1,16 1,17

Příklad 1.2

Příprava formy paclitaxelu o jeho celkové koncentraci 0,6 mg/ml

6,5 g amorfiíího acetyl-y-cyklodextrinu bylo zvlhčeno 3 ml roztoku paclitaxelu o koncentraci 10 mg/ml (odpovídá 30 mg paclitaxelu). Ihned bylo do zvlhčené směsi přidáno 50 ml

5% roztoku glukosy směs byla třepána dokud nebyl získán čirý roztok. Koncentrace rozpuštěného paclitaxelu v roztoku byla 0,55 ± 0,05 mg/ml a byla stanovena pomocí HPLC po • · • · · · filtraci roztoku přes membránový filtr 0,2 pm. Roztok může být uchováván při pokojové teplotě za normálních světelných podmínek ve skleněných nádobách alespoň 6 hodin bez zaznamenatelné opalescence a/nebo tvorby částic. Opakovaná analýza rozpuštěného paclitaxelu po 6 hodinách skladování pomocí HPLC ukázala, že nedošlo k poklesu koncentrace rozpuštěného paclitaxelu.

Příklad 1.3

Příprava formy paclitaxelu o jeho celkové koncentraci 0,3 mg/ml

6,5 g amorfního acetyl-y-cyklodextrinu bylo zvlhčeno 3 ml roztoku paclitaxelu o koncentraci 10 mg/ml (odpovídá 30 mg paclitaxelu). Do zvlhčené směsi bylo přidáno 100 ml 5% roztoku glukosy směs byla třepána dokud nebyl získán čirý roztok. Koncentrace rozpuštěného paclitaxelu v roztoku byla 0,27 ± 0,03 mg/ml a byla stanovena pomocí HPLC po filtraci roztoku přes membránový filtr 0,2 pm. Roztok může být uchováván při pokojové teplotě za normálních světelných podmínek ve skleněných nádobách alespoň 12 hodin bez zaznamenatelné opalescence a/nebo tvorby částic. Opakovaná analýza rozpuštěného paclitaxelu po 12 hodinách skladování pomocí HPLC ukázala, že nedošlo během těchto 12 hodin k poklesu koncentrace rozpuštěného paclitaxelu.

Příklad 1.4

Příprava formy docetaxelu o jeho celkové koncentraci 0,5 a 1 mg/ml

100 mg amorfního acetyl-y-cyklodextrinu býlo zvlhčeno 0,1 ml roztoku docetaxelu o koncentraci 20 mg/ml (odpovídá 2 mg docetaxelu). Do zvlhčené směsi bylo ihned přidáno 1 nebo 2 ml 5% roztoku glukosy směs byla třepána, dokud nebyl získán čirý roztok. Koncentrace rozpuštěného docetaxelu v roztoku podle příkladu 1.4. byla 1 nebo 0,5 mg/ml. Roztok může být uchováván při pokojové teplotě za normálních světelných podmínek ve skleněných nádobách alespoň 24 hodin bez zaznamenatelné opalescence a/nebo tvorby částic. Složení obou roztoků odpovídají dávkové jednotce docetaxelu 20 mg je následující:

- 1000 mg AcyCD

- 20 mg docetaxel

- 1 ml ethanol

- 20 ml nebo 40 ml 5% dextrose

Příklad 1.5

Příprava formy docetaxelu o jeho celkové koncentraci 0,75 mg/ml využívající hydroxypropyl-β-cyklodextrin (HPpCD).

