CS276439B6 - Pharmaceutical for treating auto-immune diseases - Google Patents
Pharmaceutical for treating auto-immune diseases Download PDFInfo
- Publication number
- CS276439B6 CS276439B6 CS902689A CS268990A CS276439B6 CS 276439 B6 CS276439 B6 CS 276439B6 CS 902689 A CS902689 A CS 902689A CS 268990 A CS268990 A CS 268990A CS 276439 B6 CS276439 B6 CS 276439B6
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- animals
- cells
- group
- proteoglycan
- carbon atoms
- Prior art date
Links
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 7
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 229910003873 O—P—O Inorganic materials 0.000 claims 1
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 abstract 3
- 239000011149 active material Substances 0.000 abstract 1
- ZGYRTJADPPDDMY-UHFFFAOYSA-N titanium;tetrahydrate Chemical compound O.O.O.O.[Ti] ZGYRTJADPPDDMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 53
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 33
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 33
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 29
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 15
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 15
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 14
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 14
- MHFRGQHAERHWKZ-HHHXNRCGSA-N (R)-edelfosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC[C@@H](OC)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C MHFRGQHAERHWKZ-HHHXNRCGSA-N 0.000 description 13
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 12
- 208000018937 joint inflammation Diseases 0.000 description 12
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 229960005536 Alkyl-lysophospholipid Drugs 0.000 description 8
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 8
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 8
- -1 alkyl radical Chemical class 0.000 description 7
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 7
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 7
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 6
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 4
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 4
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 4
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000037716 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Human genes 0.000 description 3
- 108090000819 Chondroitin-sulfate-ABC endolyases Proteins 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 238000005684 Liebig rearrangement reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHFRGQHAERHWKZ-UHFFFAOYSA-N 1-octadecyl-2-methylglycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(OC)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C MHFRGQHAERHWKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100028626 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Human genes 0.000 description 1
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 description 1
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 1
- 102000011413 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000008558 Osteophyte Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 206010043561 Thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000001800 adrenalinergic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007469 bone scintigraphy Methods 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 1
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 210000001513 elbow Anatomy 0.000 description 1
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 201000010934 exostosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004744 fore-foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 235000020121 low-fat milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N methyl Chemical compound [CH3] WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000000538 tail Anatomy 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
- A61K31/685—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Vynález se týká farmaceutického prostředku pro léčbu autoimunologických onemocnění při použiti derivátu lysolecithinu.
Ze zveřejněných NSR patentových přihlášek č. 20 09 342 a 20 09 343, je známo, že je možno užít syntetické deriváty lysolecithinu jako pomocné prostředky pri onemocněních, při nichž se účastní imunologický systém a také ke zvýšení odolnosti. 'Mimoto je známo ze zveřejněné SRN přihlášky č. 26 19 686, že alkyllysofosfolipidy tohoto typu jsou účinné jako protinádorové látky. Mimoto je známo, že po podání lysofosfatidů dochází ke tvorbě aktivovaných buněk, které mohou zvýšit odolnost proti nežádoucím vlivům. Mimoto je ze zveřejněné SRN patentové přihlášky č. 35 30 767 také známo, že je možno syntetické deriváty lysolecithinu užít k léčbě roztroušené sklerózy.
Při všech imunologických reakcích organismu hrají T-lymfocyty hlavní úlohu. Jejich funkce může být rozdělena na dva důležité mechanismy, a to
1. přímá obrana proti cizorodým vlivům, jako jsou například bakterie, viry, parazity a další vlivy, jejichž působením je antigen, takže T-lymfocyty se přímo účastní efektorového mechanismu a
2. řízení imunologické odpovědi tak, aby tato odpověd nebyla nepřiměřeně velká.
V obou případech je pro způsob činnosti T-lymfocytů charakteristická vysoká specifičnost, což znamená, že tyto buňky jsou schopné rozeznat jednotlivý zcela specifický antigen. Avšak před tím, než mohou tyto buňky tuto svou vlastnost prokázat, musí být aktivovány z klidového stavu, což předpokládá proliferaci a diferenciaci.
T-lymfocyty je možno rozdělit na dvě velké podskupiny na bázi určitých struktur mem«j. + ' + brány, které jsou tvořeny bílkoviny , jde tedy o T-buňky CD4 a CD8 . Buňky CD4 se označují jako pomocné nebo indukční T-buňky a mimo jiné jsou zodpovědné za rozeznání cizorodých bílkovin a za počátek Obranné reakce proti antigenům. Buňky CD8 , které se označí jako supresorické nebo jako cytotoxické T-buňky, jsou mimo jiné zodpovědné za rozeznání a destrukci buněk, infikovaných virem.
Nyní bylo zjištěno, že zejména v případě vyšších organismů z řady živočichů se objevují T-buňky, které mají autoreaktivní vlastnosti. To znamená, že tyto T-lymfocyty jsou zaměřeny proti strukturám, které jsou organismu vlastní a jsou tedy vlastně předem programovány k napadení buněk vlastního organismu. Za obvyklých podmínek zůstávají tyto autoreaktivní T-buňky neaktivní vzhledem k regulačnímu působení jiných buněk nebo faktorů, takže dochází k rovnovážnému stavu, kterým je organismus chráněn. Avšak v případě, že se tento rovnovážný stav poruší, může dojít ke vzniku autoimunologického onemocnění. Dojde ke tvorbě autoagresivních buněk nebo autoprotilátek, čímž dojde také k projevům autoimunologického onemocnění. Až dosud neni známo, které antigeny jsou zodpovědné u lidí za vznik těchto příznaků.
Autoimunologická onemocnění byla dříve léčéna látkami, které potlačovaly činnost imunologického systému, jako jsou kortikosteroidy, cyklofosfamidy, cyklosporin A a podobně.
Bylo však prokázáno, že tyto látky nejen působí inhibici celého imunologického systému, avšak mají mimo to významné vedlejší účinky jako potlačení činnosti kostní dřeně, karcinogenitu a také vysokou toxicitu.
Vynález si klade za úkol najít dalši látky, vhodné pro léčbu autoimunologických onemocnění, které by byly prosté svrchu uvedených nevýhod.
V publikaci R. Andreesen a P. Munder, New Trends Lipid Mediators Res. Basel, Karger, 1988, sv. 1, str. 16 až 29 a Immunobiol., 156, 498 až 508/1979 již bylo prokázáno, že alkyllysofosfolipidy mohou působit inhibici nespecifické proliferace lymfocytů.
Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že právě proliferace specifických autoreaktivnich T-buněk, zodpovědných za autoimunologické reakce, může být zbrzděna specifickými alkyllysofosfolipidy.
Podstatou vynálezu je farmaceutický prostředek pro léčbu autoimunologických onemocnění s výjimkou roztroušené sklerózy, při němž jako účinnou složku obsahuje sloučeniny obecného vzorce I
H2C - 0 - Rj
I (I)
Rj - C - 0 - R2 ) 2 +
H2C - o - P— 0 - CH2 - CH2 - NCCHjJj kde , .
R^ znamená alkylový zbytek o 12 až 18 atomech uhlíku,
R2 znamená alkylový zbytek s obsahem až 8 atomů uhlíku, a
R3 znamená atom vodíku nebo alkylový zbytek o až 3 atomech uhlíku.
Alkylové zbytky ve významu všech tří svrchu uvedených substituentů mohou být rozvětveny, avšak s výhodou mají přímý řetězec. Ve sloučenině obecného vzorce I znamená R^ s výhodou alkylový zbytek o až 3 atomech uhlíku, zejména methyl a/nebo znamená R^ s výhodou atom vodíku. Výhodnými sloučeninami jsou zvláště ty sloučeniny obecného vzorce I, v .nichž R^ znamená n-hexadecyl, R2 · znamená methyl a R^ t znamená atom vodíku (sloučenina II) a sloučeniny obecného vzorce I, v němž R^ znamená n-oktadecyl, R2 znamená methylový zbytek a R^ znamená atom vodiku (sloučenina III).
Výroba sloučenin obecného vzorce I je známa, sloučeniny je možno získat některým ze způsobů, které byly popsány v literatuře, například v publikacích D. Arnold a další, Liebigs Ann. Chem., 709, 234 až 239, 1967 a H. U. Weltzien a O. Westphal, Liebigs Ann. Chem., 709, 240 až 243/1967.
Bylo zjištěno, že uvedené farmaceutické prostředky jsou zvláště vhodné pro léčbu theumatoidní arthritidy. Jde o často se vyskytující onemocnění typu progresivní chronické polyarthritidy, která probíhá plíživě nebo v jednotlivých atakách. Obvykle se objevuje ve třetí až páté dekádě života, přičemž výskyt u žen je přibližně třikrát častější než u mužů. Choroba může vést i k vážným omezením pohyblivosti.
Prostředky podle vynálezu je však možno použít i pro léčbu Hasthimodovy thyreotidy, systemického lupus erythematosus, Goodpastureho syndromu, pemfigu, Basedowovy choroby a myasthenia gravis, dále je možno tímto způsobem léčit odolnost proti inzulínu, hemolytickou anémii a thrombocytopenickou purpuru na autoimunologickém podkladě, progresivní systemickou sklerózu, různá onemocnění pojivových tkání, zhoubnou anémii, idiopathickou Adissonovu nemoc, ty případy neplodnosti, které jsou způsobeny protilátkami proti spermiím, dále některé glomerulonefritidy, bulosní emfidoid, Sjógrensenovu nemoc, ty případy cukrovky, které jsou způsobeny imunitou, zprostředkovanou buňkami a protilátkami proti buňkám ostrův ků, prostředky je možno použít také v případě resistence proti lékům na adrenergním podkladě, v případech chronické aktivní hepatitidy a v případech selhání žláz s vnitřní sekrecí, které bylo vyvoláno protilátkami, specifickými pro uvedené tkáně. Přesto, že je známo, že pro vznik autoimunologického onemocnění je nutná genetická disposice, skutečný proces, jímž tyto choroby vznikají, není znám. Je však pravděpodobné, že určitou roli hrají virové nebo bakteriální infekce.
Jak již bylo shora uvedeno, je ET-18-OCH3 látkou, zvláště vhodnou pro léčbu rheumatoidní arthritidy a ankylosující spodylitidy. Očinek této látky byl zkoušen vyvoláním tohoto onemocnění u myší BALB/c působením proteoglykanu. Na tomto modelu je možno pozorovat velkou příbuznost s lidským onemocněním, i pokud jde o radiografickou analýzu a scintigrafii kostí a také pokud jde o histopatholog.ický obraz kloubů a páteře, jak bylo popsáno v publikacích Glant a další, Arthritis Rheum. 30 (1987), 201 až 212 a Mikecz a další, Arthritis Rheum. 30 (1987), 306 až 318. Arthritis začíná jako polyartikulární synovitus v bilaterálních, malých periferních kloubech a zahrnuje také spondylitis, která se stává progresivní s velkými defekty chrupavky i kostní tkáně v oblasti kloubu. Počáteční zevní příznaky zánětu kloubu jako otok a zčervenání se objevují po třetí nebo čtvrté intraperitoneální injekci proteoglykanu.
Vývoj arthritidy u myší BALB/c závisí na obou typech imunity. Autoprotilátky se však objevují pouze u hyperimunizovaných arthritických zvířat v případě, že rozrušení chrupavky je již více nebo méně zřejmé. Tyto autoprotilátky reagují jak s intaktními (nedegradovanými) i s modifikovanými (chondroitinásou ABC-zpracovanými) proteoglykany chrupavky a je možno pozorovat zkříženou reaktivitu s imunizujícím proteoglykanem, jak bylo popsáno v publikaci Mikecz a další, Arthritis Rheum. 30 (1987), 306 až 318.
Předběžné ošetření ET-18-OCH3 chránil zvířata před vznikem onemocnění nebo v případě, že zvířata byla léčena v průběhu imunizace proteoglykanem, vyvolávajícím zánět kloubů, došlo k výraznému zpoždění vzniku projevů zánětu. Mimoto v případě, že se již vyvinuly klinické příznaky zánětu kloubů, byly tyto příznaky, například červenání a otok méně intenzivní a byl zasažen menší počet periferních kloubů než u neošetřených zvířat.
Při zahájení léčby uvedenou látkou došlo ke snížení koncentrace (auto) protilátek v oběhu a k potlačení jejich tvorby po celou dobu pokusu. Trlymfocyty u zvířat, předem ošetřených uvedenou látkou, neproliférovály za přítomnosti antigenu, užitého k imunizaci a došlo také k podstatnému potlačení nespecifické stimulace T-buněk.
