CZ150695A3 - DNA kodující 2-acyltransferásy - Google Patents
DNA kodující 2-acyltransferásy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ150695A3 CZ150695A3 CZ951506A CZ150695A CZ150695A3 CZ 150695 A3 CZ150695 A3 CZ 150695A3 CZ 951506 A CZ951506 A CZ 951506A CZ 150695 A CZ150695 A CZ 150695A CZ 150695 A3 CZ150695 A3 CZ 150695A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- leu
- ala
- acyltransferase
- plant
- ser
- Prior art date
Links
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 71
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 25
- DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N Brassidinsaeure Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N Erucic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N erucic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims abstract description 17
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 17
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241001547351 Libyostrongylus douglassi Species 0.000 claims abstract description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 53
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 33
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 28
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 15
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 8
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 7
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 6
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 5
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 5
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000003901 Crambe Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000220246 Crambe <angiosperm> Species 0.000 claims description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000185347 Lippia alba Species 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 abstract description 23
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 abstract description 9
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 abstract description 9
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 abstract description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 abstract description 7
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 abstract description 5
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 abstract description 3
- 241001072282 Limnanthes Species 0.000 abstract description 2
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 abstract description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 abstract 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 23
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 18
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 13
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 1-oleoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol group Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 10
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 8
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 8
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 7
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 6
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 6
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 6
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 5
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 4
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N Arg-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- DNLQVHBBMPZUGJ-BQBZGAKWSA-N Arg-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O DNLQVHBBMPZUGJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N Glu-Tyr-Leu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- MYGQXVYRZMKRDB-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN MYGQXVYRZMKRDB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N Met-Lys-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N Trp-Leu-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 108700014220 acyltransferase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 101710124165 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 description 3
- DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N Arg-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N Asn-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N Asp-Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 3
- WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N Glu-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N Glu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- RWYCOSAAAJBJQL-KCTSRDHCSA-N Ile-Gly-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N RWYCOSAAAJBJQL-KCTSRDHCSA-N 0.000 description 3
- VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N Leu-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N Leu-Lys-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 101710097496 Lysophospholipid acyltransferase Proteins 0.000 description 3
- JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 3
- YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N Phe-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 3
- FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- JJUNLJTUIKFPRF-BPUTZDHNSA-N Ser-Met-Trp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N JJUNLJTUIKFPRF-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 3
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 3
- XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N Thr-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- IQIRAJGHFRVFEL-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Cys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N IQIRAJGHFRVFEL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 3
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 3
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 3
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 3
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 3
- RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- NWVVKQZOVSTDBQ-CIUDSAMLSA-N Ala-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NWVVKQZOVSTDBQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N Ala-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CCCCN PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N Arg-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N Asn-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- ZKDGORKGHPCZOV-DCAQKATOSA-N Asn-His-Arg Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ZKDGORKGHPCZOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N Glu-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 2
- VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N Glu-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N Gly-Thr-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N 0.000 description 2
- WTUSRDZLLWGYAT-KCTSRDHCSA-N Gly-Trp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)CN WTUSRDZLLWGYAT-KCTSRDHCSA-N 0.000 description 2
- REJKOQYVFDEZHA-SLBDDTMCSA-N Ile-Asp-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N REJKOQYVFDEZHA-SLBDDTMCSA-N 0.000 description 2
- QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N 0.000 description 2
- DNKDIDZHXZAGRY-HJWJTTGWSA-N Ile-Met-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N DNKDIDZHXZAGRY-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 2
- OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N Leu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N Lys-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- BIWVMACFGZFIEB-VFAJRCTISA-N Lys-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O BIWVMACFGZFIEB-VFAJRCTISA-N 0.000 description 2
- RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N Met-Ser-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100205189 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-5 gene Proteins 0.000 description 2
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 2
- GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N Phe-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 2
- YMDNFPNTIPQMJP-NAKRPEOUSA-N Ser-Ile-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O YMDNFPNTIPQMJP-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- LPSKHZWBQONOQJ-XIRDDKMYSA-N Ser-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N LPSKHZWBQONOQJ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N Thr-Arg-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N 0.000 description 2
- WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N Thr-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N Thr-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N 0.000 description 2
- ZOCJFNXUVSGBQI-HSHDSVGOSA-N Thr-Trp-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O ZOCJFNXUVSGBQI-HSHDSVGOSA-N 0.000 description 2
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 2
- FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N [3-[(z)-docos-13-enoxy]-2-hydroxypropyl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCCOCC(O)COP(O)(O)=O FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 108010090037 glycyl-alanyl-isoleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 101150112552 plsB gene Proteins 0.000 description 2
- 101150057826 plsC gene Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 108010036211 5-HT-moduline Proteins 0.000 description 1
- CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N Ala-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- CKLDHDOIYBVUNP-KBIXCLLPSA-N Ala-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CKLDHDOIYBVUNP-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N Ala-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N 0.000 description 1
- CHFFHQUVXHEGBY-GARJFASQSA-N Ala-Lys-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N CHFFHQUVXHEGBY-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N Ala-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AWNAEZICPNGAJK-FXQIFTODSA-N Ala-Met-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AWNAEZICPNGAJK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N Ala-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](C)N)O CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N Arg-Arg-Thr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- ITVINTQUZMQWJR-QXEWZRGKSA-N Arg-Asn-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITVINTQUZMQWJR-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- OQCWXQJLCDPRHV-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OQCWXQJLCDPRHV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N Arg-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FBXMCPLCVYUWBO-BPUTZDHNSA-N Arg-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N FBXMCPLCVYUWBO-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N Arg-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N Asn-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N Asn-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N Asp-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- IZUNQDRIAOLWCN-YUMQZZPRSA-N Cys-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N IZUNQDRIAOLWCN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)CN=C(N)N CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- VXQOONWNIWFOCS-HGNGGELXSA-N Glu-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N VXQOONWNIWFOCS-HGNGGELXSA-N 0.000 description 1
- ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N Glu-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N Gly-Leu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N His-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N His-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N Ile-Ala-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N Ile-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N AXNGDPAKKCEKGY-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- XQLGNKLSPYCRMZ-HJWJTTGWSA-N Ile-Phe-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N XQLGNKLSPYCRMZ-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VFQOCUQGMUXTJR-DCAQKATOSA-N Leu-Cys-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N VFQOCUQGMUXTJR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CCQLQKZTXZBXTN-NHCYSSNCSA-N Leu-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CCQLQKZTXZBXTN-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- AVEGDIAXTDVBJS-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AVEGDIAXTDVBJS-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N Leu-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- KPJJOZUXFOLGMQ-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Asn Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N KPJJOZUXFOLGMQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N Lys-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- QGQGAIBGTUJRBR-NAKRPEOUSA-N Met-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC QGQGAIBGTUJRBR-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CWFYZYQMUDWGTI-GUBZILKMSA-N Met-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CWFYZYQMUDWGTI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BEZJTLKUMFMITF-AVGNSLFASA-N Met-Lys-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N BEZJTLKUMFMITF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ZRACLHJYVRBJFC-ULQDDVLXSA-N Met-Lys-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZRACLHJYVRBJFC-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N Met-Phe-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010087066 N2-tryptophyllysine Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N Phe-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N Phe-Asp-Glu Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GHNVJQZQYKNTDX-HJWJTTGWSA-N Phe-Ile-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O GHNVJQZQYKNTDX-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- CWFGECHCRMGPPT-MXAVVETBSA-N Phe-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CWFGECHCRMGPPT-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N Phe-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- RBRNEFJTEHPDSL-ACRUOGEOSA-N Phe-Phe-Lys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RBRNEFJTEHPDSL-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- XNQMZHLAYFWSGJ-HTUGSXCWSA-N Phe-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XNQMZHLAYFWSGJ-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- FYQSMXKJYTZYRP-DCAQKATOSA-N Pro-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FYQSMXKJYTZYRP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SUENWIFTSTWUKD-AVGNSLFASA-N Pro-Leu-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SUENWIFTSTWUKD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- COAHUSQNSVFYBW-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O COAHUSQNSVFYBW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N Ser-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- LALNXSXEYFUUDD-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LALNXSXEYFUUDD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SBMNPABNWKXNBJ-BQBZGAKWSA-N Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO SBMNPABNWKXNBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N Ser-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HHJFMHQYEAAOBM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N Ser-Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N Ser-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- STIAINRLUUKYKM-WFBYXXMGSA-N Ser-Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)=CNC2=C1 STIAINRLUUKYKM-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N Thr-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N Thr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- LCPVBXOHXMBLFW-JSGCOSHPSA-N Trp-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)=CNC2=C1 LCPVBXOHXMBLFW-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- BGWSLEYVITZIQP-DCPHZVHLSA-N Trp-Phe-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O BGWSLEYVITZIQP-DCPHZVHLSA-N 0.000 description 1
- KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- GNCPKOZDOCQRAF-BPUTZDHNSA-N Trp-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N GNCPKOZDOCQRAF-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- IIJWXEUNETVJPV-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Ser Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)O IIJWXEUNETVJPV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N Tyr-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- FGVFBDZSGQTYQX-UFYCRDLUSA-N Tyr-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FGVFBDZSGQTYQX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- QPZMOUMNTGTEFR-ZKWXMUAHSA-N Val-Asn-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N QPZMOUMNTGTEFR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N Val-Glu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N Val-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N 0.000 description 1
- YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N Val-Lys-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 1
- 229940094991 herring sperm dna Drugs 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDUHQPOXLUAVEE-BPMMELMSSA-N oleoyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 XDUHQPOXLUAVEE-BPMMELMSSA-N 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
- C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Other Liquid Machine Or Engine Such As Wave Power Use (AREA)
Description
Předložený vynález se týká modifikovaných rostlin. Zejména se vynález týká rostlin modifikovaných tak, že alespoň část rostliny /například semena rostliny/ je schopna poskytnout komerčně využitelný olej.