• · i ^ř: <

• 9 9 9 9

200 mg amorfního HPpCD bylo zvlhčeno 0,15 ml roztoku docetaxelu o koncentraci 10 mg/ml (odpovídá 1,5 mg docetaxelu). Do zvlhčené směsi bylo ihned přidáno 2 ml 5% roztoku glukosy směs byla třepána dokud nebyl získán čirý roztok. Koncentrace rozpuštěného docetaxelu v roztoku podle příkladu 1.5 byla 1 nebo 0,75 mg/ml. Roztok může být uchováván při pokojové teplotě za normálních světelných podmínek ve skleněných nádobách alespoň 24 hodin bez zaznamenatelné opalescence a/nebo tvorby částic. Složení obou roztoků odpovídají dávkové jednotce docetaxelu 20 mg je následující:

-2670 mg HPpCD

- 20 mg docetaxel

- 2 ml ethanol

- 27 ml 5% dextrose

Příklad 1.6

Příprava binárního spolulyofílizátu paclitaxel/acetyl-y-cyklodextrin.

mg paclitaxelu rozpuštěného v 3 ml ethanolu bylo přidáno do 5,0 g amorfního acetyl-ycyklodextrinu. Do vlhkého prášku bylo dále přidáno 2 ml ethanolu a prášek je rozpuštěn v 50 ml destilované vody za získání čirého roztoku o analytické koncentraci paclitaxelu 0,6 mg/ml. Tento roztok byl rychle zmražen na suchém ledu a lyofílizován za získání bílého lyofílizátu s obsahem paclitaxelu 0,6 ± 0,05% hmotnosti.

Tento lyofilizát může být snadno rozpuštěn na původní objem roztoku přidáním 50 ml 5% vodného roztoku glukosy. Výsledkem je čirý roztok o koncentraci paclitaxelu 0,6 mg/ml.

Rekonstituovaný roztok byl uchováván za pokojové teploty a normálních podmínek v skleněných lahvích. Koncentrace paclitaxelu byla stanovena pomocí HPLC po filtraci testovaného roztoku přes membránu 0,2 pm. Obsah paclitaxelu:

po přípravě: 0,513 ± 0,07 mg/ml* po 25 hodinách skladování 0,556 ± 0,01 mg/ml (* Rozdíl mezi analytickou a naměřenou koncentrací paclitaxelu je způsobena změnou objemu lyofílizátu.)

Příklad 1.7

Příprava binárního spolulyofílizátu docetaxel/acetyl-y-cyklodextrin.

mg docetaxelu rozpuštěného v 0,5 ml ethanolu bylo přidáno do 400 mg amorfního acetyl-y-cyklodextrinu. Vlhký prášek je rozpuštěn v 8 ml destilované vody za získání čirého roztoku o analytické koncentraci docetaxelu 1,25 mg/ml. Tento roztok byl rychle zmražen na • * suchém ledu a lyofilizován za získání bílého lyofilizátu s obsahem docetaxelu 2,25 ± 0,1% hmotnosti.

mg tohoto lyofilizátu může být snadno rozpuštěno 1 ml 5% vodného roztoku glukosy za získám čirého roztoku o koncentraci docetaxelu 1,13 mg/ml (stanoveno HPLC).

Rekonstituovaný roztok byl uchováván za pokojové teploty a normálních podmínek v skleněných lahvích. Po 21 hodinách skladování byla koncentrace docetaxelu stanovena pomocí HPLC. Dokonce po 72 hodinách skladování není pozorovatelná žádná opalescence, nebo tvorba pevných částic v roztoku.

Příklad 1.8

Příprava spolulyofilizátu paclitaxel/acetyl-y-cyklodextrin/glukosa.

mg paclitaxelu rozpuštěného v 3 ml ethanolu bylo přidáno do 5,0 g amorfního acetyl-y- cyklodextrinu. Do vlhkého prášku bylo dále přidáno 2 ml ethanolu a prášek je rozpuštěn v 50 ml 5% vodného roztoku glukosy. Tento roztok byl zmražen na suchém ledu a lyofilizován za získám lyofilizátu s obsahem paclitaxelu 0,42 ±0,01% hmotnosti.

Tento lyofilizát může být snadno rozpuštěn v původním objemu roztoku přidáním 50 ml destilované vody. Výsledkem je čirý roztok o koncentraci paclitaxelu 0,6 mg/ml.