Bylo také zjištěno, že působení alkyllysofosfolipidů je možno dosáhnout inhibice autoreaktivních T-buněk bez ohledu na to, zda jde o buňky CD4 nebo CD8 , přičemž k této * inhibici zřejmě dochází rozrušením metabolismu fosfatidylcholinu v buňce. Je také možno se zmínit o tom, že tato porucha je specifická pouze pro aktivované T-buňky. Neaktivované T-buňky tímto způsobem nejsou ovlivněny. Vzhledem k tomu, že proliferace autoreaktivních T-buněk je základním předpokladem jejich agresivity, je tímto způsobem možno dosáhnout úplného potlačení jejich nežádoucího působení.
Vynález bude osvětlen v souvislosti s připojenými výkresy, kde na obr. 1 je graficky znázorněna inhibice proliferace autoreaktivních CD4+ buněk různými látkami v závislosti na jejich koncentraci, na obr. 2 je znázorněno graficky totéž co na obr. 1 v závislosti na době pokusu, na obr. 3 je provedeno totéž grafické znázornění jako na obr. 1 pro inhibici proliferace buněk CTLLl, na obr. 4 je graficky znázorněna tvorba T-lymfocytů (inkorporace cholinu) za přítomnosti ET-18-OCH3 v závislosti na stavu aktivace buněk, na obr. 5 je graficky znázorněna degradace fosfatidylcholinu buňkami T-AR17 za přítomnosti ET-18-OCH3, na obr. 6 je provedeno grafické znázornění, analogické obr. 5 pro neaktivované T-buňky, na obr. 7 je graficky znázorněna stimulace lymfocytů imunizovaných myší BALB/ /c, skupiny 2-5, na obr. 8 je graficky znázorněna koncentrace protilátek v séru u zvířat skupiny 4, imunizovaných proteoglykanem z chrupavky kloubu skotu (BAC-PG), na obr. 9 je graficky znázorněn účinek ET-18-OCH3 na koncentraci protilátek v séru myší BALB/c skupiny 5, imunizovaných stejným způsobem, na obr. 10 je graficky znázorněna koncentrace protilátek u zvířat ze skupiny 7, imunizovaných proteoglykanem z chrupavky lidského osteofytu (HYAC-PG), na obr. 11 je grafické znázornění provedeno analogicky jako na obr. 7 pro myši ze skupin 6 až 9, na obr. 12 je grafický znázorněn účinek ET-18-OCH3 na koncentraci protilátek u myší BALB/c skupiny 8, imunizovaných HYAC-PG a na obr. 13 je graficky znázorněna koncentrace protilátek v séru u myší BALB/c, předem ošetřených ET-18-OCH3 a pak imunizovaných HYAC-PG.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady.
Příklad 1
Autoreaktivní CD4+ T-lymfocyty, použité při těchto zkouškách, jsou zodpovědné za vznik experimentálního autoimunního zánětu kloubů u krys, tzv. adjuvantní arthritidy.
Tyto lymfocyty byly izolovány způsobem podle publikace J, Holoshitz a další, Science,
219, 56 až 58/1983. Proliferace byla vyvolána antigenem PPD (čištěný derivát bílkoviny z tuberkulosních bakterií).
Dále byla provedena zkouška proliferace buněk CD4+ působením alkyllysofosfolipidů za přítomnosti antigenu.
x 10^ T-lymfocytů (AR 17) bylo pěstováno 48 hodin v prostředí RPMI 1640 s 10 % fetálního telecího séra a 1 g antigenu. Jako buňky citlivé na antigen se současně pěstují ozářené (30 Gy) thymocyty v množství 1 χ 106. Po uvedené době se ke kultuře přidá v
0,5 yUCi H-thymidinu a po dalších 6 hodinách se měří členění thymidinu do DNA buněk.
Získané výsledky jsou znázorněny na obr, 1. Je zřejmé, že proliferace AR 17-buněk, vyvolaná tímto způsobem, byla inhibována l-oktadecyl-2-methylglycero-3-fosfocholinem, který bude dále uváděn jako ET-I8-OCH3.
Příklad 2
Buňky AR 17, které byly izolovány stejně jako v příkladu 1, byly stimulovány k proliferaci přidáním růstového faktoru (IL-2). Inhibice této proliferace byla potom vyvolána působením alkyllysofosfolipidů. Zkouška byla provedena následujícím způsobem:
o x 10 T-lymfocytů AR 17 bylo pěstováno 24 až 48 hodin v prostředí RPMI s 10 í fetálního telecího séra a 10 % supernatantu kultury slezinných buněk (IL-2), stimulováných Con A. Po této době bylo ke kultuře přidáno 0,5 yUCi H-thymidinu a po dalších 6 hodinách bylo měřeno včlenění thymidinu do DNA buněk.
Získané výsledky jsou znázorněny na obr. 2. Je zřejmé, že i v tomto případě působí sloučenina ET-18-OCH2 výraznou inhibici proliferace.
Příklad 3
Cytotoxické T-lymfocyty (CTLL^) byly izolovány způsobem podle publikace Μ. M. Simon a další, Eur. J. Immunol., 16, 1269 až 1276/1986 a inhibice proliferace této buněčné linie byla sledována působením alkyllysofosfolipidů.Buněčná linie obsahovala autoreaktivní . + 3 buňky CD8 . Při provádění zkoušky byly pěstováno 1 x 10 T-lymfocytu (CTLL-1) 48 hodin v prostředí RPMI 1640 s 10 % fetálního telecího séra a 10 % supernatantu kultury slezin3 ných buněk, stimulovaných Con A, (112). Po této době bylo přidáno 0,5 ^uCi H-thymidinu a po dalších 6 hodinách bylo měřeno včlenění thymidinu do DNA buněk.
Získané výsledky jsou znázorněny ná obr. 3 v procentech ve srovnání s kontrolními pokusy. Jak je z výkresu zřejmé, působí význačnou inhibici proliferace uvedených buněk nejen sloučenina ET-18-0H, ale také sloučenina ET-18-OCHg.