Dosavadní stav techniky
Rostliny jsou již dlouhou dobu komerčně cenným zdrojem oleje. Nutriční využití olejů získaných z rostlin bylo dosud dominantní, ale pozornost je nyní obracena k rostlinám jako zdroji průmyslově využitelných olejů, například jako náhrad nebo zlepšení minerálních olejů. Olejová semena, jako z řepky, obsahují různé lipidy /Hildish and Williams, Chemical Composition of Natural Lipids, Chapman Halí, Londýn,
1964/. Nyní je projevován zájem o změnu lipidového složení za použití rekombinantní DNA technologie /Knauf,
TIBtech, únor 1987, 40-47/, ale dosud nebyly realizovány žádné z těchto cílů a to z mnoha různých příčin navzdory stále se zvyšující náročností, technologie.
Úspěch ve změně obsahu lipidů v olejích získaných z rostlin vyžaduje spolehlivou znalost biochemie a genů, které jsou zde obsaženy. V širším smyslu jsou dostupná dvě řešení. Za prvé mohou být rostliny modifikovány tak, aby umožnily syntézu mastných kyselin, které jsou nové /pro rostlinu/í tak, mohou být například laurát a/nebo stearát syntetizovány v řepce. Za druhé, způsob a/nebo přebytek inkorporace mastných kyselin do glycerolového řetězce lipidu může být změněn. Druhé řešení je obsaženo v předloženém vynálezu i když první může být navíc také využito.
Lipidy jsou vytvářeny v rostlinách adicí skupin mastné kyseliny na glycerolový řetězec sérií acyltransferásových enzymů. V glycerolové molekule jsou tři polohy,
-2do kterých mohou být skupiny mastné kyseliny /acyl/ substituovány a substituce dosahovaná v každé poloze je katalyzována polohově specifickým enzymem: tento enzym je znám jako 1-, 2- a 3-acyltransferása.
Jedním, ale ne pouze tímto, současným cílem lipidového inženýrství v rostlinách je poskytnutí olejů, obsahujících lipidy s vysokým obsahem erukové /22:1/ kyseliny. Eruko vou kyselinu obsahující lipidy jsou komerčně žádoucí z mnoha důvodů, zejména jako náhrady nebo doplňky minerálních olejů za určitých podmínek, jak bylo uvedeno výše. V případě oleje ze semen řepky /Brassica napus/, v současnosti jedné z nejvýznamnějších olej produkujících plodin, specifita enzymu 2-acyltransferása pozitivně rozpoznává inkorporaci erukové kyseliny v poloze 2. Tak i když jsou tyto kultivary řepky schopny inkorporovat kyselinu erukovou v polohách 1 a 3, není zde žádná /nebo je alespoň redukovaná/ diskriminace vůči erukové kyselině, pouze maximálně 66 % mastných kyselin inkorporovaných do triacylglacerolů může být kyselina eruková. Takové odrůdy řepky jsou známé jako HEAR /high erucic acid rape - řepka s vysokým obsahem kyseliny erukové/.
Bylo by žádoucí zvýšit obsah kyseliny erukové v běžných řepkových olejnatých semenech, jakož i HEAR odrůdách; totéž je možno uvést u rostlin, které jsou zdrojem rostlinných olejů, jako je kukuřice, slunečnice a sója, což představuje jen několik příkladů takových rostlin. I když v zásadě je možné zavést do požadované rostliny DNA, kódující 2-acyltransferásu specifickou pro odlišnou mastnou kyselinu, například z odlišné rostliny, v praxi zde existuje řada problémů.
-3Zaprvé jsou 2-acyltransferása a 3-acyltransferása membránově vázané a proto nerozpustné enzymy. Nebyly čištěny. Toto činí práci s nimi obtížnou a vylučuje použití mnoha běžných DNA klonovacích postupů. Tato obtíž paradoxně neleží ve způsobu klonování genu /nebo alespoň cDNA/ kódujícího 1-acyltransferásový enzym, který je rozpustný: ve skutečnosti rekombinantní DNA práce vždy vždy podléhá tomuto enzymu ze zcela rozdílných důvodů, jmenovitě zvýšení odolnosti vůči chladu v listech tabákových rostlin - Murata a spol. /Nátuře 356 710-713 /1992//.
Zadruhé je velmi málo známo o 2- a 3-acyltransferásách. Není zde žádná představa o jejich velikosti nebo jak jsou cíleny k membránám. Nejsou dostupné žádné údaje o nukleotidových nebo aminokyselinových sekvencích a vůči nim nebyl zvýšeny žádné protilátky.
I když zde byla diskuse o tom, že je žádoucí modifikovat 2-acyltransferásovou specifitu, například importováním genu, kódujícího odpovídající enzym, ale odlišné specifity, z jiných druhů, existuje zde v oboru potřeba klíčového řešení, které by umožnilo práci provést. Předložený vynález poskytuje takové klíčové řešení ve formě DNA sekvence /ve specifickém případě cDNA sekvence/ kódující 2-acyltransferásu. DNA sekvence na obr. 1 z nukleotidů 130 až 1254 kóduje 2-acyltransferásu z kukuřice /Zea mays/, obsahující stop kodon.
Podstata vynálezu
Podle prvního aspektu vynálezu je zde poskytnuta rekombinantní nebo izolovaná DNA sekvence, výhodně kódující enzym, mající membránově navázanou acyltransferásovou aktivitu a vybranou z:
i/ DNA sekvence, zahrnující DNA sekvenci z obr. 1, kódující alespoň od MET^ do Stop418 /seQ ID: 2/ nebo její
-4komplementárná řetězec, ii/ nukleokyselinové sekvence hybridizující k DNA sekvenci z obr. 1 /SEQ IDí 1/ nebo jejánu komplementárnímu řetězci za přísných podmínek a iii/ nukleokyselinové sekvence, které by měly hybridizovat k DNA sekvenci z obr. 1 /SEQ ID:1/, nebo jejímu komplementárnímu řetězci, ale s degenerací genetického kódu.
Fragmenty výše uvedených sekvencí, délky například alespoň 15, 20, 30, 40 nebo 60 nukleotidů, také spadají do rozsahu vynálezu.
Vhodné přísné podmínky zahrnují solné roztoky přibližně 0,9 molární při teplotě od 35 °C do 65 °C. Konkrétněji, přísné hybridizační podmínky zahrnují 6 x SSC, 5 x Denhardtův roztok, 0,5% pyrofosforačnan tetrasodný a 50 ,ug/ml denaturované:
DNA sledího spermatu; promývá se 2 x 30 minut pri 65 C v 1 x SSC, 0,1% SDS a 1 x 30 minut v 0,2 x SSC, 0,1 %
SDS při 65 °C.
Sekvence nukleové kyseliny v rozsahu prvního aspektu vynálezu budou obecně kodovat protein, mající 2-acyltransferásovou aktivitu, jako je aktivita enzymu kódovaného nukleokyselinovou sekvencí na obr. 1. Nukleokyselinové sekvence nekódující protein, mající enzymatickou aktivitu /nebo relevantní enzymatickou aktivitu/, ale jinak v souladu s prvním aspektem vynálezu jak je uveden výše, mohou být použitelné pro jiné účely /a proto také jsou zahrnuty v rozsahu vynálezu/; například mohou být použitelné jako sondy, jejichž použitelnost je dána nukleokyselinovými sekvencemi podle prvního aspektu vynálezu, včetně samotné sekvence na obr.1.
-5Využitelnost sondy vzniká následovně. Protože zde je pravděpodobně vysoký stupeň homologie mezi acyltransferásami různých druhů /a zejména mezi 2-acyltransferásami různých druhů/ sekvence na obr. 1 /nebo části této sekvence, nebo jinými sekvencemi v rozsahu vynálezu/ může být použita k sondování cDNA nebo genomických knihoven jiných druhů za účelem klonování DNA sekvencí, kódujících acyltransferásy, mající požadované specifity. Například, jestliže je žádoucí produkovat olej, mající vysoký obsah erukové kyseliny esterifikované ke glycerolu, může být sondována DNA knihovna jakýchkoliv druhů, které přirozeně vytvářejí kyselinu erukovou Vhodné rostliny zahrnují /Limnathes spp., zejména L.alba a zejména, L.douglassi/ a Crambe. Limnathes douglassi je preferovaný druh, protože studie specifity ukazují, že je zde pozitivní rozlišování proti inkorporaci erukové kyseliny do polohy 2 triacylglyceridu. Knihovny organismů jiných než vyšších rostlin mohou být sondovány? například určité bakterie mohou mít acyltransferásu požadované specifity.