Rekonstituovaný roztok byl uchováván za pokojové teploty a normálních podmínek v skleněných lahvích. Koncentrace paclitaxelu byla stanovena pomocí HPLC po filtraci testovaného roztoku. Obsah paclitaxelu:

po přípravě: 0,530 ± 0,08 mg/ml* po 25 hodinách skladování 0,541 ± 0,05 mg/ml (* Rozdíl mezi analytickou a naměřenou koncentrací paclitaxelu je způsobena změnou objemu lyofilizátu.)

Příklad 1.9

Příprava spolulyofilizátu docetaxel/acetyl-y-cyklodextrin/glukosa.

mg paclitaxelu rozpuštěného v 0,4 ml ethanolu bylo přidáno do 400 mg amorfního acetyl-γ-cyklodextrinu. Vlhký prášek byl rozpuštěn v 50 ml 5% vodného roztoku glukosy za vzniku čirého roztoku, který byl zmražen na suchém ledu a lyofilizován za získání bílého lyofilizátu s obsahem docetaxelu 1%.

100 mg tohoto lyofilizátu může být snadno rozpuštěno v 1, 2, nebo 4 ml destilované vody za vzniku čirého roztoku o koncentraci docetaxelu 1, 0,5, nebo 0,25 mg/ml. V tabulce 6 je

uvedena fyzikální stabilita roztoků docetaxelu jako jejich koncentrace stanovená pomocí HPLC během 21 uchovávání za pokojové teploty ve skleněných lahvích.

• · »

Tabulka 6

Rozpuštěný docetaxel mg/ml HPLC	Analytická koncentrace rozpuštěného docetaxelu
	1 mg/ml	0,5 mg/ml	0,25 mg/ml
po přípravě	0,93	0,49	0,24
po 21 hodinách	0,89	0,48	0,24

Přikladl. 10

Příprava binárního spolulyofilizátu docetaxel/hydroxypropyl-p-cyklodextrin (HPpCD).

mg docetaxelu rozpuštěného v 0,3 ml ethanolu bylo přidáno do 300 mg HPpCD. Vlhký prášek je rozpuštěn v 6 ml destilované vody za získání čirého roztoku o analytické koncentraci docetaxelu 1 mg/ml. Tento roztok byl rychle zmražen na suchém ledu a lyofilizován za získání bílého lyofilizátu s obsahem docetaxelu 2% hmotnosti.

mg tohoto lyofilizátu může být snadno rozpuštěno v 1, nebo 2 ml 5% vodného roztoku glukosy za získání čirého roztoku o koncentraci docetaxelu 0,97 a 0,59 mg/ml (stanoveno HPLC).

Rekonstituovaný roztok byl uchováván za pokojové teploty a normálních podmínek v skleněných lahvích. Po 21 hodinách skladování byly stanoveny pomocí HPLC koncentrace docetaxelu 0,95±0,05 a 0,49±0,005 mg/ml.

Přikladl. 11

Prodloužení stability přesyceného roztoku paclitaxelu cestou odpařování.

mg paclitaxelu bylo rozpuštěno v 6 ml ethanolu a roztok byl opatrně smíchán s 5 g acetyl-y-cyklodextrinu. Byly přidány další 3 ml ethanolu a směs byla míchána 5 minut při pokojové teplotě. Ethanol byl poté ze směsi odstraněn proudem dusíku ve vakuové odparce. Výsledná bílá pevná látka je poté rozpuštěna v 5 ml deionisované vody za vzniku mírně opalescentního roztoku, který byl ihned zmražen na suchém ledu a lyofilizován. Získaný lyofilizát je rychle ve vodě rozpustný amorfní prášek. Po přidání vody pro injekční užití, nebo 5% vodného roztoku glukosy může být snadno převeden na čirý roztok. Rekonstituovaný roztok obsahující 0,3-0,6 mg/ml rozpuštěného paclitaxelu je stabilní alespoň 24 hodin při pokojové teplotě.

Přikladl, 12

Parenterální přípravek pro intravenózní použití.