Příklad 4
Bylo sledováno včleňování radioaktivně značeného cholinu do fosfatidylcholinu a tímto způsobem byla stanovena schopnost nové tvorby buněk. V tomto případě bylo pěstováno 1 x 10® T-lymfocytů po udanou dobu v prostředí DMEM bez cholinu (Dulbeccova modifikace Eaglova prostředí) s 10 % fetálního telecího séra a 10 % supernatantu kultury slezinných buněk, stimulovaných Con A (IL 2) a s 0,51·Ci ^^C-cholinu. Fosfolipidy buněk byly extrahovány, odděleny chromatografii na tenké vrstvě a byla měřena radioaktivita fosfotidylcholinu.
CS 276439 B>6‘
Získané výsledky jsou uvedeny na obr. 4. Přerušovaná čára znázorňuje včlenění cholinu do nestimulovaných T-buněk, nepřerušovaná čára znázorňuje včlenění do stimulovaných CD4+ T-buněk (AR 17). Výsledky jsou uvedeny v procentech ve srovnání s kontrolní hodnotou. Je zřejmé, že zcela neočekávaně způsobuje ET-I8-OCH3 pouze inhibici tvorby aktivovaných autoreaktivních AR 17 T-buněk, zatímco neaktivované T-lymfocyty, které se neúčastní autoimunologické reakce zůstávají působením této sloučeniny zcela neovlivněny.
Příklad 5
Složení alifatických kyselin ve fosfatidylcholinu je obnovováno působením fosfolipázy A jako deacylačního enzymu a acyltransferázy, jako reacylačního enzymu. Aby bylo možno - 14 sledovat tento metabolismus, byly T-bunky předem inkubovány s kyselinou C-olejovou, takže včleněním této kyseliny byl fosfatidylcholin radioaktivně značen.
Potom byla sledována schopnost rozkladu fosfatidylcholinu buňkami T- AR 17 přidáním různých alkyllysofosfolipidů. 1 χ 106 T-lymfocytů bylo pěstováno v prostředí DMEM s 1 % fetálního telecího séra a s 0,1 yUCi 14C-olejové kyseliny 4 hodiny. Potom byly značené buňky dále pěstovány v přítomnosti různých alkyllysofosfolipidů 24 a 48 hodin v prostředí DMEM s 10 % fetálního telecího séra a 10 % supernatantu kultury Con A-stimulovaných slezinných buněk (IL 2). Byly extrahovány fosfolipidy buněk, které potom byly děleny chromatograf ií na tenké vrstvě s následným množením radioaktivity pro pásy fosfatidylcholinu.
Na obr. 5 jsou znázorněny získané výsledky v procentech ve srovnání s kontrolou.
Je zřejmé, že buňky, inkubované s ET-I8-OCH3 rychle ztrácejí radioaktivitu, což znamená rychlou ztrátu fosfatidylcholinu. Jak je zřejmé z obr. 6, tento účinek se netýká neaktivovaných buněk.
Příklad 6
Indukce primární arthritidy
Proteoglykan z lidských chondrofytů, rozložený chondroitinázou ABC, ekvivalentní s proteoglykanem z nezralé lidské kloubní chrupavky (HYAC) byl užit k imunizaci myších samic BALB/c ve stáří 5 až 6 týdnů (Charles River Colony, Montreal, Quebec) způsobem podle publikací Glant a další, Arthritis Rheum. 30 (1987) , 201 až 212;Mikecz a další, Arthritis Rheum. 30 (1987), 306 až 318. Bylo podáno vždy 100 yUm uvedeného proteoglykanu ve 100 yUl fyziologického roztoku s fosfátovým pufrem (PBS) o pH 7,2 a úplný Freundův pomocný prostředek ve formě emulze 1 : 1 s PBS. Injekce byla ještě třikrát opakována při použití neúplného Frenudova pomocného prostředku ve dnech 9, 35 a 65. Kontrolní myši byly imunizovány proteoglykanem ze skotu (BAC-PG), který nezpůsobuje zánět kloubů nebo pouze PBS a pomocným prostředkem bez obsahu proteoglykanu.
Skupiny, užité pro tento pokus jsou shrnuty v tabulce 1. Původně bylo ve skupině 9 předem ošetřeno 10 zvířat sloučeninou ET-I8-OCH3 a tato zvířata potom byla imunizována proteoglykanem z lidských chondrofytů, ve skupině 6 byla imunizovaná, neošetřená zvířata, ve skupině 7 byla zvířata imunizovaná, neošetřená, avšak krmená mlékem a ve skupině 8 byla imunizovaná zvířata, krmená mlékem, v němž byla rozpuštěna sloučenina ET-I8-OCH3.
Zvířata ze skupiny 4 a 5 byla imunizována BAC-PG a byla nebo nebyla ošetřena ET-18-OCHj, 15 myší v dalších třech skupinách bylo užito jako negativní kontroly. Každá ze skupin obsahovala 5 až 10 samic kmene BALB/c ve stáří 5 až 6 týdnů na začátku pokusu. Ošetření bylo prováděno sloučeninou ET-I8-OCH3, rozpuštěnou v mléce s nízkým obsahem tuku při použití jícnové sondy po dobu 12 týdnů, a to 25 mg/kg 6 týdnů a 20 mg/kg 6 týdnů. Dávka byla snížena vzhledem k tomu, že myši měly stále horši tělesný stav od konce druhého týdne léčení a nakonec uhynulo větší množství zvířat, 4 zvířata ze skupiny 9 a 2 zvířata ze skupiny 8 ve třetím a čtvrtém týdnu. Zvířatům s výjimkou skupiny 9 byla podávána sloučenina ET-ie-OCH^ v pátém až sedmnáctém týdnu pokusu, potom byla zvířata zabita.
Každá doba, uváděná v pokuse a v jednotlivých výkresech je počítána ode dne podání první injekce.
Vzorky séra, zkoušky na protilátky
Vzorky séra byly odebírány z retroorbitální žilní pleteně ve dnech 1, 9, 19, 27, 35, 44, 55, 65, 77, 85, 97 a 112. Séra byla skladována při teplotě -20 *C až do konečného odběru ve dni 122, potom byl současně stanoven a srovnáván titr protilátek ve třinácti vzorcích séra od každého zvířete.