DNA podle vynálezu bude obecně mít vyšší stupeň homologie s alespoň částí sekvence na obr. 1 než se známými sekvencemi .
Rekombinantní DNA podle vynálezu může mít formu vektoru, který může mít dostatečné regulační sekvence /jako je promotor/ pro řízení exprese. Vektory, které nejsou expresní vektory jsou vhodné pro klonovací účely /jako mohou být samotné expresní vektory/. Hostitelské buňky /jako jsou bakterie a rostlinné buňky/ obsahující vektory podle vynálezu jako takové tvoří součást vynálezu.
DNA sekvence podle vynálezu mohou být použity při dalším způsobu klonování genu z jiných druhů: jestliže DNA je kopulována do vhodného promotoru, například expresního vektoru ve vhodném hostitelském organismu, může být produkován protein. Takový protein může být použit pro přípravu
-6polyklonálních nebo monoklonálních protilátek, nebo jiných vazebných molekul, které pak mohou být použity pro prohledávání při expresi homologních proteinů v jiných druzích, například jako část screeningového programu DNA knihovny.
Vhodné cDNA knihovny cílových druhů budou obecně připraveny, jestliže je požadovaný gen pravděpodobně exprimován j cDNA embryové knihovny /připravené v časném stadiu lipidové syntézy/, budou preferovány - například Limnanthes spp..
Vynález tak umožňuje klonování širokého množství genů /nebo obecněji DNA sekvencí/, kódujících acyltransferásy a 2-acyltransferásy zejména, za použití DNA sekvencí jak jsou popsány výše.
Takové acyltransferásy, jako je z Limnathes spp. mohou být také klonovány přímo, například za použití komplementačních studií, z DNA knihovny požadovaných druhů. Například jestliže je E.coli použita jako komplementační hostitel, je zvolen mutant, který je defektní v relevantním enzymu /například 2-acyltransferáse/? DNA knihovna z cílových druhů /jako je L.douglassi/ se klonuje do mutantního komplementačního hostitele? hostitelské buňky inkorporující do svéhogenomu gen cílové acyltransferásy, mohou být snadno odděleny za použití vhodného selektivního media. E.coli mutant JC201 je vhodný hostitel pro použití v koraplementačních studiích týkajících se 2-acyltransferásy.
Klonování acyltransferásového genu, který byl zvolen, do mikrobiálního hostitele, jako je bakterie podobná E.coli, tak, že gen může být exprimován má zvláštní výhodu v tom, že substrátová specifita acyltransferásového genu může být hodnocena v mikrobiálním hostiteli před přípravou transformovaných rostlin, čímž se ušetří čas pro výzkum. Takové
-7hodnocení může být provedeno kompetitivními substrátovými zkouškami, ve kterých různě detegovatelné značené substráty pro enzym vzájemně soutěží o inkorporaci do glyceridu. Například ^c-erucyl CoA a ^H-oleoyl CoA mohou být použity jako kompetitivní substráty pro 2-acyltransferásu a mohou být měřena relativní množství nebo tritia přijatého do glyceridu. /Protože 2-acyltransferásy mají akčeptor, substráty na bázi glycerolu, a donor, substráty na bázi mastných kyselin, může být pokus proveden s různými akceptory, jako je l-erucyl-glycerol-3-fosfát a l-oleoyl-glycerol-3fosfát/. Gen, kódující enzym, který přednostně dodává erukovou kyselinu k akceptoru /zejména l-erucyl-glycerol-3-fosfát/ může být takto identifikován jako DNA sekvence volby pro další použití ve vynálezu jak je popsáno dále.
Ve druhém aspektu vynálezu je poskytnuta rostlina, mající jeden nebo více nerozpustných acyltransferásových enzymů, majících substrátovou specifitu, která se liší od přirozeného enzymu rostliny.
I když místně řízená mutagenese a/nebo jiné techniky proteinového inženýrství mohou být použity ke změnění specifity enzymu přirozeného pro rostlinu, je preferováno, že rostlina bude transgenní a inkorporovat expresibilní acyltransferásový gen, kódující enzym požadované specifity z jiných druhů. 2-Acyltransferásy jsou enzymy volby. Například jak je popsáno výše, 2-acyltransferásový enzym, který má zvýšenou specifitu pro, nebo alespoň nepůsobí proti, eru^ove kyselině, může být připraven těmito prostředky k expresi v rostlině, která by normálně neinkorporovala erukovou kyselinu do triacylglyceridů. Důležité provedení vynálezu se týká genetickým inženýrstvím zpracovaných rostlin, které
-8mají vyšší hladiny erukové kyseliny inkorporováné do triacylglacerolů než je tomu v nezpracovaných rostlinách.
I když toto je výhodné provedení, není vynález omezen na zvýšení inkorporace kyseliny erukové do glyceridů: podle okolností mohou být žádoucí i jiné kyseliny.
K acyltransferásovému transgenu byl operativně kopulován promotor, aby tento byl expresibilní. Protože za současného stavu v oboru je obtížné přesně regulovat místo inkorporace transgenu do hostitelského genorau, je výhodné, aby transgen byl kopulován ke svému promotoru před transformací rostliny. Promotory vhodné podle vynálezu mohou být časově- a/nebo semenově specifické, ale není zde žádná nutnost, aby takové byly: konstitutivní promotory, jako je CaMV 35S promotor, mohou být ve skutečnosti preferovány, protože to jsou obvykle silné promotory. Jiné tkáně jsou naneštěstí nežádoucím způsobem ovlivněny, jestliže transgen, kódující acyltransferásový enzym je exprimován v nich, protože využitelnost mastná kyselina CoA substrátů je účinně omezena na semeno.
Konstrukt promotor-transgen, je-li připraven, se zavede do rostlinných buněk jakýmikoliv vhodnými prostředky. Vynález zahrnuje takové rostlinné buňky. Výhodně je DNA transformována do rostlinných buněk za použití bezraménkového Ti-plasmidového vektoru a nesena Agrobacteriem postupy známými v oboru, jak jsou například popsány v EP-A0116718 a EP-A-0270822. Alternativně by mohla být cizí DNA zavedena přímo do rostlinných buněk za použití zařízení s elektrickým výbojem, tato metoda je preferována jestliže je Agrobacterium neúčinné, například tam, kde je rostlina, která je příjemcem, jednoděložná. Vhodná může také být jakákoliv jiná metoda, která poskytuje stabilní inkorporaci DNA do jaderné DNA jakékoliv rostlinné buňky jakéhokoliv druhu. Toto zahrnuje druhy rostlin, které nejsou v současnosti schopny genetické transformace.
-9Výhodně obsahuje DNA podle předloženého vynálezu také druhý chimérický gen / markér gen/, který umožňuje aby transformovaná rostlina nebo tkáňová kultura, obsahující cizí DNA byly snadno odlišeny od jiných rostlin nebo tkáňových kultur, které neobsahují cizí DNA. Příklady takového markerového genu zahrnují antibiotickou rezistenci /Herrera-Estrella a spol., EMBO J. 2/6/ 987-95 /1983/ a Herrera-Estrella a spol., Nátuře 303 209-13 /1983//, herbicidní rezistenci /EP-A-0242246/ a glukorurodidasovou /GUS/ expresi /EP-A-0344029/. Exprese markerového genu je výhodně kontrolována druhým promotorem, který umožňuje expresi buněk jiných než je tapetum, a tak umožňuje selekci buněk nebo tkáně, obsahujících markér v jakémkoliv stadiu regenerace rostliny. Preferovaný druhý promotor je odvozen od genu, který kóduje 35S podjednotku obalového proteinu viru květákové mozaiky /Cauliflower Mosaic Virus - CaMV/.
Může však být použit jakýkoliv jiný vhodný druhý promotor.
Celá rostlina může být regenerována z jediné transformované rostlinné buňky a vynález proto poskytuje transgenní rostliny /nebo jejich části, jako je rozmnožovací materiál/, obsahující DNA podle vynálezu jak je uvedena výše. Regenerace může být provedena známými metodami.
V jednom provedení vynálezu může být nativní acyltransferásový gen transgenní rostliny, který odpovídá transgenu učiněn alespoň částečně neoperativním nebo může být odstraněn. Tak, jestliže transgen kóduje 2-acyltransferásu, může být rostlinná nativní 2-acyltransferása učiněna neoperativní, například, technikami antisense nebo ribozymovou technikou, které jsou v oboru známy.
-10Prostředky podle vynálezu mohou být produkovány rostliny, vytvářející olej se stanoveným obsahem lipidů. Například lipidové složení triacylglyceridů v rostlině může být podstatně změněno za produkce triglyceridů s požadovanou mastnou kyselinou /například kyselinou erukovou/ v určitém obsahu který je vyšší než bylo doposud možné. Například olejnatá semena řepky /B.napus/ mohou být transformována za vzniku oleje, jehož triacylglycerid má obsah erukové kyseliny nad 70 %.