* ί ϊι* *<· ·· ·· ·

100 mg rozpuštěného v 10 ml ethanolu bylo přidáno do 15,0 g amorfního acetyl-ycyklodextrinu s velkým povrchem. Do vlhkého prášku bylo přidáno dalších 10 ml ethanolu prášek byl rozpuštěn v 80 ml destilované vody za získání čirého roztoku o analytické koncentraci paclitaxelu 1,25 mg/ml. Tento roztok byl rychle zmražen na suchém ledu a lyofilizován za získání bílého lyofilizátu s obsahem paclitaxelu 0,05% hmotnosti.

Tento lyofilizát může být snadno rekonstituován na roztok o objemu 100 ml přidáním 5% vodného roztoku glukosy. Získaný čirý roztok o koncentraci paclitaxelu 1,0 mg/ml může být okamžitě použit pro intravenózní aplikaci.

II. Biologické studie

Cílem studií bylo určit specifické vedlejší účinky intravenózmho podávání paclitaxelu. Kardiovaskulární a respirační účinky paclitaxelu, které následují po jeho íntravenózním podání byly zkoušeny na 7 psech plemena beagle udržovaných v anestezi a-chloralosa/pentobarbitonem sodným.

II. 1. Testované přípravky

A. Paclitaxel 1 ml, kapalina (30 mg/ml v ethanolu) dodávaná ve vialkách. Před testem rozpuštěno ve vehikulu Cremophor ELP : ethanol 1:1.

B. Paclitaxel / AcyCD bílý krystalický prášek; připravený podle příkladu I.I.6. vynálezu. Před testem rozpuštěno ve vehikulu 2,5 % hmotn./obj. vodném roztoku glukosy.

II.2. Metody

Následující údaje byly zaznamenány, nebo odvozeny, aby sloužily jako indikátory funkčního stavu různých částí kardiovaskulárního a respiračního systému. Jednotky měření jsou uvedeny v závorkách.

Systolický, diastolický, průměrný krevní tlak. (mmHg) Puls (údery/minutu)	Celkový hemodynamický stav
Levý ventrikulámí systolický tlak (mmHg) Levý ventrikulámí dp/pt max. (mmHg. s'1)	Kontraktivní stav myokardu
Elektrodiagram (lead H)	Elektrický stav myokardu
Femorálm průtok (ml/minuta) Femorální odpor (mmHg/ml/min)	Stav a odpor periferních cév
Respirační frekvence (vdechy/min) Respirační minutový objem (ml) Respirační vdechový objem (ml)	Celkový respirační stav

«· ·

¹⁴ > ι ' ’: : i «V* · » · · ·

Anesteze byla navozena intravenózně injekcí thipentonu sodného a udržována intravenžně směsí α-chloralosy a pentobarbitonu sodného podávaného podle potřeby. Byla udržována tělesná teplota.

Trachea byla intubuvána a trubice připojena na respirační monitor, kde byl sledován objem vdechu (ml) a odvozené parametry respirační rychlost (vdech/min) a minutový objem (ml). Do levé femorální arterie a cefalícké vény byly zavedeny katetry a byl měřen krevní tlak a také pomocí nich byla podávána vehikula, testované přípravky a anestetika. Femorální arterie byla připojena na tlakový převodník naplněný roztokem heparinu ve fyziologickém roztoku spojený s Grass E7 polygrafem. Srdeční tep byl sledován elektronicky pomocí tlakových pulsů krve.

Ultrazvuková průtoková sonda byla umístěna u levé femorální arterie a připojena na měřič průtoku krve napojený na Grass polygraf a byl tak zaznamenáván femorální průtok krve (ml/min).

Do levé karotidy byl zaveden katetr, který byl poté posunut až do levé komory, aby bylo umožněno měření levého ventrikulámiho systolického tlaku (LVSP). Katetr byl připojen na tlakový převodník naplněný roztokem heparinu ve fyziologickém roztoku a signál LVSP byl zobrazen na Grass polygrafii.

Do vhodných končetin byly vloženy subkutánní jehlové elektrody a byl získáván elektrokardiogram, který byl zobrazen na Grass polygrafii. Signály byly s Grass polygrafii převáděny do počítače a data byla zpracována a zobrazena.