Protilátky séra byly měřeny radioimunologicky při použití proteoglykanů z chrupavky,
125 a to I-značeného z materiálu lidských novorozenců, rozštěpeného chondroitinázou ABC 125 a I-značeného z myší, a to intaktního nebo rozštěpeného stejnou chondroitinázou. Každé sérum bylo vyšetřováno v ředění 1 : 100, 1 : 500 a 1 : 2 500 a v případě potřeby i 1 :
: 12 500 podle shora uvedené publikace Mikecz a další, a podle publikace Glant a další, Biochem. J. 234, 31 - 41. 100 ^ul zředěného séra bylo inkubováno se značením proteoglykanem (10 000 impulsů za minutu v objemu 50 yul) celkem 4 hodiny při teplotě místnosti.
Po inkubaci bylo přidáno 25 ^ul Staphylococcus aureus s obsahem bílkoviny A (5 %) a po inkubaci 30 minut při teplotě 37 ’C byla po odstředění stanovena radioaktivita usazeniny počítačem (Beckman).
Zkoušky na reaktivitu lymfocytů
Byla stanovena odpověd splenocytů na konkavalin A (con A, mitogen pro myši T-buňky) a na antigeny typu proteoglykanů z chrupavky (BAC-PG a HYAC-PG) shora uvedeným způsobem. Stimulace lymfocytů byla vyjádřena ve formě indexu, který je vyjádřen poměrem impulsů za minutu pro stimulované kultury v hodnotě pro nestimulované kultury.
Stanovení rozsahu arthritidy
Končetiny všech myší, imunizovaných i neimunizovaných byly denně prohlíženy k zaznamenání zánětlivých změn na kloubech, které byly hodnoceny podle publikace Gent a další, Arthritis Rheum. 30 (1987), 201 až 212. Byly hodnoceny otoky a červenání jako první klinické příznaky zánětu a zduření (průměr) kolena, lokte, kotníku, zápěstí a také dorso-volární tlouštka předních tlapek.
Klinické a histologické zkoušky
Před pokusem byl stanoven počet červených a bílých krvinek i jejich diferenciální počet, stejné hodnoty byly opakovány v týdnu 11, tj. po ošetření, trvajícím 6 týdnů a na konci pokusu v den 122.
Končetiny, ocasy, bederní páteř a jednotlivé orgány byly testovány, kosti byly odvápněny a připraveny k výrobě řezů pro histologické účely.
Výsledky
Skupiny 1, 2 a 3 (neimunizované kontrolní myši bez zánětu kloubů)
Tyto myši BALB/c ve skupinách po pěti nebyly imunizovány proteoglykanem jako antigenem, avšak zvířatům ve skupině 2 a 3 byla podána ve formě emulze směs fyziologického roztoku chloridu sodného a Preundova pomocného prostředku, jak je uvedeno v tabulce I. U žádného z těchto zvířat nedošlo ke tvorbě protilátek včetně proteoglykanů a kolagenu typu II a nevyvinut se zánět kloubů.
Zvířata ze skupiny 3 ztratila na váze a byla mírně chudokrevná (Tabulka II) pravděpodobně vzhledem k odběru krve, jinak však byla zdravá. Pouze došlo k poklesu stimulace lym7 focytů vlivem mitogenu T-buněk (con A), jak je zřejmé z obr. 7.
Skupiny 4 a 5 (zvířata, imunizovaná proteoglykany, které nevyvolávají záněty kloubů)
Tato zvířata byla imunizována proteoglykany z chrupavky kloubů skotu (BAC,, avšak pouze zvířatům ze skupiny 5 byla podávána sloučenina ET-lň-OCH^, jak je zřejmé z tabulky I. Jak bylo možno očekávat, u žádného ze zvířat ze skupin 4 a 5 se nevyvinul zánět kloubů.
Zvířata ze skupiny 4 produkovala běžné protilátky proti použitému proteoglykamu, titr protilátek se stále zvyšoval až do zkřížené reaktivity, avšak tyto protilátky se neúčastní vývoje choroby a nejde o stejné protilátky jako proti HYAC, jak je zřejmé z obr.
8. Odpověd lymfocytů ve formě stimulačního indexu podle svrchu uvedené publikace Mikecze a dalších, byla zřetelně zvýšena za přítomnosti proteoglykanů BAC a současně HYAC, jak je zřejmé z obr. 7.
Zvířata ze skupiny 5 produkovala menší množství protilátek proti proteoglykanům ze skotu nebo lidského původu, autoprotilátky proti proteoglykanům myší chrupavky nebylo možno prokázat ani při zředění séra pouze 1 : 100, jak je zřejmé z obr. 9. Protilátky v séru byly potlačeny působením ET-I8-OCH3 v průběhu 2 týdnů, toto potlačení bylo výraznější pro dávku 25 mg/kg/den než pro dávku 20 mg/kg/den. Produkce antilátek se však přesto zvyšovala v průběhu celého období léčby, jak je zřejmé z obr. 9. Stimulace lymfocytů proteoglykanem nebo con A byla jasně potlačena, a to i po přerušení léčby sloučeninou ET-I8-OCH3, jak je zřejmé z obr. 7.
Skupiny 6 a 7 (zvířata, imunizovaná HYAC, avšak neošetřená ET-I8-OCH3)
Zvířata v těchto dvou skupinách byla imunizována a byly provedeny zkoušky podle publikací Glant a další, Arthritis Rheum., 30 (1987), 201 až 212 a Mikecz a další,
Arthritis Rheum. 30 (1987), 306 až 318. Nebylo možno prokázat žádný rozdíl mezi zvířaty ze skupin 6 a 7, přičemž v druhé skupině bylo denně podáváno mléko bez sloučeniny ET-I8-OCH3. Zvířata produkovala protilátky proti proteoglykamin HYAC a velké množství autoprotilátek proti proteoglykanům myší chrupavky. U všech zvířat se vyvinut zánět kloubů po třetí nebo bezprostředně po čtvrté intraperitoneální injekci proteoglykanů HYAC, jak je zřejmé z obr. 10, tento zánět byl progresivní a vedl ke vzniku deformit a ankyloz periferních kloubů, jak bylo popsáno v publikaci Glant a další. Arthritis Rheum., 30 (1987), 201 až 212. Proliferace splenocytů těchto zvířat in vitro je shrnuta na obr. 11, z něhož je zřejmá charakteristická stimulace lymfocytů za přítomnosti proteoglykanových antigenu a con A.
