CS276073B6 - Způsob přípravy biomasy s obsahem psilocybinu a peilociau ze etopkovýtrusá houby - Google Patents

Abstract

Řeší ee příprava paychotropnlch látek peilocybinu a peilociau kultivací houby Psilocybe bohemiea Šebek, jejíž mycelium produkuje v podmínkách hloubkové kultivace aa tekutém komplexním médiu podstatně vyšší koncentrace těchto látek. Účelem je umožnit fermentační výrobu peychotropního peilocybinu a peilociau využitelných v paycho- * diagnostice a psychoterapii. Produkční kmen podle vynálezu je uložen ve sbírce CCBAS Mikrobiologického ústavu ČSAV v Praze pod číslem 672.

Description

Vynález se týká způsobu přípravy biomasy s obsahem psilocybinu a psilocinu ze stopkovýtrusé houby.

Psilocybin a pailocin jsou účinné složky některých druhů halucinogenních hub. Tyto látky jsou vzhledem k nízké toxicitě vhodnějším prostředkem v psychoterapii a psychodiagnostice než toxičtější a návykový diethylamid lysergové kyseliny (Leuner H., Schlichting Μ.: Ueber den derzeitigen Stand der Forschung auf dem Gebiet der peychoaktíven Substanzen, 153—173 (1986)). Zavedení psilocybinu a psilocinu do praxe brání především jejich nedostupnost - chemická syntéza je obtížná (Speeter Μ. E., Anthony W. C«: J. Am. Chem. Soc. 76, 6209 (1954), Hofmann A. et all.: Experientia 14, 397 (1958) a ekonomicky neschůdná a biochemická příprava je dosud málo efektivní (Pat. CH 215 055 Sandoz A. G., Basel, 1967: Production of Psilocybin and Psilocin) - myceliální kultury Psilocybe mexicana použité k izolaci látek obsahují velmi nízké koncentrace látek.

Podstatou způsobu přípravy biomasy s obsahem psilocybinu a psilocinu podle vynálezu je, že se myceliální kultura kloboukaté stopkovýtrusé houby Psilocybe bohemica Šebek, kmen uložený ve sbírce kultur basidiomycetů CCBAS 672, kultivuje za submersních podmínek při teplotě 24+1 °C po dobu 17 až 25 dnů na komplexní tekuté živné půdě obsahující monosacharxdy, zdroje asimilovatelného dusíku, minerální a růstové látky, načež se odfiltruje mycelium, které obsahuje konečné produkty.

Pro produkci psychotropních látek je inokulum kultury pěstováno stacionárně v Petriho miskách na SEKYKO-agaru, na kterém mycelium roste rychlostí kolem 5 mm za 7 dnů.

Živná půda musí obsahovat zdroj uhlíku a dusíku, minerální soli, stopové prvky a růstové látky. Mycelium na tekuté sladinové půdě o koncentraci 4 až 8 °Ball. roste bohatěji, avšak produkuje podstatně méně psilocybinu a psilocinu než na tekuté komplexní půdě SEKYKO (glukosa 20 g, fruktosa 20 g, glycin 9 g, jantaran amonný 1 g, tryptofan 0,2 g, kvasničný extrakt 1 g, heptahydrát síranu hořečnatého 0,50 g, dihydrogenfosforečnan draselný 0,10 g, heptahydrát síranu železnatého 5 mg, heptahydrát síranu zinečnatého 2,5 mg, destilovaná voda 1000 ml, pH 5,5). .

Psychotropní látky psilocybin a psilocin jsou houbou produkovány intracelulárně. Kultivací houby za uvedených podmínek se získá mycelium s obsahem psilocybinu a psilocinu významně vyšším, než je dosud známo z literatury (Pat. sw 215 055).

Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy podle vynálezu.

Příklad 1 denní kultivace za účelem získání psilocinu

Inokulum se připraví zaočkováním myceliální kultury Psilocybe bohemica CCBAS 672 ze šikmého agaru ve zkumavce na Petriho misky s komplexní živnou půdou (složení je uvedeno dříve) s přídavkem 2 % (m/V) agaru. K další inokulaci se použije 35 denní kultura.

Hloubková kultivace se provádí na rotačním třepacím stroji v Erlenmayerových baňkách obsahujících 100 ml tekutého kompexního média. Baňky se inokulují větším počtem výřezů myp celiální kolonie velkých kolem 10 mm z Petriho misek. Po 17 dnech třepání ve tmě se filtrací oddělí mycelium, promyje se destilovanou vodou a usuší se za laboratorní teploty. Metodou vysokoúčinné kapalinové chromatogr £le byla po extrakci v suchém myceliu stanovena koncentrace 0,30 % (m/m) psilocinu a 0,40 % (m/m) psilocybinu. Suchá hmotnost mycelia byla ve stacionární fázi růstu 6,5 mg/ml.

Příklad 2 denní kultivace za účelem získání psilocybinu

Kultivace se provede za stejných podmínek jako v příkladě 1. Ukončí se však v 25. dni po zaočkování. Mycelium po stacionární fázi růstu vykazovalo suchou hmotnost 6 mg/ml. Koncentrace psilocybinu v suchém myeeliu byla 0,95 Ž (m/m), psilocinu 0,05 % (m/m).

Změny koncentrací psilocybinu a psilocinu a hmotnosti mycelia v průběhu hloubkové

CS 276 073 B6 kultivace na optimalizované komplexní půdě jsou znázorněny na grafu na přiloženém obrázku Z obrázku je například patrno, že maximální koncentrace psilocybinu je dosaženo na konci kultivace, zatímco psilocin vykazuje koncentrační maximum kolem 17- dne kultivace. Logaritmická fáze růstu kultury přechází do stacionární kolem ’5. dne.

Claims (1)

1. PATENTOVÉ NÍBOKY Způsob přípravy biomasy s obsahem psilocybinu a psilocinu ze stopkovýtrusé houby Psilocybe bohemiea Šebek, vyznačující se tím, že myeeliální kultura této houby, kmen CCBAS 672, se kultivuje za submeraních podmínek při teplotě 24+1 °C po dobu 17 až 25 dnů na komplexní tekuté živné půdě obsahující monosacharidy, zdroje asimilovatelného dusíku, minerální a růstové látky, načež se odfiltruje mycelium, které obsahuje konečné produkty.