Je zřejmé, že rostliny se zvýšenými hladinami lipidů mohou být produkovány prostředky podle předloženého vynálezu. Avšak vynález je také vhodný pro produkci rostlin se sníženými hladinami lipidů, které mohou být požadovány jest liže jsou žádoucí zvýšené hladiny proteinu a/nebo škrobu. Snížených hladin lipidů může být dosaženo interferováním se správnou funkcí genu, kódujícího 2-acyltransferásu, například antisense nebo ribozymovou technologií. /Takové rostliny s redukovanými lipidy mohou být, je-li to žádoucí, dále zpracovávány pro vyšší obsah proteinu a/nebo škrobu, je-li to žádoucí/.
Promotory, které přirozeně pohánějí 2-acyltransferásy mohou také být získány hybridizací a/nebo restrikcí a/nebo sekvenačními studiemi za použití sekvence na obr. 1.
Vynález umožňuje produkci proteinu kódovaného DNA podle prvního aspektu předloženého vynálezu, který je požadován. Protein může být exprimován hostitelskými buňkami nesoucími DNA ve formě expresního vektoru. Protein, kterým může být enzym, mající aktivitu 2-acyltransferásy, může mít aminokyselinovou sekvenci, které je shodná s nebo homologní se sekvencí na obr. 1. Stupeň homologie bude obecně větší než u známých proteinů a musí být alespoň 40,50, 60, 70,
80, 90, 95 nebo 99 %.
-11Preferované rysy každého aspektu předloženého vynálezu jsou pro každý další aspekt mutatis mutandis.
Vynález je ilustrován následujícími příklady.
Příklady se opírají o připojené obrázky.
Popis obrázků na připojených výkresech
Obr. 1 představuje cDNA sekvenci získanou v příkladu 1 /SEQ ID: 1/ a její odvozenou proteinovou sekvenci /SEQ ID: 2/.
Obr. 2 představuje sekvenci seskupení části genových produktů z plsB /SEQ ID: 3/ a plsC /SEQ ID: 4/ s částí sekvence uvedené na obr. 1 /SEQ ID:5/, ukazující konzervovaný motiv. plsB je E.coli sn-glycerol-3fosfát acyltransferásového genu a plsC 1-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferásového genu E.coli. Dvojtečky označují přesná srovnání mezi dvěma sekvencemi a jediná tečka konzervativní aminokyselinové substituce. Hvězdičky označují shodné aminokyseliny ve všech třech sekvencích a zbytky konzervované ve dvou ze tří sekvencí jsou označeny symbolem +.
Obr. 3A, 3B a 3C: Membránové fosfolipidy z E.coli kmenů byly extrahovány do chloroformu a odděleny 2-rozměrnou chromatografií na tenké vrstvě, první rozměr /vzestupný/ byl vyvíjen za použití chloroformu:methanolu: vody /65:25:4/ a druhý rozměr /zleva doprava/ byl vyvíjen chloroformemsmethanolem:kyselinou octovou /65:25:10/. Fosfolipidy byly vizualizovány autoradiografií po 16 h při -70 °C za použití Fuji RX filmu. E.coli kmeny, které byly použity /obr. 3A/: JC201, který nese termosenzitivní mutaci v 1-acyl-sn-gly-12cerol-3-fosfát acyltransferásovém genu; /obr.
3B/: JC201, obsahující plasmid pPLSC, který kóduje E.coli l-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferásový gen; /obr. 3C/: JC201, obsahující plasmid, jehož cDNA inzertová sekvence je uvedena na obr. 1. LPA, lysofosfatidická kyselina; PE, fosfatidylethanolamin;
CL, cardiolipin; PG, fosfatidylglycerol; PA, fosfatidická kyselina; O, původ. 20 % P je inkorporováno v LPA v JC201 a zbývající odpovídající hladina je inkorporována v PE v obou dalších kmenech.
Obr. 4: Acyltransferásové zkoušky byly provedeny za použití 32
P-značené lysofosfatidické kyseliny, která byla extrahována z E.coli kmene JC201 a oleoyl CoA jako acyl-donoru. Fosfolipidy přítomné v reakčních směsích byly extrahovány do chloroformu a odděleny za použití silikagelové chromatografie na tenké vrstvě. Pro vyvíjení desek byl použit chloroformxmethanol:kyselina octová:voda /25:15:4:2/. Fosfolipidy byly vizualizovány autoradiografií po 16 h při -70 °C za použití Fuji RX filmu. Použitými E.coli kmeny byly: JC201, který nense termosenzitivní mutaci v l-acyl-sn-glycerol-3fosfát acyltransferásovém genu; JC201, obsahující plasmid pPLSC, který kóduje E.coli 1-acyl-sn-glycerol3-fosfát acyltransferásový gen; JC201, obsahující plasmid jehož kukuřiční cDNA inzertová sekvence je uvedena na obr. 1. LPA, lysofosfatidická kyselina; PA, fosfatidická kyselina.
Obr. 4 představuje porovnání proteinové sekvence uvedené na obr. 1 /SEQ ID:6/ se sekvencí odvozenou /SEQ ID:7/ z B.napus semenového cDNA inzertu, který byl izolován při DNA hybridizaci k sekvenci kukuřičné cDNA. Sekvence byly seřazeny pomocí FastA seřazovacího programu /1988/.
Dvojtečky označují shodné aminokyseliny a jednotlivé *
tečky konzervativní aminokyselinové substituce.
-13kukuřice = 374 ak vs. řepka = 311 ak 51,5% identita, optimalizované skoré: 705
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Derivace cDNA sekvence z obr. 1
Komplementační studie za použití kukuřičné cDNA expresní knihovny transferované do E.coli mutantu JC201 umožňují izolaci plasmidů, kódujícího 2-acyltransferásový enzym z kukuřice. cDNA inzert tohoto plasmidů má velikost l,6kb a obsahuje póly A konec velikosti 70 bp. Inzert byl sekvenován za poskytnutí uvedených dat a translace sekvence odhaluje přítomnost pouze jednoho velkého otevřeného čtecího rámečku. Toto je znázorněno na obr. 1 s navrženým start methioninem a stop kodonem v rámečku. 2-Acyltransferása je velikosti 374 aminokyselin a sekvenování ve směru otevřeného čtecího rámečku ukazuje, že protein je exprimován jako část fuzního proteinu v E.coli. Tento tvoří 10 aminokyselin β-galaktosidásového proteinu, 43 aminokyselin /uvedeno v sekvenci/, odpovídajících
5'netranslatovanému regionu mRNA a 374 aminokyselin proteinu. Srovnání proteinových sekvencí ve velkém otevřeném čtecím rámečku s 2-acyltransferásou E.coli ukazuje malou celkovou identitu, ale je zde rozsah 80 zbytků, který má velkou hladinu konzervativní substituce a obsahuje některé aminokyseliny, které jsou konzervovány ve 2-acyltransferáse, 1-acyltransferáse a N-acetylglukosamin acyltransferáse E.coli.
-14Příklad 2
Inkorporace P do celkových fosfolipidů
E.coli kmeny byly kultivovány v minimálním mediu, obsahujícím P orthofosfát. Celkové fosfolipidy byly extrahovány do organických rozpouštědel a odděleny 2D chromatografií na tenké vrstvě /obr. 3//lysofosfatidická kyselina /LPA/ je substrát pro 2-acyltransferásu /2-AT/.
Jak je zřejmé z obr. 3A, akumulace P-znacené LPA v mutantu JC 201 ilustruje nepřítomnost plně funkční 2-AT. Adicí plasmidu, nesoucího bučí nativní E.coli gen /obr. 3B/ nebo kukuřičný klon uvedený na obr. 1 /obr. 3C/ navrací 2-AT aktivitu buňkám, umožňující LPA aby byla odstraněna a dále metabolizována /lysofosfatidická kyselina/.
tyto údaje ukazují, že DNA sekvence uvedená na obr.
kóduje 2-AT.
Příklad 3
Nadexprese cDNA cDNA region specifikující proteinovou sekvenci uvedenou na obr. 1 byl klonován do E.coli nadexpresního vektoru pETlld /Studier a spol., Meth.Enzymol. 185 60-89/1990//. Zvýšená 2-acyltransferásová aktivita po indukci exprese z plasmidového inzertu potvrzuje, že sekvence na obr. 1 je sekvence 2-AT.
Příklad 4
Lokalizace 2-AT aktivity v E.coli buňkách, obsahujících kukuřičný klon
Byly provedeny 2-acyltransferásové studie za použití
-15membrán izolovaných z mutantu kmene JC.201, který postrádá 2-AT a z JC.201, obsahujícího kukuřičný plasmid /obr. 4/.
2-AT aktivita nebyla detegována v membránových frakcích z JC.201. Adice plasmidu nesoucího nativní E.coli gen nebo sekvenci uvedenou na obr. 1, k JC.201 vede k navrácení 2-AT aktivity membránám.
Příklad 5
Použití kukuřičné cDNA jako heterologní sondy pro získání cDNA z olejnatých semen řepky
Knihovna semenové cDNA z Brassica napus byla screenována sekvencí uvedenou na obr. 1 za použití standardních technik /Sambrook a spol. Molecular Cloning - A Laboratory Manual. 2.vydání, Cold Spring Harbor Laboratory Press,
1989/.