Skupina 8 (zvířata, imunizovaná HYAC a ošetřená ET-I8-OCH3) šest zvířat ve skupině 8 bylo imunizováno proteoglykany HYAC stejně jako zvířata ze skupin 6 a 7, avšak tato zvířata byla ošetřena podáváním ET-I8-OCH3 po dobu 12 týdnů. Vzhledem k tomu, že se stav zvířat zhoršoval a dvě zvířata uhynula ve 3. a 5. týdnu léčby, bylo nutno snížit dávku ET-I8-OCH3 z původní dávky 25 na dávku 20 mg/kg/den od 6. týdne léčby, jak je zřejmé z obr. 12. Po snížení dávky se stav zvířat zlepšil. U tří ze čtyř zvířat se vyvinul zánět kloubů, avšak ke vzniku zánětu došlo později a všechny klinické příznaky byly mírnější (rudnutí a otok, vyjádřený jako průměr kotníku), také počet zasažených kloubů byl menší než u skupin 4 a 5.
U zvířat této skupiny a ve všech dalších skupinách, jimž byla podávána účinná látka, bylo možno pozorovat větší anemii než u neošetřených zvířat, jak je zřejmé z tabulky IX. Toto pozorování může být založeno na přímém účinku sloučeniny ET-I8-OCH3 na buňky kostní dřeně, může však také jít o nepřímý účinek, způsobený celkově zhoršeným stavem, například snížením tělesné hmotnosti. Slabá anemie však byla pozorována u všech myší, zřejmě v důCS 276439 B6 sledku častých odběrů krve. Další laboratorní zkoušky, jako proteinurie (nebyla prokázána) , počet a direfenciální počet bílých krvinek nevykazovaly žádný rozdíl u ošetřených a neošetřených zvířat.
Koncentrace protilátek proti proteoglykanům HYAC a proti myším chrupavkám byla snížena až potlačena od druhého týdne léčby, avšak potom se opět zvyšovala i přes použití vyšší dávky 25 mg/kg/den sloučeniny ET-18-OCH3, jak je zřejmé z obr. 12. Na druhé straně proliferace T-lymfocytů, a to jak stimulovaná antigenem, tak nespecifická (con A) byla potlačena stejně u všech ošetřených zvířat, jak je zřejmé z obr. 11.
Skupina 9 (předběžné ošetření ET-18-OCH3 před imunizací proteoglykanem, vyvolávajícím zánět kloubů)
Zvířata (původně 10 zvířat) této skupiny byla předběžně ošetřena podáním sloučenin ET-18-OCH3 dva týdny před první injekcí antigenu. Naneštěstí uhynula 4 zvířata z této skupiny v průběhu prvních 6 týdnů pokusů,, takže použitá dávka byla pravděpodobně příliš vysoká pro myši BALB/c. Avšak pro srovnání nebyla dávka účinné látky snížena až do té doby, kdy uhynula dvě zvířata ze skupiny 8, jak bylo uvedeno shora.
Klinické parametry a celkový stav zvířat odpovídal skupině 8 s tím rozdílem, že se nevyvinul zánět kloubů, histopathologické vyhodnoceni dosud nebylo provedeno. Stimulace lymfocytů lidským proteoglykanem, nebo proteoglykanem skotu a con A byla stejná jako pro skupinu 8, došlo tedy k podstatnému potlačení specifické i nespecifické odpovědi T-lymfocytů. Mimoto došlo později k produkci protilátek, protilátky bylo možno prokázat v protiséru obvykle až po čtvrté injekci antigenu.
Závěry • Ošetřením myší BALB/c sloučeniny ET-18-OCH3 je možno potlačit projevy akutního zánětu a utlumit progresivitu chronického zánětu kloubů, který byl vyvolán proteoglykanem. Předběžné podání této látky chrání myši před vznikem zánětu, pravděpodobně potlačením imunologické odpovědi, zprostředkované T-buňkami. Produkce (auto) protilátek byla podstatně potlačena. Tento účinek je stálý přibližně po dobu 3 až 4 týdnů při podávání uvedené látky perorálně, potom se tvorba protilátek obnoví na základě zatím neznámého mechanismu.
TABULKA 1
| Pokusné skupiny, imunizace a léčba myší BALB/c | ||||||
| skupi- počet | typ imuni- protilátky proti | klinický stav | léčba ET-18-OCH3 | |||
| na č. | zvířat | zace HYAC-PG | myší-PG | |||
| 1 | 5 | - | - | - | bez zánětu | - |
| 2 | 5 | NaCl | - | - | bez zánětu | rozpouštědlo |
| 3 | 5 | NaCl | - | - | bez zánětu | + |
| 4 | 5 | BAC-PG | + | + | bez zánětu | rozpouštědlo |
| 5 | 6 | BAC-PG | + | + | bez zánětu | + |
| 6 | 5 | HYAC-PG | + | + | zánět kloubů | - |
| 7 | 6 | HYAC-PG | + | + | zánět kloubů | rozpouštědlo |
| 8 | 6 | HYAC-PG | + | + | mírný a pozdní zánět kloubů | + |
| 9 | 10 | HYAC-PG | + | + | bez zánětu | předběžné ošetření |
| Imunizační | látky byly podávány | jako | emulze v | chloridu sodném a | Freundově pomocném |
prostředku.
HYAC-PG = proteoglykan z lidských chronrofytů
BAC-PG = proteoglykan z chrupavky skotu
NaCl = roztok s fosfátovým pufrem o pH 7,4 (0,01 M PO^ v 0,14 M NaCl) rozpouštědlo = mléko, které bylo užito také k rozpuštění ET-ie-OCH^.
