CS272935B1 - Adjuvant for virus vaccines - Google Patents
Adjuvant for virus vaccines Download PDFInfo
- Publication number
- CS272935B1 CS272935B1 CS77089A CS77089A CS272935B1 CS 272935 B1 CS272935 B1 CS 272935B1 CS 77089 A CS77089 A CS 77089A CS 77089 A CS77089 A CS 77089A CS 272935 B1 CS272935 B1 CS 272935B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- adjuvant
- collagen
- vaccine
- saponin
- weight
- Prior art date
Links
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title abstract description 27
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title abstract description 21
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims description 15
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims description 15
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims description 15
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 abstract description 3
- SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N oat triterpenoid saponin Chemical compound CNC1=CC=CC=C1C(=O)OC1C(C=O)(C)CC2C3(C(O3)CC3C4(CCC5C(C)(CO)C(OC6C(C(O)C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)CO6)OC6C(C(O)C(O)C(CO)O6)O)CCC53C)C)C4(C)CC(O)C2(C)C1 SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 2
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 208000005562 infectious bovine rhinotracheitis Diseases 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008213 Brosimum alicastrum Species 0.000 description 1
- 241001070941 Castanea Species 0.000 description 1
- 235000014036 Castanea Nutrition 0.000 description 1
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000245063 Primula Species 0.000 description 1
- 235000016311 Primula vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical group [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 230000002542 deteriorative effect Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 235000005828 ramon Nutrition 0.000 description 1
- 238000012770 revaccination Methods 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- -1 t Species 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
(54)
Adjuvans pro virové vakcíny (57) Řešení se týká adjuvans tvořeného 1,5 až 4,5 % hmot. vodorozpustného štěpeného hovězího .kolagenu o molekulové hmotnosti 30 000 až 40 000, v kombinaci s 0,15 až 0,45 % hmot. rostlinného saponinu v konečné formě vakcíny. Toto adjuvans zesiluje imunogenní odpověď na aplikovaný antigen a nemá nepříznivý vliv na organismus.
| (11) , | ||
| (13) | B1 | |
| (51) | Int. | Cl.5 |
| A .61 | K 47/OoZ/ | |
| A 61 | K 37/12 |
*- CS 272 935 Bl
Vynález se týká adjuvans pro virové vakciny. Řeší u nich zasílení imunogenní odpovědi na podaný antigen. Adjuvantního účinku se u vakcin dosahuje obsahem 1,5 až 4,5 % hmot. vodorozpustného hovězího kolagenu v kombinaci s 0,15 až 0,45 % hmot. rostlinného saponinu.
Antigen aplikovaný do organismu parenterálně vyvolává určitý stupeň imunity. Za účelem zvýšení jeho působení se přidávají adjuventní látky (Ramon,G.: C.R. Acad. Sc. 181,(1925), 157; Ramon,G.: Bull. Soc. Centr.Méd.Véter. (1925), 101, 227).
Celosvětově se ustálilo používání zejména gelu hydroxidu hlinitého, minerálních olejů a saponinu (Ramon.G., Richon,R., Thiery, 3.P., Gerbeaux, Cl.: D Imunologie (1943) 13, 301. Klasické adjuvans typu parafinového oleje je Freundovo adjuvans (Freund, 3.: Ann. Rev. Microbiol: 1 (1947) 291; Freund, 3.: A.3. Clin. Path. 21 (1951) 645), které se obohacuje případnými emulgátory. Tyto přípravky mají vedle adjuvantního účinku některé vedlejší nežádoucí účinky. 3sou to především reakce v inístě aplikace, ale také v posledních letech - v souvislosti se zhoršující se ekologickou situací a zvyšující se vnímavostí zvířat - celkové reakce anafylaktoidního charakteru, které se vyskytují hlavně u skotu. Některé případy končí úhynem.
Uvedené nedostatky odstraňuje adjuvans pro virové vakciny podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje 1,5 až 4,5 % hmot. vcdorozpustného štěpeného hovězího kolagenu o molekulové hmotnosti 30 000 až 40 000 a 0,15 až 0,45 % hmot. rostlinného saponinu.
Adjuvans pro virové vakciny podle vynálezu má oproti dosud používaným adjuvaciím následující výhody:
3e neantigenní povahy, při parenterálním podání je u zvířat bezvýhradně snášeno, potencuje imunogenní účinek živých i inaktivovaných antigenů lépe než dosud známá adjuvancia, je snadno vstřebatelné a v místě vpíchu nezanechává rezidua a následky.
Základní složkou je vodorozpustný štěpený hovězí kolagen o molekulové hmotnosti 30 000 až 40 000. V koncentracích do 10 % hmot, je tekutý při teplotách do -10 °C. Na četná vazebná místa se poměrně pevně vážou antigenni částice. Druhou složkou je rostlinný saponin.
Směs těchto složek je možno sterilizovat varem, autoklávováním, radiačně nebo podle potřeby přídavkem antiseptik. Směs se připravuje v destilované vodě, ve fyziologickém roztoku nebo v pufrovaném fyziologickém roztoku, popřípadě přímo v roztoku antigénu.