Podmínky
Pro hybridizaci kukuřičného cDNA inzertu do řepkové knihovny: hybridizace byla v 6xSSC, 5xDenhardtův roztok,
0,5 % SDS, 0,5% pyrofosforečnan tetrasodný a 50 ^ug/ml denatu rované DNA sledího spermatu. Filtry byly promývány 2 x 30 minut při 65 °C v lxSSC, 0,1 %SDS a 1 x 30 minut v 0,2xSSC? 0,1% SDS při 65 °C.
Hybridizující klon byl sekvenován a proteinová sekvence odvozena od velkého ORF. Spojení této proteinové sekvence se sekvencí odvozenou z kukuřičného cDNA klonu uvedenou na obr. 1, je uvedeno na obr. 5.
-16Silná identita mezi těmito sekvencemi ilustruje potenciál použití sekvence uvedené na obr. 1 pro získání další 2-ATS.
Příklad 6
Transgenní rostliny
Sekvence uvedená na obr. 1 může být klonována těsně vedle vhodného promotoru, do vhodného vektoru pro expresi do rostlin. Vektor může být použit ke transformování rostlin a výsledné rostliny exprimující 2-AT mohou být analyzovány na obsah lipidů. Lipidový metabolismus se očekává jako přeregulovaný a zvýšené hladiny lipidů byly detegovatelné v semenech.
Příklad 7
Antisense
Sekvence uvedená na obr. 1 může být klonována, těsně vedle víiodného promotoru, v antisense orientaci do vhodného vektoru pro expresi v rostlinách. Vektor může být použit pro transformování rostlin a výsledné rostliny exprimující 2-AT mohou být analyzovány na protein a obsah škrobu. Zvýšené hladiny škrobu a proteinu jsou považovány za detegovatelné v semenech.
Příklad 8
Potlačení nativní 2-AT
DNA sekvence 2-AT odvozená od L.douglassii /získaná jak je popsáno v příkladu 5/ může být zavedena do olejnaté řepky /OSR/ za exprese vhodného promotoru, za použití vektorů a metod transformace rostlin, které jsou v oboru dobře známé. Druhá sekvence, obsahující antisense nebo ribozymy vůči řepkové cDNA /příklad 5/ může být zavedena pro současnou expresi. Výsledná transformovaná rostlina je považována za
-17mající 2-AT aktivitu, odpovídající aktivitě L.douglassii, se současným potlačením nativního řepkového 2-AT genu.
Modifikovaná OSR rostlina takto získaná měla vyšší hladiny erukové kyseliny v poloze 2 svých triacylglycerolů, než mají původní rostliny.Navíc byly nalezeny vyšší hladiny trierucinu v oleji semen.
Příklad 9
Screening genomové knihovny
Sekvence uvedená na obr. 1 se použije ke screeningu geno mové knihovny Arabidopsis a hybridu získaného použitím klonu Za použití standardních technik může být z tohoto klonu získán promotor, promotor může být použit k působení na expresi v rostlinných buněčných membránách.
-18Seznam sekvencí (1) Obecná informace:
(i)Přihlašovatel:
(A)Jméno: Nickerson BIOCEM Limited TT1 . he jen US ') (g)Ulice: Cambridge Science Park, Milton Road (C)Mesto: Cambridge (E)Země: United Kingdom
Íp)Póštovní kod: (ZIP) : 034 4GZ (A) Jméno:; SLABAS, Antoni Ryszard
,. I jen US I (B) Ulice 8 Telford Close, High Shinclffe (C) Město: Durham (E) Země: United Kingdom
Poštovní kod:(ZIp): DH1 2YJ (A) Tměno BROWN, Adrian Paul (US pouze) (B) ulice 4 Church Villas, Shadforth (C) město: Durham (E) žerně : United Kingdom W poštovní kod <ZIP) : DH6 1LQ (ii) Název vynálezu: DNA, kódující 2-acyltransferásy (iii) počet sekvencí: : 7 (iv) počítačově čtecí forma:
(A) typ media: Floppy disk (B) počítač- : IBM PC compatible (O operační systém: ’ PC-DOS/MS-DOS (D) software : Patentln Release #1.0, Version #1.25 (EPO) (V) údaje ó přihlášce:
číslo přihlášky:.. - wo PCT/GB93/_ (2) Informace o SEQ i^ NO: i:
(i) charakteristiky sekvence:
(A) délka: 1514 párů bází !B! typ: nukelová kyselina φ) řetězec: dvojitý topologie: lineární (ii) typ molekuly: cDNA (ix) rysy:
(A) jméno/klíč: cds (B) lokace : 130..1254 (xi) Popis sekvence: seq ID NO: i:
CCCCGTCCTC CTCGTCGCCG GCGGAGCCGC CTACTATCGC CTGGAGAAGG AGCGCCGCGG
GGAGCTTTTC CCACTGCCGA CTGCCGTCTG ACCCTCCGAG ATCGGAAGCG GCGCCGGCGC
CGGCCGGCG ATG GCG ATC CCG CTC GTG CTC GTC GTG CTC CCG CTC GGC Met Ala Ile Pro Leu Val Leu Val Val Leu Pro Leu Gly
10
120
168
| CTG CTC Leu Leu | TTC CTC | CTG TCC Leu Ser | GGC Gly 20 | CTC ATC GTC AAC GCC ATC CAG GCC GTC | 216 | |||||||||||
| Phe | Leu | Leu | lle | Val Asn | Ala 25 | lle Gin | Ala | Val | ||||||||
| 15 | ||||||||||||||||
| CTA | TTT | GTG | ACG | ATA | AGG | ccc | TTT | TCG | AAG | AGC | TTC | TAC | CGT | CGG | ATC | 264 |
| Leu | Phe | Val | Thr | lle | Arg | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser | Phe | Tyr | Arg | Arg | lle | |
| 30 | 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| AAC | AGA | TTC | TTG | GCC | GAG | CTG | CTG | TGG | CTT | CAG | CTT | GTC | TGG | GTG | GTG | 312 |
| Asn | Arg | Phe | Leu | Ala | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu | Gin | Leu | Val | Trp | Val | Val | |
| 50 | 55 | 60 | ||||||||||||||
| GAC | TGG | TGG | GCA | GGT | GTT | A^G | GTA | CAA | CTG | CAT | GCA | GAT | GAG | GAA | ACT | 360 |
| Asp | Trp | Trp | Ala | Gly | Val | Lys | Val | Gin | Leu | His | Ala | Asp | Glu | Glu | Thr | |
| 65 | 70 | 75 | ||||||||||||||
| TAC | AGA | TCA | ATG | GGT | AAA | GAG | CAT | GCA | CTC | ATC | ATA | TCA | AAT | CAT | CGG | 408 |
| Tyr | Arg | Ser | Met | Gly | Lys | Glu | His | Ala | Leu | lle | lle | Ser | Asn | His | Arg | |
| 80 | 85 | 90 | ||||||||||||||
| AGT | GAT | ATT | GAT | TGG | CTC | ATT | GGA | TGG | ATA | TTG | GCC | CAG | CGT | TCA | GGG | 456 |
| Ser | Asp | lle | Asp | Trp | Leu | lle | Gly | Trp | lle | Leu | Ala | Gin | Arg | Ser | Gly | |
| 95 | 100 | 105 | ||||||||||||||
| TGC | CTT | GGA | AGT | ACA | CTT | GCT | GTC | ATG | AAG | AAG | TCA | TCC | AAG | TTC | CTT | 504 |
| Cys | Leu | Gly | Ser | Thr | Leu | Ala | Val | Met | Lys | Lys | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu | |
| 110 | 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| CCA | GTT | ATT | GGC | TGG | TCA | ATG | TGG | TTT | GCA | GAG | TAC | CTC | TTT | TTG | GAA | 552 |
| Pro | Val | Xle | Gly | Trp | Ser | Met | Trp | Phe | Ala | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu | Glu | |
| 130 | 135 | 140 | ||||||||||||||
| AGG | AGC | TGG | GCC | AAG | GAT | GAA | AAG | ACA | CTA | AAG | TGG | GGT | CTC | CAA | AGG | 600 |
| Arg | Ser | Trp | Ala | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu | Gin | Arg | |
| 145 | 150 | 155 | ||||||||||||||
| TTG | AAA | GAC | TTC | CCT | AGA | CCA | TTT | TGG | CTA | GCT | CTT | TTC | GTC | GAG | GGT | 648 |
| Leu | Lys | Asp | Phe | Pro | Arg | Pro | Phe | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe | Val | Glu | Gly | |
| 160 | 165 | 170 | ||||||||||||||
| ACT | CGC | TTT | ACT | CCA | GCA | AAG | CTT | CTC | GCA | GCT | CAG | GAA | TAT | GCG | GCC | 696 |
| Thr | Arg | Phe | Thr | Pro | Ala | Lys | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin | GlU | Tyr | Ala | Ala | |
| 175 | 180 | 185 | ||||||||||||||
| TCC | CAG | GGC | TTA | CCG | GCT | CCT | AGA | AAT | GTA | CTT | ATT | CCA | CGT | ACC | AAG | 744 |
| Ser | Gin | Gly | Leu | Pro | Ala | Pro | Arg | Asn | Val | Leu | lle | Pro | Arg | Thr | Lys | |
| 190 | 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| GGA | TTT | GTA | TCT | GCT | GTA | AGT | ATT | ATG | CGA | GAT | TTT | GTT | CCA | GCC | ATT | 792 |
| Gly | Phe | Val | Ser | Ala | Val | Ser | lle | Met | Arg | Asp | Phe | Val | Pro | Ala | lle | |
| 210 | 215 | 220 | ||||||||||||||
| TAT | GAT | ACA | ACT | GTA | ATA | GTC | CCT | AAA | GAT | TCC | CCT | CAA | CCA | ACA | ATG | 840 |