Po třiceti minutách stabilizace bylo intravenózně podáno vehikulum během 15 minut v dávkovém objemu 7,0 ml/kg. O 45 minut později a v alespoň 45 minutových intervalech byly podávány dávky jednotlivých přípravků v dávkovém objemu 7,0 ml/kg vždy znovu během 15 minut. Parametry byly zaznamenávány alespoň 45 minut od začátku infiize. Všechny dávky byly podávány pomocí infuzní pumpy KdS model 200.

Byly testovány následující vzorky:

č.	Zvíře	Vehikulum i. v.	Přípravek	Dávka přípravku
		7 ml/kg, 15 min.		mg/m2
1.		Cremophor ELP:ethanol	paclitaxel	6; 60
2.		Cremophor ELP:ethanol	paclitaxel	6; 60
3.	2901AK	Cremophor ELP:ethanol	žádný	-
4.	2841AK	Cremophor ELP:ethanol	žádný	-
5.	D2515	2,5% glukosa ve vodě	paclitaxel/AOyCD*	10; 20; 40; 60
6.	D2937	2,5% glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD *	40; 10; 60; 90
7.	D5	2,5% glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD*	90; 120; 240
*= připravený poc	le příkladu 1.6.

·· ···· <» ·

Všechny parametry včetně záznamu ECG s vysokým rozlišením byly měřeny v 5 minutových intervalech během stabilizační periody a v intervalech 0,5 1, 2 a 5 minut po podání jednotlivých vehikul a přípravků. Na konci měření byla zvířata utracena vysokou intravenózní dávkou pentobarbitonu sodného.

II.3. Výsledky

Zvířata Výsledky a 2 Podávání 6 a 60 mg/m² paclitaxelu Cremophor ELP:ethanol 1:1 byl přerušeno pro smrt zvířat.

a 4 Intravenózní podání Cremophor ELP:ethanol v obou dávkách (odpovídající dávce 6 a 60 mg/m² paclitaxelu) způsobilo anafylaktickou reakci: okamžitý pokles arteriálního krevního tlaku, srdeční frekvence, levého ventrikulámího systolického tlaku a levého ventrikulámího dp/dt maxima přibližně stejného rozsahu u obou zvířat. Po dávce byla pozorována pouze malá nebo žádná obnova normálních kardiovaskulárních parametrů. Obě dávky způsobily ventrikulámí ektopické údery, snížení celkové amplitudy na ECG, změny T-vlny a redukci amplitudy T-vlny. U zvířete 2841AK vehikulum také indukovalo zvýšení S-T segmentu.

Jako závěr těchto nálezů může být konstatováno, že rozpouštědlová směs je toxická a neměla by být intravenózně podávána.

5; 6; 7; Podání 2,5% hmotn./obj. glukosy v dávkovém objemu 7 ml/kg nemělo žádný celkový účinek na kardiovaskulární, nebo respirační parametry třech testovaných zvířat. Podání paclitaxel/ACyCD v dávce do 240 mg/m² v zásadě způsobila pouze malé změny měřených kardiovaskulárních a respiračních parametrů. Slabé účinky zahrnují mírné zvýšení arteriálního krevního tlaku a levého ventrikulámího systolického tlaku spojeného s poklesem srdeční frekvence a levého ventrikulámího dp/dt maxima. Další změny nespecifické změny zahrnovaly zvýšení femorálního průtoku, vdechového objemu a respirační rychlosti. Nálezy byly vratné.