Adjuvans s antigeny se v organismu pozvolna rozkládá a zajišťuje tak dlouhodobý adjuvantní účinek. Vyvolává imunitní odpověď, která je stejná nebo vyšší než u vakcin s olejovým adjuvans, a to bez nebezpečí vedlejších reakcí,ke které po olejových adjuvans někdy dochází, a vyšší než u adjuvans s hydroxidem hlinitým, po jehož aplikaci zůstávají rezidua hliníku a poškození tkáně.
Titry dokumentující účinnost jsou uvedeny v příkladech.
Výhodně se vhodným poměrem kolagenové a saponinové složky využívá adjuvantního účinku v komplexním působení, jako důsledku depotního a imunostimulačního účinku.
Následující uvedené příklady ilustrují, ale neomezují předmět vynálezu.
Příklad 1
Příprava vodorozpustného kolagenu kg nativní hovězí párkové kolagenní hmoty (Cutisin Oilemnice) se vložilo do baňky objemu 50 litrů, přidalo se 10 litrů destilované vody a za stálého míchání se rozpustilo při pokojové teplotě. Po dobu 2 hodin se sledovalo pH upravovalo se přídavky 20 % hmot. hydroxidu sodného na hodnotu 7,0. Po ustálení pH se teplota zvýšila na 37 °C a přidal se 1 g trypsinu (Bíoveta Terezín). Teplota v nádobě se udržovala na 37 °C za stálého míchání až do vymizení všech pevných částí kolagenu (12 h). Potom se teplota zvýšila po dobu 20 minut na 80 θΟ,. čímž došlo k inaktívaci trypsinu a proces krakováni kolagenu se zastavil. Po vychladnutí se
CS 272 935 Bl roztok filtroval, rozplnil do pracovních nádob a stanovil se obsah kolagenu. Roztok, který obsahoval 7 % hmot. kolagenu, se ředěním upravil na 6 % hmot. roztok, který se použil k dalšímu zpracování.
Příklad 2
Příprava tekuté inaktivované vakciny proti infekční bovinni rinotracheitidě
Připravilo se 10 000 ml suspenze kmenů IBR v koncentraci l.lO^/cm3 a smísilo se s 10 000 ml 6 % hmot. roztoku kolagenu připraveného podle příkladu 1. Přidalo se 60 g mydlicového saponinu (tj. do výsledné koncentrace 0,3 % hmot.) a konzervovalo se 2 g merthiolátu (tj. do výsledné koncentrace 0,01 % hmot.). Po homogenizaci se připravená vakcina rozplnila do lékovek. Vakcinační dávka pro sket byla 5 cm3 s revakcinací za 21 dní stejnou dávkou. Ověření takto připravené vakciny provedl V0Vel Brno se závěrem, že její i.m. aplikace vyvolala tvor bu specifických protilátek, jejichž koncentrace v séru kulminovala za 5 týdnů po vakcinaci. Úroveň protilátkové odpovědi a její dynamika byla adekvátní imunitní reakci navozené aplika cí vakciny obsahující olejové adjuvans, avšak bez nepříznivých průvodních jevů.
Tab.č. 1
Druh adjuvans Výsledný titr protilátek
Olejová adjuvans 45
Kolagenové adjuvans se saponinem 48
Příklad 3
Příprava lyofilizované vakciny proti infekční bovinni rinotracheitidě
Vakcina připravená podle příkladu 2 a rozplněná do lékovek se zamrazila na teplotu minus 40 °C a byla zlyofilizována. Lékovky byly uzavřeny ve vakuu. Před použitím byl obsah lékovky doplněn destilovanou vodou na původní objem. Použití vakciny bylo stejné jako u příkladu 2 a stejné byly i výsledky (uvedené v tabulce č.l).
Příklad 4
Příprava tekuté vakciny proti.moru a myxomatóze králíků cm3 vhodné orgánové suspenze s obsahem inaktivovaného viru moru králíků se smíchalo s 10 cm3 roztoku obsahujícího:
- 3 % hmot. vodorozpustného kolagenu podle příkladu 1 (0,3 g)
- 0,30 % hmot. prvosenkového saponinu (0,03 g)
- 100 vakcinačních dávek viru myxomatózy MXT (1,8 cm3)
- voda do 10 cm3.
Tím vzniklo 20 cm3 vakciny, ve které byla jako adjuvans použita koncentrace kolagenu 1,5 % hmot, a saponinu 0,15 % hmot. Dávka pro jednoho králíka činila 0,2 cm3 perkutánně. Ověření takto připravené vakciny bylo provedeno přímým průkazem účinnosti - čelenží - proti moru králíků a proti myxomatóze. Všichni vakcinovaní králíci přežili experimentální infekci, všichni kontrolní nevakcinovaní králičí uhynuli. Výsledek prokázal, že adjuvans potencuje účinek antigenu v tvorbě specifických protilátek proti moru králíků a současně proti myxomatóze stejně dobře jako dosud používaný gel hydroxidu hlinitého se saponinem, a to bez nepříznivých jevů poškozené tkáně a kůže v místě vpichu.