TABULKA II
Srovnání tělesné hmotnosti, počtu červených krvinek a průměru kotníků u myší se zánětem kloubů a bez zánětu ve dnech 1, 71 a 122 skupí- den tělesná hmotnost počet červených krvinek průměr kotníků na č. pokusu (g) (x lO^^ul) v mm
6-7
| 1 | 19,9 | + 2,7 | 9,13 + | 0,62 | 3,16 + | 0,05 |
| 71 | 27,2 | + 1,2 | 8,78 + | 0,49 | 3,14 + | 0,05 |
| 122 | 27,4 | + 1,6 | 8,02 + | 0,32 | 3,16 + | 0,07 |
| 1 | 19,6 | + 2,6 | 9,26 + | 0,51 | 3,13 + | 0,13 |
| 71 | 24,2 | + 1,4 | 8,04 + | 0,66 | 3,18 + | 0,08 |
| 122 | 24,8 | + 0,0 | 6,43 + | 0,60 | 3,16 + | 0,13 |
| 1 | 19,2 | + 2,7 | 9,18 + | 0,26 | 3,17 + | 0,05 |
| 71 | 25,2 | + 3,4 | 8,75 + | 0,19 | 3,64 + | 0,12 |
| 122 | 24,9 | + 3,9 | 7,92 + | 0,28 | 3,71 + | 0,24 |
Tabulka II - pokračování skupi- den * tělesná hmotnost počet červených krvinek průměr kotníků
| na č. | pokusu | (g) | (x 106 | yUl) | v mm |
| 8 | 1 | 19,2 + 1,6 | 8,72 + | 0,24 | 3,17 + 0,04 |
| 71 | 22,6 + 3,1 | 6,25 + | 0,21 | 3,19 + 0,08 | |
| 122 | 21,4 + 4,3 | 5,38 + | 0,32 | 3,32 + 0,18 | |
| 9 | 1 | 17,8 + 2,9 | 8,22 + | 0,24 | 3,16 + 0,04 |
| 71 | 19,1 + 1,9 | 7,95 + | 0,19 | 3,16 + 0,05 | |
| 122 | 23,4 + 3,7 | 6,42 + | 0,73 | 3,17 + 0,07 |
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (4)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Farmaceutický prostředek pro léčbu autoimunologických onemocnění s výjimkou roztroušené sklerózy, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje sloučeniny obecného vzorce IH0C - 0 - R,IR3 - C - 0 - R2 1 !H2C- 0 - P - 0 -CH2- CH2- N(CH3)j o(I) kdeR-^ znamená alkylový zbytek o 12 až 18 atomech uhlíku,R2 znamená alkylový zbytek s obsahem až 8 atomů uhlíku, aRg znamená atom vodíku nebo alkylový zbytek o až 3 atomech uhlíku.
- 2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeniny obecného vzorce I, kde R2 znamená alkylový zbytek o až 3 atomech uhlíku a R^ a R^ mají význam, uvedený v bodu 1.
- 3. Farmaceutický prostředek podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce II h2cHC h2c o - (ch2)15 - ch3O - CH3 oO - P - O (II) +CH2 - CHg - N(CH3)3O
- 4. Farmaceutický prostředek podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce IIIHgC - 0 - (CH2)17 - CH3HC - 0 - CH3OH2C - 0 - P - O - CH2 o“ (III)CH2 -N(CH3)3
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3918082A DE3918082A1 (de) | 1989-06-02 | 1989-06-02 | Mittel gegen autoimmunerkrankungen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS268990A3 CS268990A3 (en) | 1992-01-15 |
| CS276439B6 true CS276439B6 (en) | 1992-05-13 |
Family
ID=6381972
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS902689A CS276439B6 (en) | 1989-06-02 | 1990-05-31 | Pharmaceutical for treating auto-immune diseases |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5266564A (cs) |
| EP (1) | EP0474712B1 (cs) |
| JP (1) | JP2977894B2 (cs) |
| AT (1) | ATE94757T1 (cs) |
| AU (1) | AU5670690A (cs) |
| CA (1) | CA2056421C (cs) |
| CS (1) | CS276439B6 (cs) |
| DE (2) | DE3918082A1 (cs) |
| DK (1) | DK0474712T3 (cs) |
| ES (1) | ES2060173T3 (cs) |
| GR (1) | GR1001195B (cs) |
| IE (1) | IE64039B1 (cs) |
| WO (1) | WO1990014829A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA904196B (cs) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3941009A1 (de) * | 1989-12-12 | 1991-06-13 | Medmark Pharma Gmbh | Eliminierung von aktivierten lymphozyten |
| NZ536216A (en) * | 1996-02-09 | 2006-08-31 | Abbott Biotech Ltd | Use of an isolated antibody D2E7 for the treatment of a disorder in which TNF(alpha) activity is detrimental |
| EP1140112B1 (en) | 1998-12-21 | 2005-03-09 | Inkeysa, S.A. | Etherlysophospholipids for the treatment of chronic inflammatory diseases |
| SE9902155L (sv) * | 1999-06-09 | 2000-12-10 | Bjoern Rydevik | Serum antibodies |
| JP2002228764A (ja) * | 2001-02-02 | 2002-08-14 | Fuji Photo Film Co Ltd | 透光性シート体検出装置 |
| CA2668919C (en) * | 2006-11-10 | 2015-11-03 | Alphaptose Gmbh | Oral dosage form comprising tri-substituted glycerol compounds |
| ES2393762T3 (es) | 2006-11-10 | 2012-12-27 | Alphaptose Gmbh | Procedimientos y composiciones para detectar miméticos de ligandos de receptores |
| DK2089401T3 (da) * | 2006-11-10 | 2012-09-17 | Radioprotect Alphaptose Ug Haftungsbeschraenkt & Co Kg | Anvendelse af trisubstituerede glycerolforbindelser til behandling af strålingsskader |
| EP2120873B1 (en) * | 2006-12-20 | 2012-06-27 | Alphaptose Gmbh | Topical dosage form comprising tri-substituted glycerol compounds |
| HRP20130551T1 (xx) | 2007-03-28 | 2013-07-31 | Aker Biomarine As | Biouäśinkovite smjese kril ulja |
| US8697138B2 (en) | 2007-03-28 | 2014-04-15 | Aker Biomarine As | Methods of using krill oil to treat risk factors for cardiovascular, metabolic, and inflammatory disorders |
| CA2839075A1 (en) * | 2007-08-29 | 2009-03-05 | Aker Biomarine Asa | A new method for making krill meal |
| US20100226977A1 (en) * | 2007-08-29 | 2010-09-09 | Aker Biomarine Asa | Low viscosity phospholipid compositions |
| US8372812B2 (en) * | 2009-02-26 | 2013-02-12 | Aker Biomarine Asa | Phospholipid and protein tablets |
| WO2013156630A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Alphaptose Gmbh | S-enantiomer of a tri-substituted glycerol compound |
| AU2014203179C1 (en) | 2013-06-14 | 2017-05-04 | Aker Biomarine Antarctic As | Lipid extraction processes |
| GB201400431D0 (en) | 2014-01-10 | 2014-02-26 | Aker Biomarine As | Phospholipid compositions and their preparation |
| ES2937960T3 (es) | 2015-02-11 | 2023-04-03 | Aker Biomarine Antarctic As | Proceso de extracción de lípidos |