II.4. Obrázky

Pro ilustraci je důležitý parametr arteriální krevní tlak po intravenózním podání vzorků pokusným psům beagle dokumentován na obrázcích 1 až 6:

Arteriální krevní tlak (mmHg) v závislosti na čase (minuty) systolický -A-A-A- diastolický

Graf	zvíře	vehikulum	přípravek mg/m2
Obrázek 1	2901AK	Cremophor:ethanol	žádný
Obrázek 2	284 ÍAK	Cremophor:ethanol	žádný
Obrázek 3	D2515	2,5 % glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD Př. 1.6 10, 20, 40, 60
Obrázek 4	D5	2,5 % glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD Př. 1.6 120, 90, 240
Obrázek 5	D2937	2,5 % glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD Př. 1.6 10, 20, 40, 60
Obrázek 6 průměrný tlak	D5	2,5 % glukosa ve vodě	paclitaxel/ACyCD Př. 1.6 120, 90, 240

II.5. Závěr

Intravenózní podání Cremophoru ELP:ethanol 1:1 vehikula stejně jako paclitaxelu spolu s tímto vehikulem způsobilo anafylaktickou reakci a je tedy nevhodné. Podání paclitaxel/acetyl-y-CD (od 20 mg do 240 mg/m²) ve vodném roztoku glukosy jako vehikula nezpůsobilo zjevné a dlouho přetrvávající kardiovaskulární účinky v žádném ze sledovaných parametrů a u žádného z testovaných zvířat.

Claims (12)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Způsob přípravy pevných, okamžitě rozpustných přípravků pro farmaceutické použití a jejich roztoků ve vodných rozpouštědlech, vyznačující se tím, že zahrnuje

   a) rozpuštění taxoidu, s výhodou paclitaxelu, nebo docetaxelu, nebo jejich solí, nebo hydrátů či solvátů v ethanolu provedené některým z následujících kroků:

   i) přidání pevného derivátu cyklodextrinů konkrétně acetyl-y-cyklodextrinu, nebo hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu a případně dalších ve vodě rozpustných pomocných látek obvyklých pro farmaceutika za účelem parenterálního podání, rozpuštění směsi ve vodném rozpouštědle a lyofilizace za získání pevné látky, nebo ii) přidání lyofilizovaného pevného cyklodextrinů konkrétně aeetyl-y-cyklodextrinu, nebo hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu a případně dalších ve vodě rozpustných pomocných látek obvyklých pro farmaceutika za účelem parenterálního podání, odpaření rozpouštědla a vysušení za získání pevné látky, nebo iii) smíchání roztoku s pevným cyklodextrinem konkrétně acetyl-y-cyklodextrinem, nebo hydroxy-propyl-P-cyklodextrinem a případně dalšími ve vodě rozpustnými pomocnými látkami obvyklými pro farmaceutika za účelem parenterálního podání a poté rozpuštění ve vodném rozpouštědle případně v přítomnosti účinného množství isotonizujících aditiv za získání roztoku obsahujícího:

   a) taxoid jako aktivní složku a

   b) derivát cyklodextrinů a

   c) případně další ve vodě rozpustné pomocné látky obvyklé pro farmaceutika za účelem parenterálního podání, kde hmotnostní poměr taxoid : cyklodextrin je mezi 1 : 25 a 1 : 400; s výhradou, že hydroxy-propyl-p-cyklodextrin je používán jen s docetaxelem v poměru taxoid : cyklodextrin od 1:25 do 1:100 a případně

   b) použití kroků i) nebo ii) pro rozpuštění pevné látky ve vodném rozpouštědle k získání parenterálního roztoku určeného pro přímé medicínské použití.
2. 2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že se použije kteréhokoli vodné rozpouštědlo, nebo ředidlo vybrané ze skupiny sestávající z vody pro injekční použití, vodného φφ φφφφ ♦ · * ♦ « φ φ «φφφ φ φφ «φφ φφφφ