Příklad 5
Příprava vakciny proti rota a korona infekcím novorozených telat
Smíchalo se 280 cm3 Inaktivovaného rotaviru hodnoty RVK 1 : 16 s 280 cm3 inaktivovaného ko4
CS 272 935 B1 ronaviru s hemaglutinačním titřem 128. Přidalo se 200 cm5 6 % hmot. kolagenu podle příkladu 1 a 1,14 g kaštanového saponinu. Dále se přidalo 100 000 m.j, draselné soli G Penicilinu, 0,1 g síranu streptomycinu, 3 cm3 l % hmot. roztoku fungicidinu a 2,5 cm3 10 % hmot. roztoku hydroxidu sodného. Vakcina byla rozplněna po 25 cm3. Jedna vakcinační dávka byla 2,5 cm3. V tomto případě adjuvans tvořil kolagen o koncentraci 1,5 % hmot. a saponin o koncentraci 0,15 % hmot.
Tato vakcina byla přezkoušena na pokusných zvířatech v porovnání s vakcinou s olejovým adjuvans s tímto výsledkem.
Adjuvans
Kolagen se saponinem
Olejové
Pokus · Výsledné průměrné titry protilátek c‘ antirotavirové antikoronavirové
ELISA HIT
1 : 16 1 : 128
1 : 16 1 : 64
1 : 16 1 : -.64
1:8 1 : '64
Imunitní odpověď kolagenového adjuvans je stejná nebo vyšší jako po dosud používaném olejovém adjuvans a je bez vedlejších nežádoucích účinků.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUAdjuvans pro virové vakciny, vyznačující se tím, že obsahuje 1,5 až 4,5 % hmot. vodorozpustného štěpeného hovězího kolagenu o molekulové hmotnosti 30 000 až 40 000 a 0,15 až 0,30 % hmot. rostlinného saponinu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS77089A CS272935B1 (en) | 1989-02-06 | 1989-02-06 | Adjuvant for virus vaccines |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS77089A CS272935B1 (en) | 1989-02-06 | 1989-02-06 | Adjuvant for virus vaccines |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS77089A1 CS77089A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272935B1 true CS272935B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5340440
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS77089A CS272935B1 (en) | 1989-02-06 | 1989-02-06 | Adjuvant for virus vaccines |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272935B1 (cs) |
-
1989
- 1989-02-06 CS CS77089A patent/CS272935B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS77089A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4806352A (en) | Immunological lipid emulsion adjuvant | |
| McKee et al. | Old and new adjuvants | |
| US9579379B1 (en) | Saponin adjuvant compositions and methods relating thereto | |
| KR102257743B1 (ko) | 유성 아쥬반트 | |
| Topping et al. | The preparation of antigens from yolk sacs infected with rickettsiae | |
| BRPI0412444B1 (pt) | fração de quil a com baixa toxidez e seu uso | |
| JPH09506353A (ja) | 抗原用のアジュバントおよびその製法ならびに用途 | |
| WO2009156960A2 (en) | Novel adjuvant compositions | |
| JP2004002479A (ja) | ワクチンにおいて使用するためのアジュバント | |
| JPH08325163A (ja) | 哺乳動物用ワクチン組成物 | |
| JP2756321B2 (ja) | 水酸化亜鉛または水酸化鉄をアジュバントとして含有する抗原溶液 | |
| ES2227651T3 (es) | Composiciones vacunales que comprenden inmunogenos inactivados y el virus vivo de la anemia aviar. | |
| US4395394A (en) | Use of lipid amines formulated with fat or lipid emulsions as vaccine adjuvants | |
| Habel | Preparation of mumps vaccines and immunization of monkeys against experimental mumps infection | |
| Harrison et al. | Duration of immunity, efficacy and safety in sheep of a recombinant Taenia ovis vaccine formulated with saponin or selected adjuvants | |
| US4310550A (en) | Lipid amines formulated with fat or lipid emulsions as vaccine adjuvants | |
| US3178350A (en) | Biologic antigens adjuvanted with a colloidally water-soluble polymer of acrylic acidcrosslinked with polyallyl sucrose or polyallyl pentaerythritol | |
| US4291019A (en) | Vaccine for infectious bovine rhinotracheitis | |
| GB1256457A (en) | Diethylaminoethyldextran (deae-d) as adjuvant for vaccines for active immunisation | |
| CS272935B1 (en) | Adjuvant for virus vaccines | |
| US6905712B2 (en) | Vaccine adjuvants comprising ginseng plant extract and added aluminum salt | |
| US3629413A (en) | Polyvalent bovine vaccines and methods of making and using same | |
| US3674862A (en) | Live attenuated rabies virus vaccine and process therefor | |
| Chen et al. | Adjuvant enhancement of humoral immune response to chemically inactivated bovine viral diarrhea virus | |
| RU2242993C2 (ru) | Способ приготовления вакцины для профилактики хламидийных инфекций у человека |