CS272890B1 - Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272890B1 CS272890B1 CS152689A CS152689A CS272890B1 CS 272890 B1 CS272890 B1 CS 272890B1 CS 152689 A CS152689 A CS 152689A CS 152689 A CS152689 A CS 152689A CS 272890 B1 CS272890 B1 CS 272890B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridome
- virus
- ueo
- monoclonal antibody
- glycoprotein
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 13
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 4
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 3
- 101500007117 Bovine leukemia virus Surface protein Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 108010011013 glycoprotein GP51 Proteins 0.000 abstract 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 101000920732 Bovine leukemia virus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
CS 272890 BI
Vynález sa týká nového mySieho lymfocytárneho hybridómu, BIiVgp51 UEO-4E9/32E5 t.j.hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostroj'ená fáziou buniek mySej myelómovej linieSp2/0 a myších lymfoidných buniek, produkujácich protilátky namierené proti obalovémuglykoproteinu agp 51 virusu bovinnej leukémie (BLV). Obalový glykoproteín je důležitousúčastfou virusu bovinnej leukémie, je zodpovědný za infektivitu virusu. Nález anti gp--protilátok u zvierat má zásadný význam-pre diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Doteraz sa protilátky proti antigénom ELV vyrábajá tak, že purifikovaný gp51 jeopakované injikovaný produkčným zvieraťám, najčastéjšie. králikom. Sérum takto imunizo-vaných zvierat, odobrané po určitéj době posobenia antigénu, sláži ako zdroj protilátok.Tento postup má mnohé nevýhody, pre každá imunizáciu je nutné izolovat znova glykopro-teín gp51 z virusu, jeho purifíkácia je drahá a časové náročná. Okrem toho v sére imuni-zovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každomzvierati řízne a neopakovateíhé. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči ne- -čistotám antigénového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňoval vysycovaním. Z tých-to dovodov výrobně Šarže sa značné odlišujú a kvalita získaných polyklonálnych proti-látok nie je štandardná.
Uvedené nedostatky výše uvedeného postupu konvečnej imunizácie odpadná, keň mámek dispozici! hybridóm, produkujáci monoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteí-nu BEiV, ktorý je uložený v zbierke hýbridómov oddelenia molekulárnej virologie, lístavuexperimentélnej onkológie SAVv Bratislavě, ul. čsl. armády 21, pod označením UEO--4E9/32E5.
Uvedený hybridóm bol získaný v podstatě postupom známým v odbornej literatáre akohybridómová technológía (Kohler, G., Milsteíň, C.: Continuous cultures of fused cellssecreting antibody of prodefined specificity,. Nátuře 25 ň', 495, 1975), H.H. Burdon, P.H.VanKhippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology, Vol. 13,Monoclonal Antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984). Postup, ktorým boli hybridó-my připravené bol námi modifikovaný CO. Orlík, 5. Altaner: Modifications of hybridomatechnology yield of monoclonal antibody-producing cells, J. Immunol. Methods, 115, 55-59, 1988). Výhodou hýbridómu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagu-jú s obalovým glykoproteínom BLV. Hybridóm BLVgp51UEO-4E9/32E5, je možno kultivovatin vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky a sáčasne je adaptovaný pre rast in vi-vo v peritoneálnej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sú uchovávané v kva-palnom dusíku, je možno zahájit produkciu protilátky bez dalšieho antigénu. Protilátkaprodukovaná klónom BLV gp51-4E9/32E5 reaguje Specificky s'determinantou obalového glyko-proteínu BLV. Příklad: Za áčelom pomnoženia hýbridómových buniek in vivo bolo 2-10x10^ buniek in-jikovaná do peritoneálnej dutiny myší kmeňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým in-jikované do peritoneálnej dutiny 0.5 ml Přistanu alebo inkompletného Preudova adjuvansza áčelom vytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá rastu injikovanýeh hýbridómovýchbuniek. Po 14 dňoch rastu hýbridómových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtenáa neprodukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml asci-tovej tekutiny, ktorá obsahovala 9mg/ml imunoglobulinu. Monoklonálna protilátka reagova-la Specificky s glykoproteínom gp51-ELV a s desintegrovaným vírusom a rádioprecipitačnomteste a rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny byl imunoglobulín izolovaný po-mocou chromatografie na koloně Protein A-Sepharose alebo inou vhodnou metódou.Takto pu-rifikovaná monoklonálna protilátka je vhodná pře poťahovanie polystyrénových materiálov(mikrotitračné doštičky, polystyrénové tyčinky) za áčelom přípravy diagnostických sápravna detekeiu ELV infikovaných zvierat.
Claims (2)
- CS 272890 EL
- 2 In vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenznó kultúra. Základným kultivačnýmmédiom je Dulbeccova modifikácia Eaglova minimálneho esenoiálneho média doplněného 5percentami koňského alebo iného séra vhodného pre tkáňové kultúry. Hybridám je kulti-vovaný pri 37 °C v C02 termostate, jeho štandartná generačná doba je přibližné 24 ho-din. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulin podtriedy IgG2b. Hybridem BLVgp51UEO-4E9/32E5 može byt priemyslovo využívaný ako zdroj protilátkyproti obalovému glykoproteínu gp51 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných me-todách a iných aplikáciach. Konkrétné má využitie: pri výrobě imunodiagnostických súprav na detekcii infekciehovadzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikácii virusového glykoproteí-nu imunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusové-ho glykoproteínu, ako zdroj protilátky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detek-ciu virusového antigénu v infikovaných zvieratách. PHEDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm BLVgp51UEO-4E9/32E5 produkujúci monoklonálnu proti-látku podtriedy IgG2b proti obalovému glykoproteínu gp51 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152689A1 CS152689A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272890B1 true CS272890B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349857
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272890B1 (cs) |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152689A patent/CS272890B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152689A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2648419B2 (ja) | モノクローナル抗体混合物 | |
| FI83538C (fi) | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| US4731237A (en) | Immune response to virus induced by anti-idiotype antibodies | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| WO1990001066A1 (en) | Porcine polyclonal and monoclonal antibodies | |
| KR880001757B1 (ko) | 알파 인터페론 정제에 효과가 있는 단일항체의 제조방법 | |
| RU2257414C1 (ru) | Штамм гибридных клеток с3/s-3e5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к коксиеллам бернета | |
| SU1631072A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L., используемый дл получени моноклональных антител к гликопротеидному структурному белку вируса бешенства | |
| RU1801117C (ru) | Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека | |
| RU93019968A (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животного mus musculus - продуцент моноклональных антител к с-концевой части белка р24 вируса иммунодефицита человека i типа | |
| CS239800B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TU-04 | |
| CS253337B1 (cs) | Myši lymfocytárnf hybridem IMG CZAS RT-14 | |
| CA2039168A1 (en) | Neutralizing monoclonal antibody to infectious pancreatic necrosis virus | |
| CN109627333A (zh) | 新疆伊犁株马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体制备方法 | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| JPS6272700A (ja) | ホルモン又は酵素のモノクロナ−ル抗体及びその製造方法とこれを用いた精製方法 | |
| JPH1084986A (ja) | スタフィロキナーゼに対するモノクローナル抗体 | |
| CS259231B1 (sk) | Myši lymfocytámy hybridóm produkujúci monoklonálnu protilátku inhibujúcu hemaglutinačnú aktivitu virusu Newcastleskej choroby |