   10 ·4·«ΦΦΦ «φφφφ

   40 φφφφφ» φφφφ ·· · ·· φφ φ φφ roztoku isotonizujících aditiv, jako je chlorid sodný, glukosy, nebo glukosy obsahující tato aditiva v účinném množství pro isotonizaci vodného roztoku.
3. 3. Způsob podle kteréhokoli z nároků la2,vyznačující se tím, že se použijí jako cyklodextrinové složky kterýkoli ze skupiny sestávající z acetyl-y-cyklodextrinu mající stupeň acetylace asi od 2 do 12 acetylových skupin najeden cyklodextrinový kruh, acetyl-y-cyklodextrin mající stupeň acetylace asi 8 acetylových skupin na cyklodextrinový kruh.
4. 4. Způsob podle kteréhokoli z nároků 1 a 3, vyznačující se t í m, že se použije paclitaxel v jeho hydratované polymorfin formě, nebo v solvatované formě jako je solvát s ethanolem.
5. 5. Způsob podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, v y z n a ě u j í c í se 11 m, že se použije jako cyklodextrinové složky hydroxy-propyl-p-cyklodextrin, s výhodou kterýkoli ze skupiny sestávající z hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu mající stupeň substituce mezi asi 2 až 10 hydroxypropylových skupin na cyklodextrinový kruh, hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu mající stupeň substituce mezi asi 4 až 6 hydroxypropylových skupin na cyklodextrinový kruh.
6. 6. Okamžitě rozpustné pevné přípravky pro farmaceutické použití a jejich roztoky ve vodných rozpouštědlech, vy znač uj íc í se t í m, že obsahují

   a) jako aktivní látku jemně dispergovaný amorfní s výhodou lyofilizovaný taxoid s velkým povrchem s výhodou paclitaxel, nebo docetaxel, případně ve formě jejich solí, nebo solvátů s ethanolem a

   b) jemně dispergovaný amorfní s výhodou lyofilizovaný derivát cyklodextrinu s velkým povrchem konkrétně acetyl-y-cyklodextrinu, nebo hydroxy-propyl-P-cyklodextrinu, kde hmotnostní poměr taxoidu a cyklodextrinu je mezi 1 ; 25 a 1 : 400; s výhradou, že hydroxy-propyl-p-cyklodextrin je používán jen s docetaxelem v poměru taxoid : cyklodextrin od 1:25 do 1:100

   c) a případně další ve vodě rozpustné pomocné látky obvyklé pro farmaceutika za účelem parenterálního podání.
7. 7. Přípravek podle nároku 6, vyznačující se tím, že obsahuje paclitaxel a acetyl-ycyklodextrin v hmotnostním poměru 1 : 100 až 1 :250.
8. 8. Okamžitě rozpustné pevné přípravky pro farmaceutické použití a jejich roztoky ve vodných rozpouštědlech, kde přípravky zahrnují kterýkoli z přípravků připravených způsoby podle nároků 1 až 5.
9. 9. Způsob zabránění samoagregace a předčasné precipitace taxoidu vybraného ze skupiny sestávající Z paclitaxelu a docetaxelu a jejich soli, solvátů a hydrátů ve vodných roztocích a pro prodloužení stability přesycených roztoků těchto látek použitím taxoidů ve formě přípravku podle kteréhokoli z nároků 6 až 8.
10. 10. Způsob léčby nežádoucí proliferace buněk využívající účinná množství farmaceutických přípravků podle kteréhokoli z nároků 6až 8, vyznačující se tím, že se podá dávková forma pacientům, kteří vyžadují tuto léčbu, obsahující farmaceutický přípravek podle kteréhokoli z nároků 6 až 8, obsahující účinné množství taxoidu vybraného s výhodou ze skupiny sestávající z paclitaxelu a docetaxelu a jejich solí a solvátů a hydrátů.
11. 11. Způsob podle nároku 10, v y z n a č u j í c í se t í m, že se podá pacientovi, který potřebuje takovou léčbu, dávková forma obsahující paclitaxel, jeho soli, solváty, nebo hydráty a acetyl-y-cyklodextrin v hmotnostním poměru od 1 : 100 do 1 ; 250.
12. 12. Způsob podle nároku 10 charakterizovaný podáváním pacientovi, který potřebuje takovou léčbu, dávkovou formu obsahující paclitaxel, jeho soli, solváty, nebo hydráty a hydroxypropyl-p-cyklodextrin v hmotnostním poměru od 1 ; 25 do 1 : 100.