| Tyr | Asp | Thr | Thr | Val | lle | Val | Pro | Lys | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro | Thr | Met | |
| 225 | 230 | 235 | ||||||||||||||
| CTG | CGG | ATT | TTG | AAA | GGG | CAA | TCA | TCA | GTG | ATA | CAT | GTC | CGC | ATG | AAA | 888 |
| Leu | Arg | lle | Leu | Lys | Gly | Gin | Ser | Ser | Val | lle | His | Val | Arg | Met | Lys | |
| 240 | 245 | 250 | ||||||||||||||
| CGT | CAT | GCA | ATG | AGT | GAG | ATG | CCA | AAA | TCA | GAT | GAG | GAT | GTT | TCA | AAA | 936 |
| Arg | His | Ala | Met | Ser | Glu | Met | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu | Asp | Val | Ser | Lys |
255 260 265
| TGG Trp 270 | TGT Cys | AAA GAC Lys Asp | ATT TTT GTG GCA AAG GAT GCC TTA CTG GAC AAG CAT | 984 | |||||
| Ile | Phe Val Ala Lys 275 | Asp Ala Leu 280 | Leu Asp | Lys | His 285 | ||||
| TTG | GCA | ACA GGC | ACT | TTC GAT GAG GAG | ATT AGA CCT | ATT GGC | CGT | CCA | 1032 |
| Leu | Ala | Thr Gly | Thr 290 | Phe Asp Glu Glu | Ile Arg Pro 295 | Ile Gly Arg 300 | Pro | ||
| GTG | AAA | TCA TTG | CTG | GTG ACC CTG TTC | TGG TCG TGC | CTC CTG | CTG | TTT | 1080 |
| Val | Lys | Ser Leu 305 | Leu | Val Thr Leu Phe 310 | Trp Ser Cys | Leu Leu 315 | Leu | Phe | |
| GGC | GCC | ATC GAG | TTC | TTC AAG TGG ACA | CAG CTT CTG | TCG ACG | TGG | AGG | 1128 |
| Gly | Ala | Ile Glu 320 | Phe | Phe Lys Trp Thr 325 | Gin Leu Leu | Ser Thr 330 | Trp | Arg | |
| GGT | GTG | GCG TTC | ACT | GCC GCA GGG ATG | GCG CTT GTG | ACG GGT | GTC | ATG | 1176 |
| Gly | Val 335 | Ala Phe | Thr | Ala Ala Gly Met 340 | Ala Leu Val 345 | Thr Gly | Val | Met | |
| CAT | GTC | TTC ATC | ATG | TTC TCC CAG GCT | GAG CGG TCG | AGC TCA | GCC | AGG | 1224 |
| His 350 | Val | Phe Ile | Met | Phe Ser Gin Ala 355 | Glu Arg Ser 360 | Ser Ser | Ala | Arg 365 | |
| GCG Ala | GCA Ala | CGG AAC Arg Asn | CGG Arg | GTC AAG AAG GAA Val Lys Lys Glu | TGAAAAATGG AGGGTGGAGA | 1271 |
| 370 | 375 ' | |||||
| TGAGGTTCTC | GTGGGGTTTG | TTATGGGCAA | CCTTCAAAAG | GACTCTCCAT | TCATATTAGT | 1331 |
| ATTAATTCAT | ATATATGCAG | CGCCAAATTC | CAGACATTGA | TATGCTCTCA | AATAGGATGT | 1391 |
| TCTGCTCCCC | TCTTGTATTT | GTATGCAGGA | AAGGGTTTGT | AGGGAGTTTA | CCCCCCCCCC | 1451 |
| CCCCCCCCCC | GCCTTTCTTT | GGGGAAGAAA | GACATATTCT | GGAAGCCTTC | CAGTAGTTCA | 1511 |
AAA
1514
-21(2) Informace O SEQ ID NO: 2:
(£) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 374 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii)typ molekuly: protein
| (xi) | popis sekvence: | SEQ | ID NO 2: | • * | 2: | ||||||||||
| Met 1 | Ala | Ile | Pro | Leu 5 | Val | Leu | Val | Val | Leu 10 | Pro | Leu | Gly | Leu | Leu 15 | Phe |
| Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu | Ile | Val | Asn | Ala 25 | Ile | Gin | Ala | Val | Leu 30 | Phe | Val |
| Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser 40 | Phe | Tyr | Arg | Arg | Ile 45 | Asn | Arg | Phe |
| Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu 55 | Gin | Leu | Val | Trp | Val 60 | Val | Asp | Trp | Trp |
| Ala 65 | Gly | Val | Lys | Val | Gin 70 | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | Glu | Thr | Tyr | Arg | Ser 80 |
| Met | Gly | Lys | Glu | His 85 | Ala | Leu | Ile | Ile | Ser 90 | Asn | His | Arg | Ser | Asp 95 | Ile |
| Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | Ile | Leu | Ala 105 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 110 | Leu | Gly |
| Ser | Thr | Leu 115 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp | Phe | Ala 135 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 140 | Glu | Arg | Ser | Trp |
| Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr ISO | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu 155 | Gin | Arg | Leu | Lys | Asp 160 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 170 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 175 | Phe |
| Thr | Pro | Ala | Lys 180 | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin 185 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 190 | Gin | Gly |
| Leu | Pro | Ala 195 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 200 | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys 205 | Gly | Phe | Val |
| Ser | Ala 210 | Val | Ser | Ile | Met | Arg 215 | Asp | Phe | Val | Pro | Ala 220 | Ile | Tyr | Asp | Thr |
| Thr 225 | Val | Ile | Val | Pro | Lys 230 | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro 235 | Thr | Met | Leu | Arg | Ile 240 |
| Leu | Lys | Gly | Gin | Ser 245 | Ser | Val | Ile | His | Val 250 | Arg | Met | Lys | Arg | His 255 | Ala |
| Met | Ser | Glu | Met 260 | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu 265 | Asp | Val | Ser | Lys | Trp 270 | Cys | Lys |
| Asp | Ile | Phe 275 | Val | Ala | Lys | Asp | Ala 280 | Leu | Leu | Asp | Lys | His 285 | Leu | Ala | Thr |
| Gly | Thr | Phe | Asp | Glu | Glu | Ile | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg | Pro | Val | Lys | Ser |
| 290 | 295 | 300 | |||||||||||||
| Leu | Leu | Val | Thr | Leu | Phe | Trp | Ser | Cys | Leu | Leu | Leu | Phe | Gly | Ala | Ile |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Glu | Phe | Phe | Lys | Trp | Thr | Gin | Leu | Leu | Ser | Thr | Trp | Arg | Gly | Val | Ala |
| 325 | 330 | 335 | |||||||||||||
| Phe | Thr | Ala | Ala | Gly | Met | Ala | Leu | Val | Thr | Gly | Val | Met | His | Val | Phe |
| 340 | 345 | * | 350 | ||||||||||||
| Ile | Met | Phe | Ser | Gin | Ala | Glu | Arg | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg | Ala | Ala | Arg |
| 355 | t | 360 | 365 | ||||||||||||
| Asn | Arg | Val | Lys | Lys | Glu |
370
-232) Informace o ' id NO: 3:
charakteristiky sekvence:
(A) délka: 15 aminokyselin (B) typ: aminokyseliny (D) topologie: lineární . (ii) typ molekuly: protein (xi) popis sekvence: seq ID NO: 3:
Tyr Phe Val Glu Gly Gly Arg Ser Arg Thr Gly Arg Leu Leu Asp 1 5 10 15
-24(2) Informace ® SEQ ID NO: 4:
Charakteristiky sekvence: (Ajdélka: 15 aminokyselin (B)typ: aminokyselina (D)topologie: lineární (ii) : typ molekuly: protein (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 4:
Met Phe Pro Glu Gly Thr Arg Ser Arg Gly Arg Gly Leu Leu 15 10
Pro
-25(2) Informace o seq ID no.· 5:
charakteristiky sekvence:
(A) délka: 15 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie:-lineární (ii) typ molekuly: protein (xi)popis sekvence: SEQ ID NO: 5:
Leu Phe Val Glu Gly Thr Arg Phe Thr Pro Ala Lys Leu Leu Ala 15 10 15 (2) Informace o seq je no: g; !il sekvence:
: 374 aminokyselin (D) tyP: aminokyselina topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein (xi) popis sekvence: SEQ ID NO: 6:
| Met 1 | Ala | Ile | Pro | Leu 5 | Val | Leu | Val | Val | Leu 10 | Pro | Leu | Gly | Leu | Leu 15 | Phe |
| Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu | Ile | Val | Asn | Ala 25 | Ile | Gin | Ala | Val | Leu 30 | Phe | Val |
| Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser 40 | Phe | Tyr | Arg | Arg | Ile 45 | Asn | Arg | Phe |
| Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu S5 | Gin | Leu | Val | Trp | Val 60 | Val | Asp | Trp | Trp |
| Ala 55 | Gly | Val | Lys | Val | Gin 70 | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | Glu | Thr | Tyr | Arg | Ser 80 |
| Met | Gly | Lys | Glu | His 85 | Ala | Leu | Ile | Ile | Ser 90 | Asn | His | Arg | Ser | Asp 95 | Ile |
| Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | Ile | Leu | Ala 105 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 110 | Leu | Gly |
| Ser | Thr | Leu 115 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp | Phe | Ala 135 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 140 | Glu | Arg | Ser | Trp |
| Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr 150 | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu 155 | Gin | Arg | Leu | Lys | Asp 160 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 170 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 175 | Phe |
| Thr | Pro | Ala | Lys 180 | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin 185 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 190 | Gin | Gly |
| Leu | Pro | Ala 195 | Pro Arg Asn Val Leu Ile Pro Arg Thr 200 | Lys Gly Phe 205 | Val | ||||||||||
| Ser | Ala | Val | Ser | Ile | Met | Arg | Asp | Phe | Val | Pro | Ala | Ile | Tyr | Asp | Thr |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Thr | Val | Ile | Val | Pro | Lys | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro | Thr | Met | Leu | Arg | Ile |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Leu | Lys | Gly | Gin | Ser | Ser | Val | Ile | His | Val | Arg | Met | Lys | Arg | His | Ala |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Met | Ser | Glu | Met | Pro | ř Lys | Ser | Asp | Glu | Asp | Val | Ser | Lys | Trp | Cys | Lys |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Asp | Ile | Phe | Val | Ala | Lys | Asp | Ala | Leu | Leu | Asp | Lys | His | Leu | Ala | Thr |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Gly | Thr | Phe | Asp | Glu | Glu | Ile | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg | Pro | Val | Lys | Ser |
| 290 | 295 | 300 | |||||||||||||
| Leu | Leu | Val | Thr | Leu | Phe | Trp | Ser | Cys | Leu | Leu | Leu | Phe | Gly | Ala | Ile |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Glu | Phe | Phe | Lys | Trp | Thr | Gin | Leu | Leu | Ser | Thr | Trp | Arg | Gly | Val | Ala |
| 325 | 330 | 335 | |||||||||||||
| Phe | Thr | Ala | Ala | Gly | Met | Ala | Leu | Val | Thr | Gly | Val | Met | His | Val | Phe |
| 340 | 345 | 350 | |||||||||||||
| Ile | Met | Phe | Ser | Gin | Ala | Glu | Arg | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg | Ala | Ala | Arg |
| 355 | 360 | 365 | |||||||||||||
| Asn | Arg | Val | Lys | Lys | Glu |
370
-27(2') informace o SE*Q ID NO: 7:
(i) Charakteristiky sekvence:(A) délka: 295 aminokyselin tyP: aminokyselina D topologie: lineární . (ii) typ molekuly: protein (xi) popis sekvence: SEQ ID NO: 7:
| Met 1 | Ala | Met | Ala | Ala 5 | Ala | Val | Ile | Val | Pro 10 | Leu | Gly | Ile | Leu | Phe 15 | Phe |
| Ile | Ser | Gly | Leu 20 | Val | Val | Asn | Leu | Leu 25 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 30 | Leu | Gly |
| Ser | Ala | Leu 35 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 40 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 45 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 50 | Ser | Met | Trp | Phe | Ser 55 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 60 | Glu | Arg | Asn | Trp |
| Ala 65 | Lys | Asp | Glu | Ser | Thr 70 | Leu | Lys | Ser | Gly | Leu 75 | Gin | Arg | Leu | Asn | Asp 80 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 85 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 90 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 95 | Phe |
| Thr | Glu | Ala | Lys 100 | Leu | Lys | Ala | Ala | Gin 105 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 110 | Ser | Glu |
| Leu | Pro | Val 115 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 120 | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys 125 | Gly | Phe | Val |
| Ser | Ala 130 | Val | Ser | Asn | Met | Arg 135 | Ser | Phe | Val | Pro | Ala 140 | Ile | Tyr | Asp | Met |
| Thr 145 | Val | Ala | Ile | Pro | Lys ISO | Thr | Ser | Pro | Pro | Pro 155 | Thr | Met | Leu | Arg | Leu 160 |
| Phe | Lys | Gly | Gin | Pro 165 | Ser | Val | Val | His | Val 170 | His | Ile | Lys | Cys | His 175 | Ser |
| Met | Lys | Asp | Leu 180 | Pro | Glu | Ser | Glu | Asp 185 | Glu | Ile | Ala | Gin | Trp 190 | Cys | Arg |
| Asp | Gin | Phe 195 | Val | Thr | Lys | Asp | Ala 200 | Leu | Leu | Asp | Lys | His 205 | Ile | Ala | Ala |
| Asp | Thr 210 | Phe | Ala | Gly | Gin | Lys 215 | Glu | Gin | Asn | Ile | Gly 220 | Arg | Pro | Ile | Lys |
| Ser 225 | Leu | Ala | Val | Val | Leu 230 | Ser | Trp | Ala | Cys | Leu 235 | Leu | Thr | Leu | Gly | Ala 240 |
| Met | Lys | Phe | Leu | His 245 | Trp | Ser | Asn | Leu | Phe 250 | Ser | Ser | Trp | Lys | Gly 255 | Ile |
| Ala | Leu | Ser | Ala | Leu | Gly | Leu | Gly | Ile | Ile | Thr | Leu | Cys | Met | Gin | Ile |
260 265 270
Leu Ile Arg Ser Ser Gin Ser Glu Arg Ser Thr Pro Ala Lys Val Ala 275 280 285
-28Pro Ala Lys Pro Lys Asp Asn
Claims (18)
- o c OPATENTOVÉ NÁROKY ty/sve-v to ď cn1. Rekombinantní nebo izolovaná DNA sekvence vybraná z (i) DNA sekvence, obsahující DNA sekvenci z obr. 1, kódující alespoň od Met44 do Stop41g (SEQ ID: 2) nebo její komplementární řetězec, (ii) nukleokyselinové sekvence hybridizující k DNA sekvenci z obr. 1 (SEQ ID: 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za přísných podmínek a (iii) nukleokyselinové sekvence, které by měly hybridizovat k DNA sekvenci z obr. 1 (SEQ ID: 1), nebo jejímu komplementárnímu řetězci, ale za degenerace genetického kódu.
- 2. DNA sekvence podle nároku 1, která kóduje enzym, mající membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu.
- 3. DNA sekvence podle nároku 2, ve které acyltransferázová aktivita je 2-acyltransferázová aktivita.
- 4. Izolovaný protein, který je produktem exprese DNA sekvence podle nároku 1, 2 nebo 3.
- 5. Protilátka schopná specifického navázání k proteinu podle nároku 4.
- 6. Rostlina, která má jeden nebo více nerozpustných acyltransferázových enzymů s jinou substrátovou specifitou, než má nativní enzym rostliny.
- 7. Rostlina podle nároku 6, která je transgenní pro nerozpustný acyltransferázový enzym z jiných druhů.
- 8. Rostlina podle nároku 6 nebo 7, kterou j e řepka, kukuřice, slunečnice nebo sója.
- 9. Rostlina podle nároku 7, kde uvedeným jiným druhem je druh rodu Limanthes, jako je L. alba nebo výhodně L. douglassi, nebo Crambe.
- 10. Rostlina podle kteréhokoliv z nároků 6 až 9, kde nerozpustným acyltransferázovým enzymem je 2-acyltransferáza.
- 11. Rostlina podle nároku 10, kde 2-acyltransferáza má vyšší specifitu pro kyselinu erukovou než přirozený enzym rostliny.
- 12. Rostlina podle kteréhokoliv z nároků 6 až 11, kde uvedený přirozený enzym je alespoň částečně učiněn neoperativním nebo je odstraněn, například ribozymem nebo antisense nukleovou kyselinou.
- 13. Způsob získání oleje, vyznačující se tím, že zahrnuje kultivaci rostliny podle kteréhokoliv z nároků 6 až 12 a sklizeň oleje produkovaného rostlinou nebo její částí, zej ména semeny.
- 14. Protein, který je v podstatě homologní k proteinu podle nároku 4.
- 15. Fragment DNA sekvence podle nároku 1, 2 nebo 3, obsahující alespoň 15 nukleotidů.
- 16. DNA kódující RNA, která je v opačném směru (antisense) k RNA, kódované DNA podle nároku 1, 2 nebo 3.
- 17. DNA, kódující ribozym specifický k RNA, kódované DNA podle nároku 1, 2 nebo 3.