| NZ735362A (en) | 2015-02-11 | 2019-01-25 | Aker Biomarine Antarctic As | Lipid compositions |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2009343C3 (de) * | 1970-02-27 | 1980-10-23 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | Verwendung von Lysolecithinen als immunologische Adjuvantien |
| DE2009342C3 (de) * | 1970-02-27 | 1980-12-18 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | Verwendung von Glycerin-alkyläther-(l)-phosphorsäure-(3)-monocholinestern |
| DE2619686C2 (de) * | 1976-05-04 | 1986-08-07 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Verwendung eines Lysolecithins zur Tumorbehandlung |
| CH670763A5 (cs) * | 1985-08-02 | 1989-07-14 | Seuref Ag | |
| DE3530767A1 (de) * | 1985-08-28 | 1987-03-12 | Max Planck Gesellschaft | Mittel gegen multiple sklerose |
-
1989
- 1989-06-02 DE DE3918082A patent/DE3918082A1/de active Granted
-
1990
- 1990-05-29 GR GR900100406A patent/GR1001195B/el not_active IP Right Cessation
- 1990-05-31 JP JP2507957A patent/JP2977894B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1990-05-31 CS CS902689A patent/CS276439B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1990-05-31 DK DK90908504.5T patent/DK0474712T3/da active
- 1990-05-31 DE DE90908504T patent/DE59002863D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-05-31 ES ES90908504T patent/ES2060173T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-05-31 EP EP90908504A patent/EP0474712B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-05-31 WO PCT/EP1990/000870 patent/WO1990014829A1/de active IP Right Grant
- 1990-05-31 AT AT90908504T patent/ATE94757T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-05-31 US US07/777,248 patent/US5266564A/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-05-31 CA CA002056421A patent/CA2056421C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-05-31 AU AU56706/90A patent/AU5670690A/en not_active Abandoned
- 1990-06-01 ZA ZA904196A patent/ZA904196B/xx unknown
- 1990-06-01 IE IE198790A patent/IE64039B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE94757T1 (de) | 1993-10-15 |
| JP2977894B2 (ja) | 1999-11-15 |
| ES2060173T3 (es) | 1994-11-16 |
| WO1990014829A1 (de) | 1990-12-13 |
| DE3918082C2 (cs) | 1992-02-06 |
| JPH04507096A (ja) | 1992-12-10 |
| IE64039B1 (en) | 1995-06-28 |
| ZA904196B (en) | 1991-03-27 |
| DE59002863D1 (de) | 1993-10-28 |
| CA2056421C (en) | 2000-10-10 |
| DK0474712T3 (da) | 1993-11-29 |
| GR1001195B (el) | 1993-06-07 |
| US5266564A (en) | 1993-11-30 |
| CS268990A3 (en) | 1992-01-15 |
| AU5670690A (en) | 1991-01-07 |
| EP0474712B1 (de) | 1993-09-22 |
| GR900100406A (en) | 1991-11-15 |
| IE901987L (en) | 1990-12-02 |
| DE3918082A1 (de) | 1991-01-24 |
| CA2056421A1 (en) | 1990-12-03 |
| EP0474712A1 (de) | 1992-03-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS276439B6 (en) | Pharmaceutical for treating auto-immune diseases | |
| Macdermott et al. | Alterations of the immune system in ulcerative colitis and Crohn's disease | |
| Wofsy et al. | Reversal of advanced murine lupus in NZB/NZW F1 mice by treatment with monoclonal antibody to L3T4. | |
| Kita et al. | Probucol prevents the progression of atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit, an animal model for familial hypercholesterolemia. | |
| Voorthuis et al. | Suppression of experimental allergic encephalomyelitis by intraventricular administration of interferon‐gamma in Lewis rats | |
| Fallon et al. | Immune-dependent chemotherapy of schistosomiasis | |
| Winn et al. | Acute destruction by humoral antibody of rat skin grafted to mice: the role of complement and polymorphonuclear leukocytes | |
| HU210813A9 (en) | Enhancement of the down-regulation of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens | |
| EP0251134B1 (en) | Compositions for preventing graft rejection | |
| US4778788A (en) | Agent against multiple sclerosis | |
| US7608246B2 (en) | Apolipoprotein E as an adjuvant for lipid antigens | |
| AU665764B2 (en) | Methods and compositions for the prevention, diagnosis, and treatment of inflammatory serosal disease and related conditions | |
| CA2265631A1 (en) | Therapeutic formulations containing venom or venom anti-serum either alone or in combination for the therapeutic prophylaxis and therapy of neoplasms | |
| RU2083210C1 (ru) | Средство для профилактической, поддерживающей и восстановительной терапии развивающихся при старении и/или под воздействием патогенных факторов патологий, связанных с дистрофическим и дегенеративными изменениями органов и тканей | |
| Bräuer et al. | Changes of immunoregulatory properties and induction of autoimmune reactivity to cartilage in rabbits with antigen-induced arthritis | |
| Internationalis | Bacteriology, immunology | |
| Du Clos | THE SUPPRESSOR CELL IN NEONATALLY INDUCED TOLERANCE. | |
| Dion | Septic shock, the second messenger system and the complement system | |
| CHARLES | Immunologic Tissue Injury Mediated by Neutrophilic Leukocytes1 | |
| Koopman et al. | Suzanne M. Michalek, Jerry R. McGhee, Dawn E. Colwell, Shane I. Williamson, Thomas A. Brown, David M. Spalding | |
| Smiley | The immune response in rheumatoid synovitis | |
| Weltzin | Intracellular Calcium and Protein Kinase C Regulate Nonspecific Cell-Mediated Cytotoxicity by Mouse Lymphocytes (Calmodulin) | |
| Cutler | Serum-mediated interactions between Bacteroides gingivalis and polymorphonuclear leukocytes | |
| Noor | Immunosuppression in Atlantic salmon by an extracellular protein of Aeromonas salmonicida | |
| Ginsburg et al. | Prostaglandins and Their Modification by Anti-Inflammatory Agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20080531 |