- 18. Izolovaná nebo rekombinantní DNA, obsahující promotor, který přirozeně pohání expresi genu k produkci proteinu podle nároku 4 nebo 14.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929225845A GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1992-12-10 | Modified plants |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ150695A3 true CZ150695A3 (cs) | 1998-03-18 |
| CZ294457B6 CZ294457B6 (cs) | 2005-01-12 |
Family
ID=10726430
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19951506A CZ294457B6 (cs) | 1992-12-10 | 1993-12-10 | DNA kódující 2-acyltransferázy |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5843739A (cs) |
| EP (1) | EP0673424B1 (cs) |
| AT (1) | ATE396271T1 (cs) |
| AU (1) | AU694098B2 (cs) |
| CA (1) | CA2151147A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ294457B6 (cs) |
| DE (1) | DE69334219D1 (cs) |
| GB (1) | GB9225845D0 (cs) |
| HU (1) | HU222403B1 (cs) |
| PL (1) | PL176961B1 (cs) |
| SK (1) | SK76395A3 (cs) |
| WO (1) | WO1994013814A1 (cs) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
| US5910630A (en) * | 1994-04-06 | 1999-06-08 | Davies; Huw Maelor | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| US5563058A (en) * | 1994-04-06 | 1996-10-08 | Calgene, Inc. | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| DE4433307A1 (de) * | 1994-09-19 | 1996-03-21 | Norddeutsche Pflanzenzucht Han | Ein isoliertes Nuckleinsäurefragment und daraus abgeleitete Produkte |
| AU703957B2 (en) * | 1994-10-26 | 1999-04-01 | Cargill Incorporated | FAE1 genes and their uses |
| GB9502468D0 (en) * | 1995-02-09 | 1995-03-29 | Gene Shears Pty Ltd | DNA Sequence |
| GB9510927D0 (en) * | 1995-05-31 | 1995-07-26 | Ca Nat Research Council | Plant and seed oil modification |
| US5959131A (en) * | 1995-12-07 | 1999-09-28 | Kraft Foods, Inc. | Nutritionally superior fat for food compositions |
| FR2785911B1 (fr) * | 1998-11-18 | 2001-01-26 | Agronomique Inst Nat Rech | Gene codant pour une acyltransferase de colza, et ses utilisations |
| CA2380633A1 (en) * | 1999-08-06 | 2001-02-15 | Genentech, Inc. | Peptide antagonists of factor viia |
| AU2001232894A1 (en) * | 2000-01-20 | 2001-07-31 | Mci Worldcom, Inc. | Intelligent network and method for providing voice telephony over atm and closeduser groups |
| JP2003522528A (ja) * | 2000-02-11 | 2003-07-29 | インサイト・ゲノミックス・インコーポレイテッド | 薬剤代謝酵素 |
| GB0031558D0 (en) | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Biogemma Uk Ltd | Elongase promoters |
| US7164002B2 (en) | 2002-02-06 | 2007-01-16 | Genentech, Inc. | FVIIa antagonists |
| ES2421138T3 (es) | 2003-03-31 | 2013-08-29 | University Of Bristol | Nuevas aciltransferasas vegetales específicas para ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga |
| US20060246206A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Mitsugu Watanabe | Preparation of oyster flesh extracts |
| IL188983A (en) * | 2008-01-23 | 2014-01-30 | Bromine Compounds Ltd | Delay in combustion in fabrics |
| AU2010247438B2 (en) | 2009-05-13 | 2015-01-29 | Basf Plant Science Company Gmbh | Acyltransferases and uses thereof in fatty acid production |
| WO2011161093A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Basf Plant Science Company Gmbh | Acyltransferases and uses therof in fatty acid production |
| JP7423177B2 (ja) | 2014-11-14 | 2024-01-29 | ビーエーエスエフ プラント サイエンス カンパニー ゲーエムベーハー | Ｐｕｆａを含有する植物性脂質の改質 |
| CN112708628B (zh) * | 2021-01-19 | 2022-05-03 | 河北农业大学 | 玉米百粒重主效QTL位点qKW4a及其候选基因和应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0116718B2 (en) * | 1983-01-13 | 1996-05-08 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Process for the introduction of expressible genes into plant cell genomes and agrobacterium strains carrying hybrid Ti plasmid vectors useful for this process |
| EP0242236B2 (en) * | 1986-03-11 | 1996-08-21 | Plant Genetic Systems N.V. | Plant cells resistant to glutamine synthetase inhibitors, made by genetic engineering |
| EP0265556A1 (en) * | 1986-10-31 | 1988-05-04 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Stable binary agrobacterium vectors and their use |
| GB8810120D0 (en) * | 1988-04-28 | 1988-06-02 | Plant Genetic Systems Nv | Transgenic nuclear male sterile plants |
| DE69207749T2 (de) * | 1991-01-16 | 1996-06-13 | Kirin Brewery | Kälteresistente pflanzen und ihre herstellung |
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
-
1992
- 1992-12-10 GB GB929225845A patent/GB9225845D0/en active Pending
-
1993
- 1993-12-10 DE DE69334219T patent/DE69334219D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 US US08/454,267 patent/US5843739A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 CZ CZ19951506A patent/CZ294457B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 PL PL93309327A patent/PL176961B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 HU HU9501694A patent/HU222403B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 WO PCT/GB1993/002528 patent/WO1994013814A1/en active IP Right Grant
- 1993-12-10 CA CA002151147A patent/CA2151147A1/en not_active Abandoned
- 1993-12-10 EP EP94902058A patent/EP0673424B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-10 AU AU56567/94A patent/AU694098B2/en not_active Ceased
- 1993-12-10 AT AT94902058T patent/ATE396271T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 SK SK763-95A patent/SK76395A3/sk unknown
-
1997
- 1997-09-30 US US08/941,319 patent/US5945323A/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-03-05 US US09/035,098 patent/US6194640B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB9225845D0 (en) | 1993-02-03 |
| CZ294457B6 (cs) | 2005-01-12 |
| HUT71785A (en) | 1996-02-28 |
| SK76395A3 (en) | 1995-09-13 |
| US5945323A (en) | 1999-08-31 |
| DE69334219D1 (de) | 2008-07-03 |
| PL176961B1 (pl) | 1999-08-31 |
| WO1994013814A1 (en) | 1994-06-23 |
| CA2151147A1 (en) | 1994-06-23 |
| US5843739A (en) | 1998-12-01 |
| EP0673424B1 (en) | 2008-05-21 |
| ATE396271T1 (de) | 2008-06-15 |
| AU5656794A (en) | 1994-07-04 |
| AU694098B2 (en) | 1998-07-16 |
| PL309327A1 (en) | 1995-10-02 |
| HU222403B1 (hu) | 2003-06-28 |
| HU9501694D0 (en) | 1995-08-28 |
| EP0673424A1 (en) | 1995-09-27 |
| US6194640B1 (en) | 2001-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ150695A3 (cs) | DNA kodující 2-acyltransferásy | |
| Kim et al. | Ubiquitous and endoplasmic reticulum–located lysophosphatidyl acyltransferase, LPAT2, is essential for female but not male gametophyte development in Arabidopsis | |
| AU781089B2 (en) | Elongase promoters for the tissue-specific expression of transgenes in plants | |
| JPH09505739A (ja) | 脂肪アシル−ＣｏＡ代謝に関与する植物細胞質タンパク質をコードする核酸配列 | |
| AU2006249983B2 (en) | Safflower with elevated gamma-linolenic acid | |
| JPH11506323A (ja) | 酵母ｓｌｃ遺伝子を用いての植物脂質及び種子油の変更 | |
| US8101818B2 (en) | Enhancement of hydroxy fatty acid accumulation in oilseed plants | |
| JP2003518369A (ja) | 多不飽和脂肪酸および脂質の合成に関与するタンパク質をコードするフィスコミトレラ・パテンス由来のコケの遺伝子 | |
| TW201142021A (en) | A gene of unsaturated fatty acid synthetic enzyme isolated from marchantia polymorpha and its use | |
| NL9002130A (nl) | Dna-sequentie die ten minste een deel van een gen coderend voor stearoyl-acp-desaturase omvat, alsmede toepassing van de dna-sequentie in een werkwijze voor het wijzigen van de vetzuurbiosynthese van een plant. | |
| US20050170478A1 (en) | Expression of phospholipid:diacylglycerine acyltranssferase (pdat) for the production of plant storage lipids with polyunsaturated fatty acids | |
| US20090036695A1 (en) | Oil Biosynthesis | |
| US20220025391A1 (en) | Improved method for the production of high levels of pufa in plants | |
| US20210317467A1 (en) | Improved method for the production of high levels of pufa in plants | |
| US20090325264A1 (en) | Engineered Delta-15-Fatty Acid Desaturases | |
| CN112969792A (zh) | 用于在植物中产生高水平pufa的改进方法 | |
| Nampaisansuk | Molecular cloning and analysis of the genes for cotton palmitoyl-acyl carrier protein thioesterase (PATE) and Δ-12 fatty acid desaturase (FAD2-3) and construction of sense and anti-sense PATE plasmid vectors for altering oilseed composition of transgenic cotton plants | |
| AU2008201181A1 (en) | Production of oil with higher erucic acid content |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20091210 |